Prefrontal Cortical Circuit pre depresívne a úzkostné správanie sprostredkované cholecystokinínom: Úloha ΔFosB (2014)

abstraktné

Znížená neuronálna aktivita stredného prefrontálneho kortexu (mPFC) je spojená s depresiami a úzkosťami podobnými správaniu u myší. Molekulárne mechanizmy, ktoré sú základom zníženej aktivity mPFC a jej proliečivej úlohy však zostávajú neznáme. Ukážeme tu, že indukcia transkripčného faktora AFosB v mPFC, konkrétne v oblasti predimetrickej (PrL), sprostredkuje náchylnosť na stres. Indukcia AFOS v PrL sa vyskytla selektívne u vnímavých myší po chronickom sociálnom porážkovom stresu a nadmerná expresia AFOSB v tejto oblasti, ale nie v blízkej infralimbickej (IL) oblasti, zvýšila citlivosť na stres. FosB tieto účinky vyvolával čiastočne indukciou receptora cholecystokinínu (CCK) -B: Blokáda CCKB v mPFC indukuje rezistentný fenotyp, zatiaľ čo podávanie CCK do mPFC napodobňuje anxiogénne a depresívne účinky sociálneho stresu. Už skôr sme zistili, že optogenetická stimulácia neurónov mPFC u vnímavých myší zvracia niekoľko abnormalít správania pozorovaných po chronickom strese v sociálnej porážke. Preto sme predpokladali, že optogenetická stimulácia kortikálnych projekcií zachráni patologické účinky CCK v mPFC. Po infúzii CCK v mPFC sme optogeneticky stimulovali projekcie mPFC na bazolaterálnu amygdalu alebo nucleus accumbens, dve subkortikálne štruktúry zapojené do regulácie nálady. Stimulácia projekcií kortikamygdaly blokovala anxiogénny účinok CCK, hoci na iné príznaky sociálnej porážky sa nepozoroval žiadny účinok. Naopak, stimulácia projekcií kortikosteroidov zvrátila CCK-indukované sociálne vyhýbanie sa a deficit preferencie sacharózy, ale nie anxiogénne účinky. Tieto výsledky spolu naznačujú, že deficity správania vyvolané sociálnym stresom sú čiastočne sprostredkované molekulárnymi adaptáciami v mPFC zahŕňajúcimi ΔFosB a CCK prostredníctvom kortikálnych projekcií do odlišného subkortikálneho cieľa.s.

Kľúčové slová: accumbens, amygdala, úzkosť, CCK, depresia, mPFC

úvod

Niektoré anatomicky a funkčne prepojené limbické mozgové oblasti, vrátane stredného prefrontálneho kortexu (mPFC), hippocampu, amygdaly a nucleus accumbens (NAc), sú zapojené do sprostredkovania kľúčových príznakov depresie a úzkosti (; ; ; ; , ; ; ). Napríklad neprítomnosť kortikálnej spätnej väzby na amygdalu je v korelácii s dysforickými emóciami a po úspešnej liečbe sa vracia na normálnu úroveň. Antidepresívne účinky hlbokej mozgovej stimulácie subgenálnej cingulóznej kôry, oblasti mPFC, sú spojené s obnovením kortikálnej a subkortikálnej mozgovej aktivity na normálnu úroveň (; ). Podobne hlboká mozgová stimulácia NAc je antidepresívum a anxiolytikum a koreluje so zmeneným metabolizmom v NAc, amygdala a mPFC (; ; ). Tieto údaje podporujú hypotézu nervovej siete o poruchách nálady, pri ktorých antidepresívne liečby, bez ohľadu na mechanizmy, normalizujú aktivitu v podaktívnych kortikálnych a nadmerne aktívnych subkortikálnych obvodoch (; ; ; ; ; ).

Zvieracie modely zahŕňajúce chronické vystavenie fyzickému alebo psychickému stresu zhoršujú štruktúru a funkciu neurónov v mPFC (), amygdala (), hippocampus () a NAc (; ). Chronický sociálny porážkový stres, etologicky platný model depresie (), znižuje neurónovú aktivitu mPFC, ako je odvodené zo zníženej expresie Zif268 a c-Fos (; ). Optogenetická stimulácia mPFC navráti tieto deficity a vykazuje účinky podobné antidepresívam (), potvrdzujúc dôležitosť mPFC pri javoch súvisiacich s náladou. Thlodavce mPFC, rovnako ako u primátov, ovláda emocionálne správanie čiastočne prostredníctvom projekcií bazolaterálnej amygdaly (BLA) a NAc (; ; ). Molekulárne mechanizmy, ktoré sprostredkovávajú túto úlohu mPFC, však zostávajú neznáme.

Táto štúdia bola spočiatku zameraná na AFosB, stabilný transkripčný faktor, ktorý je indukovaný v NAc chronickým sociálnym porážkovým stresom, kde je proti citlivosti na stres (). Vykonali sme mozgové mapovanie indukcie AFosB po porážke a zistili sme, podobne ako v predchádzajúcich štúdiách (; ; ), robustná indukcia v mPFC. Prekvapivo sme zistili, že taká indukcia AFosB v mPFC podporuje citlivosť na stres. Identifikovali sme cholecystokinínový (CCK) -B receptor ako molekulárny cieľ AFosB v mPFC, kde CCKergická neurotransmisia sa podieľa na anxiogénnych aj depresogénnych účinkoch sociálneho stresu (, ). Zistili sme, že aktivita CCK v mPFC je potrebná aj dostatočná na zmiernenie účinkov stresu podobného stresu a depresii. Navyše pomocou optogenetických prístupov demonštrujeme špecifické pôsobenie CCK v mPFC subcirkuloch: CCK v projekciách mPFC-BLA sprostredkuje príznaky úzkosti, zatiaľ čo CCK v projekciách mPFC-NAc sprostredkuje príznaky depresie.

Materiály a metódy

Pokus 1: mozgové mapovanie indukcie AFosB pomocou stresu pri sociálnej porážke v mozgu.

Osemtýždňové samce myší C57BL / 6J boli podrobené chronickému spoločenskému porážkovému stresu po dobu nasledujúcich 10, ako je opísané vyššie (; ; ) (pozri Tabuľka 1; Obr. 1A). Stručne povedané, každá myš bola vystavená neznámej agresívnej samčej chovateľskej myši CD1 v dôchodku po dobu 5 min. Za deň. Po priamej interakcii s agresorom CD1 (5 min.) Sa zvieratá umiestnili do susedného oddelenia tej istej klietky na ďalších 24 h so senzorickým, ale nie fyzickým kontaktom. Kontrolné zvieratá boli chované v ekvivalentných klietkach, ale s členmi toho istého kmeňa. Testy sociálnej interakcie boli vykonané 24 h po poslednom dni porážky. Sociálne vylúčenie neznámeho samca myši CD1 sa hodnotilo podľa publikovaných protokolov. Zmeral sa čas strávený v „interakčnej zóne“ (chodba široká 8-cm obklopujúca klietku). Oddelenie porazených myší na citlivé a odolné subpopulácie sa uskutočnilo tak, ako je opísané vyššie (; ). Pretože väčšina kontrolných myší trávi viac času interakciou so sociálnym cieľom ako s prázdnym krytom cieľa, použije sa ako hranica interakčný pomer 100 (rovnaký čas strávený v zóne interakcie v prítomnosti vs. neprítomnosti sociálneho cieľa): myši so skóre <100 sú označené ako „náchylné“ a myši so skóre ≥ 100 ako „odolné“. Rozsiahle behaviorálne, biochemické a elektrofyziologické analýzy podporujú platnosť týchto odlišných citlivých a odolných subpopulácií (; ; ).

Tabuľka 1.  

Priemerný počet (± SEM) FosB-imunoreaktívnych jadier na mm2 v mozgových oblastiach kontroly, náchylných a odolných myší 24 h po chronickom (10 d) stresu pri sociálnej porážke
Obrázok 1.  

Indukcia AFOS v mPFC podporuje náchylnosť na stres. AReprezentatívne fotomikrografy imunohistochémie AFosB v mPFC 24 h po poslednej epizóde sociálnej porážky 10. BIndukcia AFosB sa u GABAergic nevyskytuje ...

Hneď po teste sociálnej interakcie sa myši anestetizovali a intrakardiálne perfundovali 4% paraformaldehydom / PBS. Počty buniek pre AFosB+ neuróny v NAc boli uskutočňované tak, ako je opísané vyššie (). Mozgy boli kryoochránené 30% sacharózou a koronálne rezy (30 um) boli odrezané na zmrazenom mikrotóme a spracované na imunohistochémiu. Voľne plávajúce rezy boli preinkubované v blokovacom tlmivom roztoku obsahujúcom 0.3% Triton a 3% normálne kozie sérum. FosB sa detegoval pomocou králičích polyklonálnych protilátok vypestovaných proti N-terminálnej časti proteínu (1 / 1000, Santa Cruz Biotechnology, katalógové č. Sc-48) v rovnakom pufri, potom sa spracoval s biotinylovanými kozími anti-králičími protilátkami IgG a avidín-biotínom metóda peroxidázového komplexu s DAB ako substrátom (Vector Laboratories). Inkubačné časy diaminobenzidínu sa udržiavali konštantné pre všetky podmienky (100). Plátky sa pripevnili, dehydratovali a prikryli krytom. FosB-imunopozitívne bunky vykazovali špecifické jadrové zafarbenie v jadre a boli kvantifikované pozorovacou slepou podľa podmienok ošetrenia pomocou mikroskopu (20 × zväčšenie). Pre každú kvantifikáciu sa na myš vybrali tri vybraté rezy mozgu pokrývajúce každú oblasť mozgu. Anatomická segregácia každej oblasti mozgu bola uskutočnená porovnaním rezu s atlasom mozgu myší Paxinos. Podmienky pre imunohistochémiu boli optimalizované tak, aby sa znížili hladiny pozadia na minimum, čo umožňuje správnu identifikáciu AfosB-pozitívnych buniek. Priemerné hodnoty boli vypočítané pre každé zviera a považované za individuálne pozorovanie pre štatistickú analýzu. Hoci použitá protilátka rozpoznáva ako FosB, tak FosB s plnou dĺžkou, podľa Western blottingu vieme, že za študovaných podmienok je detekovateľná iba AFosB (; ).

Pokus 2: identifikácia ΔFosB neuronálneho fenotypu indukovaného sociálnym stresom v mPFC.

Na skúmanie expresie AFosB v kortikálnych GABAergických neurónoch sme použili tkanivá z myší GAD2-tdTomato vystavených chronickému stresu v sociálnej porážke a farbené na AFosB, ako je opísané vyššie (pozri vyššie) (pozri vyššie). Obr. 1B). Myši sa vytvorili chovom knockinových myší GAD2-Cre (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; sériové číslo JAX 010802) () s (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; skladové číslo JAX 007908), ktoré nesú tdTomato riadené floxed-stop (variant RFP).

Pokus 3: behaviorálne účinky nadmernej expresie AFosB v predimetrickej (PrL) a infralimbickej (IL) kôre.

Sterotaxická operácia sa uskutočnila na dospelých samcoch myší (8 týždne) na injekciu HSV-AFOSB-GFP alebo HSV-GFP do oblastí PrL alebo IL mPFC. Stručne, myši sa anestetizovali použitím zmesi ketamínu (10 mg / kg) a xylazínu (1 mg / kg) a na dodávku vírusu pre PrL sa použili nasledujúce stereotaxické súradnice: 1.8 mm (predná / zadná), 0.65 mm (laterálna) ), -2.2 mm (chrbtová / ventrálna); a pre IL: 1.9 mm (predný / zadný), 0.75 mm (laterálny), -2.8 mm (dorzálny / ventrálny) pod uhlom 10 ° od stredovej čiary (vzhľadom na bregmu). Celkom 0.5 μl purifikovaného vírusu bolo podaných bilaterálne počas periódy 5 min (0.1 μl / min) a potom 5 min. Odpočinku. Miesta vírusovej injekcie boli potvrdené štandardnými histologickými metódami (pozri Obr. 1C). Aj keď nie je možné selektívne zacieliť PrL verzus IL u myší s dokonalou presnosťou, údaje v Obrázok 1C ilustrujú, že je veľmi možné zamerať sa prevažne na jeden alebo druhý región. Tento prístup v skutočnosti odôvodňujú zreteľné behaviorálne účinky získané zo zacielenia na tieto dve regióny (pozri výsledky). Prvá skupina myší sa použila výlučne v experimente so submaximálnou sociálnou porážkou (pozri Obr. 1D). Tri dni po chirurgickom zákroku sa myši podrobili dvom po sebe nasledujúcim porážkam v ten istý deň a potom sa testovali na sociálnu interakciu 24 h neskôr. Tento postup submaximálnej porážky bol predtým validovaný, aby sa odhalili fenotypy prosusceptovateľnosti po genetických manipuláciách (; ).

Druhá skupina myší sa použila na testovanie správania podobného bazálnej úzkosti a depresii (pozri Obr. 1E-J). Deň po operácii boli myši navyknuté roztokom 1% (hm./obj.) Sacharózy. Nasledujúci deň si myši mohli vybrať medzi fľašou s vodou a fľašou s roztokom 1% sacharózy, ktorá sa denne prepínala. Príjem roztoku sacharózy pre 24 h sa meral počas štvrtého a piateho dňa po chirurgickom zákroku a vyjadril sa ako percento z celkového množstva požitej tekutiny. Myši boli testované v otvorenom poli (deň 3), zvýšené plus bludisko (deň 4), spoločenské interakcie (deň 5 ráno) a testy núteného plávania (deň 5 popoludní) na základe publikovaných protokolov (). Zistili sme, že pri tomto poradí testov výsledky predchádzajúcich testov neovplyvňujú výsledky (). Aktivita myší v otvorenom poli sa zaznamenala 5 min pomocou videotrackingového systému (Ethovision) v podmienkach červeného svetla. Vyvýšené plus bludisko sa skladalo z dvoch priamych pretínajúcich sa dráh umiestnených 60 cm nad podlahou a rozdelených na dve otvorené a dve uzavreté ramená. Myši sa individuálne umiestnili do stredu bludiska a nechali sa voľne skúmať každú ruku po dobu 5 min. V testoch na voľnom poli a na zvýšených plus bludisku sa čas používaný v strede a otvorených ramenách použil ako inverzný index reakcií súvisiacich s úzkosťou. Jednodňový test núteného plávania bol uskutočňovaný po dobu 5 min. Predĺžený čas imobility počas testu núteného plávania sa interpretoval ako prodepresívne správanie. Tento 1-denný test sa vo veľkej miere používal na myšiach a potvrdil sa ako miera prediktívnej platnosti v tom, že antidepresíva znižujú dobu imobility.

Nakoniec bola samostatnej skupine myší injikovaná intra-mOFC s HSV-AFOS a testovaná na sociálnu interakciu po submaximálnej porážke (pozri Obr. 1K).

Vektory HSV boli získané od Rachael Neve (Massachusetts Institute of Technology). Gény, o ktoré je záujem (AFOS a GFP) sú pod promótorom CMV. Tieto vektory boli extenzívne validované v predchádzajúcich publikáciách (napr. ).

Pokus 4: účinky chronického sociálneho stresu na hladiny CCKB receptorov v mPFC.

V 24 h po teste sociálnej interakcie sa mozgy rýchlo vybrali a postupne sa nakrájali na plátky a mPFC sa rýchlo rozrezal a zmrazil na suchom ľade (pozri Obr. 2A,B). Izolácia RNA, qPCR a analýza údajov sa uskutočnili tak, ako už bolo opísané (; ). RNA bola izolovaná s TriZol reagentom (Invitrogen) a bola ďalej purifikovaná pomocou microeasy RNAeasy od QIAGEN. Zistilo sa, že všetky vzorky RNA majú hodnoty 260 / 280 a 260 / 230 ≥ 1.8. Reverzná transkripcia sa uskutočňovala s použitím iScript (Bio-Rad). qPCR s použitím SYBR Green (Quanta) sa uskutočňoval s PCR systémom Applied Biosystems 7900HT RT s nasledujúcimi parametrami cyklu: 2 min pri 95 ° C; 40 cykly 95 ° C pre 15 s, 59 ° C pre 30 s, a 72 ° C pre 33 s; a odstupňované zahrievanie na 95 ° C, aby sa vytvorili disociačné krivky na potvrdenie jednotlivých produktov PCR. Dáta boli analyzované porovnaním Ct hodnoty liečebného stavu (vnímavé alebo odolné verzus kontrolné myši alebo HSV-AFOSB oproti HSV-GFP) s AACt metóda (). Priméry qPCR sú nasledujúce: AFOS, forward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT a reverzný, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, forward, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC a reverz, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, forward, AGCGCGATACATCCAGCAG a reverz, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, vpred, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG a spätne, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

Obrázok 2.  

Blokáda receptora CCKB má proresilienčný a antidepresívny účinok. A, Spoločenská porážka znižuje hladiny receptorov CCKB v mPFC iba u odolných myší (n = 8 – 10). *p <0.05, v porovnaní s kontrolou (jednosmerná ANOVA). **p <0.05 ...
Pokus 5: účinky AFosB na CCKB receptor a hladiny cFos.

Myšiam sa injektoval intra-PrL s HSV-AFOS. V čase 72 h po chirurgickom zákroku, na vrchole vírusovej nadmernej expresie, boli miesta vpichu vyrezané pod fluorescenčným mikroskopom (pozri Obr. 2C). Izolácia RNA, qPCR a analýza údajov sa uskutočnili, ako je opísané vyššie. Priméry qPCR sú nasledujúce: c-fos, forward, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA a reverzný, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

Pokus 6: účinky blokády AFosB na stresom indukované hladiny receptora CCKB a odolnosť.

Dospelým myšiam sa do PrL injektovali bilaterálne HSV-GFP alebo HSV-AJunD (pozri pozri Obr. 2D-F). JunD je mutant JunD skrátený na N-konci, ktorý pôsobí ako dominantne negatívny antagonista AFosB. Myši boli podrobené sociálnej porážke dvakrát denne pre 5 d. Tento zrýchlený protokol sociálnej porážky, skrátený na časovú periódu maximálnej expresie transgénu HSV, sa predtým používal a ukázalo sa, že vyvoláva maximálnu úroveň sociálneho vylúčenia (). 24 hodín po poslednej stresovej epizóde boli myši bez anestézie dekapitované, aby sa zabránilo účinkom anestetík na hladinu neuronálnych proteínov. Infikované tkanivo sa odstránilo v inhibítoroch proteázy obsahujúcich PBS (Roche) a inhibítoroch fosfatázy (Sigma-Aldrich) pomocou razidla s mierkou 15 a okamžite sa zmrazilo na suchom ľade. Vzorky sa homogenizovali sonifikáciou svetlom v modifikovanom tlmivom roztoku RIPA: 10 mm báza Tris, 150 mm chlorid sodný, 1 mm EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% deoxycholát sodný, pH 7.4, a inhibítory proteázy a fosfatázy ako vyššie. Po pridaní Laemmliho pufra sa proteíny separovali na 4–15% polyakrylamaidových gradientových géloch (Criterion System; Bio-Rad) a Western blot sa uskutočňoval pomocou systému Odyssey (Li-Cor) podľa protokolov výrobcu. Membrány sa blotovali s CCKB receptorovou protilátkou (1/1000, Acris, katalógové č. AP01421PU-N). Ďalšej skupine myší sa injekčne podal AAV-AJunD alebo AAV-GFP v PrL a potom sa 5 týždňov po chirurgickom zákroku, aby sa dosiahla maximálna expresia transgénu, myši podrobili submaximálnemu protokolu porážky. Boli testovaní na sociálnu interakciu 24 hodín po poslednej porážke.

Pokus 7: účinky intra-mPFC CI-988, antagonistu CCKB, na sociálne vyhýbanie sa vyvolané sociálnym stresom a anedóniu.

U vnímavých myší bola implantovaná dvojstranná kanyla (vzdialenosť kanyly 1.0 mm od kanyly, predná strana 1.8 mm, injektor - 2.2 mm dorzálna / ventrálna) zameraná na mPFC (pozri pozri časť 4.4). Obr. 2G,H). Týždeň po operácii sa 10 ng CI-988 podalo infúziou priamo do mPFC so zameraním predovšetkým na PrL. Myši sa potom testovali na svoje spoločenské správanie. Pre zvyšných 24 h sa merala preferencia sacharózy. CI-988 (Tocris Bioscience) bol rozpustený v soľnom roztoku, rozdelený na alikvóty a zmrazený. Konečné riedenie bolo pripravené v deň experimentu. Ďalší pokus sa uskutočnil na vnímavých myšiach s CI-988 podávaným intraperitoneálne (2 mg / kg) 30 min. Pred testom sociálnej interakcie.

Pokus 8: účinky agonistu CCKB na citlivosť na sociálny stres a zvrátenie optogenetickou stimuláciou projekcií mPFC na BLA alebo NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP alebo AAV-CaMKII-EYFP sa injektovali do pravého mPFC, opäť zamerali primárne PrL (pozri Obr. 3A-G). O päť týždňov neskôr boli implantované optické vlákna do pravého NAc (1.4 predný / zadný, 2.6 laterálny, -4.7 dorzálny / ventrálny v uhle 25 ° od stredovej čiary) alebo BLA (-1.6 predný / zadný, 3.1 laterálny, -4.7 dorzálny / ventrálne bez uhla od stredovej čiary. Počas toho istého chirurgického zákroku sa do mPFC implantovali bilaterálne kanyly (pozri vyššie). Kanyly a vlákna sa k lebke pripevnili zubným cementom. Myši sa potom nechali zotaviť 1 pred začiatkom behaviorálnych experimentov. Myši boli podrobené submaximálnej porážke, potom boli 24 h neskôr testované na sociálnu interakciu, priamo nasledovalo zvýšené plus bludisko a na zvyšnú 24 h sa uprednostnila sacharóza. V 30 min. Pred testom sociálnej interakcie bola polovica myší infundovaná CCK-8 (10 ng) do mPFC, zatiaľ čo druhá polovica dostala vehikulum (fyziologický roztok). Myši sa testovali v pároch (myš ošetrená vehikulom a CCK-8, s AAV-GFP alebo AAV-ChR2). CCK-8 (Sigma) sa rozpustil vo fyziologickom roztoku, rozdelil sa na alikvóty a zmrazil sa. Konečné riedenie bolo pripravené v deň experimentu.

Obrázok 3.  

Citlivosť na stres vyvolaná CCK-8 závisí od konkrétnych kortikálnych projekcií. AV čase 24 h po submaximálnej sociálnej porážke a 30 min. Po infúzii CCK-8 boli projekčné oblasti mPFC stimulované laserom počas testu sociálnej interakcie. Infúzia CCK-8 ...

Optické stimulácie sa uskutočňovali podľa publikovaných protokolov (). Optické vlákna (Thor Laboratories) boli chronicky implantované a spojené pomocou adaptéra FC / PC k modrej laserovej dióde 473 nm (Crystal Lasers, BCL-473 – 050-M). Na generovanie impulzov modrého svetla bol použitý stimulátor (Agilent, #33220A). Počas všetkých stimulov boli 40 ms impulzy 100 Hz (šírka hrotu 9.9 ms) šírky modrého svetla dodávané každých 3 s do terminálnych oblastí v BLA alebo NAc iba počas trvania testu sociálnej interakcie, aby sa napodobnil burst-like model kortikálnej aktivitu. Intenzita svetla z optických vlákien bola overená pred každým použitím pomocou svetelného senzora (Thor Laboratories, S130A) a intenzita svetla bola xXUMUM mW. Tento stimulačný protokol, ktorý bol predtým elektrofyziologicky potvrdený (), nespôsobili záchvaty na základe behaviorálnych pozorovaní a neprítomnosti expresie c-Fos mimo optogeneticky stimulovaných oblastí ().

Pokus 9: účinky agonistu CCKB na neurónovú aktivitu mPFC merané hladinami mRNA c-Fos.

Bilaterálne kanyly sa implantovali dospelým myšiam zacieleným na mPFC (pozri Obr. 3H). Po týždni odpočinku sa myši podrobili submaximálnej porážke a neskôr sa im podala infúzia CCK-8 24 h. Razy mPFC boli odobraté 30 min. po infúzii liečiva a vzorky boli pripravené na analýzu mRNA, ako je opísané vyššie.

Umiestnenie zvierat.

Boli použité samce myší C57BL / 6J vo veku osem týždňov (The Jackson Laboratory). Všetky myši boli navyknuté do zariadenia pre zvieratá najmenej 1 týždeň pred experimentálnymi manipuláciami a boli udržiavané pri 23 ° C - 25 ° C v cykle 12 h svetlo / tma (svetlá svietili v 7: 00 AM) s podľa chuti prístup k jedlu a vode. Pokusy sa uskutočňovali v súlade s pokynmi Spoločnosti pre neurovedy a Ústavného výboru pre starostlivosť o zvieratá a ich používanie na Icahnovej lekárskej fakulte v Mount Sinai.

Štatistické analýzy.

Zobrazené údaje sú vyjadrené ako priemer ± SEM (vyjadrené ako chybové stĺpce). Jednosmerné ANOVA sa použili na porovnanie prostriedkov medzi kontrolnými, vnímavými a odolnými myšami v imunohistochemických, biochemických a behaviorálnych analýzach. Jednosmerné ANOVA sa použili na porovnanie prostriedkov medzi kontrolami GFP a nadmernou expresiou AFOSB v PrL alebo IL v otvorenom poli, zvýšeným plus bludiskom, núteným plávaním a preferenčnými testami na sacharózu. Na porovnanie priemerov medzi GFP-kontrolami, AFOS-PrL a AFOS-IL v teste sociálnej interakcie sa použili dvojcestné ANOVA. Dvojcestné ANOVA sa použili na porovnanie účinkov CCK-8 s optogenetickou stimuláciou alebo bez nej vo všetkých pokusoch so správaním, ako aj účinok nadmernej expresie FosB alebo infúzie CI-988 na sociálne vylúčenie. Ak je to vhodné, post hoc analýzy sa uskutočňovali s použitím Bonferroni post hoc test. Študentské t testy sa použili na porovnanie prostriedkov na účinok infúzie CI-988 na preferencie sacharózy a testy núteného plávania a testy CCK-8 na c-Fos hladiny mRNA. Rozdiely medzi experimentálnymi podmienkami sa považovali za štatisticky významné, keď p ≤ 0.05.

výsledky

Mapovanie indukcie AFosB pomocou mozgu v dôsledku chronického sociálneho porážkového stresu

Najprv sme skúmali indukciu AFB imunohistochémiou u kontrolných, vnímavých a odolných myší po priebehu chronického (10 d) sociálneho porážkového stresu so zameraním na oblasti predného mozgu a stredné mozgy, ktoré sa predtým podieľali na stresových reakciách. Zvieratá boli analyzované 24 h po poslednej porážkovej epizóde. Chronický sociálny stres indukuje AFos v mnohých oblastiach mozgu s odlišnými vzormi pozorovanými medzi odolnými a vnímavými myšami. Ako je uvedené v Tabuľka 1 a Obrázok 1A, IL, BLA, dentate gyrus hippocampu, dorzálneho striata a jadra NAc vykazovali prednostnú aktiváciu u odolných myší; takéto výsledky v NAc sú v súlade s publikovanými zisteniami (). Na rozdiel od toho, náchylné myši vykazovali väčšiu indukciu PrL, laterálneho septa a jadra lôžka stria terminalis. Niekoľko oblastí mozgu vykazovalo porovnateľnú indukciu AFOS u vnímavých a odolných myší; medzi ne patrili orbitofrontálna kôra (OFC, ďalšia oblasť PFC), ulita NAc, dorzálna raphé a periaqueducal grey (PAG).

Na identifikáciu neuronálneho podtypu, ktorý vykazuje indukciu AFosB v kortikálnych oblastiach, boli myši GAD2-tdTomato vystavené chronickému sociálnemu porážkovému stresu. Imunoreaktivita AFosB u vnímavých myší bola nedetegovateľná v GABAergických neurónoch (Obr. 1B), ktorá potvrdzuje skoršie zistenia špecifickej indukcie AFosB v kortikálnych pyramidálnych neurónoch po iných formách chronického stresu (). U kontrolných myší bez kontroly základné hladiny ΔFosB v mozgových oblastiach boli podobné hladinám, ktoré sa uvádzali v predchádzajúcich štúdiách (, ) s oveľa vyššími bazálnymi hladinami v NAc a dorzálnym striatom v porovnaní s akýmkoľvek iným regiónom, s jedinou výnimkou dentátu gyrus, ktorý vykazoval hladiny porovnateľné s hladinami v striatálnych regiónoch (Tabuľka 1).

FOSB v mPFC podporuje náchylnosť na stres

Na sledovanie týchto zistení sme sa zamerali na PrL, pretože sme predtým ukázali, že optogenetická aktivácia tohto regiónu mala antidepresívne účinky v paradigme sociálnej porážky (). Na testovanie funkčných dôsledkov indukcie AFosB v tejto oblasti mozgu sme vírusovo nadmerne exprimovali AFosB v PrL kontrolných myší. (Obr. 1C) a podrobili ich submaximálnemu priebehu sociálneho porážkového stresu, ktorý u normálnych zvierat nevyvoláva sociálne vyhýbanie sa. Myši s nadmernou expresiou AFosB v PrL boli náchylnejšie na sociálnu porážku ako kontrolné myši s injekciou GFP, pretože po submaximálnej sociálnej porážke vykazovali sociálne vyhýbanie sa (interakcia, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, hlavný účinok vírusu, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.447, p <0.05) (Obr. 1D). Tieto myši tiež preukázali zvýšenú imobilitu v 1-dennom teste vynúteného plávania (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroniho post test t = 3.518, p <0.05) (Obr. 1E), účinok opačný ako účinok antidepresív. Naopak nadmerná expresia AFOS v PrL nezmenila niekoľko východiskových mierok správania podobného úzkosti, preferencie sacharózy, sociálnej interakcie alebo lokomotorickej aktivity (Obr. 1F-J). Tieto nálezy spoločne podporujú hypotézu, že selektívna indukcia AFosB v PrL vnímavých myší prispieva k náchylnosti na stres a jeho škodlivé následky. Naopak, nadmerná expresia AFosB v inej oblasti mPFC, IL, nemala žiadny vplyv na východiskové emocionálne správanie alebo na reakcie na stres sociálneho zabíjania. (Obr. 1D-J), keďže nadmerná expresia AFOS v mediálnej OFC mala tendenciu podporovať odolnosť voči chronickej sociálnej porážke, hoci tento účinok nedosiahol štatistickú významnosť (interakcia, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, hlavný účinok času interakcie, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroniho post test t = 3.860, p <0.05 v rámci skupiny GFP; t = 1.960, p <0.05 v rámci skupiny AFosB; účinok vírusu, t = 2.447, p <0.05) (Obr. 1K).

FosB podporuje indukciu CCKB v mPFC

Veľký počet dôkazov podporuje názor, že CCK, hojný neuropeptid v mozgu, hrá zásadnú úlohu v neurobiologických mechanizmoch stresu a úzkosti. (). Najmä uvoľňovanie CCK v mPFC počas sociálneho stresu u potkanov je spojené so správaním súvisiacim s úzkosťou (). Aj keď účasť CCK na ľudskej depresii zostáva nejasná, najnovšie dôkazy poukazujú na jej úlohu v správaní depresie podobnej depresii u potkanov (). Preto sme predpokladali, že zmeny hladín CCK alebo jeho CCKB (známeho tiež ako CCK2) v mPFC môžu prispieť k rozdielom medzi vnímavými a odolnými myšami. Po 48 h po poslednej porážkovej epizóde boli hladiny mRNA CCKB znížené iba v mPFC rezistentných myší (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroniho post test, t = 3.104, p <0.05 vs kontrola; t = 5.113, p <0.01 vs vnímavý) (Obr. 2A). Nebol pozorovaný žiadny rozdiel v hladinách mRNA CCK u vnímavých alebo odolných myší (údaje nie sú uvedené). Pozorovali sme zvýšenie AFosB Hladiny mRNA iba u vnímavých myší v súlade s vyššie uvedenými údajmi o proteínoch (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroniho post test t = 3.336, p <0.05 vs vnímavý; t test t(12) = 2.138, p <0.05 vs kontrola) (Obr. 2B). Pretože ΔFosB reguluje transkripciu mnohých génov (; ), zvážili sme možnosť, že by mohla regulovať expresiu CCKB mRNA. Na vyriešenie tejto otázky sme najskôr nadmerne exprimovali ΔFosB v PrL a zistili sme, že táto manipulácia zvyšuje hladiny CCKB mRNA v tejto oblasti (t(12) = 2.012, p <0.05 vs GFP) (Obr. 2C). Zaujímavé je, že sme zistili aj pokles v roku 2007 c-Fos hladiny mRNA po nadmernej expresii AFos (t(11) = 3.382, p <0.01) (Obr. 2C). TTieto zistenia ďalej naznačujú, že indukcia AFosB v PrL vnímavých myší je aktívnym mechanizmom citlivosti tým, že bráni supresii CCKB pozorovanej u odolných myší.

Na ďalšie posilnenie týchto pozorovaní sme nadmerne exprimovali Aunun, väzbový partner AFosB, ktorý nemá svoju transaktivačnú doménu, a teda pôsobí ako dominantný negatívny antagonista, a určil jeho účinok na stresom indukovanú expresiu CCKB. Potvrdili sme, že chronický sociálny porážkový stres zvýšil hladiny proteínov CCKB v PrL vnímavých myší (t test t(12) = 2.289, p <0.05 vs kontrola) (Obr. 2D,E). Okrem toho bola takáto indukcia úplne blokovaná nadmernou expresiou AJunD v tejto oblasti (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroniho po teste t = 3.615, p <0.01) (Obr. 2D,E), podporujúce hypotézu, že AFosB sprostredkuje stresom indukovanú expresiu CCKB. Okrem toho blokáda aktivity AFOS v PrL prostredníctvom lokálnej expresie AJunD tiež podporovala odolnosť proti stresu (t test t(16) = 2.114, p = 0.05 verzus kontrola) (Obr. 2F). Mechanizmus, ktorý je základom down-regulácie CCKB u odolných myší, zostáva objasniť.

Úloha CCKB v odolnosti a náchylnosti na stres

Na priame testovanie úlohy regulácie CCKB v PrL pri sprostredkovaní citlivosti verzus odolnosť, sme infúziu selektívneho antagonistu receptora CCKB CI-988 (10 ng) priamo do tejto oblasti mozgu vnímavých myší. CI-988 účinne antagonizuje CCKB receptory in vivo pretože vykazuje nanomolárnu afinitu a vysokú selektivitu pre podtyp receptora CCKB (). Blokáda aktivity CCKB výrazne zvýšila sociálnu interakciu (Obr. 2G) (interakcia, F(1,20) = 7.795, p <0.05; droga F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroniho po teste t = 3.615, p <0.01). Infúzia CI-988 tiež zvrátila deficit preferencií sacharózy pozorovaný u vnímavých myší (t(8) = 2.681, p <0.05) (Obr. 2H). Oba behaviorálne výsledky naznačujú, že blokáda pôsobenia CCK v PrL má silné antidepresívne účinky. Je zaujímavé, že pri intraperitoneálnom podaní bol CI-988 neúčinný pri zvrátení sociálneho vyhýbania sa (údaje nie sú uvedené).

Aby sme otestovali opak, že aktivácia CCKB v PrL by mohla sprostredkovať sociálne vyhýbanie sa a zníženú preferenciu sacharózy indukovanú chronickým sociálnym porážkovým stresom, skúmali sme účinok lokálnej infúzie CCK-8 (10 ng), dominantnej formy CCK v mozgu. , o správaní súvisiacich s depresiou a úzkosťou. Dávka lieku bola vybraná na základe predchádzajúcich výsledkov v literatúre (; ; ). Pred testovaním správania boli myši vystavené submaximálnemu stresu v sociálnej porážke 24 h (Obr. 3A). CCK-8, podaný infúziou 30 min. Pred testom, bol dostatočný na vyvolanie sociálneho vyhýbania sa v teste sociálnej interakcie, ako aj na zníženie času stráveného v otvorených ramenách vo zvýšenom plus bludisku (SI: BLA, interakcia F(1,22) = 0.79, p > 0.05; hlavný účinok lieku, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.957, p <0.05; NAc: interakcia, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroniho po teste t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, interakcia, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroniho post test t = 2.509, p <0.05 účinok lieku; t = 2.528, p <0.05 vírusový účinok; NAc, t test t(17) = 1.961; p <0.05 účinku lieku v skupine s eYFP) (Obr. 3B-E, vľavo). V preferencii sacharózy neboli pozorované žiadne rozdiely (Obr. 3F,G, vľavo). Nakoniec infúzia CCK-8 nemala v týchto testoch žiadny vplyv na správanie (spoločenské interakcie a zvýšené plus bludisko) naivných neošetrených myší (údaje nie sú uvedené). TTieto výsledky ukazujú, že AOSOS sprostredkované zvýšenie CCKB aktivity v PrL vnímavých myší v porovnaní s odolnými myšami prispieva k niektorým stresom indukovaným deficitom správania, ktoré vykazujú tieto zvieratá.

Blokovanie náchylnosti na stres vyvolané CCK aktiváciou kortikálnych projekcií na BLA verzus NAc

Znížená neurálna aktivita mPFC koreluje s depresiou podobným chovaním u myší, s optogenetickou stimuláciou neurónov mPFC u vnímavých myší, ktoré vyvolávajú antidepresívne účinky (). Preto sme predpokladali, že CCK môže pôsobiť v PrL tak, že inhibuje neuronálnu aktivitu a tým spôsobuje depresívne správanie. V súlade s touto hypotézou sme zaznamenali pokles c-Fos Hladiny mRNA v PrL v reakcii na infúziu CCK do tejto oblasti mozgu (t(13) = 2.235, p <0.05) (Obr. 3H).

Ďalej sme predpokladali, že optogenetická stimulácia mPFC uplatňuje svoje antidepresívne účinky tým, že sa stavia proti účinkom CCK na neuronálnu aktivitu. Pri testovaní tejto hypotézy sme skúmali subkortikálne štruktúry sprostredkujúce anxiogénne a prodepresívne účinky CCK. Pyramidálne neuróny mPFC sa silne premietajú do NAc a BLA, dvoch limbických štruktúr zapojených do behaviorálnych reakcií na stres. Ukázalo sa, že zmenená aktivita obidvoch oblastí mozgu zohráva zásadnú úlohu pri vyjadrovaní správania podobného úzkosti a depresii (; ). Preto sme testovali, či stimulácia glutamátergických projekcií z PrL na NAc alebo na BLA by bola proti škodlivým účinkom mikroinfúzie CCK na PrL (Obr. 3A). Injikovali sme AAV-CaMKII-ChR2-EYFP alebo AAV-CaMKII-EYFP ako kontrolu do PrL. Je známe, že CaMKII promótor cieli vírusovú expresiu na glutamatergické pyramidálne neuróny v kortikálnych oblastiach. Potom sme nechali dostatočný čas (6 týždne) na to, aby sa transgény transportovali do nervových terminálov týchto pyramidálnych neurónov v NAc a BLA (Obr. 3I). Myši dostali submaximálnu sociálnu porážku; 24 h neskôr sme infúziou CCK-8 do PrL a 30 min. Potom sa zmerala sociálna interakcia počas optogenetickej stimulácie glutamátergických terminálov v NAc alebo BLA. Bezprostredne po teste sociálnej interakcie sa myši hodnotili vo zvýšenom plus bludisku na vyhodnotenie správania súvisiaceho s úzkosťou a potom na preferenciu sacharózy na vyhodnotenie anedónie.

Optogenetická stimulácia PrL glutamatergických projekcií na NAc úplne zvrátila sociálne vyhýbanie sa vyvolané intra-PrL CCK-8 (interakcia, F(1,26) = 6.688, p <0.05, žiadny účinok liečiva v skupine ChR2) (Obr. 3C). Naopak, takáto stimulácia PrL na NAc nemala žiadny vplyv na správanie podobné úzkosti merané vo zvýšenom plus bludisku (Obr. 3E); Avšak takáto stimulácia zvýšila preferenciu sacharózy v porovnaní s nestimulovanými myšami (interakcia, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroniho post test t = 2.998, p <0.05 stimulačného účinku u zvierat liečených CCK-8) (Obr. 3G).

Pri optogenetickej stimulácii glutamatergických projekcií PrL na BLA sa pozoroval veľmi odlišný vzorec správania. Takáto stimulácia nezabránila sociálnemu vyhýbaniu sa vyvolanému infúziou intra-PrL CCK-8 (interakcia, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; hlavný účinok lieku, F(1,22) = 11.75, p <0.05; žiadny účinok v stimulovanej skupine, t test t(12) = 2.054, p <0.05) (Obr. 3B). Stimulácia BLA aferentov však mala anxiolytický účinok, čo naznačuje zvýšený čas strávený v otvorených ramenách zvýšeného plus bludiska (interakcia, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroniho post test t = 2.528, p <0.05 vírusového účinku v skupinách liečených CCK-8) (Obr. 3D). Stimulácia glutamatergických projekcií na BLA nemala významný vplyv na preferenciu sacharózy (interakcie, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Obr. 3F).

Diskusia

Výsledky tejto štúdie poskytujú dôkaz molekulárnych adaptácií vyskytujúcich sa v PrL, ktoré sú základom náchylnosti k sociálnemu stresu. Ukazujeme indukciu AFosB v tomto subregióne mPFC po chronickom sociálnom porážnom strese, kde nadmerná expresia AFosB podporuje citlivosť na stres. Identifikovali sme CCKB receptor ako jeden cieľový gén regulovaný AFosB v PrL, zjavne indukujúci proteín CCKB u vnímavých myší a brániaci downregulácii expresie CCKB, ktorá sa vyskytuje selektívne u odolných myší. Ďalej sme ukázali, že infúzia agonistu CCK do PrL podporuje depresie a úzkosti podobné behaviorálne abnormality v reakcii na sociálny stres, zatiaľ čo blokáda aktivity receptora CCKB v tejto oblasti vnímavých myší tieto účinky blokuje. Ďalej sme použili optogenetické nástroje na identifikáciu mikroobvodov zapojených do akcií CCK v PrL podobajúcich se proanxietou a prodekpresiou. Aj keď glutamatergické projekcie kortiko-NAc sprostredkujú deficity odmeňovania, ktoré dokazujú sociálne vyhýbanie sa a znížená preferencia sacharózy, tento mikroobvod neovplyvňuje anxiogénne účinky CCK infúzie do PrL. Naopak, kortikálne projekcie na BLA sprostredkúvajú prejavy správania súvisiace s úzkosťou, nemajú však žiadny vplyv na sociálne vyhýbanie sa vyvolané sociálnym stresom ani na deficit preferencie sacharózy. Tieto údaje dokazujú, že zmeny vo fungovaní PrL po chronickom sociálnom porážkovom strese sprostredkujú početné behaviorálne deficity prostredníctvom špecifických subkortikálnych projekcií.

ΔFosB: mapovanie limbickej stresovej siete a úlohy v mPFC

Imunohistochémia ΔFosB identifikuje neuróny ovplyvnené chronickým stresom s rozlíšením jednej bunky a používa sa na mapovanie neuronálnych obvodov regulovaných stresom (; ; ). Túto metodiku sme použili na preukázanie toho, že chronický sociálny porážkový stres indukuje AFosB v niekoľkých oblastiach mozgu s odlišnými vzormi medzi odolnými a vnímavými skupinami, pričom niektoré oblasti vykazujú indukciu iba u odolných myší, iné iba u vnímavých myší a ešte ďalšie za oboch podmienok (Tabuľka 1). Predchádzajúca práca preukázala, že indukcia AFOS v NAc alebo ventrálnom PAG podporuje odolnosť voči chronickému stresu a prispieva k antidepresívnym reakciám. (; ).

Indukcia AFosB v PrL vnímavých myší, spojená s predchádzajúcimi poznatkami, že optogenetická stimulácia tejto oblasti má antidepresívne účinky. (), nás viedli k štúdiu vplyvu ΔFosB v tejto kortikálnej oblasti. Na rozdiel od nálezov v NAc a ventrálnom PAG sme zistili, že AFosB v PrL podporuje náchylnosť k chronickému stresu v sociálnej porážke a vyvoláva prodepresiu podobný účinok v teste vynúteného plávania bez ovplyvnenia správania podobného úzkosti alebo preferencie sacharózy. Na rozdiel od PrL sme nenašli žiadny účinok nadmernej expresie AFosB v blízkom IL. Nedávna štúdia zistila zvýšené hladiny ΔFosB v IL u odolných myší a implikovala tento subregión v odolnosti voči sociálnemu stresu (). Preto sú potrebné ďalšie štúdie, aby sa riešili rozdielne úlohy týchto dvoch podoblastí mPFC, o ktorých sa preukázalo, že vyvolávajú opačné účinky v iných doménach správania (; ; ). Už sme predtým uviedli, že depresívni ľudia vykazujú nižšie hladiny AFosB v postmortémovom vyšetrení NAc (), wpri vyšších dorzolaterálnych PFC (Brodmann area 46) u depresívnych ľudí sa preukázali vyššie hladiny AFosB (). Ostatné kortikálne regióny neboli v druhej štúdii skúmané. V každom prípade tieto nálezy spoločne podporujú regionálne špecifické abnormality expresie AFosB pri ľudskej depresii, kde transkripčný faktor má veľmi odlišné účinky na zraniteľnosť stresom. V budúcich štúdiách by bolo zaujímavé skúmať vplyv AFOSB v mnohých ďalších oblastiach mozgu, kde je indukovaný (Tabuľka 1) o reakciách na stres.

Jedným mechanizmom, ktorým môže indukcia AFB v PrL prispieť k depresívnemu správaniu, je potlačenie aktivity PrL. ΔFosB preukázalo, že potláča glutamátové odpovede AMPA, a c-Fos expresia v NAc stredne ostnatých neurónoch (; ; ). Podobne sme zistili pokles c-Fos expresia po nadmernej expresii AFos v PrL. Indukcia AFosB v PrL by teda mohla byť zodpovedná za zníženú neuronálnu aktivitu pozorovanú v tejto oblasti po chronickom sociálnom porážkovom strese. Očakáva sa, že taký znížený tón PrL nad jeho subkortikálnymi cieľmi, ako sú BLA a NAc, zvýši strach a neschopnosť uhasiť emocionálne reakcie na stres (, ). Okrem toho lézie mPFC vyvolávajú citlivé stresové reakcie a deficity pri zániku strachu (; ; ; ), čo naznačuje, že stresom vyvolaná porucha mPFC, sprostredkovaná čiastočne indukciou ΔFosB, by mohla prispieť k depresii a iným poruchám súvisiacim so stresom ().

Úloha CCK v zraniteľnosti stresom

Poskytujeme dôkaz, že receptor CCKB je cieľom AFosB, takže indukcia AFosB v PrL vnímavých myší je iba jedným mechanizmom, prostredníctvom ktorého AFosB v tejto oblasti uplatňuje svoje prodrepresívne účinky. Aj keď špecifické účinky CCK v mPFC obvodoch zostávajú nejasné, CCK u hlodavcov je lokalizovaný v GABAergických interneurónoch (). Predpokladá sa, že potláča aktivitu kortikálnych pyramidálnych neurónov zvýšením lokálneho uvoľňovania GABA a pôsobením priamo na receptory CCKB exprimované pyramidálnymi neurónmi (; ; ; ). CCKergická neurotransmisia by teda mohla prispieť k zníženej aktivite PrL uvedenej vyššie.

CCK je anxiogénne činidlo so systémovým podávaním agonistov CCKB indukujúcim záchvaty paniky u zdravých dobrovoľníkov. Pacienti s predispozíciou na záchvaty paniky sa po expozícii CCK stanú precitlivení (; ). Niekoľko štúdií potvrdilo anxiogénne účinky CCK na hlodavce (). Uvoľňovanie CCK v mPFC počas stresového stresu u potkanov je spojené so správaním súvisiacim s úzkosťou (); V tejto štúdii neboli diferencované PrL a IL podoblasti. Nedávno systémová, chronická blokáda CCKB s CI-988om mala antidepresívne účinky u potkanov (). CI-988 normalizoval čas imobility v teste núteného plávania. Zabránil tiež hyperaktivite osi hypotalamus-hypofýza-nadobličiek, znížil objem hippocampu a proliferáciu buniek a znížil preferenciu sacharózy, ktorá sa bežne vyvoláva sociálnou porážkou. Tu potvrdzujeme tieto výsledky preukázaním antidepresívneho účinku CI-988 infúzie do PrL vnímavých myší, hoci jediná systémová injekcia tento účinok nenapodobňuje.

Okrem akútnych účinkov CCK v PrL sme identifikovali znížené hladiny CCKB mRNA u odolných myší, čo by mohla byť molekulárna adaptácia, ktorá je základom odolnosti. Zmeny v CCKergickom tóne, konkrétne hladiny CCKB, sú skutočne dôležitým mechanizmom na vyjadrenie úzkosti. Transgénne myši nadmerne exprimujúce CCKB v prednom mozgu vykazujú zvýšenú reakciu na úzkosť a strach (). Naše zistenie zmenených hladín CCKB medzi odolnými a vnímavými myšami by mohlo prispieť k fenotypovým rozdielom v úzkosti a depresívnom správaní. Tu demonštrujeme PrL ako kritický anatomický substrát pre anxiogénne a prodepresívne účinky CCK v kontexte sociálneho stresu. Napriek tomu je do behaviorálnych akcií CCK zapojených niekoľko ďalších oblastí mozgu, vrátane BLA, hipokampu, NAc a PAG (; ; ; ; ). Zistili sme tiež zvýšenie hladín proteínov CCKB, ale nie hladín mRNA, v mPFC vnímavých zvierat. Tieto zistenia podčiarkujú, že aj keď hladiny mRNA často korelujú s hladinami proteínov, nie je to nevyhnutne ().

Naše optogenetické experimenty ukazujú, že zvyšujúca sa aktivita glutamatergických projekcií z PrL na NAc alebo na BLA antagonizuje účinky CCK v PrL. Potrebné sú ďalšie štúdie, aby sa zistilo, že tento účinok optogenetickej stimulácie je sprostredkovaný rovnakými PrL neurónmi, ktoré sú kontrolované CCK. Je zaujímavé, že naše údaje odhaľujú odlišné úlohy týchto dvoch mikroobvodov pri sprostredkovaní rôznych domén abnormalít správania. Projekcia kortiko-NAc riadi anhedóniu a odmenu; skutočnosť, že reguluje sociálne vyhýbanie sa, potvrdzuje, že tento príznak je skôr odrazom zníženej motivácie a odmeňovania za sociálne správanie a nie zvýšenej sociálnej úzkosti. Tento záver je v súlade s neschopnosťou benzodiazepínov korigovať túto abnormalitu () a nedávnou demonštráciou, že stimulácia NAc mPFC zvyšuje odmenu a motiváciu za zneužívanie drog (). Na rozdiel od toho projekcia kortiko-BLA riadi symptómy súvisiace s úzkosťou, čo je v súlade s rozsiahlou literatúrou o hlodavcoch a ľuďoch (pozri vyššie).

Záverom možno povedať, Výsledky tejto štúdie identifikujú vzor limbických mozgových oblastí zapojených do vnímavých a odolných zvierat a demonštrujú zmeny v PrL, ktoré zvyšujú citlivosť. Tieto zmeny zahŕňajú indukciu AFosB a jej indukciu CCKB receptora, Naopak blokáda účinkov CCK v PrL podporuje antidepresívne a anxiolytické účinky. Stanovujeme tiež subkortikálne ciele týchto kortikálnych pyramidálnych neurónov, ktoré sprostredkúvajú tieto účinky, s kortiko-NAc obvodom nevyhnutným pre správanie súvisiace s depresiou a kortiko-BLA obvodom nevyhnutným pre správanie súvisiace s úzkosťou. Zatiaľ čo klinické štúdie antagonistov CCKB u depresívnych pacientov na 1990och nepriniesli sľubné výsledky, súčasné zistenia naznačujú hodnotu revízie terapeutického potenciálu týchto látok v podskupinách pacientov vystavených vysokej úrovni stresu.

poznámky pod čiarou

 

Táto práca bola podporená Národným ústavom duševného zdravia (EJN) a Národnou alianciou pre výskum schizofrénie a depresie pre výskum mozgu a behaviorálnej nadácie pre mladých výskumníkov VV

 

 

Autori neuvádzajú žiadne konkurenčné finančné záujmy.

 

Referencie

  • Akirav I, Maroun M. Úloha mediálneho prefrontálneho obvodu kôry a amygdaly v stresových účinkoch na vyhynutie strachu. Neural Plast. 2007, 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Barbas H, Blatt GJ. Topograficky špecifické projekcie hipokampu sa zameriavajú na funkčne odlišné prefrontálne oblasti opice makak rézus. Hippocampus. 1995, 5: 511-533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Cross Ref]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Zvýšené kortikálne extracelulárne hladiny materiálu podobného cholecystokinínu v modeli predvídania spoločenskej porážky u potkanov. J Neurosci. 2001, 21: 262-269. [PubMed]
  • Becker C, Zeau B, Rivat C, Blugeot A, Hamon M, Benoliel JJ. Opakované behaviorálne a biologické zmeny vyvolané sociálnou porážkou u potkanov: zapojenie cholecystokinínu. Mol Psychiatry. 2008, 13: 1079-1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Cross Ref]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Asymetria v behaviorálnych reakciách na cholecystokinín mikroinjekovaný do jadra potkana accumbens a amygdaly. Neuropharmacology. 1994, 33: 995-1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, pôsobiaci na receptory GABAA aj GABAB, inhibuje uvoľňovanie materiálu podobného cholecystokinínu z miechy potkanov in vitro. Brain Res. 1992, 590: 255-262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Základná úloha BDNF v mezolimbickej dopamínovej dráhe v sociálnom porážkovom strese. Science. 2006, 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Cross Ref]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Indukcia 8FosB v periaqueductal šedej stresom podporuje aktívne reakcie na zvládanie. Neurón. 2007, 55: 289-300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Nucleus accumbens hlboká mozgová stimulácia znižuje hodnotenie depresie a úzkosti pri depresii rezistentnej na liečbu. Biol Psychiatry. 2010, 67: 110-116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Zvýšená citlivosť na tetrapeptid cholecystokinínu pri panickej poruche: klinické a behaviorálne nálezy. Arch Gen Psychiatry. 1991, 48: 603-610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Poškodzuje mozog stres? Biol Psychiatry. 1999, 45: 797-805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bremner JD. Traumatický stres: účinky na mozog. Dialógy Clin Neurosci. 2006, 8: 445-461. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Bremner JD. Neuroimaging pri posttraumatickej stresovej poruche a ďalších stresových poruchách. Neuroimaging Clin North Am. 2007, 17: 523-538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Synaptický a behaviorálny profil viacerých glutamátergických vstupov do nucleus accumbens. Neurón. 2012, 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Burgos-Robles A, Bravo-Rivera H, Quirk GJ. Prelimbické a infralimbické neuróny signalizujú zreteľné aspekty apetitívneho inštrumentálneho správania. PLoS One. 2013, 8: e57575. doi: 10.1371 / journal.pone.0057575. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Zvýšený cholecystokinergný tonus predstavuje dôležitý molekulárny / neuronálny mechanizmus expresie úzkosti u myši. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103: 3881 – 3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Choi DC, Gourley SL, Ressler KJ. Prelimbická signalizácia BDNF a TrkB reguluje konsolidáciu chutného a averzívneho emocionálneho učenia. Transl Psychiatry. 2012, 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Christoffel DJ, Golden SA, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kináza reguluje synaptickú a behaviorálnu plasticitu vyvolanú stresom spôsobeným sociálnou porážkou. J Neurosci. 2011, 31: 314-321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Krátky stres zo sociálnej porážky: dlhotrvajúce účinky na užívanie kokaínu počas výraznej mexickej a zif268 mRNA expresie v amygdale a prefrontálnej kôre. Neuropsychofarmakologie. 2005, 30: 310-321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Antidepresívny účinok optogenetickej stimulácie mediálneho prefrontálneho kortexu. J Neurosci. 2010, 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, CA Tamminga, Nestler EJ. Úloha represívnej metylácie histónu pri náchylnosti na stres vyvolanej kokaínom. Neurón. 2011, 71: 656-670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • de Montigny C. Cholecystokinín tetrapeptid indukuje záchvaty podobné panike u zdravých dobrovoľníkov: predbežné nálezy. Arch Gen Psychiatry. 1989, 46: 511-517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Cross Ref]
  • De Witte P, Heidbreder C, Roques B, Vanderhaeghen JJ. Opačné účinky cholecystokinínoktapeptidu (CCK-8) a tetrapeptidu (CCK-4) po injekcii do kaudálnej časti jadra accumbens alebo do jej rostrálnej časti a mozgových komôr. Neurochem Int. 1987, 10: 473-479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Cross Ref]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Úloha mediálneho prefrontálneho kortexu (cingulate gyrus) pri regulácii hypotalamo-hypofýzno-nadobličkových reakcií na stres. J Neurosci. 1993, 13: 3839-3847. [PubMed]
  • Drevety WC. Neuroimagingové a neuropatologické štúdie depresie: implikácie pre kognitívne-emocionálne vlastnosti porúch nálady. Curr Opin Neurobiol. 2001, 11: 240-249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Zmenené spracovanie emočného rušenia v mozgových obvodoch s afektívnym a kognitívnym riadením pri veľkej depresii. Biol Psychiatry. 2008, 63: 377-384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Mathews J, Snyder AZ, Sheline YI. Liečba antidepresívami normalizuje hypoaktivitu v dorsolaterálnom prefrontálnom kortexe počas spracovania emočnej interferencie pri veľkej depresii. J Ovplyvniť disord. 2009, 112: 206-211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Feder A, Nestler EJ, Charney DS. Psychobiológia a molekulárna genetika odolnosti. Nat Rev Neurosci. 2009, 10: 446-457. doi: 10.1038 / nrn2649. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. Kortikálne zdroje CRF, NKB a CCK a ich účinky na pyramidálne bunky v neokortexe. Cereb Cortex. 2006, 16: 1440-1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Neuropsychologická bezpečnosť jadra pripisuje hlbokú mozgovú stimuláciu pre veľkú depresiu: účinky 12-mesačnej stimulácie. World J Biol Psychiatry. 2011, 12: 516-527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Cross Ref]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. AFosB diferenciálne moduluje nukleus accumbens priamu a nepriamu funkciu dráhy. Proc Natl Acad Sci US A. 2013: 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Korelácia medzi hojnosťou proteínov a mRNA v kvasinkách. Mol Celí Biol. 1999, 19: 1720-1730. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Mediálny prefrontálny kortex u potkanov: dôkaz dorso ventrálneho rozlíšenia na základe funkčných a anatomických charakteristík. Neurosci Biobehav Rev. 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Cross Ref]
  • Holson RR. Mesiálne prefrontálne kortikálne lézie a plachosť u potkanov: I. Reaktivita na averzívne stimuly. Physiol Behav. 1986, 37: 221-230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Neurálne koreláty anedónie pri veľkej depresívnej poruche. Biol Psychiatry. 2005, 58: 843-853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Depresia rezistentná na liečbu: pokrok v somatických terapiách. Ann Clin Psychiatry. 2007, 19: 279-287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Zmeny v regionálnom metabolizme glukózy v mozgu merané pozitrónovou emisnou tomografiou po liečbe veľkej depresie paroxetínom. Am J Psychiatry. 2001, 158: 899-905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A Eisch AJ, Self DW, Lee FS a kol. Molekulárne adaptácie, ktoré sú základom náchylnosti a odolnosti voči sociálnej porážke v regiónoch odmeňovania mozgu. Bunka. 2007, 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Cross Ref]
  • Krishnan V, Nestler EJ. Molekulárna neurobiológia depresie. Nature. 2008, 455: 894-902. doi: 10.1038 / nature07455. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Obohatenie životného prostredia poskytuje stresovú pružnosť sociálnej porážke prostredníctvom neuroanatomickej dráhy závislej od infralimbického kortexu. J Neurosci. 2011, 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Brain, siete, depresia a ďalšie. Eur Neuropsychopharmacol. 2013, 23: 55-62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Cross Ref]
  • Mayberg HS, Lozano AM, Voon V, McNeely HE, Seminowicz D, Hamani C, Schwalb JM, Kennedy SH. Hlboká stimulácia mozgu na liečbu rezistentnú depresiu Neurón. 2005, 45: 651-660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Cross Ref]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, mechanik M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Základná úloha histón metyltransferázy G9a v plasticite vyvolanej kokaínom. Science. 2010, 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulácia génovej expresie a kokaínovej odmeny pomocou CREB a DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003, 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Cross Ref]
  • Milad MR, Quirk GJ. Neuróny v mediálnej prefrontálnej pamäti kôry signalizujú strach. Nature. 2002, 420: 70-74. doi: 10.1038 / nature01138. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J., Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Bilaterálna epidurálna prefrontálna kortikálna stimulácia pre depresiu rezistentnú na liečbu. Biol Psychiatry. 2010, 67: 101-109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nikulina EM, Arrillaga-Romany I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Dlhodobá zmena v mezokortikoidických štruktúrach po opakovanom sociálnom porážkovom stresu u potkanov: časový priebeh mu-opioidného receptora mRNA a FosB / DeltaFosB imunoreaktivita. Eur J Neurosci. 2008, 27: 2272-2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Roques BP. Receptor CCK-B: chémia, molekulárna biológia, biochémia a farmakológia. Prog Neurobiol. 1999, 58: 349-379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Cross Ref]
  • Noble F, Wank SA, Crawley JN, Bradwejn J, Seroogy KB, Hamon M, Roques BP. Medzinárodná farmaceutická únia: XXI. Štruktúra, distribúcia a funkcie receptorov cholecystokinínu. Pharmacol Rev. 1999; 51: 745 – 781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 zvyšuje K (+) - vyvolané [3H] kyselina gama-aminomaslová sa uvoľňuje v plátkoch z rôznych oblastí mozgu. Eur J Pharmacol. 1993, 250: 423-430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcia δFosB v mozgových štruktúrach súvisiacich s odmenou po chronickom strese. J Neurosci. 2004, 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Odlišné vzorce indukcie DeltaFosB v mozgu drogami zneužívania. Synapsie. 2008, 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Radley JJ, Rocher AB, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Opakovaný stres vyvoláva stratu dendritickej chrbtice v strednom prefrontálnom kortexe potkanov. Cereb Cortex. 2006, 16: 313-320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Cross Ref]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB sprostredkuje epigenetickú desenzibilizáciu génu c-fos po chronickej expozícii amfetamínu. J Neurosci. 2008, 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rezayat M, Roohbakhsh A, Zarrindast MR, Massoudi R, Djahanguiri B. Cholecystokinín a GABA interakcie v dorzálnom hipokampu potkanov pri zvýšenom plus-bludisku test úzkosti. Physiol Behav. 2005, 84: 775-782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Cross Ref]
  • Richard JM, Berridge KC. Prefrontálna kôra moduluje túžbu a strach generovaný narušením glutamátu v jadre. Biol Psychiatry. 2013, 73: 360-370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Rotzinger S, Vaccarino FJ. Podtypy receptorov cholecystokinínu: úloha pri modulácii správania súvisiaceho s úzkosťou a odmeňovaním na zvieracích modeloch. J Psychiatry Neurosci. 2003, 28: 171-181. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Schlaepfer TE, Cohen MX, Frick C, Kosel M, Brodesser D, Axmacher N, Joe AY, Kreft M, Lenartz D, Sturm V. Hlboká stimulácia mozgu odmeňovaním obvodov zmierňuje anedóniu v refraktérnej veľkej depresii. Neuropsychofarmakologie. 2008, 33: 368-377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Cross Ref]
  • Sierra-Mercado D, Padilla-Coreano N, Quirk GJ. Oddeliteľné úlohy predimbických a infralimbických kôrov, ventrálneho hippocampu a basolaterálneho amygdaly pri vyjadrovaní a zániku podmieneného strachu. Neuropsychofarmakologie. 2011, 36: 529-538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Silva MG, Boyle MA, Finger S, Numan B, Bouzrara AA, Almli CR. Behaviorálne účinky veľkých a malých lézií stredného čelného kortexu potkana. Exp Brain Res. 1986, 65: 176-181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Rôzne populácie GABAergických neurónov vo vizuálnej kôre a hipokampu mačky obsahujú imunoreaktívny materiál somatostatín alebo cholecystokinín. J Neurosci. 1984, 4: 2590-2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Antidepresíva získavajú nové neuróny na zlepšenie regulácie stresovej reakcie. Mol Psychiatry. 2011, 16: 1177-1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Taniguchi H, He, Wu P, Kim S, PaikR, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. Zdroj riadiacich liniek Cre na genetické zacielenie GABAergických neurónov v mozgovej kôre. Neurón. 2011, 71: 995-1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. Aktivácia modelu expresie génov závislých od DeltaFOSB v dorsolaterálnom prefrontálnom kortexe pacientov so závažnou depresívnou poruchou. J Ovplyvniť disord. 2011, 133: 174-178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tsankova NM, Berton O, Renthal W, Kumar A, Neve RL, Nestler EJ. Trvalá regulácia hipokampálneho chromatínu v myšacom modeli depresie a antidepresívneho pôsobenia. Nat Neurosci. 2006, 9: 519-525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Cross Ref]
  • Tye KM, Prakash R, Kim SY, Fenno LE, Grosenick L, Zarabi H, Thompson KR, Gradinaru V, Ramakrishnan C, Deisseroth K. Amygdala obvody sprostredkujúce reverzibilnú a obojsmernú kontrolu úzkosti. Nature. 2011, 471: 358-362. doi: 10.1038 / nature09820. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, a kol. DeltaFosB v mozgových odmeňovacích obvodoch sprostredkuje odolnosť voči stresovým a antidepresívnym reakciám. Nat Neurosci. 2010, 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Funkčná heterogenita v mozgovej kôre: predné výkonné a zadné hodnotiace oblasti. Cereb Cortex. 1992, 2: 435-443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wilkinson MB, Xiao G, Kumar A, LaPlant Q, Renthal W, Sikder D, Kodadek TJ, Nestler EJ. Ošetrenie a odolnosť proti imipramínu prejavujú podobnú reguláciu chromatínu v jadre myši accumbens v depresívnych modeloch. J Neurosci. 2009, 29: 7820-7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcia DeltaFosB v orbitofrontálnej kôre sprostredkuje toleranciu kognitívnej dysfunkcie vyvolanej kokaínom. J Neurosci. 2007, 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Uvoľňovanie cholecystokinínu z mozgovej kôry potkanov in vivo: úloha systémov GABA a glutamátových receptorov. Brain Res. 1987, 406: 207-214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Zanoveli JM, Netto CF, Guimarães FS, Zangrossi H., Jr Systémové a intradorsálne periaqueduktálne sivé injekcie cholecystokinínom sulfátovaného oktapeptidu (CCK-8) vyvolávajú paniku podobnú reakciu u krýs podrobených zvýšenému T-bludisku. Peptidy. 2004, 25: 1935-1941. doi: 10.1016 / j.peptidy.2004.06.016. [PubMed] [Cross Ref]