PLoS One. 2014 Môže 1; 9 (5): e96337. doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.
abstraktné
Adolescencia je spojená s vysokou impulzívnosťou a rizikom, čo zvyšuje náchylnosť dospievajúcich k užívaniu drog. Včasné užívanie drog koreluje so zvýšeným rizikom porúch spojených s užívaním návykových látok neskôr v živote, ale neurobiologický základ nie je jasný. Mozog prechádza počas dospievania rozsiahlym vývojom a poruchy sú v súčasnosti považované za predpoklad zvýšenej zraniteľnosti. Prechod z kontrolovaného na nutkavé užívanie drog a závislosť zahŕňa dlhotrvajúce zmeny v nervových sieťach vrátane posunu od nucleus accumbens, sprostredkovania akútnych zosilňujúcich účinkov, k náboru dorzálneho striata a formovania návykov. Cieľom tejto štúdie bolo testovať hypotézu zvýšeného uvoľňovania dopamínu po farmakologickej výzve u dospievajúcich potkanov. Uvoľňovanie a absorpcia dopamínu vyvolaného draslíkom sa skúmala pomocou chronoamperometrických záznamov o dopamíne v kombinácii s expozíciou amfetamínu u skorých a neskorých dospievajúcich potkanov a dospelých potkanov. Okrem toho sa skúmali dôsledky dobrovoľného požívania alkoholu počas dospievania na tieto účinky. Údaje ukazujú postupné zvyšovanie uvoľňovania dopamínu s vekom, čo podporuje predchádzajúce štúdie naznačujúce, že množstvo uvoľniteľného dopamínu sa s vekom zvyšuje. Na rozdiel od toho sa v reakcii na amfetamín pozorovalo postupné znižovanie uvoľňovaného uvoľňovania s vekom, čo podporuje pomerne väčšiu zásobu dopamínu u mladších zvierat., Meranie dopamínu po dobrovoľnom požívaní alkoholu viedlo k nižším amplitúdam uvoľňovania v reakcii na chlorid draselný, čo naznačuje, že alkohol ovplyvňuje uvoľniteľné množstvo dopamínu, čo môže mať dôsledky na zraniteľnosť voči závislosti a na iné psychiatrické diagnózy zahŕňajúce dopamín v dorzálnom striate.
úvod
Adolescencia je spojená s vysokou impulzívnosťou a rizikovým správaním, čo zvyšuje náchylnosť dospievajúcich k užívaniu drog [1], Nikotín, alkohol alebo kanabis sa pravdepodobne testujú pred psychostimulanciami alebo opiátmi [2], [3] a skoré užívanie drog koreluje so zvýšenými poruchami užívania drog (SUD) neskôr v živote [4]-[6], Neurobiológia, ktorá je príčinou tohto zvýšeného rizika SUD, nie je jasná, ale dospievanie je časom rozsiahleho vývoja mozgu a predpokladá sa, že narušenie normálneho vývoja mozgu u drog zneužívajúcich drog prispieva k zvýšenej zraniteľnosti po užívaní drog u dospievajúcich. [7].
Drogy zneužívania bežne pôsobia na systém odmeňovania a zvyšujú extracelulárne hladiny dopamínu v jadre akútne po užití. [8], Prechod z počiatočného užívania drog na nutkavé užívanie a závislosť však vyžaduje dlhotrvajúce zmeny v mnohých nervových sieťach. [9] a jeden z nich sa predpokladá, že zahŕňa posun od nucleus accumbens, sprostredkovanie akútnych zosilňujúcich účinkov, k náboru dorzálneho striata a formovania návykov. [10], Dopaminergná aktivita v dorzálnom striatume by preto mohla byť tiež faktorom zraniteľnosti adolescentných jedincov.
Zvieracie modely majú veľký význam pre naše pochopenie týchto mechanizmov a vekové okno identifikované ako dospievanie u hlodavcov je medzi postnatálnym dňom (PND) 28 a 50 [11]. Predchádzajúce štúdie ukázali, že dospievajúce potkany majú zníženú bazálnu rýchlosť uvoľňovania dopamínu, zníženú zásobu ľahko uvoľniteľného dopamínu, ale tiež väčšiu zásobnú zásobu dopamínu v porovnaní s dospelými.s [12]. Tiež sa navrhuje, že napriek zníženému uvoľňovaniu dopamínu za bazálnych podmienok môžu dospievajúci jedinci byť schopní uvoľniť viac dopamínu, ak sú stimulovaní farmakologickými výzvami. [13], Prvým cieľom tejto štúdie bolo preto otestovať hypotézu zvýšeného uvoľňovania dopamínu po farmakologickej výzve u dospievajúcich zvierat. Uvoľňovanie a absorpcia dopamínu sa skúmala pomocou chronoamperometrických záznamov dopamínu v kombinácii s expozíciou amfetamínu u skorých a neskorých adolescentov, ako aj u dospelých, outbredných krýs Wistar.
Druhým cieľom tejto štúdie bolo skúmať vplyv vplyvu na životné prostredie dobrovoľným požitím alkoholu počas dospievania. Dôvodom bolo to, že predchádzajúce štúdie ukazujú, že environmentálne faktory počas adolescentného obdobia, ako napríklad intraperitoneálne podaný alkohol, zvyšujú bazálne extracelulárne hladiny dopamínu. [14] zatiaľ čo dobrovoľný príjem alkoholu u potkanov s preferovaným alkoholom zvyšuje absorpciu dopamínu bez ovplyvnenia bazálnych extracelulárnych hladín [15], Rozdiely medzi týmito štúdiami sa dajú vysvetliť celým radom faktorov, ako je napríklad spôsob podania, dávka, kmeň potkana a presné časové obdobie, ale v oboch prípadoch ovplyvňuje adolescentný príjem alkoholu dynamiku dopamínu, čo sa oplatí ďalej preskúmať.
Materiály a metódy
Vyhlásenie o etike
Všetky pokusy na zvieratách sa uskutočňovali podľa protokolu schváleného Etickou komisiou pre zvieratá v Uppsale a postupovali podľa usmernení švédskych právnych predpisov o pokusoch na zvieratách (zákon o dobrých životných podmienkach zvierat SFS1998: 56) a smernice Rady Európskych spoločenstiev (86 / 609 / EHS).
zver
Tehotné potkany Wistar (RccHan: WI, Harlan Laboratories BV, Horst, Holandsko) dorazili do zvieracieho zariadenia v deň gravidity 16. Zvieratá prišli do šarží v priebehu niekoľkých týždňov, aby sa prispôsobili načasovanie chronoamperometrických záznamov. Priehrady boli jednotlivo umiestnené v makroklonových klietkach (59 cm x 38 cm x 20 cm) s krmivom z peliet (typ R36; Lantmännen, Kimstad, Švédsko) a vodovodnou vodou podľa chuti, Klietky obsahovali podložky z drevotriesky a listy papiera (40 x 60 cm; Cellstoff, Papyrus) a pracovníci starostlivosti o zvieratá ich vymieňali raz týždenne. Izba pre zvieratá sa udržiavala pri konštantnej teplote (22 ± 1 ° C) a vlhkosti (50 ± 10%) v pravidelnom cykle 12h svetlo / tma so zapnutým svetlom v 06: 00 am. Všetky miestnosti mali maskujúci šum v pozadí, aby sa minimalizovali neočakávané zvuky, ktoré by mohli zvieratá rušiť.
Prehľad experimentálnej osnovy je uvedený v Obrázok 1, Vrh, ktorý sa narodil v ten istý deň (postnatálny deň (PND) 0), sa krížil s cieľom zahrnúť samce 6 a samice 4 s cieľom zvládnuť stres pri preprave matky, správanie matky a genetiku. Šteniatka boli odstavené v PND 22 a ustajňovali 3 v klietke až do PND 28 (± 1 deň) alebo PND 42 (± 1 deň), keď sa robili chronoamperometrické záznamy. V tejto štúdii boli ďalej použité iba samce. Skupina tridsiatich samcov potkanov dostala dobrovoľný binge-like prístup k 20% etanolu v paradigme s voľným výberom z dvoch fliaš od PND28 k PND65. Zvieratám bol poskytnutý 24-hodinový prístup k etanolu počas troch po sebe nasledujúcich dní v týždni, tj od utorka do štvrtka počas šiestich týždňov, teda celkom 18 relácií. Na meranie príjmu etanolu sa fľaše odvážili pred a po každej relácii a vypočítala sa gramy čistého etanolu na kilogram telesnej hmotnosti. Polohy fľaše sa medzi jednotlivými reláciami zmenili, aby sa zabránilo preferencii pozícií. Zvieratá konzumujúce etanol boli chované jednotlivo od PND 28 do PND 70. Zvieratá s najvyšším kumulatívnym príjmom etanolu (g / kg) sa vybrali a potom sa uskutočnili elektrochemické záznamy pri PND 70 (± 2 dní). V rovnakom období boli tiež umiestnené individuálne kontrolné skupiny na pitie vody podľa veku.
Obrázok 1. Experimentálny prehľad.
E = pitie etanolu, PND = postnatálny deň, W = pitie vody.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g001
Chronoamperometrické záznamy dopamínu In vivo
Materiálov.
Inaktín, roztok Nafion 5%, hydrochlorid dopamínu, kyselina L-askorbová, chlorid draselný, chlorid sodný, fosforečnan sodný, chlorid vápenatý a d-amfetamín sulfát boli získané od Sigma-Aldrich, LLC (St Louis, MO, USA). Lepivý vosk Kerr bol získaný od DAB LAB AB (Upplands Väsby, Švédsko). Mikroelektródy z uhlíkových vlákien (SF1A; 30 um vonkajší priemer x 150 um dĺžka) boli zakúpené od Quanteon, LLC (Nicholasville, KY, USA), referenčný elektródový strieborný drôt (200 um, izolovaný teflónom) bol zakúpený od AM Systems Inc. ( Carlborg, WA, USA) a sklenené kapiláry (vnútorný priemer 0.58 mm) pre mikropipety boli zakúpené od World Precision Instruments Ltd (Stevenage, UK).
Ordinácie.
Dopamínové záznamy sa uskutočňovali v PND 28 (± 1 deň), PND 42 (± 1 deň) alebo PND 70 (± 2 dní). Chirurgia sa uskutočnila bezprostredne pred elektrochemickými záznamami. Na udržiavanie telesnej teploty sa použila vyhrievacia podložka cirkulujúca voda (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, New York). Zvieratá sa anestetizovali Inactin 125 mg / kg intraperitoneálne (ip) a umiestnili sa do stereotaxického rámu (Stoelting Co., Wood Dale, IL, USA). Diera v lebke bola vyvŕtaná nad záznamovým miestom pre elektródu a ďalšia diera bola vyvŕtaná vzdialene od záznamového miesta pre umiestnenie referenčnej elektródy Ag / AgCl.
Vysokorýchlostné chronoamperometrické záznamy uvoľňovania a absorpcie dopamínu.
Vysokorýchlostné chronoamperometrické merania (vzorkovacia rýchlosť 1 Hz, celkom 200 ms) sa uskutočňovali pomocou záznamového systému FAST16-mkII (Fast Analytical Sensing Technology, Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA) podľa predtým opísaného postupu. [16], Mikroelektródy z uhlíkových vlákien (SF1A) boli potiahnuté tromi vrstvami Nafionu s 5 min. Zahrievaním na 200 ° C pred prvým poťahom a po každom poťahovaní [17], Elektródy sa potom kalibrovali in vitro v 0.05 M fosfátom pufrovanom soľnom roztoku na stanovenie selektivity, limitu detekcie (LOD) a sklonu pred použitím in vivo [16], Mikroelektródy vykazovali lineárne reakcie na sérové adície dopamínu (2 – 6 µM) s priemerným korelačným koeficientom (R2) 0.999 ± 0.0003. Priemerná selektivita pre všetky elektródy použité v tejto štúdii bola 14482 ± 3005 uM pre dopamín nad kyselinou askorbovou. Priemerná LOD bola 0.026 ± 0.004 uM dopamín a priemerný sklon bol -1.00 ± 0.03 nA / uM dopamínu. Priemerný pomer redukcie / oxidácie nameraný počas referenčných maximálnych odoziev dopamínu bol 0.67 ± 0.02, čo svedčí o detekcii prevažne dopamínu. [17], Strieborný drôt bol pokovovaný a použitý ako in vivo Referenčná elektróda Ag / AgCl [18].
Experimentálny protokol in vivo.
Mikropipeta (vnútorný priemer 10 – 15 um) bola naplnená izotonickým roztokom chloridu draselného (120 mM KCl, 29 mM NaCl, 2.5 mM CaCl)2· 2H2O) (pH 7.2 – 7.4) pomocou ihly na plnenie pipetou (28G, World Precision Instruments, Aston, UK). Mikropipeta bola pripevnená približne 150 – 200 um od špičky uhlíkových vlákien pomocou lepivého vosku. Elektróda bola stereotakticky umiestnená do dorzálneho striata, AP: + 1.0 mm, L: + 3.0 mm od bregma, tyč rezáka bola upravená podľa veku a hmotnosti [19], [20], Elektróda bola spočiatku umiestnená dorzálna (-3.0 mm) na miesto záznamu pomocou mikromanipulátora (Narishige International Ltd, Londýn, UK), aby ju znížila, a nechala sa dosiahnuť stabilnú základnú čiaru asi 45-60 min. Predtým, ako sa zníži na hĺbka -4.0 mm od bregma. Elektróda sa potom nechala stabilizovať ďalších 5-10 min na mieste záznamu pred stanovením účinku jednej injekcie chloridu draselného na uvoľňovanie dopamínu. Roztok draslíka bol lokálne aplikovaný pomocou tlakovej ejekcie kontrolovanej pomocou PicoSpritzer III (Parker Hannifin Corporation, Pine Brook, NJ, USA) a tlak (10 – 20 psi) a čas (0.5 – 1.0 s) boli upravené tak, aby dodávali 100 nl roztok draslíka, meraný chirurgickým mikroskopom vybaveným okulárovým retikulom [21].
Uvoľňovanie vyvolané draslíkom sa použilo v kombinácii so subkutánnymi injekciami amfetamínu alebo fyziologického roztoku. Vytvorili sa tri referenčné vrcholy podobné v amplitúde, 10 min. Od seba. Päť minút po poslednom referenčnom píku dostali potkany buď 2 mg / kg amfetamínu alebo ekvivalentné množstvo fyziologického roztoku (1 ml / kg) a po ďalšom uvoľňovaní 5 min sa opäť každých 10 opäť vyvolalo uvoľňovanie, pričom píky boli produkované v 5, 15, 25 , 35, 45, 55 a 65 min. Po systémovej injekcii, pozri Obrázok 2A pre reprezentatívnu stopu. Dávka amfetamínu bola vybraná na základe behaviorálnych účinkov v štúdiách lokomócie a samopodania [22]-[24].
Obrázok 2. Reprezentatívne stopy.
A) Reprezentatívna stopa oxidačného prúdu pre potkana v postnatálnom dni 28 prijímajúcom amfetamín a B) detail druhého referenčného piku pre rovnaké zviera ukazujúci, ako sa vypočítala amplitúda a T80. Amp = amplitúda, báza = základňa, ref = referencia.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g002
Overenie umiestnenia a vylúčenia elektród.
Po ukončení experimentu boli elektródy odrezané a ponechané na mieste a mozgy boli zmrazené. Umiestnenie bolo overené pomocou rezu zmrazených mozgov. Zo zvierat 12 v PND28 bol 1 vylúčený z dôvodu nesprávneho umiestnenia a 2 kvôli chybám v nahrávaní. V prípade zvierat 12 v PND 42 bolo zviera 1 vylúčené z dôvodu nesprávneho umiestnenia. Pre zvieratá 16 v PND 70 boli 3 vylúčené z dôvodu chýb záznamu. V prípade zvierat 16 konzumujúcich etanol v PND 70 bol 2 vylúčený z dôvodu chýb v zázname. Medzi chyby záznamu patrí upchávanie pipiet a elektrické poruchy, ako sú výpadky napájania a poruchy všeobecného napájania záznamovej jednotky.
Analýza dát.
Maximálna amplitúda vyvolaných píkov a čas, kedy pík klesne na 80% svojej amplitúdy (T80), sa vypočítali pomocou softvéru FAST Analysis verzie 4.4 (Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA), pozri Obrázok 2B pre reprezentatívnu stopu. Tri referenčné vrcholy sa spriemerovali a percento týchto vrcholov sa vypočítalo pre vrcholy nasledujúce po injekcii. Pre štatistickú analýzu sa na porovnanie chronoamperometrických údajov v priebehu času medzi vekovými skupinami alebo skupinami, ktoré konzumovali alkohol, a liečbou (soľným roztokom alebo amfetamínom) použila analýza rozptylu opakovaných meraní (ANOVA), po ktorej nasledoval Fisherov najmenej významný rozdiel (LSD) post-hoc test. Pre údaje o príjme etanolu, ktoré neboli normálne distribuované, sa použila Friedman ANOVA. Štatistické analýzy sa uskutočňovali pomocou programu Statistica 10 (StatSoft Inc., Tulsa, OK, USA). Rozdiely sa považovali za štatisticky významné pri p <0.05.
výsledky
Účinky závislé od veku
Rozdiely v referenčných amplitúdach medzi vekovými skupinami sú uvedené v% Obrázok 3, Opakované merania ANOVA porovnávajúce vek a čas, ukázali hlavný účinok veku [F (2,22) = 5.81; p = 0.009], ale žiadny účinok času [F (2,44) = 1.43; p = 0.25] alebo akýkoľvek interakčný efekt medzi časom a vekom [F (4,44) = 1.70; p = 0.17].
Obrázok 3. Referenčné amplitúdy píkov v rôznom veku.
Amplitúdy (uM) (priemer ± SEM) troch referenčných vrcholov pred liečbou buď amfetamínom alebo soľným roztokom v troch vekových skupinách; postnatálny deň (PND) 28, 42 a 70. ** p <0.01.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g003
Žiadne účinky veku [F (2,24) = 1.02; p = 0.38], čas [F (2,48) = 0.94; p = 0.40] alebo čas a vek [F (4,48) = 0.22; p = 0.93] sa našli pre referenčné hodnoty T80. Priemerná ± štandardná chyba stredných (SEM) referenčných hodnôt T80 bola 17.3 ± 1.3 pre PND 28, 19.5 ± 0.9 pre PND 42 a 20.5 ± 1.0 pre PND70.
Rozdiely medzi vekovými skupinami v amplitúdovej odpovedi na amfetamín sú uvedené v% Obrázok 4A-C. Liečba amfetamínom mala za následok hlavné účinky veku [F (2,26) = 3.95; p = 0.03], ošetrenie [F (1,26) = 10.77; p = 0.003] a čas [F (6,156 3.32) = 0.004; p = 12,156] a interakčné účinky medzi časom a vekom [F (2.23 0.01) = 6,156; p = 4.20], čas a liečba [F (0.001 2,26) = 2.37; p <0.11], ale žiadna interakcia medzi vekom a liečbou [F (12,156) = 0.77; p = 0.68] alebo čas, vek a liečba [F (XNUMX XNUMX) = XNUMX; p = XNUMX].
Obrázok 4. Amplitúda a odozvy T80 v priebehu času v rôznych vekových skupinách.
Odpovede v priebehu času po subkutánnych (sc) injekciách soľného roztoku alebo amfetamínu, ako percento referenčných hodnôt (priemer ± SEM), pre amplitúdy v A) postnatálny deň (PND) 28, B) PND 42 a C) PND 70 a pre hodnoty T80 pri D) PND 28, E) PND 42 a F) PND 70. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 v porovnaní s fyziologickými kontrolami, #p <0.05 v porovnaní s ekvivalentným časovým bodom pri PND 42, ° p <0.05, °° p <0.01, °°° p <0.001 v porovnaní s ekvivalentným časovým bodom pri PND 70, §p <0.05, §§p <0.01, §§§p <0.001 v porovnaní s ekvivalentným časovým bodom pri PND 28.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g004
Reakcia T80 na amfetamín je uvedená v Obrázok 4D-E. Vek nemal žiadny hlavný účinok [F (2,25) = 1.87; p = 0.17], ale boli tu aj účinky liečby [F (1,25) = 26.52; p <0.001], čas [F (6,150) = 7.70; p <0.001] a interakčný efekt času a liečby [F (6,150 12.29) = 0.001; p <2,25]. Medzi vekom a liečbou nedošlo k nijakej interakcii [F (1.29) = 0.29; p = 12,150], čas a vek [F (0.66 0.78) = 12,150; p = 1.60] a trend smerom k interakcii medzi časom, vekom a liečbou [F (0.098 XNUMX) = XNUMX; p = XNUMX].
Dobrovoľný príjem alkoholu u dospievajúcich
Údaje o príjme etanolu u krýs 14, ktoré boli použité v chronoamperometrických záznamoch, sú uvedené v grafe Tabuľka 1, Friedman ANOVA nevykazoval žiadne významné rozdiely v príjme v priebehu času, hoci bol trend [x2 = 9.80; p = 0.08] smerom k rozdielom spôsobeným príjmom počas druhého týždňa (PND 35 – 37), ktorý bol mierne vyšší ako v nasledujúcich týždňoch. Friedmanova ANOVA preferencie vykazovala v priebehu času nárast [x2 = 19.7; p = 0.001], najmä v dôsledku zvýšenia v priebehu prvých troch týždňov, pozri Tabuľka 1.
Tabuľka 1. Medián, minimálny a maximálny príjem alkoholu (g / kg / 24 h) a preferencia (%) počas šiestich týždňov prístupu k alkoholu a medián, minimálny a maximálny kumulatívny príjem (g) po reláciách 18.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.t001
Rozdiely v referenčných amplitúdach medzi skupinami konzumujúcimi etanol a vodu sú uvedené v grafe Obrázok 5. Opakované meranie ANOVA porovnávajúce pitnú skupinu a čas ukázalo hlavný účinok pitnej skupiny [F (1,17) = 16.22; p <0.001], ale žiadny časový efekt [F (2,34) = 1.76; p = 0.19] alebo akýkoľvek interakčný efekt medzi časom a pitnou skupinou [F (4,44) = 1.32; p = 0.28].
Obrázok 5. Referenčné amplitúdy píkov zvierat, ktoré pijú vodu alebo etanol.
Amplitúdy (uM) (priemer ± SEM) troch referenčných vrcholov pred liečbou buď amfetamínom alebo soľným roztokom v skupinách pitnej vody a etanolu. ** p <0.01, *** p <0.001.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g005
Žiadne účinky pitnej skupiny [F (1,18) = 0.04; p = 0.85], čas [F (2,36) = 1.96; p = 0.16] alebo skupina času a pitia [F (2,36) = 0.22; p = 0.81] sa našli pre referenčné hodnoty T80. Priemerné hodnoty ± SEM referenčných hodnôt T80 boli 20.5 ± 1.0 pre potkany, ktoré pili vodu, a 19.1 ± 1.3 pre potkany, ktoré pili etanol.
Reakcia na amfetamín v skupinách konzumujúcich etanol a vodu je uvedená na obrázku Obrázok 6, Pre amplitúdy, ako je uvedené v Obrázok 6A, došlo k trendu účinku liečby [F (1,19) = 3.01; p = 0.099] a došlo k hlavnému účinku času [F (6,114) = 2.30; p = 0.04], ale žiadny účinok pitnej skupiny [F (1,19) = 0.39; p = 0.54] alebo akékoľvek interakčné účinky medzi liečenou a pitnou skupinou [F (1,19) = 0.83; p = 0.37] alebo čas a ošetrenie [F (6,114) = 1.13; p = 0.35], čas a skupina na pitie [F (6,114) = 0.44; p = 0.85] alebo čas, liečebná a pitná skupina [F (6,114) = 0.27; p = 0.95].
Obrázok 6. Amplitúdy a reakcie T80 v priebehu času u zvierat, ktoré pijú vodu alebo etanol.
Odpovede v priebehu času po subkutánnych (sc) injekciách soľného roztoku alebo amfetamínu ako percento referenčných hodnôt (priemer ± SEM) pre A) amplitúdy a B) hodnoty T80 vo skupinách pitnej vody (W) - alebo etanole (E) . * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 v porovnaní s fyziologickými kontrolami.
doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g006
Pre hodnoty T80 Obrázok 6B, došlo k hlavnému účinku liečby [F (1,19) = 17.35; p <0.001] a čas [F (6,114 2.42) = 0.03; p = 6,114] a interakčný efekt medzi časom a liečením [F (10.28) = 0.001; p <1,19]. Skupina s pitím nemala žiadny účinok [F (0.33) = 0.57; p = 1,19] alebo akýkoľvek interakčný efekt medzi liečenou a pitnou skupinou [F (0.76) = 0.40; p = 6,114], čas a pitie [F (1.66) = 0.14; p = 6,114] alebo skupina času, liečby a pitia [F (1.75 0.12) = XNUMX; p = XNUMX].
Diskusia
Účinky na uvoľňovanie a príjem dopamínu závislé od veku sa skúmali v základných podmienkach a ako reakcia na amfetamín u skorých a neskorých dospievajúcich potkanov, ako aj dospelých. Preskúmal sa aj vplyv pitia alkoholu počas dospievania a podľa našich vedomostí je prvou štúdiou, ktorá skúma uvoľňovanie a príjem u dobrovoľných potkanov s pitím alkoholu chronoamperometrickou technikou.
Účinky závislé od veku
Rozdiely v referenčných amplitúdach závislé od veku sú v súlade s predchádzajúcou štúdiou využívajúcou voltametriu v kombinácii s elektrickou stimuláciou, ktorá ukázala, že dospelé potkany po stimulácii uvoľnili viac dopamínu ako mladé potkany. [12], Čas dospievania používaný Stamfordom (1989) bol približne PND 30, ale od tej doby štúdie ukázali, že okolo PND 40 – 45 existujú vrcholy v bazálnych extracelulárnych hladinách dopamínu. [25]-[27] a dopamínový receptor D2 hustota [28], zatiaľ čo hladiny tyrozínhydroxylázy sú nižšie ako skorá adolescencia aj dospelosť [29], Súčasná štúdia preto zahrnula dva časové body počas dospievania, PND 28 a PND 42, čo je ekvivalent skorej a neskorej dospievania [11], Amplitúda u neskorých adolescentných zvierat bola stredná k amplitúdam v skorej adolescencii a dospelosti, čo naznačuje, že vývoj od dospievania do dospelosti zahŕňal postupné zvyšovanie uvoľňovacej kapacity dopamínu v reakcii na chlorid draselný v dorzálnom striate. To je v súlade so správami o zvýšenej extracelulárnej hladine dopamínu v jadre accumbens v dospelosti v porovnaní s dospievaním. [30], [31], Ako už bolo uvedené, niektoré štúdie ukazujú aj najvyššie hladiny pri PND 45 [25]-[27] a môžu byť zladené so súčasnou štúdiou prostredníctvom správ o zvýšených rýchlostiach paľby okolo toho istého PND [32], [33], Súčasná štúdia nemerala bazálne extracelulárne hladiny a je možné, že zvýšená rýchlosť spaľovania vedie k zvýšeniu bazálnych hladín bez maxima uvoľňovania indukovaného draslíkom. Okrem toho jedna zo štúdií, ktorá ukazuje draslíkom indukované extracelulárne hladiny v jadre, dosahuje vrchol okolo PND 42 [25] na rozdiel od údajov z dorzálneho striata, od Stamforda (1989) a súčasnej štúdie, ktorá naznačuje regionálne rozdiely.
Miera vychytávania T80 neodhalila žiadne rozdiely medzi vekovými skupinami v súčasnej štúdii, zatiaľ čo Stamford (1989) zistil, že miera vychytávania bola vyššia u dospelých potkanov. Môže to byť spôsobené metodickými rozdielmi v miere absorpcie; T80 obsahuje tak lineárnu, ako aj zakrivenú časť krivky, zatiaľ čo Stamford použil lineárnu časť krivky. [34], Koncentrácie dosiahnuté v tejto štúdii sú iba desatinou koncentrácií v predchádzajúcej štúdii a Vmax by sa preto nemalo dosiahnuť. Použitím lineárnej časti krivky piku na výpočet rýchlosti absorpcie za týchto podmienok sa dosiahnu iba rýchlosti absorpcie závislé od amplitúd. [35], T80 bol vybraný, pretože zohľadňuje aj krivočiary úsek krivky, kde sú koncentrácie dopamínu nižšie a sú citlivejšie na blokátory absorpcie dopamínu. [35], [36], Prirodzene, T80 je tiež závislý na amplitúde, ale ako je vidieť v tejto štúdii, rozdiely v amplitúde automaticky nevedú k rozdielom v T80, čo naznačuje, že pomer vychytávania k uvoľňovaniu je posunutý smerom k vychytávaniu u mladších zvierat. Podporujúce súčasné zistenia je štúdia, ktorá využívala kvantitatívnu mikrodialýzu a nezistila žiadne rozdiely v extrakčnej frakcii, čo je nepriama miera absorpcie, v jadre accumbens potkanov pri PND 35, 45 a 60. [26].
Vyššie uvoľňovanie draslíkom vyvolané v dospelosti by mohlo byť spôsobené väčšou uvoľniteľnou zásobou dopamínu [12] a môže byť zahrnutých množstvo faktorov, ako sú napríklad vekovo závislé rozdiely v syntéze dopamínu tyrozínhydroxylázou [29], [37]vezikuly obsahujúce vezikulárny monoamínový transportér-2 (VMAT-2) [38]a kinetika VMAT-2 [39]a orezávanie receptorov D2 [28] a funkcie [40], Tieto faktory by tiež mohli pomôcť vysvetliť zvýšené amplitúdy pozorované po amfetamíne u skorých dospievajúcich zvierat. Súčasné údaje sú opäť v súlade s údajmi, ktoré vykazujú väčšie zvýšenie uvoľňovania dopamínu u mladých v porovnaní s dospelými zvieratami v reakcii na nomifensín. [12] čo naznačuje, že dospievajúce potkany majú proporcionálne väčšiu rezervu, ktorá sa môže uvoľniť po stimulácii psychoaktívnymi látkami. Toto sú ďalej podporené údajmi, ktoré ukazujú väčšie zvýšenie stimulovaného extracelulárneho dopamínu po amfetamíne u dospievajúcich zvierat [22], Existujú však štúdie mikrodialýzy, ktoré ukazujú, že dospievajúci vykazujú nižšie extracelulárne hladiny dopamínu po amfetamíne v porovnaní s dospelými. [30], [37], čo opäť zdôrazňuje, že možnosť zvýšeného stimulovaného uvoľňovania nemusí nevyhnutne znamenať zvýšenie extracelulárnych hladín a že rôzne techniky môžu dopĺňať doplňujúce informácie.
Po amfetamíne sa nezistili žiadne vplyvy závislé od veku na T80, čo naznačuje, že amfetamín má podobné účinky na absorpciu dopamínu vo všetkých vekových skupinách. Opäť to potvrdzujú výsledky zo štúdie Stamford (1989), ktoré nepreukázali žiadne rozdiely v miere blokovania absorpcie po nomifenzíne medzi vekovými skupinami. Existujú tiež štúdie, ktoré naznačujú, že rozdiely v štruktúre a funkcii dopamínového transportéra súvisiace s vekom súvisia s väzobným miestom pre kokaín na transportéri, ale nie s väzobným miestom pre amfetamíny. [22] čo by mohlo naznačovať, že na amfetamíne v závislosti od veku neexistuje absorpcia. Existuje však trend smerom k interakcii medzi časom, vekom a liečbou, čo naznačuje, že v závislosti od veku reagovali na amfetamín v priebehu času odlišne. Ďalšie štúdie skúmajúce vychytávanie pomocou exogénneho dopamínu by tiež mohli pomôcť oddeliť vychytávanie závislé od amplitúdy od funkcie transportéra. [41]-[43], Dôležité by boli aj štúdie na bdelých potkanoch, keďže súčasná štúdia sa uskutočnila na anestetizovaných zvieratách. Použitá anestézia bola barbiturátový tiobutabarbital (inaktín), pozitívny alosterický modulátor receptorov kyseliny gama-aminomaslovej (GABA) A, ktorý u potkanov vytvára predĺženú a stabilnú anestéziu. [44], GABA môže mať rôzne účinky v závislosti od veku a histórie pitia alkoholu [45] a preto by anestézia mohla interagovať s vekom alebo liečbou a vyvolávať mätúce účinky. Ukázalo sa však, že pentobarbitál, ďalší barbiturát, má malý vplyv na hladinu dopamínu v striatu. [46], Okrem toho v súčasnej štúdii bolo uvoľňovanie indukované pomocou chloridu draselného a nespoliehalo sa na spontánne udalosti, čo by malo znižovať význam GABAergického tónu pri uvoľňovaní. Pokiaľ ide o absorpciu dopamínu, existujú správy, že barbituráty môžu špecificky ovplyvniť absorpciu dopamínu [47], ale nie je jasné, či môže dôjsť aj k interakcii s vekom alebo liečbou.
Dobrovoľný príjem alkoholu u dospievajúcich
Dobrovoľný príjem alkoholu u dospievajúcich po dobu šiestich týždňov mal za následok nižšie referenčné amplitúdy v porovnaní s kontrolami pitnej vody. Amplitúdy boli podobné amplitúdam pozorovaným u dospievajúcich potkanov. Pretože účinky boli pozorované v amplitúde a nie v čase absorpcie, je možné, že alkohol ovplyvňuje faktory ovplyvňujúce uvoľniteľný súbor dopamínu skôr ako dopamínový transportér a existujú údaje podporujúce neovplyvnený príjem po adolescentnom alkohole. [14], Existujú aj údaje o mikrodialýze, ktoré ukazujú zvýšenú extracelulárnu hladinu dopamínu po adolescentnej expozícii intraperitoneálnym injekciám alkoholu. [14], [27], [48]a to je do istej miery v rozpore so súčasnými zisteniami o zníženom uvoľniteľnom dopamíne. Ako už bolo spomenuté vyššie, zvýšená rýchlosť prepúšťania môže byť spôsobom, ako zosúladiť údaje o mikrodialýze so súčasnými údajmi, ale neexistujú žiadne štúdie, ktoré by to podporili. Ďalej existujú štúdie, ktoré ukazujú, že spôsob vystavenia alkoholu, tj dobrovoľný alebo nútený, môže mať na neurobiológiu rôzne účinky [49].
Pri liečbe amfetamínom nedošlo k žiadnym významným rozdielom medzi skupinami konzumujúcimi alkohol a vodu v amplitúdach alebo T80. Trend smerujúci k účinku na amplitúdy však bol spôsobený nárastom alkoholu v skupine. Existuje tiež viac odchýlok v reakcii na amfetamín v skupine s alkoholom, čo by mohlo byť spôsobené zmenami v príjme alkoholu, aj keď táto zmena nie je v korelácii s odpoveďou (údaje nie sú uvedené). To tiež poukazuje na obmedzenie v tejto štúdii, konkrétne to, že hladiny alkoholu v krvi sa nemerali. Štúdia bola založená na nerušenom prístupe k 24ha h a na meraní hladín alkoholu v krvi by musel byť prístup obmedzený a stres, ktorý sa vyskytuje pri odbere krvi, by riskoval narušenie spôsobu príjmu zvierat. Preto nie je možné vylúčiť korelácie medzi reakciou a jednotlivými hladinami alkoholu v krvi. Údaje o príjme uvedené v tejto štúdii sú však podobné ako v iných štúdiách, ktoré preukazujú neurobiologické účinky alkoholu, pri použití potkanov Wistar v podobnom veku alebo paradigmách príjmu[50]-[52], To naznačuje, že nielen jednotlivci, ktorí sú náchylní k vysokému príjmu, ale aj skromní pijáci z prierezu všeobecnej populácie, riskujú zmeny v neurobiológii po dobrovoľnom požívaní alkoholu adolescentmi.
Žiadne rozdiely v čase absorpcie po amfetamíne nenaznačujú, že adolescentný alkohol nemá účinok na funkciu dopamínového transportéra v reakcii na amfetamín, ale prospieva by tiež vyšetreniu použitím exogénneho dopamínu [41]-[43].
Ďalej boli predložené dve zaujímavé pripomienky. Po prvé, referenčné amplitúdy po požití alkoholu sú podobné amplitúdam pozorovaným u zvierat na začiatku periódy príjmu alkoholu, tj PND 28. Po druhé, veľkosť nárastu amplitúd po amfetamíne u zvierat, ktoré konzumujú alkohol, je podobná ako u neskorých dospievajúcich potkanov, tj PND 42. Je potrebné objasniť, či sa tieto zistenia týkajú zmeneného vývoja uvoľniteľnej zásoby a zásobnej zásoby dopamínu v neurónoch. Súčasná štúdia nezahŕňala skupinu dospelých potkanov, ktorí pijú alkohol, takže nie je možné vyvodiť závery o možnosti účinkov špecifických pre vek. Náznaky účinkov špecifických pre vek sa však dajú nájsť v rozdieloch medzi štúdiami dospievajúcich potkanov vystavených alkoholu, ktoré vykazujú neovplyvnený príjem dopamínu. [14] a štúdie dospelých potkanov a opíc vystavených alkoholu, ktoré vykazujú zvýšené vychytávanie, ale nemajú žiadny vplyv na vyvolané pretečenie dopamínu. [53], [54], Pri budúcich štúdiách by preto bolo veľmi dôležité skúmať expozíciu alkoholu a mechanizmy, ktoré ovplyvňujú jeho účinok v rôznych vekových skupinách. Ďalšie skúmanie faktorov, ako je tyrozínhydroxyláza, hustota a funkcia receptora dopamínu a vezikulárny monoamínový transportér, by mohli pomôcť objasniť možné účinky alkoholu súvisiaceho s vekom na uvoľniteľný bazén a zásobný roztok dopamínu. Pokiaľ je nám známe, tieto faktory sa po adolescentnom alkohole neskúmali.
záver
Údaje ukazujú postupné zvyšovanie evakuovaného pretečenia dopamínu s vekom, čo podporuje predchádzajúce štúdie naznačujúce, že množstvo uvoľniteľného dopamínu sa zvyšuje s vekom. Na rozdiel od toho sa v reakcii na amfetamín pozorovalo postupné znižovanie evakuovaného pretečenia s vekom, čo podporuje proporčne väčšiu zásobu dopamínu u mladších zvierat, čo ich robí potenciálne citlivejšími na lieky uvoľňujúce dopamín. Dospievajúci príjem alkoholu mal za následok prepad nižší ako v kontrolách pitia vody. To naznačuje, že alkohol ovplyvňuje uvoľniteľný súbor dopamínu, čo môže mať dôsledky na zraniteľnosť voči závislosti a iným psychiatrickým diagnózam, ktoré sa týkajú dopamínového systému v dorzálnom striate.
Poďakovanie
Autori by chceli poďakovať pani Marite Bergovej za technickú pomoc a Dr. Martinovi Lundbladovi za metodologické diskusie.
Príspevky od autorov
Koncipované a navrhnuté experimenty: SP IN. Vykonané experimenty: SP. Analyzované údaje: SP IN. Napísal článok: SP.
Referencie
Referencie
- 1. Arnett J (1992) Bezohľadné správanie v dospievaní - vývojová perspektíva. Developmental Review 12: 339–373.
doi: 10.1016/0273-2297(92)90013-r - 2. Yamaguchi
K, Kandel DB (1984) Vzory užívania drog od dospievania po mladých
dospelosť: II. Sekvencie progresie. Am J Verejné zdravie 74: 668 – 672.
doi: 10.2105 / ajph.74.7.668 - 3. Degenhardt
L, Chiu WT, Conway K, Dierker L, Glantz M, a kol. (2009) Má
„brána“ záleží? Súvislosti medzi poradím začatia užívania drog
a vývoj drogovej závislosti v Národnej štúdii komorbidity
Replikácie. Psychol Med 39: 157 – 167.
doi: 10.1017 / s0033291708003425 - 4. Anthony JC, Petronis KR (1995) Užívanie drog v počiatočnom štádiu a riziko neskorších problémov s drogami. Závisí od drogy 40: 9 – 15.
doi: 10.1016/0376-8716(95)01194-3 - 5. Grant
BF, Dawson DA (1997) Vek na začiatku užívania alkoholu a jeho súvislosť
so závislosťou od alkoholu DSM-IV a závislosťou: výsledky od národného
Pozdĺžny epidemiologický prieskum o alkohole. J Zneužitie látky 9: 103 – 110.
doi: 10.1016/s0899-3289(97)90009-2 - 6. Dewit
DJ, Adlaf EM, Offord DR, Ogborne AC (2000) Vek pri prvom použití alkoholu: a
rizikový faktor pre vývoj alkoholových porúch. Am J Psychiatry
157: 745-750.
doi: 10.1176 / appi.ajp.157.5.745 - 7. posádky
F, He J, Hodge C (2007) Dospievajúci kortikálny vývoj: kritický
obdobie zraniteľnosti pre závislosť. Pharmacol Biochem Behav 86:
189-199.
doi: 10.1016 / j.pbb.2006.12.001 - 8. Di
Chiara G, Imperato A (1988) Drogy zneužívané ľuďmi prednostne
zvýšiť koncentrácie synaptického dopamínu v mezolimbickom systéme
voľne sa pohybujúce potkany. Proc Natl Acad Sci USA 85: 5274 – 5278.
doi: 10.1073 / pnas.85.14.5274 - 9. Koob GF, Volkow ND (2010) Neurocircuitry of addiction. Neuropsychofarmakológia 35: 217 – 238.
dva: 10.1038 / npp.2009.110 - 10. Everitt
BJ, Robbins TW (2013) Od ventrálnej po dorzálnu striatum:
Preskúmanie ich úloh v drogovej závislosti. Neurosci Biobehav Rev. - 11. Spear LP (2000) Dospievajúci mozog a prejavy správania súvisiace s vekom. Neurosci Biobehav Rev 24: 417 – 463.
doi: 10.1016/s0149-7634(00)00014-2 - 12. Stamford
JA (1989) Vývoj a starnutie nigrostriatálneho dopamínu u potkanov
systém študovaný s rýchlou cyklickou voltametriou. J Neurochem 52: 1582 – 1589.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.1989.tb09212.x - 13. Marco
EM, Adriani W, Ruocco LA, Canese R, Sadile AG, a kol. (2011)
Neurobehaviorálne adaptácie na metylfenidát: problém začiatku
expozícia adolescentom. Neurosci Biobehav Rev 35: 1722 – 1739.
doi: 10.1016 / j.neubiorev.2011.02.011 - 14. bádania
KA, Maldonado AM, Kirstein CL (2007) Chronická expozícia etanolu počas
dospievanie zvyšuje bazálny dopamín v jadre accumbens septi
počas dospelosti. Alcohol Clin Exp Res 31: 895 – 900.
doi: 10.1111 / j.1530-0277.2007.00370.x - 15. Sahr
AE, Thielen RJ, Lumeng L, Li TK, McBride WJ (2004), dlhotrvajúci
zmeny mezolimbického dopamínového systému po periadolescente
pitie etanolu potkanmi preferujúcimi alkohol. Alcohol Clin Exp Res 28:
702-711.
doi: 10.1097 / 01.alc.0000125344.79677.1c - 16. Littrell
OM, Pomerleau F, Huettl P, Surgener S, McGinty JF, a kol. (2012)
Zvýšená aktivita dopamínového transportéra u heterozygotov Gdnf v strednom veku
myšou. Starnutie neurobiolu 33: 427 e421 – 414. - 17. Gerhardt
GA, Hoffman AF (2001) Účinky zloženia záznamového média na
reakcie mikroelektród uhlíkových vlákien potiahnutých Nafionom merané pomocou
vysokorýchlostná chronoamperometria. J Neurosciho metódy 109: 13 – 21.
doi: 10.1016/s0165-0270(01)00396-x - 18. Lundblad
M, af Bjerken S., Cenci MA, Pomerleau F, Gerhardt GA, a kol. (2009)
Chronická intermitentná liečba L-DOPA indukuje zmeny v dopamíne
release. J Neurochem 108: 998 – 1008.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05848.x - 19. Paxinos G, Watson C (2007) Potkanský mozog v stereotaxických súradniciach. New York: Academic Press.
- 20. Sherwood
NM, Timiras PS (1970) Stereotaxický atlas vyvíjajúceho sa mozgu potkanov.
Berkeley ,: Kalifornská univerzita Press. 209 str. (str. 214 – 203 illus.) s. - 21. Friedemann
MN, Gerhardt GA (1992) Regionálne účinky starnutia na dopaminergné látky
pôsobia na potkanovi Fischer-344. Neurobiol starnutie 13: 325 – 332.
doi: 10.1016/0197-4580(92)90046-z - 22. Chodítko
QD, Morris SE, Arrant AE, Nagel JM, Parylak S, a kol. (2010) dopamín
Inhibítory vychytávania, ale nie uvoľňovače dopamínu, vyvolávajú väčšie zvýšenie
motorické správanie a extracelulárny dopamín u dospievajúcich potkanov ako u
dospelé samce potkanov. J Pharmacol Exp Ther 335: 124 – 132.
doi: 10.1124 / jpet.110.167320 - 23. háky
MS, Jones GH, Neill DB, Justice JB Jr (1992) Jednotlivé rozdiely v
senzibilizácia amfetamínu: účinky závislé od dávky. Pharmacol Biochem
Behav 41: 203 – 210.
doi: 10.1016/0091-3057(92)90083-r - 24. Dellu
F, Piazza PV, Mayo W, Le Moal M, Simon H (1996) Hľadanie noviniek v
potkany - biologické behaviorálne vlastnosti a možný vzťah k internetu
črta hľadajúca zmysel u človeka. Neuropsychobiológia 34: 136 – 145.
dva: 10.1159 / 000119305 - 25. Nakano
M, Mizuno T (1996) Zmeny metabolizmu
neurotransmitery v striatum potkana: štúdia na mikrodialýze. Mech Aging
Dev 86: 95 – 104.
doi: 10.1016/0047-6374(95)01680-5 - 26. bádania
KA, Adler KJ, Kirstein CL (2006) Adolescenti sa líšia od dospelých v roku 2005
kokaínové kondicionované miesto a kokaínmi indukovaný dopamín v USA
nucleus accumbens septi. Eur J Pharmacol 550: 95 – 106.
doi: 10.1016 / j.ejphar.2006.08.034 - 27. Philpot
RM, Wecker L, Kirstein CL (2009) Opakovaná expozícia etanolu počas
dospievanie mení vývojovú trajektóriu dopaminergnej produkcie
z jadra accumbens septi. Int J Dev Neurosci 27: 805 – 815.
doi: 10.1016 / j.ijdevneu.2009.08.009 - 28. Teicher
MH, Andersen SL, Hostetter JC Jr (1995) Dôkaz dopamínového receptora
prerezávanie medzi dospievaním a dospelosťou v striate, ale nie v jadre
accumbens. Brain Res Dev Brain Res 89: 167 – 172.
doi: 10.1016/0165-3806(95)00109-q - 29. Mathews
IZ, Waters P, McCormick CM (2009) Zmeny hyporeaktivity na
akútny amfetamín a vekové rozdiely v tyrozínhydroxyláze
imunoreaktivita v mozgu počas dospievania u samcov a samíc potkanov.
Dev Psychobiol 51: 417 – 428.
doi: 10.1002 / dev.20381 - 30. Laviola
G, Pascucci T, Pieretti S (2001) Striatálna senzibilizácia dopamínu na
D-amfetamín u periadolescentov, ale nie u dospelých potkanov. Pharmacol Biochem
Behav 68: 115 – 124.
doi: 10.1016/s0091-3057(00)00430-5 - 31. Gazzara
RA, Andersen SL (1994) Potomstvo apomorfínom vyvolaných zmien
uvoľňovania neostriatálneho dopamínu: účinky na uvoľňovanie vyvolané draslíkom.
Neurochem Res 19: 339 – 345.
doi: 10.1007 / bf00971583 - 32. McCutcheon JE, Marinelli M (2009) Vek záleží. Eur J Neurosci 29: 997 – 1014.
doi: 10.1111 / j.1460-9568.2009.06648.x - 33. Wong
WC, Ford KA, Pagels NE, McCutcheon JE, dospievajúci Marinelli M (2013)
sú náchylnejšie na závislosť od kokaínu: behaviorálne a
elektrofyziologický dôkaz. J Neurosci 33: 4913 – 4922.
doi: 10.1523 / jneurosci.1371-12.2013 - 34. Stamford
JA, Kruk ZL, Millar J, Wightman RM (1984) Príjem striatálneho dopamínu v
potkan: analýza in vivo rýchlou cyklickou voltametriou. Neurosci Lett 51:
133-138.
doi: 10.1016/0304-3940(84)90274-x - 35. Wightman
RM, Zimmerman JB (1990) Kontrola extracelulárnej koncentrácie dopamínu
v striatum potkana impulzným tokom a absorpciou. Brain Res Brain Res Rev 15:
135-144.
doi: 10.1016/0165-0173(90)90015-g - 36. Zahniser
NR, Dickinson SD, Gerhardt GA (1998) Vysokorýchlostný chronoamperometr
elektrochemické merania klírensu dopamínu. Metódy Enzymol 296:
708-719.
doi: 10.1016/s0076-6879(98)96050-5 - 37. Matthews
M, Bondi C, Torres G, Moghaddam B (2013) Znížený presynaptický dopamín
aktivita pri dorzálnom striatume adolescenta. Neuropsychofarmakológia 38:
1344-1351.
dva: 10.1038 / npp.2013.32 - 38. Truong
JG, Wilkins DG, Baudys J, Crouch DJ, Johnson-Davis KL, a kol. (2005)
Zmeny vezikulárneho monoamínu závislé od veku vyvolali metamfetamín
Funkcia transportéra-2: dôsledky pre neurotoxicitu. J Pharmacol Exp
Ďalej 314: 1087 – 1092.
doi: 10.1124 / jpet.105.085951 - 39. Volz
TJ, Farnsworth SJ, Rowley SD, Hanson GR, Fleckenstein AE (2009)
Vekovo závislé rozdiely v dopamínovom transportéri a vezikulárnom
monoamínový transportér-2 a jeho dôsledky pre
neurotoxicita metamfetamínu. Synapse 63: 147 – 151.
doi: 10.1002 / syn.20580 - 40. Benoit-Marand
M, O'Donnell P (2008) D2 dopamínová modulácia kortikosteroidov
zmeny synaptickej odpovede počas dospievania. Eur J Neurosci 27:
1364-1372.
doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06107.x - 41. Cass
WA, Gerhardt GA (1995) Stanovenie absorpcie dopamínu u potkanov in vivo
stredná prefrontálna kôra: porovnanie s dorzálnym striatom a jadrom
accumbens. J Neurochem 65: 201 – 207.
doi: 10.1046 / j.1471-4159.1995.65010201.x - 42. Cass
WA, Zahniser NR, Flach KA, Gerhardt GA (1993) Klírens exogénnych
dopamín v dorzálnom striatume a jadre accumbens potkanov: úloha
metabolizmus a účinky lokálne aplikovaných inhibítorov absorpcie. J Neurochem
61: 2269-2278.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.1993.tb07469.x - 43. Mlynár
EM, Pomerleau F, Huettl P, Russell VA, Gerhardt GA, a kol. (2012) The
spontánne hypertenzívne a Wistar Kyoto modely krýs ADHD vykazujú
subregionálne rozdiely v uvoľňovaní a absorpcii dopamínu v striate
a nucleus accumbens. Neurofarmakológia 63: 1327 – 1334.
doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.08.020 - 44. Anestézia a analgézia rýb RE (2008) u laboratórnych zvierat. San Diego: Academic Press.
- 45. Silveri
MM (2014) Príspevky GABA k reakcii na alkohol počas roku 2006
dospievanie: Informácie z predklinických a klinických štúdií. Pharmacol
Ther. - 46. Sembo
K, Adachi N, Arai T (2005) Uľahčenie serotonergnej aktivity a
amnézia u potkanov spôsobená intravenóznymi anestetikami. Anesteziológia 102:
616-623.
doi: 10.1097 / 00000542-200503000-00021 - 47. Keita
H, Lecharny JB, Henzel D, Desmonts JM, Mantz J (1996) je inhibícia
príjem dopamínu relevantný pre hypnotické pôsobenie iv anestetík? br
J Anaesth 77: 254 – 256.
doi: 10.1093 / bja / 77.2.254 - 48. veľkonočné
M, Boix J, Felipo V, Guerri C (2009) Opakované podávanie alkoholu
počas dospievania spôsobuje zmeny mezolimbického dopaminergného a
glutamatergické systémy a podporuje príjem alkoholu u dospelých potkanov. J
Neurochem 108: 920 – 931.
doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05835.x - 49. Spanagel R (2003) Výskum závislosti od alkoholu: od zvieracích modelov po kliniky. Best Pract Res Res Gastroenterol 17: 507 – 518.
doi: 10.1016/s1521-6918(03)00031-3 - 50. Adermark
L, Jonsson S, Ericson M, Soderpalm B (2011) Intermitentný etanol
spotreba tlmí endokanabinoidovú signalizáciu v dorsolaterále
striatum potkana. Neurofarmakológia 61: 1160 – 1165.
doi: 10.1016 / j.neuropharm.2011.01.014 - 51. García-Burgos
D, González F, Manrique T, Gallo M (2009)
dospievajúcich, dospievajúcich a dospelých potkanov Wistar v akvizícii,
podmienky údržby a relapsu. Alkoholizmus: Klinický a
Experimentálny výskum 33: 722 – 728.
doi: 10.1111 / j.1530-0277.2008.00889.x - 52. Steensland
P, Fredriksson I., Holst S., Feltmann K., Franck J., a kol. (2012) The
monoamínový stabilizátor (-) - OSU6162 zoslabuje dobrovoľný príjem etanolu a
produkcia dopamínu v jadre accumbens vyvolaná etanolom. Biol Psychiatry
72: 823-831.
dva: 10.1016 / j.biopsych.2012.06.018 - 53. Budygin
EA, John CE, Mateo Y, Daunais JB, Friedman DP, a kol. (2003) Chronické
Expozícia etanolu mení presynaptickú funkciu dopamínu v striate
opice: predbežná štúdia. Synapse 50: 266 – 268.
doi: 10.1002 / syn.10269 - 54. Budygin
EA, Oleson EB, Mathews TA, Lack AK, Diaz MR, a kol. (2007) Účinky
- chronická expozícia alkoholu pri absorpcii dopamínu v jadre potkanov a
kaudátový putamen. Psychofarmakológia (Berl) 193: 495 – 501.
doi: 10.1007/s00213-007-0812-1
;
