Behav Brain Res. Autorský rukopis; dostupné v PMC 2015 Jun 5.
Publikované v konečnom upravenom formulári ako:
Behav Brain Res. 2014 Apr 1; 262: 101 – 108.
Publikované online 2014 Jan 7. doi: 10.1016 / j.bbr.2013.12.014
PMCID: PMC4457313
NIHMSID: NIHMS554276
abstraktné
Táto štúdia určila účinky adolescentného podávania nikotínu na preferenciu alkoholu u dospelých u potkanov vykazujúcich vysokú alebo nízku behaviorálnu reaktivitu k novému prostrediu a zistila, či nikotín zmenil AFosB vo ventrálnom striate (vStr) a prefrontálnom kortexe (PFC) bezprostredne po podaní liečiva alebo po dozretí potkanov do dospelosti.
Zvieratá sa charakterizovali ako zvieratá vykazujúce vysokú (HLA) alebo nízku (LLA) lokomotorickú aktivitu v novom otvorenom poli na postnatálnom dni (PND) 31 a dostali injekcie fyziologického roztoku (0.9%) alebo nikotínu (0.56 mg voľnej bázy / kg) od PND 35 -42. Uprednostňovaná podmienka (CPP) vyvolaná etanolom bola hodnotená na PND 68 po úpravách 8 dní v zaujatej paradigme; AFosB sa meral na PND 43 alebo PND 68. Po expozícii mladistvému nikotínu \ t HLA zvieratá demonštrovali CPP, keď boli upravené etanolom; LLA zvieratá neboli ovplyvnené. Ďalej, expozícia adolescentného nikotínu počas 8 dní zvýšila hladiny AFosB v limbických oblastiach u potkanov HLA aj LLA, ale tento nárast pretrvával do dospelosti len u zvierat LLA.
Výsledky ukazujú, že adolescentná expozícia nikotínu uľahčuje zavedenie etanolu CPP u potkanov HLA a že trvalé zvýšenie AFosB nie je potrebné alebo dostatočné na vytvorenie CPP etanolu v dospelosti. Tieto štúdie podčiarkujú dôležitosť hodnotenia behaviorálneho fenotypu pri určovaní behaviorálnych a bunkových účinkov vystavenia mladistvému nikotínu adolescentom.
1. Úvod
Početné štúdie ukázali, že vysoká snaha vyhľadávať a skúmať sa spája so zvýšenou citlivosťou na odmenu za lieky [1-8]. Ukázalo sa, že dospievajúci vykazujú väčší záujem o vyhľadávanie a prieskum ako dospelí [9-11], a niekoľko správ ukazuje, že dospievajúci majú pri začatí užívania drog väčšiu pravdepodobnosť, že dospejú k pokroku v závislosti od drog [.12-18]. Adolescenti tak môžu byť náchylnejší k posilňovaniu a odmeňovaniu účinkov zneužívaných drog a dospievajúci s vysokým pocitom vyhľadávajúceho profilu môžu predstavovať najzraniteľnejšiu populáciu.
Najbežnejšie užívané lieky sú nikotín a alkohol [2].19, 20] a dôkazy naznačujú, že používanie nikotínu ovplyvňuje spotrebu alkoholu. Fajčenie a správanie sa pri konzumácii alkoholu sa často vyskytujú spoločne, pričom frekvencia správania sa súvisí s frekvenciou ostatných [21]. Udeliť [22] uviedli, že takmer 29% jednotlivcov, ktorí začnú fajčiť pred vekom 14u, sa stáva závislým od alkoholu a 8% postupuje k nadmernému požívaniu alkoholu počas svojho života. Okrem toho 19% tých, ktorí začínajú fajčiť medzi 14om a 16om, sa stáva závislým od alkoholu, pričom 7% týchto jedincov postupuje k nadmernému požívaniu alkoholu. Je zaujímavé, že jedinci, ktorí nezačnú fajčiť, kým 17 rokov nie sú polovične pravdepodobnejší, že sa stanú závislými na alkohole alebo pokročia v závislosti od závislosti. Fajčenie skorého začiatku je teda silným prediktorom celoživotného pitia a závislosti od alkoholu a zneužívania.22].
Ukázalo sa, že adolescentná expozícia nikotínu zvyšuje odmeňujúce účinky niekoľkých liekov u dospelých laboratórnych zvierat, vrátane nikotínu, kokaínu a diazepamu [23-26]. Ďalej Riley a kol. [27] demonštrovali, že podávanie nikotínu myšiam počas dospievania, ale nie dospelosti, zvyšuje citlivosť na odobratie etanolu pri meraní v dospelosti a naznačilo, že adolescencia predstavuje kritické obdobie citlivosti na nikotín, ktoré vedie k zmenám v mozgu, ktoré pretrvávajú v dospelosti. Túto myšlienku podporujú viaceré štúdie, ktoré dokazujú, že expozícia nikotínu u adolescentov vedie k anxiogénnemu stavu v dospelosti [28-30]. Je možné, že pretrvávajúce zmeny po expozícii mladistvému nikotínu zahŕňajú transkripčný faktor AFosB, u ktorého sa preukázalo, že vyvoláva trvalú senzibilizáciu mezolimbickej dráhy a zvyšuje citlivosť na motivačné vlastnosti niektorých liekov zneužívania, vrátane alkoholu [1].31-34] a ktorého nadmerná expresia v limbickom systéme zvyšuje preferencie liekov [31, 35]. Je zaujímavé, že adolescentné zvieratá vykazujú väčšie zvýšenie ako u dospelých v AFosB v nucleus accumbens (NAcc) ako odpoveď na podávanie kokaínu alebo amfetamínu [36]; účinok podávania nikotínu počas dospievania na AFosB nebol skúmaný. Pretože dospievajúce zvieratá vykazujú zvýšenú reguláciu vzostupu AFosB v porovnaní s dospelými v reakcii na zneužívané lieky, môžu byť citlivejšie na odmeňovanie stimulov po opakovanej expozícii ako u podobne vystavených dospelých jedincov. Táto myšlienka je podporená štúdiami, ktoré naznačujú, že dospievajúci potkany, ktorí po injekciách 4 stanovili preferenciu kondicionovaného miesta (CPP) indukovanú nikotínom, vykazujú zvýšenie ventorovej imunoreaktivity (zostrihový variant AFosB nebol špecificky meraný) vo ventrálnej tegmentálnej oblasti (VTA), NAcc a prefrontálny kortex (PFC) bezprostredne po testovaní správania [37].
Napriek dôkazom, že adolescencia je obdobím zvýšeného pocitu hľadania a prvého užívania drog, používanie nikotínu je spojené so zvýšeným používaním etanolu a že zvýšená citlivosť na lieky zneužívania drog je spojená s akumuláciou AFOSB [31], vplyv adolescentného vystavenia nikotínu na hladiny ΔFosB a jeho dlhodobé dôsledky na odmenu za etanol sú nejasné. Preto táto štúdia: 1) určila účinky adolescentného podávania nikotínu na preferenciu alkoholu u dospelých u potkanov charakterizovaných počas adolescencie ich behaviorálnou reaktivitou na nové prostredie, t. J. Vykazujúce vysokú alebo nízku lokomotorickú aktivitu; a 2) zistili, či nikotín zmenil AFosB vo ventrálnom striate (vStr) a PFC týchto zvierat bezprostredne po podaní v období dospievania alebo po dozretí potkanov do dospelosti.
2. metódy
2.1 Materiály
Etanol sa získal od firmy AAPER Alcohol and Chemical Company (Shelbyville, KY). Všetky ostatné činidlá boli zakúpené od Sigma-Aldrich Life Sciences (St. Louis, MO), pokiaľ nie je uvedené inak.
Subjekty 2.2
Samce a samice potomkov (n = 89) časovaných gravidných potkanov (n = 10) sa použili ako jedinci; deň narodenia bol definovaný ako postnatálny deň 0 (PND 0). Aby sa zabezpečil podobný vývoj vrhov, všetky vrhy boli vyradené na mláďatá 10 – 12 (samce 5 – 6 / samice 5 – 6) na PND 1 a zostali umiestnené s ich príslušnými matkami až do PND 21, kedy boli zvieratá odstavené a umiestnené v chove. v skupinách 3 rovnakého pohlavia v štandardných polypropylénových klietkach s podstielkou z kukurice. Všetky zvieratá boli chované na Univerzite Južnej Floridy vo viváriu kontrolovanom teplotou a vlhkosťou na cykle 12: 12-hr svetlo-tma (7 am / 7 pm). Experimenty sa uskutočňovali počas ľahkej fázy a starostlivosť a používanie zvierat boli v súlade s pokynmi, ktoré stanovil Inštitucionálny výbor pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie a National Institutes of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals. V súlade s týmito pokynmi experimenty využívali najmenší počet zvierat na skupinu potrebnú na získanie zmysluplných údajov.
2.3 Charakterizácia behaviorálnej reaktivity na nové prostredie
Na charakterizáciu behaviorálnej reaktivity potkanov do nového prostredia sa použila lokomotorická aktivita. Aby sa to dosiahlo, na PND 31 sa zvieratá odstránili z ich domácej klietky a umiestnili sa do kruhovej arény (priemer 100 cm) pri miernom osvetlení (20 lux) pre 5 min. Celková prejdená vzdialenosť (TDM) bola zaznamenaná automaticky pomocou videokamery a analyzovaná pomocou softvéru EthoVision (Noldus Information Technology, Leesburg, VA) podľa opisu [38]. Zvieratá boli klasifikované ako zvieratá vykazujúce buď vysokú (HLA) alebo nízku (LLA) lokomotorickú aktivitu v novom otvorenom poli s použitím strednej stratégie rozdelenia, pričom predchádzajúca aktivita vykazovala hornú hodnotu 50% a druhá v dolnej 50% relatívne k ich%. súrodenci [4].
2.4 injekcie nikotínu
Zvieratá dostávali injekcie (sc) buď fyziologického roztoku pufrovaného fosfátom (PBS, 0.9%) alebo hydrogénartartrátu nikotínu v PBS (0.56 mg nikotínu vo forme voľnej bázy / kg) raz denne počas 4 alebo 8 dní začínajúcich na PND 35. Ukázalo sa, že táto dávka nikotínu zvyšuje reakciu na podmienené podnety [39, 40] a zvýšiť hraničné hodnoty pre posilnené reakcie [41], v ktorom sa uvádza, že je to odmeňovanie a posilňovanie, a použila sa v predchádzajúcej štúdii adolescentov [38]. Pre každú injekciu boli zvieratá v domácej klietke transportované do slabo osvetlenej miestnosti, umiestnenej do novej klietky, ktorá bola obložená čerstvou podstielkou, vstrekovaná a vrátená do svojej domácej klietky.
Predvoľba podmieneného miesta 2.5 (CPP)
Pri meraní CPP dostávali potkany injekcie nikotínu z PND 35 – 42 a 18 dní po poslednej injekcii nikotínu, na PND 60, zvieratám (n = 40; 4 – 5 na skupinu) bol povolený voľný prístup do dvoch vzájomne prepojených komôr Plexiglas (každá komora: 21 cm široká × 18 cm dlhá × 21 cm vysoká) obsahujúca zreteľné vizuálne (vertikálne alebo horizontálne čierne a biele pruhy) a hmatové podnety (pogumované alebo brúsené papierové podlahy) počas troch intervalov 5 min. Priemerný čas strávený na každej strane prístroja sa použil na určenie preferencie základnej línie pre každé zviera. Hoci každé zviera malo na základnej línii vedľajšiu preferenciu, v populácii nebola tendencia, aby bola určitá komora preferovaná. Počas nasledujúcich 8 dní, od PND 61 po 68, sa použila paradigma predpojatého kondicionovania, v ktorom boli zvieratá trénované, aby spojili preferovanú komoru so subjektívnymi účinkami etanolu. Na kondicionovanie dostalo každé zviera injekciu etanolu (17%; 1.0 g / kg, ip) a následne bolo obmedzené na pôvodne nevýhodnú komoru pre 15 min. Ukázalo sa, že táto dávka a koncentrácia etanolu zavádza CPP počas neskorej adolescencie [42] a významne zvýšiť dopamín v NAcc adolescentných a mladých dospelých zvierat [43, 44]. Kontrolné zvieratá boli po injekcii fyziologického roztoku (15%, ip) obmedzené na 0.9 min na pôvodne nevýhodnú komoru. Obe zvieratá s etanolom upraveným a kontrolným zvieratám dostávali injekcie fyziologického roztoku pred tým, než sa obmedzili na pôvodne preferovanú komoru pre 15 min denne. Každé zviera teda dostalo 2 tréningy za deň, jedno pre pôvodne preferované a jedno pre výhodnú komoru. Poradie týchto sedení sa striedalo každý deň a vyskytlo sa ráno a popoludní, oddelené aspoň o 5 hodín. Na PND 69, približne 16 – 18 hodín po poslednom tréningu, sa zvieratám povolil voľný prístup do oboch komôr pre 5 min a meral sa čas strávený v každej komore na stanovenie CPP. Prednostné skóre sa vypočítalo odpočítaním času stráveného v pôvodne preferovanej komore od času stráveného v pôvodne nevýhodnej komore.
2.6 Western blot analýzy
Pre imunoblotové analýzy sa potkany rýchlo dekapitovali a izolované vStr a PFC izolovali 24 po buď injekcii 4th alebo 8th nikotínu na PND 39, resp. 43, (n = 32; 4 na skupinu) alebo 26 dní po injekcii 8th na PND. 69 (n = 16; 4 na skupinu), čo zodpovedá dňu, kedy bola CPP hodnotená v oddelenej skupine zvierat. Tkanivo sa rýchlo zmrazilo na suchom ľade a skladovalo sa pri -80 ° C až do homogenizácie podľa opisu [38]. Proteíny sa oddelili elektroforézou na polyakrylamidovom géli s dodecylsulfátom sodným (10% polyakrylamid) a preniesli sa elektroforeticky na polyvinylidénfluoridové membrány. Membrány boli blokované počas 1 hodiny v Tris-pufrovanom fyziologickom roztoku obsahujúcom 0.1% Tween 20 a 5% nonfat suché mlieko. Následne primárna protilátka [FosB (5G4) #2251, 1: 4000; Cell Signaling, Danvers, MA], ktorý produkuje robustné značenie AFosB [45sa pridala do blokovacieho roztoku a membrány sa inkubovali cez noc pri 4 ° C. O 16 hodín neskôr sa membrány premyli a inkubovali so sekundárnou protilátkou [kozí anti-králičí IgG-HRP, 1: 2000, Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA] v blokovacom roztoku po dobu 1 hodín pri teplote miestnosti a signály vizualizované použitím zosilnenej chemiluminiscencie. Po imunodetekcii sa bloty odobrali, blokovali a inkubovali s primárnou protilátkou proti p-tubulínu [H-235, Santa Cruz Biotechnology, Inc., 1: 16,000] ako kontrola plnenia. Pás 35 / 37 kDa predstavujúci AFosB a 50 kDa pás zodpovedajúci p-tubulínu boli kvantifikované na každom blote s použitím denzitometra a Un-Scan-It gélového digitalizačného softvéru (Silk Scientific Inc., Orem, Utah). Optická hustota pôvodnej vzorky bola normalizovaná na druhú pre každú vzorku a výsledky sú vyjadrené ako percento zodpovedajúcich kontrolných roztokov fyziologického roztoku na každom blote, aby sa eliminovala variabilita medzi blotmi.
Štatistické analýzy 2.7
Na stanovenie účinkov na CPP [(mužský alebo ženský) × (HLA alebo LLA) × (expozícia fyziologickým roztokom alebo nikotínom) × (úprava fyziologickým roztokom alebo etanolom) ×] sa použila 4-faktorová analýza odchýlky (ANOVA)] a post hoc sa použil Tukeyov test. na zistenie významných rozdielov medzi skupinami. Na stanovenie rozdielov v ΔFosB medzi samcami a samicami zvierat HLA a LLA [(samec alebo samica) × (HLA alebo LLA) × (fyziologický roztok alebo nikotín)] pomocou Studentovho t-testu vykonaného post hoc na zistenie signifikantných výsledkov bola použitá 3-faktorová ANOVA. rozdiely medzi skupinami. Hladina p <0.05 bola prijatá ako dôkaz významného účinku. Pretože veľkosť vzorky v týchto štúdiách bola malá, čo viedlo k zníženiu štatistického výkonu, veľkosti účinku
3. výsledok
3.1 Behaviorálna reaktivita na nové prostredie
Lokomotorická aktivita, ktorú prejavujú dospievajúce potkany v novom otvorenom poli pre 5 min Obrázok 1. TDM sa normálne distribuoval (Kolmogorov-Smirnov D = 0.083, p> 0.05), pričom zvieratá vykazovali rozsah pohybu medzi 4339 a 7739 cm / 5 min. Stredná hodnota TDM bola 5936 cm / 5 min, pričom u jedného zvieraťa sa dosiahla stredná hodnota (zobrazená v sivom kruhu), ktorá bola vyradená z ďalšej štúdie. TDM pre HLA a LLA skupiny bol významne odlišný [t (86) = 12.15, p <0.05; Cohen's D = 2.56] s TDM 6621 TDM ± 71 cm / 5 min pre zvieratá HLA a 5499 ± 59 cm / 5 min pre zvieratá LLA. Zvieratá sa systematicky zaraďovali do experimentálnych skupín podľa reaktivity správania na nové prostredie, aby sa zabezpečilo, že všetky skupiny vykazovali rovnocennosť v novej aktivite na otvorenom poli a obsahovali rovnaký počet zvierat HLA a LLA (Tabuľka 1). Okrem toho do každej skupiny nebolo priradených viac ako muž 1 a samica 1 z daného vrhu.
3.2 Etanol CPP v dospelosti po expozícii nikotínu počas dospievania
Prvá skupina experimentov určila, či vystavenie nikotínu počas dospievania zvýšilo zraniteľnosť voči odmeňujúcim účinkom alkoholu v dospelosti a zistilo, či odpovede závisia od behaviorálnej reaktivity potkanov do nového prostredia. Po klasifikácii potkanov ako HLA alebo LLA dostali zvieratá injekcie fyziologického roztoku alebo nikotínu z PND 35 – 42 a CPP na etanol bol stanovený pri potkanoch mladých dospelých na PND 69. Výsledky sú uvedené v Obrázok 2. ANOVA naznačila významnú trojcestnú interakciu medzi novou aktivitou v otvorenom poli (HLA alebo LLA), expozíciou nikotínu a úpravou etanolom [F (3) = 1,19, p <5.165], s pozorovanou silou 0.05 a odhadovaným účinkom veľkosť
3.3 AFosB v dospievaní počas opakovanej expozície nikotínu
Pretože zvýšenie AFosB v limbických štruktúrach zvyšuje preferenciu liekov [15,16], experimenty určili, či expozícia adolescentného nikotínu mala rozdielny účinok na hladiny tohto transkripčného faktora v vStr a PFC z potkanov HLA a LLA. Po klasifikácii správania sa samce a samice potkanov dostávali injekcie buď fyziologického roztoku alebo nikotínu pre dni 4 alebo 8 začínajúce na PND 35. Vzorky mozgu sa izolovali 24 hodín po poslednej injekcii na PND 39, respektíve 43, a podrobili sa Western imunoblot analýzam. Výsledky merania AFosB vo vStr (Obrázok 3) naznačil významný hlavný účinok tak počtu dní injekcie [F (1, 16) = 4.542, p <0.05;
3.4 AFosB v dospelosti po expozícii nikotínu počas dospievania
Aby sa zistilo, či zvýšenie nikotínu indukované AFosB pozorované v adolescencii pretrvávalo v mladej dospelosti, na základe behaviorálnej klasifikácie potkanov, zvieratá dostávali injekcie fyziologického roztoku alebo nikotínu počas 8 dní od PND 35 – 42 a 27 dní neskôr, na PND 69 a XNUMX dní neskôr na PND XNUMX izolovali sa vStr a PFC a kvantifikovali sa AFosB. Výsledky merania AFosB vo vStr (Obrázok 4) naznačil významný hlavný účinok oboch fenotypov [F (1, 16) = 14.349, p <0.05;
4. diskusia
Predkladaná štúdia demonštruje, že vystavenie nikotínu počas dospievania má rozdielne účinky na CPP v etanole a zmeny v AFB v limbických oblastiach od potkanov s rozdielnou reaktivitou správania k novému prostrediu. Expozícia mladistvého nikotínu uľahčila zavedenie etanolu CPP v dospelosti len u zvierat, ktoré vykazovali vysokú lokomotorickú aktivitu v novom prostredí v dospievaní. Ďalej, aj keď adolescentné vystavenie nikotínu zvýšilo hladiny AFosB v vStr a PFC po 8 dňoch podávania, tento nárast pretrvával do dospelosti len u zvierat, ktoré vykazovali nízku lokomotorickú aktivitu v novom prostredí.
Výsledky teda ukazujú, že účinky adolescentnej expozície nikotínu na etanol CPP v dospelosti závisia od behaviorálneho fenotypu zvierat a naznačujú, že trvalé zvýšenie AFosB v limbických oblastiach nie je nevyhnutné alebo dostatočné na uľahčenie CPP v etanole v dospelosti.
Zistenie, že adolescentná expozícia nikotínu uľahčuje CPP etanolu v dospelosti u HLA zvierat, súhlasí so zisteniami, že jedinci so zvýšenou reaktivitou na správanie voči novým stimulom vykazujú vyššiu citlivosť na odmeňovanie účinkov zneužívaných zlúčenín ako jedinci s nižšou reaktivitou [1].1-8]. Treba však poznamenať, že CPP môže byť produkovaný posilnením špecifického správania počas kondicionovania alebo dôsledkom podmienených účinkov liečiva [47], a preto je potrebná opatrnosť pri interpretácii výsledkov CPP ako indikátora zvýšenej odmeny za lieky. Smith a kol. [48] nezistili zvýšený príjem etanolu u dospelých potkanov Sprague-Dawley po expozícii mladistvému nikotínu, čo svedčí o tom, že vlastnosti odmeňovania etanolu neboli zmenené predchádzajúcimi skúsenosťami s nikotínom. Avšak títo autori použili kontinuálnu expozičnú paradigmu počas 21 dní a nerozlišovali zvieratá na základe lokomotorickej aktivity v novom prostredí. Výsledky tejto štúdie naznačujú, že dôsledky denných injekcií nikotínu sa môžu líšiť od dôsledkov spôsobených kontinuálnou expozíciou nikotínom a preukázať dôležitosť rozlišovania medzi HLA a LLA potkanmi, čo je rozdiel, ktorý môže byť obzvlášť dôležitý pri štúdiu adolescentov. Hoci mnohí vyšetrovatelia uviedli, že adolescentná populácia môže byť citlivejšia na odmeňovanie a posilňovanie účinkov liekov [49-51], toto pozorovanie pravdepodobne odráža vývojovú tendenciu adolescentov mať vlastnosti HLA zvierat [10]. Štúdie v ľudskej populácii preukázali, že vrcholy pociťované v období adolescencie a potom poklesy u tých, ktorí udržujú adolescentné pocity, ktoré s najväčšou pravdepodobnosťou eskalujú požívanie alkoholu [52].
Výsledky naznačujúce diferenciálny účinok expozície adolescentného nikotínu na AFosB v mozgu HLA a LLA potkanov podčiarkujú inherentné rozdiely medzi týmito skupinami zvierat. Výsledky ukazujú jasný nárast hladín AFosB v vStr a PFC z oboch skupín potkanov po 8 dňoch adolescentnej expozície nikotínu, ale tento účinok pretrvával do dospelosti len v mozgu potkanov LLA. Soderstrom a kol. [53] preukázali, že 10 dni vystavenia nikotínu (0.4 mg / kg, ip) z PND 34 – 43 zvýšili imunoreaktivitu FosB v NAcc v 37 dňoch po poslednej injekcii nikotínu, ale títo autori nešpecificky merali AFosB alebo charakterizovali behaviorálny fenotyp. zvieratá. Výsledky naznačujúce, že predĺžené zvýšenie AFosB po adolescentnej expozícii nikotínu sa vyskytuje len u adolescentov LLA, naznačuje, že dospievajúci LLA sú „dospelí“ ako ich HLA náprotivky. Dlhodobé zvýšenie AFosB po podaní liečiva sa opakovane preukázalo u dospelých zvierat [31, 33, 34].
Očakávalo sa, že HLA zvieratá vystavené nikotínu počas adolescencie by demonštrovali ako CPP v etanole indukované CPP v dospelosti, tak aj trvalé zvýšenie AFosB, ktoré pravdepodobne senzibilizovalo cesty odmeňovania. Výsledky však ukazujú, že pretrvávajúce zvýšenia AFosB po expozícii dospievajúceho nikotínu nie sú ani nevyhnutné, ani dostatočné na stanovenie CPP v etanole v dospelosti. Pretože zaujatá paradigma CPP použitá v tejto štúdii je citlivá na anxiolytické účinky etanolu [54, 55], etanolom indukovaný CPP pozorovaný po expozícii adolescentom nikotínu môže byť sprostredkovaný skôr zmenami v citlivosti na anxiolytické účinky etanolu, ako výsledkom senzibilizovanej dráhy odmeňovania. Dospelé zvieratá vystavené nikotínu počas dospievania vykazujú v dospelosti zvýšenú citlivosť na stres a úzkosť, o čom svedčí zvýšený obsah kortikosterónu [28], znížené skúmanie nového otvoreného poľa a skrátenie času v otvorených ramenách zvýšeného plus bludiska [29, 30]. Zdá sa teda pravdepodobné, že dospelé zvieratá vystavené nikotínu ako adolescenti môžu v dôsledku anxiolytických vlastností etanolu vykazovať CPP etanolu v zaujatej paradigme. Zaujímavé je, že zvieratá vykazujúce zvýšenú expresiu AFosB môžu byť menej citlivé na stres a úzkosť, ako je indikované zvýšeným časom stráveným v otvorených ramenách zvýšeného plus bludiska [56], predĺžiť čas plávania v teste Porsoltovho núteného plávania [56], zvýšená odolnosť po sociálnom porážkovom strese [57] a znížená kortikosterónová reakcia na obmedzujúci stres [58]. Teda LLA zvieratá vystavené nikotínu, ktoré vykazujú trvalú expresiu AFosB ako dospelí, nemusia nájsť anxiolytické účinky odmeňovania etanolu a v dôsledku toho nevykazujú CPP v zaujatej paradigme. Skutočne, LLA zvieratám injikovaným etanolom sa prejavilo veľké zníženie (D = 0.80) v čase strávenom na strane spárovanej s etanolom v porovnaní so zvieratami LLA injikovanými fyziologickým roztokom, čo svedčí o averzii podmieneného etanolom vyvolaného podmieneného miesta. Ďalšie štúdie sú potrebné na potvrdenie rozdielov medzi HLA a LLA zvieratami pri úzkostnom správaní a citlivosti na stres po expozícii dospievajúceho nikotínu.
Hoci neboli pozorované žiadne štatisticky významné rozdiely medzi samcami a samicami zvierat, boli prítomné niektoré stredné až veľké účinky súvisiace s pohlavím. Merania AFosB v PFC boli približne o 25% nižšie u mužských adolescentov ako u ich ženských náprotivkov po injekciách fyziologického roztoku 4 a približne o 19% vyššie u mužov ako u dospievajúcich žien po injekciách 4 nikotínu, čo naznačuje, že dospievajúci muži môžu vykazovať zvýšenie AFosB po menšom vystavení nikotínu ako dospievajúce ženy. Okrem toho merania AFosB boli 15-17% vyššie u dospelých vStr a PFC ako u dospelých žien bez ohľadu na to, či boli tieto zvieratá vystavené fyziologickému roztoku alebo nikotínu ako adolescentom. Toto zistenie je v súlade so správou, ktorá dokazuje, že dospelé samce vykazujú mierne vyššie hladiny AFosB v jadre nucleus accumbens v oblastiach jadra a škrupiny ako ich ženské náprotivky a že tento rozdiel je prítomný u zvierat injikovaných buď fyziologickým roztokom alebo kokaínom (15 mg / kg). pre 2 týždne, čo naznačuje, že tento rozdiel je nezávislý od vystavenia lieku [45]. Podľa našich vedomostí žiadne štúdie s dospievajúcimi alebo dospelými zvieratami nepozorovali rozdiely pohlavia v expresii AFosB po expozícii nikotínu; tieto zistenia si vyžadujú ďalšie preskúmanie.
Stručne povedané, dospievajúce zvieratá, ktoré preukazujú rozdiely v reaktivite správania na nové prostredie, tiež vykazujú rozdiely v: 1) dlhodobých dôsledkoch vystavenia nikotínu na citlivosť na účinky etanolu v dospelosti; 2) indukcia ΔFosB počas opakovanej expozície nikotínu; a 3) perzistencia ΔFosB po opakovanej expozícii nikotínu. Tieto objavy poskytujú základ pre skúmanie rozdielov v inherentnej zraniteľnosti dospievajúcich zvierat, charakteristík, ktoré je možné skrínovať pomocou relatívne jednoduchých meraní správania.
prednosti
- Expozícia mladistvého nikotínu má za následok alkohol CPP pri vysokom pocite, ktorý hľadá dospelých
- Expozícia nikotínu u adolescentov zvyšuje expresiu AFosB
- Expresia AFosB po adolescentnom nikotíne pretrváva v dospelosti u žiadateľov o nízku senzáciu
Poďakovanie
Výskum podporil štát Florida a NIAAA Národného ústavu zdravotníctva pod číslom F32AA016449. Obsah je výhradnou zodpovednosťou autorov a nemusí predstavovať oficiálne názory štátu Florida alebo National Institutes of Health.
poznámky pod čiarou
Zrieknutie sa zodpovednosti vydavateľa: Toto je súbor PDF s neupraveným rukopisom, ktorý bol prijatý na uverejnenie. Ako službu pre našich zákazníkov poskytujeme túto skoršiu verziu rukopisu. Rukopis sa podrobí kopírovaniu, sádzaniu a preskúmaniu výsledného dôkazu skôr, ako sa uverejní vo svojej konečnej podobe. Upozorňujeme, že počas výrobného procesu môžu byť zistené chyby, ktoré by mohli mať vplyv na obsah, a všetky právne zrieknutia sa zodpovednosti, ktoré sa vzťahujú na časopis.
Referencie
;