J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.
Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM.
Источник
Кафедра анатомии и клеточной биологии, Школа медицины и стоматологии им. Шулиха, Университет Западного Онтарио, Лондон, Онтарио N6A5C1, Канада.
Абстрактные
Пользователи метамфетамина (Meth) сообщают о том, что имеют повышенное сексуальное удовольствие, многочисленные сексуальные партнеры и участвуют в незащищенном сексе из-за потери тормозного контроля. Это навязчивое сексуальное поведение способствует увеличению распространенности инфекций, передаваемых половым путем, но нейронная основа для этого неизвестна. Ранее мы установили парадигму для компульсивного сексуального поведения у самцов крыс, в которых висцеральная болезнь, вызванная хлоридом лития, спаривалась с сексуальным поведением (Davis et al., 2010, Frohmader et al., 2010a). В настоящем исследовании изучалось влияние повторного приема метастазов на сексуальную активность, навязчивое сексуальное поведение, а также на секс или вознаграждение за метам. Во-первых, результаты показали, что семь ежедневных администраций 2 мг / кг, но не 1 мг / кг, Meth увеличивали задержки для начала спаривания. Это ухудшение было очевидным 30 мин после последнего введения Meth, но рассеивалось после 1 или 7 d последующего абстиненции. Повторное количество 1 мг / кг. Метное воздействие приводило к вынужденному сексуальному поведению 2 недель после последнего введения Meth. Этот эффект зависел от того, что введение Meth одновременно с сексуальным опытом и не наблюдалось у сексуально опытных животных, которые получали только Meth. Более того, одновременный метод Meth и сексуальный опыт улучшали условное предпочтение (CPP) для Meth и для одновременного Meth и спаривания по сравнению с Meth или спариванием в одиночку, Напротив, CPP для спаривания в одиночку уменьшалась. Вместе эти данные указывают на то, что связь между употреблением наркотиков и спариванием может потребоваться для выражения компульсивного сексуального поведения и коррелируется с увеличением вознаграждения за одновременное выявление и спаривание Мет.
Введение
Заболевания, связанные с сексуальным здоровьем в популяциях наркоманов, повышают осведомленность о воздействии наркотиков на сексуальное поведение, поскольку хроническое употребление наркотиков связано с небезопасной сексуальной практикой, приводящей к увеличению распространенности инфекций, передаваемых половым путем, включая вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) (Кроу и Джордж, 1989; Пег и Беленко, 2001; Sánchez et al., 2002; Raj et al., 2007; Fisher et al., 2011). Эти эффекты наркотиков на сексуальное поведение хорошо документированы для психостимулятора метамфетамина (Meth). Пользователи Meth часто сообщают о повышенном сексуальном желании, пробуждении и удовольствии и определяют эти факторы в качестве основной мотивации для употребления наркотиков (Semple и др., 2002; Schilder и др., 2005; Зеленый и Халкит, 2006). Более того, злоупотребление Meth обычно связано с потерей ингибирующего контроля над половым поведением или сексуально компульсивным поведением (Halkitis и др., 2001; McKirnan и др., 2001; Rawson и др., 2002; Зеленый и Халкит, 2006) и увеличение распространенности ВИЧ (Frosch et al., 1996; Halkitis и др., 2001; Парсонс и Халкит, 2002).
Отчеты о человеке, демонстрирующие использование методов использования метаданных в качестве предиктора поведения в отношении сексуального риска, основаны на самоотчетах хронических пользователей Meth, которые не имеют надежного измерения взаимосвязи между использованием методов и сексуальным поведением (Frohmader и др., 2010b). Таким образом, для понимания сложной связи между Мет и сексуальным поведением требуется исследование изменений, вызванных Мет в сексуальном поведении в контролируемых экспериментальных условиях с использованием модели животных.
Недавно наша лаборатория изучила влияние острого Meth на компульсивное половое возбуждение у самцов крыс (Frohmader и др., 2010a). В этих исследованиях использовалась условная парадигма сексуального отвращения, в которой самцы крыс научились ассоциировать спаривание с последующим висцеральным заболеванием (Peters, 1983; Agmo, 2002). Как только была установлена связь между спариванием и аверсивным стимулом, животные не инициировали спаривание (Дэвис и др., 2010; Frohmader и др., 2010a). Предварительная обработка метаном одной недели инъекции до кондиционирования нарушала получение запрещенных сексуальных реакций (Frohmader и др., 2010a). Таким образом, самцы-крысы, обработанные метанами, искали сексуальное поведение, хотя спаривание было связано с аверсивным стимулом; это было названо неадаптивным или компульсивным спариванием.
Поскольку предыдущие исследования, в которых анализировались эффекты острой инъекции наркотиков и исследования, в которых изучалось влияние повторного Meth на сексуальное поведение мужчин-крыс, было ограничено, основная цель текущего исследования состояла в том, чтобы исследовать влияние повторного введения Meth на различные аспекты сексуального поведения, включая производительность, компульсивный поиск пола и вознаграждение. Во-первых, эффекты повторного Meth на спаривание были проверены после введения лекарственного средства и после периода абстиненции препарата, чтобы отличить краткосрочные и долгосрочные эффекты Meth от сексуальной функции. Затем были исследованы эффекты повторного введения метастазов в отношении неадаптивного полового поведения, реализующего парадигму условного секса. Кроме того, было определено, являются ли научные ассоциации между повторным воздействием Мет и сексуальным поведением существенными для воздействия Meth на неадаптивное сексуальное поведение. Наконец, было проверено, приводит ли повторное воздействие Meth к усиленной награде за Meth и / или спаривание, что определяется парадигмами предпочтения условных мест (CPP).
Материалы и методы
Тематика
Взрослые самцы крыс Sprague Dawley (210-225 g) были получены из Charles River Laboratories и размещены в однополых парах в стандартных клетках из плексигласа (домашние клетки), содержащие куски трубы из ПВХ для экологического обогащения. Животные размещались в помещении, поддерживаемом 12 / 12 h обратным светом / темным циклом (выключается при 11: 00 AM) с доступными продуктами питания и водой вволю, Все испытания проводились во время темного цикла при красном освещении. Самцы стимулов (200-225 g, Charles River Laboratories), используемые для сексуального поведения, подвергались двусторонней овариэктомии и получали подкожный имплантат, содержащий 5% эстрадиолбензоат и 95% холестерина. Чтобы индуцировать сексуальную восприимчивость, женщинам вводили 0.5 мг прогестерона в 0.1 мл кунжутного масла (sc) 4 h до сексуального поведения. Экспериментальные процедуры были одобрены Комитетом по уходу за животными в Университете Западного Онтарио и Комитетом по уходу и использованию животных Мичиганского университета Мичигана и были согласованы с руководящими принципами, изложенными Канадским советом по уходу за животными и Национальными институтами здравоохранения.
Экспериментальные проекты
Сексуальное поведение
В текущем эксперименте были исследованы эффекты повторного Meth на сексуальную активность и мотивацию сразу после инъекции препарата и после периода абстиненции. Тридцать три самца крысы приобрели сексуальный опыт в отдельных клетках для испытаний (спаривание аренов, 60 × 45 × 50 см), содержащих чистые постельные принадлежности в течение пяти сеансов спаривания в два раза в неделю. Во время каждого сеанса спаривания мужчинам разрешалось спариваться с восприимчивой самкой до появления одной эякуляции или для 1 h, в зависимости от того, что произошло раньше. Через неделю после последнего сеанса спаривания самцы привыкли к экспериментальным процедурам и получали подкожную инъекцию 1 мл / кг физиологического раствора в течение трех последовательных дней. После каждой инъекции животных помещали в камеры локомоторной активности из плексигласа (40.5 × 40.5 см, Med Associates), оснащенные массивами фотоэлементов 16 × 16; локомоторная активность регистрировалась в течение 30 мин. В дополнение к регистрации амбулаторного поведения после инъекции лечения, размещение мужчин в локомоторных камерах обеспечивало среду, связанную с лекарственными средствами, отличную от активности спаривания. Затем самцы получали ежедневную инъекцию 1 или 2 мг / мл / кг Meth или носителя (физиологический раствор, 1 мл / кг; n = 11 каждый) для 7 последовательных дней. После каждой инъекции самцы помещали в камеры локомоторной активности, а локомоторную активность регистрировали в течение 30 мин, после чего они возвращались в клетки-носители. В последний день введения Meth, самцы были удалены из камеры локомоторной активности после 30 мин и помещены на спаривающую арену, чтобы проверить влияние Meth на сексуальное поведение. Животных снова тестировали на сексуальное поведение на спаривающих аренах после 1 d или 1 недели абстиненции.
Во время сеансов спаривания наблюдались и регистрировались стандартные параметры для сексуального поведения, в том числе латентные периоды (время от введения женского пола до первого креста) и введение (время от введения женского до первого введения), которые указывают на сексуальную мотивацию (Халл и др., 2002), а также латентность к эякуляции (время от первого введения до эякуляции), количество вершин и интрогментов перед эякуляцией и период послеякуляции, которые являются показателями сексуальной активности (Халл и др., 2002; Pfaus, 2009). Различия между группами определялись по каждому параметру сексуального поведения с использованием непараметрического анализа Краскела – Уоллиса и анализа Данна. Постфактум сравнений, при значительных уровнях 0.05.
Локомоторная активность
Двигательная активность после каждой инъекции мета была проанализирована с использованием программного обеспечения для анализа Med Associates как расстояние, пройденное с интервалом в 5 минут. Групповые различия исследовали с помощью непараметрического анализа Краскела – Уоллиса и анализа Данна. Постфактум сравнения. Чтобы исследовать сенсибилизацию, вызванную Meth, индуцированную метадом активность в течение последнего 10 мин теста сравнивали между первым и седьмым днями инъекции в каждой группе лечения дозами лекарственного средства, используя парную t тесты. Уровень значимости 0.05 применялся ко всем сравнениям.
Успокойное сексуальное отвращение
Эксперимент 1.
Во-первых, самцы крыс 50 были приучены к физиологическим инъекциям в течение трех последовательных дней, а самцы приобретали сексуальный опыт в течение трех сеансов спаривания. Перед каждым сеансом спаривания животным вводили либо 1 мг / кг Meth, либо 1 мл / кг физиологического раствора (sc), помещали на спаривающие арены, а спустя 30 через минуту им позволяли спариваться с восприимчивой самкой до эякуляции или 1 h. Параметры для сексуального поведения регистрировались и анализировались (см. Сексуальное поведение, выше). Две недели спустя животные подверглись условной парадигме отвращения. Самцы подразделялись на четыре экспериментальные группы в соответствии с предварительной обработкой (Meth или физиологический раствор) и кондиционированием [хлорида лития (LiCl) -парыми или -независимыми]; группы были физиологически непарыми (n = 12), Meth-непарный (n = 12), физиологический раствор (n = 13) и Meth-pair (n = 13). Парадигма условного отвращения состояла из восьми последовательных клинических испытаний 2. В течение первого дня все самцы помещали на спаривающую арену на период привыкания 10 min, после чего вводили восприимчивую самку. Женщины были напудрены, смазав миндальное масло на шее и основание хвоста перед спариванием, поскольку показали, что обонятельные сигналы помогают мужскому подходу и усиливают кондиционирование (Лоуренс и Кифер, 1987; Agmo, 2002). Самцам разрешалось спариваться в течение 30 мин или до одной эякуляции. Если интромиссии не произошли в течение первого 15 мин, спаривание было прекращено. Через одну минуту после эякуляции или окончания испытания мужчинам вводили внутрибрюшинную инъекцию 127.2 мг / кг 10 мл / кг LiCl (парные самцы) или физиологический раствор (непарные самцы). LiCl или физиологический раствор вводили независимо от того, произошло ли спаривание. На следующий день непарные самцы получали инъекцию LiCl 10 мл / кг, в то время как парные мужчины получали физиологический раствор. После инъекций животных возвращали в домашнюю клетку.
Эксперимент 2.
Чтобы проверить, зависят ли эффекты предварительной обработки Meth от условного отторжения от секреции одновременно с одновременным воздействием Meth и спариванием или только с помощью Meth, был проведен дополнительный эксперимент. Мужские крысы (n = 20) получил сексуальный опыт в течение пяти сеансов спаривания, но без приема Meth или солевого раствора (n = 10 каждый). Вместо этого, через неделю 1 после сексуального опыта, они получили семь раз в день инъекций либо Meth (1 мг / кг, sc), либо физиологического раствора, а спустя 2 недели были подвергнуты парадигме условного отторжения (см. Эксперимент 1, выше).
Для обоих экспериментов и во время каждого экспериментального исследования были проанализированы параметры для сексуального поведения, а групповые различия были определены для каждого экспериментального исследования с использованием двухстороннего ANOVA (факторы: предварительная обработка Meth / saline, кондиционирование). Пирсон χ2 анализ использовался для сравнения различий между группами в процентах мужчин, которые отображали монтировки, интромиссии или эякуляцию в каждом кондиционном следе.
Условное расположение места
Чтобы проверить, влияет ли предварительная обработка метамфетаминов на вознаграждение за метаморфозы или сексуальное поведение, были проведены эксперименты с CPP. Аппарат с тремя отсеками (Med Associates), содержащий две большие внешние камеры (28 × 22 × 21 см) с различимыми визуальными и тактильными сигналами и разделенные небольшим центральным отсеком (13 × 12 × 21 см), использовался для всех экспериментов по CPP. . Двери по обеим сторонам центрального отсека разделяли камеры и могли подниматься, чтобы животные могли свободно перемещаться по всему аппарату, или опускались, чтобы ограничить их определенным пространством. Аппарат был снабжен фотопучками для измерения времени пребывания в каждой камере. В первый день было проведено 15-минутное предварительное испытание для определения первоначального предпочтения камеры каждого животного, в результате чего каждому животному позволяли свободно перемещаться между камерами аппарата CPP. Между экспериментальными группами не было обнаружено значительных предпочтений ни в одной из камер. Животные были исключены из исследования, если они демонстрировали расширенное предпочтение определенной камеры (разница более 120 с; показано менее 10% субъектов). Кондиционирование проводилось в течение 2 и 3 дней. Во время кондиционирования первоначально нежелательная камера (парная камера) была объединена с манипуляцией с вознаграждением в течение 30 минут. Первоначально предпочтительная камера (непарная камера) была спарена с управляющей манипуляцией. Порядок, в котором животных помещали в парные и непарные камеры, уравновешивался в каждой экспериментальной группе. Посттест, процедурно идентичный предварительному, был проведен на четвертый и последний день.
Эксперимент 1.
Во-первых, самцы крыс 50 были приучены к физиологическим инъекциям в течение трех последовательных дней, а самцы приобретали сексуальный опыт в течение трех сеансов спаривания. Во время каждого сеанса спаривания животных вводили либо 1 мг / кг Meth, либо 1 мл / кг физиологического раствора (sc), помещали в тестовые клетки, а спустя 30 мин, позволяли спариваться с восприимчивой самкой до эякуляции или 1 h. Параметры для сексуального поведения регистрировались и анализировались (для описания см. Сексуальное поведение, выше). Через неделю животных распределяли по четырем экспериментальным группам, подходящим для лечения наркозависимости и сексуальной активности для тестирования CPP. При кондиционировании самкам вводили либо Meth, либо физиологический раствор (соответствующий предшествующему лечению наркотиками), а спустя 30 мин было разрешено спариваться до эякуляции. Через минуту после эякуляции животное помещали в парную камеру. Непарная камера была связана с инъекцией (Meth или физиологическим раствором) или спариванием без инъекции. После теста postteest оценка предпочтения (процент времени, проведенного в парной камере во время предварительного теста и посттеста, рассчитанный как время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарной камере × 100) и CPP-оценка (эксперимент 1; разница в время, проведенное в парной камере во время посттеста минус предварительный осмотр) были рассчитаны для каждого испытуемого. Оценки предпочтений сравнивались в экспериментальных группах с использованием парных t тесты и оценки CPP сравнивались между экспериментальными группами с использованием однофакторного дисперсионного анализа и критерия наименьшего значимого различия Фишера для Постфактум сравнения, все с уровнями доверия 95%.
Эксперимент 2.
Чтобы проверить, были ли эффекты предварительной обработки метана на CPP для Meth или спаривания зависели от одновременного воздействия Meth и спаривания или из-за только Meth, был проведен дополнительный эксперимент. Самцы крыс получали Meth (1 мг / кг) и спаривались одновременно в течение 4 дней подряд (n = 10). Две контрольные группы оставались сексуально наивными и получали либо Meth, либо физиологический раствор (n = 10 каждый). Через неделю была проведена CPP для Meth. Все мужчины получали инъекцию Meth в парной камере, и солевая инъекция была связана с непарной камерой. Оценки предпочтений рассчитывали и сравнивали в экспериментальных группах с использованием парных t тесты с уровнем значимости 0.05.
Эксперимент 3.
Чтобы проверить, является ли одновременное воздействие Meth и спаривание критическим для измененной сексуальной награды, проводилось исследование спаривания CPP. Самцы крыс получали либо Meth (1 мг / кг), либо физиологический раствор одновременно с спариванием в течение четырех последовательных дней (n = 10 каждый). Через неделю была проверена CPP для сексуального поведения. Все самцы помещали в парную камеру после спаривания, и спаривание не было связано с непарной камерой. Оценки предпочтений рассчитывали и сравнивали в экспериментальных группах с использованием парных t тесты с уровнем значимости 0.05.
Умеренное отвращение к месту
Чтобы проверить, влияет ли воздействие Мет на чувствительность к индуцированной LiCl болезнью, был проведен эксперимент с отклонением условного места (CPA). Тест CPA проводился в течение первой половины темного периода с использованием того же устройства, что и для CPP-экспериментов (см. Раздел «Предпочтение условного места» выше). В течение трех последовательных дней самцы крыс приобретали сексуальный опыт одновременно с Meth (1 мг / кг) или физиологическим раствором (n = 10 каждый). Через неделю все мужчины получали инъекцию LiCl (10 мл / кг, ip) в паре с первоначально предпочтительной камерой, тогда как эквивалентная доза физиологического раствора была связана с первоначально непреднамеренной камерой. После теста posttest средний балл (процент времени, проведенного в парной камере во время предварительного теста и посттеста, рассчитанный как время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарной камере × 100) и показатель CPA (разница во времени, проведенном в парная камера во время посттеста минус предварительный тест) были рассчитаны для каждого испытуемого. Оценки предпочтений сравнивались в экспериментальных группах с использованием парных t тестов, в то время как оценки CPA сравнивались между экспериментальными группами с использованием непарных t тесты, все с уровнем значимости 0.05.
Итоги
Сексуальное поведение
Meth значительно повлиял на инициирование сексуального поведения при тестировании спаривания 30 мин после последней инъекции препарата. Этот эффект был дозозависимым при 2 мг / кг, но не 1 мг / кг, Meth. Мет значительно увеличил латентность монтирования и затухания (p = 0.001 и 0.002 соответственно) по сравнению с контролем солевого раствора (Рис 1A). Meth не влиял на процент мужчин, которые инициировали поведение, и 100% мужчин спаривались во всех трех группах лечения. Meth не оказывал долгосрочного воздействия на инициирование сексуального поведения, поскольку мужчины с мета-обработанным метаном не проявляли измененного поведения при поведении по сравнению с контрольным контролем солевого раствора, когда спаривание тестировалось во время дней абстиненции в отношении лекарств 1 и 7 (Рис 1B,C). Наконец, Meth не влиял на сексуальную активность в любое время, так как не было никаких последствий для латентности для эякуляции (Рис 1) или числа монтировок и интродукций (данные не показаны). Таким образом, повторное снижение уровня ИМ после спаривания при тестировании вскоре после введения, но не оказало долгосрочного воздействия на сексуальную мотивацию или эффективность.
Эффекты повторного Meth на сексуальном исполнении. А-С, Латентности для монтирования (ML), интромации (IL) и эякуляции (EL) после введения 0, 1 или 2 мг / кг Meth 30 мин после седьмой и последней инъекции препарата (A) и дней абстиненции с лекарственными средствами 1 (B) и 7 (C). Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительные отличия от мужчин, инъецированных физиологическим раствором (p <0.05).
Локомоторная активность
Meth в дозах 1 или 2 мг / кг увеличивал локомоторную активность по сравнению с контролем (p <0.001, 1 и 2 мг / кг; Рис 2A,B). Повторное введение метастата приводило к сенсибилизированным локомоторным ответным самцам, которым вводили 1 мг / кг. Мет продемонстрировал значительно большую локомоторную активность после последней инъекции препарата по сравнению с первой инъекцией (p = 0.042; Рис 2C). Напротив, 2 мг / кг Мет привел к значительному снижению локомоторной активности в последний день по сравнению с первым днем (p = 0.009; Рис 2C), что может свидетельствовать об увеличении стереотипного поведения.
Эффекты повторного Meth на локомоторную активность. A, B, Расстояние, пройденное самцами, которым вводили 0, 1 или 2 мг / кг Meth после первого (A) и последний (B) Мет инъекции. Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительные отличия от контроля для всех групп лечения (p <0.05); #существенные различия между 1 мг / кг Meth и только контроль (p <0.05). C, Вызванный метаном сенсибилизированный локомоторный ответ. Расстояние, пройденное самцами, вводили 0, 1 или 2 мг / кг Meth после первой и последней инъекций Meth в течение последнего 10 мин записей локомоторной активности. Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительное отличие от сексуально наивных мужчин одной и той же группы лечения (p <0.05).
Успокойное сексуальное отвращение
Сексуальное поведение
Во время фазы предварительной обработки Meth эксперимента 1 сексуальное поведение не подвергалось влиянию обработки 1 мг / кг Meth во время каждой из трех последующих сеансов по сравнению с мужчинами, предварительно обработанных физиологическим раствором (Таблица 1). Эти результаты подтверждают отсутствие эффектов этой дозы Meth на сексуальное поведение, даже когда они вводятся в одной и той же среде. Более того, предварительная обработка Meth не меняла сексуального поведения в течение первого дня парадигмы кондиционирования (до спаривания LiCl; Таблица 1) или во время любого из испытаний по кондиционированию в непарных группах LiCl. Эти результаты подтверждают, что у Мет не было долгосрочных эффектов на сексуальное поведение.
Обзор сексуального поведения
Компульсивное сексуальное поведение
Эксперимент 1.
Напротив, повторное лечение методом МФ усиливало компульсивное половое влечение. При контроле, вызванные физиологическим раствором животные, условное отвращение к сексу значительно тормозило сексуальное поведение. В частности, снижение процента спаренных мужчин с LiCl, которые были установлены и введены по сравнению с непарными самцами, предварительно обработанными физиологическим раствором, были впервые выявлены на шестом (p = 0.039), и продолжалась в процессе кондиционирования 7 (p = 0.005; данные не показаны) и 8 (p <0.001; Рис 3B). Значительная разница в процентах мужчин, которые эякулировали, была впервые очевидна на четвертой (p = 0.041) и сохранялись в процессе кондиционирования (p <0.001; Рис 3C). Тем не менее, предварительная обработка метастаза повлияла на условное отторжение от секса, так как у мужчин, обработанных Meth-pretreated, в паре с LiCl, не достигло значительного ингибирования сексуального поведения до последнего кондиционного испытания по сравнению с непарными мужчинами, предварительно обработанными метанами. В частности, процентное соотношение пациентов, получавших метанол, предварительно обработанных с помощью LiCl, проявляющих интромиссии и эякуляцию, значительно снижалось только во время кондиционирования 8 (p = 0.03 и p = 0.011, соответственно). Таким образом, предварительная обработка Meth за 2 за несколько недель до начала кондиционирования привела к неадекватному или компульсивному поведению в отношении секса.
Эффекты одновременного спаривания (секса) и предварительной обработки метана при условном отторжении (Эксперимент 1). A, Экспериментальные группы включали в себя соленые (Sal) или Meth-pretreated самцы, которые получали LiCl после спаривания (парные самцы) и соленые или мета-обработанные самцы, которые получали солевой раствор после спаривания (непарные самцы). В течение второго дня каждого экспериментального исследования парные самцы получали физиологические и непарные самцы, получавшие LiCl. B, C, Процент крепления мужчин (B) и эякуляции (C) во время условного отторжения от секса после предварительной обработки Препаратом, назначаемой одновременно с сексуальным опытом. * Значительная разница с не прошедшими физиологический анализ непарными мужчинами (p <0.05); #Значительное отличие от несогласованных мужчин,p <0.05).
Эксперимент 2.
Эффекты предварительной обработки метана на условное отторжение от секса были зависимы от одновременного опыта Meth и спаривания. В частности, условное отторжение от секса не было затронуто у сексуально опытных мужчин, которые получали предварительную обработку и спаривание метана в разное время (неточно). Процентная доля предварительно обработанных с помощью LiCl мужчин, которые проявляли кресты и эякуляции, не отличалась от солевых,Рис 4). Эти данные свидетельствуют о том, что первоначальная связь между Мет и сексуальным опытом была фактором, способствующим влиянию Meth на компульсивное половое поведение.
Эффекты неконтактного спаривания (пола) и предварительной обработки метана при условном отторжении (Эксперимент 2). Процентная доля мужчин,A) и эякуляции (B) во время LiCl обусловлено отторжением от секса после предварительной обработки препарата, не связанной с сексуальным опытом. Были включены две группы: LiCl-парная, предварительно обработанная физиологическим раствором и LiCl-парным раствором, обработанная Meth.
Умеренное отвращение к месту
Дополнительные контрольные эксперименты показали, что неспособность ингибировать спаривание после предварительной обработки Meth не связана с притупленной чувствительностью к индуцированному LiCl висцеральным заболеванием, поскольку все самцы сформировали отвращение к камере, связанную с разовой дозой LiCl. В частности, как соленые, так и мета-обработанные мужчины провели значительно меньше времени в LiCl-парной камере во время посттеста по сравнению с предварительным тестированием (p = 0.037 и 0.045 соответственно; Рис 5A). Кроме того, разница времени, проведенного в LiCl-парной камере после посттеста в сравнении с предварительным тестированием, была идентичной в группах, обработанных Meth- и физиологическим раствором (Рис 5B).
Эффекты одновременного спаривания (секса) и предварительной обработки Meth на индуцированной LiCl CPA. A, B, Преференциальный балл (время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарная камера × 100; A) и показатель CPA (разница во времени, проведенном в спаренной камере во время посттеста минус предварительный тест; B) у мужчин, предварительно обработанных физиологическим раствором (Sal; sex + saline) или Meth (sex + Meth). Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительные отличия от предварительного теста в той же экспериментальной группе (p <0.05).
Условное расположение места
Experiment 1
Исследования, посвященные самоотчету, показывают, что использование метапротонов повышает сексуальное удовольствие и является основной мотивацией для употребления наркотиков (Semple и др., 2002; Schilder и др., 2005; Зеленый и Халкит, 2006). Это усиленное сексуальное удовольствие, вызванное Мет, не было проверено в модели грызунов. Поэтому парадигма CPP использовалась для проверки того, является ли сексуальное поведение с Meth более полезным, чем спаривание или введение Meth. В соответствии с предыдущими исследованиями (Агмо и Беренфельд, 1990; Pfaus и Phillips, 1991; Tenk и др., 2009), спаривание в контрольных самцах, обработанных физиологическим раствором, привело к тому, что самцы CPP проводили больше времени в половой солевой ячейке, чем камера солевого раствора во время посттеста (p = 0.001; Рис 6C,D). Кроме того, контрольные самки не отдали предпочтение половой и соляно-парной камерам над половой камерой, демонстрируя, что инъекция солевого раствора перед спариванием не влияла на сексуальную награду (Рис 6C,D). Результаты показали, что Meth увеличил CPP для секса по сравнению с одним спариванием или одним Meth. Мужчины проводили больше времени во время посттеста в сексе + Meth-pair, чем в половой комнате (p <0.001; Рис 6C) или Meth-парная камера (p = 0.02; Рис 6C) или по сравнению с контрольной группой (p = 0.002 и 0.05 соответственно; Рис 6D). Поэтому сексуальное поведение, совпадающее с Meth, представляется более полезным, чем сексуальное поведение, или только Meth в отношении животных, которые были предварительно обработаны сексуальным поведением и Meth одновременно.
Эффекты одновременного спаривания (секса) и предварительной обработки метана при спаривании и мета-индуцированной CPP (эксперимент 1). Включены четыре группы. A, Две группы получали предварительную обработку пола + физиологический раствор (Sal) и следующее лечение в парной / непарной камере: пол + физиологический раствор / пол, пол + физиологический раствор / физиологический раствор. Первая группа служила отрицательным контролем, так как физиологический раствор не должен был изменять CPP для секса. Вторая группа служила положительным контролем, так как секс должен был вызвать CPP. B, Две другие группы получали секс + предварительную обработку препарата и следующие в спаренных / непарных камерах: секс + Мет / пол или секс + Мет / Мет. Порядок, в котором животные подвергались воздействию парных и неспаренных камер, уравновешивался в каждой экспериментальной группе. C, Оценка предпочтения (время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарной камере × 100). Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительные отличия от предварительного теста в той же экспериментальной группе (p <0.05). D, Оценка CPP (разница во времени, проведенном в парной камере во время посттеста минус предварительный тест). Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительные отличия от пола + солевой / половой группы (p <0.05).
Experiment 2
Затем было определено, влияет ли одновременная предварительная обработка Meth и пола на CPP для Meth по сравнению с физиологическим раствором в непарной камере. Действительно, мета-предварительно обработанные самцы, которые спаривались одновременно с каждой инъекцией лекарственного средства, формировали предпочтение для ячейки, парной,p = 0.01; Рис 7). Напротив, самцы, которые получали повторные физиологические растворы или инъекции Meth без контекста спаривания, не проявляли повышенного предпочтения для камеры Meth-pair во время посттеста.
Эффекты одновременного спаривания (секса) и предварительной обработки Meth на Meth-индуцированной CPP (эксперимент 2). Оценка предпочтения (время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарная камера × 100) у мужчин, предварительно обработанных физиологическим раствором (Sal), Meth или сексом + Meth. Данные представлены как среднее ± SEM. * Значительное отличие от предварительного теста в пределах той же экспериментальной группы (p <0.05).
Experiment 3
Наконец, было проверено, повлияло ли одновременное лечение Meth и спаривания на CPP для спаривания в одиночку. Самцы, предварительно обработанные Meth и спариванием, не стали предпочитать сексуальное поведение, о чем свидетельствует отсутствие увеличенного времени, проведенного в половой комнате. Напротив, самцы, которые лечились физиологическим раствором и спариванием, предпочитали половую парную камеру (p = 0.003; Рис 8). Вместе эти данные свидетельствуют о том, что связь между Meth и спариванием приводит к увеличению стимулов для Meth в отсутствие спаривания и для спаривания одновременно с Meth, но уменьшает стимул для спаривания при отсутствии препарата.
Эффекты одновременного спаривания (пола) и предварительной обработки Meth на спариваемую CPP (эксперимент 3). Оценка предпочтения (время, проведенное на парной камере, деленное на время в парной + непарной камере × 100) у мужчин, предварительно обработанных сексом + физиологическим раствором (Sal) или сексом + Meth. Данные представлены как среднее ± SEM.
Обсуждение
В текущем исследовании были проанализированы эффекты повторного Meth на сексуальное поведение с особым упором на сексуальную эффективность, неадекватную или компульсивную сексуальную ориентацию, а также спаривание и / или вознаграждение за вознаграждение. Tосновной вывод этого исследования состоял в том, что предварительная обработка препарата не влияла на выражение сексуального поведения, но вызывала компульсивное сексуальное поведение в течение нескольких недель после предварительной обработки. Этот эффект на компульсивное сексуальное поведение зависит от одновременного опыта с Meth и спаривания. Кроме того, одновременная предварительная обработка Meth и mating улучшала награду Мем, но уменьшала сексуальную награду. Вместе эти исследования показывают, что связь между Meth и спариванием имеет решающее значение для развития или выражения компульсивного сексуального поведения и изменений в сексуальной и лекарственной награде.
Предварительная обработка метана при одновременном спаривании имела долгосрочные последствия для способности условной парадигмы отвращения к сексу препятствовать сексуальному поведению, Этот эффект не может быть легко объяснен дефицитом в обучении или памяти, так как мужчины, предварительно обработанные метадом, не демонстрировали каких-либо признаков нарушения обучения во время CPP или индуцированных LiCl парадигм отвращения к сексу. Кроме того, маловероятно, что повторное введение низкой дозы Meth вызывало когнитивные нарушения и нейротоксичность, которые обычно наблюдались после хронического воздействия высоких доз Meth у крыс (Уолш и Вагнер, 1992; Friedman et al., 1998; Chapman et al., 2001; Schröder и др., 2003) и людей (Ornstein et al., 2000; Simon и др., 2002; Kalechstein et al., 2003), так как однодневные парадигмы Meth bingeing, использующие ту же дозу, что и текущее исследование, не ухудшали познавательное распознавание предметов и не приводили к нейротоксичности (Marshall et al., 2007). Другим альтернативным объяснением ослабленного приобретения или выражения условного отторжения от секса является потеря чувствительности для LiCl. Однако животные одинаково способны получить условное отвращение к камере, ранее соединенной с LiCl. Следовательно, у мужчин с мета-обработкой метастазами не было нарушенной ассоциативной памяти или сниженной чувствительности к болезни, вызванной LiCl или LiCl. Похоже, что предварительная обработка метадом вызвала неадекватный или компульсивный секс, несмотря на изученные негативные последствия, что соответствует человеческим сообщениям (Frosch et al., 1996; Halkitis и др., 2001; McKirnan и др., 2001; Rawson и др., 2002; Somlai и др., 2003; Зеленый и Халкит, 2006; Springer et al., 2007).
Более того, эффект предварительной обработки Meth и спаривания на снижение ингибирования неадаптивного сексуального поведения нелегко объяснить усиленной наградой, связанной с спариванием. Напротив, у животных, которые получали одновременный опыт Meth и спаривания, вознаграждение, связанное с спариванием, было уменьшено. Поэтому должно быть предложено другое объяснение эффектов одновременной терапии Meth и спаривания при экспрессии неадаптивного сексуального поведения. Недавнее нейроанатомическое исследование из нашей лаборатории выявило области головного мозга, где Мет может опосредовать влияние на сексуальное поведение (Frohmader и др., 2010c). Здесь нейронную активацию, вызванную спариванием или Meth, исследовали с использованием маркеров нейральной активности, таких как Fos или фосфорилирование MAPK, соответственно. Meth и спаривание коактивированных нейронов в ядре accumbens, базалатеральной амигдале и передней области челюсти медиальной префронтальной коры (Frohmader и др., 2010c) и в орбитофронтальной коре (Frohmader и Coolen, 2010). Префронтальная и орбитофронтальная коры представляют особый интерес, поскольку они способствуют привыканию к поведению (Каливас и Волков, 2005; Kalivas et al., 2005; Lasseter et al., 2010; Winstanley и др., 2010). Более того, гипоактивность этих областей мозга коррелировала с несколькими психиатрическими состояниями, связанными с потерей ингибирующего контроля (Грейбиэль и Раух, 2000; Taylor et al., 2002; Лондон и др., 2005). Эти данные свидетельствуют о том, что Мет может действовать в этих лобных коре, чтобы вызвать долгосрочные изменения, которые, в свою очередь, опосредуют компульсивное сексуальное поведение. В соответствии с этим было показано, что высокая частота компульсивного сексуального поведения перекрывается с другими психическими расстройствами, включая наркоманию, тревогу и расстройства настроения (Bancroft, 2008). Также предположительно, что лекарственная индуцированная дисфункция медиальной префронтальной и орбитофронтальной коры ответственна за снижение импульсного контроля (Brewer и Potenza, 2008; Fineberg et al., 2010) и повышенное сексуальное поведение, наблюдаемое у многих наркоманов (Jentsch и Taylor, 1999; Bancroft, 2008). Яn с этим поражением медиальной префронтальной коры у самцов крыс приводило к компульсивному поведению в сексуальной ориентации в условной парадигме отвращения к сексу, используемой в текущих исследованиях (Дэвис и др., 2010).
Предыдущие исследования показали, что повторное введение психостимуляторов или опиатов усиливает вызванное лекарством вознаграждение, измеряемое CPP (Lett, 1989; Shippenberg и Heidbreder, 1995; Shippenberg и др., 1996). Кроме того, сексуальный опыт вызвал dнаграду -amphetamine (Питчерс и др., 2010). В текущем исследовании влияние Meth и / или сексуального опыта на Meth CPP было протестировано в условиях, которые, как ожидается, не приведут к CPP препарата: низкая доза Meth, одно клиническое испытание и тестирование во время темной фазы дня при самых низких CPP (Webb и др., 2009a,b). Сенсибилизирующие режимы повторного Meth или сексуального опыта, используемые в текущем исследовании, не вызывали усиленного CP CPP. Тем не менее, предварительная обработка метаном одновременно с спариванием повышала награду Мет, указывая, что эта связь между Meth и спариванием вызвала усиление вознаграждения за поиск Meth. Эти результаты, по-видимому, согласуются с сообщениями людей о том, что повышенный поиск метаданных в сексуальных предпочтениях Мети в качестве основного стимула для употребления наркотиков (см.Semple и др., 2002; Schilder и др., 2005; Зеленый и Халкит, 2006). В настоящее время неясно, какие компоненты сексуального поведения имеют решающее значение для ассоциации между Meth и спариванием. В настоящем исследовании все мужчины спаривались с эякуляцией. Однако наши предыдущие выводы свидетельствуют о том, что социальных взаимодействий может быть достаточно, чтобы вызвать неадаптивное поведение, связанное с сексом (Frohmader и др., 2010a).
Нейронные субстраты, которые могут опосредовать усиливающие эффекты одновременной предварительной обработки и спаривания на вознаграждение Meth, включают ядро accumbens и базолатеральную амигдалу. Длительные изменения плотности дендритного позвоночника и морфологии в прилежах приводят к повторному введению лекарственного средства (Браун и Колб, 2001; Робинсон и др., 2002; Li et al., 2003; Робинсон и Колб, 2004) или сексуального опыта (Meisel и Mullins, 2006; Питчерс и др., 2010), и предполагается, что они опосредуют индуцированную наркотиками локомоторную и вознаграждающую сенсибилизацию (Пирс и Каливас, 1997; Вандершурен и Каливас, 2000; Li et al., 2004). Базолатеральная миндалина имеет решающее значение для памяти условных раздражителей, связанных с лекарственными раздражителями (Грейс и Розенкранц, 2002; Лавиолетт и Грейс, 2006) и участие в повышении вознаграждения и подкрепления (Everitt et al., 1999; Cardinal et al., 2002; См. 2002). Поражения или инактивация базалатеральной миндалины блокируют приобретение (Whitelaw и др., 1996) и выражение (Grimm and See, 2000) восстановленного восстановления кокаина. Кроме того, базалатеральные поражения миндалевидной железы приводят к уменьшению реакции на условные раздражители в сочетании с пищей (Everitt et al., 1989) или сексуального подкрепления (Everitt et al., 1989; Everitt, 1990) у крыс. Таким образом, возможно, что психостимуляторные и спаривающие изменения в accumbens и basolateral amygdala приводят к потенцированной наградной значимости Meth.
Было показано, что сенсибилизирующие полки препаратов способствуют сексуальному поведению. Сенсибилизирующая предварительная обработка d-эмфетамин (ежедневные инъекции 10 1.5 мг / кг) способствуют сексуальному поведению (Фиорино и Филлипс, 1999a,b), а также поведение подхода к сексуальным стимулам (Nocjar и Panksepp, 2002). Исследования у самок крыс, предварительно обработанных Meth (три ежедневных инъекции 5 мг / кг), приводили к увеличению восприимчивого поведения (Holder et al., 2010). Напротив, в текущем исследовании не проявлялось влияние сенсибилизирующего полка лечения Meth на сексуальное поведение. Возможные объяснения этого расхождения включают более низкое дозирование лекарственного средства, используемое в текущем исследовании, различные оценки сексуальной мотивации и половые различия (Беккер и Ху, 2008).
Исследования, посвященные моделям грызунов в отношении склонности к наркотикам, в последнее время были сосредоточены на парадигмах, связанных с наркотиками, для исследования причинно-следственных нарушений, вызванных Мет (Belcher и др., 2008; Izquierdo et al., 2010; O'Dell и др., 2011), нейропластические изменения (Бреннан и др., 2010) и нейротоксичность (Moszczynska et al., 1998; Kuczenski et al., 2007; Graham et al., 2008). Основная цель этих исследований заключалась в том, чтобы достичь уровня плазменного препарата у крыс, близкого к уровню, обнаруженному у людей, употребляющих наркотики человека. Напротив, текущее исследование показало, что однажды ежедневное пассивное введение низкой дозы Meth было достаточным, чтобы вызвать длительное навязчивое сексуальное поведение. Парадигма Meth bingeing не использовалась по практическим соображениям: высокие дозы Meth ухудшают сексуальное поведение (Frohmader и др., 2010a), а люди часто используют препараты, повышающие сексуальную эффективность, для поддержания сексуальной функции (Semple и др., 2009). В центре внимания текущих наборов исследований было исследование сексуальной награды и компульсивного спаривания у животных с неважным спариванием. Результаты показывают, что навязчивое сексуальное поведение и измененное лекарственное и сексуальное вознаграждение могут быть вызваны очень низким уровнем воздействия лекарственного средства, когда они одновременно с сексуальным опытом, и не зависят от того, чтобы вызывать уровни метана в мозге.
Вместе, нынешний набор исследований является важным шагом на пути к лучшему пониманию влияния Мет на компульсивное сексуальное поведение и ассоциации между наркотиками и сексуальным вознаграждением. Более того, эти данные параллельны тем, которые сообщаются у людей, употребляющих наркотики; таким образом, модель мужской крысы может быть дополнительно использована для изучения молекулярных и структурных механизмов влияния Meth на сексуальное поведение и потенциально способствуют будущей терапии наркомании.
Сноски
- Полученный Август 4, 2011.
- Получено подтверждение Сентябрь 8, 2011.
- Принятый Сентябрь 23, 2011.
Эта работа была поддержана Канадскими институтами исследований в области здравоохранения Грант RN 014705 для LMC
Авторы не заявляют никаких конкурирующих финансовых интересов.
- Переписка должна быть адресована Лике М. Кулену, Мичиганский университет, кафедра молекулярной и интегративной физиологии, медицинская наука II, комната 7732B, 1137 E. Catherine Street, Ann Arbor, MI 48109-5663. [электронная почта защищена]
- Copyright © 2011 авторы 0270-6474 / 11 / 3116473-10 $ 15.00 / 0
Рекомендации
;