Spremembe dinamike sproščanja dopamina med mladostnikom in po prostovoljnem vnosu alkohola (2014)

PLoS One. 2014 maj 1; 9 (5): e96337. doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.

Palm S, Nylander I.

Minimalizem

Adolescenca je povezana z visoko impulzivnostjo in tveganjem, zaradi česar so mladostniki bolj nagnjeni k uporabi drog. Zgodnja uporaba drog je povezana z večjim tveganjem za motnje uporabe drog pozneje v življenju, nevrobiološka osnova pa je nejasna. Možgani se med adolescenco močno razvijajo, zato se v tem času pojavljajo motnje, ki prispevajo k povečani ranljivosti. Prehod z nadzorovane na kompulzivno uporabo drog in zasvojenosti vključuje dolgotrajne spremembe v nevronskih mrežah, vključno s premikom od nucleus accumbens, ki posreduje akutne okrepitvene učinke, do novačenja dorzalnega striatuma in oblikovanja navad. Cilj te študije je bil preizkusiti hipotezo o povečanem sproščanju dopamina po farmakološkem izzivu pri podganah. Sproščanje in privzem dopamina, ki ga povzroča kalij, so raziskovali s pomočjo kronoamperometričnih zapisov dopamina v kombinaciji z izzivi amfetamina v zgodnjih in poznih mladostnikih in pri odraslih podganah. Poleg tega so bile preučene posledice prostovoljnega uživanja alkohola med adolescenco na te učinke. Podatki kažejo postopno povečanje sproščenega dopamina s starostjo, kar potrjuje predhodne študije, ki kažejo, da se bazen z dopaminom povečuje s starostjo. V nasprotju s tem pa se je kot odziv na amfetamin opazilo postopno zmanjšanje sprožene sproščanja s starostjo, kar je podprlo sorazmerno večje skladiščenje dopamina pri mlajših živalih.. Ukrepi dopamina po prostovoljnem vnosu alkohola so povzročili nižje amplitude sproščanja kot odziv na kalijev klorid, kar kaže, da alkohol vpliva na sproščujoč dopaminski bazen in to lahko vpliva na ranljivost za odvisnost in druge psihiatrične diagnoze, ki vključujejo dopamin v hrbtnem striatumu.

Predstavitev

Adolescenca je povezana z visoko impulzivnostjo in obnašanjem tveganj, zaradi česar so mladostniki bolj nagnjeni k uporabi drog [1]. Nikotin, alkohol ali konoplja so verjetno testirani pred psihostimulanti ali opiati [2], [3] in zgodnja uporaba drog je povezana z večjimi motnjami uporabe snovi (SUD) kasneje v življenju [4]-[6]. Nevrobiologija, na kateri temelji to povečano tveganje za SUD, je nejasna, toda adolescenca je čas obsežnega razvoja možganov in motnje normalnega razvoja možganov zaradi zlorabe drog, kar naj bi prispevalo k povečani ranljivosti po uporabi adolescentnih drog. [7].

Droge zlorabe pogosto delujejo na sistem nagrajevanja in povečajo zunajcelično raven dopamina v jedru nucleus accumbens po zaužitju [8]. Vendar pa prehod od začetne uporabe drog k kompulzivni uporabi in zasvojenosti vključuje dolgotrajne spremembe v številnih nevronskih mrežah [9] in ena od njih predvideva, da vključuje premik od nucleus accumbens, ki posreduje akutne okrepitvene učinke, do novačenja dorzalnega striatuma in oblikovanja navad. [10]. Dopaminergična aktivnost v hrbtnem striatumu je zato lahko tudi dejavnik ranljivosti mladostnikov.

Živalski modeli so zelo pomembni za naše razumevanje teh mehanizmov in starostno okno, prepoznano kot adolescenca pri glodalcih, je med postnatalnim dnem (PND) 28 in 50 [11]. Prejšnje študije so pokazale, da imajo mladostniki podgane zmanjšano bazalno hitrost sproščanja dopamina, zmanjšano količino dopamina, ki se da hitro sprostiti, pa tudi večje skladišče dopamina v primerjavi z odraslimi.s [12]. Prav tako je bilo predlagano, da kljub zmanjšanemu sproščanju dopamina pri osnovnih pogojih lahko mladostniki sproščajo več dopamina, če ga stimulirajo farmakološki izzivi. [13]. Prvi cilj te študije je bil zato preskusiti hipotezo o povečanem sproščanju dopamina po farmakološkem izzivu pri mladostnikih. Sproščanje in privzem dopamina sta bila raziskana s pomočjo kronoamperometričnih dopaminskih zapisov v kombinaciji z izzivi amfetamina v zgodnjih in poznih mladostnikih, pa tudi pri odraslih podganah Wistar.

Drugi cilj te študije je bil raziskati vpliv vpliva okolja na prostovoljni vnos alkohola v adolescenci. Razlog za to je bil, da prejšnje študije kažejo, da okoljski dejavniki v obdobju mladostništva, kot so intraperitonealno aplicirani alkohol, povečajo bazalne ekstracelularne ravni dopamina. [14] medtem ko prostovoljni vnos alkohola pri podganah, ki dajejo prednost alkoholu, povečajo privzem dopamina, ne da bi prizadeli bazalne ravni zunaj \ t [15]. Razlike med temi študijami je mogoče razložiti s številnimi dejavniki, kot so način dajanja, odmerek, sev podgane in natančno časovno obdobje, vendar v obeh primerih uživanje alkohola pri mladostnikih vpliva na dinamiko dopamina in to je dobro raziskati.

Materiali in metode

Izjava o etiki

Vsi poskusi na živalih so bili izvedeni v skladu s protokolom, ki ga je odobril Uppsala etični odbor za živali, in upoštevali smernice švedske zakonodaje o poskusih na živalih (Zakon o zaščiti živali SFS1998: 56) in Direktivo Sveta Evropskih skupnosti (86 / 609 / EEC).

živali

Noseče podgane Wistar (RccHan: WI, Harlan Laboratories BV, Horst, Nizozemska) so prispele v prostor za živali na dan nosečnosti 16. Živali so prispele v serijah več tednov, da bi se prilagodile časovnemu zaporedju kronoamperometričnih zapisov. Jezovi so bili samski, nameščeni v makrolonske kletke (59 cm × 38 cm × 20 cm) s hrano za pelete (tip R36; Lantmännen, Kimstad, Švedska) in vodo iz pipe ad libitum. Kletke so vsebovale posteljnino iz lesa in listov (40 × 60 cm; Cellstoff, Papyrus), osebje za nego živali pa je bilo enkrat tedensko zamenjano. Prostor za živali je bil na stalni temperaturi (22 ± 1 ° C) in vlažnosti (50 ± 10%) na običajnem ciklu 12 h svetlo / temno z lučmi pri 06: 00 am. Vse sobe so imele maskirni hrup, da bi zmanjšali nepričakovane zvoke, ki bi lahko motili živali.

Pregled eksperimentalnega orisa lahko najdete v Slika 1. Legla, ki so se rodila istega dne (postnatalni dan (PND) 0), so bila navzkrižno oskrbljena, da bi vključevala moške 6 in ženske 4, da bi nadzorovali materinski ladijski stres, materinsko vedenje in genetiko. Mladiči so bili odstavljeni na PND 22 in shranjeni v 3 na kletko do PND 28 (± 1 dan) ali PND 42 (± 1 dan), ko so bili narejeni kronoamperometrični posnetki. V tej študiji so bili uporabljeni samo moški mladiči. Skupina tridesetih podganjih samcev je dobila prostovoljni dostop do 20% etanola v dvojni embalaži proste izbire od PND28 do PND65. Živali so dobile 24 ure dostop do etanola tri zaporedne dni na teden, tj. Torek do četrtka za šest tednov, skupaj 18 sej. Za meritve vnosa etanola so bile steklenice stehtane pred in po vsaki seji in izračunani so bili čisti etanol na kilogram telesne teže. Položaji steklenic so bili spremenjeni med sejami, da bi se izognili prednostnim položajem. Živali za pitje etanola so bile individualno nameščene iz PND 28 do PND 70. Živali z najvišjim kumulativnim vnosom etanola (g / kg) so bile izbrane in elektrokemijski posnetki so bili nato narejeni pri PND 70 (± 2 dni). V istem obdobju so bile posamično urejene tudi kontrole pitja vode, ki ustrezajo starosti.

thumbnail

Slika 1. Eksperimentalni oris.

E = pitje etanola, PND = poporodni dan, W = pitje vode.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g001

Kronoamperometrični zapis dopamina In vivo

Materiali.

Inaktin, raztopino Nafion 5%, dopamin hidroklorid, L-askorbinsko kislino, kalijev klorid, natrijev klorid, natrijev fosfat, kalcijev klorid in d-amfetamin sulfat smo dobili od Sigma-Aldrich, LLC (St Louis, MO, ZDA). Kerr lepilni vosek je bil pridobljen od podjetja DAB LAB AB (Upplands Väsby, Švedska). Mikroelektrode iz ogljikovih vlaken (SF1A; 30 µm zunanji premer × 150 µm dolžine) so bile kupljene od Quanteon, LLC (Nicholasville, KY, ZDA), srebrna žica referenčne elektrode (200 µm, izolirana s teflonom) je bila kupljena od AM Systems Inc. Carlborg, WA, ZDA) in steklene kapilare (notranji premer 0.58 mm) za mikropipete so kupili pri World Precision Instruments Ltd (Stevenage, UK).

Operacija.

Posnetki dopamina so bili narejeni pri PND 28 (± 1 dan), PND 42 (± 1 dan) ali PND 70 (± 2 dni). Kirurgijo smo izvedli tik pred elektrokemičnimi posnetki. Za vzdrževanje telesne temperature smo uporabili ogrevalno blazino, ki kroži z vodo (Gaymar Industries, Inc., Orchard Park, New York). Živali smo anestezirali z Inactin 125 mg / kg intraperitonealno (ip) in dali v stereotaksični okvir (Stoelting Co., Wood Dale, IL, USA). V luknji je bila izvrtana luknja, ki je ležala nad mestom za zapisovanje elektrode, in druga luknja je bila izvrtana oddaljeno od mesta za snemanje za namestitev referenčne elektrode Ag / AgCl.

Hitro kronoamperometrični posnetki sproščanja in vnosa dopamina.

Hitro kronoamperometrične meritve (1 Hz vzorčna hitrost, 200 ms vsota) so bile izvedene z uporabo sistema za zapisovanje FAST16-mkII (Fast Analytical Sensing Technology, Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, ZDA) po predhodno opisanem postopku. [16]. Mikroelektrode iz ogljikovih vlaken (SF1A) so bile obložene s tremi nanosi Nafiona s segrevanjem 5 min pri 200 ° C pred prvo prevleko in po vsakem nanosu [17]. Elektrode so bile nato umerjene in vitro v 0.05 M fosfatnem pufru, da določimo selektivnost, mejo detekcije (LOD) in naklon pred uporabo vivo [16]. Mikroelektrode so pokazale linearne odzive na serijske dodatke dopamina (2 – 6 µM), s povprečnim korelacijskim koeficientom (R2) 0.999 ± 0.0003. Povprečna selektivnost za vse elektrode, uporabljene v tej študiji, je bila 14482 ± 3005 µM ​​za dopamin nad askorbinsko kislino. Povprečni LOD je bil 0.026 ± 0.004 µM ​​dopamin in povprečni naklon je bil -1.00 ± 0.03 nA / µM dopamin. Povprečno razmerje zmanjšanja / oksidacije, izmerjeno med referenčnimi najvišjimi odzivi dopamina, je bilo 0.67 ± 0.02, kar kaže na odkrivanje pretežno dopamina. [17]. Srebrna žica je bila prevlečena in uporabljena kot vivo Referenčna elektroda Ag / AgCl [18].

Eksperimentalni protokol in vivo.

Mikropipeto (notranji premer 10 – 15 µm) smo napolnili z izotonično raztopino kalijevega klorida (120 mM KCl, 29 mM NaCl, 2.5 mM CaCl).2· 2H2O) (pH 7.2 – 7.4) z iglo za polnjenje s pipeto (28G, World Precision Instruments, Aston, UK). Mikropipeta je bila pritrjena na približno 150-200 µm od konice ogljikovih vlaken z lepljivim voskom. Elektroda je bila stereotaktično nameščena v hrbtnem striatumu, AP: + 1.0 mm, L: + 3.0 mm iz bregme, incizijski bar je bil prilagojen glede na starost in težo [19], [20]. Elektroda je bila najprej postavljena na hrbtno stran (-3.0 mm) na mesto snemanja, z uporabo mikromanipulatorja (Narishige International Ltd, London, UK), da ga je znižala, in je dosegla stabilno izhodiščno vrednost za približno 45 – 60 min, preden je bila znižana na globina −4.0 mm od bregme. Elektroda je bila nato dovoljena, da se drugo stabilizator 5-10 na mestu snemanja, preden je bil določen učinek enkratne injekcije kalijevega klorida na sproščanje dopamina. Kalijevo raztopino smo lokalno uporabili z iztiskanjem pod pritiskom, ki so ga nadzorovali PicoSpritzer III (Parker Hannifin Corporation, Pine Brook, NJ, ZDA), tlak (10 – 20 psi) in čas (0.5 – 1.0 s) pa smo prilagodili, da smo dobili 100 nl kalijevo raztopino, izmerjeno s kirurškim mikroskopom, opremljenim z mrežico okularja [21].

Kalijevo sproženo sproščanje smo uporabili v kombinaciji s subkutanimi injekcijami amfetamina ali slanice. Izdelali smo tri referenčne vrhove, podobne amplitudi, 10 min narazen. Pet minut po zadnjem referenčnem vrhu so podgane dobile bodisi 2 mg / kg amfetamina ali ekvivalentno količino fiziološke raztopine (1 ml / kg) in po drugem sproščanju 5 min je bil spet evociran vsak 10 min, kar je povzročilo vrhove pri 5, 15, 25 , 35, 45, 55 in 65 min po sistemski injekciji, glej Slika 2A za reprezentativno sled. Odmerek amfetamina je bil izbran na podlagi vedenjskih učinkov pri študijah gibanja in samoupravljanja [22]-[24].

thumbnail

Slika 2. Reprezentativne sledi.

A) Reprezentativna sled oksidacijskega toka za podgane v postnatalnem dnevu 28, ki je prejemal amfetamin in B) blizu drugega referenčnega vrha za isto žival, ki prikazuje izračun amplitude in T80. Amp = amplituda, Base = izhodišče, Ref = referenca.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g002

Preverjanje namestitve in izključitve elektrod.

Elektrode smo odrezali in pustili na mestu po končanem eksperimentu, možgane pa zamrznili. Namestitev je bila preverjena z razdelitvijo zamrznjenih možganov. Od živali 12 pri PND28 je bil 1 izključen zaradi napačne umestitve, 2 pa zaradi napak pri snemanju. Za živali 12 pri PND 42 je bila žival 1 izključena zaradi nezakonite namestitve. Pri živalih 16 v PND 70 so bile 3 izključene zaradi napak pri snemanju. Pri živalih za pitje etanola 16 pri PND 70 so bile 2 izključene zaradi napak pri snemanju. Napake pri snemanju vključujejo zamašitev pipet in električne motnje, kot so prekinitve napajanja in motnje splošnega napajanja snemalne enote.

Analiza podatkov.

Najvišjo amplitudo evociranih vrhov in čas, ko je vrh padel na 80% amplitude (T80), smo izračunali z uporabo programske opreme FAST Analysis 4.4 (Quanteon, LLC, Nicholasville, KY, USA). Slika 2B za reprezentativno sled. Trije referenčni vrhovi so bili povprečeni in odstotek teh vrhov je bil izračunan za vrhove po injiciranju. Za statistično analizo je bila uporabljena analiza variacije ponavljajočih se meritev (ANOVA) za primerjavo kronoamperometričnih podatkov skozi čas med starostmi ali skupinami pitja in zdravljenjem (fiziološka raztopina ali amfetamin), čemur je sledil Fisher-jev test najmanjše pomembne razlike (LSD) po hoc. Za podatke o vnosu etanola, ki običajno niso bili porazdeljeni, je bila uporabljena Friedman ANOVA. Statistične analize so bile izvedene z uporabo Statistice 10 (StatSoft Inc., Tulsa, OK, ZDA). Razlike so bile statistično pomembne pri p <0.05.

Rezultati

Učinki, odvisni od starosti

Razlike v referenčnih amplitudah med starostnimi skupinami so prikazane v Slika 3. Ponovljene meritve ANOVA, ki primerjajo starost in čas, so pokazale glavni učinek starosti [F (2,22) = 5.81; p = 0.009], vendar brez učinka časa [F (2,44) = 1.43; p = 0.25] ali kateri koli interakcijski učinek med časom in starostjo [F (4,44) = 1.70; p = 0.17].

thumbnail

Slika 3. Referenčne amplitude vrhov v različnih starostih.

Amplitude (µM) (povprečje ± SEM) treh referenčnih vrhov pred zdravljenjem z amfetaminom ali fiziološko raztopino v treh starostnih skupinah; postnatalni dan (PND) 28, 42 in 70. ** p <0.01.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g003

Ni starostnih učinkov [F (2,24) = 1.02; p = 0.38], čas [F (2,48) = 0.94; p = 0.40] ali čas in starost [F (4,48) = 0.22; p = 0.93] so bile najdene za referenčne vrednosti T80. Povprečna ± standardna napaka povprečnih (SEM) referenčnih vrednosti T80 je bila 17.3 ± 1.3 za PND 28, 19.5 ± 0.9 za PND 42 in 20.5 ± 1.0 za PND70.

Razlike med starostnimi skupinami v amplitudnem odzivu na amfetamin so prikazane v. \ T Slika 4A – C. Zdravljenje z amfetaminom je povzročilo glavne učinke starosti [F (2,26) = 3.95; p = 0.03], obdelava [F (1,26) = 10.77; p = 0.003] in čas [F (6,156) = 3.32; p = 0.004] in učinki interakcije med časom in starostjo [F (12,156) = 2.23; p = 0.01], čas in zdravljenje [F (6,156) = 4.20; p <0.001], ni pa interakcije med starostjo in zdravljenjem [F (2,26) = 2.37; p = 0.11] ali čas, starost in zdravljenje [F (12,156) = 0.77; p = 0.68].

thumbnail

Slika 4. Amplitude in odzivi T80 skozi čas v različnih starostih.

Odzivi skozi čas po subkutanih (sc) injekcijah fiziološke raztopine ali amfetamina v odstotkih referenčnih vrednosti (povprečje ± SEM) za amplitude pri A) poporodni dan (PND) 28, B) PND 42 in C) PND 70 in za vrednosti T80 pri D) PND 28, E) PND 42 in F) PND 70. * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 v primerjavi s fiziološko raztopino, #p <0.05 v primerjavi z ekvivalentno časovno točko pri PND 42, ° p <0.05, °° p <0.01, °°° p <0.001 v primerjavi z ekvivalentno časovno točko pri PND 70, §p <0.05, §§p <0.01, §§§p <0.001 v primerjavi z enakovredno časovno točko pri PND 28.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g004

Odziv T80 na amfetamin je prikazan v Slika 4D – E. Glavnega učinka starosti ni bilo [F (2,25) = 1.87; p = 0.17], vendar so bili učinki zdravljenja [F (1,25) = 26.52; p <0.001], čas [F (6,150) = 7.70; p <0.001] in interakcijski učinek časa in zdravljenja [F (6,150) = 12.29; p <0.001]. Med starostjo in zdravljenjem ni bilo interakcije [F (2,25) = 1.29; p = 0.29], čas in starost [F (12,150) = 0.66; p = 0.78] in trend k interakciji med časom, starostjo in zdravljenjem [F (12,150) = 1.60; p = 0.098].

Prostovoljni vnos alkohola med mladostniki

Podatki o vnosu etanola za podgane 14, ki so bili uporabljeni v kronoamperometričnih zapisih, so prikazani v Tabela 1. Friedmanova ANOVA ni pokazala bistvenih razlik v vnosu skozi čas, čeprav je bil trend [χ2 = 9.80; p = 0.08] glede na razlike, ki jih je povzročil vnos v drugem tednu (PND 35 – 37), ki je bil nekoliko višji kot v naslednjih tednih. Friedmanova ANOVA preferenc je sčasoma naraščala [χ2 = 19.7; p = 0.001], predvsem zaradi povečanj v prvih treh tednih, glej Tabela 1.

thumbnail

Tabela 1. Mediana, najmanjši in najvišji vnos alkohola (g / kg / 24 h) in preferenca (%) za šest tednov dostopa do alkohola in mediana, minimalni in maksimalni kumulativni vnos (g) po sejah 18.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.t001

Razlike v referenčnih amplitudah med skupinami za pitje etanola in vode so prikazane v Slika 5. Ponavljajoči se ukrepi ANOVA v primerjavi s skupino in časom pitja so pokazali glavni učinek skupine za pitje [F (1,17) = 16.22; p <0.001], vendar brez učinka časa [F (2,34) = 1.76; p = 0.19] ali kakršen koli učinek interakcije med časom in skupino pitja [F (4,44) = 1.32; p = 0.28].

thumbnail

Slika 5. Referenčne amplitude vrhov pri živalih, ki pijejo vodo ali etanol.

Amplitude (µM) (povprečje ± SEM) treh referenčnih vrhov pred obdelavo z amfetaminom ali slanico v skupinah, ki pijejo vodo in etanol. ** p <0.01, *** p <0.001.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g005

Ni učinkov alkoholne skupine [F (1,18) = 0.04; p = 0.85], čas [F (2,36) = 1.96; p = 0.16] ali časovna in pitna skupina [F (2,36) = 0.22; p = 0.81] so bile najdene za referenčne vrednosti T80. Povprečne ± SEM referenčne vrednosti T80 so bile 20.5 ± 1.0 za podgane za pitje vode in 19.1 ± 1.3 za podgane za pitje etanola.

Odziv na amfetamine v skupinah za pitje etanola in vode je prikazan v Slika 6. Za amplitude, kot je prikazano v Slika 6Aje prišlo do trenda učinka zdravljenja [F (1,19) = 3.01; p = 0.099] in je bil glavni učinek časa [F (6,114) = 2.30; p = 0.04], vendar noben učinek skupine za pitje [F (1,19) = 0.39; p = 0.54] ali kakršni koli interakcijski učinki med skupino za zdravljenje in skupino za pitje [F (1,19) = 0.83; p = 0.37] ali čas in obdelava [F (6,114) = 1.13; p = 0.35], časovna in pitna skupina [F (6,114) = 0.44; p = 0.85] ali čas, obdelava in skupina za pitje [F (6,114) = 0.27; p = 0.95].

thumbnail

Slika 6. Amplitude in odzivi T80 sčasoma pri živalih, ki pijejo vodo ali etanol.

Odzivi skozi čas po subkutanih (sc) injekcijah fiziološke raztopine ali amfetamina v odstotkih referenčnih vrednosti (povprečje ± SEM) za amplitude A) in vrednosti T80 v skupinah, ki pijejo vodo (W) - ali etanolu (E) . * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001 v primerjavi s fiziološko raztopino.

doi: 10.1371 / journal.pone.0096337.g006

Za vrednosti T80, Slika 6B, je bil glavni učinek zdravljenja [F (1,19) = 17.35; p <0.001] in čas [F (6,114) = 2.42; p = 0.03] in učinek interakcije med časom in zdravljenjem [F (6,114) = 10.28; p <0.001]. Učinek pitja skupine ni bil [F (1,19) = 0.33; p = 0.57] ali kakršen koli učinek interakcije med skupino, ki pije in pije [F (1,19) = 0.76; p = 0.40], čas in skupina pitja [F (6,114) = 1.66; p = 0.14] ali skupina za čas zdravljenja in pitja [F (6,114) = 1.75; p = 0.12].

Razprava

Starostno odvisni učinki na sproščanje in privzem dopamina so raziskovali pri osnovnih pogojih in kot odziv na amfetamine v zgodnjih in poznih mladostnikih, pa tudi pri odraslih podganah. Preučen je bil tudi vpliv alkohola med adolescenco in je po naših podatkih prva raziskava o sproščanju in vnosu v prostovoljne mladice podgane s kronoamperometrično tehniko.

Učinki, odvisni od starosti

Razlike v referenčnih amplitudah, odvisne od starosti, so v skladu s predhodno študijo, ki je uporabila voltametrijo v kombinaciji z električno stimulacijo, ki je pokazala, da so odrasli podgani sproščali več dopamina po stimulaciji kot mladi podganji. [12]. Časovna točka za adolescenco, ki jo je uporabil Stamford (1989), je bila približno PND 30, vendar so od takrat študije pokazale, da so okoli PND 40 – 45 vrhovi pri bazalnih zunajceličnih nivojih dopamina. [25]-[27] in dopamin receptor D2 Gostota [28], medtem ko so ravni tirozin hidroksilaze nižje kot v zgodnji adolescenci in odrasli dobi [29]. Sedanja študija je zato vključevala dve časovni točki med adolescenco, PND 28 in PND 42, enakovredno zgodnji in pozni adolescenci. [11]. Amplitude v poznih adolescentnih živalih so bile v zgodnjem adolescenci in odraslosti vmesne do amplitude, kar kaže, da je razvoj od adolescence do odraslosti vključeval postopno povečanje zmogljivosti dopamina kot odziva na kalijev klorid v hrbtnem striatumu. To je skladno s poročili o povečanih zunajceličnih nivojih dopamina v nucleus accumbens v odrasli dobi v primerjavi z adolescenco. [30], [31]. Kot smo že omenili, nekatere študije kažejo tudi najvišje ravni pri PND 45 [25]-[27] in jih je mogoče uskladiti s sedanjo študijo s poročili o povečanih stopnjah streljanja okrog iste PND [32], [33]. Trenutna študija ni izmerila bazalnih zunajceličnih ravni in možno je, da povečana hitrost žganja povzroči zvišanje bazalnih ravni brez kakršnega koli vrha v sproščanju s kalijem. Poleg tega je bila ena od študij, ki kažejo, da so izvencelične ravni kalija inducirane v jedru accumbens do vrha okoli PND 42. [25] nasprotuje podatkom iz hrbtnega striatuma iz Stamforda (1989) in trenutne študije, ki kažejo regionalne razlike.

Merilo prevzema, T80, ni razkrilo nobenih razlik med starostmi v trenutni študiji, medtem ko je Stamford (1989) ugotovil, da je bila stopnja prevzema višja pri odraslih podganah. To je lahko posledica metodoloških razlik v merilu za prevzem; T80 vključuje tako linearni kot krivocasni del krivulje, medtem ko je Stamford uporabljal linearni del krivulje. [34]. Koncentracije, dosežene v tej študiji, so le desetina koncentracij v prejšnji študiji in Vmax zato ni treba doseči. Uporaba linearnega dela maksimalne krivulje za izračun stopnje absorpcije v teh pogojih bo povzročila le stopnje privzema, ki so odvisne od amplitud. [35]. T80 je bil izbran zato, ker upošteva tudi krivuljni del krivulje, kjer so koncentracije dopamina nižje in bolj občutljive na blokatorje privzema dopamina. [35], [36]. Seveda je T80 odvisen tudi od amplitude, vendar, kot je razvidno iz te študije, razlike v amplitudi ne povzročijo samodejno razlik v T80, kar kaže, da se razmerje med absorpcijo in sproščanjem premakne v smeri privzema pri mlajših živalih. Podpora trenutnim ugotovitvam je študija, ki je uporabila kvantitativno mikrodializo in ni ugotovila razlik v frakciji ekstrakcije, posrednem merilu stopnje absorpcije, v nucleus accumbens podgan pri PND 35, 45 in 60 [26].

Večje sproščanje kalija v odrasli dobi bi lahko bilo posledica večjega dopaminskega bazena [12] Vključeni so lahko številni dejavniki, kot so starostno odvisne razlike v sintezi dopamina s tirozinsko hidroksilazo [29], [37], vesicularni monoaminski transporter-2 (VMAT-2), ki vsebuje vezikle [38]in kinetika VMAT-2 [39]kot tudi obrezovanje D2 receptorjev [28] in funkcijo [40]. Ti dejavniki lahko pomagajo pojasniti tudi povečane amplitude, ki so jih opazili po amfetaminu pri zgodnjih mladostnikih. Tudi trenutni podatki so skladni s podatki, ki kažejo večje povečanje sproščanja dopamina pri mladih v primerjavi z odraslimi živalmi kot odgovor na nomifensin [12] kažejo, da imajo mladi podganah podgane sorazmerno večji skladiščni bazen, ki se lahko sprosti ob stimulaciji s psihoaktivnimi snovmi. To potrjujejo tudi podatki, ki kažejo večje povečanje stimuliranega zunajceličnega dopamina po amfetaminu pri mladostnikih [22]. Vendar pa obstajajo mikrodializne študije, ki kažejo nižjo raven zunajcelične dopamina po amfetaminu pri mladostnikih v primerjavi z odraslimi. [30], [37], ki ponovno poudarjajo, da možnost povečanja stimuliranega sproščanja ne pomeni nujno povečanja zunajceličnih ravni in da lahko različne tehnike dodajajo dopolnilne informacije.

Po amfetaminu niso ugotovili starostno odvisnih učinkov na zdravilo T80, kar kaže, da amfetamin vpliva na absorpcijo dopamina v vseh starostnih obdobjih. To potrjujejo tudi rezultati Stamforda (1989), ki ne kažejo razlik v stopnji blokade privzema po nomifensinu med starostnimi skupinami. Obstajajo tudi študije, ki kažejo, da so starostne razlike v strukturi in funkciji prenosnika dopamina povezane z mestom za vezavo kokaina na transporterju, ne pa na mestu, ki veže amfetamin. [22] kar lahko kaže, da starostno odvisni učinki amfetamina na absorpcijo ne obstajajo. Vendar je prišlo do trenda interakcije med časom, starostjo in zdravljenjem, kar kaže na to, da so se sčasoma različno odzivali na amfetamin, odvisno od starosti. Nadaljnje študije, ki preučujejo prevzem z uporabo eksogenega dopamina, bi lahko prav tako pomagale ločiti absorpcijo, odvisno od amplitude, iz funkcije transporterja. [41]-[43]. Pomembne bi bile tudi študije na budnih podganah, saj je bila trenutna študija izvedena pri anesteziranih živalih. Uporabljena anestezija je bil barbiturat tiobutabarbital (Inactin), pozitivni alosterični modulator receptorjev gama-aminobutirne kisline (GABA) A, ki povzroča podaljšano in stabilno anestezijo pri podganah. [44]. GABA ima lahko različne učinke glede na starost in zgodovino uživanja alkohola [45] in zato lahko anestezija vpliva na starost ali zdravljenje in povzroči zmedo. Vendar pa je bilo dokazano, da ima pentobarbital, drug barbiturat, majhen učinek na raven dopamina v striatumu. [46]. Poleg tega je bilo v trenutni študiji sproščanje sproženo z uporabo kalijevega klorida in se ni zanašalo na spontane dogodke, kar bi zmanjšalo pomen GABAergičnega tona pri sproščanju. Kar zadeva privzem dopamina, obstajajo poročila, da lahko barbiturati vplivajo na privzemanje dopamina posebej [47]vendar ni jasno, ali bi lahko obstajala tudi interakcija s starostjo ali zdravljenjem.

Prostovoljni vnos alkohola med mladostniki

Prostovoljni vnos alkohola med mladostniki za šest tednov je povzročil nižje referenčne amplitude v primerjavi z nadzorom pitja vode. Amplitude so bile podobne tistim, ki so jih opazili pri mladih podganah. Ker so bili učinki opaženi pri amplitudah in ne v času privzema, je mogoče zamisliti, da alkohol vpliva na dejavnike, ki nadzorujejo sproščanje dopamina in ne na transporterja dopamina, in da obstajajo podatki, ki podpirajo nespremenjen vnos po adolescentnem alkoholu. [14]. Obstajajo tudi podatki o mikrodializi, ki kažejo povečano zunajcelično raven dopamina po izpostavljenosti mladostnika intraperitonealni injekciji alkohola. [14], [27], [48]in to je nekoliko protislovno s sedanjimi ugotovitvami zmanjšanega sproščenega dopamina. Kot smo že omenili, so lahko povečane stopnje sprožitve način usklajevanja podatkov o mikrodializi s trenutnimi podatki, vendar ni raziskav, ki bi to podprle. Poleg tega obstajajo študije, ki kažejo, da ima lahko način izpostavljenosti alkoholu, tj. Prostovoljno ali prisilno, različne učinke na nevrobiologijo [49].

Pri zdravljenju z amfetamini ni bilo bistvenih razlik med skupinami alkohola in vode v amplitudah ali T80. Vendar pa je bil trend povečanja amplitude posledica povečanja, ki ga je pokazala skupina za pitje alkohola. Obstaja tudi večja odstopanja v odzivu na amfetamin v skupini, ki pije alkohol, kar je lahko posledica spremembe v vnosu alkohola, čeprav ta razlika ni povezana z odgovorom (podatki niso prikazani). To kaže tudi na omejitev pri tej študiji, in sicer, da ravni alkohola v krvi niso bile izmerjene. Študija je temeljila na nemotenem dostopu za 24 h in da bi bilo treba omejiti koncentracijo alkohola v krvi, ki bi jo bilo treba omejiti, stres pri vzorčenju krvi pa bi lahko ogrozil vzorce vnosa živali. Zato ni mogoče izključiti korelacij med odzivom in posameznimi koncentracijami alkohola v krvi. Vendar pa so podatki o vnosu, predstavljeni v tej študiji, podobni drugim študijam, ki kažejo nevrobiološke učinke alkohola, pri katerih so podgane Wistar v podobnih starostnih ali vnosnih paradigmah[50]-[52]. To nakazuje, da ne le posamezniki, ki so nagnjeni k visokemu vnosu, temveč tudi skromni pivci iz preseka splošne populacije, tvegajo spremembe v nevrobiologiji po prostovoljnem uživanju alkohola pri mladostnikih.

Razlike v času absorpcije amfetamina ne kažejo na to, da mladostni alkohol nima učinka na funkcijo prenosnika dopamina kot odziv na amfetamin, vendar bi imel tudi korist od preiskave z uporabo eksogenega dopamina. [41]-[43].

Poleg tega sta bili podani dve zanimivi ugotovitvi. Prvič, referenčne amplitude po vnosu alkohola so podobne tistim pri živalih na začetku uživanja alkohola, tj. PND 28. Drugič, velikost povečanja amplitud po amfetaminu pri živalih, ki pijejo alkohol, je podobna kot pri podganah v poznem obdobju, to je PND 42. Ali se te ugotovitve nanašajo na spremenjeni razvoj sproščljivega bazena in skladiščenje dopamina v nevronih, je treba še pojasniti. Sedanja študija ni vključevala skupine odraslih podgan za pitje alkohola, zato ni mogoče sprejeti sklepov o možnosti, da se učinki, značilni za starost, pojavijo. Vendar pa so indikacije za starostno specifične učinke mogoče najti v neskladju med študijami pri podganah, ki so bile izpostavljene alkoholu, ki kažejo nespremenjen sprejem dopamina. [14] in študije odraslih podgan, ki so bile izpostavljene alkoholu in opicam, ki kažejo povečano absorpcijo, vendar ne \ t [53], [54]. Za prihodnje študije bi bilo zato zelo zanimivo raziskati izpostavljenost alkoholu in mehanizme za njegov učinek v različnih starostnih obdobjih. Nadaljnje raziskave dejavnikov, kot so tirozinska hidroksilaza, gostota in funkcija dopaminskih receptorjev ter vezikularni monoaminski transporter, bi lahko pomagale osvetliti morebitne starostno specifične učinke alkohola na sprostljivi bazen in skladišče dopamina. Po naših podatkih ti dejavniki niso raziskani po adolescentnem alkoholu.

zaključek

Podatki kažejo postopno povečanje prekomernega pretoka dopamina s starostjo, kar potrjuje predhodne študije, ki kažejo, da se bazen z dopaminom povečuje s starostjo. V nasprotju s tem pa se je kot odziv na amfetamin opazilo postopno zmanjšanje evociranega prelivanja s starostjo, kar je podprlo sorazmerno večje skladiščenje dopamina pri mlajših živalih, zaradi česar so potencialno bolj občutljivi na zdravila, ki sproščajo dopamin. Vnos alkohola med mladostniki je povzročil prelivanje nižje kot pri kontrolah pri pitju vode, kar kaže, da alkohol vpliva na sproščujoč dopaminski bazen in to lahko vpliva na ranljivost za zasvojenost in druge psihiatrične diagnoze, ki vključujejo sistem dopamina v hrbtnem striatumu.

Priznanja

Avtorici se želita zahvaliti gospe Mariti Berg za tehnično pomoč in dr. Martinu Lundbladu za metodološke razprave.

Prispevki avtorjev

Zasnovali in oblikovali eksperimente: SP IN. Izvedeni poskusi: SP. Analizirani podatki: SP IN. Napisal je papir: SP.

Reference

Reference

  1. 1. Arnett J (1992) Nepremišljeno vedenje v mladosti - razvojna perspektiva. Razvojni pregled 12: 339–373.
    doi: 10.1016/0273-2297(92)90013-r  

  2. 2. Yamaguchi
    K, Kandel DB (1984) Vzorci uporabe drog od adolescence do mladih
    odraslost: II. Zaporedja napredovanja. Am J Javno zdravje 74: 668 – 672.
    doi: 10.2105 / ajph.74.7.668  

  3. 3. Degenhardt
    L, Chiu WT, Conway K, Dierker L, Glantz M, et al. (2009) Ali je
    "prehod"? Povezave med vrstnim redom začetka uporabe drog
    in razvoj odvisnosti od drog v Nacionalni študiji komorbidnosti
    Replikacija. Psihol Med 39: 157 – 167.
    doi: 10.1017 / s0033291708003425  

  4. 4. Anthony JC, Petronis KR (1995) Zgodnja uporaba drog in tveganje kasnejših težav z drogami. Z alkoholom odvisni od drog 40: 9 – 15.
    doi: 10.1016/0376-8716(95)01194-3  

  5. 5. Grant
    BF, Dawson DA (1997) Starost ob začetku uživanja alkohola in njegova povezanost
    z zlorabo alkohola in odvisnostjo od DSM-IV: rezultati nacionalnega
    Longitudinalna alkoholna epidemiološka raziskava. J Zlonamerna zloraba 9: 103 – 110.
    doi: 10.1016/s0899-3289(97)90009-2  

  6. 6. DeWit
    DJ, Adlaf EM, Offord DR, Ogborne AC (2000) Starost pri prvi uporabi alkohola: a
    dejavnik tveganja za razvoj alkoholnih motenj. Am J Psychiatry
    157: 745-750.
    doi: 10.1176 / appi.ajp.157.5.745  

  7. 7. Posadke
    F, He J, Hodge C (2007) Mladostni kortikalni razvoj: kritičen
    obdobje ranljivosti za zasvojenost. Pharmacol Biochem Behav 86:
    189-199.
    doi: 10.1016 / j.pbb.2006.12.001  

  8. 8. Di
    Chiara G, Imperato A (1988) Droge, ki jih ljudje zlorabljajo
    povečanje koncentracij sinaptičnih dopamina v mezolimbičnem sistemu. \ t
    prosto gibljive podgane. Proc Natl Acad Sci ZDA 85: 5274 – 5278.
    doi: 10.1073 / pnas.85.14.5274  

  9. 9. Koob GF, Volkow ND (2010) Nevroskopi odvisnosti. Nevropsihofarmakologija 35: 217 – 238.
    doi: 10.1038 / npp.2009.110  

  10. 10. Everitt
    BJ, Robbins TW (2013) Od ventralne do hrbtnega striatuma:
    Razvijanje pogledov na njihovo vlogo pri zasvojenosti z drogami. Neurosci Biobehav Rev.
  11. 11. Kopje LP (2000) Adolescentne možganske in starostno povezane vedenjske manifestacije. Neurosci Biobehav Rev 24: 417 – 463.
    doi: 10.1016/s0149-7634(00)00014-2  

  12. 12. Stamford
    JA (1989) Razvoj in staranje podgana nigrostriatalnega dopamina
    preučevali s hitro ciklično voltametrijo. J Neurochem 52: 1582 – 1589.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.1989.tb09212.x  

  13. 13. Marco
    EM, Adriani W, Ruocco LA, Canese R, Sadile AG, et al. (2011)
    Nevrobno-vedenjske prilagoditve metilfenidata: vprašanje zgodnjih
    izpostavljenosti mladostnika. Neurosci Biobehav Rev 35: 1722 – 1739.
    doi: 10.1016 / j.neubiorev.2011.02.011  

  14. 14. Badanich
    KA, Maldonado AM, Kirstein CL (2007) Kronična izpostavljenost etanolu med
    adolescenca povečuje bazalni dopamin v nucleus accumbens septi
    v odrasli dobi. Alkohol Clin Exp Res 31: 895 – 900.
    doi: 10.1111 / j.1530-0277.2007.00370.x  

  15. 15. Sahr
    AE, Thielen RJ, Lumeng L, Li TK, McBride WJ (2004) dolgotrajen
    spremembe mezolimbičnega dopaminskega sistema po periadolescentu
    alkohola, ki ga pijejo podgane, ki dajejo prednost alkoholu. Alkohol Clin Exp Res 28:
    702-711.
    doi: 10.1097 / 01.alc.0000125344.79677.1c  

  16. 16. Littrell
    OM, Pomerleau F, Huettl P, Surgener S, McGinty JF, et al .. (2012)
    Okrepljena aktivnost dopaminskega transporterja pri Gdnf heterozigotnih srednjih letih
    miši. Nevrobiolno staranje 33: 427 e421 – 414.
  17. 17. Gerhardt
    GA, Hoffman AF (2001) Učinki sestave snemalnega medija na
    odzivi mikroelektrod, prevlečenih z Nafionom iz ogljikovih vlaken
    hitro kronoamperometrijo. J Neurosci metode 109: 13 – 21.
    doi: 10.1016/s0165-0270(01)00396-x  

  18. 18. Lundblad
    M, af Bjerken S, Cenci MA, Pomerleau F, Gerhardt GA, et al. (2009)
    Zdravljenje s kronično prekinitvijo L-DOPA povzroči spremembe v dopaminu
    sprostitev. J Neurochem 108: 998 – 1008.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05848.x  

  19. 19. Paxinos G, Watson C (2007) Možgani podgan v stereotaksičnih koordinatah. New York: Academic Press.
  20. 20. Sherwood
    NM, Timiras PS (1970) Stereotaksični atlas možganov podgan v razvoju.
    Berkeley, University of California Press. 209 str. (str. 214 – 203 illus.) str.
  21. 21. Friedemann
    MN, Gerhardt GA (1992) Regionalni učinki staranja na dopaminergik
    v Fischer-344 podgani. Nevrobiolno staranje 13: 325 – 332.
    doi: 10.1016/0197-4580(92)90046-z  

  22. 22. Walker
    QD, Morris SE, Arrant AE, Nagel JM, Parylak S, et al. (2010) Dopamin
    zaviralci privzema, vendar ne dopaminski sproščalci, povzročajo večje povečanje
    motoričnega obnašanja in zunajceličnega dopamina pri mladostnikih podgane kot v \ t
    odraslih samcih podgan. J Pharmacol Exp Ther 335: 124 – 132.
    doi: 10.1124 / jpet.110.167320  

  23. 23. kljuke
    MS, Jones GH, Neill DB, pravosodje JB Jr (1992) Individualne razlike v
    preobčutljivost na amfetamin: odvisni od odmerka. Pharmacol Biochem
    Behav 41: 203 – 210.
    doi: 10.1016/0091-3057(92)90083-r  

  24. 24. Dellu
    F, Piazza PV, Mayo W, Le Moal M, Simon H (1996)
    podgane - biobehavioralne značilnosti in možna povezava z. \ t
    občutek, ki išče občutek v človeku. Nevropsihobiologija 34: 136 – 145.
    doi: 10.1159 / 000119305  

  25. 25. Nakano
    M, Mizuno T (1996) Starostne spremembe v metabolizmu
    nevrotransmiterji v striatumu podgane: študija mikrodialize. Mech Aging
    Dev 86: 95 – 104.
    doi: 10.1016/0047-6374(95)01680-5  

  26. 26. Badanich
    KA, Adler KJ, Kirstein CL (2006) Mladostniki se od odraslih razlikujejo
    kokaina, pogojene s preferencami mesta in dopamina v kokainu
    nucleus accumbens septi. Eur J Pharmacol 550: 95-106.
    doi: 10.1016 / j.ejphar.2006.08.034  

  27. 27. Philpot
    RM, Wecker L, Kirstein CL (2009) Ponavljajoča izpostavljenost etanolu med
    adolescenca spremeni razvojno pot dopaminergičnih učinkov
    iz nucleus accumbens septi. Int J Dev Neurosci 27: 805 – 815.
    doi: 10.1016 / j.ijdevneu.2009.08.009  

  28. 28. Teicher
    MH, Andersen SL, Hostetter JC Jr (1995) Dokazi za dopaminski receptor
    obrezovanje med adolescenco in odraslostjo v striatumu, ne pa v jedru
    accumbens. Brain Res Dev Brain Res 89: 167 – 172.
    doi: 10.1016/0165-3806(95)00109-q  

  29. 29. Mathews
    IZ, Waters P, McCormick CM (2009) Spremembe v hiporespektivnosti na
    akutnih amfetamina in starostne razlike v tirozin hidroksilazi
    imunoreaktivnosti v možganih pred adolescenco pri samcih in samicah podgan.
    Dev Psychobiol 51: 417 – 428.
    doi: 10.1002 / dev.20381  

  30. 30. Laviola
    G, Pascucci T, Pieretti S (2001) Striatalna dopaminska senzibilizacija na
    D-amfetamin v periadolescentu, vendar ne pri odraslih podganah. Pharmacol Biochem
    Behav 68: 115 – 124.
    doi: 10.1016/s0091-3057(00)00430-5  

  31. 31. Gazzara
    RA, Andersen SL (1994) Ontogene spremembe, povzročene z apomorfinom
    sproščanja neostriatalnega dopamina: učinki na sproščanje, ki ga povzroča kalij.
    Neurochem Res 19: 339 – 345.
    doi: 10.1007 / bf00971583  

  32. 32. McCutcheon JE, Marinelli M (2009) Starost je pomembna. Eur J Neurosci 29: 997 – 1014.
    doi: 10.1111 / j.1460-9568.2009.06648.x  

  33. 33. Wong
    WC, Ford KA, Pagels NE, McCutcheon JE, Marinelli M (2013) Mladostniki
    so bolj izpostavljeni odvisnosti od kokaina: vedenjski in
    elektrofiziološki dokazi. J Neurosci 33: 4913 – 4922.
    doi: 10.1523 / jneurosci.1371-12.2013  

  34. 34. Stamford
    JA, Kruk ZL, Millar J, Wightman RM (1984) Striatalni vnos dopamina v
    podgana: in vivo analiza s hitro ciklično voltametrijo. Neurosci Lett 51:
    133-138.
    doi: 10.1016/0304-3940(84)90274-x  

  35. 35. Wightman
    RM, Zimmerman JB (1990) Nadzorovanje zunajcelične koncentracije dopamina
    v striatumu podgan s pretokom impulzov in prevzemom. Brain Res Brain Res Rev XNUM:
    135-144.
    doi: 10.1016/0165-0173(90)90015-g  

  36. 36. Zahniser
    NR, Dickinson SD, Gerhardt GA (1998) Hitro kronoamperometrično
    elektrokemijske meritve očistka dopamina. Metode Enzymol 296:
    708-719.
    doi: 10.1016/s0076-6879(98)96050-5  

  37. 37. Matthews
    M, Bondi C, Torres G, Moghaddam B (2013) Zmanjšana presinaptična dopamin
    aktivnost v adolescentnem hrbtnem striatumu. Nevropsihofarmakologija 38:
    1344-1351.
    doi: 10.1038 / npp.2013.32  

  38. 38. Truong
    JG, Wilkins DG, Baudys J, Crouch DJ, Johnson-Davis KL, et al. (2005)
    Starostno odvisne spremembe metamfetamina v vezikularnem monoaminu
    funkcija transporter-2: posledice za nevrotoksičnost. J Pharmacol Exp
    314: 1087 – 1092.
    doi: 10.1124 / jpet.105.085951  

  39. 39. Volz
    TJ, Farnsworth SJ, Rowley SD, Hanson GR, Fleckenstein AE (2009)
    Starostno odvisne razlike v transporterju dopamina in vezikularnem
    funkcija monoaminskega transporterja-2 in njihove posledice za
    nevrotoksičnost metamfetamina. Synapse 63: 147 – 151.
    doi: 10.1002 / syn.20580  

  40. 40. Benoit-Marand
    M, O'Donnell P (2008) D2 dopaminska modulacija corticoaccumbens
    sinaptični odzivi se spreminjajo v adolescenci. Eur J Neurosci 27:
    1364-1372.
    doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06107.x  

  41. 41. Cass
    WA, Gerhardt GA (1995) Ocena in vivo privzema dopamina pri podganah
    medialni prefrontalni korteks: primerjava z dorzalnim striatumom in jedrom
    accumbens. J Neurochem 65: 201 – 207.
    doi: 10.1046 / j.1471-4159.1995.65010201.x  

  42. 42. Cass
    WA, Zahniser NR, Flach KA, Gerhardt GA (1993)
    dopamin v dorsal striatum in nucleus accumbens: vloga. \ t
    presnove in učinkov lokalno uporabljenih zaviralcev absorpcije. J Neurochem
    61: 2269-2278.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.1993.tb07469.x  

  43. 43. Miller
    EM, Pomerleau F, Huettl P, Russell VA, Gerhardt GA, et al. (2012)
    spontano hipertenzivni in Wistar Kjotski podganji modeli ADHD
    subregionalne razlike v sproščanju in absorpciji dopamina v striatumu
    in nucleus accumbens. Nevrofarmakologija 63: 1327 – 1334.
    doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.08.020  

  44. 44. Ribe RE (2008) Anestezija in analgezija pri laboratorijskih živalih. San Diego: Akademski tisk.
  45. 45. Silveri
    MM (2014) Prispevki GABA k odzivnosti alkohola med
    adolescenca: vpogled v predklinične in klinične študije. Pharmacol
    Ther.
  46. 46. Semba
    K, Adachi N, Arai T (2005) Pospeševanje serotoninergičnih aktivnosti in
    amneziji pri podganah, ki so jo povzročili intravenski anestetiki. Anesteziologija 102:
    616-623.
    doi: 10.1097 / 00000542-200503000-00021  

  47. 47. Keita
    H, Lecharny JB, Henzel D, Desmonts JM, Mantz J (1996) Je zaviranje
    dopamin, ki je pomemben za hipnotično delovanje iv anestetika? Br
    J Anaesth 77: 254 – 256.
    doi: 10.1093 / bja / 77.2.254  

  48. 48. Pascual
    M, Boix J, Felipo V, Guerri C (2009) Ponovna uporaba alkohola
    v adolescenci povzroči spremembe v mezolimbični dopaminergiki in
    glutamatergičnih sistemov in spodbuja uživanje alkohola pri odrasli podganah. J
    Nevrokem 108: 920 – 931.
    doi: 10.1111 / j.1471-4159.2008.05835.x  

  49. 49. Spanagel R (2003) Raziskava o odvisnosti od alkohola: od živalskih modelov do klinik. Best Pract Res Clin Gastroenterol 17: 507 – 518.
    doi: 10.1016/s1521-6918(03)00031-3  

  50. 50. Adermark
    L, Jonsson S, Ericson M, Soderpalm B (2011)
    uživanje zmanjša endokanabinoidno signalizacijo v dorzolateralu
    striatum podgan. Nevrofarmakologija 61: 1160 – 1165.
    doi: 10.1016 / j.neuropharm.2011.01.014  

  51. 51. García-Burgos
    D, González F, Manrique T, Gallo M (2009) Vzorci vnosa etanola v
    predadolescentne, mladostniške in odrasle podgane Wistar,
    vzdrževanja in podobnih pogojev. Alkoholizem: Klinično in
    Eksperimentalno raziskovanje 33: 722 – 728.
    doi: 10.1111 / j.1530-0277.2008.00889.x  

  52. 52. Steensland
    P, Fredriksson I, Holst S, Feltmann K, Franck J, et al. (2012)
    monoaminski stabilizator (-) - OSU6162 oslabi prostovoljni vnos etanola in
    proizvodnja dopamina, povzročena z etanolom, v nucleus accumbens. Biol Psychiatry
    72: 823-831.
    doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.06.018  

  53. 53. Budygin
    EA, John CE, Mateo Y, Daunais JB, Friedman DP, et al. (2003) Kronična
    izpostavljenost etanolu spremeni presinaptično funkcijo dopamina v striatumu
    opice: predhodna študija. Synapse 50: 266 – 268.
    doi: 10.1002 / syn.10269  

  54. 54. Budygin
    EA, Oleson EB, Mathews TA, Lack AK, Diaz MR, et al. (2007) Učinki
    kronično izpostavljenost alkoholu pri vnosu dopamina v nukleus podgane podgane in
    caudate putamen. Psihofarmakologija (Berl) 193: 495 – 501.
    doi: 10.1007/s00213-007-0812-1