Prekomerna ekspresija DeltaFosB v jedrnih obtožbah povečuje spolno nagrajevanje ženskih sirskih hrčkov (2009)

PRIPOMBE: ΔFosB je kemikalija, ki je potrebna, da se pojavijo odvisnosti. Tako odvisnost od drog kot tudi vedenjske odvisnosti korelirajo z akumulacijo Delta FosB. Blok Delta FosB in odvisnost preneha. Tukaj je prikazano, da spolna izkušnja povečuje Delta FosB in vodi v senzibilizacijo nagrajevalnega centra. Preobčutljivost povzroči večje sproščanje dopamina, zaradi česar je aktivnost ali zdravilo bolj privlačno. V bistvu je seks odvisnost. Ta študija je tudi genetsko povečala Delta FosB, kar je povečalo koristne vidike spola nad normalno ravnjo in nad njo. Ali lahko uporaba internetne pornografije povzroči porast Delta FosB nad normalno ravnjo? Ali bi to vodilo v odvisnost in ponovno ožičenje živčnih poti? Zdi se razumno.

POPOLNA ŠTUDIJA: ΔFosB Prekomerna ekspresija v nuklearnih obtožnicah povečuje spolno nagrajevanje pri ženskih sirijskih hrčkih

Geni Brain Behav. 2009 junij; 8 (4): 442 – 449. doi: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.

Varovalo, 1 S. Chakravarty, 2 EJ Nestler, 2 in RL Meisel1

Minimalizem

Ponavljajoča aktivacija mezolimbičnega dopaminskega sistema povzroči trajne vedenjske spremembe, ki jih spremlja vzorec neuralne plastičnosti v nucleus accumbens (NAc). Ker je kopičenje transkripcijskega faktorja ΔFosB lahko pomemben sestavni del te plastičnosti, je vprašanje, ki ga obravnavamo v naši raziskavi, to, ali ΔFosB regulira spolna izkušnja pri ženskah. Pokazali smo, da ženski sirski hrčki, ki imajo spolno izkušnjo, kažejo več vedenjskih sprememb, vključno s povečano spolno učinkovitostjo pri naivnih hrčkih, spolnem nagrajevanju in večji odzivnosti na psihomotorične stimulanse (npr. Amfetamin).

Pred kratkim smo pokazali, da so spolne izkušnje povečale ravni ΔFosB v NAc ženskih sirijskih hrčkov. Poudarek te študije je bil raziskati funkcionalne posledice te indukcije z določitvijo, ali je konstitutivna čezmerna ekspresija ΔFosB z adeno-povezanimi virusnimi (AAV) vektorji v NAc lahko posnemajo vedenjske učinke spolne izkušnje.

Živali s prekomerno ekspresijo ΔFosB, ki jo je povzročila AAV, so pokazale spolno nagrajevanje pri pogojeni preferencialni preferencialni izbiri. paradigma pod pogoji, v katerih kontrolne živali, ki so prejemale injekcijo AAV-zelenega fluorescentnega proteina (GFP) v NAc, niso. Tudi testi spolnega obnašanja so pokazali, da so moški, seznanjeni z ženskami AAV-ΔFosB, imeli povečano kopulacijsko učinkovitost, merjeno z deležem vzponov, ki so vključevali intromisijo, v primerjavi s samci, parjenimi s samicami AAV-GFP. Ti rezultati podpirajo vlogo ΔFosB pri posredovanju naravnega motiviranega vedenja, v tem primeru spolnega vedenja žensk, in zagotavljajo nov vpogled v možno endogeno delovanje ΔFosB.

Pojdi na:

Predstavitev

Izkušnje z zlorabami drog, motiviranim vedenjem, obnašanjem pri vožnji koles ali instrumentalnim učenjem povzročijo aktivacijo mezolimbičnega dopaminskega sistema in trajne spremembe v jedru nucleus accumbens (NAc) (Becker et al., 2001, Di Chiara et al., 1998, Harris et al., 2007, Kumar et al., 2005, Meisel in Mullins, 2006, Nestler, 2008, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Pierce in Kumaresan, 2006, Wolf et al., 2004). Strukturne spremembe, zlasti nastajanje dendritičnih bodic, so pomembna sestavina plastičnosti, ki temelji na izkušnjah (Allen et al., 2006, Lee et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel in Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson & Kolb, 2004), ki ostane dolgo po prenehanju vedenjskih izkušenj ali uporabe drog (McClung & Nestler, 2008, Meisel in Mullins, 2006, Wolf et al., 2004).

Transkripcijski faktor ΔFosB ima molekularne lastnosti, zaradi katerih je dober kandidat za posredovanje trajnih strukturnih in vedenjskih sprememb, ki izhajajo iz vedenjskih ali zdravilnih izkušenj (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Colby et al., 2003, Doucet et al., 1996, Upam, da et al., 1994, Kelz et al., 1999, McClung & Nestler, 2003, McClung et al., 2004, McDaid et al., 2006, Nakabeppu & Nathans, 1991, Nestler, 2008, Nye et al., 1995, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Wallace et al., 2008, Werme et al., 2002, Zachariou et al., 2006). ΔFosB je alternativni produkt spajanja iz zgodnjega zgodnjega gena fosB (Mumberg et al., 1991, Nakabeppu & Nathans, 1991) in, za razliko od polne dolžine FosB proteina, ima okrnjena ΔFosB nenavadno stabilnost, ki povzroči kopičenje beljakovin po večkratni stimulaciji (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Upam, da et al., 1994, Kelz et al., 1999, Perrotti et al., 2008, Zachariou et al., 2006). Čeprav mehanizem, s katerim fosB gen je alternativno spojen ostaja neznan, obrezovanje proteina skupaj s fosforilacijo ščiti beljakovine pred hitro proteazomsko razgradnjo, kar povzroči večjo stopnjo transkripcijske aktivnosti v primerjavi z bolj prehodno živečimi člani družine FosB (Carle et al., 2007, Ulery & Nestler, 2007, Ulery et al., 2006). Postulat je, da kopičenje beljakovine ΔFosB povzroča vzorce izražanja genov, ki lahko temeljijo na učinkih izkušenj na dolgoročno vedenjsko in celično plastičnost (McClung & Nestler, 2008).

Uporabili smo spolno vedenje žensk v sirskih hrčkih kot model plastičnosti v možganih, ki temelji na izkušnjah (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley in Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel in Mullins, 2006). Prednost pri delovanju s spolnim vedenjem je zmožnost nadzora nad stopnjami izkušenj živali s tem, da imajo bodisi popolnoma spolno naivne živali, bodisi z različno izpostavitvijo živali različnim stopnjam spolne izkušnje. Pred tem smo pokazali, da ponavljajoče se spolne izkušnje povzročajo preobčutljivost mezolimbičnega dopaminskega sistema, podobno tistemu pri zlorabi drog (Bradley et al., 2005b, Bradley in Meisel, 2001, Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Upam, da et al., 1992, Kelz et al., 1999, Kohlert & Meisel, 1999, Pierce in Kalivas, 1995, Pierce in Kalivas, 1997a, Pierce in Kalivas, 1997b, Robinson & Kolb, 1999a). Na primer, tako kot učinki drog, ponavljajoče se spolne izkušnje povečujejo dendritične bodice v srednjih živčevjih NAc (Lee et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel in Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson et al., 2001, Robinson & Kolb, 1997, Robinson & Kolb, 1999a, Robinson & Kolb, 1999b, Robinson & Kolb, 2004). Nadalje smo ugotovili, da je barvanje ΔFosB / FosB vztrajno povišano v NAc po ponovljenih spolnih izkušnjah (Meisel in Mullins, 2006).

Glede na to, da lahko spolna izkušnja povzroči dolgotrajno izražanje družinskih članov FosB, je bil namen te študije manipulirati izraz ΔFosB, da bi posnemal vedenjske posledice ponavljajočih se spolnih izkušenj. Po virusni posredni preveliki ekspresiji ΔFosB v NAc so bile preiskave na ženske sirske hrčke testirane na izboljšano kondicionalno preferenco prostora in tudi na povečanje učinkovitosti kopulacije z naivnimi moškimi hrčki.Bradley et al., 2005b, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel in Mullins, 2006). W.Tukaj poročamo, da z vztrajnim prekomernim izražanjem ΔFosB v NAc ženskih hrčkov, ki prejemajo minimalne spolne izkušnje, lahko povzročimo spremembe vedenja, podobne tistim ženskam z obsežnejšimi spolnimi izkušnjami.

Pojdi na:

Materiali in metode

Eksperimentalni predmeti

Moške in ženske sirske hrčke smo dostavili približno v 60 starosti od Charles River Breeding Laboratories, Inc. (Wilmington, MA). Samice so bile nameščene posamično v plastičnih kletkah (50.8 cm dolga × 40.6 cm široka × 20.3 cm visoka), medtem ko so bile živali moških dražljajev razporejene v enake kletke v številu treh ali štirih. Živalska soba je bila vzdrževana pri nadzorovani temperaturi 22 ° C z 14: 10 hr svetlo-temno razporeditvijo (luči med 1: 30 in 11: 30 pm). Hrana in voda sta bili na voljo živalim ad libitum.

Vsi postopki, uporabljeni v tem poskusu, so bili v skladu z nacionalnimi inštituti za zdravje Smernice za nego in uporabo laboratorijskih živali in jih je odobril odbor za nego in uporabo živali Animal Purdue.

Surgery

Samice so bile dvostransko ovariektomizirane pod anestezijo z natrijevim pentobarbitalom (Nembutal; 8.5 mg na telesno maso 100 gm, ip), z dodatnim anestetikom in nato podvržene dvostranski stereotaksični operaciji za dostavo virusnih vektorjev. Med stereotaksično kirurgijo je bila glava obrita, koža in mišica sta se umaknili. V lobanji je bila izvrtana majhna luknja in 5 μL Hamiltonova brizga je bila spuščena na raven NAc z bočnega kota 2 °, da se zagotovi odstranitev stranskih možganskih prekatov. Injekcijska brizga je bila pred injiciranjem shranjena na mestu 5 min, nato pa je bil v NAc v 0.7 min dan adeno-povezan virus (AAV) -GFP ali AAV-ΔFosB (7 μL), nato pa je bila brizga na mestu za dodatnih 5 min. Ta postopek se je ponovil za kontralateralno stran možganov.

Virusni vektorji

Za AAV je značilna sposobnost učinkovite transfekcije nevronov in ohranjanje specifične transgenske ekspresije za daljša časovna obdobja (Chamberlin et al., 1998). AAV vektorji obstajajo v različnih serotipih na podlagi karakterizacije kapsidnega proteina. Ta poskus je uporabil AAV2 (serotip 2) iz Stratagene s titrom nad 108/ μl, ki izraža zeleni fluorescenčni protein (AAV-GFP), kot tudi vektor AAV, ki je imel konstrukte za ΔFosB in GFP (AAV-ΔFosB-GFP). Virusni vektorji so bili injicirani v NAc vsaj 3 tednov pred vedenjskim testiranjem, da bi omogočili razvoj ΔFosB prekomerne ekspresije. Ti AAV vektorji posredujejo transgeno ekspresijo pri podganah in miših, ki postanejo maksimalni v 10 dneh injiciranja in potem ostanejo na tej ravni vsaj 6 mesecev (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Pomembno je, da vektorji okužijo samo nevrone in ne proizvajajo nobene toksičnosti, ki bi bila večja od samih infuzij vehikla. Podrobnosti o proizvodnji in uporabi teh vektorjev so navedene v prejšnjih publikacijah (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006).

Spolne izkušnje

Vse ženske hrčke z ovariektomijo so bile enkrat tedensko pripravljene za spolno izkušnjo z dvema subkutanima injekcijama estradiol benzoata (10 μg v 0.1 ml olja bombažnega semena) približno 48 h in 24 h pred testom spolnega vedenja, ki mu je sledila subkutana injekcija progesterona. (500 μg v 0.1 ml olja iz semen bombaža) 4 – 6 uro pred testom spolnega vedenja. Ženske, ki so prejele spolno izkušnjo, so bile predstavljene s spolno izkušenim moškim hrčkom za sejo 10 min 4 – 6 h po injiciranju progesterona. Vsak moški in ženska sta bili med trajanjem testov spolnih izkušenj le enkrat seznanjeni.

Prednostna pogoja

V tem preizkusu je bila uporabljena pristranska paradigma preferencialov mesta (Tzschentke, 1998). Naš aparat za kondicioniranje (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996) je sestavljen iz enega belega in enega sivega predelka (60 × 45 × 38 cm), povezanega z jasnim osrednjim predelkom (37 × 22 × 38). Glavni oddelki so bili nadalje diferencirani z aspensko posteljnino (Harlan Laboratories, IN) v sivem predelu in steljo koruznega nakita (Harlan Laboratories, IN) v belem predelu. Ženske hrčke z ovariektomijo so bile hormonsko pripravljene pred pred-testom, zasedanjem spolne kondicije in po testu. Med predpreizkusom je bila žival postavljena v čisto osrednjo komoro in je lahko prosto krožila po različnih predelih za 10 min, da bi določila začetno prednost za vsak predel. Ker so vse živali pokazale začetno preferenco za belo komoro, je bilo kondicioniranje izvedeno v sivi komori. Hormonsko polnjenje je bilo ponovljeno med 2 (Skupine 2-5) ali 5 tednov (Skupina 1) kondicioniranja. Med kondicioniranjem so ženske dobile spolno izkušnjo z moškim v sivem predelu za 10 min, pri čemer so merili ženske kopulacijske parametre (latentnost in skupno trajanje lordoze). Eno uro po testu spolne izkušnje je bila samica postavljena sama v belo komoro za 10 min. Kontrolna skupina samic, ki niso prejele spolne izkušnje, je bila hormonsko pripravljena, vendar je bila postavljena sama v vsaki komori za 10 min. Po 2 ali 5 tednih kondicioniranja so živali dobile post-test, v katerem so lahko spet prosto krožile po komorah za 10 min. Ne glede na skupino so bili vsi post-testi opravljeni sedem tednov po stereotaksični kirurgiji, zato so bile vse živali žrtvovane z enako stopnjo virusne ekspresije. V tem poskusu so bile izvedene skupine živali 5: pozitivna kontrolna skupina živali je dobila dvostranski AAV-GFP in dobila 5 tedensko združitev spolnega vedenja z moškim (skupina 1, n = 8). Dve negativni kontrolni skupini nista dali nobene spolne pripravljenosti za 2 tedne in sta prejeli bodisi AAV-ΔFosB (skupina 2, n = 5) ali AAV-GFP (skupina 3, n = 4). Nazadnje so bile živali, ki so prejele 2 tedne spolnega vedenja z moškim z dvostransko injekcijo bodisi AAV-ΔFosB (skupina 4, n = 7) ali AAV-GFP (skupina 5, n = 7).

Naivni moški eksperiment

Prejšnje raziskave so pokazale, da lahko spolno izkušeni hrčki izboljšajo kopulacijsko učinkovitost medsebojnega delovanja s svojimi spolno naivnimi moškimi partnerji (Bradley et al., 2005b). Ta test je bil dan približno en teden po kondicioniranem preferenčnem mestu po preskusu za dve skupini živali, ki sta prejeli 2 tedne spolne kondicije (skupine 4 in 5). Samice so bile hormonsko pripravljene za spolno izkušnjo, kot je opisano. Med testom 10 min, je bil spolno naiviran moški hrček uveden v žensko domačo kletko in testna seja je bila posneta za kasnejšo analizo. Število videoposnetkov je bilo določeno s številom moških in intromisij (vključno z ejakulacijami) moškega, pa tudi delež skupnih vzponov, ki so vključevali intermisijo (hitrost udarca).

Imunohistokemija

Imunološko barvanje smo izvedli na vseh živalih, da smo preverili mesto injekcije virusa in anatomsko stopnjo ekspresije proteina. Samice so prejele prevelik odmerek zdravila Sleepaway (0.2 ml ip, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) in intrakardialno perfuzirali z 25 mM fosfatnim pufrom (PBS) za 2 min (približno 50 ml), ki mu je sledil 4% paraformaldehid v 25 mM PBS za 20 min (približno 500 ml). Možgane smo odstranili in po fiksiranju za 2 h v 4% paraformaldehidu nato dali v raztopino 10% saharoze v PBS preko noči pri 4 ° C. Živali, ki so prejele samo dvostranski AAV-GFP, so imele serijske koronalne odseke (40 μm) izrezane iz zamrznjenega tkiva v 25 mM PBS plus 0.1% govejega serumskega albumina (BSA) (pufra za pranje), nato pa so bile nameščene neposredno na stekelce in pokrite, medtem ko so bile še mokre s 5% n-propil galat v glicerinu. Živali, ki so prejele dvostranske AAV-ΔFosB, so imele serijske koronalne odseke (40 μm), izrezane iz zamrznjenega tkiva, in nato sprane 3-krat za 10 min v pufru za pranje. Živali AAV-ΔFosB so bile analizirane samo za ekspresijo ΔFosB in so bile zato inkubirane v primarnem protitelesu ΔFosB / FosB (1: 10000, sc-48 Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA) v pufru za pranje plus 0.3% Triton-X 100 pri sobni temperaturi za 24 h in nato premaknili na 4 ° C za 24 h. Ta koncentracija primarnega protitelesa je bila izbrana, ker povzroča le minimalno endogeno obarvanje ΔFosB / FosB. Po inkubaciji v primarnem protitelesu so sekcije sprane 3-krat za 10 min v pufru za spiranje in nato inkubirane v biotiniliranem-sekundarnem protitelesu za 45 min pri sobni temperaturi (1: 200, Vector, Burlingame, CA). Odseke smo nato sprali 3-krat za 10 min v pufru za spiranje, preden smo jih inkubirali v konjugatu streptavidin Alexa Fluor 594 (1: 500, Molecular Probes, Eugene, OR). Po tej inkubaciji smo sekance sprali 3-krat za 10 min v pufru za spiranje in nato montirali na stekelca in prekrivali, medtem ko še vedno mokro z 5% n-propil galatom v glicerinu.

Mikroskopska analiza

Predložke smo analizirali s svetlobnim mikroskopom Leica DM4000B s fluorescentno sposobnostjo, povezano z digitalnim fotoaparatom Leica DFC500. Digitalne slike desnega in levega mesta injiciranja vsakega odseka so bile serijsko analizirane s fluorescenčno mikroskopijo, da bi se lokacijo injekcije lociralo v NAc. Oddelki iz vsake živali so bili analizirani, da bi našli rostralno do kaudalno širjenje virusne ekspresije in tudi anatomsko lokacijo največjega premera izražanja. Nadalje, v teh odsekih so bile številke FosB obarvanih celic preštete v ImageJ iz shranjenih digitalnih slik. Ker je bil naš cilj preprosto pridobiti približno število celic, niso bile uporabljene stereološke metode.

Pojdi na:

Rezultati

Časovni potek prekomernega izražanja ΔFosB, ki ga povzroča virus, v NAc ženskih sirskih hrčkov

Na začetku smo uporabili ločeno skupino živali, da bi ugotovili časovni potek prekomerne ekspresije ΔFosB, ki jo povzroči virus, v ženskem hrčku. Analiza ekspresije ΔFosB pri časovnih točkah 3 (n = 5), 6 (n = 6) in 9 (n = 2) je pokazala, da je 3 tednov po stereotaksični kirurgiji povzročilo prekomerno izražanje ΔFosB, ki je bilo ohranjeno s pomočjo 6 in 9 tednov pred stereotaksično operacijo. Virusna ekspresija je bila večinoma jedrska, najdena pa je bila tudi v citoplazmi in celo v dendritih nekaterih celic s prekomerno ekspresijo. Od trinajstih živali, ki so vključevale eksperiment s časovnim potekom, so imele štiri živali rostralne NAc jedrne virusne injekcije, od katerih se je ena razširila v ležišče jedra stria terminalis (BNST). Preostalih devet živali je imelo kaudalno injekcijsko namestitev, sedem v repnem jedru in dve v repni lupini NAc. Samo ena od kavdalnih injekcij lupine je kavdalno prešla v BNST, medtem ko je šest injekcij v repnem jedru prečkalo kavdalno v BNST. Ugotovljeno je bilo, da so povprečni največji premeri virusne ekspresije za vsako časovno točko 0.9 mm, 1.2 mm in 1.0 mm za 3, 6 in 9 tedne. Ti povprečni premeri so bili podvrženi analizi variance in ni bilo ugotovljeno, da bi se bistveno razlikovali. Zato so se v naslednjih vedenjskih poskusih testi vedenja začeli okoli 3 tednov pred stereotaksično kirurgijo, živali pa so bile žrtvovane okoli 9 tednov po stereotaksični kirurgiji, da bi zagotovili, da se virusna ekspresija ohranja na dosledni ravni.

Imunohistološka analiza injekcij AAV-ΔFosB in AAV-GFP

Sekcije možganov vsake živali, uporabljene v vedenjskih poskusih, so bile serijsko analizirane v koronalni ravnini za anatomsko lokacijo virusne injekcije. Skupno število 12 živali smo analizirali glede na njihovo dvostransko ekspresijo ΔFosB s številom celic in postavitvijo injekcije, ki smo jo določili s sledenjem preostalih sledi igle. Čeprav je bila postavitev injekcije analizirana v koronalnem odseku (Slika 1), ekspresija beljakovin se je razširila v rostralno-kaudalni elipsi z mesta injiciranja in se razširila tudi v dorzalno-ventralno elipso z mesta injiciranja. Od petih živali, ki so bile analizirane iz skupine 2, je bilo 70.5% celic za prekomerno merjenje v NAc (median = celice 16,864, spodnji kvartil = celice 7,551, zgornji kvartil = celice 20,002, interkvartilni razpon = 12,451). Sedem živali, analiziranih iz skupine 4, so pokazale prekomerno izražanje virusne 65.6% v NAc (median = celice 9,972, nižji kvartil = celice 5,683, zgornji kvartil = celice 11,213, interkvartilni razpon = 5530.). Ta števila celic predstavljajo prekomerno ekspresijo virusa kot pa endogeno obarvanje zaradi namenske razredčitve primarnega protitelesa.

Slika 1    

Ravni ekspresije beljakovin, ki jih posredujejo AAV-GFP ali AAV-ΔFosB 12 tedne po injiciranju. Vrh. Prekomerna ekspresija GFP je bila večinoma jedrska, ugotovljeno pa je bilo tudi, da se je razširila na citoplazmo in dendrite celic. Spodaj. Izraz proteina ΔFosB je posnemal ...

Od dvostranskih mest injiciranja 24 je bilo dvanajst v rostralnem jedru NAc, od katerih jih je šest imelo virusno ekspresijo, ki se je kavzalno razširila v BNST. Preostalih dvanajst mest injiciranja je bilo v repni NAc. Ena od dvanajstih injekcij je bila v repni lupini in se razširila kaudalno v BNST. Zadnjih enajst mest injiciranja je bilo v repnem jedru NAc, od katerih jih je osem razširjeno kaudalno v BNST. Vse injekcije so bile centrirane okoli sprednje komisije, razen ene injekcije v repni lupini NAc, ki je bila nekoliko bolj medialna kot sprednja komisija (Slika 2). Vse živali so pokazale ustrezno prekomerno izražanje bodisi GFP bodisi ΔFosB in so bile zato uporabljene v naknadni vedenjski analizi. Nobena žival ni bila izključena iz študije zaradi slabe anatomske injekcije. Nadalje, ker so bile vse injekcije usmerjene v tikalno jedro in samo ena injekcija je vključevala lupino, ni bila opravljena statistična analiza na mestih injiciranja.

Slika 2    

Anatomska lokalizacija virusnih injekcij v poskusnih živalih. Krogi predstavljajo postavitev AAV-GFP in kvadrati predstavljajo umestitev AAV-ΔFosB. a. AAV-GFP injekcijske namestitve za živali z 5 wks spolno pripravo (skupina 1). ...

Vektorska ekspresija AAV vektorja ΔFosB v NAc ženskih sirskih hrčkov ima za posledico povečano spolno nagrajevanje

Da bi ocenili, ali je čezmerna ekspresija ΔFosB v NAc vplivala na spolno nagrajevanje, smo uporabili pogojeno pogojeno preferenco prostora. V tem preskusu so živali prejele bodisi 0, 2 ali 5 tedne spolne kondicije. Med spolnim zdravljenjem so zabeležili latentnost in trajanje lordoze za vsakega hrčka. Niti latentnost lordoze (Skupina 1: 553 sek ± 7 sek, Skupina 4: 552 sek ± 7 sek, Skupina 5: 561 sek ± 7 sek,) niti trajanje lordoze (Skupina 1: 485 sec ± 15 sek, Skupina 4: 522 sek ± 10 sek, Skupina 5: 522 sek ± 12 sek) med spolnim zdravljenjem se je med skupinami med testiranjem bistveno razlikovalo, ne glede na virusno injekcijo. Zato niti prekomerna ekspresija GFP niti ΔFosB nista imela nobenega vpliva na receptivno vedenje samic.

Vsaka skupina iz kondicioniranega preferenčnega postopka je bila analizirana posamično s ponovljenim t-testom meritve med časom, preživetim v predelku za pripravo (sivi predelek) med pred-testom in post-testom. Statistična analiza ni bila razširjena med skupinami. Prejšnje raziskave so pokazale, da je pet seksualnih izkušenj s kondicioniranjem dovolj za odkrivanje pomembnih sprememb v preferencah prostoraMeisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Dejansko je bila skupina pozitivnih kontrol, sestavljena iz samic, ki so prekomerno izražale GFP v NAc, ki so dobile pet kondicijskih spolnih izkušenj, v post-testu v sivi komori skupaj s spolno izkušnjo v primerjavi s predkondicionirnim učinkom precej več časa, t (8) ) = −3.13, P<0.05. Kot smo pričakovali, živali, ki niso prejemale nobenih pogojevalnih spolnih izkušenj, niso bistveno spremenile časa v obeh komorah, ne glede na virusno injekcijo. Samice, ki so prekomerno izrazile GFP, ki so prejele dve kondicijski spolni izkušnji, niso pokazale kondicioniranja prostora, medtem ko so ženske, ki so dobile dve kondicijski spolni izkušnji s prekomernim izražanjem ΔFosB, med tem post testom preživele bistveno več časa v komori, seznanjeni s spolnimi izkušnjami, t (2) = -7, P <2.48 (Slika 3).

Slika 3    

Klimatizirana prednostna točka po injiciranju virusa. Ta graf prikazuje povprečno (± SEM) število sekund med preskusom predkondicioniranja (Pre) in preskusom po postu (Post), ki ga je vsaka skupina hrčkov preživela v sivem predelu. ...

Prekomerna ekspresija AAV vektorja ΔFosB v NAc ženskih sirijskih hrčkov izboljša njihovo kopulacijsko učinkovitost z naivnimi moškimi.

En teden po post-testu kondicioniranega mesta, so ženske z 2 tedni testov spolne kondicije (skupine 4 in 5) bile podvržene testu spolnega vedenja pri moških. V tem preskusu so ženske AAV-ΔFosB s testi 2 pred spolnimi izkušnjami bistveno izboljšale svojo kopulacijsko učinkovitost bolj kot AAV-GFP ženske z 2 pred spolnimi izkušnjami (Slika 4). Stopnja zadetkov (delež celotnih namestitev, ki so vključevale intromisijo) spolno naivnih samcev, ki so bili seznanjeni z ženskami AAV-ΔFosB, je bila znatno višja od stopnje zadetkov naivnih samcev, seznanjenih z ženskami AAV-GFP, t (14) = 4.089 p <0.005.

Slika 4    

Kopulacijska učinkovitost naivnih partnerjev moškega hrčka. Ta graf prikazuje povprečno (± SEM) stopnjo zadetka (delež skupnih vzponov, ki so vključevali intromiozijo) naivnih moških hrčkov, ki so bili seznanjeni s samicami AAV-GFP. ...
Pojdi na:

Razprava

Prejšnji poskusi, ki so uporabljali AAV vektorje za prekomerno izražanje ΔFosB, so bili izvedeni v modelnih sistemih podgane ali miši (Wallace et al., 2008, Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Vzorce virusne ekspresije smo ovrednotili v možganih hrčka z imunohistokemičnim barvanjem. Ta analiza je pokazala učinkovito izražanje ΔFosB, ki se je pojavilo takoj po 3 tednih po intrakranialni injekciji in je ostalo 9 tednov v naši analizi časa in do 12 tednov v vedenjskih poskusih.

V našem modelu spolne izkušnje ponavljajoče kopulacijske interakcije moškega povzročijo preobčutljivost dopamina na NAc (Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997), ki ima okrepljene posledice v pogojeni klimatski preferencim (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Ta dopaminska senzibilizacija, kakor tudi sposobnost ženskih hrčkov, da uravnavajo uspešen vdor moškega, ki ga vzreja zaradi ponavljajočih se spolnih srečanj, kaže na asociativni odziv (Bradley et al., 2005b). Pokazali smo, da se to okrepljeno spolno vedenje lahko poveča s prekomerno ekspresijo ΔFosB v NAc v kontekstu podskupne spolne izkušnje, analogno izboljšanju instrumentalnih odzivov na kokain, morfij ali porabo hrane po podobni prekomerni ekspresiji ΔFosB (Colby et al., 2003, Olausson et al., 2006, Zachariou et al., 2006). To izboljšanje spolnih interakcij z moškim, ki sledi spolni izkušnji, se je odrazilo s pridobitvijo pogojene preference kraja. jazt je smiselno obravnavati ΔFosB, ki deluje kot transkripcijska povezava, ki posreduje tako dolgoročne spremembe v vedenju kot tudi osnovno nevronsko plastičnost, ki je posledica aktiviranja spodnjih ciljev ΔFosB.

Glede na to, da povečanje ΔFosB povzroča te učinke, je treba razmisliti o osnovnih mehanizmih. Obstaja zelo malo identificiranih molekularnih posledic, ki so posledica kopičenja ΔFosB. MŠtudije z mikroargami miši, ki prekomerno izražajo ΔFosB, so pokazale povečanje serin / treonin ciklin odvisne kinaze-5 (Cdk5), jedrskega faktorja kapa B (NF-κB), podenote GluR2 glutamatnega receptorja in dynorphin (Ang et al., 2001, Bibb, 2003). Ni jasno, kako bi ti molekularni dogodki lahko vplivali na plastičnost in nastanek dendritične hrbtenice, čeprav ima Cdk5 pomembno vlogo pri povečevanju dendritične gostote hrbtenice (Bibb, 2003, Cheung et al., 2006, Kumar et al., 2005, Norrholm et al., 2003), podenote GluR2 ali NF-κB pa so bile vpletene v sinaptično (Ang et al., 2001, Nestler, 2001, Peakman et al., 2003). V prihodnjih študijah načrtujemo, da se osredotočimo na te in druge potencialne nižje transkripcijske cilje ΔFosB, da ugotovimo, kako njihova aktivnost niha s kopičenjem ΔFosB po ponavljajočem se spolnem vedenju.

Obstaja velika literatura, ki postavlja različne vloge, ki jih lupina in jedro NAc igrajo v motiviranem vedenju (Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Perrotti et al., 2008, Pierce in Kalivas, 1995). Prejšnje raziskave v našem laboratoriju so dosledno ugotavljale celične učinke spolnih izkušenj na jedro akumbensov (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley in Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Kohlert et al., 1997, Meisel et al., 1993), ki so podlaga za našo usmeritev jedra NAc v tej študiji. Naša analiza anatomskega obsega prevelike ekspresije ΔFosB je pokazala, da čeprav so bile injekcije dejansko usmerjene v kaudalno jedro NAc, je izraz ΔFosB pogosto razširil kaudalno v rostralni BNST. Čeprav sta kaudalni NAc in rostral BNST vsekakor anatomsko različna jedra, nista nujno funkcionalno različna, saj obe regiji modulirata mnoge mehanistične elemente, ki so ključni za motivacijske procese (npr. Koob et al., 2004). V naših mikrodializnih študijah ženskih hrčkov (Kohlert et al., 1997), smo opazili nezmožnost razlikovanja med rostralno BNST sondo in tistimi v kaudalnem NAc v smislu bazalnih ravni dopamina, dopaminskih odzivov na spolne interakcije z moškimi ali vzorcev dopaminergične aferentne inervacije. Namesto da bi širjenje okužbe v BNST obravnavali kot metodološko problematično, ti rezultati podpirajo idejo o funkcionalnem kontinuumu med NAc in BNST.

Čeprav smo pokazali, da je prekomerna ekspresija ΔFosB pri ženskih hrčkih dovolj Da bi zagotovili prednostni položaj pri pogojih za spolni odziv in povečali kopulacijsko interakcijo z moškimi, še vedno ni znano, ali je izražanje ΔFosB tudi potrebno za te vedenjske posledice spolne izkušnje. Nedavne študije so uporabile virus AAV-ΔJunD, ki zmanjšuje transkripcijo ΔFosB, ki jo posreduje konkurenčno heterodimeriziranje z ΔFosB pred vezavo regije AP-1 na gene (Winstanley et al., 2007). Z uporabo AAV-ΔJunD za izkoreninjenje transkripcije, posredovane z ΔFosB, upamo, da bomo ugotovili, ali je ΔFosB potreben za vedenjsko plastičnost, ki smo jo opazili po spolnem vedenju, ki bo dopolnilo rezultate študije, predstavljene tukaj. Če kopičenje ΔFosB in njegova kasnejša aktivacija ciljnih verig navzdol povzročata vedenjsko in celično plastičnost, potem bi morala odprava ΔFosB odpraviti te učinke.

Pojdi na:

Priznanja

Zahvaljujemo se Amandi Mullins, Melissi McCurley in Chelsea Baker za pomoč pri vedenjskem testiranju, kondicioniranju in obdelavi tkiv. To delo so podprli štipendije NIH DA13680 (RLM) in MH51399 (EJN).

Pojdi na:

Reference

  • Allen PB, Zachariou V, Svenningsson P, Lepore AC, Centon D, Costa C, Rossi S, Bender G, Chen G, Feng J, Snyder GL, Bernardi G, Nestler EJ, Yan Z, Calabresi P, Greengard P. za spinofilin in neurabin v dopaminsko posredovani plastičnosti. Nevroznanosti. 2006;140: 897-911. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Indukcija jedrskega faktorja kappaB v nucleus accumbens s kronično kokainsko administracijo. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Becker JB, Rudick CN, Jenkins WJ. Vloga dopamina v nucleus accumbens in striatum med spolnim obnašanjem pri samicah. J Neurosci. 2001;21: 3236-3241. [PubMed]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Indukcija deltaFosB v perikvektualni sivi s stresom spodbuja aktivne odzivne oblike. Neuron. 2007;55: 289-300. [PubMed]
  • Bibb JA. Vloga Cdk5 pri nevronski signalizaciji, plastičnosti in zlorabi zdravil. Nevrosignali. 2003;12: 191-199. [PubMed]
  • Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, Mermelstein PG. Spremembe izražanja genov znotraj nucleus accumbens in striatum po spolni izkušnji. Geni Brain Behav. 2005a;4: 31-44. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hidroksidopaminske lezije pri ženskah hrčkih (Mesocricetus auratus) odpravljajo občutljive učinke spolnih izkušenj na kopulacijske interakcije z moškimi. Behav Neurosci. 2005b;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Spolno obnašanje c-Fos v nukleus accumbens in lokomotorna aktivnost, stimulirana z amfetaminom, je občutljiva na prejšnje spolne izkušnje pri ženskih sirijskih hrčkih. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Bradley KC, Mullins AJ, Meisel RL, Watts VJ. Spolne izkušnje spreminjajo produkcijo cikličnega AMP, ki jo povzroča receptor D1, v nucleus accumbens ženskih sirskih hrčkov. Synapse. 2004;53: 20-27. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. Ekspresija c-Fos in deltaFosB sta različno spremenjena v različnih subregijah lupine nucleus accumbens pri podganah, občutljivih na kokain. Nevroznanosti. 2006;137: 773-780. [PubMed]
  • Cadoni C, Di Chiara G. Vzajemne spremembe odzivnosti dopamina v lupini in jedru nucleus accumbens ter na hrbtnem repnem-putamenu pri podganah, občutljivih na morfij. Nevroznanosti. 1999;90: 447-455. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomsko odvisni in neodvisni mehanizmi za destabilizacijo FosB: identifikacija degronskih domen FosB in posledice za stabilnost DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chamberlin NL, Du B, de Lacalle S, Saper CB. Rekombinantni adeno-povezani virusni vektor: uporaba za transgeno ekspresijo in sledenje anterogradnemu traktu v CNS. Brain Res. 1998;793: 169-175. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kronični antigeni, povezani s Fos: stabilne variante deltaFosB, inducirane v možganih s kroničnim zdravljenjem. J Neurosci. 1997;17: 4933-4941. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulacija delta FosB in FosB podobnih beljakovin z elektrokonvulzivnim napadom in zdravljenjem s kokainom. Mol Pharmacol. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Cheung ZH, Fu AK, Ip NY. Sinaptične vloge Cdk5: implikacije pri višjih kognitivnih funkcijah in nevrodegenerativnih boleznih. Neuron. 2006;50: 13-18. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Steratalno specifična prekomerna ekspresija DeltaFosB-a povečuje spodbudo za kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Di Chiara G, Tanda G, Cadoni C, Acquas E, Bassareo V, Carboni E. Homologije in razlike v delovanju mamil in konvencionalni ojačevalec (prehrana) pri prenosu dopamina: interpretativni okvir mehanizma odvisnosti od drog. Adv Pharmacol. 1998;42: 983-987. [PubMed]
  • Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hope BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS. Kronične spremembe v dopaminergični nevrotransmisiji povzročajo vztrajno povečevanje beljakovin, podobnih deltaFosB, v striatumu glodalcev in primatov. Eur J Neurosci. 1996;8: 365-381. [PubMed]
  • Harris GC, Hummel M, Wimmer M, Mague SD, Aston-Jones G. Povišanja FosB v nucleus accumbens med prisilno kokainsko abstinenco korelirajo z različnimi spremembami v funkciji nagrajevanja. Nevroznanosti. 2007;147: 583-591. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulacija neposredne zgodnje genske ekspresije in vezave AP-1 v podganah nukleusa accumbens s kroničnim kokainom. Proc Natl Acad Sci ZDA A. 1992;89: 5764-5768. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija dolgotrajnega kompleksa AP-1, ki ga sestavljajo spremenjeni Fos-podobni proteini v možganih s kroničnim kokainom in drugimi kroničnimi zdravljenji. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Izražanje transkripcijskega faktorja deltaFosB v možganih nadzoruje občutljivost na kokain. Narava. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Kohlert JG, Meisel RL. Spolne izkušnje povzročajo senzibilizacijo nukleusa akumbensovih dopaminskih odgovorov pri parjenju ženskih sirskih hrčkov. Behav Brain Res. 1999;99: 45-52. [PubMed]
  • Kohlert JG, Rowe RK, Meisel RL. Intromisivna stimulacija moškega povečuje zunajcelično sproščanje dopamina iz fluoro-zlato identificiranih nevronov v srednjem mozgu ženskih hrčkov. Horm Behav. 1997;32: 143-154. [PubMed]
  • Koob GF, Ahmed SH, Boutrel B, Chen SA, Kenny PJ, Markou A, O'Dell LE, Parsons LH, Sanna PP. Nevrobiološki mehanizmi pri prehodu z uporabe drog na odvisnost od drog. Nevroznanost in Biobehavioral Reviews. 2004;27: 739-749. [PubMed]
  • Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Preoblikovanje kromatina je ključni mehanizem, ki je podlaga za plastičnost kokaina v striatumu. Neuron. 2005;48: 303-314. [PubMed]
  • Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Nastanek dendritične hrbtenice, povzročen s kokainom, v D1 in D2-dopaminskih receptorjih, ki vsebujejo srednje trde nevrone v nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci ZDA A. 2006;103: 3399-3404. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Li Y, Kolb B, Robinson TE. Lokacija obstojnih amfetaminsko induciranih sprememb gostote dendritičnih hrbtenic na srednjih kostnih nevronov v nucleus accumbens in caudate-putamen. Nevropsihofarmakologija. 2003;28: 1082-1085. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulacija izražanja genov in kokainske nagrade s strani CREB in DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Nevroplastičnost je posredovana s spremenjeno ekspresijo genov. Nevropsihofarmakologija. 2008;33: 3-17. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekularno stikalo za dolgoročno prilagoditev v možganih. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • McDaid J, poslanec Graham, Napier TC. Preobčutljivost zaradi metamfetamina različno spreminja pCREB in DeltaFosB v celotnem limbičnem krogu možganov sesalcev. Mol Pharmacol. 2006;70: 2064-2074. [PubMed]
  • Meisel RL, Camp DM, Robinson TE. Mikrodializna študija dopaminskega ventima v striatni trak med spolnim obnašanjem pri ženskih sirijskih hrčkih. Behav Brain Res. 1993;55: 151-157. [PubMed]
  • Meisel RL, MA Joppa. Kondicionalna prednostna izbira pri hrčkih po agresivnih ali spolnih srečanjih. Physiol Behav. 1994;56: 1115-1118. [PubMed]
  • Meisel RL, Joppa MA, Rowe RK. Antagonisti dopaminskih receptorjev oslabijo pogojeno prednostno mesto po spolnem vedenju pri ženskih sirskih hrčkih. Eur J Pharmacol. 1996;309: 21-24. [PubMed]
  • Meisel RL, Mullins AJ. Spolne izkušnje pri ženskah glodalcev: celični mehanizmi in funkcionalne posledice. Brain Res. 2006;1126: 56-65. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Mermelstein PG, Becker JB. Povečani zunajcelični dopamin v jedru nucleus accumbens in striatum ženskega podgane med tempo obnašanja med kopulacijo. Behav Neurosci. 1995;109: 354-365. [PubMed]
  • Mumberg D, FC Lucibello, Schuermann M, Muller R. Alternativno povezovanje fosB transkriptov ima za posledico diferencialno izražene mRNA, ki kodirajo funkcionalno antagonistične proteine. Geni Dev. 1991;5: 1212-1223. [PubMed]
  • Nakabeppu Y, Nathans D. Naravna prisotna oblika FosB, ki zavira transkripcijsko aktivnost Fos / Jun. Celica. 1991;64: 751-759. [PubMed]
  • Nestler EJ. Molekularna osnova dolgoročne plastičnosti, ki je v osnovi zasvojenosti. Nat Rev Neurosci. 2001;2: 119-128. [PubMed]
  • Nestler EJ. Transkripcijski mehanizmi odvisnosti: vloga deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Kokainsko povzročena proliferacija dendritičnih hrbtenic v nucleus accumbens je odvisna od aktivnosti ciklin odvisne kinaze-5. Nevroznanosti. 2003;116: 19-22. [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakološke študije regulacije kronične indukcije antigena, povezane s FOS, s kokainom v striatumu in nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Oades RD, Halliday GM. Ventralni tegmentalni (A10) sistem: nevrobiologija. 1. Anatomija in povezljivost. Brain Res. 1987;434(2): 117-165. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB v nucleus accumbens ureja instrumentalno vedenje in motivacijo, ki je ojačana s hrano. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducibilna ekspresija dominantnega negativnega mutanta c-Jun v transgenih miših, specifična za možgansko regijo, zmanjša občutljivost na kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Različni vzorci indukcije DeltaFosB v možganih zaradi zlorabe drog. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Pfaus JG, Damsma G, Wenkstern D, Fibiger HC. Spolna aktivnost poveča prenos dopamina v nucleus accumbens in striatum samic podgan. Brain Res. 1995;693: 21-30. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Amfetamin proizvaja senzibilizirano povečanje gibanja in zunajcelični dopamin, prednostno v lupini nucleus accumbens pri podganah, ki so prejemale ponavljajoči se kokain. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1019-1029. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Model vezja za izražanje vedenjske senzibilizacije do amfetaminskih podobnih psihostimulantov. Brain Res Brain Res Rev. 1997a;25: 192-216. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Ponovljeni kokain spreminja mehanizem, s katerim amfetamin sprosti dopamin. J Neurosci. 1997b;17: 3254-3261. [PubMed]
  • Pierce RC, Kumaresan V. Mezolimbični sistem dopamina: končna skupna pot okrepitve učinka zlorabe drog? Neurosci Biobehav Rev. 2006;30: 215-238. [PubMed]
  • Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Samokontrola kokaina spreminja morfologijo dendritov in dendritičnih bodic v nucleus accumbens in neokorteksu. Synapse. 2001;39: 257-266. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Stalne strukturne spremembe v nukleus akumbensih in prefrontalnih nevronih v korteksu, ki jih proizvajajo predhodne izkušnje z amfetamini. J Neurosci. 1997;17: 8491-8497. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Spremembe v morfologiji dendritov in dendritičnih bodic v nucleus accumbens in prefrontalnem korteksu po večkratnem zdravljenju z amfetaminom ali kokainom. Eur J Neurosci. 1999a;11: 1598-1604. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Morfin spreminja strukturo nevronov v nucleus accumbens in neokorteksu podgan. Synapse. 1999b;33: 160-162. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Strukturna plastičnost, povezana z izpostavljenostjo zlorabam drog. Neurofarmakologija. 2004;47(Dodatek 1): 33 – 46. [PubMed]
  • Tzschentke TM. Merjenje nagrajevanja s pogojeno paradigmo za preferenco kraja: celovit pregled učinkov drog, nedavni napredek in nova vprašanja. Prog Neurobiol. 1998;56: 613-672. [PubMed]
  • Ulery PG, Nestler EJ. Regulacija transkripcijske aktivnosti DeltaFosB s fosforilacijo Ser27. Eur J Neurosci. 2007;25: 224-230. [PubMed]
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulacija stabilnosti DeltaFosB s fosforilacijo. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Vpliv DeltaFosB-ja v jedru je posledica naravnega obnašanja, povezanega z nagrajevanjem. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB ureja tek koles. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Indukcija DeltaFosB v orbitofrontalnem korteksu posreduje toleranco na kokainsko povzročeno kognitivno disfunkcijo. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Wolf ME, Sun X, Mangiavacchi S, Chao SZ. Psihomotorične stimulanse in nevronska plastičnost. Neurofarmakologija. 2004;47(Dodatek 1): 61 – 79. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Bistvena vloga za DeltaFosB v nucleus accumbens v delovanju morfina. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]