DeltaFosB în Nucleus Accumbens este critică pentru întărirea efectelor recompensei sexuale. (2010)

COMENTARII: Delta FosB este un marker pentru toate dependențele, atât comportamentale, cât și chimice. Pe măsură ce această moleculă crește în circuitul recompensei, crește și comportamentele dependente. Este una dintre moleculele implicate în modificările neuroplastice. Acest experiment arată că crește odată cu experiența sexuală, la fel ca în cazul dependenței de droguri. În experiment, ei au folosit ingineria genetică pentru a-și crește nivelurile dincolo de „normal”. Acest lucru a dus la o facilitare sporită a activității sexuale. Credem că acest lucru se întâmplă cu dependența de porno.


STUDIU FULL

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genele Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Departamentul de Anatomie si Biologie Celulara, Scoala de Medicina si Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, Ontario, Canada.

REZUMAT

Comportamentul sexual la șobolanii masculi este recompensat și consolidat. Cu toate acestea, se cunosc puține despre mecanismele celulare și moleculare specifice care mediază răsplata sexuală sau despre efectele de întărire ale recompensei asupra expresiei ulterioare a comportamentului sexual. Acest studiu testează ipoteza că ΔFosB, forma trunchiată a FosB, exprimată în mod stabil, joacă un rol critic în întărirea comportamentului sexual și facilitarea motivației și performanței sexuale prin experiență.

Experiența sexuală a determinat acumularea ΔFosB în câteva regiuni creierului limbic, incluzând nucleul accumbens (NAc), cortexul prefrontal medial, zona tegmentală ventrală și putamenul caudat, dar nu nucleul preoptic medial.

Apoi, inducția de c-Fos, o țintă în aval (reprimată) a ΔFosB, a fost măsurată la animale cu experiență sexuală și naivă. Numărul de celule c-Fos-imunoreactive induse de împerechere a fost semnificativ scăzut în cazul animalelor cu experiență sexuală comparativ cu controalele care nu au primit naivitate sexuală.

În cele din urmă, nivelurile ΔFosB și activitatea sa în NAc au fost manipulate utilizând transferul de gene mediate viral pentru a studia rolul său potențial în medierea experienței sexuale și a facilității induse de experiența de performanță sexuală. Animalele cu o supraexprimare cu ΔFosB au prezentat o facilitare sporită a performanței sexuale cu experiență sexuală în raport cu controalele. Spre deosebire de aceasta, expresia lui ΔJunD, un partener dominant de legare negativă a ΔFosB, a atenuat facilitarea performanței sexuale induse de experiența sexuală și întreținerea pe termen lung a facilitării în comparație cu proteina fluorescentă verde și grupurile supraexprimate ΔFosB.

Împreună, aceste constatări susțin un rol critic pentru exprimarea ΔFosB în NAc pentru efectele de întărire a comportamentului sexual și a facilității de performanță sexuală indusă de experiența sexuală.

INTRODUCERE

Comportamentul sexual este foarte răsplătit și întăritor pentru rozătoarele masculine (Coolen și colab. 2004; Pfaus et al. 2001). Mai mult, experiența sexuală alterează comportamentul sexual ulterior și recompensele (Tenk et al. 2009). Cu o experiență de împerechere repetată, comportamentul sexual este facilitat sau "întărit", evidențiat de latențele scăzute pentru inițierea împerecherii și facilitarea performanței sexuale (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Cu toate acestea, mecanismele celulare și moleculare subiacente ale recompensei sexuale și ale întăririi sunt puțin înțelese. Comportamentul sexual și indicațiile condiționate care prezic împerecherea au demonstrat că provoacă tranzitoriu expresia genei c-fos imediat imediată în sistemul mesolimbic al șobolanilor masculi (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Mai mult, sa demonstrat recent că experiența sexuală induce neuroplasticitatea de lungă durată în sistemul mezolimbic de șobolan masculin (Frohmader et al. 2009; pitchers et al. 2010). În plus, la șobolanii masculi, sa demonstrat că experiența sexuală induce DFosB, a Membru al familiei Fos, în nucleul accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, o variantă trunchiată de FosB, este un membru unic al familiei Fos datorită stabilității sale mai mari (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) și joacă un rol în îmbunătățirea motivației și recompensării pentru medicamentele de abuz și pentru plasticitatea neuronală pe termen lung care mediază dependența (Nestler et al. 2001). ΔFosB formează un complex de factor de transcripție heteromeric (proteină activator-1 (AP-1)) cu proteine ​​Jun, de preferință JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Prin suprapresiunea inductibilă a ΔFosB, limitată în primul rând la striatum folosind șoareci bi-transgenici, se produce un fenotip comportamental dependent de droguri, în ciuda absenței expunerii anterioare a medicamentului (McClung et al. 2004). Acest fenotip comportamental include un răspuns locomotor sensibilizat la cocaină (Kelz et al. 1999), preferința crescută pentru cocaină (Kelz et al. 1999) și morfină (Zachariou et al. 2006) și creșterea autoadministrării cocainei (Colby et al. 2003).

Similar cu recompensa de droguri, ΔFosB este upregulată de comportamente naturale recompensatoare și mediază expresia acestor comportamente. Suprapunerea expresiei ΔFosB în NAc utilizând modelele de rozătoare crește rularea voluntară a roților (Werme et al. 2002), instrumental pentru mâncare (Olausson et al. 2006), zaharoză (Wallace et al. 2008), și facilitează bărbații (Wallace et al. 2008) și de sex feminin (Bradley et al. 2005) comportamentul sexual. Astfel, ΔFosB poate fi implicat în medierea efectelor experiențelor naturale de recompensare. Tstudiul actual extinde studiile anterioare prin investigarea specifică a rolului ΔFosB în NAc în rezultatele pe termen lung ale experienței sexuale asupra comportamentului de împerechere ulterioară și activării neuronale în sistemul mezolimbic.

  • În primul rând, sa stabilit care regiuni ale creierului implicate în circuitele de recompensă și în comportamentul sexual exprimă ΔFosB induse de experiența sexuală.
  • Apoi, efectul ΔFosB indus de experiența sexuală asupra exprimării induse de împerechere a c-Fos, o țintă în aval reprimată de ΔFosB (Renthal et al. 2008), a fost investigat.
  • În cele din urmă, efectul manipulării activității ΔFosB în NAc (supraexpresia genelor și exprimarea unui partener negativ-obligatoriu dominant) asupra comportamentului sexual și facilitării experienței induse de motivație și performanță sexuală a fost determinată utilizând tehnologia de livrare a vectorilor virale.

METODE

animale

Șobolani masculi adulți Sprague Dawley (200-225 grame) au fost obținuți de la Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Animalele au fost adăpostite în cuști din plexiglas cu un tub de tunel în perechi de sexe pe tot parcursul experimentelor. Sala de colonii a fost reglată la temperatură și menținută pe un ciclu 12 / 12 lumină întunecată cu alimente și apă disponibile ad libitum cu excepția testelor comportamentale. Femelele de stimulare (210-220 grame) pentru sesiuni de împerechere au primit un implant subcutanat conținând 5% benzoat de estradiol și colesterol 95% în urma ovarectomiei bilaterale sub anestezie profundă (0.35g ketamină / 0.052g Xylazină). Receptivitatea sexuală a fost indusă prin administrarea de progesteron 500μg în ulei de susan 0.1 mL de aproximativ 4 ore înainte de testare. Toate procedurile au fost aprobate de Comitetul pentru îngrijirea și utilizarea animalelor de la Universitatea din Western Ontario și au fost conforme cu orientările CCAC care implică cercetări în animale vertebrate.

Comportamentul sexual

Ședințele de împerechere au apărut în faza întunecată timpurie (între 2-6 ore după debutul perioadei întunecate) sub iluminare roșie dim. Înainte de începerea experimentului, animalele au fost divizate în mod aleatoriu în grupuri. În timpul ședințelor de împerechere, șobolanii masculi au fost lăsați să coopereze la ejaculare sau ora 1, iar parametrii pentru comportamentul sexual au fost înregistrați incluzând: latența de montare (ML, timpul de la introducerea femeii până la prima vârf), latența intromisiei (IL; femeia până la prima vârstă cu penetrare vaginală), latența ejacularii (EL, timpul de la prima intromisie până la ejaculare), intervalul post-ejaculare (PEI, timpul de la ejaculare până la prima intromisie ulterioară), numărul de picioare (M, penetrare), numărul de intromizări (IM, montaj inclusiv penetrarea vaginală) și eficiența copulației (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Numerele de suporturi și intromisiuni nu au fost incluse în analiza pentru animalele care nu au prezentat ejacularea. Latențele la montură și la intromisiune sunt parametri indicativi ai motivației sexuale, în timp ce latența ejaculării, numărul de suporturi și eficiența copulației reflectă performanța sexuală (Hull 2002).

Experiment 1: Exprimarea ΔFosB

Sobolanii masculi naivi sexuali au fost lăsați să se îmbine în cuști de testare curate (60 × 45 × 50 cm) pentru sesiuni 5 consecutive, de împerechere zilnică sau au rămas naivi sexuali. Masa suplimentară 1 schițează paradigma comportamentală pentru grupurile experimentale: sexul naiv (NNS; n = 5), sexul naiv (NS; n = 5), nu au experimentat sex (ENS; n = 5); Animalele NS și ES au fost sacrificate timp de 4 după ejaculare în ultima zi de împerechere pentru a investiga expresia c-Fos indusă de împerechere. Animalele NNS au fost sacrificate concomitent cu animale ENS 1 ore după încheierea sesiunii de împerechere pentru a examina ΔFosB induse de experiența sexuală. Grupurile cu experiență sexuală au fost potrivite pentru comportamentul sexual înainte de testarea ulterioară. Nu s-au detectat diferențe semnificative între grupuri pentru eventualele măsuri comportamentale în cadrul sesiunii de împerechere corespunzătoare și facilitarea comportamentului sexual provocată de experiența sexuală a fost afișată de ambele grupuri experimentate (Masa suplimentară 2). Controalele au inclus bărbați naivi sexual tratați concomitent cu animale de împerechere, asigurând expunerea la mirosuri și vocalizări feminine fără contact direct cu femeile.

Pentru sacrificare, animalele au fost profund anesteziate folosind pentobarbital de sodiu (270mg / kg; ip) și perfuzate intracardial cu 50 ml de soluție salină 0.9%, urmată de 500 ml de paraformaldehidă 4% în tampon fosfat 0.1 M (PB). Creierele au fost îndepărtate și post-fixate pentru 1 h la temperatura camerei în același fixativ, apoi au fost imersate în 20% zaharoză și 0.01% azidă de sodiu în 0.1 M PB și depozitate la 4 ° C. Secțiunile coronale (35 μm) au fost tăiate cu un microtom congelator (H400R, Micron, Germania), colectate în patru serii paralele în soluție de crioprotector (30% zaharoză și 30% etilenglicol în 0.1 M PB) și depozitate la -20 ° C. Secțiunile plutitoare libere au fost spălate extensiv cu soluție salină tamponată cu fosfat 0.1 M (PBS, pH 7.3-7.4) între incubări. Secțiunile au fost expuse la 1% H2O2 pentru 10 min la temperatura camerei, pentru a distruge peroxidazele endogene, apoi a fost blocat în soluție de incubare PBS +, care este PBS conținând albumină serică bovină 0.1% (catalog 005-000-121, Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) și 0.4% Triton X -100 (element de catalog BP151-500; Sigma-Aldrich) pentru 1 h. Secțiunile au fost apoi incubate peste noapte la 4 ° C într-un anticorp policlonal de iepure pan-FosB (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, SUA). Anticorpul pan-FosB a fost ridicat împotriva unei regiuni interne împărtășite de FosB și ΔFosB. Celulele ΔFosB-IR au fost în mod specific ΔFosB-pozitive, deoarece la timpul post-stimul (ore 24) toate FosB induse de stimuli detectabile sunt degradate (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). În plus, în acest experiment, animalele împerecheate în ultima zi (NS, ES) au fost sacrificate 1 h după împerechere, astfel înainte de exprimarea FosB. Analiza Western blot a confirmat detectarea ΔFosB la aproximativ 37 kD. După incubarea primară a anticorpilor, secțiunile au fost incubate pentru 1 h în IgG de capră anti-iepure conjugată cu biotină (1: 500 în PBS +, Vector Laboratories, Burlingame, CA, SUA) și apoi 1 h în peroxidază avidin-biotin-hoseradă , 1: 1K în PBS, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). În urma acestei incubări secțiunile au fost prelucrate în unul din următoarele moduri:

1. Etichetare peroxidază unică

Secțiunile de animale NNS și ENS au fost folosite pentru analiza creierului cu privire la acumularea de ΔFosB indusă de experiența sexuală. După incubarea ABC, complexul de peroxidază a fost vizualizat după tratamentul timp de 10 minute la o soluție de cromogen conținând 0.02% 3,3'-diaminobenzidină tetrahidroclorură (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) îmbunătățită cu 0.02% sulfat de nichel în 0.1 M PB cu peroxid de hidrogen (0.015%). Secțiunile au fost spălate bine în 0.1 M PB pentru a termina reacția și au fost montate pe slide-uri de sticlă Superfrost plus codificate (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) cu gelatin 0.3% în ddH20. După deshidratare, toate alunecările au fost alunecate cu DPX (xilen dibutil ftalat).

2. Imunofluorescență dublă

S-au folosit secțiuni din toate cele patru grupe experimentale care conțin NAc și mPFC pentru analiza ΔFosB și c-Fos. După incubarea ABC, secțiunile au fost incubate pentru 10 min cu tiramidă biotinilată (BT; 1: 250 în PBS + 0.003% H2O2 Tamponul de amplificare a semnalului tiramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) și pentru 30 min cu strepavidina conjugată cu Alexa 488 (1: 100, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Secvențele au fost apoi incubate peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure care recunoaște în mod specific c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), urmată de o incubare 30 min cu anticorp secundar conjugat cu capră anti-iepure Cy3 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). După colorare, secțiunile au fost spălate bine în 0.1 M PB, montate pe culise de sticlă codificată cu 0.3% gelatină în ddH20 și acoperire-alunecat cu un mediu de montare apoasă (Gelvatol) care conține agent anti-decolorare 1,4-diazabiciclo (2,2) octan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Controlul imunohistochimic a inclus omiterea unuia sau a doi anticorpi primari, rezultând în absența etichetării la lungimea de undă adecvată.

Analiza datelor

Analiza cerebrală a ΔFosB

Doi experimentatori orbi la tratament au efectuat scanarea pe creier pe diapozitive codate. Celulele ΔFosB-imunoreactive (-IR) din creier au fost analizate semicantitativ folosind o scală pentru a reprezenta numărul de celule ΔFosB-pozitive așa cum s-a subliniat în Tabelul 1. În plus, pe baza constatărilor semi-cantitative, numărul celulelor ΔFosB-IR a fost calculat utilizând zone standard de analiză în zonele creierului implicate în recompensă și comportament sexual folosind un tub de desen tehnic lucida atașat la un microscop Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Germania): NAc (miez (C) și coajă (S); 400 × 600μm) analizate la trei nivele rostral-caudale (Balfour et al. 2004); ventrală (VTA; 1000 × 800μm) analizată la trei nivele rostral-caudale (Balfour et al. 2004) și coada VTA (Perrotti et al. 2005); cortexul prefrontal (zona anterioară a cinglulatului (ACA), cortexul prelimbic (PL), cortexul infralimbic (IL), 600 × 800μm fiecare); caudate putamen (CP; 800 × 800μm); și nucleul preoptic medial (MPN; 400 × 600 μm) (Figuri suplimentare 1-3). Două secțiuni au fost numărate pe subregiune și au fost medii pe animal pentru calcularea mediei grupului. Media mediană a grupurilor ΔFosB-IR mediană și mediană a grupurilor experimentale a fost comparată pentru fiecare subregiune utilizând t-teste ne-corelate.

Tabelul 1     

Rezumat al exprimării ΔFosB la animalele naivă și experimentate sexual
Analiza ΔFosB și c-Fos

Imaginile au fost capturate folosind o cameră CCD răcită (Microfire, Optronics) atașată la un microscop Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Germania) și software-ul Neurolucida (MicroBrightfield Inc). Numărul de celule care exprimă c-Fos-IR sau ΔFosB-IR în zone standard de analiză în nucleul NAc și în cochilie (10 × 400μm fiecare; Figura suplimentară 1) și ACA al mPFC (600 × 800μm; Figura suplimentară 3) au fost numărate manual de către un observator orbit la grupurile experimentale, în secțiuni 2 pe animal folosind software de Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) și medii per animal. Valorile medii ale grupurilor c-Fos sau ΔFosB au fost comparate folosind ANOVA cu două sensuri (factori: experiență sexuală și activitate sexuală) și Fisher LSD pentru comparații post hoc la un nivel de semnificație al 0.05.

Experiment 2: manipularea expresiei ΔFosB

Transferul genei mediate de vectorul viral

Șobolanii masculi de la Sprague Dawley, naivi, sexual naiv au fost împărțiți în mod aleatoriu în grupuri înainte de intervenția chirurgicală stereotaxică. Toate animalele au primit microinjecții bilaterale de vectori viroși recombinanți adeno-asociați (rAAV) care codifică GFP (control; n = 12), DFosB de tip sălbatic (n = 11) sau un partener de legare negativ dominant al ΔFosB denumit ΔJunD în NAc. ΔJunD scade transcripția mediată de ΔFosB prin heterodimerizare competitivă cu ΔFosB înainte de legarea regiunii AP-9 în promotorii genei (Winstanley et al. 2007). Titrul de virus a fost determinat de qPCR și evaluat in vivo înainte de începerea studiului. Titer a fost 1-2 × 1011 particule infecțioase pe ml. Vectorii rAAV au fost injectați într-un volum de 1.5 μl / lateral peste 7 minute (coordonate: AP + 1.5, ML +/- 1.2 de la Bregma, DV -7.6 din suprafața craniului conform Paxinos și Watson, 1998) utilizând o seringă Hamilton (5μL , Aparatul Harvard, Holliston, MA, SUA). Vectorii nu produc nici o toxicitate mai mare decât perfuziile de control în monoterapie (Winstanley și colab., 2007; pentru detalii despre prepararea AAV, a se vedea Hommel și colab., 2003). Experimentele comportamentale au început 3 săptămâni după ce injecțiile vectoriale au permis o infecție virală optimă și stabilă (Wallace et al. 2008). Exprimarea transgenei la vârstele de specii murine la vârste de 10 și rămâne ridicată cel puțin pentru 6 luni (Winstanley et al. 2007). La sfârșitul experimentului, animalele au fost perfuzate transcardially și secțiunile NAc au fost imuno-prelucrate pentru GFP (1: 20K; anticorp anti-GFP de iepure; Molecular Probes) utilizând o reacție ABC-peroxidază-DAB (așa cum s-a descris mai sus) verificați punctele de injectare utilizând GFP ca marker (Figura suplimentară 4). Vectorii ΔFosB și ΔJunD conțin de asemenea un segment care exprimă GFP separat printr-un sit intern de intrare ribozomal, permițând verificarea locului de injectare prin vizualizarea GFP la toate animalele. Numai animalele cu locurile de injectare și răspândirea virusului limitate la NAc au fost incluse în analizele statistice. Răspândirea virusului a fost, în general, limitată la o porțiune din NAc și nu sa răspândit în esență pe cale laterală în întregul nucleu. Mai mult, răspândirea virusului a apărut în cea mai mare parte limitată fie la coajă, fie la miez. Cu toate acestea, variația locurilor de injectare și răspândirea în cadrul NAc nu au influențat efectele asupra comportamentului. În cele din urmă, injecțiile cu GFP nu au influențat comportamentul sexual sau facilitarea comportamentului sexual induse de experiență în comparație cu animalele neoperatorii din studiile anterioare (Balfour et al. 2004).

Comportamentul sexual

La trei săptămâni după livrarea vectorilor virali, animalele au fost îmbinate la o singură ejaculare (sau timp de 1) pentru sesiuni de împerechere consecutive 4 pentru a câștiga experiență sexuală (sesiuni de experiență) și au fost testate ulterior pentru exprimarea pe termen lung a experienței induse de comportament sexual 1 și săptămâni 2 (sesiuni de testare 1 și 2) după sesiunea de experiență finală. Parametrii comportamentului sexual au fost înregistrați în timpul tuturor sesiunilor de împerechere, așa cum este descris mai sus. Diferențele statistice pentru toți parametrii în timpul fiecărei sesiuni de împerechere au fost comparate în cadrul grupurilor și între grupuri, utilizând măsurători repetate ANOVA (Factori: tratament și ședințe de împerechere) sau ANOVA într-o singură direcție (latența ejaculării, numărul de suporturi și intromisme; ) urmată de testele Fisher LSD sau Newman-Keuls pentru comparații post hoc la un nivel de semnificație al 0.05. Concret, efectele facilitare ale experienței sexuale asupra parametrilor de împerechere au fost comparate între sesiunea de experiență 1 (naivă) și sesiunile de experiență 2, 3 sau 4 fiecare, precum și între grupurile experimentale din cadrul fiecărei sesiuni de experiență. În plus, pentru a analiza efectele tratamentului (vector) asupra facilitării pe termen lung a comportamentului sexual, parametrii de împerechere au fost comparați între sesiunea de experiență 4 și sesiunea de testare 1 și 2 în cadrul fiecărui grup de tratament și comparate între grupurile experimentale din cadrul fiecărei sesiuni de testare.

REZULTATE

Experiența sexuală determină acumularea ΔFosB

Inițial, a fost efectuată o investigație semi-cantitativă a acumulării ΔFosB în întreaga creier la bărbații cu experiență sexuală comparativ cu controalele naivă sexuală. Un rezumat al constatărilor globale este furnizat în Tabelul 1. Analiza ΔFosB-IR a fost susținută prin determinarea numărului de celule ΔFosB-IR în câteva regiuni ale creierului asociate limbic, utilizând zone standard de analiză. Figura 1 demonstrează imagini reprezentative ale colorării NAB a animalelor naivă și experimentată sexual. S-a găsit reglarea în sus a ΔFosB în subregiunile mPFC (Figura 2A), Nucleul NAc și coajă (2B), caudate putamen (2B) și VTA (2C). În NAc, există diferențe semnificative la toate nivelele rostral-caudale din nucleul și cochilia NAc și datele prezentate în Figura 2 este media peste toate nivelele rostro-caudale. În contrast, nu a existat o creștere semnificativă a ΔFosB-IR în nucleul preoptic medial hipotalamic (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26; ENS: Avg 6.0 +/- 1.86).

Figura 1    

 

Imagini reprezentative care prezintă celule ΔFosB-IR (negru) în NAc de sex fără naiv (A) și nu experimentează grupuri sexuale (B). aco: comisia anterioară Bara de scară indică 100 μm.
Figura 2      

Numărul celulelor ΔFosB-IR în: subregiuni de cortex prefrontal medial, infralimbic (IL), prelimbic (PL) și cortex cingular anterior (ACA); B. Nucleus accumbens core and shell și caudate putamen (CP); C. Rostral, mijloc, caudal și coadă ...

Experiența sexuală atenuează c-Fos indusă de împerechere

Efectul experienței sexuale asupra nivelurilor ΔFosB în NAc a fost confirmat utilizând tehnici de colorare fluorescentă. În plus, au fost analizate efectele experienței sexuale asupra exprimării c-Fos. Figura 3 demonstrează imagini reprezentative ale celulelor ΔFosB- (verde) și c-Fos (roșu) -IR în toate grupele experimentale (A, NNS, B, NS, C, ENS, D, ES). Experiența sexuală a crescut semnificativ expresia ΔFosB în nucleul NAc (Figura 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) și coajă (Figura 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Prin contrast, împerecherea cu 1 oră înainte de perfuzie nu a avut un efect asupra expresiei ΔFosB (Figura 4A, C) și nu a fost detectată nicio interacțiune între experiența sexuală și imperecherea imediat înainte de perfuzie. A existat un efect global de împerechere înainte de perfuzie pe exprimarea c-Fos atât în ​​nucleul NAc (Figura 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) și shell (Figura 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Mai mult, un efect general al experienței sexuale a fost detectat în nucleul NAc (Figura 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) și coajă (Figura 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) și a fost detectată o interacțiune între experiența sexuală și împerecherea înainte de perfuzie în nucleul NAc (F1,15 = 6.5; p = 0.022), cu o tendință în coajă (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Analizele post hoc au demonstrat expresia c-Fos indusă de împerechere în miezul și în cochilia bărbaților naivi naivi sexualiFigura 4B, D). Cu toate acestea, la bărbații cu experiență sexuală, c-Fos nu a crescut semnificativ în nucleul NAc (Figura 4B) și atenuată semnificativ în cochilie (Figura 4D). Astfel, experiența sexuală a determinat o reducere a expresiei c-Fos indusă de împerechere. Valorile P pentru comparații specifice perechi sunt în legendele figurii.

Figura 3      

Imagini reprezentative care prezintă ΔFosB (verde) și c-Fos (roșu) în NAc pentru fiecare grup experimental. Scara de bare indică 100 μm.
Figura 4      

Experiența sexuală indusă de ΔFosB și c-Fos induse de împerechere. Numerele de celule imunoreactive ΔFosB (nucleu, A; Shell, C, ACA, E) sau c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) pentru fiecare grupă: NNS (n = 5) 5), ENS (n = 5) sau ES (n = 4). Datele sunt exprimate ...

Efectul experienței sexuale asupra nivelurilor c-Fos induse de împerechere nu a fost limitat la NAc. O atenuare similară a expresiei c-Fos a fost observată în ACA la animalele cu experiență sexuală comparativ cu controalele nedorite sexual. Experiența sexuală a avut un efect semnificativ asupra exprimării ΔFosB în ACA (Figura 4E: F1,15 = 154.2; p <0.001). Împerecherea înainte de perfuzie nu a avut efect asupra expresiei osFosB (Figura 4C) dar a crescut în mod semnificativ c-Fos (Figura 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) în ACA. Mai mult, expresia c-Fos indusă de împerechere în ACA a fost semnificativ scăzută de experiența sexuală (Figura 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). A fost detectată o interacțiune bidirecțională între experiența sexuală și împerecherea înainte de perfuzie pentru exprimarea c-Fos (Figura 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). Valorile P pentru comparații specifice pe perechi sunt în legendele figurii. În cele din urmă, nu a existat nicio reducere semnificativă a expresiei c-Fos induse de împerechere în nucleul preoptic medial (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), o zonă în care experiența de împerechere nu a cauzat o semnificativă creșterea expresiei ΔFosB, indicând faptul că expresia c-Fos indusă de împerechere nu a fost afectată în toate zonele creierului.

ΔFosB în NAc mediază întărirea comportamentului sexual

Pentru a explora un mecanism molecular potențial pentru întărirea comportamentului sexual, așa cum sa demonstrat prin facilitarea comportamentului sexual indus de experiență, s-au determinat efectele manipulării locale a nivelurilor ΔFosB și activitatea sa transcripțională. Experiența sexuală în timpul celor patru sesiuni de experiență consecutive a avut un efect semnificativ asupra latenței de montare (Figura 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), latența intromisiei (Figura 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) și latența ejaculării (Figura 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). Animalele de control GFP au prezentat facilitarea comportamentului sexual indusă de experiență și au prezentat latențe semnificativ mai mici la prima montare, prima intromisie și ejaculare în timpul sesiunii de experiență 4 comparativ cu sesiunea de experiență 1Figura 5A-C; a se vedea legenda figura pentru valorile p). Această facilitare indusă de experiența comportamentului sexual a fost observată, de asemenea, în grupul ΔFosB pentru latențele de montare și intromisiune, dar nu a fost detectată o diferență semnificativă în latența ejaculării (Figura 5A-C). Spre deosebire de acestea, animalele ΔJunD au prezentat o facilitate ușoară; chiar dacă latențele pentru mounts, intromisiuni și ejaculări au scăzut cu sesiuni de împerechere repetate, nici unul dintre acești parametri nu a atins semnificație statistică atunci când este comparat între sesiunile de experiență 1 și 4 (Figura 5A-C). Între comparațiile de grup pentru fiecare sesiune de experiență rezultă că ΔJunD a avut latențe semnificativ mai mari pentru a se monta, a intromita și a ejacula în timpul sesiunilor de experiență în comparație cu ΔFosB și GFPFigura 5A-C). În plus, atât experiența sexuală cât și tratamentul au avut efecte semnificative asupra eficienței copulației (Figura 5F: experiență sexuală, F1,12 = 22.5; p <0.001; tratament, F1,12 = 3.3; p = 0.049). Bărbații ΔFosB au crescut eficiența copulației în timpul sesiunii de experiență 4 comparativ cu sesiunea de experiență 1 (Figura 5F). În plus, animalele ΔFosB au avut în mod semnificativ mai puține suplimente care au precedat ejacularea în timpul zilei de sesiune 4, comparativ cu sesiunea de experiență 1 (Figura 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004) și că bărbații ΔJunD au avut semnificativ mai multe suplimente care au precedat ejacularea, astfel scăzând semnificativ eficiența copulației decât oricare dintre celelalte două grupuri (Figura 5D și F). Astfel, animalele GFP și ΔFosB au prezentat facilitatea de inițiere a comportamentului sexual și a performanței sexuale induse de experiență, în timp ce animalele ΔJunD nu au făcut acest lucru.

Figura 5      

Comportamentul sexual al animalelor GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) și ΔJunD (n = 9): latența de montare (A), latența intromisiei (B), latența ejaculării numărul de intromisiuni (E) și eficiența copulației (F). Datele sunt exprimate ...

Pentru a testa ipoteza că exprimarea ΔFosB este critică pentru exprimarea pe termen lung a facilitării comportamentului sexual indusă de experiență, animalele au fost testate săptămâna 1 (ședința de testare 1) și săptămânile 2 (sesiunea de testare 2) după sesiunea de experiență finală. Într-adevăr, comportamentul sexual facilitat a fost menținut în ambele grupuri GFP și ΔFosB, deoarece nici unul dintre parametrii comportamentali nu diferă între sesiunile de testare 1 sau 2 și sesiunea de experiență finală 4, în cadrul grupurilor GFP și ΔFosBFigura 5A-C; cu excepția eșecului de ejaculare și a eficienței copulației în sesiunea de testare 1 pentru animalele ΔFosB). Diferențe semnificative între animalele ΔJunD și grupurile GFP sau ΔFosB au fost detectate în ambele sesiuni de testare pentru toți parametrii de comportament sexual (Figura 5A-F). Nu au existat diferențe detectate între sau în cadrul grupurilor atunci când au fost comparate numerele de intromizări, PEI sau procentele animalelor care au ejaculat (100% dintre bărbați în toate grupurile ejaculate în timpul ultimelor patru sesiuni de împerechere).

DISCUŢIE

Studiul actual a demonstrat că experiența sexuală determină o acumulare de ΔFosB în câteva regiuni ale creierului asociate limbic, incluzând nucleul și cochilia NAc, mPFC, VTA și putamen putamen. În plus, experiența sexuală a atenuat exprimarea indusă de împerechere a c-Fos în NAc și ACA. În cele din urmă, ΔFosB în NAc sa dovedit a fi critic în medierea facilitării împerecherii în timpul achiziționării experienței sexuale și a exprimării pe termen lung a facilitării comportamentului sexual indusă de experiență. În mod specific, reducerea transcripției mediată de ΔFosB a atenuat experiența indusă de facilitarea motivației și performanței sexuale, în timp ce supraexprimarea ΔFosB în NAC a provocat o facilitare sporită a comportamentului sexual, în ceea ce privește creșterea performanței sexuale, cu mai puțină experiență. Împreună, concluziile actuale susțin ipoteza că ΔFosB este un mediator molecular critic pentru plasticitatea neuronală și comportamentală pe termen lung indusă de experiența sexuală.

Constatările actuale extind studiile anterioare care demonstrează experiența sexuală indusă de ΔFosB la NAc la șobolanii de sex masculin (Wallace et al. 2008) și hamsteri de sex feminin (Hedges et al. 2009). Wallace și colab. (2008) a arătat că rAAV-Exprimarea ΔFosB în comportamentul sexual îmbunătățit la NAc la animalele naivă sexuală în timpul primei sesiuni de împerechere, după cum rezultă din mai puține intromizări la ejaculare și intervale mai scurte de post-ejaculare, dar nu au avut efect asupra bărbaților experimentați sexual (Wallace et al. 2008).

În contrast, studiul actual nu a demonstrat efecte ale supraexprimării ΔFosB la bărbații naivi sexuali în timpul primului test, ci mai degrabă în timpul și după dobândirea experienței sexuale. Expresoarele ΔFosB au demonstrat performanțe sexuale crescute (eficiență crescută a copulației) comparativ cu animale GFP.

În plus, studiul actual a testat rolul ΔFosB prin blocarea transcripției mediate de ΔFosB utilizând un vector viral care exprimă ΔJunD. Prevenirea creșterii induse de experiență în expresia ΔFosB a împiedicat facilitarea motivării sexuale a experienței induse de experiență (latențe crescute la montură și intromisie), precum și performanțele sexuale (latența crescută a ejaculării și numărul de vârfuri) și expunerea ulterioară pe termen lung a comportamentului sexual facilitat.

Prin urmare, aceste date sunt primele care indică un rol obligatoriu al ΔFosB în dobândirea facilității de comportament sexual induse de experiență. Mai mult, aceste date arată că ΔFosB este, de asemenea, implicat critic în exprimarea pe termen lung a comportamentului facilitat de experiență. Propunem ca această expresie pe termen lung a comportamentului facilitat să reprezinte o formă de memorie pentru recompensa naturală, prin urmare, ΔFosB în NAc este un mediator al memoriei de recompensă. Experiența sexuală a crescut, de asemenea, nivelurile ΔFosB în VTA și mPFC, zone implicate în recompensă și memorie (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Studiile viitoare sunt necesare pentru a elucida o semnificație potențială a reglementării ΔFosB în aceste domenii pentru memoria de recompensă.

Expresia ΔFosB este foarte stabilă, având astfel un potențial mare ca mediator al adaptărilor persistente ale creierului după perturbări cronice (Nestler et al. 2001). Sa demonstrat că ΔFosB crește treptat în NAc față de injecțiile multiple cu cocaină și persistă timp de până la câteva săptămâni (Speranţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994). Aceste schimbări în exprimarea NAc ΔFosB sunt asociate cu sensibilizarea la recompensă și dependența de droguri (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). În schimb, rolul ΔFosB în medierea recompensei naturale a fost subestimat. Au apărut dovezi recente care sugerează că inducerea ΔFosB în NAc este implicată în recompense naturale. Nivelurile ΔFosB sunt în mod similar crescute în NAc după aportul de zaharoză și roata. Exprimarea excesivă a ΔFosB în striatum utilizând șoareci bitransgenici sau vectori virali la șobolani determină o creștere a aportului de zaharoză, o motivație sporită pentru alimente și o alergare sporită a roților spontane (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Datele actuale adaugă substanțial la aceste rapoarte și susțin în continuare ideea că ΔFosB este un mediator critic pentru întărirea recompensei și memoria naturală a recompensei.

ΔFosB poate media întărirea indusă de experiența comportamentului sexual prin inducerea plasticității în sistemul mezolimbic. Într-adevăr, experiența sexuală provoacă o serie de schimbări de durată ale sistemului mezolimbic (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; pitchers et al. 2010). nivelul de comportament, un răspuns locomotor sensibilizat la amfetamină și o recompensă îmbunătățită a amfetaminei au fost demonstrate la șobolanii de sex masculin cu experiență sexualăpitchers et al. 2010); un răspuns locomotor alterat la amfetamină a fost observat, de asemenea, la hamsteri de sex feminin (Bradley & Meisel 2001). Mai mult, au fost găsite creșteri ale numărului de coloane dendritice și complexitatea arborilor dendritici după o perioadă de abstinență datorată experienței sexuale la șobolani masculi (pitchers et al. 2010). Studiul actual sugerează că ΔFosB poate fi un mediator molecular specific al rezultatelor pe termen lung ale experienței sexuale. De acord, sa demonstrat recent că ΔFosB este important pentru inducerea modificărilor coloanei dendritice ca răspuns la administrarea cocainei cronice (Dietz et al. 2009; Labirint et al. 2010).

Nu este clar care neurotransmițător (i) din amonte este responsabil de inducerea ΔFosB în NAc, dar DA a fost propus ca un candidat (Nye et al. 1995). Practic, toate drogurile de abuz, inclusiv cocaina, amfetamina, opiaceele, canabinoidele și etanolul, precum și recompensele naturale, măresc ΔFosB în NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Ambele medicamente de abuz și recompense naturale măresc concentrația DA sinaptică în NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). Inducția ΔFosB prin medicamente de abuz a fost demonstrată în celulele care conțin receptorul DA, iar ΔFosB indus de cocaină este blocat de un antagonist al receptorului D1 DAt (Nye et al. 1995). Prin urmare, eliberarea DA este ipoteză pentru a stimula exprimarea ΔFosB și, prin urmare, să medieze neuroplasticitatea legată de recompensă. Sprijinind în continuare ideea că nivelurile ΔFosB sunt dependente de DA este constatarea că zonele creierului în care experiența sexuală alterează nivelul ΔFosB primesc o contribuție puternică dopaminergică din VTA, incluzând cortexul prefrontal medial și amigdala bazolaterală.

Totuși, în contrast, ΔFosB nu este crescut în zona preoptică mediană, chiar dacă această zonă primește intrare dopaminergică, deși din surse hipotalamice (Miller & Lonstein 2009). Sunt necesare studii viitoare pentru a testa dacă expresia ΔFosB indusă de împerechere și efectele experienței sexuale asupra motivației și performanței sexuale depind de acțiunea DA. Rolul DA pentru recompensa sexuală la șobolanii de sex masculin nu este în prezent clar (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Există dovezi ample că DA este eliberat în NAc în timpul expunerii la o femeie sau în împerechere (Damsma et al. 1992) și neuronii DA sunt activate în timpul comportamentului sexual (Balfour et al. 2004). Cu toate acestea, injecțiile sistemice ale antagonistului receptorului DA nu împiedică preferința locului condiționat condiționat indusă de recompensa sexuală (Agmo & Berenfeld 1990) și ipoteza că DA este critică pentru consolidarea indusă de experiență a împerecherii nu este testată.

De asemenea, este neclar cu privire la mediatorii din aval ai efectelor ΔFosB asupra comportamentului sexual. Sa demonstrat că ΔFosB acționează atât ca un activator transcripțional, cât și ca represor prin intermediul unui mecanism dependent de AP-1 (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Numeroase gene țintă au fost identificate, incluzând gena c-fos (Speranţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dinorfina (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), Subunități NFκB (Ang et al. 2001), Ond subunitatea receptorului de glutamat AMPA GluR2 (Kelz et al. 1999). Rezultatele actuale demonstrează că nivelurile de c-Fos induse de împerechere au fost reduse prin experiența sexuală din zonele creierului cu ΔFosB crescut (NAc și ACA). Supresia c-Fos apare dependentă de perioada de la ultima asociere de împerechere și repetare, ca în studiile anterioare, o astfel de scădere a c-Fos nu a fost detectată la șobolani masculi testați săptămâna 1 după sesiunea de împerechere finalăBalfour et al. 2004) sau după experiența sexuală care constă doar într-o singură sesiune de împerechere (Lopez & Ettenberg 2002). Mai mult, concluzia actuală este conformă cu dovezile că ΔFosB reprimă gena c-fos după expunerea cronică la amfetamină (Renthal et al. 2008). În concordanță cu aceste constatări, inducerea mai multor mARN-uri genetice imediate (c-fos, fosB, c-jun, junB și zif268) a fost redusă după injectările repetate de cocaină în comparație cu injecțiile acute cu medicamenteSperanţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994) și c-fos indusă de amfetamină a fost suprimată în urma retragerii din administrarea cronică de amfetamină (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Relevanța funcțională a reglementării descrescătoare a expresiei c-Fos după tratamentul cronic de droguri sau experiența sexuală rămâne neclară și sa sugerat a fi un mecanism homeostatic important pentru a regla sensibilitatea animalului la expunerea repetată a recompensării (Renthal et al. 2008).

În concluzie, studiul actual demonstrează că ΔFosB în NAc joacă un rol esențial în memoria recompenselor sexuale, susținând posibilitatea ca ΔFosB să fie importantă pentru întărirea generală a recompensei și pentru memorie. Constatările din studiul actual clarifică în continuare înțelegerea noastră despre mecanismele celulare și moleculare care mediază recompensa și motivația sexuală și adaugă la un corp de literatură care arată că ΔFosB este un jucător important în dezvoltarea dependenței, demonstrând un rol pentru ΔFosB în recompensa naturală armare.

Material suplimentar

Supunem Fig S1-S4 și Tabelul S1-S2

Mulţumiri

Aceasta cercetare a fost sustinuta de subventii de la Institutul Canadian de Sanatate Cercetare la LMC, Institutul National de Sanatate Mintala la EJN, si Stiinte naturale si inginerie Consiliul de Cercetare din Canada la KKP si LMC.

REFERINȚE

  1. Agmo A. Comportamentul sexual al șobolanilor. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Proprietățile de întărire a ejacularii la șobolanii masculi: rolul opioidelor și al dopaminei. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Inducerea factorului nuclear-kappaB în nucleul accumbens prin administrarea cocainei cronice. J Neurochem. 2001; 79: 221-224. [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamentul sexual și indicatorii de mediu asociați sexului activează sistemul mezolimbic la șobolanii masculi. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Efectele expunerii cronice la cocaină sunt reglementate de proteina neuronală Cdk5. Natură. 2001; 410: 376-380. [PubMed]
  6. Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. Leziunile 6-hidroxidopamină la hamsterii de sex feminin (Mesocricetus auratus) elimină efectele sensibilizate ale experienței sexuale asupra interacțiunilor copulative cu bărbații. Behav Neurosci. 2005; 119: 224-232. [PubMed]
  7. Bradley KC, Meisel RL. Inducerea comportamentului sexual al c-Fos în nucleul accumbens și activitatea locomotorie stimulată de amfetamină este sensibilizată de experiența sexuală anterioară la hamsterile siriene femele. J Neurosci. 2001; 21: 2123-2130. [PubMed]
  8. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mecanisme dependente de proteazom și independente pentru destabilizarea FosB: identificarea domeniilor FosB degron și implicațiile pentru stabilitatea DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
  9. Chao J, Nestler EJ. Neurobiologia neurologică a dependenței de droguri. Annu Rev Med. 2004; 55: 113-132. [PubMed]
  10. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Reglarea proteinelor delta FosB și FosB prin tratamente de convulsii electroconvulsive și tratamente cu cocaină. Farmacologie moleculară. 1995; 48: 880-889. [PubMed]
  11. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Supraexpresia specifică de tip celular de tip Striatal a DeltaFosB sporește stimularea cocainei. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  12. Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Reglementarea centrală a ejaculării. Physiol Behav. 2004; 83: 203-215. [PubMed]
  13. Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Comportamentul sexual crește transmiterea dopaminei în nucleul accumbens și striatum de șobolani masculi: comparație cu noutatea și locomoția. Behav Neurosci. 1992; 106: 181-191. [PubMed]
  14. Dietz DM, labirint I, mecanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Rolul esențial al ΔFosB în reglarea cocainei a coloanei dendritice a neuronilor nucleului accumbens. Societatea pentru Neuroștiințe Rezumat. 2009
  15. Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Pastile de amestec: analiza efectelor drogurilor asupra comportamentului sexual la om și modele animale. Hormonul Behav. 2009 În presă.
  16. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Supraexpresia Delta FosB în nucleul accumbens sporește recompensa sexuală la hamsterii sirieni de sex feminin. Genele Brain Behav. 2009; 8: 442-449. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  17. Hernandez L, Hoebel BG. Hrănirea și stimularea hipotalamică măresc cifra de afaceri a dopaminei în accumbens. Physiol Behav. 1988a; 44: 599-606. [PubMed]
  18. Hernandez L, Hoebel BG. Recompensa alimentară și cocaina măresc dopamina extracelulară în nucleul accumbens măsurată prin microdializă. Life Sci. 1988b; 42: 1705-1712. [PubMed]
  19. Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Rolul esențial al genei fosB în acțiunile moleculare, celulare și comportamentale ale convulsiilor cronice electroconvulsive. J Neurosci. 1998; 18: 6952-6962. [PubMed]
  20. Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Distrugerea genei locale în creier utilizând interferența ARN-mediată virale. Nat Med. 2003; 9: 1539-1544. [PubMed]
  21. Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Reglarea exprimării genetice imediate și legarea AP-1 în nucleul accumbens de șobolan prin cocaină cronică. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1992; 89: 5764-5768. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Inducerea unui complex AP-1 de lungă durată compus din proteine ​​modificate Fos în creier prin cocaină cronică și alte tratamente cronice. Neuron. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  23. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Conduita sexuală la bărbați. Hormonul Behav. 2002; 1: 1-139.
  24. Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Tratamentele acute și cronice de amfetamină reglementează în mod diferit nivelele ARN ale neuropeptidelor messenger și imunoreactivitatea Fos în neuronii striatal de șobolan. Neuroscience. 1995; 65: 1041-1050. [PubMed]
  25. Jenkins WJ, Becker JB. Creșteri dinamice ale dopaminei în timpul copulației ritmice la șobolanii femele. Eur J Neurosci. 2003; 18: 1997-2001. [PubMed]
  26. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Exprimarea factorului de transcripție deltaFosB în creier controlează sensibilitatea la cocaină. Natură. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  27. Lopez HH, Ettenberg A. Expunerea la șobolani femele produce diferențe în inducerea c-fos între șobolanii masculi naivi și cei experimentați. Brain Res. 2002; 947: 57-66. [PubMed]
  28. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Rolul esențial al histonmetiltransferazei G9a în plasticitatea indusă de cocaină. Ştiinţă. 2010; 327: 213-216. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  29. McClung CA, Nestler EJ. Reglementarea expresiei genelor și a recompensei cocainei de către CREB și DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. [PubMed]
  30. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: un comutator molecular pentru adaptarea pe termen lung în creier. Brain Res Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
  31. Miller SM, Lonstein JS. Proiecții dopaminergice în zona preoptică mediană a șobolanilor postpartum. Neuroscience. 2009; 159: 1384-1396. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  32. Morgan JI, Curran T. Stimularea-transcripție de cuplare în neuroni: rolul genelor celulare imediate-devreme. Tendințe Neurosci. 1989; 12: 459-462. [PubMed]
  33. Nestler EJ. Mecanisme moleculare ale dependenței de droguri. Neuropharmacology. 2004; 47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
  34. Nestler EJ. Neurobiologia dependenței de cocaină. Știință Pract Perspect. 2005; 3: 4-10. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  35. Nestler EJ. Revizuire. Mecanisme transcripționale ale dependenței: rolul DeltaFosB. Philos Trans R. Soc Lond. B Biol Sci. 2008; 363: 3245-3255. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  36. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: un comutator molecular susținut pentru dependență. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2001; 98: 11042-11046. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  37. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Studii farmacologice privind reglarea inducției cronice asociate cu FOS cu cocină în striatum și nucleul accumbens. J. Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  38. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB în nucleul accumbens reglează comportamentul instrumental și motivația armată de alimente. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. [PubMed]
  39. Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Explicarea specifică a regiunii cerebrale a unui mutant negativ dominant al c-Jun la șoarecii transgenici reduce sensibilitatea la cocaină. Brain Res. 2003; 970: 73-86. [PubMed]
  40. Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB se acumulează într-o populație de celule GABAergic în coada posterioară a zonei tegmentale ventrale după tratamentul psihostimulant. Eur J Neurosci. 2005; 21: 2817-2824. [PubMed]
  41. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Inducția deltaFosB în structurile cerebrale legate de recompense după stresul cronic. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. [PubMed]
  42. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Modele distincte ale inducției DeltaFosB în creier prin medicamente de abuz. Synapse. 2008; 62: 358-369. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  43. Pfaus JG. Căile de dorință sexuală. J Sex Med. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  44. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condiționarea și comportamentul sexual: o analiză. Hormonul Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  45. Phillips AG, Vacca G, Ahn S. O perspectivă de sus în jos privind dopamina, motivația și memoria. Pharmacol Biochem Behav. 2008; 90: 236-249. [PubMed]
  46. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitatea în sistemul mesolimbic indusă de recompensa naturală și abstinența recompensă ulterioară. Biol Psihiatrie. 2010; 67: 872-879. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  47. Rentale W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB mediază desensibilizarea epigenetică a genei c-fos după expunerea cronică la amfetamină. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  48. Rentalul W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Nestler EJ. Analiza genomului asupra reglajului cromatinei de cocaină relevă un rol pentru sirtuine. Neuron. 2009; 62: 335-348. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  49. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Răsplata sexuală la șobolanii masculi: efectele experienței sexuale asupra preferințelor locului condiționat asociate cu ejacularea și intromisele. Hormonul Behav. 2009; 55: 93-97. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  50. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforilarea lui DeltaFosB mediază stabilitatea sa in vivo. Neuroscience. 2008
  51. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Reglarea stabilității DeltaFosB prin fosforilare. J Neurosci. 2006; 26: 5131-5142. [PubMed]
  52. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Influența DeltaFosB asupra nucleului accumbens asupra comportamentului natural al recompensei. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  53. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reglează rularea roților. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  54. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Inducția DeltaFosB în cortexul orbitofrontal mediază toleranța la disfuncția cognitivă indusă de cocaină. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. [PubMed]
  55. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Un rol esențial al DeltaFosB în nucleul accumbens în acțiunea morfinei. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. [PubMed]
  56. Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos facilitează dobândirea și dispariția modificărilor persistente induse de cocaină. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]