OBSERVAȚII: Deși stresul, drogurile de abuz și anumite recompense naturale declanșează o acumulare de DeltaFosB, stresul activează diferite celule din aval și mai târziu receptori și gene diferite. Cu alte cuvinte, dependențele și rezistența la stres se bazează pe mecanisme fundamentale diferite
J Neurosci. 2010 Oct 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
Sursă
Fishberg, Departamentul de Neuroștiințe, Scoala de Medicină Muntele Sinai, New York, New York 10029, SUA.
Abstract
Mecanismele moleculare care stau la baza adaptărilor neuronale induse de stres și de droguri sunt incomplet înțelese. O moleculă implicată în astfel de adaptări este ΔFosB, un factor de transcripție care se acumulează în nucleul accumbens al rozătoarelor (NAc), o regiune-cheie de recompensare a creierului, ca răspuns la stresul cronic sau expunerea repetată la medicamente de abuz. Tmecanismele transcripționale din amonte care controlează inducerea ΔFosB de acești stimuli de mediu rămân evazivi. Aici, identificăm factorul de transcripție dependent de activitate, factorul de răspuns al serului (SRF), ca un mediator nou în amonte de stres-, dar nu și cocaină-, induse de ΔFosB. SRF este scăzută în NAc atât la pacienții depresivi umani, cât și la șoarecii expuși cronic la stresul social înfrânt. Această reducere a SRF este absentă în animalele rezistente. Prin utilizarea mutagenezei inductibile, am arătat că inducerea mediată de stres a ΔFosB, care apare predominant în șoareci elastici, depinde de expresia SRF în această regiune a creierului. Mai mult, ștergerea genetică specifică NAc a SRF promovează o varietate de fenotipuri asemănătoare cu cei care suferă de progestativitate și pro-anxietate și face animalele mai sensibile la efectele nocive ale stresului cronic. În schimb, demonstrăm că SRF nu joacă un rol în acumularea ΔFosB în NAc ca răspuns la expunerea cocaină cronică. În plus, reducerea specifică a NAF a SRF nu are niciun efect asupra comportamentelor induse de cocaină, indicând faptul că stresul cronic de înfrângere socială și expunerea repetată la cocaină reglează acumularea ΔFosB și sensibilitatea comportamentală prin mecanisme independente.
Introducere
Nucleul accumbens (NAc), o regiune cheie de recompensare a creierului, este important pentru integrarea intrărilor senzoriale și cognitive care conduc comportamente relevante motivante ca răspuns la stimulii mediului (Nestler și Carlezon, 2006, Sesack și Grace, 2010). NAc a fost, de asemenea, implicată în anomalii comportamentale asociate dependenței de droguri și depresiei. În consecință, s-a arătat că țintirea NAc cu stimulare profundă a creierului a atenuat comportamentele depresive și de dependență atât la oameni, cât și la rozătoare (Schlaepfer și colab., 2008, Vassoler și colab., 2008, Heinze și colab., 2009; al., 2009).
Expunerea repetată la medicamente de abuz sau stres induce modificări ale expresiei genei în NAc, care pot fi subiacente cronicității dependenței și depresiei (Berton și colab., 2006, Krishnan și colab., 2007, Maze și colab., 2010, Vialou și colab. ., 2010). Interesant, factorul de transcripție ΔFosB, un produs de îmbinare al genei fosB, se acumulează în NAc ca răspuns la expunerea repetată la medicament sau stres (Nestler, 2008, Perrotti și colab., 2008, Vialou și colab., 2010). DFosB a fost propus ca un comutator molecular potențial care orientează trecerea de la consumul de droguri recreaționale la starea de dependență cronică (Nestler și colab., 1999, McClung și alții, 2004, Renthal și colab., 2009), deoarece acumularea lui în NAc recompensarea răspunsurilor la mai multe medicamente de abuz. Mai recent, a fost elucidată rolul inducerii ΔFosB în NAc în urma stării cronice de înfrângere socială (Nikulina și colab., 2008; Vialou și colab., 2010): ΔFosB promovează răspunsurile active de coping la stimulii stresanți și crește rezistența. Deși inducerea ΔFosB are loc într-o manieră dependentă de stimulare, mecanismele responsabile de acumularea ΔFosB indusă de medicament și de stres în NAc rămân necunoscute.
Factorul de răspuns seric (SRF) este un factor de transcripție necesar activării transcripționale dependente de activitate a mai multor gene timpurii imediate, inclusiv c-fos, fosb, Egr1 și Arc (Knöll și Nordheim, 2009). Studii recente au demonstrat efectele SRF asupra proprietăților morfologice și citoarhitecturale ale neuronilor, inclusiv reglarea activității sinaptice și formarea circuitelor în creierul adult (Knöll și Nordheim, 2009). Aceste descoperiri ne-au determinat să investigăm dacă SRF este reglementat funcțional de expunerea cronică la droguri de abuz sau stres, precum și de impactul potențial al unei astfel de reglementări asupra inducției osFosB în aceste condiții.
Aici, descriem un mecanism nou prin care reglarea descendentă a SRF în NAc promovează fenotipurile prodepresive și anxiogene, crescând în cele din urmă vulnerabilitatea unui animal la efectele dăunătoare ale stresului cronic. Aceste efecte sunt mediate, în parte, de pierderea inducției osFosB în NAc a animalelor stresate. Scăderile observate ale expresiei SRF și ΔFosB în țesutul NAc postmortem obținut de la pacienții deprimați susțin relevanța constatărilor noastre pentru depresia umană. Interesant este faptul că acest mecanism de control al acumulării osFosB pare a fi specific stresului: expunerea cronică la cocaină nu are niciun efect asupra expresiei SRF, ștergerea SRF din NAc nu are impact asupra acumulării osFosB după expunerea cronică la cocaină și o astfel de ștergere SRF nu are niciun efect asupra cocainei. comportamente induse. Această nouă interacțiune între SRF și ΔFosB, în contextul stresului, poate reprezenta un important mecanism homeostatic care reglementează sensibilitatea unui individ la stresul cronic.
Materiale și metode
animale
Șoareci masculi C57BL / 6J de șase săptămâni (Jackson Laboratory) au fost utilizați în toate experimentele comportamentale și biochimice. Toate animalele au fost obișnuite la instalația animală timp de cel puțin săptămâna 1 înainte de manipularea experimentală și s-au menținut la 23-25 ° C pe un ciclu 12 h light / dark (lumini de la 7: 00 AM la 7: 00 PM) cu ad libitum accesul la hrană și apă. Experimentele au fost efectuate în conformitate cu liniile directoare ale Societății pentru Neuroștiințe și cu Comitetul instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor de la Scoala de Medicină din Muntele Sinai.
Pentru experimentele de cocaină [Western blotting și imunoprecipitarea cromatinei cantitative (ChIP)] s-au utilizat șoareci C8BL / 10J de sex masculin în vârstă de 57- la 6. Animalele au primit șapte injecții intraperitoneale zilnice fie de soluție salină, fie de cocaină (20 mg / kg cocaină-HCl, Sigma). Șoarecii au fost utilizați 24 h după tratamentul final. Pentru experimentele comportamentale, șoarecii au fost adăpostiți singuri și au fost tratați cu 10 mg / kg (sensibilizare locomotorie) sau cu 7.5 mg / kg (preferată locație preferată) cocaină-HCI intraperitoneal, așa cum este descris mai jos.
S-au obținut sfeclă / flămică așa cum s-a descris anterior (Ramanan și colab., 2005). Activitatea de renunțare specifică la NAc a Srf a fost realizată prin injectare stereotaxică și supraexpresia virală ulterioară a Cre recombinase (Cre) fuzionată cu proteina fluorescentă verde (GFP) folosind vectori ai virusului adeno-asociat (AAV). Cre a fost folosit de creștini. AAV-GFP a fost injectat în locul AAV-Cre-GFP în Srffl / flice ca un control. Pe scurt, șoarecii au fost anesteziați utilizând un amestec de ketamină (10 mg / kg) și xilazină (10 mg / kg), cu următoarele coordonate stereotaxice utilizate pentru administrarea virală: + 1.6 (anterior / posterior) + 1.5 4.4 (dorsal / ventral) la un unghi de 10 ° de la linia mediană (în raport cu bregma). Un total de 0.5 μl de virus purificat a fost transmis bilateral pe o perioadă minimă 5 (0.1 μl / min), urmată de un minut de repaus 5. Șoarecii au fost testați 2 săptămâni după operație, când exprimarea virală a fost maximă, iar locurile de injectare virală au fost confirmate pentru toate animalele utilizând metode histologice standard. Eficacitatea expresiei Cre mediate virale a fost validată prin imunohistochimie și prin PCR cu transcriptază inversă pentru Srf, efectuată pe drenuri NAc microdisecționate de la animale cărora li s-au administrat AAV-Cre-GFP și AAV-GFP în NAc. Virusurile AAV-GFP și AAV-Cre-GFP au fost generate așa cum s-a descris anterior (Maze și colab., 2010).
Proceduri comportamentale
Stres social înfrânt.
Șoarecii C57BL / 6J au fost supuși stresului de cedare socială cronică pentru zile consecutive 10 așa cum s-a descris anterior (Berton și colab., 2006, Krishnan și colab., 2007, Vialou și colab., 2010). Pe scurt, fiecare șoarece a fost expus la un șoarece de crescător de câine retras CD1 necunoscut și agresiv pentru 5 min pe zi. În urma interacțiunii directe cu agresorul CD1, animalele au fost apoi plasate într-un compartiment adiacent din aceeași cușcă pentru următorul 24 h cu contact senzorial, dar nu fizic. Animalele de control au fost adăpostite în cuști echivalente, dar cu membri ai aceleiași tulpini. Testele de interacțiune socială au fost efectuate cu 24 h după ultima zi de înfrângere.
Evitarea socială la un șoarece mascul CD1 necunoscut a fost evaluată conform protocoalelor publicate (Berton și colab., 2006; Krishnan și colab., 2007; Vialou și colab., 2010). Șoarecele experimental a fost introdus mai întâi într-un câmp deschis care conține o cușcă goală cu plasă de sârmă timp de 2.5 minute. În timpul unei a doua sesiuni, un șoarece de sex masculin CD1 necunoscut a fost introdus în cușca cu fir. Timpul petrecut în zona de interacțiune (un coridor de 8 cm lățime care înconjura cușca) a fost măsurat. Segregarea șoarecilor învinși în subpopulații sensibile și rezistente a fost efectuată așa cum s-a descris anterior (Krishnan și colab., 2007; Vialou și colab., 2010). Deoarece majoritatea șoarecilor de control au petrecut mai mult timp interacționând cu o țintă socială decât cu o incintă țintă goală, un raport de interacțiune de 100 (timp egal petrecut în zona de interacțiune în prezența versus absența unei ținte sociale) a fost stabilit ca o limită. Șoarecii cu scoruri <100 au fost etichetați ca sensibili, iar cei cu scoruri ≥100 au fost etichetați ca rezistenți. Analize comportamentale, biochimice și electrofiziologice extinse susțin validitatea acestor subpopulații distincte susceptibile și rezistente (Krishnan și colab., 2007; Wilkinson și colab., 2009; Vialou și colab., 2010).
Pentru a examina vulnerabilitatea Srffl / flmice la stresul social de înfrângere, șoarecii, injectați bilateral cu AAV-GFP sau AAV-Cre-GFP, au fost supuși la trei înfrângeri consecutive în aceeași zi și apoi au fost testați pentru interacțiunea socială 24 h mai târziu. Această procedură de înfrângere submaximală a fost validată anterior pentru a descoperi fenotipuri de prosuzibilitate ca urmare a manipulărilor genetice (Krishnan și colab., 2007; Vialou și colab., 2010).
Învățat neajutorare.
S-au exprimat suprapresiunea fie AAV-GFP, fie AAV-Cre-GFP la procedeul de neajutorare învățat așa cum s-a descris anterior (Berton și colab., 2007). Pe scurt, șoarecii au fost expuși șocurilor intermitente, inevitabile ale piciorului pentru 1 h peste zilele consecutive 2 (0.45 mA, durata 5 s). În ziua testului, șoarecii au fost reintrodinați în cutie pentru studiile 15 de evadare consecutive. În timpul fiecărui proces, sa produs un șoc continuu și soarecii au avut posibilitatea de a scăpa prin intrarea în compartimentul adiacent, neelectrificat. După o evadare reușită, ușa a fost închisă automat, iar latența de ieșire a fost înregistrată. Atunci cand soarecii nu au scapat in cadrul 25 s, procesul a fost incheiat si a fost inregistrat ca un esec. Studiile anterioare au arătat că expresia virală în NAc și în alte regiuni nu are nici un efect asupra comportamentului de evacuare inițial în absența stresului (Newton și colab., 2002, Berton și colab., 2007).
Sensibilizarea locomotorie.
La două săptămâni după injecțiile intra-NAc de AAV-GFP sau AAV-Cre-GFP, șoarecii Srffl / fl au fost supuși sensibilizării locomotorii. Șoarecii au fost obișnuiți pe arena locomotorie timp de 30 de minute pe zi timp de 4 zile. După obișnuință, animalele au fost injectate intraperitoneal cu 10 mg / kg de cocaină-HCl și plasate în cutiile locomotorii. Activitățile locomotorii animalelor au fost înregistrate folosind un sistem de raze fotovoltaice (San Diego Instruments) ca pauze de raze ambulatorii timp de 30 de minute pe zi. Sensibilizarea locomotorie a fost înregistrată pe o perioadă de 6 zile.
Condiție preferată de locație.
Procedura de condiționare a locului a fost efectuată așa cum s-a descris anterior (Maze și colab., 2010), cu următoarele modificări. Pe scurt, la 18 zile după perfuzii intra-NAc de AAV-GFP sau AAV-Cre-GFP la șoareci Srffl / fl, animalele au fost plasate în camerele de condiționare, care constau din trei medii contextuale distincte. Șoarecii care prezintă o preferință semnificativă pentru oricare dintre cele două camere de condiționare au fost excluși din studiu (<10% din toate animalele). Grupurile de condiționare au fost în continuare echilibrate pentru a se adapta pentru orice prejudecată a camerei care mai poate exista. În zilele următoare, animalele au fost injectate cu ser fiziologic și închise într-o cameră după-amiaza timp de 30 de minute și apoi injectate cu cocaină (7.5 mg / kg, ip) și închise timp de 30 de minute în cealaltă cameră a doua zi, echivalând cu un total de două runde de antrenament de asociere pe tratament (două soluții saline și două perechi de cocaină). În ziua testului, șoarecii au fost repuși în aparat fără tratament timp de 20 de minute și testați pentru a evalua preferința laterală. Răspunsurile locomotorii la cocaină au fost evaluate prin spargerea fasciculului în camerele asociate cocainei pentru a asigura eficacitatea tratamentului medicamentos. Pentru toate grupurile, locomoția inițială ca răspuns la soluție salină a fost evaluată pentru a se asigura că locomoția nu a fost afectată de tratamentul viral.
Alte teste comportamentale.
Influențele sferice au fost testate în teste în câmp deschis, lumină / întuneric și forfetare bazate pe protocoale publicate (Vialou și colab., 2010). Activitatea șoarecilor în câmp deschis a fost înregistrată pentru 5 min utilizând un sistem de urmărire video (Ethovision) în condiții de lumină roșie. Pentru testul de lumină / întuneric, șoarecii au fost lăsați să exploreze liber o cutie cu două camere, compusă dintr-o arena mare iluminată conectată la o arenă închisă mai mică. Șoarecii au fost testați pentru o perioadă de 5 min pentru a evalua timpul petrecut în fiecare incintă. În timpul testelor open-field și light / dark, timpul petrecut în centru și, respectiv, arena luminoasă a fost evaluat ca un indice invers al răspunsurilor legate de anxietate. A fost efectuat un test 1 d forțat-înot pentru o perioadă de 5 min. Timpul mai mare de imobilizare în timpul testului de înot forțat a fost interpretat ca un comportament asemănător cu tipul de medicament. Testul 1 d forțat-înot a fost utilizat pe scară largă la șoareci și a fost validat ca o măsură a valabilității predictive, în sensul că terapiile antidepresive reduc timpul de imobilizare.
imunohistochimie
Laptele sanguine au fost anesteziați și perfuzate intracardial cu 4% paraformaldehidă / PBS. Creierii au fost îndepărtați și crioprotecați în 30% zaharoză / PBS. Secțiunile coronare (30 μm) au fost tăiate pe un microtome de congelare și au fost prelucrate pentru analize imunohistochimice. Validarea vaccinului Srffl / fl a fost efectuată utilizând un anticorp policlonal îndreptat împotriva SRF (1 / 2000, Santa Cruz Biotechnology). Expresia Cre a fost confirmată prin expresia GFP (pui policlonală, 1 / 8000, Aves Labs) în creierul disecat, deoarece Cre este fuzionat cu GFP. Pentru cuantificarea inducerii ΔFosB după stresul de înfrângere socială la șoareci Srffl / fl knock-out, a fost detectat ΔFosB utilizând un anticorp policlonal de iepure creat împotriva regiunii N-terminale a proteinei (1 / 1000, Santa Cruz Biotechnology). Imaginile au fost luate cu un microscop confocal (20 × mărire; Zeiss). Numărul de celule imunopozitive GFP numărate ca negative și pozitive pentru imunoreactivitatea ΔFosB a fost cuantificat în mai multe imagini pentru fiecare animal, cu valori medii ulterior calculate pentru fiecare animal. Fiecare animal a fost considerat o observație individuală pentru analiza statistică.
Umane postmortem țesut NAc
Țesutul cerebral uman postmortem a fost obținut din Dallas Brain Collection, unde țesutul este colectat de la Oficiul Medicului Examinator din Dallas și de la Universitatea din Texas (UT) Southwestern's Tissue Transplant Program, după acordul celor mai apropiați. Țesutul a fost analizat atât de la bărbați, cât și de la femei, potrivite pentru vârstă, interval post-mortem, număr de integritate ARN (RIN) și pH. Factorii specifici agonali, inclusiv comă, hipoxie, pirexie, convulsii, deshidratare, hipoglicemie, insuficiență multiplă a organelor și ingestia de substanțe neurotoxice în momentul morții influențează integritatea ARN în țesuturile cerebrale post-mortem (Tomita și colab., 2004). Am folosit o scală a factorului agonal (AFS) pentru a caracteriza probele de țesut pe fiecare dintre aceste opt condiții. Absenței unui factor agonal i s-a atribuit un scor 0 și prezența sa a fost notată ca 1 pentru a furniza un scor AFS total între 0 și 8. Țesutul cu scoruri agonice de 0 sau 1 reflectă probe de bună calitate; datele demografice ale cazului sunt date în Tabelul 1. Calitatea remarcabilă a țesuturilor a fost confirmată de valori ridicate ale RIN. Cazurile au fost supuse unei disecții standard înainte de înghețarea rapidă în izopentan -40 ° C și depozitare la -80 ° C; o disecție suplimentară a NAc a fost efectuată pe țesutul înghețat. Consiliul de revizuire instituțională UT Southwestern a analizat și a aprobat colectarea acestui țesut pentru utilizare în cercetare. A fost efectuat un interviu direct cu informatori pentru fiecare caz de depresie la o dată ulterioară, unde au fost documentate informații cu privire la boala cazului; un diagnostic consensual al tulburării depresive majore a fost făcut folosind criteriile DSM-IV de către doi psihiatri de cercetare. Niciunul dintre cazurile incluse în acest studiu nu a avut teste de toxicologie a sângelui pozitive pentru droguri de abuz, alcool sau medicamente eliberate pe bază de rețetă, altele decât antidepresivele. În ciuda tratamentului antidepresiv, toți subiecții au fost deprimați clinic la momentul decesului. Probele de țesut au fost distribuite într-un mod orbit pentru analiză.
Tabelul 1.
Date demografice pentru studiul postmortem uman
Western blotting
Specimenele NAc uman și de șoarece au fost prelucrate așa cum s-a descris anterior (Maze și colab., 2010). Țesutul înghețat a fost sonicat într-un tampon de liză 5 mM HEPES conținând 1% SDS cu inhibitori de protează (Roche) și fosfatază (Sigma). Concentrațiile de proteine au fost determinate prin analiza proteinei Dc (Bio-Rad). Cantități egale de probe de proteine au fost supuse SDS-PAGE și Western blotting. Blocurile Western au fost analizate utilizând un anticorp pentru SRF (1 / 2000, Santa Cruz Biotechnology) sau GAPDH (1 / 1500; Abcam) și au fost apoi scanate și cuantificate utilizând sistemul de imagistică Odyssey (Licor).
Izolarea ARN și PCR cantitativ
Izolarea ARN, PCR cantitativ (qPCR) și analiza datelor au fost realizate așa cum s-a descris anterior (Maze și colab., 2010; Vialou și colab., 2010). Pe scurt, ARN s-a izolat cu reactiv TriZol (Invitrogen) și s-a purificat suplimentar cu kituri RNAeasy de la Qiagen. Toate probele de ARN au fost determinate a avea valori 260 / 280 și 260 / 230 ≥1.8. Transcrierea inversă a fost efectuată utilizând iScript (Bio-Rad). qPCR folosind SYBR verde (Quanta) s-a efectuat cu un sistem PCR Applied Biosystems 7900HT RT cu următorii parametrii de ciclu: 2 min la 95 ° C; 40 cicluri de 95 ° C pentru 15 s, 59 ° C pentru 30 s, 72 ° C pentru 33 s; și încălzirea gradată la 95 ° C pentru a genera curbe de disociere pentru confirmarea produselor PCR unice. Datele au fost analizate prin compararea valorilor C (t) ale stării de tratament (control față de șoareci susceptibili sau rezistenți sau control uman împotriva pacienților deprimați) cu metoda ΔΔC (t) (Tsankova et al., 2006). Primerii ΔFosB qPCR: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT și invers, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
ChIP
Chip a fost realizat așa cum s-a descris mai înainte (Maze și colab., 2010) pe poansoane bilaterale NAc combinate de la șoarecii de control, susceptibili și elastici (14-1 h 24 h după ultima experiență de înfrângere și de la salină și cocaină- animalele tratate 1 h după tratamentul final. Țesutul a fost reticulat în formaldehidă 80%. Fixarea a fost ulterior întreruptă prin aplicarea glicinei, iar țesutul a fost spălat și ținut la -280 ° C până la utilizare. Cromatina cristalizată a fost incubată peste noapte cu un anticorp anti-SRF (Santa Cruz Biotechnology) legat anterior la perle magnetice (Dynabeads M-XNUMX; Invitrogen). După reticulare reversibilă și purificare ADN, legarea SRF la promotorul fosb a fost determinată prin qPCR folosind primeri care se întind pe o regiune a promotorului fosb conținând două situsuri de legare a elementului de răspuns al serului. Plăcuțele SRF s-au îmbogățit în mod semnificativ în comparație cu controlul non-anticorp. Granulele de promotor ale genei fosbice de mina: înainte, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG și invers, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
analize statistice
ANOVA-urile unidirecționale au fost utilizate pentru a compara mijloacele dintre șoareci martori, sensibili și rezilienți în analize biochimice și comportamentale. ANOVA bidirecționale au fost folosite pentru a compara inducția osFosB prin înfrângere socială la șoareci knock-out locali Srf, precum și pentru a compara efectul knock-out Srf în protocoalele învățate de neputință și de sensibilizare locomotorie. Testele t ale studenților au fost folosite pentru a compara mediile în efectul knock-out-ului Srf asupra inducției ΔFosB și între grupurile din țesutul postmortem uman și analiza ChIP de șoarece. Diferențele dintre condițiile experimentale au fost considerate semnificative statistic atunci când p ≤ 0.05.
REZULTATE
Expresia SRF și ΔFosB în depresia umană și șoarecii învinsi social
Pentru a explora un rol potențial pentru SRF în dezvoltarea comportamentelor depresive, am evaluat mai întâi expresia proteinei SRF în NAc a pacienților umani cu depresie post-mortem. Subiecții deprimați au prezentat niveluri SRF reduse semnificativ în NAc comparativ cu controalele potrivite vârstei (t (19) = 1.9; p <0.05) (Fig. 1A). Având în vedere rolul SRF în reglarea expresiei genei timpurii imediate dependente de activitate (Ramanan și colab., 2005), am emis ipoteza că SRF ar putea fi implicat în controlul expresiei osFosB în această regiune a creierului. În sprijinul acestei ipoteze, am observat că nivelurile de ARNm de osfosb au fost, de asemenea, reduse semnificativ în NAc la oamenii deprimați (t (16) = 1.8; p <0.05) (Fig. 1B). Acest lucru este în concordanță cu constatările recente ale nivelurilor scăzute ale proteinei osFosB și în aceste condiții (Vialou și colab., 2010).
Figura 1.
Represia cronică a SRF indusă de stres se corelează cu transcrierea scăzută a osFosB în NAc. A, B, pacienții cu depresie umană Postmortem prezintă niveluri reduse de proteină SRF (n = 10 / grup; A) și expresia ARNm Δfosb în NAc (n = 8 / grup; B). C, Șoarecii supuși stresului de înfrângere socială cronică (10 zile) au fost grupați în subpopulații sensibile și rezistente. D, stresul de înfrângere socială cronică reduce nivelurile de proteine SRF la NAc la șoareci sensibili, dar nu la șoareci rezistenți, comparativ cu controalele efectuate la 24 de ore după testul de interacțiune socială prezentat în C. E, nivelurile de ARNm ΔfosB în NAc sunt nealterate la șoarecii sensibili, dar semnificativ reglată în sus la animale rezistente (n = 7-15 / grup). F, proteina SRF prezintă legare crescută la promotorul genei fosb după stresul de înfrângere socială cronică numai la șoareci rezistenți și nu la șoareci sensibili (n = 5 / grup). Datele afișate sunt exprimate ca medie ± SEM (reprezentată ca bare de eroare). Con., Control; Dep., Deprimat; Sus., Susceptibil; Rezistent, rezistent. * p <0.05 versus control; *** p <0.001 versus control; #p <0.05 versus susceptibil; ## p <0.01 versus susceptibil; ### p <0.001 față de susceptibil.
Pentru a extinde aceste constatări, am folosit protocolul de stres social înfrângere cronică la șoareci. Două grupuri distincte de șoareci învinși, sensibili și rezistenți, au fost evidente (Krishnan și colab., 2007) pe baza unei măsuri de evitare socială, în care animalele sensibile au prezentat o interacțiune socială redusă semnificativ în comparație cu animalele de control și cele rezistente (F (2,23, 157.2) = 0.001; p <0.001; teste t cu o corecție Bonferroni, susceptibil vs control, p <0.05; rezilient vs control, p <0.01; rezilient vs susceptibil, p <1) (Fig. 2,32C). La două zile după ultimul episod de înfrângere, șoarecii de control susceptibili, rezistenți și nedepăși au fost analizați pentru exprimarea SRF în NAc. Similar cu descoperirile din depresia umană, nivelurile de proteine SRF au fost semnificativ reduse în NAc de șoareci sensibili comparativ cu martorii, în timp ce nivelurile de SRF nu au fost afectate în NAc de șoareci rezistenți (F (4.7) = 0.05; p <0.05; teste t cu un Corecția Bonferroni, susceptibil vs control, p <0.05; rezilient vs susceptibil, p <1) (Fig. XNUMXD).
Apoi, am examinat expresia ARNm Δfosb în NAc a acestor trei grupuri de animale și am observat o creștere semnificativă a expresiei Δfosb doar la animalele rezistente, cu o tendință, dar fără o creștere semnificativă observată la șoarecii sensibili (t (14) = 2.1; p <0.05 ) (Fig. 1E). Pentru a investiga în continuare posibilele interacțiuni dintre nivelurile SRF și transcripția Δfosb, am folosit ChIP pentru a examina dacă legarea SRF la promotorul genei fosb a fost modificată după stresul de înfrângere socială cronică în cohorte separate de șoareci sensibili și rezilienți. Animalele rezistente au prezentat legarea SRF îmbunătățită semnificativ la promotorul fosb în NAc comparativ cu martorii (t (8) = 2.1; p <0.05), precum și în comparație cu șoarecii sensibili (t (8) = 2.0; p <0.05). Nu s-a observat nicio diferență între martori și șoareci sensibili, reflectând probabil lipsa inducerii SRF la șoareci sensibili (Fig. 1F).
Pentru a confirma rolul SRF în reglarea osFosB după stresul de înfrângere socială cronică, șoarecii Srffl / fl au fost folosiți pentru a examina efectul unei ștergeri selective a SRF din NAc asupra inducerii stresului a osFosB. Șoarecii Srffl / fl au fost injectați stereotaxic intra-NAc cu vectori AAV care exprimă GFP sau Cre-GFP. Un knock-out specific al NAc al SRF indus de AAV-Cre-GFP a fost confirmat imunohistochimic (Fig. 2A). Într-adevăr, nu a existat nicio suprapunere între colorarea SRF și expresia Cre, demonstrând eficacitatea knock-out-ului. În pumnii NAc microdisecți, am detectat o scădere semnificativă cu 50% a nivelurilor de proteine SRF (t (11) = 4.3; p <0.001). Mărimea reflectă probabil faptul că o fracțiune de țesut în astfel de microdisecții nu este infectată viral.
Figura 2.
SRF mediază inducerea ΔFosB prin stresul înfrângerii sociale cronice. A, Injecția AAV-Cre-GFP în NAc a șoarecilor Srffl / fl are ca rezultat eliminarea proteinei SRF în neuronii care exprimă Cre. Injectarea AAV-GFP a fost fără efect distinct. B, O astfel de eliminare selectivă a SRF de la NAc blochează complet inducerea osFosB în NAc după stresul de înfrângere socială cronică (n = 4 / grup). Datele afișate sunt exprimate ca medie ± SEM (reprezentată ca bare de eroare). * p <0.05 comparativ cu controlul AAV-GFP; ** p <0.01 comparativ cu înfrângerea AAV-GFP.
Apoi am efectuat imunohistochimie cantitativă pentru ΔFosB în NAc de șoareci înfrânți Srffl / fl injectați intra-NAc fie cu AAV-Cre-GFP, fie cu AAV-GFP. După stresul de înfrângere socială cronică, expresia ΔFosB a fost indusă în mod semnificativ în NAc de animale injectate cu AAV-GFP (interacțiune virus × tratament, F (1,12) = 6.4; teste t cu corecție Bonferroni, control vs înfrângere, p <0.05; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01). Cu toate acestea, această inducție nu a fost observată la șoarecii Srffl / fl care au primit AAV-Cre-GFP (Fig. 2B), demonstrând că inducerea ΔFosB în NAc prin stres cronic necesită SRF.
Declinarea SRF în NAc promovează fenotipurile de tip "prodepression" și "proanxiety"
Deoarece s-a demonstrat anterior că inducerea ΔFosB prin stresul social înfrângere cronică mediază rezistența (Vialou și colab., 2010), am emis ipoteza că reglarea descendentă a SRF și pierderea rezultată a inducției ΔFosB, la animalele sensibile, poate reprezenta o adaptare negativă care, în cele din urmă, face ca animale mai vulnerabile la efectele dăunătoare ale stresului. Pentru a testa această ipoteză, am indus o ștergere locală specifică NAc a genei Srf la șoareci adulți Srffl / fl, așa cum este descris mai sus, iar șoarecii rezultați și controalele lor au fost testați într-o baterie de paradigme comportamentale pentru a evalua depresia și anxietatea de bază ca un comportament. Ștergerea locală a NAc a SRF a promovat un efect asemănător prodepresiunii măsurat prin testul de înot forțat (t (30) = 2.5; p <0.05), precum și un efect anxiogenic măsurat în câmp deschis (t (38) = 1.9; p <0.05) și teste de lumină / întuneric (t (8) = 1.9; p <0.05). Astfel, șoarecii Srffl / fl care primesc AAV-Cre-GFP în NAc au prezentat o latență scăzută la imobilitate în testul de înot forțat, mai puțin timp în centrul unui câmp deschis și mai puțin timp în compartimentul luminos al unei cutii de lumină / întuneric comparativ cu animalele injectate cu AAV-GFP (Fig. 3A-C). Cu toate acestea, ștergerea intra-NAc a SRF nu a modificat nivelurile inițiale de locomoție, sugerând că efectele comportamentale observate la animalele knock-out ale SRF nu s-au datorat anomaliilor în activitatea locomotorie generală (Fig. 3D). Aceste date sunt interesante în lumina rapoartelor anterioare care sugerează că, deși ΔFosB în NAc reglează comportamentele depresive, nu pare a fi implicat în răspunsurile legate de anxietate (Vialou și colab., 2010). Descoperirile noastre actuale conform cărora pierderea SRF induce răspunsuri anxiogene sugerează că o face prin alte ținte decât ΔFosB.
Figura 3.
Knock-out-ul SRF de la NAc promovează fenotipuri asemănătoare prodepresiunii și proanxietății. A – C, eliminarea selectivă a SRF din NAc, realizată prin injecție AAV-Cre-GFP în NAc a șoarecilor Srffl / fl, reduce latența la imobilitate în testul de înot forțat (n = 14-18 / grup; A) și reduce timpul petrecut în centru și timpul petrecut în compartimentul luminos în câmpul deschis (B) și testele de lumină / întuneric (C), respectiv (n = 5-15 / grup). D, Nu s-a observat nicio diferență în activitatea locomotorie bazală în câmpul deschis al șoarecilor care au primit injecții intra-NAc de AAV-GFP sau AAV-Cre-GFP. E, F, susceptibilitate crescută la neajutorarea învățată (n = 7-8 / grup; E) și stresul de înfrângere socială (n = 5-6 / grup; F), măsurat, respectiv, de latența de evadare și timpul de interacțiune socială . Datele afișate sunt exprimate ca medie ± SEM (reprezentată ca bare de eroare). * p <0.05 versus GFP sau versus țintă absentă; ** p <0.01 versus GFP; *** p <0.001 față de GFP.
Am studiat apoi dacă ștergerea SRF în NAc crește, de asemenea, vulnerabilitatea unui animal la efectele dăunătoare ale stresului repetat. Șoarecii Srffl / fl, injectați fie cu AAV-Cre-GFP, fie cu AAV-GFP în NAc, au fost examinați în două modele de depresie, au învățat neajutorare și stres de înfrângere socială cronică. În neajutorarea învățată, animalele Srffl / fl care primeau AAV-Cre-GFP au prezentat o latență crescută pentru a scăpa de un șoc la nivelul piciorului, după expunerea anterioară la stresul de șoc al piciorului inevitabil (interacțiunea tratamentului × testelor, F (14,180) = 10.2; testele t cu o corecție Bonferroni, p <0.001; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01), indicând o susceptibilitate crescută la deficite comportamentale induse de stres (Fig. 3E). În mod similar, ștergerea locală a SRF din NAc a crescut și aversiunea socială (t (10) = 1.8; p <0.05) în comparație cu animalele de control injectate cu AAV-GFP după stresul de înfrângere socială cronică (Fig. 3F), un efect asemănător prodepresiunii.
Lipsa implicării SRF în inducția ΔFosB și răspunsurile comportamentale la cocaină
Având în vedere că ΔFosB este indus și în NAc ca răspuns la droguri de abuz, cum ar fi cocaina, a fost de interes să se examineze un rol potențial al SRF în acțiunea asupra cocainei. Spre deosebire de stresul de înfrângere socială cronică, expunerea repetată la cocaină nu a modificat expresia proteinei SRF în NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Fig. 4A) și nu a avut niciun efect asupra legării SRF la promotorul genei fosB în această regiune a creierului (t (4) = 0.7; p> 0.05) (Fig. 4B). Acest lucru sugerează că, contrar stresului, inducerea osFosB după cocaină cronică nu este mediată prin SRF. Am testat acest lucru direct examinând dacă acumularea ΔFosB după cocaină cronică este modificată la animalele Srffl / fl care primesc AAV-Cre-GFP versus AAV-GFP în NAc. Am constatat că ștergerea SRF nu a avut niciun efect asupra acumulării de osFosB indusă de cocaină în această regiune a creierului (Fig. 4C).
Figura 4.
Pierderea SRF nu a avut niciun efect asupra inducției cocainei asupra comportamentelor reglementate de DFosB sau de cocaină. A, B, expunerea repetată la cocaină (7 d, 20 mg / kg cocaină-HCI) nu a avut niciun efect asupra expresiei proteinei SRF în NAc (A) sau asupra legării SRF la promotorul genei fosB din această regiune a creierului (B) 24 h după expunerea la medicament (n = 5 / grup). C, acumularea ΔFosB, măsurată imunocitochimic, ca urmare a expunerii cocainice cronice, nu este afectată de scăderea specifică a NAF a SRF. D, E, ștergerea locală a SRF de la NAc nu a avut, de asemenea, niciun efect asupra activității locomotorii după o injecție salină (d 1) asupra activității locomotorii induse de cocaină și sensibilizării (n = 8 / grup) (d 1-7; pe preferința locului condiționat pentru cocaină (n = 8 / grup; E). Datele afișate sunt exprimate ca medie ± SEM (reprezentate ca bare de eroare).
Pentru a urmări această descoperire surprinzătoare, am investigat dacă un knock-out selectiv SRF de la NAc modifică răspunsurile comportamentale la cocaină. În concordanță cu lipsa de reglementare a SRF a inducției ΔFosB de către cocaină, eliminarea specifică a NAc a SRF nu a avut niciun efect asupra activității locomotorii induse de cocaină acută sau de sensibilizare locomotorie observată după expuneri repetate la cocaină (tratament × interacțiune în timp, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Fig. 4D). De asemenea, knock-out-ul specific NAc al SRF nu a avut niciun efect asupra preferinței locului condiționat de cocaină (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Fig. 4E), care oferă o măsură indirectă a recompensei de cocaină.
Discuție
Acest studiu a identificat SRF ca un mediator nou în amonte al ΔFosB în NAc după stresul social al înfrângerii sociale și implică SRF în dezvoltarea comportamentelor depresive și de anxietate. Oferim dovezi directe că stresul cronic de înfrângere socială scade nivelul de SRF în NAc al animalelor susceptibile, dar nu reziduale, și că această reglare în jos împiedică inducerea ΔFosB în această regiune a creierului, ceea ce am demonstrat că este necesară pentru a face față eficient stresului cronic, adică rezistența (Vialou și colab., 2010). O reducere similară a expresiei SRF a fost găsită în NAc a oamenilor deprimați, unde expresia ARN mRNA și expresia proteinei a fost, de asemenea, redusă. În contrast, nivelele ΔFosB nu au fost reduse în NAc al șoarecilor susceptibili, în ciuda unei reglaje în jos a SRF, care implică alte mecanisme transcripționale, încă necunoscute, în controlul expresiei ΔFosB. Un rol cauzal pentru SRF în medierea inducției ΔFosB în NAc după stres cronic a fost stabilit prin utilizarea ștergerii genetice inductibile a SRF din această regiune a creierului. Analiza comportamentală a șoarecilor cu acest SRC knock-out specific NAc implică în continuare SRF ca jucând un rol-cheie în dezvoltarea comportamentului de depresie și de anxietate indus de stare și de stres. În contrast izbitor, ștergerea SRF nu a avut niciun efect asupra inducerii ΔFosB ca răspuns la administrarea cocainei cronice sau asupra efectelor comportamentale ale cocainei. Aceste constatări susțin un rol specific stimulului specific SRF în reglarea inducerii ΔFosB și a răspunsurilor comportamentale la perturbări de mediu distincte.
Transcripția mediată de SRF a demonstrat anterior că răspunde la activitatea sinaptică, declanșată în mare măsură de creșterea influxului de calciu, precum și de intensificarea activității neurotrofice, în special în cazul factorului neurotrofic derivat din creier (BADNF) (Bading și colab., 1993; Xia și alții, 1996, Johnson și colab., 1997, Chang și alții, 2004, Kalita și colab., 2006, Knöll și Nordheim, 2009). Acest lucru ridică întrebarea interesantă despre motivul pentru care SRF este scăzută în NAc de șoareci susceptibili, dar nu rezilienți, după stresul social înfrângerea socială. Această reglementare diferențială nu este probabil mediată de semnalizarea dopaminei sau BDNF, deoarece șoarecii susceptibili afișează niveluri de proteină BDNF crescute și semnalarea BDNF în aval în NAc, precum și arderea spontană a neuronilor dopaminergici din zona tegmentală ventrală (VTA), care inervază NAc, în timp ce animalele rezistente afișează niveluri normale de semnalizare BDNF și rate de ardere VTA (Krishnan și colab., 2007). O posibilitate alternativă este ca expresia SRF să fie suprimată în NAc ca răspuns la inervația glutamatergică modificată a acestei regiuni cerebrale, ceea ce am arătat că este diferențiată în șoarecii susceptibili față de șoarecii rezistenți (Vialou și colab., 2010). Sunt necesare lucrări suplimentare pentru a studia în mod direct acest mecanism și alte mecanisme posibile.
Studii recente care utilizează metode la nivel de genom și alte metode sugerează că genele țintă imediate în genele neuronilor sunt 5-10% din genele timpurii imediate (Philippar și colab., 2004, Ramanan și colab., 2005, Etkin și colab., 2006, Knöll și Nordheim, 2009). Acest lucru este în concordanță cu datele noastre care demonstrează un rol critic pentru SRF în inducerea ΔFosB, un produs trunchiat al genei fosb imediate timpuriu, prin stres cronic. Interesant, numeroasele gene țintă SRF identificate în aceste studii diferite reprezintă, de asemenea, ținte cunoscute ale ΔFosB în NAc (Kumar și colab., 2005, Renthal și colab., 2008, 2009, Maze și colab., 2010). Printre aceste gene reglementate frecvent sunt câteva care sunt cunoscute pentru a regla citoscheletul neuronal (de exemplu, Cdk5, Arc și Actb). Acest lucru, la rândul său, este în concordanță cu rapoartele conform cărora SRF influențează dinamica actinică și motilitatea neuronală în mai multe tipuri de celule neuronale (Alberti și colab., 2005, Ramanan și colab., 2005, Knöll și alții, 2006), în timp ce ΔFosB este cunoscut afectează evoluția coloanei vertebrale dendritice a neuronilor NAc (Maze și colab., 2010). Astfel de obiective funcționale comune pot reflecta efectele concertate ale SRF, combinate cu inducerea ΔFosB, care acționează asupra unei serii de gene țintă comune pentru a influența morfologia neuronală și, în cele din urmă, comportamentul complex.
SRF a fost, de asemenea, demonstrat că joacă roluri importante în reglarea plasticității sinaptice și a activității neuronale dependentă de exprimarea și comportamentul genei. De exemplu, pierderea inducției dependente de SRF a genelor timpurii imediate ca răspuns fie la explorarea voluntară a unui mediu nou, fie la activarea neuronală prin convulsii electroconvulsive a fost asociată cu potențarea sinaptică pe termen lung în hipocampul mutanților Srf (Ramanan și colab. , 2005, Etkin și colab., 2006). Mai mult, sa demonstrat că epuizarea SRF în hipocampus cauzează deficiențe în depresia sinaptică pe termen lung, expresia genetică imediată imediată indusă de un context nou și habitatele afectate în timpul explorării unui mediu nou (Etkin și colab., 2006). Aceste date stabilesc importanța SRF în capacitatea unui animal de a se adapta în mod adecvat la perturbațiile mediului, ca în cazul menționat anterior de a învăța să se obișnuiască cu un mediu nou sau, în cazul adaptării la stimuli stresivi negativi, pentru a preveni promulgarea stresului. -deficitele comportamentale induse, ca în studiul nostru actual. Astfel, observăm că animalele care prezintă deficite în expresia SRF, fie ca răspuns la stresul de înfrângere socială la indivizii susceptibili, fie prin eliminarea directă a SRF, prezintă comportamente depresive și anxioase crescute. Având în vedere că subiecții umani deprimați prezintă, de asemenea, niveluri scăzute de SRF în NAc, este de conceput că SRF joacă un rol fundamental în reglarea capacității individului de a se adapta pozitiv la stimulii de mediu negativi, parțial prin reglarea expresiei osFosB în NAc.
MECANISME DE DIFUZARE: REZISTENȚA DE STRĂTĂȚI CU ADEVĂRAREA VS
O constatare surprinzătoare a studiului prezent este că, deși SRF este necesar pentru acumularea ΔFosB în NAc ca răspuns la stresul cronic, nu este necesară inducerea ΔFosB în aceeași regiune a creierului ca răspuns la cocaina cronică. De asemenea, SRF nu este necesară pentru răspunsurile comportamentale normale la medicament. Aceste date arată că, în ciuda faptului că ΔFosB este indus în NAc ca răspuns la multe tipuri de stimuli (Nestler și colab., 1999, Nestler, 2008), se pare că există căi moleculare distincte care conduc la inducerea ΔFosB. O posibilă explicație pentru aceste constatări sunt tipurile de celule parțial diferite care prezintă acumularea ΔFosB ca răspuns la stres față de cocaină. Stresul cronic induce DFosB aproximativ în mod egal în cele două subpopulații majore ale neuronilor SPC medii spinați, cei care exprimă predominant receptorii D1 față de D2 dopaminergici, în timp ce cocaină cronică induce DFosB predominant în neuronii D1 + (Kelz și colab., 1999, Perrotti și colab., 2004) . Astfel, este posibil ca căile dependente de SRF să fie importante pentru inducerea ΔFosB în neuronii D2 +. Totuși, acest lucru nu ar explica pierderea completă a inducerii ΔFosB la șoarecii cu șoareci SRF după stresul cronic, deoarece inducerea are loc în ambele subtipuri neuronale. O explicație alternativă este că stresul cronic și cocainele cronice afectează cascade distincte de semnalizare intracelulare, în virtutea modurilor lor diferite de acțiune asupra neuronilor NAc, cu stres cronic care poate funcționa prin transmisia glutamatergică modificată, după cum sa menționat anterior, și cocaină cronică care funcționează în principal prin D1 receptorul de semnalizare (Nestler, 2008). O altă posibilitate este că inducerea ΔFosB prin stres cronic față de cocaină cronică este dependentă de mecanisme transcripționale distincte care sunt controlate diferențiat prin intrări neurale distincte inervând NAc din diferite regiuni de proiecție glutamatergică, de exemplu, câteva regiuni ale cortexului prefrontal, hipocampusului și amigdalei. Sunt necesare multe lucrări suplimentare pentru a explora aceste posibilități și alternative.
Împreună, descoperirile noastre identifică un nou mecanism transcripțional prin care ΔFosB este indus în NAc pentru a media reacțiile de proreziune la stimulii stresanți. Acest studiu oferă, de asemenea, o nouă perspectivă importantă asupra rolului jucat de SRF la nivelul NAc în reglementarea comportamentelor depresive și de tip anxietate. Obținerea unei mai bune înțelegeri a rolului transcripțional al SRF în reglarea unor astfel de comportamente va ajuta la identificarea unor ținte genetice noi implicate în rezistența la tulburările legate de stres și poate facilita dezvoltarea viitoare a terapiilor antidepresive mai eficiente.
Acest lucru a fost sustinut de subventii de la Institutul National de Sanatate Mintala si Institutul National pentru Abuzul de droguri si de o alianta de cercetare cu AstraZeneca. Îi mulțumim lui David D. Ginty pentru oferirea serviciului de asistență medicală.
Corespondența trebuie adresată lui Eric J. Nestler, Departamentul de Neuroștiințe din Fishberg, Scoala de Medicină din Muntele Sinai, Unu Gustave L. Levy Place, Box 1065, New York, NY 10029-6574. [e-mail protejat]
Copyright © 2010 autorii 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
Referinte
1. ↵
1. Alberti S,
2. Krause SM,
3. Kretz O,
4. Philippar U,
5. Lemberger T,
6. Casanova E,
7. Wiebel FF,
8. Schwarz H,
9. Frotscher M,
10. Schütz G,
11. Nordheim A
(2005) Migrația neuronală în fluxul de migrație a minelei rostrale necesită factor de răspuns seric. Proc Natl Acad Sci Statele Unite ale Americii 102: 6148-6153.
Rezumat / Text complet gratuit
2. ↵
1. Bading H,
2. Ginty DD,
3. Greenberg ME
(1993) Reglarea exprimării genelor în neuronii hipocampali prin căi distincte de semnalizare a calciului. Știință 260: 181-186.
Rezumat / Text complet gratuit
3. ↵
1. Berton O,
2. McClung CA,
3. Dileone RJ,
4. Krishnan V,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Graham D,
8. Tsankova NM,
9. Bolanos CA,
10. Rios M,
11. Monteggia LM,
12. Auto DW,
13. Nestler EJ
(2006b) Rolul esențial al BDNF în calea mezolimbică a dopaminei în stresul social înfrânt. Știință 311: 864-868.
Rezumat / Text complet gratuit
4. ↵
1. Berton O,
2. Covington HE 3rd.,
3. Ebner K,
4. Tsankova NM,
5. Carle TL,
6. Ulery P,
7. Bhonsle A,
8. Barrot M,
9. Krishnan V,
10. Singewald GM,
11. Singewald N,
12. Birnbaum S,
13. Neve RL,
14. Nestler EJ
(2007) Inducerea ΔFosB în gri periaqueductal prin stres promovează răspunsuri active de coping. Neuron 55: 289-300.
CrossRefMedline
5. ↵
1. Chang SH,
2. Poser S,
3. Xia Z
(2004) Un rol nou pentru factorul de răspuns al serului în supraviețuirea neuronală. J Neurosci 24: 2277-2285.
Rezumat / Text complet gratuit
6. ↵
1. Etkin A,
2. Alarcón JM,
3. Weisberg SP,
4. Touzani K,
5. Huang YY,
6. Nordheim A,
7. Kandel ER
(2006) Un rol în procesul de învățare pentru SRF: ștergerea în creierul adult adult perturbă LTD și formarea unei amintiri imediate a unui context nou. Neuron 50: 127-143.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Heinze HJ,
2. Heldmann M,
3. Voges J,
4. Hinrichs H,
5. Marco-Pallares J,
6. Hopf JM,
7. Müller UJ,
8. Galazky I,
9. Sturm V,
10. Bogerts B,
11. Münte TF
(2009) Combaterea sensibilizării stimulentelor în dependența severă de alcool prin stimularea creierului adânc al nucleului accumbens: aspecte clinice și științifice de bază. Frontul Hum Neurosci 3: 22.
Medline
8. ↵
1. Johnson CM,
2. Hill CS,
3. Chawla S,
4. Treisman R,
5. Bading H
(1997) Calciul controlează expresia genei prin intermediul a trei căi distincte care pot funcționa independent de cascada de semnalizare a proteinelor kinazelor activate de Ras / mitogen. J Neurosci 17: 6189-6202.
Rezumat / Text complet gratuit
9. ↵
1. Kalita K,
2. Kharebava G,
3. Zheng JJ,
4. Hetman M
(2006) Rolul leucemiei acute megakaryoblastice-1 în stimularea dependentă de ERK1 / 2 dependentă de transcripția factorului de răspuns al serului prin BDNF sau creșterea activității sinaptice. J Neurosci 26: 10020-10032.
Rezumat / Text complet gratuit
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Auto DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Exprimarea factorului de transcripție ΔFosB în creier controlează sensibilitatea la cocaină. Natura 401: 272-276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Knöll B,
2. Nordheim A
(2009) Versatilitatea funcțională a factorilor de transcripție în sistemul nervos: paradigma SRF. Tendințe Neurosci 32: 432-442.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Knöll B,
2. Kretz O,
3. Fiedler C,
4. Alberti S,
5. Schütz G,
6. Frotscher M,
7. Nordheim A
(2006) Factorul de răspuns al serului controlează asamblarea circuitului neuronal în hipocamp. Nat Neurosci 9: 195-204.
CrossRefMedline
13. ↵
1. Krishnan V,
2. Han MH,
3. Graham DL,
4. Berton O,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Laplant Q,
8. Graham A,
9. Lutter M,
10. Lagace DC,
11. Ghose S,
12. Reister R,
13. Tannous P,
14. Green TA,
15. Neve RL,
16. Chakravarty S,
17. Kumar A,
18. Eisch AJ,
19. Auto DW,
20. Lee FS,
21. și colab.
(2007) Adaptări moleculare care stau la baza susceptibilității și rezistenței la înfrângerea socială în regiunile de recompensare a creierului. Celula 131: 391-404.
CrossRefMedline
14. ↵
1. Kuhn J,
2. Bauer R,
3. Pohl S,
4. Lenartz D,
5. Huff W,
6. Kim EH,
7. Klosterkoetter J,
8. Sturm V
(2009) Observații privind renunțarea la fumat fără stimulare după stimularea cerebrală adâncă a nucleului accumbens. Eur Addict Res 15: 196-201.
CrossRefMedline
15. ↵
1. Kumar A,
2. Choi KH,
3. Renthal W,
4. Tsankova NM,
5. Theobald DE,
6. Truong HT,
7. Russo SJ,
8. Laplant Q,
9. Sasaki TS,
10. Whistler KN,
11. Neve RL,
12. Auto DW,
13. Nestler EJ
(2005) Remodelarea cromatinei este un mecanism cheie care stă la baza plasticității induse de cocaină în striatum. Neuron 48: 303-314.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Labirintul I,
2. Covington HE 3rd.,
3. Dietz DM,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Mecanic M,
8. Mouzon E,
9. Neve RL,
10. Haggarty SJ,
11. Ren Y,
12. Sampath SC,
13. Hurd YL,
14. Greengard P,
15. Tarakhovsky A,
16. Schaefer A,
17. Nestler EJ
(2010) Rolul esențial al histonmetiltransferazei G9a în plasticitatea indusă de cocaină. Știință 327: 213-216.
Rezumat / Text complet gratuit
17. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: un comutator molecular pentru adaptare pe termen lung în creier. Brain Res Mol creier Res 132: 146-154.
Medline
18. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Mecanisme transcripționale ale dependenței: rolul deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci 363: 3245-3255.
Rezumat / Text complet gratuit
19. ↵
1. Nestler EJ,
2. Carlezon WA Jr.
(2006) Circuitul mesolimbic de recompensă a dopaminei în depresie. Psihiatrie biologică 59: 1151-1159.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Nestler EJ,
2. Kelz MB,
3. Chen J
(1999) ΔFosB: un mediator molecular al plasticității neuronale și comportamentale pe termen lung. Brain Res 835: 10-17.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Newton SS,
2. Thome J,
3. Wallace TL,
4. Shirayama Y,
5. Schlesinger L,
6. Sakai N,
7. Chen J,
8. Neve R,
9. Nestler EJ,
10. Duman RS
(2002) Inhibarea proteinei de legare a elementului de răspuns cAMP sau a dynorfinului în nucleul accumbens produce un efect antidepresiv. J Neurosci 22: 10883-10890.
Rezumat / Text complet gratuit
22. ↵
1. Nikulina EM,
2. Arrillaga-Romani I,
3. Miczek KA,
4. Hammer RP Jr.
(2008) Modificări de lungă durată în structurile mezocorticolimbice după stresul de reprimare socială repetată la șobolani: durata de timp a ARNm receptorului mu-opioid și a imunoreactivității FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci 27: 2272-2284.
CrossRefMedline
23. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Inducerea ΔFosB în structurile cerebrale legate de recompense după stresul cronic. J Neurosci 24: 10594-10602.
Rezumat / Text complet gratuit
24. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal W,
5. Labirintul I,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. Knapp DJ,
9. Selley DE,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. Auto DW,
14. Nestler EJ
(2008) Modele distincte de inducere a DeltaFosB în creier prin medicamente de abuz. Synapse 62: 358-369.
CrossRefMedline
25. ↵
1. Philippar U,
2. Schratt G,
3. Dieterich C,
4. Müller JM,
5. Galgóczy P,
6. Engel FB,
7. Keating MT,
8. Gertler F,
9. Schüle R,
10. Vingron M,
11. Nordheim A
(2004) Gena țintă SRF Fhl2 antagonizează activarea dependentă de RhoA / MAL a SRF. Mol Cell 16: 867-880.
CrossRefMedline
26. ↵
1. Ramanan N,
2. Shen Y,
3. Sarsfield S,
4. Lemberger T,
5. Schütz G,
6. Linden DJ,
7. Ginty DD
(2005) SRF mediază expresia genei indusă de activitate și plasticitatea sinaptică, dar nu și viabilitatea neuronală. Nat Neurosci 8: 759-767.
CrossRefMedline
27. ↵
1. Renthal W,
2. Carle TL,
3. Labirintul I,
4. Covington HE 3rd.,
5. Truong HT,
6. Alibhai I,
7. Kumar A,
8. Montgomery RL,
9. Olson EN,
10. Nestler EJ
(2008) Delta FosB mediază desensibilizarea epigenetică a genei c-fos după expunerea cronică la amfetamină. J Neurosci 28: 7344-7349.
Rezumat / Text complet gratuit
28. ↵
1. Renthal W,
2. Kumar A,
3. Xiao G,
4. Wilkinson M,
5. Covington HE 3rd.,
6. Labirintul I,
7. Sikder D,
8. Robison AJ,
9. LaPlant Q,
10. Dietz DM,
11. Russo SJ,
12. Vialou V,
13. Chakravarty S,
14. Kodadek TJ,
15. Stack A,
16. Kabbaj M,
17. Nestler EJ
(2009) Analiza genomului asupra controlului cromatinei de către cocaină relevă un rol pentru sirtuine. Neuron 62: 335-348.
CrossRefMedline
29. ↵
1. Schlaepfer TE,
2. Cohen MX,
3. Frick C,
4. Kosel M,
5. Brodesser D,
6. Axmacher N,
7. Joe AY,
8. Kreft M,
9. Lenartz D,
10. Sturm V
(2008) Stimularea profundă a creierului pentru a recompensa circuitele ușurează anhedonia în depresia majoră refractară. Neuropsihopharmacologie 33: 368-377.
CrossRefMedline
30. ↵
1. Sesack SR,
2. Grație AA
(2010) Rețea de recompensă cortico-bazală: microcircuit. Neuropsihopharmacologie 35: 27-47.
CrossRefMedline
31. ↵
1. Tomita H,
2. Vawter MP,
3. Walsh DM,
4. Evans SJ,
5. Choudary PV,
6. Li J,
7. Overman KM,
8. Atz ME,
9. Myers RM,
10. Jones EG,
11. Watson SJ,
12. Akil H,
13. Bunney WE Jr.
(2004) Efectul factorilor agonali și postmortem asupra profilului expresiei genei: controlul calității în analizele microarray sau creierul uman postmortem. Biol Psihiatrie 55: 346-352.
CrossRefMedline
32. ↵
1. Tsankova NM,
2. Berton O,
3. Renthal W,
4. Kumar A,
5. Neve RL,
6. Nestler EJ
(2006) Reglarea cromatinei hipocampice susținută într-un model de șoareci de depresie și acțiune antidepresivă. Nat Neurosci 9: 519-525.
CrossRefMedline
33. ↵
1. Vassoler FM,
2. Schmidt HD,
3. Gerard ME,
4. Celebrul KR,
5. Ciraulo DA,
6. Kornetsky C,
7. Knapp CM,
8. Pierce RC
(2008) Stimularea cerebrală profundă a cochiliei nucleului accumbens atenuează reintegrarea indusă de cocaină prin stimularea consumului de droguri la șobolani. J Neurosci 28: 8735-8739.
Rezumat / Text complet gratuit
34. ↵
1. Vialou V,
2. Robison AJ,
3. Laplant QC,
4. Covington HE 3rd.,
5. Dietz DM,
6. Ohnishi YN,
7. Mouzon E,
8. Rush AJ 3rd.,
9. Watts EL,
10. Wallace DL,
11. Iñiguez SD,
12. Ohnishi YH,
13. Steiner MA,
14. Warren BL,
15. Krishnan V,
16. Bolaños CA,
17. Neve RL,
18. Ghose S,
19. Berton O,
20. Tamminga CA,
21. Nestler EJ
(2010) ΔFosB în circuitele de recompensare a creierului mediază rezistența la stres și răspunsurile antidepresive. Nat Neurosci 13: 745-752.
CrossRefMedline
35. ↵
1. Wilkinson MB,
2. Xiao G,
3. Kumar A,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Sikder D,
7. Kodadek TJ,
8. Nestler EJ
(2009) Tratamentul cu imipramină și elasticitatea prezintă o reglare asemănătoare a cromatinei într-o regiune de recompensare a creierului. J Neurosci 29: 7820-7832.
Rezumat / Text complet gratuit
36. ↵
1. Xia Z,
2. Dudek H,
3. Miranti CK,
4. Greenberg ME
(1996) Influxul de calciu prin receptorul NMDA induce transcripția genetică imediată imediată printr-un mecanism MAP kinază / ERK dependent. J Neurosci 16: 5425-5436.
Rezumat / Text complet gratuit
;