DeltaFosB v jedru Nucleus Accumbens regulira okrepljeno instrumentalno vedenje in motivacijo hrane (2006)

POPOLNA ŠTUDIJA

Journal of Neuroscience, 6 September 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006

Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4in Jane R. Taylor1

1.Korespondenco je treba nasloviti na Jane R. Taylor, Oddelek za psihiatrijo, Oddelek za molekularno psihiatrijo, Medicinsko šolo na univerzi Yale, raziskovalne ustanove Ribicoff, Center za duševno zdravje v Connecticutu, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-pošta zaščitena]

Minimalizem

Spremembe v motivaciji so bile vpletene v patofiziologijo več psihiatričnih motenj, vključno z zlorabo snovi in ​​depresijo. Znano je, da ponavljajoča se izpostavljenost zlorabam ali stresu vztrajno spodbuja transkripcijski faktor ΔFosB v jedru nucleus accumbens (NAc) in hrbtni striatum, ki domnevno prispevata k nevroadaptacijam pri dopaminsko regulirani signalizaciji. Malo pa je znanega o posebnem vključevanju ΔFosB v disregulacijo apetitivno motiviranega vedenja. Tukaj smo pokazali, da je inducibilna prekomerna ekspresija ΔFosB v NAc in dorzalni striatum bitransgeničnih miši ali specifično v jedru NAc podgan z uporabo virusnega posredovanega prenosa genov, okrepljene instrumentalne zmogljivosti in progresivnega odziva. Zelo podobni vedenjski učinki so bili ugotovljeni po prejšnji ponavljajoči se izpostavljenosti kokainu, amfetaminu, MDMA [(+) - 3,4-methylenedioxymethamphetamine] ali nikotinu pri podganah. Ti rezultati razkrivajo močno regulacijo motivacijskih procesov z ΔFosB in dokazujejo, da lahko spremembe v genski ekspresiji zaradi indukcije ΔFosB znotraj jedra NAc igrajo ključno vlogo pri vplivu motivacijskih vplivov na instrumentalno vedenje.

Predstavitev

Ponavljajoča izpostavljenost zdravilom povzroča časovno dinamične spremembe v transkripciji genov, ki povzročajo trajne nevroopogone v jedru nucleus accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Ta regija možganov ima ključno vlogo pri postopkih krepitve zdravil in naravnih ojačitev (Kelley in Berridge, 2002), čeprav je malo znanega o transkripcijskih faktorjih, ki vplivajo na vedenje, ki ga motivirajo nenaravni ojačevalci apetita, kot je hrana. ΔFosB je transkripcijski faktor, ki se aktivira v NAc in dorzalni striatum s kronično izpostavljenostjo zdravilu (Konradi et al., 1994; Nye et al., 1995; Chen et al., 1997; Pich et al., 1997; Shaw-Lutchman et al., 2003) in kompulzivno vožnjo koles (Werme et al., 2002). V teh regijah ga povzroča tudi več oblik kroničnega stresa (Perrotti et al., 2004). Izboljšanje procesov okrepitve zdravil, povezanih z indukcijo striatnega ΔFosB, je dobro uveljavljeno (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Vendar posledice povišanih ravni ΔFosB v teh regijah na instrumentalno obnašanje, ki jih motivirajo naravni ojačevalci, pa niso znane.

Učinkovitost instrumentalnih odzivov je nujna sestavina obnašanja, ki povzroča drog, ki lahko postane neregulirana ali nefleksibilna, ko prehaja k zasvojenosti (Jentsch in Taylor, 1999; Berke in Hyman, 2000; Berridge in Robinson, 2003; Everitt in Robbins, 2005). NAc je vključen v več vidikov instrumentalnega vedenja, ki je pomemben za zasvojenost (Balleine in Killcross, 1994; Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002; Di Ciano in Everitt, 2004b; Everitt in Robbins, 2005). Zato je verjetno, da bi nevroopogonitve, ki jih povzročajo droge znotraj NAc, lahko vplivale na izvajanje instrumentalnih ukrepov. Dejansko kronična izpostavljenost kokainu povečuje instrumentalno zmogljivost, okrepljeno s saharozo (Miles et al., 2004) in manipulacije, za katere menijo, da blokirajo nevplastičnost znotraj jedra NAc, vključno z inhibicijo PKA (protein kinaze A) ali sintezo beljakovin, vplivajo na instrumentalno nagrajene odgovore (Baldwin et al., 2002a; Hernandez et al., 2002). NAc jedro posreduje tudi motivacijski vpliv pogojenih vplivov na instrumentalno vedenje (Parkinson et al., 1999; Corbit et al., 2001; Hall et al., 2001; Di Ciano in Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), ki zagotavljajo nevrobiološki substrat, pri katerem lahko indukcija ΔFosB močno vpliva na delovanje in motivacijo za okrepitve apetita, kot so hrana, voda ali droge.

Tukaj smo raziskali učinke ΔFosB na instrumentalno vedenje, ki temelji na hrani, z uporabo dveh komplementarnih genetskih pristopov: (1) inducibilne prekomerne ekspresije ΔFosB znotraj NAc in dorzalnega striatuma bitransgenskih miši (NSE-TAC × TetOp-ΔFosB) in (2) prekomerne ekspresije ΔFosB v jedru NAc specifično z uporabo virusnega prenosa genov pri podganah. Ocenili smo tudi, ali bi predhodna ponavljajoča se izpostavljenost kokainu, amfetaminu, (+) - 3,4-metilendioksimetamfetaminu (MDMA) ali nikotinu v pogojih, o katerih se je poročalo o povečanju ΔFosB, okrepila instrumentalno odzivanje in / ali motivacijo, okrepljeno s hrano, z uporabo progresivnega časovnega razporeda, kot je bilo dokazano za samoupravo, okrepljeno z drogami (Horger et al., 1990, 1992; Piazza et al., 1990; Vezina et al., 2002; Miles et al., 2004). Naši rezultati dokazujejo obstojne učinke ΔFosB na instrumentalno vedenje in kažejo, da lahko ta transkripcijski faktor deluje v jedru NAc kot regulator motivacijske funkcije.

Materiali in metode

Nega živali in živali

Eksperimentalno naivne podgane Sprague Dawley so pridobili od Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Moške bitransgenične 11A miši so bile izvedene iz križanja med homozigotnimi transgenskimi mišmi, ki izražajo nevronsko specifičen enolazni (NSE) -tTA tetraciklinski transaktivatorski protein (linija A) in miši, ki izražajo TetOp (tetraciklin-odzivni promotor) -ΔFosB (linija 11); starševske linije so bile ohranjene na mešanem ozadju (50% ICR in 50% C57BL6 × SJL) (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Ti bitransgenični miši 11A izražajo ΔFosB samo, kadar: (1) oba transgena sta prisotna v isti celici in (2) transkripcijska aktivacija s TTA ni inhibirana s prisotnostjo tetraciklinskih antibiotikov, kot je doksiciklin. Dajanje doksiciklina tem mišim lahko tako izvaja časovno kontrolo nad izražanjem ΔFosB in se uporablja za preprečevanje izražanja med razvojem; dejansko je dajanje doksiciklina povezano z nezaznavno ekspresijo uhajanja ΔFosB (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Poleg tega je bila za trenutne eksperimente izbrana linija 11A bitransgeničnih miši, ker so pokazali vzorec izražanja, ki je primarno omejen na dynorphin vsebujoče striatne nevrone (tako NAc kot dorzalni striatum), zelo podobne vzorcu indukcije ΔFosB s kroničnim drogom izpostavljenost (Kelz et al., 1999). Poleg tega je bila kvantifikacija te striatne ekspresije ΔFosB kvantificirana prej (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Miševi so nastali na jugozahodnem Univerzi v Teksasu, vzdrževali in testirali v objektih Yale. V celotnem obdobju brejosti in razvoja so vse miši vzdrževali doksiciklin do 8 – 9 tednov starosti pri koncentraciji 100 μg / ml v pitni vodi, stanje, za katerega je znano, da vzdržuje TetOp transgene v stanju “off”, in uporabljen začetni 6 tednov brez doksiciklina, ko izraz ΔFosB postane največji (Kelz et al., 1999). Vsi eksperimenti so vključevali primerjavo bitransgenskih miši na ležečem mestu v primerjavi z off doksiciklinom, ki sam po sebi nima vpliva na motivirano vedenje (Kelz et al., 1999; McClung in Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).

Vsi poskusni subjekti so bili nameščeni v parih (podgane) ali v skupinah (miši; od štiri do pet na kletko) v pogojih nadzorovane temperature in vlažnosti pod ciklom svetlobe / temne 12 h (prižgana pri 7: 00 AM in izklop pri 7: 00 PM). Dovoljeno jim je bilo vsaj 7 d, da se prilagodijo stanovanjskim objektom pred vsako študijo. Živali so imele ves čas dostop do vode in imajo omejen dostop do hrane, kot je opisano spodaj. Vsa živalska uporaba je bila izvedena v skladu z navodili Nacionalnega inštituta za zdravje za oskrbo in uporabo laboratorijskih živali in je bila odobrena s strani odborov za nego živali in uporabo na Univerzi Texas Southwestern in Yale University.

Droge

Kokain hidroklorid [prijazno zagotovil Nacionalni inštitut za zlorabo drog (NIDA)], d-amfetamin sulfat (Sigma, St. Louis, MO), MDMA hidroklorid (prijazno, ki ga je zagotovil NIDA), in (-) - nikotinski vodikov tartrat (Sigma) ) raztopimo v sterilni fiziološki raztopini (0.9%) in injiciramo intraperitonalno pri volumnu 5 ml / kg (miši) ali 2 ml / kg (podgane). PH raztopine nikotina smo nastavili z natrijevim bikarbonatom pred injiciranjem.

Virusni vektorji

Virusno posredovan prenos gena je bil izveden, kot je opisano prej (Carlezon et al., 1998; Perrotti et al., 2004). Na kratko, cDNA, ki kodira specifične beljakovine, je bila vstavljena v amplikon HSV-PrPUC herpes simplex virusa (HSV) in pakirana v virus z uporabo pomožnega 5dl1.2. Vektorje, ki poganjajo ekspresijo bodisi HSV-LacZ, ki kodira za kontrolno beljakovino P-galaktozidazo, ali HSV-ΔFosB, kodira za ΔFosB, so bili nato infundirani v NAc jedro v skladu s eksperimentalnim protokolom.

eksperimentalni postopek

Oris.

Eksperiment 1 je preučil učinke prejšnje ponavljajoče se izpostavljenosti zdravilu na instrumentalno zmogljivost, ki je bila okrepljena s hrano, in odziv na progresivno razmerje. Podgane so bile naključno razdeljene v pet poskusnih skupin (n = 9 – 10 / skupina). Te skupine so dobivale injekcije dvakrat na dan (intraperitonealno; pri 9: 00 AM in 5: 00 PM) s fiziološko raztopino ali eno od naslednjih zdravil: nikotin, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokain, 15 mg / kg; ali amfetamin, 2.5 mg / kg za 15 zaporednih dni. Doze so bile izbrane na podlagi naših predhodno objavljenih podatkov (Taylor in Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), in stimulirano z zdravilom lokomotorno stimulacijo smo spremljali na dan zdravljenja 1 in 15. Po 5 d umika so bile živali vzgojene na instrumentalnem odzivu za 10 zaporednih dni in nato testirane na progresivno razmerje, ki se je odzvalo naslednji dan. Dve živali sta bili izključeni iz statistične analize, ker nista pridobili instrumentalnega odziva, saj sta na vsakem od treh zaključnih treningov dosegli največ en aktivni odzivni vzvod.

Poskusi 2 in 3 sta proučevali učinke inducibilne prevelike ekspresije ΔFosB v bitransgenskih miših na instrumentalno zmogljivost in odziv na progresivno razmerje ojačitve. Dokazano je bilo, da je inducibilna prekomerna ekspresija ΔFosB pri teh miših posnemala učinke ponavljajoče se izpostavljenosti zdravilom v lokomotorni aktivnosti in pogojenih paradigmah preferenc na mestu (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Te miši lahko zagotovijo kritične informacije o prispevku striatne ΔFosB k specifičnim vedenjskim procesom. Genotipizirane mišje samce so vzdrževali na doksiciklinu ali pa so jih zamenjali z vodo iz pipe v starosti 8 tednov. Poskusi so bili sproženi po 6 tednih odvzema doksiciklina, pri čemer je bila ekspresija transgena maksimalna (Kelz et al., 1999). V eksperimentu 2 so bile živali (n = 16) omejene na živila in trenirane na spodaj opisanem instrumentalnem postopku (glej spodaj, Instrumentalni odziv in postopno testiranje razmerja) za 10 zaporednih dni. Po zaključku instrumentalnega testiranja je bila pri teh miših ovrednotena kokainsko inducirana lokomotorna stimulacija. V eksperimentu 3 je bila ločena skupina miši (n = 18) usposobljena za instrumentalni odziv za 10 zaporedne dni pod pogoji, v katerih je bilo dostavljenih največ 50 ojačevalcev. Na dan 11 so bile vse miši testirane s postopnim odzivom. Na dan 12 smo določili učinke okrepitvene devalvacije s prefeatingom na odzivno progresivno razmerje.

Poskusi 4 in 5 sta proučevali učinke virusne posredne prekomerne ekspresije ΔFosB specifično znotraj NAc. Eksperiment 4 je preizkusil učinke prekomernega izražanja ΔFosB na instrumentalno zmogljivost. Tu so podgane infundirali s HSV-ΔFosB (n = 8) ali HSV-LacZ (n = 8) v NAc jedru in usposobili na instrumentalnem postopku, ki se je začel kasneje z 40 h. Po dnevnih treningih 10 so bile osnovne vrednosti aktivnosti ocenjene za vse živali v opremi za spremljanje gibalne aktivnosti, kot je opisano spodaj (glej spodaj, Lokomotorna aktivnost). Eksperiment 5 je ovrednotil učinke prekomerne ekspresije NAc ΔFosB posebej na odziv, ki se je odzval na progresivno razmerje. Tu so podgane sprva trenirali za 15 zaporedne dni, dodeli poskusnim skupinam in nato infundirali s HSV-ΔFosB (n = 8) ali HSV-LacZ (n = 7) v NAc jedru. Živali smo pustili nepreizkušene in neobdelane za 4d, da smo omogočili vrh ΔFosB. Na dan 5 po infuziji so vse živali testirali na pritisk vzvoda po progresivnem urniku. Po zadnjem dnevu testiranja so ubili vse podgane in postavili infuzijske kanile v NAc jedro, ki smo jih preverili histokemično. Na podlagi postavitve infuzijskih kanil smo iz eksperimenta 4 in enega podgane iz poskusa 5 izključili dva podganja.

Karakterizacija izražanja genov je bila narejena v ločeni skupini živali. Tukaj je bil HSV-LacZ infundiran v NAc jedro in živali so bile kasneje ubite 3 d. Ekspresijo P-galaktozidaze smo nato naknadno ocenili imunohistokemično.

Lokomotorna aktivnost.

Lokomotorno aktivnost merimo z uporabo merilnikov aktivnosti (Digiscan monitor aktivnosti živali; Omnitech Electronics, Columbus, OH). Merilniki aktivnosti so bili opremljeni z dvema vrstama infrardečih fotosenzorjev, vsaka vrsta, sestavljena iz senzorjev 16, je postavila 2.5 cm narazen. Merilnike aktivnosti smo nadzorovali in podatke iz merilnikov aktivnosti, ki smo jih zbrali na PC računalniku z uporabo programske opreme Micropro (Omnitech Electronics).

Poskusne živali so bile postavljene v prozorne plastične škatle (25 × 45 × 20 cm), ki so bile dane v merilnike aktivnosti. Živali so bile sprva dovoljene, da se prilagodijo na opremo za beleženje gibalne aktivnosti za 30 min. V nekaterih poskusih so živali nato odstranili, injicirali s kokainom, amfetaminom, nikotinom ali vehiklom v skladu z eksperimentalno zasnovo in jih dali nazaj v škatle. Potem so zabeležili lokomotorno aktivnost za 60 min, z začetkom 5 min po injiciranju zdravila, da bi se izognili nespecifični hipermotilnosti, povzročeni z injekcijo. Vsi poskusi so bili izvedeni med svetlobno fazo živali (med 9: 00 AM in 6: 00 PM).

Testiranje z instrumentalnim odzivom in progresivnim razmerjem.

Instrumentalno odzivanje je bilo ocenjeno z uporabo standardnih operantnih komor za podgane (30 × 20 × 25 cm) ali miši (16 × 14 × 13 cm), ki jih nadzoruje programska oprema MedPC (Med Associates, St. Albans, VT). Vsaka komora je bila nameščena v zvočno izolirno zunanjo komoro, opremljeno z generatorjem belega šuma in ventilatorjem za zmanjšanje vpliva zunanjega hrupa. Hišna svetloba, nameščena na zadnji steni, je osvetlila komoro. Razdeljevalec peletov je kot ojačevalec v revijo dostavil hrano pelete (20 ali 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ). Vhodi glave so bili zaznani s fotocelico, nameščeno nad ojačitveno posodo. V tej reviji je bila spodbuda svetloba. Za podgane je bil na vsako stran revije postavljen en vzvod. Za miši sta bili na zadnji steni komore (npr. Nasproti ojačevalne reže) postavljeni dve odprtini za nos.

Med 5 d tik pred začetkom usposabljanja so bile živali omejene na 90 min dostop do hrane na dan in izpostavljene živilskim peletom na osnovi zrna (miši, 20 mg; podgane, 45 mg) v svojih kletkah. Med preskusnim obdobjem so bili v operantnih komorah občasno na voljo hranilni peleti po vedenjskem protokolu (glej spodaj) in v neomejenih količinah v domači kletki za 90 min, začenši z 30 min po dnevnem testiranju. Ta urnik dostopa do hrane omogoča, da vsaka posamezna žival doseže svojo individualno točko sitosti in zmanjša variabilnost, ki jo povzroča konkurenca med prevladujočimi in podrejenimi živalmi. V naših rokah ta urnik omogoča počasno povečanje telesne mase po začetni izgubi teže 85 – 90% teže proste prehrane. V celotnem poskusu smo spremljali uteži živali.

Vsi subjekti so bili sprva navajani na testno napravo za 2 d; Med temi sejami so bili peleti za hrano dostavljeni v revijo ojačevalca po določenem časovnem razporedu 15 s (FT-15). Naslednji dan so udeleženci prejeli vsakodnevne treninge za 10 zaporednih dni. Odziv na hrano je bil preizkušen na podlagi predhodno objavljenih instrumentalnih postopkov (Baldwin et al., 2002b). Odziv na pravilen (tj. Aktivni) vzvod / nosno luknjo je bil okrepljen, odziv na drugi (neaktivni) vzvod / nosnik pa ni imel programiranih posledic. Položaj aktivnega nosa ali vzvoda (levo / desno) je bil uravnotežen za vse eksperimentalne skupine. Zaključek zahteve glede odziva (glej spodaj) je povzročil začetek stimulacijske svetlobe v reviji, kasneje pa je bil po 1-u dostavljen en sam hranilni pelet. Dve sekundi kasneje se je svetloba dražljaja izklopila. Prvi 10 ojačevalci so bili pridobljeni po uspešnem zaključku odziva v skladu s časovnim načrtom s fiksnim razmerjem (FR1), po katerem so bili peleti na voljo po odzivu na urniku spremenljivega razmerja (VR2). Seja je trajala 15 min.

Poskusi 3 (miši) in 5 (podgane) so uporabili alternativne načrte usposabljanja, da bi se izognili možnemu vplivu razlik v instrumentalni zmogljivosti med treningom na poznejše odzivno progresivno razmerje (podrobno spodaj). V eksperimentu 3 so miši trenirali na urniku FR1 za 2 d in nato na urniku FR2 za 8 d. Prvi 3 d testiranja je uporabil 60 min. Zadnjih 7 dni usposabljanja je bila seja prekinjena, ko je bila pridobljena okrepitev 50. V eksperimentu 5 so podgane trenirali na urniku FR1 / VR2 v sejah 15 min, kot je opisano zgoraj za vse druge poskuse z dvema izjemama. Najprej smo dobili največje število peletov / sej 150. Drugič, te živali so prejele dodatne dni usposabljanja 5 (tj. Skupaj 15 d), da bi omogočile vzpostavitev stabilnega delovanja pred kakršno koli eksperimentalno manipulacijo.

Živali so bile testirane tudi na odziv za hrano na progresivnem časovnem razporedu ojačitve. V tem preskusu je bila zahteva po odzivu za pridobitev hrane sprožena kot urnik FR1, vendar se je postopoma povečevala za 2, da bi dobila poznejšo ojačitev (tj. Odzive 1, 3, 5, 7…, X + 2). V poskusu zdravljenja z zdravili z uporabo podganah se je časovni razpon postopoma povečal za 5, kar je privedlo do končnega razporeda 1, 6, 11, 16…, X + 5. Vsi drugi parametri so ostali enaki zgoraj opisanemu postopku usposabljanja. Preskus je bil zaključen, ko ni bil opravljen noben aktivni odziv za 5 min.

Devalvacija okrepitve.

Učinek okrepitvene devalvacije je bil preučen z uporabo ojačitveno specifičnega prefeinga. Tu so imeli miši dovoljeno, da med 3 h jedo neomejene živilske pelete na osnovi zrna v svoji kletki pred testiranjem na progresivnem časovnem razporedu ojačitve, kot je opisano zgoraj.

Kirurške tehnike.

Živali smo anestezirali z uporabo Equithesina [zmes, ki je vsebovala pentobarbital (35 mg / kg) in kloral hidrat (183.6 mg / kg) v etanolu (10% v / v) in propilenglikol (39% v / v); xNUMX ml / kg, ip]. Cannulas (Plastics One, Roanoke, VA) so bili kirurško vsajeni, usmerjeni nad jedrom NAc, z uporabo Kopfove stereotaktične opreme. Uporabljene stereotaktične koordinate glede na bregmo so bile naslednje: anterior / posterior, + 4.32 mm; stransko / medijalno, ± 1.5 mm; ventralno / hrbtno, -1.5 mm (Paxinos in Watson, 1986). Kanile so bile pritrjene na lobanjo z vijaki in zobnim cementom. Obturatorji so bili postavljeni v vodilne kanile, da se prepreči blokiranje. Po operaciji so bile živali podvržene standardni postoperativni oskrbi in so jim omogočili, da se pred začetkom katerega koli eksperimenta opomorejo na 5 d.

Infuzije.

Intracerebralne infuzije virusnih vektorjev so bile izvedene dvostransko 40 h pred začetkom usposabljanja (glejte spodaj). Injekcijske brizge (merilnik 31), ki segajo do 1 mm pod konico vodilnih kanil, so se počasi istočasno spustile v levo in desno NAc, in 1.0 μl / stran je bil infundiran v obdobju min 4 pri hitrosti infundiranja 0.25 μl / min z uporabo mikroinfuzijske črpalke (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Infuzijske igle so po končanem infundiranju ostale na mestu 1 min in zamenjali lutke s kanilom. Namestitve kanile so bile histološko preverjene po zaključku vedenjskih poskusov (glej sliko 6B), in samo živali z pravilno nameščenimi kanilami so bile vključene v statistično analizo eksperimentalnih podatkov.

Histološke analize in imunsko barvanje.

Po zaključku poskusov so živali, ki so bile deležne operacije kot del poskusa, anestezirane z Equithesinom in perfundirane transkardialno z 0.1 m PBS (5 min) in 10% formalinom (10 min) po standardnih postopkih. Možgani so bili postavljeni v formalin in nato postavljeni v raztopino saharoze s fosfatnim pufrom (30%). Vsi možgani so bili nato razrezani v sekcijah 40 μm na mikrotomu in uporabljeni za histološko analizo namestitve kanile in ekspresije proteina.

Namestitev kanile je bila izvedena v odsekih, obarvanih z nevtralno rdečo barvo in nameščenih na mikroskopskih stekelcih v destiliranem plastifikatorju in ksilenu (DPX) po dehidraciji etanola. Imunohistokemija je bila izvedena, kot je opisano prej (Hommel et al., 2003). Skratka, ekspresija P-galaktozidaze po infuziji HSV-LacZ je bila določena z imunofluorescentnim barvanjem z uporabo primarnega protitelesa kozjega anti-P-galaktozidaze (1: 5000; Biogeneza, Kingston, NH). Po inkubaciji čez noč, sekcije speremo in nato inkubiramo s fluorescentnim osličkim protitelesom proti kozi, konjugiranim na Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Sekcije so ponovno sprane, nato sledi dehidracija etanola in vgradnja v DPX. Sosednje kontrolne sekcije so bile obravnavane identično brez vključitve primarnih protiteles. Imunofluorescenco smo ocenili pri 520 nm z uporabo a Zeiss (Oberkochen, Nemčija) mikroskop s FITC filtrom in slike, zajete pri enakih časih izpostavljenosti z Zeiss Axiovision digitalni slikovni sistem.

Statistika

Podatki iz vseh poskusov so bili ovrednoteni z enosmernim, dvo- ali trismernim ANOVA-jem, čemur je sledil Scheffejev ali Dunnettov post hoc test, pri čemer je bilo po potrebi popravljeno za več primerjav z uporabo Holmovega zaporednega testa zavrnitve. Vrednost p ≤ 0.05 je bila statistično pomembna.

Rezultati

Eksperiment 1: učinki ponavljajoče se izpostavljenosti zdravilu na instrumentalno učinkovitost in odziv na progresivno razmerje

Da bi potrdili, da je naša paradigma ponavljajoče se izpostavljenosti zdravilu povzročila funkcionalno pomembne nevroadaptacije, smo najprej ocenili lokomotorno senzibilizacijo kot prototipno vedenjsko merilo kroničnega delovanja drog. Podganam so dajali injekcije nikotina (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokaina (15 mg / kg) ali amfetamina (2.5 mg / kg) dvakrat na dan, lokomotorno aktivnost pa so testirali po prvi injekciji. dnevi zdravljenja 1 in 15 (dodatno sliko 1A – E, na voljo na www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Statistična analiza je pokazala pomembno interakcijo zdravljenja po dnevu (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Z izjemo MDMA (p = 0.62) so vsa zdravila inducirala bistveno večjo lokomotorno aktivnost (tj. Senzibilizacijo) na dan 15 v primerjavi z dnevnim 1 (nikotin, p ≤ 0.001; kokain, p ≤ 0.001; amfetamin, p ≤ 0.01). Ponavljajoče injekcije slanice niso imele učinka. Nobena od zdravil za zdravljenje ni spremenila izhodiščne lokomotorne aktivnosti, izmerjene med obdobjem navajanja na dan 15 (dodatek Slika 2A, ki je na voljo pri www.jneurosci.org kot dopolnilni material).

Pet dni po zadnjem injiciranju drog smo preučevali učinke predhodne ponavljajoče se izpostavljenosti nikotinu, MDMA, kokainu ali amfetaminu na instrumentalno vedenje, ojačano s hrano. Podatki so predstavljeni za vsako zdravilo posebej Slika 1A – H z isto kontrolno skupino za slanico za primerjave. Ugotovili smo, da je predhodna izpostavljenost vsakemu od teh zdravil pomembno in selektivno povečala instrumentalno odzivanje, ojačano s hrano (zdravljenje z vzvodom po dnevu treninga, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc analiza: nikotin, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; kokain, p ≤ 0.01; amfetamin, p ≤ 0.001). Vztrajno zvišanje vrednosti instrumentalnega odziva, opaženo pri asimptotični učinkovitosti, je pokazalo možno povečanje motivacije, skladno s predhodno poročanimi povečanji po večkratni izpostavljenosti psihostimulantom (glejte razpravo). Zato smo preverili, ali je predhodna ponovljena izpostavljenost drog izboljšana z uporabo progresivnega časovnega razporeda. Statistični učinek predhodne izpostavljenosti zdravilu na odziv na aktivni vzvod (zdravljenje z interakcijo z vzvodom, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Slika 2A) in končno točko preloma (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Slika 2B). Dodatna analiza je pokazala, da so vsa zdravljenja povečala tako število aktivnih odzivov (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; kokain, p ≤ 0.001; amfetamin, p ≤ 0.001) in lomno točko (nikotin, p ≤ 0.001; MDMA). , p ≤ 0.01, kokain, p ≤ 0.0001, amfetamin, p ≤ 0.0001) v skladu z učinkom teh zdravljenj na motivacijo. Glede na pomanjkanje učinka zdravil na izhodiščno lokomotorno aktivnost in pomanjkanje učinka na neaktivne pritisne ročice ni verjetno, da bi povečan odziv na hrano v teh razmerah odražal nespecifično povečanje motorične aktivnosti.

Slika 1.

Vpliv predhodnih ponavljajočih se injekcij nikotina (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaina (15 mg / kg) ali amfetamina (2.5 mg / kg) dvakrat na dan za 15 d ob poznejšem instrumentalnem obnašanju. Živali so bile testirane skupaj, vendar so zaradi jasnosti učinki vsakega zdravila predstavljeni ločeno, z uporabo iste kontrolne skupine, ki je bila zdravljena s slanico. A (aktivni odzivi) in B (neaktivni odzivi) kažejo učinke predhodne izpostavljenosti nikotinu; C, D, MDMA; E, F, kokain; G, H, amfetamin. Podatki so predstavljeni kot sredstva ± SEM.

Slika 2.

Učinek predhodnega ponovljenega zdravljenja (dvakrat na dan, 15 dni) s fiziološko raztopino, nikotinom (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokainom (15 mg / kg) ali amfetaminom (2.5 mg / kg) na odziv instrumenta na progresivnem razporedu razmerja ojačitve. Podatki so predstavljeni kot povprečje ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, fiziološka raztopina; Nic, nikotin; Coc, kokain; Amf, amfetamin; PR, progresivno razmerje.

Prejšnja izpostavljenost zdravilu tudi ni vplivala na telesno težo, zabeleženo pred omejitvijo hrane, na prvi ali zadnji dan instrumentalnega usposabljanja ali neposredno pred testom progresivnega razmerja (dodatek Slika 2B, ki je na voljo na: www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Omejen dostop do hrane za 3 d je sprva zmanjšal telesno težo na povprečno vrednost 91 – 92% teže proste prehrane. Na koncu vedenjskega testiranja so se uteži vrnile na 97 – 99% predrestrikcijske telesne teže in niso opazili razlik med živalmi, izpostavljenimi zdravilu, in živalmi, ki so bile zdravljene s slanico. Spremembe telesne teže in razlike v lakoti ali apetitu ne bi smele bistveno prispevati k opažanju povečanja instrumentalne zmogljivosti ali motivacije.

Eksperiment 2: inducibilna prekomerna ekspresija ΔFosB v bitransgenskih miših; instrumentalna izvedba

V nadaljevanju smo preverili, ali je bila povečana tudi instrumentalna zmogljivost pri bitransgenskih miših, ki inducibilno prekomerno izražajo ΔFosB z izrazito selektivnostjo v NAc in dorzalnem striatumu (Kelz et al., 1999). V tem poskusu smo miši s prekomerno ekspresijo ΔFosB primerjali s kontrolami littermate, ki ne prekomerno izražajo ΔFosB, ker se vzdržujejo na doksiciklinu (glej Materiali in metode). Ugotovili smo, da je prekomerna ekspresija ΔFosB pomembno povečala odziv na hrano (izražanje genov z vzvodom po dnevu treninga, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Slika 3A). Število odzivov, ki so nastali v neaktivni odprtini, se med obema skupinama ni razlikovalo (Slika 3B). Ti podatki skupaj kažejo, da je prekomerna ekspresija ΔFosB v NAc in dorzalni striatum selektivno povečala instrumentalno učinkovitost

Slika 3

Vpliv inducibilne prevelike ekspresije ΔFosB v bitransgenskih miših na instrumentalno zmogljivost. A, Aktivni odgovori. B, Neaktivni odzivi. Podatki so predstavljeni kot sredstva ± SEM.

Da bi izključili, da bi se povečanje instrumentalne zmogljivosti pri živalih s prekomerno ekspresijo ΔFosB lahko pojasnilo s spremembami apetita ali lakote, je bila telesna teža zabeležena pred omejitvijo hrane in na prvem in zadnjem dnevu treninga. ΔFosB ni vplival na telesno maso pred omejitvijo hrane, niti ni vplival na telesno maso med vedenjskim testiranjem. Tu je omejen dostop do hrane za 3 d zmanjšal telesno težo na povprečje 87 – 89% teže proste prehrane. Na koncu vedenjskega testiranja so bile teže živali enake 97-99% telesne teže predrastrikcije, pri čemer so enakovredne spremembe opazili pri miših ΔFosB in kontrolnih miših (dopolnilni sl. 3A, na voljo na: www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Zato je malo verjetno, da bi potencialni učinki prekomerne ekspresije ΔFosB na lakoto ali apetit lahko bili razlog za izboljšanje opaženega instrumentalnega odziva.

Ko je bilo testiranje na instrumentalnem delovanju končano, prekomerna ekspresija ΔFosB ni spremenila izhodiščne lokomotorne aktivnosti, izmerjene v obdobju 30 min (dopolnilna slika 3B, na voljo pri www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Ta ugotovitev podpira stališče, da nespecifična sprememba v dejavnosti ne prispeva k izboljšani instrumentalni zmogljivosti, opaženi pri teh živalih. Poročali so, da imajo ΔFosB prekomerno izražene bitransgenske miši povečan lokomotorni odziv na akutni in ponavljajoči se kokain (Kelz et al., 1999). Ker smo uporabili nekoliko drugačen urnik umika iz doksiciklina, da bi inducirali ekspresijo genov (6 tedni z omejitvijo hrane), smo se odločili za potrditev tega fenotipa. Dejstvo je, da so prekomerno izražene miši ΔFosB pokazale bistveno večje povečanje lokomotorne aktivnosti pri injiciranju s kokainom v primerjavi z nadzorom, opravljenim na doksiciklinah (zdravljenje z gensko ekspresijo, F \ t(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (dodatno sliko 3C, na voljo na www.jneurosci.org kot dopolnilni material).

Eksperiment 3: inducibilna prekomerna ekspresija ΔFosB v bitransgenskih miših; progresivno razmerje

Glede na to, da predhodna izpostavljenost drog povzroča striatno ΔFosB (Nestler et al., 2001) in ugotovljeno je bilo, da povečuje odziv na progresivno razmerje, nato pa smo preverili, ali transgena striatna prekomerna ekspresija ΔFosB prav tako poveča učinkovitost pri progresivnem časovnem razporedu ojačitve. Nova skupina miši je bila usposobljena na instrumentalnem odzivu pod pogoji (glej Materiali in metode), ki niso pokazali pomembnih razlik v instrumentalni zmogljivosti pred testiranjem na progresivno razmerje (F)(1,16) <1). V preskusu progresivnega razmerja pa smo opazili pomembno ekspresijo genov z vzvodom (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Slika 4A) in ugotovili, da so ΔFosB-prekomerno izražene miši v primerjavi z kontrolnimi mišmi za littermate, vzdrževane na doksiciklinu, naredile večje število aktivnih odzivov (p <0.05), medtem ko se število neaktivnih odzivov ni razlikovalo. ΔFosB-prekomerno izražene miši so prav tako dosegli višjo točko prekinitve (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Slika 4B). Ti podatki kažejo, da kot pri prejšnji izpostavljenosti psihostimulantom, prevelika ekspresija ΔFosB s striatami poveča motivacijo. Ker se število neaktivnih odzivov pri miših s prekomerno ekspresijo ΔFosB ni spremenilo, ni verjetno, da bi nespecifično povečanje aktivnosti prispevalo k tem učinkom. To stališče je bilo dodatno podprto z ocenami izhodiščne lokomotorne aktivnosti, pri katerih ni bilo razlike med mišmi, ki so prekomerno izražale ΔFosB in kontrolne miši za littermate, ki so se vzdrževale na doksiciklinu. Pri merjenju na dan testiranja ni bilo opaziti nobenih velikih razlik v telesni masi med prekomerno ekspresijo ΔFosB in kontrolnimi živalmi. Čeprav bodo ΔFosB-prekomerno izražene živali sproščale več instrumentalnega odgovora na hrano, se zdi, da ne uživajo več hrane, ko je prosto na voljo. Najverjetnejša razlaga za to opažanje je, da čeprav motivacija določa, kako težko bo žival delala, da bi pridobila okrepitev, številni dodatni dejavniki (apetit, sitosti, presnovno stanje itd.) Vplivajo na prehranjevalno vedenje in dejansko porabo hrane.

Slika 4.

Učinek inducibilne prekomerne ekspresije FosB pri bitransgenih miših na instrumentarni odziv na progresivni urnik ojačitve, pred in po devalvaciji ojačevalca, ki jo povzroči sitost. A, B, izhodišče: odzivi vzvoda (A), prelomna točka (B). C, D, Po razvrednotenju ojačevalnika: odzivi vzvoda (C), prelomna točka (D). Podatki so predstavljeni kot povprečje ± SEM. * p <0.05.

Tukaj uporabljene ΔFosB bitransgenske miši izražajo ΔFosB v celotnem striatumu. Medtem ko je bil ventralni striatum (vključno z NAc) vpleten v motivacijske procese, naj bi bil hrbtni striatum vključen v pridobivanje instrumentalnih navad (Yin et al., 2004; Faure et al., 2005). Čeprav nismo opazili razlik v instrumentalni zmogljivosti med fazo usposabljanja z uporabo nizkega razmerja razmerja z maksimalnimi omejitvami okrepitve, so razmere relativno odporne na razvoj instrumentalnih navad (Dickinson, 1985), možno je, da bi vzpostavitev navad lahko vplivala na odziv v okviru progresivnega časovnega razporeda. Ta možnost je bila preizkušena neposredno z ocenjevanjem učinka okrepitvene devalvacije s prefevanjem na odzivno progresivno razmerje. Takšno prefeating zapre učinek ΔFosB na progresivno razmerje odziva, brez razlik v odzivnih ali prekinitvenih točkah, opaženih med ΔFosB prekomerno ekspresijo in kontrolnimi mišmi (F).(1,16) <1) (Slika 4C, D). Ti podatki skupaj kažejo, da striatna prekomerna ekspresija ΔFosB ni spremenila občutljivosti na spremembe vrednosti nagrajenih rezultatov z uporabo tega urnika testiranja. Namesto tega se zdi, da je instrumentalni odziv, opažen pri testu progresivnega razmerja, ciljno usmerjen in da je povečana točka prekinitve, opažena pri miših s prekomerno ekspresijo ΔFosB, verjetno posledica povečane motivacije in ne povišanega odziva na navado.

Eksperiment 4: virusno posredovana prekomerna ekspresija ΔFosB v jedru NAc: instrumentalna zmogljivost

Da bi ocenili, ali bi lahko prekomerna ekspresija ΔFosB selektivno v NAc pojasnila vedenje, ugotovljeno pri bitransgenskih miših, smo infuzijo HSV-ΔFosB ali HSV-LacZ kot kontrolo, selektivno v jedro NAc podgan in preučili učinek te manipulacije na hrano. - okrepljena instrumentalna zmogljivost (Slika 5A, B). Po usposabljanju v revijah so HSV-ΔFosB ali HSV-LacZ infundirali v jedro NAc 40 h pred začetkom vedenjskega testiranja. Položaj infuzije in obseg virusne ekspresije, posredovane z virusom, sta prikazana v Slika 6, A in B. NAc infuzije HSV-ΔFosB so povzročile trajno povečanje števila aktivnih odzivov (izražanje genov z vzvodom, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Slika 5A), ki je trajala ves čas poskusa. Ti učinki so bili selektivni, ker ni bilo pomembnih učinkov prekomerne ekspresije ΔFosB v jedru NAc na število neaktivnih odzivov (Slika 5B) ali na osnovno lokomotorno aktivnost, zabeleženo dan po zaključku poskusa (podatki niso prikazani). Prekomerna ekspresija ΔFosB v NAc je tako posnemala vedenjske učinke predhodne izpostavljenosti zdravilu ali striatno prekomerno izražanje ΔFosB.

Slika 5.

Vpliv infuzij HSV-ΔFosB na jedro NAc pred treningom instrumentalnega odziva. A, Aktivni odgovori. B, Neaktivni odzivi. Podatki so predstavljeni kot sredstva ± SEM.

Slika 6.

A, Namestitev mest infuzije za eksperimente z virusnimi vektorji. Vrh, napolnjeni črni krogi ustrezajo predvidenemu mestu infuzije. Samo infuzije v ∼0.5 mm tega območja (tj. Znotraj jedra NAc), kot je označeno s krogom, se je štelo za sprejemljivo. Živali z infuzijami izven tega območja so bile izključene iz statističnih analiz. Spodaj, mesto infuzije znotraj NAc v reprezentativni živali. B, Imunohistokemično preverjanje izražanja beljakovin po infuziji HSV-LacZ. Zgornje plošče prikazujejo ekspresijo β-galaktozidaze znotraj jedra NAc (povečava 2.5 in 10 ×). Spodnje plošče prikazujejo pomanjkanje imunofluorescence v sosednjih kontrolnih odsekih z uporabo istega imunohistokemičnega postopka brez vključitve primarnega protitelesa.

Eksperiment 5: prekomerno izražanje ΔFosB v jedru NAc: virusno posredovanje: progresivno razmerje

Končni eksperiment je neposredno določil, ali je omejena prekomerna ekspresija ΔFosB v jedru NAc z uporabo pristopa prenosa genov z virusom zadostna za povečanje motivacije pri podganah. Pri tem je bil HSV-ΔFosB infundiran šele po zaključku instrumentalnega usposabljanja, kar je odpravilo vsak potencialni vpliv prekomerne ekspresije ΔFosB med treningom na poznejšem testu progresivnega razmerja. Nova skupina podgan je bila, kot prej, trenirana in razdeljena na uravnotežene eksperimentalne skupine na podlagi njihove uspešnosti v zadnjih dneh usposabljanja. Živali so naknadno prejele dvostranske infuzije HSV-ΔFosB ali HSV-LacZ v NAc jedro in so bile testirane na progresivnem razmerju, ki se je odzvalo po 5 d prekomerne ekspresije. Statistična analiza je pokazala pomembno izražanje genov z interakcijo z vzvodom (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Slika 7A). Podgane, ki so bile infundirane s HSV-ΔFosB, so imele bolj aktivne odzive (p ≤ 0.01) v primerjavi s tistimi, ki so bile infundirane s HSV-LacZ, medtem ko odziv na neaktivni vzvod ni bil prizadet. V skladu s tem povečanjem so imele tudi podgane, ki so bile infundirane s HSV-ΔFosB, višjo točko prekinitve (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Slika 7B) kot živali, ki so bile infundirane s HSV-LacZ. Učinek ΔFosB na izhodiščno lokomotorno aktivnost, ki je bila testirana 1 h pred preskusom progresivnega razmerja (dopolnilni sl. 4A, na voljo pri www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Prav tako ni bilo razlik v telesni teži na dan preskušanja progresivnega razmerja (dodatek Slika 4B, ki je na voljo na www.jneurosci.org kot dopolnilni material). Te ugotovitve potrjujejo naša opažanja s transgenskimi ΔFosB prekomerno ekspresirajočimi mišmi in kažejo, da je selektivna prekomerna ekspresija ΔFosB v NAc zadostna za povečanje motivacije, povezane s hrano.

Slika 7.

Vpliv infuzij HSV-ΔFosB 5 d pred preskušanjem na instrumentarni odziv na progresivno razmerje ojačitve. A, odzivi vzvoda. B, točka preloma. Podatki so predstavljeni kot povprečje ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.

 Razprava

Ta študija dokazuje, da čezmerna ekspresija ΔFosB znotraj NAc izboljša instrumentalno vedenje, ki je ojačano s hrano.r. Prejšnja izpostavljenost kokainu, amfetaminu, MDMA ali nikotinu je povzročila trajno povečanje poznejše instrumentalne učinkovitosti. Ta izpostavljenost drogam je povečala tudi obnašanje hrane, ki je bilo motivirano s hrano, pod postopnim časovnim razporedom okrepitve. Ti učinki predhodne izpostavljenosti zdravilu so bili oponašani z omejeno prekomerno ekspresijo ΔFosB v striatumu, z uporabo inducibilnih mišjih bitransgenskih (NSE-TA × TetOP-ΔFosB) ali z uporabo novega virusnega vektorja za selektivno izražanje ΔFosB v NAc. Predvsem se je pokazala prekomerna ekspresija ΔFosB v jedru NAc, potem ko je bil instrumentalni odziv že dosežen, povečana motivacija za hrano pod progresivnim časovnim razporedom. Naše ugotovitve skupaj identificirajo ΔFosB v jedru NAc kot potencialni posrednik nevrooptihanja, ki jo povzroča zdravilo in ki lahko spodbudi instrumentalno vedenje, s čimer se poveča vloga tega transkripcijskega faktorja, da vključi procese, ki so pomembni za motivacijske vplive na učinkovitost vedenja, okrepljenega s hrano. Prav tako dvigujejo možnost, da lahko pogoji, ki povzročajo izražanje ΔFosB v NAc, vplivajo na motivacijske lastnosti tako naravnih kot tudi ojačevalec zdravil..

ΔFosB se kopiči v dynorphin-izražajočem mediju kostnih nevronov obeh NAc in hrbtnega striatuma po kronični, vendar ne akutni izpostavljenosti zlorabam drog. Ta regionalni vzorec izražanja je reproduciran v inducibilnih bitransgeničnih ΔFosB-prekomerno izraženih miših, uporabljenih tukaj. V teh miših, povišane striatalne ravni ΔFosB povečajo občutljivost živali na kokain in morfij, merjeno s kondicijsko preferenco (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Prav tako povečuje progresivno razmerje, ki se odziva na kokain, kar kaže, da je motivacija za samo-dajanje kokaina povečana s preveliko ekspresijo striatnih ΔFosB (Colby et al., 2003). Tukaj smo ugotovili, da je prevelika ekspresija ΔFosB pri striatih pri teh miših prav tako povečala progresivno razmerje, ki se odziva na ojačevalec hrane, in da so bili ti učinki reproducirani z omejeno prekomerno ekspresijo ΔFosB v jedru NAc pri podganah. Naši podatki kažejo, da lahko ΔFosB deluje kot transkripcijski modulator motivacije za primarne ojačevalce, naj bo to hrana, droge ali morda vadba, kar je v skladu s predhodnimi ugotovitvami, da se striatna ekspresija ΔFosB poveča po kroničnem kroženju kolesa ali saharoze (McClung et al., 2004). Ti podatki nakazujejo, da lahko prekomerna ekspresija ΔFosB z NAc poveča motivacijski učinek tako naravnega kot tudi ojačevalnega zdravila.

Podregije NAc so bile upravičene do diferencialnega posredovanja vpliva pavlovskih ali instrumentalnih spodbujevalnih procesov na instrumentalno delovanje. (Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002), ker lahko bolj splošne motivacijske vplive na instrumentalno zmogljivost kodirajo druge regije, kot je osrednje jedro amigdale, (Corbit in Balleine, 2005). NAc jedro pa je bilo tudi predlagano kot kritično mesto za pridobitev ciljno usmerjenega instrumentalnega učenja (Smith-Roe in Kelley, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004). Pokazali smo enakovredne učinke predhodne izpostavljenosti zdravilom in transgene striatne prevelike ekspresije ΔFosB na izboljšanje instrumentalnega vedenja. Infuzije HSV-ΔFosB, ki so bile omejene na jedro NAc, so prav tako povečale instrumentalno odzivanje, ojačano s hrano. Čeprav ti poskusi ne izključujejo prispevka hrbtnega striatuma pri teh obnašanjih, močno kažejo, da so spremembe v genski ekspresiji v NAc, ki jih povzroča ΔFosB, dovolj za povečanje odziva na živila. Ker se je odziv na progresivno razmerje povečal tudi, ko je bil ΔFosB izražen, ko je bil predhodno dosežen stabilen instrumentalni učinek, se zdi verjetna vloga motivacijskih vplivov na instrumentalno vedenje. Možnosti, da naše manipulacije vplivajo tudi na procese instrumentalnega učenja, pa ni mogoče popolnoma izključiti. V podporo našim ugotovitvam se je povečanje instrumentalne učinkovitosti opazilo po predhodni izpostavljenosti peroralnemu kokainu (Miles et al., 2004) je trdil, da vključuje motivacijske spremembe, ki so skladne s sposobnostjo kroničnega nikotinskega zdravljenja, da poveča progresivno razmerje, ki se odziva pri miših (Brunzell et al., 2006). Poleg tega so miši za izločanje dopaminskih transporterjev, pri katerih so povečane ravni zunajceličnega dopamina, pokazale povečano imunoreaktivnost ΔFosB in motivacijo, okrepljeno s hrano, vendar ne spremenjeno učenje (Cagniard et al., 2006). Poleg tega, smo ugotovili, da prekomerna ekspresija striatnih ΔFosB pri miših ni vplivala na zmogljivost, ko je bila hrana »devalvirana« s prefeiranjem. Ti podatki kažejo, da so bile živali občutljive na motivacijsko vrednost ojačevala in da je bil odziv usmerjen.

Prejšnja ponavljajoča izpostavljenost zdravilom lahko izboljša tudi vedenjski nadzor, ki ga izvajajo pogojeni dražljaji, povezani z naravnimi ojačevalci, merjeno s pavlovskim pristopom (Harmer in Phillips, 1998; Taylor in Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), pogojena ojačitev (Taylor in Horger, 1999; Olausson et al., 2004) in pavlovian-to-instrumental prenos (Wyvell in Berridge, 2001). Sedaj obstajajo prepričljivi dokazi, da jedro NAc, v nasprotju z lupino, sodeluje pri nadzoru obnašanja, ki ga motivirajo pavlovski pogojeni dražljaji (Parkinson et al., 1999, 2002; Hall et al., 2001; Dalley et al., 2002; Ito et al., 2004). Naši rezultati lahko kažejo, da je indukcija ΔFosB v NAc, ki jo povzroči zdravilo, lahko eden od mehanizmov, s katerim se v teh postopkih poveča vedenjski nadzor. Možno je tudi, da pavlovski pogojeni dražljaji, ki delujejo kot pogojeni ojačevalci, prispevajo k sedanjim vedenjskim učinkom. Okrepljen nadzor nad obnašanjem takih pogojenih dražljajev, ki jih posreduje povečanje striatne ΔFosB, lahko prav tako prispeva k učinku beljakovine na pogojeno lokalno preferenco, ki jo povzroča zdravilo. (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006) in progresivno razmerje za kokain (\ tColby et al., 2003). Predvideva se, da so spremembe v motivacijskih procesih prispevale k razvoju in vzdrževanju zasvojenostnega vedenja (Robinson in Berridge, 1993; Jentsch in Taylor, 1999; Robbins in Everitt, 1999; Nestler, 2004). Sedanji podatki so tudi skladni z drugimi teorijami, ki poudarjajo več instrumentalnih in pavlovskih procesov v odvisnostnem vedenju (Everitt in Robbins, 2005). Sedaj je potrebno dodatno delo, da se opredeli vloga nevrooptipkov, povzročenih z drogami in ΔFosB, v NAc in drugih limbično-strijatalnih subregijah glede na specifične asociativne ali motivacijske dejavnike, ki lahko olajšajo instrumentalno učinkovitost in prispevajo k kompulzivnemu vedenju.

Čeprav natančni molekularni mehanizmi, s katerimi spremembe znotraj NAc vplivajo na vedenje, ki ga motivirajo primarni ali kondicionirani ojačevalci, niso znani (Kelley in Berridge, 2002), GABAergični srednji živčni nevroni NAc veljajo za kritičen substrat za plastičnost, odvisno od drog in izkušenj. Tu se dopaminergični vnos iz ventralnega tegmentalnega območja in glutamatergični vnos iz kortikolimbičnih aferentov konvergirajo na skupne dendrite in dendritične bodice (Sesack in Pickel, 1990; Smith in Bolam, 1990). Kronična izpostavljenost psihostimulantom poveča gostoto takšnih bodic na nevronih v lupini in jedru NAc (Robinson in Kolb, 1999; Robinson et al., 2001; Li et al., 2003, 2004). V zadnjem času je bila indukcija vedenjske senzibilizacije povezana predvsem s povečanjem dendritičnih bodic znotraj jedra NAc (Li et al., 2004). Predvsem kokainom povzročeno povečanje gostote hrbtenice vztraja le pri D1pozitivni nevroni, ki izražajo ΔFosB (Robinson in Kolb, 1999; Lee et al., 2006). ΔFosB v jedru NAc lahko tako prispeva k trajni sinaptični plastičnosti, ki bi lahko vplivala na instrumentalno vedenje. Dejansko je kritična vloga za dopaminsko-glutamatno nevrotransmisijo (Smith-Roe in Kelley, 2000), aktivnost protein kinaze A (Baldwin et al., 2002a) in de novo sintezo beljakovin (Hernandez et al., 2002) v jedru NAc o instrumentalni zmogljivosti so bili prej poročani. Sedaj ΔFosB identificiramo kot transkripcijski faktor, ki lahko vztrajno izboljša odziv na hrano, ko se prekomerno izraža v jedru NAc. Specifične gene ali beljakovine, ki so vključeni v te učinke, je treba natančno opredeliti. ΔFosB uravnava izražanje več proteinov v NAc, ki sodelujejo pri nevroplastičnosti (McClung in Nestler, 2003). Nedavna analiza mikromrež, ki je označevala vzorce genske ekspresije v NAc bitransgenskih miši, ki izražajo ΔFosB, uporabljen tukaj, in identificirala podskupino genov, ki so bili regulirani z relativno kratkotrajno ekspresijo ΔFosB (McClung in Nestler, 2003). BDNF je bil eden takšnih genov, in BDNF v tem nevronskem vezju je znano, da izboljša odzivanje na droge in povezane s hrano (Horger et al., 1999; Grimm et al., 2003; Lu et al., 2004). Dodatni zanimivi gen je ciklin-odvisna kinaza 5 (Bibb et al., 2001), ki jo povzroča tudi ΔFosB, lahko uravnava strukturno plastičnost, povzročeno s kokainom (\ tNorrholm et al., 2003) in motivacijo, merjeno s progresivnim razmerjem, ki se odziva na naravne ali zdravilne okrepitve (JR Taylor, neobjavljena opazovanja). Še dodatne kandidate so podenota GluR2 receptorjev AMPA glutamata (Kelz et al., 1999) in transkripcijski faktor NFκB (jedrski faktor κB) (Ang et al., 2001). Pomembno bi bilo ovrednotiti te in druge regulirane beljakovine v NAc podregijah kot kandidate za posredovanje vedenjskih učinkov ΔFosB na instrumentalno delovanje in motivacijo.

O sedanji nizi poskusov zagotavljajo dokaze, da lahko prekomerna ekspresija ΔFosB znotraj NAc izboljša vedenje, ki je motivirano s hrano, in s tem uravnava instrumentalno učinkovitost, kot je bilo prej prikazano za nagrade za zdravila. Ti podatki zagotavljajo nove dokaze, da lahko ΔFosB deluje kot splošno molekularno stikalo, povezano z izboljšavami motivacijskih vidikov ojačevalcev na ciljno usmerjeno obnašanje. Naše ugotovitve vzbujajo možnost, da je indukcija NAc ΔFosB, na primer z zasvojenimi zdravili, stresom ali morda zelo nagrajenimi živili, kritičen mehanizem, s katerim disfunkcionalna motivacijska stanja povzročijo psihiatrične motnje, povezane s kompulzivnim vedenjem..

Opombe

o   Prejeto marca 15, 2006.

o   Revizija je bila sprejeta junija 23, 2006.

o   Sprejeto avgusta 2, 2006.

*     To delo so podprli štipendije Nacionalnega inštituta za zlorabo drog, Nacionalnega inštituta za duševno zdravje in Nacionalnega inštituta za zlorabo alkohola in alkoholizma. Zahvaljujemo se za dragoceno pomoč Dilje Krueger, Drew Kiraly, Dr. Ralph DiLeone, Roberta Searsa in dr. Jonathana Hommela na Oddelku za psihiatrijo na Univerzi Yale. Prav tako smo hvaležni dr. Jennifer Quinn in dr. Paulu Hitchcottu, ki sta nam pomagala pri pripravi koristnih pripomb.

*     Korespondenco je treba nasloviti na Jane R. Taylor, Oddelek za psihiatrijo, Oddelek za molekularno psihiatrijo, Medicinsko šolo na univerzi Yale, raziskovalne ustanove Ribicoff, Center za duševno zdravje v Connecticutu, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-pošta zaščitena]

*     Copyright © 2006 Društvo za nevroznanost 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0

Reference

1.   

1.    Ang E,

2.    Chen JS,

3.    Zagouras P,

4.    Magna H,

5.    Holland J,

6.    Schaeffer E,

7.    Nestler EJ

(2001) Indukcija NFkB v nucleus accumbens s kronično uporabo kokaina. J Neurochem 79: 221 – 224.

CrossRefMedline

2.   

1.    Baldwin AE,

2.    Sadeghian K,

3.    Holahan MR,

4.    Kelley AE

(2002a) Apetitivno instrumentalno učenje je ovirano zaradi zaviranja cAMP-odvisne proteinske kinaze znotraj nucleus accumbens. Neurobiol Learn Mem 77: 44 – 62.

CrossRefMedline

3.   

1.    Baldwin AE,

2.    Sadeghian K,

3.    Kelley AE

(2002b) Apetitivno instrumentalno učenje zahteva naključno aktiviranje NMDA in dopamina D1 v medialni prefrontalni korteks. J Neurosci 22: 1063 – 1071.

Povzetek / prosti tekst

4.   

1.    Balleine B,

2.    Killcross S

(1994) Učinki ibotenskih kislinskih lezij jedra accumbens na instrumentalno delovanje. Behav Brain Res 65: 181 – 193.

CrossRefMedline

5.   

1.    Berke JD,

2.    Hyman SE

(2000) Zasvojenost, dopamin in molekularni mehanizmi spomina. Nevron 25: 515 – 532.

CrossRefMedline

6.   

1.    Berridge KC,

2.    Robinson TE

(2003) Razdeljevanje nagrad. Trendi Neurosci 26: 507 – 513.

CrossRefMedline

7.   

1.    Bibb JA,

2.    Chen J,

3.    Taylor JR,

4.    Svenningsson P,

5.    Nishi A,

6.    Snyder GL,

7.    Yan Z,

8.    Sagawa ZK,

9.    Ouimet CC,

10. Nairn AC,

11. Nestler EJ,

12. Greengard P

(2001) Učinke kronične izpostavljenosti kokainu regulira nevronski protein Cdk5. Narava 410: 376 – 380.

CrossRefMedline

8.   

1.    Brunzell DH,

2.    Chang JR,

3.    Schneider B,

4.    Olausson P,

5.    Taylor JR,

6.    Picciotto MR

Nikotinske acetilholinske receptorje (2006) beta2-podenote, ki sodelujejo v nikotinsko induciranih povišanjih kondicionirane okrepitve, ne pa tudi progresivnega razmerja, ki se odziva na hrano v miših C57BL / 6. Psihofarmakologija (Berl) 184: 328 – 338.

CrossRefMedline

9.   

1.    Cagniard B,

2.    Balsam PD,

3.    Brunner D,

4.    Zhuang X

(2006) Miši s kronično povišanim dopaminom kažejo večjo motivacijo, vendar ne učenje, za nagrado za hrano. Nevropsihofarmakologija 31: 1362 – 1370.

CrossRefMedline

10.

1.    Carlezon WA Jr.

2.    Thome J,

3.    Olson VG,

4.    Lane-Ladd SB,

5.    Brodkin ES,

6.    Hiroi N,

7.    Duman RS,

8.    Neve RL,

9.    Nestler EJ

(1998) Uredba o nagradi za kokain s strani CREB. Znanost 282: 2272 – 2275.

Povzetek / prosti tekst

11.

1.    Chen J,

2.    Kelz MB,

3.    Hope BT,

4.    Nakabeppu Y,

5.    Nestler EJ

(1997) Kronični antigeni, povezani s Fos: stabilne variante ΔFosB, inducirane v možganih s kroničnim zdravljenjem. J Neurosci 17: 4933 – 4941.

Povzetek / prosti tekst

12.

1.    Chen J,

2.    Kelz MB,

3.    Zeng G,

4.    Sakai N,

5.    Steffen C,

6.    Shockett PE,

7.    Picciotto MR,

8.    Duman RS,

9.    Nestler EJ

Transgene živali z inducibilno, ciljno izraženo gensko ekspresijo v možganih. Mol Pharmacol 54: 495-503.

13.

1.    Colby CR,

2.    Whisler K,

3.    Steffen C,

4.    Nestler EJ,

5.    Self DW

(2003) Stresatalno specifična prekomerna ekspresija ΔFosB povečuje spodbudo za kokain. J Neurosci 23: 2488 – 2493.

Povzetek / prosti tekst

14.

1.    Corbit LH,

2.    Balleine BW

(2005) Dvojna disociacija bazolateralnih in centralnih amigdalnih lezij na splošne in rezultatno specifične oblike pavlovsko-instrumentalnega prenosa. J Neurosci 25: 962 – 970.

Povzetek / prosti tekst

15.

1.    Corbit LH,

2.    Muir JL,

3.    Balleine BW

(2001) Vloga nucleus accumbens v instrumentalni kondiciji: dokaz funkcionalne disociacije med akumbenskim jedrom in lupino. J Neurosci 21: 3251 – 3260.

Povzetek / prosti tekst

16.

1.    Dalley JW,

2.    Chudasama Y,

3.    Theobald DE,

4.    Pettifer CL,

5.    Fletcher CM,

6.    Robbins TW

(2002) Učenje nukleusa akumbens dopamina in diskriminiranega pristopa: interaktivni učinki lezij 6-hidroksidopamina in sistemsko dajanje apomorfina. Psihofarmakologija (Berl) 161: 425 – 433.

CrossRefMedline

17.

1.    de Borchgrave R,

2.    Rawlins JN,

3.    Dickinson A,

4.    Balleine BW

(2002) Učinki lezij citotoksičnega jedra accumbens na instrumentalno kondicioniranje pri podganah. Exp Brain Res 144: 50 – 68.

CrossRefMedline

18.

1.    Di Ciano P,

2.    Everitt BJ

(2004a) Neposredne interakcije med bazolateralnim amigdalam in jedrom nucleus accumbens temeljijo na podvigu, ki iščejo kokain. J Neurosci 24: 7167 – 7173.

Povzetek / prosti tekst

19.

1.    Di Ciano P,

2.    Everitt BJ

(2004b) Pogojne okrepitvene lastnosti dražljajev, povezane s kokainom, heroinom ali saharozo, ki se dajejo samemu sebi, posledice za obstoj zasvojenosti. Nevrofarmakologija 47 ([Suppl 1]) 202 – 213.

20.

1.    Dickinson A

(1985) Dejavnosti in navade: razvoj vedenjske avtonomije. Philos Trans R Lond B Biol Sci 308: 67 – 78.

CrossRef

21.

1.    Everitt BJ,

2.    Robbins TW

(2005) Nevronski sistemi okrepitve za zasvojenost z drogami: od dejanj do navad do prisile. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.

CrossRefMedline

22.

1.    Faure A,

2.    Haberland U,

3.    Conde F,

4.    El Massioui N

(2005) Lezija nigrostriatalnega dopaminskega sistema moti nastanek navade stimulacije-odziva. J Neurosci 25: 2771 – 2780.

Povzetek / prosti tekst

23.

1.    Grimm JW,

2.    Lu L,

3.    Hayashi T,

4.    Hope BT,

5.    Su TP,

6.    Shaham Y

(2003) Časovno odvisno povečanje ravni nevrotrofičnega faktorja, pridobljenega iz možganov, v mezolimbičnem sistemu dopamina po prenehanju jemanja kokaina: posledice za inkubacijo kokainske želje. J Neurosci 23: 742 – 747.

Povzetek / prosti tekst

24.

1.    Hall J,

2.    Parkinson JA,

3.    Connor TM,

4.    Dickinson A,

5.    Everitt BJ

(2001) Vključevanje osrednjega jedra amigdale in jedra nucleus accumbens v posredovanje Pavlovskih vplivov na instrumentalno vedenje. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.

CrossRefMedline

25.

1.    Harmer CJ,

2.    Phillips GD

(1998) Okrepljeno kondicioniranje po ponovljeni predobdelavi z d-amfetaminom. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.

Medline

26.

1.    Hernandez PJ,

2.    Sadeghian K,

3.    Kelley AE

(2002) Zgodnja konsolidacija instrumentalnega učenja zahteva sintezo beljakovin v nucleus accumbens. Nat Neurosci 5: 1327 – 1331.

CrossRefMedline

27.

1.    Hommel JD,

2.    Sears RM,

3.    Georgescu D,

4.    Simmons DL,

5.    DiLeone RJ

(2003) Lokalno izločanje genov v možganih z uporabo interakcije z virusno posredovano RNA. Nat Med 9: 1539 – 1544.

CrossRefMedline

28.

1.    Horger BA,

2.    Shelton K,

3.    Schenk S

(1990) Pri prekomerni izpostavljenosti se podgane zavedajo učinkovitih učinkov kokaina. Pharmacol Biochem Behav 37: 707 – 711.

CrossRefMedline

29.

1.    Horger BA,

2.    Giles MK,

3.    Schenk S

(1992) Pri prekomerni izpostavljenosti amfetaminu in nikotinu lahko podgane samodejno dajo nizek odmerek kokaina. Psihofarmakologija (Berl) 107: 271 – 276.

CrossRefMedline

30.

1.    Horger BA,

2.    Iyasere CA,

3.    Berhow MT,

4.    Messer CJ,

5.    Nestler EJ,

6.    Taylor JR

(1999) Povečanje gibalne aktivnosti in kondicioniranje kokaina z možganskim nevrotrofnim faktorjem. J Neurosci 19: 4110 – 4122.

Povzetek / prosti tekst

31.

1.    Ito R,

2.    Robbins TW,

3.    Everitt BJ

(2004) Diferencialni nadzor nad obnašanjem kokaina v jedru in lupini nucleus accumbens. Nat Neurosci 7: 389 – 397.

CrossRefMedline

32.

1.    Jentsch JD,

2.    Taylor JR

(1999) Impulzivnost, ki je posledica frontostriatne disfunkcije v zlorabi drog: posledice za nadzor obnašanja s spodbudami, povezanimi z nagrajevanjem. Psihofarmakologija (Berl) 146: 373 – 390.

CrossRefMedline

33.

1.    Kelley AE

(2004) Ventralna striatna kontrola motivacije za nagnjenost: vloga pri zaužitju in učenje, povezano z nagrajevanjem. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.

CrossRefMedline

34.

1.    Kelley AE,

2.    Berridge KC

Nevroznanost naravnih nagrad: pomembnost za zasvojenost z drogami. J Neurosci 2002: 22 – 3306.

Brezplačno polno besedilo

35.

1.    Kelz MB,

2.    Chen J,

3.    Carlezon WA Jr.

4.    Whisler K,

5.    Gilden L,

6.    Beckmann AM,

7.    Steffen C,

8.    Zhang YJ,

9.    Marotti L,

10. Self DW,

11. Tkatch T,

12. Baranauskas G,

13. Surmeier DJ,

14. Neve RL,

15. Duman RS,

16. Picciotto MR,

17. Nestler EJ

(1999) Izražanje transkripcijskega faktorja ΔFosB v možganih nadzoruje občutljivost na kokain. Narava 401: 272 – 276.

CrossRefMedline

36.

1.    Konradi C,

2.    Cole RL,

3.    Heckers S,

4.    Hyman SE

(1994) Amfetamin uravnava gensko ekspresijo v striatumu podgan s transkripcijskim faktorjem CREB. J Neurosci 14: 5623 – 5634.

Minimalizem

37.

1.    Lee KW,

2.    Kim Y,

3.    Kim A,

4.    Helmin K,

5.    Nairn AC,

6.    Greengard P

(2006) Nastajanje dendritične hrbtenice, ki jo povzroča kokain, v srednjih živčnih nevronih, ki vsebujejo dopaminske receptorje D1 in D2, v nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci ZDA 103: 3399 – 3404.

Povzetek / prosti tekst

38.

1.    Li Y,

2.    Kolb B,

3.    Robinson TE

(2003) Lokacija trajnih amfetaminskih sprememb v gostoti dendritičnih hrbtenic na srednjih živčnih nevronih v nucleus accumbens in caudate-putamen. Nevropsihofarmakologija 28: 1082 – 1085.

Medline

39.

1.    Li Y,

2.    Acerbo MJ,

3.    Robinson TE

(2004) Indukcija vedenjske senzibilizacije je povezana s strukturno plastičnostjo, ki jo povzroča kokain, v jedru (ne pa v lupini) nucleus accumbens. Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.

CrossRefMedline

40.

1.    Lu L,

2.    Dempsey J,

3.    Liu SY,

4.    Bossert JM,

5.    Shaham Y

(2004) Enkratna infuzija nevrotrofnega faktorja, ki izhaja iz možganov, v ventralno tegmentalno območje povzroči dolgotrajno povečanje kokaina, ki išče po umiku. J Neurosci 24: 1604 – 1611.

Povzetek / prosti tekst

41.

1.    McClung CA,

2.    Nestler EJ

(2003) Regulacija izražanja genov in kokainske nagrade s strani CREB in ΔFosB. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.

CrossRefMedline

42.

1.    McClung CA,

2.    Ulery PG,

3.    Perrotti LI,

4.    Zachariou V,

5.    Berton O,

6.    Nestler EJ

(2004) ΔFosB: molekularno stikalo za dolgoročno prilagoditev v možganih. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 – 154.

Medline

43.

1.    Miles FJ,

2.    Everitt BJ,

3.    Dalley JW,

4.    Dickinson A

(2004) Kondicionirana aktivnost in instrumentalna ojačitev po dolgotrajni peroralni uporabi kokaina pri podganah. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.

CrossRefMedline

44.

1.    Nestler EJ

(2004) Molekularni mehanizmi odvisnosti od drog. Nevrofarmakologija 47 ([Suppl 1]) 24 – 32.

45.

1.    Nestler EJ,

2.    Barrot M,

3.    Self DW

(2001) ΔFosB: trajno molekularno stikalo za zasvojenost. Proc Natl Acad Sci ZDA 98: 11042 – 11046.

Povzetek / prosti tekst

46.

1.    Norrholm SD,

2.    Bibb JA,

3.    Nestler EJ,

4.    Ouimet CC,

5.    Taylor JR,

6.    Greengard P

(2003) Kokainsko povzročena proliferacija dendritičnih hrbtenic v nucleus accumbens je odvisna od aktivnosti kinaze-5, odvisne od ciklina. Nevroznanost 116: 19 – 22.

CrossRefMedline

47.

1.    Nye HE,

2.    Hope BT,

3.    Kelz MB,

4.    Iadarola M,

5.    Nestler EJ

(1995) Farmakološke študije regulacije kronične indukcije antigena, povezane s FOS, s kokainom v striatumu in nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.

Povzetek / prosti tekst

48.

1.    Olausson P,

2.    Jentsch JD,

3.    Taylor JR

(2003) Ponavljajoča se izpostavljenost nikotinu izboljša učenje, povezano z nagrado pri podganah. Nevropsihofarmakologija 28: 1264 – 1271.

CrossRefMedline

49.

1.    Olausson P,

2.    Jentsch JD,

3.    Taylor JR

(2004) Ponavljajoča izpostavljenost nikotinu poveča odzivnost s kondicionirano ojačitvijo. Psihofarmakologija (Berl) 173: 98 – 104.

CrossRefMedline

50.

1.    Parkinson JA,

2.    Olmstead MC,

3.    Burns LH,

4.    Robbins TW,

5.    Everitt BJ

(1999) Disociacija v učinkih lezij jedra in lupine nucleus accumbens na obnašanje apetitivnega pavlovskega pristopa in povečanje pogojene okrepitve in lokomotorne aktivnosti z d-amfetaminom. J Neurosci 19: 2401 – 2411.

Povzetek / prosti tekst

51.

1.    Parkinson JA,

2.    Dalley JW,

3.    Kardinal RN,

4.    Bamford A,

5.    Fehnert B,

6.    Lachenal G,

7.    Rudarakanchana N,

8.    Halkerston KM,

9.    Robbins TW,

10. Everitt BJ

(2002) Nucleus accumbens dopaminsko osiromašenje slabi tako pridobitev kot tudi uspešnost apetitivnega Pavlovskega pristopa: posledice za dopaminsko funkcijo mezoakumbensov. Behav Brain Res 137: 149 – 163.

CrossRefMedline

52.

1.    Paxinos G,

2.    Watson C

(1986) Podganji možgani v stereotaksičnih koordinatah (Akademski, Sydney).

53.

1.    Perrotti LI,

2.    Hadeishi Y,

3.    Ulery PG,

4.    Barrot M,

5.    Monteggia L,

6.    Duman RS,

7.    Nestler EJ

(2004) Indukcija ΔFosB v možganskih strukturah, povezanih z nagrajevanjem, po kroničnem stresu. J Neurosci 24: 10594 – 10602.

Povzetek / prosti tekst

54.

1.    Piazza PV,

2.    Deminiere JM,

3.    Le Moal M,

4.    Simon H

(1990) Stresno in farmakološko sprožena vedenjska senzibilizacija poveča občutljivost za pridobivanje amfetaminske samouprave. Brain Res 514: 22 – 26.

CrossRefMedline

55.

1.    Pich EM,

2.    Pagliusi SR,

3.    Tessari M,

4.    Talabot-Ayer D,

5.    Hooft van Huijsduijnen R,

6.    Chiamulera C

(1997) Skupni živčni substrati za zasvojenost z lastnostmi nikotina in kokaina. Znanost 275: 83 – 86.

Povzetek / prosti tekst

56.

1.    Robbins TW,

2.    Everitt BJ

(1999) Zasvojenost z drogami: slabe navade. Narava 398: 567 – 570.

CrossRefMedline

57.

1.    Robinson TE,

2.    Berridge KC

(1993) Nevronske osnove za hrepenenje po drogah: teorija o zasvojenosti, ki spodbuja senzibilizacijo. Brain Res Brain Res Rev 18: 247 – 291.

CrossRefMedline

58.

1.    Robinson TE,

2.    Kolb B

(1999) Spremembe morfologije dendritov in dendritičnih bodic v nucleus accumbens in prefrontalnem korteksu po večkratnem zdravljenju z amfetaminom ali kokainom. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.

CrossRefMedline

59.

1.    Robinson TE,

2.    Gorny G,

3.    Mitton E,

4.    Kolb B

(2001) Kokainska samouprava spreminja morfologijo dendritov in dendritičnih bodic v nucleus accumbens in neokorteksu. Synapse 39: 257 – 266.

CrossRefMedline

60.

1.    Sesack SR,

2.    Pickel VM

(1990) V podganah je medialno jedro accumbens, hipokampalni in kateholaminergični terminali konvergirani na trnovih nevronih in so medsebojno povezani. Brain Res 527: 266 – 279.

CrossRefMedline

61.

1.    Shaw-Lutchman TZ,

2.    Impey S,

3.    Storm D,

4.    Nestler EJ

(2003) Ureditev CRE-posredovane transkripcije v mišjih možganih z amfetaminom. Synapse 48: 10 – 17.

CrossRefMedline

62.

1.    Smith AD,

2.    Bolam JP

(1990) Nevronska mreža bazalnih ganglij je razkrita s študijo sinaptičnih povezav identificiranih nevronov. Trendi Neurosci 13: 259 – 265.

CrossRefMedline

63.

1.    Smith-Roe SL,

2.    Kelley AE

(2000) Sočasno aktiviranje NMDA in dopamina D1 receptorji znotraj jedra nucleus accumbens so potrebni za apetitivno instrumentalno učenje. J Neurosci 20: 7737 – 7742.

Povzetek / prosti tekst

64.

1.    Taylor JR,

2.    Horger BA

(1999) Okrepljeno odzivanje na kondicionirano nagrado, ki jo povzroči amfetamin znotraj akumensa, se okrepi po senzibilizaciji s kokainom. Psihofarmakologija (Berl) 142: 31 – 40.

CrossRefMedline

65.

1.    Taylor JR,

2.    Jentsch JD

(2001) Ponavljajoča intermitentna uporaba psihomotoričnih stimulansov spreminja pridobitev pavlovskega pristopa pri podganah: diferencialni učinki kokaina, d-amfetamina in 3,4-metilendioksimetamfetamina ("ekstazi") Biol psihiatrija 50: 137 – 143.

CrossRefMedline

66.

1.    Vezina P,

2.    Lorrain DS,

3.    Arnold GM,

4.    Austin JD,

5.    Suto N

(2002) Senzibilizacija reverzibilnosti nevronov dopamina na srednjem mozgu pospešuje iskanje amfetamina. J Neurosci 22: 4654 – 4662.

Povzetek / prosti tekst

67.

1.    Werme M,

2.    Messer C,

3.    Olson L,

4.    Gilden L,

5.    Thoren P,

6.    Nestler EJ,

7.    Brene S

(2002) ΔFosB uravnava tek kolesa. J Neurosci 22: 8133 – 8138.

Povzetek / prosti tekst

68.

1.    Wyvell CL,

2.    Berridge KC

(2001) Spodbujevalna senzibilizacija s predhodno izpostavljenostjo amfetaminu: povečana "želja" po nagradi za saharozo. J Neurosci 21: 7831 – 7840.

Povzetek / prosti tekst

69.

1.    Yin HH,

2.    Knowlton BJ,

3.    Balleine BW

(2004) Lezije dorzolateralnega striatuma ohranjajo pričakovano pričakovanje, vendar ovirajo oblikovanje navad v instrumentalnem učenju. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.

CrossRefMedline

70.

1.    Zachariou V,

2.    Bolanos CA,

3.    Selley DE,

4.    Theobald D,

5.    Cassidy MP,

6.    Kelz MB,

7.    Shaw-Lutchman T,

8.    Berton O,

9.    Sim-Selley LJ,

10. Dileone RJ,

11. Kumar A,

12. Nestler EJ

(2006) Pomembna vloga ΔFosB v nucleus accumbens v delovanju morfina. Nat Neurosci 9: 205 – 211.

CrossRefMedline