Kronična samo-dajanje alkohola ima za posledico zvišanje ΔFosB: primerjava hibridnih miši z različnimi vzorci pitja (2012)

BMC Neurosci. 2012 Oct 29;13:130. doi: 10.1186/1471-2202-13-130.
 

vir

Wagonerjev center za alkoholizem in Odvisnost Raziskave, Inštitut za nevroznanost, Univerza Teksas v Austinu, Austin, TX, 78712, ZDA. [e-pošta zaščitena]

Minimalizem

VSEBINA:

OZADJE:

Nezmožnost zmanjšanja ali uravnavanja vnosa alkohola je značilen simptom za motnje uživanja alkohola. Raziskave novih vedenjskih in genetskih modelov sprememb v pitju, ki jih povzročajo izkušnje, bodo še dodatno prispevale k znanju o motnjah uživanja alkohola. Pri primerjavi dveh hibridnih sevov F1 miši smo prej opazili različno vedenje alkohola, ki ga jemljemo samodejno: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) po izkušnjah z visokimi koncentracijami alkohola in obdobji abstinence kažejo zmanjšano prednost alkohola medtem ko je C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) kažejo trajno prednost alkohola. Ti fenotipi so zanimivi, ker ti hibridi kažejo pojavnost genetske aditivnosti (BxN) in naddominance (BxF) v vnosu etanola na način, ki je odvisen od izkušenj.

Natančneje, BxF kaže trajno prednost pri alkoholu in BxN kaže zmanjšano prednost alkohola po izkušnjah z visokimi koncentracijami etanola; Vendar pa izkušnje z nizkimi koncentracijami etanola proizvajajo trajno preferenco za alkohol za oba hibrida.

V tej študiji smo testirali hipotezo, da so ti fenotipi predstavljeni z diferencialno produkcijo inducibilnega transkripcijskega faktorja, ΔFosB, v nagradnih, odpornih in stresnih regijah možganov.

REZULTATI:

Spremembe nevronske plastičnosti (merjene z ravnmi ΔFosB) so bile odvisne od izkušenj, kot tudi možganske regije in genotipa specifične, kar še dodatno podpira to, da nevronska vezja temeljijo na motivacijskih vidikih porabe etanola..

BxN miši, ki so pokazali zmanjšano prednost alkohola, so imeli nižje vrednosti ΔFosB v jedru Edinger-Westphal kot miši, ki so kazale trajno prednost alkohola, in povečale ravni ΔFosB v srednji medialni amigdali v primerjavi s kontrolnimi mišmi.

BxN miši, ki kažejo trajno prednost alkohola, kažejo višje vrednosti ΔFosB v ventralni tegmentalni površini, Edinger-Westphalsko jedro in amigdala (osrednje in bočne delitve).

Še več, v Ravni BxN miši ΔFosB v jedru Edinger-Westphal in ventralnih tegmentalnih regijah so bile znatno pozitivno povezane s preferenco in vnosom etanola. Poleg tega je hierarhična analiza grozdenja pokazala, da so številni miši, ki še niso bili narejeni z etanolom, s splošno nizko koncentracijo ΔFosB, v skupini, medtem ko so mnoge miši, ki kažejo trajno prednost alkohola s splošno visokimi ravnmi ΔFosB, v skupini skupaj.

SKLEPI:

S primerjavo in kontrastom dveh alkoholnih fenotipov ta študija dokazuje, da so vezja, povezana z nagrado in stresom (vključno z jedrom Edinger-Westphal, ventralnim tegmentalnim območjem, amigdalo) podvržena pomembni plastičnosti, ki se kaže kot zmanjšanje preferenc alkohola.

Ozadje

Znani so dejavniki občutljivosti, okoljski in genetski, povezani z zlorabo alkohola in alkoholizmom. Zmožnost piti veliko količino alkohola z majhno posledico za posameznika je primarni simptom nastopa pri mnogih alkoholikih, kar kaže, da je nizka stopnja odziva na alkohol glavni dejavnik ranljivosti v razvoju alkoholizma.1,2]. Opredelitev nevrobioloških dejavnikov, ki prispevajo k zmerni uporabi alkohola, bo pomagalo razumeti uživanje in zlorabo alkohola in je učinkovita strategija za razvoj izboljšanih zdravil za posameznike, pri katerih je ugotovljena motnja uživanja alkohola. Uporaba modelov glodalcev za posnemanje človeških bolezni je bilo močno orodje pri napredovanju razumevanja te bolezni in izboljšanju zdravljenja. Obstaja več modelov za glodalce, ki preučujejo vidike zlorabe alkohola in alkoholizma, vendar noben model v celoti ne modelira alkoholizma. V kolikšnem obsegu bo miška peroralno sama aplicirala raztopine etanola v podobnih okoljskih pogojih, je močno odvisna od njegove genske zasnove [3].

V zadnjem času smo ugotovili, da hibridne miši C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) in FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 samo-aplicirajo nenavadno visoke stopnje alkohola pri preferenčnih preizkusih z dvema steklenicama (samice porabijo 20 – 35 g / kg / dan in moški 7 – 25 g / kg / dan, odvisno od koncentracije in paradigme) [4]. Ta novi genetski model ima pomembno prednost v primerjavi z obstoječimi sorodnimi sevi, vključno z dokazom prekomernega fenotipa in pitja na visoke ravni alkohola v krvi.4]. Poleg tega je visoka poraba etanola, ki jo kažejo miši BxF, vidna v dveh dodatnih paradigmah za pitje etanola (pitje v temi in sprejemanje etanola med rednim dostopom do tekočine).4]. Nato smo pri primerjavi dveh hibridnih sevov F1 miši opazili različno vedenje alkohola za samoupravo: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) kažejo zmanjšano prednost alkohola po izkušnjah z visokimi koncentracijami alkohola in obdobji abstinence in BxF kažejo trajno prednost alkohola [5]. Z uporabo vedenjskih testov smo pokazali, da so BxN bolj občutljivi kot BxF miši na averziven in sedativen učinek etanola. [6].

Temeljne raziskave o novih vedenjskih in genetskih modelih visokega uživanja alkohola in sprememb v pitju, ki jih povzročajo izkušnje, bodo dodatno podprle naše znanje o zlorabi alkohola in alkoholizmu. Zmanjšan fenotip preferenc za alkohol je zanimiv, ker BxN miši sprva kažejo visoko prednost za etanolne raztopine. Čeprav motivacijski vidik zmanjšanja vnosa alkohola po izkušnjah z visokimi koncentracijami etanola in abstinenco ni znan, bi lahko BxN miši primerjali z zmernimi alkoholnimi pivniki, ker še vedno uživajo raztopine etanola, vendar na nižji ravni, domnevno zaradi neprijetnih izkušenj.

Zanimiv je tudi vztrajni model alkohola, saj BxF miši stabilno uživajo izredno visoke ravni etanola, ne glede na predhodne izkušnje. Trajno in zmanjšano preferenco alkohola je mogoče povezati z učinkom odvzema alkohola, pojavom, ko živali kažejo znatno povečano uživanje alkohola po obdobju prisilnega abstinenca.e7]. Učinek odvzema alkohola je koristen pojav pri preučevanju povečanega vedenja alkohola. Čeprav je eksperimentalni načrt, za katerega je znano, da povzroča učinek odvzema alkohola, precej drugačen od urnika, ki ga tukaj uporabljamo, primerjava trajnega in zmanjšanega preferenčnega uživanja alkohola z učinkom pomanjkanja alkohola povezuje različne vedenjske fenotipe, ki so tukaj obravnavani, na pomemben pojav v modelih alkoholnih raziskav pri glodalcih. Zmanjšana prednost alkohola bi bila nasprotje učinka odvzema alkohola, trajno prednost pa bi lahko opisali kot odsotnost učinka odvzema alkohola. Uporaba različnih genetskih modelov živali, kot so BxF in BxN, močno prispeva k napredku na tem področju, saj naj bi bile motnje uživanja alkohola posledica kompleksnih interakcij med genetiko in okoljem. Identifikacija diferencialnega neposrednega zgodnjega izražanja genov za te hibride ponuja vpogled v možganske vezje, ki so pomembni za nagrajevanje in zavračanje lastnosti etanola.

V specifičnih modelih glodalcev, ki uporabljajo molekularne markerje nevronske plastičnosti in / ali aktivnosti, so proučevali etanol in druga nevrokombinska vezja, ki se ukvarjajo z zdravili.8-15]. Etanol, ki ga dajejo sami in ki ga dajo eksperimenti, ne povzroči enakovrednih presnovnih zemljev za možgane, kar nakazuje, da so specifični tokokrogi podrejeni učinkom etanola.8,9].

Ena od ključnih sestavin, ki jo je treba še temeljito raziskati v raziskavah o alkoholu, je preučevanje trajnega in zmanjšanega vedenja alkohola in identifikacija nevronskih vezij, ki so vključena med temi obnašanji. Cilj tega poskusa je bil identificirati regije možganov, ki so jih uporabljale trajno in zmanjšano preferenco alkohola. Ker je bilo dokazano, da kronično dajanje alkohola (skupaj z drugimi zlorabami zdravil) povzroča regionalne razlike v možganskih ravneh ΔFosB, smo testirali hipotezo, da so ti vedenjski fenotipi predstavljeni z diferencialno proizvodnjo inducibilnega transkripcijskega faktorja ΔFosB, v možganskih regijah, za katere je znano, da biti vključen v nagrajevanje, odpor in stres [10].

Kronični dražljaji, ki povzročajo regionalne razlike v koncentracijah ΔFosB, vključujejo zlorabe drog (alkohol, kokain, amfetamin, nikotin, morfij in antipsihotiki), kronični stres (zadrževalni stres, nepredvidljivi šok na nogi, elektro konvulzivni napadi) in kompulzivno teka koles [11]. Kot potencialni posrednik dolgotrajnih prilagoditev v možganih je prepoznavanje prevladujoče variante FosB (FosB ali ΔFosB) kot odziv na kronično zdravljenje z etanolom pomembna razlika.

Obstaja več študij, ki so izmerile FosB in ΔFosB po kroničnih dražljajih, za katere ni bilo preverjeno, da je bil ΔFosB prevladujoča izooblika (kot je opisana spodaj). Vendar obstajajo trdni dokazi, da je ΔFosB, ne FosB, prevladujoča izooblika po kroničnih dražljajih [10-12]. Študija Ryabinina in Wanga (1998) je pokazala, da so pri dBA / 2J miših z nizko vsebnostjo alkohola štirje dnevi ponovljenih injekcij etanola povzročili močno povečanje izražanja FosB v naslednjih možganskih regijah: anteriorno kortikalno amigdaloidno jedro, lateralno septum ventrale, centralno amigdaloidno jedro, lateralno septum ventrale, centralno amygdalo , bočna amigdala, stranski hipotalamus, lupina nucleus accumbens, nukleus postelje stria terminalis in paraventricularno jedro talamusa [13]. Njihovi rezultati določajo nevrološko vezje, odzivno na etanol. Izražanje FosB je bilo prav tako izmerjeno v mišici C57BL / 6J z visoko vsebnostjo alkohola med pridobivanjem in vzdrževanjem samo-dajanja etanola pod omejenimi pogoji dostopa. Med pridobivanjem samoupravljanja ni prišlo do sprememb v ravni FOSB.14]. Po dveh tednih samoinjiciranja z etanolom z omejenim dostopom so se vrednosti FosB povečale v osrednjem medialnem jedru amigdale in Edinger-Westphalovega jedra.15]. Poročila na splošno opredeljujejo nove regije, ki se ukvarjajo s samo-dajo etanola, in vključujejo vlogo za mezokortikolimbično pot in podaljšano amigdalo.16]. Vendar je pomembno omeniti, da so spremembe v koncentracijah ΔFosB odvisne od načina dajanja etanola, odmerka in časa, ki je izpostavljen zdravljenju ali urniku.13-15].

Mišji sevi, uporabljeni v tej študiji, zagotavljajo zanimive modele za primerjavo trajnega in zmanjšanega preferenc alkohola in osnovnih mehanizmov, ki so odgovorni za te različne odgovore na alkohol. Ta študija dokazuje, da imajo miši, ki kažejo zmanjšano prednost alkohola, tudi pomembno plastičnost v vezjih, povezanih z nagrado in stresom (vključno z jedrom Edinger-Westphal, ventralnim tegmentalnim področjem, amigdalo, nucleus accumbens in cingulate cortex).

Rezultati

Vpliv alkoholnih koncentracij in obdobij abstinence na samoupravljanje pri BxF in BxN miših

Da bi dokazali, da so različne koncentracije etanola in / ali abstinenčna obdobja spremenile kasnejšo porabo etanola, smo oblikovali štiri razporede (skupine) za merjenje porabe etanola (Figure1a, b).1a, b). Za vsak hibrid so bile izvedene štiri poskusne skupine: visoke koncentracije, visoke koncentracije z apstinenčnimi obdobji, nizke koncentracije in nizke koncentracije z apstinenčnimi obdobji. Popolni podatki za preferenco etanola (slika 1). \ T (Figure2)2) in porabo (slika 3). \ t (Figure3)3) podatki (za vse skupine in oba genotipa) so predstavljeni kot referenca. Za določitev in ponazoritev vedenjskih fenotipov trajnega in zmanjšanega preferenčnega uživanja alkohola so podatki o prednostih in porabi etanola 9% prikazani na slikah Številke44 in in5.5. Ti vedenjski fenotipi temeljijo na primerjavi primerjave in porabe etanola 9% s prvo, drugo, tretjo in četrto predstavitvijo v skupinah z visokimi koncentracijami in ustreznimi poskusnimi dnevi za skupine nizkih koncentracij. Izvedena je bila dvosmerna ANOVA (genotip x čas) prednostne koncentracije etanola 9% in porabe. Za skupino z visokimi koncentracijami, prednost etanola (slika. \ T (Figure4a)4a) in porabo (slika 3). \ t (Figure5a)5a) so bili za BxF večji od BxN, BxF pa je imel trajno naklonjenost in uživanje alkohola, medtem ko je BxN pokazal zmanjšano naklonjenost in uživanje alkohola (ETHANOL PREFERENCE - interakcija F (3,54) = 4.83, P <0, genotip F (01, 1,54) = 24.10, P <0.001, čas F (3,54) = 9.92, P <0.0001; PORABA ETANOLA - interakcija N / S, genotip F (1,54) = 50.73, P <0.0001, čas F (3,54, 11.68) = 0.0001, P <XNUMX). Za skupino z visokimi koncentracijami z abstinenco, prednost etanolu (slika (Figure4b)4b) in porabo (slika 3). \ t (Figure5b)5b) so bili za BxF večji od BxN, BxF pa je imel trajno naklonjenost in uživanje alkohola, medtem ko je BxN pokazal zmanjšano naklonjenost in uživanje alkohola (ETHANOL PREFERENCE - interakcija F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotip F (1,132) = 250.43, P <0.0001, čas F (3,132) = 27.48, P <0.0001; PORABA ETANOLA - interakcija F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotip F (1,132) = 510.88, P <0.0001, čas F (3,132) = 22.42, P <0.0001). Za skupino z nizkimi koncentracijami prednost pri etanolu (slika (Figure4c)4c) in porabo (slika 3). \ t (Figure5c)5c) so bili večji za BxF kot BxN, oba hibrida pa sta imela trajno naklonjenost in uživanje alkohola (PREFERENCA ETHANOLA - interakcija N / S, genotip F (1,54) = 12.2, P <0.01, čas N / S; POTROŠNJA ETANOLA - interakcija N / S, genotip F (1,54) = 74.83, P <0.0001, čas N / S). Za skupino z nizkimi koncentracijami z abstinenco, prednost etanolu (slika (Figure4d)4d) in porabo (slika 3). \ t (Figure5d)5d) bili večji za BxF kot BxN, oba hibrida pa sta pokazala zmerno zmanjšanje preferenc in uživanja alkohola (PREFERENCA ETHANOLA - interakcija N / S, genotip F (1,132) = 166.58, P <0.0001, čas N / S; POTROŠNJA ETANOLA - interakcija F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotip F (1,132) = 480.64, P <0.0001, čas F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Če povzamemo, v skupinah z visokimi koncentracijami (brez abstinence) je BxF pokazal trajno naklonjenost alkoholu, medtem ko je BxN pokazal zmanjšano naklonjenost alkoholu, v skupinah z nizko koncentracijo (brez abstinence) pa sta tako BxF kot B6xN pokazala trajno naklonjenost alkoholu. Ker so fenotipi, ki nas zanimajo, najbolje zajeti v skupinah brez abstinence, so težišče v preostalem delu študije.

Slika 1  

Eksperimentalni razpored za neprekinjeno prostovoljno porabo etanola. a. Eksperimentalni razpored za skupine z nizko koncentracijo in visoko koncentracijo. b. Eksperimentalni načrt za nizke koncentracije z apstinenčnimi obdobji in visokimi koncentracijami ...
Slika 2  

Prednost etanola je odvisna od genotipa in koncentracije etanola. a. V skupinah z visokimi koncentracijami je prednost etanola (poraba etanola / skupna poraba tekočine) večja za BxF kot BxN in se spreminja glede na ponujeno koncentracijo etanola. b ...
Slika 3  

Poraba etanola je odvisna od genotipa in koncentracije etanola. a. V skupinah z visokimi koncentracijami je poraba etanola (g / kg / dan čistega etanola) večja za BxF kot BxN in se spreminja s ponujeno etanolno koncentracijo. b. V visokih koncentracijah ...
Slika 4  

Trajni in zmanjšani vedenjski fenotipi preferenc glede alkohola. Prikazana je primerjava prednostnih lastnosti 9% etanola od prve, druge, tretje in četrte predstavitve, da se ugotovijo vedenjski fenotipi trajnega ali zmanjšanega preferenčnega uživanja alkohola. a. ...
Slika 5  

Trajni in zmanjšani obnašanje fenotipov uživanja alkohola. Primerjava porabe etanola 9% od prve, druge, tretje in četrte predstavitve kaže na vedenjske fenotipe trajnega ali zmanjšanega uživanja alkohola. ...

Ravni ΔFosB

Kvantifikacijo in analizo ΔFosB smo uporabili za ugotavljanje kronične aktivacije nevroskopskega vezja med trajno in zmanjšano prednostjo alkohola. Za vsak hibrid so bile na voljo tri poskusne skupine: visoke koncentracije, nizke koncentracije in voda (kontrola). Podatki ΔFosB so predstavljeni kot odstotek pozitivnih nevronov ΔFosB [(# pozitivnih nevronov ΔFosB) / (# pozitivnih nevronov ΔFosB + # Nissl pozitivnih nevronov)] (Tabela1).1). Prejšnje delo je pokazalo, da lahko izkušnje z etanolom povzročijo nevrodegeneracijo.17]. Zato smo raziskali številke nevronov v tej študiji in nismo poročali o pomembnih razlikah glede na genotip ali skupino za možganska področja, ki so bila kvantificirana v tej študiji. Izvedene so bile naslednje tri analize podatkov ΔFosB: 1) trismerna ANOVA (genotip x skupina x možganska regija), 2) dvosmerna ANOVA (skupina možganske regije x) za vsak genotip in 3) korelacijske matrike so bile razvite za prikaz korelacije omrežij.

Tabela 1  

Odstotek ΔFosB pozitivnih nevronov

Ponovljeni ukrepi trosmerne ANOVA (genotip x skupina x regija možganov) so razkrili interakcijo genotip x regija možgan [F (15,375) = 2.01, P <.05], interakcijo skupine x regija možganov [F (15.375) = 1.99, P <0.01] in glavni učinek možganske regije [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Ponovljeni ukrepi dvosmerne ANOVA (regija možganov x skupina) za vsak genotip so pokazali, da je bil glavni učinek skupine in regije možganov tako za BxF kot za BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, glavni učinek skupina; F (15,374) = 25.64, P <.0001, glavni učinek možganske regije; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, glavni učinek skupine; F (15,360) = 23.73, P <.0001, glavni učinek genotipa]. Post-hoc analiza je pokazala šest pomembnih skupinskih razlik za BxN (slika (Figure6a-c).6ac). Odstotki ΔFosB so bili višji v skupini nizkih koncentracij kot v skupini voda v La, CeC / CeL, EW in VTA. Odstotek ΔFosB je bil višji v skupini z visokimi koncentracijami kot v skupini voda v CeMPV. Odstotek ΔFosB je bil višji v skupini nizkih koncentracij kot v skupini z visokimi koncentracijami v EW. Podatki ΔFosB za vse druge kvantificirane možganske regije so predstavljeni v tabeli Tabela1.1. S Pearsonovo korelacijsko analizo smo ugotovili, ali je% pozitivnih nevronov ΔFosB v določeni možganski regiji koreliral s porabo ali preferenco etanola. Poraba in preferenca etanola sta pokazala pomembno pozitivno korelacijo z% ΔFosB v EW in VTA miši BxN (POTROŠNINA ETANOLA - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; PREFERENCA ETHANOLA - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 za vse).

Slika 6  

Trajno in zmanjšano preferenco alkohola povzroča ΔFosB v amigdali, EW in VTA. Odstotek pozitivnih nevronov ΔFosB v regijah amigdale (a.), EW (b.) in VTA (c.). d. in e. Reprezentativne slike barve ΔFosB / Nissl ...

Kompleksna povezava med izražanjem ΔFosB, genotipom, možgansko regijo in porabo etanola je bila nadalje raziskana z uporabo analize glavnih elementov in hierarhičnega združevanja. Analiza glavnih komponent je pokazala, da je večina variabilnosti (~ 80%) v podatkih predstavljena s komponentami 5. Nenadzorovano hierarhično združevanje (združeno s posamezniki in regijami možganov) je bilo nato izvedeno in urejeno z uporabo prve glavne komponente (slika (Figure7).7). Posamezno združevanje je pokazalo močne, vendar ne popolne vzorce združevanja na osnovi porabe etanola, ne glede na genotip. Mnogi miši, ki še niso bili narejeni iz etanola, so se združili in razkrili manj celotnega ΔFosB od povprečja in mnogi od miši, ki so pokazali podaljšano prednost alkohola, so se kopičili in pokazali več celotnega ΔFosB kot srednja vrednost. Ti dve skupini sta bili najbolj različni. Tri skupine so predstavljale večjo, manj kot povprečno mešanico vrednosti ΔFosB in fenotipov za pitje etanola.

Slika 7  

Ravni ΔFosB ne poganja samo poraba etanola. Opravili smo hierarhično združevanje in prikazali toplotno karto posameznih nivojev ΔFosB in ustrezno porabo etanola 9%. Zelena = ΔFosB manj kot ...

Razprava

Pri primerjavi dveh hibridnih sevov miši F1 so opazili različno vedenje alkohola. BxN kaže zmanjšano preferenco alkohola po izkušnjah z visokimi koncentracijami alkohola in obdobjem abstinence, medtem ko BxF kaže trajno prednost alkohola.. BxF modeli so stabilni, imajo veliko porabo (trajno prednost pred alkoholom) in BxN modeli zmerno pitje (zmanjšanje alkohola). Plastičnost nevronov (ali aktivnost, merjena z ravnmi ΔFosB) je bila različna glede na izkušnje z etanolom, kar je nadalje podpiralo osnovno vlogo specifičnega nevronskega vezja pri trajnem in zmanjšanem preferencah alkohola.

Za visok sev alkohola, C57BL / 6, so prednostni etanol in poraba močno odvisni od začetne koncentracije etanola, dolžine abstinence in sub-seva (C57BL / 6Cr ali C57BL / 6J) [7,18]. Ugotovili smo, da sta prednost in poraba etanola pri BxF miših dosledno višja (in bolj stabilna kot v BxN) v štirih različnih testiranih shemah. Zmerno visoka prednost in poraba etanola v BxN sta bila podprta le z enim načrtom kroničnega pitja (nizke koncentracije brez abstinence), medtem ko so zmanjšanje preferenc in porabe opazili pri vseh drugih testiranih kroničnih shemah pitja. BxN reducirana prednostna vsebnost alkohola ponuja nov živalski model, v katerem izkušnje (ponovna predstavitev etanola po izkušnjah z več visokimi koncentracijami etanola in / ali več kratkih obdobij abstinence) dramatično zmanjšajo njihov odziv na predhodno zelo prednostno koncentracijo etanola.

Etanol, ki ga dajejo sami in ki ga dajo eksperimenti, proizvaja različne presnovne zemljevide možganov, kar kaže na specifično vezje, ki je podlaga za okrepitev učinkov etanola. [8,9]. Preizkusili smo hipotezo, da sta trajni in zmanjšani vedenjski fenotipi preferenc alkohola predstavljeni z diferencialno proizvodnjo inducibilnega transkripcijskega faktorja, ΔFosB, v regijah možganov, za katere je znano, da sodelujejo pri nagrajevanju, odpornosti in stresu. ΔFosB je transkripcijski faktor z edinstveno dolgoročno stabilnostjo in ne desenzibilizira na dražljaje, kot je c-Fos, temveč se kopiči med kroničnimi zdravljenji. Povečanje ΔFosB je posledica povečane nevronske aktivnosti in naj bi odražalo dolgotrajno nevronsko plastičnost. Ugotovili smo, da je odstotek pozitivnih nevronov ΔFosB v možganskih regijah odvisen od genotipa (BxF in BxN) in skupine (kontrola vode, nizke koncentracije in visoke koncentracije).

Fali BxN, post-hoc analiza je pokazala, da je prostovoljna poraba etanola povzročila povečanje ΔFosB v jedru EW, VTA in amigdala: kar kaže na povečano plastičnost nevronov v regijah možganov, za katere je znano, da so vključeni v reakcije etanola, nagrad in stresa. BxN miši v skupini z visokimi koncentracijami (zmanjšana prednost alkohola) so zmanjšale plastičnost nevronov v EW, kar kaže na to, da se ti nevroni odzivajo na vnos alkohola s plastičnostjo, ki je odvisna od izkušenj. V skupini z nizkimi koncentracijami (ki kaže prekomerno preferenco glede alkohola) je nevronska plastičnost v EW večja kot v kontrolnih skupinah z visokimi koncentracijami in vodo. Čeprav so bile izvedene z različnimi paradigmami pitja etanola in genetskih modelov miši, se naše ugotovitve v EW miših BxN strinjajo s prejšnjimi študijami porabe etanola [14,15]. Nepreganglionski EW je bil pred kratkim označen kot zdravilo, ki vsebuje nevrone, ki vsebujejo periokulomotorni urokortin (Ucn) [19]. Ucn1 je peptid, podoben kortikotropinskemu sproščanju (CRF), ki veže receptorje CRF1 in CRF2. Prejšnje študije z uporabo genetskih, farmakoloških in lezijskih pristopov so pokazale, da Ucn1 sodeluje pri uravnavanju uživanja alkohola.19-22]. Ttukaj je znana genetska predispozicija za visok vnos alkohola pri glodalcih, ki je v korelaciji z višjimi osnovnimi ravnmi Ucn1 v EW in LSi [23]. Tako je bilo nepričakovano pomanjkanje post-hoc pomena, ki smo ga opazili pri EW za alkohol, ki raje daje prednost in porabi BxF miši. Morda je to posledica rahlo povišanega deleža ΔFosB v skupini BxF v primerjavi z BxN vodno skupino. Dejansko so bili odstotki ΔFosB pri vseh miših, ki kažejo trajno prednost pri alkoholu (skupina BxF High Concentrations, skupina BxF nizkih koncentracij in skupina BxN nizka koncentracija), precej podobni.

Za BxN je poraba etanola v skupini z nizkimi koncentracijami povečala nevronsko plastičnost v VTA (večja kot v skupinah za visoke koncentracije in vode). Prednost in poraba etanola sta bili tudi večji za skupino nizkih koncentracij. Pomanjkanje post-hoc pomena, ki smo ga opazili pri VTA za alkohol, ki daje prednost in porabi BxF miši, je bilo nepričakovano in je lahko posledica nekoliko višjih bazalnih ravni ΔFosB v vodni kontrolni skupini. Odstotki ΔFosB so bili v skupini BxF nekoliko povišani v primerjavi z vodno skupino BxN, medtem ko so bili odstotni deleži ΔFosB precej podobni za vse miške, ki kažejo trajno preferenco glede alkohola (skupina BxF High Concentrations, skupina BxF nizkih koncentracij in skupina BxN nizka koncentracija). . VTA dopamin ima pomembno vlogo pri posredovanju okrepitvenih učinkov etanola in sodeluje v številnih vzajemnih povezavah, pomembnih za etanol in obnašanje, povezano z nagrajevanjem.24-26]. Poleg tega VTA projektira v amigdalno in EW jedro. Pokazalo se je, da se podgane samodejno dajejo etanol neposredno v VTA.27]. Tudi izpostavljenost etanolu poveča hitrost streljanja dopaminergičnih nevronov v VTA.28,29]. Povečana hitrost streljanja je lahko povezana z indukcijo ΔFosB v VTA, ki smo jo opazili po kronični prostovoljni uporabi etanola v BxN.

Odvisnost od alkohola povzroča dolgotrajne nevroadaptacije, kar ima za posledico negativna čustvena stanja; pomemben mehanizem pri negativni ojačitvi je signalizacija kortikotropin-sprostitvenega faktorja (CRF) znotraj amigdale [30]. Farmakološke manipulacije nevronov v CeA so usmerjene na GABA, CRF, opioidne, serotoninske, dynorphin in norepinefrinske receptorje [25,31-34]. GAntagonisti ABA, kot tudi antagonisti CRF, zmanjšajo porabo etanola [32,33,35]. Lezije CeA zmanjšujejo neprekinjeno prostovoljno porabo etanola [36]. Naše ugotovitve nadalje podpirajo vlogo, ki jo ima CeA pri urejanju alkoholizma. GABAergični nevroni v centralni amigdali tvorijo heterogeno populacijo, katere povezave so povezane z njihovo vsebnostjo peptidov. Ti GABAergični nevroni integrirajo izhodno aktivnost CeA. Kot je pregledano v [Wee in Koob (2010]), sNekdanje študije so pokazale, da imajo dynorphin in kappa opioidni receptorji vlogo pri vzdrževanju in povečevanju količine etanola.e37]. Pred kratkim sta Walker et al pokazala, da antagonist κ-opioidnega receptorja, nor-binaltorfimin, v podaljšani amigdali selektivno zmanjšuje samo-dajanje etanola v odvisnih živalih [38]. Kappa opioidna receptorska signalizacija ostaja ključni interes raziskav na stičišču stresa, nagrajevanja in odpornosti. Dokazano je bilo tudi, da je samo-dajanje etanola, inducirano s stresom, posredovano s signalizacijo kapa opioidnih receptorjev [39]. Osrednji CeA lahko razdelimo na latero-kapsularno (CeL / CeC) in medialno posteriorno ventralno. GABAergični nevroni CeL / CeC prejmejo dopaminergične inervacije iz VTA; kot smo že omenili, se ti nevroni aktivirajo po dajanju akutnega etanola in kažejo povečane ΔFosB miši, ki kažejo zadržano prednost alkohola. Glejte tudi Mc [Nevesta (2002]) za odličen pregled CeA in učinkov alkohola [40]. V naši študiji so BxN miši s podaljšano prednostjo alkohola (skupina nizkih koncentracij) pokazale večjo plastičnost nevronov v CeC / CeL in La in BxN miših z zmanjšano prednostjo alkohola (skupina z visoko koncentracijo) kažejo povečano plastičnost nevronov v CeMPV. Ti rezultati kažejo, da specifična izkušnja z etanolom vključuje plastičnost GABAergičnih nevronov v amigdali. S temi podatki, skupaj z ustreznimi spremembami nevronske plastičnosti v VTA in EW, predlagamo, da je to vezje podvrženo precejšnji plastičnosti pri trajnih pogojih alkohola.

Prejšnje raziskave so pokazale, da lahko miši C57BL / 6J dosežejo visoko vsebnost alkohola v krvi z izbiro pitja za dve steklenici, vendar te koncentracije alkohola v krvi niso podprte in pogosto pitje ne izpolnjuje meril za farmakološko motivacijo, ki so jih določili Dole in Gentry (1984) [41,42]. BxN miši z zmanjšano prednostjo alkohola porabijo manj, kot bi pričakovali od tipične miške C57BL / 6J [1]. Čeprav nismo vzeli vzorcev alkohola v krvi, ni verjetno, da bi BxN miši, ki kažejo zmanjšano prednost alkohola, dosegli trajne farmakološko pomembne koncentracije alkohola v krvi, kar kaže, da visoke koncentracije alkohola v krvi niso potrebne za induciranje plastičnosti teh regij možganov. Pomembno je omeniti, da zelo pomemben učinek skupine obstaja tudi v BxF, čeprav post hoc rezultati (popravljeni za več primerjav) za BxF regije možganov niso pokazali pomembnih sprememb v odstotkih pozitivnih nevronov ΔFosB za katerokoli regijo po kronični porabi etanola. s temi različnimi razporedi.

Za vizualizacijo potencialnih povezav med spremenljivkami je bilo izvedeno hierarhično povezovanje. Analiza toplotne slike rezultatov analize kaže splošni trend med ravnmi ΔFosB in porabo etanola, ne glede na genotip. Višje vrednosti ΔFosB so bile povezane z visokim pitjem in nižje ravni ΔFosB so bile povezane s kontrolnimi živalmi; vendar pa trdnost povezave ni bila zadostna za natančno predvidevanje pijanih fenotipov, ki bi temeljili izključno na ravneh ΔFosB.

Sklepi

Opazno vedenje alkohola za samoinjiciranje so opazili z dvema hibridnima sevoma F1 miši: BxN kaže zmanjšano preferenco alkohola po izkušnjah z visokimi koncentracijami alkohola, medtem ko BxF kaže trajno prednost alkohola. BxF modeli so stabilni, imajo veliko porabo (trajno prednost pred alkoholom) in BxN modeli zmerno pitje (zmanjšanje alkohola). Spremembe nevronske plastičnosti (merjene z ravnmi ΔFosB) so bile odvisne od izkušenj, pa tudi od specifičnosti možganske regije in genotipa, nadaljnje definiranje nevronskih vezij pa je osnova motivacijskih vidikov porabe etanola. Ti rezultati kažejo, da sprememba ene starševske linije v hibridnih miših povzroči spremembe v vzorcih uživanja alkohola in izrazite spremembe v vzorcih izraza ΔFosB, kar kaže, da se v teh različnih hibridnih miših ukvarjajo različne možganske mreže.

Metode

etika

Študija je bila izvedena strogo v skladu s priporočili iz Priročnika za nego in uporabo laboratorijskih živali Nacionalnih inštitutov za zdravje. Protokol je odobril Odbor za institucionalno oskrbo živali in uporabo Univerze v Teksasu v Austinu (AUP 2010 – 00028). Vse kirurgije so opravili pod natrijevo pentobarbitalno anestezijo in vsa prizadevanja so bila vložena v zmanjšanje trpljenja.

živali

Študije so bile izvedene z uporabo hibridnih miši F1, pridobljenih iz C57BL / 6J, in miši FVB / NJ ali NZB / B1NJ (BxF F1 in BxN F1, sev matere x očetov sev). C57BL / 6J, FVB / NJ in NZB / B1NJ rejci so bili kupljeni pri The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) in parjeni v 7 – 8 tednih. Potomci so bili odstavljeni v izoseksualne skupine vsakega od genotipov (BxF F1, BxN F1). Za lažjo primerjavo s predhodno zbranimi podatki smo testirali samo ženske miši1,5,6]. Miši so bile nameščene v standardnih kletkah s hrano in vodo ad libitum. Prostor kolonij in prostor za testiranje sta bila na 12 h svetlobi: 12 h temnem ciklu (luči pri 07: 00).

Dve steklenici izberejo preskus etanola

Metoda izbire z dvema steklenicama je bila uporabljena za določitev vzorcev prostovoljne etanolne samouprave v samicah BxF in BxN miši [1,6]. Hibridne ženske miši F1 (dnevi 63 starosti) so bile posamično nameščene v standardne kletke, medtem ko so se pred enim tednom navajale na steklenice s cevkami s sipperjem, pred vnosom raztopine etanola. Po navajanju so miši imeli dostop do dveh enakih steklenic: enega, ki je vseboval vodo, in drugega, ki je vseboval raztopino etanola. Položaji cevi so se dnevno spreminjali, da bi se določile željene pozicije. Da bi upoštevali potencialno razlitje in izhlapevanje, je bila povprečna masa, izčrpana iz cevi v kontrolnih kletkah brez miši, vsak dan odšteta od posameznih vrednosti pitja. Miši smo tehtali vsakih 4 dni v celotnem poskusu. Celotna poraba tekočine je bila merjena vsak dan med poskusom. Količino porabljenega etanola in preferenco za etanol smo izračunali za vsako miš in te vrednosti smo povprečili za vsako koncentracijo etanola. Učinek koncentracij alkohola in abstinenčnih obdobij na samoupravljanje pri BxF in BxN miših je bil dokazan z določitvijo poskusne skupine z dostopom do visokih koncentracij (stopnjevanje dostopa do raztopin etanola 3-35%, ki mu sledijo ponavljajoči se cikli 3, 9, 18, in 27% etanol, ki se konča s končno predstavitvijo 9% etanola) in drugo skupino z nizkimi koncentracijami (stopnjevanje dostopa do etanola 3-9%, preostanek poskusa pa izvedemo z dostopom do 9% etanola). Vsaka od teh skupin je imela podskupino, ki je doživela ali ni doživela treh tednov abstinence. Kontrolne miši so imele podobno stanje kot eksperimentalne miši, vendar so bile ponujene samo eno steklenico vode.

Skupno je bilo za vsak hibrid pet skupin: voda (n = 14-16), visoke koncentracije (n = 10), visoke koncentracije z abstinenčnimi obdobji (n = 20), nizke koncentracije (n = 10) in nizke koncentracije z obdobji abstinence (n = 20). Glejte sliko Slika11 za podrobne razporede za izbiro dveh steklenic.

ΔFosB Imunohistokemija in kvantifikacija

Imunohistokemija ΔFosB (IHC) je bila izmerjena v 16 možganskih regijah pri miših, ki so imele 72 dni neprekinjenega dostopa do vode (Control) ali vode in alkohola [visoke koncentracije in nizke koncentracije]. Učinek visokih koncentracij na preferenco in porabo etanola je bil veliko večji od učinka abstinence; zato skupine, ki so imele obdobja abstinence, niso bile vključene v meritve ΔFosB IHC. Nadalje je bil poskus izveden po prvem pojavu trajne ali zmanjšane alkoholne naklonjenosti, da bi pokazal, da so vedenjski fenotipi stabilni s ponavljajočimi se cikli sprememb koncentracije etanola, da bi preučili učinke kronične porabe etanola. Štiri do osem ur po odstranjevanju alkohola 73. dan poskusa so miši globoko anestezirali (175 mg / kg natrijevega pentobarbitala) in intrakardiralno prepojili z 20 ml 0.01 M fiziološke raztopine, puferirane s fosfatom (PBS), čemur je sledilo 100 ml 4% paraformaldehid v PBS. Možgani so bili odstranjeni, naknadno pritrjeni v 4% paraformaldehida pri 4 ° C, vdelani v 3% agarozo, razdeljeni (50 um, koronalni) na vibratom, položeni v krioprotektant (30% saharoze, 30% etilen glikola in 0.1% polivinil pirolidon v PBS) čez noč pri 4 ° C in shranite pri -20 ° C, dokler se ne predela za IHC. Odmrznjene odseke smo sprali s PBS, obdelali z 0.3% H2O2 in inkubirali eno uro v 3% običajnem kozjem serumu, da smo zmanjšali nespecifično označevanje. Odseke tkiva smo nato čez noč inkubirali pri 4 ° C v 3% normalnem kozjem serumu in anti-FosB (SC-48, razredčitev 1: 5000, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Odseke smo eno uro oprali, inkubirali v biotiniliranem kozjem anti-zajčjem Ig (razredčitev 1: 200, Vector Laboratories, Burlingame, CA), sprali in inkubirali v kompleksu avidin-biotin (razredčenje 1: 200, Elite kit-Vector Laboratories) . Aktivnost peroksidaze smo vizualizirali z reakcijo z 0.05% diaminobenzidinom (ki vsebuje 0.015% H2O2). Tkivne sekcije so bile Nissl kontrastne (z uporabo metilen modre / modre II). Diapozitivi so bili kodirani za slepo štetje. ΔFosB-IR nevroni so bili prešteti pri 50X (oljni) povečavi z uporabo metode optičnega frakcioniranja in računalniške programske opreme StereoInvestigator. Podatki o vzorčnih parametrih: okvir za štetje (50um x 50um x 10um) je bil enak za vse kvantificirane regije; vendar pa je bila velikost mreže določena za vsako možgansko regijo, da bi zagotovili, da bi bil skupni dvoboj celic enak 100 – 300, da bi dosegli koeficient variacije, manjši od 0.1. Podatki so bili izračunani kot odstotek pozitivnih jeder ΔFosB (število ΔFosB pozitivnih jeder / število nevronov) za vsako regijo.

FosB protitelesa, uporabljena v tej študiji (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), so se dvignila proti notranji regiji FosB in prepoznala FosB in ΔFosB. Čeprav to protitelo prepozna FosB in ΔFosB, se imunopozitivni nevroni, kvantificirani v tej študiji, imenujejo pozitivni nevroni ΔFosB, ker je bilo dokazano, da droge, vključno z alkoholom, inducirajo ΔFosB, ne FosB, v nevronih. Perrotti et al. ([2008]) izmerili indukcijo ΔFosB (kot odgovor na kronično dajanje drog, vključno z alkoholom) z uporabo dveh protiteles: enega, ki prepozna FosB in ΔFosB (SC-48) in enega selektivnega za ΔFosB (ni komercialno dostopno) in ugotovilo, da za vsa zdravila opazili, da je imunoreaktivnost, opažena z uporabo FosB protitelesa (SC-48), posledica ΔFosB, ker niso zaznali imunoreaktivnih nevronov z uporabo protiteles, selektivnih za FosB polne dolžine [10]. Poleg tega je znano, da se ΔFosB inducira na način, specifičen za tip možganske regije in celice, z različnimi kroničnimi zdravljenji in da so na voljo odlični pregledi na to temo [11,43,44].

Kratice in lokacije nevroanatomskih struktur

Il - infralimbična skorja (+1.70 mm); Cg1 - cingulasta skorja 1 (+1.1 mm); Cg2 - cingulasta skorja 1 (+1.10 mm); Jedro NAcc - jedro nucleus accumbens (+1.10 mm); Lupina NAcc - lupina nucleus accumbens (+1.10 mm); LSi - vmesni del stranskega septuma (+1.10 mm); La - bočna amigdala (-1.22 mm); Bla - bazolateralna amigdala (-1.22 mm); CeC / CeL - osrednja kapsularna in osrednja bočna amigdala (-1.22 mm); CeMPV - medialni posterioventralni del osrednjega jedra amigdale (-1.22 mm); PAG - periakvaduktalna siva (-3.64 mm); EW - Edinger-Vestfalsko jedro (-3.64 mm); VTA - ventralno tegmentalno območje (-3.64 mm); DR - hrbtni raphe (- 4.60 mm); PBN - parabrahialno jedro (-5.2 mm); NTS - jedro traktus solitarius (-6.96 mm). Mišji možgani v stereotaksičnih koordinatah[45] je bil uporabljen za subjektivno ujemanje enega do treh odsekov za kvantifikacijo vsake možganske regije.

Statistični postopki

Podatki so sporočeni kot srednja vrednost ± SEM, razen če ni drugače navedeno. Podatki so bili normalno porazdeljeni. Statistični podatki so bili izvedeni z uporabo različice Statistica 6 (StatSoft, Tulsa, OK, ZDA) in različice GraphPad Prism 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, ZDA). Za dvosmerne ANOVA-e za ponovitev meritev smo uporabili podatke o porabi etanola in prednostne podatke, da bi ocenili razlike med skupinami. Za podatke o ΔFosB so bile izvedene dvo- in trismerne ANOVA za ovrednotenje interakcij in glavnih učinkov za skupino (visoke koncentracije, nizke koncentracije in voda), regijo možganov in genotip. Bonferronijev popravek za večkratne primerjave in Bonferonijeve post-hoc so bile izvedene, kadar je bilo to primerno. Natančneje, domnevali smo, da bi se stres in nagrada vezala povečala FosB pri miših, ki kažejo zmanjšano prednost alkohola. Za vsak hibridni križ smo uporabili Pearsonovo r za identifikacijo prisotnosti pomembnih korelacij med ravnmi ΔFosB in prednostjo etanola in porabo pri miših z etanolom.

Hierarhično razvrščanje je bilo izvedeno, da bi se vizualiziralo, kako se podatki spreminjajo in ocenjujejo, kako so podatkovne skupine skupaj. Pripisane vrednosti mediane so nadomestile manjkajoče odstotke ΔFosB podatkov, ki niso presegli 15% podatkov. Čeprav obstaja večja stopnja negotovosti, kot če bi bile imputirane vrednosti dejansko upoštevane, hierarhična analiza grozdenja zahteva popolno članstvo ali popolno izbris za primerjavo primerov. Hierarhično združevanje je bilo izvedeno z uporabo Wardove metode in nastali grozdi so bili razvrščeni po prvotni komponenti analize glavne komponente (JMP®, Version 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). Za skupine, izkušene z vodo in etanolom, so bili ΔFosB podatki za vsako regijo možganov transformirani z-score in analiza glavnih komponent je bila izvedena za določitev števila skupin. Podatke smo nato združili v možganske regije in posameznike z uporabo nadzorovane hierarhične analize grozdov.

Konkurenčni interesi

Avtorji izjavljajo, da nimajo konkurenčnih interesov.

Prispevki avtorjev

ARO, YAB, RAH, TAJ so prispevali k zasnovi študije. ARO je podatke pridobil. ARO, IP, RDM so analizirali podatke. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB in RAH so sodelovali pri pripravi in ​​reviziji rokopisa. Vsi avtorji so prebrali in odobrili končni rokopis.

Priznanja

Zahvaljujemo se Drs. Jody Mayfield in Colleen McClung za koristne razprave in Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour in Darshan Pandya za tehnično pomoč. Ta raziskava je bila podprta z Integrativno nevroznanstveno iniciativo za konzorcij za alkoholizem AA13520 in Nacionalni inštitut za zlorabo alkohola in alkoholizem AA06399-S in AA16424.

Reference

  • Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Mit o požarni vodi in odziv na alkohol v Misiji Indijancev. Am J Psychiatry. 1997;154: 983-988. [PubMed]
  • Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Ugotovitve v podskupinah glede stopnje odziva na alkohol kot dejavnika tveganja za motnje uživanja alkohola: populacija žensk in latinistov v kolegiju. Alkohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
  • Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Prostovoljna poraba etanola v sorodnih mišjih sevih 15. Psihofarmakologija. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Cross Ref]
  • Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hibridni C57BL / 6J x FVB / NJ miši pijejo več alkohola kot C57BL / 6J miši. Alkohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Hibridni miši kot genetski modeli visoke porabe alkohola. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Vedenjske razlike med hibridnimi mišmi C57BL / 6JxFVB / NJ in C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1: v zvezi z nadzorom vnosa etanola. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Razvoj odvzema alkohola in učinka stopnjevanja v C57BL / 6J. Alkohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Učinki samo-dajanja etanola in etanola / saharoze na hitrost lokalnega izkoriščanja glukoze v možganih pri podganah. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
  • Williams-Hemby L, Porrino LJ. Nizki in zmerni odmerki etanola povzročajo različne vzorce možganskih presnovnih sprememb pri podganah. Alkohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Različni vzorci indukcije DeltaFosB v možganih zaradi zlorabe drog. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekularno stikalo za dolgoročno prilagoditev v možganih. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB se kopiči v populaciji GABAergičnih celic v posteriornem repu ventralnega tegmentalnega območja po zdravljenju psihostimulantov. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Wang YM. Ponovljeno dajanje alkohola različno vpliva na imunoreaktivnost c-Fos in FosB proteina pri miših DBA / 2J. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. Izraz ITF pri mišjih možganov med pridobivanjem alkoholne samouprave. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Cross Ref]
  • Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Pitje alkohola povzroča selektivne spremembe v možganih v izražanju inducibilnih transkripcijskih faktorjev. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Kalivas PW. Kako določimo, katere spremembe, ki jih povzroča zdravilo, so pomembne? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Cross Ref]
  • Posadke FT, Nixon K. Mehanizmi nevrodegeneracije in regeneracije pri alkoholizmu. Alkohol. 2009;44: 115 – 127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Cross Ref]
  • Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Opredelitev učinka odvzema etanola v substratih C57BL / 6 miši. Alkohol. 2006;40: 119 – 126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Porazdelitev urokortina 1 v možganih miši je odvisna od seva. Nevroznanosti. 2005;132: 729 – 740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE. Lezije Edinger-Westphalovega jedra v miših C57BL / 6J motijo ​​hipotermijo in porabo etanola. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Mikroinekcija urokortina 1 v stranski septum miške uravnava pridobivanje in izražanje uživanja alkohola. Nevroznanosti. 2008;151: 780 – 790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Ekspresija urokortina 1 v petih parih linij podgan, selektivno vzgojenih zaradi razlik v pitju alkohola. Psihofarmakologija. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Ryabinin AE, Weitemier AZ. Nevroskopi urokortina 1: občutljivost za etanol in morebitna vključenost v uživanje alkohola. Brain Res Rev. 2006;52: 368 – 380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Cross Ref]
  • Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Samoupravljanje alkohola: vloga mezolimbičnega dopamina. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • McBride WJ, Li TK. Živalski modeli alkoholizma: nevrobiologija vedenja pri pitju alkohola pri glodalcih. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Cross Ref]
  • Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Nevroskopski cilji v nagradi za etanol in odvisnosti. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Intrakranialna samo-dajanje etanola znotraj ventralnega tegmentalnega področja pri samcih podgan Wistar: dokaz za vpletenost dopaminskih nevronov. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Cross Ref]
  • Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Nizki odmerki etanola aktivirajo dopaminergične nevrone v ventralnem tegmentalnem območju. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Cross Ref]
  • Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Etanol poveča hitrost žganja dopaminskih nevronov v predelu ventralnega tegmentalnega področja podgane in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Cross Ref]
  • Heilig M, Koob GF. Ključna vloga za faktor sproščanja kortikotropina v odvisnosti od alkohola. Trendi Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Dyr W, Kostowski W. Dokazi, da je amigdala vključena v zaviralne učinke antagonistov receptorjev 5-HT3 na pitje alkohola pri podganah. Alkohol. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Cross Ref]
  • Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Učinki receptorjev CRF1 in antagonistov opioidnih receptorjev na povečanje pitja alkohola, ki ga povzročajo alkohol, podgane, ki dajejo prednost alkoholu (P). Alkohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Hyytiä P, Koob GF. Antagonizem receptorja GABAA v podaljšani amigdali zmanjša samo-dajanje etanola pri podganah. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Cross Ref]
  • Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Etanol poveča GABAergični prenos na obeh pred- in postsinaptičnih mestih na osrednjih nevronih amygdale podgan. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053 – 2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Intra-amigdala muscimol zmanjša samo-dajanje etanola v odvisnih podganah. Alkohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Cross Ref]
  • Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Zmanjšana eksperimentalna anksioznost in prostovoljna poraba etanola pri podganah zaradi centralnih, vendar ne bazolateralnih amigdalnih lezij. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Cross Ref]
  • Wee S, Koob GF. Vloga dynorphin-kappa opioidnega sistema pri krepitvi učinkov drog. Psihofarmakologija (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Ciljanje dynorphin / kappa opioidnih receptorskih sistemov za zdravljenje zlorabe alkohola in odvisnosti. Alkohol. 2012;46: 359 – 370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Endogena kappa-opioidna mediacija stresno induciranega potenciala etanolno pogojene preferenciale mesta in samoupravljanja. Psihofarmakologija (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Cross Ref]
  • McBride WJ. Osrednje jedro amigdale in učinki vedenja alkohola in alkohola pri glodalcih. Farmakol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. Proti analogu alkoholizma pri miših: faktorji obsega v modelu. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543 – 3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Dole VP, Gentry RT. K analogu alkoholizma pri miših: Merila za prepoznavanje farmakološko motivirane pitje. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469 – 3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Nestler EJ. Molekularna nevrobiologija zasvojenosti. Am J Addict. 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Cross Ref]
  • Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: molekularni posrednik dolgoročne nevronske in vedenjske plastičnosti. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Cross Ref]
  • Franklin KJ, Paxinos G. Mišji možgani v stereotaksičnih koordinatah. 2. San Diego, CA: Akademski; 2001.