پويو اڪيلو 2014 Jul 29؛ 9 (7): e102524. دوئي: 10.1371 / journal.pone.0102524. اليڪٽرڪڪس 2014.
تجريدي
انساني رواداري ٻنهي جي وچ ۾ دائمي ڪوڪين جي نموني ۽ عدم روين جي ماڊل ۾ اڳوڻو ڪاڻرياتي سرگرمي گهٽائي ٿي ٿي، جنهن کان پوء بعد ۾ ڊيوائس پروسيسنگ ۽ اعلي آرڊر ايگزيڪيوٽو فن کي ڊائيڪيو ويندو آهي. هن رويي جي جذباتي اثر جو خالص اثر ريفريٽ ڪرڻ جي لاء وڌيڪ متاثر ٿيل آهي. اڳ ۾ اسان اھو ظاھر ڪيو آھي تھ وچن جي وچ ۾ اضافو وڌايو ويو آھي جيڪي وچولي نڪوري سگريڪس (PFC) ۾ دماغي نڪتل ٿيل نيورٽروفڪڪ فڪر (بي ايف سي ايف) جي بيان ۾ ھڪڙو نوري لوڊپيوڪ ميڪانيزم آھن، جيڪو کوڪائن جي مضبوط اثرائتي کي رد ڪري ٿو. جئين بي ڊي اين ايف کي نيروالائي بقا ۽ سنپپيتڪ پلاسٽائيٽي تي اثر انداز ٿي وڃي ٿو، اسان اهو تصور ڪيو آهي ته ڪوکوئن خود انتظام کان بچاء پي ايف سي ۾ نيورونولا مورفولوجي ۽ سنپپيتڪ ڊائيٽي ۾ تبديل ڪري سگهندي. هڪ ناول ٽيڪنڪ، گرافي جي شڪل ۽ گنجائش جو استعمال ڪندي، چوٿين پي ايف ايف جي نفسياتي تبديلين کي ڪائنن خود انتظامي ۽ زبردستي زبردستيء جي 14 ڏينهن جي 7 ڏينهن جي تجزيو ڪيو ويو. اسان جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته مجموعي ڊينڊيتڪڪ شاخنگ ۽ مجموعي سنائيپلوڪ کثافت چوٿين پي ايف ايف ۾ گهٽ ۾ گهٽ ٿي ويا آهن. ان جي ابتڙ، پيالي ايف جي آرٽيڪل اسپين جي کثافت کي پي اي ايف جي پرت وي پيامميل نيورسن تي تمام گهڻو وڌايو ويو آهي. انهن نتيجن مان ظاهر آهي ته ڪوڪن جي جوڙجڪ جي وچ ۾ متحرڪ ڍڪيل تبديلين جو سبب آهي جيڪا ڪوڪين-ڳاڙيندڙ ماڻهن ۾ پي سي ايف جي ڪيل هائپو سرگرمي ۾ مدد ڪري سگهي ٿي.
تعارف
انعام سرڪٽري جي جوڙجڪ پلاسٽڪٽيشن ۾ keyير keyار مشڪوڪ اهم ميڪنزم پيش ڪيا ويا آهن دوا کي ڳولڻ واري رويي کي برقرار رکڻ جي ڪوڪائن جي طاقتور قابليت ۾. [1]). اڳوڻي اڀياس ڏيکاريا آهن ته ڊينڊيتڪ آرگنائزيشن ۽ اسپائن جي کثافت ۾ نائيليس امتحان (اين سي سي) [2]-[4]، ويڙھ ٽڪنڊو علائقو [5]۽ اڳوڻو ڪورتر (PFC) [6] کوڪن کي هيٺيان لڳائڻ. جڏهن ته سڀ کان وڌيڪ مطالعي اين اين سي جي خراب ڪارڪردگي سان منسلڪ جوڙجڪ تبديلين تي ڌيان ڏنو آهي، خاص طور تي گهٽ مطالعو پي ايف سي ۾ تبديل ڪيا آهن. ڪيتريون ئي سٽون آهن جيڪي پي ايم ايف جي انساني ڀڃڪڙي ۾ دائمي ڪوڪين جي نموني جي پيماني تي ظاهر ڪن ٿا [7], [8] ۽ رواداري نموني جي ماڊل ۾ [9], [10]. تنهن ڪري، پي ايف سي ۾ موجود تبديلين جي تبديلين کي واضع ڪرڻ جو انويڪل واقعن کي سمجهڻ لاء ضروري آهي، جيڪا لت کي گهٽايو.
پي ايف سي تسلسل تي ڪنٽرول ۽ فيصلا ڪرڻ واري طريقي کي منظم ڪندي آهي ۽ اهڙي طرح فرد جي رويو ڪنٽرول جي قابليت ، خاص طور تي منشيات جي انحصار ۾ اهم ڪردار ادا ڪندي آهي [8], [11]. مثال طور، انهن ماڻهن کي کوڪن جي نشاندهي ڪرڻ، اڳوڻو ڪرتسڪس چالو گهٽائڻ ۾ منشي جي پوزيشن سان لاڳاپيل آهي ۽ اعلي آرڊر ايگزيڪيوٽو ردعمل کي وڌايو ويندو آهي. [7], [8]، جيڪو تڪرار کي هٿي وٺائي سگهي ٿو. رستن ۾، پي ايف سي ۾ نيروالائي سرگرمين ۾ واڌ ڪئي وئي آهي ڪوڪين جي وقف سان لاڳاپيل آهي [9], [10]، اجتماعي دوا واري ڳولڻ جو رويو [12]، ۽ پوئتي موٽڻ کانپوء ڪوکن بحال ٿيڻ [13]-[15]. ان کان سواء، پي ايف سي کي دائمي ڪوڪائن جي انتظاميه جي پيماني تي جھلي بيسٽيت کي ختم ڪيو ويو آهي [16]. آخرڪار، پي ايف سي ۾ منشيابولي سرگرمي کي متاثر ڪيو ويو آهي چوڪن ۾ چٽسائن کي ڪوچائن جي انتظاميه کان واپسي جي دوران چئلينج انجڻ جاري ڪيو ويو آهي. [9], [17]. گڏوگڏ، اهو اڀياس اهو ظاهر ڪري ٿو ته دائمي ڪوڪين پي ايف سي ۾ وڏا ڪارڪردگي تبديلين کي وڌائي ٿو جيڪا پي سي ايف ۾ اضافو ٿي سگهي ٿي يا / يا يا پي سي ايف ۾ حوصله افزائي ۾ گهٽتائي. بهرحال، پي ايف سي ۾ ميرافياتي ڦيرڦار جو واڌارو نه ڪيو ويو آهي.
موجوده مطالعي ۾ اسان اهو جانچڻ جي ڪوشش ڪئي وئي ته ڇا کولڪو کان پريشان ٿيڻ پي سي ايف ۾ جوڙجڪ تبديلين جي ڪري ٿي. مورتياتي ڦيرڦار کي روايتي طريقي سان استعمال ڪيو ويو، گولي جي ڄمڻ، انهي سان گڏ هڪ ناول ٽيڪنڪ، ٺهيل سرگرافي کي. آرٽيڪوگرافي هڪ منفرد طريقو آهي جنهن کي ايمٽراٿين جي ٽائيم مان امونفورورسنسيس ۽ ٽي ماڊل تصويرن جي بحالي واري سيڪشن کي مجموعي طور تي ڪل ۽ ذيلي قسم جي مخصوص ٺهيل گنجائش جي اجازت ڏيڻ جي اجازت ڏني وئي آهي. [18], [19]. انهن طريقن کي استعمال ڪندي، اسان جي نتيجن کي چوٿين پي ايف ايف ۾ استحڪام فارم ڪوڪين جي جواب ۾ انتهائي پلاسٹکائي ظاهر ڪيو آهي.
مواد ۽ طريقا
جانور ۽ رهائش
مرد اسپراگ-ڊولي چوٽا (Rattus norvegicus) جنهن جو وزن 250-300 g آهي ، ٽاڪنڪ ليبارٽريز (جرمنيٽ ، نيويارڪ) مان حاصل ڪيا ويا. جانور انفرادي طور تي پنهنجي گهرج ۾ خوراڪ ۽ پاڻي موجود اشتهار لائيٽم سان گڏ هئا. تجرباتي پروٽوڪول سڀ آمريڪي صحت جي نيشنل انسٽيٽيوٽ پاران جاري ڪيل هدايتن سان مطابقت رکن پيا ۽ پرينلينڊ اسڪول آف دوائون آف پنسلوانيا يونيورسٽي ۽ پنسلوينيا جي ادارياتي جانورن جي سنڀال ۽ استعمال ڪميٽي يونيورسٽي طرفان منظور ڪيا ويا.
جراحي
جراحي کان پهريان، چوٽي کي 80 ايم ڪيو / ڪلوگرام کٽيامائن ۽ 12 مگسي / ڪلوگرامن (ايم، سينما-آڊريچ، سينٽ لوئس، ايم ايم) سان ٻڌل هئي. هڪ رهائشي سلائيچيني ڪيٿر (اندروني قطر 0.33 ملي، ٻاهران ويندڙ 0.64 مليم) کي صحيح جاگول رڳ ۾ داخل ڪيو ويو ۽ جاء تي محفوظ ٿي ويو. وري ڪيٿر کي ڪلر بلڊ تي ويٺل هوندو هو ۽ هڪ ميش بڪمائوٽ پليٽمنٽ (ڪئمي ڪيٿ، ڪئمبرج، برطانيه) ڏانهن هليو ويو جيڪو چمڙي جي سڌي طرح مٿي اسڪاليل مٿي هيٺ ڏنل هئي. ڪئتنيات روزانو انيڪ بايوٽيڪ ٽيمنائن (ايڪبيڪين ڊسپوڊيم / پوتنشيم کليلينٽ، 0.3 مگ / ايل، هيريين اسڪين، ميليل، نيو) جي هيڊينٽيڊ نموني (اين اين ايڪس ايم / ايم ايل) ۾ ڦهليل ڪيو ويو. ڪيٽٽرن کي پلاٽرن جي خاطريٽر سان ٺهرايو ويو جڏهن استعمال ۾ نه هجي.
کوڪن خود انتظام
7 ڏينهن کي ڪرن جي خود انتظام جي شروعات کان اڳ رشتي جي بحالي تائين رتن کي اجازت ڏني وئي. رتن بي ترتيب سان هڪ ٻن گروهه کي لڳايو ويو آهي: ڪوڪين پاڻ کي انتظام ڪري جانور ۽ سوچي نموني سنڀال ڪن ٿا. هر چوٿين کي مشڪلات رکندڙ ڪوڪنن جي مداخلت لاء جواب ڏيڻ جي لاء تيار ڪيو ويو هڪ يوڪليڪ موضوع سان گڏ جيڪو ٺاهيل ڪوڪين تجرباتي چوٿين طرفان خودمختيار طور تي ساڳيو نمبر ۽ ڦوٽو جي عارضي نموني حاصل ڪيو ويو. سالين جياٽ جي چوٽي لاء ليور پريشر ٿيڻ جو ڪوبه نتيجو نه هو.
شروعات ۾، کوکائن تجرباتي چوپس ماڊولر آپريٽنگ چيمبرز (ميڊ ايسوسيٽسز، ايس ايبنس، وي ٽي) ۾ رکيل هئا ۽ انهن جي اندروني کوڪائن جي بيماري لاء ليور پريس ڪرڻ جي اجازت ڏني وئي (0.25 مگ ڪوڪائن / 59 μl سالائن، 5 جي مٿان انفيويوشن) تناسب جي جوڙجڪ 1 (FR1) شيڊول. هڪ ڀيرو هڪ ڪيڪن تجرباتي چوٿين هڪ ڀيرو آپريٽر سيشن جي هيٺئين هڪ سيشن سيشن ۾ ڪوکن جي 20 انتمائي حاصل ڪئي، ايف ايڪس اينيمڪس شيڊول جي تحت، جواب جي ضرورت کي قابو جي FR1 شيڊول ۾ تبديل ڪيو ويو. ٻئي مقرر ڪيل تناسب شيڊولن تي جواب ڏيڻ لاء، ڪوڪين جي بيماري جي وڌ کان وڌ تعداد تائين اين اين ايڪس سي روزاني خود انتظام سيشن تي محدود ٿي ويو ۽ هڪ اين ايڪسڪس جي وقت جي دور ۾ هر هڪ کيڪوائن انفيوژن، جنهن ۾ هر وقت فعال ليور ردعمل ٺهرايو ويو، پر ڪابه مقرر ڪيل نتيجا نه هئي . روزاني 5 اي آپريٽنگ سيشن (30 ڏينهن / هفتي) سڄو 20 ڏينهن جي لاء ڏني وئي. غير فعال ليور تي رد ڪيون ويون آهن، جن بابت ڪو به نتيجو نه هئا، پڻ ايف ايڪس اينيمڪس ۽ FR2 ٽريننگ سيشن دوران پڻ رڪارڊ ڪيا ويا.
14 کان پوءth روزاني آپريٽنگ سيشن، ڪوکوين تجرباتي ۽ جوکيو سلين ڪنٽرول چٽس پنهنجي گهرج ۾ واپس ويا هئا جتي انهن کي زبردستي دوا جي بيقانونيت جي 7 ڏينهن ضايع ڪيو ويو. پر 7th کاڪين جي بيمارين جو ڏينهن، دماغ هٽايو ويو ۽ پي سي ايف تي برف جي ڀڃڪڙي ڪئي وئي. PFC BDNF अभिव्यक्तिमा कोकोइन-حوصلہ افزائی کی تبدیلیوں کی جانچ پڑتال کرنے والے ہمارے پہلے شائع شدہ مطالعہ کے براہ راست موازنہ کو اپنی طرف متوجہ کرنے کے لئے کوکین کی اہتمام کے سات دن منتخب کیا گیا [20].
پريفيوشن
چوٽين کي تيار ڪيو ويو (100 ايم ڪيو / ڪلو، ايپ سوڊيم پينٽوروبرال) ۽ ايڪس ٿڌو 4٪ فارفرمالديڊايڊ سان 0.1 M PB، PH 7.4 (PFA). هر دماغ کان هڪ گولار گولولو گراهڪ جي لاء استعمال ڪيو ويو هو ۽ ٻيو گولف گولا جي شڪل لاء. آرٽائرس 4٪ پي اي ايف ۾ 2.5 سان گڏوگڏ سموريون پوسٽون 2 ڪلاڪ لاء سيفروس ۽ گولگ ڳاڙهو پوسٽ مقرر ڪيا ويا سي ايم اين ايڪس ۾ 48٪ PFA.
سوراخ
حيرت انگيز جا تجربا اڳ ۾ بيان ڪيل هئا [19], [21]. خوبي طور تي، پي ايف ايف جي ٺهيل ٽائيم رين ۽ ڪورونل (70 nm) ۾ ايم پي سي سي جي سطح تي شامل ڪيا ويا ۽ ربن جي طور تي گڏ ڪيو ويو. ربنس ۾ 50 ايم ايم گليڪين ۾ هتان پهچايو ويو ۽ حل کي روڪيو ويو (0.05٪ ٽينڪس / 0.1٪ ٽينس بفر ۾ بنوائن سيرم البمين (50 ايم ٽسس / ايڪس ايم ايم ايم اين اي ايل، پي ايڇ اينڪس). ربن کي پرائمري اينٽيڊيوز، گادڪسيمڪس ( ايڪسميڪ)، پي ايس ڊيڪسينمڪس (سي ايس ڊيڪسينمڪس)، سيلاب سگنلنگ (، يا سيپيسفسائنن (ابامڪام)، رات جي شروعاتن ۾ ٺهڪندڙ حلن ۾ 150 ° C ربنون ٽرس بفر سان گڏ ڌوڪي ويا ۽ 7.6 ۾ ثانوي انٽيبيوڊز سان لڳل هئابلاڪ ٿيندڙ حل ۾ 50 (بکري جي مخالف-ايڪسا-اٽو 488 ۽ بيٽ مخالف خرگوش سائڪس اينيمڪس يا گيري مخالف خرگوش سائڪس اينيمڪس). ربنن جو مقابلو ڪيو ويو هو ڊپ سان گڏ هر حصي تي ساڳيو سائيٽون ڳولڻ لاء. Zeiss AxioImager Z3 ايپي پائيسنس ماڊروڪپو استعمال ڪندي ٽائل-اسڪين تصويرون گڏ ڪيون ويون آهن. ساڳئي سائيٽ کان تصويرون هڪ اليڪٽرڪس 5-2 سيرل حصن تي هر ربن تي حاصل ڪيا ويا سي آر ٽريمگراف لاء تيار ڪيل خودڪار پروگرام سان 20x تي.
حيرت انگيز جي تجزيه
سيريل تصويرون هر ربن ذريعي کوليا ويا، ترتيب سان، هڪ اسٽيڪ ۾ تبديل ۽ پلگ ان سان ملائي ملٽي اسٽيڪ آرج ۽ اسٽيڪ ريگ (اسٽنف آف اسٽنفورڊ يونيورسٽيء ۾. [21], [22]. زراعت وارو دٻو (19.5 μmx19.5 μm) استعمال ٿيندڙ دلچسپي جي علائقائي (ROI) کي استعمال ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويو. چونڊون نيوونالٽ سيلون ادارن يا ٻين غير واضع خصوصيتن کي خارج ڪرڻو پيو. خودڪار ٿيل تصويري تجزيي لاء، Synaptophysin، گلووتامڪ اسيد ڊررو باڪسائيزيس-ايڪس اينڪسڪس (GAD65) ۽ پي ڊي ڊيڪسيمڪس لاء دلچسپي جي فصلن (فصلن) جو ترتيب پاڻمرادو طور تي ImageJ ۾ خود کار الورتورڊمز سان ٺهرايل ٿي ويو. فصلون ڪوڊ ڪيو ويو ۽ تجزيا حالت تائين انڌو هلائي وئي. هڪ خودڪار، threshold-based جي چڪاس پروگرام مثبت نحو جي طور تي سڃاڻپ پٽي جي تعداد کي مقدار جي طور تي استعمال ڪيو ويو جيئن اڳ بيان ڪيل [23]. presynaptic ٹرمینلز کے اخراجات، حوصلہ افزائی پوزیشنینپیٹک ٹرمینلز، اور GAD-مثبت (نابالغ) نمیوں کا فیصد پی سی ایف کے دو مختلف ٹشو بلاکس سے جمع کردہ ایک جانور کے اوسط 75 نمونہ سائٹس سے شمار ہوا.=5 پوسٽينپپسيڪ پٽيڪٽر ۽ ايڪس اينڪسڪس نموني جي ايڪسڪسينڪس کان 5 پريسپپيڪڪ پٽيڪٽي جي ايڪسڪسين نموني جي سائيٽن جي ايڪسينڪس نموني وارن جانورن وارن جانورن جي ماهرين ۽ ايڪس اينڪس پوسٽينپيپڪ ۽ ايڪس نيڪس پريسپپڪڪ پائينڪٽي جي ايڪسينڪس نموني جي سائيٽن تي زينت ڪوڪين کي جانورن جي حوالي ڪيو ويو آهي. تنقيد جي کثافت لاء ميڊيڪل اقدار ۽ فيض جي عيوضات جي تناسب جي حساب سان ڏوهه ڪئي وئي ۽ ٽيو ٽيسٽ هلائيندڙ ميڊيا استعمال ڪندي هلڻ جي لاء آزمائي ٿو ته ڇا گروپ جو مطلب آهي وچ ۾ فرق آهي.
ريپ-گلگ طريقو
سنگاپور سيڪنڊ گولي کي لڳل پيش ڪيو ويو آھي جيئن اڳ بيان ڪيو ويو آھي [24], [25]. خوبي طور تي، ايم پي سي جي هر هڪ حيوانات جي ٻنيء کان مٿي ڪيو ويو هو 100 مائيم ڪورون حصن ۾ ۽ پوسٽ مقرر ڪيو ويو. 1٪ آسميم ٽائيٽ آڪسائيڊ ۾ پوسٽ ٿيل. بعد ۾ 0.1 M PB، پي ايڇ ڊيڪس. سيڪشن ۾ رات جو زڪوڙي پٽڪوٽن پوسٽشيم ڊائرموٽ ۾ شامل ڪيو ويو، مختصر طور تي ڌوڪو ڪيو ويو ۽ سينووچ طريقو سان 7.4٪ چانديٽ نائٽريٽ سان ڀريل آهي. [25]. حصن ۾ جليٽٽين ڪڻڪ واري سلائڊ تي ايڪس اينڪسڪس سيڪروروز ۽ سليوس سان ٺهيل ٿڌاڻن سان ٺهيل هئا.
Golgi Analysis
Golgi سلائڊ ڪوڊ ڪيو ويو ۽ انڌن کي انڌو ڪيو ۽ سڀني تجربن جي تجربي واري تجزيه کي. نيونون تصويرون ۽ ڊٿا آرٽيڪل اسپائن جون ٽرڪن ۽ نمائندو تصويرون گڏ ڪيون ويون هڪ بيٺل BX51 اولمپس خوردبيني جي استعمال سان گڏ هڪ اين ايڪسڪس ٽيڪس ايڪسڪسڪس اين اي سان گڏ هڪ موٽر سائيڪل واري اسٽيج (اڳوڻي سائنسيفٽ، ريللينڊ، ايم) سان. dendritic برانچنگ تجزيي لاء، اين ايڪسڪس نيورسن تجزيه مطابق في جانور لاء چونڊيو ويو. اسان ترتيب ڏنل نوري جي ڊيگهه ۽ پيچيدگي واري ماڊرن نوري جون جي ۽ ترقي يافته شال تجزيي جي ماپ جو اندازو ڪيو. 20-0.7 μm (ريڊل ۽ ايڪلي ڊينڊريٽس شامل آهن) جي وچ ۾ چوڪرن جي شاخن (شاخ پوائنٽس) جي اندر ايندڙ ڳاڙيلن جو تعداد ماپ ۽ گروپن جي ڀيٽ ۾ مقابلو ڪيو ويو آهي. اسپين جي کثافت جي تجزيي لاء، گهٽ ۾ گهٽ 7 μm جا حصا ٽيون آرٽيڪل کان ماپ ۾ ڊيزيمڪس-5 حصن ۾ بسلل ڊيٽرن جي تجزيه ڪئي وئي. ايڪسينٽ اين ايڪس ايڪس ايڪس نيروسن جي فيڊرز زائس AxioImager Z250 ايپيفورسسنس جي خوردبيني جي استعمال سان مائروروسڪوپي مان هڪ نيروسن جو تجزيو ڪيو ويو. چمڙي جي نمونيات اڳ ۾ بيان ڪيل بيان ڪيل هئي [26]. هر ڏند جي ڦيري جي رين جي گنجائش ۽ لڪير جي بيماري (ڳاڙهي، ڳاڙھو، مرچڻ، پيالو جو ٺهيل) جي وچ ۾ گروپن جي ڀيٽ ۾ مقابلو ڪيو ويو آهي. نيشنل انسٽيٽيوٽ آف ہیل (ImageJ) کان اوپن سورس سافٽ ويئر گوليگ لاء استعمال ڪئي وئي ۽ تيمرياتي انگن اکرن جي تجزيو ڪرڻ.
نتيجا
کوکين کان بچاء مجموعي نفاذ جي کثافت گھٽائي ٿي
آرٽيڪراف کي مخصوص ميفولوجي ڦيرڦار کي پڪڙڻ لاء ٻنهي حوصلہ افزائي ۽ موصوف جي نثارن ۾ تبديلين جي ماپ کي استعمال ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويو آهي ته پي سي ايف ۾ ڪيڪائن خود انتظام کان بچڻ جي جواب ۾. آرٽيڪوگرافي هڪ اعلي ذريع طريقو آهي، جيڪا ٺهيل شڪل ۾ مجموعي، مخزن ۽ خوشحالي واري ٺهڪن جي درست مقدار جي اجازت ڏئي ٿي جيڪا مناسب طور تي سڃاڻپ ڪرڻ يا روايتي قاعدو مائڪروڪروپي طريقن سان مڪاني ترتيب ڏني وئي آهي. [19]. جيئن ته انفرافي ۽ حوصلہ افزائي واريون سازشون منشي اجزاء سرڪٽري جو لازمي اجزاء آهن [13], [27], [28] اسان اهو ناول طريقو استعمال ڪيو هو ته پي سي ايف ۾ ميففيجي تبديلين کي چڪاس ڪرڻ کان پوء ڪوچين کان. ھڪڙو دماغ جي ھميشه جي اڌ گولن مان سي اين ايف جي سيڪشن ۾ ملا ڪئي-سلين ۽ 5 کوڪائن تجربو چوٿون انٽيبيوڊ سان پي ايس ڊيڪسيميمڪس، ھڪ پوسٽينپيپيڪ حوصلہ مارڪر، سينپپيفسينن، ھڪ پريينپپيڪڪ مارڪر ۽ گادڪسينمڪس سان گڏ، جنھن ۾ نموني نونون ۽ نيونون لکيل آھن. نقاشي کي ڦهلائڻ ۽ مخزن جي جوڙجڪ جي سيڪڙو سينگارولي پرت V ۾ طئي ڪيو ويو (شڪل 1A ۽ 1B). اسان جي نتيجن مان ظاهر آهي ته ڪوپائن کان بغير دوران Synaptophysin کثافت ۾ هڪ وڏي گهٽتائي هئي (شڪل 1C)، جيڪي سڀني presynaptic ٽرمينلز کي اپائن ٿا (ٽي (7)=2 ، ص <0.05]. excitatory synaps کثافت ۾ ڪو خاص گهٽتائي نه هئي [t (8)=0.48، ص=0.32] پي ايس ڊي ڊي اينيمڪس پٽيٽر جي حساب سان ماپ ڪئي وئي (شڪل 1D). دلچسپ ڳالهه، GAD65-مثبت مثبت نموني جي نثارن جي وڌ ۾ وڌڻ جي لاء هڪ غير اهم رجحان موجود هو [ٽي (8)=-1.39، پي=0.9] (شڪل 2E).
کوکين کان بچاء پي اي ايف ۾ اسپائن ٽائيم وڌائڻ دوران ڊنٽيتڪ شاخنگ کي گهٽتائي ڪري ٿي
گوليگ طريقي سان نونالل شاخنگ ۽ دندنٽ واري اسپين کثافت ۾ ڦيرڦار جي امتحان ڪرڻ لاء استعمال ڪيو ويو هو ته ان جي نتيجي ۾ ٺهڪندڙ کثافت ۾ ڪيل تبديلين تبديلين جي تصديق ڪرڻ (شڪل 1). اسان پي سي ايف ۾ نيروسن جي سبسٽ تي هڪ گلگت بلتستان جي تڪليف تي گلگت بلتائن کي ٻين شين جي ساڳين جانورن مان جيڪي به استعمال ڪيا ويا هئا اهي استعمال لاء ئي آرٽ tomography studies. دندن جي شاخنگ، دندنٽ واري اسپائن جي حساب سان، ۽ ماھر جي نمونيات جو جائزو ورتو ويو. ٻنھي نمائندن جي ھڪڙي نموني ڪنٽرول جي پي ايف سي کان ھڪڙو نمائندو پيمائڊل نيورسن ۽ ڪوڪوائن جي ڀڃڪڙي چوٿين ۾ ڏيکاريل آھن شڪل 2A. شال پلاٽ جي ڪمرن جي تعداد (شاخ پوائنٽس) جي اندر ايندڙ ڳاڙيلن ۾ 5-250 μm جي وچ ۾ گھٽجي ويندي آهي. اسان جا نتيجا ظاهر ڪن ٿا ته ڪائنن جي انتظاميه کان زبردستي زبردستيء جي هيٺيان 7 ڏينهن ڊنٽرتري پيچيدگي ۾ هڪ وڏي گھٽتائي هئي (شڪل 2B). ANOVA جا ٻه رستا طريقا اپنائڻ واريون تجويز ڪيل ڊيٽا جي تجزيا ظاهر ڪرڻ جي وڏي اهم اثرات ظاهر ڪري [ايف(1,738)=30.59 ، ص <0.0001] ۽ ريڊئيس [ايف(245، 738)=289.6 ، ص <0.0001] (شڪل 2B)، ڊيٽرنس جي نقصان جي تصديق ڪندڙ آهي جيڪو نابودن جي نقصان سان متفق ٿئي ٿو.شڪل 1C). ثانوي ۽ ٽئين ترتيب جو تجزيو ڊاٽرنس سان ٺهڪندڙ ڄاڻايو ويو آهي ايڪسينڪس جي پڙهيل نائن واري ڏينهن جي هيٺيان ڊنٽرنٽ اسپائن ۾ هڪ اضافو واڌارو [ٽي (7)=−3.12 ، ص <0.05] (شڪل 2D). وڌيڪ خاص طور تي، کوڪائن جي نمائش کان بچاء وڌندڙ پتلي اسپائن جو تعداد وڌائي ٿي، جڏهن ته ٻيا اسپين ذيلي قسم تي ڪو خاص اثر نه ٿيو (شڪل 2E)، جيئن ٻن طرفن ذريعي لاٿو ويو ته علاج جي مکيه اثرات سان اينووا اپائن جو طريقا اپايو. [F(1,30)=11.9، ص=0.0017]، اسپائن ذيلي قسم [F(4,30)=57.7 ، پي <0.0001] ، ۽ ھڪ اھم علاج ايڪس اسپائن ذيلي قسم جي گفتگو [F(1، 4، 30)=8.8 ، ص <0.0001].
بحث مباحثي
موجوده مطالعي ۾ اسان اهو سمجهون ٿا ته ڪوڪائن جي خودمختاري کان زبردستي غريب جي ايڪس اين ايڪس جي پٺيان پي سي ايف جي ورڇ وارن ۾ بيان ڪيل ساختماني ۽ مطابقت پذير تبديليون. خاص طور تي، پيامامل نيورسن جي دندنٽي شاخنگ ۾ هڪ اهم گهٽتائي ۽ سنسڪرت جي کثافت ۾ عام نقصان آهي، جيئن ته Synaptophysin سان ليبل مجموعي پريسينپيڪٽ بوٽن جي گهٽتائي جي شدت سان ماپي ٿي. نائنسپيپڪڪ کثافت جي نقصان جي باوجود، پرتل ڊي جي ميراثل نيورون جي بصال ڊيٽرنٽ ڊينڊٽيٽائت رائن جي گھڻائي ۾ خاص طور تي پتلي، پلاسٽڪ اسپائنز ۾ اضافو ڪيو. جيئن ته اسان پي ايس ڊيڪس اينيمڪس جي کثافت ۾ اهم تبديلين جو پتو نه لڳايو آهي، اهو اهو ثابت ڪيو وڃي ٿو ته presynaptic ٽرمينل ۾ گهٽ آهي، پر اڇن جي کثافت ۾ اضافو ٿي سگهي ٿو ته گهڻن سنائيپلوٽ بوٽن جي تعداد ۾ اضافو ٿي سگهي ٿي. اضافي طور تي، اهو پڻ سمجهڻ جي قابل آهي ته اسان پي سي ايف ۾ موثر نموني واري سنگت جي لاء هڪ رجحان ڏسڻ ۾ اچي ٿي. پتلي اسپائنن کان پوء پلاسٽائٽي ۾ ملوث آهن [29]، انهن اسپائن ۾ اضافو انهن معاوضتي نيورسن تي مطابقت پذير آهستي کي برقرار رکڻ لاء معاوضي واري پلاٽ ويئر جي نمائندگي ڪري ٿو جيڪو ڊندرياتي شاخن کي وڃائي ڇڏيو آهي.
اڳئين مطالعي مان ظاهر ڪيو ويو آهي ته اين اين سي ۾ ڪوڪائن ڊيٽينيٽي آرربائزيشن ۽ ريجن جي کثافت وڌائي ٿي [2]-[4]. تازو، دوميتري ۽ ايٽ.، 2012 [30] ظاهر ڪيو ويو آهي ته اين سي سي بنيادي ۽ شيل ۾ کوڪوائن کي متحرڪ طور تي مسترد اسپائن کي ختم ڪري ٿو. خاص طور تي، شيل ۾، ڪوڪين کان واپسي پتلي اسپين وڌائي، اين اين سي جي شيل ۾ مشرومن جي اسپن سر جي کثافت کي گهٽايو [30]. اين سي سي جي مطالعي جي ابتڙ ، صرف چند مطالعات آهن جن پي سي ايف ۾ نيورونال مورفولوجي تي ڪوڪن جي اثرن جي جاچ ڪئي آهي. [6], [31]. اسان جي ڊيٽا هڪ تازي مطالعي سان برابر آهي جيڪا واضع آهي ته ڪوڪين پي ايف سي ۾ رائن جي کثافت ۾ اضافو ڪري ٿو [31]. خاص طور تي، چوٿون لڳاتار ۽ مستحڪم اسپائنن ۾ تمام گهڻي واڌاري هئي، يعني هاڻوڪي زين واري ڏينهن کان پوئتي لڳائن ٿيون، ايڪلي ڊينڊٽيٽس تي، وڌيڪ ڪوکوائن حالتن جي جڳهه ترجيحات ۽ ڪوکائن-حوصلہ افزائي وحدت [31]. پوئين پي سي ايف پي جي ماٿل II-III نيوورسن ۾، ايپي ۽ بيالل ڊينڊريٽس تي ڊائونٽائن جي تقريبن 3 اسپين جي قيمت ٻڌايو، جنهن ۾ شدت سان نمايان ٿيندي هئي. [32]. اسان جي قيمتي ڪنڪسولس'2 اسپين / ڊيٽميڪ حصن جي 10 μm جي گهٽتائي ۾ گهٽ هوندا آهن، جو شايد مختلف نيرواليل آبادي جي تجزيه (پرت وي باسل ڊيٽرنس) يا امتياز جي ٽيڪنڪ ۾ فرق هجڻ جي ڪري. موجوده مطالعي ۾ اسان هڪ واحد تيز رفتار گوليگي جو طريقو استعمال ڪيو هو جڏهن ته لوڪوفر پيلي ڊائي جو آئنٽفوٽيتي انجنيشن قونصل ايملنگ سان گڏ گڏيل ريڊلي ۽ ساٿين جي استعمال سان استعمال ڪيا ويا آهن. [32] نيرواليل ۽ دندنٽ جي ميرافيات کي ڏسڻ لاء. ان کان علاوه، اسان جي ڳولا جي نتيجي ۾ کوڪوائن خودمختاري کان بچاء جي مدت جي اهميت کي اجاگر ڪري ٿو جيڪا دماغ ۾ ساختماني تبديلين جي ڪري ٿي. ھڪڙي شايع ٿيل رپورٽ ۾ ڊگھي مدت (ڊي اينيمڪس-ايڪسڪسڪس ڏينهن) کان پوء ڊنٽرتير جي آبادي ۾ واڌ وڌايو ويو آھي [6]نارين غلن ۾ زبردست غفلت جي هيٺيان ويجها ڏينهن اسان جي گهٽتائي جي مقابلي جي ابتڙ آهي. هنن طريقي سان اختلافن ۽ شاخنگ جي انگن اکرن ۾ اختلافات، ٻنهي مطالعي ۾ اسپين جو تعداد وڌايو ويو آهي، ڪيڪن آستين جي دوران وڏي پيماني تي سرڪٽ جي بحالي جي تصديق. مستقبل جي مطالعي کي انهن واقعن جي وقت جو اندازو لڳايو ويندو آهي اهو ٻڌائڻ لاء ته ڇا اهي جوڙجڪ تبديلين ٽرانسيل يا ڊگهي گذارڻ وارا آهن.
اسان جي شناخت ظاهر آهي ته ڪوکوائن جي خودمختاري کان زبردست غفلت متحرڪ ساختماني تبديلين کي متاثر ڪري ٿو ۽ PFC ۾ synaptic ٻيهر تنظيم ڪري ٿو. هنن نتيجن کي پي سي ايف ۾ هيڪو-سرگرمي جي وضاحت ڪري سگھي ٿو جيڪو بار بار ڪيڪن جي نموني جي نتيجي ۾ هوندو آهي [8], [33]. ان کان علاوه، اسان جي آڌار تي پي ايف سي جي ٺاھڻ جي ظاهر ڪيل پوئين اڀياس جي حمايت ڪندي [7], [8]۽ ميزيل پي ايف ايف ۾ اضافي جي گراهڪ اضافو ڪيو ويو آهي ۽ کوڪائن جي واپسي ۾ [34]. ان ڪري، دائمي ڪوڪين جي نمائش کانپوء پي ايف سي جي هيڪو-سرگرمي جي حساب سان ميڪانيزم [8], [10] شايد 1 (GABAergic) ۾ اضافو ڪيو ويندو، (2) گلوتاميرجڪ ۾ گهٽتائي ۽ / يا (3) ڊيپينيميرڪڪ Synaptic ان پٽ پي ايم ايف ۾ گهٽتائي. موجوده مطالعي مان اهو ظاهر ٿئي ٿو ته ڪوڪين کان بيقانوني طور تي مجموعي طور تي ٺهيل گنجائش کي گهٽتائي گهٽ آهي جيئن ته Synaptophysin مثبت Synaptic Puncta کی تعداد میں کمی کی طرف اشارہ کیا جاتا ہے. انهن انگن بابت اها ڄاڻ آهي ته پي ايف سي ۾ پوسٽ-سينپليڪ ردعمل ۾ گهٽتائي آهي، ممڪن آهي ته ممڪن آهي گيوتاميون يا ڊومامين ان پٽ جي ذريعي. درحقيقت، اهڙا اهڙا مطالع آهن جيڪي ڪوڪائن گلووتاماتيرڪ سر ۾ گهٽتائي پيدا ڪري ٿو [35], [36]. تنهن هوندي، گوليگ طريقو استعمال ڪندي اسان پيراڊيدل نيورسن جي بصري ڊاندرن تي پتلي ڊنٽرتري اسپائن جي تعداد ۾ اضافو ڪيو آهي، جيڪا پي سي ايف ۾ خوشبو انٽيليشنز کي باقي نيورائن ڏانهن وڌائي ٿي. ظاهر ڪيل تڪرار انگن اکرن کي نقصان پهچائڻ جي وڏي نقصان سان لاڳاپيل نابالغ جو مجموعي نقصان ظاهر ڪري ٿو، جيڪو اسان جي معاوضي جي جواب سان مشاهدو ڪري ٿو، ممڪن آهي ته بيڊ اين ايف جي وڌائي وڌائي، جيئن اسان جي پوئين نتيجن ۾ ڏيکاريل آهي. [20]، باقي نيورين تي ڊائنٽرتڪ اسپائن جي کثافت وڌائڻ لاء.
مجموعي طور تي، اسان جي دستيابن کي ظاهر ڪيو ويو آهي ته پي سي ايف ۾ ڪيڪن آستينن ۾ متحرڪ ٻيهر تنظيم. خاص طور تي، پيپي ايف سي ايف ۾ آرٽيڪلڪ رابطي ۾ هڪ اهم گهٽتائي، ڊيٽرتير شاخنگ جي نقصان ۽ وڌايل ٽيلين جي تعداد ۾ اضافو ٿيو آهي. هنن نتيجن کي پي اي ايف جي دائمي ڪوڪن جي بدعنوان ۾ ڪيل ڪيل ڪيل هائپو سرگرمي جي بنياد تي بنيادي بنيادن تي مهيا ڪري سگھن ٿا ۽ شايد شايد ڪنوين جي نشري جي دوران ٿيڻ سان سنجڪندڙ ڪنٽرول جي نقصان جي وضاحت ڪري سگهجي ٿي.
پئسي جو بيان
اهو ڪم NIDA گرانٽ DA22339 ۽ DA033641 (RCP & GSV) ۽ DA18678 (آر سي پي) جي مدد سان هو. ايڇ ڊي ايس انفرادي K01 انعام (DA030445) طرفان سهڪار ڪئي وئي هئي. فنڊز جو مطالعو ڊيزائن ، ڊيٽا گڏ ڪرڻ ۽ تجزيو ، شايع ڪرڻ جو فيصلو ، يا رسم الخط جي تياري ۾ ڪوبه ڪردار نه هو.
حوالا