Funkčná úloha N-terminálnej domény ΔFosB v reakcii na stres a zneužívanie drog (2014)

Neuroscience. 2014 Oct 10. pii: S0306-4522(14)00856-2. doi: 10.1016/j.neuroscience.2014.10.002.

Ohnishi YN1, Ohnishi YH1, Vialou V2, Mouzon E2, LaPlant Q2, Nishi A3, Nestler EJ4.

abstraktné

Predchádzajúca práca sa týka transkripčného faktora, AFosB, pôsobiaceho v nucleus accumbens, pri sprostredkovaní pro-odmeňovacích účinkov liekov zneužívania, ako je kokaín, ako aj pri sprostredkovaní odolnosti voči chronickému sociálnemu stresu. Avšak transgénne a vírusové génové prenosové modely použité na vytvorenie týchto AFosB fenotypov exprimujú okrem AFosB aj alternatívny translačný produkt AFosB mRNA, nazývaný A2AFosB, ktorému chýba N-terminálny 78 aa prítomný v AFosB. Aby sme študovali možný príspevok A2FosB k týmto liekovým a stresovým fenotypom, pripravili sme vírusový vektor, ktorý nadmerne exprimuje bodovú mutantnú formu AFosB mRNA, ktorá nemôže podstúpiť alternatívnu transláciu, ako aj vektor, ktorý nadmerne exprimuje samotný A2FosB. Naše výsledky ukazujú, že mutantná forma AFosB, keď je nadmerne exprimovaná v nucleus accumbens, reprodukuje zvýšenie odmeny a resiliencie pozorovanej u našich skorších modelov, bez účinkov pozorovaných pre A2FosB. Nadmerná expresia FosB plnej dĺžky, ďalšieho hlavného produktu génu FosB, tiež nemá žiadny účinok. Tieto zistenia potvrdzujú jedinečnú úlohu AFosB v nucleus accumbens pri kontrole reakcií na lieky zneužívania a stresu.

ÚVOD

AFosB je kódovaný kódom FosB a zdieľa homológiu s inými faktormi transkripcie Fos rodiny, medzi ktoré patria c-Fos, FosB, Fra1 a Fra2. Všetky proteíny rodiny Fos sú indukované rýchlo a prechodne v špecifických oblastiach mozgu po akútnom podaní mnohých liekov zneužívania [pozri ]. Tieto reakcie sú najvýraznejšie pozorované v nucleus accumbens (NAc) a dorzálnom striate, ktoré sú dôležitými mediátormi odmeňovania a lokomotorického pôsobenia liekov. Všetky tieto proteíny rodiny Fos sú však vysoko nestabilné a počas niekoľkých hodín po podaní liečiva sa vracajú na základné hodnoty. Na rozdiel od toho, AFosB, kvôli svojej nezvyčajnej stabilite in vitro a in vivo (; Carle a kol., 2006; ) sa po opakovanej expozícii lieku jedinečne akumuluje v tých istých oblastiach mozgu (\ t; ; ). Novšie štúdie ukázali, že chronické vystavenie určitým formám stresu tiež indukuje akumuláciu AFosB v NAc a že takáto indukcia sa prednostne vyskytuje u zvierat, ktoré sú relatívne odolné voči škodlivým účinkom stresu (tj odolné zvieratá) (; , ).

Preukázali sme, že nadmerná expresia AFosB v NAc, či už u indukovateľných bitransgénnych myší alebo lokálnym génovým prenosom sprostredkovaným vírusom, zvyšuje citlivosť zvieraťa na odmeňujúce a lokomotoricky aktivujúce účinky kokaínu a iných drog zneužívania (; ; ; ; Robison a kol., 2013). Takáto indukcia tiež zvyšuje spotrebu a motiváciu prirodzených odmien (; ; ; ; ; Pitchers a kol., 2009; ), zvyšuje odmenu v stimulácii mozgu v samo-kraniálnych paradigmách \ t) a poskytuje zvieratám odolnosť voči viacerým formám chronického stresu (\ t, ). Podobne, myši, ktoré konštitutívne nemajú expresiu FosB plnej dĺžky, ale vykazujú zvýšenú expresiu AFosB, vykazujú zníženú citlivosť na stres (). Tieto zistenia spoločne podporujú názor, že AFosB, pôsobiaci v NAc, zvyšuje stav odmeňovania, nálady a motivácie zvieraťa.

Hlavnou výhradou týchto štúdií je však to, že ďalší produkt FosB Gén, označovaný ako A2FosB, je tiež exprimovaný vo všetkých týchto geneticky mutantných myšiach a vírusových vektorových systémoch, pričom ponecháva otvorený možný príspevok A2FosB k pozorovaným behaviorálnym fenotypom. A2AFosB sa preloží z alternatívneho štartovacieho kodónu umiestneného v AFosB transkript mRNA (). Tento alternatívny preklad vedie k vytvoreniu A2FosB, ktorému chýba 78 N-terminálna aa AFosB. V tejto štúdii sme skúmali úlohu A2FosB v modeloch zneužívania a stresu pri liekoch nadmernou expresiou, alebo AFosB alebo FosB, s AAV (adeno-asociovanými vírusmi) vektormi; Použili sme mutantnú formu AFosB mRNA, ktorá nemôže podstúpiť tento alternatívny translačný mechanizmus. Naše výsledky potvrdzujú, že pro-odmeny a pro-pružné akcie pozorované v predchádzajúcich štúdiách sú skutočne sprostredkované prostredníctvom AFOSB a nie dvoma ďalšími protenprodukciami. FosB gén, FosB s plnou dĺžkou alebo A2FosB.

METÓDY

zver

Pred experimentovaním boli samce myší C9BL / 11J staré 57-6-týždne (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, USA) umiestnené v piatich kolách v klietke v kolóniovej miestnosti nastavenej na konštantnú teplotu (23 ° C). cyklus 12 hr svetlo / tma (svetlá zapnuté na prístroji 7 AM) s prístupom ad libitum k jedlu a vode. Niektoré experimenty využívali bitransgénne myši, u ktorých je nadexpresia AFosB pod kontrolou systému regulácie tetracyklínového génu, ako je opísané (). Myši boli použité na doxycyklíne (na udržanie expresie génu) alebo na doxycyklíne, ktorý umožňuje expresiu AFosB. Všetky protokoly boli schválené Inštitucionálnym výborom pre starostlivosť o zvieratá a používanie (IACUC) na Mount Sinai.

AAV vektory

Použili sme sérotyp AAV2 na balenie AAV vektorov exprimujúcich FosB, AFosB alebo A2FosB s plnou dĺžkou pod promótorom ľudského bezprostredného skorého cytomegalovírusu (CMV) s fluorescenčným proteínom Venuše kódovaným po intervenujúcom IRES2 (interné ribozómové miesto opätovného vstupu 2). Konštrukt AAV-AFosB exprimoval mutantnú formu AFosB mRNA, kde kodón predstavujúci Met79 bol mutovaný na Leu, aby sa odstránilo alternatívne miesto začiatku translácie, ktoré generuje A2FosB.

Prenos génov sprostredkovaný vírusmi

Myši boli umiestnené v malých zvieracích stereotaxických prístrojoch pod anestéziou ketamínom (100 mg / kg) a xylazínom (10 mg / kg) a ich lebečné povrchy boli vystavené. Injekčné ihly s objemom tridsaťtri gauge boli bilaterálne znížené do NAc, aby sa infúzia 0.5 μl AAV vektora uskutočnila v uhle 10 ° (anterior / posterior + 1.6; mediálny / laterálny + 1.5; dorzálny / ventrálny - 4.4 mm). Infúzie sa uskutočnili rýchlosťou 0.1 μl / min. Zvieratá dostávajúce injekcie AAV sa nechali zotaviť aspoň po dobu 24 po operácii. Na potvrdenie expresie boli myši anestetizované a intrakardiálne perfundované 4% paraformaldehydom / PBS (fosfátom pufrovaný fyziologický roztok). Mozgy sa chránili kryo pomocou 30% sacharózy a potom sa zmrazili a uskladnili pri -80 ° C až do použitia. Koronálne rezy (40 μm) boli narezané na kryostate a spracované na skenovanie konfokálnou mikroskopiou.

Behaviorálne testovanie

Myši sa študovali s niekoľkými štandardnými testami správania podľa publikovaných protokolov nasledovne:

Chronické (10 dní) sociálny porážkový stres bola vykonaná presne tak, ako je opísané (; ). Stručne povedané, jedna experimentálna myš a jeden agresor CD1 boli zostavené pre 5 min v domácej klietke myši CD1. Potom boli oddelené plastovým deličom, ktorý bol perforovaný, aby umožnil zmyslový kontakt pre pripomienku dňa. Každé ráno počas 10 dní bola experimentálna myš presunutá do inej agresívnej myši. Neodborné kontrolné myši podstúpili podobné expozície, ale s inými myšami C57BL / 6J. Testy pre sociálna interakcia boli uskutočnené tak, ako bolo opísané vyššie (; ). Stručne povedané, testovacia myš bola umiestnená do novej arény, ktorá obsahovala malú klietku na jednej strane. Pohyb (napr. Prejdená vzdialenosť, strávený čas v blízkosti tejto malej klietky) bol pôvodne monitorovaný pre 150 sek, keď bola malá klietka prázdna, nasledovaná ďalším 150 sek s myšou CD1 v tejto klietke. Informácie o pohybe boli získané pomocou softvéru EthoVision 5.0 (Noldus).

Použili sme štandard, nezaujatý podmienené miesto preferencie (CPP) (; Robison a kol., 2013). Stručne povedané, zvieratá boli testované na 20 min v trojkomorovom boxe s foto-lúčom, ktorý bol monitorovaný foto-lúčom, s voľným prístupom k environmentálne odlišným bočným komorám. Myši sa potom rozdelili do kontrolných a experimentálnych skupín s ekvivalentným skóre pred testom. Po experimentálnej manipulácii myši podstúpili štyri tréningy 30 min (striedanie kokaínu a fyziologického roztoku). V deň testu mali myši 20 min neobmedzený prístup do všetkých komôr a skóre CPP sa vypočítalo odpočítaním času stráveného v komore spárovanej s kokaínom mínus čas strávený v komore spárovanej s fyziologickým roztokom. Lokomotoricky indukovaná lokomotorická aktivita kokaínu bola meraná pomocou fotobeamového zlomu v CPP boxe pre 30 min po každej testovanej injekcii.

Zvýšené plus bludisko testy boli uskutočnené s použitím čierneho plexiskla vybaveného bielymi spodnými povrchmi, aby bol). Myši sa umiestnili do stredu bludiska a nechali voľne preskúmať bludisko pre 5 min za podmienok červeného svetla. Poloha každej myši v čase v otvorených a uzavretých ramenách bola monitorovaná videotrackingovým zariadením (Ethovision) a kamerou umiestnenou na strope.

Všeobecne, ambulantne lokomotorická aktivita počas nočnej fázy sa hodnotili v domácich klietkach so zariadením na fotobunkové mriežky (Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA), ktoré počítalo počet prestávok ambulantných lúčov fotónov počas obdobia 12 hod.).

Western blotting

Vzorky NAc boli podrobené Western blotu, ako je opísané (, ). Mrazené NAc disekcie boli homogenizované v 100 ul pufra obsahujúceho koktaily inhibítora fosfatázy I a II (Sigma, St. Louis, MO, USA) a inhibítory proteáz (Roche, Basel, Švajčiarsko) s použitím ultrazvukového procesora (Cole Parmer, Vemon Hills, IL , USA). Koncentrácie proteínov boli stanovené pomocou DC proteínového testu (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) a 10-30 μg proteínu bol nanesený na 12.5% alebo 4% -15% gradient Tris-HCI plyacrylamidové gély na frakcionáciu elektroforézou (Bio -Rad). Po prenesení proteínov na nitrocelulózové filtre boli filtre inkubované s anti-FosB protilátkou, ktorá rozpoznáva všetky FosB génové produkty, potom sekundárnou protilátkou a nakoniec kvantifikované použitím systému Odyssey (Li-Cor) podľa protokolov výrobcu.

štatistika

Použili sa ANOVA a t-testy študentov, korigované na viacnásobné porovnania, s významnosťou nastavenou na p <0.05.

VÝSLEDKY

Ako je zobrazené v Obrázok 1Asa FosB gén kóduje mRNA pre FosB plnej dĺžky a pre AFosB. ΔFosB mRNA je generovaná z alternatívneho zostrihu v Exon 4 FosB primárny transkript; to má za následok vytvorenie predčasného stop kodónu a skráteného proteínu AFosB, ktorému chýba C-koncový 101 aa prítomný vo FosB. FosB a AFosB mRNA má rovnaký ATG štart kodón, umiestnený smerom ku koncu 3 Ex Exon 1. Je známe už od pôvodného klonovania FosB produkty, ktoré tieto dve mRNA tiež zdieľajú alternatívne štartovacie miesta pre transláciu v Exon 2, nazývané A1, A2 a A3 ATG. Predchádzajúca práca ukázala, že minoritný proteínový produkt je generovaný z AFosB mRNA, ale nie FosB mRNA, cez ATN ATXXX; tento proteín sa nazýva A2FosB a nemá 2 aa N-koncovú oblasť AFosB (). Naopak, Δ1 a Δ3 ATG sa zdajú byť tiché, pretože neexistujú dôkazy o ich použití pri preklade FosB alebo ΔFosB prepisy.

Obrázok 1 

Úrovne výrazu FosB génových produktov

Obrázok 1B ilustruje indukciu FosB génové produkty v NAc po opakovanom podávaní kokaínu, pričom zvieratá skúmali 2 h po poslednej dávke kokaínu. V tomto časovom bode vykazujú proteíny AFosB aj FosB signifikantnú indukciu kokaínom, bez konzistentnej indukcie A2FosB. Všimnite si, že indukcia AFosB aj FosB je odlišná od vzoru pozorovaného pri 24 hodine alebo viac po poslednej dávke liečiva, keď je indukovaný len AFosB v dôsledku jedinečnej stability proteínu AFosB (; ; ). Na rozdiel od nedostatku indukcie A2FosB opakovaným podávaním kokaínu sa však bitransgénny myšací systém, ktorý sme použili na nadmernú expresiu AFosB a na štúdium jeho následkov správania (; ; ) vedie k významnej, aj keď nižšej hladine nadmernej expresie A2AFosB navyše k AFosB (Obrázok 1C). Podobná úroveň indukcie A2FosB je pozorovaná u našich vírusových vektorov, ktoré nadmerne exprimujú A divokého typu.FosB (pozri napr Obrázok 2). Tieto pozorovania zvyšujú možnosť, že niektoré z údajných účinkov AFosB uvedených skôr by mohli byť sprostredkované čiastočne prostredníctvom A2FosB.

Obrázok 2

Selektívne vyjadrenie FosB génových produktov s AAV vektormi v bunkách Neuro2A

Na rozlíšenie diferenciálnych rolí AFosB voči A2FosB sme vytvorili AAV vektor, ktorý nadmerne exprimuje samotný A2FosB, ako aj nový vektor, ktorý nadmerne exprimuje mutantnú formu AFosB mRNA (mΔFosB mRNA), ktorá nemôže byť vystavená alternatívnej translácii za vzniku A2AFosB. Oba vektory tiež exprimujú Venuši ako marker expresie. Porovnali sme účinky týchto dvoch vektorov s inými, ktoré ako kontrolu exprimujú FosB plus Venuša alebo Venuša. Schopnosť týchto nových AAV vektorov selektívne nadmerne exprimovať ich kódované transgény je znázornená na obr Obrázok 2.

Potom otestujte účinok každého z nich FosB génový produkt, pôsobiaci v NAc. pri komplexnom správaní sme každý z týchto AAV injikovali do tejto oblasti mozgu bilaterálne oddelených skupín myší a 3 týždňov neskôr, keď je expresia transgénu maximálna (Obrázok 3A), vykonala sériu testov. Najprv sme vyhodnotili schopnosť FosB génové produkty na ovplyvnenie pro-resilienčného fenotypu uvedeného predtým pre AFosB v paradigme sociálnej porážky (, ), Ako je uvedené v Obrázok 3Akontrolné myši exprimujúce samotnú Venušu vykazovali očakávaný pokles v sociálno-interakčnom správaní, dobre zavedený behaviorálny marker citlivosti (; ). Nadmerná expresia mAFosB úplne zmenila tento fenotyp, na rozdiel od A2FosB a FosB, ktoré nemali žiadny účinok.

Obrázok 3 

Účinok FosB génové produkty v NAc na behaviorálne reakcie na kokaín alebo sociálny stres

Na otestovanie relatívneho príspevku každého z nich FosB génový produkt k odmeňujúcim účinkom kokaínu, sme nadmerne exprimovali samotný A2FosB, mFosB alebo FosB v NAc a študovali zvieratá v paradigme podmieneného miesta preferencie. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 3Bbilaterálna nadmerná expresia mAFosB v NAc zvyšuje účinky kondicionovania miesta prahovej dávky kokaínu, ktorá nevyvoláva významné miesto v kontrolných zvieratách exprimujúcich Venuši. Na rozdiel od toho, nadmerná expresia A2FosB alebo FosB nemala žiadny vplyv na kondicionovanie miesta kokaínu. Keďže sme použili prahovú dávku kokaínu, ktorá nevyvolávala u kontrolných zvierat významné miesto, nemôžeme vylúčiť možnosť, že by FosB alebo A2FosB mohli znížiť odmeňujúce účinky kokaínu.

Nakoniec, na vyhodnotenie základného správania sme skúmali lokomotorickú aktivitu v domácej klietke zvierat, ako aj správanie podobné úzkosti vo zvýšenom bludisku. Nadmerná expresia FosB, mAFosB alebo A2FosB v NAc mala vplyv na lokomotorickú aktivitu, aj keď FosB a A2FosB - ale nie mFosB - produkovali malé, ale významné zníženie správania podobného úzkosti vo zvýšenom plus bludisku (Obrázok 3D, E). Tieto údaje naznačujú, že FosB Expresia génu významne nezmení správanie za normálnych podmienok.

DISKUSIA

Výsledky tejto štúdie potvrdzujú, že fenotyp uvedený skôr pre AFosB je skutočne sprostredkovaný prostredníctvom AFosB, a nie pomocou ACNUMXFosB, alternatívne preloženého produktu AFosB mRNA, ktorá nemá AF-B N-koniec. Zatiaľ čo naše predtým používané nástroje na nadmernú expresiu AFosB tiež vedú k tvorbe nízkych hladín A2FosB, ukázali sme tu, že nadexpresia v NAc mutovanej formy AFosB mRNA, ktorá nemôže generovať A2AFosB v dôsledku mutácie alternatívneho štartovacieho kodónu, rekapituluje zvýšenie tak v odmeňovaní kokaínu, ako aj v odolnosti voči sociálnemu deficitu stresu, ktorý bol uvedený predtým pre AFosB (; ). Navyše nadmerná expresia samotného A2FosB nemá žiadny vplyv na kokaínové ani stresové reakcie. Tiež po prvý raz ukázali, že nadmerná expresia FosB s plnou dĺžkou v NAc tiež nemá žiadny vplyv na behaviorálne reakcie na kokaín alebo stres.

Aj keď tieto výsledky nevylučujú možnosť, že A2FosB ako minoritný proteínový produkt FosB gén, mohol by mať funkčné účinky v iných oblastiach mozgu alebo v periférnych tkanivách, naše zistenia však potvrdzujú jedinečný prínos AFosB, pôsobiaceho v NAc odmeňovacom okruhu, pri podpore odmeňovania kokaínu a odolnosti voči stresu.

prednosti

  • ΔFosB mRNA vedie k vzniku AFosB a k minoritnému alternatívne translatovanému A2FosB.
  • Nadmerná expresia AFosB samotného potvrdzuje jeho pro-odmenu a pro-resilienčný fenotyp.
  • Na rozdiel od toho, A2FosB nemá žiadny vplyv na odmenu kokaínu alebo stresovú zraniteľnosť.
  • FosB s plnou dĺžkou, kódovaný FosB mRNA, tiež neovplyvňuje odmenu alebo odolnosť.

Poďakovanie

Táto práca bola podporená grantmi od Národného inštitútu duševného zdravia a Národného inštitútu pre zneužívanie drog a nadácie Ishibashi a Japonskej spoločnosti pre podporu vedy (JSPS KAKENHI čísla: 24591735).

poznámky pod čiarou

Zrieknutie sa zodpovednosti vydavateľa: Toto je súbor PDF s neupraveným rukopisom, ktorý bol prijatý na uverejnenie. Ako službu pre našich zákazníkov poskytujeme túto skoršiu verziu rukopisu. Rukopis sa podrobí kopírovaniu, sádzaniu a preskúmaniu výsledného dôkazu skôr, ako sa uverejní vo svojej konečnej podobe. Upozorňujeme, že počas výrobného procesu môžu byť zistené chyby, ktoré by mohli mať vplyv na obsah, a všetky právne zrieknutia sa zodpovednosti, ktoré sa vzťahujú na časopis.

Referencie

  1. Bol LE, Hedges VL, Vialou V, Nestler EJ, Meisel RL. Expresia Delta JunD v nucleus accumbens zabraňuje sexuálnej odmene u samíc sýrskych škrečkov. Gény Brain Behav. 2013, 12: 666-672. [Článok bez PMC] [PubMed]
  2. Berton O, McClung CA, DiLeone RJ, Krishnan V, Russo S, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Základná úloha BDNF v mezolimbickej dopamínovej dráhe v sociálnom porážkovom strese. Science. 2006, 311: 864-868. [PubMed]
  3. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Absencia konzervatívnej C-terminálnej degrónovej domény prispieva k jedinečnej stabilite AFosB. Eur J Neurosci. 2007, 25: 3009-3019. [PubMed]
  4. Chen JS, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Chronické antigény súvisiace s Fos: stabilné varianty deltaFosB indukované v mozgu chronickými liečbami. J Neurosci. 1997, 17: 4933-4941. [PubMed]
  5. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. AFosB zvyšuje stimuláciu kokaínu. J Neurosci. 2003, 23: 2488-2493. [PubMed]
  6. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. AFosB diferenciálne moduluje nukleus accumbens priamu a nepriamu funkciu dráhy. Proc Natl Acad Sci USA. 2013, 110: 1923-1927. [Článok bez PMC] [PubMed]
  7. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Nadmerná expresia AFosB v nucleus accumbens zvyšuje sexuálnu odmenu u samíc sýrskych škrečkov. Gény Brain Behav. 2009, 8: 442-449. [Článok bez PMC] [PubMed]
  8. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. Myši s mutáciou FosB: Strata chronickej indukcie kokaínu proteínov súvisiacich s Fos a zvýšená citlivosť na psychomotorické a odmeňujúce účinky kokaínu. Proc Natl Acad Sci USA. 1997, 94: 10397-10402. [Článok bez PMC] [PubMed]
  9. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia dlhodobého AP-1 komplexu pozostávajúceho z pozmenených proteínov typu Fos v mozgu chronickým kokaínom a inými chronickými liečeniami. Neurón. 1994, 13: 1235-1244. [PubMed]
  10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Expresia transkripčného faktora AFosB v mozgu riadi citlivosť na kokaín. Nature. 1999, 401: 272-276. [PubMed]
  11. Monteggia LM, Luikart B, Barrot M, Theobald D, Malkovska I, Nef S, Parada LF, Nestler EJ. BDNF podmienené knockouty ukazujú rodové rozdiely v správaní súvisiacom s depresiou. Biol Psychiatria. 2007, 61: 187-197. [PubMed]
  12. Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr AFosB zvyšuje odmeňujúce účinky kokaínu a súčasne znižuje pro-depresívne účinky kappa-opioidného agonistu U50488. Biol Psychiatria. 2012, 71: 44-50. [Článok bez PMC] [PubMed]
  13. Nestler EJ. Transkripčné mechanizmy závislosti: úloha deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008, 363: 3245-3255. [Článok bez PMC] [PubMed]
  14. Ohnishi YN, Ohnishi YH, Hokama M, Nomaru H, Yamazaki K, Tominaga Y, Sakumi K, Nestler EJ, Nakabeppu Y. FosB Je nevyhnutný pre zvýšenie tolerancie stresu a antagonizuje lokomotorickú senzibilizáciu FosB. Biol Psychiatria. 2011, 70: 487-495. [Článok bez PMC] [PubMed]
  15. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery P, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia AFosB v oblastiach mozgu súvisiacich s odmenou po chronickom strese. J Neurosci. 2004, 24: 10594-10602. [PubMed]
  16. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Rozlišujúce vzory indukcie AFosB v mozgu drogami zneužívania. Synapsie. 2008, 62: 358-369. [Článok bez PMC] [PubMed]
  17. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. AFosB v nucleus accumbens je rozhodujúci pre posilnenie účinkov sexuálnej odmeny. Gény Brain Behav. 2010, 9: 831-840. [Článok bez PMC] [PubMed]
  18. Pitchers KK, Vialou V, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. Sexuálna skúsenosť zvyšuje amfetamínovú odmenu a spinogenézu nucleus accumbens prostredníctvom dopamínovej aktivity D1 receptora a indukciu deltaFosB. J Neurosci. 2013, 33: 3434-3442. [Článok bez PMC] [PubMed]
  19. Roybal K, Theobold D, DiNieri JA, Graham A, Russo S, Krishnan V, Chakravarty S, Peevey J, Oehrlein N, Birnbaum S, Vitaterna MH, Orsulak P, Takahashi JS, Nestler EJ, Carlezon WA, Jr, McClung CA. Mania podobné správanie vyvolané narušením CLOCK. Proc Natl Acad Sci USA. 2007, 104: 6406-6411. [Článok bez PMC] [PubMed]
  20. Teegarden SL, Bale TL. Zníženie diétnej preferencie spôsobuje zvýšenú emocionalitu a riziko recidívy z potravy. Biol Psychiatry. 2007, 61: 1021-1029. [PubMed]
  21. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulácia stability AFosB fosforyláciou. J Neurosci. 2006, 26: 5131-5142. [PubMed]
  22. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylácia AFosB sprostredkováva jeho stabilitu in vivo. Neuroscience. 2009, 158: 369-372. [Článok bez PMC] [PubMed]
  23. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, III, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, III, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren B, Krishnan V, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, Nestler EJ. AFosB v okruhoch odmeňovania mozgu sprostredkováva odolnosť voči stresu a antidepresívnym reakciám. Nature Neurosci. 2010; 13: 745-752. [Článok bez PMC] [PubMed]
  24. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ. Faktor odpovede na sére podporuje odolnosť voči chronickému sociálnemu stresu prostredníctvom indukcie AFosB. J Neurosci. 2010b; 30: 14585-14592. [Článok bez PMC] [PubMed]
  25. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham D, Green TA, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños CA. Vplyv AFosB v nucleus accumbens na prirodzené správanie súvisiace s odmenou. J Neurosci. 2008, 28: 10272-10277. [Článok bez PMC] [PubMed]
  26. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. AFosB reguluje chod kolesa. J Neurosci. 2002, 22: 8133-8138. [PubMed]
  27. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. AFosB: Základná úloha pre AFosB v nucleus accumbens pri účinku morfínu. Nature Neurosci. 2006, 9: 205-211. [PubMed]