Receptorii androgeni cu membrană pot să medieze armarea androgenului. (2010)

Psychoneuroendocrinology. 2010 Aug; 35 (7): 1063-73. Epub 2010 Feb 6.

Sato SM, Johansen JA, Iordania CL, Lemn RI.

Sursă

Departamentul de celule și neurobiologie, Școala de medicină Keck, Universitatea din California de Sud, Los Angeles, CA 90033, SUA.

Abstract

Analfabetismul steroizi anabolico-androgen (AAS) este larg răspândit. Mai mult, AAS sunt consolidate, după cum se arată prin autoadministrarea la rozătoare. Cu toate acestea, receptorii care transduc efectele de întărire ale AAS sunt neclare. AAS se poate lega de receptorii clasici de androgen nuclear (AR) sau receptorii membranari. Am folosit două abordări pentru a examina rolul AR-urilor nucleare în administrarea AAS. În primul rând, am testat auto-administrarea androgenilor la șobolani cu mutația testiculară de feminizare (Tfm), care interferează cu legarea androgenului. În cazul în care AR sunt nucleare esențiale pentru AAS autoadministrarea, bărbații Tfm nu trebuie să se autoadministeze androgeni. Tfm masculii și cei de tip sălbatic (WT) au administrat de la sine dihidrotestosteronul (DHT) și vehiculul intracerebroventricular (ICV), care nu au aromatizat, la scule fixe (FR) până la FR5. Ambii șobolani Tfm și WT au dobândit o preferință pentru nasul activ în timpul auto-administrării DHT (răspunsurile 66.4 +/- 9.6 / 4 h pentru Tfm și 79.2 +/- 11.5 pentru răspunsurile WT / 4 h), iar nasul-pokes a crescut Cerința FR a crescut. Scorurile de preferință au fost semnificativ mai mici la șobolanii care au auto-administrat (răspunsuri 42.3 +/- 5.3 / 4 h pentru răspunsurile Tfm și 19.1 +/- 4.0 / 4 h pentru WT). De asemenea, am testat autoadministrarea DHT conjugată cu albumină serică bovină (BSA) la C3 și C17, care este limitată la acțiuni la suprafața celulei. Hamsterii au fost lăsați să se auto-administreze DHT, BSA și DHT-BSA conjugate pentru zile 15 la FR1. Hamsterii au arătat o preferință semnificativă pentru conjugatele DHT (18.0 +/- 4.1 răspunsuri / 4 h) sau DHT-BSA (10.0 +/- 3.7 răspunsuri / 4 h și 21.0 +/- 7.2 răspunsuri / 4 h), dar nu pentru BSA (2.5 + Răspunsurile 2.4 / 4 h). Luate împreună, aceste date demonstrează că AR nu sunt necesare pentru administrarea androgenă. Mai mult, administrarea androgenă de sine poate fi mediată de receptorii cu membrană plasmatică.

Drepturi de autor 2010 Elsevier Ltd. Toate drepturile rezervate.

Cuvinte cheie: Steroizi anabolico-androgenici, autoadministrare, receptorul androgen membranar, receptorul androgenic nuclear, mutația feminizării testiculare

Steroizii anabolico-androgenici (AAS) sunt medicamente de abuz. Acești derivați de testosteron (T) sunt utilizați în scopuri atletice și estetice (Yesalis și colab., 1993). Efectele secundare variază de la hipogonadism și ginecomastie până la disfuncție cardiacă și hepatică (Leshner, 2000). În plus, se acumulează dovezi că abuzul de AAS provoacă modificări ale dispoziției (Papa și Katz, 1994), agresivitate (Choi și Pope, 1994, Kouri și colab., 1995) și pot produce dependență (Brower și colab., 1991, Brower, 2002). În ciuda preocupărilor crescânde, mecanismele care stau la baza abuzului de AAS nu au fost bine înțelese.

La om, se susține că inițierea utilizării AAS este în mare măsură motivată de efectele anabolice, dar unii abuzatori dezvoltă în cele din urmă dependență (Brower, 2002). Dovezile provenite din cercetarea pe animale susțin această ipoteză. AAS induce preferința locului condiționat (CPP) la șoareci (Arnedo și colab., 2000) și șobolani (Packard și colab., 1997, Packard și colab., 1998, Frye și colab., 2002). Mai mult, hamsterii consumă voluntar AAS prin administrare orală (Lemn, 2002), intravenos (Wood și colab., 2004) și auto-administrare intracerebroventriculară (ICV) (DiMeo și Wood, 2004, Triemstra și lemn, 2004, Wood și colab., 2004, DiMeo și Wood, 2006b).

În timp ce autoadministrarea ICV sugerează locurile centrale de acțiune, hormonii și receptorii specifici care mediază armarea AAS sunt neclare. Dovezile actuale sugerează că efectele de întărire ale T sunt mediate de androgeni, mai degrabă decât prin estrogenii după aromatizare. Hamsterii masculi vor autoadministra dihidrotestosteronul (DHT; DiMeo și Wood, 2006b) și alți androgeni care nu pot fi aromatizați (Ballard și Wood, 2005). În plus, autoadministrarea T este blocată de flutamida anti-androgen (Peters și Wood, 2004). Întrebarea acum devine: cum este transmis semnalul androgen în creier?

Receptorul androgen (AR) este un receptor clasic de steroizi nucleari care funcționează ca un factor de transcripție. AR sunt rare în structurile asociate cu abuzul de droguri, cum ar fi nucleul accumbens (Acb) și zona tegmentală ventrală (VTA; Simerly și colab., 1990, Lemn și Newman, 1999). Există, de asemenea, dovezi pentru administrarea de steroizi gonadali prin intermediul receptorilor de suprafață celulară (Mermelstein și colab., 1996, Zhu și colab., 2003, Thomas și colab., 2006, Vasudevan și Pfaff, 2007).

În studiul actual, am folosit două abordări pentru a determina rolul AR clasic în armarea androgenului. Pentru a minimiza posibila activare a receptorilor de estrogen (ER), am testat DHT autoadministrarea. În primul experiment, șobolanii cu mutație feminizantă testiculară (Tfm) au fost testați pentru autoadministrarea ICV a DHT. Tfm este o substituție cu o singură bază care are ca rezultat ARs defecte cu legare limitată a ligandului (Yarbrough și colab., 1990). Șobolanii Tfm masculi prezintă un fenotip extern de sex feminin datorită unei stimulente androgene insuficiente în timpul dezvoltării (Zuloaga și colab., 2008b). Dacă AR sunt necesare pentru armarea AAS, șobolanii Tfm nu trebuie să administreze DHT. În schimb, șobolanii Tfm au reușit să dobândească administrarea DHT. În cel de-al doilea experiment, am testat autoadministrarea ICV a formelor de DHT impermeabile la membrană la hamsteri. Atunci când DHT este conjugat cu albumina serică bovină (BSA), acțiunile sale sunt limitate la receptorii de suprafață celulară. Dacă AR sunt necesare pentru armarea cu androgeni, hamsterii nu ar trebui să se autoadministreze DHT conjugat cu BSA. Dimpotrivă, hamsterii au arătat o preferință clară pentru DHT conjugat cu BSA. Împreună, aceste studii arată că AR nu sunt necesare pentru administrarea androgenă. În schimb, armarea androgenă poate fi mediată de membranele AR.

Metode și materiale

Subiecții

şobolanii

Sobolanii Tfm adulți masculi și cei de tip sălbatic (WT) au fost obținuți dintr-o colonie de la Universitatea de Stat din Michigan. Genotipul lor a fost verificat prin PCR, similar metodelor descrise anterior (Fernandez și colab., 2003). Pe scurt, clemele de urechi s-au digerat peste noapte la 55 ° C în tampon de liză care conține proteinaza K, apoi s-au încălzit inactivate la 95 ° timp de minute 30. AR a fost amplificată utilizând primer 5'-GCAACTTGCATGTGGATGA-3 'și primerul invers 5'-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3', obținându-se un produs 135bp. Probele amplificate au fost apoi digerate cu enzima de restricție Sau96I (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) peste noapte la temperatura de 37 ° C și trecute pe un gel de agaroză 3%. Doar WT AR este tăiat cu această enzimă de restricție, lăsând două benzi sub 100bp, în timp ce Tfm AR rămâne netedă. Tfm animalele au fost, de asemenea, verificate prin fenotip, prin prezența mameloanelor, a distanței feminine și genitală și a testiculelor abdominale. Șobolanii Tfm au fost utilizați anterior pentru a demonstra efecte androgene non-genomice în hipocampus (MacLusky și colab., 2006). La începutul experimentului, șobolanii WT au fost între 75 și 140, iar șobolanii Tfm au fost între 75 și 138.

Hamsterii

Adulți de hamsteri sirieni masculi (130 - 150 g) au fost obținuți de la Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Animalele au fost adăpostite singure pe un ciclu de lumină inversă (14L: 10D) cu alimente și apă disponibile ad libitum. Toate procedurile experimentale au fost aprobate de comitetele instituționale de îngrijire a animalelor și de utilizare a instituțiilor respective și desfășurate în conformitate cu directiva Ghid pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator (NationalResearchCouncil, 1996).

Intervenție Chirurgicală

Toate animalele au fost implantate cu canule de ghidare din oțel inoxidabil 22g (Plastic One, Roanoke, VA) în ventriculul lateral [șobolan: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 -5.0Paxinos și Watson, 1998); hamster: AP: + 1.0, ML, + 1.0, DV: -3.0 ~ -5.0 (Morin și Wood, 2001), mm de la bregma], sub Na⁺ anestezia pentobarbitală (șobolan: 50 mg / kg, hamster: 100mg / kg) așa cum s-a descris anterior (Wood și colab., 2004). Toate procedurile chirurgicale au fost efectuate în condiții aseptice în conformitate cu Principiile de îngrijire a animalelor de laborator (NIH, 1985). Animalele au fost lăsate să se recupereze timp de cel puțin o săptămână după operație înainte de testare.

Droguri

Au fost obținute DHT, DHT-carboximetil-oximă (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisuccinat (Hemis) și DHT-Hemis-BSA de la Steraloids (Newport, RI). În DHT-CMO-BSA, DHT este conjugat la BSA la poziția C3 cu CMO ca linker. În mod similar, DHT este legat de BSA la poziția C17 prin Hemis pentru a forma DHT-Hemis-BSA. Atât DHT-CMO-BSA (Gatson și colab., 2006) și DHT-Hemis-BSA (Braun și Thomas, 2003) au fost utilizate anterior pentru a investiga posibilele efecte ale androgenelor la membrana plasmatică. DHT a fost dizolvat într-o soluție apoasă de 13% p-ciclodextrină (BCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) la 1pg / pl. După cum sa stabilit din studiul nostru anterior la hamsteri, această doză produce un operator robust care răspunde în timpul auto-administrării ICV (DiMeo și Wood, 2006b). Derivații DHT au fost dizolvați în același vehicul la concentrația echivalentă molară a DHT (DHT-CMO: 1.25 pg / pl, DHT-CMO-BSA: 8.7 pg / pl, DHT-Hemis: 1.34 pg / : 8.83μg / μl). BSA (Sigma-Aldrich) a fost dizolvat în același vehicul la 7.45 μg / μl pentru a obține concentrația echivalentă molară a BSA ca în DHT-CMO-BSA și DHT-Hemis-BSA. Medicamentele care conțin BSA au fost preparate zilnic imediat înainte de utilizare pentru a evita degradarea și toate soluțiile au fost filtrate printr-un filtru 0.22 μm. Studiile anterioare au arătat că numai o mică parte a steroidului disociază de BSA (Stevis și colab., 1999) și această cantitate nu este suficientă pentru a induce efecte androgenice semnificative (Lieberherr și Grosse, 1994, Gatson și colab., 2006). De asemenea, studiul nostru anterior a arătat că DHT este autoadministrat la 1.0 μg / μl, dar nu la 0.1 μg / μl (DiMeo și Wood, 2006b). Prin urmare, este puțin probabil ca DHT gratuit (> 10%) să se disocieze de BSA în cantitate suficientă pentru a sprijini autoadministrarea.

Aparat

Animalele au fost lăsate să auto-administreze soluția de medicament sau vehicul 4 ore / zi, 5 zile / săptămână într-o cameră operantă (Med Associates, St. Albans, VT) închisă într-o cameră de atenuare a sunetului cu ventilație forțată. Fiecare cameră a fost echipată cu găuri de lumină pentru casă, 2 și cu o pompă de seringă controlată de calculator conectată la un pivot de lichid pe un braț de echilibru. Soluțiile dintr-o seringă de sticlă 100 μl au fost livrate animalului prin intermediul tubului Tygon conectat la pivot. Tubul care leagă pivotul și canula ICV a fost protejată de un arc metalic. Soluția medicamentului sau vehiculul a fost administrată printr-o canulă internă 28-ga introdusă în canula de ghidare imediat înainte de testare. Fiecare infuzie a furnizat 1 μl de soluție la 0.2 μl / s. Orificiile din nas au fost amplasate 6 cm de la podea, sub lumina casei. Unul dintre gaurile din nas a fost desemnat drept gaura activă. Un răspuns pe această gaură a fost înregistrat ca un vârf activ al nasului (R: activat-întărit) și a fost numărat în funcție de cerința de răspuns (FR1 la 5) pentru declanșarea unei perfuzii. Odată ce o infuzie a fost declanșată, lumina de casă a fost stinsă și gaura activă a aprins în timpul perfuziei 5-ului, pentru a ajuta la distrugerea gaurii active. Înregistrarea nasului în gaura activă în timpul perioadei de expirare 5 a fost înregistrată, dar nu a fost luată în considerare pentru armarea ulterioară (NR: activă ne-armată). Un răspuns la celălalt orificiu a fost înregistrat ca o inimă inactivă (I), dar nu a dus la nici o perfuzie. Localizarea gaurii active a gâtului în față sau în spatele camerei a fost echilibrată pentru a controla preferințele laterale. Datele au fost înregistrate de software-ul WMPC (Med Associate) pe un PC Windows.

ICV auto-administrare

şobolanii

Administrarea automată a DHT la șobolanii Tfm și WT a urmat o schemă ascendentă (FR) de la FR1 la FR5. Șobolanii au fost inițial instruiți pe FR1, unde fiecare răspuns pe nasul activ a fost întărit. Ulterior, numărul răspunsurilor necesare pentru obținerea unei perfuzii a fost crescut cu câte o zi 5. La FR5, pentru o perfuzie au fost necesare cinci răspunsuri pe gaura activă. În general, șobolanii au fost testați pe FR1 pentru zilele 10 și FR2 la FR5 (5 zile fiecare), pentru un total de 30 zile. Șobolanii din fiecare genotip au fost repartizați aleatoriu fie în grupuri DHT sau vehicul (Veh), fie au permis autoadministrarea DHT, respectiv vehiculului βCD. Treizeci și șase șobolani (n_WT = 19, n_TFM = 17) au fost utilizate în acest experiment.

Hamsterii

Hamsterii au fost testați în cadrul programului FR1 pentru zilele 15. În studiile anterioare, zilele 15 de autoadministrare ICV T sunt suficiente pentru a obține o preferință pentru nasul activ. Hamsterii au fost repartizați aleatoriu la DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis ) sau grupuri BSA (n = 11).

Analiza datelor

şobolanii

Valorile zilnice de preferință pentru nasul activ au fost determinate prin scăderea nodurilor inactive din suma acutizării active și armăturii active (R + NR-I) armată activ și activ. Scorul mediu preferat a fost calculat pentru fiecare animal din ultimele 5 zile de FR1 și în timpul FR2 la FR5. În plus, numărul mediu de întăriri pe sesiune pentru fiecare animal la fiecare FR a fost comparat.

Datele au fost analizate prin metoda ANOVA cu 3, cu genotip (WT sau Tfm), medicament (DHT sau vehicul) și program FR (1 ~ 5) ca factori între subiecți. Programul FR a fost tratat ca un factor între, deoarece unele animale nu au reușit să completeze întreaga zi de testare 30 din cauza blocării canulei ghidante ICV. În aceste cazuri, numai datele din programele completate au fost incluse în analize. Numărul de animale incluse în fiecare condiție este prezentat în Tabelul 1. O ANOVA cu trei căi a fost urmărită de ANOVA de ordin inferior pentru efecte simple. Testul Newman-Keuls pentru comparații post-hoc pereche a fost utilizat atunci când este necesar.

Tabelul 1

Greutatea corporală (media ± SEM în g) și numărul de șobolani utilizați (n) la începutul fiecărui FR și sfârșitul lui FR5. * În mod semnificativ diferit de FR1 (p <0.05). # Semnificativ diferit de WT (p <0.05).

Hamsterii

Mijloacele individuale ale R, NR și I au fost utilizate pentru analiza datelor. Scorul de preferință pentru fiecare animal a fost determinat prin scăderea mișcării medii inactive a nasului (I) de la nivelul nasului mediu activ (R + NR-I). Scorul mediu de preferință a fost analizat cu o singură probă t-test față de 0 (adică fără preferințe) pentru fiecare grup. În plus, numărul de întăriri primite a fost mediat pentru fiecare animal. Armarea medie primită pentru fiecare grup de medicamente a fost comparată cu cea a controalelor BSA cu probe independente 2 t-Test. Animalele care nu au reușit să finalizeze un minim de sesiuni 5 au fost excluse din analiză (1 fiecare din grupurile DHT-Hemis și DHT-Hemis-BSA).

Toate analizele statistice au fost efectuate utilizând SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). Pentru toate analizele, p <0.05 a fost considerat semnificativ statistic. Datele sunt prezentate ca medie ± SEM la 4h sesiune.

REZULTATE

Șobolanii WT și Tfm auto-administrează DHT

Operatorul răspunde

Fig. 1 ilustrează preferința medie pentru nasul activ (R + RN - I) la fiecare FR pentru grupurile DHT și Veh. Șobolanii autoadministrați DHT au arătat o preferință mai mare pentru lovitura activă a nasului (73.1 ± 7.6 resp / 4h), comparativ cu controalele vehiculului (29.8 ± 3.5 resp / 4h; F_1,145 = 31.77, p <0.001). A existat, de asemenea, un efect principal al programului FR (F_4,145 = 4.25, p <0.01), interacțiunea genotip-medicament (F_1,145 = 5.27, p = 0.02), și o interacțiune de tip medicament-FR (F_4,145 = 2.60, p = 0.02). Nu a existat efectul principal al genotipului, iar alte interacțiuni nu au fost semnificative.

Figura 1

Preferință medie (nivele active - inactive) pentru șobolani care administrează DHT (partea superioară) și vehiculul (partea de jos). Mijloacele ± SEM pentru fiecare FR sunt prezentate, împreună cu media generală ± SEM (dreapta). * În mod semnificativ diferit de FR1 (p < (Mai Mult …)

Testele post-hoc au arătat că șobolanii care au administrat DHT au prezentat o preferință semnificativ mai mare față de programul FR (F_4,73 = 4.18, p <0.01), creșterea preferinței de la FR1 (33.4 ± 4.4 resp / 4h) la FR4 (110.8 ± 26.7 resp / 4h) și FR5 (106.4 ± 18.9 resp / 4h). Nu a fost observat niciun efect al genotipului în acest grup (schema genotip-FR: F_4,73 = 0.13, ns; genotip: F_1,73 = 0.86, ns).

În contrast, șobolanii care administrează Veh nu au prezentat nicio schimbare în preferința față de programul FR (F_4,72 = 0.31, ns), și nici o interacțiune cu programul de genotip-FR (F_4,72 = 0.12, ns). Spre deosebire de DHT, șobolanii Tfm au prezentat o preferință mai mare decât WT în acest grup (42.3 ± 5.3 și 19.1 ± 4.0 resps / 4h, respectiv; F_4,72 = 11.81, p <0.01).

infuzii

Numărul mediu de infuzii DHT și Veh primite la fiecare FR este prezentat în Fig. 2. În general, șobolanii au primit mai multe perfuzii când au fost autorizați să administreze DHT (26.9 ± 2.2 μg / 4h) față de vehicul (15.4 ± 1.9 μl / 4h, F_1,145 = 14.70, p <0.001). A existat, de asemenea, un efect principal al programului FR (F_1,145 = 3.32, p = 0.01) și interacțiunea genotip-medicament (F_1,145 = 6.41, p = 0.01). Toate celelalte interacțiuni și efectele principale nu au fost semnificative.

Figura 2

Infuzii medii primite de șobolani care administrează DHT (partea superioară) și vehicul (partea de jos). Mijloacele ± SEM pentru fiecare FR sunt prezentate, împreună cu media generală ± SEM (dreapta). * În mod semnificativ diferit de DHT FR1 (p <0.05). # În mod semnificativ (Mai Mult …)

Cantitatea medie zilnică de DHT din toate programele FR a fost similară la șobolani Tfm (24.3 ± 2.9 μg / 4hr) și WT (29.4 ± 3.4 μg / 4h). În ambele grupuri, aportul de droguri a rămas constant deoarece programul FR a crescut (F_4,73 = 0.54, ns). La femeile FR1, Tfm și WT au auto-administrat DHT la 24.5 ± 2.3 μg / 4h și 37.3 ± 6.7 μg / 4h, respectiv. În cadrul unui program FR5, administrarea de sine DHT a înregistrat o valoare medie 18.3 ± 4.5 μg / 4h pentru Tfm și 23.9 ± 5.9 μg / 4h pentru șobolani WT. Acest grup nu a prezentat diferențe bazate pe genotip sau genotip-FR (F_1,73 = 1.17, ns; F_4,73 = 0.34, ns, respectiv).

Prin contrast, la ambii șobolani Tfm și WT, numărul de infuzii de vehicule a scăzut semnificativ pe măsură ce cerința FR a crescut (F_4,72 = 4.73, p <0.01). Oarecum surprinzător, șobolanii Tfm s-au autoadministrat aproximativ de două ori mai mult vehicul (20.7 ± 2.4 μl / 4h) decât șobolanii WT (10.7 ± 1.4 μl / 4h, F_1,72 = 7.77, p <0.01). La șobolanii Tfm la FR1, numărul perfuziilor vehiculului (39.9 ± 13.2 μl / 4h) a depășit numărul de perfuzii DHT (24.5 ± 2.3 μl / 4h). Cu toate acestea, până la sfârșitul experimentului, autoadministrarea vehiculului a scăzut la 10.3 ± 2.4 μl / 4h. În mod similar, șobolanii WT s-au auto-administrat cu 18.6 ± 4.1 μl / 4h vehicul la FR1, care a scăzut la 6.6 ± 1.8 μl / 4h la FR5.

Se indică greutatea corporală medie la începutul fiecărui program FR și numărul de animale în fiecare condiție Tabelul 1. Șobolanii WT au fost semnificativ mai grei decât șobolanii Tfm (F_1,174 = 144.62, p <0.001) și toate grupurile s-au îngrășat în timp (F_5,174 = 5.59, p <0.001). Nu a existat niciun efect al stării medicamentului (DHT vs Veh) asupra greutății corporale (F_{1, 174} = 0.31, ns) sau orice interacțiune. Aportul DHT ajustat pentru greutatea corporală a fost similar la ambele genotipuri atât la FR1 (WT: 77.9 μg / kg, Tfm: 65.4 μg / kg), cât și la FR5 (WT: 46.5 μg / kg, Tfm: 42.6 μg / kg).

Hamsterii sirieni autoadministrează DHT conjugat cu BSA

Operatorul răspunde

Hamsterii autoadministrați DHT și DHT conjugați cu BSA, dar nu numai cu BSA. Fig. 3a arată preferința medie (activă - inactivă) pentru DHT, BSA, DHT-CMO-BSA și DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. În concordanță cu studiile noastre anterioare, hamsterii au dezvoltat o preferință pentru nasul activ în timpul autoadministrării DHT (t₇ = 4.34, p <0.01), dar nu a arătat nici o preferință la autoadministrarea BSA (t₈ = 1.03, ns). De asemenea, hamsterii au arătat o preferință pentru nasul activ cu atât cu DHT-CMO-BSA (t₉ = 2.71, p = 0.02) și DHT-Hemis-BSA (t₇ = 2.92, p = 0.02). Cu DHT atașat numai la linkeri, hamsterii auto-administrat DHT-CMO (t₈ = 3.91, p <0.01), dar nu a arătat o preferință semnificativă la autoadministrarea DHT-Hemis (t₁₀ = 1.87, p = 0.09). În cazul DHT-Hemis, răspunsurile la nivelul nasului activ (40.5 ± 10.3 resp / 4h) au fost similare cu cele pentru DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), dar acești bărbați au prezentat și răspunsuri crescute pentru nasul inactiv (28.7 ± 6.6 resp / 4h) comparativ cu cele pentru DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).

Figura 3

3a: preferință medie (activ - inactiv) pentru hamsteri autoadministrați BSA (n = 9), DHT (n = 8), DHT-CMO-BSA DHB, n = 10), DHT-CMO (DC, n = 8) și DHT hemis (DH, n = 8). * În mod semnificativ diferit de (Mai Mult …)

infuzii

Numărul de infuzii primite pentru fiecare grup este afișat în Fig. 3b. Hamsterii au primit în mod semnificativ mai mult DHT decât infuzii BSA (t₁₅ = 3.04, p = 0.01). În mod similar, hamsterii au primit mai multe perfuzii când au permis autoadministrarea DHT-Hemis-BSA (t₁₅ = 2.72, p = 0.02) sau DHT-CMO (t₁₆ = 2.70, p = 0.02) comparativ cu BSA. Numărul de infuzii primite pentru grupurile DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) și DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) au fost similare cu cele ale administrării DHT, DHT-Hemis-BSA și DHT- OCP. Cu toate acestea, hamsterii nu au primit semnificativ mai mult DHT-CMO-BSA (t₁₇ = 1.96, p = 0.07) sau DHT-Hemis (t₁₈ = 1.91, p = 0.07) comparativ cu BSA.

Supradozaj

Unsprezece hamsteri 55 au murit înainte de a termina toate sesiunile de testare 15. Decesele datorate supradozei androgene în timpul autoadministrării cu testosteron au fost descrise anterior (Peters și Wood, 2005). În studiul prezent, 2 de bărbați 8 (25%) a decedat în timpul administrării cu DHT, similar cu 24% raportat la supradozajul cu testosteron (Peters și Wood, 2005). Autoadministrarea DHT-CMO și DHT-Hemis au fost asociate cu cele mai mari pierderi (fiecare 3 de 8 per grup, 38%), în timp ce au existat puține decese în rândul hamsterilor care au administrat BSA (1 de 9, 11%) sau DHT -Hemis-BSA (0 de 8). Ca și în cazul supradozajului cu testosteron, niciunul dintre hamsterii din studiul prezent nu a murit în timpul administrării de sine. În schimb, hamsterii au murit câteva ore mai târziu în cuștile lor, cu deprimare severă locomotorie și respiratorie.

Supradozajul cu testosteron este strâns corelat cu aportul de testosteron, în special aportul maxim pe ședință (Peters și Wood, 2005). Fig. 4 compară scorurile preferate, numărul de întăriri primite și aportul maxim pentru hamsterii care au terminat toate sesiunile de testare 15 și cei care nu au făcut acest lucru. Ambele grupuri au prezentat o preferință semnificativă pentru nasul activ (p <0.05). Cu toate acestea, preferința a fost semnificativ mai mare la hamsterii care au murit în timpul autoadministrării (25.7 ± 5.2 resp / 4h) comparativ cu cei care au supraviețuit (9.5 ± 2.0 resp / 4h, t₅₃ = 3.42, p <0.01). Hamsterii care nu au reușit să finalizeze 15 sesiuni au primit mai mult de două ori mai multe perfuzii pe sesiune (31.2 ± 5.0 inf / 4h) decât cei care au finalizat toate sesiunile (14.8 ± 1.1 inf / 4h, t₅₃ = 5.05, p <0.001). Mai mult, pentru hamsterii care au murit în timpul studiului, aportul maxim pe sesiune a fost semnificativ mai mare (77.0 ± 9.8 inf / 4h) decât pentru bărbații care au supraviețuit (36.1 ± 2.9 inf / 4h, t₅₃ = 5.41, p <0.001).

Figura 4

Scorurile medii de preferință (stânga), perfuziile primite (mijloc) și aportul maxim pe sesiune (dreapta) pentru hamsterii care au finalizat toate cele 15 sesiuni (C15, n = 44) și cei care nu au făcut (<15, n = 11). Grupul înseamnă ± SEM sunt afișate ca fire încrucișate. (Mai Mult …)

Discuție

Androgenul de autoadministrare poate fi mediat de membrană asociată, dar nu de receptorii de androgeni nucleari

Studiul actual demonstrează că AR-urile clasice nu sunt esențiale pentru auto-administrarea androgenilor. Ambii șobolani Tfm și WT au dezvoltat o preferință pentru nasul activ în timpul administrării DHT. Mai mult, au fost capabili să răspundă la programul de ascensiune FR prin creșterea numărului de nasuri active, menținând astfel un nivel constant de aport de droguri indiferent de programul FR. În contrast, șobolanii care primesc vehicul nu au răspuns la modificările din programul FR. Nasul activ al acestora nu a crescut semnificativ ca răspuns la modificările programării FR, și au primit mai puține infuzii pe măsură ce cerința de răspuns a crescut. Deoarece legarea ligandului la receptorul "clasic" de androgen nuclear este compromisă în mutanții Tfm, aceasta susține ipoteza noastră conform căreia armarea androgenului este mediată prin căi alternative.

Răspunsul neașteptat de ridicat la vehicule de șobolani Tfm este puțin probabil să se datoreze vehiculului în sine. Am observat fenomene similare într-un grup separat de șobolani Tfm care nu primiseră nicio perfuzie (datele nu au fost prezentate). În schimb, poate fi legat de trăsăturile comportamentale feminizate la bărbații Tfm. Creșterile crescute ale nasului de către șobolanii Tfm pot fi similare cu creșterea creșterii exploratorie a capului observată la șobolani femele (Brown și Nemes, 2008). Alternativ, șobolanii și șoarecii Tfm sunt cunoscuți pentru a prezenta comportamente de tip anxietate sporite (Zuloaga și colab., 2006, Zuloaga și colab., 2008a). Poate, efectele sedative / anxiolitice ale DHT (Agren și colab., 1999, Arnedo și colab., 2000, Frye și Seliga, 2001, Berbos și colab., 2002, Peters și Wood, 2005) a blocat comportamentele de tip anxietate atunci când șobolanii Tfm au administrat DHT.

În plus, autoadministrarea conjugatelor DHT-BSA la hamsteri de sex masculin furnizează dovezi că androgenii pot acționa la membrana plasmatică neuronală pentru a avea acțiune de întărire. Hamsterii au prezentat o preferință semnificativă atât pentru conjugatele DHT-BSA. Dozele autoadministrate sunt în concordanță cu studiile noastre anterioare privind T, DHT și steroizii abuzați în mod obișnuit (Ballard și Wood, 2005, DiMeo și Wood, 2006b). În schimb, hamsterii nu au arătat nici o preferință pentru BSA singur. Datele privind mortalitatea și aportul de droguri demonstrează că DHT și derivații săi pot fi letale, extinderea datelor noastre anterioare privind supradozajul T (Peters și Wood, 2005).

Studiul actual relevă un tipar specific de specii de răspuns operator. Hamsterii nu preferau nasul activ în timp ce autovehiculul administrat, așa cum a fost demonstrat anterior (Johnson și Wood, 2001, Lemn, 2002, DiMeo și Wood, 2004, Triemstra și lemn, 2004, Wood și colab., 2004, Ballard și Wood, 2005, DiMeo și Wood, 2006b). La șobolani, totuși, exista o preferință clară pentru nasul activ, indiferent de medicamentul primit. Am observat o tendință similară în studiul nostru anterior privind autoadministrarea T la șobolani, deși nu a fost statistic semnificativ (Wood și colab., 2004). Pe baza unei astfel de diferențe comportamentale specifice în ceea ce privește speciile, trebuie făcută o precauție atunci când se compară datele comportamentale de la șobolani și hamsteri.

Există câteva avertismente care trebuie luate în considerare în interpretarea studiului actual. În primul rând, ARs nucleare cu legare semnificativă a ligandului sunt încă prezente în șobolani Tfm (Yarbrough și colab., 1990), spre deosebire de șoarecii Tfm (He și colab., 1991). Este posibil ca AR AR mutații suficiente să fie suficiente pentru medierea efectelor androgenelor la doze supra-fiziologice. În al doilea rând, conjugatele DHT-BSA se pot degrada in vivo, rezultând DHT liber. Deși acest lucru nu pare a fi o problemă semnificativă in vitro (Lieberherr și Grosse, 1994, Gatson și colab., 2006), gradul și durata degradării DHT-BSA in vivo în creier este în prezent necunoscut. În cele din urmă, conjugatele DHT-BSA nu pot pătrunde semnificativ în țesutul cerebral. DHT-BSA este semnificativ mai mare decât DHT, astfel că efectele DHT-BSA observate în studiul actual sunt susceptibile de a fi mediate la locurile apropiate de ventricule.

În ciuda acestor avertismente, aceste două abordări diferite au produs rezultate consecvente care susțin cu fermitate necesitatea AR de protecție nucleară în armarea androgeni. În plus, autoadministrarea conjugatelor BSA sugerează că androgenii pot acționa la membrana plasmatică în armarea androgenului. Din cunoștințele noastre, studiul actual oferă primul in vivo dovezi privind efectele relevante de comportament ale androgenelor la membrana plasmatică.

Androgenii exercită efecte rapide ale AR-nucleare independente pe răsplată

Câteva alte studii referitoare la recompensarea androgenului au arătat rezultate consecvente cu efectele non-genomice sau ale membranei plasmatice. CPP se dezvoltă în intervalul 30 min de injectare sistemică T (Alexander și colab., 1994), un curs de timp compatibil cu efectele acut non-genomice ale T. CPP poate fi de asemenea indus cu perfuzii intra-Acb de T sau metabolitul său (Packard și colab., 1997, Frye și colab., 2002), deși Acb are puține AR genomice. Mai mult, VTA exprimă Fos ca răspuns la infuzia cu ICV T (Dimeo și Wood, 2006a), în ciuda lipsei de expresie clasică AR semnificativă acolo. Studiul actual nu oferă informații privind locul de acțiune din creier. Cu toate acestea, aceasta indică faptul că lipsa relativă de AR nucleară singură nu este un motiv suficient pentru a exclude structuri cum ar fi Acb și VTA de la potențialele situsuri care pot media efectele androgene.

Efectele rapide ale membranei plasmatice a steroizilor în striatul dorsal și ventral nu se limitează la androgeni. Progestinele sunt cunoscute pentru a induce CPP, posibil prin intermediul receptorilor acidului gama-aminobutiric (GABA) în Acb (Frye, 2007). Estrogenii exercită, de asemenea, efecte rapide, mediate de receptorul membranar în striatul dorsal (Mermelstein și colab., 1996, Becker și Rudick, 1999). Un receptor asociat membranei a fost deja izolat pentru progestine (Zhu și colab., 2003), iar probele se acumulează pentru receptorii de suprafață celulară pentru estrogeni (revizuit în Vasudevan și Pfaff, 2007) și androgeni (revizuit în Thomas și colab., 2006). În timp ce estrogenii sunt de asemenea consolidați (DiMeo și Wood, 2006b), efectele de întărire ale T par a fi predominant androgenice. Hamsterii autoadministrează androgenii care nu pot fi aromatizați, cum ar fi drostanolona și DHT (Ballard și Wood, 2005, DiMeo și Wood, 2006b). În plus, flutamida anti-androgen poate bloca administrarea de sine T (Peters și Wood, 2004). Deși acest lucru pare să contrazică rolul membranei AR raportate în acest studiu, s-a raportat că flutamida blochează și activarea AR membranei (Braun și Thomas, 2003, Braun și Thomas, 2004).

Proprietățile receptorilor androgeni ai membranei

Din punct de vedere istoric, efectele steroizilor, inclusiv androgenele, au fost considerate a fi transduse prin procese mediate de receptori nucleari. Cu toate acestea, rapoartele privind efectele rapide ale androgenului, probabil mediate de receptorii asociate membranei, au fost disponibile timp de câteva decenii. De exemplu, în zona preoptică mediană, androgenii pot modifica arderea neuronală în câteva secunde (Yamada, 1979) la minute (Pfaff și Pfaffmann, 1969). În plus, Orsini și colegii (Orsini, 1985, Orsini și colab., 1985) au arătat o modificare rapidă a frecvenței arderii neuronale de către androgeni în hipotalamus lateral (LHA). Acest efect al androgenilor în LHA poate fi de o importanță deosebită pentru studiul prezent, deoarece LHA este cunoscut a fi implicat în circuitele de recompensă (Olds și Milner, 1954) și LHA orexină / ipocretin este reglat de steroizi gonadali (Muschamp și colab., 2007).

Tipurile de celule cu ARs membranare posibile includ glial (Gatson și colab., 2006), gonadal (Braun și Thomas, 2003, Braun și Thomas, 2004) și celulele imune (Benten și colab., 1999, Guo și colab., 2002), miococi (Estrada și colab., 2003) și osteoblastele (Lieberherr și Grosse, 1994). Deși identitatea moleculară nu a fost încă determinată, candidații pentru membrana AR includ receptori membranari cu situsuri de legare a steroidului cunoscute, cum ar fi GABA-A (revizuit în Lambert și colab., 2003) și subunități NR2 ale receptorilor de acid N-metil-D-aspartic (Malayev și colab., 2002). Alternativ, Thomas și colegii (2004) au raportat dovezi pentru un nou receptor cuplat la proteina G ca o membrană AR. În plus, efectele androgenilor care nu au legătură cu un receptor specific nu pot fi excluse în studiul actual.

Recent in vitro studiile sugerează că există multiple ARs de membrană sau mai mult de un situs de legare pe un singur receptor, așa cum a fost propus pentru receptorul de progesteron membranar (Ramirez și colab., 1996). În multe tipuri de celule, membrana AR pare să fie un receptor de membrană cuplat la Gq / o (Lieberherr și Grosse, 1994, Benten și colab., 1999, Zhu și colab., 1999, Guo și colab., 2002, Estrada și colab., 2003). Cu toate acestea, caracteristicile de legare a steroizilor și sensibilitatea la anti-androgeni ale membranei AR presupuse variază foarte mult, în funcție de tipul celulei. De exemplu, anti-androgenii pot bloca efectele DHT asupra celulelor ovariene croaker (Braun și Thomas, 2003, Braun și Thomas, 2004), în timp ce acestea nu sunt eficiente în alte tipuri de celule (Lieberherr și Grosse, 1994, Benten și colab., 2004, Gatson și colab., 2006) sau poate avea chiar efecte asemănătoare agoniștilor în celulele hipocampale (Pike, 2001, Nguyen și colab., 2007) și câteva linii celulare de cancer (Peterziel și colab., 1999, Zhu și colab., 1999, Evangelou și colab., 2000, Papakonstanti și colab., 2003). În plus, au fost raportate diferite caracteristici de legare T pentru diferite organe din pește (Braun și Thomas, 2004).

Experiența noastră cu AAS abuzat în mod obișnuit indică faptul că modificările majore la inelul A (la C2 și / sau C3) și la C17 au tendința de a interfera cu autoadministrarea (Ballard și Wood, 2005). De exemplu, stanozololul, care are o modificare majoră la C2 și C3, precum și o grupare metil atașată la C17, nu este autoadministrată. În studiul actual, hamsterii au administrat atât BSA conjugați la C3 (DHT-CMO-BSA) cât și C17 (DHT-Hemis-BSA). Cercetări suplimentare sunt necesare pentru a elucida caracteristicile androgenilor autoadministrați.

Semnificația clinică

AAS, în special T, sunt de departe cele mai frecvente agenți de sporire a performanței folosiți de sportivi, reprezentând aproape jumătate din testele pozitive de dopaj (Agenția Mondială Anti-Doping, 2006). Având în vedere utilizarea atât de larg răspândită, abuzul de AAS are consecințe pe scară largă asupra sănătății. Efectele secundare cardiace și hepatice ale abuzului AAS sunt bine stabilite (Leshner, 2000). Acestea și efectele anabolice ale AAS au fost considerate a fi mediate prin intermediul AR. Cu toate acestea, posibilele efecte nucleare AR-independente ale androgenelor sugerează că influența AAS se poate extinde mult dincolo de structurile cu expresia AR nucleară.

În ceea ce privește asemănarea cu alte medicamente de abuz, AAS produc efecte diferite și au diferite mecanisme de acțiune din partea stimulanților. Spre deosebire de stimulente (Graybiel și colab., 1990), AAS induce activarea c-Fos numai în VTA și nu în Acb (Dimeo și Wood, 2006a). Mai mult, AAS atenuează eliberarea Acb DA indusă de stimulent (Birgner și colab., 2006) și inhibă acut eliberarea DA (Triemstra și colab., 2008). Din punct de vedere comportamental, AAS nu induce activarea locomotoare caracteristică stimulentelor (Peters și Wood, 2005).

În schimb, răspunsurile comportamentale la AAS acute se aseamănă cu cele ale opioidelor sau benzodiazepinelor, eventual exercitând efecte aditive atunci când sunt luate împreună. Expunerea acută la AAS deprimă funcțiile autonome, incluzând respirația și temperatura corpului (Peters și Wood, 2005). Depresia autonomă indusă de AAS amintește de simptomele supradozajului cu opioide și este blocată de antagonistul opioid naltrexonă (Peters și Wood, 2005). Mai mult, nandrolonul, un AAS utilizat în mod obișnuit, potențează efectele hipotermice ale morfinei și exacerbează simptomele de retragere a morfinei precipitate de naloxonă (Celerier și colab., 2003). În plus, este bine stabilit că AAS acute sunt sedative / anxiolitice (Agren și colab., 1999, Arnedo și colab., 2000, Frye și Seliga, 2001, Berbos și colab., 2002, Peters și Wood, 2005), posibil mediate de efectele lor directe asupra receptorilor GABA-A (Masonis și McCarthy, 1995, Masonis și McCarthy, 1996). Consumul sporit de etanol la șobolanii tratați cu AAS poate fi, de asemenea, o reflectare a funcției GABAergice modificată (Johansson și colab., 2000).

Constatările noastre privind supradozajul ridică o preocupare suplimentară pentru sănătate. În prezent, clasificarea AAS ca substanțe de control se bazează pe proprietățile lor anabolice (Substanță controlată, 1991). Cu toate acestea, studiul actual demonstrează că eficacitatea anabolică a AAS nu corespunde neapărat proprietăților lor de întărire și riscurilor de supradozaj. În plus față de conjugatele DHT-BSA, DHT-CMO utilizat în acest studiu nu este o substanță controlată, deși proprietățile sale de întărire și mortalitatea datorată supradozajului său pare a fi destul de similar cu DHT și T (Peters și Wood, 2005). Modelul supradozajului a semănat și cu cel raportat anterior pentru T (Peters și Wood, 2005), în cazul în care consumul ridicat a dus la mortalitate 24 la 48 ore mai târziu. Având în vedere aceste constatări, criteriile utilizate pentru programarea unui steroid ca substanță controlată pot necesita revizuiri pentru a explica responsabilitatea privind abuzul și toxicitatea acestuia, în plus față de potențialul său anabolic.

Rezultatele studiului actual sugerează că AR-ul nuclear, singurul AR izolat până acum, nu este esențial pentru armarea androgenului. În schimb, rezultatele sugerează că armarea androgenului este translatată la membrana plasmatică. Astfel, sunt necesare cercetări suplimentare privind identitatea AR membranei presupuse, caracteristicile funcționale și distribuția anatomică pentru a elucida mecanismul de bază al abuzului de AAS și implicațiile sale clinice.

Note de subsol

Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus copierii, tipăririi și revizuirii probelor rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală. Rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul și toate denunțările legale care se referă la jurnal.

Referinte

Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Efectele anxiolitice comportamentale ale tratamentului cu steroizi anabolizanți androgenici cu doze mici la șobolani. Physiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteronul are proprietăți afective de recompensare la șobolanii masculi: implicații pentru baza biologică a motivației sexuale. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Proprietățile satisfacatoare ale testosteronului la șoarecii intacți masculi: un studiu pilot. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
Ballard CL, Wood RI. Administrarea intracerebrală a administrării steroizilor anabolico-androgeni abuzați frecvent la hamsteri masculi (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolonă, oxymetholone și stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
Becker JB, Rudick CN. Efectele rapide ale estrogenului sau progesteronului asupra creșterii induse de amfetamină în dopamina striatală sunt îmbunătățite prin ameliorarea estrogenului: un studiu de microdializă. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Efectele rapide ale androgenelor în macrofage. Steroizi. 2004;69: 585-590. [PubMed]
Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosteronul de semnalizare prin intermediul receptorilor de suprafață internalizabili în macrofagele fără receptori androgenici. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Efecte comportamentale acute ale steroizilor anabolizanți: anxietate, stereotipie și activitate locomotorie. Hormonul Behav. 2002;41: 457.
Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Nivelurile extracelulare modificate ale DOPAC și HVA în coaja nucleului accumbens de șobolan ca răspuns la administrarea sub-cronică de nandrolon și la o provocare ulterioară a amfetaminei. Neurosci Lett 2006
Braun AM, Thomas P. Androgens inhibă sinteza estradiol-17beta în ovarele Croaker Atlantic (Micropogonias undulatus) printr-un mecanism nongenomic inițiat la suprafața celulei. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
Braun AM, Thomas P. Caracterizarea biochimică a receptorului androgen membranar în ovarul cocoșului atlantic (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
Brower KJ. Anabolism și dependență de steroizi anabolizanți. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Simptome și corelații ale dependenței anabolico-androgenice cu steroizi. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
Brown GR, Nemes C. Comportamentul exploratoriu al șobolanilor în aparatul de gaură-bord: este o deviație a capului o măsură valabilă a neofiliei? Procesele Behav. 2008;78: 442-448. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Celebră E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Efectele nandrolonei asupra răspunsurilor morfinei acute, toleranței și dependenței la șoareci. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
Choi PY, Pope HG., Jr Violența față de femei și utilizarea steroizilor androgen-anabolizanți ilegali. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
Titlul 21, capitolul 13 - Prevenirea și controlul abuzului de droguri Substanță controlată. 1991
DiMeo AN, Wood RI. Antagoniștii circulanți sporesc sensibilitatea la autoadministrarea testosteronului la hamsteri de sex masculin. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
Dimeo AN, Wood RI. Testosteronul ICV induce Fos în creierul de hamster de sex masculin sirian. Psychoneuroendocrinology. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
DiMeo AN, Wood RI. Auto-administrarea de estrogen și dihidrotestosteron la hamsteri de sex masculin. Hormonul Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteronul stimulează eliberarea intracelulară a calciului și protein kinazele activate prin mitogen prin intermediul unui receptor cuplat în proteina G în celulele musculare scheletice. Endocrinologie. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letter M. Reglarea în jos a receptorilor de beta-factori de creștere transformați de androgen în celulele cancerigene ovariene. Cancer Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. O metodă moleculară pentru clasificarea genotipurilor obținute într-o colonie de reproducere de la șobolani testicul feminizați (Tfm). Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
Frye CA. Progestine influențează motivația, recompensa, condiționarea, stresul și / sau răspunsul la medicamentele de abuz. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Nucleul accumbens ca loc de acțiune pentru a recompensa proprietățile testosteronului și a metabolitului său redus 5alpha. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
Frye CA, Seliga AM. Testosteronul crește analgezia, anxioliza și performanța cognitivă a șobolanilor de sex masculin. Neuroștiințe cognitive, afective și comportamentale. 2001;1: 371-381.
Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihidrotestosteronul modulează modularea diferențială a proteinei kinazei activate de mitogen și a căilor fosfoinozitide 3-kinază / Akt prin receptorul androgeni nucleari și noi membrii în celulele C6. Endocrinologie. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamina și cocaina induc activarea specifică a genei c-fos în compartimentele matricei striosome și subdiviziunile limbice ale striatumului. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1990;87: 6912-6916. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomic testosteron calciu de semnalizare. Acțiunile genotropice în macrofagele fără receptori androgenici. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
El WW, Kumar MV, Tindall DJ. O mutație a cadrelor în gena receptorului androgen provoacă insensibilitate completă la androgen la șoarecele feminizat testicular. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Steroizii androgeni anabolizanți afectează aportul de alcool, comportamentele defensive și peptidele opioide cerebrale la șobolan. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
Johnson LR, Wood RI. Administrarea orală a testosteronului la hamsteri de sex masculin. Neuroendocrinologie. 2001;73: 285-292. [PubMed]
Kouri EM, Lukas SE, Papa HG, Jr, Oliva PS. A crescut reacția agresivă la voluntarii de sex masculin după administrarea de doze crescătoare treptate de cipionat de testosteron. Alcoolul de droguri depinde. 1995;40: 73-79. [PubMed]
Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Modularea neurostiroidică a receptorilor GABAA. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Anabolic Steroid Abuz. 2000: 1-8.
Lieberherr M, Grosse B. Androgenii măresc concentrația intracelulară de calciu și formarea de inositol 1,4,5-trisfosfat și diacilglicerol prin intermediul unei proteine G sensibile la toxina pertussis. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
Macrousky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Iordania CL, Leranth C. Efectele Androgen asupra numărului sinapselor hipocampice CA1 ale coloanei vertebrale sunt reținute la șobolanii Tfm de sex masculin cu receptori androgeni defecți. Endocrinologie. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibarea răspunsului NMDA de către sulfat de pregnenolonă evidențiază modularea selectivă subtipică a receptorilor NMDA prin steroizi sulfați. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Efectele directe ale steroizilor anabolici / androgenici, stanozololului și 17 alfa-metiltestosteronului, asupra legării benzodiazepinului la. (a) receptorul acidului gama-aminobutiric. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
Masonis AE, McCarthy MP. Efectele steroizilor androgenici / anabolizanți stanozolol asupra funcției receptorului GABAA: Influxul 36CI-stimulat de GABA și legarea [35S] TBPS. J Pharmacol Exp Acolo. 1996;279: 186-193. [PubMed]
Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiolul reduce curenții de calciu la neuronii neostriatali de șobolan prin intermediul unui receptor de membrană. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
Morin LP, Wood RI. O atlas stereotaxic al creierului de hamster de aur. Academic Press; San Diego: 2001.
Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. Un rol al ipocretinului (orexinei) în comportamentul sexual masculin. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
Consiliul NR, redactor. Consiliul national de cercetare. Ghid pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de laborator. Consiliul national de cercetare; Washington, DC: 1996.
Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamida și acetatul de cyproteron au efecte agoniste: inducerea neuroprotecție dependentă de receptorul androgenului. Endocrinologie. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
NIH. Principiul îngrijirii animalelor de laborator. Institutul Național de Sănătate; Bethesda, Maryland: 1985.
Olds J, premierul Milner. Armatura pozitivă produsă de stimularea electrică a zonei septului și a altor regiuni ale creierului de șobolan. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
Orsini JC. Efectele directe ale androgenilor asupra activității neuronale hipotalamice laterale la șobolanii masculi: II. Un studiu de ejecție a presiunii. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
Orsini JC, Barone, Armstrong DL, Wayner MJ. Efectele directe ale androgenilor asupra activității neuronale hipotalamice laterale la șobolanii masculi: I. Un studiu microiontoforetic. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Recompensarea proprietăților afective ale injectărilor de testosteron intra-nucleu accumbens. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Exprimarea preferințelor locului condiționate cu testosteron este blocată de injectarea periferică sau intra-accumbens a alfa-flupentixolului. Hormonul Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. O cale rapidă, nongenomică, de semnalizare reglează reorganizarea actinei indusă de activarea receptorilor de testosteron cu membrană. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
Paxinos G, Watson C. Brainul de șobolan: în coordonate sterotaxe. 4th. Academic Press; New York: 1998.
Peters KD, Lemn RI. Anabolismul și dependența de steroizi androgenici implică receptorii de androgen și opioizi. Proceedings de la 34th reuniunea anuala a Societatii pentru Neuroscience; San Diego, CA. 2004.
Peters KD, Lemn RI. Androgen dependența de hamsteri: supradozaj, toleranță și potențiale mecanisme opioidergice. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Rapidă semnalizare de către receptorul androgen în celulele cancerului de prostată. Oncogene. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
Pfaff DW, Pfaffmann C. Influențe olfactive și hormonale asupra creierului bazal al șobolanului mascul. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
Pike CJ. Testosteronul atenuează toxicitatea beta-amiloidă în neuronii hipocampali de cultură. Cercetarea creierului. 2001;919: 160-165. [PubMed]
Papa HG, Jr, Katz DL. Efectele psihiatrice și medicale ale utilizării steroizilor anabolico-androgenici. Un studiu controlat al sportivilor 160. Arch Gen Psychiatry. 1994;51: 375-382. [PubMed]
Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Receptori cu membrană pentru estrogen, progesteron și testosteron în creierul de șobolan: fantezie sau realitate. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
Simplu RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribuția celulelor care conțin ARN de androgeni și estrogeni în creierul de șobolan: Un studiu de hibridizare in situ. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Efecte diferențiate ale conjugatelor de estradiol și estradiol-BSA. Endocrinologie. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
Thomas P, dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, receptori cuplați de estrogeni și androgeni G-proteină în gonade de pește. Steroizi. 2006;71: 310-316. [PubMed]
Triemstra JL, Sato SM, lemn RI. Testosteronul și nucleul accumbens dopamină la hamsterul sirian masculin. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Triemstra JL, lemn RI. Testosteronul de auto-administrare la hamsteri de sex feminin. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
Vasudevan N, Pfaff DW. Acțiunile inițiate de membrii estrogenilor în neuroendocrinologie: principii emergente. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
Lemn RI. Administrarea orală a testosteronului la hamsteri masculi: doză-răspuns, exercițiu voluntar și diferențe individuale. Hormonul Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Analiza testosteronului: administrare intravenoasă și intracerebroventriculară la șobolani și hamsteri de sex masculin. Psihofarmacologie (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
Wood RI, Newman SW. Imunoreactivitatea receptorului androgen la creierul de hamster sirian masculin și feminin. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
WorldAnti-DopingAgency. Constatări analitice adverse raportate de laboratoarele acreditate. Agenția Mondială Anti-Doping; Montreal, Canada: 2006.
Yamada Y. Efectele testosteronului asupra activității unității la hipotalamus și septum de șobolan. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, FS franceză, Wilson EM. O mutație de bază unică în gena receptorului androgen cauzează insensibilitatea androgenului la șobolanul testicular feminizat. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Utilizarea steroizi anabolico-androgenici în Statele Unite. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgenul stimulează proteina kinază activată de mitogen în celulele cancerului de sân uman. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
Zhu Y, CD Rice, Pang Y, Pace M, Thomas P. Clonarea, expresia și caracterizarea unui receptor de progesteron membranar și dovada că este un intermediar în maturarea meiotică a ovocitelor de pește. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2003;100: 2231-2236. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Zuloaga DG, Morris JA, Iordania CL, Breedlove SM. Șoarecii cu mutație feminizantă testiculară demonstrează un rol pentru receptorii androgeni în reglarea comportamentelor legate de anxietate și a axei hipotalamo-pituitare-suprarenale. Hormonul Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
Zuloaga DG, Puts DA, Jordan CL, Breedlove SM. Rolul receptorilor androgeni în masculinizarea creierului și a comportamentului: ceea ce am învățat din mutația feminizării testiculare. Hormonul Behav. 2008b;53: 613-626. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Zuloaga DZ, Iordania CL, Breedlove SM. Șobolanii cu mutație feminizantă testiculară (TFM) prezintă indici de creștere a anxietății. Proceedings de la 36th reuniunea anuala a Societatii pentru Neuroscience; Atlanta, GA. 2006. Programul # 152.118.