Circuitul prefrontal cortic pentru comportamente legate de depresie și anxietate mediate de colecistokinină: rolul lui ΔFosB (2014)

Abstract

Scăderea activității neuronale a cortexului prefrontal medial (mPFC) este asociată cu comportamente asemănătoare depresiei și anxietății induse de înfrângerea socială la șoareci. Cu toate acestea, mecanismele moleculare care stau la baza scăderii activității mPFC și rolul său prodepresiv rămân necunoscute. Arătăm aici că inducerea factorului de transcripție ΔFosB în mPFC, în special în zona prelimbic (PrL), mediază susceptibilitatea la stres. Inducerea ΔFosB în PrL a avut loc selectiv la șoarecii susceptibili după stresul cronic de înfrângere socială și supraexprimarea ΔFosB în această regiune, dar nu în zona infralimbic (IL) din apropiere, a sporit susceptibilitatea la stres. ΔFosB a produs aceste efecte parțial prin inducerea receptorului de colecistokinină (CCK)-B: blocarea CCKB în mPFC induce un fenotip rezistent, în timp ce administrarea CCK în mPFC imită efectele anxiogene și depresive ale stresului social. Am descoperit anterior că stimularea optogenetică a neuronilor mPFC la șoarecii susceptibili inversează mai multe anomalii comportamentale observate după stresul cronic al înfrângerii sociale. Prin urmare, am emis ipoteza că stimularea optogenetică a proiecțiilor corticale ar salva efectele patologice ale CCK în mPFC. După perfuzia de CCK în mPFC, am stimulat optogenetic proiecțiile mPFC către amigdala bazolaterală sau nucleul accumbens, două structuri subcorticale implicate în reglarea dispoziției. Stimularea proiecțiilor corticoamigdalei a blocat efectul anxiogen al CCK, deși nu a fost observat niciun efect asupra altor simptome de înfrângere socială. În schimb, stimularea proiecțiilor corticoaccumbens a inversat evitarea socială indusă de CCK și deficitele de preferință pentru zaharoză, dar nu efectele anxiogene. Împreună, aceste rezultate indică faptul că deficitele comportamentale induse de stresul social sunt mediate parțial de adaptări moleculare în mPFC care implică ΔFosB și CCK prin proiecții corticale către o țintă subcorticală distinctă.s.

Cuvinte cheie: accumbens, amigdala, anxietate, CCK, depresie, mPFC

Introducere

Mai multe regiuni ale creierului limbic interconectate anatomic și funcțional, inclusiv cortexul prefrontal medial (mPFC), hipocampul, amigdala și nucleul accumbens (NAc), sunt implicate în mediarea simptomelor cheie ale depresiei și anxietății (; ; ; ; , ; ; ). De exemplu, absența feedback-ului cortical la amigdala este corelată cu emoțiile disforice și revine la niveluri normale după un tratament de succes. Efectele antidepresive ale stimulării cerebrale profunde a cortexului cingulat subgenual, o zonă a mPFC, sunt asociate cu restabilirea activității creierului atât cortical, cât și subcortical la niveluri normale (; ). În mod similar, stimularea cerebrală profundă a NAc este antidepresivă și anxiolitică și se corelează cu metabolismul alterat în NAc, amigdala și mPFC (; ; ). Aceste date susțin o ipoteză a rețelei neuronale a tulburărilor de dispoziție în care tratamentele antidepresive, indiferent de mecanisme, normalizează activitatea atât în ​​circuitele corticale subactive cât și subcorticale hiperactive (; ; ; ; ; ).

Modelele animale care implică expunerea cronică la stres fizic sau psihologic afectează structura și funcția neuronilor din mPFC (), amygdala (), hipocampus (), și NAc (; ). Stresul cronic al înfrângerii sociale, un model de depresie valid din punct de vedere etologic (), scade activitatea neuronală mPFC așa cum se deduce din expresia redusă a Zif268 și c-Fos (; ). În plus, stimularea optogenetică a mPFC inversează aceste deficite și exercită efecte asemănătoare antidepresivelor (), confirmând importanța mPFC în fenomenele legate de starea de spirit. TRozatoarea mPFC, ca si la primate, controleaza comportamentul emotional in parte prin proiectii catre amigdala bazolaterala (BLA) si NAc (; ; ). Cu toate acestea, mecanismele moleculare care mediază acest rol al mPFC rămân necunoscute.

Prezentul studiu s-a concentrat inițial pe ΔFosB, un factor de transcripție stabil care este indus în NAc de stresul cronic al înfrângerii sociale, unde se opune susceptibilității la stres. (). Am efectuat maparea la nivelul creierului a inducției ΔFosB după stresul de înfrângere și am constatat, similar cu studiile anterioare (; ; ), inducție robustă în mPFC. În mod surprinzător, am descoperit că o astfel de inducție ΔFosB în mPFC promovează susceptibilitatea la stres. Am identificat receptorul colecistochininei (CCK)-B ca o țintă moleculară a ΔFosB în mPFC, unde neurotransmisia CCKergică a fost implicată atât în ​​efectele anxiogene, cât și depresogene ale stresului social (, ). Am descoperit că activitatea CCK în mPFC este atât necesară, cât și suficientă pentru efectele stresului social, asemănătoare anxietății și depresiei. Mai mult, prin utilizarea abordărilor optogenetice, demonstrăm acțiuni specifice ale CCK în subcircuitele mPFC: CCK în proiecțiile mPFC-BLA mediază simptomele de anxietate, în timp ce CCK în proiecțiile mPFC-NAc mediază simptomele depresiei.

Materiale și metode

Experimentul 1: cartografierea la nivelul creierului a inducției ΔFosB prin stresul cronic al înfrângerii sociale.

Șoarecii masculi C57BL/6J în vârstă de opt săptămâni au fost supuși unui stres cronic de înfrângere socială timp de 10 zile consecutive, așa cum s-a descris anterior (; ; ) (vedea Tabelul 1; Fig. 1A). Pe scurt, fiecare șoarece a fost expus la un șoarece reproducător CD1, mascul, agresiv, nefamiliar, timp de 5 minute pe zi. După interacțiunea directă cu agresorul CD1 (5 min), animalele au fost plasate într-un compartiment adiacent al aceleiași cuști pentru următoarele 24 de ore cu contact senzorial, dar nu fizic. Animalele martor au fost găzduite în cuști echivalente, dar cu membri ai aceleiași tulpini. Testele de interacțiune socială au fost efectuate la 24 de ore după ultima zi de înfrângere. Evitarea socială a unui șoarece mascul CD1 necunoscut a fost evaluată conform protocoalelor publicate. A fost măsurat timpul petrecut în „zona de interacțiune” (un coridor de 8 cm lățime care înconjoară cușca). Segregarea șoarecilor învinși în subpopulații susceptibile și rezistente a fost efectuată așa cum s-a descris anterior (; ). Deoarece majoritatea șoarecilor de control petrec mai mult timp interacționând cu o țintă socială decât cu o incintă țintă goală, un raport de interacțiune de 100 (timpul egal petrecut în zona de interacțiune în prezența vs absența unei ținte sociale) este utilizat ca limită: șoarecii cu scoruri <100 sunt etichetați ca „susceptibili”, iar cei cu scoruri ≥100 ca „rezistenți”. Analizele comportamentale, biochimice și electrofiziologice ample susțin validitatea acestor subpopulații distincte sensibile și rezistente (; ; ).

Tabelul 1.  

Numărul mediu (± SEM) de nuclee imunoreactive FosB per mm2 în zonele creierului de control, șoareci susceptibili și rezistenți la 24 de ore după stresul cronic (10 d) de înfrângere socială
Figura 1.  

Inducerea ΔFosB în mPFC promovează susceptibilitatea la stres. A, Fotomicrografii reprezentative ale imunohistochimiei ΔFosB în mPFC la 24 de ore după ultimul dintre cele 10 episoade de înfrângere socială. B, Inducerea ΔFosB nu are loc la GABAergic ...

Imediat după testul de interacțiune socială, șoarecii au fost anesteziați și perfuzați intracardic cu 4% paraformaldehidă/PBS. Numărul de celule pentru ΔFosB+ neuronii din NAc au fost executați așa cum s-a descris anterior (). Creierele au fost crioprotejate cu zaharoză 30% și secțiunile coronale (30 μm) au fost tăiate pe un microtom de congelare și prelucrate pentru imunohistochimie. Secțiunile care plutesc liber au fost preincubate într-un tampon de blocare care conține 0.3% Triton și 3% ser normal de capră. ΔFosB a fost detectat folosind anticorpi policlonali de iepure crescuți împotriva porțiunii N-terminale a proteinei (1/1000 Santa Cruz Biotechnology, catalog # sc-48) în același tampon, apoi procesat cu anticorpi IgG de capră anti-iepure biotinilați și avidină-biotină metoda complexului de peroxidază cu DAB ca substrat (Vector Laboratories). Timpii de incubare a diaminobenzidinei s-au menținut constant pentru toate condițiile (100 s). Feliile au fost montate, deshidratate și acoperite cu lamela. Celulele imunopozitive ΔFosB au prezentat o colorare maro specifică în nucleu și au fost cuantificate de către un observator nevăzut la condițiile de tratament folosind un microscop (mărire de 20x). Trei secțiuni ale creierului selectate care acoperă fiecare zonă a creierului au fost alese per șoarece pentru cuantificare. Segregarea anatomică a fiecărei regiuni a creierului a fost realizată prin compararea secțiunii cu atlasul creierului de șoarece Paxinos. Condițiile pentru imunohistochimie au fost optimizate pentru a reduce nivelurile de fond la minim, permițând identificarea corectă a celulelor ΔFosB-pozitive. Valorile medii au fost calculate pentru fiecare animal și considerate ca o observație individuală pentru analiza statistică. Deși anticorpul utilizat recunoaște atât ΔFosB cât și FosB de lungime completă, știm prin Western blot că numai ΔFosB este detectabil în condițiile studiate (; ).

Experimentul 2: identificarea fenotipului neuronal ΔFosB indus de stresul social în mPFC.

Pentru a examina expresia ΔFosB în neuronii corticali GABAergici, am folosit țesuturi de la șoareci GAD2-tdTomato expuși la stresul cronic al înfrângerii sociale și colorate pentru ΔFosB așa cum este descris mai sus (vezi Fig. 1B). Șoarecii au fost generați prin reproducerea șoarecilor knockin GAD2-Cre (Gad2tm2(cre)Zjh/J; numărul de stoc JAX 010802) () cu (B6.Cg-Gt(ROSA)26Sortm9(CAG-tdTomato)Hze/J; numărul de stoc JAX 007908) care poartă tdTomato controlat cu oprire floxed (varianta RFP).

Experimentul 3: efectele comportamentale ale supraexprimării ΔFosB în cortexul prelimbic (PrL) și infralimbic (IL).

Chirurgia stereotaxică a fost efectuată pe șoareci masculi adulți (8 săptămâni) pentru a injecta HSV-ΔFosB-GFP sau HSV-GFP în regiunile PrL sau IL ale mPFC. Pe scurt, șoarecii au fost anesteziați folosind un amestec de ketamina (10 mg/kg) și xilazină (1 mg/kg), iar următoarele coordonate stereotaxice au fost utilizate pentru livrarea virală pentru PrL: 1.8 mm (anterior/posterior), 0.65 mm (lateral). ), −2.2 mm (dorsal/ventral); iar pentru IL: 1.9 mm (anterior/posterior), 0.75 mm (lateral), -2.8 mm (dorsal/ventral) la un unghi de 10° față de linia mediană (față de bregma). Un total de 0.5 μl de virus purificat a fost eliberat bilateral pe o perioadă de 5 minute (0.1 μl/min), urmată de 5 minute de repaus. Locurile de injectare virală au fost confirmate folosind metode histologice standard (vezi Fig. 1C). Deși nu este posibilă țintirea selectivă a PrL față de IL la șoareci cu acuratețe perfectă, datele din Figura 1C ilustrează faptul că este foarte fezabil să țintim în mod predominant o regiune sau alta. Într-adevăr, efectele comportamentale distincte obținute din țintirea celor două regiuni (vezi Rezultatele) fundamentează această abordare. Primul lot de șoareci a fost folosit exclusiv într-un experiment de înfrângere socială submaximală (vezi Fig. 1D). La trei zile după operație, șoarecii au fost supuși la două înfrângeri consecutive în aceeași zi și apoi testați pentru interacțiunea socială 24 de ore mai târziu. Această procedură de înfrângere submaximală a fost validată anterior pentru a dezvălui fenotipuri de prosusceptibilitate în urma manipulărilor genetice (; ).

Un al doilea lot de șoareci a fost folosit pentru a testa comportamentele bazale de anxietate și depresie (vezi Fig. 1E J). La o zi după operație, șoarecii au fost obișnuiți cu o soluție de zaharoză 1% (g/v). În ziua următoare, șoarecii au putut alege între o sticlă de apă și o sticlă de soluție de zaharoză 1%, schimbată zilnic. Aportul de soluție de zaharoză timp de 24 de ore a fost măsurat în a patra și a cincea zi după intervenție chirurgicală și a fost exprimat ca procent din cantitatea totală de lichid ingerată. Șoarecii au fost testați în câmp deschis (ziua 3), în labirint la nivel ridicat plus (ziua 4), interacțiune socială (ziua 5 dimineața) și teste de înot forțat (ziua 5 după-amiază), pe baza protocoalelor publicate (). Am constatat că, cu această ordine de testare, rezultatele la testele ulterioare nu sunt afectate de cele anterioare (). Activitatea șoarecilor în câmp deschis a fost înregistrată timp de 5 minute folosind un sistem de urmărire video (Ethovision) în condiții de lumină roșie. Labirintul ridicat plus a constat din două piste drepte care se intersectează, poziționate la 60 cm deasupra podelei și împărțite în două brațe deschise și două brațe închise. Șoarecii au fost plasați individual în centrul labirintului și lăsați să exploreze liber fiecare braț pentru o perioadă de 5 minute. În testele în câmp deschis și în labirint, timpul petrecut în centru și, respectiv, în brațele deschise, a fost folosit ca indice invers al răspunsurilor legate de anxietate. Un test de înot forțat de o zi a fost efectuat pentru o perioadă de 5 minute. Timpul crescut de imobilitate în timpul testului de înot forțat a fost interpretat ca un comportament asemănător prodepresiei. Acest test de 1 zi a fost utilizat pe scară largă la șoareci și validat ca măsură a validității predictive, deoarece medicamentele antidepresive reduc timpii de imobilitate.

În cele din urmă, unui grup separat de șoareci au fost injectați intra-mOFC cu HSV-ΔFosB și au fost testați pentru interacțiunea socială după o înfrângere submaximală (vezi Fig. 1K).

Vectorii HSV au fost obținuți de la Rachael Neve (Massachusetts Institute of Technology). Genele de interes (ΔFosB și GFP) sunt sub un promotor CMV. Acești vectori au fost validați pe scară largă în publicații anterioare (de exemplu, ).

Experimentul 4: efectele stresului social cronic asupra nivelurilor receptorilor CCKB în mPFC.

La 24 de ore după testul de interacțiune socială, creierul a fost îndepărtat rapid și tăiat în serie, iar mPFC a fost disecat rapid și înghețat pe gheață uscată (vezi Fig. 2A,B). Izolarea ARN, qPCR și analiza datelor au fost efectuate așa cum s-a descris anterior (; ). ARN a fost izolat cu reactiv TriZol (Invitrogen) și a fost purificat în continuare cu kiturile RNAeasy micro de la QIAGEN. S-a determinat că toate probele de ARN au valori 260/280 și 260/230 ≥1.8. Transcrierea inversă a fost efectuată folosind iScript (Bio-Rad). qPCR folosind SYBR Green (Quanta) a fost efectuat cu un sistem Applied Biosystems 7900HT RT PCR cu următorii parametri de ciclu: 2 min la 95°C; 40 de cicluri de 95°C timp de 15 s, 59°C timp de 30 s și 72°C timp de 33 s; și încălzire gradată la 95°C pentru a genera curbe de disociere pentru confirmarea produselor PCR unice. Datele au fost analizate prin compararea Ct valorile stării de tratament (susceptibili sau rezistenți față de șoarecii de control sau HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) cu ΔΔCt metoda (). Primerii qPCR sunt după cum urmează: AFosB, înainte, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT și invers, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, înainte, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC și înapoi, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, înainte, AGCGCGATACATCCAGCAG și invers, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, înainte, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG și înapoi, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Figura 2.  

Blocarea receptorului CCKB are un efect de proreziliență, asemănător antidepresiv. A, Înfrângerea socială scade nivelul receptorilor CCKB în mPFC numai la șoarecii rezistenți (n = 8–10). *p < 0.05, comparativ cu controlul (ANOVA unidirecțional). **p <0.05 ...
Experimentul 5: efectele ΔFosB asupra receptorilor CCKB și a nivelurilor cFos.

Șoarecilor li s-a injectat intra-PrL cu HSV-ΔFosB. La 72 de ore după operație, la vârful supraexpresiei virale, locurile de injectare au fost disecate la microscop fluorescent (vezi Fig. 2C). Izolarea ARN, qPCR și analiza datelor au fost efectuate așa cum este descris mai sus. Primerii qPCR sunt după cum urmează: c-fos, înainte, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA și invers, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Experimentul 6: efectele blocării ΔFosB asupra nivelurilor și rezistenței receptorilor CCKB induse de stres.

Șoarecii adulți au fost injectați bilateral cu HSV-GFP sau HSV-ΔJunD în PrL (vezi Fig. 2D-F). ΔJunD este un mutant trunchiat N-terminal al JunD care acționează ca un antagonist dominant-negativ al ΔFosB. Șoarecii au fost supuși înfrângerii sociale de două ori pe zi timp de 5 zile. Acest protocol accelerat de înfrângere socială, scurtat pentru a coincide cu perioada de expresie maximă a transgenei HSV, a fost folosit anterior și s-a dovedit că induce niveluri maxime de evitare socială (). La 24 de ore de la ultimul episod de stres, șoarecii au fost decapitați fără anestezie pentru a evita efectele anestezicelor asupra nivelului de proteine ​​neuronale. Țesutul infectat a fost îndepărtat în inhibitori de protează (Roche) și fosfatază (Sigma-Aldrich) care conține PBS, folosind un pumn de calibrul 15 și imediat congelat pe gheață carbonică. Probele au fost omogenizate prin sonicare ușoară în tampon RIPA modificat: 10 mm bază Tris, 150 mm clorură de sodiu, 1 mm EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% deoxicolat de sodiu, pH 7.4 și inhibitori de protează și fosfatază ca de mai sus. După adăugarea tamponului Laemmli, proteinele au fost separate pe geluri cu gradient de poliacrilamidă 4-15% (Criterion System; Bio-Rad), iar Western blotting a fost efectuată folosind sistemul Odyssey (Li-Cor) conform protocoalelor producătorului. Membranele au fost tamponate cu anticorp receptor CCKB (1/1000, Acris, catalog #AP01421PU-N). Un alt grup de șoareci a fost injectat cu AAV-ΔJunD sau AAV-GFP în PrL și apoi, la 5 săptămâni după intervenție chirurgicală pentru a permite expresia maximă a transgenei, șoarecii au fost supuși protocolului de înfrângere submaximal. Au fost testați pentru interacțiunea socială la 24 de ore după ultima înfrângere.

Experimentul 7: efectele intra-mPFC CI-988, un antagonist CCKB, asupra evitării sociale și anhedoniei induse de stresul social.

Canula bilaterală (distanță de 1.0 mm canulă la canulă, 1.8 mm anterior, injector -2.2 mm dorsal/ventral) care vizează mPFC au fost implantate la șoareci susceptibili (vezi Fig. 2G,H). La o săptămână după operație, 10 ng de CI-988 au fost infuzați direct în mPFC, țintind în primul rând PrL. Șoarecii au fost apoi testați pentru comportamentul lor de interacțiune socială. Preferința zaharozei a fost măsurată pentru restul de 24 de ore. CI-988 (Tocris Bioscience) a fost dizolvat în soluţie salină, alicotat şi congelat. Diluția finală a fost pregătită în ziua experimentului. Un experiment suplimentar a fost efectuat pe șoareci sensibili cu CI-988 administrat intraperitoneal (2 mg/kg) cu 30 de minute înainte de testul de interacțiune socială.

Experimentul 8: efectele agonistului CCKB asupra susceptibilității la stres social și inversare prin stimularea optogenetică a proiecțiilor mPFC la BLA sau NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP sau AAV-CaMKII-EYFP a fost injectat în mPFC drept, vizând din nou în primul rând PrL (vezi Fig. 3A–G). Cinci săptămâni mai târziu, fibrele optice au fost implantate în NAc drept (1.4 anterior/posterior, 2.6 lateral, -4.7 dorsal/ventral la un unghi de 25° față de linia mediană) sau BLA (-1.6 anterior/posterior, 3.1 lateral, -4.7 dorsal). /ventral fără unghi de la linia mediană). În timpul aceleiași proceduri chirurgicale, au fost implantate canule bilaterale în mPFC (vezi mai sus). Canulele și fibrele au fost fixate de craniu cu ciment dentar. Apoi șoarecilor li s-a lăsat să se recupereze cu o săptămână înainte de începerea experimentelor comportamentale. Șoarecii au fost supuși unei înfrângeri submaximale, apoi au fost testați 1 de ore mai târziu pentru interacțiunea socială, urmat direct de labirint plus crescut și pentru preferința de zaharoză pentru restul de 24 de ore. Cu 24 de minute înainte de testul de interacțiune socială, jumătate de șoareci au fost perfuzați cu CCK-30 (8 ng) în mPFC, în timp ce cealaltă jumătate a primit vehicul (soluție salină). Șoarecii au fost testați în perechi (un șoarece tratat cu vehicul și CCK-10, cu AAV-GFP sau AAV-ChR8). CCK-2 (Sigma) a fost dizolvat în soluţie salină, alicotat şi congelat. Diluția finală a fost pregătită în ziua experimentului.

Figura 3.  

Susceptibilitatea la stres indusă de CCK-8 depinde de proiecțiile corticale specifice. A, La 24 de ore după înfrângerea socială submaximală și la 30 de minute după perfuzia CCK-8, regiunile de proiecție mPFC au fost stimulate cu laser în timpul unui test pentru interacțiunea socială. infuzie CCK-8 ...

Stimulările optice au fost efectuate conform protocoalelor publicate (). Fibrele optice (Thor Laboratories) au fost implantate cronic și conectate printr-un adaptor FC/PC la o diodă laser albastră de 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473–050-M). Un stimulator (Agilent, #33220A) a fost folosit pentru a genera impulsuri de lumină albastră. În timpul tuturor stimulărilor, rafale de 40 ms de impulsuri de lumină albastră de 100 Hz (9.9 ms lățimea vârfurilor) au fost livrate la fiecare 3 s în regiunile terminale în BLA sau NAc numai pe durata testului de interacțiune socială, pentru a imita un model de explozie cortical. activitate. Intensitatea luminii din fibră optică a fost verificată înainte de fiecare utilizare, folosind un senzor de lumină (Thor Laboratories, S130A), iar intensitatea luminii a fost de aproximativ 15 mW. Acest protocol de stimulare, care a fost validat electrofiziologic anterior (), nu a indus convulsii pe baza observațiilor comportamentale și a absenței exprimării c-Fos în afara regiunilor stimulate optogenetic ().

Experimentul 9: efectele agonistului CCKB asupra activității neuronale mPFC măsurate prin nivelurile de ARNm c-Fos.

Canulele bilaterale au fost implantate pe șoareci adulți care vizează mPFC (vezi Fig. 3H). După o săptămână de odihnă, șoarecii au fost supuși unei înfrângeri submaximale și au fost infuzați cu CCK-8 24 de ore mai târziu. Puncturile mPFC au fost luate la 30 de minute după perfuzia de medicament și probele au fost pregătite pentru analiza mARN așa cum este descris mai sus.

Adăpostirea animalelor.

Au fost utilizați șoareci masculi C57BL/6J în vârstă de opt săptămâni (Laboratorul Jackson). Toți șoarecii au fost obișnuiți cu instalația pentru animale timp de cel puțin 1 săptămână înainte de manipulările experimentale și au fost menținuți la 23°C–25°C pe un ciclu de 12 ore lumină/întuneric (luminile aprinse la 7:00 AM) cu ad libitum acces la alimente și apă. Experimentele au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare ale Societății pentru Neuroscience și ale Comitetului Instituțional pentru Îngrijirea și Utilizarea Animalelor de la Icahn School of Medicine din Mount Sinai.

Analize statistice.

Datele afișate sunt exprimate ca medie ± SEM (reprezentată ca bare de eroare). ANOVA unidirecționale au fost utilizate pentru a compara mediile între șoarecii de control, susceptibili și rezistenți în analizele imunohistochimice, biochimice și comportamentale. ANOVA unidirecționale au fost utilizate pentru a compara mediile dintre controalele GFP și supraexprimarea ΔFosB în PrL sau IL în testele de preferință în câmp deschis, labirint plus ridicat, înot forțat și zaharoză. ANOVA bidirecționale au fost utilizate pentru a compara mediile între controalele GFP, ΔFosB-PrL și ΔFosB-IL în testul de interacțiune socială. ANOVA bidirecționale au fost utilizate pentru a compara efectele CCK-8 cu sau fără stimulare optogenetică în toate experimentele comportamentale, precum și efectul supraexprimării ΔFosB sau al infuziei CI-988 asupra evitării sociale. Atunci când este cazul, post hoc analizele au fost efectuate folosind un Bonferroni post hoc Test. Elevi t testele au fost utilizate pentru a compara mediile pentru efectul perfuziei CI-988 asupra preferinței de zaharoză și a testelor de înot forțat și al CCK-8 asupra c-Fos nivelurile de ARNm. Diferențele dintre condițiile experimentale au fost considerate semnificative statistic atunci când p ≤ 0.05.

REZULTATE

Cartografierea la nivelul creierului a inducției ΔFosB prin stresul cronic al înfrângerii sociale

Am investigat mai întâi inducerea ΔFosB prin imunohistochimie la șoareci de control, susceptibili și rezistenți, după un curs de stres cronic (10 d) de înfrângere socială, cu accent pe regiunile creierului anterior și al creierului mediu implicate anterior în răspunsurile la stres. Animalele au fost analizate la 24 de ore după ultimul episod de înfrângere. Stresul social cronic induce ΔFosB în numeroase zone ale creierului cu modele distincte observate între șoarecii rezistenți și susceptibili. Așa cum se arată în Tabelul 1 și Figura 1A, IL, BLA, girusul dentat al hipocampusului, striatul dorsal și miezul NAc au prezentat activare preferențială la șoarecii rezistenți; astfel de rezultate în NAc sunt în concordanță cu constatările publicate (). În contrast izbitor, șoarecii sensibili au prezentat o inducție mai mare în PrL, septul lateral și nucleul de pat al striei terminale. Mai multe regiuni ale creierului au prezentat inducerea ΔFosB comparabilă la șoarecii susceptibili și rezistenți; acestea au inclus cortexul orbitofrontal (OFC, o altă zonă a PFC), învelișul NAc, rafe dorsal și gri periaqueducal (PAG).

Pentru a identifica subtipul neuronal care afișează inducerea ΔFosB în regiunile corticale, șoarecii GAD2-tdTomato au fost supuși la stres cronic de înfrângere socială. Imunoreactivitatea ΔFosB la șoarecii susceptibili a fost nedetectabilă în neuronii GABAergici (Fig. 1B), care confirmă descoperirile anterioare ale inducției specifice a ΔFosB în neuronii piramidali corticali după alte forme de stres cronic (). La șoarecii de control neînvinși, Nivelurile inițiale de ΔFosB în regiunile creierului au fost similare cu cele raportate în studiile anterioare (, ) cu niveluri bazale mult mai ridicate în NAc și striatul dorsal în comparație cu orice altă regiune, cu o singură excepție a girului dintat, care a afișat niveluri comparabile cu cele din regiunile striatale (Tabelul 1).

ΔFosB în mPFC promovează susceptibilitatea la stres

Pentru a urmări aceste constatări, ne-am concentrat pe PrL, deoarece am arătat anterior că activarea optogenetică a acestei regiuni exercita efecte asemănătoare antidepresivelor în paradigma înfrângerii sociale (). Pentru a testa consecințele funcționale ale inducției ΔFosB în această regiune a creierului, am supraexprimat viral ΔFosB în PrL la șoarecii de control (Fig. 1C) și le-a supus unui curs submaximal de stres social de înfrângere, care nu induce evitarea socială la animalele normale. Șoarecii care supraexprimau ΔFosB în PrL au fost mai susceptibili la înfrângere socială decât șoarecii de control injectați cu GFP, deoarece au arătat un comportament de evitare socială după o înfrângere socială submaximală. (interacţiune, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, efectul principal al virusului, F(2,38) = 6.013, p < 0.05; Bonferroni post test t = 2.447, p <0.05) (Fig. 1D). Acești șoareci au arătat, de asemenea, o imobilitate crescută într-un test de înot forțat de 1 zi (F(2,31) = 6.448, p < 0.05; Bonferroni post test t = 3.518, p <0.05) (Fig. 1E), un efect opus celui produs de medicamentele antidepresive. În schimb, supraexprimarea ΔFosB în PrL nu a modificat mai multe măsurători de bază ale comportamentului asemănător anxietății, preferinței de zaharoză, interacțiunii sociale sau activității locomotorii (Fig. 1F–J). Împreună, aceste descoperiri susțin ipoteza că inducerea selectivă a ΔFosB în PrL a șoarecilor susceptibili contribuie la vulnerabilitatea la stres și la consecințele sale dăunătoare. În schimb, supraexprimarea ΔFosB într-o altă regiune a mPFC, IL, nu a avut niciun efect asupra comportamentelor emoționale de bază sau asupra răspunsurilor la stresul de înfrângere socială. (Fig. 1D–J), întrucât supraexprimarea ΔFosB în OFC medial a avut tendința de a promova reziliența la înfrângerea socială cronică, deși acest efect nu a atins o semnificație statistică (interacţiune, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, efectul principal al timpului de interacțiune, F(1,31) = 14.170, p < 0.05; Bonferroni post test t = 3.860, p < 0.05 în cadrul grupului GFP; t = 1.960, p < 0.05 în cadrul grupului ΔFosB; efectul virusului, t = 2.447, p <0.05) (Fig. 1K).

ΔFosB promovează inducerea CCKB în mPFC

Un număr mare de dovezi susțin ideea că CCK, o neuropeptidă abundentă în creier, joacă un rol esențial în mecanismele neurobiologice ale stresului și anxietății. (). În special, eliberarea de CCK în mPFC în timpul stresului social la șobolani este asociată cu comportamente legate de anxietate (). Deși implicarea CCK în depresia umană rămâne neclară, dovezile recente indică rolul său în comportamentul asemănător depresiei indus de înfrângerea socială la șobolani (). Astfel, am emis ipoteza că modificările nivelurilor de CCK sau receptorul său CCKB (cunoscut și ca CCK2) în mPFC ar putea contribui la diferențele dintre șoarecii susceptibili și rezistenți. La 48 de ore după episodul final de înfrângere, nivelurile de ARNm CCKB au scăzut doar în mPFC la șoarecii rezistenți (F(2,18) = 8.084, p < 0.01; Bonferroni post test, t = 3.104, p < 0.05 față de control; t = 5.113, p < 0.01 vs susceptibil) (Fig. 2A). Nu a fost observată nicio diferență în nivelurile de ARNm CCK la șoarecii susceptibili sau rezistenți (datele nu sunt prezentate). Am observat o creștere a ΔFosB Nivelurile de ARNm numai la șoarecii susceptibili în concordanță cu datele despre proteine ​​raportate mai sus (F(2,18) = 5.246, p < 0.01; Bonferroni post test t = 3.336, p < 0.05 vs susceptibil; t test t(12) = 2.138, p < 0.05 față de control) (Fig. 2B). Deoarece ΔFosB reglează transcripția a numeroase gene (; ), am luat în considerare posibilitatea ca acesta să regleze expresia ARNm CCKB. Pentru a aborda această întrebare, am supraexprimat mai întâi ΔFosB în PrL și am constatat că această manipulare reglează în creștere nivelurile mARN CCKB în această regiune (t(12) = 2.012, p < 0.05 față de GFP) (Fig. 2C). Interesant este că am constatat și o scădere a c-Fos Nivelurile de ARNm după supraexprimarea ΔFosB (t(11) = 3.382, p <0.01) (Fig. 2C). TAceste descoperiri sugerează în plus că inducerea ΔFosB în PrL a șoarecilor susceptibili este un mecanism activ de susceptibilitate prin prevenirea suprimării CCKB observată la șoarecii rezistenți.

Pentru a consolida și mai mult aceste observații, am supraexprimat ΔJunD, un partener de legare ΔFosB căruia îi lipsește domeniul său de transactivare și, prin urmare, acționează ca un antagonist negativ dominant și i-am determinat efectul asupra expresiei CCKB indusă de stres. Am confirmat că stresul cronic al înfrângerii sociale a crescut nivelul proteinei CCKB la PrL la șoareci susceptibili (t test t(12) = 2.289, p < 0.05 față de control) (Fig. 2D,E). Mai mult, o astfel de inducție a fost complet blocată de supraexprimarea ΔJunD în această regiune (F(2,20) = 6.306, p < 0.01, post test Bonferroni t = 3.615, p <0.01) (Fig. 2D,E), susținând ipoteza că ΔFosB mediază expresia CCKB indusă de stres. În plus, blocarea activității ΔFosB în PrL, prin expresia locală ΔJunD, a promovat, de asemenea, rezistența pentru a învinge stresul (t test t(16) = 2.114, p = 0.05 față de control) (Fig. 2F). Mecanismul care stă la baza reglării în jos a CCKB la șoarecii rezistenți rămâne de elucidat.

Rolul CCKB în reziliența și susceptibilitatea la stres

Pentru a testa direct rolul reglării CCKB în PrL în mediarea susceptibilității față de reziliență, am infuzat antagonistul selectiv al receptorului CCKB CI-988 (10 ng) direct în această regiune a creierului șoarecilor susceptibili. CI-988 antagonizează eficient receptorii CCKB in vivo deoarece prezintă afinitate nanomolară și selectivitate ridicată pentru subtipul receptorului CCKB (). Blocarea activității CCKB a crescut puternic interacțiunea socială (Fig. 2G) (interacțiune, F(1,20) = 7.795, p < 0.05; medicament F(1,20) = 5.38, p < 0.05, post test Bonferroni t = 3.615, p < 0.01). Perfuzia de CI-988 a inversat, de asemenea, deficitul de preferință pentru zaharoză observat la șoarecii sensibili (t(8) = 2.681, p <0.05) (Fig. 2H). Ambele rezultate comportamentale indică faptul că blocarea acțiunii CCK în PrL exercită efecte puternice asemănătoare antidepresivelor. Interesant este că atunci când a fost administrat intraperitoneal, CI-988 a fost ineficient în inversarea evitării sociale (datele nu sunt prezentate).

Pentru a testa invers, că activarea CCKB în PrL ar putea media evitarea socială și scăderea preferinței de zaharoză induse de stresul cronic al înfrângerii sociale, am examinat efectul infuziei locale de CCK-8 (10 ng), forma predominantă a CCK în creier. , despre comportamentele legate de depresie și anxietate. Doza de medicament a fost aleasă pe baza rezultatelor anterioare din literatură (; ; ). Șoarecii au fost expuși la stres submaximal de înfrângere socială cu 24 de ore înainte de testarea comportamentală (Fig. 3A). CCK-8, infuzat cu 30 de minute înainte de testare, a fost suficient pentru a induce evitarea socială în testul de interacțiune socială, precum și o scădere a timpului petrecut în brațele deschise în labirintul ridicat plus (SI: BLA, interacțiune, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; efectul principal al medicamentului, F(1,22) = 11.75, p < 0.05; Bonferroni post test t = 2.957, p < 0.05; NAc: interacțiune, F(1,26) = 6.688, p < 0.05, post test Bonferroni t = 2.816, p < 0.05; EPM: BLA, interacțiune, F(1,22) = 8.0, p < 0.01; Bonferroni post test t = 2.509, p < 0.05 efect al medicamentului; t = 2.528, p < 0.05 efect virus; NAc, t test t(17) = 1.961; p < 0.05 efect al medicamentului în cadrul grupului eYFP) (Fig. 3FI, stânga). Nu s-au observat diferențe în preferința pentru zaharoză (Fig. 3F,G, stânga). În cele din urmă, infuzia de CCK-8 nu a avut niciun efect asupra comportamentului (interacțiunea socială și labirint crescut plus) al șoarecilor naivi neînvinși în aceste teste (datele nu sunt prezentate). TAceste rezultate demonstrează că creșterea mediată de ΔFosB a activității CCKB în PrL a șoarecilor susceptibili, în comparație cu șoarecii rezistenți, contribuie la unele dintre deficitele comportamentale induse de stres prezentate de aceste animale.

Blocarea susceptibilității la stres indusă de CCK prin activarea proiecțiilor corticale la BLA față de NAc

Scăderea activității neuronale a mPFC se corelează cu comportamente asemănătoare depresiei la șoareci, cu stimularea optogenetică a neuronilor mPFC ai șoarecilor susceptibili producând efecte asemănătoare antidepresivelor (). Astfel, am emis ipoteza că CCK ar putea acționa în PrL prin inhibarea activității neuronale și, prin urmare, provocând un comportament asemănător depresiei. În conformitate cu această ipoteză, am observat o scădere a c-Fos Nivelurile de ARNm din PrL ca răspuns la perfuzia de CCK în această regiune a creierului (t(13) = 2.235, p <0.05) (Fig. 3H).

Apoi am emis ipoteza că stimularea optogenetică a mPFC își exercită acțiunile antidepresive opunându-se efectelor CCK asupra activității neuronale. În testarea acestei ipoteze, am investigat structurile subcorticale care mediază efectele anxiogene și prodepresive ale CCK. Neuronii piramidali ai mPFC proiectează puternic către NAc și BLA, două structuri limbice implicate în răspunsurile comportamentale la stres. S-a demonstrat că activitatea alterată a ambelor regiuni ale creierului joacă un rol esențial în exprimarea comportamentelor asemănătoare anxietății și depresiei (; ). Prin urmare, am testat dacă stimularea proiecțiilor glutamatergice de la PrL la NAc sau la BLA s-ar opune efectelor dăunătoare ale microinfuziei CCK în PrL (Fig. 3A). Am injectat AAV-CaMKII-ChR2-EYFP sau AAV-CaMKII-EYFP ca control, în PrL. Se știe că promotorul CaMKII țintește expresia virală către neuronii piramidali glutamatergici din regiunile corticale. Am lăsat apoi suficient timp (6 săptămâni) pentru ca transgenele să fie transportate la terminalele nervoase ale acestor neuroni piramidali în NAc și BLA (Fig. 3I). Șoarecii au primit înfrângere socială submaximală; 24 de ore mai târziu, am infuzat CCK-8 în PrL și, 30 de minute după aceea, a fost măsurată interacțiunea socială în timpul stimulării optogenetice a terminalelor glutamatergice în NAc sau BLA. Imediat după testul de interacțiune socială, șoarecii au fost evaluați în labirintul ridicat plus pentru a evalua comportamentul legat de anxietate și apoi pentru preferința de zaharoză pentru a evalua anhedonia.

Stimularea optogenetică a proiecțiilor glutamatergice PrL la NAc a inversat complet evitarea socială indusă de CCK-8 intra-PrL (interacțiune, F(1,26) = 6.688, p < 0.05, fără efect de medicament în grupul ChR2) (Fig. 3C). În schimb, o astfel de stimulare PrL la NAc nu a avut niciun efect asupra comportamentului asemănător anxietății, măsurat în labirintul ridicat plus (Fig. 3E); totuși, o astfel de stimulare a crescut preferința de zaharoză în comparație cu șoarecii nestimulați (interacțiune, F(1,20) = 5.77, p < 0.05; Bonferroni post test t = 2.998, p < 0.05 efect de stimulare la animalele tratate cu CCK-8) (Fig. 3G).

Un model comportamental foarte diferit a fost observat cu stimularea optogenetică a proiecțiilor glutamatergice PrL la BLA. O astfel de stimulare nu a împiedicat evitarea socială indusă de perfuzia intra-PrL CCK-8 (interacțiune, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; efectul principal al medicamentului, F(1,22) = 11.75, p < 0.05; nici un efect în grupul stimulat, t test t(12) = 2.054, p <0.05) (Fig. 3B). Cu toate acestea, stimularea aferentelor BLA a exercitat un efect asemănător anxiolitic, așa cum este indicat de creșterea timpului petrecut în brațele deschise ale labirintului ridicat plus (interacțiune, F(1,22) = 8.0, p < 0.01; Bonferroni post test t = 2.528, p < 0.05 efect al virusului în grupurile tratate cu CCK-8) (Fig. 3D). Stimularea proiecțiilor glutamatergice la BLA nu a avut un efect semnificativ asupra preferinței de zaharoză (interacțiune, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Fig. 3F).

Discuție

Rezultatele studiului de față oferă dovezi ale adaptărilor moleculare care apar în PrL care stau la baza susceptibilității la stresul social. Arătăm inducerea ΔFosB în această subregiune mPFC după stresul cronic al înfrângerii sociale, unde supraexpresia ΔFosB promovează susceptibilitatea la stres. Am identificat receptorul CCKB ca o genă țintă reglată de ΔFosB în PrL, inducând aparent proteina CCKB la șoarecii susceptibili și prevenind reglarea în jos a expresiei CCKB care are loc selectiv la șoarecii rezistenți. Am arătat în continuare că infuzia unui agonist CCK în PrL promovează anomalii comportamentale asemănătoare depresiei și anxietății ca răspuns la stresul social, în timp ce blocarea activității receptorului CCKB în această regiune a șoarecilor susceptibili blochează aceste efecte. Apoi am folosit instrumente optogenetice pentru a identifica microcircuitele implicate în acțiunile proanxietate vs prodepresie ale CCK în PrL. Deși proiecțiile glutamatergice cortico-NAc mediază deficitele de recompensă evidențiate prin evitarea socială și preferința redusă la zaharoză, acest microcircuit nu influențează efectele anxiogene ale CCK infuzat în PrL. În schimb, proiecțiile corticale la BLA mediază manifestarea comportamentelor legate de anxietate, dar nu au niciun efect asupra evitării sociale induse de stresul social sau asupra deficitelor de preferință pentru zaharoză. Împreună, aceste date arată că modificările funcției PrL după stresul cronic al înfrângerii sociale mediază numeroase deficite comportamentale prin proiecții subcorticale specifice.

ΔFosB: cartografierea unei rețele de stres limbic și a rolului în mPFC

Imunohistochimia ΔFosB identifică neuronii afectați de stresul cronic cu rezoluție unicelulară și a fost utilizată pentru cartografierea circuitelor neuronale reglate de stres (; ; ). Am folosit această metodologie pentru a arăta că stresul cronic al înfrângerii sociale induce ΔFosB în mai multe zone ale creierului cu modele distincte între grupurile rezistente și susceptibile, unele regiuni prezentând inducție numai la șoarecii rezistenți, altele doar la șoarecii susceptibili și încă altele în ambele condiții (Tabelul 1). Lucrările anterioare au demonstrat că inducerea ΔFosB în NAc sau PAG ventral promovează rezistența la stresul cronic și contribuie la răspunsurile antidepresive (; ).

Inducerea ΔFosB în PrL a șoarecilor susceptibili, împreună cu constatările anterioare conform cărora stimularea optogenetică a acestei regiuni exercită efecte antidepresive (), ne-a determinat să studiem influența ΔFosB în această regiune corticală. Spre deosebire de constatările în NAc și PAG ventral, am constatat că ΔFosB în PrL promovează susceptibilitatea la stresul cronic al înfrângerii sociale și produce un efect asemănător prodepresiei în testul de înot forțat, fără a afecta comportamentul de anxietate sau preferința de zaharoză. Spre deosebire de PrL, nu am găsit niciun efect al supraexprimării ΔFosB în IL din apropiere. Un studiu recent a constatat niveluri crescute de ΔFosB în IL la șoarecii rezistenți și a implicat această subregiune în rezistența la stresul social (). Prin urmare, sunt necesare studii suplimentare pentru a aborda roluri diferențiate pentru aceste două subregiuni mPFC, care s-a dovedit că produc efecte opuse în alte domenii comportamentale (; ; ). Am raportat anterior că oamenii depresivi prezintă niveluri mai scăzute de ΔFosB în NAc examinat postmortem (), wîntrucât niveluri mai mari de ΔFosB au fost demonstrate în PFC dorsolateral (zona Brodmann 46) la oamenii depresivi (). Alte regiuni corticale nu au fost examinate în ultimul studiu. În orice caz, aceste descoperiri împreună susțin anomalii specifice regiunii în expresia ΔFosB în depresia umană, unde factorul de transcripție exercită efecte foarte diferite asupra vulnerabilității la stres. Ar fi interesant în studiile viitoare să se examineze influența ΔFosB în numeroase alte regiuni ale creierului în care este indus (Tabelul 1) privind răspunsurile la stres.

Un mecanism prin care inducerea ΔFosB în PrL ar putea contribui la un comportament asemănător depresiei este prin suprimarea activității PrL. S-a demonstrat că ΔFosB suprimă răspunsurile la glutamat AMPA, și c-Fos expresie, în neuroni spinoși medii NAc (; ; ). La fel, am constatat o scădere a c-Fos expresie după supraexpresia ΔFosB în PrL. Astfel, inducerea ΔFosB în PrL ar putea fi responsabilă pentru activitatea neuronală redusă observată în această regiune după stresul cronic al înfrângerii sociale. O astfel de scădere a tonului PrL peste țintele sale subcorticale, cum ar fi BLA și NAc, ar fi de așteptat să sporească expresia fricii și incapacitatea de a stinge răspunsurile emoționale la stres (, ). Mai mult, leziunile mPFC induc răspunsuri sensibilizate la stres și deficite în stingerea fricii (; ; ; ), sugerând că afectarea mPFC indusă de stres, mediată parțial prin inducerea ΔFosB, ar putea contribui la depresie și alte tulburări legate de stres ().

Rolul CCK în vulnerabilitatea la stres

Oferim dovezi că receptorul CCKB este o țintă a ΔFosB, astfel încât inducerea ΔFosB în PrL a șoarecilor susceptibili este un mecanism prin care ΔFosB își exercită efectele asemănătoare prodepresiei în această regiune. Deși acțiunile specifice ale CCK în circuitele mPFC rămân neclare, la rozătoare CCK este localizat în interneuronii GABAergici (). Se crede că suprimă activitatea neuronilor piramidali corticali prin îmbunătățirea eliberării locale de GABA și acționând direct asupra receptorilor CCKB exprimați de neuronii piramidali (; ; ; ). Astfel, neurotransmisia CCKergică ar putea contribui la activitatea PrL redusă menționată mai sus.

CCK este un agent anxiogen, cu administrarea sistemică de agonişti CCKB inducând atacuri de panică la voluntari sănătoşi. Pacienții predispuși la atacuri de panică devin hipersensibili după expunerea la CCK (; ). Mai multe studii au confirmat efectele anxiogene ale CCK la rozătoare (). Eliberarea de CCK în mPFC în timpul stresului de înfrângere la șobolani este asociată cu comportamente legate de anxietate (); Subregiunile PrL și IL nu au fost diferențiate în acest studiu. Mai recent, blocarea sistemică, cronică a CCKB cu CI-988 a exercitat efecte asemănătoare antidepresivelor la șobolani (). CI-988 a normalizat timpul de imobilitate în testul de înot forțat. De asemenea, a prevenit hiperactivitatea axei hipotalamo-hipofizo-suprarenale, a redus volumul hipocampului și proliferarea celulară și a redus preferința de zaharoză evocată în mod normal de înfrângerea socială. Aici, confirmăm aceste rezultate arătând un efect asemănător antidepresiv al CI-988 infuzat în PrL de șoareci susceptibili, deși o singură injecție sistemică nu a imitat acest efect.

Pe lângă acțiunile acute ale CCK în PrL, am identificat niveluri scăzute de ARNm CCKB la șoarecii rezistenți, care ar putea fi o adaptare moleculară care stă la baza rezistenței. Într-adevăr, modificările tonusului CCKergic, în special nivelurile CCKB, constituie un mecanism important pentru exprimarea anxietății. Șoarecii transgenici care supraexprimă CCKB în creierul anterior prezintă răspunsuri crescute de anxietate și frică (). Descoperirea noastră privind nivelurile modificate de CCKB între șoarecii rezistenți și susceptibili ar putea contribui la diferențele fenotipice în anxietate și comportament asemănător depresiv. Aici, demonstrăm PrL ca un substrat anatomic critic pentru efectele anxiogene și prodepresive ale CCK în contextul stresului social. Cu toate acestea, alte câteva regiuni ale creierului sunt implicate în acțiunile comportamentale ale CCK, inclusiv BLA, hipocampus, NAc și PAG (; ; ; ; ). De asemenea, am găsit o creștere a nivelurilor de proteină CCKB, dar nu a nivelurilor de ARNm, în mPFC ale animalelor susceptibile. Aceste constatări subliniază că, deși nivelurile de ARNm se corelează adesea cu nivelurile de proteine, acest lucru nu este neapărat cazul ().

Experimentele noastre optogenetice demonstrează că creșterea activității proiecțiilor glutamatergice de la PrL la NAc sau la BLA antagonizează efectele CCK în PrL. Sunt necesare studii suplimentare pentru a stabili că acest efect al stimulării optogenetice este mediat de aceiași neuroni PrL care sunt controlați de CCK. Interesant, datele noastre dezvăluie roluri distincte ale acestor două microcircuite în medierea diferitelor domenii ale anomaliilor comportamentale. Proiecția cortico-NAc controlează anhedonia și recompensa; faptul că reglează evitarea socială confirmă că acest simptom este mai degrabă o reflectare a scăderii motivației și a recompensei pentru comportamentul social și nu a anxietății sociale crescute. Această concluzie este în concordanță cu incapacitatea benzodiazepinelor de a corecta această anomalie (), și cu demonstrația recentă că stimularea mPFC a NAc crește recompensa și motivația pentru droguri de abuz (). În schimb, proiecția cortico-BLA controlează simptomele legate de anxietate, în concordanță cu o largă literatură despre rozătoare și oameni (vezi mai sus).

În concluzie, rezultatele studiului prezent identifică un model de regiuni ale creierului limbic implicate în animalele susceptibile și rezistente și demonstrează modificări ale PrL care promovează susceptibilitatea. Aceste modificări implică inducerea ΔFosB și inducerea acestuia a receptorului CCKB. În schimb, blocarea acțiunilor CCK în PrL promovează efectele de tip antidepresiv și anxiolitic. De asemenea, stabilim țintele subcorticale ale acestor neuroni piramidali corticali care mediază aceste acțiuni, cu un circuit cortico-NAc esențial pentru comportamentele legate de depresie și un circuit cortico-BLA esențial pentru comportamentele legate de anxietate. În timp ce studiile clinice ale antagoniștilor CCKB la pacienții depresivi în anii 1990 nu au dat rezultate promițătoare, prezentele descoperiri sugerează valoarea revizuirii potențialului terapeutic al unor astfel de agenți la subgrupuri de pacienți expuși la niveluri ridicate de stres.

Note de subsol

 

Această lucrare a fost susținută de Institutul Național de Sănătate Mintală (EJN) și de Fundația de Cercetare a Creierului și Comportamentului Alianța Națională pentru Cercetare în Schizofrenie și Depresie, Premiul Tinerilor Investigatori pentru VV.

 

 

Autorii nu declară interese financiare concurente.

 

Referinte

  • Akirav I, Maroun M. Rolul circuitului cortex-amigdala prefrontal medial în efectele stresului asupra stingerii fricii. Plastul Neural. 2007;2007:30873. doi: 10.1155/2007/30873. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Barbas H, Blatt GJ. Proiecțiile hipocampale specifice topografice vizează zone prefrontale distincte din punct de vedere funcțional la maimuța rhesus. Hipocampul. 1995;5:511–533. doi: 10.1002/hipo.450050604. [PubMed] [Cross Ref]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Niveluri extracelulare corticale îmbunătățite de material asemănător colecistokininei într-un model de anticipare a înfrângerii sociale la șobolan. J Neurosci. 2001;21:262–269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Modificări comportamentale și biologice asemănătoare depresiei induse de înfrângere socială repetate la șobolani: implicarea colecistokininei. Mol Psihiatrie. 2008;13:1079–1092. doi: 10.1038/sj.mp.4002097. [PubMed] [Cross Ref]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Asimetrie în răspunsurile comportamentale la colecistochinină microinjectată în nucleul accumbens și amigdală de șobolan. Neurofarmacologie. 1994;33:995–1002. doi: 10.1016/0028-3908(94)90158-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, acționând atât la receptorii GABAA, cât și la receptorii GABAB, inhibă eliberarea de material asemănător colecistokininei din măduva spinării de șobolan in vitro. Brain Res. 1992;590:255–262. doi: 10.1016/0006-8993(92)91103-L. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Rolul esențial al BDNF în calea dopaminei mezolimbice în stresul de înfrângere socială. Ştiinţă. 2006;311:864–868. doi: 10.1126/science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Inducerea δFosB în gri periaqueductal de către stres promovează răspunsuri active de coping. Neuron. 2007;55:289–300. doi: 10.1016/j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Stimularea profundă a creierului Nucleus accumbens scade evaluările depresiei și anxietății în depresia rezistentă la tratament. Biol Psihiatrie. 2010;67:110–116. doi: 10.1016/j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Sensibilitate îmbunătățită la tetrapeptida colecistochinină în tulburarea de panică: constatări clinice și comportamentale. Arch Gen Psihiatrie. 1991;48:603–610. doi: 10.1001/archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Stresul dăunează creierului? Biol Psihiatrie. 1999;45:797–805. doi: 10.1016/S0006-3223(99)00009-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Stresul traumatic: efecte asupra creierului. Dialoguri Clin Neurosci. 2006;8:445–461. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Bremner JD. Neuroimagistică în tulburarea de stres posttraumatic și alte tulburări legate de stres. Neuroimaging Clin North Am. 2007;17:523–538. doi: 10.1016/j.nic.2007.07.003. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Profilul sinaptic și comportamental al intrărilor glutamatergice multiple la nucleul accumbens. Neuron. 2012;76:790–803. doi: 10.1016/j.neuron.2012.09.040. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Neuronii prelimbici și infralimbici semnalează aspecte distincte ale comportamentului instrumental apetitiv. Plus unu. 2013;8:e57575. doi: 10.1371/journal.pone.0057575. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Tonul colecistokininergic crescut constituie un mecanism molecular/neuronal important pentru exprimarea anxietății la șoarece. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103:3881–3886. doi: 10.1073/pnas.0505407103. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Semnalizarea prelimbic BDNF și TrkB reglează consolidarea învățării emoționale atât apetitive, cât și aversive. Transl Psihiatrie. 2012;2:e205. doi: 10.1038/tp.2012.128. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kinaza reglează plasticitatea sinaptică și comportamentală indusă de stresul înfrângerii sociale. J Neurosci. 2011;31:314–321. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4763-10.2011. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, al 3-lea, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Scurt stres social de înfrângere: efecte de lungă durată asupra consumului de cocaină în timpul unei excese și exprimării ARNm zif268 în amigdala și cortexul prefrontal. Neuropsihofarmacologie. 2005;30:310–321. doi: 10.1038/sj.npp.1300587. [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Efectul antidepresiv al stimulării optogenetice a cortexului prefrontal medial. J Neurosci. 2010;30:16082–16090. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1731-10.2010. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Un rol pentru metilarea represivă a histonelor în vulnerabilitatea la stres indusă de cocaină. Neuron. 2011;71:656–670. doi: 10.1016/j.neuron.2011.06.007. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • de Montigny C. Cholecystokinin tetrapeptide induce atacuri de panică la voluntari sănătoși: constatări preliminare. Arch Gen Psihiatrie. 1989;46:511–517. doi: 10.1001/archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Cross Ref]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. Efecte opuse ale octapeptidei colecistokininei (CCK-8) și tetrapeptidei (CCK-4) după injectarea în partea caudală a nucleului accumbens sau în partea rostrală și în ventriculii cerebrali. Neurochem Int. 1987;10:473–479. doi: 10.1016/0197-0186(87)90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Rolul cortexului prefrontal medial (girus cingulat) în reglarea răspunsurilor hipotalamo-hipofizar-suprarenale la stres. J Neurosci. 1993;13:3839–3847. [PubMed]
  • WC Drevets. Studii neuroimagistice și neuropatologice ale depresiei: implicații pentru caracteristicile cognitiv-emoționale ale tulburărilor de dispoziție. Curr Opin Neurobiol. 2001;11:240–249. doi: 10.1016/S0959-4388(00)00203-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Modificarea procesării interferențelor emoționale în circuitele creierului de control afectiv și cognitiv în depresia majoră. Biol Psihiatrie. 2008;63:377–384. doi: 10.1016/j.biopsych.2007.06.012. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Tratamentul antidepresiv normalizează hipoactivitatea în cortexul prefrontal dorsolateral în timpul procesării interferențelor emoționale în depresia majoră. J Afect Disord. 2009;112:206–211. doi: 10.1016/j.jad.2008.04.027. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Psihobiologia și genetica moleculară a rezilienței. Nat Rev Neurosci. 2009;10:446–457. doi: 10.1038/nrn2649. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. Surse corticale ale CRF, NKB și CCK și efectele lor asupra celulelor piramidale din neocortex. Cortexul cerebral. 2006;16:1440–1452. doi: 10.1093/cercor/bhj081. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Siguranța neuropsihologică a nucleului accumbens stimularea profundă a creierului pentru depresia majoră: efectele stimulării de 12 luni. World J Biol Psihiatrie. 2011;12:516–527. doi: 10.3109/15622975.2011.583940. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB modulează diferențial funcția căii directe și indirecte a nucleului accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:1923–1928. doi: 10.1073/pnas.1221742110. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Corelation between protein and mRNA abundance in drojdie. Mol Cell Biol. 1999;19:1720–1730. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Cortexul prefrontal medial la șobolan: dovezi pentru o distincție dorso-ventrală bazată pe caracteristicile funcționale și anatomice. Neurosci Biobehav Rev. 2003;27:555–579. doi: 10.1016/j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Cross Ref]
  • Holson RR. Leziuni corticale prefrontale meziale și timiditate la șobolani: I. Reactivitate la stimuli aversivi. Physiol Behav. 1986;37:221–230. doi: 10.1016/0031-9384(86)90224-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Corelațiile neuronale ale anhedoniei în tulburarea depresivă majoră. Biol Psihiatrie. 2005;58:843–853. doi: 10.1016/j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Tratamentul depresiei rezistente: progrese în terapiile somatice. Psihiatrie Ann Clin. 2007;19:279–287. doi: 10.1080/10401230701675222. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Modificări ale metabolismului regional al glucozei cerebrale măsurate cu tomografie cu emisie de pozitroni după tratamentul cu paroxetină al depresiei majore. Am J Psihiatrie. 2001;158:899–905. doi: 10.1176/appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS, et al. Adaptări moleculare care stau la baza susceptibilității și rezistenței la înfrângerea socială în regiunile de recompensă ale creierului. Celulă. 2007;131:391–404. doi: 10.1016/j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Nestler EJ. Neurobiologia moleculară a depresiei. Natură. 2008;455:894–902. doi: 10.1038/nature07455. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Îmbogățirea mediului conferă rezistență la stres înfrângerii sociale printr-o cale neuroanatomică dependentă de cortexul infralimbic. J Neurosci. 2011;31:6159–6173. doi: 10.1523/JNEUROSCI.0577-11.2011. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Creierul, rețelele, depresia și multe altele. Eur Neuropsychopharmacol. 2013;23:55–62. doi: 10.1016/j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Cross Ref]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D, Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Stimularea profundă a creierului pentru depresia rezistentă la tratament. Neuron. 2005;45:651–660. doi: 10.1016/j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Cross Ref]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Rolul esențial al histonei metiltransferazei G9a în plasticitatea indusă de cocaină. Ştiinţă. 2010;327:213–216. doi: 10.1126/science.1179438. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Nestler EJ. Reglarea expresiei genelor și a recompensei cocainei de către CREB și DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6:1208–1215. doi: 10.1038/nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  • Milad MR, Quirk GJ. Neuronii din cortexul prefrontal medial semnalează memoria pentru dispariția fricii. Natură. 2002;420:70–74. doi: 10.1038/nature01138. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J, Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Stimularea corticală prefrontală epidurală bilaterală pentru depresia rezistentă la tratament. Biol Psihiatrie. 2010;67:101–109. doi: 10.1016/j.biopsych.2009.08.021. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Alterarea de lungă durată a structurilor mezocorticolimbic după stresul repetat de înfrângere socială la șobolani: cursul în timp al ARNm al receptorului mu-opioid și imunoreactivitatea FosB/DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2008;27:2272–2284. doi: 10.1111/j.1460-9568.2008.06176.x. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nobil F, Roques BP. Receptorul CCK-B: chimie, biologie moleculară, biochimie și farmacologie. Prog Neurobiol. 1999;58:349–379. doi: 10.1016/S0301-0082(98)00090-2. [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Uniunea Internațională de Farmacologie: XXI. Structura, distribuția și funcțiile receptorilor de colecistokinină. Pharmacol Rev. 1999;51:745–781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 crește K(+)-evocat [3H] eliberarea de acid gamma-aminobutiric în felii din diferite zone ale creierului. Eur J Pharmacol. 1993;250:423–430. doi: 10.1016/0014-2999(93)90029-H. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Inducerea δFosB în structurile creierului legate de recompensă după stres cronic. J Neurosci. 2004;24:10594–10602. doi: 10.1523/JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Modele distincte de inducție a DeltaFosB în creier de către droguri de abuz. Sinapsa. 2008;62:358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Stresul repetat induce pierderea coloanei vertebrale dendritice în cortexul prefrontal medial al șobolanului. Cortexul cerebral. 2006;16:313–320. doi: 10.1093/cercor/bhi104. [PubMed] [Cross Ref]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB mediază desensibilizarea epigenetică a genei c-fos după expunerea cronică la amfetamine. J Neurosci. 2008;28:7344–7349. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1043-08.2008. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Interacțiunea colecistochinină și GABA în hipocampul dorsal al șobolanilor în testul de anxietate labirint plus. Physiol Behav. 2005;84:775–782. doi: 10.1016/j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Cross Ref]
  • Richard JM, Berridge KC. Cortexul prefrontal modulează dorința și teama generate de perturbarea glutamatului nucleus accumbens. Biol Psihiatrie. 2013;73:360–370. doi: 10.1016/j.biopsych.2012.08.009. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Subtipuri de receptori de colecistokinină: rol în modularea comportamentelor legate de anxietate și de recompensă în modelele animale. J Psihiatrie Neurosci. 2003;28:171–181. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Stimularea profundă a creierului pentru a recompensa circuitele atenuează anhedonia în depresia majoră refractară. Neuropsihofarmacologie. 2008;33:368–377. doi: 10.1038/sj.npp.1301408. [PubMed] [Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Rolurile disociabile ale cortexelor prelimbice și infralimbice, hipocampului ventral și amigdalei bazolaterale în exprimarea și stingerea fricii condiționate. Neuropsihofarmacologie. 2011;36:529–538. doi: 10.1038/npp.2010.184. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Silva MG, Boyle MA, Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Efectele comportamentale ale leziunilor mari și mici ale cortexului frontal medial de șobolan. Exp Brain Res. 1986;65:176–181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Diferitele populații de neuroni GABAergici din cortexul vizual și hipocampul pisicii conțin material imunoreactiv cu somatostatina sau colecistochinină. J Neurosci. 1984;4:2590–2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Antidepresivele recrutează noi neuroni pentru a îmbunătăți reglarea răspunsului la stres. Mol Psihiatrie. 2011;16:1177–1188. doi: 10.1038/mp.2011.48. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. O resursă a liniilor de driver Cre pentru țintirea genetică a neuronilor GABAergici din cortexul cerebral. Neuron. 2011;71:995–1013. doi: 10.1016/j.neuron.2011.07.026. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. Activarea unui model de expresie genetică dependentă de DeltaFOSB în cortexul prefrontal dorsolateral al pacienților cu tulburare depresivă majoră. J Afect Disord. 2011;133:174–178. doi: 10.1016/j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. Reglarea susținută a cromatinei hipocampice într-un model de șoarece de depresie și acțiune antidepresivă. Nat Neurosci. 2006;9:519–525. doi: 10.1038/nn1659. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Circuitele amygdalei care mediază controlul reversibil și bidirecțional al anxietății. Natură. 2011;471:358–362. doi: 10.1038/nature09820. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, et al. DeltaFosB în circuitele de recompensă ale creierului mediază rezistența la stres și răspunsurile antidepresive. Nat Neurosci. 2010;13:745–752. doi: 10.1038/nn.2551. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Eterogenitatea funcțională în cortexul cingulat: regiunile de evaluare anterioară și posterioară. Cortexul cerebral. 1992;2:435–443. doi: 10.1093/cercor/2.6.435-a. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Tratamentul cu imipramină și rezistența prezintă o reglare similară a cromatinei în nucleul accumbens de șoarece în modelele de depresie. J Neurosci. 2009;29:7820–7832. doi: 10.1523/JNEUROSCI.0932-09.2009. [Articol gratuit PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Inducerea DeltaFosB în cortexul orbitofrontal mediază toleranța la disfuncția cognitivă indusă de cocaină. J Neurosci. 2007;27:10497–10507. doi: 10.1523/JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Eliberarea colecistokininei din cortexul cerebral de șobolan in vivo: rolul sistemelor receptorilor GABA și glutamat. Brain Res. 1987;406:207–214. doi: 10.1016/0006-8993(87)90784-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr. Injecțiile sistemice și intra-dorsale periaqueductale cu octapeptidă sulfatată de colecistokinină (CCK-8s) induc un răspuns asemănător panică la șobolanii supuși la labirintul T ridicat. Peptide. 2004;25:1935–1941. doi: 10.1016/j.peptides.2004.06.016. [PubMed] [Cross Ref]