Metamfetamín pôsobí na subpopulácie neurónov regulujúcich sexuálne správanie u samcov potkanov (2009)

Neuroscience. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. dva: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

zdroj

Oddelenie anatómie a bunkovej biológie, Schulichova lekárska škola a stomatológia, Univerzita v západnom Ontáriu, Londýn, ON, Kanada, N6A 5C1.

abstraktné

Metamfetamín (Meth) je vysoko návykový stimulant. Zneužívanie liekov sa bežne spája s praktikami sexuálneho rizikového správania a zvýšenej prevalencie vírusu ľudskej imunodeficiencie a používatelia Meth uvádzajú zvýšenú sexuálnu túžbu, vzrušenie a sexuálnu radosť. Biologický základ tohto spojenia drog a pohlavných stykov nie je známy. Súčasná štúdia poukazuje na to, že podávanie metylu u samcov potkanov aktivuje neuróny v oblastiach mozgu mezolimbického systému, ktoré sa podieľajú na regulácii sexuálneho správania. Konkrétne Meth a párenie ko-aktivujú bunky v nucleus accumbens jadre a shell, basolateral amygdala, a predné cingulate cortex. Tieto zistenia dokazujú, že na rozdiel od súčasnej viery, drogy zneužívania môžu aktivovať rovnaké bunky ako prirodzené zosilňovače, to je sexuálne správanie a na druhej strane môžu ovplyvňovať kompulzívne hľadanie tejto prirodzenej odmeny.

Kľúčové slová: jadro accumbens, bazolaterálna amygdala, prefrontálna kôra, zneužívanie látok, reprodukcia, závislosť

Motivácia a odmena sú regulované mesolimbickým systémom, vzájomne prepojenou sieťou mozgových plôch pozostávajúcou z nucleus accumbens (NAc) ventrálnej tegmentálnej oblasti (VTA), basolaterálnej amygády ​​a mediálnej prefrontálnej kôry (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas a Volkow, 2005). Existuje dostatok dôkazov o tom, že mezolimbický systém je aktivovaný v reakcii na obe látky zneužívania (Di Chiara a Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi a kol., 1999) a prirodzene odmeňujúce správanie, ako je sexuálne správanie (Fiorino a kol., 1997, Balfour a spol., 2004). Mužské sexuálne správanie, a najmä ejakulácia, je vysoko odhodlaná a posilňuje sa u modelov zvierat (Pfaus a kol., 2001). Mužské hlodavce vytvárajú podmienenú preferenciu miesta (CPP) na kopuláciu (Agmo a Berenfeld, 1990, Martinez a Paredes, 2001, Tenk, 2008) a bude vykonávať operantské úlohy, aby získal prístup k sexuálne vnímavej ženke (Everitt a spol., 1987, Everitt a Stacey, 1987). Lieky na zneužívanie sú tiež odmeňujúce a posilňujúce a zvieratá sa naučia samostatne podávať látky zneužívania vrátane opiátov, nikotínu, alkoholu a psychostimulantov (Wise, 1996, Pierce a Kumaresan, 2006, Feltenstein a See, 2008). Hoci je známe, že obe lieky zneužívania a sexuálneho správania aktivujú mezolimbické oblasti mozgu, v súčasnosti nie je jasné, či drogy zneužívania ovplyvňujú rovnaké neuróny, ktoré sprostredkovávajú sexuálne správanie.

Elektrofyziologické štúdie preukázali, že jedlo a kokaín aktivujú neuróny v NAc. Avšak dve zosilňovače neaktivujú rovnaké bunky v NAc (Carelli a kol., 2000, Carelli a Wondolowski, 2003). Navyše samotné podávanie jedla a sacharózy nespôsobuje dlhodobé zmeny elektrofyziologických vlastností, ktoré sú vyvolané kokaínom (Chen a kol., 2008). Na rozdiel od toho zhromažďovanie dôkazov naznačuje, že mužské sexuálne správanie a drogy zneužívania môžu skutočne pôsobiť na rovnaké mezolimbické neuróny. Psychostimulanty a opioidy menia prejav sexuálneho správania u samcov potkanov (Mitchell a Stewart, 1990, Fiorino a Phillips, 1999a, Fiorino a Phillips, 1999b). Nedávne údaje z našej laboratórie ukázali, že sexuálne skúsenosti menia reakciu na psychostimulanty, čo dokazujú senzibilizované lokomotorické reakcie a senzibilizované vnímanie odmien na d-amfetamín u sexuálne skúsených zvierat (Pitchers a kol., 2009). Podobná odpoveď sa predtým pozorovala pri opakovanom vystavení amfetamínu alebo iným liekom zneužívania (Lett, 1989, Shippenberg a Heidbreder, 1995, Shippenberg a spol., 1996, Vanderschuren a Kalivas, 2000). Tieto zistenia spoločne naznačujú, že sexuálne správanie a reakcie na drogy zneužívania sú sprostredkované tým istými neurónmi v mezolimbickom systéme. Preto je prvým cieľom tejto štúdie skúmať neurálnu aktiváciu mezolimbického systému sexuálnym správaním a podávaním liečiva u toho istého zvieraťa. Predovšetkým sme testovali hypotézu, že psychostimulant, metamfetamín (Meth), pôsobí priamo na neuróny, ktoré normálne sprostredkujú sexuálne správanie.

Meth je jedným z najviac zneužívaných nezákonných drog na svete (NIDA, 2006, Ellkashef a kol., 2008) naje často spojená so zmeneným sexuálnym správaním. Zaujímavé je, že užívatelia Meth uvádzajú zvýšenú sexuálnu túžbu a vzrušenie, ako aj zvýšenú sexuálnu radosť (Semple a kol., 2002, Schilder a kol., 2005). Okrem toho, Mýtne zneužívanie je bežne spojené s sexuálne kompulzívnym správaním (Rawson a kol., 2002). Používatelia často hlásia, že majú viacero sexuálnych partnerov a menej pravdepodobne používajú ochranu ako ostatní užívatelia drog (Somlai a kol., 2003, Springer a kol., 2007). Bohužiaľ, štúdie naznačujúce, že Meth sa používa ako prediktor sexuálneho rizikového správania, sú obmedzené, pretože sa spoliehajú na nepotvrdené vlastné správy (Elifson a kol., 2006). Z tohto dôvodu je na pochopenie tohto zložitého spojenia medzi drogami a sexom potrebné vyšetrenie bunkového základu Meth-indukovaných zmien v sexuálnom správaní na zvieracom modeli.

Vzhľadom na vyššie uvedené dôkazy naznačujúce, že zneužívanie drog a najmä Meth môžu pôsobiť na neuróny normálne zapojené do sprostredkovania sexuálneho správania, cieľom tejto štúdie bolo skúmať nervovú aktiváciu sexuálnym správaním a podaním psychostimulantu Meth, Táto štúdia zaviedla neuroanatomickú techniku ​​s využitím imunohistochemickej vizualizácie bezprostredných skorých génov Fos a fosforylovanej Map Kinázy (pERK) na detekciu súbežnej nervovej aktivácie sexuálnym správaním a Meth. Fos sa exprimuje iba v jadre buniek s maximálnou hladinou expresie 30-90 minút po aktivácii neurónu. Existuje dostatok dôkazov, že sexuálna aktivita indukuje expresiu Fos v mozgu (Pfaus a Heeb, 1997, Veening a Coolen, 1998) vrátane mezokortikolimbického systému (Robertson a kol., 1991, Balfour a spol., 2004). Existujú tiež dôkazy, že zneužívajúce lieky indukujú expresiu pERK v rámci mezokortikolimbického systému (Valjent a kol., 2000, Valjent a kol., 2004, Valjent a kol., 2005). Na rozdiel od expresie Fos je fosforylácia ERK veľmi dynamickým procesom a vyskytuje sa len 5-20 minút po aktivácii neurónov. Zreteľné časové profily Fos a pERK z nich robia ideálny súbor markerov pre následnú aktiváciu neurónov dvomi rôznymi stimulmi.

EXPERIMENTÁLNE PROCEDÚRY

Predmety

Dospelé samce potkanov Sprague Dawley (210-225 g), získané od laboratórií Charles River Laboratories (Montreal, QC, Kanada), boli umiestnené dve na klietku v štandardných klietkach z plexiskla (domáce klietky). Zvieracia miestnosť bola udržiavaná na 12 / 12 h obrátenom svetelnom cykle (zhasne pri 10.00 h). Potraviny a voda boli k dispozícii podľa chuti. Všetky testy sa uskutočnili v prvej polovici tmavej fázy za tlmeného červeného osvetlenia. Stimulačné samica použité pre sexuálne správanie boli obojstranné ovariektómii v hlbokej anestézii (13 mg / kg ketamínu a 87 mg / kg xylazínu) a dostala podkožnej implantát obsahujúci 5% estradiol-benzoát (EB) a 95% cholesterolu. Sexuálna receptivita bola vyvolaná subkutánnym (sc) podaním 500 ug progesterónu v 0.1 ml sezamového oleja 4 h pred testovaním. Všetky postupy boli schválené Výborom pre starostlivosť o zvieratá na Univerzite v západnom Ontáriu a boli v súlade s usmerneniami načrtnutými Kanadskou radou pre starostlivosť o zvieratá.

Experimentálne vzory

Experimenty 1 a 2: Samce potkanov (n = 37) sa nechali spájať s príjemnou samičkou na jednu ejakuláciu (E) alebo 30 min, ktorá sa objavila ako prvý v čistých testovacích klietkach (60 × 45 × 50 cm) - týždeň pred testovaním párových relácií, aby ste získali sexuálne zážitky. Počas posledných dvoch relácií boli zaznamenané všetky štandardné parametre sexuálnej výkonnosti, vrátane latencie (ML, čas od zavedenia žien do prvej úlohy), latentnosti intromizácie (IL, čas od zavedenia žien až po prvý úsek s (ejakulácia), ejakulačná latencia (EL, čas od prvej intromizácie po ejakuláciu), interval po ejakulácii (PEI, čas od ejakulácie po prvú následnú intromission), počet úchytov (M) a počet intromízok (IM)Agmo, 1997). Všetci muži dostali 1 ml / kg denne injekciu 0.9% NaCl (soľný roztok), 3 po sebe nasledujúcich dní pred testovacím dňom, na zvládnutie manipulácie a injekcie. Jeden deň pred testovacím dňom boli všetci muži jediní ubytovaní. U skúsených mužov môže byť Fos vyvolaný podmienenými kontextovými znameniami spojenými s predchádzajúcou sexuálnou skúsenosťou (Balfour a kol., 2004). Preto všetky párovanie a kontrolné manipulácie počas záverečných testov boli vykonané v domácej klietke (vyhýbali sa predikatívnym podmieneným podmienkam), aby sa zabránilo aktivácii indukovanej indukovanej stimulácie u nedovolených kontrolných samcov. Muži boli rozdelení do ôsmich experimentálnych skupín, ktoré sa nelíšili v žiadnej mierke sexuálnej výkonnosti počas posledných dvoch párovacích relácií (údaje nie sú uvedené). Počas záverečného testu sa muži buď doviezli do svojej domácej klietky, až kým nevykazovali ejakuláciu (pohlavie) alebo nezískali partnerku (žiadny sex). Všetci páriaci samci boli perfúziou 60 minút po nástupe párenia, aby umožnili analýzu párovania indukovanej Fos-expresie. Samci dostali injekciu 4 mg / kg Meth alebo 1 ml / kg fyziologického roztoku (sc) (n = 4 každý) buď 10 (experiment 1) alebo 15 (experiment 2) min pred perfúziou na analýzu fosforylácie vyvolanej liekmi kinázy MAP. Dávkovanie a čas pred perfúziou boli založené na predchádzajúcich hláseniach (Choe a kol., 2002, Choe a Wang, 2002, Chen a Chen, 2004, Mizoguchi a kol., 2004, Ishikawa a kol., 2006). V kontrolnej skupine mužov, ktoré neboli Mate, ale nedostala Meth 10 (n = 7) alebo 15 (n = 5) minút pred usmrtením, alebo soľnej injekcie 10 (n = 5) alebo 15 (n = 4) minút pred usmrtením , Po usmrtení boli mozgy spracované na imunohistochémiu.

Experiment 3: Pretože vysoká dávka Meth bola použitá v experimentoch 1 a 2, vykonal sa ďalší neuroanatomický experiment, aby sa zistilo, či sexuálne správanie a nižšia dávka Meth indukujú dávkovo závislú štruktúru prekrývajúcej sa nervovej aktivácie. Táto štúdia sa uskutočnila rovnakým spôsobom ako experimenty 1 a 2. Avšak na záverečnom teste boli predtým, než boli obete zosobnené a neschválené skupiny (n = 6), dostali 1 mg / kg Meth (sc) 15 min.

Experiment 4: Ak chcete zistiť, či je neurálna aktivácia spôsobená pohlavím a Meth špecifická pre Meth, tento experiment skúmal, či sa pri psychostimulujúcom d-amfetamíne (Amph) môžu pozorovať podobné vzory prekrývajúcej sa nervovej aktivácie. Tento experiment sa uskutočnil rovnakým spôsobom ako pokusy 1 a 2. Avšak na záverečnom teste sa muži pred usmrtením (každý z nich n = 5) podali buď Amph (1 mg / kg) alebo soľný roztok (15 mg / kg) (sc) 5 min. Kontrola nezamestnaných samcov dostala fyziologický roztok alebo Amph 15 minút pred usmrtením. Prehľad experimentálnych skupín použitých v experimentoch 1-4 je uvedený v Tabuľka 1.

Tabuľka 1       

Prehľad experimentálnych skupín zahrnutých v experimentoch 1-4.

Príprava tkanív

Zvieratá boli anestetizované pentobarbitalom (270 mg / kg; ip) a perfúzované transcardiálne s 5 ml fyziologického roztoku a následne 500 ml 4% paraformaldehydu v fosfátovom pufri 0.1M (PB). Mozgy boli odstránené a postfixované na 1 h pri izbovej teplote v rovnakom fixačnom činidle, potom boli ponorené do 20% sacharózy a 0.01% sacharidu sodného v 0.1 M PB a skladované pri 4 ° C. Koronálne rezy (35 μm) boli rezané na mraziacom mikrotóme (H400R, Micron, Nemecko), zhromaždené v štyroch paralelných sériách v roztoku kryoprotektantu (30% sacharózy a 30% etylénglykolu v 0.1 M PB) a uložené pri 20 ° C spracovanie.

imunohistochémia

Všetky inkubácie sa uskutočnili pri laboratórnej teplote za mierneho miešania. Voľne plávajúce rezy sa intenzívne premyli s fyziologickým roztokom pufrovaným fosfátom 0.1 M (PBS) medzi inkubáciami. Sekcie sa inkubovali v 1% H2O2 pre 10 min, potom sa zablokuje v inkubačnom roztoku (PBS obsahujúci 0.1% hovädzí sérový albumín a 0.4% Triton X-100) pre 1 h.

perky / Fos

Tkanivo bola inkubovaná cez noc s králičie polyklonálne protilátkou proti p42 a p44 MAP kinázy ERK1 a ERK2 (Perk; 1: 400 experiment 1 veľa 19; 1: 4.000 experiment 2 a 3 veľa 21; Cell Signaling Cat # 9101), po ktorom nasleduje 1 h inkubácie s biotinylovaným oslie anti-králičie IgG (1: 500; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) a avidín-chrenová peroxidáza (ABC Elite; 1: 1000, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Potom sa tkanivo inkubovalo 10 min s biotinylovaným tyramidom (BT, 1: 250 v PBS + 0.003% H2O2; Tyramidová signálna amplifikačná súprava, NEN Life Sciences, Boston, MA) a pre 30 min s Alexa 488 konjugovaným strepavidínom (1: 100, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Ďalej, tkanivo sa inkubuje cez noc s králičie polyklonálne protilátky proti c-Fos (1: 500, SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), nasledovaný 30 minútach inkubácie s kozie anti-králičie Alexa 555 (1: 200, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Po zafarbení boli rezy dôkladne premyté v 0.1 M PB, namontované na sklenené šmýkačky s 0.3% želatinou v ddH20 a pokryté krytom s vodným upevňovacím médiom (Gelvatol) obsahujúcim protizávračné činidlo 1,4-diazabicyklo (2,2) oktán (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imunohistochemické kontroly zahŕňali vynechanie jednej alebo oboch primárnych protilátok, čo viedlo k neprítomnosti označovania v príslušnej vlnovej dĺžke.

Analýza dát

Sexuálne správanie

Pre všetky štyri experimenty sa štandardné parametre pre sexuálnu výkonnosť zaznamenali tak, ako je opísané vyššie, a analyzovali sa pomocou analýzy rozptylu (ANOVA). Analýza údajov o sexuálnom správaní počas posledného testovacieho dňa neodhalila žiadne významné rozdiely medzi skupinami v žiadnom z parametrov sexuálnej výkonnosti.

Počet buniek pERK / Fos

Jednotlivé a duálny značené bunky pre Fos a Perk boli počítané v chvostovej úrovniach NAC jadra a škrupiny podoblastí, bazolaterální amygdaly (BLA), posterodorsal mediálne amygdaly (MEApd), centrálne amygdaly (CEA), mediálne Preoptic nukleových (MPN), Posteromediální a posterolaterálne ložiskové jadro stria terminalis (BNSTpm a BNSTpl) a predregulárne oblasti (ACA), prelimbické (PL) a infralimbické (IL) subregióny mPFC. Snímky boli zachytené pomocou chladenej CCD kamery (Microfire, Optronics) pripojenej k mikroskopu Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Nemecko) a softvéru Neurolucida (MicroBrightfield Inc) s pevnými nastaveniami fotoaparátu pre všetky subjekty (pomocou cieľov 10x). Pomocou softvéru neurolucida boli oblasti analýzy definované na základe orientačných bodov (Swanson, 1998) jedinečné pre každú oblasť mozgu (pozri Obrázok 1). Štandardné oblasti analýzy boli použité vo všetkých oblastiach okrem jadra a shell NAc. V týchto oblastiach expresia pERK a Fos nebola homogénna a objavila sa v patch-like vzorkách. Celé jadro a shell boli preto načrtnuté na základe orientačných bodov (laterálna komora, predná komunikácia a ostrovy Calleja). Oblasti analýzy sa medzi experimentálnymi skupinami nelíšili a boli 1.3 mm2 v jadre a škrupine NAc. Štandardné oblasti analýzy pre zvyšné oblasti boli: 1.6 mm2 v BLA, 2.5 a 2.25 mm2 v MEApd a CeA, 1.0 mm2 v MPN, 1.25 mm2 v subregiónoch BNST a mPFC a 3.15 mm2 vo VTA. Dve rezy sa počítali dvojstranne pre každú oblasť mozgu na jedno zviera a vypočítali sa počet jediných a duálne značených buniek pre pERK a Fos, rovnako ako percentá pERK buniek, ktoré exprimovali Fos marker. Pri experimentoch 1, 2 a 4 boli priemerné skupiny porovnávané pomocou dvojcestného ANOVA (faktorov: párenie a liečivo) a Fischerovho LSD pre post hoc porovnania na úrovni významu 0.05. Pre experiment 3 boli priemerné skupiny porovnávané pomocou nepárových t-testov na úrovni významnosti 0.05.

Obrázok 1       

Schématické obrázky a obrázky ilustrujúce oblasti analýzy mozgu. Uvedené oblasti analýzy boli založené na pamiatkach jedinečných pre každú oblasť mozgu, nelíšili sa medzi experimentálnymi skupinami a boli 1.25 mm2 v subregiónoch mPFC (a), 1.3 mm2 v ...

snímky

Digitálne obrázky pre Obrázok 3 boli zachytené použitím CCD kamery (DFC 340FX, Leica) pripojenej k mikroskopu Leica (DM500B) a boli importované do softvéru Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Obrázky sa nijako nezmenili, s výnimkou nastavenia jasu.

Obrázok 3       

Reprezentatívne obrazy sekcií NAc, ktoré boli imunizované pre Fos (červená, a, d, g, j) a pERK (zelená, b, e, h, k) zvierat v každej experimentálnej skupine: , Sex + Sal (d, e, f), Žiadny sex + Meth (g, h, i) a Sex + Meth (j, k, l). Pravé panely sú ...

VÝSLEDKY

Neurónová aktivácia jazykového systému sexuálnym správaním a metódou

Experiment 1: Analýza buniek s jednoduchou a dvojitou značkou pre párovú indukovanú FOS a Meth-indukovanú pERK u samcov, ktorí dostali Meth 10 minút pred usmrtením, odhalili párenie indukované Fos v MPN, BNSTpm, NAc jadre a škrupine, BLA, VTA, a všetky subregióny mPFC, v súlade s predchádzajúcimi štúdiami demonštrujúcimi v týchto oblastiach expresiu Fos vyvolanú párovaním (Baum a Everitt, 1992, Pfaus a Heeb, 1997, Veening a Coolen, 1998, Hull a kol., 1999). Meth podávanie 10 minút pred usmrtením vyvolalo pERK v jadre a plášti NAc, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl a oblastiach mPFC, v súlade s aktivačnými vzormi indukovanými inými psychostimulanciamiValjent a kol., 2000, Valjent a kol., 2004, Valjent a kol., 2005).

Okrem toho boli pozorované tri modely koexpresie neurálnej aktivácie sexuálnym správaním a Meth: Po prvé boli identifikované oblasti mozgu, kde pohlavné a liekové organizmy aktivovali neprekrývajúce sa nervové populácie (Tabuľka 2). Konkrétne v CeA, MEApd, BNSTpl a mPFC došlo k významnému zvýšeniu tak pERK (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001), ako aj Fos vyvolaného pohlavím (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; p <1,16). Avšak v týchto oblastiach nedošlo k významnému zvýšeniu duálne značených neurónov u spárených mužov liečených pervitínom. Jedinou výnimkou bol MEApd, kde sa zistil účinok párenia na počet duálne označených buniek (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Neexistoval však žiadny celkový účinok liečby liekom a duálne značenie v skupinách liečených pervitínom nebolo významne vyššie ako v skupinách liečených soľným roztokom, a teda nebolo spôsobené liekom (Tabuľka 2). Po druhé, mozgové oblasti boli identifikované, kde nervová aktivácia bola indukovaná len párovaním (Tabuľka 3). Konkrétne sa MPN, BNSTpm a VTA aktivovali iba párovaním a obsahovali významné zvýšenia v páre indukovanej FOS (F (1,16) = 14.99-248.99; p <0.001), ale nedochádzalo k meta-indukovanému pERK.

Tabuľka 2       

Prehľad sprostredkovania indukovanej Fos a Meth-indukovanej expresie pERK v oblastiach mozgu, kde pohlavie a lieky aktivujú neprekrývajúce sa nervové populácie.
Tabuľka 3       

Prehľad sprostredkovania indukovanej Fos a Meth-indukovanej expresie pERK v oblastiach mozgu, kde nervová aktivácia bola indukovaná iba párovaním.

Nakoniec boli nájdené oblasti mozgu, kde pohlavie a lieky aktivovali prekrývajúce sa populácie neurónov (Obrázok 2 a and3) .3). V jadre a škrupine NAc, BLA a ACA boli celkové účinky párenia (F (1,16) = 7.87–48.43; p = 0.013- <0.001) a liečby drogami (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), ako aj interakcia medzi týmito dvoma faktormi (F (1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04- <0.001; žiadna významná interakcia v ACA) na počty buniek exprimujúcich oba párením indukovaný Fos a pervitín indukovaný pervitínom. Post hoc analýza odhalila, že počet duálne označených neurónov bol signifikantne vyšší u spárených mužov s injekciou Meth v porovnaní s nepárnymi mužmi, ktorým bol podaný Meth (p = 0.027- <0.001), alebo u párovaných so soľným roztokom (p = 0.001- <0.001) mužov (Obrázok 2 a and3) .3). Keď boli údaje vyjadrené ako percentá neurónov aktivovaných liekmi, 39.2 ± 5.3% v jadre NAc, 39.2 ± 5.8% v NAc plášti, 40.9 ± 6.3% v BLA a 50.0 ± 5.3% ACA neurónov boli aktivované ako párenie a Meth.

Obrázok 2       

Pohlavne indukovaná Fos a Meth-indukovaná expresia pERK v NAc, BLA a ACA neurónoch 10 min po podaní 4 mg / kg Meth. Priemerné počty ± sem Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) a duálne (c, f, i, ...

Neočakávané pozorovanie bolo, že sexuálne správanie ovplyvnilo pERK vyvolaný metamom. Hoci Meth signifikantne indukoval hladiny pERK v skupinách so spriaznenými a nezmazanými metam injektovanými, v NAc, BLA a ACA, označenie pERK bolo významne nižšie u párových samcov s injekciou metastázy v porovnaní s mužmi, (Obrázok 2b, e, h, k; p = 0.017 - <0.001). Toto zistenie môže ďalej podporovať hypotézu, že pohlavie a lieky pôsobia na rovnaké neuróny, ale môže tiež naznačovať zmeny indukované párovaním pri príjme alebo metabolizme liekov, ktoré následne spôsobujú zmenené nervové reakcie na Meth. Na vyšetrenie toho, či sexuálne správanie spôsobuje inú časovú štruktúru aktivácie indukovanej liečivom, boli sekcie NAc, BLA a ACA farbené pre samcov usmrtených v neskoršom časovom bode (15 min) po podaní liečiva (experiment 2).

Experiment 2: Analýza jedno- a dvojitých značených buniek potvrdila vyššie uvedené zistenia, že sexuálne správanie a následná expozícia Meth 15 minút pred usmrtením viedla k významnému zvýšeniu Fos a pERK imunokoznačenia v jadre a plášti NAc, BLA a ACA. Okrem toho bola v týchto oblastiach opäť nájdená významná koexpresia páru indukovanej Fos a Meth-indukovanej pERK (Obrázok 4; efekt párenia: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002 - <0.001; účinok lieku: F (1,12) = 14.11–54.41; p = 0.003 - <0.001). Počet duálne označených neurónov u spárených samcov s injekciou pervitínu bol signifikantne vyšší v porovnaní s nepárnymi samcami ošetrenými pervitínom (p <0.001) alebo spárenými soľnými roztokmi (p <0.001). Keď boli údaje vyjadrené ako percentá neurónov aktivovaných liekom, aktivovalo sa 47.2 ± 5.4% (NAc jadro), 42.7 ± 7.6% (NAc obal), 36.7 ± 3.7% (BLA) a 59.5 ± 5.1% (ACA) neurónov párením aktivoval aj Pervitín. Liekom indukovaná pERK sa navyše nelíšila medzi párenými a nedopárovanými zvieratami (Obrázok 4b, e, h, k), vo všetkých oblastiach okrem ACA (p <0.001). Tieto údaje naznačujú, že sexuálne správanie skutočne spôsobuje zmenu časového vzoru indukcie pERK pôsobením Meth.

Obrázok 4       

Pohlavne indukovaná Fos a Meth-indukovaná expresia pERK v NAc, BLA a ACA neurónoch 15 min po podaní 4 mg / kg Meth. Priemerné počty ± sem Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) a duálne (c, f, i, ...

Neurálna aktivácia po sexuálnom správaní a 1 mg / kg Meth

Doterajšie výsledky odhalili, že sexuálne správanie a 4 mg / kg Meth aktivovali prekrývajúce sa populácie neurónov v jadre a škrupine NAc, BLA a ACA. To skúmať vplyv dávky lieku na toto prekrývanie pri aktivácii, boli študované aj modely nervovej aktivácie s použitím nižšej dávky Meth. Jadro a shell NAc, BLA a ACA boli analyzované na aktiváciu indukovanú pohlavím a Meth. Skutočne, sexuálne správanie a následná expozícia Meth viedla k významnému zvýšeniu označovania Fos a pERK v subregiónoch NAc jadro a shell, BLA, rovnako ako neuróny v ACA oblasti mPFC (Obrázok 5). Zaujímavé je, že nižšia dávka Meth viedla k podobnému počtu neurónov značených pERK indukovaných 4 mg / kg Meth v analyzovaných štyroch oblastiach mozgu. Ešte dôležitejšie je, že NAc jadro a škrupina, BLA a ACA vykazujú významné zvýšenie počtu duálne značených buniek (Obrázok 5c, f, i, l) v porovnaní s nespojenými mužmi, ktorým sa injekčne podal pervitín (p = 0.003 - <0.001). Keď boli údaje vyjadrené ako percento neurónov aktivovaných liekom, 21.1 ± 0.9% a 20.4 ± 1.8% v jadre NAc a škrupine, 41.9 ± 3.9% v BLA a 49.8 ± 0.8% neurónov ACA bolo aktivovaných podľa pohlavia a Meth.

Obrázok 5       

Pohlavne indukovaná Fos a Meth-indukovaná expresia pERK v NAc, BLA a ACA neurónoch 15 min po podaní 1 mg / kg Meth. Priemerné počty ± sem Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) a duálne (c, f, i, ...

Neurálna aktivácia po sexuálnom správaní a podávaní d-amfetamínu

Na testovanie toho, či vyššie uvedené výsledky boli špecifické pre Meth, bol vykonaný ďalší experiment na štúdium nervovej aktivácie indukovanej párovaním a Amphom. Analýza jedno- a dvojitých značených buniek pre pERK a Fos preukázala, že sexuálne správanie a následná expozícia Amphu viedla k významnému zvýšeniu Fos a pERK imuno-značenia v NAc jadre a plášti a BLAObrázok 6; efekt párenia: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016 - <0.001; účinok lieku: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047 - <0.001). Okrem toho bol počet duálne označených neurónov signifikantne vyšší u spárených mužov liečených Amph v porovnaní s nepárnymi mužmi liečených Amph (p = 0.009 - <0.001) alebo u spárených mužov liečených soľným roztokom (p = 0.015 - <0.001) (Obrázok 6c, f, i). Keď boli údaje vyjadrené ako percentá neurónov aktivovaných liekmi, 25.7 ± 2.8% a 18.0 ± 3.2% v jadre a plášti NAc a 31.4 ± 2.0% neurónov BLA boli aktivované ako párovaním, tak Amph. ACA oblasť mPFC vykazovala významné hladiny Fos indukovanej párom (Obrázok 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Na rozdiel od pervitínu však Amph neviedol k významnému zvýšeniu hladín pERK vyvolaných liekom v ACA (Obrázok 6k) alebo čísla neurónov s dvojitou značkou v ACA (Obrázok 6l) v porovnaní so samcami spárovanými aj nezmiešanými soľami injektovanými soľným roztokom.

Obrázok 6       

Pohlavne indukovaná Fos a amf-indukovaná expresia pERK v NAc, BLA a ACA neurónoch 15 min po podaní 5 mg / kg Amph. Priemerné počty ± sem Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) a duálne (c, f, i, ...

DISKUSIA

Súčasná štúdia demonštruje na bunkovej úrovni prekrytie medzi nervovou aktiváciou prirodzeným posilňujúcim sexuálnym správaním a psychostimulantom Meth. Preto tieto údaje ukazujú, že nielen lieky pôsobia na rovnaké oblasti mozgu, ktoré regulujú prirodzenú odmenu, ale v skutočnosti drogy aktivujú rovnaké bunky, ktoré sa podieľajú na regulácii prirodzenej odmeny. Konkrétne sa tu ukázalo, že sexuálne správanie a Meth spoločne aktivovali populáciu neurónov v NAc jadre a škrupine, BLA a ACA oblasti mPFC, pričom identifikovali potenciálne miesta, kde môže Meth ovplyvňovať sexuálne správanie.

Súčasné zistenie, že sexuálne správanie a podávanie Meth aktivujú prekrývajúce sa populácie neurónov v NAc, BLA a ACA, je na rozdiel od zistení z iných štúdií, ktoré ukazujú, že rôzne populácie NAc neurónov kódujú drogu a prirodzenú odmenu.

Konkrétne elektrofyziologické štúdie, ktoré porovnávali nervovú aktiváciu počas samo-podávania prirodzených odmien (potraviny a voda) a intravenózneho kokaínu, naznačili, že samotná kokaínová aktivácia aktivovala diferenciálnu neprekrývajúcu sa populáciu neurónov, ktorá vo všeobecnosti nereagovala počas odpovede operandom na vodu a potravinárskej výstuže (92%). Iba 8% nahromadených neurónov ukázalo aktiváciu kokaínom aj prirodzenou odmenou (Carelli a kol., 2000).

Naproti tomu väčšina (65%) buniek v NAc vykazovala aktiváciu rôznymi prirodzenými odmenami (jedlo a voda), dokonca aj vtedy, ak bol jeden výstuž väčší chuť (sacharóza) (Roop a kol., 2002).

Niektoré faktory môžu prispieť k nesúladu s aktuálnymi výsledkami. Po prvé, na vyšetrenie neurálnej aktivity boli použité rôzne technické prístupy. Súčasná štúdia používa neuroanatomickú metódu na detekciu súbežnej nervovej aktivácie dvomi rôznymi stimulmi s využitím duálnej fluorescenčnej imunocytochemie pre Fos a pERK, čo umožňuje vyšetrenie aktivácie jednotlivých buniek na veľkých rozpätiach mozgových oblastí. Na rozdiel od toho štúdie od Carelli a spolupracovníkov používali elektrofyziologické záznamy obmedzené na NAc o správaní sa zvierat, aby zistili, či samo-podávanie liekov zneužívania aktivuje tie isté neurálne obvody, ktoré používajú prirodzené odmeny.

Po druhé, súčasná štúdia skúmala odlišnú prirodzenú odmenu, tj sexuálne správanie v porovnaní s predchádzajúcimi štúdiami, ktoré používali potravu a vodu u potkanov s obmedzeným účinkom (Carelli, 2000). Potraviny a voda môžu mať menej hodnotnú hodnotu ako párenie. Sexuálne správanie je veľmi odhodlané a potkany ľahko tvoria CPP na kopuláciu (Agmo a Berenfeld, 1990, Martinez a Paredes, 2001, Tenk, 2008). Hoci potkany s obmedzenou diétou tvoria CPP pre vodu (Agmo et al., 1993, Perks a Clifton, 1997) a jedlo (Perks a Clifton, 1997), dNeobmedzené potkany prednostne konzumujú a vytvárajú CPP pre chutnejšie potraviny (Jarosz a kol., 2006, Jarosz a kol., 2007).

Po tretie, naše štúdie zahŕňali rôzne lieky proti zneužívaniu v porovnaní s predchádzajúcimi štúdiami, pričom namiesto kokaínu sa použil metamfetamín a amfetamín. Súčasné výsledky ukazujú, že špecificky Meth a v menšej miere amfetamín vyústili do aktivácie neurónov, ktoré boli aktivované aj sexuálnym správaním. Skúsenosti s drogami môžu zohrávať aj faktor v našich zisteniach. V súčasných štúdiách sa použili zvieratá, ktoré boli sexuálne skúsené, ale naozaj neliečené. Na rozdiel od toho, elektrofyziologické štúdie Carelli a spolupracovníkov používali "dobre vyškolené" zvieratá, ktoré dostávali opakovanú expozíciu kokaínu.

Preto je možné, že metastatická aktivácia neurónov aktivovaných sexuálnym správaním je zmenená u potkanov skúsených na liečbu. Avšak predbežné štúdie našej laboratórií naznačujú, že skúsenosť s drogami je nepravdepodobná ako hlavný faktor, pretože sexuálne správanie a liečba Meth u mužov chronicky liečených Methom ko-aktivovanými podobnými percentami aktivovaných neurónov, ako je uvedené v súčasnej štúdii (20.3 ± 2.5% v jadre NAc a 27.8 ± 1.3% v plášti NAc, Frohmader a Coolen, nepublikované pozorovania).

A nakoniec, súčasná štúdia skúmala "priamy" účinok liekov využívajúcich pasívne podávanie. Preto súčasná analýza neodhaľuje informácie týkajúce sa nervových okruhov, ktoré sa podieľajú na hľadaní liekov alebo podnetov súvisiacich s odmeňovaním liekov, ale skôr odhaľuje nervovú aktivitu spôsobenú farmakologickým účinkom drogy, V predchádzajúcich elektrofyziologických štúdiách sa neurálna aktivita NAc vyskytujúca sa v priebehu sekúnd zosilnených odpovedí nevyskytuje ako výsledok farmakologického účinku kokaínu, ale je značne závislá od asociatívnych faktorov v rámci paradigmy samo-podávaniaCarelli, 2000, Carelli, 2002). Konkrétne NAc neurálna aktivita je ovplyvnená nezávislými reakciami na podnety stimulov súvisiacich s intravenóznym dodaním kokaínu, ako aj pomocou inštrumentálnych nepredvídaných udalostí (tj lisovanie páky), ktoré sú vlastné tejto paradigme správania (Carelli, 2000, Carelli a Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli a Wightman, 2004). Stručne povedané, naše zistenia o ko-aktivácii prostredníctvom prírodnej a drogovej odmeny môžu byť špecifické pre aktiváciu sexuálnym správaním a pasívne podávané Meth a Amph.

Meth a sex aktivovali prekrývajúce sa populácie neurónov v jadre NAc a škrupine spôsobom závislým od dávky. Ko-aktivované neuróny v NAc môžu sprostredkovať potenciálne účinky Meth na motiváciu a odmeňovanie vlastností sexuálneho správania, pretože lézie NAc narušujú sexuálne správanie (Liu a kol., 1998, Kippin a kol., 2004). Navyše, tieto neuróny sú potenciálne lokusom pre dávkovanie závislý účinok lieku na párenie, pretože nižšia dávka Meth (1 mg / kg) znížila počet duálne značených buniek o 50% v porovnaní s vyššou dávkou Meth (4 mg / kg). Hoci táto štúdia neidentifikuje chemický fenotyp ko-aktivovaných neurónov, predchádzajúce štúdie ukázali, že expresia pERK a Fos indukovaná liečivom v NAc je závislá na dopamínových (DA) a glutamátových receptoroch (Valjent a kol., 2000, Ferguson a kol., 2003, Valjent a kol., 2005, Sun a kol., 2008). Hoci nie je jasné, či je neurónová aktivácia indukovaná párovaním v NAc závislá od týchto receptorov, toto bolo demonštrované na iných oblastiach mozgu, najmä v mediálnej preoptickej oblasti (Lumley a Hull, 1999, Dominguez a kol., 2007). Thus, Meth môže pôsobiť na neuróny, ktoré sú tiež aktivované počas sexuálneho správania prostredníctvom aktivácie receptorov dopamínu a glutamátu. Úloha glutamátu NAc v sexuálnom správaní je v súčasnosti nejasná, ale je dobre známe, že DA hrá rozhodujúcu úlohu v motivácii sexuálneho správania (Hull a kol., 2002, Hull a kol., 2004, Pfaus, 2009). Mikrodialyzačné štúdie zaznamenali zvýšenie výtoku NAc DA počas fázy apetitívnej a konzumácie samčieho sexuálneho správania (Fiorino a Phillips, 1999a, Lorrain a kol., 1999) a mezolimbický DA eflux sa korelovali s uľahčením iniciácie a udržiavania sexuálneho správania potkanov (Pfaus a Everitt, 1995). Ďalej, DA manipulačné štúdie ukazujú, že DA antagonisty v NAc inhibujú sexuálne správanie, zatiaľ čo agonisti uľahčujú iniciáciu sexuálneho správaniar (Everitt a spol., 1989, Pfaus a Phillips, 1989). Tak Meth môže ovplyvniť motiváciu k sexuálnemu správaniu prostredníctvom aktivácie DA receptorov.

Na rozdiel od NAc, počet duálne značených buniek v BLA a ACA zostal relatívne nezmenený bez ohľadu na dávku Meth. BLA je rozhodujúca pre diskrétne asociačné učenie a je silne zapojená do kondičného posilňovania a hodnotenia odmien počas inštrumentálnej odpovede (Everitt a spol., 1999, Cardinal a kol., 2002, Pozrite si, 2002). BLA poškodené potkany ukazujú zníženie stlačenia páky pre kondicionované podnety spárované s jedlom (Everitt a spol., 1989) alebo sexuálne posilnenie (Everitt a spol., 1989, Everitt, 1990). Naproti tomu táto manipulácia neovplyvňuje konzumačnú fázu kŕmenia a sexuálneho správania (Cardinal a kol., 2002). BLA zohráva kľúčovú úlohu aj v pamäti podmienených stimulov spojených s stimulmi lieku (Grace a Rosenkranz, 2002, Laviolette a Grace, 2006). Postihy alebo farmakologická inaktivácia BLA blokuje akvizíciu (Whitelaw a spol., 1996) a výraz (Grimm a See, 2000) podmienené obnovenie kokaínu, pričom neovplyvňuje proces podávania lieku. ďalej Amph infúzia priamo do BLA vedie k potenciálnemu opätovnému podaniu lieku v prítomnosti podmienených podnetov (Pozri et al., 2003). Preto je možné, že prenos DA DA v BLA má za následok zosilnenie emocionálnej (Ledford a kol., 2003) sexuálnej odmeny, čím prispieva k zvýšenému sexuálnemu vplyvu a túžbe, ktoré hlásia užívatelia Meth (Semple a kol., 2002, Zelená a Halkitis, 2006).

V ACA bola neurálna aktivácia sexuálne aktivovaných neurónov nezávislá od dávky a špecifická pre Meth, pretože to nebolo pozorované u Amph. Hoci Meth a Amph majú podobné štruktúrne a farmakologické vlastnosti, Meth je účinnejším psychostimulantom ako Amph s dlhodobejšími účinkami (NIDA, 2006). Štúdie autorov Goodwin a kol. ukázali, že Meth generuje väčší výtok DA a inhibuje klírens lokálne aplikovaného DA účinnejšie v kryse NAc ako Amph. Tieto vlastnosti by mohli prispieť k návykovým vlastnostiam Meth v porovnaní s Amphom (Goodwin a kol., 2009) a možno pozorované rozdiely v neurálnej aktivácii medzi dvoma liekmi. Nie je však jasné, či sú rôzne vzorce výsledkov spôsobené rozdielmi v účinnosti medzi problémami s drogami alebo účinnosťou súvisiacimi s použitými dávkami a je potrebné ďalšie vyšetrenie.

Aktivácia Meth a pohlavie sa nepozorovala v iných subregiónoch mPFC (IL a PL). U potkanov sa ACA rozsiahlo študoval s použitím predvídavých úloh, podporujúcich úlohu v združeniach podporujúcich stimul (Everitt a spol., 1999, Pozrite si, 2002, Cardinal a kol., 2003). Existuje dostatok dôkazov o tom, že mPFC je zapojený do túžby po liečení a relapsu k správaniu pri hľadaní liekov a užívaní liekov u ľudí i potkanov (Grant a kol., 1996, Childress a kol., 1999, Capriles a kol., 2003, McLaughlin a See, 2003, Shaham a kol., 2003, Kalivas a Volkow, 2005). jaV súlade s tým sa navrhlo, že dFfunkcia mPFC spôsobená opakovaným vystavením liekov zneužívania môže byť zodpovedná za zníženú kontrolu impulzov a zvýšenú správanie zameranú na lieky, ako je pozorované u mnohých závislých (Jentsch a Taylor, 1999). Nedávne údaje z našej laboratória ukázali, že lézie mPFC majú za následok pokračovanie v hľadaní sexuálneho správania, keď to bolo spojené s averzívnym podnetom (Davis a kol., 2003). Hoci táto štúdia neprešetrila ACA, podporuje hypotézu, že mPFC (a ACA špecificky) sprostredkováva účinky Meth na stratu inhibičnej kontroly nad sexuálnym správaním, ako to uvádza Meth abusers (Salo a kol., 2007).

Na záver spoločne tieto štúdie tvoria kritický prvý krok smerom k lepšiemu pochopeniu toho, ako zneužívanie drog pôsobí na nervové cesty, ktoré normálne sprostredkovávajú prirodzené odmeny. Tieto zistenia navyše dokazujú, že na rozdiel od súčasného presvedčenia, že zneužívanie drog neaktivuje rovnaké bunky v mezolimbickom systéme ako prirodzená odmena, Meth av menšej miere Amph aktivuje rovnaké bunky ako sexuálne správanie. Na druhej strane tieto ko-aktivované nervové populácie môžu ovplyvniť hľadanie prirodzenej odmeny po expozícii lieku. Na záver, výsledky tejto štúdie môžu významne prispieť k nášmu pochopeniu základu závislostí vo všeobecnosti. Porovnanie podobností a rozdielov, ako aj zmeny v nervovej aktivácii mezolimbického systému vyvolané sexuálnym správaním oproti liekom zneužívania môžu viesť k lepšiemu pochopeniu zneužívania návykových látok a súvisiacich zmien prirodzenej odmeny.

Poďakovanie

Tento výskum bol podporený grantmi z Národných inštitútov zdravotníctva R01 DA014591 a kanadských inštitútov výskumu zdravia RN 014705 na LMC.

SKRATKY

  • ABC
  • komplex avidín-biotín-chrenová peroxidáza
  • ACA
  • prednej cingulárnej oblasti
  • amphi
  • d-amfetamín
  • BLA
  • bazolaterálna amygdala
  • BNSTpl
  • posterolaterálne lôžkové jadro stria terminis
  • BNSTpm
  • jadro bedromedial bed of the stria terminalis
  • BT
  • biotinylovaného tyramidu
  • CEA
  • centrálna amygdala
  • CPP
  • podmienené miesto preferencie
  • E
  • ejakulácia
  • EL
  • latencia ejakulácie
  • IF
  • infralimbic oblasť
  • IL
  • latencia intromiózy
  • IM
  • vniknutiu
  • M
  • namontovať
  • MAP Kinase
  • mitogénom aktivovanej proteínkinázy
  • MEApd
  • posterodorézna mediálna amygdala
  • meth
  • metamfetamín
  • ML
  • latencia pripojenia
  • MPFC
  • mediálna prefrontálna kôra
  • MPN
  • mediálne preoptické jadro
  • NAC
  • jadro Accumbens
  • PB
  • fosfátový pufor
  • PBS
  • fosfátom pufrovaný soľný roztok
  • PEI
  • po ejakulačnom intervale
  • perky
  • fosforylovanej MAP kinázy
  • PL
  • prelimbic oblasť
  • VTA
  • ventrálna tegmentová oblasť

poznámky pod čiarou

Zrieknutie sa zodpovednosti vydavateľa: Toto je súbor PDF s neupraveným rukopisom, ktorý bol prijatý na uverejnenie. Ako službu pre našich zákazníkov poskytujeme túto skoršiu verziu rukopisu. Rukopis sa podrobí kopírovaniu, sádzaniu a preskúmaniu výsledného dôkazu skôr, ako sa uverejní vo svojej konečnej podobe. Upozorňujeme, že počas výrobného procesu môžu byť zistené chyby, ktoré by mohli mať vplyv na obsah, a všetky právne zrieknutia sa zodpovednosti, ktoré sa vzťahujú na časopis.

Referencie

  1. Agmo A. Pohlavné správanie samcov potkana. Brain Res Brain Res Protoc. 1997, 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Vystužovacie vlastnosti ejakulácie u samcov potkana: úloha opioidov a dopamínu. Behav Neurosci. 1990, 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Odmena a posilnenie produkované pitnou vodou: Úloha opioidov a subtypov receptora dopamínu. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Sexuálne správanie a environmentálne príznaky spojené s pohlavím aktivujú mezolimbický systém u samcov potkanov. Neuropsychofarmakologie. 2004, 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Zvýšená expresia c-fos v mediálnej preoptickej oblasti po párení u samcov potkanov: Úloha aferentných vstupov z mediálneho amygdaly a stredného mozgu centrálneho tegmentového poľa. Neuroscience. 1992, 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D., Sorge RE, Stewart J. Úloha prefrontálnej kôry pri stresovom a kokaínom vyvolanom obnovení hľadania kokaínu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Kardinál RN, Parkinson JA, hala J, Everitt BJ. Emócia a motivácia: úloha amygdaly, ventrálneho striata a prefrontálnej kôry. Neurovedy a biobehaviorálne recenzie. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Cardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Úloha predného cingulárneho kortexu pri kontrole správania Pavloviánsky podmienených stimulov u potkanov. Behavioral Neuroscience. 2003, 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktivácia stlačenia buniek accumbens stimulmi spojenými s dodaním kokaínu počas samo-podávania. Synapsie. 2000, 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens strieľanie buniek počas cieľového správania pre kokaín vs. „prirodzené“ posilnenie. Fyziológia a správanie. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektívna aktivácia accumbensových neurónov stimulmi súvisiacimi s kokaínom počas viacnásobného rozvrhu vody / kokaínu. Brain Research. 2001, 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Dôkaz, že oddelené nervové obvody v nucleus accumbens kódujú kokaín versus "prírodné" (voda a jedlo) odmenu. J Neurosci. 2000, 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funkčné mikroobvody v accumbens podliehajúcich drogovej závislosti: poznatky z signalizácie v reálnom čase počas správania. Súčasné stanovisko v neurobiológii. 2004, 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektívne kódovanie kokaínu versus prirodzené odmeny neurónov nucleus accumbens nie je spojené s chronickou expozíciou lieku. J Neurosci. 2003, 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JJ, Zhang L, Janák PH, Woodward DJ. Neuronové odpovede v prefrontálnej kôre a nucleus accumbens počas samého podávania heroínu u voľne sa pohybujúcich potkanov. Brain Res. 1997, 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokaín, ale nie prirodzená odmena Samospráva ani pasívna infúzia kokaínu vytvára pretrvávajúci LTP vo VTA. Neurón. 2008, 59: 288-297. [Článok bez PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Zvýšená aktivita Cdk5 a translokácia p35 vo Ventral Striatum akútnych a chronických metamfetamínom liečených potkanov. Neuropsychofarmakologie. 2004, 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M., O'Brien CP. Limbická aktivácia počas túžby po kokaine vyvolanej touto chorobou. Am J Psychiatria. 1999, 156: 11-18. [Článok bez PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamín zvyšuje fosforyláciu extracelulárnej signálne regulovanej kinázy a transkripčných faktorov v kryse striatum prostredníctvom metabotropných glutamátových receptorov skupiny I. Neuropsychofarmakologie. 2002, 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reguluje amfetamínom indukovanú fosforyláciu ERK1 / 2 v striatálnych neurónoch. Neuroreport. 2002, 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Spoločnosť pre behaviorálnu neuroendokrinológiu. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormóny a správanie; 2003. Poranenia mediálnej prefrontálnej kôry neporušujú sexuálne správanie u samcov potkanov; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Lieky zneužívané ľuďmi prednostne zvyšujú koncentrácie synaptických dopamínov v mezolimbickom systéme voľne sa pohybujúcich potkanov. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274-5278. [Článok bez PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Spájanie aktivuje receptory NMDA v mediálnej preoptickej oblasti samcov potkanov. Behavioral Neuroscience. 2007, 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Prediktory sexuálneho riskovania medzi novými užívateľmi drog. Časopis sexuálneho výskumu. 2006, 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapia závislostí na metamfetamíne: aktualizácia. Zneužívanie látok. 2008, 29: 31-49. [Článok bez PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Sexuálna motivácia: nervová a behaviorálna analýza mechanizmov, ktoré sú základom reakcií apetitívnych a kopulátorov samcov potkanov. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interakcie medzi amygdálou a ventrálnym striatom v združeniach s stimulom a odmenou: Štúdie s použitím programov sexuálnej výbavy druhého rádu. Neuroscience. 1989, 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Štúdium inštrumentálneho správania se sexuálnou výzvou u samcov potkanov (Rattus norvegicus): I. Kontrola krátkymi vizuálnymi stimulmi spriahnutými s receptívnou ženou. J Comp Psychol. 1987, 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Asociačné procesy závislostí a odmeňovanie úlohy amygdala-ventrálnych striatálnych podsystémov. Annals z Newyorskej akadémie vied. 1999, 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Štúdium inštrumentálneho správania se sexuálnou podporou u samcov potkanov (Rattus norvegicus): II. Účinky lézií preoptickej oblasti, kastrácie a testosterónu. J Comp Psychol. 1987, 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, pozri RE. Neurocirkulácia závislosti: prehľad. Br J Pharmacol. 2008, 154: 261-274. [Článok bez PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Amfetamínom vyvolaná expresia c-fos mRNA v caudate-putamen: účinky antagonistov DA a NMDA receptorov sa líšia ako funkcia neurónového fenotypu a environmentálneho kontextu. Journal of Neurochemistry. 2003, 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dynamické zmeny v jadrovom prírastku dopamínového prírastku počas účinku Coolidge u samcov potkanov. J Neurosci. 1997, 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Uľahčenie sexuálneho správania a zvýšený dopamínový efekt v jadrových placentách samcov potkanov po senzibilizácii vyvolanej D-amfetamínom. J Neurosci. 1999; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Uľahčenie sexuálneho správania u samcov potkanov po senzibilizácii správania indukovanej d-amfetamínom. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamín a metamfetamín sa odlišne týkajú transportérov dopamínu in vitro a in vivo. J Biol Chem. 2009, 284: 2978-2989. [Článok bez PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulácia podmienených reakcií bazolaterálnych neurónov amygdaly. Fyziológia a správanie. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, Londýn ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktivácia pamäťových obvodov počas kokaínu. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040-12045. [Článok bez PMC] [PubMed]
  39. Zelená AI, Halkitída PN. Kryštálový metamfetamín a sexuálna socialita v mestskej gay subkultúre: voliteľná príbuznosť. Kultúra, zdravie a sexualita. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, pozri RE. Disociácia primárnych a sekundárnych lymfatických jadier významných pre odmeňovanie v zvieracom modeli relapsu. Neuropsychofarmakologie. 2000, 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interakcie hormónov a neurotransmiterov pri kontrole sexuálneho správania. Behaviorálny výskum mozgu. 1999, 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mužské sexuálne správanie. In: Pfaff DW a kol., Editori. Hormóny mozgu a správania. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. str. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamín a serotonín: vplyvy na sexuálne správanie mužov. Fyziológia a správanie. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitri A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Účinky jednorazového a opakovaného podávania metamfetamínu alebo morfínu na expresiu génu neuroglykánu C v mozgu potkanov. Medzinárodný žurnál neuropsychofarmakológie. 2006, 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Podmienené preferencie miest (CPP) na vysokokalorické "občerstvenie" v potkaních kmeňoch geneticky náchylných na rezistenciu na obezitu vyvolanú stravou: Odolnosť voči blokáde naltrexónu. Farmakológia a chovanie. 2007, 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Účinok opioidného antagonizmu na kondicionované preferencie miesta na občerstvenie. Farmakológia a chovanie. 2006, 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulzivita vyplývajúca z predsieňovej dysfunkcie pri zneužívaní drog: dôsledky pre kontrolu správania od stimulov súvisiacich s odmenou. Psychofarmakológia (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Neurálny základ závislosti: patológia motivácie a voľby. Am J Psychiatria. 2005, 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Pamäť a závislosť: spoločné neurálne obvody a molekulárne mechanizmy. Neurón. 2004, 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Odporujú sa úlohy jadra accumbens a prednej laterálnej hypotalamickej oblasti pri kontrole sexuálneho správania u samcov potkanov. European Journal of Neuroscience. 2004, 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoidy zosilňujú plasticitu v neurónoch mediálneho prefrontálneho kortexu prostredníctvom bazolaterálnych vstupov amygdaly. J Neurosci. 2006, 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, pozri RE. Potenciálne opätovné zavedenie chuti kokaínu po infúzii D-amfetamínu do bazolaterálnej amygády. Neuropsychofarmakologie. 2003, 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Opakované expozície zintenzívňujú skôr než znižujú odmeňujúce účinky amfetamínu, morfínu a kokaínu. Psychofarmakológia (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Pohlavné správanie u samcov potkanov po rádiofrekvenčných alebo léziách poškodzujúcich dopamín v nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998, 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Laterálny hypotalamický serotonín inhibuje nukleosúčasť dopamínu: dôsledky pre sexuálnu sýtosť. J Neurosci. 1999, 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Účinky antagonistu D1 a sexuálnej skúsenosti na imunogreaktivitu podobnú Fos-indukovanej kopulácii v mediálnom preoptickom jadre. Brain Research. 1999, 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Iba samo-chodiace párenie je odhodlané u potkanov oboch pohlaví. Horm Behav. 2001, 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, pozri RE. Selektívna inaktivácia dorsomediálnej prefrontálnej kôry a bazolaterálnej amygdaly zmierňuje kondicionované obnovenie zhabaného chovania kokaínu u potkanov. Psychofarmakológia (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Uľahčenie sexuálneho správania u samcov potkanov za prítomnosti stimulov predtým spárovaných so systémovými injekciami morfínu. Farmakológia a chovanie. 1990, 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Pravidlá odmeňovania metamfetamínu extracelulárnou signálnou regulovanou kinázou 1 / 2 / ets podobná gene-1 signalizačnej dráhe prostredníctvom aktivácie dopamínu NIDA Výskumná správa Séria: Zneužívanie metamfetamínu a návyk 2006 NIH Číslo publikácie 06-4210.PubMed]
  61. Výhody SM, Clifton PG. Precenenie zosilňovača a preferované podmienené miesto. Fyziológia a správanie. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Cesty sexuálnej túžby. Časopis sexuálnej medicíny. 2009, 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psychofarmakológia sexuálneho správania. V: Bloom FE, Kupfer DJ, redaktori. Psychofarmakológia: štvrtá generácia pokroku. New York: Raven; 1995. str. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Dôsledky okamžitej-včasnej genetické indukcie v mozgu po sexuálnej stimulácii ženských a mužských hlodavcov. Brain Research Bulletin. 1997, 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicionovanie a sexuálne správanie: prehľad. Horm Behav. 2001, 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Diferenciálne účinky antagonistov dopamínového receptora na sexuálne správanie samcov potkanov. Psychopharmacology. 1989, 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Mezolimbický dopamínový systém: Posledná spoločná cesta k posilňujúcemu účinku zneužívaných drog? Neurovedy a biobehaviorálne recenzie. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Džbány KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Sexuálne skúsenosti indukujú funkčnosť a štrukturálnu plasticitu v mezolimbickom systéme. Biologická psychiatria. 2009 Stlačte tlačidlo.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Kolísanie dopamínu v nucleus accumbens počas udržiavania, zániku a obnovenia intravenóznej samo-podávania D-amfetamínu. J Neurosci. 1999, 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Lieky a sexuálne účinky: úloha typu a pohlavia. Časopis o liečbe zneužívania látok. 2002, 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Sexuálne správanie zvyšuje expresiu c-fos v prednom mozgu samcov potkana. Brain Res. 1991, 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Akumuluje aktivitu počas viacnásobného rozvrhu na výstupe vody a sacharózy u potkanov. Synapsie. 2002, 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Úroveň kontroly pozornosti a mozgového metabolitu u abusérov metamfetamínu. Biologická psychiatria. 2007, 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Krištáľový metamfetamín a extáza sa líšia vo vzťahu k nebezpečnému sexu medzi mladými homosexuálmi. Kanadský časopis o verejnom zdraví. 2005, 96: 340-343. [PubMed]
  75. Pozri RE. Neurálne substráty kondiciovanej kondómovej reakcie na správanie hľadajúceho drogy. Farmakológia a chovanie. 2002, 71: 517-529. [PubMed]
  76. Pozri RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drug Addiction, Relapse a Amygdala. Annals z Newyorskej akadémie vied. 2003, 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivácie súvisiace s užívaním metamfetamínu u HIV mužov, ktorí majú sex s mužmi. Časopis o liečbe zneužívania látok. 2002, 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Opätovný model relapsu lieku: história, metodológia a hlavné zistenia. Psychofarmakológia (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Senzibilizácia k podmieneným efektom odmeňovania kokaínu: farmakologické a časové charakteristiky. J Pharmacol Exp Ther. 1995, 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Senzibilizácia k podmieneným efektom odmeňovania morfínu: farmakológia a časové charakteristiky. Eur J Pharmacol. 1996, 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Prediktori sexuálneho rizikového správania sa HIV v spoločenskej vzorke mužov a žien užívajúcich injekčné drogy. AIDS a správanie. 2003, 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Metamfetamín používanie a správanie sexuálnych rizík u študentov stredných škôl v USA: Zistenia z národného prieskumu správania sa rizík. Prevencia vedy. 2007, 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Účinky dopamínových a NMDA receptorov na expresiu Fos indukovanú kokaínom v striatúch potkanov Fischer. Brain Research. 2008, 1243: 1-9. [Článok bez PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, redaktor. Mozgové mapy: Štruktúra mozgu potkanov. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Sexuálna odmena u samcov potkanov: Účinky sexuálnej skúsenosti na podmienenú preferenciu miesta spojenú s ejakuláciami a intromismi. Horm Behav. 2008 [Článok bez PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pages C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Zapojenie extracelulárnej signálu regulovanej kinázovej kaskády pre kokaín-odmeňujúce vlastnosti. J Neurosci. 2000, 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pages C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Návykové a non-návykové drogy indukujú odlišné a špecifické vzory aktivácie ERK v myšom mozgu. Eur J Neurosci. 2004, 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulácia kaskády proteínovej fosfatázy umožňuje konvergujúci signály dopamínu a glutamátu na aktiváciu ERK v striatom. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491-496. [Článok bez PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Zmeny v dopaminergnom a glutamatergickom prenosu pri indukcii a expresii behaviorálnej senzibilizácie: kritická revízia predklinických štúdií. Psychofarmakológia (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neurálna aktivácia po sexuálnom správaní u mužského a ženského mozgu potkanov. Behaviorálny výskum mozgu. 1998, 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Excitotoxické lézie bazolaterálnej amygády ​​zhoršujú získanie chovania kokaínu v rámci druhého rádu zosilnenia. Psychopharmacology. 1996, 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiológia závislosti. Súčasné stanovisko v neurobiológii. 1996, 6: 243-251. [PubMed]