Indukcia DeltaFosB v podtypech Striatal Medium Spiny Neuron v reakcii na chronické farmakologické, emočné a optogenetické stimuly (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, Nugent A, Finkel E, Chaudhury D, Chandra R, Riberio E, Rabkin J, Mouzon E, Cachope R, Fandiť JF, Han MH, Dietz DM, Vlastné DW, Hurd YL, Vialou V, Nestler EJ.

zdroj

Katedra anatómie a neurobiológie, University of Maryland School of Medicine, Baltimore, Maryland 21201, Fishberg Department of Neuroscience a Friedman Brain Institute, Icahn School of Medicine na Mount Sinai, New York, New York 10029, Katedry psychiatrie a farmakológie a systémov Terapeutiká, Icahn School of Medicine na Mount Sinai, New York, New York 10029, Katedra psychiatrie, University of Texas Southwestern Medical Center, Dallas, Texas 75390, Katedra farmakológie a toxikológie a Výskumný ústav závislostí, Štátna univerzita v New Yorku v Buffalo, New York, New York 14214 a Národný inštitút pre výskum a vývoj v Recherche Médicale, U952, Centrum Národnej rady pre výskum, Unité Mixte de Recherche 7224, UPMC, Paríž, 75005, Francúzsko.

abstraktné

Transkripčný faktor, AFosB, je robustne a vytrvale indukovaný v striatu niekoľkými chronickými stimulmi, ako sú drogy zneužívania, antipsychotiká, prírodné odmeny a stres. Avšak len veľmi málo štúdií skúmalo stupeň indukcie AFosB v dvoch striatálnych stredných spinálnych neurónoch (MSN) subtypoch. Využívame fluorescenčné reportérové ​​BAC transgénne myši na vyhodnotenie indukcie AFosB v dopamínovom receptore 1 (D1) obohatenom a dopamínovom receptore 2 (D2) obohatenom MSN v ventrálnom striate, v jadre accumbens (NAc) a v jadre a v dorzálnom striate (dStr). ) po chronickom vystavení viacerým liekom, vrátane kokaínu, etanolu, A (9) -tetrahydrokanabinolu a opiátov; antipsychotické liečivo, haloperidol; obohatenie mladistvých; pitie sacharózy; obmedzenie kalórií; inhibítor spätného vychytávania serotonínu antidepresívum, fluoxetín; a sociálnu porážku. Naše zistenia ukazujú, že chronické vystavenie mnohým stimulom indukuje AFosB v selektívnom vzore MSN subtypu vo všetkých troch striatálnych oblastiach. Na preskúmanie indukcie indukcie AFOSB v striate, sprostredkovanej obvodom, používame optogenetiku na zvýšenie aktivity v limbických oblastiach mozgu, ktoré vysielajú synaptické vstupy do NAc; tieto oblasti zahŕňajú ventrálnu tegmentálnu oblasť a niekoľko glutamátergických aferentných oblastí: mediálny prefrontálny kortex, amygdala a ventrálny hipokampus. Tieto optogenetické stavy vedú k vysoko odlišným vzorcom indukcie AFosB v subtypoch MSN v NAc jadre a shell. Tieto zistenia spoločne vytvárajú selektívne vzorce indukcie AFosB v striatálnych MSN subtypoch ako odozvu na chronické stimuly a poskytujú nový pohľad na mechanizmy na úrovni obvodov indukcie AFosB v striate.

úvod

Chronické stimuly, vrátane návykových látok, antipsychotických liekov, stresu a prirodzených odmien, spôsobujú stabilnú akumuláciu AFosB, skráteného produktu \ t FosB gén, v striate (napr. Hope a kol., 1994; Hiroi a Graybiel, 1996; Hiroi a kol., 1997; Moratalla a kol., 1996; Perrotti a kol., 2004, 2008; Muller a Unterwald, 2005; McDaid a spol., 2006; Teegarden a Bale, 2007; Wallace a kol., 2008; Solinas a kol., 2009; Vialou a kol., 2010, 2011; Kaplan a kol., 2011). Táto akumulácia vedie k obojsmernej regulácii mnohých génov pomocou AFosB v tejto oblasti mozgu (McClung a Nestler, 2003; Renthal a kol., 2008, 2009; Vialou a kol., 2010; Robison a Nestler, 2011). Striatum je zložené hlavne (∼95%) GABAergic projekcia stredných ostnatých neurónov (MSN), ktoré sú segregované do dvoch podtypov na základe ich obohatenia mnohých génov, vrátane dopamínového receptora 1 (D1) alebo dopamínového receptora 2 (D2) (DXNUMX) (Gerfen, 1992; Graybiel, 2000; Lobo a kol., 2006; Heiman a kol., 2008) a ich rozdielnymi výstupmi do odlišných subkortikálnych štruktúr (Albin a kol., 1989; Gerfen, 1992; Kalivas a kol., 1993; Graybiel, 2000; Nicola, 2007; Smith a kol., 2013). V poslednej dobe sa vyskytuje množstvo správ, ktoré demonštrujú odlišné molekulové a funkčné úlohy týchto podtypov MSN vo ventrálnom striate (nukleus accumbens [NAc]) a dorzálnom striate (dStr) pri sprostredkovaní motivačného a motorického správania (Lobo a Nestler, 2011; Gittis a Kreitzer, 2012).

Predchádzajúce štúdie preukázali, že AFosB je indukovaný primárne v D1-MSN chronickou liečbou kokaínom alebo chronickým behom kolies, čo je forma prirodzenej odmeny (Moratalla a kol., 1996; Werme a spol., 2002; Lee et al., 2006), zatiaľ čo chronický obmedzujúci stres indukuje AFosB v obidvoch podtypoch MSN (Perrotti a kol., 2004). Ďalej, presvedčivý dôkaz z transgénnych línií špecifických pre bunkový typ alebo prenos génov sprostredkovaný vírusmi demonštruje, že indukcia AFosB v D1-MSN zvyšuje behaviorálnu a štrukturálnu plasticitu voči kokaínu, behaviorálne reakcie na morfín, beh kolesa, potravinovú odmenu a odolnosť voči chronickej sociálnej poruche zatiaľ čo indukcia AFosB v D2-MSN negatívne reguluje reakcie správania na beh kolesa (Kelz a kol., 1999; Werme a spol., 2002; Colby a kol., 2003; Olausson a kol., 2006; Zachariou a kol., 2006; Vialou a kol., 2010; Grueter a kol., 2013; Robison a kol., 2013).

Vzhľadom na kľúčovú úlohu pre AFosB pri regulácii týchto chronických motivačných stimulov, s výraznými účinkami v D1-MSN v porovnaní s D2-MSN, tu robíme komplexnú štúdiu vzorcov indukcie AFosB v subtypoch MSN niekoľkými chronickými stimulmi, vrátane chronickej expozície liečivám. chronická liečba antipsychotickým liekom, chronické vystavenie zmeneným environmentálnym a chuťovým stimulom, chronický stres sociálnej porážky a chronická liečba antidepresívom. Na pochopenie mechanizmov obvodov, ktoré riadia indukciu AFosB v striate pomocou niekoľkých aferentných limbických oblastí mozgu, používame optogenetické technológie na opakovanú aktiváciu bunkových telies v dopaminergných alebo glutamátergických aferentných mozgových oblastiach a skúmanie výslednej indukcie AFosB v subtypoch MSN. Naše výsledky poskytujú nový pohľad na indukciu AFosB v striatálnych D1-MSN a D2-MSN chronickými stimulmi a po prvýkrát demonštrujú indukciu indukovanú AFOSB v striate a v rámci selektívnych podtypov MSN.

Materiály a metódy

Zvieratá.

D1-GFP or D2-GFP hemizygotických myší (Gong a kol., 2003) na pozadí C57BL / 6 boli udržiavané na cykle 12 h light dark podľa chuti potravín a vody. Všetky štúdie sa uskutočnili v súlade s pokynmi, ktoré ustanovili Inštitucionálne výbory pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie na University of Maryland School of Medicine a Icahn School of Medicine na Mount Sinai. Pre všetky pokusy boli použité samce myší (vek 8 týždňov). Všetky myši sa perfundovali a mozgy sa odobrali počas popoludnia svetelného cyklu. Hemizygote D1-GFP a D2-GFP Ukázalo sa, že myši na pozadí C57BL / 6 alebo FVB / N sú ekvivalentné s myšami divokého typu s ohľadom na správanie, fyziológiu D1-MSNs a D2-MSN a vývoj MSN (Lobo a kol., 2006; Chan a kol., 2012; Nelson a kol., 2012). Okrem toho sú celkové modely indukcie AFosB pozorované v tejto štúdii porovnateľné s tými, ktoré sa pozorujú u zvierat divokého typu s nástrojmi selektívnymi pre nebunečné typy (napr. Perrotti a kol., 2004, 2008).

Liečba kokaínom.

D1-GFP (n = 4 na ošetrenie) a D2-GFP (n = 4 na ošetrenie) myši dostali 7 denne intraperitoneálne injekcie kokaínu (20 mg / kg) alebo 0.9% fyziologického roztoku v domácej klietke. V prípade injekcií 1 alebo 3 d kokaínu (20 mg / kg) dostali myši 6 alebo 4 d injekcií 0.9% fyziologického roztoku a potom 1 alebo 3 d injekcií kokaínu. Všetky myši boli perfundované 24 h po poslednej injekcii. Táto dávka kokaínu sa vybrala na základe predchádzajúcich štúdií (napr. Maze a kol., 2010).

Liečba haloperidolom.

D1-GFP (n = 3 alebo 4 na ošetrenie) a D2-GFP (n = 4 na liečbu) myši dostali haloperidol (2 mg / kg) v pitnej vode, pH 6.0 (Narayan a kol., 2007) alebo bežnej pitnej vody, pH 6.0, pre 3 týždňov (21 d). Myši boli perfundované v deň 22.

Liečba morfínom.

D2-GFP myši (n 4 alebo 5 na liečbu) boli krátko anestetizované izofluranom a dostali subkutánne implantáty morfínu (25 mg) alebo simulované pelety v deň 1 a deň 3, ako bolo opísané vyššie (Mazei-Robison a kol., 2011). Myši boli perfundované v deň 5.

Spracovanie etanolom.

D2-GFP myši (n 4 alebo 5 na liečbu) boli vystavené účinku 10% etanolu (EtOH), čo je dávka, o ktorej sa preukázalo, že C57BL / 6 pije (Yoneyama a kol., 2008). Myšiam bol podávaný test výberu dvoch fliaš na 10% EtOH (fľaša A) a voda (fľaša B), zatiaľ čo myši boli testované na fľašiach D2-GFP kontroly dostali vodu v oboch fľašiach (fľaša A a B) pre 10 d. Všetky myši, ktoré dostávali EtOH fľaše, vykazovali preferenciu pre EtOH, ako bolo vypočítané (100 × objem fľaše A / [objem fľaše A + objem fľaše B]). Myši, ktoré dostali 10% EtOH fľašu, spotrebovali podstatne viac EtOH v porovnaní s vodou, zatiaľ čo myši, ktoré dostali vodu v oboch fľašiach, nepreukázali žiadny rozdiel v spotrebe kvapaliny. Večer dňa 10 dostali všetky myši normálnu pitnú vodu a boli perfundované v deň 11.

A (9) -tetrahydrokanabinol (A (9) -THC) ošetrenie.

D2-GFP (n = 3 na ošetrenie) myši dostali intraperitoneálne injekcie A (9) -THC (10 mg / kg) alebo vehikulum (0.9% fyziologický roztok s 0.3% Tween) dvakrát denne pre 7 d (Perrotti a kol., 2008). Myši sa perfundovali 24 h po poslednej injekcii.

Samoregulácia kokaínu.

D2-GFP myši (n = 4 alebo 5 na liečbu) boli spočiatku vyškolení na to, aby stlačili 20 mg sacharózové pelety v pevnom pomere 1 (FR1) posilňovacieho plánu, kým sa nedosiahlo kritérium akvizície peliet 30 sacharózy spotrebovaných na 3 po sebe idúce dni testovania podľa štandardných postupov (Larson a kol., 2010). Myši, ktoré sa naučili pákový lis, boli chirurgicky implantované intravenóznym jugulárnym katétrom, aby sa umožnilo následné intravenózne podanie kokaínu. Jeden týždeň po chirurgickom zákroku boli myši zavedené do paradigmy samopodania počas denných sedení 2 h na FR1 programe posilňovania. Zariadenie na samo-podávanie (Med Associates) bolo naprogramované tak, že reakcia na aktívnej páke viedla k dodaniu kokaínu (cez 2.5 s) (0.5 mg / kg / infúzia na správny stlačenie páky), zatiaľ čo odpoveď na inaktívnu páku nemali žiadny naprogramovaný dôsledok. Myši samo-podávané kokaín na FR1 rozvrh v denných 2 h sedeniach, 5 d týždenne, pre 3 týždňov. D2-GFP myši, ktoré dostávali injekcie 0.9% fyziologického roztoku počas ekvivalentného časového obdobia, boli použité ako kontroly. Myši sa perfundovali 24 h po poslednom podaní kokaínu alebo fyziologického roztoku.

Samoregulácia heroínu.

Pred samopodaním heroínu \ t D2-GFP myši (n = 4 na ošetrenie) boli vyškolení na pákový lis na čokoládové pelety (BioServ, Dustless Precision Pellets) v siedmich denných sedeniach 1 h. Myši, ktoré sa naučili pákový lis, boli chirurgicky implantované intravenóznym jugulárnym katétrom, aby sa umožnilo následné intravenózne podanie heroínu. Jeden týždeň po chirurgickom zákroku boli myši zavedené do paradigmy samopodania počas denných sedení 3 h na programe FR1 posilnenia podľa štandardných postupov (Navarro a kol., 2001). Zariadenie samo-administrácie (Med Associates) bolo naprogramované tak, že reakcia na aktívnej páke viedla k dodaniu (cez 5 s) heroínu (30 μg / kg / injekcia; NIDA liekový dodávací program), zatiaľ čo odpoveď na neaktívny páka nemala naprogramovaný dôsledok. Zvieratám bol umožnený prístup k samotnému podávaniu heroínu pre 14 d. D2-GFP myši, ktoré dostávali injekcie 0.9% fyziologického roztoku počas ekvivalentného časového obdobia, boli použité ako kontroly. Myši sa perfundovali 24 h po poslednom podaní heroínu alebo fyziologického roztoku.

Obohatenie životného prostredia pre mladistvých.

D2-GFP (n = 4 na skupinu) myši boli odstavené do obohateného prostredia alebo normálnych podmienok ustajnenia v postnatálnom dni 21 (P21) použitím paradigmy prispôsobenej potkanom (Green et al., 2010). Obohatené prostredie sa skladalo z väčšej škrečkovej klietky s podstielkou enrich-o-cob (podstielka Andersons Laboratory) plnená obohacovacími zariadeniami, ktoré zahŕňali myšacie tunely, kopuľu a kolesá, lezecké gule, chaty (Bio Serv) a ďalšie hračky. Myši zostali v podmienkach ustajnenia pre 4 týždne až do P50 a potom boli perfundované.

Liečba sacharózou.

D2-GFP myši (n = 4 alebo 5 na liečbu) boli podrobené dvom testom na výber fľaše pre 10% sacharózy podobnej predchádzajúcej štúdii (Wallace a kol., 2008). Myšiam bola podaná 10% sacharóza (fľaša A) a voda (fľaša B), zatiaľ čo myši D2-GFP kontroly dostali vodu v oboch fľašiach pre 10 d. Všetky myši, ktoré dostávali fľaše sacharózy, vykazovali preferenciu pre sacharózu, ako bolo vypočítané (100 × objem fľaše A / objem fľaše A + objem fľaše B). Myši, ktoré dostávali 10% sacharózovú fľašu, spotrebovali podstatne viac sacharózy v porovnaní s vodou, zatiaľ čo myši prijímajúce vodu v oboch fľašiach nepreukázali žiadny rozdiel v spotrebe kvapaliny. Večer dňa 10 dostali všetky myši normálnu pitnú vodu a boli perfundované v deň 11.

Obmedzenie kalórií.

D2-GFP myši (n = 4 na genotyp) prešiel protokolom obmedzenia kalórií, v ktorom dostali 60% z podľa chuti kalórií denne (Vialou a kol., 2011) pre 10 d. D2-GFP kontrolné myši dostali plný prístup ku krmivu. Večer dňa 10 dostali všetky myši úplný prístup ku krmivu a boli perfundované v deň 11.

Sociálny porážkový stres.

D2-GFP myši (n = 4 alebo 5 na skupinu) podstúpili 10 d sociálneho porážkového stresu, ako bolo opísané vyššie (Berton a spol., 2006; Krishnan a kol., 2007). Myši boli vystavené agresívnym chovateľom CD1 v dôchodku pre 5 min vo veľkej škrečkovej klietke. Myši sa potom umiestnili na 24 h v rovnakej klietke na druhej strane perforovaného deliča, aby sa udržal zmyslový kontakt. Nasledujúci deň boli myši vystavené novej myši CD1 za rovnakých podmienok a puzdra. Toto sa opakovalo pre 10 d s novým CD1 každý deň. Kontrolné myši boli chované za podobných podmienok bez porážkového stresu. Myši boli testované na sociálnu interakciu v deň 11. Myši sa najprv testovali na čas strávený interakciou s novou komorou v otvorenom poli poľa bez ďalšej prítomnej myši (bez cieľa) a potom sa následne testovali na čas strávený interakciou s novou myšou CD1 (cieľ), ktorá sa nachádzala za komorou (Berton a spol., 2006; Krishnan a kol., 2007). Myši boli rozdelené do citlivých alebo pružných skupín na základe predtým opísaných parametrov (Krishnan a kol., 2007). To zahŕňalo celkový čas strávený s novou myšou a pomer interakcie: (čas strávený s cieľom / časom stráveným bez cieľa) × 100. Ukázalo sa, že toto opatrenie spoľahlivo identifikuje citlivé a pružné skupiny a je vysoko korelované s inými rozdielmi v správaní (Krishnan a kol., 2007). Všetky myši boli perfundované 24 h po sociálnom interakčnom teste (48 h po poslednej epizóde sociálnej porážky).

Liečba fluoxetínom.

D2-GFP myši (n 3 alebo 4 na skupinu) dostávali 14 denne intraperitoneálne injekcie fluoxetínu (20 mg / kg) alebo vehikula (0.9% fyziologický roztok s 10% cyklodextrínom) (Berton a spol., 2006). Myši sa perfundovali 24 h po poslednej injekcii.

Stereotaxická chirurgia.

D2-GFP myši sa anestetizovali ketamínom (100 mg / kg) / xylazínom (10 mg / kg), umiestnili do stereotaxického prístroja pre malé zvieratá a ich povrch lebky sa exponoval. Injekčné ihly s objemom tridsať tri gauge sa použili na jednostrannú infúziu 0.5-1 μl, v množstve 0.1 μl za minútu, obojstranne do ventrálnej tegmentálnej oblasti (VTA), mediálneho prefrontálneho kortexu (mPFC), amygdaly alebo ventrálneho hipokampu (mPFC). vHippo). AAV [adeno-asociovaný vírus] -hSyn-ChR2 [channelrhodopsin 2] -EYFP alebo AAV-hSyn-EYFP bol infundovaný do VTA D2-GFP myši (n = 5 na skupinu) pri stereotaxických súradniciach (anterior-posterior, −3.3 mm; laterálne-mediálne, 0.5 mm; dorzálne-ventrálne, −4.4 mm, uhol 0 °). Potom nasledovala dvojstranná kanyla (26-gauge) s dĺžkou 3.9 mm, implantácia cez VTA (anterior-posterior, −3.3 mm; laterálna-mediálna, 0.5 mm; dorzálna-ventrálna, −3.7 mm) (Koo a kol., 2012; Chaudhury a kol., 2013). Do mPFC boli injikované AAV-CaMKII-ChR2-mCherry alebo AAV-CaMKII-mCherry (n = 4 alebo 5 na skupinu), amygdala (n = 3 alebo 4 na skupinu) alebo vHippo (n = 3 alebo 4 na skupinu) D2-GFP myši nasledované implantáciou chronických implantabilných optických vlákien 105 μm (Sparta et al., 2011). Súradnice boli nasledovné: mPFC (infralimbický bol zacielený, ale pozorovali sme prelievanie vírusu do prelimbických oblastí: anterior - posterior, 1.7 mm; laterálny - medián, 0.75 mm; dorzálny - ventrálny, - 2.5 mm, uhol 15 °) a optické vlákno (dorzálna-ventrálna, −2.1 mm); amygdala (bola zacielená bazolaterálna amygdala, ale pozorovali sme prelievanie vírusu do centrálneho jadra amygdaly; anterior-posterior, −1.6 mm; laterálne-mediálne, 3.1 mm; dorzálne ventrálne, −4.9 mm, 0 ° uhol) a optické vlákno (dorzálne-ventrálne, −4.9 mm); vHippo (cielené bolo ventrálne subikulum, ale pozorovali sme prenikanie vírusu do iných oblastí ventrálneho hipokampu; predné a zadné, −3.9 mm; laterálne-mediálne, 3.0 mm; (dorzálna-ventrálna, −5.0 mm).

Optogenetické stavy.

pre in vivo optická kontrola VTA neuronálneho pálenia, 200 μm jadro optického vlákna patch kábel bol modifikovaný pre pripojenie k kanyle. Keď bolo vlákno pripevnené kanyle, hrot vlákna predĺžil ∼0.5 mm za kanylu (Lobo a kol., 2010; Chaudhury a kol., 2013). pre in vivo optická kontrola mPFC, amygdala a vHippo neuronálneho pálenia, 62.5 μm delený vláknitý patch kábel bol pripojený k implantabilným vláknam na upevnenie na hlave (Sparta a kol., 2011). Optické vlákna boli pripojené cez FC / PC adaptér k modrej laserovej dióde 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473-050-M) a pomocou stimulátora (Agilent, 33220A) boli generované svetelné impulzy. Pre VTA, modré svetlo (473 nm) fázové impulzy, 20 Hz pre 40 ms (Chaudhury a kol., 2013), boli dodané pre 10 min denne cez 5 d. Pre mPFC, amygdala a vHippo sa pre 473 min. Pre 20 d dodali pulzy s modrým svetlom (30 nm), 10 Hz pre 5 s. V domácej klietke sa vyskytlo dodávanie svetla a všetky myši boli po poslednej svetelnej stimulácii perfundované 24 h.

In vitro elektrofyziológia náplasti.

Záznamy z celých buniek sa získali z VTA dopamínových neurónov alebo mPFC glutamátergných neurónov v akútnych rezoch mozgu z myší, ktorým sa injikovali vírusy uvedené vyššie. Záznamy rezov sa uskutočnili na myšiach s č in vivo stimulácie, ale s 1 d stimulácie rezu (1 d) alebo 4 d in vivo stimulácia a 1 d stimulácie rezu (5 d). Na minimalizáciu stresu a na získanie zdravých rezov sa myši anestetizovali bezprostredne po tom, čo boli privedené do oblasti elektrofyziológie a perfundované pre 40-60 s ľadovo studeným aCSF, ktorý obsahoval 128 mm NaCl, 3 mm KCl, 1.25 mm NaH.2PO4, 10 mm d-glukóza, 24 mm NaHCO3, 2 mm CaCl2a 2 mm MgCl2 (okysličené s 95% O2 a 5% CO2, pH 7.4, 295 – 305 mOsm). Akútne rezy mozgu obsahujúce mPFC alebo VTA boli narezané s použitím mikroskopického zariadenia (Ted Pella) v studenej sacharóze-aCSF, ktorý bol získaný úplnou náhradou NaCl s 254 mm sacharózou a nasýteným 95% O2 a 5% CO2, Rezy sa udržiavali v záchytnej komore s aCSF pre 1 h pri 37 ° C. Patchové pipety (3 – 5 MΩ) pre celobunkový prúd boli naplnené vnútorným roztokom obsahujúcim: 115 mm glukonát draselný, 20 mm KCl, 1.5 mm MgCl2, 10 mm fosfokreatín, 10 mm HEPES, 2 mm horčíkový ATP a 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Záznamy v celých bunkách sa uskutočnili s použitím aCSF pri 34 ° C (prietok = 2.5 ml / min). Vlaky s modrým svetlom (20 Hz pre mPFC alebo fázové 20 Hz, 40 ms pre VTA) boli generované stimulátorom pripojeným cez adaptér FC / PC na modrú laserovú diódu 473 nm (OEM) a dodané do rezov mPFC a VTA cez 200 μm optické vlákno. Experimenty s prúdovou svorkou sa uskutočnili s použitím zosilňovača Multiclamp 700B a zber dát sa uskutočnil v pClamp 10 (Molecular Devices). Rezistencia v sérii bola monitorovaná počas experimentov a membránové prúdy a napätia boli filtrované pri 3 kHz (Besselov filter).

Imunohistochémia.

Myši sa anestetizovali chloralhydrátom a premývali s 0.1 m PBS nasledovaným 4% paraformaldehydom v PBS. Mozgy boli postfixované v 4% paraformaldehyde cez noc a potom cyropreservované v 30% sacharóze. Mozgy sa rozdelili na kryostat (Leica) pri 35 μm do PBS s 0.1% azidom sodným. Pre imunohistochémiu boli rezy blokované v 3% normálnom oslovom sére s 0.01% Triton-X v PBS pre 1 h na trepačke pri teplote miestnosti. Rezy sa potom inkubovali v primárnych protilátkach v bloku cez noc na trepačke pri teplote miestnosti. Použité protilátky boli nasledujúce: králičie anti-FosB (1: 2000, katalóg # sc-48, Santa Cruz Biotechnology), myšacia anti-NeuN (1: 1000, katalóg #MAB377, Millipore), kurací anti-GFP (1: 5000 , katalóg # 10-20, Aves) a králičie anti-CREB (väzbový proteín cAMP responzívneho elementu; 1: 1000, katalóg # 06-863, Millipore). Nasledujúci deň sa rezy prepláchli v PBS, po čom nasledovala inkubácia 1 h v sekundárnych protilátkach: donkey anti-králičí Cy3, oslový anti-myšací Cy5 a donkey anti-chicken DyLight-488 alebo Alexa-488 (Jackson ImmunoResearch Laboratories). Pre imunohistochémiu mCherry a tyrozínhydroxylázy sa uskutočnili experimenty, ako bolo opísané vyššie (Lobo a kol., 2010; Mazei-Robison a kol., 2011). Rezy sa prepláchli v PBS, umiestnili na sklíčka a zakryli.

Zobrazovanie a počítanie buniek.

Imunofluorescencia sa zobrazila na Zeiss Axioscope alebo konfokálnom mikroskope Olympus Bx61. Počítanie buniek sa uskutočnilo pomocou softvéru ImageJ. Snímky odoberajúce bregma 1.42 – 1.1 NAc (jadro a škrupina) a chrbtové striatum sa odobrali z častí mozgu / zvieraťa 2 alebo 3 (pozri Obr. 1A). Počet buniek 400 – 500 sa spočítal na každú oblasť mozgu na myšiach pomocou obrázkov 250 μm × 250 μm. Bunky sa spočítali pomocou softvéru ImageJ podobného predchádzajúcej štúdii (Lobo a kol., 2010). Približne 400 – 500 celkové NeuN bunky boli spočítané na mozgovú oblasť na myš a potom počet GFP+, GFP+: ΔFosB+, GFP-a GFP-: ΔFosB+ bunky sa spočítali v každej oblasti. Údaje boli kvantifikované nasledovne: (GFP+: ΔFosB+ neuróny × 100%) / (celkový GFP+ neurónov) a (GFP)-: ΔFosB+ neuróny × 100%) / (celkový GFP- neuróny). Štatistické analýzy sa uskutočňovali použitím softvéru GraphPad Prism. Dvojcestné ANOVA nasledované Bonferroniho post testami boli použité pre všetky analýzy počítania buniek.

Obrázok 1.  

Chronický kokaín selektívne indukuje AFosB v D1-MSN v striatálnych oblastiach. ANa počítanie buniek sa použili striatálne rezy z bregma + 1.42 do + 1.10. Obrázok a D2-GFP striatálny rez ukazuje tri študované striatálne oblasti: NAc jadro, ...

výsledky

AFosB je diferenciálne indukovaný v D1-MSN a D2-MSN po opakovanej expozícii kokaínu oproti haloperidolu.

Najprv sme skúmali indukciu AFosB v subtypoch MSN v D1-GFP a D2-GFP chronických kokaínových stavoch, u ktorých sa preukázalo, že prednostne indukujú proteín AFosB v D1-MSN (Moratalla a kol., 1996). D1-GFP a D2-GFP BAC transgénne myši, ktoré exprimujú zvýšený zelený fluorescenčný proteín pod D1 alebo D2 receptorovým génom (Obr. 1A), dostali intraperitoneálne injekcie kokaínu (20 mg / kg) alebo fyziologického roztoku pre 7 d a po poslednom podaní injekcie sa odobrali 24 h (Obr. 1B). Potom sme vykonali imunohistochémiu na rezoch mozgu s použitím protilátok proti NeuN, GFP alebo FosB a zobrazených a počítaných buniek v NAc jadre, NAc shell a dStr (Obr. 1A,C). Zatiaľ čo anti-FosB protilátka rozpoznáva FosB a AFosB plnej dĺžky, mnohé štúdie využívajúce Western blotting alebo imunohistochémiu potvrdili, že AFosB je jediný detegovateľný druh prítomný v 24 h odberovom čase (napr. Perrotti a kol., 2008). Preto sme použili 24 h alebo dlhší časový bod na zhromaždenie mozgov po všetkých podmienkach v tejto štúdii, aby sme zaistili, že detegujeme len AFosB. Pretože striatálne MSNs obsahujú -95% všetkých neurónov v striate, použili sme imunoznačenie NeuN na identifikáciu GFP- neurónov, ktoré sú obohatené v opačnom subtype MSN (tj D2-MSNs v D1-GFP myši a D1-MSN v D2-GFP myši). Našli sme to D1-GFP myši liečené kokaínom vykazujú významnú indukciu AFosB v GFP+/ Neun+ neuróny (D1-MSN) v NAc jadre, NAc shell a dStr, zatiaľ čo GFP-/ Neun+ bunky (D2-MSN) nevykazovali významnú indukciu AFosB vo všetkých striatálnych oblastiach (Obr. 1D): dvojcestný ANOVA, NAc jadro: liek × bunkový typ F(1,12) = 16.41, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: liek × bunkový typ F(1,12) = 12.41, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.001; dStr: liek × typ bunky F(1,12) = 12.07, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01. V súlade s týmito zisteniami sme pozorovali v roku D2-GFP Myši nemali významnú indukciu AFosB v GFP+/ Neun+ neurónov (D2-MSN), ale významnú indukciu AFosB v GFP-/ Neun+ (D1-MSN) vo všetkých striatálnych oblastiach po liečbe kokaínom (\ tObr. 1D): dvojcestný ANOVA, NAc jadro: liek × bunkový typ F(1,12) = 15.76, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.0001; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,12) = 20.33, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; dStr: liek × typ bunky: F(1,12) = 35.96, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.001. Skúmali sme kinetiku indukcie ΔFosB v MSN po 1, 3 alebo 7 d injekciách kokaínu (20 mg / kg, ip). Pozorovali sme významnú indukciu ΔFosB v D1-MSN s 3 alebo 7 d liečbou kokaínom v porovnaní s liečbou soľným roztokom vo všetkých striatálnych oblastiach (Obr. 1F): reprezentatívny graf z dStr; dvojcestná ANOVA, typ bunky × deň F(2,13) = 17.87, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01, p <0.001. To je v súlade s časovým priebehom akumulácie ΔFosB v striate, ktorý bol predtým pozorovaný metódou Western blot (Hope a kol., 1994) a potvrdzuje selektívnu indukciu AFosB výhradne v D1-MSN počas priebehu vystavenia kokaínu.

Ďalej sme skúmali indukciu AFosB imunohistochémiou v subtypoch MSN po chronickej expozícii haloperidolu (Obr. 2). Predchádzajúca práca nepriamo naznačila, že chronický haloperidol môže indukovať AFosB prednostne v D2-MSN (Hiroi a Graybiel, 1996; Atkins a kol., 1999), hoci toto nebolo doteraz priamo skúmané. D1-GFP a D2-GFP myši dostali haloperidol (2 mg / kg) v pitnej vode, pH 6.0, zatiaľ čo u myší D1-GFP a D2-GFP kontrolné myši dostávali pravidelnú pitnú vodu, pH 6.0, pre 21 d (3 týždňov) a mozgy sa odobrali v deň 22 (Obr. 2A). Ako v prípade kokaínu, aj my vieme, že celá imunoreaktivita podobná FosB v striate v tomto časovom bode predstavuje AFosB, nie FosB plnej dĺžky (Atkins a kol., 1999). Našli sme to D1-GFP myši, ktoré dostávali haloperidol, nevykazovali žiadnu významnú indukciu AFosB v GFP+/ Neun+ neuróny (D1-MSN) v NAc jadre, NAc shell alebo dStr; v GFP sa však pozoroval významný nárast AFosB-/ Neun+ neurónov (D2-MSN) vo všetkých striatálnych oblastiach (Obr. 2B,C): dvojcestná ANOVA, NAc jadro: liek × typ bunky: F(1,10) = 23.29, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: droga: droga × typ bunky: F(1,10) = 30.14, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; dStr: liek × typ bunky: F(1,10) = 37.63, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.0001. Toto bolo potvrdené vyšetrením D2-GFP myši: pozorovali sme významnú indukciu AFosB v GFP+/ Neun+ neurónov (D2-MSN) vo všetkých troch striatálnych oblastiach, ale žiadna významná zmena v AFosB v GFP-/ Neun+ (D1-MSN) po liečbe haloperidolom (\ tObr. 2B,C): dvojcestná ANOVA, NAc jadro: liek × typ bunky: F(1,12) = 24.30, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.05; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,12) = 26.07, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.001; dStr: liek × typ bunky: F(1,12) = 21.36, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01. Vzhľadom na to, že sme pozorovali podobný vzorec indukcie ΔFosB v D1-MSN opakovanou expozíciou kokaínu u oboch D1-GFP (GFP+/ Neun+) a D2-GFP (GFP-/ Neun+) a opakovaným haloperidolom v D2-MSNs in D1-GFP (GFP-/ Neun+) a D2-GFP (GFP+/ Neun+) myši, zvyšok našich experimentov sa použil D2-GFP na indukciu indukcie AFosB v D1-MSN (GFP)-/ Neun+) a D2-MSN (GFP)+/ Neun+) po iných chronických stimuloch.

Obrázok 2.  

Chronický haloperidol selektívne indukuje AFosB v D2-MSN v striatálnych oblastiach. AČasový priebeh 21 d liečby haloperidolom (2 mg / kg, v pitnej vode) alebo vodou. B, Imunohistochémia NAc shell z. \ T D1-GFP a D2-GFP myši po haloperidole ...

Ako kontrola sme skúmali hladiny expresie CREB v kokaínových a haloperidolových podmienkach, aby sme zistili, či by naše nálezy mohli byť zovšeobecnené na iné transkripčné faktory (Obr. 3). Nepozorovali sme signifikantný rozdiel v expresii CREB medzi kontrolami a myšami liečenými liečivom. Ďalej sme nepozorovali žiadny rozdiel v hladinách CREB medzi D2-MSN a D1-MSN (Obr. 3B,C).

Obrázok 3.  

Chronický kokaín alebo haloperidol neindukujú CREB v subtypoch MSN. A, Imunofarbenie pre CREB a GFP v striate D2-GFP po chronickom kokaíne alebo chronickom haloperidole (Obr. 1 a and22 legendy pre protidrogovú liečbu). Stupnica, 50 μm. ...

Rozlišujúce vzory indukcie AFosB v subtypoch MSN liekmi zneužívania

Pretože predchádzajúce štúdie preukázali, že iné lieky na zneužívanie môžu silne indukovať AFosB v striatálnych subregiónoch (Perrotti a kol., 2008) sme skúmali AFosB v MSN subtypoch po chronickom vystavení opiátom, EtOH alebo A (9) -THC. Najprv sme skúmali, či chronická expozícia morfínu indukuje AFosB v špecifických podtypoch MSN naprieč striatálnymi oblasťami. D2-GFP myši dostávali dva subkutánne implantáty simulovanej alebo morfínovej (25 mg) pelety v dňoch 1 a 3 a mozgy boli odobrané v deň 5 (Obr. 4A), keď je indukovaný AFosB, ale nie FosB (Zachariou a kol., 2006). V nápadnom kontraste s kokaínom oba podtypy MSN vykazovali významný (a približne porovnateľný) nárast AFosB v NAc jadre, NAc shell a dStr v morfínovej skupine v porovnaní so simulovanými kontrolami, bez diferenciálnej indukcie bunkového podtypu AFosB pozorovaného vo všetkých striatálnych regióny (Obr. 4A): obojsmerná ANOVA; NAc jadro: liečivo F(1,14) = 75.01, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); Škrupina NAc: droga F(1,14) = 62.87, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (Dl-MSN); dStr: droga F(1,14) = 60.11, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Obrázok 4.  

Lieky zneužívania indukujú AFosB v subtypoch MSN v striatálnych oblastiach. AChronická liečba morfínom (25 mg pelety v dňoch 1 a 3) v. \ T D2-GFP Myši majú za následok významnú indukciu AFosB v obidvoch podtypoch MSN v NAc jadre, NAc shell a dStr. ...

Ďalej sme skúmali model indukcie AFosB v subtypoch MSN po chronickej expozícii EtOH. D2-GFP myšiam bol podávaný test výberu dvoch fliaš na 10% EtOH (fľaša A) a voda (fľaša B), zatiaľ čo myši D2-GFP Kontroly dostávali vodu v obidvoch fľašiach (fľaše A a B), pre 10 d a mozgy boli odobraté v deň 11 (Obr. 4B). Myši, ktoré dostali fľašu 10% EtOH, spotrebovali podstatne viac EtOH v porovnaní s vodou, zatiaľ čo myši prijímajúce vodu v oboch fľašiach nepreukázali žiadny rozdiel v spotrebe kvapaliny (Obr. 4B): preferencia pre skupinu s fľašou vody: 50.00 ± 4.551%, skupina EtOH: 84.44 ± 8.511%; Študentské t test p <0.05. Chronické podávanie EtOH viedlo k významnej indukcii ΔFosB selektívne v D1-MSN v jadre NAc, v plášti NAc a v dStr bez zmeny v D2-MSN (Obr. 4B): dvojcestná ANOVA, NAc jadro: liek × typ bunky: F(1,14) = 24.58, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.05; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,14) = 36.51, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01; dStr: liek × typ bunky: F(1,14) = 29.03, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01.

D2-GFP myši boli tiež liečené A (9) -THC (10 mg / kg, ip) dvakrát denne po dobu 7 d a po poslednom podaní injekcie boli odobrané mozgy 24 h. Podobne ako v podmienkach kokaínu a EtOH sme pozorovali signifikantné zvýšenie AFosB selektívne v D1-MSN vo všetkých striatálnych oblastiach u myší, ktoré dostávali chronický A (9) -THC (Obr. 3E): dvojcestný ANOVA, NAc jadro: liek × bunkový typ F(1,8) = 26.37, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,8) = 44.49, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.001; dStr: liek × typ bunky F(1,8) = 29.30, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01.

Ďalej sme skúmali, či pozorovaný vzorec indukcie AFosB v subtypoch MSN podaním skúmaného kokaínu alebo opiátov v skúmaných prípadoch sa vyskytuje v podmienených paradigmách, v ktorých sa myšiam liek podáva samostatne. Najprv, D2-GFP myši boli vyškolené na podávanie kokaínu (0.5 mg / kg / infúzia) v režime FR1 po dobu 2 ha počas 3 týždňov a po poslednom podaní infúzie boli odobraté mozgy 24 hObr. 4D), keď je známe, že AFosB, ale nie FosB, je indukovaný (Larson a kol., 2010). Myši strávili podstatne viac času stlačením aktívnej a neaktívnej pákyObr. 4D; Študentské t test p <0.01). Priemerná denná dávka kokaínu bola 19.1 mg / kg intravenózne (Obr. 4D), podobne ako pri vyššie uvedenej intraperitoneálnej dávke 20 mg / kg (\ tObr. 1). Rovnako ako pri nesúvislej expozícii kokaínu (Obr. 1), zistili sme, že samopodanie kokaínu spôsobilo významnú indukciu AFosB len v D1-MSN vo všetkých striatálnych oblastiach v porovnaní s expozíciou fyziologickému roztoku (Obr. 4D): dvojcestný ANOVA, NAc jadro: liek × bunkový typ F(1,14) = 21.75, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,14) = 26.52, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.01; dStr: liek × typ bunky F(1,14) = 33.68, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.001. Podobne, podobne ako pri nepretržitom vystavení účinkom opiátov (morfínu) (Obr. 4A), zistili sme to D2-GFP myši, ktoré si sami podali heroín (30 μg / kg na infúziu), v programe FR1 3 ha deň počas 2 týždňov skúmali 24 h po poslednej expozícii lieku, vykazovali signifikantnú indukciu AFosB v oboch D2-MSN a D1-MSNs vo všetkých striatálnych regióny (Obr. 4E): dvojcestná ANOVA, NAc jadro: liečivo F(1,12) = 68.88, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); Škrupina NAc: droga F(1,12) = 80.08, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (Dl-MSN); dStr: droga F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroniho po teste: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Priemerná denná dávka heroínu bola 0.459 mg / kg a myši strávili výrazne viac času stlačením páky aktívna verzus neaktívna (Studentova t test p <0.05) (Obr. 4E).

Obohatenie životného prostredia a chuťové stimuly indukujú AFosB v D1-MSN aj D2-MSN.

Keďže predchádzajúce štúdie preukázali, že prirodzené odmeny indukujú AFosB v striatálnych oblastiach (Werme a spol., 2002; Teegarden a Bale, 2007; Wallace a kol., 2008; Solinas a kol., 2009; Vialou a kol., 2011), s indukciou selektívnou pre koleso D1-MSN (Werme a spol., 2002) sme skúmali, či indukcia inými prirodzenými odmenami preukázala bunkovú špecificitu. Najprv sme použili paradigmu obohatenia mladistvých, v ktorej D2-GFP myši boli chované v obohatenom prostredí od odstavenia (3 týždňov) počas obdobia 4 týždňa (Obr. 5A). Ukázalo sa, že tento prístup indukoval AFosB v myšacích NAc a dStr (Solinas a kol., 2009; Lehmann a Herkenham, 2011). V porovnaní s normálnymi podmienkami bývania obohatené prostredie významne zvýšilo AFosB vo všetkých striatálnych oblastiach, ale neurobilo tak v bunkovo ​​špecifickom spôsobe, s porovnateľnou indukciou pozorovanou v D1-MSN a D2-MSN (Obr. 5A): dvojcestné ANOVA, NAc jadro: prostredie F(1,12) = 89.13, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Plášť NAc: prostredie F(1,12) = 80.50, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: prostredie F(1,12) = 56.42, p <0.01, Bonferroniho po teste: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Obrázok 5.  

Obohatenie životného prostredia a chuťové stimuly indukujú AFosB v obidvoch podtypoch MSN. A, D2-GFP myši, ktoré boli umiestnené v obohatenom prostredí začínajúcom na P21 počas 4 týždňov, vykazujú indukciu AFosB v obidvoch podtypoch MSN naprieč všetkými striatálnymi ...

Ďalej sme skúmali expresiu AFosB v subtypoch MSN po chronických chutných stimuloch. Najprv sme testovali účinky chronického pitia sacharózy, o ktorých sa dokázalo, že indukuje AFosB u potkaních NAc (Wallace a kol., 2008). D2-GFP myšiam bol podávaný test voľby dvoch fliaš na 10% sacharózu (fľaša A) a vodu (fľaša B), zatiaľ čo myši boli testované na fľašiach D2-GFP Kontroly dostávali vodu v obidvoch fľašiach (fľaša A a B) pre 10 d a mozgy boli odobraté v deň 11 (Obr. 5B). Myši, ktoré dostali 10% sacharózy spotrebovali významne viac sacharózy, zatiaľ čo myši, ktoré dostávali vodu v oboch fľašiach, nepreukázali žiadny rozdiel v spotrebe kvapaliny (Obr. 5B): preferencia pre fľašu A, voda: 50.00 ± 4.749%, sacharóza: 89.66 ± 4.473%; Študentské t test p <0.001. Zistili sme, že chronická spotreba sacharózy indukovala ΔFosB v jadre NAc, škrupine NAc a dStr a že k tomu došlo v obidvoch podtypoch MSN (Obr. 5B): dvojcestné ANOVA, NAc jadro: liečba F(1,12) = 76.15 p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Škrupina NAc: ošetrenie F(1,12) = 63.35, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: liečba F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Nakoniec sme skúmali expresiu AFosB v subtypoch MSN po obmedzení kalórií, pretože tento stav, ktorý zvyšuje lokomotorickú aktivitu a motivačný stav, predtým dokázal, že zvyšuje hladiny AFosB u myší NAc (Vialou a kol., 2011). D2-GFP myši prešli protokolom obmedzeným na kalórie, v ktorom dostali 60% podľa chuti kalórií denne pre 10 d a mozgy boli zhromaždené v deň 11 (Obr. 5C). Obmedzenie kalórií zvýšilo hladiny AFosB v NAc jadre a NAc škrupine, ako bolo predtým preukázané (Vialou a kol., 2011) a tiež zvýšené hladiny AFosB v dStr. V D1-MSNs sme však nepozorovali žiadnu diferenciálnu indukciu oproti D2-MSN (Obr. 5C): dvojcestné ANOVA, NAc jadro: liečba F(1,12) = 67.94 p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); Škrupina NAc: ošetrenie F(1,12) = 67.84, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: liečba F(1,12) = 82.70, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Chronický sociálny porážkový stres a antidepresívna liečba spôsobujú diferenciálnu indukciu AFosB v subtypoch MSN

Predtým sme preukázali, že AFosB je zvýšený u NAc myší po chronickom strese zo sociálnej porážky (Vialou a kol., 2010). Hoci táto indukcia bola pozorovaná u oboch citlivých myší (u tých, ktoré vykazujú škodlivé následky stresu), ako aj u myší, ktoré sú odolné (tie, ktoré uniknú väčšine týchto škodlivých účinkov), indukcia AFosB bola väčšia v pružnej podskupine a bola preukázaná priamo sprostredkovať stav odolnosti. V tejto štúdii sme zistili výraznú bunkovú špecificitu pre indukciu AFosB v týchto dvoch fenotypových skupinách. D2-GFP myši boli vystavené 10 d stresu sociálnej porážky a rozdelené do citlivých a pružných populácií na základe miery sociálnej interakcie (Obr. 6A), čo vysoko koreluje s inými príznakmi správania (Krishnan a kol., 2007). Myši, u ktorých sa vyvinulo citlivé správanie po sociálnom porážkovom strese, vykazovali významnú indukciu AFosB v D2-MSN v NAc jadre, NAc shell a dStr v porovnaní s kontrolnými a rezistentnými myšami, bez indukcie v D1-MSN. V nápadnom kontraste vykazovali pružné myši významnú indukciu AFosB v D1-MSN vo všetkých striatálnych oblastiach v porovnaní s vnímavými a kontrolnými myšami, bez indukcie v D2-MSN (Obr. 6A; dvojcestný ANOVA, NAc jadro: skupina × bunkový typ F(1,20) = 20.11, p <0.05, Bonferroniho po teste: D2-MSN / citlivé p <0.05, D1-MSN / pružný p <0.05; Plášť NAc: skupina × typ bunky F(1,20) = 27.79, p <0.01, Bonferroniho po teste: D2-MSN / citlivé p <0.001, D1-MSN / pružný p <0.01; dStr: skupina × typ bunky F(1,20) = 19.76, p <0.01, Bonferroniho po teste: D2-MSN / citlivé p <0.05, D1-MSN / pružný p <0.01).

Obrázok 6.  

Chronický stres sociálnych porúch a chronický fluoxetín spôsobujú indukciu AFosB v odlišných podtypoch MSN v striate. A, D2-GFP , ktoré sú citlivé na priebeh sociálneho deficitu 10 d, vykazujú indukciu AFosB v D2-MSNs vo všetkých striatálnych ...

Chronická liečba antidepresívom SSRI, fluoxetínom, zvracia správanie podobné depresii, ktoré sa prejavuje u citlivých myší po chronickom strese zo sociálnej porážky (Berton a spol., 2006). Okrem toho takáto liečba indukuje ΔFosB v NAc vnímavých aj kontrolných myší a ukázali sme, že takáto indukcia je nevyhnutná pre blahodárne účinky fluoxetínu na správanie (Vialou a kol., 2010). Skúmali sme teda bunkovú špecificitu indukcie AFosB po chronickom podaní fluoxetínu. D2-GFP myši dostávali fluoxetín (20 mg / kg, ip) pre 14 d a mozgy sa odobrali v deň 15 (Obr. 6B). Pozorovali sme signifikantnú indukciu AFosB v D1-MSN, ale nie v D2-MSNs, u myší liečených fluoxetínom v porovnaní s kontrolami s vehikulom (Obr. 6B; dvojcestný ANOVA, NAc jadro: liek × bunkový typ F(1,10) = 14.59, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: liek × typ bunky: F(1,10) = 26.14, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; dStr: liek × typ bunky F(1,10) = 8.19, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.001).

In vivo optogenetická manipulácia NAc aferentných mozgových oblastí spôsobuje odlišné vzory indukcie AFosB v striatálnych oblastiach a podtypoch MSN

Vzhľadom na to, že dopaminergné a glutamátergické aferentné vstupy pre NAc môžu uľahčiť hľadanie odmeny a zmeniť správanie podobné depresii (Tsai a kol., 2009; Covington a kol., 2010; Adamantidis a kol., 2011; Witten a kol., 2011; Britt a kol., 2012; Lammel a kol., 2012; Stuber a kol., 2012; Chaudhury a kol., 2013; Kumar a kol., 2013; Tye a kol., 2013), sme skúmali indukciu AFosB v striatálnych MSN subtypoch po manipulácii aktivity niekoľkých kľúčových aferentných oblastí mozgu. Vírusovo exprimovali ChR2 v každej z niekoľkých oblastí a aktivovali sme ich modrým svetlom (473 nm), ako bolo opísané vyššie (Gradinaru a kol., 2010; Yizhar a kol., 2011). Pretože nedávna štúdia ukázala, že fázová stimulácia modrým svetlom po expresii ChR2, ktorá nie je selektívna pre bunky, vo VTA viedla k rovnakému fenotypu správania ako selektívna fázová stimulácia VTA dopamínových neurónov selektívnou ChR2 (Chaudhury a kol., 2013), sme vyjadrili ChR2 pomocou AAV-hsyn-ChR2-EYFP vo VTA D2-GFP myši; kontrolným myšiam bol injikovaný AAV-hsyn-EYFP. Rezy VTA boli koimunologicky zafarbené tyrozínhydroxylázou a GFP na vizualizáciu expresie ChR2-EYFP (Obr. 7C). D2-GFP myši exprimujúce samotný ChR2-EFYP alebo EYFP vo VTA dostali 5 d 10 min fázovej stimulácie modrého svetla, ako bolo opísané vyššie (Koo a kol., 2012; Chaudhury a kol., 2013) (Obr. 7A), a mozgy sa odobrali 24 h po poslednej stimulácii. Nedošlo k desenzibilizácii schopnosti ChR2 aktivovať VTA dopamínové neuróny po 5 d stimulácie (Obr. 7B). Zistili sme, že opakovaná fázová stimulácia VTA neurónov exprimujúcich ChR2-EYFP zvyšuje AFosB v oboch MSN subtypoch v NAc jadre, ale len v D1-MSN v NAc shell (Obr. 7C; dvojcestné ANOVA, NAc jadro: optogenetické stimuly F(1,16) = 51.97, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.001; (oba podtypy MSN) Oblasť NAc: optogenetické stimuly × typ bunky: F(1,16) = 13.82, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01). Nepozorovali sme žiadnu indukciu ΔFosB v dStr po fázovej stimulácii modrým svetlom na ChR2-EYFP exprimujúci VTA v porovnaní s kontrolami EYFP. Tieto výsledky by sa mali interpretovať opatrne, pretože sme sa selektívne nezamerali na dopamínové neuróny VTA kvôli optickej stimulácii a nedávne štúdie preukázali nedopaminergické projekčné neuróny vo VTA, ako aj značnú heterogenitu VTA, čo môže viesť k odlišným behaviorálnym reakciám v závislosti od streľby. parametre a subpopulácie postihnutých neurónov (Tsai a kol., 2009; Lammel a kol., 2011, 2012; Witten a kol., 2011; Kim a kol., 2012, 2013; Tan et al., 2012; van Zessen a kol., 2012; Stamatakis a Stuber, 2012; Chaudhury a kol., 2013; Tye a kol., 2013).

Obrázok 7.  

Optogenetická aktivácia oblastí mozgu, ktoré inervujú NAc, spôsobuje odlišné vzory indukcie AFosB v subtypoch MSN a striatálnych oblastiach. A, Optogenetická stimulačná paradigma pre všetky podmienky. Mozgy sa odobrali 24 h po 5 d optogenetiky ...

Ďalej sme použili vektory AAV-CaMKII-ChR2-mCherry a AAV-CaMKII-mCherry na expresiu ChR2-mCherry alebo mCherry samotného ako kontroly v mPFC, amygdale alebo vHippo D2-GFP myši (Obr. 7D-F). Expresia ChR2 a mCherry sprostredkovaná CaMKII-ChR2 vírusom bola predtým dokázaná, že kolokalizuje s expresiou CaMKII, ktorá prevažne označuje glutamátergické neuróny (Gradinaru a kol., 2009; Warden a kol., 2012). Aktivovali sme bunky exprimujúce ChR2 v týchto oblastiach s 20 Hz modrým svetlom pre 10 min denne pre 5 d a po poslednej stimulácii sa odobrali mozgy 24 h.Obr. 7A). Tento stimulačný model vyvolal ∼27-33 Hz streľbu, hlavne kvôli pozorovanému dubletovému spikingu. Žiadna zjavná desenzibilizácia ChR2 sa nevyskytla pri stimulácii 5 d; pozorovali sme však mierny nárast v streľbe z 1 na 5 d (32 – 33 Hz) stimulácie. Zistili sme, že optogenetická aktivácia neurónov mPFC viedla k indukcii AFosB v D1-MSN v NAc jadre, zatiaľ čo indukcia AFosB sa vyskytovala v oboch subtypoch MSN v NAc shell (Obr. 7D; dvojcestné ANOVA, NAc jadro: optogenetické stimuly × bunkový typ F(1,14) = 10.31, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Obal NAc: optogenetické podnety F(1,14) = 57.17, p <0.001, Bonferroniho po teste: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). Po aktivácii mPFC sa v dStr nepozorovala žiadna zmena v hladinách AFosB. Naproti tomu optogenetická aktivácia neurónov amygdaly indukovala ΔFosB v obidvoch podtypoch MSN v jadre NAc a selektívne v D1-MSN v plášti NAc, pričom v dStr nedošlo k žiadnym zmenám (Obr. 7E; dvojcestné ANOVA, NAc jadro: optogenetické stimuly F(1,10) = 78.92, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); Plášť NAc: optogenetické stimuly × typ bunky: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, Bonferroniho po teste: p <0.0001). Napokon optogenetická aktivácia vHippo neurónov spôsobila významnú indukciu ΔFosB iba v D1-MSN v jadre NAc aj v plášti NAc, opäť sa nepozorovala žiadna zmena v dStr (Obr. 7F; dvojcestné ANOVA, NAc jadro: optogenetické stimuly × bunkový typ F(1,10) = 18.30, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01; Plášť NAc: optogenetické stimuly × typ bunky: F(1,10) = 22.69, p <0.05, Bonferroniho po teste: p <0.01).

Diskusia

Táto štúdia skúma indukciu AFosB v D1-MSN a D2-MSN v striatálnych oblastiach po niekoľkých chronických stimuloch (Tabuľka 1). Najprv stanovíme realizovateľnosť použitia D1-GFP a D2-GFP reportérové ​​línie na demonštrovanie selektívnej indukcie AFosB v D1-MSN po chronickom kokaíne a v D2-MSN po chronickom haloperidole. Zistenia kokaínu sú v súlade s predchádzajúcimi štúdiami (Moratalla a kol., 1996; Lee et al., 2006) a stanovenú úlohu ΔFosB v D1-MSN pri podpore odmeňovania kokaínu (Kelz a kol., 1999; Colby a kol., 2003; Grueter a kol., 2013). Predtým sme ukázali, že výskumník a samo-podávaný kokaín indukuje AFosB v ekvivalentnom rozsahu v NAc (Winstanley a kol., 2007; Perrotti a kol., 2008), a čo je dôležité, ukázali sme tu, že obidva spôsoby príjmu kokaínu indukujú AFosB selektívne v D1-MSN vo všetkých troch striatálnych oblastiach. Naše zistenia sú v súlade s predchádzajúcimi štúdiami, ktoré dokazujú, že akútny kokaín indukuje iné okamžité skoré gény a fosforyláciu niekoľkých intracelulárnych signálnych proteínov len v D1-MSN (Bateup a kol., 2008; Bertran-Gonzalez a kol., 2008). Podobne opačný vzor indukcie AFosB po chronickom haloperidole je v súlade s blokádou tejto indukcie agonistami receptora podobného D2 (Atkins a kol., 1999) a s akútnou selektívnou indukciou haloperidolu okamžitých skorých génov a fosforyláciou niekoľkých signálnych proteínov v D2-MSN (Bateup a kol., 2008; Bertran-Gonzalez a kol., 2008).

Tabuľka 1.  

Indukcia AFosB v striatálnych podtypoch MSN po chronických farmakologických, emocionálnych a optogenetických stimulocha

Rovnako ako u kokaínu sme zistili, že chronická expozícia dvom ďalším liekom, ktoré sú zneužívané, EtOH a A (9) -THC, indukuje AFosB selektívne v D1-MSN vo všetkých striatálnych oblastiach. Predtým sme demonštrovali, že EtOH indukuje AFosB v NAc jadre, NAc shell a dStr, ale že A (9) -THC významne zvyšuje reguláciu AFosB v NAc jadre, s trendom pozorovaným v iných oblastiach (Perrotti a kol., 2008). Podobne sme tu pozorovali najväčšiu A (9) -THC indukciu AFosB v NAc jadre v D1-MSN; naša schopnosť demonštrovať indukciu v iných striatálnych oblastiach je pravdepodobne spôsobená použitou špecifickou analýzou buniek. Je zaujímavé, že chronické podávanie morfínu a heroínu, na rozdiel od iných liekov zneužívania, indukovalo AFosB v oboch subtypoch MSN v porovnateľnom rozsahu vo všetkých striatálnych oblastiach. Nedávna štúdia ukázala, že akútny morfín indukuje c-Fos v D1-MSN, zatiaľ čo naloxón-precipitovaný ústup po chronickom morfíne indukuje c-Fos v D2-MSN (Enoksson a kol., 2012). Hoci sme v našej štúdii nepozorovali príznaky abstinenčného abstinenčného opiátu, je možné, že subtilné abstinenčné príznaky, ktoré sa vyskytujú pri podávaní morfínu alebo heroínu v sledovanom časovom bode, sú zodpovedné za indukciu AFosB v D2-MSNs, ktoré sa tu pozorujú. Ukázali sme skôr, že AFosB v D1-MSNs, ale nie D2-MSNs, zvyšuje odmeňovanie odpovedí na morfín (Zachariou a kol., 2006). Teraz by bolo zaujímavé testovať možnosť, že indukcia AFosB v D2-MSN prispieva k averzívnym účinkom abstinenčného opiátu. Podobne by sa mal preskúmať potenciálny prínos abstinenčného lieku a túžba po indukcii AFosB pozorované u všetkých liekov.

Predchádzajúce štúdie ukazujú, že obohatenie životného prostredia počas vývoja indukuje AFosB v NAc a dStr (Solinas a kol., 2009; Lehmann a Herkenham, 2011). Naše údaje ukazujú, že táto akumulácia sa vyskytuje rovnako v D1-MSN a D2-MSN vo všetkých striatálnych oblastiach. Ukázalo sa, že paradigma obohatenia bola tupým odmeňovaním a pohybovými reakciami na kokaín (Solinas a kol., 2009); tento behaviorálny fenotyp však pravdepodobne nie je dôsledkom akumulácie AFosB, pretože indukcia AFosB v samotnom D1-MSN zvyšuje reakcie na kokaín, zatiaľ čo táto indukcia v D2-MSN nemá žiadny rozpoznateľný účinok (Kelz a kol., 1999; Colby a kol., 2003; Grueter a kol., 2013). Ukázalo sa, že spotreba chronickej sacharózy zvyšuje AFosB v NAc a nadmerná expresia AFosB, buď v samotnom D1-MSN alebo v oboch subtypoch, v NAc zvyšuje spotrebu sacharózy (Olausson a kol., 2006; Wallace a kol., 2008). Tu sme pozorovali porovnateľnú indukciu AFosB v obidvoch podtypoch MSN v NAc a dStr po pití sacharózy. Nakoniec sme dokázali, že indukcia AFosB v NAc sprostredkováva určité adaptívne reakcie na obmedzenie kalórií prostredníctvom zvýšenej motivácie pre potraviny s vysokým obsahom tuku a zníženým výdajom energie (Vialou a kol., 2011). Celkovo tieto výsledky demonštrujú, že akumulácia AFosB v NAc a dStr nastáva v D1-MSN a D2-MSNs ako odozva na niekoľko prirodzených odmien. Toto zistenie je prekvapujúce vzhľadom na pozorovanie, že AFosB sa akumuluje v D1-MSN len po ďalšej prirodzenej odmene, chronickom behu kolesa a že nadmerná expresia AFosB v D1-MSNs zlepšila beh kolesa, zatiaľ čo nadmerná expresia AFosB v D2-MSNs znížila beh kolesa (Werme a spol., 2002). Beh kolesa však môže aktivovať rôzne motorické dráhy, ktoré sú zodpovedné za jeho rozdielny vzorec indukcie AFosB. V každom prípade výsledky s inými prirodzenými odmenami naznačujú, že odlišne kontrolujú AFosB v striate v porovnaní s účinnejšími odmenami za liečivá, ako je kokaín, EtOH a A (9) -THC. Indukcia AFosB v obidvoch podtypoch MSN za týchto podmienok prirodzeného odmeňovania je v súlade s nedávnou štúdiou, ktorá dokazuje, že iniciácia akcie pre potravinovú odmenu aktivuje obidva podtypy MSN (Cui a kol., 2013).

Chronický sociálny porážkový stres indukuje AFosB v NAc škrupine citlivých a pružných myší, ale v NAc jadre iba v pružných myšiach (Vialou a kol., 2010). Nadmerná expresia AFosB v D1-MSN ďalej podporuje odolnosť po chronickom strese zo sociálnej porážky. Chronická liečba fluoxetínom tiež spôsobuje akumuláciu AFosB u NAc u myší bez stresu a u citlivých myší po chronickom strese zo sociálnej porážky a nadmerná expresia AFosB ukázala, že sprostredkováva reakcie na správanie podobné antidepresívam za týchto podmienok (Vialou a kol., 2010). A nakoniec, predchádzajúca štúdia preukázala indukciu AFosB v obidvoch podtypoch MSN po chronickom obmedzujúcom strese (Perrotti a kol., 2004). Výsledky tejto štúdie, kde sme preukázali indukciu AFosB selektívne v D1-MSN v pružných myšiach ošetrených fluoxetínom, ale selektívne v D2-MSN u citlivých myší, poskytujú dôležitý pohľad na tieto skoršie nálezy a podporujú hypotézu, že AFosB v D1- MSN sprostredkovávajú odolnosť a antidepresívny účinok, zatiaľ čo AFosB v D2-MSNs môže sprostredkovať citlivosť. Na overenie tejto hypotézy je teraz potrebná ďalšia práca.

Nedávna práca s použitím optogenetiky demonštruje silnú úlohu dopaminergných a glutamátergických afferentov na NAc pri modulácii odmien a stresových reakcií (pozri Výsledky). Tieto optogenetické nástroje využívame na skúmanie indukcie AFosB v D1-MSN a D2-MSN po opakovanej aktivácii NAc aferentných oblastí. Zistili sme, že fázová stimulácia VTA neurónov, alebo aktivácia hlavne glutamátergických neurónov v amygdale, indukuje AFosB v D1-MSN v NAc shell av oboch MSN subtypoch v NAc jadre. Naopak, aktivácia neurónov mPFC vedie k opačnému vzoru indukcie AFosB, so zvýšenými hladinami v D1-MSN v NAc jadre, ale indukcia v obidvoch podtypoch MSN v NAc shell. Nakoniec, optogenetická aktivácia vHippo neurónov spôsobuje akumuláciu AFosB len v D1-MSN v NAc jadre a shell. Zistenia vHippo sú v súlade s nedávnymi štúdiami, ktoré dokazujú, že hippokampálne vstupy sú omnoho slabšie na D2-MSN v porovnaní s D1-MSNs (MacAskill a kol., 2012) a že tieto vstupy kontrolujú pohyb vyvolaný kokaínom (\ tBritt a kol., 2012). Okrem toho, naša demonštrácia indukcie AFosB prevažne v D1-MSN so všetkými vstupmi je v súlade s predchádzajúcimi štúdiami, ktoré ukazujú, že AFosB v D1-MSNs podporuje odmeňujúce reakcie na lieky zneužívania, ako aj štúdie, ktoré ukazujú, že optogenetická stimulácia VTA dopamínových neurónov alebo mPFC, amygdala alebo terminály vHippo v NAc podporujú odmenu (Kelz a kol., 1999; Zachariou a kol., 2006; Tsai a kol., 2009; Witten a kol., 2011; Britt a kol., 2012; Grueter a kol., 2013).

Nakoniec je pravdepodobné, že v týchto dvoch subtypoch MSN existujú selektívne neuronálne súbory, ktoré sú diferencovane aktivované pozitívnymi alebo negatívnymi stimulmi. To by mohlo zodpovedať za naše pozorovanie indukcie AFosB v D2-MSN v určitých podmienkach odmeňovania (opiáty a prirodzené odmeny), ako aj podmienky averzívnej (sociálnej porážky). Striatum je veľmi heterogénne okrem podtypov MSN, vrátane kompartmentov náplastí a matríc v dorzálnom aj ventrálnom striate (Gerfen, 1992; Watabe-Uchida a kol., 2012). Ďalej predchádzajúce štúdie demonštrujú aktiváciu veľmi malého percenta striatálnych neuronálnych súborov psychostimulanciami so zvýšenou indukciou FosB v týchto aktivovaných neurónoch (Guez-Barber a kol., 2011; Liu a kol., 2013), hoci nie je známe, či tieto aktivované neuróny sú D1-MSN alebo D2-MSN. Funkcia AFosB v jadre verzus shell pri sprostredkovaní odmeňovania a averzívnom správaní je tiež neznáma. Nadmerná expresia AFosB v D1-MSN zvyšuje tiché synapsie v jadre aj v shelle, ale výraz v D2-MSN znižuje tiché synapsie iba v shell (Grueter a kol., 2013). Ďalej indukcia AFosB v jadre verzus shell je pravdepodobne sprostredkovaná rôznymi mechanizmami, pretože sme zistili kokaínom sprostredkovanú stabilizáciu AFOSB sprostredkovanú CaMKIIa v škrupine, ale nie v jadre, čo vedie k väčšej akumulácii AFosB v škrupine (Robison a kol., 2013). Budúce štúdie, ktoré selektívne cielia MSN subtypy v jadre verzus shell, aktivované neuronálne súbory alebo kompartmenty v porovnaní s matricou, pomôžu definovať behaviorálnu úlohu AFosB v týchto heterogénnych oblastiach.

Celkovo tieto indukčné modely indukcie selektívne indukované v obvode bunkami bunkového typu AFosB v NAc naznačujú, že odmeňovanie a stresové stimuly diferencovane zaberajú odlišné NAc aferenty na kódovanie špecifických vlastností týchto stimulov. Naše výsledky poskytujú nielen komplexný pohľad na indukciu AFosB v striatálnych MSN subtypoch chronickými stimulmi, ale tiež ilustrujú využiteľnosť pri použití AFosB ako molekulárneho markera na pochopenie trvalých účinkov špecifických nervových obvodov pri ovplyvňovaní NAc funkcie.

poznámky pod čiarou

Autori neuvádzajú žiadne konkurenčné finančné záujmy.

Referencie

  1. Adamantidis AR, Tsai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber GD, Budygin EA, Touriño C, Bonci A, Deisseroth K, de Lecea L. Optogenetická interogácia dopaminergnej modulácie viacerých fáz správania, ktoré sa snaží získať odmenu. J Neurosci. 2011, 31: 10829-10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  2. Albin RL, Young AB, Penney JB. Funkčná anatómia bazálnych ganglií. Trends Neurosci. 1989, 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Hiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Regionálne špecifická indukcia δFosB opakovaným podávaním typických verzus atypických antipsychotík. Synapse. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [Cross Ref]
  4. Bateup HS, Svenningsson P, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. Bunkovo ​​špecifická regulácia fosforylácie DARPP-32 pomocou psychostimulantov a antipsychotík. Nat Neurosci. 2008, 11: 932-939. doi: 10.1038 / nn.2153. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Základná úloha BDNF v mezolimbickej dopamínovej dráhe v sociálnom porážkovom strese. Science. 2006, 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Hervé D, Valjent E, Girault JA. Protichodné vzorce signalizačnej aktivácie v dopamínových D1 a D2 receptoroch exprimujúcich striatálne neuróny v reakcii na kokaín a haloperidol. J Neurosci. 2008, 28: 5671-5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [Cross Ref]
  7. Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Synaptický a behaviorálny profil viacerých glutamátergických vstupov do nucleus accumbens. Neurón. 2012, 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  8. Chan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard P, Surmeier DJ. Strahovo špecifická regulácia striatálneho fenotypu u Drd2-eGFP BAC transgénnych myší. J Neurosci. 2012, 32: 9124-9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  9. Chaudhury D, Walsh JJ, Friedman AK, Juarez B, Ku SM, Koo JW, Ferguson D, Tsai HC, Pomeranz L, Christoffel DJ, Nectow AR, Ekstrand M, Domingos A, Mazei-Robison MS, Mouzon E, Lobo MK, Neve RL, Friedman JM, Russo SJ, Deisseroth K a kol. Rýchla regulácia správania súvisiacich s depresiou prostredníctvom kontroly dopamínových neurónov stredného mozgu. Nature. 2013, 493: 532-536. doi: 10.1038 / nature11713. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. AFosB zvyšuje stimuláciu kokaínu. J Neurosci. 2003, 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Antidepresívny účinok optogenetickej stimulácie mediálneho prefrontálneho kortexu. J Neurosci. 2010, 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Costa RM. Súčasná aktivácia striatálnych priamych a nepriamych ciest počas iniciácie účinku. Nature. 2013, 494: 238-242. doi: 10.1038 / nature11846. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonzalez J, Christie MJ. Nucleus accumbens Stredne ostnaté neuróny D2 a D1-receptora sú selektívne aktivované abstinenciou morfínu a akútnym morfínom. Neuropharmacology. 2012, 62: 2463-2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [Cross Ref]
  14. Gerfen CR. Neostriatálna mozaika: viacero úrovní kompartmentovej organizácie v bazálnych gangliách. Annu Rev Neurosci. 1992, 15: 285-320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [Cross Ref]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Striatálne mikroobvody a poruchy pohybu. Trends Neurosci. 2012, 35: 557-564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  16. Gong S, Zheng C, Doughty ML, Losos K, Didkovsky N, Schambra UB, Nowak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten ME, Heintz N. Atlas génovej expresie centrálneho nervového systému na báze bakteriálnych umelých chromozómov. Nature. 2003, 425: 917-925. doi: 10.1038 / nature02033. [PubMed] [Cross Ref]
  17. Gradinaru V, Mogri M., Thompson KR, Henderson JM, Deisseroth K. Optická dekonštrukcia parkinsonovských nervových obvodov. Science. 2009, 324: 354-359. doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [Cross Ref]
  18. Gradinaru V, Zhang F, Ramakrishnan C, Mattis J., Prakash R., Diester I, Goshen I, Thompson KR, Deisseroth K. Molekulárne a bunkové prístupy na diverzifikáciu a rozšírenie optogenetiky. Bunka. 2010, 141: 154-165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [Cross Ref]
  19. Graybiel AM. Bazálne ganglie. Curr Biol. 2000, 10: R509-R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [Cross Ref]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass CE, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Environmentálne obohatenie produkuje behaviorálny fenotyp sprostredkovaný aktivitou nízkocyklického adenozínmonofosfátového väzobného elementu (CREB) v nucleus accumbens. Biol Psychiatria. 2010, 67: 28-35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. AFosB diferenciálne moduluje nukleus accumbens priamu a nepriamu funkciu dráhy. Proc Natl Acad Sci US A. 2013: 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Schrama R, Koya E, Stern AL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS identifikuje jedinečnú génovú reguláciu indukovanú kokaínom u selektívne aktivovaných dospelých striatálnych neurónov. J Neurosci. 2011, 31: 4251-4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  23. Heiman M, Schaefer A, Gong S, Peterson JD, deň M, Ramsey KE, Suárez-Farinas M, Schwarz C, Stephan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. Prístup translačného profilovania molekulárnej charakterizácie typov buniek CNS , Bunka. 2008, 135: 738-748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Atypické a typické neuroleptické liečby indukujú odlišné programy expresie transkripčného faktora v striate. J Comp Neurol. 1996; 374: 70–83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [Cross Ref]
  25. Hiroi N, Brown JR, Haile CN, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB mutantné myši: Strata chronickej kokaínovej indukcie proteínov súvisiacich s Fos a zvýšená citlivosť na psychomotorické a obohacujúce účinky kokaínu. Proc Natl Acad Sci US A. 1997; 94: 10397–10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  26. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia dlhodobo trvajúceho komplexu AP-1 zloženého zo zmenených fos-podobných proteínov v mozgu chronickým kokaínom a inými chronickými liečbami. Neurón. 1994, 13: 1235-1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [Cross Ref]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick MA. Projekcia GABA a enkefalínu z nucleus accumbens a ventrálnej pallidum do ventrálnej tegmentálnej oblasti. Neuroscience. 1993, 57: 1047-1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [Cross Ref]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, Fan W, Young AJ, Guy MD. Senzibilizácia opiátov indukuje expresiu FosB / AFosB v mozgových oblastiach prefrontálnych kortikálnych, striatálnych a amygdala. PLoS One. 2011, 6: e23574. doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Expresia transkripčného faktora AFosB v mozgu riadi citlivosť na kokaín. Nature. 1999, 401: 272-276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [Cross Ref]
  30. Kim KM, Baratta MV, Yang A, Lee D, Boyden ES, Fiorillo CD. Optogenetické mimikry prechodnej aktivácie dopamínových neurónov prirodzenou odmenou postačujú na operatívne posilnenie. PLoS One. 2012, 7: e33612. doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Song J, Song YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, Song IS, Shin G, Al-Hasani R, Kim S, Tan MP, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA a kol. Injekčná optoelektronická bunková škála s aplikáciami pre bezdrôtovú optogenetiku. Science. 2013, 340: 211-216. doi: 10.1126 / science.1232437. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Werno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Han MH, Nestler EJ. BDNF je negatívny modulátor účinku morfínu. Science. 2012, 338: 124-128. doi: 10.1126 / science.1222265. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  33. Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A Eisch AJ, Self DW, Lee FS a kol. Molekulárne adaptácie, ktoré sú základom náchylnosti a odolnosti voči sociálnej porážke v regiónoch odmeňovania mozgu. Bunka. 2007, 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  34. Kumar S, Black SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington HE, 3rd, Dzirasa K. Kortikálne riadenie afektívnych sietí. J Neurosci. 2013, 33: 1116-1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Projekčne špecifická modulácia synapsií dopamínových neurónov averzívnymi a odmeňujúcimi stimulmi. Neurón. 2011, 70: 855-862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran C, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Vstupná kontrola odmeňovania a averzie vo ventrálnej tegmentálnej oblasti. Nature. 2012, 491: 212-217. doi: 10.1038 / nature11527. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edwards S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Striatálna regulácia AFosB, FosB a cFos počas samokontroly kokaínu a vysadenia. J Neurochem. 2010, 115: 112-122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  38. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Tvorba dendritickej chrbtice vyvolaná kokaínom v stredných spinálnych neurónoch obsahujúcich dopamínový receptor D1 a D2 v nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006: 103: 3399 – 3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Obohatenie životného prostredia poskytuje stresovú pružnosť sociálnej porážke prostredníctvom neuroanatomickej dráhy závislej od infralimbického kortexu. J Neurosci. 2011, 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hope BT. Detekcia molekulárnych zmien v neurónoch Fos-exprimujúcich metamfetamínom aktivovaných z dorzálneho striata potkana pomocou fluorescenčne aktivovaného triedenia buniek (FACS) J Neurochem. 2013 doi: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Predpredaj online publikácie. Získané júl 29, 2013. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Friedman AK, Sun H, Damez-Werno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. Strata BDNF špecifickej pre bunkový typ napodobňuje optogenetickú kontrolu odmeňovania kokaínu. Science. 2010, 330: 385-390. doi: 10.1126 / science.1188472. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Striatálne vyvažovacie pôsobenie pri drogovej závislosti: odlišné úlohy priamych a nepriamych dráh stredných ostnatých neurónov. Predné Neuroanat. 2011, 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Gray M, Geschwind DH, Yang XW. FACS-profilovanie striatálnych projekčných neurónov subtypov u juvenilných a dospelých myších mozgov. Nat Neurosci. 2006, 9: 443-452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [Cross Ref]
  44. MacAskill AF, Little JP, Cassel JM, Carter AG. Subcelulárna konektivita je základom signalizácie špecifickej pre dráhu v nucleus accumbens. Nat Neurosci. 2012, 15: 1624-1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  45. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, mechanik M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Základná úloha histón metyltransferázy G9a v plasticite vyvolanej kokaínom. Science. 2010, 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  46. Mazei-Robison MS, Koo JW, Friedman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, Siuta MA, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Neve RL, Worley PF, Snyder SH, Hurd YL, Cheer JF, Han MH, Russo SJ a kol. Úloha pri signalizácii mTOR a neuronálnej aktivite pri morfínom indukovaných adaptáciách v ventrálnej tegmentálnej oblasti dopamínových neurónov. Neurón. 2011, 72: 977-990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  47. McClung CA, Nestler EJ. Regulácia génovej expresie a odmeny kokaínu prostredníctvom CREB a AFosB. Nat Neurosci. 2003, 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Senzibilizácia vyvolaná metamfetamínom odlišne mení pCREB a AFosB v limbickom okruhu mozgu cicavcov. Mol Pharmacol. 2006, 70: 2064-2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [Cross Ref]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. Receptory dopamínu triedy D1 ovplyvňujú pretrvávajúcu expresiu fos-príbuzných proteínov v striate. Neuroreport. 1996, 8: 1-5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [Cross Ref]
  50. Muller DL, Unterwald EM. D1 dopamínové receptory modulujú ôFosB indukciu v striatume potkana po prerušovanom podávaní morfínu. J. Pharmacol Exp Ther. 2005, 314: 148-154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [Cross Ref]
  51. Narayan S, Kass KE, Thomas EA. Chronická liečba haloperidolom vedie k zníženiu expresie génov súvisiacich s myelínom / oligodendrocytmi v mozgu myši. J. Neurosci Res. 2007, 85: 757-765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [Cross Ref]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta W, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua MA, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Funkčná interakcia medzi receptormi opioidov a kanabinoidov drogovej samosprávy. J Neurosci. 2001, 21: 5344-5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Pascoli V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Porovnanie správania závislých od striatalu u transgénnych myší divokého typu a hemizygótnych Drd1a a Drd2 BAC. J Neurosci. 2012, 32: 9119-9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  54. Nicola SM. Jadro accumbens ako súčasť bazálneho ganglia selekčného okruhu. Psychopharmacology. 2007, 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [Cross Ref]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. AFosB v nucleus accumbens reguluje inštrumentálne správanie a motiváciu posilnenú potravinami. J Neurosci. 2006, 26: 9196-9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [Cross Ref]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia δFosB v mozgových štruktúrach súvisiacich s odmenou po chronickom strese. J Neurosci. 2004, 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Odlišné vzorce indukcie DeltaFosB v mozgu drogami zneužívania. Synapsie. 2008, 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  58. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. AFosB sprostredkováva epigenetickú desenzibilizáciu génu c-fos po chronickej expozícii amfetamínu. J Neurosci. 2008, 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  59. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Široká analýza regulácie chromatínu kokaínom odhalila novú úlohu sirtuínov. Neurón. 2009, 62: 335-348. doi: 10.1016 / j.neuron.2009.03.026. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  60. Robison AJ, Nestler EJ. Transkripčné a epigenetické mechanizmy závislosti. Nat Rev Neurosci. 2011, 12: 623-637. doi: 10.1038 / nrn3111. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Thomas M, Nestler EJ. Behaviorálne a štrukturálne reakcie na chronický kokaín vyžadujú doprednú slučku zahŕňajúcu AFosB a proteínkinázu II závislú od vápnika / kalmodulínu II v jadre nucleus accumbens. J Neurosci. 2013, 33: 4295-4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  62. Smith RJ, Lobo MK, Spencer S, Kalivas PW. Adaptácie indukované kokaínom v D1 a D2 accumbens projekčné neuróny (dichotómia nie je nevyhnutne synonymom priamych a nepriamych ciest) Curr Opin Neurobiol. 2013, 23: 546-552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. Obohatenie životného prostredia v skorých štádiách života znižuje behaviorálne, neurochemické a molekulárne účinky kokaínu. Neuropsychofarmakologie. 2009, 34: 1102-1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [Cross Ref]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovorca N, van Zessen R, Stuber GD. Konštrukcia implantovateľných optických vlákien pre dlhodobú optogenetickú manipuláciu nervových obvodov. Nat Protoc. 2012, 7: 12-23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [Cross Ref]
  65. Stamatakis AM, Stuber GD. Aktivácia laterálnych habenulových vstupov do ventrálneho stredného mozgu podporuje vyhýbanie sa správaniu. Nat Neurosci. 2012, 24: 1105-1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonci A. Optogenetická modulácia nervových obvodov, ktoré sú základom hľadania odmeny. Biol Psychiatria. 2012, 71: 1061-1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  67. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouèbe G, Deisseroth K, Tye KM, Lüscher C. GABA neuróny VTA poháňa podmienenú averziu miesta. Neurón. 2012, 73: 1173-1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [Cross Ref]
  68. Teegarden SL, Bale TL. Zníženie preferencií v strave spôsobuje zvýšenú emocionalitu a riziko relapsu diét. Biol Psychiatria. 2007, 61: 1021-1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [Cross Ref]
  69. Tsai HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Fázové pálenie v dopaminergných neurónoch je dostatočné na kondicionovanie správania. Science. 2009, 324: 1080-1084. doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [Cross Ref]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, Warden MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adhikari A, Thompson KR, Andalman AS, Gunaydin LA, Witten IB, Deisseroth K. Dopamínové neuróny modulujú neurálne kódovanie a expresiu depresie súvisiacej s depresiou správanie. Nature. 2013, 493: 537-541. doi: 10.1038 / nature11740. [PubMed] [Cross Ref]
  71. van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. Aktivácia neurónov VTA GABA narúša spotrebu odmien. Neurón. 2012, 73: 1184-1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA a kol. AFosB v okruhoch odmeňovania mozgu sprostredkováva odolnosť voči stresu a antidepresívnym reakciám. Nat Neurosci. 2010, 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgoub M., Yu HG, Rush AJ, Pranav H., Jung S, Yangisawa M., Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Úloha pre AFosB v metabolických zmenách vyvolaných kalórmi , Biol Psychiatria. 2011, 70: 204-207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Inuiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzmán CA. Vplyv DeltaFosB na jadro accumbens na prirodzené správanie súvisiace s odmenou. J Neurosci. 2008, 28: 10272-10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  75. Warden MR, Selimbeyoglu A, Mirzabekov JJ, Lo M, Thompson KR, Kim SY, Adhikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. Neurónová projekcia prefrontálneho kortexového mozgového kmeňa, ktorá riadi reakciu na behaviorálnu výzvu. Nature. 2012, 492: 428-432. doi: 10.1038 / nature11617. [PubMed] [Cross Ref]
  76. Watabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Mapovanie priamych mozgových vstupov do dopamínových neurónov stredného mozgu. Neurón. 2012, 74: 858-873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [Cross Ref]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. AFosB reguluje chod kolesa. J Neurosci. 2002, 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcia AFosB v orbitofrontálnom kortexe sprostredkováva toleranciu kognitívnej dysfunkcie vyvolanej kokaínom. J Neurosci. 2007, 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. Recombinase-driver potkanie línie: nástroje, a optogenetické aplikácie na dopamínom sprostredkované vystuženie. Neurón. 2011, 72: 721-733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Optogenetics in neurural systems. Neurón. 2011, 71: 9-34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [Cross Ref]
  81. Yoneyama N, Crabbe JC, Ford MM, Murillo A, Finn DA. Dobrovoľná konzumácia etanolu v inbredných myšacích kmeňoch 22. Alkohol. 2008, 42: 149-160. doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Podstatná úloha pre deltaFosB v nucleus accumbens pri účinku morfínu. Nat Neurosci. 2006, 9: 205-211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [Cross Ref]