Nadmerná expresia DeltaFosB v Nucleus Accumbens zlepšuje sexuálnu odmenu u syrských škrečkov (2009)

POZNÁMKY: ΔFosB je chemikália potrebná na návyky. Liečivé a behaviorálne závislosti závisia od akumulácie Delta FosB. Blok Delta FosB a závislosť prestane. Tu sa ukazuje, že sexuálna skúsenosť zvyšuje Delta FosB a vedie k zvýšeniu citlivosti centra odmeňovania. Senzibilizácia spôsobuje vyššie uvoľňovanie dopamínu, ktoré zvyšuje aktivitu alebo liek. V podstate je sex závislým procesom. Táto štúdia tiež geneticky zvýšila Delta FosB, čo zvýšilo obohacujúce aspekty sexu nad rámec bežných hladín. Mohol by použiť internetový porno spôsobiť vzostup Delta FosB nad rámec bežných úrovní? Mohol by to viesť k závislosti a opätovnému prepojeniu neurálnych ciest? Zdá sa byť rozumné.

FULL STUDY: Nadmerná expresia ΔFosB v Nukleus Accumbens zvyšuje sexuálnu odmenu u samičích škrečkov

Gény Brain Behav. 2009 jún; 8 (4): 442-449. dva: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.

VL živé ploty, 1 S. Chakravarty, 2 EJ Nestler, 2 a RL Meisel1

abstraktné

Opakovaná aktivácia mezolimbického dopamínového systému má za následok pretrvávajúce zmeny správania sprevádzané vzorom neurálnej plasticity v nucleus accumbens (NAc). Keďže akumulácia transkripčného faktora ΔFosB môže byť dôležitou súčasťou tejto plasticity, otázkou, ktorú sme sa zaoberali v našom výskume, je, či je ΔFosB regulovaný sexuálnymi skúsenosťami u žien. Ukázali sme, že samice sýrskych škrečkov, ktorí podstúpili sexuálnu skúsenosť, vykazujú niekoľko zmien správania vrátane zvýšenej sexuálnej účinnosti s naivnými samcami škrečkov, sexuálnej odmeny a zvýšenej schopnosti reagovať na psychomotorické stimulanty (napr. Amfetamín).

Nedávno sme preukázali, že sexuálna skúsenosť zvýšila hladiny ΔFosB v NAc samíc syrských škrečkov. Cieľom tejto štúdie bolo preskúmať funkčné dôsledky tejto indukcie určením, či konštitutívna nadmerná expresia ΔFosB adeno-asociovanými vírusovými (AAV) vektormi v NAc môže napodobňovať behaviorálne účinky sexuálnej skúsenosti.

Zvieratá s AAV sprostredkovanou nadmernou expresiou ΔFosB v NAc preukázali dôkaz sexuálnej odmeny v podmienkach kondicionovaného miesta paradigma za podmienok, pri ktorých kontrolné zvieratá, ktoré dostali injekciu fluorescenčného proteínu AAV-zeleného (GFP) do NAc, nevyhovovali. Skúšky sexuálneho správania ďalej ukázali, že muži spárovaní s AAV-ΔFosB samicami mali zvýšenú kopulačnú účinnosť, meranú podielom psoch, ktoré zahŕňali intromisiu v porovnaní s mužmi spájanými s ženami AAV-GFP. Tieto výsledky podporujú úlohu pre ΔFosB pri sprostredkovaní prírodného motivovaného správania, v tomto prípade ženského sexuálneho správania, a poskytujú nový pohľad na možné endogénne pôsobenie ΔFosB.

Prejsť na:

úvod

Skúsenosti s drogami, zneužívaním drog, motivovaným správaním, správaním na kolesách alebo inštrumentálnym učením vedú k aktivácii mezolimbického dopamínového systému a pretrvávajúcim zmenám v nucleus accumbens (NAc) (Becker et al., 2001, Di Chiara et al., 1998, Harris et al., 2007, Kumar et al., 2005, Meisel & Mullins, 2006, Nestler, 2008, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Pierce & Kumaresan, 2006, Vlk et al., 2004). Štrukturálne zmeny, najmä tvorba dendritických tŕňov, sú dôležitou súčasťou plasticity založenej na skúsenostiach (Allen et al., 2006, Závetrie et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson & Kolb, 2004), ktorý zostáva dlho po ukončení skúseností z hľadiska správania alebo podania lieku (McClung & Nestler, 2008, Meisel & Mullins, 2006, Vlk et al., 2004).

Transkripčný faktor ΔFosB má molekulové vlastnosti, ktoré ho robia vhodným kandidátom na sprostredkovanie trvalých štrukturálnych a behaviorálnych modifikácií následkom behaviorálnych alebo liekových skúseností (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Colby et al., 2003, Doucet et al., 1996, Nádej et al., 1994, Kelz et al., 1999, McClung & Nestler, 2003, McClung et al., 2004, McDaid et al., 2006, Nakabeppu a Nathans, 1991, Nestler, 2008, Nye et al., 1995, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Wallace et al., 2008, WERMA et al., 2002, ZACHARIE et al., 2006). ΔFosB je alternatívny zostrihový produkt okamžitého skorého génu fosB (Mumberg et al., 1991, Nakabeppu a Nathans, 1991) a na rozdiel od plnej dĺžky proteínu FosB má skrátený ΔFosB nezvyčajnú stabilitu, čo vedie k akumulácii proteínu po opakovanej stimulácii (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Nádej et al., 1994, Kelz et al., 1999, Perrotti et al., 2008, ZACHARIE et al., 2006). Hoci mechanizmus, ktorým fosB je alternatívne zostrihnutý, nezostáva neznáme, skrátenie proteínu spolu s fosforyláciou chráni proteín pred rýchlou proteasomálnou degradáciou, čím sa dosiahne vyššia úroveň transkripčnej aktivity v porovnaní s viacerými členmi rodiny s prechodným pobytom FosB (Carle et al., 2007, Ulery & Nestler, 2007, Ulery et al., 2006). Predpokladá sa, že akumulácia proteínu ΔFosB produkuje vzory génovej expresie, ktoré môžu byť základom účinkov skúseností na dlhodobú behaviorálnu a bunkovú plasticitu (McClung & Nestler, 2008).

Použili sme sexuálne správanie žien v sýrskych škrečkoch ako model plasticity založenej na skúsenostiach v mozgu (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley a Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993, Meisel a Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). Výhodou práce so sexuálnym správaním je schopnosť kontrolovať úroveň pokusov zvieraťa tým, že má buď úplne sexuálne naivné zvieratá, alebo odlišným vystavením zvierat rôznym úrovniam sexuálnej skúsenosti. Predtým sme ukázali, že opakované sexuálne skúsenosti vedú k senzibilizácii mezolimbického dopamínového systému, podobne ako pri užívaní drog (Bradley et al., 2005b, Bradley a Meisel, 2001, Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Nádej et al., 1992, Kelz et al., 1999, Kohlert a Meisel, 1999, Pierce a Kalivas, 1995, Pierce a Kalivas, 1997a, Pierce a Kalivas, 1997b, Robinson & Kolb, 1999a). Napríklad, podobne ako účinky liekov, opakovaná sexuálna skúsenosť zvyšuje dendritické tŕne v stredne štipľavých neurónoch NAc (Závetrie et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson et al., 2001, Robinson & Kolb, 1997, Robinson & Kolb, 1999a, Robinson & Kolb, 1999b, Robinson & Kolb, 2004). Ďalej sme zistili, že farbenie "FosB / FosB je vytrvalo zvýšené v NAc po opakovaných sexuálnych skúsenostiachMeisel & Mullins, 2006).

Vzhľadom na to, že sexuálne skúsenosti môžu viesť k dlhotrvajúcim prejavom členov rodiny FosB, cieľom tejto štúdie bolo manipulovať expresiu Î "FosB s cieľom napodobniť následky správania opakovaných sexuálnych skúseností. Po vírusom sprostredkovanej nadmernej expresii ß "FosB v NAc boli samice sýrskych škrečkov testované na zvýšenú preferenciu kondicionovaného miesta a tiež na zvýšenú kopulačnú účinnosť u našich samcov škrečkov, pričom dva koncové body, ktoré boli predtým preukázané, že sú ovplyvnené opakovanými sexuálnymi skúsenosťamiBradley et al., 2005b, Meisel a Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). Wže v dôsledku pretrvávajúcej nadmernej expresie Î "FosB v NAc samíc škrečkov, ktorí dostali minimálnu sexuálnu skúsenosť, sme schopní produkovať zmeny správania podobné tým ženám, ktoré majú rozsiahlejšie sexuálne skúsenosti.

Prejsť na:

Materiály a metódy

Experimentálne subjekty

Mužské a samičie syrské škrečky sa dodávali približne v 60 veku od Charles River Breeding Laboratories, Inc. (Wilmington, MA). Samice sa umiestnili jednotlivo do plastových klietok (50.8 cm dlhé - 40.6 cm široké - 20.3 cm vysoké), zatiaľ čo samce stimulujúce zvieratá boli umiestnené v skupinách v rovnakých klietkach v počte troch alebo štyroch. Zvieracia miestnosť bola udržiavaná pri kontrolovanej teplote 22 ° C s programom 14: 10 hr svetlo-tma (svetlá medzi 1: 30 a 11: 30 pm). Zvieratám boli k dispozícii potraviny a voda podľa chuti.

Všetky postupy použité v tomto experimente boli v súlade s národnými inštitúciami zdravia Pokyny pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat a boli schválené Výborom pre starostlivosť a používanie zvierat Purdue.

chirurgia

Samice škrečkov boli bilaterálne ovariektomizované pod anestézou sodnou pentobarbitalom (Nembutal, 8.5 mg na 100 gm telesnej hmotnosti, ip), dostali doplnkovú anestéziu a potom prešli dvojstrannou stereotaxiou na dodávanie vírusových vektorov. Počas stereotaxickej operácie bola hlava oholená a koža a svaly boli stiahnuté. V lebke bola vyvŕtaná malá diera a injekčná striekačka 5 ¼L Hamilton bola znížená na úroveň NAc z bočného uhla 2 °, aby sa zabezpečila priechodnosť bočných mozgových komôr. Injekčná striekačka bola pred injekciami udržiavaná na mieste 5 min a potom bol do NAc po 0.7 min dodaný buď adeno-asociovaný vírus (AAV) -GFP alebo AAV-1 "FosB (7 ¼L), pričom injekčná striekačka bola na mieste za ďalšie 5 min. Tento postup bol opakovaný pre kontralaterálnu stranu mozgu.

Vírusové vektory

AAV sa vyznačuje schopnosťou účinne transfekovať neuróny, ako aj udržiavať expresiu špecifického transgénu po dlhú dobu (Chamberlin et al., 1998). Vektory AAV existujú v rôznych sérotypoch na základe charakterizácie ich kapsidového proteínového povlaku. Tento experiment použil AAV2 (sérotyp 2) zo Stratagene s titrom nad 108(AAV-GFP), rovnako ako AAV vektor, ktorý mal konštrukty pre obidve FosB a GFP (AAV-Î "FosB-GFP). Vírusové vektory sa injikovali do NAc najmenej 3 týždňov pred testovaním správania, aby sa umožnilo vyvíjanie nadmernej expresie I "FosB. Tieto vektory AAV sprostredkujú transgénnu expresiu u potkanov a myší, ktorá sa stáva maximálnou v priebehu 10 dní injekcie a potom pretrváva na tejto úrovni aspoň počas mesiacov 6 (Winstanley a kol., 2007, Zachariou a kol., 2006). Dôležité je, že vektory infikujú len neuróny a neprinášajú žiadnu vyššiu toxicitu ako samotné infúzie. Podrobnosti o výrobe a použití týchto vektorov sú uvedené v predchádzajúcich publikáciách (Winstanley a kol., 2007, Zachariou a kol., 2006).

Sexuálne skúsenosti

Všetky samice škrečkov ovariektomizované boli pripravené na sexuálne zážitky raz týždenne dvakrát denne subkutánne injekcie estradiolbenzoátu (10® v 0.1 ml bavlníkových semien) približne 48 hr a 24 hr pred testom sexuálneho správania, po ktorom nasledovala subkutánna injekcia progesterónu (500 ¼g v 0.1 ml bavlníkových semien) 4 - 6 h pred testom sexuálneho správania. Ženy, ktoré dostali sexuálnu skúsenosť, dostali sexuálne skúsený samček škrečka na 10 min session 4 - 6 h po injekcii progesterónu. Každý muž a žena boli spárované raz počas trvania testov sexuálnej skúsenosti.

Uprednostňované preferenčné miesto

V tomto experimente bola využitá prednostná paradigma so zaujatými podmienkami (Tzschentke, 1998). Naše kondicionované zariadenie na preferenčné miesto (Meisel a Joppa, 1994, Meisel et al., 1996) pozostáva z jednej bielej a jednej šedej priehradky (60 Ã- 45 Ã- 38 cm) spojenej jasným centrálnym oddelením (37 Ã- 22 Ã- 38). Hlavné oddelenia boli ďalej odlíšené v podstielke osika (Harlan Laboratories, IN) v šedej priehradke a v bielom oddelení podložkou z kukurice (Harlan Laboratories, IN). Ženské škrečky ovariektomizované boli hormonálne pripravené pred predbežnou skúškou, sexuálnymi podmienkami a následným testom. Počas predbežného testovania bolo zviera umiestnené do čírej centrálnej komory a bolo možné pohybovať rôznymi oddeleniami pre 10 min, aby sa stanovila počiatočná preferencia pre každé oddelenie. Keďže všetky zvieratá vykazovali počiatočnú preferenciu pre bielu komoru, kondicionovanie sa uskutočňovalo v šedej komore. Podávanie hormónov sa opakovalo počas 2 (skupiny 2 - 5) alebo 5 týždňov (skupina 1) kondicionovania. Počas kondicionovania sa ženám poskytli sexuálne skúsenosti so samcom v šedej priehradke pre 10 min, pričom boli merané parametre ženského kopulácie (latencia lordózy a celková doba lordózy). Jedna hodina po skúške sexuálnej skúsenosti bola samica umiestnená sama v bielej komore pre 10 min. Kontrolná skupina samíc, ktoré nedostali sexuálnu skúsenosť, boli hormonálne ošetrené, ale umiestnené samostatne v každej komore pre 10 min. Po týždňoch kondicionovania 2 alebo 5 sa zvieratám podával post-test, v ktorom sa opäť mohli pohybovať komorami pre 10 min. Bez ohľadu na skupinu boli všetky post-testy vykonané sedem týždňov po stereotaxickej operácii, a preto všetky zvieratá boli usmrtené rovnakou úrovňou vírusovej expresie. V tomto experimente boli skupiny 5: Pozitívna kontrolná skupina zvierat dostala bilaterálnu AAV-GFP a týždenné sexuálne správanie 5 s mužom (skupina 1, n = 8). Dve negatívne kontrolné skupiny nedostali žiadnu sexuálnu kondíciu za týždne 2 a dostali buď AAV-1 "FosB (skupina 2, n = 5) alebo AAV-GFP (skupina 3, n = 4). Nakoniec existovali zvieratá, ktoré dostali 2 týždne párov sexuálneho správania mužovi s bilaterálnou injekciou AAV-1 "FosB (skupina 4, n = 7) alebo AAV-GFP (skupina 5, n = 7).

Naivný mužský experiment

Predchádzajúce výskumy ukázali, že sexuálne skúsené samice škrečkov môžu zlepšiť kooperatívnu účinnosť interakcií s ich sexuálne nažilými mužskými partnermi (Bradley et al., 2005b). Tento test bol podaný približne jeden týždeň po skončení kondície podmieneného miesta po testovaní na dve skupiny zvierat, ktoré dostali 2 týždne sexuálnej kondície (skupiny 4 a 5). Ženy boli hormonálne pripravené na sexuálnu skúsenosť, ako je opísané. Počas testu 10 min bol do domovej klietky ženského pohlavia predstavený sexuálne známy škrečok a skúšobná relácia bola nahratá videozáznamom pre neskoršiu analýzu. Počet videonahrávok a intromízok (vrátane ejakulácií) mužského pohlavia, ako aj podiel celkových úchytov, ktoré zahŕňali intromisiu (hit rate) boli stanovené z videopásky.

imunohistochémia

Imunofarbenie sa uskutočnilo na všetkých zvieratách s cieľom overiť umiestnenie miesta injekcie a anatomický rozsah expresie proteínu. Ženy dostali predávkovanie lieku Sleepaway (0.2 ml ip, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) a intrakardiálne perfundované s fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom 25 (PBS) pre 2 min (približne 50 ml) a potom s 4% paraformaldehydom v 25 mM PBS pre 20 min (približne 500 ml). Mozgy boli odstránené a následne fixované na 2 hr v 4% paraformaldehyde a potom boli umiestnené do roztoku 10% sacharózy v PBS cez noc pri 4 ° C. Zvieratá, ktoré dostali iba bilaterálny AAV-GFP, mali sériové koronálne rezy (40 ™) odrezané zo zamrznutej tkaniny na 25 mM PBS plus 0.1% bovinný sérový albumín (BSA) (premývací roztok), potom sa namontovali priamo na klzné sklíčko a pokrývajú, n-propylgalátu v glyceríne. Zvieratá, ktoré dostali bilaterálny AAV-1 "FosB, mali sériové koronálne rezy (5 ¼m) rezané z mrazeného tkaniva a potom opláchli 40 krát za 3 min v premývacom pufri. AAV-1 "FosB zvieratá boli analyzované len na expresiu" FosB "a preto boli inkubované v primárnej protilátke FosB / FosB (10: 1, sc-10000 Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA) % Triton-X 48 pri izbovej teplote pre 0.3 hr a potom sa presunul na 100 ° C pre 24 hr. Táto koncentrácia primárnej protilátky bola zvolená, pretože produkuje len minimálne endogénne farbenie "FosB / FosB. Po inkubácii v primárnej protilátke sa rezy premyli 4 krát v 24 min v premývacom pufri a potom sa inkubovali v biotinylovanej sekundárnej protilátke pri 3 min pri izbovej teplote (10: 45, Vector, Burlingame, CA). Sekcie sa potom premyli 1 krát za 200 min v premývacom pufri predtým, ako sa inkubovali v konjugáte streptavidínu Alexa Fluor 3 (10: 594, Molecular Probes, Eugene, OR). Po tejto inkubácii boli rezy premyté 1 časmi pre 500 min v premývacom pufri, potom boli namontované na šmýkačky a pokryté krytom, zatiaľ čo boli ešte vlhké s glycerolom 3% n-propylgalátu.

Mikroskopická analýza

Sklíčka boli analyzované svetelným mikroskopom Leica DM4000B s fluorescenčnou schopnosťou spojenou s digitálnym fotoaparátom Leica DFC500. Digitálne snímky pravého aj ľavého miesta injekcie každej časti boli sériovo analyzované fluorescenčnou mikroskopiou na lokalizáciu injekčného umiestnenia v NAc. Sekcie z každého zvieraťa sa analyzovali tak, aby sa našiel rastrál na kaluálne šírenie vírusovej expresie a tiež anatomické umiestnenie najväčšieho priemeru expresie. Ďalej sa v týchto sekciách počty buniek farbených FosB počítali v ImageJ z uložených digitálnych obrazov. Keďže našim cieľom bolo jednoducho získať približné počty buniek, stereologické metódy neboli použité.

Prejsť na:

výsledky

Časový priebeh vírusom sprostredkovanej nadmernej expresie I "FosB v NAc samíc syrských škrečkov

Samostatná skupina zvierat bola použitá spočiatku na nájdenie časového priebehu vírusom sprostredkovanej Î "FosB nadmernej expresie u samice škrečka. Analýza expresie "FosB v týždňových časových bodoch 3 (n = 5), 6 (n = 6) a 9 (n = 2) odhalila, že 3 týždne po stereotaktickej operácii produkovali hladinu nadmernej expresie I" FosB, cez 6 a 9 týždne po stereotaxickej operácii. Vírusová expresia bola väčšinou jadrová, ale bola tiež nájdená v cytoplazme a dokonca aj v dendritoch niektorých nadmerných buniek. Z trinástich zvierat, ktoré obsahovali časový priebeh experimentu, štyri zvieratá mali na injekciu jadrových injekcií s rastrálnou NAc, z ktorých jedna sa rozširovala do jadra lôžka stria terminalis (BNST). Zvyšných deväť zvierat malo zavedenie injekcie do kaudálnej polohy, sedem v kaudálnom jadre a dve v kaudálnom obale NAc. Len jeden z injekcií s kaudálnym puzdrom prekročil kavuálne do BNST, zatiaľ čo šesť injekcií v kaudálnom jadre sa krížovo prekročilo do BNST. Priemerné najväčšie priemery vírusovej expresie pre každý časový bod boli 0.9 mm, 1.2 mm a 1.0 mm pre týždne 3, 6 a 9. Tieto priemerné priemery boli podrobené analýze rozptylu a neboli zistené, že sú výrazne odlišné. Preto v nasledujúcich behaviorálnych pokusoch začalo testovanie správania okolo 3 týždňov po stereotaxickej operácii a zvieratá boli usmrtené asi 9 týždne po stereotaxickej operácii, aby sa zabezpečilo, že vírusová expresia bude udržiavaná na konzistentnej úrovni.

Imunohistologická analýza vírusových injekcií AAV-1 "FosB a AAV-GFP

Segmenty mozgu z každého zvieraťa použité v behaviorálnych experimentoch boli sériovo analyzované v koronálnej rovine pre anatomické umiestnenie vírusovej injekcie. Celkový počet zvierat 12 bol analyzovaný pre ich bilaterálnu expresiu "FosB počítaním počtu buniek a umiestnením injekcie, ktorá bola určená sledovaním zostávajúcich dráh ihly. Hoci sa injekčné umiestnenie analyzovalo v koronálnej časti (Obrázok 1), proteínová expresia sa rozšírila v ústí injekčného miesta v ústnej a kaludovej elipse a tiež sa rozšírila v oblasti dorzálnej a ventrálnej elipsy z miesta vpichu. Z piatich zvierat analyzovaných zo skupiny 2 bolo 70.5% buniek nadmernej expresie v NAc (medián = 16,864 bunky, dolný kvartil = 7,551 bunky, horný kvartil = 20,002 bunky, interkvartilný rozsah = 12,451). Sedem zvierat analyzovaných zo skupiny 4 preukázalo 65.6% vírusovú nadmernú expresiu v NAc (stredná = 9,972 bunky, dolný kvartil = 5,683 bunky, horný kvartil = 11,213 bunky, interkvartilný rozsah = 5530.). Tento počet buniek predstavuje skôr vírusovú nadmernú expresiu ako endogénne farbenie v dôsledku účelného zriedenia primárnej protilátky.

Obrázok 1    

Hladiny expresie proteínov sprostredkované AAV-GFP alebo AAV-1 "FosB 12 wks po injekcii. Top. Nadmerná expresia GFP bola väčšinou jadrová, ale tiež sa zistilo, že sa šíri do cytoplazmy a dendritov buniek. Dno. Î "FosB proteínová expresia napodobená ...

Z bilaterálnych miest vpichu 24 bolo dvanásť v rastrálnom jadre NAc, z ktorých šesť malo vírusovú expresiu, ktorá sa kaviarne rozšírila do BNST. Zostávajúcich dvanásť miest vpichu bolo v caudálnej NAc. Jedna z dvanástich injekcií bola v kaudálnej škrupine a rozširovala sa do BNST. Posledných jedenásť miest vpichu bolo všetko v kaudálnom jadre NAc, z ktorých osem sa kaludovo šírilo do BNST. Všetky injekcie boli sústredené okolo prednej komory s výnimkou jednej injekcie v kaudálnom plášti NAc, ktorá bola o niečo viac mediálna ako predná komisařka (Obrázok 2). Všetky zvieratá vykazovali primeranú nadmernú expresiu buď GFP alebo I "FosB a preto sa použili v následnej behaviorálnej analýze. Zo štúdie neboli vylúčené žiadne zvieratá z dôvodu zlého umiestnenia anatomickej injekcie. Ďalej, pretože všetky injekcie boli zamerané na akumulačné jadro a iba jedna injekcia obsahovala škrupinu, na mieste injekcie sa nevykonala štatistická analýza.

Obrázok 2    

Anatomická lokalizácia umiestnení vírusových injekcií experimentálnych zvierat. Kruhy predstavujú umiestnenie AAV-GFP a štvorčeky predstavujú umiestnenie AAV-Î "FosB. a. AAV-GFP injekčné umiestnenie pre zvieratá s 5 wks sexuálne kondicionovanie (skupina 1). ...

AAV vektorová nadmerná expresia ß "FosB v NAc samíc sýrskych škrečkov má za následok zvýšenú sexuálnu odmenu

Ak chceme posúdiť, či nadmerná expresia ß "FosB v NAc mala vplyv na sexuálnu odmenu, použili sme paradigmu predpísaného kontinentu. Pri tomto teste sa zvieratá podrobujú buď týždňom sexuálnej kondície 0, 2 alebo 5. Počas sexuálnej kondízie bola latentná lordóza a trvanie zaznamenané pre každú škrečkovú samicu. Žiadna latencia lordózy (skupina 1: 553 sekúnd ± 7 sek, skupina 4: 552 sekúnd ± 7 sec, skupina 5: 561 sekúnd ± 7 sec), ani trvanie lordózy (skupina 1: 485 sec ± 15 sek, skupina 4: 522 sek. ± 10 sek., Skupina 5: 522 sek. ± 12 sek.) Počas sexuálnej kondície sa v priebehu testovania výrazne líšil medzi skupinami bez ohľadu na vírusovú injekciu. Z toho dôvodu ani nadmerná expresia GFP, ani Î "FosB nemala žiadny vplyv na receptívne správanie žien.

Každá skupina z kondície preferenčného miesta sa analyzovala individuálne opakovaným meraním t-testu medzi časom stráveným v kondicionačnom priestore (šedý oddiel) počas predbežného testu a po testovaní. Štatistická analýza nebola rozšírená medzi skupiny. Predchádzajúci výskum ukázal, že päť podmienených sexuálnych skúseností postačuje na odhalenie významných zmien preferencie miesta (Meisel a Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Pozitívna kontrolná skupina pozostávajúca zo samíc zvierat, ktoré nadmerne exprimujú GFP v NAc, ktoré dostali päť kondičných sexuálnych skúseností, strávila počas posttestu výrazne viac času v šedej komore spárovanej so sexuálnym zážitkom v porovnaní s výkonom predkondicionovania, t (8 ) = â'3.13, P<0.05. Ako sa očakávalo, zvieratá, ktoré nedostali nijaké kondičné sexuálne zážitky, významne nezmenili čas v ktorejkoľvek komore bez ohľadu na vírusovú injekciu. Ženy nadmerne exprimujúce GFP, ktoré dostali 2 kondicionačné sexuálne skúsenosti, nepreukázali kondicionovanie miesta, zatiaľ čo ženy, ktoré dostali dve kondicionálne sexuálne skúsenosti s nadmernou expresiou ΔFosB, strávili počas tohto post testu podstatne viac času v komore spárovanej so sexuálnymi skúsenosťami, t (7) = −2.48, P <0.05 (Obrázok 3).

Obrázok 3    

Podmienečné miesto preferencie po virálnej injekcii. Tento graf zobrazuje priemerný počet (± SEM) sekúnd počas testu predbežnej kondicionácie (Pre) a postkondičného testu (Post), že každá skupina škrečkov strávila v šedej priehradke. ...

AAV vektorová nadmerná expresia ß "FosB v NAc samíc sýrskych škrečkov zlepšuje ich kopulačnú účinnosť u mužov naiv

Jeden týždeň po skončení kondície podmieneného miesta po skončení testu boli ženy s 2 týždňami testov sexuálnej kondície (Skupiny 4 a 5) podrobené testu mužského sexuálneho správania. V tomto teste ženy AAV-F "FosB s testami 2 predchádzajúcej sexuálnej skúsenosti výrazne zlepšili svoju účinnosť kopulácie viac ako ženy AAV-GFP s 2 predchádzajúcimi sexuálnymi skúsenosťamiObrázok 4). Miera úspešnosti (podiel celkových prírastkov, ktoré zahŕňali intromisiu) sexuálne naivných mužov, ktorí boli spárovaní so ženami AAV-ΔFosB, bola významne vyššia ako miera úspešnosti naivných mužov spárovaných so ženami AAV-GFP, t (14) = 4.089 p <0.005.

Obrázok 4    

Účinnosť kopulácie naivných partnerov mužských škrečkov. Tento graf zobrazuje priemerný (± SEM) miera úspešnosti (podiel celkového úbytku, ktorý zahŕňal intromisiu) naivných samcov škrečkov, ktoré boli spárované buď s AAV-GFP ženami ...
Prejsť na:

Diskusia

Predchádzajúce pokusy, ktoré využívali AAV vektory na nadmernú expresiu ΔFosB, sa uskutočňovali buď v krysích alebo myšacích modelových systémoch (Wallace et al., 2008, Winstanley et al., 2007, ZACHARIE et al., 2006). V imunokistochemickom farbení sme validovali vzorky vírusovej expresie v mozgu škrečkov. Táto analýza preukázala účinnú expresiu ΔFosB, ktorá sa objavila hneď ako 3 týždne po intrakraniálnej injekcii a zostala zvýšená v týždňoch 9 v našej analýze časového priebehu a až do 12 týždňov v behaviorálnych experimentoch.

V našom modeli sexuálnych skúseností opakované kopulačné interakcie mužského pohlavia vedú k senzibilizácii uvoľňovania dopamínu v NAc (Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997), ktorá má posilňujúce dôsledky v paradigme preferenčného prostrediam (Meisel a Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Táto senzibilizácia dopamínu, rovnako ako schopnosť samíc škrečkov regulovať úspešnú intromizáciu u muža, ktorý sa namontuje v dôsledku opakovaných sexuálnych stretnutí, demonštruje asociačnú odpoveď (Bradley et al., 2005b). Ukázali sme, že toto posilnené sexuálne správanie môže byť zvýšené nadmernou expresiou ΔFosB v NAc v kontexte sexuálnej skúsenosti pod prahom, podobne ako zvýšenie nástrojových odpovedí na kokaín, morfín alebo spotrebu potravín po podobnej nadmernej expresii ΔFosBColby et al., 2003, Olausson et al., 2006, ZACHARIE et al., 2006). Toto zvýšenie sexuálnych interakcií s mužom po sexuálnej skúsenosti sa odzrkadlilo nadobudnutím predpísanej preferencie miesta. jat je rozumné považovať ΔFosB ako fungujúci ako transkripčný spoj, ktorý sprostredkováva dlhodobé modifikácie správania, ako aj základnú neuronálnu plasticitu následkom aktivácie downstreamových cieľov ΔFosB.

Vzhľadom na to, že zvýšenie hodnoty ΔFosB vyvoláva tieto účinky, mali by sa zvážiť základné mechanizmy. Existuje len veľmi málo zistených molekulárnych dôsledkov, ktoré vyplývajú z akumulácie ΔFosB. MŠtúdie s mikroskopom u myší s nadmernou expresiou ΔFosB naznačili zvýšenie serín / treonín-dependentnej kinázy-5 (Cdk5), nukleárneho faktora kappa B (NF-κB), podjednotky GluR2 receptora glutamátu a dynorfínu (Ang et al., 2001, Bibb, 2003). Nie je jasné, ako tieto molekulárne udalosti môžu ovplyvňovať plasticitu a dendritickú formu chrbtice, hoci Cdk5 má známu úlohu pri zvyšovaní dendritickej hustoty chrbtice (Bibb, 2003, Cheung et al., 2006, Kumar et al., 2005, Norrholm et al., 2003) a podjednotiek GluR2 alebo NF-kB sa podieľali na synaptickej (Ang et al., 2001, Nestler, 2001, Peakman et al., 2003). V budúcich štúdiách plánujeme sústrediť sa na tieto a ďalšie potenciálne nadradené transkripčné ciele ΔFosB, aby sme zistili, ako ich činnosť kolíše s akumuláciou ΔFosB po opakovanom sexuálnom správaní.

Existuje rozsiahla literatúra postulujúca odlišné úlohy, ktoré shell a jadro NAc hrajú v motivovanom správaní (Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Perrotti et al., 2008, Pierce a Kalivas, 1995). Predchádzajúce výskumy v našej laboratórii konzistentne zistili bunkové účinky sexuálnych skúseností na jadreBradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley a Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert a Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993), ktoré tvoria základ pre naše zameranie na jadro NAc v tejto štúdii. Naša analýza anatomického rozsahu nadmernej expresie ΔFosB naznačila, že aj keď injekcie boli skutočne cielené na kaudálne jadro NAc, expresia ΔFosB sa často rozšírila kaudálne do rostrálneho BNST. Hoci caudálne NAc a rostral BNST sú určite anatomicky odlišné jadrá, nie sú nevyhnutne funkčne odlišné, pretože obe oblasti modulujú mnohé z mechanických prvkov, ktoré sú kľúčom k motivačným procesom (napr. Koob a kol., 2004). V našich mikrodialýzových štúdiách samíc škrečkov (Kohlert et al., 1997) sme zaznamenali neschopnosť rozlíšiť umiestnenie rastrálnych BNST sond od tých, ktoré sú v caudálnom NAc, pokiaľ ide o hladiny bazálneho dopamínu, dopamínové odpovede na sexuálne interakcie s mužmi alebo vzory dopamínergnej aferentnej inervácie. Namiesto sledovania šírenia infekcie do BNST ako metodologicky problematických, tieto výsledky podporujú myšlienku funkčného kontinua medzi NAc a BNST.

Aj keď sme preukázali, že nadmerná expresia ΔFosB u samíc škrečkov je dostatočný na vytvorenie kondicionovaného miesta preferencie sexuálnej odpovede a na zvýšenie kopulačných interakcií s mužmi, zostáva neznáme, či je expresia ΔFosB tiež nevyhnutný pre tieto správanie dôsledky sexuálnej skúsenosti, Nedávne štúdie využili vírus AAV-ΔJunD, ktorý znižuje transkripciu sprostredkovanú pomocou IFFosB kompetitívnou heterodimerizáciou sDFosB pred väzbou AP-1 oblasti na gény (Winstanley et al., 2007). Použitím transkripcie sprostredkovanej AAV-ΔJunD na znižujúcu sa schopnosť DFosB dúfame, že určime, či sa pre behaviorálnu plasticitu, ktorú sme pozorovali po skúsenosti so sexuálnym správaním, požaduje ΔFosB, čo doplní výsledky tu prezentovanej štúdie. Ak akumulácia ΔFosB a jeho následná aktivácia následných cieľov spôsobujú tak behaviorálnu, ako aj bunkovú plasticitu, potom by zrušenie týchto účinkov malo zrušiť deaktiváciu ΔFosB.

Prejsť na:

Poďakovanie

Radi by sme poďakovali Amande Mullinsovej, Melissii McCurleyovej a Chelseovej Bakerovej za pomoc pri testovaní správania, kondicionovaní a spracovaní tkanív. Táto práca bola podporená grantmi NIH DA13680 (RLM) a MH51399 (EJN).

Prejsť na:

Referencie

  • Allen PB, Zachariou V, Svenningsson P, Lepore AC, Centonze D, Costa C, Rossi S, Bender G, Chen G, Feng J, Snyder GL, Bernardi G, Nestler EJ, Yan Z, Calabresi P, Greengard P. Distinct roles pre spinofilín a neurabín v dopamínom sprostredkovanej plasticite. Neuroscience. 2006;140: 897-911. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holand J, Schaeffer E, Nestler EJ. Indukcia nukleárneho faktora-kappaB v nucleus accumbens chronickým podávaním kokaínu. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Becker JB, Rudick CN, Jenkins WJ. Úloha dopamínu v nucleus accumbens a striatum počas sexuálneho správania u samíc potkanov. J Neurosci. 2001;21: 3236-3241. [PubMed]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Indukcia deltaFosB v periaqueduktálnej šedosti stresom podporuje aktívne reakcie na zvládnutie. Neurón. 2007;55: 289-300. [PubMed]
  • Bibb JA. Úloha Cdk5 pri signalizácii neurónov, plasticity a zneužívaní drog. Neurosignals. 2003;12: 191-199. [PubMed]
  • Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, Mermelstein PG. Zmeny v expresii génov v nucleus accumbens a striatum po sexuálnej skúsenosti. Gény Brain Behav. 2005;4: 31-44. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopamínové lézie u samíc škrečkov (Mesocricetus auratus) odstraňujú senzibilizované účinky sexuálnych skúseností na kopulačné interakcie s mužmi. Behav Neurosci. 2005b;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Indukcia sexuálneho správania c-Fos v nucleus accumbens a amfetamínom stimulovaná lokomotorická aktivita sú senzibilizované predchádzajúcimi sexuálnymi skúsenosťami u samirových škrečkov. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Bradley KC, Mullins AJ, Meisel RL, Watts VJ. Sexuálne skúsenosti menia produkciu cyklického AMP sprostredkovanú receptorom D1 v nucleus accumbens samíc syrských škrečkov. Synapsie. 2004;53: 20-27. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. Expresia c-Fos a deltaFosB sa diferencovane mení v rôznych subregiónoch škrupiny nucleus accumbens u potkanov senzibilizovaných na kokaín. Neuroscience. 2006;137: 773-780. [PubMed]
  • Cadoni C, Di Chiara G. Recipročné zmeny dopamínovej reakcie v jadrovej štruktúre jadra a jadra a v chrbtovej kaudate-putamen u potkanov senzibilizovaných na morfín. Neuroscience. 1999;90: 447-455. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mechanizmy závislé na proteazóme a nezávislé na destabilizácii FosB: identifikácia FosB degron domén a dôsledky pre stabilitu DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chamberlin NL, Du B, de Lacalle S, Saper CB. Rekombinantný adeno-asociovaný vírusový vektor: použitie na expresiu transgénu a sledovanie anterográdneho traktu v CNS. Brain Res. 1998;793: 169-175. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Antigény súvisiace s chronickým Fos: stabilné varianty deltaFosB indukované v mozgu pomocou chronickej liečby. J Neurosci. 1997;17: 4933-4941. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulácia proteínov delta FosB a FosB podobných elektrokonvulzívnym záchvatom a kokaínom. Mol Pharmacol. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Cheung ZH, Fu AK, Ip NY. Synaptické úlohy Cdk5: dôsledky v vyšších kognitívnych funkciách a neurodegeneratívnych ochoreniach. Neurón. 2006;50: 13-18. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Nadmerná expresia DeltaFosB špecifického pre špecifický typ buniek zvyšuje motiváciu kokaínu. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Di Chiara G, Tanda G, Cadoni C, Acquas E, Bassareo V, Carboni E. Homológie a rozdiely v účinkoch drog a zneužívania a konvenčné posilňovače (potraviny) na prenos dopamínu: interpretačný rámec mechanizmu drogovej závislosti. Adv. Pharmacol. 1998;42: 983-987. [PubMed]
  • Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS. Chronické zmeny dopaminergnej neurotransmisie spôsobujú pretrvávajúce zvýšenie proteínu (proteínov) podobného deltaFosB tak v hlodavcovi, ako aj v striate z primátov. Eur J Neurosci. 1996;8: 365-381. [PubMed]
  • Harris GC, Hummel M, Wimmer M, Mague SD, Aston-Jones G. Zvýšenie FosB v nucleus accumbens počas abstinencie núteným kokaínom koreluje s rozdielnymi zmenami odmeňovania. Neuroscience. 2007;147: 583-591. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulácia okamžitej včasnej expresie génov a väzby AP-1 v krysách nucleus accumbens chronickým kokaínom. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia dlhodobého AP-1 komplexu pozostávajúceho z pozmenených proteínov typu Fos v mozgu chronickým kokaínom a inými chronickými liečeniami. Neurón. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Expresia transkripčného faktora deltaFosB v mozgu riadi citlivosť na kokaín. Príroda. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Kohlert JG, Meisel RL. Sexuálna skúsenosť senzibilizuje reakcie jadrových a adumbensových dopamínov, ktoré súvisia s párením samíc syrských škrečkov. Behav Brain Res. 1999;99: 45-52. [PubMed]
  • Kohlert JG, Rowe RK, Meisel RL. Intromissívna stimulácia muža zvyšuje extracelulárne uvoľňovanie dopamínu z neurónov identifikovaných z fluoro-zlata v strednom mozgu samíc škrečkov. Horm Behav. 1997;32: 143-154. [PubMed]
  • Koob GF, Ahmed SH, Boutrel B, Chen SA, Kenny PJ, Markou A, O'Dell LE, Parsons LH, Sanna PP. Neurobiologické mechanizmy v prechode od užívania drog k drogovej závislosti. Neuroscience a Biobehavioral Reviews. 2004;27: 739-749. [PubMed]
  • Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatínová remodelácia je kľúčovým mechanizmom, ktorý je základom plasticity indukovanej kokaínom v striate. Neurón. 2005;48: 303-314. [PubMed]
  • Lee KW, Kim Y, Kim Am, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaínom indukovaná tvorba dendritickej chrbtice v D1 a D2 dopamínových receptoroch obsahujúcich stredné špinavé neuróny v nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103: 3399-3404. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Li Y, Kolb B, Robinson TE. Umiestnenie pretrvávajúcich amfetamínom indukovaných zmien v hustote dendritických tŕňov na stredne štipľavých neurónoch v nucleus accumbens a caudate-putamen. Neuropsychopharmacology. 2003;28: 1082-1085. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulácia génovej expresie a odmeňovania kokaínom CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Neuroplasticita sprostredkovaná zmenenou expresiou génov. Neuropsychopharmacology. 2008;33: 3-17. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulárny prepínač pre dlhodobú adaptáciu v mozgu. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • McDaid J., Graham MP, Napier TC. Metamfetamínom indukovaná senzibilizácia odlišne mení pCREB a DeltaFosB v celom limbickom okruhu cicavčieho mozgu. Mol Pharmacol. 2006;70: 2064-2074. [PubMed]
  • Meisel RL, Camp DM, Robinson TE. Štúdia mikrodialýzy ventrálneho striatálneho dopamínu počas sexuálneho správania sa samirových škrečkov. Behav Brain Res. 1993;55: 151-157. [PubMed]
  • Meisel RL, Joppa MA. Podmienečné preferencie miesta u škrečkov po agresívnych alebo sexuálnych stretnutiach. Physiol Behav. 1994;56: 1115-1118. [PubMed]
  • Meisel RL, Joppa MA, Rowe RK. Antagonisty dopamínového receptora zmierňujú preferenciu na mieste po sexuálnom správaní u samičiek škrečkov. Eur J Pharmacol. 1996;309: 21-24. [PubMed]
  • Meisel RL, Mullins AJ. Sexuálne skúsenosti s hlodavcami: bunkové mechanizmy a funkčné dôsledky. Brain Res. 2006;1126: 56-65. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Mermelstein PG, Becker JB. Zvýšený extracelulárny dopamín v nucleus accumbens a striatum samice potkanov počas stimulovaného kopulatívneho správania. Behav Neurosci. 1995;109: 354-365. [PubMed]
  • Mumberg D, Lucibello FC, Schuermann M, Muller R. Alternatívne zostrihnutie fosB transkriptov vedie k diferenciálne exprimovaným mRNA kódujúcim funkčne antagonistické proteíny. Genes Dev. 1991;5: 1212-1223. [PubMed]
  • Nakabeppu Y, Nathans D. Prirodzene sa vyskytujúca skrátená forma FosB, ktorá inhibuje transkripčnú aktivitu Fos / Jun. Bunka. 1991;64: 751-759. [PubMed]
  • Nestler EJ. Molekulárny základ dlhodobej plasticity založenej na závislosti. Nat Rev Neurosci. 2001;2: 119-128. [PubMed]
  • Nestler EJ. Transkripčné mechanizmy závislosti: úloha deltaFosB. Philos Trans R Soc. London B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Kokaínom indukovaná proliferácia dendritických tŕňov v nucleus accumbens závisí od aktivity cyklín-dependentnej kinázy-5. Neuroscience. 2003;116: 19-22. [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologické štúdie regulácie chronickej indukcie antigénu súvisiacej s FOS kokaínom v striate a nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Oades RD, Halliday GM. Ventrálny tegmentálny systém (A10): neurobiológia. 1. Anatómia a konektivita. Brain Res. 1987;434(2): 117-165. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB v nucleus accumbens reguluje inštrumentálne správanie a motiváciu posilňovanú potravinami. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Indukovateľná expresia dominantného negatívneho mutantu c-Jun v transgénnych myšiach špecifických pre mozgovú oblasť znižuje citlivosť na kokaín. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Výrazné vzory indukcie DeltaFosB v mozgu drogami zneužívania. Synapsie. 2008;62: 358-369. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Pfaus JG, Damsma G, Wenkstern D, Fibiger HC. Sexuálna aktivita zvyšuje prenos dopamínu v nucleus accumbens a striatum samíc potkanov. Brain Res. 1995;693: 21-30. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Amfetamín produkuje prednostne zvýšenú pohyblivosť a extracelulárny dopamín v jadrovej škrupine krysích potkanov, ktorým sa podával opakovaný kokaín. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1019-1029. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Obvodový model vyjadrenia senzibilizácie správania na psychostimulanty podobné amfetamínu. Brain Res Brain Res Rev. 1997;25: 192-216. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Opakovaný kokaín upravuje mechanizmus, ktorým amfetamín uvoľňuje dopamín. J Neurosci. 1997b;17: 3254-3261. [PubMed]
  • Pierce RC, Kumaresan V. Mesolimbický dopamínový systém: konečná spoločná cesta posilňujúceho účinku liekov zneužívania? Neurosci Biobehav Rev. 2006;30: 215-238. [PubMed]
  • Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Samokanalácia kokaínu mení morfológiu dendritov a dendritických tŕňov v nucleus accumbens a neocortex. Synapsie. 2001;39: 257-266. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Perzistentné štrukturálne modifikácie v nucleus accumbens a neurónoch prefrontálneho kôra produkované predchádzajúcimi skúsenosťami s amfetamínom. J Neurosci. 1997;17: 8491-8497. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Zmeny v morfológii dendritov a dendritických tŕňov v nucleus accumbens a prefrontálnej kôre po opakovanej liečbe amfetamínom alebo kokaínom. Eur J Neurosci. 1999;11: 1598-1604. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Morphine mení štruktúru neurónov v nucleus accumbens a neocortex potkanov. Synapsie. 1999b;33: 160-162. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Štruktúrna plasticita spojená s expozíciou drog. Neuropharmacology. 2004;47(Suppl 1): 33-46. [PubMed]
  • Tzschentke TM. Meranie odmeny s predpísanou koncepciou preferovaných miest: komplexná revízia účinkov liekov, nedávny pokrok a nové problémy. Prog Neurobiol. 1998;56: 613-672. [PubMed]
  • Ulery PG, Nestler EJ. Regulácia transkripčnej aktivity DeltaFosB fosforyláciou Ser27. Eur J Neurosci. 2007;25: 224-230. [PubMed]
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulácia stability DeltaFosB fosforyláciou. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Vplyv DeltaFosB v nucleus accumbens na prirodzené odmeňovanie. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reguluje chod motocyklov. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcia DeltaFosB v orbitofronálnej kôre sprostredkováva toleranciu k kokaínom indukovanej kognitívnej dysfunkcii. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Wolf ME, Sun X, Mangiavacchi S, Chao SZ. Psychomotorické stimulátory a neuronálna plasticita. Neuropharmacology. 2004;47(Suppl 1): 61-79. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Podstatná úloha DeltaFosB v nucleus accumbens pri morfínových akciách. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]