Journal of Neuroscience, 6 September 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4a Jane R. Taylor1
1.Korešpondencia by mala byť adresovaná Jane R. Taylorovi, Katedre psychiatrie, Divízii molekulárnej psychiatrie, Lekárskej fakulte Univerzity Yale, Výskumným zariadeniam Ribicoff, Centrum duševného zdravia Connecticut, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[chránené e-mailom]
abstraktné
Zmeny v motivácii sa podieľajú na patofyziológii niekoľkých psychiatrických porúch, vrátane zneužívania návykových látok a depresie. Je známe, že opakovaná expozícia drogám zneužívania alebo stresu trvalo indukuje transkripčný faktor AFosB v nucleus accumbens (NAc) a dorzálnom striate, účinky predpokladané ako príspevok k neuroadaptáciám v signalizácii regulovanej dopamínom. Je však málo známe o špecifickej účasti AFosB pri dysregulácii chutne motivovaného správania. Ukázali sme tu, že indukovateľná nadmerná expresia AFosB v NAc a dorzálnom striatum bitransgénnych myší, alebo špecificky v NAc jadre potkanov použitím vírusom sprostredkovaného prenosu génov, zlepšila inštrumentálny výkon posilnený potravou a progresívny pomer odpovedí. Veľmi podobné účinky na správanie sa zistili po predchádzajúcej opakovanej expozícii kokaínu, amfetamínu, MDMA [(+) - 3,4-metyléndioxymetamfetamínu] alebo nikotínu u potkanov. Tieto výsledky ukazujú silnú reguláciu motivačných procesov pomocou AFosB a poskytujú dôkazy, že zmeny v génovej expresii indukované liečivom prostredníctvom indukcie AFosB v jadre NAc môžu hrať rozhodujúcu úlohu pri vplyve motivačných vplyvov na inštrumentálne správanie.
úvod
Opakovaná expozícia lieku spôsobuje časovo dynamické zmeny v transkripcii génu, ktoré produkujú trvalé neuroadaptácie v jadre accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Táto mozgová oblasť hrá rozhodujúcu úlohu v procesoch posilňovania drog a prírodnýchKelley a Berridge, 2002), aj keď je málo známe o transkripčných faktoroch, ktoré majú vplyv na správanie motivované nondrug, apetitívne zosilňovače, ako sú potraviny. AFosB je transkripčný faktor aktivovaný v NAc a dorzálnom striate pri chronickej expozícii lieku (Konradi a kol., 1994; Nye a kol., 1995; Chen a kol., 1997; Pich a kol., 1997; Shaw-Lutchman a kol., 2003) a kompulzívny chod kolesa (Werme a spol., 2002). V týchto oblastiach sa tiež indukuje niekoľkými formami chronického stresu (Perrotti a kol., 2004). Zlepšenie procesov zosilnenia liečiva spojených s indukciou striatálneho AFosB je dobre zavedené (Kelz a kol., 1999; Colby a kol., 2003; Zachariou a kol., 2006). Dôsledky zvýšených hladín AFosB v týchto oblastiach na inštrumentálne správanie motivované prirodzenými zosilňovačmi však nie sú známe.
Výkon inštrumentálnych reakcií je nevyhnutnou zložkou správania užívania drog, ktoré sa môže stať dysregulovaným alebo nepružným, keď prechod na závislosť postupuje (Jentsch a Taylor, 1999; Berke a Hyman, 2000; Berridge a Robinson, 2003; Everitt a Robbins, 2005). NAc je zapojený do viacerých aspektov inštrumentálneho správania s významom pre závislosť (Balleine a Killcross, 1994; Corbit a kol., 2001; de Borchgrave a kol., 2002; Di Ciano a Everitt, 2004b; Everitt a Robbins, 2005). Je preto pravdepodobné, že neuroadaptácie vyvolané liekmi v rámci NAc by mohli ovplyvniť výkon inštrumentálnych činností. Chronická expozícia kokaínu skutočne zvyšuje inštrumentálnu výkonnosť posilnenú sacharózou (Miles a kol., 2004) a manipulácie, o ktorých sa predpokladá, že blokujú neuroplasticitu v jadre NAc, vrátane inhibície PKA (proteínkinázy A) alebo syntézy proteínov, interferujú s inštrumentálnymi odpoveďami odmenenými od potravín (Baldwin a kol., 2002a; Hernandez a kol., 2002). Jadro NAc tiež sprostredkúva motivačný vplyv podmienených vplyvov na inštrumentálne správanie (Parkinson a kol., 1999; Corbit a kol., 2001; Hall a kol., 2001; Di Ciano a Everitt, 2004a; Ito a kol., 2004) poskytuje neurobiologický substrát, pričom indukcia AFosB by mohla silne ovplyvniť inštrumentálny výkon a motiváciu pre chuťové zosilňovače, ako sú potraviny, voda alebo lieky na zneužívanie.
Tu sme skúmali účinky AFosB na potravinovo motivované inštrumentálne správanie pomocou dvoch komplementárnych genetických prístupov: (1) indukovateľná nadmerná expresia AFosB v NAc a dorzálnom striatum bitransgénnych myší (NSE-tTA × TetOp-AFosB) a (2) nadmerná expresia FosB v jadre NAc špecificky použitím prenosu vírusom sprostredkovaného génu u potkanov. Tiež sme hodnotili, či predchádzajúce opakované vystavenie kokaínu, amfetamínu, (+) - 3,4-metyléndioxymetamfetamínu (MDMA) alebo nikotínu za podmienok, o ktorých sa uvádza, že zvyšujú AFosB, by posilnilo inštrumentálnu reakciu posilnenú potravou a / alebo motiváciu pomocou progresívneho pomeru pomerov, ako sa ukázalo v prípade samokonzervácie posilnenej drogami (Horger a kol., 1990, 1992; Piazza a kol., 1990; Vezina a kol., 2002; Miles a kol., 2004). Naše výsledky demonštrujú pretrvávajúce účinky AFosB na inštrumentálne správanie a naznačujú, že tento transkripčný faktor môže pôsobiť v NAc jadre ako regulátor motivačnej funkcie.
Materiály a metódy
Zvieratá a starostlivosť o zvieratá
Experimentálne naivné potkany Sprague Dawley boli získané od Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Mužské bitransgénne myši 11A boli odvodené z kríženia medzi homozygotnými transgénnymi myšami exprimujúcimi neurón-špecifickú enolázu (NSE) -tTA tetracyklínový transaktivátorový proteín (línia A) a myši exprimujúce TetOp (promótor reagujúci na tetracyklín) -FosB (línia 11); rodičovské línie boli udržiavané na prekríženom zmiešanom pozadí (50% ICR a 50% C57BL6 × SJL) (Chen a kol., 1998; Kelz a kol., 1999). Tieto bitransgénne myši 11A exprimujú AFosB len vtedy, keď: (1) sú oba transgény prítomné v rovnakej bunke a (2) transkripčná aktivácia tTA nie je inhibovaná prítomnosťou tetracyklínových antibiotík, ako je doxycyklín. Podávanie doxycyklínu týmto myšiam tak môže vykonávať časovú kontrolu nad expresiou AFosB a môže byť použité na prevenciu expresie počas vývoja; podanie doxycyklínu je spojené so žiadnou detekovateľnou expresiou úniku AFosB (Chen a kol., 1998; Kelz a kol., 1999). Okrem toho bola pre tieto experimenty vybraná línia bitransgénnych myší 11A, pretože vykazujú profil expresie, ktorý je primárne obmedzený na striatálne neuróny obsahujúce dynorfín (ako NAc, tak dorzálne striatum), veľmi podobný vzoru indukcie AFosB chronickým liečivom. expozície (\ tKelz a kol., 1999). Okrem toho kvantifikácia tejto striatálnej expresie AFosB bola kvantifikovaná predtým (Chen a kol., 1998; Kelz a kol., 1999). Myši boli generované na University of Texas Southwestern a udržiavané a testované v zariadeniach Yale. V priebehu gravidity a vývoja boli všetky myši udržiavané na doxycyklíne až do veku 8-9 v dávkach 100 μg / ml v pitnej vode, čo je stav, o ktorom je známe, že udržujú transgény riadené TetOp v stave „vypnuté“ a používajú počiatočný liek 6. týždne mimo doxycyklínu, keď sa expresia AFosB stane maximálnou (Kelz a kol., 1999). Všetky experimenty zahŕňali porovnanie bitransgénnych myší v porovnaní s doxycyklínom, ktorý sám o sebe nemá žiadny vplyv na motivované správanie (Kelz a kol., 1999; McClung a Nestler, 2003; Zachariou a kol., 2006).
Všetky experimentálne subjekty boli chované v pároch (potkany) alebo v skupinách (myši, štyri až päť na klietku) v kontrolovaných teplotných a vlhkostných podmienkach v cykle 12 h svetlo / tma (svetlo na 7: 00 AM a vypnuté na 7: 00 POPOLUDNIE). Pred akoukoľvek štúdiou im bolo umožnené aspoň 7 d prispôsobiť sa ubytovacím zariadeniam. Zvieratá mali neustále prístup k vode a obmedzený prístup k potravinám, ako je podrobne uvedené nižšie. Všetky zvieratá boli použité v súlade s National Institutes of Health Guide pre starostlivosť a používanie laboratórnych zvierat a bol schválený výbormi pre starostlivosť o zvieratá a využívanie zvierat na University of Texas Southwestern a Yale University.
Drogy
Hydrochlorid kokaínu [láskavo poskytol Národný inštitút pre zneužívanie drog (NIDA)], sulfát d-amfetamínu (Sigma, St. Louis, MO), hydrochlorid MDMA (láskavo poskytnutý NIDA) a hydrogén-vínan (-) - nikotín (Sigma ) sa rozpustili v sterilnom fyziologickom roztoku (0.9%) a intraperitoneálne sa injikovali v objeme 5 ml / kg (myši) alebo 2 ml / kg (potkany). PH roztoku nikotínu sa upravilo pomocou hydrogenuhličitanu sodného pred injekciou.
Vírusové vektory
Vírusom sprostredkovaný prenos génov bol uskutočňovaný ako bolo opísané vyššie (Carlezon a kol., 1998; Perrotti a kol., 2004). Stručne povedané, cDNA kódujúce špecifické proteíny boli vložené do amplikónu HSV-PrPUC vírusu herpes simplex (HSV) a zabalené do vírusu pomocou pomocného 5dl1.2. Vektory riadiace expresiu buď HSV-LacZ, kódujúce kontrolný proteín β-galaktozidázu, alebo HSV-AFosB, kódujúce AFosB, boli následne podané do NAc jadra podľa experimentálneho protokolu.
experimentálny postup
Obrys.
Experiment 1 skúmal účinky predchádzajúceho opakovaného vystavenia účinkom lieku na prístrojovú výkonnosť posilnenú potravinami a reagujúcu na progresívny pomer. Potkany boli náhodne rozdelené do piatich experimentálnych skupín (n = 9 – 10 / skupina). Tieto skupiny dostávali injekcie dvakrát denne (intraperitoneálne; pri 9: 00 AM a 5: 00 PM) so soľankou alebo jedným z nasledujúcich liekov: nikotín, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokaín, 15 mg / kg; alebo amfetamín, 2.5 mg / kg pre 15 po sebe idúce dni. Dávky boli vybrané na základe našich predtým publikovaných údajov (Taylor a Jentsch, 2001; Olausson a kol., 2003), a liečebne indukovaná lokomotorická stimulácia bola monitorovaná v dňoch liečby 1 a 15. Po odobratí 5 d boli zvieratá trénované na inštrumentálnu odpoveď na 10 po sebe idúce dni a následne testované na progresívny pomer odpovedajúci na nasledujúci deň. Dve zvieratá boli zo štatistickej analýzy vylúčené, pretože nezískali inštrumentálnu odozvu, takže na každej z troch záverečných tréningov neboli žiadne reakcie aktívnej páky.
Experimenty 2 a 3 skúmali účinky indukovateľnej striatálnej nadmernej expresie AFosB u bitransgénnych myší na prístrojový výkon a reagovali na progresívny pomer zosilnenia. Indukovateľná nadmerná expresia AFosB u týchto myší bola predtým dokázaná, že napodobňuje účinky opakovaného vystavenia účinkom lieku v lokomotorickej aktivite a paradigmách preferencie podmieneného miesta (Kelz a kol., 1999; Zachariou a kol., 2006). Tieto myši môžu poskytnúť kritické informácie o príspevku striatálneho AFosB k špecifickým procesom správania. Samci myší s genotypom sa udržiavali na doxycyklíne alebo sa prepínali na vodu z vodovodu vo veku 8 týždňov. Experimenty boli iniciované po 6 týždňoch vysadenia doxycyklínu, kedy je expresia transgénu maximálna (Kelz a kol., 1999). V experimente 2 boli zvieratá (n = 16) obmedzené na potravu a boli trénované na inštrumentálny postup opísaný nižšie (pozri nižšie, Instrumentálna reakcia a progresívny pomerový test) po 10 po sebe idúce dni. Po ukončení inštrumentálneho testovania bola u týchto myší hodnotená lokomotorická stimulácia vyvolaná kokaínom. V experimente 3 bola oddelená skupina myší (n = 18) trénovaná na inštrumentálnu odozvu pre 10 po sebe idúce dni za podmienok, počas ktorých bolo dodaných maximálne množstvo zosilňovačov 50. V deň 11 boli všetky myši testované na progresívny pomer. V deň 12 sme určili účinky devalvácie posilňovača prefeeding na progresívny pomer odpovedí.
Experimenty 4 a 5 skúmali účinky nadmernej expresie AFosB sprostredkovanej vírusom špecificky v NAc. Experiment 4 testoval účinky nadmernej expresie AFosB na inštrumentálny výkon. Tu boli potkanom infúzne podávané HSV-AFosB (n = 8) alebo HSV-LacZ (n = 8) v jadre NAc a boli trénované na inštrumentálnom postupe začínajúcom neskôr 40 h. Po denných tréningoch 10 boli hodnotené východiskové hladiny aktivity pre všetky zvieratá v zariadení na monitorovanie lokomotorickej aktivity, ako je opísané nižšie (pozri nižšie, lokomotorická aktivita). Experiment 5 vyhodnotil účinky NAc AFosB nadexpresie špecificky na progresívny pomer reagujúci. Tu boli potkany najprv vyškolené na 15 po sebe idúce dni, priradené experimentálnym skupinám a následne infundované HSV-AFosB (n = 8) alebo HSV-LacZ (n = 7) v NAc jadre. Zvieratá sa nechali netestované a neošetrené na 4 d, aby sa umožnila expresia AFosB na vrchole. V deň 5 po infúzii boli všetky zvieratá testované na stlačenie páky na rozvrhu progresívneho pomeru. Po poslednom dni testovania sa všetky potkany usmrtili a umiestnenie infúznych kanyl do NAc jadra sa overilo histochemicky. Na základe umiestnenia infúznych kanyl boli dve krysy vylúčené z experimentu 4 a jedného potkana z experimentu 5.
Charakterizácia génovej expresie sa uskutočnila v oddelenej skupine zvierat. Tu bol HSV-LacZ infúziou do jadra NAc a zvieratá boli neskôr usmrtené 3 d. Expresia p-galaktozidázy bola následne hodnotená imunohistochemicky.
Lokomotorická aktivita.
Lokomotorická aktivita bola meraná s použitím meračov aktivity (Digiscan monitor aktivity zvierat; Omnitech Electronics, Columbus, OH). Merače aktivity boli vybavené dvoma radmi infračervených fotosenzorov, pričom každý rad pozostávajúci z 16 senzorov umiestnených 2.5 cm od seba. Merače aktivity boli kontrolované a údaje z meračov aktivity zhromaždené počítačom PC pomocou softvéru Micropro (Omnitech Electronics).
Pokusné zvieratá sa umiestnili do priehľadných plastových boxov (25 × 45 × 20 cm), ktoré sa vložili do meračov aktivity. Zvieratá sa pôvodne nechali zvyknúť na záznamové zariadenie lokomotorickej aktivity pre 30 min. V niektorých experimentoch boli zvieratá následne odobraté, injekčne podané kokaínom, amfetamínom, nikotínom alebo vehikulom podľa experimentálneho usporiadania a umiestnené späť do boxov. Lokomotorická aktivita sa potom zaznamenala pre 60 min, počnúc 5 min po injekcii liečiva, aby sa zabránilo nešpecifickej injekčne indukovanej hypermotilite. Všetky experimenty sa uskutočňovali počas svetelnej fázy zvierat (medzi 9: 00 AM a 6: 00 PM).
Prístrojová reakcia a testovanie progresívneho pomeru.
Inštrumentálna odpoveď bola hodnotená s použitím štandardných operačných komôr pre potkany (30 × 20 × 25 cm) alebo myší (16 × 14 × 13 cm) kontrolovaných softvérom MedPC (Med Associates, St. Albans, VT). Každá komora bola umiestnená vo vonkajšej komore tlmiacej hluk, vybavenej generátorom bieleho šumu a ventilátorom na zníženie vplyvu vonkajšieho hluku. Komora bola osvetlená domovým svetlom umiestneným na zadnej stene. Zásobník peliet dodal potravinové pelety (20 alebo 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) ako zosilňovač do zásobníka. Hlavové vstupy boli detegované fotobunkou namontovanou nad nádobou na vystuženie. V tomto časopise bolo podnetné svetlo. U potkanov bola jedna páčka umiestnená na každej strane zásobníka. Pre myši boli na zadnú stenu komôrok umiestnené dva otvory na nosné otvory (napr. Oproti zosilňovaciemu zásobníku).
Počas 5 d bezprostredne pred začiatkom tréningu boli zvieratá obmedzené na 90 min prístup k potravinám denne a vystavené potravinám na báze obilia (myši, 20 mg; potkany, 45 mg) v ich domácich klietkach. Počas testovacieho obdobia boli potravinové pelety prerušovane dostupné v operatívnych komorách podľa protokolu správania (pozri nižšie), ako aj v neobmedzených množstvách v domácej klietke pre 90 min, počnúc 30 min po dennom testovaní. Tento plán prístupu k potravinám umožňuje každému jednotlivému zvieraťu dosiahnuť svoj individuálny bod sýtosti a znížiť variabilitu spôsobenú konkurenciou medzi dominantnými a podriadenými zvieratami. V našich rukách tento harmonogram umožňuje pomalý prírastok hmotnosti po počiatočnom úbytku hmotnosti -85 – 90% hmotnosti voľnej potravy. V priebehu pokusu boli sledované hmotnosti zvierat.
Všetci jedinci boli pôvodne zvyknutí na testovacie zariadenie pre 2 d; počas týchto stretnutí boli potravinové pelety dodané do časopisu posilňovača na časovom harmonograme 15 s (FT-15). Začiatkom nasledujúceho dňa dostávali účastníci denné tréningy na 10 po sebe idúce dni. Reakcia na jedlo bola testovaná na základe predtým publikovaných inštrumentálnych procedúr (Baldwin a kol., 2002b). Reakcia na správnu (tj aktívnu) páku / nosepoke bola zosilnená, zatiaľ čo reakcia na inú (neaktívnu) páku / nosepoke nemala žiadne naprogramované následky. Poloha aktívneho špičky hlavy alebo páky (vľavo / vpravo) bola vyvážená pre všetky experimentálne skupiny. Dokončenie požiadavky na odozvu (pozri nižšie) viedlo k nástupu svetelného stimulačného svetla časopisu, po ktorom nasledovala dodávka jednej potravinovej pelety 1. O dve sekundy neskôr bolo svetlo podnetu vypnuté. Prvé zosilňovače 10 boli získané po úspešnom dokončení reakcie podľa plánu fixného pomeru (FR1), po ktorom boli pelety dostupné po odpovedi na rozvrh variabilného pomeru (VR2). Relácia trvala pre 15 min.
Experimenty 3 (myši) a 5 (potkany) používali alternatívne tréningové programy, aby sa zabránilo možnému vplyvu rozdielov v prístrojovom výkone počas tréningu na následnú progresívnu reakciu pomeru (podrobne opísanú nižšie). V experimente 3 boli myši trénované na FR1 rozvrhu pre 2 d a potom na FR2 rozvrhu pre 8 d. Prvý 3 d testovania použil 60 min sedenia. Počas posledných tréningových dní 7 bola relácia ukončená, keď boli získané zosilňovače 50. V experimente 5 boli potkany trénované na FR1 / VR2 pláne v 15 min sedeniach, ako je opísané vyššie pre všetky ostatné experimenty s dvoma výnimkami. Najprv bol doručený maximálny počet peliet / relácií 150. Po druhé, tieto zvieratá dostali 5 ďalšie dni tréningu (tj celkom 15 d), aby sa umožnilo vytvorenie stabilného výkonu pred akoukoľvek experimentálnou manipuláciou.
Zvieratá boli tiež testované na reakciu na potravu na progresívnej schéme zosilnenia. V tomto teste sa požiadavka na odpoveď na získanie potravy iniciovala ako FR1 plán, ale postupne sa zvyšovala pomocou 2, aby sa získal nasledujúci zosilňovač (tj odpovede 1, 3, 5, 7, X + 2). V experimente liečenia liečiva s použitím potkanov 5 postupne zvyšoval harmonogram, čím sa dosiahol konečný harmonogram 1, 6, 11, 16, X + 5. Všetky ostatné parametre boli identické s vyššie uvedeným tréningovým postupom. Test bol ukončený, keď nebola vykonaná žiadna aktívna odozva pre 5 min.
Devalvácia zosilňovača.
Účinok devalvácie zosilňovača bol skúmaný s použitím prefeedingu špecifického pre zosilňovač. V tomto prípade sa myši nechali jesť neobmedzené potravinové pelety na báze obilia vo svojej domácej klietke počas testu 3 h pred testovaním na progresívnej schéme zosilnenia, ako je opísané vyššie.
Chirurgické techniky.
Zvieratá sa anestetizovali použitím Equithesinu [zmes obsahujúca pentobarbital (35 mg / kg) a chloralhydrát (183.6 mg / kg) v etanole (10% obj./obj.) A propylénglykolu (39% obj./obj.); podávané v 4.32 ml / kg, ip]. Kanyly (Plastics One, Roanoke, VA) boli chirurgicky implantované nad NAc jadro s použitím Kopf stereotaktického zariadenia. Stereotaktické súradnice použité vo vzťahu k bregme boli nasledujúce: anterior / posterior, + 1.5 mm; laterálny / stredný, ± 1.5 mm; ventrálna / dorzálna, −6.0 mm (Paxinos a Watson, 1986). Kanyly boli ukotvené k lebke pomocou skrutiek a zubného cementu. Do vodiacich kanyl sa umiestnili prekážky, aby sa zabránilo zablokovaniu. Po operácii sa zvieratá podrobili štandardnej pooperačnej starostlivosti a nechali sa zotaviť pre 5 d pred začiatkom akéhokoľvek experimentu.
Infúzia.
Intracerebrálne infúzie vírusových vektorov sa uskutočňovali bilaterálne 40 h pred nástupom tréningu (pozri nižšie). Injekčné striekačky (meradlo 31), rozprestierajúce sa 1 mm pod špičkou vodiacich kanyl, sa pomaly znižovali súčasne do ľavej a pravej NAc a 1.0 μl / strana sa podávala infúziou počas obdobia 4 min pri rýchlosti infúzie 0.25 μl / ml. min s použitím mikroinfúznej pumpy (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Infúzne ihly boli ponechané na mieste pre 1 min po ukončení infúzie a vymieňali sa fiktívne kanyly. Umiestnenie kanyly bolo histologicky overené po ukončení experimentov správania (pozri obr. 6B) a do štatistickej analýzy experimentálnych údajov boli zahrnuté iba zvieratá so správne umiestnenými kanylami.
Histologické analýzy a imunofarbenie.
Po ukončení experimentov sa zvieratá, ktoré dostali chirurgický zákrok ako súčasť experimentu, anestetizovali s Equithesinom a perfundovali sa transkardiálne pomocou 0.1 m PBS (5 min) a 10% formalínu (10 min) podľa štandardných postupov. Mozgy sa postfixovali vo formalíne a potom sa umiestnili do fosfátového pufrovaného roztoku sacharózy (30%). Všetky mozgy boli potom narezané v rezoch 40 μm na mikrotóme a použité na histologické analýzy umiestnenia kanyly a expresie proteínu.
Umiestnenie kanyly bolo uskutočnené v rezoch kontrastne zafarbených neutrálnou červenou farbou a upevnených na mikroskopických sklíčkach v zmäkčovadle distyrénu a xyléne (DPX) po dehydratácii etanolom. Imunohistochémia bola uskutočnená tak, ako bolo opísané vyššie (Hommel a kol., 2003). Stručne povedané, expresia p-galaktozidázy po infúzii HSV-LacZ bola stanovená imunofluorescenčným farbením s použitím kozej anti-p-galaktozidázovej primárnej protilátky (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Po inkubácii cez noc sa rezy prepláchli a následne inkubovali s fluorescenčnou oslí anti-kozou sekundárnou protilátkou konjugovanou s Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Rezy sa znova premyjú a potom nasleduje dehydratácia etanolom a montáž v DPX. Susediace kontrolné rezy boli ošetrené identicky bez zahrnutia primárnych protilátok. Imunofluorescencia bola hodnotená pri 520 nm použitím a Zeiss (Oberkochen, Nemecko) mikroskop s FITC filtrom a snímky zachytené pri rovnakých expozičných časoch s. \ T Zeiss Digitálny zobrazovací systém Axiovision.
štatistika
Údaje zo všetkých experimentov sa hodnotili pomocou jedno-, dvoj- alebo trojcestného testu ANOVA, po ktorom nasledoval Scheffeho alebo Dunnettov post hoc test, pričom sa prípadne korigovalo na viacnásobné porovnanie pomocou Holmovho sekvenčného odmietacieho testu. Hodnota p ≤ 0.05 sa považovala za štatisticky významnú.
výsledky
Experiment 1: účinky opakovanej expozície liečiva na inštrumentálny výkon a odpovedajúci progresívny pomer
Aby sme potvrdili, že naše opakované paradigma vystavenia účinkom liečiv spôsobilo funkčne významné neuroadaptácie, najprv sme hodnotili lokomotorickú senzibilizáciu ako prototyp behaviorálneho merania chronického účinku lieku. Potkanom sa podávali dvakrát denne injekcie nikotínu (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokaínu (15 mg / kg) alebo amfetamínu (2.5 mg / kg) a lokomotorická aktivita sa testovala po prvej injekcii dní liečby 1 a 15 (doplnkové Obr. 1A – E, dostupné na internetovej adrese www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). Štatistická analýza odhalila signifikantnú interakciu počas dňa (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). S výnimkou MDMA (p = 0.62), všetky liečivá indukovali signifikantne väčšiu lokomotorickú aktivitu (tj senzibilizáciu) v deň 15 v porovnaní s dňom 1 (nikotín, p <0.001; kokaín, p <0.001; amfetamín, p <0.01). Opakované injekcie fyziologického roztoku nemali žiadny účinok. Žiadna z liečebných terapií nezmenila základnú lokomotorickú aktivitu meranú počas obdobia návyku v deň 15 (doplnkové obr. 2A, dostupné na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál).
Päť dní po poslednej injekcii lieku sme skúmali účinky predchádzajúceho opakovaného vystavenia nikotínu, MDMA, kokaínu alebo amfetamínu na inštrumentálne správanie posilnené potravinami. Údaje sú uvedené pre každý liek samostatne v Obrázok 1A – H s použitím rovnakej kontrolnej skupiny fyziologického roztoku na porovnanie. Zistili sme, že predchádzajúce vystavenie každému z týchto liekov významne a selektívne zvýšilo reakciu posilnenú inštrumentálne posilnenú potravu (liečba pomocou páky pomocou tréningového dňa, F(36,378) = 1.683; p <0.01; post hoc analýza: nikotín, p <0.01; MDMA, p <0.05; kokaín, p <0.01; amfetamín, p <0.001). Pretrvávajúce zvýšenie inštrumentálnej odozvy pozorované pri asymptotickom výkone naznačovalo možné zvýšenie motivácie, čo je v súlade so skôr zaznamenaným zvýšením po opakovanej psychostimulačnej expozícii (pozri Diskusiu). Preto sme testovali, či predchádzajúca opakovaná expozícia lieku zvýšila motiváciu pomocou progresívneho pomeru. Bol zaznamenaný štatistický účinok predchádzajúcej expozície liečiva na reakciu na aktívnu páku (liečba pákovou interakciou, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Obr. 2A), ako aj konečný bod zlomu (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Obr. 2B). Ďalšia analýza ukázala, že všetky liečby zvýšili počet aktívnych odpovedí (nikotín, p <0.001; MDMA, p <0.05; kokaín, p <0.001; amfetamín, p <0.001) a bod zlomu (nikotín, p <0.001; MDMA , p <0.01, kokaín, p <0.0001, amfetamín, p <0.0001) v súlade s účinkom týchto liečebných postupov na motiváciu. Vzhľadom na nedostatok účinku liekov na základnú lokomotorickú aktivitu a nedostatok účinku na inaktívne pákové lisy je nepravdepodobné, že by zvýšená odpoveď na potraviny za týchto podmienok odrážala nešpecifické zvýšenie motorickej aktivity.
Obrázok 1.
Účinok predchádzajúcich opakovaných injekcií nikotínu (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaínu (15 mg / kg) alebo amfetamínu (2.5 mg / kg) dvakrát denne pre 15 d na následné inštrumentálne správanie. Zvieratá boli testované spoločne, ale pre jasnosť sú účinky každého liečiva prezentované oddelene, s použitím rovnakej kontrolnej skupiny ošetrenej fyziologickým roztokom. A (aktívne reakcie) a B (neaktívne reakcie) ukazujú účinky predchádzajúcej expozície nikotínu; C, D, MDMA; E, F, kokaín; G, H, amfetamín. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM.
Obrázok 2.
Účinok predchádzajúcej opakovanej liečby (dvakrát denne, 15 dní) soľným roztokom, nikotínom (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaínom (15 mg / kg) alebo amfetamínom (2.5 mg / kg) na inštrumentálnu odpoveď na postupnom harmonograme zosilnenia. Údaje sú vyjadrené ako priemery ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, fyziologický roztok; Nic, nikotín; Coc, kokaín; Amph, amfetamín; PR, progresívny pomer.
Predchádzajúca expozícia lieku tiež nemala žiadny vplyv na telesnú hmotnosť zaznamenanú pred obmedzením potravy, na prvý alebo posledný deň inštrumentálneho tréningu, alebo bezprostredne pred testom progresívneho pomeru (doplnok Obr. 2B, dostupný na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). Obmedzený prístup k potravinám pre 3 d spočiatku znížil telesnú hmotnosť v priemere na 91 – 92% hmotnosti krmiva. Na konci testovania správania sa váhy vrátili na 97 – 99% predradenej telesnej hmotnosti a neboli pozorované žiadne rozdiely medzi zvieratami vystavenými liečivu a fyziologickým roztokom. Zmeny telesnej hmotnosti a rozdiely v hlade alebo chuti do jedla by preto nemali významne prispieť k pozorovanému zvýšeniu inštrumentálneho výkonu alebo motivácie.
Experiment 2: indukovateľná nadmerná expresia AFosB u bitransgénnych myší; inštrumentálny výkon
Ďalej sme skúmali, či sa zvýšila aj inštrumentálna výkonnosť u bitransgénnych myší, ktoré indukovali nadmerne expresiu AFosB s výraznou selektivitou v NAc a dorzálnom striate (Kelz a kol., 1999). V tomto experimente sa myši s nadmernou expresiou AFosB porovnávali s kontrolami zo súrodenca, ktoré nadexprimovali AFosB, pretože sa udržiavali na doxycyklíne (pozri Materiály a metódy). Zistili sme, že nadmerná expresia AFosB významne zvýšila reakciu zosilnenú potravou (expresia génu pomocou páky počas tréningového dňa, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Obr. 3A). Počet reakcií na nosepoke v neaktívnej clone sa medzi týmito dvoma skupinami nelíšil (Obr. 3B). Tieto údaje spoločne ukazujú, že nadmerná expresia AFosB v NAc a dorzálnom striatum selektívne zvyšuje inštrumentálny výkon
Obrázok 3
Účinok indukovateľnej striatálnej nadmernej expresie AFosB u bitransgénnych myší na inštrumentálny výkon. A, Aktívne reakcie. B, Neaktívne reakcie. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM.
Aby sa vylúčilo, že zvýšenie inštrumentálnej výkonnosti u zvierat s nadmernou expresiou AFosB by mohlo byť vysvetlené zmenami v chuti k jedlu alebo hladu, telesná hmotnosť bola zaznamenaná pred obmedzením potravy a počas prvého a posledného dňa tréningu. AFosB nemal žiadny vplyv na telesnú hmotnosť pred potravinovým obmedzením, ani nebol ovplyvnený telesnou hmotnosťou počas testovania správania. Obmedzený prístup k potravinám pre 3 d znížil telesnú hmotnosť v priemere o 87 – 89% hmotnosti voľnej výživy. Na konci behaviorálneho testovania boli hmotnosti zvierat 97-99% prerestrikčných telesných hmotností, s ekvivalentnými zmenami pozorovanými u AFosB a kontrolných myší (doplnkové Obr. 3A, dostupné na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). Je preto nepravdepodobné, že by potenciálne účinky nadmernej expresie AFosB na hlad alebo chuť do jedla mohli zodpovedať za zlepšenie pozorovanej inštrumentálnej reakcie.
Keď bolo testovanie na prístrojovom výkone dokončené, nadmerná expresia AFosB nezmenila základnú lokomotorickú aktivitu meranú počas periódy 30 min (doplnkové obr. 3B, dostupné na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). Toto pozorovanie podporuje názor, že nešpecifická zmena aktivity neprispieva k zvýšenému inštrumentálnemu výkonu pozorovanému u týchto zvierat. Boli však hlásené, že bitransgénne myši s nadmernou expresiou AFosB vykazujú zvýšené lokomotorické reakcie na akútny a opakovaný kokaín (Kelz a kol., 1999). Pretože sme použili mierne odlišný plán odchodu z doxycyklínu na indukciu génovej expresie (6 týždne s potravinovým obmedzením), rozhodli sme sa potvrdiť tento fenotyp. Myši s nadmernou expresiou AFosB preukázali významne vyšší nárast lokomotorickej aktivity pri injekčnom podávaní kokaínu v porovnaní s ich kontrolami zo súrodencov na doxycyklíne (liečba génovou expresiou, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (doplnkové obr. 3C, dostupné na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál).
Experiment 3: indukovateľná nadmerná expresia AFosB u bitransgénnych myší; progresívny pomer
Vzhľadom na to, že predchádzajúca expozícia liekmi indukuje striatálny ΔFosB (Nestler a kol., 2001) a zistilo sa, že sa tým zvyšuje progresívny pomer odpovedí, ďalej sme testovali, či transgénna nadmerná expresia striatálneho delta AFosB tiež zvyšuje výkonnosť pri progresívnom pomere zosilnenia. Nová skupina myší bola zaškolená na inštrumentálnu reakciu za podmienok (pozri Materiály a metódy), ktoré nevyvolali signifikantné rozdiely v inštrumentálnom výkone pred testovaním na progresívny pomer reagujúci (F(1,16) <1). Avšak v teste progresívneho pomeru sme pozorovali významnú génovú expresiu interakciou páky (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Obr. 4A) a zistili, že myši s nadmernou expresiou AFosB, v porovnaní s kontrolnými myšami so súrodencami, ktoré boli udržiavané na doxycyklíne, dosiahli väčší počet aktívnych odpovedí (p <0.05), zatiaľ čo počet neaktívnych reakcií na páku nebol odlišný. Myši nadmerne exprimujúce AFosB tiež dosiahli vyšší bod zlomu (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Obr. 4B). Tieto údaje naznačujú, že podobne ako predchádzajúca psychostimulačná expozícia, striatálna nadmerná expresia AFosB zvyšuje motiváciu. Pretože počet neaktívnych reakcií sa nezmenil u myší s nadmernou expresiou AFosB, nie je pravdepodobné, že nešpecifické zvýšenie aktivity prispeje k týmto účinkom. Tento pohľad bol ďalej podporený hodnotením základnej lokomotorickej aktivity, v ktorej nebol žiadny rozdiel medzi myšami nadmerne exprimujúcimi AFosB a kontrolné myši so súrodencami, ktoré boli udržiavané na doxycyklíne. Žiadne hrubé rozdiely v telesnej hmotnosti medzi AFosB-nadmerne exprimujúcimi a kontrolnými zvieratami neboli evidentné, ako sa meralo v deň testu. Teda hoci zvieratá nadmerne exprimujúce AFosB budú emitovať inštrumentálne reakcie motivované viac potravinami, nezdá sa, že by konzumovali viac potravy, keď sú voľne dostupné. Najpravdepodobnejším vysvetlením tohto pozorovania je, že hoci motivácia určuje, ako ťažké bude zviera pracovať na získanie zosilňovača, mnohé ďalšie faktory (chuť do jedla, sýtosť, metabolický stav atď.) Ovplyvňujú správanie sa krmiva a skutočnú spotrebu potravy.
Obrázok 4.
Účinok indukovateľnej nadmernej expresie FosB u bitransgénnych myší na inštrumentálnu reakciu podľa progresívneho harmonogramu zosilnenia pred a po znehodnotení zosilňovača vyvolaného sýtosťou. A, B, základná línia: reakcie páky (A), bod zlomu (B). C, D, Po znehodnotení výstuže: reakcie páky (C), bod zlomu (D). Údaje sú vyjadrené ako priemery ± SEM. * p <0.05.
Bitosgénne myši AFosB, ktoré sa tu používajú, exprimujú AFosB v celom striate. Zatiaľ čo ventrálna striatum (vrátane NAc) sa podieľa na motivačných procesoch, argumentuje sa, že chrbtové striatum sa podieľa na získavaní inštrumentálnych návykov (Yin a kol., 2004; Faure et al., 2005). Napriek tomu, že sme nezaznamenali rozdiely v inštrumentálnej výkonnosti počas tréningovej fázy s použitím pomeru nízkych pomerov s maximálnymi limitmi zosilnenia, podmienok relatívne odolných voči vývoju inštrumentálnych návykov (Dickinson, 1985), je možné, že stanovenie návykov by mohlo ovplyvniť reakciu v rámci progresívneho pomeru. Táto možnosť bola testovaná priamo vyhodnotením účinku devalvácie zosilňovača prefeed na progresívny pomer odpovedí. Takéto prefeeding eliminovalo účinok AFosB na progresívny pomer reagujúci, bez rozdielov v odpovediach alebo zlomoch pozorovaných medzi AFosB-nadmerne exprimujúcimi a kontrolnými myšami (F(1,16) <1) (Obr. 4C, D). Tieto údaje spoločne svedčia o tom, že nadmerná expresia striatálneho delta AFosB nezmenila citlivosť na zmeny hodnoty odmeňovaných výsledkov pomocou tohto plánu testovania. Skôr sa zdá, že inštrumentálna odpoveď pozorovaná v pokuse s progresívnym pomerom je cielená a zvýšený bod zlomu pozorovaný u myší s nadmernou expresiou AFosB sa pravdepodobne pripisuje zvýšenej motivácii a nie zvýšenej odpovedi podobnej zvykom.
Experiment 4: nadmerná expresia AFosB sprostredkovaná vírusom v jadre NAc: inštrumentálny výkon
Na posúdenie, či nadmerná expresia AFosB selektívne v NAc by mohla zodpovedať za správanie pozorované u bitransgénnych myší, sme infúziou HSV-AFosB alebo HSV-LacZ ako kontrola selektívne do NAc jadra potkanov a študovali účinok tejto manipulácie na potravu. - posilnená inštrumentálna výkonnosť (Obr. 5A, B). Po tréningu časopisu sa HSV-AFosB alebo HSV-LacZ podali infúziou do NAc jadra 40 h pred začatím behaviorálneho testovania. Umiestnenie infúzie a rozsah génovej expresie sprostredkovanej vírusom sú uvedené v Obrázok 6, A a B. NAc infúzie HSV-AFosB viedli k trvalému zvýšeniu počtu uskutočnených aktívnych reakcií (expresia génu pomocou páky, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Obr. 5A), ktorý pretrvával počas celého experimentu. Tieto účinky boli selektívne, pretože neboli pozorované žiadne významné účinky nadmernej expresie AFosB v jadre NAc na počet neaktívnych reakcií (Obr. 5B) alebo na základnej lokomotorickej aktivite zaznamenanej deň po ukončení experimentu (údaje nie sú uvedené). Nadmerná expresia AFosB v NAc tak napodobňovala behaviorálne účinky predchádzajúcej expozície liečiva alebo nadmernú expresiu striatalu AFosB.
Obrázok 5.
Vplyv infúzií HSV-AFosB do NAc jadra pred tréningom na inštrumentálnej odpovedi. A, Aktívne reakcie. B, Neaktívne reakcie. Údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM.
Obrázok 6.
A, Umiestnenie miest infúzie pre experimenty s vírusovými vektormi. Naplnené čierne krúžky zodpovedajú zamýšľanému miestu infúzie. Iba infúzie v rámci ∼0.5 mm tejto oblasti (tj v jadre NAc), ako je naznačené kružnicou, boli považované za prijateľné. Zvieratá s infúziami mimo tejto oblasti boli zo štatistických analýz vylúčené. Dno, miesto infúzie v rámci NAc u reprezentatívneho zvieraťa. B, Imunohistochemické overenie expresie proteínu po infúzii HSV-LacZ. Vrchné panely demonštrujú expresiu p-galaktozidázy v jadre NAc (2.5 a 10 × zväčšenie). Spodné panely demonštrujú nedostatok imunofluorescencie v susedných kontrolných rezoch použitím rovnakého imunohistochemického postupu bez zahrnutia primárnej protilátky.
Experiment 5: nadmerná expresia AFosB sprostredkovaná vírusom v jadre NAc: progresívny pomer
Konečný experiment priamo určil, či obmedzená nadmerná expresia AFosB v jadre NAc použitím prístupu prenosu génov sprostredkovaného vírusom bola dostatočná na zvýšenie motivácie u potkanov. Tu bol HSV-AFosB podaný infúziou až po ukončení inštrumentálneho tréningu, čím sa eliminoval potenciálny vplyv nadmernej expresie AFosB počas tréningu na následnom teste progresívneho pomeru. Nová skupina potkanov bola vyškolená, ako predtým, a rozdelená do vyvážených experimentálnych skupín na základe ich výkonu v posledných dňoch tréningu. Zvieratá následne dostali bilaterálne infúzie HSV-AFosB alebo HSV-LacZ do NAc jadra a testovali sa na progresívnom pomere odpovedajúcom po 5 d nadmernej expresie. Štatistická analýza odhalila významnú génovú expresiu pomocou pákovej interakcie (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Obr. 7A). Potkany, ktorým bol podávaný HSV-AFosB, boli účinnejšie (p <0.01) v porovnaní s tými, ktorí dostali infúziu HSV-LacZ, zatiaľ čo odpoveď na inaktívnu páku nebola ovplyvnená. V súlade s týmto zvýšením mali potkany infundované HSV-AFosB tiež vyšší bod zlomu (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Obr. 7B) ako zvieratá infundované HSV-LacZ. Nepozorovali sa žiadne účinky AFosB na základnú lokomotorickú aktivitu 1 h pred testom progresívneho pomeru (doplnkové obr. 4A, dostupné na www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). V deň testovania progresívneho pomeru sa tiež nezistili žiadne rozdiely v telesnej hmotnosti (doplnkové obr. 4B, dostupné na adrese: www.jneurosci.org ako doplnkový materiál). Tieto zistenia podporujú naše pozorovania u transgénnych myší s nadmernou expresiou AFosB a ukazujú, že selektívna nadmerná expresia AFosB v NAc je dostatočná na zvýšenie motivácie spojenej s potravou.
Obrázok 7.
Účinok infúzií HSV-ΔFosB 5 d pred testovaním na inštrumentálnu odpoveď podľa progresívneho harmonogramu zosilnenia. A, Pákové reakcie. B, Bod zlomu. Údaje sú vyjadrené ako priemery ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.
Diskusia
Táto štúdia demonštruje, že nadmerná expresia AFosB v NAc zvyšuje inštrumentálne správanie posilnené potravour. Predchádzajúce vystavenie účinkom kokaínu, amfetamínu, MDMA alebo nikotínu viedlo k trvalému zvýšeniu následného inštrumentálneho výkonu. Tieto expozície voči liekom tiež zvýšili správanie motivované potravinami v progresívnom harmonograme posilňovania. Tieto účinky predchádzajúcej expozície liečiva boli napodobnené obmedzenou nadmernou expresiou AFosB v striate, použitím indukovateľných bitransgénnych myší (NSE-tTA × TetOP-AFosB) alebo použitím nového vírusového vektora na expresiu AFosB selektívne v NAc., Predovšetkým nadmerná expresia AFosB v jadre NAc po získaní inštrumentálnej odpovede už zvýšila motiváciu pre potraviny v rámci progresívneho pomeru. Naše zistenia spoločne identifikujú AFosB v jadre NAc ako potenciálny mediátor neuroadaptácií indukovaných liekmi, ktoré môžu podporovať inštrumentálne správanie, čím sa rozširuje úloha tohto transkripčného faktora tak, aby zahŕňal procesy s významom pre motivačné vplyvy na výkonnosť posilneného správania sa potravín. Takisto zvyšujú možnosť, že podmienky, ktoré indukujú expresiu AFosB v NAc, môžu ovplyvniť motivačné vlastnosti prirodzených aj liečivových posilňovačov..
AFosB sa akumuluje v dynorfín-exprimujúcich stredných ostnatých neurónoch tak NAc, ako aj dorzálneho striata po chronickej, ale nie akútnej expozícii drogám zneužívania. Tento regionálny model expresie je reprodukovaný v indukovateľných bitransgénnych AFosB-nadmerne exprimujúcich myšiach, ktoré sa tu používajú. U týchto myší \ t zvýšené striatálne hladiny ΔFosB zvyšujú citlivosť zvierat na kokaín a morfín, merané podľa preferencie podmieneného miesta (Kelz a kol., 1999; Zachariou a kol., 2006). Taktiež zvyšuje progresívny pomer reagujúci na kokaín, čo naznačuje, že motivácia k self-administrácii kokaínu je zvýšená nadmernou expresiou striatálneho AFosB (Colby a kol., 2003). Zistili sme, že nadmerná expresia striatálneho AFosB u týchto myší tiež zvýšila progresívny pomer reagujúci na potravinový zosilňovač a že tieto účinky boli reprodukované obmedzenou nadmernou expresiou AFosB sprostredkovanou vírusom v jadre NAc u potkanov. Naše údaje naznačujú, že AFosB môže pôsobiť ako transkripčný modulátor motivácie pre primárne zosilňovače, či už ide o potraviny, lieky alebo napríklad cvičenie, čo je v súlade s predbežnými pozorovaniami, že striatálna expresia AFosB je zvýšená po chronickom behu kolesa alebo pití sacharózy (McClung a kol., 2004). Tieto údaje naznačujú, že nadmerná expresia NAc AFosB môže zvýšiť motivačný vplyv prirodzených aj liečivových posilňovačov.
Subregióny NAc sa argumentujú, že diferencovane sprostredkovávajú vplyv pavloviánskych alebo inštrumentálnych stimulačných procesov na inštrumentálnu výkonnosť. (Corbit a kol., 2001; de Borchgrave a kol., 2002), zatiaľ čo všeobecnejšie motivačné vplyvy na inštrumentálnu výkonnosť môžu byť zakódované inými regiónmi, ako je centrálne jadro amygdaly (Corbit a Balleine, 2005). Jadro NAc však bolo tiež navrhnuté ako kritické miesto na získanie cieleného inštrumentálneho učenia (Smith-Roe a Kelley, 2000; Baldwin a kol., 2002a,b; Kelley, 2004). Preukázali sme ekvivalentné účinky predchádzajúcich expozícií lieku a nadmernú expresiu transgénneho striatálneho AFosB na zvýšenie inštrumentálneho správania. Infúzie HSV-AFosB obmedzené na NAc jadro tiež zvýšili potravinovo posilnenú inštrumentálnu reakciu. Aj keď tieto experimenty nevylučujú príspevok dorzálneho striata v tomto správaní, silne naznačujú, že zmeny v expresii génu v NAc vyvolané AFosB sú dostatočné na zvýšenie reakcie na potraviny. Pretože progresívny pomer odpovedí bol tiež zvýšený, keď bol AFosB exprimovaný po predchádzajúcom dosiahnutí stabilného inštrumentálneho výkonu, úloha motivačných vplyvov na inštrumentálne správanie sa javí ako pravdepodobná. Možnosť, že naše manipulácie ovplyvňujú aj inštrumentálne učebné procesy, však nemožno úplne vylúčiť. Na podporu našich záverov, zvýšenie inštrumentálnej výkonnosti pozorované po predchádzajúcom vystavení perorálnemu kokaínu (\ tMiles a kol., 2004), sa argumentuje tým, že zahŕňa motivačné zmeny zodpovedajúce schopnosti chronickej liečby nikotínom zvýšiť progresívny pomer reagujúci u myší (Brunzell a kol., 2006). Okrem toho, myši vyradené z dopamínového transportéra, v ktorých sú zvýšené hladiny extracelulárneho dopamínu, vykazujú zvýšenú imunoreaktivitu AFosB a motiváciu posilnenú potravou, ale nezmenili učenie (Cagniard a kol., 2006). Navyšezistili sme, že nadmerná expresia striatálneho AFosB u myší neovplyvnila výkon, keď bola potrava „znehodnotená“ prefeedingom, Tieto údaje ukazujú, že zvieratá boli citlivé na motivačnú hodnotu zosilňovača a že reakcia bola zameraná na cieľ.
Predchádzajúca opakovaná expozícia lieku môže tiež zlepšiť kontrolu správania vyvolanú podmienenými stimulmi súvisiacimi s prirodzenými zosilňovačmi, meranými pavloviánskym prístupom (Harmer a Phillips, 1998; Taylor a Jentsch, 2001; Olausson a kol., 2003), podmienené vystuženie (Taylor a Horger, 1999; Olausson a kol., 2004) a prenosom z pavlovian-to-instrumental (Wyvell a Berridge, 2001). Tam je teraz presvedčivý dôkaz, že NAc jadro, na rozdiel od shell, sa podieľa na kontrole drog-motivované správanie pavlovian podmienené podnety (Parkinson a kol., 1999, 2002; Hall a kol., 2001; Dalley a kol., 2002; Ito a kol., 2004). Naše výsledky môžu naznačovať, že indukcia AFosB indukovaná liečivom v NAc môže byť jedným z mechanizmov, pomocou ktorých je v týchto postupoch posilnená kontrola správania. Je tiež možné, že pavlovské podmienené podnety, ktoré pôsobia ako podmienené zosilňovače, prispievajú k súčasným účinkom správania. Zvýšená kontrola správania takýchto podmienených stimulov sprostredkovaných zvýšením striatálneho AFosB môže tiež prispievať k účinku proteínu na preferenciu kondicionovaného miesta indukovaného liečivom. (Kelz a kol., 1999; Zachariou a kol., 2006) a progresívny pomer reagujúci na kokaín (\ tColby a kol., 2003). Zmeny v motivačných procesoch sa predpokladajú, že prispievajú k rozvoju a udržaniu návykového správania (Robinson a Berridge, 1993; Jentsch a Taylor, 1999; Robbins a Everitt, 1999; Nestler, 2004). Súčasné údaje sú tiež v súlade s ďalšími teóriami, ktoré zdôrazňujú viaceré inštrumentálne a pavlovské procesy v návykovom správaní (Everitt a Robbins, 2005). Teraz je potrebná ďalšia práca na definovanie úlohy neuroadaptácií indukovaných liekmi a AFosB v NAc a iných limbicko-striatálnych subregiónoch s ohľadom na špecifické asociatívne alebo motivačné faktory, ktoré môžu uľahčiť inštrumentálny výkon a prispieť k nutkavému správaniu.
Hoci nie sú známe presné molekulárne mechanizmy, ktorými nie sú známe zmeny v rámci vplyvu NAc motivovaného primárnymi alebo upravenými zosilňovačmi (Kelley a Berridge, 2002), GABAergné stredne ostnaté neuróny NAc sú považované za kritický substrát pre plasticitu závislú od liekov a skúseností. Tu sa dopaminergný vstup z ventrálnej tegmentálnej oblasti a glutamátergický vstup z kortikolimbických afferentov približujú k bežným dendritom a dendritickým spinom. (Sesack a Pickel, 1990; Smith a Bolam, 1990). Chronická psychostimulačná expozícia zvyšuje hustotu takýchto spinov na neurónoch v NAc shell a jadre (Robinson a Kolb, 1999; Robinson a kol., 2001; Li et al., 2003, 2004). Nedávno bola indukcia behaviorálnej senzibilizácie spojená špecificky so zvýšením dendritických spinov v jadre NAc (Li et al., 2004). Zvýšenie hustoty chrbtice vyvolané kokaínom pretrváva len v D1-pozitívne neuróny, ktoré koexprimujú AFosB (Robinson a Kolb, 1999; Lee et al., 2006). AFosB v jadre NAc tak môže prispieť k trvalej synaptickej plasticite, ktorá by mohla ovplyvniť inštrumentálne správanie. Kritická úloha pre dopamín-glutamátovú neurotransmisiu (Smith-Roe a Kelley, 2000), aktivita proteínkinázy A (Baldwin a kol., 2002a) a de novo proteínová syntéza (Hernandez a kol., 2002) v jadre NAc na inštrumentálnu výkonnosť boli predtým hlásené. Teraz sme identifikovali AFosB ako transkripčný faktor, ktorý môže trvalo zvýšiť reakciu zosilnenú potravou, keď je nadmerne exprimovaný v NAc jadre. Špecifické gény alebo proteíny podieľajúce sa na týchto účinkoch ostávajú presne definované. AFosB reguluje expresiu viacerých proteínov v NAc podieľajúcom sa na neuroplasticite (McClung a Nestler, 2003). Nedávna analýza microarray charakterizovala vzory expresie génov v NAc bitransgénnych myší exprimujúcich AFosB tu použitých a identifikovala podskupinu génov, ktoré boli regulované relatívne krátkodobou expresiou AFosB (McClung a Nestler, 2003). BDNF bol jedným z takýchto génov a je známe, že BDNF v tomto nervovom okruhu zlepšuje reakciu na podnety súvisiace s liečivom a potravinami (Horger a kol., 1999; Grimm a kol., 2003; Lu a kol., 2004). Ďalší požadovaný gén je cyklín-dependentná kináza 5 (Bibb a kol., 2001), ktorý je tiež indukovaný AFosB, a môže regulovať štrukturálnu plasticitu vyvolanú kokaínom (Norrholm a kol., 2003) a motivácia meraná progresívnym pomerom reagujúcim na prírodné alebo liečivé látky (JR Taylor, nepublikované pozorovania). Ďalšími kandidátmi sú GluR2 podjednotka AMPA glutamátových receptorov (Kelz a kol., 1999) a transkripčný faktor NFκB (jadrový faktor κB) (Ang a kol., 2001). Bolo by dôležité vyhodnotiť tieto a ďalšie regulované proteíny v subregiónoch NAc ako kandidátov na sprostredkovanie účinkov správania AFosB na inštrumentálny výkon a motiváciu.
Súčasná séria experimentov poskytuje dôkaz, že nadmerná expresia AFosB v NAc môže zlepšiť správanie motivované potravinami a tým regulovať inštrumentálnu výkonnosť, ako bolo predtým preukázané pre odmeňovanie liekov. Tieto údaje poskytujú nový dôkaz, že AFosB môže pôsobiť ako všeobecný molekulárny prepínač spojený so zlepšením motivačných aspektov zosilňovačov pri cielenom správaní. Naše zistenia poukazujú na možnosť, že indukcia NAc AFosB, napríklad návykovými látkami, stresom alebo možno aj vysoko odmeňovanými potravinami, môže byť kritickým mechanizmom, ktorým dysfunkčné motivačné stavy vedú k psychiatrickým poruchám spojeným s nutkavým správaním..
poznámky pod čiarou
o Prijaté marca 15, 2006.
o Revízia dostala jún 23, 2006.
o Akceptované August 2, 2006.
Táto práca bola podporená grantmi z Národného inštitútu pre zneužívanie drog, Národného inštitútu duševného zdravia a Národného inštitútu pre zneužívanie alkoholu a alkoholizmu. Vďačne oceňujeme cennú pomoc Dilji Kruegerovej, Drewa Kiralyho, Dr. Ralpha DiLeona, Roberta Searsa a Dr. Jonathana Hommela na Katedre psychiatrie na Univerzite Yale. Sme tiež vďační Dr. Jennifer Quinnovej a Dr. Paulovi Hitchcottovi za poskytnutie užitočných pripomienok k tomuto rukopisu.
Korešpondencia by mala byť adresovaná Jane R. Taylorovi, Katedre psychiatrie, Divízii molekulárnej psychiatrie, Lekárskej fakulte Univerzity Yale, Výskumným zariadeniam Ribicoff, Centrum duševného zdravia Connecticut, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[chránené e-mailom]
Copyright © 2006 Spoločnosť pre neurovedy 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Referencie
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) Indukcia NFκB v nucleus accumbens chronickým podávaním kokaínu. J Neurochem 79: 221 – 224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Holahan MR,
4. Kelley AE
(2002a) Chutné inštrumentálne učenie je narušené inhibíciou proteínkinázy závislej od cAMP v nucleus accumbens. Neurobiol Learn Mem 77: 44 – 62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) Chutné inštrumentálne učenie vyžaduje súbežnú aktiváciu NMDA a dopamínu D1 receptory v mediálnom prefrontálnom kortexe. J Neurosci 22: 1063 – 1071.
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Účinky lézií kyseliny iboténovej v jadre accumbens na inštrumentálny účinok. Behav Brain Res 65: 181 – 193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Závislosť, dopamín a molekulárne mechanizmy pamäte. Neuron 25: 515 – 532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinson TE
(2003) Odmena za analýzu. Trendy Neurosci 26: 507 – 513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P
(2001) Účinky chronickej expozície kokaínu sú regulované neuronálnym proteínom Cdk5. Príroda 410: 376 – 380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) nikotínové acetylcholínové receptory obsahujúce beta2-podjednotku sa podieľajú na zvýšení podmieneného zosilnenia nikotínom, ale nie progresívnom pomere odpovedajúcom na potraviny u myší C57BL / 6. Psychofarmakológia (Berl) 184: 328 – 338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Myši s chronicky zvýšeným dopamínom vykazujú zvýšenú motiváciu, ale nie učenie, pre potravinovú odmenu. Neuropsychofarmakológia 31: 1362 – 1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Regulácia odmeňovania kokaínu zo strany CREB. Veda 282: 2272 – 2275.
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Nádej BT,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ
(1997) Chronické antigény súvisiace s Fos: stabilné varianty AFosB indukované v mozgu chronickými liečbami. J Neurosci 17: 4933 – 4941.
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Transgénne zvieratá s indukovateľnou, cielenou expresiou génu v mozgu. Mol Pharmacol 54: 495-503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Vlastné DW
(2003) Zvýšená expresia AFosB špecifická pre striatálny bunkový typ zvyšuje stimuláciu kokaínu. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Dvojitá disociácia bazolaterálnych a centrálnych lézií amygdaly na všeobecné a na výsledky špecifické formy pavloviansko-inštrumentálneho prenosu. J Neurosci 25: 962 – 970.
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Úloha nucleus accumbens pri inštrumentálnom kondicionovaní: dôkaz funkčnej disociácie medzi akumulačným jadrom a škrupinou. J Neurosci 21: 3251 – 3260.
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamín a učenie diferencovaného prístupu: interaktívne účinky lézií 6-hydroxydopamínu a systémové podávanie apomorfínu. Psychofarmakológia (Berl) 161: 425 – 433.
17. ↵
1. de Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Účinky lézií cytotoxického jadra accumbens na inštrumentálnu úpravu u potkanov. Exp Brain Res 144: 50 – 68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Priame interakcie medzi bazolaterálnou amygdala a jadrom accumbens jadrom sú základom pre správanie potkanov, ktoré vyhľadáva kokaín. J Neurosci 24: 7167 – 7173.
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Kondicionované posilňujúce vlastnosti stimulov spojených s vlastným podávaním kokaínu, heroínu alebo sacharózy: dôsledky pre pretrvávanie návykového správania. Neurofarmakológia 47 ([Suppl 1]) 202 – 213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Činnosti a návyky: rozvoj autonómie správania. Philos Trans R Londýn B Biol Sci 308: 67 – 78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Neurónové systémy posilňovania drogovej závislosti: od činov k návykom k donucovaniu. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) Lézia na nigrostriatálny dopamínový systém narúša tvorbu návyku-odozvy. J Neurosci 25: 2771 – 2780.
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. Nádej BT,
5. Su TP,
6. Shaham Y.
(2003) Časovo závislé zvýšenie hladín proteínov neurotrofického faktora odvodených z mozgu v rámci mezolimbického dopamínového systému po vysadení kokaínu: dôsledky pre inkubáciu túžby po kokaíne. J Neurosci 23: 742 – 747.
24. ↵
1. Hala J,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Zapojenie centrálneho jadra jadra amygdaly a nucleus accumbens do sprostredkovania Pavlovovských vplyvov na inštrumentálne správanie. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Zvýšená apetitívna kondícia po opakovanej predbežnej liečbe d-amfetamínom. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
Včasná konsolidácia inštrumentálneho učenia vyžaduje syntézu proteínov v nucleus accumbens. Nat Neurosci 2002: 5 – 1327.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Lokálny génový knockdown v mozgu pomocou vírusom sprostredkovanej RNA interferencie. Nat Med 9: 1539 – 1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Preexpozícia senzibilizuje potkany na hodnotné účinky kokaínu. Pharmacol Biochem Behav 37: 707 – 711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) Preexpozícia amfetamínu a nikotínu predisponuje potkany, aby si sami podávali nízku dávku kokaínu. Psychofarmakológia (Berl) 107: 271 – 276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Zvýšenie pohybovej aktivity a podmienená odmena kokaínu neurotrofickým faktorom odvodeným z mozgu. J Neurosci 19: 4110 – 4122.
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Diferenciálna kontrola správania pri vyhľadávaní kokaínu pomocou jadra nucleus accumbens a shell. Nat Neurosci 7: 389 – 397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulzivita vyplývajúca z frontostriatálnej dysfunkcie pri užívaní drog: implikácie na kontrolu správania podnetmi súvisiacimi s odmenou. Psychofarmakológia (Berl) 146: 373 – 390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Ventrálna striatálna kontrola chuťovej motivácie: úloha pri ingestívnom správaní a vzdelávaní súvisiacom s odmenou. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Neuroveda prírodných odmien: význam pre návykové drogy. J Neurosci 22: 3306 – 3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Vlastné DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Expresia transkripčného faktora ΔFosB v mozgu riadi citlivosť na kokaín. Príroda 401: 272-276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetamín reguluje expresiu génu v striatum potkana prostredníctvom transkripčného faktora CREB. J Neurosci 14: 5623 – 5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Tvorba dendritickej chrbtice vyvolanej kokaínom u stredných spinálnych neurónov obsahujúcich D1 a D2 dopamínového receptora v nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci USA 103: 3399 – 3404.
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) Umiestnenie perzistentných amfetamínom indukovaných zmien v hustote dendritických spinov na stredných ostnatých neurónoch v nucleus accumbens a caudate-putamen. Neuropsychofarmakológia 28: 1082 – 1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Indukcia behaviorálnej senzibilizácie je spojená so štrukturálnou plasticitou vyvolanou kokaínom v jadre (ale nie v škrupine) nucleus accumbens. Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y.
(2004) Jednorazová infúzia neurotrofického faktora odvodeného z mozgu do ventrálnej tegmentálnej oblasti indukuje dlhodobú potenciáciu vyhľadania kokaínu po vysadení. J Neurosci 24: 1604 – 1611.
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) Regulácia génovej expresie a odmeny kokaínu prostredníctvom CREB a AFosB. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) AFosB: molekulárny prepínač pre dlhodobú adaptáciu v mozgu. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 – 154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Kondicionovaná aktivita a inštrumentálne posilnenie po dlhodobej perorálnej konzumácii kokaínu potkanmi. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Molekulárne mechanizmy drogovej závislosti. Neurofarmakológia 47 ([Suppl 1]) 24 – 32.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Vlastné DW
(2001) AFosB: trvalý molekulárny prepínač pre závislosť. Proc Natl Acad Sci USA 98: 11042 – 11046.
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Kokaínom indukovaná proliferácia dendritických spinov v nucleus accumbens závisí od aktivity kinázy-5 závislej od cyklínu. Neuroscience 116: 19 – 22.
47. ↵
1. No HE,
2. Nádej BT,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Farmakologické štúdie regulácie chronickej indukcie antigénu súvisiaceho s FOS kokaínom v striate a nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Opakovaná expozícia nikotínu zvyšuje u potkanov učenie súvisiace s odmenou. Neuropsychofarmakológia 28: 1264 – 1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Opakovaná expozícia nikotínu zvyšuje reakciu s podmienenou výstužou. Psychofarmakológia (Berl) 173: 98 – 104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Disociácia pri účinkoch lézií jadra accumbens jadra a škrupiny na chuťové chovanie pavlovian prístup a potencovania podmienené posilnenie a lokomotorická aktivita d-amfetamínu. J Neurosci 19: 2401 – 2411.
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardinál RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Deplécia dopamínu Nucleus accumbens poškodzuje tak nadobudnutie, ako aj výkon apetitívneho Pavlovovho prístupového správania: dôsledky pre funkciu dopamínu mesoaccumbens. Behav Brain Res 137: 149 – 163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Mozog potkana v stereotaxických súradniciach (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Indukcia ΔFosB v mozgových štruktúrach súvisiacich s odmenou po chronickom strese. J Neurosci 24: 10594-10602.
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) Stresová a farmakologicky indukovaná behaviorálna senzibilizácia zvyšuje zraniteľnosť voči získaniu samopodania amfetamínu. Brain Res 514: 22 – 26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Bežné nervové substráty pre návykové vlastnosti nikotínu a kokaínu. Veda 275: 83 – 86.
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Drogová závislosť: zlé návyky sa sčítavajú. Príroda 398: 567 – 570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) Nervový základ túžby po drogách: teória závislosti a motivácie senzibilizácie. Brain Res Brain Res Rev 18: 247 – 291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Zmeny v morfológii dendritov a dendritických spinov v nucleus accumbens a prefrontálnom kortexe po opakovanej liečbe amfetamínom alebo kokaínom. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
Samostatné podávanie kokaínu mení morfológiu dendritov a dendritických spinov v nucleus accumbens a neokortexe. Synapse 2001: 39 – 257.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) V krysom strednom jadre accumbens sa hipokampálne a katecholaminergné terminály zbiehajú na ostnatých neurónoch a navzájom sa nachádzajú. Brain Res 527: 266 – 279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Storm D,
4. Nestler EJ
(2003) Regulácia transkripcie sprostredkovanej CRE v mozgu myší amfetamínom. Synapse 48: 10 – 17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Neurónová sieť bazálnych ganglií odhalená štúdiom synaptických spojení identifikovaných neurónov. Trendy Neurosci 13: 259 – 265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) Súčasná aktivácia NMDA a dopamínu D1 Receptory v jadre nucleus accumbens sú potrebné pre chuťovo inštrumentálne inštrumentálne učenie. J Neurosci 20: 7737 – 7742.
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) Zvýšená odpoveď na podmienenú odmenu vyvolanú intra-akumulovaným amfetamínom je potencovaná po senzibilizácii kokaínu. Psychofarmakológia (Berl) 142: 31 – 40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Opakované prerušované podávanie psychomotorických stimulačných liekov mení získavanie pavlovianskeho prístupu u potkanov: rozdielne účinky kokaínu, d-amfetamínu a 3,4-metyléndioxymetamfetamínu („extáza“) Biol Psychiatry 50: 137 – 143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Senzibilizácia reaktivity dopamínového neurónu stredného mozgu podporuje amfetamín. J Neurosci 22: 4654 – 4662.
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) ΔFosB reguluje chod kolesa. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Incentívna senzibilizácia pri predchádzajúcej expozícii amfetamínom: zvýšená cue-triggered „wanting“ pre odmenu sacharózy. J Neurosci 21: 7831 – 7840.
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Lézie dorsolaterálneho striatum zachovávajú očakávanú výslednú hodnotu, ale narúšajú tvorbu návykov v inštrumentálnom učení. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Podstatná úloha pre AFosB v nucleus accumbens pri účinku morfínu. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
;
