Experiența experienței reale modifică distribuția și funcționarea receptorilor AMPA și NMDA în nucleul accumbens (2012)

PLoS Unul. 2012; 7 (4): e34700. doi: 10.1371 / journal.pone.0034700. Epub 2012 Apr 18.

Dulgherie KK, Schmid S, Di Sebastiano AR, Wang X, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM.

Sursă

Departamentele de Anatomie și Biologie Celulară, Scoala de Medicină și Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, Ontario, Canada.

Abstract

Recompensa naturală și drogurile de abuz converg asupra sistemului mezolimbic care mediază comportamentele de motivație și răsplată. Drogurile induc modificări neuronale în acest sistem, inclusiv modificări transcripționale, morfologice și sinaptice, care contribuie la dezvoltarea și exprimarea amintirilor și dependenței legate de consumul de droguri. Anterior, s-a raportat că experiența sexuală la șobolanii masculi, un comportament natural de recompensă, induce neuroplasticitate similară în sistemul mezolimbic și afectează răsplata naturală și comportamentul legat de consumul de droguri.

Studiul actual a determinat dacă experiența sexuală provoacă schimbări de lungă durată în împerecherea sau traficul sau funcționarea receptorilor de glutamat ionotropic în nucleul accumbens (NAc), urmând perioadele de abstinență 3 diferite: săptămâna 1, săptămâna 1 sau 1 lună după încheierea sesiunii de împerechere.

Șobolanii masculi Sprague Dawley s-au împerecheat în timpul zilelor 5 consecutive (experiență sexuală) sau au rămas naivi sexuali pentru a servi ca martori. Masculii experimentați sexual au prezentat facilitarea inițierii și a performanței împerecherii la fiecare punct de timp. În continuare, exprimarea suprafeței intracelulare și a membranei N-metil-D-aspartat (NMDA: subunitatea NR1) Şi a-amino-3-hidroxi-5-metilizoxazol-4-propionat (AMPA: GluA1, subunități GluA2) în NAc a fost determinată utilizând un test de reticulare a proteinei bis (sulfosuccinimidil) suberat (BS (3)) urmat de analiza Western Blot.

Expresia NR1 a fost crescută la abstinența zilei 1 atât la suprafață, cât și la nivel intracelular, dar a scăzut la suprafață la săptămâna de abstinență 1. GluA2 a fost crescut intracelular la săptămâna 1 și a crescut la suprafață după luna de abstinență 1. În cele din urmă, s-au determinat înregistrări electrofiziologice ale clemelor cu cleme întregi raportul AMPA / NMDA redus al curenților sinaptici în neuronii NAc shell după stimularea aferențială corticală la bărbații cu experiență sexuală după toate perioadele de abstinență a recompenselor.

Împreună, aceste date arată că experiența sexuală determină modificări pe termen lung în expresia și funcția receptorului de glutamat în NAc. Deși nu este identică, această neuroplasticitate indusă de experiența sexuală are asemănări cu cele cauzate de psihostimulanți, sugerând mecanisme comune de întărire a recompensei naturale și a drogurilor.

Introducere

Sistemul mezolimbic constă din zone de creier interconectate, incluzând zona tegmentală ventrală, cortexul prefrontal medial (mPFC) și nucleul accumbens (NAc) [1]. Împreună, aceste zone ale creierului mediază comportamente naturale recompensatoare, inclusiv hrănirea [2], [3], [4], [5], băutură [6], comportamentul matern [7], legătura socială [8], [9] și comportamentul sexualr [10], [11], [12], [13], [14]. Studiile comportamentale au demonstrat că comportamentul sexual al șobolanilor masculi este recompensat și întăritor deoarece șobolanii de sex masculin formează o preferință de locație condiționată pentru copulare [15], [16], [17], să dezvolte viteze mai rapide de rulare în T-mazes [18], pista cu braț drept [19] sau alunecarea obstacolelor [20], și să îndeplinească sarcini operant pentru a avea acces la femele receptive sexual [21], [22]. În plus, experiența sexuală determină facilitarea comportamentului sexual ulterior, inclusiv creșterea motivației și performanței sexuale [23], și influențează exprimarea preferinței locului condiționat pentru împerechere [15]. Aceste schimbări comportamentale sugerează apariția învățării și a memoriei legate de răsplata naturală, care se presupune a fi mediată de modificări ale sistemului mezolimbic induse de experiența de comportament în împerechere [11].

În sprijinul acestei ipoteze, am arătat anterior că experiența sexuală a provocat o reglare superioară a deltafosB în NAc, care, la rândul său, a fost critică pentru facilitarea inițierii și performanței comportamentului sexual în urma experienței sexuale [23].

În plus, experiența sexuală a determinat o creștere a arborizării dendritice și a numărului de spini în NAc [11]. Modificări similare în transcripție și morfologie sunt induse de psihostimulante [24], [25], [26]. Experiența sexuală a demonstrat că modifică reacția la medicamentele de abuz, inclusiv sensibilizarea la activitatea locomotorie indusă de psihostimulant (sensibilizare încrucișată) și recompensa psihostimulantă îmbunătățită [10], [11], [27]. Sa demonstrat că o perioadă de retragere sau abstinență după expunerea la medicament este critică pentru o dorință crescută pentru medicament, denumită incubare a poftei [28]. De asemenea, o perioadă de abstinență de împerechere care urmează experienței sexuale este critică pentru îmbunătățirea indusă de experiența sexuală a recompensării psihostimulante și a creșterii ramificațiilor dendritice și a coloanei în NAc [11]. Prin urmare, experiența sexuală și abstinența ulterioară de la această recompensă naturală determină modificări pe termen lung în sistemul mezolimbic care sunt similare cu cele induse de psihostimulante și afectează răspunsurile comportamentale atât la recompensele naturale, cât și la cele de droguri.

Psihostimulanții au fost raportate că induc numeroase modificări suplimentare la NAc, dintre care unele sunt dependente de o perioadă de abstinență a medicamentului. Aceste modificări includ modificări ale traficului și funcției receptorilor de glutamat [29], [30]. Cocaina repetată urmată de o perioadă lungă de abstinență (săptămâni 3-7), determină o creștere în expresia de suprafață a subunităților receptorului a-amino-3-hidroxi-5-metilizoxazol-4-propionat (AMPA) și N-metil-D-NMDA) subunități receptor, în timp ce nu s-au observat modificări după a perioadă scurtă de abstinență (1 zi).

Mai mult, diferitele subunități ale receptorilor AMPA și NMDA sunt afectați diferențiat de expunerea la medicament și perioadele de abstinență ulterioare, deoarece expresia de suprafață a AMPAR-urilor fără GluA2 este reglată în sus după perioade de abstinență prelungite (săptămâni 5-7) [31], [32]. PFC oferă o contribuție majoră glutamatergică la NAc [33] și studiile electrofiziologice au arătat că repetarea cocainei cauzează modificări ale raportului AMPA / NMDA în neuronii cu coajă NAc care răspund la PFC și modificări ale excitabilității intrinseci a neuronilor NAc care pot depinde de perioada de abstinență a medicamentului și de subregiunea NAc [34], [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41]. O astfel de plasticitate neuronală indusă de medicamente contribuie la schimbări în sensibilizarea comportamentală psihostimulantă [42], [43], [44], [45] și căutarea de droguri [31], [46], [47].

În prezent, nu se cunoaște dacă adaptările similare ale traficului și funcției receptorilor de glutamat apar în urma experienței de recompensare naturală și a abstinenței ulterioare de la recompensa naturală. Prin urmare, scopul studiului actual a fost de a testa ipoteza că experiența sexuală determină modificări ale traficului de receptori AMPA sau NMDA în NAc și al modificărilor în concentrația sinaptică a neuronilor NAC corespondenți PFC. In plus, aceste masuri au fost determinate la 3 de cateva ori in urma sesiunii de imperechere finala pentru a investiga efectele unei perioade de abstinenta din recompensa naturala (saptamana 1 sau 1 luna dupa imperecherea finala) asupra plasticitatii in NAc comparativ cu o perioada fara abstinenta (1 zi după împerecherea finală).

REZULTATE

Experimentul 1: facilitarea sexului

Obiectivul experimentului 1 a fost stabilirea unui curs de timp pentru facilitarea comportamentului sexual în urma experienței sexuale. Anterior, facilitarea comportamentului sexual a fost detectată până în săptămâna 1 după sesiunea de împerechere finală [23], dar nu a fost investigat anterior dacă facilitarea intervenției sexuale a comportamentului sexual este menținută după o perioadă de abstinență prelungită. Aici s-au testat două grupe de șobolani masculi pentru exprimarea pe termen lung a facilitării comportamentului sexual, fie săptămâna 1, fie luna 1 după ultima sesiune de împerechere. În primul rând, ambele grupuri au arătat facilitarea comportamentului sexual în timpul a cinci sesiuni de împerechere zilnice, așa cum a fost demonstrat de latențele semnificativ mai scurte pentru a fi montate (Figura 1A; Săptămâna 1, p=0.028; 1 lună, p=0.019), intromisia (Figura 1B; 1 lună, p=0.016; trend la săptămâna 1, p=0.078) și ejacularea (Figura 1C; Săptămâna 1, p=0.016; 1 lună, p=0.008) în ziua 5 în comparație cu ziua 1 a experienței sexuale. În plus, facilitarea comportamentului sexual a fost menținută atât în ​​săptămâna 1, cât și în cea de 1 după ultima sesiune de împerechere, latențele la parametrii de împerechere au fost mai scurte în ziua testului (1 săptămână sau 1 lună după zi 5 de experiență sexuală) comparativ cu ziua de împerechere 1 (Figura 1A: latență de montare, luna 1, p=0.016; Figura 1B: latența intromisiei, luna 1, p=0.046; Figura 1C: latența ejaculării, săptămâna 1, p=0.016; 1 lună, p=0.008) și nu au existat diferențe semnificative între zilele de împerechere 5 și ziua de testare pentru orice parametru comportamental în orice moment (cu excepția lățimii de montare la 1 lună;=0.016). Prin urmare, facilitarea induse de experiență a comportamentului sexual a fost menținută pe parcursul unei perioade de 1 de abstinență de împerechere.

Figura 1    

Menținerea pe termen lung a comportamentului sexual facilitat.

Experimentul 2: redistribuirea / exprimarea subunității receptorilor de glutamat ionotropic

Obiectivul experimentului 2 a fost acela de a determina expresia subunităților receptorilor de glutamat ionotropic la bărbații cu experiență sexuală și naivi, urmând perioade de abstinență diferite. Suprafetele subunității AMPAR și NMDAR și piscinele intracelulare au fost cuantificate utilizând un reactiv de reticulare cu membrană-impermeantă (BS3), care a modificat selectiv proteina exprimată la suprafață permițând distincția de proteinele intracelulare nemodificate folosind SDS-PAGE și analiza Western Blot. Pete reprezentative care ilustrează suprafața (MW mare,> 250 kDa) și benzile intracelulare sunt prezentate în Figura 2M.

Figura 2  
Exprimarea și distribuția subunității receptorului glutamat în NAc.

Într-o zi după experiența sexuală, expresia subunității NR1 în suprafața (S), intracelulară (I) și totală (S + I) a crescut semnificativ (S, Figura 2A, p=0.025; I, Figura 2D, p=0.035; S + I, Figura 2J, p=0.023) la animalele cu experiență sexuală comparativ cu cele care nu au primit naivitate sexuală (Figura 2N). La o săptămână după ultima împerechere, a existat o scădere semnificativă a expresiei raportului intracelular la NR1 (raport S / I; Figura 2G; p=0.024) fără modificări semnificative la nivelul expresiei de suprafață sau intracelulară, comparativ cu animalele naivă sexuală. Expresia GluA2 a crescut semnificativ o săptămână după ultima împerechere, în expresie intracelulară și totală, fără modificări ale expresiei de suprafață (I, Figura 2E, p=0.026; S + I, Figura 2K, p=0.014) la animalele cu experiență sexuală, comparativ cu cele naivi (Figura 2O). Întrucât, la o lună după ultima împerechere, GluA2 a crescut semnificativ în raport S / I (Figura 2H; p=0.046), însoțită de o tendință statistică spre o creștere a expresiei suprafeței (Figura 2B; p=0.055) la animalele cu experiență sexuală comparativ cu cele controlate naiv. Modificările la GluA1 nu au fost detectate în ziua 1 sau în săptămâna 1 după ultima împerechere. După luna 1, expresia de suprafață GluA1 și raportul S / I părea a fi crescută la animalele cu experiență sexuală comparativ cu cele controlate naiv, deși au fost detectate numai tendințele statistice (S, Figura 2C, p=0.098; SI, Figura 2I, p=0.083). Prin urmare, în rezumat, inițial la 1 zi de abstinență, a fost detectată o expresie crescută crescută a NR1, urmată de creșterea expresiei intracelulare a GluA2 după săptămâna de abstinență 1 și creșterea expresiei de suprafață a GluA2 și GluA1 după abstinența 1 ca tendință statistică).

Experiment 3: Electrofiziologie

Obiectivul experimentului 3 a fost de a determina dacă experiența sexuală modifică puterea sinaptică în neuronii coajă de NAc care răspund la PFC. Curenții sinaptici au fost înregistrați în neuronii spinoși medii în carcasa NAc a masculilor experimentați sexual și naivi după stimularea fibrelor presupuse a deriva de la PFC. Rata AMPA / NMDA a fost semnificativ redusă la animale experimentate sexual 1 zi (p=0.005), săptămâna 1 (p=0.016) și luna 1 (p=0.005) după o sesiune de împerechere finală, comparativ cu grupul de control naiv sexual (Figura 3A, B, C). Pentru a determina dacă a avut loc o schimbare în probabilitatea de eliberare presinaptică a emițătorului, au fost investigate rapoartele de impulsuri asociate. Mărimea facilitării eliberării emițătorului care a apărut ca răspuns la stimularea pulsului asociat nu a fost diferită între animale experimentate sexual și naive în orice interval de timp (Figura 3D).

Figura 3    

Rata AMPA / NMDA pentru bărbații cu experiență sexuală și naivi la ziua 1, săptămâna 1 sau 1 lună după ultima sesiune de împerechere sau de manipulare.

Discuție

Studiul actual a demonstrat că experiența sexuală determină modificări ale distribuției și funcției receptorilor de glutamat ionotropic în NAc la șobolanii masculi și că unele dintre aceste modificări au variat odată cu perioada de abstinență a comportamentului sexual. Comparativ cu bărbații naivi sexuali, bărbații cu experiență sexuală au prezentat o creștere pe termen scurt a expresiei totale a subunității NR1, datorată creșterii atât a bazinelor receptorilor de suprafață cât și a celor intracelulare. Expresia GluA2 a fost crescută intracelular și la suprafață după săptămâna 1 și luna de abstinență a recompenselor 1. În cele din urmă, expresia GluA1 nu a fost modificată semnificativ în niciun moment. Mai mult, animalele cu experiență sexuală au prezentat un raport AMPA / NMDA micșorat, imediat și de lungă durată, înregistrat de neuronii cu coajă NAc care răspund la PFC comparativ cu controalele naive. Rezultatele noastre indică faptul că traficul de receptori de glutamat depinde de durata unei perioade de abstinență de la comportamentul sexual, în timp ce modificările în rezistența sinaptică la sinapsele formate de cortexul prefrontal aferent la carcasa NAc nu. Aceste constatări principale sunt similare cu rapoartele după cocaina repetată în ceea ce privește exprimarea suprafeței subunității AMPAR după abstinența lungă la medicament și o scădere imediată a raportului AMPA / NMDA, dar diferă în ceea ce privește expresia subunității NMDAR pe termen scurt și o scădere persistentă în AMPA / NMDA.

Comportamentul sexual este foarte răsplătit și întăritor. Astfel, pe măsură ce un șobolan masculin dobândește experiență sexuală, acesta prezintă o motivație și o performanță sexuală sporită, care se demonstrează prin latențe mai scurte pentru inițierea ejacularii de împerechere și expunere și creșterea eficienței copulației [10], [23]. Aici sa confirmat că această facilitare a comportamentului sexual a fost prezentă la săptămâna 1 după împerechere și sa stabilit că un comportament sexual facilitat a fost menținut până la o lună de abstinență de împerechere de până la 1. Profilul temporal al facilitării comportamentului sexual indus de experiența sexuală corespunde studiului nostru anterior, care arată sensibilizarea încrucișată la efectele amfetaminei care provoacă locomotive atunci când au fost testate la aceleași perioade de abstinență de împerechere [11]. Studiile anterioare au implicat NAC ca mediator al menținerii comportamentului sexual facilitat. Ambii neuroni ai nucleului NAc și ai cochiliei sunt activi prin împerechere sau cugetări asociate cu împerecherea [48], iar experiența sexuală are ca rezultat creșterea ramificației dendritice și a coloanei vertebrale în miezul NAc și coajă la o săptămână după împerechere [11]. În plus, scăderea activității deltaFosB a factorului de transcripție în NAc prin transferul de gene mediate de vectorul viral atenuează facilitarea comportamentului sexual indusă de experiență [23], [49]. Tconstatările din acest studiu sugerează că NAc este asociat în mod specific cu întărirea comportamentului sexual și este potențial critic pentru efectele drogului transversal sensibilizate ale experienței sexuale [23].

Studiul actual a demonstrat că experiența sexuală a provocat modificări ale sintezei și / sau traficului AMPAR care depindea de durata perioadei de abstinență sexuală. Mai întâi, o creștere a expresiei intracelulare a expresiei GluA2 a fost evidentă la săptămâna 1, ceea ce ar putea indica o creștere a sintezei și / sau endocitozelor receptorilor GluA2. Apoi, a fost detectată o creștere a raportului GluA2 suprafață / intracelulară (în mare parte datorită creșterii la suprafață) la 1 lună după ultima împerechere, ceea ce sugerează redistribuirea receptorilor la suprafața celulară. Schimbările în traficul AMPAR după expunerea la cocaină au fost, de asemenea, dependente de durata perioadei de abstinență a medicamentului [50]. În general, nivelurile de GluA1 și GluA2 / 3 ale suprafeței celulare și ale GluA3 / GluAXNUMX / XNUMX sunt crescute după o săptămână de abstinență de la cocaină și sunt menținute la niveluri ridicate timp de până la XNUMX săptămâni după ultima injecție de cocaină [51], [52], [53], [54], [55]. După o perioadă mai lungă de abstinență a medicamentului (săptămâni 5), expresia de suprafață GluA1 a rămas ridicată și a existat o micșorare a raportului suprafață / intracelulară GluA2 și, prin urmare, AMPARs lipsiți de GluA2 au fost crescuți [31], [56]. Această creștere a expresiei receptorilor lipsiți de GluA2 la suprafață a fost detectată după retragerea prelungită (săptămâni 5-7) de la autoadministrarea cu cocaină cu acces extins, dar nu după retragerea prelungită de la cocaina necontingentă [32]. Mai mult decât atât, blocarea GluA2 fără AMPAR a împiedicat căutarea de droguri [31], [57]. Modificările în traficul AMPA receptor după experiența sexuală și abstinența variază ușor față de cele induse de cocaină. În ceea ce privește exprimarea crescută a suprafeței GluA1, datele prezente indică o creștere modestă a receptorilor GluA1 la suprafața membranei care nu a reușit să atingă semnificația statistică la 1 lună după experiența sexuală și sugerând astfel că expresia de suprafață GluA1 poate necesita perioade mai lungi de abstinență - reglaj, similar cu modificările induse de cocaină după săptămâni de abstinență 5 [31]. Mai mult, datele actuale diferă în termeni de GluA2 care a suferit o micșorare după 5 sau mai multe săptămâni fără cocaină, în timp ce experiența sexuală și luna de abstinență 1 au dus la creșterea expresiei de suprafață a GluA2. Noi presupunem că reglementarea AMPA a receptorilor în NAc poate fi critică pentru efectele pe termen lung ale experienței sexuale asupra comportamentului de recompensare ulterioară și pentru creșterea recompensei amfetaminei [11] după perioada de abstinență prelungită testată în studiul actual. Dimpotrivă, modificările expresiei sau ale traficului AMPA nu sunt esențiale pentru efectele pe termen scurt ale experienței sexuale asupra comportamentului de recompensă. În sprijin, numeroase rapoarte au demonstrat că transmisia modificată AMPAR nu este necesară pentru sensibilizarea comportamentală indusă de medicamente față de psihostimulante (pentru revizuire [30]). S-au observat sensibilizare și sensibilizare încrucișată după ziua 1 a abstinenței de recompensă fără modificări în reglarea AMPAR [11], [53]. Mai mult, sensibilizarea comportamentală a fost demonstrată prin expunerea repetată la amfetamina psihostimulantă, care nu a fost asociată cu nicio modificare în transmisia AMPAR [50], [53], [58].

Rolul NMDAR a fost mult mai puțin studiat decât AMPAR-urile în ceea ce privește sensibilizarea comportamentului și traficul de receptori. Un antagonist neselectiv NMDAR (MK-801) a împiedicat dezvoltarea sensibilizării locomotorii cu cocaină sau amfetamină, dar nu a reușit să blocheze exprimarea acestei sensibilizări [59], [60]. Rolul NMDAR în comportamentul sexual a fost examinat minim prin administrarea sistemică sau intramedia a zonei preoptice a MK-801, care a afectat comportamentul sexual la șobolanii masculi naivi și cu experiență [61], [62], [63]. NMDAR mediază și alte recompense naturale, deoarece antagoniștii NMDAR au scăzut aportul alimentar la babuini [64] și poftă de mâncare îmbunătățită la șobolani [65]. Expresia NMDAR în NAc este modificată prin expunerea la cocaină și perioadele de abstinență mai lungi (3 saptamani), dar nu scurte (1 zile) de la cocaina repetată au crescut expresia subunităților NMDAR (NR1, NR2A, NR2B) [55], [60]. Rezultatele actuale demonstrează că experiența sexuală a provocat o creștere a expresiei totale NR1 la ziua 1 datorită nivelurilor crescute atât în ​​bazinele receptorilor de suprafață cât și intracelulară, în plus față de raportul scăzut de suprafață / intracelular după o perioadă de abstinență săptămânală 1. Prin urmare, vom presupune că o creștere inițială a transmiterii NMDAR poate fi critică pentru efectele pe termen scurt ale experienței sexuale asupra comportamentului ulterior al recompensării.

Mai mult, creșterea pe termen scurt a subunității NR1 ca urmare a experienței sexuale poate fi o indicație a formării sinapsei silențioase indusă de experiența sexuală. Huang și colab [66] a demonstrat că repetate cocaine au generat sinapse silențioase în cochilia NAc, în care recrutarea post-sinaptică a noului NMDAR a fost esențială. Sintaxele sinogtale de glutamatergie exprimă curenți mediate de NMDAR în absența curenților mediați de AMPAR [67], [68], [69]. Sa demonstrat că expunerea anterioară a cocainei poate genera sinapse silențioase în întreaga creier și că aceste sinapse recent generate oferă un substrat pentru experiența ulterioară [66], [70]. NMDAR sunt compuse din cel puțin o subunitate NR1 în combinație cu una sau mai multe subunități NR2 (A-D). NR1 este necesar pentru formarea canalelor funcționale; prin urmare, modificările expresiei NR1 pot furniza un indice pentru modificările numărului de receptori funcționali NMDA. Cocaina repetată conduce introducerea NMDAR-urilor NR1 și NR2B și generează sinapse silențioase în cochilia NAc. Aceste sinapse silențioase care conțin NR2B au fost inhibate în timpul administrării cocainei, care a atenuat sensibilizarea locomotorie ulterioară cu cocaină [71]. Numărul sinapselor silențioase a scăzut după câteva zile de abstinență cocaină, în timp ce sensibilizarea locomotoare persistă, sugerând că sinapsele premature se pot angaja în formarea de noi circuite plastice care pot fi modificate (potențial prin abstinență de recompensă) pentru a media aceste comportamente persistente. Astfel, putem presupune că reglarea expresiei totale a NR1 la scurt timp după experiența sexuală se poate datora creșterii numărului de NMDAR în sinapselor tăcute nou formate. Mai mult, experiența sexuală urmată de abstinența prelungită poate duce la scăderea sinapselor silențioase, explicând atât raportul de suprafață / intracelular scăzut al NR1, cât și creșterea subunităților AMPAR cu perioade de abstinență prelungite, deoarece sinapsele sunt nealiniate.

Constatările actuale că experiența sexuală și perioadele de abstinență recompensate au provocat modificări ale traficului și expresiei receptorului de glutamat, sugerând modificări ale rezistenței sinaptice la sinapsele excitaționale din NAc. Prin urmare, o procedură de electrofiziologie bazată pe un studiu anterior efectuat de Thomas și colegi [72] a fost utilizată pentru a studia funcția receptorului glutamat în neuronii NAC de coajă, urmând aceleași perioade de abstinență care au arătat că au ca rezultat comportamentul sexual și comportamentul medicamentos sensibilizat și redistribuirea receptorului de glutamat. Similar studiilor anterioare care au urmat expunerea la cocaină, plasticitatea a fost determinată în sinapsele de coajă NAc care au fost receptive la intrarea PFC. PFC este bine stabilit pentru a juca un rol cheie în comportamentul compulsiv și abuzul de droguri [73], [74]. De asemenea, PFC este critică pentru dezvoltarea sau exprimarea comportamentului sexual compulsiv, deoarece leziunile PFC cauzează căutarea maladaptivă a comportamentului sexual la șobolanii de sex masculin [75]. Datele actuale au arătat că experiența sexuală a provocat o scădere imediată și de lungă durată a raportului AMPA / NMDA la nivelul neuronilor de coajă NAc responsabili cu PFC.

Anterior, sa emis ipoteza că diferența primară dintre recompensa naturală și cea de droguri este aceea că schimbările în raportul AMPA / NMDA după recompensa naturală sunt temporare și vor disipa în timp, în timp ce schimbările induse de droguri vor persista [76]. Această ipoteză sa bazat pe constatările că cocaina, dar nu cea alimentară sau sucroza, a indus o creștere a raportului AMPA / NMDA în VTA [76]. În schimb, studiul actual demonstrează că experiența sexuală a provocat într-adevăr o schimbare pe termen lung a raportului AMPA / NMDA în NAc.

Cu toate acestea, plasticitatea pe coajă indusă de sexul NAc diferă de cea după expunerea la cocaină, care sa dovedit a fi asociată cu o schimbare bidirecțională în excitabilitatea mediată de AMPAR. După expunerea la cocaină și o zi de abstinență medicamentoasă, o reducere a raportului AMPA / NMDA [72] și depresie în capacitatea de ardere [34] a fost găsit, similar cu rezultatele obținute pentru efectele pe termen scurt ale experienței sexuale. Cu toate acestea, după o perioadă de abstinență 14 de zile de la cocaină, neuronii de coajă NAc au crescut rapoartele AMPA / NMDA, sugerând că abstinența de la concentrația sinaptică îmbunătățită de cocaină în NAc [54]. Hexpunerea la cocaină duce la o schimbare bidirecțională a plasticității sinaptice cu răspunsuri mediate de AMPA reduse la scurt timp după expunerea la medicament, dar a crescut excitabilitatea mediată de AMPAR cu abstinența medicamentului prelungită. În contrast, abstinența prelungită din experiența sexuală a determinat o excitabilitate mediată de AMPAR scăzută în coaja NAc, chiar dacă sensibilizarea activității locomotorii și a recompensei asociate cu amfetamina sunt observate în timpul acelor perioade de abstinență [11]. Cu toate acestea, alte rapoarte au arătat că excitabilitatea membranei intrinseci a scăzut atât în ​​miez, cât și în cochilie, la perioada de abstinență scurtă și lungă după expunerea la cocaină [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], arătând o lipsă de schimbare bidirecțională, similară cu efectele experienței sexuale. Mai mult, rezultatele actuale arată că experiența sexuală nu provoacă modificări în probabilitatea de eliberare a glutamatului presinaptic pe baza lipsei de diferențe între grupuri pentru raportul pulsului asociat. Kalivas și colegii săi au demonstrat că cocaina repetată induce modificări în mediatorii bazinelor glutamat extracelular non-sinaptice în NAc, dacă astfel de modificări apar cu experiența sexuală rămân să fie determinate (pentru revizuire [77]).

Este probabil ca intrările glutamatergice la NAc din alte zone ale creierului decât PFC să joace un rol funcțional în efectele experienței sexuale asupra comportamentului de recompensare ulterioară. TNAc primește răspunsul glutamatergic din amigdala bazală terapeutică (BLA) și subiculul ventral al hipocampului [78]. BLA joacă un rol în comportamentul natural care caută recompense [79], [80], este esențială pentru asocierea stimulilor de mediu cu recompensa sexuală [81] și pentru comportamentul instrumental de a iniția împerecherea [82]. Prin urmare, este tentant să se speculeze că modificările induse de experiența sexuală în puterea sinaptică la sinapsele de răspuns BLA.

Reducerea raportului AMPA / NMDA la sinapsele PFC din coaja NAc este în concordanță cu creșterea expresiei NR1 la scurt timp după experiența sexuală, dar inconsistentă cu creșterea GluA2 și GluA1 după perioade prelungite de abstinență. O explicație este că traficul de receptori a apărut la sinapsele care primesc intrare glutamatergică provenind din alte zone ale creierului în afară de PFC. De asemenea, includerea nucleului NAc, în plus față de carcasa NAc, în probele de proteine ​​exclude posibilitatea de a face corelații corecte între expresia proteinei și datele de rezistență sinaptică. Cu toate acestea, concluziile actuale demonstrează clar că comportamentul natural de recompensă și abstinența de recompensă ulterioară determină plasticitate sinaptică în NAc cu asemănări și diferențe față de cele induse de psihostimulante.

IConcluzia, experiența sexuală și abstinența de recompensă ulterioară la șobolanii de sex masculin sa dovedit a provoca facilitarea imediată și de lungă durată a comportamentului sexual, similar cu efectele experienței sexuale asupra sensibilizării la efectele locomotorii de inducere a amfetamelorne [11], și a fost asociată cu o scădere imediată și de lungă durată a raporturilor AMPA / NMDA în sinapse în coaja NAc. Mai mult, experiența sexuală a determinat o creștere rapidă a NMDAR și o redistribuire înceată a redistribuirii AMPAR la suprafața neuronilor NAc. Prin urmare, similar cu efectele psihostimulanților, comportamentul natural de recompensă poate provoca modificări de lungă durată în expresia receptorului de glutamat, trafic și excitabilitate. Totuși, abstinența prelungită din experiența sexuală, spre deosebire de cea care a urmat după cocaină, a dus la scăderea persistentă a raportului AMPA / NMDA în coaja NAc. Au fost propuse o serie de ipoteze testabile pentru eventualele factori care contribuie la această discrepanță, inclusiv modificări ale sinapsei de răspuns BLA, ca urmare a experienței de recompensare naturală. Aceste date arată încă o dată atât similitudinile, cât și diferențele dintre consecințele pe termen lung ale expunerii la recompense naturale și droguri și pot contribui la o mai bună înțelegere a modului în care medicamentele pot acționa pe această cale de recompensare naturală.

Metode

Declarație de etică

Toate procedurile au fost aprobate de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de la Universitatea din Western Ontario și au fost conforme cu recomandările Consiliului Canadian privind îngrijirea animalelor care implică cercetări în animalele vertebrate.

animale

S-au obținut adulți șobolani masculi Sprague Dawley (experiment 1 și 2: 10-12 săptămâni, experimente 3, săptămâni 8-10 la momentul declanșării experimentelor) de la Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Animalele de același sex au fost adăpostite în cuști din plexiglas, cu un tub de tunel într-o cameră cu temperatură reglată, menținută pe un ciclu 12 / 12 lumină întunecată, cu alimente și apă disponibile ad libitum cu excepția testelor comportamentale. Femelele de stimulare (210-220 grame) pentru sesiuni de împerechere au primit un implant subcutanat care conține 5% benzoat de estradiol și 95% colesterol în urma ovarectomiei bilaterale. Receptivitatea sexuală a fost indusă prin administrarea de 500 μg progesteron în ulei de susan 0.1 mL de aproximativ 4 ore înainte de testare.

Experiența sexuală

Toți șobolanii de sex masculin au fost naivi sexual înainte de debutul experimentelor. Ședințele de împerechere au apărut în faza întunecată timpurie (între 2-6 ore după debutul perioadei întunecate) sub iluminare roșie dim. În timpul fiecărei ședințe de împerechere, șobolanii masculi au fost lăsați să coopereze la ejaculare sau până când au fost înregistrați ora 1 și parametrii pentru comportamentul sexual, incluzând: latența de montare (ML, timpul de la introducerea femelei până la prima mount), latența intromisiei de la femeie până la prima instalare cu penetrare vaginală) și latența ejacularii (EL, de la prima intromisie până la ejaculare) [83]. Controlul sexual naiv a fost manipulat, adăpostit în aceleași camere ca și animalele de împerechere și astfel expus la aceleași niveluri de zgomot, perturbări generale și mirosuri îndepărtate ale femelelor estroase, dar nu li sa permis să interacționeze sau să se îmbine cu femelele receptive.

Experimentul 1: facilitarea sexului

Sobolanii de sex masculin Sprague Dawley se îmbracă în cuștile lor pentru serii 5 consecutive, zilnice de împerechere. Animalele au fost împărțite în grupuri experimentale 2 și au fost testate pentru comportament sexual fie săptămâna 1, fie 1 lună după ultima sesiune de împerechere (Ziua testului; n=7 pe grup). Grupurile au fost potrivite pentru parametrii comportamentului sexual și nu s-au detectat diferențe semnificative între grupuri pentru orice măsură de comportament sexual în timpul unei sesiuni de împerechere, în timp ce au câștigat experiență sexuală.

Analiza datelor

În cadrul grupărilor au fost efectuate evaluări ale Zilei 1 și 5 de experiență sexuală pentru a determina facilitarea comportamentului sexual cu experiență sexuală între Ziua 1 și Ziua de Teste și între Ziua 5 și Ziua de Teste (fie 1 săptămână, fie 1 lună după Ziua 5) , latențe de intromission și ejaculare utilizând testul Wilcoxin Signed Rank cu un nivel de semnificație de 5%.

Experimentul 2: redistribuirea / exprimarea subunității receptorilor de glutamat ionotropic

Pentru a examina redistribuirea receptorilor ionotropici, a fost utilizată o paradigmă similară experimentului 1. Șobolani de sex masculin, naivi, de sex masculin, Sprague Dawley, au fost împărțiți în grupuri cu experiență sexuală și naivă. Pentru grupurile cu experiență sexuală, experiența sexuală a fost câștigată prin intermediul sesiunilor 5 consecutive, de împerechere zilnică (așa cum este descris mai sus). Barbatii cu experienta sexuala au fost apoi impartiti in grupuri experimentale 3 (potrivite pentru parametrii de comportament sexual) pentru colectarea tesuturilor, fie 1 zi, 1 saptamana, fie 1 luna dupa ultima sedinta de imperechere. Creierul din controalele naive sexual (manipulate așa cum s-a descris mai sus) au fost colectate la momente identice de timp după manipularea finală. Grupurile incluse: experiență sexuală (AMPAR: 1D, nr=9; 1W, n=12; 1M, n=12; NMDAR: 1D, n=9, 1W sau 1M, n=6) sau naivi sexuali (AMPAR: 1D, nr=9; 1W, n=12; 1M, n=12; NMDAR: 1D, n=9, 1W sau 1M, n=6).

Suprafață de legare a receptorului de suprafață

Animalele au fost eutanasiate cu pentobarbital de sodiu (270 mg / kg; ip) urmat de decapitare. După decapitare, fiecare creier a fost îndepărtat rapid și plasat imediat în soluție salină rece ca gheața. NAc bilateral a fost disecat folosind o matrice cerebrală de șobolan (ASI Instruments, Warren, MI, SUA) și o lamă de bisturiu conform limitelor NAc definite de Paxinos & Watson (1998). Apoi, țesutul NAc a fost tocat în cuburi de 400 × 400 µm folosind un tocător de țesut McIlwain (Vibratome, St. Louis, MO, SUA). Metodologia pentru reticularea subunității receptorilor AMPA și NMDA s-a bazat pe Boudreau și Wolf [53]. Imediat după tocare, țesutul cerebral a fost rapid transferat într-un tub Eppendorf conținând 1 ml de aCSF răcit cu gheață cu dopa reactiv de reticulare a proteinei Bis (sulfosuccinimidil) suberat (BS3, 2 mM; Pierce Biotechnology, Rockford, IL, USA) și s-a incubat timp de minute 30 pe un balansor la 4 ° C. BS3 nu intersectează membranele celulare, permițându-i să controleze selectiv proteine ​​exprimate în suprafață cu legături de sulfură, formând astfel agregate cu greutate moleculară ridicată, în timp ce proteinele intracelulare rămân nemodificate. Această reacție permite separarea bazelor de proteine ​​de suprafață și intracelulară de proteină pe bază de MW folosind electroforeza pe gel de dodecil sulfat-poliacrilamidă de sodiu (SDS-PAGE) și analiza Western Blot. Reacția de reticulare a fost stinsă prin adăugarea de 100 uL de glicină 1 M pentru 10 min la 4 ° C. Țesutul a fost peletat prin centrifugare la 14 000 rpm pentru 2 minute la 4 ° C și supernatantul a fost aruncat. Peletele au fost resuspendate în 400 uL de tampon de liză rece pe gheață [25 mM Hepes (pH 7.4), 500 mM NaCI, 2 mM EDTA, 1 mM DTT, 1 mM PMSF, 20 mM NaF, 0.1% Nonidet P-40 %), cocktail inhibitor de protează (Ministop, Roche Diagnostics GmbH, Mannheim, Germania) și cocktail inhibitor de fosfatază 0.1x (Phosstop, Roche Diagnostics GmbH)]. Probele au fost sonicate timp de 1 secunde pentru a distruge țesuturile, apoi s-au centrifugat la 5 14 rpm pentru 000 min la 2 ° C și imediat plasate înapoi în blocul de gheață. Supernatantul a fost transferat într-un tub Eppendorf nou, din care 4 μL de probă au fost puse pe gheață și supernatantul rămas a fost depozitat la -30 ° C pentru analiza Western Blot. Pentru fiecare probă s-a determinat concentrația de proteină a lizatelor reticulate utilizând un test BCA (ThermoFisher Scientific Inc., Waltham, MA) și spectrofotometrul NanoDrop ND-80 (ThermoFisher Scientific Inc., Waltham, MA).

Analiza Western Blot

Probele de proteină (20 pg) au fost încărcate și electroporate pe geluri Tris-HCI gradient 4-15% (Bio-Rad Laboratories Ltd., Mississauga, Ontario, Canada) utilizând un sistem Mini Trans-Blot Cell (Bio-Rad Laboratories Ltd.) și tampon de rulare Tris-Glicină-SDS [25 mM Tris, 192 mM Glicină, 0.1% SDS (pH8.3)]. Proteina Precision Plus Toate standardele Blue (Bio-Rad Laboratories Ltd.) au fost utilizate ca markeri de greutate moleculară. După separare, proteinele au fost transferate în membranele de difluorid de poliviniliden de Millipore Immobilon-FL (PVDF, Millipore, Billerica, MA, SUA) utilizând sistemul de blotting celular Trans-Blot Cell (Bio-Rad Laboratories Ltd.) pentru imunoblotting. Transferul de proteine ​​a fost efectuat în tampon de transfer (20% metanol și 0.037% SDS în Tris-Glicină [25 mM Tris, 192 mM Glicină (pH 8.3)] la 82 V pentru 1 hr la temperatura camerei (RT) cel puțin duplicat, echilibrat între grupuri și între geluri individuale.

Apoi, membranele au fost incubate într-un 2[raport]Soluția 3 de tampon de blocare a Odyssey (LI-COR Biosciences, Lincoln, NE) și soluție salină tamponată cu Tris (TBS, 50 mM Tris și 150 mM NaCI (pH8.0)) pentru 1 hr pe o tavă de agitare la temperatura camerei. Membranele au fost apoi incubate individual pentru ore 16 pe un agitator la 4 ° C fie cu anti-GluA1 policlonal de iepure (~ 106 kDa, 1[raport]1K; Millipore, Cat # AB1504) și GluA2 (~ 100 kDa; 1[raport]4K; Millipore, Cat # AB1768) sau anti-NR1 monoclonal de șoarece (~ 130 kDa; 1[raport]2K; Upstate (Millipore), Cat # 05-432). Acești anticorpi primari au fost utilizați și validați anterior [84], [85], și a produs o singură bandă la greutatea moleculară corespunzătoare care a fost prevenită prin preabsorbția anticorpului cu peptidă atunci când este utilizat pe țesut nereticulat. Toți anticorpii au fost diluați într-un 2[raport]Amestec 3 de tampon de blocare Odyssey cu TBS-T (TBS + 0.05% Tween-20 (pH8.0).) După trei spălări cu 10-min în TBS-T, membranele au fost incubate în anticorpi secundari diluați într-o soluție 2[raport]Amestec 3 de tampon de blocare Odyssey și TBS-T pentru 1 hr la RT. Anticorpii secundari au inclus Alexa-680 de capră anti-iepure conjugat (1[raport]5K; Invitrogen, Carlsbad, CA, SUA) sau IR anti-șoarece de capră conjugat cu IR Dye800 CW (1[raport]10K; LI-COR Biosciences). S-a vizualizat imunoreactivitatea fluorescentă și imaginile au fost capturate utilizând un scanner Odyssey 2.1 (LI-COR Biosciences).

Cuantificarea și analizele statistice

Pentru fiecare probă de proteine, nivelurile de intensitate a fluorescenței pentru fiecare bandă (MW ridicat,> 250 kDa pentru expresia suprafeței și benzile la MW specificate mai sus pentru expresia intracelulară) au fost determinate utilizând software-ul Odyssey și mediile au fost calculate pentru fiecare animal. Valorile densității benzii de suprafață (S), intracelulară (I), raportul (S / I, măsurarea distribuției subunității receptorului) și total (S + I, măsurarea expresiei subunității receptorului total) au fost normalizate la valorile medii ale controlului naiv sexual corespunzător grupuri. Nu a existat nicio diferență în intensitatea fluorescenței între replicile fiecărei probe (încărcate în geluri diferite), confirmând lipsa variabilității în încărcarea probelor de proteine. Toate datele Western Blot au fost analizate între controalele cu experiență sexuală și cele naive sexual în același moment, folosind teste t nepereche cu un nivel de semnificație de 0.05

Experiment 3: Electrofiziologie

Același proiect experimental a fost folosit așa cum s-a descris mai sus pentru experimentele 1 și 2. Copiii cu experiență sexuală au fost împărțiți în grupuri experimentale 3, potrivite pentru performanța comportamentului sexual și bazate pe timpul colectării de țesut 1 zi, săptămână 1 sau 1 lună după ultima sesiune de împerechere (1 zi, n=7; Săptămâna 1, n=9; 1 lună, n=10). Comportamentul sexual la acești șobolani mai tineri de sex masculin nu a fost diferit de comportamentul sexual al șobolanilor masculi mai în vârstă în experimentele 1 și 2. Șobolanii au fost anesteziați cu pentobarbital de sodiu (270 mg / kg; ip) urmat de perfuzia transcardială cu oxigenat rece pe gheață (95% O2, 5% CO2) soluție conținând [250 mM de zaharoză, 2.5 mM KCI, 1.25 mM NaH2PO4, 4 mM MgCl2, 0.1 mM CaCl2, 26 mM NaHCO3, 10 mM glucoză, 3 mM myoinozitol, piruvat de sodiu 2 mM și ascorbat 0.5 mM). Creierul a fost excizat și plasat în soluție de preparare oxigenată rece pe gheață. Secțiunile creierului sagital, grosime 400 μm, au fost obținute de la fiecare animal utilizând un vibratom (Microm, Walldorf, Germania). Un număr total de felii 4 per creier au fost transferate într-o cameră de depozitare cu lichid cerebrospinal artificial (aCSF) [125 mM NaCI, 2.5 mM KCI, 1.25 mM NaH2PO4, 1.3 mM MgCl2, 2.5 mM CaCl2, 26.2 mM NaHCO3 și 10 mM glucoză], încălzită la 32 ° C timp de 30 min și apoi lăsată să se recupereze la temperatura camerei timp de cel puțin 1 hr înainte ca o singură felie să fie plasată într-o cameră de înregistrare. Această cameră a fost superfuzată cu aCSF oxigenat la 22 ° C. Nu au existat diferențe între grupuri pentru parametrii sexuali comportamentali. Creierele au fost colectate de la controale naive sexual la fiecare dintre punctele de timp 3 după manipularea finală (n=3-4 fiecare).

Shell neuronii au fost examinați în felii medii de NAc care nu conțineau striatum dorsal [72]. Microelectrozele bipolare din oțel inoxidabil au fost plasate în marginea cortexului preliminal-NAc pe roșu la electrodul de înregistrare pentru stimularea presinaptică a fibrelor corticale aferente. Neuronii spini neuroni medii au fost identificați vizual prin dimensiunea lor soma (în jurul diametrului 30-35 μM) și un potențial relativ negativ al membranei de repaus -75 la -85 mV. Înregistrările au fost făcute utilizând un amplificator Axopatch 200A și o rată de eșantionare 20 kHz (Digidata 1340), cu un filtru low-pass 10 kHz. PClamp 9.0 a fost utilizat pentru protocoale de experimentare și analiză. Asocienții au fost stimulați cu impulsuri asociate (50 ms ISI) la 0.1 Hz și neuroni folosind un electrod bolfolar concentrat de tungsten. Celulele au fost fixate la tensiune la -80 mV și depolarizate la + 40 mV pentru 500 ms înainte de stimularea sinaptică, pentru a elibera blocul de magneziu al curenților NMDA. Rapoartele AMPA / NMDA au fost determinate prin luarea mediei EPSC la + 40 mV în absența sau prezența antagonistului NMDAR AP5 (50 μM, curenți ai celulelor întregi 30 × control și 30 × în prezența AP5). Răspunsul NMDA a fost calculat prin scăderea înregistrărilor AP5 din control. Vârful AMPAR EPSC a fost împărțit la vârful EPSC NMDAR pentru a obține un raport AMPA / NMDA. Pentru a determina rapoartele impulsurilor asociate, au fost efectuate măsurători la -80 mV cu stimulare presinaptică (30 ×).

Analiza datelor

Datele din controalele naive sexual au fost combinate pentru a forma un singur grup de control (nr=Neuroni 10 la animale 10), deoarece nu s-au detectat diferențe statistice între punctele de timp din cadrul controalelor. Grupuri cu experiență sexuală (ziua 1, n=7; Săptămâna 1, n=9; 1 lună, n=Neuronii 10; în mod obișnuit, un neuron pe animal) au fost comparate cu grupul de control naiv sexual nefolosit utilizând un ANOVA cu o singură cale (factori: intervalul de timp) urmat de un Fisher LSD pentru post hoc comparații cu un nivel de semnificație de 5%.

recunoasteri

Îi mulțumim doctorilor Marina E. Wolf și Mike Milovanovic la Universitatea Rosalind Franklin de Medicină și Știință pentru consultanța lor tehnică.

Note de subsol

Interese interesante: Autorii au declarat că nu există interese concurente.

Finanțarea: Institutul Canadian de Cercetare a Sănătății pentru LMC și ARD, precum și pentru Științele Naturii și Cercetare în Inginerie la LMC și KKP. Finanțatorii nu au avut niciun rol în proiectarea studiului, colectarea și analiza datelor, decizia de a publica sau pregătirea manuscrisului.

Referinte

1. Morgane PJ, Galler JR, Mokler DJ. O trecere în revistă a sistemelor și rețelelor brațului limbesc / midbrainului limbic. Prog Neurobiol. 2005;75: 143-160. [PubMed]
2. Avena NM, Bocarsly ME, Rada P, Kim A, Hoebel BG. După ce bingeți zilnic pe o soluție de zaharoză, lipsa alimentelor induce anxietate și accumbens dopamină / acetilcolină dezechilibru. Physiol Behav. 2008;94: 309-315. [PubMed]
3. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Zahărul și înțepăturile de grăsime prezintă diferențe notabile în comportamentul de dependență. J Nutr. 2009;139: 623-628. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
4. Avena NM. Binge eating: vederi neurochimice din modele animale. Mananca disconfort. 2009;17: 89-92. [PubMed]
5. Vucetic Z, Reyes TM. Circuitele centrale dopaminergice care controlează consumul de alimente și recompensa: implicații pentru reglementarea obezității. Wiley Interdiscip Rev Syst Biol Med. 2010;2: 577-593. [PubMed]
6. Yoshida M, Yokoo H, Mizoguchi K, Kawahara H, Tsuda A, și colab. Alimentația și consumul de alcool cauzează eliberarea sporită a dopaminei în nucleul accumbens și zona tegmentală ventrală la șobolan: măsurarea prin microdializă in vivo. Neurosci Lett. 1992;139: 73-76. [PubMed]
7. Numan M. Sistemele motivaționale și circuitele neuronale ale comportamentului matern la șobolan. Dev Psychobiol. 2007;49: 12-21. [PubMed]
8. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Mecanisme celulare de atașament social. Hormonul Behav. 2001;40: 133-138. [PubMed]
9. Young LJ, Wang Z. Neurobiologia lipirii perechilor. Nat Neurosci. 2004;7: 1048-1054. [PubMed]
10. Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Pastile de amestecare: analiza efectelor drogurilor asupra comportamentului sexual la om și a modelelor animale. Hormonul Behav. 2010;58: 149-162. [PubMed]
11. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, YuL și colab. Neuroplasticitatea în sistemul mesolimbic indusă de recompensa naturală și abstinența recompensă ulterioară. Biol Psihiatrie. 2010;67: 872-879. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
12. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, și colab. Influența DeltaFosB asupra nucleului accumbens asupra comportamentului natural al recompensei. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
13. Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, și colab. Schimbări în expresia genelor în nucleul accumbens și striatum în urma experienței sexuale. Genele Brain Behav. 2005;4: 31-44. [PubMed]
14. Bradley KC, Meisel RL. Inducerea comportamentului sexual al c-Fos în nucleul accumbens și activitatea locomotorie stimulată de amfetamină este sensibilizată de experiența sexuală anterioară la hamsterile siriene femele. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
15. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Răsplata sexuală la șobolanii masculi: efectele experienței sexuale asupra preferințelor locului condiționat asociate cu ejacularea și intromisele. Hormonul Behav. 2009;55: 93-97. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
16. Agmo A, Berenfeld R. Proprietățile de întărire a ejaculării la șobolanii masculi: rolul opioidelor și al dopaminei. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
17. Agmo A, Gomez M. Armarea sexuală este blocată prin perfuzarea naloxonei în zona preoptică mediană. Behav Neurosci. 1993;107: 812-818. [PubMed]
18. Kagan J. Valoarea diferențială a comportamentului sexual incomplet și complet. J Comp Physiol Psychol. 1955;48: 59-64. [PubMed]
19. Lopez HH, Ettenberg A. Stimulente condiționate sexual: atenuarea impactului motivațional în timpul antagonismului receptorilor dopaminergici. Pharmacol Biochem Behav. 2002;72: 65-72. [PubMed]
20. Sheffield FD, Wulff JJ, Backer R. Valoarea recompensă a copulației fără reducerea sexului. J Comp Physiol Psychol. 1951;44: 3-8. [PubMed]
21. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolanii masculi (Rattus norvegicus): I. Controlul prin stimulente vizuale scurte asociate cu o femeie receptivă. J Comp Psychol. 1987;101: 395-406. [PubMed]
22. Everitt BJ, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolani masculi (Rattus norvegicus): II. Efectele leziunilor din zona preoptică, castrarea și testosteronul. J Comp Psychol. 1987;101: 407-419. [PubMed]
23. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ și colab. DeltaFosB în nucleul accumbens este esențială pentru consolidarea efectelor recompensei sexuale. Genele Brain Behav. 2010;9: 831-840. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
24. Dietz DM, Dietz KC, Nestler EJ, Russo SJ. Mecanisme moleculare ale plasticității structurale induse de psihostimulant. Pharmacopsychiatry. 2009;42(Suppl 1): S69-78. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
25. McClung CA, Nestler EJ. Reglementarea expresiei genelor și a recompensei cocainei de către CREB și DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
26. Robinson TE, Kolb B. Plasticitate structurală asociată expunerii la medicamente de abuz. Neuropharmacology. 2004;47(Suppl 1): 33-46. [PubMed]
27. Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM. Expunerea concomitenta la metamfetamina si comportamentul sexual imbunatateste ulterior recompensa de droguri si cauzeaza un comportament sexual compulsiv la sobolani de sex masculin. J Neurosci. 2011;31: 16473-16482. [PubMed]
28. Grimm JW, Hope BT, Wise RA, Shaham Y. Neuroadaptarea. Incubarea poftei de cocaina dupa retragere. Natura. 2001;412: 141-142. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
29. Thomas MJ, Kalivas PW, Shaham Y. Neuroplasticitatea în sistemul mezolimbic de dopamină și dependența de cocaină. Br J Pharmacol. 2008;154: 327-342. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
30. Wolf ME. Triunghiul Bermudelor de neuroadaptări induse de cocaină. Tendințe Neurosci. 2010;33: 391-398. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
31. Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ și colab. Formarea adulților GluR2 lipsiți de receptori AMPA mediază incubarea poftei de cocaină. Natura. 2008;454: 118-121. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
32. McCutcheon JE, Wang X, Tseng KY, Wolf ME, Marinelli M. Receptorii AMPA permeabili la calciu sunt prezenți în sinapsele nucleului accumbens după retragerea prelungită de la autoadministrarea cocainei, dar nu și cocaina administrată de experimentator. J Neurosci. 2011;31: 5737-5743. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
33. McGeorge AJ, Faull RL. Organizarea proiecției de la cortexul cerebral la striatum la șobolan. Neuroscience. 1989;29: 503-537. [PubMed]
34. Kourrich S, Thomas MJ. Similar neuroni, adaptări opuse: experiența psihostimulantului modifică diferențial proprietățile de ardere în nucleul accumbens față de coajă. J Neurosci. 2009;29: 12275-12283. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
35. Ishikawa M, Mu P, Moyer JT, Wolf JA, Quock RM, și colab. Plasticizarea membranei acționate de sinapsă homeostatică în neuronii nucleului accumbens. J Neurosci. 2009;29: 5820-5831. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
36. Moussawi K, Pacchioni A, Moran M, Olive MF, Gass JT, și colab. N-acetilcisteina inversează metaplasia indusă de cocaină. Nat Neurosci. 2009;12: 182-189. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
37. Mu P, Moyer JT, Ishikawa M, Zhang Y, Panksepp J, și colab. Expunerea la cocaină reglează dinamic excitabilitatea membranei intrinseci a neuronilor nucleului accumbens. J Neurosci. 2010;30: 3689-3699. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
38. Zhang XF, Cooper DC, White FJ. Tratamentul cu cocaină repetată scade curentul de calciu din celule întregi în neuronii nucleului accumbens de șobolan. J Pharmacol Exp Acolo. 2002;301: 1119-1125. [PubMed]
39. Zhang XF, Hu XT, White FJ. Întregul celular în retragerea cocainei: curenți de sodiu redus în neuronii nucleului accumbens. J Neurosci. 1998;18: 488-498. [PubMed]
40. Hu XT, Basu S, White FJ. Administrarea repetată de cocaină suprimă potențialul HVA-Ca2 + și intensifică activitatea canalelor K + în neuronii nucleului accumbens de șobolan. J Neurophysiol. 2004;92: 1597-1607. [PubMed]
41. Hu XT, Ford K, White FJ. Administrarea repetată a cocainei scade calcineurina (PP2B), dar îmbunătățește modularea DARPP-32 a curenților de sodiu în neuronii nucleului accumbens de șobolan. Neuropsychopharmacology. 2005;30: 916-926. [PubMed]
42. Wolf ME. Rolul aminoacizilor excitatori în sensibilizarea comportamentală la stimulatorii psihomotori. Prog Neurobiol. 1998;54: 679-720. [PubMed]
43. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alterarea transmiterii dopaminergice și glutamatergice în inducerea și exprimarea sensibilizării comportamentale: o analiză critică a studiilor preclinice. Psihofarmacologie (Berl) 2000;151: 99-120. [PubMed]
44. Wolf ME, Ferrario CR. AMPA receptor plasticitate în nucleul accumbens după expunerea repetată la cocaina. Neurosci Biobehav Rev. 2010;35: 185-211. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
45. Pierce RC, Bell K, Duffy P, Kalivas PW. Cocaina repetată amplifică transmisia de aminoacizi excitatori în nucleul accumbens numai la șobolani care au dezvoltat sensibilizare comportamentală. J Neurosci. 1996;16: 1550-1560. [PubMed]
46. Suto N, Tanabe LM, Austin JD, Creekmore E, Pham CT, și colab. Expunerea anterioară la psihostimulanți sporește reintroducerea cocainei în căutarea nucleului accumbens AMPA. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 2149-2159. [PubMed]
47. Cornish JL, Kalivas PW. Transferul glutamatului în nucleul accumbens mediază recaderea în dependența de cocaină. J Neurosci. 2000;20: RC89. [PubMed]
48. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamentul sexual și indicatorii de mediu asociați sexului activează sistemul mezolimbic la șobolanii masculi. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
49. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, și colab. DeltaFosB în circuitele de recompensare a creierului mediază rezistența la stres și răspunsurile antidepresive. Nat Neurosci. 2010;13: 745-752. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
50. Ferrario CR, Li X, Wang X, Reimers JM, Uejima JL, și colab. Rolul redistribuirii receptorilor de glutamat în sensibilizarea locomotorie față de cocaină. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 818-833. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
51. Boudreau AC, Ferrario CR, Glucksman MJ, Wolf ME. Modificări ale căii de semnalizare și substraturi de protein kinază A noi legate de sensibilizarea comportamentală la cocaină. J Neurochem. 2009;110: 363-377. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
52. Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Receptorii receptorului AMPA la nivelul nucleului accumbens de șobolan cresc în timpul retragerii cocainei, dar se internalizează după provocarea cu cocaină în asociere cu activarea modificată a protein kinazelor activate de mitogen. J Neurosci. 2007;27: 10621-10635. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
53. Boudreau AC, Wolf ME. Sensibilizarea comportamentală față de cocaină este asociată cu creșterea expresiei suprafeței receptorului AMPA în nucleul accumbens. J Neurosci. 2005;25: 9144-9151. [PubMed]
54. Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Experiența cocainei controlează plasticitatea sinaptică bidirecțională în nucleul accumbens. J Neurosci. 2007;27: 7921-7928. [PubMed]
55. Ghasemzadeh MB, Mueller C, Vasudevan P. Sensibilizarea comportamentală la cocaină este asociată cu creșterea traficului de receptori de glutamat la densitatea postsynaptică după o perioadă de așteptare prelungită. Neuroscience. 2009;159: 414-426. [PubMed]
56. Mameli M, Halbout B, Creton C, Engblom D, Parkitna JR, și colab. Cocaina plastică sinaptică evocată de cocaină: persistența în VTA declanșează adaptările în NAc. Nat Neurosci. 2009;12: 1036-1041. [PubMed]
57. Celebre KR, Kumaresan V, Sadri-Vakili G, Schmidt HD, Mierke DF, și colab. Traficul dependent de fosforilare a receptorilor AMPA care conțin GluR2 în nucleul accumbens joacă un rol critic în reintroducerea cocainei. J Neurosci. 2008;28: 11061-11070. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
58. Bachtell RK, Self DW. Expunerea excesivă de cocaină produce modificări tranzitorii în comportamentul mediată de receptorul AMPA nucleu accumbens. J Neurosci. 2008;28: 12808-12814. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
59. Karler R, Calder LD, Chaudhry IA, Turkanis SA. Blocarea tolerantei inverse la cocaina si amfetamina de catre MK-801. Life Sci. 1989;45: 599-606. [PubMed]
60. Schumann J, Yaka R. Retragerea prelungită din expunerea repetată de cocaină noncontingente crește expresia receptorului NMDA și activitatea ERK în nucleul accumbens. J Neurosci. 2009;29: 6955-6963. [PubMed]
61. Powell WS, Dominguez JM, Hull EM. Un antagonist al NMDA afectează copularea și intensificarea indusă de experiența comportamentului sexual masculin la șobolan. Behav Neurosci. 2003;117: 69-75. [PubMed]
62. Fleming AS, Kucera C. Efectele de experiență sexuală sunt blocate atât de inhibitorul de sinteză a proteinelor, de cicloheximid, cât și de antagonistul NMDA necompetitiv, MK-801. Behav Neural Biol. 1991;56: 319-328. [PubMed]
63. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown JL, Davis BA, și colab. Împerecherea activează receptorii NMDA în zona preoptică mediană a șobolanilor masculi. Behav Neurosci. 2007;121: 1023-1031. [PubMed]
64. Bisaga A, Padilla M, Garawi F, Sullivan MA, Haney M. Efectele întăririi și dorinței alternative asupra opțiunii de a fuma țigări în laborator. Hum Psychopharmacol. 2007;22: 41-47. [PubMed]
65. Yonghui L, Xigeng Z, Yunjing B, Xiaoyan Y, Nan S. Efectele opuse ale MK-801 asupra exprimării prefeței de hrană indusă de hrană și morfină la șobolani. J Psychopharmacol. 2006;20: 40-46. [PubMed]
66. Huang YH, Lin Y, Mu P, Lee BR, Brown TE și colab. Experiența cocainei in vivo generează sinapse silențioase. Neuron. 2009;63: 40-47. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
67. Liao D, Zhang X, O'Brien R, Ehlers MD, Huganir RL. Reglarea sinapselor morfologice postsinaptice tăcute în dezvoltarea neuronilor hipocampici. Nat Neurosci. 1999;2: 37-43. [PubMed]
68. Pickard L, Noel J, Henley JM, Collingridge GL, Molnar E. Modificări de dezvoltare în distribuția sinaptică a AMPA și NMDA receptor și compoziția subunității receptorului AMPA în neuronii hipocampali vii. J Neurosci. 2000;20: 7922-7931. [PubMed]
69. Groc L, Gustafsson B, Hanse E. AMPA semnalizare în sinapsele glutamatergice în naștere: acolo și nu acolo! Tendințe Neurosci. 2006;29: 132-139. [PubMed]
70. Marie H, Morishita W, Yu X, Calakos N, Malenka RC. Generarea sinapselor silențioase prin exprimarea acută in vivo a CaMKIV și CREB. Neuron. 2005;45: 741-752. [PubMed]
71. Brown TE, Lee BR, Mu P, Ferguson D, Dietz D, și colab. Un mecanism silențios bazat pe sinapse pentru sensibilizarea locomotorie indusă de cocaină. J Neurosci. 2011;31: 8163-8174. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
72. Thomas MJ, Beurrier C, Bonci A, Malenka RC. Depresia pe termen lung în nucleul accumbens: corelarea neuronală a sensibilizării comportamentale la cocaină. Nat Neurosci. 2001;4: 1217-1223. [PubMed]
73. Feil J, Sheppard D, Fitzgerald PB, Yucel M, Lubman DI, și colab. Dependența, căutarea de droguri compulsive și rolul mecanismelor frontostriale în reglarea controlului inhibitor. Neurosci Biobehav Rev. 2010;35: 248-275. [PubMed]
74. Goldstein RZ, Volkow ND. Disfuncția cortexului prefrontal în dependență: constatările neuroimagistice și implicațiile clinice. Nat Rev Neurosci. 2011;12: 652-669. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
75. Davis JF, Loos M, Di Sebastiano AR, Brown JL, Lehman MN, și colab. Leziunile cortexului prefrontal medial provoacă un comportament sexual maladaptiv la șobolanii masculi. Biol Psihiatrie. 2010;67: 1199-1204. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
76. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, și colab. Reacția de auto-administrare a cocainei, dar nu naturală, nici perfuzia pasivă de cocaină produce LTP persistent în VTA. Neuron. 2008;59: 288-297. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
77. Kalivas PW. Ipoteza homeostaziei glutamatului de dependență. Nat Rev Neurosci. 2009;10: 561-572. [PubMed]
78. Belujon P, Grace AA. Hipocampus, amigdala și stres: sisteme de interacțiune care afectează susceptibilitatea la dependență. Ann NY Acad Sci. 2011;1216: 114-121. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
79. Ishikawa A, Ambroggi F, Nicola SM, Fields HL. Contribuții ale cortexului amigdală și medială prefrontală la răspunsul stimulativ. Neuroscience. 2008;155: 573-584. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
80. Stuber GD, Sparta DR, Stamatakis AM, van Leeuwen WA, Hardjoprajitno JE, și colab. Excizia transmisă de la amigdala la nucleul accumbens facilitează căutarea de recompense. Natura. 2011;475: 377-380. [PubMed]
81. van Furth WR, Wolterink G, van Ree JM. Reglarea comportamentului sexual masculin: implicarea opioidelor cerebrale și a dopaminei. Brain Res Brain Res Rev. 1995;21: 162-184. [PubMed]
82. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interacțiunile dintre amigdala și striatum ventral în asociațiile de stimulare-recompensă: studii care utilizează un program secundar de armare sexuală. Neuroscience. 1989;30: 63-75. [PubMed]
83. Agmo A. Comportamentul sexual al șobolanilor. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
84. Nelson CL, Milovanovic M, Wetter JB, Ford KA, Wolf ME. Sensibilizarea comportamentală la amfetamină nu este însoțită de modificări ale expresiei suprafeței receptorului de glutamat în nucleul accumbens de șobolan. J Neurochem. 2009;109: 35-51. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
85. Gao C, Wolf ME. Receptorii dopaminici reglează expresia suprafeței receptorului NMDA în neuronii cortexului prefrontal. J Neurochem. 2008;106: 2489-2501. [Articol gratuit PMC] [PubMed]