DeltaFosB v spoločnosti Nucleus Accumbens je rozhodujúca pre posilnenie účinkov sexuálnej odmeny. (2010)

KOMENTÁRE: Delta FosB je marker pre všetky závislosti, behaviorálne aj chemické. Keď sa táto molekula zvyšuje v okruhu odmien, zvyšuje sa aj návykové správanie. Je to jedna z molekúl zapojených do neuroplastických zmien. Tento experiment ukazuje, že sa zvyšuje so sexuálnymi skúsenosťami, podobne ako v prípade drogových závislostí. V experimente použili genetické inžinierstvo na zvýšenie jeho hladín nad „normálne“. To malo za následok väčšie uľahčenie sexuálnej aktivity. Myslíme si, že sa to deje so závislosťou od pornografie.

Džbány KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Gény Brain Behav. 2010 Okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Oddelenie anatómie a bunkovej biológie, Schulichova lekárska škola a stomatológia, Univerzita v západnom Ontáriu, Londýn, Ontário, Kanada.

Abstrakt

Sexuálne správanie u samcov potkanov je odmeňovaním a posilňovaním. Málo sa však vie o špecifických bunkových a molekulárnych mechanizmoch sprostredkúvajúcich sexuálnu odmenu alebo o posilňujúcich účinkoch odmeny na následné vyjadrenie sexuálneho správania. Táto štúdia testuje hypotézu, že ΔFosB, stabilne exprimovaná skrátená forma FosB, zohráva rozhodujúcu úlohu pri posilňovaní sexuálneho správania a skúsenosti vyvolanom uľahčení sexuálnej motivácie a výkonu.

Ukázalo sa, že sexuálne skúsenosti spôsobujú akumuláciu ΔFosB v niekoľkých limbických oblastiach mozgu, vrátane jadra accumbens (NAc), mediálnej prefrontálnej kôry, ventrálnej tegmentálnej oblasti a caudate putamen, ale nie mediálneho preoptického jadra.

Ďalej bola indukovaná indukcia c-Fos, downstream (potlačená) cieľová hodnota ΔFosB, meraná v sexuálne skúsených a naivných zvieratách. Počet kmeňom indukovaných c-Fos-imunoreaktívnych buniek bol signifikantne znížený u pokusných zvierat v porovnaní s sexuálne nedovedenými kontrolami.

Napokon, hladiny ΔFosB a jeho aktivita v NAc boli manipulované pomocou vírusom sprostredkovaného prenosu génov, aby sa študovala jeho potenciálna úloha sprostredkovať sexuálne skúsenosti a skúsenosti vyvolané uľahčenie sexuálnej výkonnosti. Zvieratá s nadmernou expresiou DFosB vykazovali zvýšené uľahčenie sexuálnej výkonnosti so sexuálnymi skúsenosťami vo vzťahu k kontrolám. Na rozdiel od toho expresia ΔJunD, dominantného negatívneho väzobného partnera ΔFosB, oslabila sexuálne skúsenosti indukované sexuálne skúsenosti a zmiernil dlhodobú udržiavanie uľahčenia v porovnaní so zeleným fluorescenčným proteínom a s nadmerne exprimujúcimi ΔFosB skupinami.

Tieto zistenia spoločne podporujú kritickú úlohu pri expresii ΔFosB v NAc na posilnenie účinkov sexuálneho správania a sexuálnych skúseností vyvolaných uľahčením sexuálnej výkonnosti.

ÚVOD

Sexuálne správanie je pre mužské hlodavce vysoko obohacujúce a posilňujúce (Coolen a kol. 2004; Pfaus et al. 2001). Okrem toho sexuálna skúsenosť pozmeňuje následné sexuálne správanie a odmenu (tenk et al. 2009). Pri opakovanej skúsenosti s párením je sexuálne správanie uľahčené alebo "zosilnené", čo je dokázané zníženou latenciou na iniciovanie párenia a uľahčenie sexuálnej výkonnosti (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Podstatné bunkové a molekulárne mechanizmy sexuálnej odmeny a posilnenia sú však zle pochopené. Zistilo sa, že sexuálne správanie a kondicionované príznaky, ktoré predpovedajú párenie, prechodne indukujú expresiu bezprostredne skorého génu c-fos v mezolimbickom systéme samcov potkanov (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Okrem toho sa nedávno preukázalo, že sexuálne skúsenosti indukujú dlhodobú neuroplasticitu v mesolimbickom systéme potkanov (Frohmader et al. 2009; džbány et al. 2010). Okrem toho sa u samcov potkanov ukázalo, že sexuálne skúsenosti indukujú ΔFosB, a Člen rodiny Fos, v nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, skrátený zostrihový variant FosB, je unikátnym členom rodiny Fos kvôli jeho väčšej stabilite (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) a zohráva úlohu pri zlepšenej motivácii a odmeňovaní liekov zneužívania a dlhodobej neuralkej plasticity sprostredkujúcej závislosť (Nestler et al. 2001). ΔFosB tvorí komplex heteromérneho transkripčného faktora (aktivátorový proteín-1 (AP-1)) s Jun proteínmi, výhodne JunDChen et al. 1995; Hiromi et al. 1998). Prostredníctvom indukovateľnej nadmernej expresie ΔFosB, primárne obmedzenej na striatum s použitím bi-transgénnych myší, sa produkuje fenotyp behaviorálneho správania podobný správaniu, aj napriek absencii predchádzajúcej expozície lieku (McClung et al. 2004). Tento behaviorálny fenotyp zahŕňa senzibilizovanú lokomotorickú odpoveď na kokaín (Kelz et al. 1999), zvýšenie preferencie pre kokaín (Kelz et al. 1999) a morfín (ZACHARIE et al. 2006) a zvýšenú samoadministráciu kokaínu (Colby et al. 2003).

Podobne ako odmena za lieky, ΔFosB je upregulovaný prirodzeným odmeňujúcim správaním a sprostredkováva vyjadrenie tohto správania. Nadmerná expresia ΔFosB v NAc pomocou modelov hlodavcov zvyšuje dobrovoľný chod kolies (WERMA et al. 2002), inštrumentálne reagovanie na potraviny (Olausson et al. 2006), príjmu sacharózy (Wallace et al. 2008), a uľahčuje mužov (Wallace et al. 2008) a samice (Bradley et al. 2005) sexuálne správanie. Takže ΔFosB môže byť zapojený do sprostredkovania účinkov prirodzených odmeňovacích skúseností. Tsúčasná štúdia sa rozširuje o predchádzajúce štúdie, pričom konkrétne skúmala úlohu ΔFosB v NAc v dlhodobých výsledkoch sexuálnych skúseností z následného párovania a nervovej aktivácie v mezolimbickom systéme.

Po prvé, bolo zistené, ktoré oblasti mozgu zapojené do odmeňovacieho obvodu a sexuálneho správania vyjadrujú sexuálne skúsenosti indukované ΔFosB.
Ďalej, účinok sexuálne skúsenosti indukovaného ΔFosB na párovanie indukovanú expresiu c-Fos, downstream cieľ potlačený pomocou ΔFosB (Renthal et al. 2008).
Nakoniec bol určený účinok manipulácie s aktivitou ΔFosB v NAc (nadmerná expresia génu a expresia dominantného partnera s negatívnym väzbovým vzťahom) na sexuálne správanie a skúsenosti vyvolané uľahčenie sexuálnej motivácie a výkonnosti použitím technológie na dodávanie vírusových vektorov.

METÓDY

zver

Dospelé samce potkanov Sprague Dawley (200-225 gramov) boli získané od Charles River Laboratories (Senneville, QC, Kanada). Zvieratá boli uložené v klietkach z plexiskla s tunelovou trubicou v pároch rovnakého pohlavia v priebehu pokusov. Izba kolónií bola regulovaná teplotou a udržiavaná na 12 / 12 hodinovom tmavom cykle s jedlom a vodou podľa chuti okrem testovania správania. Stimulujúce samice (210-220 gramov) na párenie sa zúčastnili subkutánneho implantátu obsahujúceho 5% estradiol-benzoátu a 95% cholesterolu po bilaterálnej ovariektómii pri hlbokej anestézii (0.35g ketamín / 0.052g Xylazin). Sexuálna receptivita bola vyvolaná podaním 500μg progesterónu v sezóne 0.1 ml sezónu približne 4 hodín pred testovaním. Všetky postupy boli schválené Výbormi pre starostlivosť o zvieratá a pre použitie na Univerzite v Západnom Ontáriu a boli v súlade s usmerneniami CCAC, ktoré zahŕňajú stavovce vo výskume.

Sexuálne správanie

Párkovanie sa vyskytlo počas rannej tmavej fázy (medzi 2-6 hodinami po začiatku tmavého obdobia) za tmavého červeného osvetlenia. Pred nástupom experimentu boli zvieratá náhodne rozdelené do skupín. Počas párenia sa samce potkanov ponechali kopulovať na ejakuláciu alebo 1 hodinu a zaznamenali sa parametre pre sexuálne správanie, vrátane latencie (ML, čas od zavedenia žien do prvej úlohy), latentnosti intromiózy (IL, čas od zavedenia (EI, čas od prvej intromizácie po ejakuláciu), interval po ejakulácii (PEI, čas od ejakulácie po prvú následnú intromizáciu), počet pacientov (M, panvové pnutie bez vaginálnej penetrácia), počet intromisií (IM, fixácia vrátane vaginálnej penetrácie) a účinnosť kopulácie (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). V analýze pre zvieratá, ktoré nevykazovali ejakuláciu, neboli zahrnuté počty úchytov a intromízok. Montáž a intromízne oneskorenie sú parametre indikujúce sexuálnu motiváciu, zatiaľ čo latencia ejakulácie, počet kopícií a efektívnosť kopulácie odrážajú sexuálnu výkonnosť (Hull 2002).

Experiment 1: Vyjadrenie ΔFosB

Sexuálne naivné samce potkanov sa nechali spájať v čistých testovacích klietkach (60 × 45 × 50 cm) pre 5 po sebe idúce denné párenie alebo zostalo sexuálne naivné. Doplnková tabuľka 1 (NNS, n = 5), naivný pohlavie (NS, n = 5), bez sexu (ENS, n = 5) a skúseného pohlavia (ES, n = 4). NS a ES zvieratá boli usmrtené 1 hodinu po ejakulácii v posledný deň párenia na vyšetrenie expresie c-Fos indukovanej párou. NNS zvieratá boli usmrtené súbežne s živými zvieratami ENS 24 hodín po konečnom párení na vyšetrenie AFosB vyvolaného sexuálnymi skúsenosťami. Sexuálne skúsené skupiny sa porovnali so sexuálnym správaním pred následným testovaním. Medzi skupinami sa nezistili žiadne významné rozdiely v prípade akýchkoľvek behaviorálnych opatrení v rámci vhodnej relácie párovania a sexuálne správanie vyvolané sexuálnymi skúsenosťami bolo pre obe skúsené skupiny (Doplnková tabuľka 2). Kontroly zahŕňali sexuálne naivné samce, s ktorými sa zaobchádzalo súbežne so spriaznenými zvieratami zabezpečujúcimi vystavenie ženským pachom a vokalizáciám bez priameho ženského kontaktu.

Na usmrtenie boli zvieratá hlboko anestetizované s použitím pentobarbitalu sodného (270mg / kg; ip) a perfúziou intrakardiálne s 50 ml fyziologického roztoku 0.9% a následným 500 ml paraformaldehydu 4% v fosfátovom pufri 0.1M (PB). Mozgy boli odstránené a postfixované na 1 h pri izbovej teplote v rovnakom fixačnom prostriedku, potom boli ponorené do 20% sacharózy a 0.01% azidu sodného v 0.1 M PB a uložené pri 4 ° C. Koronálne rezy (35 μm) boli rezané zmrazením mikrotómy (H400R, Micron, Nemecko), zhromaždené v štyroch paralelných sériách v roztoku kryoprotektantu (30% sacharózy a 30% etylénglykolu v 0.1 M PB) a skladované pri -20 ° C. Voľne plávajúce rezy boli intenzívne premyté s fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom 0.1 M (PBS, pH 7.3-7.4) medzi inkubáciami. Časti boli vystavené pôsobeniu 1% H₂O₂ pre 10 min pri izbovej teplote na zničenie endogénnych peroxidáz, potom sa zablokuje v PBS + inkubačnom roztoku, ktorým je PBS obsahujúci albumín bovinného séra 0.1% (katalógová položka 005-000-121, Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) a 0.4% Triton X -100 (katalógová položka BP151-500, Sigma-Aldrich) pre 1 h. Sekcie sa potom inkubovali cez noc pri 4 ° C v pan-FosB králičej polyklonálnej protilátke (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB protilátka bola vyvolaná proti internej oblasti zdieľanej FosB a ΔFosB. Bunky ΔFosB-IR boli špecificky ΔFosB-pozitívne, pretože v čase po stimulačnom čase (24 hodinách) sa všetky detegovateľné stimuly indukované FosB degradujú (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Okrem toho v tomto experimente boli zvieratá, ktoré sa párili v posledný deň (NS, ES), usmrtili 1 h po párení, teda pred expresiou FosB. Western blot analýza potvrdila detekciu ΔFosB pri približne 37 kD. Po inkubácii primárnych protilátok boli sekcie inkubované pre 1 h v kozieho anti-králičieho IgG konjugovanom s biotínom (1: 500 v PBS +, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) a potom 1 h v peroxidáze avidin-biotin-hoseradish peroxidase 1: 1K v PBS, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Po tejto inkubácii boli úseky spracované jedným z nasledujúcich spôsobov:

1. Označenie jednej peroxidázy

Sekcie zvierat NNS a ENS sa použili na mozgovú analýzu nahromadenia ΔFosB indukovanú sexuálnymi skúsenosťami. Po inkubácii ABC sa peroxidázový komplex vizualizoval po ošetrení 10 minút na chromogénový roztok obsahujúci 0.02% 3,3'-diaminobenzidín-tetrahydrochlorid (DAB, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) zosilnený 0.02% síranom nikelnatým v 0.1 M PB s peroxid vodíka (0.015%). Segmenty sa dôkladne premyli v 0.1 M PB na ukončenie reakcie a namontovali sa na kódované sklíčka Superfrost plus (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) s 0.3% želatinou v ddH₂0. Po dehydratácii boli všetky sklíčka prekryté s DPX (dibutylftalát xylén).

2. Duálna imunofluorescencia

Na analýzu ΔFosB a c-Fos sa použili rezy zo všetkých štyroch experimentálnych skupín obsahujúcich NAc a mPFC. Po inkubácii ABC boli sekcie inkubované za 10 min s biotinylovaným tyramidom (BT, 1: 250 v PBS + 0.003% H₂O₂ Tyramidová signálna amplifikačná súprava, NEN Life Sciences, Boston, MA) a pre 30 min s Alexa 488-konjugovaným strepavidínom (1: 100, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Sekcie sa potom inkubovali cez noc s králičou polyklonálnou protilátkou špecificky rozpoznávajúcou c-Fos (1: 150; sc-52, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), nasledovaná inkubáciou 30 min s kozou anti-králičou Cy3-konjugovanou sekundárnou protilátkou (1: 200, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Po zafarbení boli rezy dôkladne premyté v 0.1 M PB, namontované na kódované sklíčko s 0.3% želatinou v ddH₂0 a krycie sklíčko s vodným upevňovacím médiom (Gelvatol) obsahujúcim protizávažný prostriedok 1,4-diazabicyklo (2,2) oktán (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imunohistochemické kontroly zahŕňali vynechanie jednej alebo oboch primárnych protilátok, čo viedlo k neprítomnosti označovania v príslušnej vlnovej dĺžke.

Analýza dát

Mozgová analýza ΔFosB

Dva experimentovaní slepí na liečbu vykonali rozsiahle vyšetrenie mozgu na kódovaných diapozitívach. DFosB-imunoreaktívne (-IR) bunky v celom mozgu boli semikvantitatívne analyzované s použitím stupnice na reprezentovanie počtu buniek pozitívnych na AFosB, ako je uvedené v Tabuľka 1, Okrem toho sa na základe semikvantitatívnych zistení spočíta počet buniek ΔFosB-IR s použitím štandardných oblastí analýzy v oblastiach mozgu, ktoré sa podieľajú na odmeňovaní a sexuálnom správaní pomocou kamery na kreslenie lucidovej kamery pripojenej k mikroskopu Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Nemecko): NAc (jadro (C) a škrupina (S), 400 × 600μm) analyzované na troch rastrálno-kaudálnych hladinách (Balfour et al. 2004); ventrálna tegmentálna oblasť (VTA, 1000 × 800μm) analyzovaná na troch rastrálno-kaudálnych úrovniach (Balfour et al. 2004) a VTA tail (Perrotti et al. 2005); prefrontálna kôra (predná oblasť cinglulátu (ACA), prelimbická kôra (PL), infralimbická kôra (IL), 600 × 800μm); caudate putamen (CP; 800 × 800μm); a mediálne preoptické jadro (MPN, 400 × 600 μm) (Doplnkové obrázky 1-3). Dve úseky boli spočítané na subregión a spriemerované na zviera na výpočet priemernej skupiny. Sexuálne naivné a skúsené skupinové priemery buniek ΔFosB-IR boli porovnané pre každú subregiónu pomocou nepárových t-testov.

Súhrn expresie ΔFosB u sexuálne naivných a skúsených zvierat

Analýza ΔFosB a c-Fos

Obrázky boli zachytené pomocou chladenej CCD kamery (Microfire, Optronics) pripojenej k mikroskopu Leica (DM5000B, Leica Microsystems, Wetzlar, Nemecko) a softvéru Neurolucida (MicroBrightfield Inc) s pevnými nastaveniami fotoaparátu pre všetky subjekty (pomocou cieľov 10x). Počet buniek exprimujúcich c-Fos-IR alebo ΔFosB-IR v štandardných oblastiach analýzy v jadre a škrupine NAc (každý 400 × 600μm; Doplnkový obrázok 1) a ACA mPFC (600 × 800μm; Doplnkový obrázok 3) boli manuálne spočítané pozorovateľom oslepeným na experimentálne skupiny v sekciách 2 na zviera používajúcich softvér Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) a priemerované na zviera. Skupinové priemery buniek c-Fos alebo ΔFosB sa porovnávali pomocou dvojcestnej ANOVA (Faktory: sexuálna skúsenosť a sexuálna aktivita) a Fishera LSD pre post hoc porovnania na úrovni významnosti 0.05.

Experiment 2: manipulácia s výrazom ΔFosB

Génový prenos sprostredkovaný vírusovým vektorom

Sexuálne naivné samce potkanov Sprague Dawley boli náhodne rozdelené do skupín pred stereotaxiou. Všetky zvieratá dostali bilaterálne mikroinjekcie rekombinantných adeno-asociovaných vírusových (rAAV) vektorov kódujúcich GFP (kontrola, n = 12), divokého typu AFosB (n = 11) alebo dominantného negatívneho väzobného partnera ΔFosB nazvaného ΔJunD (n = 9) do NAc. DJunD znižuje transkripciu sprostredkovanú pomocou IFFb prostredníctvom kompetitívnej heterodimerizácie sDFosB pred väzbou oblasti AP-1 v génových promótoch (Winstanley et al. 2007). Vírusový titer sa stanovil pomocou qPCR a vyhodnotil sa in vivo pred začiatkom štúdie. Titer bol 1-2 × 10¹¹ infekčné častice na ml. rAAV vektory boli injikované v objeme 1.5 uL / boku po 7 minútach (súradnice: AP + 1.5, ML +/- 1.2 od firmy Bregma, DV-7.6 z povrchu lebky podľa Paxinos a Watson, 1998) použitím injekčnej striekačky Hamilton (5μL Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektory nevykazujú žiadnu vyššiu toxicitu ako samotné kontrolné infúzie (Winstanley a kol., 2007; pre podrobnosti o príprave AAV, pozri Hommel a kol., 2003). Behaviorálne experimenty začali 3 týždne po vektorových injekciách umožňujúcich optimálnu a stabilnú vírusovú infekciu (Wallace et al. 2008). Transgénna expresia u myších druhov vrcholí v 10 dňoch a zostáva zvýšená aspoň počas 6 mesiacov (Winstanley et al. 2007). Na konci experimentu boli zvieratá transkardiálne perfundované a sekcie NAc boli imunologicky spracované na GFP (1: 20K, králičia anti-GFP protilátka, Molecular Probes) s použitím reakcie ABC-peroxidázy-DAB (ako je opísané vyššie) histologicky overiť miesta vpichu pomocou GFP ako marker (Doplnkový obrázok 4). Vektory ΔFosB a ΔJunD tiež obsahujú segment vyjadrujúci GFP oddelenú vnútorným ribozomálnym vstupným miestom, čo umožňuje overenie miesta vpichu vizualizáciou GFP u všetkých zvierat. Iba zvieratá s miestami vpichu a šírenie vírusu obmedzené na NAc boli zahrnuté do štatistických analýz. Rozširovanie vírusu bolo vo všeobecnosti obmedzené na časť NAc a nerozšírilo sa v celom jadre. Okrem toho šírenie vírusu sa väčšinou obmedzilo buď na škrupinu, alebo jadro. Avšak zmena miest vpichu injekcie a rozšírenie v NAc neovplyvnilo účinky na správanie. Nakoniec injekcie GFP neovplyvnili sexuálne správanie ani skúsenosti vyvolané uľahčenie sexuálneho správania v porovnaní s neoperatívnymi zvieratami z predchádzajúcich štúdií (Balfour et al. 2004).

Sexuálne správanie

Tri týždne po dodaní vírusových vektorov sa zvieratá spriahli na jednu ejakuláciu (alebo na 1 hodinu) pre 4 po sebe idúce denné párenie na získanie sexuálnych skúseností (skúsenosti) a následne sa testovali na dlhodobé vyjadrenie skúseností vyvolaných uľahčením sexuálneho správania 1 a 2 týždňov (testovacie relácie 1 a 2) po záverečnej skúsenosti. Parametre sexuálneho správania boli zaznamenané počas všetkých párovacích relácií, ako je opísané vyššie. Štatistické rozdiely pre všetky parametre počas každej porovnávacej relácie boli porovnané v skupinách a medzi skupinami pomocou dvojcestných opakovaných meraní ANOVA (Faktory: liečba a párenie) alebo jednosmerné ANOVA (oneskorenie ejakulácie, počet úchyliek a intromissionov; Faktor: liečba alebo párenie relácia), za ktorými nasledujú testy Fischera LSD alebo Newman-Keuls pre post hoc porovnania na úrovni významu 0.05. Konkrétne boli porovnávané facilitačné účinky sexuálnej skúsenosti na parametre párenia porovnané medzi skúsenosťou 1 (naivné) a skúsenosťami 2, 3 alebo 4, ako aj medzi experimentálnymi skupinami v rámci každej skúsenosti. Navyše, na analýzu účinkov liečby (vektora) na dlhodobé uľahčenie sexuálneho správania sa porovnávali parametre párenia medzi skúsenosťou 4 a skúšobnou reláciou 1 a 2 v rámci každej skupiny liečby a porovnali sa medzi experimentálnymi skupinami v rámci každej skúšobnej relácie.

VÝSLEDKY

Sexuálne skúsenosti spôsobujú akumuláciu ΔFosB

Spočiatku sa uskutočnilo semikvantitatívne vyšetrenie akumulácie ΔFosB v mozgu u sexuálne skúsených mužov v porovnaní s sexuálne naivnými kontrolami. Zhrnutie celkových zistení je uvedené v tabuľke Tabuľka 1, Analýza ΔFosB-IR sa podporila stanovením počtu buniek ΔFosB-IR v niekoľkých mozgových oblastiach spojených s limitnou mierou pomocou štandardných oblastí analýzy. Obrázok 1 demonštruje reprezentatívne obrazy farbenia NAc na sexuálne naivných a skúsených zvieratách. V subregiónoch mPFC sa zistila významná zvýšená regulácia ΔFosB (Obrázok 2A), NAc jadro a shell (2B), caudate putamen (2B) a VTA (2C). V NAc existovali významné rozdiely vo všetkých rastrálno-kauzálnych úrovniach jadra a shellu NAc a údaje uvedené v tabuľke Obrázok 2 je priemerom nad všetkými rostrou-kaudálnymi úrovňami. Na rozdiel od toho nedošlo k významnému zvýšeniu ΔFosB-IR v mediálnom preoptickom jadre hypotalamu (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26, ENS: Avg 6.0 +/- 1.86).

Reprezentatívne obrázky zobrazujúce bunky ΔFosB-IR (čierne) v NAc naivného žiadneho pohlavia (A) a nezaujímajú žiadne skupiny (B). aco: anterior comissure Scale bar označuje 100 μm.

Počet buniek ΔFosB-IR v: subregiónoch mediálnej prefrontálnej kôry A. infralimbic (IL), prelimbic (PL) a anterior cingulate cortex (ACA); B. Nucleus accumbens jadro a škrupina, a kaudate putamen (CP); C. Rostrál, stred, chvost a chvost ...

Sexuálne skúsenosti zmierňujú párovanie indukované c-Fos

Účinok sexuálnych skúseností na hladinách ΔFosB v NAc sa potvrdil použitím fluorescenčných farbiacich techník. Okrem toho sa analyzovali účinky sexuálnej skúsenosti na expresiu c-Fos. Obrázok 3 demonštruje reprezentatívne obrazy buniek ΔFosB- (zelená) a c-Fos (červená) -IR vo všetkých experimentálnych skupinách (A, NNS, B, NS, C, ENS, D, ES). Sexuálne skúsenosti výrazne zvýšili expresiu ΔFosB v jadre NAc (Obrázok 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) a shell (Obrázok 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). Na rozdiel od toho, párenie 1 hodiny pred perfúziou nemalo vplyv na expresiu ΔFosB (Obrázok 4A, C) a nebola zistená žiadna interakcia medzi sexuálnymi skúsenosťami a párovaním bezprostredne pred perfúziou. Celkový účinok párovania pred perfúziou na expresiu c-Fos v obidvoch jadrách NAc (Obrázok 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) a škrupina (Obrázok 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Okrem toho bol v jadre NAc zistený celkový účinok sexuálnych zážitkov (Obrázok 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) a shell (Obrázok 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) a v jadre NAc bola detegovaná interakcia medzi sexuálnym zážitkom a párovaním pred perfúziou (F._1,15 = 6.5; p = 0.022), s trendom v plášti (F_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). Analýzy post hoc demonštrovali expresiu c-Fos vyvolanú párovaním v jadre a škrupine sexuálne naivných samcov (Obrázok 4B, D). Avšak u sexuálne skúsených mužov nebol c-Fos významne zvýšený v jadre NAc (Obrázok 4B) a výrazne oslabené v plášti (Obrázok 4D). Takže sexuálna skúsenosť spôsobila zníženie expresie c-Fos indukovaného párovaním. Hodnoty P pre konkrétne párové porovnania sú uvedené v legendách na obrázku.

Reprezentatívne obrázky ukazujúce ΔFosB (zelené) a c-Fos (červené) v NAc pre každú experimentálnu skupinu. Stupnica zobrazuje 100 μm.

DFosB indukovaný sexuálnym zážitkom a c-Fos indukovaným párovaním. Počet imunoreaktívnych buniek ΔFosB (jadro, A; Shell, C, ACA, E) alebo c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) pre každú skupinu: NNS (n = 5) 5), ENS (n = 5) alebo ES (n = 4). Údaje sú vyjadrené ...

Účinok sexuálnych skúseností na hladinách c-Fos indukovaných párovaním nebol obmedzený na NAc. Podobný útlm expresie c-Fos sa pozoroval u ACA u sexuálne skúsených zvierat v porovnaní s sexuálne neprítomnými kontrolami. Sexuálne skúsenosti mali významný vplyv na expresiu ΔFosB v ACA (Obrázok 4E: F_1,15 = 154.2; p <0.001). Párenie pred perfúziou nemalo vplyv na expresiu ΔFosB (Obrázok 4C), ale významne zvýšil c-Fos (Obrázok 4F: F_1,15 = 203.4; p <0.001) v ACA. Expresia c-Fos indukovaná párením v ACA bola navyše významne znížená sexuálnymi skúsenosťami (Obrázok 4F: F_1,15 = 15.8; p = 0.001). Dvojsmerná interakcia medzi sexuálnym zážitkom a párovaním pred perfúziou bola zistená pre expresiu c-Fos (Obrázok 4F: F_1,15 = 15.1; p <0.001). P-hodnoty pre konkrétne párové porovnania sú v legendách na obrázku. Nakoniec nedošlo k významnému zníženiu expresie c-Fos vyvolanej párením v mediálnom preoptickom jadre (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), čo bola oblasť, kde skúsenosti s párením nespôsobili významný pokles zvýšenie expresie ΔFosB, čo naznačuje, že expresia c-Fos indukovaná párením nebola ovplyvnená vo všetkých mozgových oblastiach.

ΔFosB v NAc sprostredkováva posilnenie sexuálneho správania

Na preskúmanie potenciálneho molekulárneho mechanizmu na posilnenie sexuálneho správania, ako dokázalo uľahčenie sexuálneho správania indukované skúsenosťami, sa určili účinky lokálnej manipulácie s hladinami ΔFosB a jeho transkripčnej aktivity. Sexuálne skúsenosti počas štyroch po sebe idúcich skúseností mali významný vplyv na latenciu (Obrázok 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), latentnosť intromizácie (Obrázok 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) a latencia ejakulácie (Obrázok 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP kontrolné zvieratá vykazovali očakávané uľahčenie sexuálneho správania vyvolané skúsenosťami a vykazovali signifikantne nižšie latencie pri prvej montáži, prvej intromission a ejakulácii počas skúsenosti 4 v porovnaní so skúsenosťou 1 (Obrázok 5A-C; viď obrázok legenda pre hodnoty p). Toto skúsenosti indukované uľahčenie sexuálneho správania sa pozorovalo aj v skupine ΔFosB pri latenciach pri ustálenom a intromistickom štádiu, ale v ejakulačnej latencii nebol zistený významný rozdiel (Obrázok 5A-C). Na rozdiel od toho, zvieratá DJunD vykazovali zľahčené uľahčenie; aj napriek tomu, že oneskorenia pri montáži, intromizách a ejakuláciách sa znížili pri opakovaných párovaniach, žiadny z týchto parametrov nedosiahol štatistickú významnosť pri porovnaní medzi skúsenosťami 1 a 4 (Obrázok 5A-C). Medzi skupinovými porovnaniami pre každú reláciu skúseností vyplýva, že ΔJunD má počas skúseností v porovnaní s ΔFosB a GFP výrazne dlhšie latencie na umiestnenie, intromitáciu a ejakuláciu (Obrázok 5A-C). Okrem toho sexuálne skúsenosti a liečba mali významný vplyv na účinnosť kopulácie (Obrázok 5F: sexuálna skúsenosť, F_1,12 = 22.5; p <0.001; liečba, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). Muži ΔFosB mali počas skúšobnej relácie 4 vyššiu účinnosť kopulácie v porovnaní so skúsenosťou 1 (Obrázok 5F). Okrem toho, zvieratá ΔFosB mali významne menej záchytov pred ejakuláciou počas dňa skúsenosti 4 v porovnaní so skúsenosťou 1 (Obrázok 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004) a že muži DJunD mali významne viac oporiek pred ejakuláciou, a tým významne znížili účinnosť kopulácie ako ktorákoľvek z ďalších dvoch skupín (Obrázok 5D a F). Zvieratá GFP a ΔFosB teda vykazovali skúsenosti vyvolané zjednodušenie iniciácie sexuálneho správania a sexuálnej výkonnosti, zatiaľ čo zvieratá DJunD to neurobili.

Sexuálne správanie zvierat GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) a ΔJunD (n = 9): latencia latencie (A), latencia intromizácie (B), latencia ejakulácie (C) počet intromisií (E) a efektívnosť kopulácie (F). Údaje sú vyjadrené ...

Na testovanie hypotézy o tom, že expresia ΔFosB je rozhodujúca pre dlhodobé vyjadrenie skúsenosti vyvolaného uľahčenia sexuálneho správania, boli zvieratá po záverečnej skúsenosti testované na 1 týždeň (skúšobná relácia 1) a 2 týždne (skúšobná relácia 2). V skupine GFP a ΔFosB sa zachovalo uľahčené sexuálne správanie, pretože sa medzi testovacími reláciami 1 alebo 2 a záverečnou skúsenosťou 4 v rámci skupín GFP a ΔFosB nerozlišoval žiadny z parametrov správania (Obrázok 5A-C; okrem oneskorenia ejakulácie a účinnosti kopulácie v testovacej relácii 1 pre zvieratá ΔFosB). Významné rozdiely medzi zvieratami ΔJunD a skupinou GFP alebo ΔFosB boli zistené v obidvoch testovacích sedeniach pre všetky parametre sexuálneho správania (Obrázok 5A-F). Medzi skupinami alebo v rámci skupín neboli zistené žiadne rozdiely v porovnaní s počtom introzióz, PEI alebo percentami zvierat, ktoré sa ejakulovali (100% mužov vo všetkých skupinách ejakulovaných počas posledných štyroch párovacích sedení).

DISKUSIA

Súčasná štúdia preukázala, že sexuálne skúsenosti spôsobujú akumuláciu ΔFosB v niekoľkých oblastiach mozgu spojených s limitom, vrátane jadra a škrupiny NAc, mPFC, VTA a caudate putamen. Okrem toho sexuálne skúsenosti oslabujú expresiu c-Fos vyvolanú párovaním v NAc a ACA. Nakoniec sa ukázalo, že ΔFosB v NAc je kritický pri sprostredkovaní uľahčenia párenia počas získania sexuálnych skúseností a dlhodobého vyjadrenia skúsenosti vyvolaného uľahčenia sexuálneho správania. Konkrétne, redukcia transkripcie sprostredkovanej transkripciou spôsobenou pomocou DFosB zhoršila skúsenosť vyvolané uľahčenie sexuálnej motivácie a výkonnosti, zatiaľ čo nadmerná expresia ΔFosB v NAc spôsobilo zlepšenie sexuálneho správania, pokiaľ ide o zvýšenie sexuálnej výkonnosti a menej skúseností. Súčasné poznatky súčasne podporujú hypotézu, že ΔFosB je kritickým molekulárnym mediátorom pre dlhodobú nervovú a behaviorálnu plasticitu vyvolanú sexuálnymi skúsenosťami.

Súčasné zistenia predlžujú predchádzajúce štúdie, ktoré ukazujú na sexuálne skúsenosti vyvolané ΔFosB v NAc u samcov potkanov (Wallace et al. 2008) a samice škrečkov (Živé ploty et al. 2009). Wallace a kol. (2008) ukázali, že rAAV-Nadmerná expresia ΔFosB v NAc zvýšenom sexuálnom správaní u sexuálne naivných zvierat počas prvého párenia, ako to dokazuje menej introzií do ejakulácie a kratších intervalov po ejakulácii, ale nemalo žiadny účinok u sexuálne skúsených mužov (Wallace et al. 2008).

Na rozdiel od toho súčasná štúdia nepreukázala žiadne účinky nadmerného prejavu ΔFosB u sexuálne naivných mužov počas prvého testu, ale skôr počas a po získaní sexuálnej skúsenosti. Nadmerné expresory ΔFosB preukázali zvýšenú sexuálnu výkonnosť (zvýšenú účinnosť kopulácie) v porovnaní s GFP zvieratami.

Okrem toho súčasná štúdia testovala úlohu ΔFosB blokovaním transkripcie sprostredkovanej ΔFosB použitím vírusového vektora exprimujúceho DJunD. Prevencia skúsenosti vyvolaného zvýšenia expresie ΔFosB zabránila uľahčeniu sexuálnej motivácie vyvolanej skúsenosťou (zvýšená oneskorenia v úvode a intromizii), ako aj sexuálne správanie (zvýšená latencia ejakulácie a počet pôrodov) a následné dlhodobé vyjadrenie uľahčeného sexuálneho správania.

Preto sú tieto údaje prvými, ktoré naznačujú povinnú úlohu pre ΔFosB pri získavaní uľahčenia sexuálneho správania spôsobeného skúsenosťami. Tieto údaje navyše ukazujú, že ΔFosB je tiež kriticky zapojený do dlhodobého prejavu uľahčeného správania vyvolaného skúsenosťami. Navrhujeme, aby toto dlhodobé vyjadrenie uľahčeného správania predstavovalo formu pamäte pre prirodzenú odmenu, a preto ΔFosB v NAc je sprostredkovateľom odmeňovanej pamäti. Sexuálne skúsenosti tiež zvýšili hladiny ΔFosB v oblastiach VTA a mPFC, v oblastiach odmeňovania a pamäte (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Budúce štúdie sú potrebné na objasnenie potenciálneho významu zvýšenia regulácie ΔFosB v týchto oblastiach pre odmeňovú pamäť.

Expresia ΔFosB je vysoko stabilná, a preto má veľký potenciál ako molekulárny mediátor pretrvávajúcich adaptácií mozgu po chronických poruchách (Nestler et al. 2001). Ukázalo sa, že ΔFosB postupne zvyšuje NAc počas niekoľkých injekcií kokaínu a pretrváva až niekoľko týždňov (Nádej et al. 1992; Nádej et al. 1994). Tieto zmeny v expresii NAc ΔFosB súvisia so senzibilizáciou a závislosťou od odmien (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; ZACHARIE et al. 2006). Na rozdiel od toho, úloha ΔFosB pri sprostredkovaní prirodzenej odmeny bola podceňovaná. Nedávne dôkazy vyplynuli, čo naznačuje, že indukcia ΔFosB v NAc je zapojená do prirodzenej odmeny. Hodnoty ΔFosB sa podobne zvyšujú v NAc po príjme sacharózy a bežiacom cykle, Nadmerná expresia ΔFosB v striate pomocou bitransgénnych myší alebo vírusových vektorov u potkanov spôsobuje zvýšenie príjmu sacharózy, zvýšenú motiváciu k jedlu a zvýšenú spontánnu prevádzku kolies (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; WERMA et al. 2002). Aktuálne údaje v podstate pridávajú k týmto správam a ďalej podporujú predstavu, že ΔFosB je kritickým sprostredkovateľom pre posilnenie odmeňovania a pamäť prirodzenej odmeny.

ΔFosB môže sprostredkovať zosilnenie sexuálneho správania vyvolané skúsenosťami prostredníctvom indukcie plasticity v mezolimbickom systéme. Skutočne, sexuálna skúsenosť spôsobuje niekoľko dlhotrvajúcich zmien mezolimbického systému (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; džbány et al. 2010). t sa prejavila úroveň správania, senzitívna lokomotorická odpoveď na amfetamín a zvýšená odmena amfetamínu u sexuálne skúsených samcov potkanov (džbány et al. 2010); zmenená lokomotorická odpoveď na amfetamín bola tiež pozorovaná u samíc škrečkov (Bradley & Meisel 2001). Okrem toho sa po abstinenčnom období od sexuálnej skúsenosti na samcoch potkanov zistilo zvýšenie počtu dendritických tŕňov a zložitosť dendritických trávnikov (džbány et al. 2010). Súčasná štúdia naznačuje, že ΔFosB môže byť špecifickým molekulárnym mediátorom dlhodobých výsledkov sexuálnych skúseností. Po dohode sa nedávno preukázalo, že ΔFosB je dôležitý pre indukciu zmien dendritickej chrbtice v reakcii na chronické podávanie kokaínu (Dietz et al. 2009; Bludisko et al. 2010).

Nie je jasné, ktorý neurotransmiter (primárne) je zodpovedný za indukciu ΔFosB v NAc, ale DA bol navrhnutý ako kandidát (Nye et al. 1995). Takmer všetky zneužívané drogy, vrátane kokaínu, amfetamínu, opiátov, kanabinoidov a etanolu, ako aj prirodzené odmeny, zvyšujú hodnotu ΔFosB v NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; WERMA et al. 2002). Obidva zneužívacie lieky a prírodné odmeny zvyšujú koncentráciu synaptickej DA v NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez a Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). Indukcia ΔFosB pomocou liekov zneužívania bola preukázaná v bunkách obsahujúcich DA receptor a kofín-indukovaný ΔFosB je blokovaný antagonistom receptora D1 DAt (Nye et al. 1995). Preto sa uvoľnenie DA predpokladá na stimuláciu expresie ΔFosB a tým na sprostredkovanie neuroplasticity súvisiacej s odmenou. Ďalšia podpora myšlienky, že hladiny ΔFosB sú závislé od DA, je zistenie, že oblasti mozgu, kde sexuálne skúsenosti menia hladiny ΔFosB, dostávajú silný dopaminergný vstup z VTA vrátane mediálnej prefrontálnej kôry a bazolaterálnej amygdaly.

Na rozdiel od toho však ΔFosB nie je zvýšený v mediálnej preoptickej oblasti, aj keď táto oblasť dostáva dopaminergný vstup, hoci z hypotalamických zdrojov (Miller & Lonstein 2009). Budúce štúdie sú potrebné na overenie toho, či expresia vyvolaná párovaním AFOSB a účinky sexuálnej skúsenosti na sexuálnu motiváciu a výkon závisia od činnosti DA. Úloha DA v sexuálnej odmeny u samcov potkanov nie je v súčasnosti úplne jasná (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Existuje dostatok dôkazov, že DA sa uvoľňuje v NAc počas vystavenia žene alebo párenie (Damsma et al. 1992) a DA neuróny sú aktivované počas sexuálneho správania (Balfour et al. 2004). Systémové injekcie antagonistov DA receptorov však nebránia preferencii podmieneného sexuálnej odmeny (Agmo & Berenfeld 1990) a hypotéza, že DA je rozhodujúca pre skúsenosti vyvolané zosilnenie párenia, nie je testovaná.

Takisto nie je jasné, aké sú následné mediátory účinkov ΔFosB na sexuálne správanie. Ukázalo sa, že ΔFosB pôsobí ako transkripčný aktivátor a represor prostredníctvom mechanizmu závislého na AP-1 (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Bolo identifikovaných mnoho cieľových génov vrátane okamžitého skorého génu c-fos (Nádej et al. 1992; Nádej et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dynorfin (ZACHARIE et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFκB podjednotiek (Ang et al. 2001) Zpodjednotkou glutamátového receptora AMPA GluR2 (Kelz et al. 1999). Súčasné výsledky ukazujú, že hladiny c-Fos vyvolané párovaním boli znížené sexuálnymi skúsenosťami v oblastiach mozgu so zvýšeným ΔFosB (NAc a ACA). Potlačenie c-Fos sa zdá byť závislé od obdobia od posledného párenia a opakovaných párovacích sedení, ako v predchádzajúcich štúdiách, také zníženie hladiny c-Fos nebolo detegované u testovaných samcov potkanov testovaných na 1 týždeň po konečnom párení (Balfour et al. 2004) alebo po sexuálnej skúsenosti pozostávajúcej iba z jedného párenia (Lopez a Ettenberg 2002). Okrem toho je súčasné zistenie v súlade s dôkazom, že ΔFosB potláča gén c-fos po chronickej expozícii amfetamínu (Renthal et al. 2008). V súlade s týmito zisteniami bola po opakovaných injekciách kokaínu v porovnaní s akútnymi injekciami lieku indukcia niekoľkých bezprostredne skorých génov mRNA (c-fos, fosB, c-jun, junB a zif268)Nádej et al. 1992; Nádej et al. 1994) a c-fos indukovaný amfetamínom bol potlačený po ukončení chronického podávania amfetamínu (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Funkčný význam downregulácie expresie c-Fos po chronickej liečbe liekom alebo sexuálnej skúsenosti zostáva nejasný a bol navrhnutý ako dôležitý homeostatický mechanizmus na reguláciu citlivosti zvieraťa na opakovanú expozíciu odmeňovania (Renthal et al. 2008).

Záverom súčasná štúdia dokazuje, že ΔFosB v NAc hrá integrálnu úlohu v pamäti sexuálnej odmeny, podporujúc možnosť, že ΔFosB je dôležitá pre všeobecnú odmenu posilnenie a pamäť, Zistenia zo súčasnej štúdie ďalej objasňujú naše chápanie bunkových a molekulárnych mechanizmov, ktoré sprostredkujú sexuálnu odmenu a motiváciu, a pridávajú do literatúry, ktorá ukazuje, že ΔFosB je dôležitým hráčom v rozvoji závislostí tým, že preukazuje úlohu pre ΔFosB prirodzenú odmenu výstuž.

Doplnkový materiál

Supp Obr. S1-S4 a tabuľka S1-S2

Kliknite tu pre zobrazenie.^{(167K, pdf)}

Poďakovanie

Tento výskum bol podporený grantmi od kanadských inštitútov výskumu zdravia LMC, Národného inštitútu duševného zdravia pre EJN a Rady pre prírodné vedy a inžinierstvo Kanady pre KKP a LMC.

REFERENCIE

Agmo A. Pohlavné správanie samcov potkana. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Vystužovacie vlastnosti ejakulácie u samcov potkana: úloha opioidov a dopamínu. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holand J, Schaeffer E, Nestler EJ. Indukcia nukleárneho faktora-kappaB v nucleus accumbens chronickým podávaním kokaínu. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Sexuálne správanie a environmentálne príznaky spojené s pohlavím aktivujú mezolimbický systém u samcov potkanov. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Účinky chronickej expozície kokaínu sú regulované neurónovým proteínom Cdk5. Príroda. 2001;410: 376-380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopamínové lézie u samíc škrečkov (Mesocricetus auratus) odstraňujú senzibilizované účinky sexuálnych skúseností na kopulačné interakcie s mužmi. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. Indukcia sexuálneho správania c-Fos v nucleus accumbens a amfetamínom stimulovaná lokomotorická aktivita sú senzibilizované predchádzajúcimi sexuálnymi skúsenosťami u samirových škrečkov. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mechanizmy závislé na proteazóme a nezávislé na destabilizácii FosB: identifikácia FosB degron domén a dôsledky pre stabilitu DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Molekulárna neurobiológia drogovej závislosti. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulácia proteínov delta FosB a FosB podobných elektrokonvulzívnym záchvatom a kokaínom. Molekulárna farmakológia. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Nadmerná expresia DeltaFosB špecifického pre špecifický typ buniek zvyšuje motiváciu kokaínu. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Centrálna regulácia ejakulácie. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Sexuálne správanie zvyšuje prenos dopamínu v nucleus accumbens a striatum samcov potkanov: porovnanie s novinkou a pohybom. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
Dietz DM, Maze I, Mechanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Podstatná úloha pre ΔFosB pri regulácii kokaínu dendritických chrbtových kmeňov nucleus accumbens neurónov. Spoločnosť pre neurovedy Abstrakt. 2009
Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Pôžitky z miešania: Preskúmanie účinkov liekov na sexuálne správanie u ľudí a na zvieracích modeloch. Horm Behav. 2009 V tlači.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Nadmerná expresia Delta FosB v nucleus accumbens zvyšuje sexuálnu odmenu u syrských škrečkov. Gény Brain Behav. 2009;8: 442-449. [Článok bez PMC] [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Kŕmenie a hypotalamická stimulácia zvyšujú prírastok dopamínu v kozách. Physiol Behav. 1988;44: 599-606. [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Odmena za potravu a kokaín zvyšujú extracelulárny dopamín v nucleus accumbens meranom mikrodialýzou. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Základná úloha génu fosB pri molekulárnych, bunkových a behaviorálnych účinkoch chronických elektrokonvulzívnych záchvatov. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokálne vylučovanie génov v mozgu pomocou vírusom sprostredkovanej RNA interferencie. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulácia okamžitej včasnej expresie génov a väzby AP-1 v krysách nucleus accumbens chronickým kokaínom. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [Článok bez PMC] [PubMed]
Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia dlhodobého AP-1 komplexu pozostávajúceho z pozmenených proteínov typu Fos v mozgu chronickým kokaínom a inými chronickými liečeniami. Neurón. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mužské sexuálne správanie. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akútne a chronické liečby amfetamínom inak regulujú hladiny neuropeptidových messengerových RNA a imunogénnu aktivitu Fos v neurónoch striatálnych potkanov. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Dynamické zvýšenie dopamínu počas stimulovanej kopulácie u samíc potkanov. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Expresia transkripčného faktora deltaFosB v mozgu riadi citlivosť na kokaín. Príroda. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Lopez HH, Ettenberg A. Expozícia samíc potkanov produkuje rozdiely v indukcii c-fos medzi sexuálne naivnými a skúsenými samcami potkanov. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
Maze I, Covington HE, XPUMXrd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Podstatná úloha histon metyltransferázy G3a v kokaínom indukovanej plasticite. Science. 2010;327: 213-216. [Článok bez PMC] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulácia génovej expresie a odmeňovania kokaínom CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulárny prepínač pre dlhodobú adaptáciu v mozgu. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Dopaminergické projekcie do mediálnej preoptickej oblasti potkanov po pôrode. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [Článok bez PMC] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkripčná kondenzácia v neurónoch: úloha bunkových okamžitých-skorých génov. Trendy Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
Nestler EJ. Molekulárne mechanizmy drogovej závislosti. Neuropharmacology. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
Nestler EJ. Neurobiológia závislosti od kokaínu. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [Článok bez PMC] [PubMed]
Nestler EJ. Preskúmanie. Transkripčné mechanizmy závislosti: úloha spoločnosti DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [Článok bez PMC] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: trvalý molekulárny prepínač závislosti. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [Článok bez PMC] [PubMed]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologické štúdie regulácie chronickej indukcie antigénu súvisiacej s FOS kokaínom v striate a nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB v nucleus accumbens reguluje inštrumentálne správanie a motiváciu posilňovanú potravinami. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Indukovateľná expresia dominantného negatívneho mutantu c-Jun v transgénnych myšiach špecifických pre mozgovú oblasť znižuje citlivosť na kokaín. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB sa hromadí v populácii GABAergických buniek v zadnom chvoste ventrálnej tegmentálnej oblasti po liečbe psychostimulantom. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia deltaFosB v mozgových štruktúrach súvisiacich s odmenou po chronickom strese. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Výrazné vzory indukcie DeltaFosB v mozgu drogami zneužívania. Synapsie. 2008;62: 358-369. [Článok bez PMC] [PubMed]
Pfaus JG. Cesty sexuálnej túžby. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicionovanie a sexuálne správanie: prehľad. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Pohľad zhora nadol na dopamín, motiváciu a pamäť. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
Džbány KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticita v mezolimbickom systéme vyvolaná prirodzenou odmenou a následnou abstinenciou odmeny. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [Článok bez PMC] [PubMed]
Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB sprostredkuje epigenetickú desenzibilizáciu génu c-fos po chronickom vystavení amfetamínu. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [Článok bez PMC] [PubMed]
Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Nestler EJ. Genómová analýza regulácie chromatínu pomocou kokaínu odhaľuje úlohu sirtuínov. Neurón. 2009;62: 335-348. [Článok bez PMC] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Pohlavné odmeny u samcov potkanov: účinky sexuálnej skúsenosti na podmienených podmienkach miesta súvisiacich s ejakuláciou a intromismi. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [Článok bez PMC] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylácia DeltaFosB sprostredkováva svoju stabilitu in vivo. Neuroscience. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulácia stability DeltaFosB fosforyláciou. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Vplyv DeltaFosB v nucleus accumbens na prirodzené odmeňovanie. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Článok bez PMC] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reguluje chod motocyklov. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcia DeltaFosB v orbitofronálnej kôre sprostredkováva toleranciu k kokaínom indukovanej kognitívnej dysfunkcii. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Podstatná úloha DeltaFosB v nucleus accumbens pri morfínových akciách. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos uľahčuje získavanie a vymieranie pretrvávajúcich zmien spôsobených kokaínom. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]