CRF-CRF1 receptorový systém v centrálnom a bazolaterálnom jadre Amygdaly sprostredkováva diferenciálne nadmerné stravovanie chutného jedla (2013)

, 2013 Nov; 38 (12): 2456 – 2466.

Publikované online 2013 Jul 10. Prepublished online 2013 jún 10. doi:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

abstraktné

Veľmi chutné potraviny a diéty sú hlavnými faktormi, ktoré prispievajú k rozvoju nutkavého stravovania pri obezite a poruchách príjmu potravy. Predtým sme dokázali, že prerušovaný prístup k chutným potravinám vedie k faktoru uvoľňujúcemu kortikotropín-1 (CRF).1) receptorovo antagonistické - reverzibilné správanie, ktoré zahŕňa nadmerný príjemný príjem potravy, hypofágiu bežného žrádla a správanie podobné úzkosti. Oblasti mozgu sprostredkujúce tieto účinky sú však stále neznáme. Samce potkanov Wistar boli buď kŕmené nepretržite po dobu 7 dní / týždeň (Čau Čau alebo kŕmené žrádlom prerušovane 5 dní / týždeň, po ktorom nasleduje sacharóza, chutná strava 2 dní / týždeň (Chow / stráviteľný skupina). Po chronickej strave potravy, účinky mikroinfúzie CRF1 antagonista receptora R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v centrálnom jadre amygdaly (CeA), bazolaterálne jadro amygdaly (BlA) alebo jadro lôžka stria terminalis (BNST) boli vyhodnotené pri nadmernom príjme chutnú diétu, chow hypofágiu a správanie podobné úzkosti. Okrem toho, CRF imunofarbenie bolo hodnotené v mozgu potkanov s cyklickou výživou. Intra-CeA R121919 zablokoval nadmerný príjemný príjem potravy a správanie podobné úzkosti v Chow / stráviteľný potkanov bez ovplyvnenia hypofágie. Naopak intra-BlA R121919 znížil hypofágiu v tele v Chow / stráviteľný potkanov, bez ovplyvnenia nadmerného chutného príjmu potravy alebo správania podobného úzkosti. Liečba intra-BNST nemala žiadny účinok. Liečba nemenila správanie Čau Čau krysy. Imunohistochémia odhalila zvýšený počet CRF-pozitívnych buniek v CeA - ale nie v BlA alebo BNST - Chow / stráviteľný potkanov, počas odňatia a obnoveného prístupu k chutnej strave v porovnaní s kontrolami. Tieto výsledky poskytujú funkčný dôkaz, že CRF – CRF1 Receptorový systém v CeA a BlA má rozdielnu úlohu pri sprostredkovaní maladaptívneho správania vyplývajúceho z chutnej diéty.

Kľúčové slová: faktor uvoľňujúci kortikotropín, BNST, závislosť, úzkosť, hypofágia, potkan

ÚVOD

Predpokladá sa, že vysoko chutné potraviny (napr. Potraviny bohaté na cukry a / alebo tuky) sú hlavnými faktormi, ktoré prispievajú k vzniku nutkavého jedenia pri určitých formách obezity a porúch príjmu potravy (; ). Existuje mnoho analógií medzi drogovou závislosťou a nadmerným príjmom vysoko chutných potravín, vrátane straty kontroly nad liekom / jedlom, neschopnosti ukončiť užívanie / prejedať sa napriek negatívnym dôsledkom, úzkosti a dysforii pri pokuse zdržať sa užívania liekov / potravín (; ). Tieto spoločné symptómy boli navrhnuté tak, aby vznikli z dysfunkcií mozgových okruhov, ktoré sa prekrývajú s drogovou závislosťou a nutkavým jedením.

Kortikotropín uvoľňujúci faktor typu 1 (CRF)1) antagonisti receptora boli navrhnutí ako nové terapeutické ciele pre návykové poruchy kvôli ich schopnosti znížiť motivačné účinky abstinenčných príznakov (). CRF je kritickým mediátorom endokrinných, sympatických a behaviorálnych reakcií na stres (; ). CRF v paraventrikulárnom jadre hypotalamu kontroluje hypotalamicko-hypofýzno-adrenálnu (HPA) reakciu na stres, zatiaľ čo behaviorálne účinky CRF sú nezávislé na HPA a sprostredkované extrahypothalamickými oblasťami mozgu (). Extrahypothalamic CRF – CRF1 Receptorový systém je prijímaný v závislosti od všetkých známych liekov zneužívania prostredníctvom cyklov intoxikácie / abstinencie a táto hyperaktivácia je považovaná za bežný prvok, podporujúci nadmerný príjem liečiva prostredníctvom negatívneho zosilneného mechanizmu (tj nutkavého príjmu liečiva produkovaného odstránením abstinencie). indukovaný negatívny emocionálny stav; ; ; ).

Hoci podobnosti medzi drogami zneužívania a jedlom boli široko študované s ohľadom na ich pozitívne posilňujúce vlastnosti (tj nadmerný príjem potravy produkovaný príjemným účinkom; ; ; ; ; ), hypotéza, že nadmerný príjem potravy môže mať za následok formu „samoliečby“ na zmiernenie negatívneho emočného stavu spojeného s vysadením z vysoko chutných potravín, je pomerne nedostatočne pochopená (; ; ).

Doteraz sme ukázali, že stiahnutie z chronického prerušovaného prístupu k vysoko chutným potravinám spôsobuje nábor extrahypothalamického systému CRF a vznik CRF.1 maladaptívne správanie závislé od receptora, ktoré zahŕňa nadmerný príjem potravy po obnovenom prístupe k vysoko chutnej strave, hypofágii inak prijateľnej diéty a správanie podobné úzkosti počas abstinencie ().

Priame funkčné dôkazy o tom, ktorá oblasť mozgu je zodpovedná za CRF1 chýbajú behaviorálne adaptácie závislé od receptora indukované chutnou diétou. Táto štúdia sa preto zamerala na stanovenie, či miestne špecifický antagonizmus CRF1 receptory v centrálnom jadre amygdaly (CeA), bazolaterálne jadro amygdaly (BlA) alebo jadro lôžka stria terminalis (BNST) bolo schopné blokovať nadmerný príjem vysoko chutných potravín, hypofágiu indukovanú abstinenčným syndrómom, chow, a správanie podobné úzkosti. Okrem toho, táto štúdia bola zameraná na stanovenie, či expresia CRF v CeA, BlA a BNST bola zvýšená u potkanov s cyklickým stravovaním v porovnaní s kontrolami, s použitím imunohistochémie. Hoci sme už predtým dokázali, že vysadenie z chutnej potravy je spojené so zvýšenou expresiou CRF v CeA, ako sú v súčasnosti ovplyvnené BlA a BNST cyklizáciou diét.

MATERIÁLY A METÓDY

Predmety

Samce potkanov Wistar (n140, z ktorých 33 potkany pre CeA experimenty, 46 potkany pre BlA experimenty, 39 potkany pre BNST experimenty a 22 potkany pre imunohistochemický experiment; Doplnková tabuľka 1), vážiace 180 – 230 g a 41 – 47 dni staré pri príchode (Charles River, Wilmington, MA, USA), boli umiestnené v plastových klietkach (27 × 48 × 20 cm) na svetle 12-h. cyklus (svetlá zhasnú pri 1100 hodinách), v AAALAC-schválenej vlhkosti (60%) a temperovanom (22 ° C) viváriu. Potkany mali podľa chuti prístup ku kukurici na báze kukurice (Harlan Teklad LM-485 Diet 7012; 65% kcal sacharidov, 13% tuku, 21% proteínu, metabolizovateľnej energie 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, USA) a vody, ak nie je uvedené inak , Postupy použité v tejto štúdii boli v súlade s National Institute of Health Guide for Care and Use of Laboratory Animals (NIH číslo publikácie 85-23, revidované 1996) a princípy starostlivosti o laboratórne zvieratá a boli schválené inštitúciou Boston University Medical Campus Institutional Výbor pre starostlivosť a používanie zvierat.

Drogy

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropylpyrazolo [2,3-a] pyrimidín-7-amín, NBI 30775) bol syntetizovaný tak, ako je opísané v publikácii ). R121919 je silný, nepeptidový, vysokoafinitný CRF1 antagonistu receptora (Ki= 2 – 5 nM), ktorý vykazuje viac ako 1000-krát slabšiu aktivitu v CRF2 receptor, receptor viažuci CRF alebo iné typy receptorov 70 (). R121919 bol solubilizovaný použitím zmesi 18: 1: 1 fyziologického roztoku: etanol: cremophor.

Behaviorálne testy

Ad libitum chutná strava striedanie prístup

Prístup k internetu podľa chuti chutná strava bola vykonaná tak, ako bolo opísané vyššie (, , ; ). Stručne, po aklimatizácii boli potkany rozdelené do dvoch skupín zodpovedajúcich príjmu potravy, telesnej hmotnosti a účinnosti krmiva predchádzajúcich dní 3-4. Jedna skupina potom dostala podľa chuti prístup k diéte (Chow) po dobu 7 dní v týždni (Čau Čau, kontrolná skupina tejto štúdie), zatiaľ čo druhá skupina mala voľný prístup ku krmivu na 5 dní v týždni, po ktorom nasledovalo 2 dní podľa chuti na vysoko chutnú stravu s vysokým obsahom sacharózy s čokoládovou príchuťou (Palatable; Chow / stráviteľný skupina). Všetky behaviorálne testy sa uskutočňovali na potkanoch, ktoré držali diétu na bicykli najmenej 7 týždňov. Diéta „čau“ bola vyššie popísaná potrava pre kukuricu od spoločnosti Harlan, zatiaľ čo chutná strava bola výživovo úplná strava s vysokým obsahom sacharózy (50% kcal) s príchuťou čokolády (76% kcal), porovnateľná s makronutrientmi proporcie a energetická hustota k strave (strava s príchuťou čokolády 5TUL: 66.7% kcal sacharidov, 12.7% tuku, 20.6% bielkovín, metabolizovateľná energia 344 kcal / 100 g (Test Diet, Richmond, IN, USA) formulované ako presnosť 45 mg potravinové pelety na zvýšenie jeho preferencie). Pre stručnosť sa prvých 5 dní (iba čau) a posledné 2 dni (čau alebo chutných podľa experimentálnej skupiny) každého týždňa označuje vo všetkých pokusoch ako C a P fázy. Chutná strava sa poskytovala v kŕmidlách GPF20 „J“ (Ancare, Bellmore, NY, USA). Diéty nikdy neboli dostupné súčasne.

Experimenty s príjmom potravy

Potkanom sa poskytli vopred odvážené potraviny v ich domácich klietkach pri nástupe tmavého cyklu. Lieky sa podávali potkanom, u ktorých bola diéta cyklovaná po dobu najmenej 7 týždňov po obnovení prístupu k chutnej strave (CP fázy) alebo na diétu (\ tPC fáza). R121919 bol mikroinfikovaný bilaterálne v rámci CeA, BlA alebo BNST (0, 0.5 a 1.5 μg / strana, 0.5 μl / strana, doba predošetrenia 30-min) s použitím náhodných latinských štvorcových vzorov.

Test svetlo-tmavý box

Potkany boli testované na 10 min vo svetlom-tmavom obdĺžnikovom boxe (50 × 100 × 35 cm), v ktorom bol averzívny svetelný priestor (50 × 70 × 35 cm) osvetlený svetlom 60 lux. Tmavá strana (50 × 30 × 35 cm) mala nepriehľadný kryt a ∼0 lux svetla. Obidve oddelenia boli spojené otvorenými dverami, čo umožnilo voľne sa pohybovať medzi nimi. Testovanie sa uskutočnilo po najmenej 7 týždňoch striedania diéty, 5-9 h po prechode z chutnej stravy na diétu s krmivom (PC fáza); tento časový bod zaisťuje výskyt úzkostného správania vyvolaného odobratím chutného jedla Chow / stráviteľný potkany (, ). Potkany sa držali v tichej, tmavej predsieni aspoň 2 h pred testovaním. Biely šum bol prítomný počas habituácie a testovania. V deň testovania sa potkany mikroinfikovali bilaterálne s R121919 v rámci CeA, BlA alebo BNST (0, 0.5 a 1.5 μg / strana, 0.5 μl / strana) 30 min. Pred umiestnením do tmavého kompartmentu smerujúceho k dverám. a správanie bolo zaznamenané pre neskoršie hodnotenie. Ošetrenia sa uskutočňovali s použitím dizajnu medzi subjektmi. Čas strávený v otvorenom kompartmente sa meral ako index správania podobného úzkosti. Prístroj sa po každom predmete očistil vodou a vysušil.

Intrakraniálna chirurgia, mikroinfúzny postup a umiestnenie kanyly

Intrakraniálne operácie

Potkany boli stereotaxicky implantované bilaterálnymi intrakraniálnymi kanylami, ako bolo opísané vyššie (; ; ). Stručne, vodiace kanyly z nehrdzavejúcej ocele (24 gauge, Plastics One, Roanoke, VA, USA) boli obojstranne znížené o 2.0 mm nad CeA, BlA alebo BNST. Štyri klenotnícke skrutky z nehrdzavejúcej ocele boli pripevnené k lebke potkana okolo kanyly. Aplikovali sa zubnou výplňou vyplnená živica (Henry Schein, Melville, NY, USA) a akrylový cement, ktoré vytvorili podstavec pevne ukotvujúci kanylu. Súradnice kanyly z bregmy použité pre CeA boli: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (z lebky) s reznou tyčou nastavenou 5.0 mm nad interaurálnou čiarou, podľa atlasu ). Súradnice kanyly použité pre BlA boli: AP-2.64, ML ± 4.8, DV-6.5 (z lebky) s plochou lebkou, podľa ). Súradnice kanyly použité pre BNST boli: AP-0.6, ML ± 3.5, DV-4.8 (z lebky) s plochou lebkou a uhlom sklonu 14 °. Dymový vodič z nehrdzavejúcej ocele (Plastics One) udržiaval priechodnosť kanyly. Po chirurgickom zákroku sa potkanom povolilo 7-denné zotavovacie obdobie, počas ktorého sa s nimi denne zaobchádzalo.

Mikroinfúzny postup

Liek bol mikroinfikovaný v mozgu potkanov, ako bolo opísané vyššie (; ). Na intrakraniálnu mikroinfúziu bol z vodiacej kanyly odstránený fiktívny vodič a bol nahradený injektorom z nehrdzavejúcej ocele 31, ktorý vyčnieval 2 mm za špičkou vodiacej kanyly; injektor bol pripojený cez PE 20 hadičku k Hamiltonovej mikrostriekačke (Hamilton, Reno, Nevada) poháňanej mikroinfúznou pumpou s viacerými injekčnými striekačkami (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, USA). Mikroinfúzie sa uskutočnili v objeme 0.5 μl dodanom cez 2 min; Injektory boli ponechané na mieste počas ďalších 1 minút, aby sa minimalizoval spätný tok.

Umiestnenie kanyly

Umiestnenie kanyly bolo overené na konci všetkých testov (pozri Obrázok 1). Subjekty boli anestetizované (izoflurán, 2-3% v kyslíku) a transkardiálne perfundované ľadovo studeným 4% paraformaldehydom (PFA) vo vode (pH 7.4) a mikroinfikované kresylfialom (0.5 μl / strana). Mozgy sa potom fixovali cez noc v 4% PFA a ekvilibrovali v 30% sacharóze v PFA. Koronálne rezy 40 μm sa zbierali pomocou kryostatu (Thermo Scientific HM-525) a umiestnenia sa overili pod mikroskopom. Štyridsať subjektov (14 pre CeA, 16 pre BlA a 10 pre BNST) bolo vylúčených z analýzy kvôli nesprávnemu umiestneniu kanyly. Analyzovali sa údaje z nesprávnych umiestnení s cieľom pomôcť interpretovať špecifickosť účinkov na mieste.

Obrázok 1 

Výkres rezov mozgu koronálnych potkanov. Bodky predstavujú miesta vpichu do centrálneho jadra amygdaly (CeA) (a), bazolaterálneho jadra amygdaly (BlA) (b) a jadra lôžka stria terminalis (BNST) (c) zahrnuté do analýzy údajov. ...

CRF imunohistochémia

Behaviorálny postup, perfúzie a imunohistochémia

Potkany (n= 22) boli cyklické diéty pre 7 týždne, anestetizované a perfundované 2 – 4 h po prechode z chutnej stravy na diétu s krmivom (PC alebo z diétnej stravy na chutnú diétu (CP fáza). Potkany sa anestetizovali a potom sa transkardiálne perfundovali najprv fyziologickým roztokom + 2% (hmotn./obj.) Dusitanom sodným (pH = 7.4) a 4% paraformaldehydom pufrovaným v Borax (pH = 9.5) ďalej. Potkany sa potom dekapitovali a mozgy sa okamžite zozbierali, umiestnili do xxxx ml 20% PFA a uskladnili v 4% sacharóze v roztoku 30% PFA pri 4 ° C až do nasýtenia.

Na vizualizáciu CRF sa mozgy rozrezali na 40 μm koronálne rezy pomocou kryostatu a následne sa uložili do kryoprotektantu pri -20 ° C. Každá šiesta sekcia (od seba vzdialená 240 μm) celého CeA, BlA a BNST bola vybraná systematickým náhodným spôsobom a spracovaná na imunocytochémiu. Voľne plávajúce rezy sa premyli v tlmivom roztoku fosforečnanu draselného (KPBS). Po počiatočnom premytí boli rezy inkubované v 0.3% roztoku KPBS s peroxidom vodíka po dobu 30 minút, aby sa blokovali endogénne peroxidázy. Rezy sa potom opäť premyli a umiestnili na 3 hodiny do blokujúceho roztoku (0.25% normálne kozie sérum, 100% Triton X0.1 a 2% hovädzieho sérového albumínu). Rezy sa potom preniesli do primárnej protilátky (zriedenie 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) v blokujúcom roztoku a inkubovali sa 72 hodín pri 4 ° C. Po ďalšom premytí sa rezy inkubovali 1 hodiny pri laboratórnej teplote so sekundárnou protilátkou (zriedenie 1000: 1000, biotinylovaná anti-králičia (BA-2) Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornia) v blokujúcom roztoku. Rezy sa premyli a potom sa inkubovali v roztoku avidín-biotín chrenová peroxidáza ABC (Vector Laboratories) v blokujúcom roztoku po dobu 1 hodiny. Rezy sa potom inkubovali s použitím súpravy substrátu diaminobenzidínu (Vector Laboratories) podľa pokynov výrobcu a po ukončení reakcie sa rezy opláchli v KPBS, namontovali sa na podložné sklíčka a nechali sa cez noc sušiť. Nasledujúci deň sa podložné sklíčka dehydratovali použitím odstupňovaných koncentrácií alkoholu a krycie sklíčko sa pripevnilo pomocou montéra DPX (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, USA).

Kvantifikácia teliesok CRF +

Kvantifikácia teliesok CRF + buniek sa uskutočnila v súlade s objektívnym prístupom k stereológii. Séria rezov sa analyzovala pre každú dávku farbenia. Rezy boli analyzované pomocou mikroskopu Olympus (Center Valley, PA, USA) BX-51, ktorý bol vybavený živou kamerou Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Kanada), trojosovým motorizovaným stupňom MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, USA) a pracovná stanica osobných počítačov. Všetky počty buniek boli uskutočnené na kódovaných sklíčkoch výskumníkom, ktorý bol slepý k podmienkam liečby. Každá oblasť bola načrtnutá virtuálne na digitalizovanom obraze každej náhodne vybranej časti s použitím modulu pracovného toku optického frakcionátora softvéru Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, USA). Všetky kontúry boli nakreslené pri nízkom zväčšení pomocou objektívu Olympus PlanApo N 2X s numerickou apertúrou 0.08 a počítané pomocou objektívu Olympus UPlanFL N 40X s numerickou apertúrou 0.75. Rám mriežky a rám počítania boli nastavené na 275 × 160 μm. Použila sa ochranná zóna 2 μm a výška disektora 20 μm. Zmrazené rezy boli pôvodne narezané pri nominálnej hrúbke 40 μm. Imunofarbenie a montáž majú za následok zmenenú hrúbku rezu, ktorá bola meraná v každom mieste počítania. Priemerná hrúbka rezu bola vypočítaná softvérom a použitá na odhad celkového objemu oblasti vzorky a celkového počtu CRF + buniek.

Štatistická analýza

Študentské t-testy boli použité na analýzu faktorov s dvoma úrovňami. ANOVA sa uskutočnili s cieľom analyzovať faktory s viac ako dvoma úrovňami. Po významnom omnibusovom účinku ANOVA (p<0.05), Fisherova LSD post hoc boli použité porovnávacie testy. Dunnettov test sa použil na zistenie, či R121919 normalizoval príjem Chow / stráviteľný potkanov Čau Čau-fed úrovne. Použité softvérové ​​/ grafické balíky boli Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, USA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, USA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, USA) a PASW Štatistika 18.0 (SPSS, Chicago, IL, USA).

VÝSLEDKY

Účinky mikroinfúzie R121919 na CeA

Nadmerný príjem chutných potravín

Určiť, či CRF1 receptory v CeA sprostredkovávajú nadmerný príjem chutných potravín v potkanoch s cyklickým stravovaním, my mikroinfikujeme konkrétne miesto selektívneho CRF1 antagonista receptora R121919 do tejto oblasti mozgu a meral príjem potravy na začiatku P fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 2a- príjem chutných diétnych krmív ošetrených vehikulom Chow / stráviteľný potkany boli dvojnásobne vyššie ako u potkanov kŕmených krmivom Čau Čau krysy. Antagonizmus CeA CRF1 receptory úplne zablokovali toto nadmerné jedenie chutných potravín v Chow / stráviteľný potkanov bez ovplyvnenia príjmu potravy u kontrolných potkanov (\ tČau ČauF (2, 20) = 0.72, NS; Chow / stráviteľný, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc porovnanie zistilo, že najvyššia dávka R121919u (1.5 μg / strana) významne znížila prijateľný príjem potravy v porovnaní \ t Chow / stráviteľný krysy. Príjem Chow / stráviteľný U potkanov po mikroinfúzii dávky 1.5 μg / strana sa signifikantne nelíšil od príjmu liečeného vehikulom Čau Čau krysy. Potvrdenie špecifickosti účinkov na CRF1 receptorov v CeA, nebol pozorovaný žiadny účinok na príjem potravy jedincov s nesprávne umiestnenými kanylami (\ tChow / stráviteľnýF (2, 2) = 4.32, NS).

Obrázok 2 

Účinky mikroinfúzie selektívneho faktoru uvoľňujúceho kortikotropín-1 (CRF)1) antagonistu receptora R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v centrálnom jadre amygdaly (CeA) pri nadmernom jedle chutných potravín, hypofágii pravidelných ...

Hypofágia bežnej diéty

Určiť, či CRF1 Receptory v CeA sprostredkovávajú hypofágiu diétnej diéty v potkanoch s cyklickou diétou, my sme mikroinfikovali R121919 do tejto oblasti mozgu a merali príjem potravy na začiatku C fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 2b, príjem ošetreného vehikulom Chow / stráviteľný potkanom bol ∼1 / 3 príjmu liečeného vehikulom Čau Čau potkanov (hypofágia). Liečba liekom R121919 neovplyvnila hypofágiu bežného žrádla Chow / stráviteľný potkany (Chow / stráviteľnýF (2, 12) = 0.14, NS). Potvrdenie výsledkov získaných v P mikroinfúzia R121919 v CeA neovplyvnila kontrolu príjmu potravy Čau Čau potkany (Čau ČauF (2, 20) = 0.01, NS).

Akútne správanie podobné úzkosti vyvolané akútnym abstinenčným príznakom

Určiť, či CeA CRF1 Receptory sprostredkovávajú negatívny emocionálny stav indukovaný odobratím chutného jedla u cyklovaných potkanov, mikroinfikovali sme miesto špecificky R121919 do tejto oblasti mozgu a merali správanie podobné úzkosti pomocou testu svetlomotónového boxu 5 h do hematokritu. C fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 2c, potkany akútne stiahnuté z chronického, prerušovaného prístupu k vysoko chutnej strave ukázali výrazný pokles času stráveného vo svetlom priestore svetlomodrej skrinky. Mikroinfúzia 1.5 μg / strana R121919u v CeA, dávka, ktorá účinne znížila nadmerné jedenie chutných potravín, úplne zablokovala správanie podobné úzkosti zvýšením času stráveného vo svetelnej oblasti krabice. Chow / stráviteľný potkanov, bez toho, aby to ovplyvnilo správanie v Čau Čau potkany (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Potvrdenie špecifickosti účinkov pre CRF1 receptory v CeA, nebol pozorovaný žiadny účinok na príjem potravy jedincov s nesprávne umiestnenými kanylami (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Účinky mikroinfúzie R121919 do BlA

Nadmerný príjem chutných potravín

Určenie, či je BlA CRF1 receptory sprostredkovávajú nadmerné jedenie chutných potravín v potkanoch s cyklickou diétou, my mikroinfikujeme konkrétne miesto R121919 do tejto oblasti mozgu a meria príjem potravy na začiatku P fáza. Na rozdiel od toho, čo bolo pozorované po podaní R1219191u do CeA, ako je znázornené na obr Obrázok 3a bilaterálna mikroinfúzia selektívneho CRF1 Antagonista receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora R1A významne neovplyvnil príjemnú potravu Chow / stráviteľný potkany (Chow / stráviteľnýF (2, 26) = 1.56, NS). Podobne aj bežná spotreba krmiva v Čau Čau potkany neboli ovplyvnené mikroinfúziou R121919 (\ tČau ČauF (2, 18) = 0.52, NS).

Obrázok 3 

Účinky mikroinfúzie selektívneho faktoru uvoľňujúceho kortikotropín-1 (CRF)1) antagonistu receptora R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v bazolaterálnom jadre amygdaly (BlA) pri nadmernom jedle chutných potravín, hypofágii pravidelných ...

Hypofágia bežnej diéty

Určiť, či CRF1 receptory v BlA sprostredkovávajú hypofágiu kurčiat v cyklovaných potkanoch, mikroinfikujeme R121919 do tejto oblasti mozgu a meria príjem potravy na začiatku C fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 3bpo mikroinfúzii CRF bol pozorovaný významný nárast pravidelného príjmu žrádla1 receptora antagonistu receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora receptora 3A Chow / stráviteľný potkany (Chow / stráviteľný, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). V skutočnosti najvyššia dávka (1.5 μg) R121919 mikroinfundovaná v BlA počas C fázy významne zvýšili spotrebu bežnej diéty o 8% v porovnaní s 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) v porovnaní s vehikulom \ t Čau Čau krysy. R121919 zoslabil, ale úplne nezablokoval, hypofágia vyvolaná abstinenčným syndrómom pri najvyššej injikovanej dávke. Potvrdenie údajov získaných v P mikroinfúzia R121919 neovplyvnila pravidelný príjem potravy v Čau Čau potkany (Čau ČauF (2, 20) = 0.25, NS). Potvrdenie špecifickosti účinkov na CRF1 receptorov v BlA, nebol pozorovaný žiadny účinok na príjem potravy jedincov s nesprávne umiestnenými kanylami (Chow / stráviteľnýF (2, 8) = 0.50, NS).

Akútne správanie podobné úzkosti vyvolané akútnym abstinenčným príznakom

Určenie, či je BlA CRF1 Receptory sprostredkovávajú negatívny emocionálny stav indukovaný akútnym odobratím chutného jedla u cyklovaných potkanov, my mikroinfikujeme miesto špecificky R121919 do tejto oblasti mozgu a meria správanie podobné úzkosti 5 h do oblasti C fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 3c, chutné potraviny stiahnuté Chow / stráviteľný potkany strávili menej času vo svetlom priestore v porovnaní s Čau Čau potkany (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, mikroinfúzia do BlA, významne neovplyvnila čas strávený vo svetlej oblasti (DÁVKA: F (1, 39) = 0.01, NS).

Účinky mikroinfúzie R121919 do BNST

Nadmerný príjem chutných potravín

Určiť, či BNST CRF1 receptory sprostredkovávajú nadmerné stravovanie chutného jedla u potkanov kŕmených stravou, R121919 bol špecificky mikroinfikovaný do tejto oblasti mozgu a príjem potravy bol meraný na začiatku P fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 4b, bilaterálna mikroinfúzia selektívneho CRF1 Antagonista receptora pre BNST nemal významný vplyv na príjem potravy v roku 2007 Chow / stráviteľný potkany (Chow / stráviteľnýF (2, 18) = 0.33, NS). Podobne aj bežná spotreba krmiva v Čau Čau potkany neboli ovplyvnené mikroinfúziou R121919 (\ tČau ČauF (2, 20) = 1.03, NS).

Obrázok 4 

Účinky mikroinfúzie selektívneho faktoru uvoľňujúceho kortikotropín-1 (CRF)1) antagonista receptora R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / strana) v jadre postele stria terminalis (BNST) pri nadmernom požití chutného jedla, hypofágia ...

Hypofágia bežnej diéty

Určiť, či BNST CRF1 receptory sprostredkujú hypofágiu potravy pre kŕmenie u cyklovaných potkanov, mikroinfikovali sme R121919 do tejto oblasti mozgu a merali sme príjem potravy na začiatku C fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 4aMikroinfúzia R121919 neovplyvňovala pravidelný príjem potravy u Čau Čau potkany (Čau Čau, F (2, 14) = 0.03, NS). Podobne liečba R121919om neovplyvnila hypofágiu pravidelného krmiva Chow / stráviteľný potkany (Chow / stráviteľnýF (2, 20) = 0.27, NS).

Akútne správanie podobné úzkosti vyvolané akútnym abstinenčným príznakom

Určiť, či BNST CRF1 receptory sprostredkujú negatívny emocionálny stav vyvolaný akútnym sťahovaním chutného jedla u cyklovaných potkanov, do tejto oblasti mozgu sme špecificky vložili mikroinfúzne miesto špecificky R121919 a merali úzkostné správanie 5 h po prechode z PC fáza. Ako je znázornené na obrázku Obrázok 4c, chutné potraviny stiahnuté Chow / stráviteľný potkany strávili menej času v svetelnej komore v porovnaní s kontrolou Čau Čau potkany (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, obojstranne mikroinfundovaný v dávke 1.5 μg / stranu do BNST, významne neovplyvnil čas strávený vo svetlej oblasti (DÁVKA: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF imunohistochémia

Obrázok 5 ilustruje reprezentatívne mikrografy buniek CRF + v CeA, BlA a BNST v roku 2007 Čau Čau a Chow / stráviteľný potkany, nasledujúce po podľa chuti chutný postup striedania stravy. Analýza CRF imunoreaktivity CeA odhalila, že medzi nimi je významný rozdiel Chow / stráviteľný a Čau Čau potkany počas oboch pokusov C a P fáza (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Medzi BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) alebo BNST (F (2, 19) = 1.16, NS) sa nepozorovali štatisticky významné rozdiely medzi skupinami.

Obrázok 5 

Reprezentatívne mikrografy imunoreaktivity faktora uvoľňujúceho kortikotropín (CRF) v centrálnom jadre amygdaly (CeA) (a – d), bazolaterálnom jadre amygdaly (BlA) (e – h) a jadre lôžka stria terminalis (BNST) ) (i – l) ...

DISKUSIA

Táto štúdia bola navrhnutá tak, aby funkčne identifikovala miesto mozgu zodpovedné za nadmerný príjem vysoko chutnej potravy u potkanov v režime striedavého stravovania, ktorý je sprostredkovaný CRF. Naše zistenia dokazujú hlavnú úlohu CeA pri sprostredkovaní nadmerného jedenia vysoko chutných potravín. Okrem toho demonštrujeme, že systém CRF v BlA, na rozdiel od CeA, má úlohu v procese devalvácie, ku ktorému dochádza pri znižovaní veľkosti odmeny za jedlo.

Už sme predtým preukázali, že opakované cykly prístupu a akútneho ukončenia konzumácie sladkej, veľmi chutnej stravy vedú k nadmernému jedlu chutného jedla, ako aj k akútnej hypofágii závislej od stiahnutia pri pravidelnej strave pre strava a správaniu podobnému strachu (; , ). Predpokladá sa, že nadmerné stravovanie je vyvolané negatívnym emocionálnym stavom vyvolaným opakovanými epizódami akútneho stiahnutia z vysoko chutných potravín prostredníctvom extrahypotalamického CRF – CRF.1 mechanizmus sprostredkovaný receptorovým systémom, ktorý sa podobá procesu „podpaľovania“, ktorý je základom návykových porúch (; ; ; ).

Výsledky tejto štúdie ukazujú, že CRF1 Receptory CeA a BlA odlišne sprostredkujú kŕmne adaptácie a správanie podobné potkanom s cyklickou výživou podobným úzkosti. Podávanie selektívneho CRF1 receptorový antagonista v CeA blokoval nadmerné stravovanie a správanie podobné strachu Chow / stráviteľný potkany bez toho, aby ovplyvnili hypofágiu nedostatočnej pravidelnej stravy. Zaujímavé je, že podávanie R121919u do BlA zmiernilo hypofágiu menej chutnej stravy pre strava (tj zvýšený pravidelný príjem chow) u Chow / stráviteľný potkany, bez ovplyvnenia nadmerného stravovania alebo správania podobného úzkosti. Keď bol mikroinfúziou v BNST, R121919 neovplyvnil žiadnu z premenných nameraných v Chow / stráviteľný potkany (nadmerné jesť vysoko chutnú stravu, príjem pravidelnej strava pre strava a akútne správanie vyvolané úzkosťou). Pozorované farmakologické účinky boli selektívne Chow / stráviteľný potkany, pretože R121919, mikroinfikované v rámci CeA, BlA alebo BNST z Čau Čau kontrolné potkany nevykazovali žiadny účinok. CRF – CRF1 Zdá sa, že receptorový systém CeA a BlA odlišne sprostredkúva behaviorálne výsledky, ktoré sú výsledkom chronického chutného stravovania. Na druhej strane CRF – CRF1 Receptorový systém BNST sa nezdá byť zapojený do behaviorálnych adaptácií vyvolaných chutnou stravou.

Naše behaviorálne a farmakologické nálezy boli podporené pozorovaním, že imunoreaktivita CRF v rámci CeA v SR Chow / stráviteľný potkany boli v porovnaní s Čau Čau kontrolné potkany počas sťahovania z a po obnovení prístupu k vysoko chutnej strave (). Je zaujímavé, že v BlA alebo BNST nebol pozorovaný žiadny významný rozdiel v imunoreaktivite CRF medzi skupinami. Zvýšená imunoreaktivita CRF pozorovaná v CeA Chow / stráviteľný potkany sú v súlade s naším predchádzajúcim zistením, že akútne stiahnutie z chutnej stravy je spojené so zvýšeným uvoľňovaním CRF v CeA (). Na rozdiel od toho, čo sa už uviedlo, však obnovenie prístupu k chutnej strave nespôsobilo návrat expresie CRF v CeA na kontrolné úrovne. Rozdiel medzi výsledkami získanými tu a predchádzajúcim pozorovaním môže súvisieť s rôznym časovým bodom odberu mozgu a rozdielnym anatomickým rozlíšením techník použitých na meranie expresie CRF. Avšak pozorované zvýšenie expresie CRF v CeA počas sťahovania a po obnovení prístupu k chutnej strave je v súlade so selektívnymi účinkami blokády správania podobného úzkosti (počas sťahovania) a nadmerného stravovania (obnovený prístup) u Chow / stráviteľný krysy. Zjavnú nekonzistentnosť medzi týmito dvoma štúdiami je preto možné interpretovať kolektívne takto: počas akútneho stiahnutia potravy sa expresia CRF v CeA u potkanov kŕmených stravou zvyšuje v porovnaní s kontrolami a je zodpovedná za výskyt negatívnych účinkov. Expresia CeA CRF zostáva zmenená až do prvých hodín vysoko chutného prístupu, čo spôsobuje nadmerné stravovanie. Po nadmernej chutnej konzumácii potravín sa však CRF vracia späť na kontrolné úrovne ().

Uvedené behaviorálne, farmakologické a molekulárne výsledky podporujú hypotézu, že CRF – CRF1 Receptorový systém v CeA má dôležitú úlohu pri sprostredkovaní negatívneho afektívneho stavu a nadmerného príjmu chutného jedla u potkanov kŕmených stravou, podobne ako to, čo sa značne preukázalo pre závislosť od alkoholu a drog (). Potkany závislé na etanole skutočne vykazujú zvýšené extracelulárne uvoľňovanie CRF v CeA počas sťahovania a podávanie antagonistu receptora CRF do CeA je schopné blokovať eskaláciu samotného etanolu počas sťahovania (; ). Analogicky zvieratá závislé od opiátov vykazujú počas vysadenia zvýšenú expresiu CRF v CeA () a blokáda receptorov CRF v CeA, ale nie v BNST, znižuje príznaky abstinenčného správania (; ). Kľúčová úloha pre CRF - CRF1 Systém v CeA sa tiež preukázal v závislosti od nikotínu. Stiahnutie nikotínu vyzrážané mecamylamínom je skutočne spojené s hyperaktiváciou CRF – CRF.1 receptorový systém v CeA () a intra-CeA, ale nie vnútri-BlA, mikroinfúzia CRF1 receptorový antagonista znižuje nikotínovo závislé zvýšenie prahu odmeny v mozgu (). U kanabinoidmi závislých potkanov je precipitované vysadenie spojené s výrazným zvýšením extracelulárnej koncentrácie CRF v CeA (). Celkovo tento dôkaz silne podporuje hypotézu, že CRF – CRF1 Receptorový systém v CeA je kľúčovým mediátorom akútneho negatívneho účinku vyvolaného abstinenčnými príznakmi spolu s nadmerným príjmom drog a alkoholu počas závislosti. Naše výsledky rozširujú tieto vedomosti o nadmerné jedenie vysoko chutného jedla, čo naznačuje, že sa vyskytujú analogické neuroadaptácie.

Výsledky tejto štúdie ukazujú, že chutná hypofágia závislá od stiahnutia potravy z menej chutnej strave pre strava je oslabená mikroinfúziou v rámci BlA selektívneho CRF.1 receptorový antagonista, zatiaľ čo nadmerné stravovanie a správanie podobné úzkosti neboli ovplyvnené liečbou intra-BlA. Rozdielne zapojenie BlA CRF – CRF1 Receptorový systém vo výsledkoch diétneho cyklovania naznačuje, že hypofágia u hydiny môže predstavovať behaviorálny proces nezávislý od správania podobného úzkosti. Tieto zistenia sú skôr v súlade s hypotézou, že BlA sprostredkuje zmyslové a motivačné aspekty motivačne významných udalostí. Skutočne existuje veľa dôkazov o tom, že BlA je kriticky dôležitá pri sprostredkovaní devalvačných procesov a averzívnych reakcií na zníženie odmeny (tj Crespiho efekt, postupný negatívny kontrast, devalvácia odmeny atď.); ; ; ), a preto hypofágia, ktorá je výsledkom prechodu z vysoko chutnej stravy na menej chutnú stravu pre strava, môže predstavovať skôr hedonálny devalvačný proces než mechanizmus energetickej homeostázy (tj nezávislý od predchádzajúceho príjmu energie alebo prírastku telesnej hmotnosti). ; , ). Blokáda CRF1 Preto sa predpokladá, že receptory v BlA znižujú hypofágiu chow (tj zvyšujú príjem chow) oslabením procesu devalvácie, ku ktorému dochádza pri prechode z vysoko chutného jedla na menej chutnú stravu. V tejto súvislosti je tiež zrejmá nezrovnalosť medzi molekulárnymi a behaviorálnymi / farmakologickými výsledkami získanými v BlA. Aj keď CRF1 Receptorový antagonista bol schopný znížiť veľkosť hypofágie čreva, keď sa injektoval do BlA, v porovnaní s kontrolnými potkanmi a potkanmi s cyklom diéty sa v tejto oblasti nepozorovali žiadne významné rozdiely v imunoreaktivite CRF. Tento zjavný nesúlad sa dá vysvetliť vzhľadom na to, že procesy znehodnocovania alternatívnych odmien závislé od BlA sa vyskytujú fyziologicky a majú dôležitý vývojový význam pri výbere potravín, ktoré poskytujú najvyššiu hodnotu odmeny / energie (). Ako také sa dá argumentovať, že sprostredkovanie týchto procesov v BlA nevyžaduje neuroadaptácie v systéme CRF (podobné tým, ktoré sa pozorovali v CeA). Na podporu tejto hypotézy, zatiaľ čo nadmerné stravovanie si vyžaduje vývoj chronickej diéty, dochádza k hypofágii menej preferovaného alternatívneho krmiva po prvom prechode z vysoko chutnej stravy späť na pravidelné krmivo (). Okrem toho je dôležité zdôrazniť, že na základe výsledkov získaných vstreknutím antagonistu receptora CRF1 do BlA a CeA, CRF1 Zdá sa, že tu pozorovaná hypofágia závislá od receptorov je odlišný behaviorálny proces ako anedónia pozorovaná pri vysadení lieku. Napriek tomu sa preukázalo, že akútne stiahnutie z prerušovaného prístupu k chutnému jedlu vyvoláva ďalšie reakcie podobné hypohedonikám, ako je zvýšená nehybnosť v teste núteného plávania a znížená odpoveď v progresívnom pomere výstuže (; ).

Je pozoruhodné spomenúť, že hoci Chow / stráviteľný u potkanov sa chronicky striedala strava, behaviorálne a neurochemické zmeny, ktoré sa tu vyskytujú, sa vyskytujú počas akútneho, nie chronického stiahnutia z chutnej stravy. Zdôraznenie tohto aspektu je obzvlášť dôležité, pretože vo výskume závislosti závisia od zásadných rozdielov v behaviorálnych, farmakologických a neurochemických dôsledkoch akútnych vs bola pozorovaná dlhá abstinencia (; ). Budúce štúdie budú užitočné, aby sa určilo, ako môže dlhotrvajúce stiahnutie ovplyvniť výsledky cyklov diéty.

Relevantným bodom diskusie je, či nadmerné chutné správanie pri príjme potravy, ktoré pozorujeme v kontexte tohto zvieracieho modelu, možno považovať za „kompulzívne“. V predklinickom výskume závislostí sa výraz „kompulzívny“ používal na opis nadmerného príjmu liekov počas abstinencie, ktorý je vyvolaný negatívnym afektívnym stavom a uľavuje sa mu pri obnovení prístupu k lieku (; ). Toto akceptovanie pojmu „kompulzívna“ je založené na koncepčnom rámci, v ktorom sú kompulzívne poruchy charakterizované úzkosťou a stresom pred nutkavým správaním, a úľavou od stresu vykonávaním kompulzívneho správania (; ). V kontexte tu použitého zvieracieho modelu možno nadmerné stravovacie správanie interpretovať ako formu „kompulzívneho“ správania vzhľadom na skôr publikované dôkazy o tom, že potkany s prerušovaným prístupom k chutnej strave vykazujú negatívny emočný stav počas chutného odobratia potravy, vyznačujúci sa tým, že úzkostným a depresívnym správaním, ktoré sa uvoľní po obnovení prístupu (, ; ).

Súhrnne možno povedať, že výsledky tejto štúdie poskytujú kritické funkčné dôkazy, že CRF – CRF1 Receptorový systém CeA a BlA má rozdielnu úlohu pri sprostredkovaní maladaptívneho správania v dôsledku prerušovaného prístupu k chutnému jedlu. V CeA ide o CRF – CRF1 receptorový systém je kľúčovým mediátorom nadmerného stravovania chutných jedál a negatívnych účinkov závislých od stiahnutia, zatiaľ čo v BlA sprostredkuje averzívne reakcie subjektov vyvolané znížením odmeny.

FINANCOVANIE A ZVEREJNENIE INFORMÁCIÍ

Autori neuvádzajú žiadny konflikt záujmov.

Poďakovanie

Ďakujeme Duncanovi Momaneyovi, Aditi R. Narayanovi, Jine Kwakovej za technickú pomoc a Tamare Zericovej za technickú a redakčnú pomoc. Ďakujeme tiež Elene F Crawfordovej za užitočné návrhy týkajúce sa imunohistochémie CRF. Táto publikácia bola možná pomocou čísel grantov DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 a AA016731, Národného ústavu pre zneužívanie drog (NIDA), Národného ústavu duševného zdravia (NIMH) a Národného ústavu pre zneužívanie alkoholu a alkoholizmus ( NIAAA), Peter Paul Career Development Professorship (PC) a Boston University's Undergraduate Research Opportunities Program (UROP). Tento výskum bol podporený aj programom intramurálneho výskumu NIH Národného ústavu pre zneužívanie drog a Národným ústavom pre zneužívanie alkoholu a alkoholizmus, NIH, DHHS. Za jeho obsah sú výlučne zodpovední autori a nemusí nevyhnutne predstavovať oficiálne názory Národných inštitútov zdravia.

poznámky pod čiarou

 

Doplnková informácia sprevádza dokument na webovej stránke neuropsychofarmakológie (http://www.nature.com/npp)

 

 

Doplnkový materiál

Doplnková informácia

Referencie

  • Ahmed SH, Koob GF. Prechod na drogovú závislosť: negatívny posilňovací model založený na alostatickom poklese funkcie odmeňovania. Psychofarmakológia (Berl) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Zvieracie modely závislé od cukru a tuku: vzťah k závislosti na potravinách a zvýšenej telesnej hmotnosti. Methods Mol Biol. 2012, 829: 351-365. [PubMed]
  • Bakshi VP, Kalin NH. Hormón uvoľňujúci kortikotropín a zvieracie modely úzkosti: interakcie gén-prostredie. Biol Psychiatry. 2000, 48: 1175-1198. [PubMed]
  • Bale TL. Citlivosť na stres: dysregulácia ciest CRF a vývoj chorôb. Horm Behav. 2005, 48: 1-10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant vyvoláva úzkosť u potkanov stiahnutých z chutného jedla: úloha centrálneho amygdaly Neuropsychofarmakológia: 10.1038 / npp.2013.153 [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioidný systém v mediálnej prefrontálnej kôre sprostredkuje stravovacie návyky závislé od návykových látok Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Koncepčný rámec pre etiológiu alkoholizmu: hypotéza „podpaľovania“ / stresu. Psychopharmacology (Berl) 2005; 178: 367–380. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M., a kol. Blokáda receptorov CRF1 v centrálnom jadre amygdaly oslabuje dysforiu spojenú s abstinenciou nikotínu u potkanov. Pharmacol Biochem Behav. 2012, 101: 62-68. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, a kol. Dizajn 2,5-dimetyl-3- (6-dimetyl-4-metylpyridín-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] pyrimidín (NBI 30775 / R121919) a vzťahy medzi štruktúrou a aktivitou radu silných a orálne aktívnych antagonistov receptora faktora uvoľňujúceho kortikotropín. J Med Chem. 2004, 47: 4787-4798. [PubMed]
  • Corwin RL. Zvieratá potkanov: model prerušovaného nadmerného správania. Chuti do jedla. 2006, 46: 11-15. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Prehľad sympózií - závislosť od jedla: skutočnosť alebo fikcia. J Nutr. 2009, 139: 617-619. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Mikroštruktúra výživy u potkanov citlivých na stravu vyvolaných v porovnaní s rezistentnými potkanmi: centrálne účinky urokortínu 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB a kol. Nábor CRF systému sprostredkováva temnú stránku nutkavého jedenia. Proc Natl Acad Sci USA. 2009; 106: 20016-20020. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Intermitentný prístup k preferovanej potrave znižuje zosilňujúcu účinnosť krmiva u potkanov. Am J Physiol Regul Integr Comp Compioliol. 2008, 295: R1066-R1076. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Konzumačné, úzkostné a metabolické adaptácie u samíc potkanov so striedavým prístupom k preferovaným potravinám. Psychoneuroendocrinology. 2009b; 34: 38-49. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, a kol. Antagonizmus sigma-1 receptorov blokuje kompulzívne stravovanie. Neuropsychofarmakologie. 2012, 37: 2593-2604. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF sprostredkuje anxiogénne a anti-obohacujúce, ale nie anorektické účinky PACAP Neuropsychofarmakológia: 10.1038 / npp.2013.113 [Článok bez PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Faktor uvoľňujúci kortikotropín v centrálnom jadre amygdaly sprostredkuje zvýšené samopodávanie etanolu u odobratých potkanov závislých od etanolu. J Neurosci. 2006, 26: 11324-11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH, a kol. Aktivácia systému CRF-CRF1 sprostredkuje zvýšenie samoaplikácie nikotínu u potkanov závislých od nikotínu. Proc Natl Acad Sci USA. 2007, 104: 17198-17203. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, a kol. In vitro charakterizácia R121919: nového nepeptidového antagonistu receptora faktora 1 (CRF1) uvoľňujúceho kortikotropín na potenciálne liečenie depresií a porúch súvisiacich s úzkosťou. Spoločnosť pre neurovedy. 2000; Abstrakt 807: 4 – 9.
  • Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Úloha chutného jedla a hladu ako spúšťacích faktorov v zvieracom modeli stresom vyvolaného nadmerného jedenia. Int J Eat Disord. 2003, 34: 183-197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Neurotoxické lézie bazolaterálneho, ale nie centrálneho amygdaly interferujú s Pavloviánskymi účinkami kondicionovania druhého stupňa a devalváciou zosilňovača. J Neurosci. 1996, 16: 5256-5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Akútne stiahnutie, dlhotrvajúca abstinencia a negatívny vplyv na alkoholizmus: sú spojené. Addict Biol. 2010, 15: 169-184. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Heilig M, Koob GF. Kľúčová úloha faktora uvoľňujúceho kortikotropín pri závislosti od alkoholu. Trendy Neurosci. 2007, 30: 399-406. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Potlačenie faktora uvoľňujúceho kortikotropín v amygdale zmierňuje averzívne následky stiahnutia morfínu. Behav Pharmacol. 1995, 6: 74-80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, a kol. Stiahnutie z chronického prerušovaného prístupu k vysoko chutnému jedlu indukuje depresívne správanie u kompulzívnych jesť potkany. Behav Pharmacol. 2012, 23: 593-602. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Úloha pre systémy stresu v mozgu v závislosti. Neurón. 2008, 59: 11-34. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Neurobiologické substráty pre temnú stránku kompulzivity v závislosti. Neuropharmacology. 2009; 56 (Suppl 1: 18 – 31. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Koob GF. Úloha CRF a CRF-príbuzných peptidov v temnej časti závislosti. Brain Res. 2010, 1314: 3-14. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Heinrichs SC. Úloha faktora uvoľňujúceho kortikotropín a urokortínu v reakciách na stres na stres. Brain Res. 1999, 848: 141-152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Plasticity odmeny neurocircuitry a 'temnej stránky' drogovej závislosti. Nat Neurosci. 2005, 8: 1442-1444. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Recenzia. Neurobiologické mechanizmy pre oponentské motivačné procesy v závislosti. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008, 363: 3113-3123. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Koob GF, Volkow ND. Neurocircuitry závislosti. Neuropsychofarmakologie. 2010, 35: 217-238. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Úloha faktora uvoľňujúceho kortikotropín pri drogovej závislosti: potenciál farmakologického zásahu. CNS Drugs. 2011, 25: 271-287. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Vplyv morfínu a kokaínu na biosyntézu CRF v centrálnom jadre potkana amygdaly. Neuropeptidy. 2003, 37: 105-110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. Úloha hormónu uvoľňujúceho kortikotropín v jadre amygdaly a lôžka jadra strie terminis v behaviorálnych, modulačných a endokrinných následkoch abstinencie opiátov. Neuroscience. 2002, 112: 605-617. [PubMed]
  • Merlo Pich E, Lorang M., Yeganeh M., Rodriguez de Fonseca F., Raber J., Koob GF, a kol. Zvýšenie hladín imunoreaktivity podobnej faktoru uvoľňujúceho kortikotropín v amygdale bdelých potkanov počas stresového obmedzenia a odoberania etanolu merané mikrodialýzou. J Neurosci. 1995, 15: 5439-5447. [PubMed]
  • Murray E, Wise S, Rhodos S. 2011Čo môžu rôzne mozgy robiť s odmenou In Gottfried JA (eds) .Neurobiology of Sensation and Reward, Kapitola 4 CRC Press: Boca Raton, FL, USA [PubMed]
  • Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Temná stránka závislosti na potravinách. Physiol Behav. 2011, 104: 149-156. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007The Brain Rat in Stereotaxic Coordinates6th edn.Academic Press
  • Pellegrino A. Stereotaxický atlas mozgu potkana. Plenum: New York; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Aktivácia faktora uvoľňujúceho kortikotropín v limbickom systéme počas vysadenia kanabinoidov. Science. 1997, 276: 2050-2054. [PubMed]
  • Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-metoxymetopón, vysoko účinný mu opioidný agonista, dvojfázovo ovplyvňuje príjem etanolu u potkanov preferujúcich alkohol na Sardínii. Psychofarmakológia (Berl) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
  • Salinas JA, rodič MB, McGaugh JL. Lézie kyseliny ibotenovej bazolaterálneho komplexu amygdaly alebo centrálneho jadra odlišne ovplyvňujú reakciu na zníženie odmeny. Brain Res. 1996, 742: 283-293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. Úloha CRF a ďalších neuropeptidov pri strese vyvolanom obnovení liečiv. Brain Res. 2010, 1314: 15-28. [Článok bez PMC] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Charakterizácia hypotalamického peptidu ovčieho zvyšku 41, ktorý stimuluje sekréciu kortikotropínu a beta-endorfínu. Science. 1981, 213: 1394-1397. [PubMed]
  • Volkow ND, O'Brien CP. Problémy pre DSM-V: ak by obezita mala byť zahrnutá ako porucha mozgu. Am J Psychiatria. 2007; 164: 708–710. [PubMed]
  • Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA-sprostredkovaná inhibícia bazolaterálneho amygdaly blokuje devalváciu odmeny u makakov. J Neurosci. 2005, 25: 4577-4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Epidemiologické a ekonomické dôsledky globálnych epidémií obezity a cukrovky. Nat Med. 2006, 12: 62-66. [PubMed]