DeltaFosB ۾ اينچيوس آسٽريلين ۾ اثرائتي اثرات جي قوي اثرات جي لاء ضروري آهي. (2010)

ميتون

تجربو 1: ΔFosB جو اظهار

جنسي طور تي سير مرد جي چادر صاف صاف پڃن ۾ کيڏڻ جي اجازت ڏني وئي هئي (60 × 45 × 50 سينٽي) 5 لاء مسلسل، روزانو ملندڙ سيشن يا جنسي طور تي رهي. اضافي ٽيبل 1 تجرباتي گروهن لاء رويي جي رويي جي جوڙجڪ کي ختم ڪري ٿو: نوي ڪو جنسي (اين اين ايس؛ اين = 5)، نوي جنس (اين ايس؛ اين = 5)، ڪنهن جي جنسي تجربي (ENS؛ n = 5) ۽ تجربو جنسي (ES؛ n = 4). اين اي ۽ ايس جانورن کي ظاهر ڪرڻ جي آخري ڏينهن تي سي اين ايڪس ڪلاڪ جي تقريب کي قرباني ڏني وئي جنهن جي نتيجي ۾ ملندڙ انسائيڪلوٽيشن ف-فاس جي تحقيق ڪرڻ. اين ايس جي جانورن سان گڏ اين اي ايس جانورن سان گڏ سموريون اين ايس جانورن کي فائونڊيشن حاصل ڪئي وئي. بعد ۾ جاچ ڪرڻ کان اڳ جنسي رويي جي جنسي طور تي تجربو گروپون ملن ٿيون. مناسب اھميت سيشن ۾ ڪي به رويي جي قدمن جي گروپن جي وچ ۾ ڪي اھم اھڙا فرق نه آيا ھئا.اضافي ٽيبل 2). ڪنٽرول ۾ شامل آهن جنسي طور تي بي حياتي مردن سان ملندڙ جانورن سان هٿ لڳائڻ واريون جانورن جي خوشبوء ۽ گهرائيزيشن کان سواء سڌو سنئون رابطي سان رابطو ڪن ٿيون.

قرباني لاء، جانورن سوڊيم پينٽورنوبرالا (270MG / ڪلوگرام) جي استعمال سان ڳاڙھي سان حساس ٿي ويا ۽ 50٪ نموني جي 0.9 ايل سان گڏ ڀرپور استعمال ڪيو ويو، بعد ۾ 500٪ paraformaldehyde 4 M فاسفٽ بفر (X) ۾ 0.1 ايل. دماغ ختم ٿي ويا ۽ 1 اي لاء ٺهڪندڙ اي واري ساڳئي ٺهڪندڙ ڪمري جي حرارت تي ٺهرايو ويو، پوء 20٪ sucrose ۽ 0.01٪ سوڊيم ازڊ ۾ 0.1 M PB ۾ ڊسڪ ڪيو ويو ۽ 4 ° C تي محفوظ ٿيل آهي. ڪورون حصن (35 μm) ٿڪڻ مائڪروٽووم (H400R، مائڪروون، جرمني) ۾ چار موئين ليول سيريز ۾ ڪرروپروٽيڪٽٽر حل (30٪ sucrose ۽ 30٪ ethylene glycol ۾ 0.1 M PB) سان گڏ کٽيل هوندا هئا ۽ ايڪسڪس ايم ايڪس اي سي سي محفوظ ڪئي وئي. مفت سچل حصن ۾ انوبٽس جي وچ ۾ 20 M فاسفٽ-بذير نموني (PBS؛ PH 0.1-7.3) سان وڏي ڌڪ هئي. حصا 7.4٪ H سان ٺهيل هئا₂O₂ 10 منٽ لاء ڪمري جي پراڻن کي برباد ڪرڻ لاء ڪمري جي حرارت تي خراب ڪرڻ، پوء پي بي بي جي وچ ۾ رهڻ جي حل جو بندوبست ڪيو ويو آهي، جيڪا پي سي بي ۾ شامل هوندي آهي 0.1٪ بووائن سيرم البمين (ڪتب آڻيندي 005-000-121) جينڪس Immuno جي ڳولا ليبارٽريريزز، ويسٽ گيول، يو ايس ۽ ايڪسڪس ٽيڪس ٽٽينون X -0.4 (ايڪس آرٽيڪل BP100-151؛ Sigma-Aldrich) لاء 500 ايڇ. 1 ° C ۾ ٿورڙي رات جا سيڪنڊ بي خرابي پنولي ڪلوليون انٽيبوڊو (سيڪنڊن): 4: 1K؛ ايس ايڪس اينڪس سانس ڪروج بايو ٽيڪنالاجي، سانتازز، سي، يو ايس اي سي ۾. FOSB ۽ ΔFosB پاران گڏيل داخلي علائقي جي خلاف پن فاسب انٽيبوڊو بلند ٿي وئي. ΔFosB-IR خانو خاص طور تي ΔFosB-positive هئا ڇاڪاڻ ته پوسٽ جي وقت جي وقت (5 ڪلاڪ) سڀ سڃاڻي وارو محرک-حوصلہ افزائي ايفسي بي کي خراب ٿي وئي آهي (Perrotti ۽ ٻيا. 2004; Perrotti ۽ ٻيا. 2008). اضافي طور تي، هن تجربي ۾، آخري ڏينهن تي جانورن کي ملائڻ (ايس اي ايس، اي ايس) ملتان بعد فوٽ بي ايڇ کي قرباني ڪرڻ کانپوء زينت مڇائي ڏني وئي. مغربي بلوٽ جي تجزيه تقريبن اي ايم ايفڪس جي ڊي تي ΔFOSB جي ڄاڻ جي تصديق ڪئي. پرائمري انٽيبوڊ ايسوسيشن کان پوء، حصن ۾ 1 H بايوٽين-برجنگ ٿيل بکري مخالف خرگوش ايگ جي ايڪس (37: پي ايس ايس + ۾ 1؛ ویکٹر ليبارٽريريزز، برنگمامام، سي ڊي ايس ڊي) ۽ پوء ايڪسينڪس بايوٽين-هائسرديش پرڪسائڊس ۾ پوء 1 اي (اي سي سي) ؛ 500: 1K پي سي بي ۾؛ ویکٹر ليبارٽريريزز، برنگنگام، سي، يو ايس ڊي). ھن ٽيوبشن جا حصا ھيٺيان ھڪڙي عمل ۾ عمل ڪيا ويا:

1. سنگل پرڪسائيس ليبلنگ

اين ايس سي بي بي جمع ڪرائڻ واري جنسي دماغي تجزيي لاء اين اين ايس ۽ اين ايس جانورن جا حصا استعمال ڪيا ويا. اي سي سي جي انٽرويو هيٺ، پيڪس آڪسائيڊس پيچيده کي ايڪس اينڪسڪس منٽ لاء ڪرومينن جي حل ڪرڻ واري طريقي سان ڏسڻ ۾ اچي ويو هيو جنهن ۾ 10٪ 0.02'-Diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB؛ Sigma-Aldrich، سينٽ لوئس، ايم ايم) سان گڏ اين ايڪسڪس ايم پي بي ۾ ايڪس سلفٽ سان وڌايو ويو. هائيڊروجن پرو آڪسائيڊ (3,3٪). سيڪشن 0.02 M PB ۾ مڪمل طور تي ڌوڪيندا هئا ۽ رد عمل کي ختم ڪيو ويو سيڊڊ آففففٽس ۽ گلاس سلائڊس (فشر، پيٽسبرگ، PA، USA) سان 0.1٪ gelatin in ddH₂0. dehydration جي هيٺيان، سڀئي سلائيڊ ڊي پي ايڪس (dibutyl phthalate xylene) سان گڏ ڪپڙا اڇا هئا.

2. ٻٽي امونفورورسنسيس

Δ ايف بي ۽ ايم ايف سي جي تجزيي لاء اين اين سي ۽ ايم پي سي سي شامل آهن چار چار تجرباتي گروپن جا حصا استعمال ڪيا ويا. اي سي سي جي انبجشن هيٺ، حصن ۾ 10 منٽ بايوٽينايل ٿيل ٽيمايڊ سان گڏ (اي ٽي پي) 1: 250 ۾ PBS + 0.003٪ H₂O₂ ايڪساڪس: ايڪسڪسڪس؛ جينڪس امونسورس ڳولا ليبارٽريريزز، ويسٽ گيول، ايم ايل ايڪسڪسڪس سان گڏوگڏ ٽريڪڊين (Tyramid Signal Amplification Kit، اين جي لائف سائنسز، بوسٽن، ايم) ۽ ايڪسڪس ايم ايڪس لاء. سيڪنڊن کي رات جو رات جو خرابي پولو پلونل انٽيبوڊ سان خاص طور تي سي-ايف (30: 488؛ SC-1؛ سانتا کروز بايو ٽيڪنالاجي، سانتا کروز، CA) سان گڏ رات جو ٽيوب ڪيو ويو، بعد ۾ بکري انسائي خرگوش سائڪسينيمڪس-برج ٿيل ثانوي انٽيبوڊو سان هڪ 100 منٽ انوائشن (1: 150؛ جيڪنامنٽ امونورورس ڳولا ليبارٽريز، ويسٽ گيول، پي پي، آمريڪا). ڄمڻ هيٺيان، حصن کي 52 M PB ۾ مڪمل طور تي ڌوڪ ڪيو ويو، ڪوڊ ٿيل گلاس سلائڊ تي ماڊل ۾ 30٪ جليٽن تي سوار₂ايڪس ايڪسڪس ۽ جيوت واري ايراضي وچولي (Gelvatol) سان گڏ ڪپڙا ڦوڪيندڙ 0-diazabicyclo (1,4) octane (DABCO؛ 2,2 mg / ml، Sigma-Aldrich، سينٽ لوئس، ايم). اموناهسٽوڪيمڪولڪ ڪنٽرولون ٻئي يا پرائمري اينٽيبيوڊز جي گم ٿيڻ شامل آهن، نتيجي ۾ مناسب طول و عرض ۾ ليبلنگ جي غير موجودگي.

ڊيٽا تجزيه

ΔFosB جي دماغي تجزيه

ٻن تجربن وارا انڌا کيڊ سلائڊ تي دماغ وسيع اسڪين کي علاج ڪرڻ کان انڌو ڪيو. ڏن ۾ ΔFosB-immunoreactive (خامي) خريات کي نيمي مقدار جي تجزياتي تجزيي سان استعمال ڪئي وئي ھئي، ΔFOSB-مثبت خاني جي تعداد کي ظاھر ڪرڻ لاء ٽيبل 1. اضافي طور تي، نيمي مقدار جي حاصلات جي بنياد تي، ΔFOSB-IR جي خاني جي تعداد دماغ ۾ متاثر ڪيل علائقن ۾ تجزيو جي معياري علائقن جي استعمال سان شمار ڪيا ويا آهن ۽ ليڪا DMRD خوردبيني سان ڳنڍيل هڪ ڪيمرا لشيدا ڊرائنگ جي استعمال سان جنسي طريقه ڪار (Leica Microsystems GmbH، Wetzlar ، جرمني (اين سي) (ڪور (سي) ۽ شيل (سي)؛ 400 × 600μM (ٽن راسلال-ڪجال جي سطح تي تجزيو ڪيو)ٻرڙو ۽ ٻيا. 2004)؛ ٽٽي ٽين ڌر واري ايراضي (VTA؛ 1000 × 800μM) ٽن روسلال-ڪيڊل سطح تي تجزيو ڪيو (ٻرڙو ۽ ٻيا. 2004) ۽ VTA دم (Perrotti ۽ ٻيا. 2005)؛ اڳوڻو مرڪوز (anterior cinglulate ايريا (ACA)؛ اڳوڻي ڪنٽينڪس (PL)؛ انفرافيڪ ڪارنس (ايل)؛ 600 × هر هنڌ 800μM؛ ڪوئليٽ ڌامين (سي پي ايڪسڪسڪس ايڪس ايمڪسڪسڪس)؛ ۽ وچولي پريپٽيڪ نائيلوس (ايم پي اي، 800 × 800 μm) (ضمني شڪلين 1-3). ٻن حصن کي ذيلي ذخيري جي حساب سان شمار ڪيو ويو، ۽ گروپ جي حساب ڪتاب جي هر جانور کي هئڻ جي معني آهي. غير مناسب ٽانڪ تجربو استعمال ڪندي غير انساني طور تي ΔFOSB-IR خريج جي هر ذيلي ذخيري جي مقابلي ۾ جنسي طور تي نه ۽ تجرباتي گروپ اوسط هئا.

    

ٽيبل 1

جنسي ۽ اڻ وڻندڙ ​​جانورن ۾ ΔFosB اظهار جي خلاصو

ΔFosB ۽ سي-فاس جو تجزيو

تصويرون هڪ بهترين سي ڊي سي جي ڪئميرا (مائڪرو فائر، اپٽيونٽي) جو استعمال ڪيو ويو آهي جيڪي ليکي خوردبيني (DM5000B، ليڪا مائڪروسيسسٽس، گلزيلينڊ، جرمني) ۽ نيوروليوڊي سافٽ ويئر (مائڪرو بيڪروفيلڊ انفارميشن) سڀني مضمونن جي لاء مقرر ڪيل ڪيمرا سيٽنگون (10x مقاصد استعمال ڪندي) سان ڳنڍيل آهن. اين سي سي ۾ تجزيو جي معياري علائقن ۾ سي-فاس-آر يا ΔFosB-IR جي سيلز جو تعداد مڪمل ڪيو ويو آهي (هر هڪ 400 600μM؛ سڄو شڪل 1) ۽ ايم پي سي جي ايم پي سي (600 × 800μm؛ سڄو شڪل 3) 2 حصن ۾ هر جانور Neurolucida سافٽ ويئر (MBF Bioscience، Williston، VT) کا استعمال کرتے ہوئے ۽ تجرباتي طور تي هر جانور تي استعمال ٿيندڙ گروپن جي هٿان ايندڙ انڊرٽرر طرفان نظر انداز ڪيا ويا هئا. سي-ايف يا ΔFosB سيلز جو مجموعو گروپ جي لحاظ کان ٻه طرفہ اينووا (فیکٹرز: جنسي تجربو ۽ جنسي سرگرمي) ۽ پوسٽ هيڪ جي مقابلي ۾ فين هائوس جي هڪ فائنل سطح تي 0.05 استعمال ڪيو ويو.

نتيجو

جنسي تجربو ΔFosB جمع ڪرڻ جو سبب آهي

شروعات ۾، ΔFOSB جمع ڪرڻ جي هڪ نيمي مقدار جي تحقيقات سڄي دماغ ۾ جنسي طور تي معياري ڪنٽرول منعقد ڪئي وئي هئي. مجموعي طور تي ملندڙ نتيجن جو تت ڏنل آهي ٽيبل 1. ΔFOSB-IR تجزيي تجزيي جي معيار جي استعمال سان ڪيترن ئي لائببي منسلڪ دماغ علائقن ۾ ΔFOSB-IR جي سيلز جي تعداد کي طئي ڪندي. شڪل 1 اين اين سي جي جنسي ۽ غير معمولي تجربا جانورن کي يقيني بڻائڻ واري ڊاڪٽرن جي نمائندگي ڪندو آهي. ΔFosB اپ-ضابطي ۾ ايم پي سي سي سبسڊيشن ۾ مليا ويا (شڪل 2A) اين سي سي ڪور ۽ شيل (2B)، ڪارڊ ٺاهڻ وارو (2B) ۽ ويٽر (2C). اين سي سي ۾ اين اين سي بنيادي ۽ شيل ۾ سڀني روسٽل-ڪيڊل سطح تي اهم اختلافات موجود هئا، ۽ ان ۾ ڏيکاريل ڊيٽا شڪل 2 سڀني روسٽرو-ڪجال جي سطح تي سراسري طور تي موجود آهي. ان جي ابتڙ، ΔFOSB-IR ۾ هفوتامڪام وچولي پريپيٽڪ نيچيوس (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26؛ ENS: Avg 6.0 +/- 1.86) ۾ ڪو خاص اضافو نه هو.

    

 

شڪل 1

نمائندي تصويرون نيو نه جنسي (A) جي اين اين سي ۾ ΔFosB-IR جي سيلز (ڪارو) ڏيکاريو ۽ جنسي (B) گروپن جو تجربو ناهي. ايڪو: ائرينئر ڪچري اسڪيل بار اشارو ڪيو آهي 100 μm.

     

شڪل 2

ΔFosB-IR جي سيلن جو تعداد: الف. انفرافيڪ (IL)، پرليمڪشنل (PL) ۽ ايئرئرئر سيننگول سگريڪس (ACA) مڊل پري فريم ورزنڪس جي ذخيرو؛ ب) نائيليس آڱريون ۽ شيل ۽ ڪنڊ ڍنڍن (CP)؛ C. رستالال، وچولي، ڪمال ۽ دم ...

جنسي تجربو ملندڙ انسائيڪلوپيڊيا ف-فاس کي ڳولي ٿو

اين سي سي ۾ ΔFOSB جي سطح تي جنسي تجربو جو اثر انهي جي تصديق ڪئي وئي هئي ته فلورسنسي اسٽاڪنگ طريقن سان. ان کان سواء، جنسي تجربو جي اثرات کي ف-فاس جي اظهار تي تجزيو ڪيو ويو. شڪل 3 مڙني تجرباتي گروپن ۾ (اي، اين اين ايس؛ بي، اين ايس؛ سي، اين ايس؛ ڊي، اي ايس) ۾ ΔFosB- (سائيز) ۽ سي-فاس (ڳاڙھي) -ير خاني جي نمائندگي ڪندو آهي. جنسي تجربو اين سي سي ڪور ۾ ΔFosB جي بيان ۾ واڌارو وڌايو (شڪل 4A: ف_1,15 = 12.0؛ پي = 0.003) ۽ شيل (شڪل 4C: ف_1,15 = 9.3؛ p = 0.008). ان جي ابتڙ، 1 ڪلاڪ کي ختم ڪرڻ کان اڳ ۾، ΔFOSB جي اظهار تي اثر نه آئي (شڪل 4A، سي) ۽ جنسي تجربي ۽ فطرت کان فوري طور تي ملائڻ جي وچ ۾ ڪابه ڪابه ڄاڻ نٿي ملي هئي. اين اين سي ڪور ۾ سي-فاس جي بيان تي ڦهلائڻ کان اڳ جي جذباتي اثر جو مجموعي اثر هو.شڪل 4B: ف_1,15 = 27.4 ؛ ص <0.001) ۽ شيل (شڪل 4D: ف_1,15 = 39.4 ؛ ص <0.001). ان کان علاوه ، اين اين سي ڪور ۾ جنسي تجربي جي مجموعي اثر کي معلوم ڪيو ويو (شڪل 4B: ف_1,15 = 6.1؛ پي = 0.026) ۽ شيل (شڪل 4D: ف_1,15 = 1.7؛ P = 0.211) ۽ جنسي تجربو ۽ ملفوظات جي وچ ۾ جذبي جي وچ ۾ هڪ رابطي اين سي ڪور (ايف) ۾ ڄاڻايل هئي_1,15 = 6.5؛ پي = 0.022)، شيل ۾ رجحان سان (ف_1,15 = 1.7؛ p = 0.211؛ F_1,15 = 3.4؛ p = 0.084). مظاهرين کي پوسٽ ڪرڻ جو طريقو پوزيشن ۾ شامل ڪيو ويو آهي ۽ بنيادي طور تي غير سني مردن جي شيل ۾ ف-فاس اظهار (شڪل 4B، ڊي). البت، جنسي تجربي واري مردن ۾، اين سي سي ڪور ۾ سيف فاسٽ ۾ اضافو نه ٿيو (شڪل 4B) ۽ خاص طور تي شيل ۾ پيش ڪيو ويو (شڪل 4D). ان ڪري، جنسي تجربي کي ملائي-حوصله افزائي ف-فاس جي گهٽتائي جي گھٽتائي ٿي. P-value مخصوص جوڙي-وار جي مقابلي لاء انگن اکرن ۾ ڏنل آهن.

     

شڪل 3

نمائندي تصويرون اين اين سي ۾ ΔFosB (سائيز) ۽ سي-فاس (ڳاڙهو) هر تجرباتي گروپ لاء. اسليلي بار کي 100 μm اشارو ڪيو آهي.

     

شڪل 4

جنس جي تجربو ΔFOSB ۽ ملن-حوصلہ افزائي سي-فاس ڪيو ويو آهي. ΔFosB (कोर، A؛ شیل، سی؛ ACA، E) یا C-Fos (Core، B؛ Shell، D؛ ACA، F) هر گروپ لاء تعداد immunoreactive خلیات: NNS (n = 5)، NS (n = 5)، ENS (n = 5) يا ايس (اين = 4). ڊيٽا جو اظهار ڪيو ويو آهي ...

اين سي سي سان ملندڙ انسائيڪلوپيڊيا سي فاس جي سطح تي جنسي تجربي جو اثر محدود نه ٿي سگهيو. سي-فاس جي اظهار جو ساڳيو سلسلو جنسي طور تي غير معمولي ڪنٽرول جي مقابلي ۾ اي سي اي جنسي تجربه جانورن ۾ ڪيو ويو آهي. جنسي تجربو ACA ۾ ΔFosB اظهار تي هڪ اهم اثر پيو (شڪل 4E: ف_1,15 = 154.2 ؛ ص <0.001). خوشبو ڏيڻ کان اڳ ملندڙ ΔFosB اظهار تي ڪو اثر نه پيو.شڪل 4C) پر وڏي تعداد ۾ اضافو وڌايو (شڪل 4F: ف_1,15 = 203.4 ؛ پي <0.001) اي سي اي ۾. ان کان علاوه ، ACA ۾ ملن-حوصلہ افزائي سي-فاس اظهار جنسي تجربي سان خاص طور تي گهٽجي وئي (شڪل 4F: ف_1,15 = 15.8؛ p = 0.001). جنسي تجربو ۽ ملفوظات جي وچ ۾ دو طرفه وچ ۾ ٻه طرفي رابطي کي ف-فاس اظهار لاء معلوم ڪيو ويو هو (شڪل 4F: ف_1,15 = 15.1 ؛ ص <0.001). پي-ويلز خاص پيئر وار وار مقابلو ڪرڻ جي انگن اکرن ۾ آهن. آخرڪار ، وچولي پريپيٽڪ نيچيوس (ج ايس: اويگ 63.5 +/− 4.0 ؛ اي ايس: اوسط 41.4 +/− 10.09) ۾ ملندڙ حوصلہ افزائي سي فاس جي بيان ۾ ڪا خاص گهٽتائي نه هئي ، هڪ علائقو جتي ملن جي تجربي اهم سبب نه بڻيو ΔFosB اظهار ۾ واڌ ، انهي ڳالهه جو اشارو ڪندي آهي ته جذب ڪندڙ حوصلہ افزائي سي-فاس اظهار سڀني دماغ جي علائقن ۾ متاثر نه ڪيو ويو.

اين ايف سي ۾ ΔFosB جو خيال آهي ته جنسي رويي جي تقويم جوڳي آهي

جنسي رويي جي تقاضا لاء تجربو-تيزي ٿيل سهولتن جي سهولت لاء، اي ايم ايف بي جي سطح جي مقامي اثرات ۽ ان جي ٽرانسپليڪ ڪمن جي ڪارڪردگي جو مظاهرو ڪيو ويو آهي. جنسي مسلسل تجربو دوران چار تجربا دوران سيشن جبلن جي ويٽميشن تي هڪ اهم اثر پيو.شڪل 5A: ف_1,23 = 13.8؛ p = 0.001)، ٺاهه واري ويڪرائيزيشن (شڪل 5B: ف_1,23 = 18.1 ؛ ص <0.001) ، ۽ ايجاد انگيز (شڪل 5C: GFP، ف_11,45 = 3.8؛ p = 0.006). تجربه سيشن اين ايڪسڪس جي ڀيٽ ۾ تجربو سيشن دوران 4 جي دوران، اڳوڻي ميز کي، پهريون ڀيرو سمجهائڻ ۽ ابتدائي گهٽتائي جي نتيجي ۾ ڄاڻايل تجربي جو مظاهرو ڪيو ويو آهي.شڪل 5A-سي؛ ڏسندڙن لاء ڪتابي ڪٿا کي ڏسو). اهو تجربو، جنسي رويي جي سهولت کي اي ميل فائونڊيشن جي مافيا ۽ ايٽميشنيمس لاء پڻ ڪيو ويو، پر ان ۾ انجيليٽ ويٽميشن ۾ هڪ اهم فرق نه هو.شڪل 5A-سي). ان جي ابتڙ، Δ جونڊ جانورن کي ھڪڙو ٺھيل سهولت پيش ڪيو آھي. جيتوڻيڪ ميٽرن، داخلا، ۽ واجبي لاء ويڪرائيزيشن بار بار ملن سيشنن سان گهٽتائي ڪئي هئي، انهن مان هڪ فيڊرٽ جي لحاظ کان ڄاڻايل اهميت تي پهچي ويو جڏهن تجربو سيشن 1 ۽ 4)شڪل 5A-سي). هر تجربه سيشن لاء گروپ جي مقابلي جي وچ ۾ ظاهر ڪري ٿو ته ΔJunD ΔFOSB ۽ GFP جي ڀيٽ ۾ تجرباتي سيشن دوران مائن، انٽرويو ۽ ايجاد ٿيڻ لاء گهڻو ڪري ڊگهي ويڪرائيون هئا (شڪل 5A-سي). ان کان سواء، جنسي تجربي ۽ علاج ٻنهي طريقيڪار ڪارڪردگي تي اهم اثرات حاصل ڪئي (شڪل 5F: جنسي تجربو، ايف_1,12 = 22.5 ؛ ص <0.001 ؛ علاج ، ايف_1,12 = 3.3؛ p = 0.049). ΔFOSB مرد تجربو سيشن دوران 4 تجربن سيشن جي ڀيٽ ۾ زلزلي جو ڪارڪردگي وڌائي ڇڏيو 1 (شڪل 5F). ان کان علاوه، ΔFOSB جانورن جي تجربه سيشن جي ڏينهن 4 تجربو سيشن اين اين ايڪسڪس (مقابلي سيشن) جي ڀيٽ ۾ تجربو سيشن اين ايڪسڪسڪس جي دوران کان اڳ ۾ گهٽ گهٽجي ويو آهي.شڪل 5D: ف_10,43 = 4.1؛ P = 0.004) ۽ ΔJunD وارا مرد گهڻو ڪري گهڻو ڪري وٺندڙ رقم کي گهڻو ڪري ڇڏيندو هو، ان ڪري ٻئي طور تي ٻئي ٻن گروهن جي ڀيٽ ۾ نقلي صلاحيت گهٽائي ٿي (شڪل 5D ۽ ايف). ان ڪري، GFP ۽ ΔFosB جانورن جي تجربي جو حوصلي واري جنسي عمل ۽ جنسي ڪارڪردگي جي شروعات ۾ شامل ڪئي وئي، جتي ΔJunD جانورن نه ھجن.

     

شڪل 5

GFP جي جنسي جنسي رويو (n = 12)، ΔFosB (n = 11) ۽ ΔJunD (n = 9) جانور: ماھر ويڪرائي (A)، ٺاھائڻ واري ويڪرائيزيشن (بي)، ضايع ٿوريگي (سي)، حسابن جو تعداد (D) انٽرمينشن جو تعداد (اي) ۽ تقسيم ڪارڪردگي (ايف). ڊيٽا جو اظهار ڪيو ويو آهي ...

فائونڊيشن کي امتحان ڏيڻ لاء، ΔFOSB اظهار تجربه جي تجربي جي استعمال جي ڊگهي مدت جي لحاظ کان نازڪ آهي، جنسي تجربن جي سهولت جي ضرورت آهي، آخري تجربو سيشن کان پوء جانورن کي جانين سي ايم ايس ايڪس (ٽيسٽ سيشن 1) ۽ 1 هفتن (ٽيسٽ سيشن 2) آزمايا ويا. در حقيقت، پي اي ايف ۽ ΔFOSB گروپن ۾ سهولت فراهم ڪئي وئي جيئن ته رويي جي اصولن مان ڪو به امتحان سيشن 2 يا 1 ۽ حتمي تجربو سيشن 2 جي وچ ۾، GFP ۽ ΔFosB گروپن جي وچ ۾ (شڪل 5A-سي؛ ΔFosB جانوروں کے لئے آزمائش سيشن 1 ۾ بجائي جي وظيفي ۽ نقل عمل موثر کانسواء. ΔJunD جانورن ۽ GFP يا ΔFosB گروپن جي وچ ۾ سڀني جاندارن جي رويي جي اصولن جي امتحان سيشن جي وچ ۾ اهم فرق (شڪل 5A-F). انگن اکرن، پي اي آئي، يا جانورن جي فيصد جي مقابلي ۾ جڏهن ڪاما جي وچ ۾ يا ڪوبه فرق نه ٿي سگهيو آهي (آخري چار ملندڙ سيشن دوران ايجاد ٿيل سڀني گروپن ۾ 100٪ جو مرد).

ڊسڪشن

موجوده مطالعي مان اهو ظاهر ڪيو ويو آهي ته جنسي تجربو ڪيترن ئي لائيمڪ منسلڪ دماغ جي علائقن ۾ ΔFOSB جي گڏ هجڻ جي ڪري ٿو، اين اين سي ڪور ۽ شيل، ايم پي سي سي، ويٽا ۽ ڪيڊٽ ڊيمامين شامل آهن. ان کان سواء، جنسي تجربي اين اين سي ۽ اي سي اي سي جي فوٽن ۾ جذباتي جذب کي شامل ڪيو. آخرڪار، اين سي سي ۾ ΔFosB جنسي جنسي تجربو ۽ جنسي رويي جي تجربي جي تجربي جي ڊگهي مدت جي وچ ۾ ملائڻ جي سهولت ۾ ڌيان ڏيڻ ۾ مشغول ٿي چڪي هئي. خاص طور تي، ΔFosB-Mediated ٽرانسپشن کي گهٽائڻ جو تجربو حوصلہ افزائي ۽ ڪارڪردگي جي سهولت ۾ شامل ڪيو ويو، جڏهن ته ΔFosB جي وڌيڪ بيان اين سي سي گهٽ تجربه سان وڌائي جنسي ڪارڪردگي جي لحاظ کان، جنسي رويي جي وڌ ۾ واڌاري جي سهولت جي سبب بنائي. گڏوگڏ، موجوده نتيجن جي انفيڪريشن جي حمايت ڪري ٿي ΔFOSB جنسي تجربو جنهن ذريعي ڊگهي مديرياتي ۽ رويي جي پلازنييت جي لاء ڊگهو آلوڪر ثالث آهي.

موجوده نتيجن جي اڳوڻي اڀياس کي وڌايو ويو آهي جيڪو جنسي تجربو ۾ اين ايف سي ۾ نارٿ جي چٽسالي ۾ ΔFOSB ڏنو ويو (والس ۽ ٻيا. 2008) ۽ عورتن جي ڪمن جو (بيج ۽ ٻيا. 2009). والس اينڊ الف. (2008) ظاهر ٿيو ته آر ڊي-ΔFosB اين سي سي ۾ وڌيڪ بيان، جنسي تناظر ۾ جنسي جنسي رويي جي ابتداء دوران، جيئن ته ڪنٽريبيوشن ۽ ننڍن پوسٽن واري وقار کي گهٽتائي کان محروم آهي، پر جنسي تجربي واري مردن ۾ ڪا به اثر نه هئي (والس ۽ ٻيا. 2008).

ان جي ابتڙ، ابتدائي مطالعي ۾ عام امتحانات ۾ جنسي ازم مردن ۾ ΔFOSB اضافی اظہار کا ڪو اثرات نمودار نه ڏني وئي، بلڪه، جنسي تجربے को अधिग्रहण पछि. ΔFOSB کان وڌيڪ مظاهرو ظاهر ڪيل GFP جانورن جي مقابلي ۾ جنسي ڪارڪردگي (نقلي ڪارڪردگي وڌائي) وڌايو.

ان کان علاوه، موجوده مطالعي ΔJosD-expressing وائرل ویکٹر استعمال ڪندي ΔFOSB-وچولي ٽريڪشن کي روڪڻ سان ΔFOSB جي ڪردار جو امتحان ورتو. ΔFOSB جي بيان ۾ اضافو اضافو جي روڪٿام تجربي ۾ استعمال ٿيندڙ جنسي جذبي (ميز ۽ معردن جي طول و عرض) وڌائڻ سان گڏوگڏ جنسي ڪارڪردگي (جنهن ۾ جنسي جنسي عمل جي آخري ڊگهي اصطلاحن ۽ تعداد جي حسابن ۾ اضافو ٿيندو).

انهيء لحاظ کان، هي ڊيٽا پهريان ئي جنسي رويي جي تجربي جي سهولت حاصل ڪرڻ ۾ ΔFOSB لاء واجبي ڪردار ادا ڪرڻ لاء پهريون آهي. ان کان علاوه، ان ڊيٽا کي ظاهر ڪري ٿو ته ΔFB بي تجربه حوصله افزائي طريقن جي ڊگهي مدت جي اظهار ۾ تنقيد سان ملوث آهي. اسان پيش ڪريون ٿا ته اسان کي مناسب رويي جي اها ڊگهي اصطلاحن قدرتي ثواب لاء يادگيري شڪل جي نمائندگي ڪري ٿي، تنهن ڪري اين اين سي ۾ ΔFOSB ثواب يادداشت جي ثالث آهي. جنسي تجربي ۽ VTA ۽ ايم پي سي سي ۾ ΔFOSB جي سطح پڻ وڌي وئي، جيڪي انعام ۽ يادگار ۾ متاثر ٿيا آهن (ٻرڙو ۽ ٻيا. 2004; Phillips ۽ ٻيا. 2008). مستقبل جي مطالعي جي ضرورت آهي ته انهن علائقن ۾ ΔF بي بي جي ضابطي جي امڪاني اهميت کي وڌائڻ لاء انعام جي يادگيري لاء.

ΔFosB جو بيان انتهائي مستحڪم آهي، تنهنڪري ان کي دماغ جي مسلسل مسلسل ٺاهه جي هڪ انوولر ثالث کان پوء دائمي فيٽابينشنز (جزياتي)ناول ۽ ٻيا. 2001). ΔFosB اين سي سي ۾ ڪيترن ئي ڪوڪن جي پيٽرن تي سست رفتار وڌي رهيو آهي ۽ ڪيترن ئي هفتن تائين جاري رهي (اميد ۽ ٻيا. 1992; اميد ۽ ٻيا. 1994). اهي ΔFosB اظهار اين اين سي ۾ منسلڪ منشي حساسيت ۽ لت سان لاڳاپيل آهن (چائو ۽ نسٽر 2004; مک ڪلنگ ۽ نسٽرر 2003; مکليڪنگ ۽ ٻيا. 2004; ناولر 2004, 2005, 2008; ناول ۽ ٻيا. 2001; زڪريا ۽ ٻيا. 2006). ان جي ابتڙ، ΔFosB جو ڪردار قدرتي ثواب ثالث ۾ سمجھيو ويو آهي. تازي شاهدي ظاهر ڪئي آهي ته اين اين سي ۾ ΔFosB انضمام قدرتي ثواب ۾ شامل آهي. اين سي سي ۾ ΔFOSB جي سطح ساڳئي وقت وڌائي ويندي آهي. britransgenic चूहों या वायरल वेक्टरों को प्रयोग गरेर striatum मा ΔFosB को अधिक-अभिव्यक्ति को कारण हुन्छ sucrose सेवन मा वृद्धि، کاڌي لاء بهتر ڪيل حوصلہ افزائي ۽ مظاهرو ويندڙ ڊوڙ وڌائي (اولاسن ۽ ٻيا. 2006; والس ۽ ٻيا. 2008; وير ۽ ٻيا. 2002). موجوده انگن اکرن کي انهن رپورٽن ۾ خاص طور تي شامل ڪيو ويو ۽ انهي جي حمايت ڪري ٿو ته ΔFOSB انعام فوق ۽ قدرتي ثواب يادداشت لاء هڪ نازڪ ثالث آهي.

ΔFosB ميولولمڪ سسٽم ۾ پلاسٽائيٽيشن جي ذريعي ذريعي جنسي رويي جي تجربي جي حوصله افزائي ڪري ٿي. در حقيقت، جنسي تجربو ملهولبڪ سسٽم ۾ ڊگهي ڊگهي تبديلي جي سبب بنائي ٿو (برادلي ۽ ميسل 2001; ايف ايڇر ۽ ٻيا. 2009; پچائيندڙ ۽ ٻيا. 2010). الفاهو رويوالي سطح، ايم ايففامائن ۾ هڪ حساس مڪومٽرر جو جواب ۽ وڌايو ويو ايم ايف ايمامين انعام کي جنسي طور تي مردن جي تجربن جي تجربي ۾ ظاهر ڪيو ويو آهي.پچائيندڙ ۽ ٻيا. 2010)؛ ايم ايففامائن ۾ مڪومٽوٽر جو رد عمل پڻ عورت جي حميدارن سان ڪيو ويو آهي (برادلي ۽ ميسل 2001). ان کان علاوه، دندن جي گھڻن جي تعداد ۾ واڌ ۽ دندن جي آرين جي پيچيدگي جي پيچيدگي ۾ مردن جي غسلن ۾ جنسي تجربو (پچائيندڙ ۽ ٻيا. 2010). موجوده مطالعي مان معلوم ٿئي ٿو ته ΔFOSB جنسي تجربو جي ڊگهي مدت جو هڪ مخصوص آولوال ثالث هوندو. معاهدي ۾، ΔFosB تازو ڪيو ويو آهي دائمي ڪوڪائن انتظاميه جي رد عمل ۾ ڊنٽيٽيڪل اسپائن تبديلين کي پيدا ڪرڻ لاء اهم (ڊائٽز ۽ ٻيا. 2009; Maze ۽ ٻيا. 2010).

اهو واضح ناهي ته اين اي ايف ۾ Δ ايف بي بي جي پيداوار جو ذميوار اوٽروڪرڪرپوهٽر ذميوار آهي، پر ڊي سي اميدوار طور پيش ڪيو ويو آهي (نئون ۽ ٻيا. 1995). عمدي طور تي سڀني دواشمن جي بدعنواني، جن ۾ ڪوڪن، امفافامائن، اپيٽيون، ڪيننابينڊ، ۽ اتنول سميت گڏوگڏ قدرتي انعامون، اين اين سي ۾ ΔFosB وڌائي رهيا آهن. (Perrotti ۽ ٻيا. 2005; والس ۽ ٻيا. 2008; وير ۽ ٻيا. 2002). دوا جي دوا جي دوا ۽ قدرتي انعامات اين اين سي ۾ همراپيڪ ڊي اي تهذيب وڌائي رهيا آهن (ڊيمما ۽ ٻيا. 1992; Hernandez ۽ هابل 1988a, b; جينڪنز ۽ بيڪر 2003). ΔFOSB جي بدعنواني پاران انشورنس کي ڊي اي ڪنٽرول ۾ شامل ڪيو ويو آهي جنهن ۾ سيلز ۽ ڪوڪين-حوصلہ افواف ΔFosB ٺهيل هڪ D1 DA ريڪسپلر انسگنگنسز طرفان بند ڪيو ويو آهي.t (نئون ۽ ٻيا. 1995). انهيء ڪري، ڊي اي او آزاد ڇڏيل ΔFOSB جي اظهار کي متحرڪ ڪرڻ ۽ ان سان گڏوگڏ انعام سان لاڳاپيل نيوروپلوزيشن جو مظاهرو ڪيو ويندو آهي.. وڌيڪ انهي خيال جي حمايت ڪري ٿو ته ΔFBB جي ڊي DA انحصار آهي ته اهو معلوم ٿئي ٿو ته دماغ وارن علائقن ۾ جتي جنسي تجربن ۾ تبديل ٿيل آهي ΔFBB جي سطح VTA کان مضبوط ڊپيمينٽيڪ ان پٽ ملن ٿيون، ميڊل پريفورٽ ڪرتڪس ۽ بصريت واري ايمگالالا شامل آهن..

جڏهن ته ان جي ابتڙ، ΔFos بي وچولي پريپٽيڪ ايراضيء ۾ وڌي نه وئي آهي جيتوڻيڪ هن ايراضين کي ڊپپينيرڪ انٽيپشن حاصل ڪري ٿي، اهڙي قسم جي هٿيروالاڪٽر ذريعن کان (ملر ۽ لونسٽين 2009). مستقبل جي مطالعي کي جانچ ڪرڻ جي ضرورت آهي ته جيڪڏهن ايم ايلس بي جي جذبات کي متاثر ڪيو وڃي ۽ جنسي شوق ۽ ڪارڪردگي تي جنسي تجربن جا اثر ڊي ڊي عمل تي منحصر آهن. مرد جي کٽ ۾ جنسي انعام ۾ ڊي جي ڪردار هاڻي مڪمل طور تي واضح ناهي (اگمو ۽ برينن فيلڊ 1990; پيفس 2009). اهڙا دليل موجود آهن ته ڊي آء اين سي ۾ ڇڏيل عورت يا ملامت کي ظاهر ڪرڻ دوران ڇڏيل آهي (ڊيمما ۽ ٻيا. 1992) ۽ ڊي سي نيورسن کي جنسي رويي جي دوران چالو ڪيو ويو آهي (ٻرڙو ۽ ٻيا. 2004). بهرحال، ڊي اي ريڪارڊر انسٽيٽيوٽ جي سسٽماتي انجنيئر کي جنسي انعام يافته ٿيل جڳهه جي ترجيحات کي روڪڻ نه ڏيندا (اگمو ۽ برينن فيلڊ 1990) ۽ اهو عهدو اهو آهي ته ڊي جي جذباتي تجربي جي حوصله افزائي لاء اڻڄاڻ آهي.

اهو پڻ واضح ناهي ته جنسي رويو تي ΔFOSB اثرات جي هيٺاڙي ڌاڙيندڙ ثالث جيڪي آهن. ΔFosB هڪ اي-اي اين اين ايڪسڪس انحصار ڪندڙ ميزمزم جي ذريعي هڪ ٽرانسپولل ايڪڪٽرريٽر ۽ ريفريسر طور ڪم ڪرڻ لاء ڏيکاريو ويو آهي.مک ڪلنگ ۽ نسٽرر 2003; پيڪسسن ۽ ٻيا. 2003). ڪيتريون ئي حدف ٿيل جينز جي سڃاڻپ ڪئي وئي آهي، جنهن ۾ جلد جيني سي-فاس شامل آهن (اميد ۽ ٻيا. 1992; اميد ۽ ٻيا. 1994; مورگن ۽ ڪرڪن 1989; ڪراچيء ۾ ۽ ٻيا. 2008; جينگ ۽ ٻيا. 2006), cdk5 (بيبي ۽ ٻيا. 2001), ڊنورفين (زڪريا ۽ ٻيا. 2006)، sirtuin-1 (ڪراچيء ۾ ۽ ٻيا. 2009), اين ايف ايف بي سبٽٽس (Ang ۽ ٻيا. 2001)، aاي ايم پي اي جي گيوٽميٽ ريڪارڊ گلويو آرڪسينم سبسٽ ڊي (Kelz ۽ ٻيا. 1999). موجوده نتيجن مان اهو ظاهر ٿئي ٿو ته ملندڙ انسائيڪلوپيڊيا سي فاس جي سطح دماغي علائقن ۾ جنسي تجربو وڌائي ΔFosB (اين سي سي ۽ اي سي اي) ۾ وڌائي ويندي هئي. ف-فاس جي ماتحت آخري ملن ۽ بار بار ملندڙ سيشن کان پوء ان تي منحصر ٿئي ٿو، جيئن اڳئين مطالعي ۾، اهڙي قسم جي گهٽتائي ۾ مردن جي ٻچن جي جانچ نه ڪئي وئي جيڪا آخري فائنل سيشن بعد 1 هفتي (ٻرڙو ۽ ٻيا. 2004) يا جنسي تجربي کان صرف هڪ هڪ سينگار جي سيشن جو حصو آهي (لوپيز ۽ ايٽينبرگ 2002). ان کان علاوه، موجوده تلاش کے ثبوت کے ساتھ مطابقت رکھتا ہے ΔFosB دائمي امفینامین نمائش کے بعد C-fos جین پریشان (ڪراچيء ۾ ۽ ٻيا. 2008). انهن نتيجن سان لائين، ڪيترن ئي ابتدائي جيني ايم آرينز (سي-فاس، فاسب، سي-جون، جون بي ۽ زفڪس اين ايڪسڪس) جي شروعات ڪئي وئي آهي، جنهن ۾ ايڪٽ ڊڪشن انجڻ جي مقابلي ۾ بار بار ڪيڪن انجيڪشن بعد گهٽ ٿي وئي (اميد ۽ ٻيا. 1992; اميد ۽ ٻيا. 1994، ۽ ايم ايففامائن جي حوصلہ افزائي ڪئي وئي آهي فمي ايف ايم ايف دائمي امفٽينينٽ انتظاميه کان واپسي کانپوءجابر ۽ ٻيا. 1995; ڪراچيء ۾ ۽ ٻيا. 2008). فعل جي تناسب، فندي تنقيد جي علاج کان پوء جنسي تجربو جي فڪر کي رد ڪرڻ واري قاعدن جي ضابطي سان واضح طور تي واضح نه ٿيو، ۽ تجويز ڪيل تجزياتي ميکانيزم کي بار بار انعاماتي نموني کي حيوانات جي حساسيت کي ضابطو رکڻ لاء پيش ڪيو ويو آهي (ڪراچيء ۾ ۽ ٻيا. 2008).

آخر ۾، موجوده مطالع مان اهو ظاهر ٿئي ٿو ته اين اين سي ۾ ΔFOS بي جنسي انعام جي ياداشت ۾ هڪ لازمي ڪردار ادا ڪري ٿي، امڪان آهي ته ΔF بي جي عام انعام جي تقاضا ۽ يادداشت لاء ضروري آهي. موجوده مطالعي جي نتيجن جي وڌيڪ وضاحت اسان کي سيلولر ۽ آلوڪ ميکانيزم کي سمجهڻ گهرجي جيڪا جنسي ثواب ۽ حوصله افزائي ڪري ٿي، ۽ ادب جي جسم ۾ اضافو ڏيکاريندي جيڪا ظاهر ڪري چڪو آهي ته Δ ايف بي روين جي ترقي ۾ هڪ اهم ڪردار آهي، جيڪا قدرتي انعام ۾ ΔFOSB جي ڪردار کي ظاهر ڪندي تقسيم ڪندڙ

اضافي مواد

Acknowledgements

حوالا