J Genet Syndr Gene Ther. 2013 februar 10; 4(121): 1000121. doi: 10.4172 / 2157-7412.1000121
Minimalizem
Z vstopom v dobo genomike z zaupanjem v prihodnost medicine, vključno s psihiatrijo, je določitev vloge DNK in polimorfnih povezav z vezmi možganskih nagrad povzročila novo razumevanje vseh odvisniških vedenj. Omeniti velja, da lahko ta strategija obravnava milijone žrtev "nagradnega pomanjkljivega sindroma" (RDS) genetske motnje vezja nagrad možganov. Ta članek se bo osredotočil na droge in hrano, ki zasvojijo vzajemnost, ter vlogo genetike in delovanja dopamina pri odvisnostih, vključno z medsebojnim delovanjem prenašalca dopamina in natrijevo hrano. Na kratko bomo pregledali naš koncept, ki se nanaša na genetske antecedente več odvisnosti (RDS). Študije so tudi pokazale, da ocena skupine uveljavljenih nagradnih genov in polimorfizmov omogoča razslojevanje genetskega tveganja za RDS. Plošča se imenuje „ocena tveganja za genetsko odvisnost (GARS)“ in je orodje za diagnozo genetske nagnjenosti za RDS. Uporaba tega testa bi, kot so poudarili drugi, koristila zdravniški skupnosti z identifikacijo ogroženih posameznikov v zelo zgodnji starosti. V poglobljeno delo spodbujamo tako živalske kot človeške modele odvisnosti. Spodbujamo nadaljnje raziskovanje nevrogenetskih korelatov skupnosti med odvisnostjo od hrane in drog ter podpiramo naprej razmišljajoče hipoteze, kot je "Hipoteza zasoljene odvisnosti od hrane".
Predstavitev
Dopamin (DA) je nevrotransmiter v možganih, ki nadzoruje občutke dobrega počutja. Ta občutek dobrega počutja je posledica interakcije DA in nevrotransmiterjev, kot so serotonin, opioidi in druge možganske kemikalije. Nizka raven serotonina je povezana z depresijo. Visoka raven opioidov (možganski opij) je povezana tudi z občutkom dobrega počutja [1]. Poleg tega so bili DA receptorji, razred receptorjev, vezanih na beljakovine (GPCR), usmerjeni v razvoj zdravil za zdravljenje nevroloških, psihiatričnih in očesnih motenj [2]. DA so poimenovali molekula antistresa in / ali užitka, vendar sta to pred kratkim razpravljala Salamone in Correa [3] in Sinha [4].
V skladu s tem smo trdili [5-8], da ima Nucleus accumbens (NAc) DA vlogo v motivacijskih procesih in da lahko mezolimbična disfunkcija prispeva k motivacijskim simptomom depresije, značilnosti zlorabe snovi in drugih motenj [3]. Čeprav je že tradicionalno označevanje nevronov DA kot nagradnih nevronov, je to pretirano posploševanje, zato je treba upoštevati, kako dopaminergične manipulacije vplivajo na različne vidike motivacije. Na primer, NAc DA je vključen v Pavlovićeve procese in instrumentalno učenje apetitivnega pristopa, averzivna motivacija, vedenjski aktivacijski procesi so trajno vključevali naloge in vložili napor, čeprav ne posreduje začetne lakote, motivacije za jesti ali apetita [3,5-7].
Čeprav je res, da je NAc DA vključen v apetitne in averzivne motivacijske procese, pa trdimo, da je DA tudi pomemben posrednik pri primarni motivaciji hrane ali apetitu, podobnem zlorabi drog. Pregled literature vsebuje številne prispevke, ki prikazujejo pomen DA v vedenju hrepenenja po hrani in posredovanja po apetitu [6,7]. Zlato je vpeljalo koncept odvisnosti od hrane [5-8]. Avena in sod. [9] pravilno trdijo, da se zasvojenost s hrano zdi verjetna, ker zasvojenost z drogami povzroča iste nevrološke poti, ki so se razvile kot odgovor na naravne nagrade. Poleg tega je sladkor sam po sebi omembe vreden kot snov, ki sprošča opioide in DA, zato lahko pričakujemo, da ima zasvojenost. Konkretno, nevronske prilagoditve vključujejo spremembe v vezavi DA in opioidnih receptorjev, ekspresijo enkefalina mRNA ter DA in sproščanje acetilholina v NAc. Dokazi podpirajo hipotezo, da lahko podgane v določenih okoliščinah postanejo odvisne od sladkorja.
Delo Wang in sod. [10], ki vključuje študije slikanja možganov pri ljudeh, vključuje vezi z modulacijo DA-ja v patološka prehranjevalna vedenja. Njihove študije kažejo, da se DA v zunajceličnem prostoru striatuma poveča s pomočjo hrane, to je dokaz, da je DA potencialno vključen v nehedonske motivacijske lastnosti hrane. Ugotovili so tudi, da se presnova orbitofrontalne skorje poveča z napisi hrane, kar kaže na to, da je ta regija povezana z motivacijo za posredovanje pri uživanju hrane. Opaženo je zmanjšanje razpoložljivosti receptorjev DA D2 pri debelih osebah, podobno kot zmanjšanje oseb, odvisnih od drog, zato so lahko prekomerno preiskovanci nagnjeni k uporabi hrane za začasno nadomeščanje pod spodbudnimi nagradnimi vezji [11]. V bistvu močni okrepitveni učinki hrane in zdravil deloma posredujejo z naglim povečevanjem DA v mesolimbičnih centrih za nagrajevanje možganov. Volkow et al. [11] poudarjajo, da nenadna povečanja DA lahko preglasijo homeostatične mehanizme nadzora v možganih ranljivih posameznikov. Študije slikanja možganov so razmejile nevrološko disfunkcijo, ki ustvarja skupne značilnosti odvisnosti od hrane in drog. Temelj skupne vzroke odvisnosti so oslabitve dopaminergičnih poti, ki uravnavajo nevronske sisteme, povezane tudi s samokontrolo, kondicioniranjem, stresno reaktivnostjo, občutljivostjo nagrajevanja in spodbujevalno motivacijo [11]. Presnova v prefrontalnih regijah je vključena v nadzor zaviranja, pri debelih osebah nezmožnost omejitve vnosa hrane vključuje ghrelin in je lahko posledica zmanjšanih receptorjev DA D2, ki so povezani z zmanjšano prefrontalno presnovo [12]. Limbične in kortikalne regije, vključene v motivacijo, spomin in samokontrolo, se pri debelih osebah aktivirajo z želodčno stimulacijo [10] in med hrepenenjem po drogah pri osebah, odvisnih od drog. Povečana občutljivost za senzorične lastnosti hrane kaže povečana presnova v somatosenzorni skorji debelih oseb. Ta povečana občutljivost za okusnost hrane skupaj z zmanjšanimi DA-D2 receptorji lahko hrano naredi okrepitev za kompulzivno prehranjevanje in tveganje za debelost [10]. Ti rezultati raziskav kažejo, da so številni možganski krogi moteni zaradi debelosti in odvisnosti od drog ter da lahko preprečevanje in zdravljenje debelosti koristijo strategijam, usmerjenim na izboljšano delovanje DA.
Lindblom et al. [13] je poročala, da dieta kot strategija za zmanjšanje telesne teže pogosto ne uspe, saj povzroča hrepenenje po hrani, kar vodi v prejedanje in ponovno pridobivanje teže. Strinjajo se tudi, da dokazi iz več raziskav kažejo na prisotnost skupnih elementov v nevronski regulaciji hrepenenja po hrani in drogah. Lindblom et al. [13] količinsko opredelili ekspresijo osmih genov, vključenih v DA-signalizacijo v možganskih regijah, povezanih z mezolimbičnim in nigrostriatalnim sistemom DA, pri samcih podgan, ki so bile podvržene kronični omejitvi hrane s pomočjo količinske verižne reakcije polimeraze v realnem času. Ugotovili so, da so bile stopnje mRNA tirozin hidroksilaze in transporter dopamina v ventralnem tegmentalnem območju močno zvišane zaradi omejitve hrane in so bile s kvantitativno avtoradiografijo opažene tudi sočasna upravna regulacija DAT na ravni beljakovin v lupini NAc. Da so bili ti učinki opaženi po kronični in ne akutni omejitvi hrane, kaže na to, da bi lahko prišlo do preobčutljivosti mezolimbične dopaminske poti. Tako je lahko preobčutljivost zaradi povečanega očistka zunajceličnega dopamina iz lupine NAc eden glavnih vzrokov za hrepenenje po hrani, ki ovira prehransko skladnost. Te ugotovitve so v skladu s prejšnjimi ugotovitvami Patterson et al. [14]. Dokazali so, da neposredna intracerebroventrikularna infuzija insulina povzroči zvišanje ravni mRNA za DA-prenašalni transporter DAT. V študiji o odvzemu hrane za 24 do 36 smo uporabili hibridizacijo hrane situ za oceno ravni mRNA DAT pri podganah, prikrajšanih za hrano (hipoinsulinemične). Ravni v ventralnem tegmentalnem območju / substantia nigra pars compacta so se znatno zmanjšale, kar kaže na to, da lahko zmernost delovanja strijatalnih DAT vplivamo na prehranski status, na tešče in inzulin. Ifland et al. [15] je napredoval hipotezo, da so predelana živila z visoko koncentracijo sladkorja in drugih rafiniranih sladil, rafinirani ogljikovi hidrati, maščobe, sol in kofein zasvojenost. Druge študije so sol ocenile kot pomemben dejavnik vedenja, ki išče hrano. Roitman in sod. [16] poudarja, da je povečan prenos DA v NAc povezan z motiviranim vedenjem, vključno z apetitom Na. DA-ov prenos modulira DAT in ima lahko vlogo pri motiviranem vedenju. V svojih študijah in vivo, močno zmanjšanje vnosa DA prek DAT pri NAc pri podganah je bilo v korelaciji z Na apetitom, ki ga povzroča izčrpavanje Na. Po zmanjšanju aktivnosti DAT v NAc so opazili po in vitro Zdravljenje aldosterona. Tako je lahko zmanjšanje aktivnosti DAT v NAc posledica neposrednega delovanja Aldosterona in je lahko mehanizem, s katerim izčrpavanje Na povzroči nastanek povečanega prenosa NAc DA med apetitom Na. Povišan NAc DA je lahko motivacijska lastnost za podgana, ki je osiromašila Na. Nadaljnja podpora vlogi slane hrane kot možne snovi (hrane) zlorabe je povzročila "Hipotezo zasoljene odvisnosti od hrane", kot sta jo predlagala Cocores in Gold [17]. V pilotski študiji, s katero so ugotovili, ali slana hrana deluje kot blag opiotni agonist, ki povzroča prenajedanje in povečanje telesne teže, so ugotovili, da je skupina, odvisna od opiatov, med odtegnitvijo opiata razvila povečanje telesne mase 6.6, kar kaže na veliko prednost slani hrani. Na podlagi te in druge literature [18] predlagajo, da je Slana hrana lahko zasvojevalna snov, ki v središču nagrad in užitka v možganih spodbuja receptorje za opiate in DA. Lahko pa so prednost, lakota, nagon in hrepenenje po "okusni" slani hrani simptomi odvzema opiatov in podobnega opiata slane hrane. Tako slana hrana kot odvzem opiata spodbujata apetit Na, kar ima za posledico povečan vnos kalorij, prenajedanje in bolezni, povezane z debelostjo.
Možganska dopaminergična funkcija
Dopaminski receptorski gen D2 (DRD2)
Kadar sinaptik DA spodbuja DA receptorje (D1 – D5), posamezniki občutijo zmanjšanje stresa in občutke dobrega počutja [19]. Kot smo že omenili, mezokortikolimbična dopaminergična pot posreduje pri krepitvi nenaravnih in naravnih nagrad. Naravni nagoni so okrepljeni fiziološki nagoni, kot sta lakota in razmnoževanje, nenaravne nagrade pa vključujejo pridobljene naučene užitke, hedonske občutke, kot so tista, ki izhajajo iz drog, alkohola, iger na srečo in drugih vedenjskih tveganj [8,20,21].
Pomemben gen DA je gen DRD2, ki je odgovoren za sintezo DA D2 receptorjev [22]. Alelna oblika gena DRD2 (A1 v primerjavi z A2) narekuje število receptorjev na mestih, ki se spojijo, in hipodopaminergično funkcijo [23,24]. Slaba recepcija DA nagiba posameznike k iskanju katere koli snovi ali vedenja, ki stimulira dopaminergični sistem [25-27].
Gen DRD2 in DA sta že dolgo povezana z nagrado [28] kljub polemiki [3,4]. Čeprav je alel Taq1 A1 gena DRD2 povezan s številnimi nevropsihiatričnimi motnjami in sprva s hudim alkoholizmom, je povezan tudi z drugimi odvisnostmi od snovi in procesov, pa tudi s Touretteovim sindromom, veliko novostjo pri iskanju vedenj, motnjo pozornosti in hiperaktivnost (ADHD) ter pri otrocih in odraslih s sočasnimi simptomi antisocialne osebnostne motnje [28].
Medtem ko se bo ta članek osredotočil na droge in hrano, ki so odvisnost od vzajemnosti, in vlogo genetike DA ter delovanja pri odvisnostih, za popolnost, bomo na kratko pregledali naš koncept, ki se nanaša na genetske antidecente več odvisnosti. "Sindrom nagradne pomanjkljivosti" (RDS) je bil v 1996 prvič opisan kot teoretični genetski napovedovalec kompulzivnega, zasvojenega in impulzivnega vedenja z zavedanjem, da je genetska varianta DRD2 A1 povezana s temi vedenji [29-32]. RDS vključuje mehanizme užitka ali nagrajevanja, ki temeljijo na DA. Vedenja ali stanja, ki so posledica odpornosti ali izčrpavanja DA, so manifestacija RDS [30]. Posameznikov biokemični primanjkljaj nagrad je lahko blag, posledica prekomerne popuščenosti ali stresa ali hujši, rezultat pomanjkanja DA na podlagi genske sestave. RDS ali poti proti nagrajevanju pomagajo razložiti, kako lahko nekatere genetske anomalije povzročijo zapleteno odklonsko vedenje. Obstajajo skupne nevrobiologije, nevro vezja in nevroanatomije za številne psihiatrične motnje in več odvisnosti. Dobro je znano, da droge zaradi zlorabe, alkohola, seksa, hrane, iger na srečo in agresivnih vznemirjenja resnično večina pozitivnih ojačevalcev povzroči aktivacijo in sproščanje nevronov možganske DA in lahko zmanjša negativne občutke. Nenormalno hrepenenje je povezano z nizko funkcijo DA [33]. Tu je primer, kako lahko kompleksna vedenja proizvedejo specifični genetski antitecedenti. Na primer pomanjkanje D2 receptorjev, ki je posledica tega, da ima A1 varianto gena DRD2 [34] lahko pri posameznikih izpostavijo veliko tveganje za hrepenenje, ki ga lahko zadovolji več odvisnih, impulzivnih in kompulzivnih vedenj. To pomanjkljivost bi se lahko še dodatno poostrilo, če bi posameznik imel drug polimorfizem, na primer gen DAT, ki je povzročil prekomerno odstranitev DA iz sinapse. Poleg tega uporaba snovi in vedenje v aborantskih okoliščinah izčrpava tudi DA. Tako se lahko RDS manifestira v hudih ali blagih oblikah, ki so posledica biokemične nezmožnosti pridobitve nagrade iz običajnih, vsakodnevnih dejavnosti. Čeprav mnogi geni in polimorfizmi posameznike nagibajo k nenormalni funkciji DA, prenašalci alela Taq1 A1 gena DRD2 nimajo dovolj DA-receptorskih mest, da bi dosegli ustrezno občutljivost DA. Ta primanjkljaj DA na mestu nagrajevanja možganov lahko povzroči nezdrave apetite in hrepenenje. V bistvu iščejo snovi, kot so alkohol, opiati, kokain, nikotin, glukoza in vedenje; celo nenormalno agresivna vedenja, za katera je znano, da aktivirajo dopaminergične poti in povzročajo prednostno sproščanje DA pri NAc. Zdaj obstajajo dokazi, da je lahko sprednja cingulatna skorja namesto NAc vključena v operativno odločanje, ki temelji na naporih [35-37] in mesto ponovitve.
Oslabitev gena DRD2 ali drugih genov za receptorje DA, kot je DRD1, ki sodeluje v homeostazi in tako imenovanem normalnem delovanju možganov, bi lahko na koncu privedla do nevropsihiatričnih motenj, vključno z odstopanjem od drog in hrane. Pokazalo se je, da prenatalna zloraba drog pri nosečnicah močno vpliva na nevrokemično stanje potomcev. Sem spadajo etanol [38]; konoplja [39]; heroin [40]; kokain [41]; in zlorabe drog na splošno [42]. Pred kratkim Novak et al. [43] zagotovila trdne dokaze, ki kažejo, da je nenormalni razvoj strijatalnih nevronov del patologije, ki je osnova za večje psihiatrične bolezni. Avtorja sta pri podganah prepoznala nerazvito gensko mrežo (zgodaj), ki ji primanjkuje pomembnih progastih receptorskih poti (signalizacija). V dveh poporodnih tednih je mreža regulirana in nadomeščena z mrežo zrelih genov, ki izražajo striatalno specifične gene, vključno z receptorji DA D1 in D2 in tem nevronom zagotavlja njihovo funkcionalno identiteto in fenotipske značilnosti. Tako lahko to razvojno stikalo tako pri podganah kot pri ljudeh postane točka dovzetnosti za motnje rasti zaradi okoljskih dejavnikov, kot je prekomerno zatiranje hrane, kot so sol in zloraba drog.
Prenosnik dopamina (DAT)
Transporter DA (tudi aktivni transporter DA, DAT, SLC6A3) je membranski protein, ki črpa nevrotransmiter DA iz sinapse nazaj v citosol, iz katerega drugi znani transporterji sekvencirajo DA in norepinefrin v nevronske vezikle za kasnejše shranjevanje in nadaljnje sproščanje [44].
Protein DAT je kodiran z genom, ki se nahaja na človeškem kromosomu 5, dolg je približno 64 kbp in je sestavljen iz 15 kodirajočega eksona. Konkretno, gen DAT (SLC6A3 ali DAT1) je lokaliziran na kromosomu 5p15.3. Poleg tega v 3 'nekodirajočem območju DAT1 obstaja polimorfizem VNTR. Genetski polimorfizem gena DAT, ki vpliva na izraženo količino beljakovin, je dokaz za povezavo med motnjami, povezanimi z DA in DAT [45]. Dobro je ugotovljeno, da je DAT glavni mehanizem, ki odstranjuje DA iz sinaps, razen v predfrontalni skorji, kjer ponovni vnos DA vključuje norepinefrin [46,47]. DAT prekine signal DA tako, da DA odstrani sinaptično vrzel in jo odloži v okoliške celice. Pomembno je, da je več vidikov nagrajevanja in spoznavanja funkcij DA in DAT olajša regulacijo DA signalizacije [48].
Omeniti velja, da je DAT integralni membranski protein in velja za simporter in sovoznik, ki se DA giblje od sinaptične vrzeli skozi fosfolipidno celično membrano, tako da se pripelje na gibanje Na-ionov navzdol po elektrokemičnem gradientu (olajšana difuzija) in v celico.
Poleg tega funkcija DAT zahteva zaporedno vezavo in sočasno prevoz dveh Na-ionov in enega kloridnega iona s substratom DA. Gonilna sila za ponovni prevzem DA, posredovanega z DAT, je gradient koncentracije ionov, ki ga ustvarja plazemska membrana Na + / K + ATP-a [49].
Sonders et al. [50] je ovrednotil vlogo splošno sprejetega modela funkcije transporta monoamina. Ugotovili so, da za normalno delovanje monoaminovega transporta zahtevajo postavljena pravila. Na primer, Na ioni se morajo vezati na zunajcelično domeno transporterja, preden se DA lahko veže. Ko se DA veže, se protein zgodi konformacijsko, kar omogoča, da se Na in DA odvežeta na medcelični strani membrane. Številne elektrofiziološke študije so potrdile, da DAT prevaža eno molekulo nevrotransmiterja skozi membrano z enim ali dvema Na-ionoma, kot drugi prenašalci monoamina. Negativno nabiti kloridni ioni so potrebni za preprečitev kopičenja pozitivnega naboja. Te študije so uporabile radioaktivno označeno DA in pokazale tudi, da sta hitrost in smer prevoza popolnoma odvisna od gradienta Na [51].
Ker je dobro znano, da veliko zlorab povzroča sproščanje nevronskih DA [52], DAT ima lahko v tem smislu vlogo. Zaradi tesne povezave membranskega potenciala in gradienta Na lahko spremembe v polarnosti membrane, ki jih povzročajo aktivnosti, močno vplivajo na hitrost transporta. Poleg tega lahko transporter prispeva k sproščanju DA, ko nevro depolarizira [53]. V bistvu, kot poudarjata Vandenbergh et al. [54] protein DAT uravnava nevrotransmisijo, ki jo posreduje DA, tako da hitro nabira DA, ki se sprosti v sinago.
Topologija membran DAT je bila sprva teoretična, določena je bila na osnovi analize hidrofobnih sekvenc in podobnosti s prenosnikom GABA. Začetna napoved Kilty et al. [55] velike zunajcelične zanke med tretjo in četrto od dvanajstih transmembranskih domen sta potrdila Vaughan in Kuhar [56], ko so uporabili proteaze, za prebavo beljakovin v manjše fragmente in glikozilacijo, ki se pojavlja le na zunajceličnih zankah, da preverijo večino vidikov strukture DAT.
DAT so našli v regijah možganov, kjer obstaja dopaminergični krog, ta področja vključujejo mezokortikalne, mezolimbične in nigrostriatalne poti [57]. Jedra, ki sestavljajo te poti, imajo izrazite vzorce izražanja. DAT ni bil odkrit v nobeni sinaptični razcepu, kar kaže na to, da se strijatalni ponovni prevzem DA zgodi zunaj sinaptičnih aktivnih con, potem ko se DA razprši od sinaptične vrzeli.
Dva alela, ponovitev 9 (9R) in ponovitev 10 (10R) VNTR lahko povečata tveganje za vedenja RDS. Prisotnost 9R VNTR je povezana z alkoholizmom in motnjo uporabe snovi. Pokazalo se je, da povečujejo transkripcijo beljakovin DAT, kar ima za posledico povečan očistek sinaptičnega DA, kar ima za posledico zmanjšanje DA in DA aktiviranje postsinaptičnih nevronov [58]. Ponavljanja v tandemu DAT so bila povezana z občutljivostjo za nagrajevanje in velikim tveganjem za hiperaktivno motnjo s pomanjkanjem pozornosti (ADHD) pri otrocih in odraslih [59,60]. Alel ponovitve 10 ima majhno, vendar pomembno povezavo s simptomi hiperaktivnosti-impulzivnosti (HI) [61].
Kartiranje genov za nagrajevanje in RDS
Podpora za impulzivno naravo posameznikov, ki imajo dopaminergične genske različice in druge nevrotransmiterje (npr. DRD2, DRD3, DRD4, DAT1, COMT, MOA-A, SLC6A4, Mu, GABAB) izhaja iz številnih pomembnih raziskav, ki ponazarjajo genetsko tveganje za vedenje, ki išče droge, na podlagi študij povezav in povezav, ki vsebujejo te alele kot antidecente tveganja, ki vplivajo na mezokortikolimbični sistem (Tabela 1). Naš laboratorij skupaj z LifeGen, Inc. in Dominion Diagnostics, Inc. izvaja raziskave, v katerih je sodelovalo dvanajst izbranih centrov po Združenih državah Amerike, da bi potrdilo prvi patentirani genetski test za določitev pacientovega genetskega tveganja za RDS, imenovan Genetic Addiction risk Score ™ ( GARS).
Priznanja
Avtorja cenita strokovni uredniški prispevek Margaret A. Madigan in Paula J. Edge. Cenimo komentarje Eric R. Braverman, Raquel Lohmann, Joan Borsten, BW Downs, Roger L. Waite, Mary Hauser, John Femino, David E Smith in Thomasa Simpatico. Marlene Oscar-Berman je prejemnica nepovratnih sredstev Nacionalnih zdravstvenih inštitutov, NIAAA RO1-AA07112 in K05-AA00219 ter Medicinske raziskovalne službe ameriškega ministrstva za veteranske zadeve. Priznamo tudi prispevek iz poročila o zadevi Karen Hurley, izvršna direktorica Nacionalnega inštituta za študije holistične odvisnosti, North Miami Beach Florida. Deloma je ta članek podprla velika podeljena fundaciji Path NY iz Life Extension Foundation.
Opombe
To je članek z odprtim dostopom, ki se distribuira pod pogoji licence Creative Commons Attribution, ki dovoljuje neomejeno uporabo, distribucijo in razmnoževanje na katerem koli nosilcu, pod pogojem, da sta originalni avtor in vir zaslužena.
Navzkrižje interesov Kenneth Blum, dr. Dr., Ima številne ameriške in tuje patente, povezane z diagnostiko in zdravljenjem RDS, za katere ima izključno licenco LifeGen, Inc. Lederach, PA. Dominion Diagnostics, LLC, North Kingstown, Rhode Island, skupaj z LifeGen, Inc., so aktivno vključeni v komercialni razvoj GARS. John Giordano je tudi partner družbe LifeGen, Inc. Nobenih drugih navzkrižij interesov ni in vsi avtorji so rokopis prebrali in odobrili.