Receptorski sistem CRF-CRF1 v centralnih in bazolateralnih jedrih amigdale diferencira med prekomernim uživanjem okusne hrane (2013)

. 2013 Nov; 38 (12): 2456 – 2466.

Objavljeno na spletu 2013 julij 10. Vnaprej objavljen v spletu 2013 junij 10. doi:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Minimalizem

Zelo prijetna hrana in dieta sta pomembna dejavnika za razvoj kompulzivnega prehranjevanja pri debelosti in motnjah hranjenja. Prej smo dokazali, da prekinitve dostopa do okusne hrane povzročajo faktor, ki sprošča kortikotropin - 1 (CRF1) vedenja z antagonisti receptorjev, ki vključujejo prekomerno prijeten vnos hrane, hipofagijo rednega čoviča in tesnobno vedenje. Vendar možganska področja, ki posredujejo pri teh učinkih, še vedno niso znana. Moške podgane Wistar so bodisi hranjene z žrebanjem neprekinjeno za dneve 7 na teden (Chow / chow skupina) ali hranjeni črevniki z občasno 5 dnevi / teden, ki jim sledi saharoza, prijetna prehrana 2 dni / teden (Chow / Palatable skupina). Po kronični prehrani prehrane učinki mikroinfuzije CRF1 antagonist receptorja R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / stran) v osrednjem jedru amigdale (CeA), bazolateralnem jedru amigdale (BlA) ali posteljnem jedru stria terminalis (BNST) smo ovrednotili pri čezmernem vnosu o okusni prehrani, hipofagiji, ki jo je treba zaužiti, in vedenje, podobno tesnobi. Poleg tega so imunsko obarvanje na CRF ovrednotili v možganih podgan, ki so bile na dieti. Intra-CeA R121919 je preprečil prekomerno prijeten vnos hrane in tesnobno vedenje Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na hipofagijo črevesa. Nasprotno, intra-BlA R121919 je zmanjšal hipofagijo črevesa v Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na prekomerno prijeten vnos hrane ali na tesnobno vedenje. Zdravljenje znotraj BNST ni imelo učinka. Zdravljenja niso spremenila vedenja Chow / chow podgane. Imunohistokemija je odkrila povečano število CRF-pozitivnih celic v CeA - vendar ne v BlA ali BNST - Chow / Palatable podgane med umikom in obnovljenim dostopom do okusne prehrane v primerjavi s kontrolo. Ti rezultati zagotavljajo funkcionalne dokaze, da je CRF – CRF1 receptorski sistem v CeA in BlA ima različno vlogo pri posredovanju nelagodnega vedenja, ki je posledica prijetnega prehranjevalnega kolesarjenja.

ključne besede: faktor, ki sprošča kortikotropin, BNST, odvisnost, tesnoba, hipofagija, podgana

UVOD

Zelo okusna hrana (npr. Hrana, bogata s sladkorjem in / ali maščobami) naj bi bila pomemben dejavnik pri nastanku kompulzivnega prehranjevanja pri določenih oblikah debelosti in motenj hranjenja (; ). Med zasvojenostjo z drogami in prekomernim vnosom zelo prijetne hrane obstaja veliko analogij, vključno z izgubo nadzora nad drogo / hrano, nezmožnostjo prekinitve uporabe / prenajedanja kljub negativnim posledicam, stiski in disforiji, ko se poskušate vzdržati uživanja drog / hrane (; ). Predvideva se, da so ti pogosti simptomi posledica disfunkcij možganskih vezi, ki se prekrivajo z odvisnostjo od mamil in kompulzivnim prehranjevanjem.

Kortikotropin sproščajoči faktor tipa 1 (CRF)1) antagonisti receptorjev so bili predlagani kot nove terapevtske tarče za zasvojenost z motnjami zaradi njihove sposobnosti zmanjšanja motivacijskih učinkov odtegnitve (). CRF je kritični posrednik endokrinih, simpatičnih in vedenjskih odzivov na stres (; ). CRF v paraventrikularnem jedru hipotalamusa nadzira odziv na stres hipotalamično-hipofizno-nadledvični (HPA), medtem ko so vedenjski učinki CRF neodvisni od HPA in posredujejo ekstrahipotalamične možganske regije (). Ekstrahipotalamični CRF – CRF1 receptorski sistem se pridobiva v odvisnosti od vseh znanih zlorab drog prek ciklov zastrupitve / odvzema, in ta hiperaktivacija velja za pogost element, ki spodbuja prekomerno uživanje drog prek negativno okrepljenega mehanizma (tj. kompulzivnega vnosa drog, ki nastane z odstranitvijo odtegnitve oz. inducirano negativno čustveno stanje; ; ; ).

Čeprav so bile podobnosti med zlorabami drog in hrano široko raziskane glede njihovih pozitivnih okrepitvenih lastnosti (tj. Prekomernega vnosa hrane, pridobljenega s prijetnim učinkom; ; ; ; ; ), hipoteza, da je lahko čezmerno uživanje hrane oblika "samozdravljenja" za lajšanje negativnega čustvenega stanja, povezanega z umikom iz zelo okusnih živil, je relativno premalo proučena (; ; ).

Prej smo pokazali, da umik iz kroničnega, občasnega dostopa do zelo okusne hrane povzroča zaposlovanje ekstrahipotalamičnega sistema CRF in pojav CRF1 od odvisnosti od receptorjev neprilagojeno vedenje, ki vključuje prekomerno uživanje hrane ob ponovnem dostopu do zelo prijetne prehrane, hipofagijo sicer sprejemljive prehrane z zajtrkom in tesnobno vedenje med abstinenco ().

Vendar so neposredni funkcionalni dokazi o tem, katero področje možganov je odgovorno za CRF1 od receptorjev odvisnih vedenjskih prilagoditev, ki jih povzroča okusna prehrana, ni. Cilj te študije je bil torej ugotoviti, ali je na mestu specifičen antagonizem CRF1 receptorji znotraj osrednjega jedra amigdale (CeA), bazolateralno jedro amigdale (BlA) ali posteljno jedro stria terminalis (BNST) so lahko blokirali prekomerni vnos zelo prijetne hrane, odtegnitev povzročila hipofagijo rednega chow in vedenje, podobno tesnobi. Poleg tega je bila ta študija namenjena ugotavljanju, ali se je pri podganah, ki so bile prehranjene s prehrano, podražile izražanje CRF v CeA, BlA in BNST v primerjavi s kontrolo z uporabo imunohistokemije. Čeprav smo že pokazali, da je umik iz okusne hrane povezan s povečanim izražanjem CRF v CeA, trenutno na prehrano kolesarjenje vplivata BlA in BNST.

MATERIALI IN METODE

Predmeti

Moški podganji Wistar (n= 140, od tega podgane 33 za poskuse na CeA, podgane 46 za poskuse s BlA, podgane 39 za poskuse BNST in podgane 22 za poskus imunohistokemije; Dodatna tabela 1), ki tehtajo 180 – 230 g in 41 – 47 dni ob prihodu (Charles River, Wilmington, MA, ZDA), so bili samski nameščeni v žice, plastične kletke (27 × 48 × 20 cm) na vzvratni luči 12-h cikla (prižge se ob urah 1100), v vivariju z vlago (60%) in temperaturno nadzorovanim (22 ° C) vivarijem, ki ga odobri AAALAC. Podgane so imele ad libitum dostop do kosmiče na osnovi koruze (Harlan Teklad LM-485 prehrana 7012; 65% kcal ogljikovih hidratov, 13% maščobe, 21% beljakovin, metabolizabilna energija 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, ZDA) in vode, če ni drugače določeno . Postopki, uporabljeni v tej študiji, so se držali Nacionalnega inštituta za zdravje pri oskrbi in uporabi laboratorijskih živali (številka publikacije NIH 85-23, spremenjen 1996) in Principi laboratorijske oskrbe živali in jih je odobrilo Medicinsko kampuso University University iz Bostona Odbor za oskrbo in uporabo živali.

Droge

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropil-pirazolo [2,3-a] pirimidin-7-amin, NBI 30775) je bil sintetiziran, kot je opisano v ). R121919 je močan, ne peptiden, visoko afinitetni CRF1 antagonist receptorjev (Ki= 2 – 5 nM), kar kaže na 1000-krat šibkejšo aktivnost na CRF2 receptor, protein, ki veže CRF, ali druge vrste receptorjev 70 (). R121919 smo solubilizirali z 18: 1: 1 mešanico fiziološke raztopine: etanol: kremofor.

Vedenjski testi

Ad libitum prijeten način prehranjevanja prehrane

Dostop do ad libitum zamenjala se je okusna prehrana, kot je bilo opisano prej (, , ; ). Na kratko, po aklimatizaciji so podgane razdelili v dve skupini, ki sta ustrezali vnosu hrane, telesni teži in učinkovitosti prehrane v prejšnjih dneh 3 – 4. Ena skupina je bila nato oskrbovana ad libitum dostop do prehrane z zajtrkom (Chow) za dneve v tednu 7 (Chow / chow, kontrolna skupina te študije), medtem ko je bila drugi skupini zagotovljen brezplačen dostop do krave za 5 dni v tednu, ki so ji sledili dnevi 2 ad libitum do diete z zelo saharozo z okusom čokolade z okusom čokolade (Palatable; Chow / Palatable skupina). Vsi vedenjski testi so bili opravljeni pri podganah, ki so vsaj 7 tednov prehranjevale. Dieta "chow" je bila zgoraj opisana chow-jeva hrana iz Harlana na osnovi koruze, medtem ko je bila okusna dieta prehransko popolna, s saharozo (50% kcal), z okusom čokolade, dieta na osnovi AIN-76A, ki je primerljiva z makrohranili razmerja in energijska gostota v dieti s čajem (formula 5TUL z okusom čokolade: 66.7% kcal ogljikovih hidratov, 12.7% maščob, 20.6% beljakovin, presnovljiva energija 344 kcal / 100 g (Test Diet, Richmond, IN, ZDA), formulirana kot natančnost 45 mg peleti za povečanje njegove želje). Za kratkost sta prva 5 dni (samo čaj) in zadnja 2 dneva (čaj ali okus po preizkusni skupini) vsakega tedna v vseh poskusih označena kot C in P faze. Preizkusna prehrana je bila zagotovljena v GPF20 'J-hranilnikih (Ancare, Bellmore, NY, ZDA). Diete niso bile sočasno na voljo.

Poskusi vnosa hrane

Podgane so v temnih ciklih v domačih kletkah dobile predhodno tehtano hrano. Zdravljenja so izvajali pri podganah, ki so bile diete ciklirane vsaj 7 tedne po obnovitvi dostopa do okusne prehrane (C→P fazo) ali prehrano z zajtrkom (P→C faza). R121919 je bil mikroinfuziran dvostransko znotraj CeA, BlA ali BNST (0, 0.5 in 1.5 μg / stran, 0.5 μl / stran, 30-min čas pred obdelavo) z uporabo randomiziranih znotraj latinsko kvadratnih modelov.

Preizkus svetlobe in temnega polja

Podgane smo testirali na 10 min v pravokotni škatli svetlo-temno (50 × 100 × 35 cm), v kateri je bil averzivni predal za svetlobo (50 × 70 × 35 cm) osvetljen z lučjo luči 60. Temna stran (50 × 30 × 35 cm) je imela neprozoren pokrov in ∼0 luks svetlobe. Oba predelka sta bila povezana z odprtimi vrati, ki so omogočali prosto premeščanje oseb. Testiranje je potekalo po vsaj 7 tedenskih dietah, 5 – 9 h po prehodu iz okusne prehrane na prehrano z zajtrkom (P→C faza); ta časovna točka zagotavlja pojav vedenja, ki je podobno tesnobi, ki ga povzroči umik iz prijetne hrane v Chow / Palatable podgane (, ). Podgane so pred testiranjem zadrževale v tihi, temni predsobi vsaj 2 h. Beli hrup je bil prisoten v vseh navadah in testiranjih. Na dan testiranja so podgane dvostransko mikrofugirali z R121919 znotraj CeA, BlA ali BNST (0, 0.5 in 1.5 μg / stran, 0.5 μl / stran) 30 min, preden so jih dali v temen predel proti vratom in vedenje je bilo posneto z video posnetki za kasnejše točkovanje. Obdelave so potekale z uporabo zasnove med temi. Čas, preživet v odprtem predalu, je bil izmerjen kot indeks vedenja, podobnega tesnobi. Aparat je bil obrisan z vodo in posušen po vsakem predmetu.

Intrakranialne kirurgije, mikroinfuzijski postopek in namestitev kanila

Intrakranialne operacije

Podgane so stereotaksično vsadile z dvostranskimi, intrakranialnimi kanili, kot je opisano prej (; ; ). Na kratko so bile vodilne kanile iz nerjavečega jekla (24 merilnik, Plastics One, Roanoke, VA, ZDA) dvostransko spuščene 2.0 mm nad CeA, BlA ali BNST. Štirje vijaki draguljarskega jekla so bili pritrjeni na lobanjo podgane okoli kanile. Uporabili smo zobno restavrativno napolnjeno smolo (Henry Schein, Melville, NY, ZDA) in akrilni cement, ki sta oblikovala podstavek, ki je trdno pritrdil kanilo. Koordinate kanile iz bregme, uporabljene za CeA, so bile: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (iz lobanje), pri čemer je bila sekalna palica postavljena 5.0 mm nad interakcijsko črto, v skladu z atlasom ). Koordinate kanile, uporabljene za BlA, so bile: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (z lobanje) z ravno lobanjo, glede na ). Koordinate kanile, uporabljene za BNST, so bile: AP −0.6, ML ± 3.5, DV −4.8 (z lobanje) z ravnim lobanjskim in nagibnim kotom 14 °. Nalepka iz nerjavečega jekla (Plastics One) je ohranila prehodnost kanile. Po operaciji je bilo podganam omogočeno obdobje okrevanja na dan 7, v katerem so jih dnevno obravnavali.

Postopek mikroinfuzije

Zdravilo se je mikroinfužiralo v možganih podgan, kot je bilo predhodno opisano (; ). Za intrakranialno mikroinfuzijo je bil preskusni model odstranjen iz vodilne kanile in nadomeščen z injektorjem iz nerjavečega jekla z merilnikom 31, ki štrli 2 mm čez konico vodilne kanile; injektor je bil preko cevi PE 20 povezan z mikroskopom Hamilton (Hamilton, Reno, Nevada), ki ga poganja multiinfuzijska črpalka za mikroinfuzijo (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, ZDA). Mikroinfuzije smo izvedli v volumnu 0.5 μl, oddanem v 2 min; injektorji so bili na mestu 1 dodatne minute, da zmanjšate povratni tok.

Namestitev kanil

Postavitev kanile je bila preverjena na koncu vseh testiranj (glej Slika 1). Preiskovanci so bili anestezirani (izofluran, 2 – 3% v kisiku) in transkardno perfuzirani z ledeno hladnim paraformaldehidom 4% (PFA) v vodi (pH 7.4) in mikroinfuzirani z vijolico Cresyl (0.5 μl / stran). Nato so bili možgani čez noč fiksirani v 4% PFA in uravnoteženi v 30% saharozi v PFA. Koronalni odseki 40 μm so bili zbrani s pomočjo kriostata (Thermo Scientific HM-525) in umestitve preverjene pod mikroskopom. Štirideset oseb (14 za CeA, 16 za BlA in 10 za BNST) je bilo izključenih iz analize zaradi napačne postavitve kanile. Podatki iz napačnih umestitev so bili analizirani, da bi pomagali razlagati specifičnost vplivov na mestu.

Slika 1 

Risba možganskih rezin kronskih podgan. Pike predstavljajo mesta injiciranja v osrednje jedro amigdale (CeA) (a), bazolateralno jedro amigdale (BlA) (b) in ležišče jedra stria terminalis (BNST) (c), vključeno v analizo podatkov. ...

CRF Imunohistokemija

Vedenjski postopek, perfuzija in imunohistokemija

Podgane (n= 22) so prehranjevali po dieti 7 tednov, anestezirali in perfuzirali 2 – 4 h, potem ko so prešli iz okusne prehrane na prehrano z žrebom (P→C faza) ali od zaužitja prehrane do okusne prehrane (C→P faza). Podgane so anestezirali in jih nato transkardično perfuirali s fiziološko raztopino + 2% (m / v) natrijevim nitritom (pH = 7.4) in z 4% paraformaldehidom, puferiranim v Boraxu (pH = 9.5). Podgane so nato obglavili in možgane takoj zbrali, dali v ∼20 ml 4% PFA in jih shranili v 30% saharozo v raztopini 4% PFA pri 4 ° C do nasičenja.

Za vizualizacijo CRF so možgane razrezali na 40 μm koronalne odseke z uporabo kriostata in nato shranili v krioprotektantu pri -20 ° C. Vsak šesti odsek (240 μm narazen) celotnega CeA, BlA in BNST je bil izbran sistematično naključno in obdelan za imunocitokemijo. Prosto plavajoči odseki so bili sprani s fiziološko raztopino kalijevega fosfatnega pufra (KPBS). Po začetnem pranju so bili deli 0.3 minut inkubirani v 30% raztopini vodikovega peroksida KPBS, da so blokirali endogene peroksidaze. Odseke nato spet speremo in damo v blokirno raztopino (3% normalnega kozjega seruma, 0.25% Triton X100 in 0.1% govejega serumskega albumina) za 2 uri. Odseke nato prenesemo v primarno protitelo (razredčitev 1: 100, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) v raztopino za blokiranje in inkubiramo 72 ur pri 4 ° C. Po dodatnem izpiranju smo odseke inkubirali v sekundarni protitelesi (razredčitev 1: 1000, biotinilirani protitjec (BA-1000) Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornija) v blokirni raztopini 2 uri pri sobni temperaturi. Odseke smo sprali in nato 1 uro inkubirali v raztopini avidin-biotinove hrenove peroksidaze ABC (Vector Laboratories) v raztopini za blokiranje. Odseke smo nato inkubirali z uporabo diaminobenzidinskega substratnega kompleta (Vector Laboratories) v skladu z navodili proizvajalca in po končani reakciji odseke sprali v KPBS, jih namestili na stekelca in pustili, da se sušijo čez noč. Naslednji dan smo diapozitive dehidrirali z uporabo stopnjevanih koncentracij alkohola in pokrijemo z DPX-montantom (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, ZDA).

Kvantifikacija celic CRF +

Kvantifikacija celic CRF + je bila izvedena v skladu z nepristranskim stereološkim pristopom. Za vsako serijo obarvanja smo analizirali vrsto odsekov. Odseke smo analizirali s pomočjo mikroskopa BX-51 Olympus (Center Valley, PA, ZDA), opremljenega z živo kamero Rotiga 2000R (QImaging, Surrey, BC, Kanada), triosnim motoriziranim odrom MAC6000 XYZ (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, ZDA) in delovno postajo za osebni računalnik. Vsa preiskava celic je na kodiranih diapozitivih naredila preiskovalca, ki je sledila pogojem zdravljenja. Vsako območje je bilo narisano na digitalizirani sliki vsakega naključno izbranega odseka z uporabo modula za optični frakcionarni tok programske opreme Stereo Investigator (MicroBrightField, Williston, VT, ZDA). Vsi obrisi so bili narisani pri majhni povečavi z uporabo cilja Olympus PlanApo N 2X z numerično odprtino 0.08 in šteti s pomočjo cilja Olympus UPlanFL N 40X z numerično odprtino 0.75. Ogrodje mreže in števni okvir sta bila nastavljena na 275 × 160 μm. Uporabljena je bila zaščitna cona 2 μm in višina disekcije 20 μm. Zamrznjeni odseki so bili prvotno razrezani z nazivno debelino 40 μm. Zaradi imuno obarvanja in pritrditve se spremeni spremenjena debelina odseka, ki je bila izmerjena na vsakem mestu za štetje. Programska oprema je izračunala povprečno debelino preseka in uporabila za oceno celotne prostornine vzorčnega območja in skupnega števila celic CRF +.

Statistična analiza

Študentski t-testov smo uporabili za analizo dejavnikov z dveh ravni. Za analizo dejavnikov z več kot dvema stopnjama smo izvedli ANOVA. Po pomembnem omnibusnem učinku ANOVA (p<0.05), Fisherjev LSD naknadnega uporabljeni so bili primerjalni testi. Dunnettov test je bil uporabljen za ugotavljanje, ali je R121919 normaliziral vnos Chow / Palatable podgane za zdravljenje z vozili Chow / chow-fed ravni. Uporabljeni programski / grafični paketi so bili Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, ZDA), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, Kalifornija, ZDA), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, ZDA) in PASW Statistika 18.0 (SPSS, Chicago, IL, ZDA).

REZULTATI

Učinki mikroinfuzije R121919 v CeA

Prekomerni vnos okusne hrane

Da bi ugotovili, ali CRF1 receptorji v CeA posredujejo prekomerni vnos okusne hrane pri prehrani s podganimi kolesami, mikroinfuziramo mesto, posebej selektivni CRF1 antagonista receptorja R121919 v to možgansko območje in izmeril vnos hrane na začetku P faza. Kot je prikazano v Slika 2a, vnos prehranske hrane, ki jo zdravijo z vozili Chow / Palatable podgane so bile dvakrat večje kot pri krmljenju s hrano, ki so ga hranili s črevo Chow / chow podgane. Antagonizem CeA CRF1 receptorji so v celoti blokirali to prekomerno uživanje okusne hrane v Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na vnos hrane pri nadzornih podganah (Chow / chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p<0.05). Post hoc primerjava je pokazala, da je najvišji odmerek R121919 (1.5 μg / stran) znatno zmanjšal prijeten vnos hrane v primerjavi z vozilom v Chow / Palatable podgane. Zaužitje Chow / Palatable podgane po mikroinfuziji odmerka 1.5 μg / stranski odmerek niso bistveno razlikovale od vnosa, ki je bil zdravljen z vozilom Chow / chow podgane. Potrjevanje posebnosti učinkov za CRF1 receptorjev v CeA, pri vnosu hrane pri osebah z napačno postavljenimi kanili ni bilo opaziti učinka (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Slika 2 

Učinki mikroinfuzije selektivnega faktorja, ki sprošča kortikotropin-1 (CRF1) antagonist receptorja R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / stran) v osrednjem jedru amigdale (CeA) ob prekomernem uživanju okusne hrane, redna hipofagija ...

Hipofagija redne prehrane z jedmi

Da bi ugotovili, ali CRF1 receptorji v CeA posredujejo hipofagijo prehrane z žrebanjem pri podganah, ki so prehranjevali prehrano, mi smo mikrofundirali R121919 v to možgansko območje in izmerili vnos hrane na začetku C faza. Kot je prikazano v Slika 2b, vnos vozil Chow / Palatable podgane je bila ∼1 / 3 od vnosa vozil, ki jih zdravijo Chow / chow podgane (hipofagija). Zdravljenje z zdravilom R121919 ni vplivalo na hipofagijo rednega čow-a Chow / Palatable podgane (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Potrditev rezultatov, pridobljenih v P faza, mikroinfuzija R121919 v CeA ni vplivala na vnos črevesja Chow / chow podgane (Chow / chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Akutno tesnobno vedenje, ki ga povzroči umik

Za določitev, ali je CeA CRF1 receptorji posredujejo pri negativnem čustvenem stanju, ki ga povzroči umik prijetne hrane pri kolesarjenih podganah, mikroinfuziramo mesto, posebej R121919, v to območje možganov in izmerimo anksiozno vedenje s testom 5 h svetlo-temnega polja v C faza. Kot je prikazano v Slika 2c, podgane, ki so se akutno umaknile zaradi kroničnega, občasnega dostopa do zelo prijetne prehrane, so pokazale znatno zmanjšanje časa, preživetega v svetlobnem oddelku svetlo-temnega polja. Mikroinfuzija 1.5 μg / stran R121919 v CeA, odmerek, ki je učinkovito zmanjšal prekomerno uživanje okusne hrane, je v celoti preprečil tesnobno vedenje s povečanjem časa, preživetega v svetlobnem območju škatle v Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na vedenje v Chow / chow podgane (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Potrditev posebnosti učinkov na CRF1 receptorjev v CeA, pri vnosu hrane pri osebah z napačno postavljenimi kanili ni bilo opaziti učinka (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Učinki mikroinfuzije R121919 v blA

Prekomerni vnos okusne hrane

Za določitev, ali je BlA CRF1 receptorji posredujejo prekomerno uživanje okusne hrane pri podganah, ki so bile prehranjene s prehrano, mi smo mikroinfugirali mesto R121919 posebej v to možgansko območje in izmerili vnos hrane na začetku P faza. Za razliko od tega, kar smo opazili po dajanju R1219191 v CeA, kot je prikazano v Slika 3a dvostranska mikroinfuzija selektivnega CRF1 antagonist receptorjev v BlA ni pomembno vplival na prijeten vnos hrane v Chow / Palatable podgane (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Podobno je z rednim uživanjem črevesja v Chow / chow na podgane mikroinfuzija R121919 ni vplivala (Chow / chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Slika 3 

Učinki mikroinfuzije selektivnega faktorja, ki sprošča kortikotropin-1 (CRF1) antagonist receptorja R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / stran) v bazolateralnem jedru amigdale (BlA) ob prekomernem uživanju okusne hrane, rednih hipofagij ...

Hipofagija redne prehrane z jedmi

Da bi ugotovili, ali CRF1 receptorji v BlA posredujejo hipofagijo črevesa pri kolesarjenih podganah, mi smo mikrofundirali R121919 v to možgansko območje in izmerili vnos hrane na začetku C faza. Kot je prikazano v Slika 3bPo mikroinfuziji CRF so opazili znatno povečanje rednega vnosa črevesja1 antagonist receptorjev v BlA od Chow / Palatable podgane (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Dejansko je bil največji odmerek (1.5 μg) R121919 mikroinfundiran v BlA med C faza je znatno povečala porabo običajne prehrane z zajtrkom za 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) odstotkov v primerjavi z vozilom Chow / chow podgane. Zdravilo R121919 je oslabilo hipofagijo, ki je povzročila odtegnitev, pri največjem injiciranem odmerku, vendar ni popolnoma blokiralo. Potrditev podatkov, pridobljenih v P faza, mikroinfuzija R121919 ni vplivala na redni vnos črevesja Chow / chow podgane (Chow / chow, F (2, 20) = 0.25, NS). Potrjevanje posebnosti učinkov za CRF1 receptorjev v BlA, pri zaužitju hrane oseb z napačno postavljenimi kanili ni bilo opaziti učinka (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Akutno tesnobno vedenje, ki ga povzroči umik

Za določitev, ali je BlA CRF1 receptorji posredujejo v negativnem čustvenem stanju, ki ga povzroči akutno umikanje živil s hrano pri kolesarjenih podganah, mikroinfuziramo mesto, posebej R121919, v to območje možganov in izmerimo anksiozno vedenje 5 h v C faza. Kot je prikazano v Slika 3c, umaknjena živila Chow / Palatable podgane so preživele manj časa v predelu svetlobe v primerjavi z Chow / chow podgane (DIET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, mikroinfundiran v BlA, ni bistveno vplival na čas, preživet v svetlobnem območju (DOZA: F (1, 39) = 0.01, NS).

Učinki mikroinfuzije R121919 v BNST

Prekomerni vnos okusne hrane

Za določitev, ali BNST CRF1 receptorji posredujejo prekomerno uživanje okusne hrane pri podganah, prehranjenih s prehrano, R121919 je bil na mestu možganov posebej mikroinfuziran in vnos hrane izmerjen na začetku P faza. Kot je prikazano v Slika 4b, dvostranska mikroinfuzija selektivnega CRF1 antagonist receptorjev v BNST ni pomembno vplival na prijeten vnos hrane v Chow / Palatable podgane (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Podobno je z rednim uživanjem črevesja v Chow / chow na podgane mikroinfuzija R121919 ni vplivala (Chow / chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Slika 4 

Učinki mikroinfuzije selektivnega faktorja, ki sprošča kortikotropin-1 (CRF1) antagonist receptorja R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / stran) v ležišču jedra stria terminalis (BNST) ob prekomernem uživanju okusne hrane, hipofagija ...

Hipofagija redne prehrane z jedmi

Za določitev, ali BNST CRF1 receptorji posredujejo hipofagijo prehrane z žrebanjem pri kolesarjenih podganah, mi smo R121919 mikrofundirali v to možgansko območje in izmerili vnos hrane na začetku C faza. Kot je prikazano v Slika 4a, Mikroinfuzija R121919 ni vplivala na redni vnos črevesja Chow / chow podgane (Chow / chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Podobno zdravljenje z zdravilom R121919 ni vplivalo na hipofagijo navadne čeljusti Chow / Palatable podgane (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Akutno tesnobno vedenje, ki ga povzroči umik

Za določitev, ali BNST CRF1 receptorji posredujejo pri negativnem čustvenem stanju, ki ga povzroči akutno umikanje živil s hrano pri kolesarjenih podganah, mikroinfuziramo mesto, posebej R121919, v to območje možganov in merimo tesnobno vedenje 5 h po prehodu iz P→C faza. Kot je prikazano v Slika 4c, umaknjena živila Chow / Palatable podgane so v svetlobnem prostoru preživele manj časa v primerjavi s kontrolo Chow / chow podgane (DIET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, dvostransko mikroinfundiran v odmerku 1.5 μg / stran v BNST, ni pomembno vplival na čas, preživet v svetlobnem območju (DOZA: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF Imunohistokemija

Slika 5 prikazuje reprezentativne mikrografije celic CRF + v celicah CeA, BlA in BNST v Chow / chow in Chow / Palatable podgane, ki sledijo ad libitum prijeten postopek prehrane prehrane. Analiza imunoreaktivnosti CeA na CRF je pokazala, da je med njimi pomembno razliko Chow / Palatable in Chow / chow podgane med obema C in P faza (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Statistično pomembnih razlik med skupinami niso opazili niti pri BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) niti pri BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Slika 5 

Reprezentativne mikrografije imunoreaktivnosti kortikotropinskega faktorja (CRF) v osrednjem jedru amigdale (CeA) (a-d), bazolateralnega jedra amigdale (BlA) (e-h) in posteljnega jedra stria terminalis (BNST ) (i – l) ...

DISKUSIJA

Ta študija je bila zasnovana za funkcionalno identifikacijo možganskega mesta, ki je odgovorno za čezmerni vnos zelo prijetne hrane pri podganah v režimu prehranjevanja s prehrano. Naše ugotovitve dokazujejo veliko vlogo CeA pri posredovanju prekomernega uživanja zelo prijetne hrane. Poleg tega dokazujemo, da ima sistem CRF v sistemu BlA, za razliko od CeA, vlogo v procesu razvrednotenja, ki se pojavi pri zmanjšanju premikov v višini nagrade za hrano.

Prej smo pokazali, da ponavljajoči se cikli dostopa do sladkega, zelo prijetnega prehranjevanja in akutnega umika s sladkorne, zelo prijetne prehrane vodijo v prekomerno uživanje okusne hrane, pa tudi do akutne hipofagije, ki je odvisna od umika, redne prehranjevalne čajne hrane in podobnega tesnobe (; , ). Tu prekomerno prehranjevanje, ki ga opazimo, temelji na negativnem čustvenem stanju, ki ga povzročajo ponavljajoče se epizode akutnega umika iz zelo prijetne hrane prek ekstrahipotalamičnega CRF – CRF1 mehanizem, ki ga posreduje receptorski sistem, ki spominja na "vžigalni" proces, na katerem temeljijo odvisnostne motnje (; ; ; ).

Rezultati te študije kažejo, da je CRF1 receptorji CeA in BlA različno posredujeta prilagajanju hranjenja in anksioznemu vedenju kronično prehranjenih podgan. Upravljanje selektivnega CRF1 antagonist receptorjev znotraj CeA blokiral tako prekomerno prehranjevanje kot anksioznost Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na hipofagijo neodkrite, redne prehrane. Zanimivo je, da je uporaba zdravila R121919 v zdravilih BlA zmanjšala hipofagijo manj privlačne prehrane z zajtrkom (tj. Povečan redni vnos črevesja) pri Chow / Palatable podgane, ne da bi to vplivalo na prekomerno prehranjevanje ali podobno tesnobno vedenje. Ko je mikroinfuziran v BNST, R121919 ni vplival na nobeno od spremenljivk, izmerjenih v Chow / Palatable podgane (prekomerno uživanje zelo prijetne prehrane, uživanje redne prehrane z zajtrkom in akutno tesnobno vedenje, ki ga povzroči umik). Opaženi farmakološki učinki so bili selektivni za Chow / Palatable podgane, ker R121919, mikroinfuziran znotraj CeA, BlA ali BNST od Chow / chow kontrolne podgane niso imele nobenega učinka. Zato CRF – CRF1 Zdi se, da receptorski sistem CeA in BlA različno posredujeta vedenjskim rezultatom, ki so posledica kroničnega prijetnega prehranjevalnega kolesarjenja. Po drugi strani CRF – CRF1 Videti je, da receptorski sistem BNST ni vključen v vedenjske prilagoditve, ki jih povzroča okusna prehrana.

Naše vedenjske in farmakološke ugotovitve so bile podprte z opažanjem, da je imunoreaktivnost CRF v CeA od Chow / Palatable podgane se je v primerjavi z Chow / chow nadzor nad podganami med umikom in po ponovnem dostopu do zelo prijetne prehrane (). Zanimivo je, da v BLA ali BNST niso opazili pomembne razlike v imunoreaktivnosti CRF med skupinami. Povečana imunoreaktivnost CRF, opažena v CeA Chow / Palatable podgane je skladno z našimi dosedanjimi ugotovitvami, da je akutni umik iz okusne prehrane povezan s povečanim sproščanjem CRF v ceavzijski obliki). Vendar, v nasprotju s prejšnjim, obnova dostopa do okusne prehrane ni povzročila, da bi se izražanje CRF v CeA povrnilo na kontrolne ravni. Neskladje med rezultati, pridobljenimi tukaj in prejšnjim opazovanjem, je lahko povezano z različno časovno točko zbiranja možganov in različno anatomsko ločljivostjo tehnik, sprejetih za merjenje izražanja CRF. Kljub temu je opazeno povečanje izražanja CRF v CeA med odtegnitvijo in po ponovnem dostopu do okusne prehrane skladno s selektivnimi učinki blokade anksioznega vedenja (med odtegnitvijo) in pretiranega prehranjevanja (ponovni dostop) v Chow / Palatable podgane. Navidezno nedoslednost med obema študijama je zato mogoče razložiti na naslednji način: med akutnim prijetnim odvzemom hrane se izraz CFF v dietah, ki so bili podvrženi dieti, podaljša v primerjavi s kontrolo in je odgovoren za nastanek negativnega učinka. Izraz CeA CRF ostaja spremenjen do prvih ur zelo prijetnega dostopa, kar povzroča prekomerno prehranjevanje. Po preveliki porabi hrane pa se CRF vrne nazaj na kontrolne ravni ().

Prikazani vedenjski, farmakološki in molekularni rezultati podpirajo hipotezo, da je CRF – CRF1 receptorski sistem v CeA ima pomembno vlogo pri posredovanju negativnega afektivnega stanja in prevelikega vnosa okusne hrane pri podganah, prehranjenih s prehrano, podobno kot je bilo nazorno dokazano pri odvisnosti od alkohola in drog (). Podgane, ki so odvisne od etanola, kažejo povečano zunajcelično sproščanje CRF v CeA med odvzemom in dajanje antagonista receptorja CRF v CeA lahko blokira eskalirano samo dajanje etanola med odvzemom (; ). Analogno, živali, odvisne od opiata, kažejo povečano izražanje CRF v CeA med odtegnitvijo () in blokada receptorjev CRF v CeA, vendar ne BNST, zmanjšuje vedenjske znake odtegnitve (; ). Ključna vloga CRF – CRF1 sistem v CeA se je izkazal tudi v nikotinski odvisnosti. Odvzem nikotina, oborjenega z mecamilaminom, je namreč povezan s hiperaktivacijo CRF – CRF1 receptorski sistem v CeA (), in intra-CeA, vendar ne znotraj-BlA, mikroinfuzija CRF1 antagonist receptorjev zniža zvišanje od nikotina odvisno od dviga praga nagradne možgane (). Pri podganah, odvisnih od kanabinoidov, je oborjeni odvzem povezan z izrazito zvišanjem koncentracije zunajceličnega CRF v CeA (). Skupaj ti dokazi močno podpirajo hipotezo, da je CRF – CRF1 receptorski sistem v CeA je ključni mediator akutnega odtegnitvenega negativnega učinka, skupaj s čezmernim uživanjem drog in alkohola med odvisnostjo. Naši rezultati razširijo to znanje na prekomerno uživanje zelo prijetne hrane, kar kaže na to, da pride do analognih nevroadaptacij.

Rezultati te študije kažejo, da je prijetna hipofagija prehrane, ki je odvisna od odvzema hrane, manj apetitna prehrana z zajtrkom oslabljena z mikroinfuzijo znotraj BlA selektivnega CRF1 antagonist receptorjev, medtem ko zdravljenje z zdravili intra-BlA ni vplivalo na prekomerno prehranjevanje in podobno tesnobi. Različna vključenost BLA CRF-CRF1 Receptorski sistem pri rezultatih prehranjevalnega kolesarjenja kaže na to, da lahko hipofagija kosmiča predstavlja vedenjski proces, neodvisen od anksioznega vedenja. Namesto tega so te ugotovitve skladne s hipotezo, da BlA posreduje senzorične in spodbujevalne vidike motivacijsko vidnih dogodkov. Dejansko obstaja veliko dokazov, da je BlA kritično pomemben pri posredovanju devalvacijskih procesov in averzivnih odzivov na zmanjšanje nagrade (tj. Učinek Crespija, zaporedni negativni kontrast, devalvacija nagrad itd.); ; ; ), in zato lahko hipofagija, ki je posledica prehoda z zelo prijetne prehrane na manj apetitno prehrano iz črevesja, predstavlja hedonski postopek razvrednotenja, ne pa mehanizem, odvisen od energijske homeostaze (tj. neodvisen od predhodnega vnosa energije ali povečanja telesne mase ; , ). Blokada CRF1 Receptorji v BlA so torej domnevani, da zmanjšajo hipofagijo črevesa (tj. da povečajo vnos čebule) tako, da oslabijo proces razvrednotenja, ki se zgodi pri prehodu iz zelo okusne hrane na manj nagajivo moko. V tem kontekstu je pomembna tudi navidezna nedoslednost med molekularnimi in vedenjskimi / farmakološkimi rezultati, pridobljenimi v BlA. Čeprav CRF1 antagonist receptorjev je uspel zmanjšati obseg hipofagije črevesa, če so ga injicirali znotraj blA, na tem področju niso opazili pomembnih razlik v imunoreaktivnosti CRF, če smo primerjali kontrolne in diete podgane. To navidezno neskladje je mogoče razložiti, če se postopki devalvacije nadomestnih nagrad, odvisnih od BlA, pojavijo fiziološko in imajo pomemben evolucijski pomen pri izbiri živil, ki prinašajo najvišjo nagrado / energijsko vrednost (). Sporno je torej, da posredovanje teh procesov v blA ne zahteva nevroadaptacij v sistemu CRF (podobno kot pri CeA). V podporo tej hipotezi, medtem ko je za prekomerno prehranjevanje potreben razvoj kroničnega prehranjevalnega kolesarjenja, se hipofagija manj zaželenega alternativnega čokota pojavi že po prvem prehodu z zelo prijetne prehrane nazaj na navadno moško (). Poleg tega je pomembno poudariti, da na podlagi rezultatov, dobljenih z injiciranjem antagonista receptorja CRF1 v BlA in CeA, CRF1 Tu se zdi, da je hipofagija, odvisna od receptorjev, drugačen vedenjski proces kot anhedonija, ki jo opazimo pri odtegnitvi zdravil. Kljub temu pa je dokazano, da akutni umik od prekinitve dostopa do okusne hrane povzroča druge hipoedonske odzive, kot sta povečana nepremičnost pri preskusu s prisilnim plavanjem in manjši odziv v progresivnem razmerju okrepitvenega razmerja (; ).

Upoštevati je treba to, čeprav Chow / Palatable podgane so kronično prehranjevale ciklično, tukaj se kažejo vedenjske in nevrokemične spremembe med akutnim in ne kroničnim umikom iz okusne prehrane. Poudarjanje tega vidika je še posebej pomembno, saj so pri raziskavah odvisnosti velike razlike v vedenjskih, farmakoloških in nevrokemičnih posledicah akutnih vs opazili so dolgotrajno abstinenco (; ). Prihodnje študije bodo koristne za ugotovitev, kako lahko dolgotrajni umik vpliva na rezultate prehranjevalnega kolesarjenja.

Ustrezna točka razprave je, ali lahko prekomerno okusno obnašanje hrane, ki ga opazimo v okviru tega živalskega modela, štejemo za "kompulzivno". V predkliničnih raziskavah zasvojenosti se izraz "kompulzivno" pogosto uporablja za opisovanje prekomernega uživanja drog med odtegnitvijo, ki je posledica negativnega afektivnega stanja in je olajšano ob ponovnem dostopu do zdravila (; ). To sprejetje izraza "kompulzivno" temelji na konceptualnem okviru, da so za kompulzivne motnje značilni tesnoba in stres pred stiskanjem kompulzivnega vedenja ter lajšanje stresa z izvajanjem kompulzivnega vedenja (; ). V kontekstu tukaj uporabljenega živalskega modela bi lahko pretirano prehranjevalno vedenje razlagali kot obliko "kompulzivnega" vedenja glede na predhodno objavljene dokaze, da podgane z občasnim dostopom do okusne prehrane kažejo negativno čustveno stanje med umikanjem okusne hrane, za katero je značilno z anksioznim in depresivnim vedenjem, ki se sprosti po obnovitvi dostopa (, ; ).

Če povzamemo, rezultati te študije zagotavljajo kritične funkcionalne dokaze, da je CRF – CRF1 receptorski sistem CeA in BlA ima različno vlogo pri posredovanju nelagodnega vedenja, ki je posledica prekinitve dostopa do okusne hrane. V CeA, CRF – CRF1 receptorski sistem je ključni posrednik čezmernega uživanja okusne hrane in odtegnitveno odvisnega negativnega vpliva, medtem ko v BlA posreduje nenaklonjene odzive preiskovancev, ki jih povzroči znižanje nagrade.

FINANCIRANJE IN RAZKRITEV

Avtorji ne izražajo navzkrižja interesov.

Priznanja

Zahvaljujemo se Duncanu Momaneyu, Aditi R Narayan, Jini Kwak za tehnično pomoč in Tamari Zerič za tehnično in uredniško pomoč. Zahvaljujemo se tudi Eleni F Crawford za koristne predloge v zvezi z imunohistokemijo CRF. To objavo so omogočile številke donacij DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 in AA016731 ​​Nacionalnega inštituta za zlorabo drog (NIDA), Nacionalnega inštituta za duševno zdravje (NIMH) in Nacionalnega inštituta za zlorabo alkohola in alkoholizem ( NIAAA), profesorja poklicnega razvoja Peter Paul Peter (PC) in dodiplomskega programa raziskovalnih možnosti (UROP) univerze Boston. To raziskavo sta podprla tudi Intramuralna raziskovalna programa NIH Nacionalnega inštituta za zlorabo drog in Nacionalnega inštituta za zlorabo alkohola in alkoholizem NIH, DHHS. Za njegovo vsebino so odgovorni izključno avtorji in ne predstavlja nujno uradnih stališč Nacionalnega inštituta za zdravje.

Opombe

 

Dodatni podatki prispevek prispeva na spletni strani Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

 

 

Dodatni material

Reference

  • Ahmed SH, Koob GF. Prehod k odvisnosti od drog: negativni okrepitveni model, ki temelji na alostatskem zmanjšanju nagradne funkcije. Psihoparmakologija (Berl) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Živalski modeli popivanja sladkorja in maščob: odnos do odvisnosti od hrane in povečana telesna teža. Metode Mol Biol. 2012; 829: 351 – 365. [PubMed]
  • Bakši VP, Kalin NH. Kortikotropin sproščajoči hormon in živalski modeli tesnobe: interakcije gensko okolje. Biološka psihiatrija. 2000; 48: 1175 – 1198. [PubMed]
  • Bale TL. Občutljivost za stres: disregulacija poti CRF in razvoj bolezni. Horm Behav. 2005; 48: 1 – 10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant izzove tesnobo pri podganah, umaknjenih iz hrane, ki jo jemljejo po okusu: vloga osrednje amigdale Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Blasio A, Steardo L, Sabino V, Bombaž P. 2013bOpioidni sistem v medialni prefrontalni skorji posreduje prehranjevanje, ki je podobno piku, odvisnik Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Breese GR, Overstreet DH, DJ Knapp. Konceptualni okvir za etiologijo alkoholizma: hipoteza "vžiganje" / stres. Psihofarmakologija (Berl) 2005; 178: 367–380. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M et al. Blokada receptorjev CRF1 v osrednjem jedru amigdale zmanjšuje disforijo, povezano z odvzemom nikotina pri podganah. Farmakol Biochem Behav. 2012; 101: 62 – 68. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Zasnova 2,5-dimetil-3- (6-dimetil-4-metilpiridin-3-il) -7-dipropilaminopirazol [1,5-a] pirimidin (NBI 30775 / R121919) in strukturno-dejavnostna razmerja vrste potencialno in oralno aktivni antagonisti receptorjev za kortikotropin, ki sproščajo faktorje. J Med Chem. 2004; 47: 4787 – 4798. [PubMed]
  • Corwin RL. Poganjki podgane: model pretiranega pretiranega vedenja. Apetit. 2006; 46: 11 – 15. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Pregled simpozija - zasvojenost s hrano: dejstvo ali fikcija. J Nutr. 2009; 139: 617 – 619. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Krmna mikrostruktura pri podganah, ki so dovzetne za debelost in proti odpornim podganam: osrednji učinki urokorortina 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487 – 504. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB idr. Zaposlovanje v sistemu CRF posreduje temno plat kompulzivnega prehranjevanja. Proc Natl Acad Sci ZDA. 2009a; 106: 20016 – 20020. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Vmesni dostop do želene hrane zmanjšuje krepitev učinkovitosti prigrizka pri podganah. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066 – R1076. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Potrošniške, tesnobne in presnovne prilagoditve pri samskih podganah z izmeničnim dostopom do želene hrane. Psihoneuroendokrinologija. 2009b; 34: 38 – 49. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Bombaž P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J in sod. Antagonizem sigma-1 receptorjev blokira kompulzivno prehranjevanje. Nevropsihoparmakologija. 2012; 37: 2593 – 2604. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF posreduje anksiogene in anti-nagrajujoče, ne pa anorektične učinke PACAP Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.113 [PMC brez članka] [PubMed] [Cross Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Faktor sproščanja kortikotropina v osrednjem jedru amigdale posreduje povečano samo-dajanje etanola v umaknjenih podganjih, odvisnih od etanola. J Neurosci. 2006, 26: 11324 – 11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH in sod. Aktivacija sistema CRF-CRF1 posreduje povečanje nikotina pri podganah, odvisnih od odtegnitve, zaradi umika. Proc Natl Acad Sci ZDA. 2007; 104: 17198 – 17203. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H in sod. In vitro karakterizacija R121919: nov nepeptidni kortikotropin, ki sprošča faktor antagonista receptorja 1 (CRF1), za potencialno zdravljenje depresije in motenj, povezanih s tesnobo. Društvo za nevroznanost. 2000; Izvleček 807: 4 – 9.
  • Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. Vloga prijetne hrane in lakote kot sprožilca živalskega modela prehranjevanja s stresom. Int J Jejte neskladje. 2003; 34: 183 – 197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Nevrotoksične lezije bazolateralnih, vendar ne centralnih, amigdala motijo ​​Pavlovianovo kondicioniranje drugega reda in učinke devalvacije ojačevalcev. J Nevrosci. 1996; 16: 5256 – 5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Akutni umik, dolgotrajna abstinenca in negativni vplivi pri alkoholizmu: ali sta povezana. Zasvojeni Biol. 2010; 15: 169 – 184. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Heilig M, Koob GF. Ključna vloga dejavnika, ki sprošča kortikotropin, pri odvisnosti od alkohola. Trendi Nevrosci. 2007; 30: 399 – 406. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Zmanjševanje faktorja sproščanja kortikotropina v amigdali slabi škodljive posledice umika morfija. Behav Pharmacol. 1995, 6: 74 – 80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L in sod. Umik iz kroničnega, občasnega dostopa do zelo prijetne hrane povzroči depresivno vedenje pri kompulzivnem prehranjevanju podgan. Behav Pharmacol. 2012; 23: 593 – 602. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Koob GF. Vloga možganskih stresnih sistemov v odvisnosti. Neuron. 2008, 59: 11 – 34. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Koob GF. Nevrobiološki substrati za temno stran kompulzivnosti v odvisnosti. Nevrofarmakologija. 2009; 56 (Suppl 1: 18 – 31. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Koob GF. Vloga CRF in s CRF povezanih peptidov v temni strani zasvojenosti. Možgani Res. 2010; 1314: 3 – 14. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Koob GF, Heinrichs SC. Vloga faktorja za sproščanje kortikotropina in urokortiina pri vedenjskih odzivih na stresorje. Možgani Res. 1999; 848: 141 – 152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Plastičnost nagradne nevroskopi in "temna stran" odvisnosti od drog. Nat Neurosci. 2005, 8: 1442 – 1444. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Pregled. Nevrobiološki mehanizmi za nasprotnikove motivacijske procese v odvisnosti. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008; 363: 3113 – 3123. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Koob GF, Volkow ND. Nevroskopi odvisnosti. Nevropsihofarmakologija. 2010, 35: 217 – 238. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. Vloga faktorja, ki sprošča kortikotropin v odvisnosti od drog: možnost farmakološkega posega. Droge CNS. 2011; 25: 271 – 287. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Vpliv morfina in kokaina na biosintezo CRF v osrednjem jedru podgane amigdale. Nevropeptidi. 2003; 37: 105 – 110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. Vloga hormona, ki sprošča kortikotropin v amigdali in posteljnem jedru stria terminalis, v vedenjskih, modulacijskih bolečinah in endokrinih posledicah odvzema opiatov. Nevroznanost. 2002; 112: 605 – 617. [PubMed]
  • Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF idr. Povečanje vrednosti zunajceličnega kortikotropina, ki je podobno faktorju podobne imunoreaktivnosti, v amigdali budnih podgan med zadrževalnim stresom in odvzemom etanola, merjeno z mikrodializo. J Nevrosci. 1995; 15: 5439 – 5447. [PubMed]
  • Murray E, Wise S, Rhodes S. 2011 Kaj lahko različni možgani naredijo z nagrado In Gottfried JA (ur.). Nevrobiologija občutka in nagrade, poglavje 4 CRC Press: Boca Raton, FL, ZDA [PubMed]
  • Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Temna stran odvisnosti od hrane. Physiol Behav. 2011; 104: 149 – 156. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007Možji podgane v stereotaksičnih koordinata6th edn.Academic Press
  • Pellegrino A. Stereotaksični atlas možganov podgane. Plenum: New York; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Aktivacija kortikotropin sproščajočega faktorja v limbičnem sistemu med odvzemom kanabinoidov. Znanost. 1997, 276: 2050 – 2054. [PubMed]
  • Sabino V, bombaž P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Metoksimetopon, zelo močan mu opioidni agonist, dvofazno vpliva na vnos etanola pri podganah, ki so raje alkohol. Psihoparmakologija (Berl) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
  • Salinas JA, starševski MB, McGaugh JL. Lezije ibotenske kisline bazolateralnega kompleksa amigdale ali osrednjega jedra različno vplivajo na odziv na znižanje nagrade. Možgani Res. 1996; 742: 283 – 293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. Vloga CRF in drugi nevropeptidi pri ponovni vzpostavitvi drog, ki jih povzroča stres. Možgani Res. 2010; 1314: 15 – 28. [PMC brez članka] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Karakterizacija ovčjega hipotalamičnega peptida z ostankom 41, ki spodbuja izločanje kortikotropina in beta-endorfina. Znanost. 1981; 213: 1394 – 1397. [PubMed]
  • Volkow ND, O'Brien CP. Vprašanja za DSM-V: ali je treba debelost vključiti kot možgansko motnjo. Am J Psihiatrija. 2007; 164: 708–710. [PubMed]
  • Wellman LL, Gale K, Malkova L. Inhibicija bazolateralne amigdale, posredovana z GABAA, blokira devalvacijo nagrad pri makakah. J Nevrosci. 2005; 25: 4577 – 4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Epidemiološke in gospodarske posledice svetovnih epidemij debelosti in sladkorne bolezni. Nat Med. 2006; 12: 62 – 66. [PubMed]