Funkcionalna vloga N-terminalne domene ΔFosB v odziv na stres in droge (2014)

Nevroznanosti. 2014 Okt 10. pii: S0306-4522(14)00856-2. doi: 10.1016/j.neuroscience.2014.10.002.

Ohnishi YN1, Ohnishi YH1, Vialou V2, Mouzon E2, LaPlant Q2, Nishi A3, Nestler EJ4.

Minimalizem

Prejšnje delo je vključevalo transkripcijski faktor ΔFosB, ki deluje v nucleus accumbens, pri posredovanju pozitivnih učinkov zlorabe drog, kot je kokain, in pri posredovanju odpornosti na kronični družbeni stres. Vendar pa transgenski in virusni modeli prenosa genov, ki se uporabljajo za določanje teh ΔFosB fenotipov, poleg ΔFosB izražajo tudi alternativni produkt translacije ΔFosB mRNA, imenovan Δ2ΔFosB, ki nima N-terminalnega 78aa, ki je prisoten v ΔFosB. Za proučitev možnega prispevka Δ2ΔFosB k tem drogam in stresnim fenotipom smo pripravili virusni vektor, ki prekomerno izraža točkovno mutantno obliko ΔFosB mRNA, ki ne more biti podvržena alternativnemu prevajanju kot tudi vektor, ki prekomerno izraža Δ2ΔFosB sam. Naši rezultati kažejo, da mutantna oblika ΔFosB, kadar je prekomerno izražena v nucleus accumbens, reproducira povečanje nagrajevanja in odpornosti, ki smo jo videli pri naših prejšnjih modelih, brez učinkov, ki bi jih opazili pri Δ2ΔFosB. Prekomerna ekspresija polne dolžine FosB, drugega pomembnega proizvoda gena FosB, prav tako nima učinka. Te ugotovitve potrjujejo edinstveno vlogo ΔFosB v nucleus accumbens pri nadzorovanju odzivov na zlorabe drog in stres.

UVOD

ΔFosB je kodiran s strani FosB gen in deli homologijo z drugimi transkripcijskimi faktorji družine Fos, ki vključujejo c-Fos, FosB, Fra1 in Fra2. Vse beljakovine družine Fos se inducirajo hitro in prehodno v določenih regijah možganov po akutnem dajanju številnih zlorab drog [glej ]. Ti odzivi so najbolj vidni v nucleus accumbens (NAc) in dorzalni striatum, ki sta pomembna posrednika pri nagrajevanju in lokomotornem delovanju zdravil. Vse te beljakovine družine Fos pa so zelo nestabilne in se vrnejo na osnovne ravni v nekaj urah po dajanju zdravila. V nasprotju s tem je ΔFosB zaradi svoje nenavadne stabilnosti in vitro in in vivo (\ t; Carle et al., 2006; ) se po večkratni izpostavljenosti zdravilu akumulira znotraj istih regij možganov (\ t; ; ). Novejše študije so pokazale, da kronična izpostavljenost nekaterim oblikam stresa povzroča tudi kopičenje ΔFosB v NAc in da se takšna indukcija pojavi prednostno pri živalih, ki so relativno odporne na škodljive učinke stresa (tj. Odporne živali) (; , ).

Dokazali smo, da prekomerna ekspresija ΔFosB v NAc, bodisi v inducibilnih bitransgeničnih miših bodisi z lokalnim virusnim posredovanjem genskega prenosa, poveča občutljivost živali na učinke kokaina in drugih drog, ki aktivirajo lokomotorno aktivacijo (; ; ; ; Robison et al., 2013). Takšna indukcija povečuje tudi porabo in motivacijo za naravne nagrade (; ; ; ; ; Pitchers et al., 2009; ), poveča nagrado za stimulacijo možganov v paradragmah intra-kranialne samopodstave (), in daje živali bolj odporne na več oblik kroničnega stresa (, ). Podobno miši, ki konstitutivno nimajo izražanja polne dolžine FosB, vendar kažejo povečano izražanje ΔFosB, kažejo zmanjšano občutljivost na stres (). Te ugotovitve skupaj podpirajo stališče, da ΔFosB, ki deluje v NAc, povečuje stanje nagrajevanja, razpoloženja in motivacije živali.

Vendar pa je pomembno opozorilo, da so te študije še en izdelek FosB Gen, imenovan Δ2ΔFosB, je izražen tudi v vseh teh genetskih mutantnih miših in virusnih vektorskih sistemih, tako da je možen prispevek Δ2ΔFosB k opazovanim vedenjskim fenotipom. Δ2ΔFosB je preveden iz alternativnega startnega kodona, ki se nahaja znotraj ΔFosB transkript mRNA (). Ta alternativni prevod vodi do tvorbe Δ2ΔFosB, ki nima 78 N-terminalnega aa ΔFosB. V tej študiji smo preučili vlogo Δ2ΔFosB pri zlorabi drog in stresnih modelih s prekomernim izražanjem ali ΔFosB ali FosB z AAV (adeno-povezanimi virusi) vektorji; uporabili smo mutantno obliko ΔFosB mRNA, ki ne more biti podvržena temu alternativnemu mehanizmu prevajanja. Naši rezultati potrjujejo, da so ukrepi, ki spodbujajo nagrajevanje in pro-odpornost in so bili vidni v prejšnjih študijah, dejansko posredovani z ΔFosB in ne z dvema drugim protenproducts iz FosB gen, polni dolžini FosB ali Δ2ΔFosB.

METODE

živali

Pred eksperimentiranjem so bili moški miši 9- v 11-tedenskih C57BL / 6J (laboratorij Jackson, Bar Harbor, ME, ZDA) nastanjeni po petih na kletko v sobi s kolonijami, ki je bila nastavljena na konstantno temperaturo (23 ° C). cikel svetlobe / temne 12 hr (luči pri 7 AM) z dostopom ad libitum do hrane in vode. Nekateri poskusi so uporabili bitransgenske miši, v katerih je prekomerna ekspresija ΔFosB pod nadzorom sistema za regulacijo tetraciklinskih genov, kot je opisano (). Miševi smo uporabili za doksiciklin (za ohranitev izločanja gena) ali za off doksiciklin, ki omogoča izražanje ΔFosB. Vse protokole je odobril Odbor za institucionalno oskrbo in uporabo živali (IACUC) na gori Sinaj.

AAV vektorji

Uporabili smo serotip AAV2 za pakiranje AAV vektorjev, ki izražajo FosB, ΔFosB ali Δ2ΔFosB polne dolžine pod človeškim takojšnjim promotorjem citomegalovirusa (CMV) s fluorescentnim proteinom Venus, ki je bil kodiran po intervencijskem IRES2 (notranjem mestu za vnos ribosoma 2). Konstrukt AAV-ΔFosB izraža mutantno obliko AFosB mRNA, kjer je bil kodon, ki predstavlja Met79, mutiran v Leu, da bi izbrisal alternativno začetno mesto prevajanja, ki generira Δ2ΔFosB.

Virusno posredovan prenos gena

Miši so bile nameščene v male živalske stereotaksične instrumente pod ketaminsko (100 mg / kg) in ksilazinsko (10 mg / kg) anestezijo in izpostavljene so bile njihove kranialne površine. Triintrideset igel z injekcijskimi brizgami je bilo dvostransko spuščeno v NAc, da bi infundiralo 0.5 μl vektorja AAV pod kotom 10 ° (spredaj / posterior + 1.6; medialno / lateralno + 1.5; dorzalno / ventralno - 4.4 mm). Infuzije so se zgodile s hitrostjo 0.1 μl / min. Živalim, ki so prejemale AAV injekcije, je bilo dovoljeno, da se opomorejo vsaj 24 h po operaciji. Za potrditev ekspresije smo miši anestezirali in perfundirali intrakardialno z 4% paraformaldehidom / PBS (fosfatno pufrna fiziološka raztopina). Možgani so bili zaščiteni z 30% saharozo, nato pa zamrznjeni in shranjeni pri -80 ° C do uporabe. Koronalne sekcije (40 μm) smo razrezali na kriostatu in obdelali za skeniranje s konfokalno mikroskopijo.

Vedenjsko testiranje

Miši smo proučevali z več standardnimi vedenjskimi analizami po objavljenih protokolih, kot sledi:

Kronična (10 dni) socialni poraz je bilo izvedeno točno tako, kot je opisano (; ). Na kratko, ena eksperimentalna miška in en napadalec CD1 sta bila združena za 5 min v domači kletki miške CD1. Nato so jih ločili s plastičnim delilnikom, ki je bil perforiran, da bi omogočil senzorični stik za opomnik dneva. Vsako jutro za 10 dni je bila eksperimentalna miška premaknjena v kletko miši drugega agresorja. Neprevzete kontrolne miši so bile izpostavljene podobni izpostavljenosti, vendar z drugimi mišmi C57BL / 6J. Testi za druženje so bile izvedene, kot je opisano prej (; ). Na kratko, testna miška je bila postavljena v novo areno, ki je vključevala majhno kletko na eni strani. Gibanje (npr. Prevožena razdalja, porabljen čas v bližini te majhne kletke) je bilo sprva spremljano za 150 s, ko je bila majhna kletka prazna, čemur je sledila dodatna 150 s miško CD1 v tej kletki. Podatki o gibanju so bili pridobljeni s pomočjo programske opreme EthoVision 5.0 (Noldus).

Uporabili smo standard, nepristranski želeno mesto (CPP) (; Robison et al., 2013). Na kratko, živali so bile testirane za 20 min v foto-žarki spremljani trikomponentni škatli s prostim dostopom do okoljsko ločenih stranskih komor. Miši smo nato razdelili v kontrolne in eksperimentalne skupine z enakovrednimi pretestnimi rezultati. Po eksperimentalni manipulaciji so miši prestali štiri treninge 30 min (izmenično kokain in slane pare). Na dan testiranja so miši imele 20 min neomejenega dostopa do vseh komor, CPP rezultat pa je bil izračunan z odštevanjem časa, porabljenega v komori s kokainom, minus čas, porabljen v komori s slanico. Kokainsko inducirana lokomotorna aktivnost je bila izmerjena s prelomi fotonapetja v CPP škatli za 30 min po vsakem testnem injiciranju.

Povišan plus labirint testi so bili izvedeni s črnim pleksi steklom, opremljenim z belimi dnom, da se zagotovi kontrast (). Miši so bile postavljene v središče plus labirinta in dovoljene, da svobodno raziskujejo labirint za 5 min pod pogoji rdeče svetlobe. Položaj vsake miši skozi čas v odprtih in zaprtih rokah smo spremljali z videotracking opremo (Ethovision) in stropno montirano kamero.

Splošno, ambulantno lokomotorne aktivnosti v nočni fazi smo ocenjevali v domačih kletkah z napravo za fotocelično mrežo (Med Associates Inc., St. Albans, VT, ZDA), ki je preštela število odmikov ambulantnih foto-žarkov v obdobju 12 h ().

Western bloting

NAc vzorci so bili podvrženi Western blotu, kot je opisano (, ). Zamrznjene disekcije NAc so bile homogenizirane v 100 μl pufra, ki vsebuje koktajle z inhibitorjem fosfataze I in II (Sigma, St. Louis, MO, ZDA) in inhibitorje proteaz (Roche, Basel, Švica) z uporabo ultrazvočnega procesorja (Cole Parmer, Vemon Hills, IL , ZDA). Koncentracije beljakovin smo določili z uporabo beljakovine DC (Bio-Rad, Hercules, CA, ZDA) in beljakovine 10-30 μg smo naložili na 12.5% ali 4% -15% gradient Tris-HCl gelov za frakcioniranje z elektroforezo. -Rad). Po prenašanju proteinov v nitrocelulozne filtre so bili filtri inkubirani z anti-FosB protitelesom, ki prepozna vse FosB genskih produktih, nato s sekundarnimi protitelesi in končno kvantificirana z uporabo sistema Odyssey (Li-Cor) v skladu s protokolom proizvajalca.

Statistika

Uporabljeni so bili ANOVA in študentovi t-testi, popravljeni za večkratne primerjave, s pomembnostjo, nastavljeno na p <0.05.

REZULTATI

Kot je prikazano v Slika 1Aje FosB gen kodira mRNA za FosB polne dolžine in za ΔFosB. ΔFosB mRNA se generira iz alternativnega dogodka spajanja v Exon 4 FosB primarni prepis; to povzroči nastanek prezgodnjega zaustavitvenega kodona in okrnjenega proteina ΔFosB, ki nima C-terminala 101aa, prisotnega v FosB. FosB in ΔFosB mRNA ima isti startni kodon ATG, ki se nahaja proti koncu 3 Ex Exon 1. Znano je že od prvotnega kloniranja FosB produkti, ki jih mRNA delita tudi alternativna mesta začetka prevajanja znotraj Exon 2, imenovanih ATXs Δ1, Δ2 in Δ3. Prejšnje delo je pokazalo, da je manjši proteinski produkt proizveden iz ΔFosB mRNA, vendar ne FosB mRNA preko Δ2 ATG; ta protein se imenuje Δ2ΔFosB in nima 78 aa N-terminalne regije ΔFosB (). Nasprotno se zdi, da so ATG Δ1 in Δ3 tihi, ker ni dokazov za njihovo uporabo v prevodu FosB ali ΔFosB prepisov.

Slika 1 

Stopnje izražanja FosB genskih izdelkov

Slika 1B ponazarja indukcijo FosB genskih produktov v NAc po poteku ponavljajoče uporabe kokaina, pri živalih, ki so po zadnjem odmerku kokaina pregledali 2 h. V tem časovnem obdobju obe proteini ΔFosB in FosB kažejo pomembno indukcijo s kokainom, brez dosledne indukcije Δ2ΔFosB. Upoštevajte, da je indukcija obeh ΔFosB in FosB drugačna od vzorca, opazovanega pri 24 h ali več po zadnji dozi zdravila, ko se zaradi edinstvene stabilnosti proteina ΔFosB inducira samo ΔFosB (; ; ). V nasprotju s pomanjkanjem indukcije Δ2ΔFosB s ponavljajočo se aplikacijo kokaina, bitransgenični mišji sistem, ki smo ga uporabili za prekomerno izražanje ΔFosB in s tem za preučevanje njegovih vedenjskih posledic (; ; ) povzroči pomembno, čeprav nižjo raven prekomerne ekspresije Δ2ΔFosB poleg ΔFosB (Slika 1C). Podobno raven indukcije Δ2ΔFosB opazimo z našimi virusnimi vektorji, ki prekomerno izražajo divji tip Δ \ tFosB (npr. glej Slika 2). Ta opažanja povečujejo možnost, da bi se lahko nekateri prijavljeni ukrepi ΔFosB, o katerih so poročali prej, deloma posredovali z Δ2ΔFosB.

Slika 2

Selektivni izraz. \ T FosB genskih produktov z AAV vektorji v celicah Neuro2A

Za razlikovanje diferencialnih vlog ΔFosB od Δ2ΔFosB smo ustvarili vektor AAV, ki prekomerno izraža Δ2ΔFosB sam, kot tudi nov vektor, ki prekomerno izraža mutirano obliko ΔFosB mRNA (mΔFosB mRNA), ki ne more biti predmet alternativnega prevajanja, da bi ustvarila Δ2ΔFosB. Oba vektorja izražata tudi Venus kot marker za izražanje. Učinke teh dveh vektorjev smo primerjali z drugimi, ki izražajo FosB plus Venero ali Venero kot nadzor. Sposobnost teh novih AAV vektorjev, da selektivno prekomerno izražajo svoje kodirane transgene, je upodobljena v Slika 2.

Naprej, da preizkusite učinek vsakega FosB genski produkt, ki deluje v NAc. o kompleksnem obnašanju smo vsakemu od teh AAV vbrizgali v to področje možganov dvostransko od ločenih skupin miši, 3 tedne kasneje, ko je transgenska ekspresija največja (Slika 3A), opravil vrsto testov. Najprej smo ovrednotili sposobnost FosB genski proizvodi vplivajo na fenotip pro-odpornosti, o katerem so prej poročali za ΔFosB v socialni paradigmi, ), Kot je prikazano na Slika 3A, kontrolne miši, ki so same izražale Venero, so pokazale pričakovano zmanjšanje vedenja socialnih interakcij, dobro uveljavljenega vedenjskega markerja občutljivosti (; ). Prekomerna ekspresija mΔFosB je popolnoma spremenila ta fenotip, v nasprotju z Δ2ΔFosB in FosB, ki nimata učinka.

Slika 3 

Učinek FosB genskih izdelkov v NAc o vedenjskih odzivih na kokain ali socialni stres

Za testiranje relativnega prispevka vsakega FosB genskega produkta za koristne učinke kokaina, smo prekomerno izražali Δ2ΔFosB, mΔFosB ali FosB dvostransko v NAc in preučevali živali v pogojeni paradigmi za preferenco kraja. Kot je prikazano v Slika 3B, dvostranska prekomerna ekspresija mΔFosB v NAc poveča učinek kondicioniranja na mesto praga odmerka kokaina, ki ni povzročil pomembne prednostne lokacije pri kontrolnih živalih, ki izražajo Venero. V nasprotju s tem pa čezmerna ekspresija Δ2ΔFosB ali FosB ni vplivala na kokainsko kondicioniranje. Ker smo uporabili mejno dozo kokaina, ki pri kontrolnih živalih ni povzročila pomembnejše preference, ne moremo izključiti možnosti, da bi FosB ali Δ2ΔFosB zmanjšali koristne učinke kokaina.

Nazadnje, da bi ovrednotili izhodiščno vedenje, smo pregledali lokomotorno aktivnost v domači kletki živali, kot tudi anksiozno obnašanje v zvišanem labirintu. Prekomerna ekspresija FosB, mΔFosB ali Δ2ΔFosB v NAc ni vplivala na lokomotorno aktivnost, čeprav sta FosB in Δ2ΔFosB - vendar ne mΔFosB - povzročila majhno, vendar pomembno zmanjšanje anksiozno podobnega vedenja v povišanem plus labirintu (Slika 3D, E). Ti podatki kažejo, da FosB izražanje genov ne vpliva bistveno na obnašanje pri normalnih pogojih.

DISKUSIJA

Rezultati te študije potrjujejo, da je fenotip, ki je bil predhodno prijavljen za ΔFosB, dejansko posredovan z ΔFosB in ne z Δ2ΔFosB, alternativno preveden produkt ΔFosB.FosB mRNA, ki nima N-terminusa ΔFosB. Medtem ko naša predhodno uporabljena orodja za prekomerno izražanje ΔFosB povzročajo tudi generiranje nizkih ravni Δ2ΔFosB, pokažemo, da je prekomerna ekspresija v NAc mutirane oblike ΔFFosB mRNA, ki zaradi mutacije alternativnega startnega kodona ne more ustvariti Δ2ΔFosB, povzema povečanje tako kokainske nagrade kot odpornosti na socialni porazni stres, ki je bila prej opisana za ΔFosB (; ). Poleg tega prekomerna ekspresija Δ2ΔFosB ne vpliva na kokain ali na odzive na stres. Prav tako prvič dokazujemo, da prekomerna ekspresija polne dolžine FosB v NAc prav tako ne vpliva na vedenjske odzive na kokain ali stres.

Medtem ko ti rezultati ne izključujejo možnosti, da je Δ2ΔFosB kot manjši beljakovinski produkt. \ T FosB genov, lahko izvajajo funkcionalne učinke v drugih regijah možganov ali v perifernih tkivih, vendar naše ugotovitve potrjujejo edinstven prispevek ΔFosB, ki deluje v NAc-jevem krogu nagrajevanja, pri spodbujanju nagrajevanja kokaina in odpornosti na stres.

Izbor

  • ΔFosB mRNA povzroči nastanek ΔFosB in manjšega, alternativno prevedenega Δ2ΔFosB.
  • Prekomerna ekspresija ΔFosB samo potrjuje njen fenotip pro-nagrajevanja in pro-odpornosti.
  • Nasprotno pa Δ2ΔFosB ne vpliva na nagrajevanje kokaina ali ranljivost stresa.
  • FosB celotne dolžine, kodiran z FosB mRNA, prav tako ne vpliva na nagrajevanje ali odpornost.

Priznanja

To delo so podprli štipendije Nacionalnega inštituta za duševno zdravje in Nacionalnega inštituta za zlorabo drog ter fundacija Ishibashi in Japonsko društvo za promocijo znanosti (JSPS KAKENHI: 24591735).

Opombe

Omejitev odgovornosti založnika: To je PDF datoteka neurejenega rokopisa, ki je bil sprejet za objavo. Kot storitev za naše stranke nudimo to zgodnjo različico rokopisa. Rokopis bo podvržen kopiranju, stavljanju in pregledu dobljenega dokaza, preden bo objavljen v končni obliki. Upoštevajte, da se med proizvodnim procesom lahko odkrijejo napake, ki bi lahko vplivale na vsebino, in vse pravne omejitve, ki veljajo za revijo.

Reference

  1. Been LE, Hedges VL, Vialou V, Nestler EJ, Meisel RL. Izraz Delta JunD v nucleus accumbens preprečuje spolno nagrajevanje ženskih sirskih hrčkov. Geni Brain Behav. 2013, 12: 666 – 672. [PMC brez članka] [PubMed]
  2. Berton O, McClung CA, DiLeone RJ, Krishnan V, Russo S, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Bistvena vloga BDNF v mezolimbični poti dopamina pri socialnem poraznem stresu. Znanost. 2006, 311: 864 – 868. [PubMed]
  3. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Odsotnost konzervirane C-terminalne degronske domene prispeva k edinstveni stabilnosti ΔFosB. Eur J Neurosci. 2007, 25: 3009 – 3019. [PubMed]
  4. Chen JS, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kronični antigeni, povezani s Fos: stabilne variante deltaFosB, inducirane v možganih s kroničnim zdravljenjem. J Neurosci. 1997, 17: 4933 – 4941. [PubMed]
  5. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. ΔFosB povečuje spodbude za kokain. J Neurosci. 2003, 23: 2488 – 2493. [PubMed]
  6. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, RC Malenka. ΔFosB diferencialno modulira nucleus accumbens neposredno in posredno funkcijo poti. Proc Natl Acad Sci ZDA. 2013, 110: 1923 – 1927. [PMC brez članka] [PubMed]
  7. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Prekomerna ekspresija ΔFosB v nucleus accumbens poveča spolno nagrajevanje pri ženskih sirskih hrčkih. Geni Brain Behav. 2009, 8: 442 – 449. [PMC brez članka] [PubMed]
  8. Hiroi N, Brown J, Haile C, Ye H, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB mutantne miši: Izguba kronične indukcije kokaina s Fos-vezanimi beljakovinami in povečana občutljivost na psihomotorične in nagrajevalne učinke kokaina. Proc Natl Acad Sci ZDA. 1997, 94: 10397 – 10402. [PMC brez članka] [PubMed]
  9. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija dolgotrajnega kompleksa AP-1, sestavljenega iz spremenjenih Fos-podobnih beljakovin v možganih s kroničnim kokainom in drugimi kroničnimi zdravljenji. Neuron. 1994, 13: 1235 – 1244. [PubMed]
  10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch R, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Izražanje transkripcijskega faktorja ΔFosB v možganih nadzoruje občutljivost na kokain. Narava. 1999, 401: 272 – 276. [PubMed]
  11. Monteggia LM, Luikart B, Barrot M, Theobald D, Malkovska I, Nef S, Parada LF, Nestler EJ. Pogojni knockouti BDNF kažejo razlike med spoloma pri obnašanju v zvezi z depresijo. Biol Psychiatry. 2007, 61: 187 – 197. [PubMed]
  12. Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr ΔFosB povečuje koristne učinke kokaina, medtem ko zmanjšuje pro-depresivne učinke kapa-opioidnega agonista U50488. Biol Psychiatry. 2012, 71: 44 – 50. [PMC brez članka] [PubMed]
  13. Nestler EJ. Transkripcijski mehanizmi odvisnosti: vloga deltaFosB. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008, 363: 3245 – 3255. [PMC brez članka] [PubMed]
  14. Ohnishi YN, Ohnishi YH, Hokama M, Nomaru H, Yamazaki K, Tominaga Y, Sakumi K, Nestler EJ, Nakabeppu Y. Biol Psychiatry. 2011, 70: 487 – 495. [PMC brez članka] [PubMed]
  15. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery P, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Indukcija ΔFosB v regijah možganov, povezanih z nagrajevanjem, po kroničnem stresu. J Neurosci. 2004, 24: 10594 – 10602. [PubMed]
  16. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Različni vzorci indukcije ΔFosB v možganih zaradi zlorabe drog. Synapse. 2008, 62: 358 – 369. [PMC brez članka] [PubMed]
  17. Pitcher KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. ΔFosB v nucleus accumbens je ključnega pomena za krepitev učinkov spolnega nagrajevanja. Geni Brain Behav. 2010, 9: 831 – 840. [PMC brez članka] [PubMed]
  18. Pitcher KK, Vialou V, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM. Spolne izkušnje povečujejo nagrajevanje amfetamina in spinogenezo nucleus accumbens z aktivnostjo receptorja dopamin D1 in indukcijo deltaFosB. J Neurosci. 2013, 33: 3434 – 3442. [PMC brez članka] [PubMed]
  19. Roybal K, Theobold D, DiNieri JA, Graham A, Russo S, Krishnan V, Chakravarty S, Peevey J, Oehrlein N, Birnbaum S, Vitaterna MH, Orsulak P, Takahashi JS, Nestler EJ, Carlezon WA, Jr. Manija podobnega obnašanja, ki ga povzroča prekinitev ure. Proc Natl Acad Sci ZDA. 2007, 104: 6406 – 6411. [PMC brez članka] [PubMed]
  20. Teegarden SL, Bale TL. Zmanjšanje prehranske preference povzroča povečano čustvo in tveganje za ponovitev prehrane. Biol Psychiatry. 2007, 61: 1021 – 1029. [PubMed]
  21. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulacija stabilnosti ΔFosB s fosforilacijo. J Neurosci. 2006, 26: 5131 – 5142. [PubMed]
  22. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforilacija ΔFosB posreduje njeno stabilnost in vivo. Nevroznanost. 2009, 158: 369 – 372. [PMC brez članka] [PubMed]
  23. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, III, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, III, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren B, Krishnan V, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA, Nestler EJ. ΔFosB v vezjih za nagrajevanje možganov posreduje odpornost na stres in antidepresivne odzive. Narava Neurosci. 2010a, 13: 745 – 752. [PMC brez članka] [PubMed]
  24. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ. Serumski odzivni faktor spodbuja prožnost kroničnega socialnega stresa z indukcijo ΔFosB. J Neurosci. 2010b, 30: 14585 – 14592. [PMC brez članka] [PubMed]
  25. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham D, Green TA, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños CA. Vpliv ΔFosB v nucleus accumbens na vedenje, povezano z naravnim nagrajevanjem. J Neurosci. 2008, 28: 10272 – 10277. [PMC brez članka] [PubMed]
  26. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S. ΔFosB uravnava tek kolesa. J Neurosci. 2002, 22: 8133 – 8138. [PubMed]
  27. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, DiLeone RJ, Kumar A, Nestler EJ. ΔFosB: Bistvena vloga ΔFosB v nucleus accumbens v delovanju morfina. Narava Neurosci. 2006, 9: 205 – 211. [PubMed]