Sladkasti vnos maščobnih senzibilizira gama-aminobutirno kislino - posredovane odzive na hranjenje, vzbujene iz lupine jedrskih obtokov (2013)

Minimalizem

Ozadje

Veliko je zanimanja za raziskovanje, ali lahko hranjenje z nagradami povzroči drog podobno plastičnost v možganih. Sistem gama-amino-maslačne kisline (GABA) v lupini nucleus accumbens (Acb), ki modulira hipotalamične sisteme hranjenja, je v dobrem položaju, da "vzurpira" homeostatski nadzor krmljenja. Kljub temu ni znano, ali se v tem sistemu pojavljajo nevroadaptacije, ki jih povzroča hranjenje.

Metode

Ločene skupine podgan, ki jih vzdržuje ad libitum, so bile dnevno izpostavljene vnosom sladkane maščobe, plenilskemu stresu ali infuzijam lupine znotraj Acb bodisi d-amfetamina (2 ali 10 μg) bodisi μ-opioidnega agonista D- [Ala2, N-MePhe4, Gly-ol] -enkephalin (DAMGO, 2.5 μg), nato izzvan z intrafuzijsko infuzijo GABAA agonist, muscimol (10 ng).

Rezultati

Izpostavljenost sladkani maščobi je močno senzibilizirano hranjenje, ki ga povzroča muscimol. Preobčutljivost je bila prisotna v tednu 1 po prenehanju prijetnega načina hranjenja, vendar je z 2 tedni opustila. Podgane, izpostavljene sladkani maščobi, niso pokazale spremenjenega odziva hranjenja na pomanjkanje hrane. Ponavljajoče infuzije lupin znotraj Acb zdravila DAMGO (2.5 µg) so prav tako občutljivo intra-Acb hranjenje, ki ga poganja muscimol. Vendar pa niti ponavljajoče se infundiranje d-amfetamina v lupini znotraj Acb (2 ali 10 μg) niti prekinitvena izpostavljenost averzivnemu dražljaju (plenilskim stresom) niso spremenili občutljivosti na muscimol.

Sklepi

Palabilno hranjenje povzroča preobčutljivost odzivov na Ab lupino GABA; ta učinek lahko vključuje sproščanje opioidnih peptidov zaradi hranjenja. Povečana vzburjenost, averzivna izkušnja ali povečan prenos kateholamina samo po sebi ne zadostujejo za učinek in nagon lakote, ki ga povzroča lakota, ni dovolj za razkritje učinka. Te ugotovitve razkrivajo novo vrsto nevroadaptacije, ki jo povzroča hrana znotraj Acb; razpravljajo o možnih posledicah razumevanja navzkrižnih učinkov med nagrado za hrano in nagrado za zdravila.

ključne besede: DAMGO, vedenje hranjenja, GABAA receptor, musimol, opioid, preobčutljivost

Hipoteza je, da je glavni dejavnik sedanje „epidemije debelosti“ razširjenost poceni, zelo prijetnih, energijsko gostih živil, ki poganjajo nehomostatično hranjenje zaradi svojih močno nagrajujočih lastnosti (-). Ker ta hrana vključuje enake osrednje poti, povezane z odvisnostjo (-) obstaja veliko zanimanje za ugotovitev, ali njihov vnos povzroči nevroplastične spremembe, podobne tistim, ki nastanejo zaradi zlorabe drog. Sistemi, ki v zvezi s tem dobijo največ pozornosti, so dopaminski in opioidni sistemi v nucleus accumbens (Acb). Več skupin je pokazalo, da večkratna izpostavljenost okusnemu hranjenju, zlasti s hrano, obogateno s sladkorjem ali maščobami, močno spremeni dinamiko nevrotransmiterjev, občutljivost na receptorje in izražanje genov znotraj teh sistemov in povzroči napačne vzorce hranjenja in druge vedenjske spremembe, ki spominjajo na podobne procese (-).

Drugi ključni igralec pri nevronskem nadzoru apetitnega vedenja je sistem, ki je lokaliziran v Acb, gama-amino-maslačni kislini (GABA). Akutna inhibicija Acb lupinskih nevronov z agonisti GABA povzroči velik odziv hranjenja pri nasičenih podganah; ta učinek se uvršča med najbolj dramatične sindrome hiperfagije, povzročene z drogami, ki se pojavlja od kjer koli v brain (-). Deloma ta hiperfagija izhaja iz zaposlovanja hipotalamičnih sistemov, kodiranih s peptidi, ki sodelujejo pri uravnavanju energetske bilance (-). Poleg tega je prednja lupina Acb edino telencefalno mesto, za katerega je znano, da podpira GABA-olajšanje hedonske okusne reaktivnosti (). Lupina Acb je zato predlagana kot bistveno vozlišče v mreži prednjih možganov, ki modulira sisteme za energetsko ravnovesje na nižji stopnji v skladu z afektivnimi / motivacijskimi nesrečami (-). Omrežno vozlišče s temi lastnostmi bi lahko torej predstavljalo ključno mesto za prijetne nevroplastičnosti, ki jih povzroča hranjenje; presenetljivo pa v zvezi s tem sistem GABA z lupino Acb lupine ni bil raziskan.

Naš cilj v tej raziskavi je bil ugotoviti, ali ponavljajoče se izkušnje z nehomostatičnim hranjenjem, ki temelji na nagradah, sprožijo nevroadaptacije v sistemih GABA Acb shell. Odkrili smo, da skromen režim prekinitve vnosa sladkanih maščob močno senzibilizira odzive na hranjenje, ki jih povzroči neposredna stimulacija GABAA receptorji v lupini Acb. Raziskali smo vedenjske in farmakološke mehanizme, na katerih temelji ta učinek, s poudarkom na možnem vključevanju lokalnih opiatergičnih in dopaminergičnih mehanizmov znotraj lupinske lupine.

Metode in materiali

Predmeti

Moške podgane Sprague-Dawley (Harlan Laboratories, Madison, Wisconsin), ki so ob prihodu tehtale 300 do 325 g, so bile nameščene v parih v čistih kletkah z dostopom ad libituma do hrane in vode (razen nekaterih poskusov, kot je opisano v nadaljevanju), pri svetlobi in temperaturi -kontroliran vivarij. Vzdrževali so jih v ciklu 12-h svetloba / temna (luči so vključene v 7: 00 AM). Vse ustanove in postopki so bili v skladu s smernicami o uporabi in oskrbi živali Nacionalnega zdravstvenega inštituta ZDA, nadzoroval in odobril pa jih je institucionalni odbor za oskrbo in uporabo živali Univerze v Wisconsinu.

Preverjanje kirurškega posega in položaja

Dvostranske vodilne kanile iz nerjavečega jekla, usmerjene v lupino Acb (merilnik 23), so bile vsadljene po standardnih stereotaksičnih postopkih [za podrobnosti glejte Baldo in Kelley ()]. Koordinate mesta infuzije (v milimetrih od bregme) so bile + 3.2 (anteroposteriorno); + 1.0 (lateromedial); –5.2 s površine lobanje (dorsoventral). Žične stile so postavili v kanilo, da se prepreči zamašitev, podgane pa so si pred testiranjem opomogle do 7 dni. Na koncu vsakega poskusa smo določili umestitve kanil z ogledom odsekov možganov, obarvanih z Nisslom, pod svetlobno mikroskopijo (nadaljnje podrobnosti glejte Dodatek 1). Podgane z napačnimi umestitvami kanil so bile izpuščene iz statistične analize; velikosti skupin, podane v tem razdelku, predstavljajo končne velikosti skupine, potem ko so bili subjekti z nepravilnimi umestitvami izpuščeni.

Droge in mikroinfuzije

Injektorji iz nerjavečega jekla (merilnik 30) so bili spuščeni, da segajo 2.5 mm mimo vrha vodilne kanile. Dvostranske tlačne injekcije so bile narejene z uporabo mikrodrivne črpalke. Zdravila so infuzirali s hitrostjo .32 μL na minuto. Celotno trajanje infuzije je bilo 93 s, kar je povzročilo skupni volumen infuzije .5 μL na stran. Po infuzijah so injektorji pustili na mestu 1 min, da se omogoči difuzija injektata pred zamenjavo stila. Muscimol, D- [Ala2, N-MePhe4, Gly-ol] -enkephalin (DAMGO) in d-amfetamin (AMPH) so bili raztopljeni v .9% sterilni fiziološki raztopini.

Palabilni režim hranjenja

Podgane so bile izpostavljene dvema 30-minimi sejami (jutranji in popoldanski) na dan 5 zapored. Te seje so potekale v kletkah iz pleksi stekla, ki so enake domačim kletkam, razen s tlemi iz žične mreže, ki omogočajo enostavno zbiranje razlitja hrane. Med jutranjo sejo (11: 00 – 11: 30 AM) so podganom nudili sladkane maščobe (poskusna skupina; n = 14) ali standardni chow (kontrolna skupina; n = 14) in dovoljeno jesti prosto. Sladkana maščoba je bila eksperimentalna dieta Teklad (TD 99200), sestavljena iz skrajšanja s 10% saharoze, z energijsko gostoto 6.2 kcal / g (za nadaljnje podrobnosti glejte Dodatek 1). Voda je bila na voljo za obe skupini. Nato so jih vrnili v domače kletke, s hrano in vodo, ki sta bili na voljo. V popoldanskih sejah (3: 00 – 3: 30 PM) so podgane ponovno postavili v kletke za testiranje, vendar sta obe skupini dobili standardno zalogo (in vodo). Tako so podgane v eksperimentalni skupini v preskusnem okolju izkusile tako okusno hrano kot standardni nageljni. To je bilo storjeno z namenom, da se eksperimentalna skupina prilagodi sprejemu črevesa v kletkah za testiranje, ker je bil chow uporabljen v drugi fazi eksperimenta (glejte "Izziv z majhnim odmerkom muscimola v testnem okolju" spodaj). Vnos v testne kletke so beležili vsak dan. V domačih kletkah je bil ves čas na voljo standardni čow (laboratorijska prehrana za glodavce Teklad) in voda.

Režim izpostavljenosti stresu

Ta manipulacija je posnemala prijeten urnik hranjenja na dan 5, razen podgan v eksperimentalni skupini (n = 11) je na jutranjih sejah namesto prijetne hrane prejel averzivno spodbudo (pleničev stres). Vsako podgano so vsakodnevno nameščali v zaščitno kovinsko mrežno kletko (7 v × 8 v × 9 v), ki je bila nameščena za 5 min v domači kletki dihurja (naravni plenilec podgan). Zaščitne kletke so omogočale živalim, da se med seboj vidijo, slišijo in vonjajo, vendar prepovedujejo fizični stik. Znano je, da ta raven izpostavljenosti znatno poviša raven kortikosterona v plazmi in spodbuja povečano vzburjenje in budnost, ki traja vsaj 30 min po prenehanju izpostavljenosti dihurja (,). Nadzorne podgane (n = 10) smo postavili v enake majhne zaščitne kletke in jih premaknili v novo, vendar nevtralno (tj. Brez dihurjev) prostora. Po 5-min dihurju ali nevtralni izpostavljenosti so poskusne in kontrolne podgane odstranili iz majhnih kletk in jih takoj postavili v standardne kletke za testiranje iz pleksi stekla (za podrobnosti glej "Palatable Sheeding Sheme" za podrobnosti) v preskusni sobi, ki ni od dihurja ali nevtralne sobe , za sejo 30 min (11: 00 – 11: 30 AM). Hrana (standardni podganji chow) in voda sta bila prosto dostopna. Vse podgane so po tej seji vrnili v svoje kletke. Za nadaljno posnemanje prijetnega urnika hranjenja so bile vse podgane izpostavljene drugemu 30-min dnevno sejo (3: 00 – 3: 30 PM) v istih kletkah kot njihove jutranje kletke, vendar brez dihurja (ali nevtralne) izpostavljenosti . Ponovno sta bila za to popoldansko sejo prosto dostopna hrana in voda. Podgane so po končanem testiranju vrnili v domače kletke.

Ponovljeni režim AMPH

Ta manipulacija je posnemala prijeten urnik hranjenja na dan 5, le da so podgane v eksperimentalni skupini prejemale vsakodnevne jutranje sesije AMPH znotraj infuzijskih školjk AMPH, namesto izvrstne hrane. Intuzijske infuzije AMPH (2 ali 10 μg, n = 11 za vsak odmerek) ali fiziološka raztopina (n = 20) so dali takoj, preden so podgane postavili v kletke za testiranje na njihove jutranje seje (11: 00 – 11: 30 AM). V tem času sta bila na voljo standardna zajčka in voda za podgane in zabeležen je bil vnos. Hiperaktivnost, ki jo povzroči AMPH, je spremljal eksperimentator, ki je slep za zdravljenje, in sicer s postopkom vzorčenja opazovanja vedenja, v katerem je bilo v 20-sek zabeleženo število dogodkov štirih vedenj (prekrivanje kletke, vzreja, usmerjeno njuhanje in negovanje) koše za čas 5 min za vsako podgano. Podgane iz plenilnega eksperimenta plenilca so bile ponovno uporabljene za skupino AMPH z 2-μg.

Vse podgane so prejele drugo dnevno izpostavljenost preskusnim kletkam (3: 00 – 3: 30 PM) s standardno prisotnostjo črevesa in vode, vendar brez infuzij drog. Podgane so po končanem testiranju vrnili v domače kletke.

Izziv z nizkim odmerkom muscimola v testnem okolju

Po dnevih izpostavljenosti 5 sladkani maščobi, plenilskemu stresu ali ponavljajočim se manipulacijam z AMPH so podgane v preskusnem okolju prejele dvostranske izzive lupine znotraj Acb s fiziološko raztopino in muscimolom (10 ng / .5 μL na stran). Fiziološko raztopino so dali vsem podganim šesti dan (tj. Dan 1 po prenehanju njihovih manipulacij z zdravljenjem v dnevu 5) in sedmi dan intra-Acb lupinski muscimol. Vsak dan so podgane prejele infuzijo lupine znotraj Acb neposredno pred namestitvijo v testne kletke za navajeno popoldansko sejo (3: 00 – 3: 30 PM). V teh dneh ni bilo nobenih jutranjih sej. Hrana (standardni chow) in voda sta bila prosto dostopna. Izmerili so vnos in podgane so po končanem testiranju vrnili v domače kletke. Za to fazo poskusa je bil uporabljen chow, ker so vse skupine že prej dobivale zajedek v testnem okolju in tako odpravile zmedo novosti v hrani. Ker so bile osnovne vrednosti vnosa črevesja nizke, je bila manjša možnost, da bi pri hiperfagiji, ki jo povzroča muscimol, naleteli na zgornje meje.

Podmnožica podgan, ki so bile izpostavljene okusnemu režimu hranjenja (n = 10 sladkana maščoba, n = 10 chow kontrola) je prejela dodatne fiziološke raztopine in muscimolsko infuzijo 7 dni po koncu protokola izpostavljenosti sladkani maščobi, vmes ni bilo izpostavljenosti sladkani maščobi. Tem podganam so bile podeljene tretje zaporedje infuzije fiziološke raztopine / muscimola XN dni po koncu protokola, spet brez vmesne izpostavljenosti sladkani maščobi.

Upoštevajte, da vrstni red infuzij fiziološke raztopine in muscimola ni bil izravnan (tj. Fiziološka raztopina je bila vedno na prvem mestu), tako da bi bilo mogoče na dan izziva s fiziološko raztopino zaznati kakršen koli možen kontekst ali pogojen odziv, ki ga povzroči iztočnica, brez razlage predhodnega muscimola izziv. Upoštevajte tudi, da je bil za 10-μg AMPH skupino na dan 50 dan dodatni izziv muscimol (8 ng).

Izziv za odvzem hrane v testnem okolju

Podgane so bile podvržene prijetnemu režimu hranjenja za 5 dni, kot je opisano prej (n = 10 za skupino sladkanih maščob, n = 11 za krmilno skupino). Šesti dan so vse živali prejele fiziološko raztopino soli in bile testirane v običajnem popoldanskem času (3: 00 – 3: 30 PM) s standardno razpoloženo enolončnico in vodo. Nobena jutranja seja ni bila dana. Nato so vse podgane prejele hrano z odvzemom hrane, v kateri je bila hrana odstranjena iz domačih kletk 18 ure pred preskušanjem (tj. Zvečer na dan slane raztopine). Naslednji dan so podgane, prikrajšane za hrano, dobile infuzijske infuzijske lupine znotraj lupine školjk in jih postavile v kletke za testiranje (s prisotno standardno kravico in vodo) ob popoldanskem času testiranja, brez jutranje seje. Izmerili so vnos in podgane so po končanem testiranju vrnili v domače kletke.

DAMGO / Muscimol navzkrižna preobčutljivost

Za ta eksperiment smo uporabili nekoliko drugačen dizajn, ker 2.5-μg DAMGO povzroča sedacijo ob prvi izpostavljenosti podganah; ta sedacija popusti v približno 30 do 45 min (nato podgane začnejo jesti približno ~ 90 min). Zato smo uporabili eno dnevno dnevno sejo 2 brez popoldanske seje. Podgane, vzdrževane z ad libitumom, so dobile štiri infuzije lupine znotraj Acb (ena infuzija na dan, vsak drugi dan) bodisi sterilne .9% fiziološke raztopine (n = 7) ali DAMGO (2.5 μg / .5 μL na stran; n = 6). Po infuziji so podgane takoj postavili v kletke za testiranje na 2 h (11: 00 AM – 1: 00 PM) z dostopom do standardne črevesa in vode. Osemindvajset ur po zadnjem od večkratnih tretmajev so preiskovanci prejeli intra-Acb lupino sterilne fiziološke raztopine in jih postavili v kletke za preskušanje v 2 ure s standardno posodo in vodo. Dva dni pozneje so jih izzvali z muscimolom (10 ng / .5 μL), ki so ga ponovno postavili takoj po infuziji v testne kletke za 2 ure s standardno posodo in vodo. Vsak dan testiranja so beležili vnos in podgane vrnili v domače kletke takoj po koncu testiranja.

Statistična analiza

Za oceno razlik med eksperimentalnimi manipulacijami (prehrana, zdravljenje z zdravili, stres) in ustreznimi kontrolami so bile uporabljene dvofaktorske analize variance (zdravljenje × dan ali zgodovina zdravljenja × izziv z drogami, če je primerno) z načrtovanimi primerjavami. Alfa je bila nastavljena ob p <.05. Analize so bile izvedene z uporabo programske opreme StatView (SAS Institute, Cary, North Carolina).

Rezultati

Občasne vnosa sladkanega maščobnega vnosa občutljivo odzovejo hranjenje, ki jih povzroči znotraj-Acb školjka muscimol

Vnos sladkane maščobe med jutranjim hranjenjem se je stopnjeval med protokolom o prekinitvenem dostopu na dan 5 [F(4,52) = 13.3; p <.0001; Slika 1A]. Peti dan je bil povprečni vnos sladkane maščobe 4.9 g, kar ustreza 30.4 kcal, v primerjavi s srednjim vnosom 1.8 kcal čebule v kontrolni skupini. Pomembno je, da med protokolom dneva 5 ni bilo splošnih razlik v telesni teži med skupinami sladkanih maščob in črevesja [F(1,26) = .3; ni pomembno (ns)] in brez prehrane × dnevna interakcija na telesno težo [F(4,104) = 1.2; ns]. Zato se zdi, da podgane v eksperimentalni skupini kompenzirajo povečan vnos kalorij, verjetno z zmanjšanjem njihovega vnosa klopov ad libitum v domače kletke (tj. Kratki primeri izpostavljenosti sladkanim maščobam niso povzročili debelosti). Pri popoldanskih seansah, v katerih sta bili obe skupini deležni prigrizka, ni bilo razlik v vnosu med skupinami in med prehrano × medsebojnim vplivom na dan (Fs = .2 – 1.3; ns). Zato jutranja izpostavljenost sladkim maščobam ni vplivala na nizko stopnjo hranjenja, ki je bila opažena na popoldanskih zaužitjih črevesja.

Slika 1   

Vnos sladkane maščobe ali kosmiča v 5-dnevni protokol o vmesni izpostavljenosti, v katerem je ena skupina podgan dnevno prejemala 30-min sej sladkane maščobe (skupina "sladke maščobe", n = 14) zjutraj () in poje popoldne (B)in ...

Po zaključku tega protokola s prekinitvenim dostopom so bile vse podgane izzvane z infuzijami lupine s fiziološko raztopino in muscimolom (10 ng). Podgane, ki so bile izpostavljene sladkani maščobi, niso pokazale spremenjenega odziva hranjenja na solni izziv v primerjavi s kontrolo, ki je bila izpostavljena čredam. Vendar so pokazali močno, zelo pomembno preobčutljivost za vnos hrane, ki jo povzroča muscimol (prehrana × interakcija z zdravili [F(1,26) = 13.6, str = .001; Slika 2 za posebne primerjave]. Voda vode ni bila prizadeta. Kot je prikazano v Slika 2, preobčutljivost za muscimol je bila še vedno prisotna 7 dni po režimu sladkanih maščob [F(1,18) = 9.3; p = .007]; 14 dni po izpostavljenosti se je občutljiv odziv zmanjšal [F(1,14) = 1.6; ns]. Nazadnje, podgane, ki so bile izpostavljene režimu sladkane maščobe, niso pokazale povečanega odzivnega hranjenja na izziv pri odvzemu hrane v času 18 v primerjavi s svojimi kolegi, ki so bili izpostavljeni črevesju [F(1,19) = .004, ns; Slika 2].

Slika 2   

Podgane, ki so bile izpostavljene protokolu izpostavljenosti sladkani maščobi 5 na dan 7, so pokazale močno preobčutljivost za izziv z muscimolom z lupino z majhnimi odmerki znotraj nukleusa (Acb), ki je trajal 14 dni, vendar se je začel zmanjševati z dnevi XNUMX. "Sal" pomeni ...

Navzkrižna občutljivost med μ-opioidnim receptorjem in stimulacijo GABA receptorjev v Acb lupini

Kot je prikazano v Slika 3, znotraj lupinske lupine DAMGO je prišlo do močne hiperfagije na vsakega od dni injiciranja 4 faze "ponovljenega DAMGO" [F(1,11) = 62.3; p <.0001]. Po teh ponovljenih tretmajih smo podgane izzvali s fiziološko raztopino in muscimolom; za te izzive je analiza variance dala močne glavne učinke zgodovine kroničnega zdravljenja [F(1,11) = 7.8; p = .018] in izziv glede drog [F(1,11) = 12.1; p = .005], vendar brez interakcije [F(1,11) = 1.4; ns]. Kljub temu so načrtovane primerjave med skupinami DAMGO in fiziološke raztopine za vsako odzivno injekcijo pokazale, da je bil vnos hrane kot odgovor na izziv z mucimolom znotraj Acb lupine znatno večji pri podganah, ki so bile zdravljene z DAMGO,p <.05), vendar se odziv na izziv s fiziološko raztopino med skupinami ni razlikoval.

Slika 3   

Podgane, ki so jih večkrat zdravili z intra-nukleusnimi infuzijami lupine μ-opioidnega agonista D- [Ala2, N-MePhe4, Gly-ol] -enkefalina (DAMGO), so pokazali navzkrižno preobčutljivost na izziv z muscimolom z majhnimi odmerki. Prva fiziološka raztopina znotraj Acb ...

Odsotnost preobčutljivosti za muscimol po večkratni, občasni izpostavljenosti stresu ali infuzijam znotraj ampule lupine

Izvedena sta bila dva poskusa, s katerimi smo preizkusili učinke izpostavljenosti plenilcev in ponavljajočih se zdravljenj AMPH na kasnejšo odzivnost na muscimol. Prvič, podgane so bile podvržene dnevnemu režimu izpostavljenosti plenilcem, ki je stal 5, čemur so sledili fiziološka raztopina lupine in muscimola (10 ng). Kot je prikazano v Slika 4, zgodovina izpostavljenosti stresorju ni spremenila odzivnosti hranjenja na poznejši izziv muscimola [F(1,19) = 1.1, ns]. Nato so bile iste podgane podvržene režimu dneva 5 dnevnih infuzij AMPH z lupino znotraj Acb lupine (2 μg). AMPH je po pričakovanjih povzročil močno motorično aktivacijo, kar se odraža v "sestavljenih rezultatih aktivnosti" križanja v kletki, vzreje, usmerjenega snifiranja in negovanja (glej metode in materiali) v primerjavi s podganami, obdelanimi s fiziološko raztopino [F(1,22) = 53.9; p <.0001; Slika 5A], kar kaže, da je bil odmerek očitno vedenjsko aktiven. Vendar akutno zdravljenje AMPH ni spremenilo zaužitnega vedenja [zdravljenje × dnevna interakcija: F(4,76) = .5, ns; podatki niso prikazani]. Po zaključku ponovljene faze eksperimenta z AMPH ali fiziološko raztopino so bile vse podgane izzvane s fiziološko raztopino in muscimolom znotraj Acb lupine. AMPH ni bistveno spremenil občutljivosti na hranjenje, ki ga povzroča muscimol (Slika 5B). Prišlo je do pomembnega učinka zdravljenja ×F(1,19) = 3.6; p = .02]; vendar so načrtovane primerjave pokazale, da je bila ta interakcija predvsem posledica velike razlike v odzivih na fiziološko razvitost v primerjavi z izzivi muscimola v skupini AMPH (p = .0009). Vendar pa ni bilo bistvene razlike med fiziološko raztopino in skupino AMPH kot odgovor na izziv muscimol (p = .11).

Slika 4   

Podgane, ki so bile v času 5 dni izpostavljene vmesnim, kratkim epizodam plenilskega stresa (glej Metode), niso pokazale nobene spremembe občutljivosti na mišični izziv znotraj nukleusnih živalskih (Acb) školjk. Skupine so bile podgane 11 za dihurjsko stresno skupino, 10 za ...
Slika 5   

Ponavljajoče zdravljenje z infuzijami d-amfetaminskih lupin znotraj nukleusa (Acb) lupine (AMPH, 2 μg) ni povzročilo preobčutljivosti na prehranjevalni učinek majhnega odmerka mišičnega mišiča znotraj Acb. () Akutna AMPH je povzročila pomembne motorike ...

Za nadaljnje raziskovanje učinkov večkratnih infuzij AMPH na občutljivost na muscimol (če upoštevamo, da so bile podgane stresno uporabljene za poskus AMPH in bi ta prejšnja stresna izkušnja lahko spremenila njihove odzive na AMPH), je bil izveden drugi poskus v ločeni skupini naivnih podgan, v katerih preiskovanci so bili podvrženi dnevnemu režimu 5 z infuzijami lupine znotraj Acb z višjim odmerkom AMPH (10 μg), čemur so sledili izzivi lupine znotraj Acb s fiziološko raztopino in dva odmerka muscimola (10 in 50 ng). Spet smo opazili močno akutno aktivacijo motorja kot odgovor na infuzije AMPH [F(1,22) = 83.7; p <.0001; Slika 6], vendar brez vpliva na hranjenje [F(4,76) = 1.7, ns]. Ko so bile te podgane izzvane bodisi z 10-ng bodisi z 50-ng znotraj-Acb lupine muscimol, niso pokazale občutljivih odzivov na hranjenje [F(2,38) = 1.4; ns]. Kot pozitiven nadzor so bile podgane v skupini z AMPH izpostavljene režimu sladkanih maščob na dan 5 (in podgane v fiziološki skupini, ki so jih predpisali z žrebo); vse podgane so nato izzvali z intrafuzijsko infuzijo lupine 10-ng muscimola. Pri teh podganah smo opazili senzibiliziran odziv hranjenega muscimola po izpostavljenosti sladkani maščobi [F(1,19) = 5.8; p = .027; vstaviti, Slika 6], kar dokazuje, da so se iste podgane, ki po večkratnih infuzijah AMPH niso pokazale preobčutljivosti, lahko razvile in izrazile preobčutljivost za muscimol kot odgovor na izpostavljenost sladkanim maščobam.

Slika 6   

Ponavljajoče zdravljenje z infuzijami d-amfetaminskih lupin znotraj nukleusa (Acb) lupine dna amfetamina (AMPH, 10 μg) ni povzročilo preobčutljivosti na prehranjevalni učinek majhnega odmerka znotraj-Acb lupinskega muscimola (Musc). Celotna zasnova tega eksperimenta ...

Umestitve kanil

Slika 7 prikazuje shematično preslikavo umestitev kanil iz vseh poskusov v tej študiji. Kot je razvidno iz slike, je velika večina umestitev (95%) padla znotraj zadnje polovice medialne lupine Acb, vključno s skrajnim rostralnim sektorjem. Pet odstotkov umestitev je padlo ravno na sredino anteroposteriornega obsega lupine, znotraj sektorja, ki daje apetitne odzive, vendar rostralno proti coni, ki daje obrambno podobna vedenja (). Umestitve na teh območjih so bile enakomerno zastopane v vseh poskusih in ni bilo sistematičnih razlik v vedenjskih ali farmakoloških učinkih zaradi variabilnosti umestitve v anteroposteriorno os.

Slika 7   

Linijske risbe, ki prikazujejo umestitve injektorjev v jedru, se obkrožajo lupine iz vseh poskusov. Območja s križnimi škripci prikazujejo cone, v katere je padlo 95% umestitev; posamezno izsekana območja prikazujejo umestitve za preostalih 5%. Sistematičnih ni bilo ...

Razprava

V tej raziskavi prikazujemo novo vrsto prehranjevanja v možganih. Prekinitve s porabo sladkanih maščob so močno senzibilizirale učinek hranjenja, ki ga je v lupini Acb povzročil izziv majhnega odmerka muscimola; preobčutljivi učinek je bil približno enakovreden učinku, ki ga je ustvaril petkrat večji odmerek muscimola pri naivnih podganah. Zdi se, da ta preobčutljivost ni nespecifična posledica splošne vzburjenosti ali diverzifikacije okolja, povezane s vmesno izpostavljenostjo sladkani maščobi. Skladno s tem, ponavljajoča se izpostavljenost močno vzbujajočim dražljajem (občasno izpostavljenost stresorjem), tudi tistim s pozitivno motivacijsko valenco (znotraj-Acb lupina AMPH) (-), niso zadostovali za preobčutljivost hranjenja, ki ga povzroča muscimol. Nasprotno so infuzije DAMGO znotraj lupine lupine, ki so sprožile hranjenje v fazi indukcije preobčutljivosti, povzročile močno navzkrižno preobčutljivost za muscimol. Zato je za spodbujanje preobčutljivosti za GABA potrebna skupna lastnost vnosa sladkanih maščob in zaužitja zajtrkov, ki jih poganjajo z opioidi, poleg njihovega splošnega vzburjenja. To implicitno dokazuje, da lastnosti oroznih ali postingvestic, značilnih za sladkor ali maščobo, niso obvezne za razvoj preobčutljivosti muscimola. Namesto tega lahko skupni mehanizem indukcije ponavlja ponavljajoče se μ-opioidne signalizacije v lupini Acb, ki nastanejo bodisi z eksogenim dajanjem DAMGO bodisi s sproščanjem endogenega μ-opioidnega peptida, ki ga sproži izlivanje sladkane maščobe.

V zvezi s tem se je pokazalo, da stimulacija intra-Acb μ-opioidnih receptorjev na ravni Acb povzroči preobčutljivost za opioide in pogojen odziv hranjenja na poznejši fiziološki izziv (). Ti učinki niso odvisni od dopamina (), kot tudi drugi postopki, ki jih locirajo Acb, µ-opioidi, kot je povečanje hedonistične okusne reaktivnosti (,,). Na splošno se s temi ugotovitvami strinja neuspeh ponavljajočih infuzij AMPH za senzibilizacijo prehrane, ki ga povzroča muscimol; tako lahko navzkrižna preobčutljivost z opioidi in GABA predstavlja vrsto dopamina neodvisne nevroadaptacije v Acb. Zanimivo je, da pri podganah, ki so bile zdravljene z DAMGO, nismo opazili pogojnega hranjenja na odziv s slano raztopino. Upoštevajte pa, da je lahko indukcija opioidno pogojenega učinka hranjenja različna in zahteva več kot štiri ponavljajoče se zdravljenje (V. Bakshi, osebna komunikacija, junij 2012). Ne glede na to ti rezultati kažejo, da za izražanje navzkrižne preobčutljivosti na opioid in GABA ni potreben pogojen učinek hranjenja (vsaj takšnega, ki bi ga bilo mogoče razkriti s fiziološko raztopino). Poleg tega nikoli nismo opazili povečanega odziva hranjenja pri podganah, ki so bili izpostavljeni sladkastim maščobam, v popoldanskih sejah z odmrzovanjem ali kot odgovor na slano ali lakotno izzivanje, kar kaže na določeno stopnjo posebnosti mehanizma za občutljiv odziv hranjenja.

Zdi se, da je nevronski mehanizem, ki je podlaga za vedenje hranjenja, ki ga povzročajo muscimol in druge manipulacije z aminokislinami v lupini Acb, vznemirjanje ravnovesja vznemirljivega in zaviralnega signala, posredovanega z AMPA, na nevrone s srednjimi bodicami. Kadar je neto učinek zmanjšanje aktivnosti teh nevronov, bodisi z zaviranjem z GABA ali z blokado glutamatnih receptorjev tipa AMPA, se sproži močna hiperfagija (,,,). Zato je parimoniozna razlaga naših rezultatov ta, da ponavljajoča aktivacija µ-opioidnih receptorjev (z eksogenim dajanjem DAMGO ali z endogenim sproščanjem opioidnega peptida, ki nastane pri izlivanju sladkane maščobe) povzroči neposredno spremembo GABAA občutljivost receptorjev sam po sebi ali bolj splošna sprememba ravnotežja ekscitatorno / zaviralnega prenosa, tako da je lažje doseči prag za inhibicijo, ki ga posreduje GABA. Večkratno zdravljenje z opioidnimi agonisti (morfiji) povzroči določene učinke v tej smeri, na primer uravnavanje GABAA vezna mesta in vnos klorida, ki ga stimulira muscimol, v sinaptosome (), povečanje GABAA izraz δ-podenote v lupini Acb () in internalizacijo podenote GluR1 receptorjev AMPA v lupini Acb (). Vsak od teh mehanizmov (ali njihova kombinacija) na ravni lupine Acb bi lahko povzročil preobčutljivost za nevronsko inhibicijo, ki jo povzroča muscimol. Kljub temu so možne tudi druge razlage; na primer, lahko pride tudi do nevroadaptacij znotraj "izhodnih" vozlišč mreže, skozi katera se izraža vedenje hranjenja, ki ga povzroča Acb lupina (na primer stranski hipotalamus). Za preizkus te možnosti so potrebne dodatne študije.

Kar zadeva klinični pomen teh ugotovitev, je zanimiva možnost, da se preobčutljivost za GABA v lupini Acb razvije kot odziv na okoljske nepredvidene okoliščine, ki izzovejo vmesno, fazno zvišanje μ-opioidne signalizacije, kot so ponavljajoči se "napitki" okusnega hranjenja. V tem kontekstu bi sprememba GABA lahko pomenila mehanizem za nadaljnje disregulirano apetitno vedenje. Naši rezultati imajo lahko tudi posledice za razumevanje učinkov "navzkrižne prehrane" med nagrajevanjem hrane in določenimi zlorabami drog. Eden očitnih kandidatov je alkohol (EtOH), katerega učinke modulirata tako μ-opioidni kot GABA sistem v Acb (-). Zanimivo je, da nekatere študije poročajo o povezavi med hrepenenjem po hrani, pivanjem in patološkim uživanjem alkohola pri ljudeh (,). V študijah na živalih bodisi blokada GABA bodisi opioidni receptor v lupini Acb zmanjša vnos EtOH [(,), vendar glej Stratford in Wirtshafter ()] in presenetljivo je, da se EtOH daje sam neposredno v lupino Acb (). Poleg tega je nedavna študija pozitronske emisijske tomografije pokazala, da μ-opioidna signalizacija v Acb spremlja vnos sladkane alkoholne pijače (). Na celični ravni se je izkazalo, da je Acb lupinsko lokaliziran GABAA receptorji, ki vsebujejo δ podenoto, modulirajo vedenjske učinke uživanja nizkih odmerkov EtOH (); kot smo že omenili, je ekspresija gena za to podenoto v ponavljajoči se stimulaciji μ-opioidnih receptorjev v lupini Acb (). Torej je možno, da se sproščanje μ-opioidnih peptidov z „prigrizkom“ s hrano z okusno hrano v okviru pitja EtOH ali uživanjem sladkanih pijač EtOH (kot so tiste, ki se tržijo za mladostniške pivce) lahko hitro razvija, z opioidi odvisnimi nevroadaptacije v vezjih z aminokislinami, ki jih vsebuje Acb lupina. Ta hipoteza, čeprav špekulativna, vodi k preizkušljivim napovedim o možnem kontekstu, v katerem bi preobčutljivost za GABA v možganskih nagradah ranljivih posameznikov lahko omogočila, da bi okusna živila služila kot "zdravilo na prehodu" za stopnjevanje napitkov hrane in vnosa EtOH.

Dodatni material

Dopolnilna datoteka

Priznanja

To delo sta podprla nacionalna inštituta za donacijo za zdravje DA 009311 in MH 074723. Podmnožica teh podatkov je bila predstavljena v abstraktni obliki na 2009-ovem srečanju Konference Društva za preučevanje zaužitega vedenja v Portlandu v Oregonu.

Opombe

Avtorji ne poročajo o biomedicinskih finančnih interesih ali morebitnih navzkrižjih interesov.

Dodatni material citirano v tem članku, je na voljo na spletu.

Reference

1. Berthoud HR, Morrison C. Možgani, apetit in debelost. Annu Rev Psihola. 2008; 59: 55 – 92. [PubMed]
2. Majhna DM. Posamezne razlike v nevrofiziologiji nagrajevanja in epidemiji debelosti. Int J Obes (Lond) 2009; 33 (suppl 2): S44 – S48. [PMC brez članka] [PubMed]
3. Volkow ND, Wang GJ, Baler RD. Nagrada, dopamin in nadzor vnosa hrane: Posledice za debelost. Trendi Cogn Sci. 2011, 15: 37 – 46. [PMC brez članka] [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. Nevroznanost naravnih nagrad: Ustreznost odvisnikom od odvisnosti. J Nevrosci. 2002; 22: 3306 – 3311. [PubMed]
5. Deadwyler SA. Elektrofiziološki korelati zlorabljenih zdravil: Odnos do naravnih nagrad. Ann NY Acad Sci. 2010; 1187: 140 – 147. [PubMed]
6. Volkow ND, Wise RA. Kako nas zasvojenost z drogami pomaga razumeti debelost? Nat Neurosci. 2005, 8: 555 – 560. [PubMed]
7. Kenny PJ. Skupni celični in molekularni mehanizmi pri debelosti in odvisnosti od drog. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 638 – 651. [PubMed]
8. Avena NM, Gold JA, Kroll C, Gold MS. Nadaljnji razvoj nevrobiologije hrane in odvisnosti: posodobitev stanja znanosti. Prehrana. 2012; 28: 341 – 343. [PMC brez članka] [PubMed]
9. Corwin RL. Bingeing podgane: Model intermitentnega pretiranega vedenja? Apetit. 2006, 46: 11 – 15. [PMC brez članka] [PubMed]
10. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Dokazi za zasvojenost s sladkorjem: vedenjski in nevrokemični učinki intermitentnega, prekomernega vnosa sladkorja. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20 – 39. [PMC brez članka] [PubMed]
11. Spangler R, Wittkowski KM, Goddard NL, Avena NM, Hoebel BG, Leibowitz SF. Opiati podobni učinki sladkorja na izražanje genov na območjih, ki nagrajujejo podgane možganov. Brain Res Mol Brain Res. 2004; 124: 134 – 142. [PubMed]
12. Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Negativni kontrast, odvisen od opioidov, in podobno prehranjevanje pri podganah z omejenim dostopom do zelo zaželene hrane. Nevropsihofarmakologija. 2008, 33: 524 – 535. [PubMed]
13. Johnson PM, Kenny PJ. Receptorji dopamina D2 v odvisnosti od nagnjene disfunkcije in kompulzivnega prehranjevanja pri debelih podganah. Nat Neurosci. 2010, 13: 635 – 641. [PMC brez članka] [PubMed]
14. Stratford TR, Kelley AE. GABA v lupini nucleus accumbens sodeluje pri centralni regulaciji krmljenja. J Neurosci. 1997, 17: 4434 – 4440. [PubMed]
15. Basso AM, Kelley AE. Hranjenje, ki ga povzroča stimulacija GABA (A) receptorjev v lupini jedra, vsebuje: regionalno preslikavo in karakterizacijo makronutrientov in okusne preference. Behav Neurosci. 1999; 113: 324 – 336. [PubMed]
16. Baldo BA, Alsene KM, Negron A, Kelley AE. Hiperfagija, ki jo povzroča inhibicija GABAA receptorja lupine nukleus acumbens: odvisnost od nepoškodovanega nevronskega izhoda iz osrednje amigdaloidne regije. Behav Neurosci. 2005; 119: 1195 – 1206. [PubMed]
17. Stratford TR, Wirtshafter D. Dokaz, da so lupina jedra, ki se nabira v jedru, ventralni palidum in stranski hipotalamus, so sestavni deli lateraliziranega kroga hranjenja. Behav možgani Res. 2012; 226: 548 – 554. [PMC brez članka] [PubMed]
18. Reynolds SM, Berridge KC. Strah in hranjenje v lupini jedra, ki se pojavlja v jedru: Rostrocaudalna segregacija obrambnega vedenja, ki ga povzroča GABA, v primerjavi s prehranjevalnim vedenjem. J Nevrosci. 2001; 21: 3261 – 3270. [PubMed]
19. Khaimova E, Kandov Y, Izrael Y, Kataldo G, Hadjimarkou MM, Bodnar RJ. Antagonisti podtipov opioidnih receptorjev diferencialno spreminjajo hranjenje, ki ga povzroča GABA agonist, in se pri podganah pojavijo bodisi z lupino jedra, ki se nahaja v jedru, bodisi z ventralnimi območji. Možgani Res. 2004; 1026: 284 – 294. [PubMed]
20. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Aktiviranje subpopulacije hipotalamičnih nevronov, ki vsebujejo oreksin / hipokretin, z inhibicijo lupine jedra akumulira z receptorji GABAA, vendar ne z izpostavljenostjo novemu okolju. Eur J Nevrosci. 2004; 19: 376 – 386. [PubMed]
21. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Peptidi, ki uravnavajo vnos hrane: manipulacija z apetitom, ki povzroča apetit, aktivira hipotalamične nererone in zavira POMC nevrone. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284: R1436 – R1444. [PubMed]
22. Stratford TR, Wirtshafter D. NPY posreduje hranjenje, ki ga injicirajo muscimol v lupino jedra. Neuroreport. 2004; 15: 2673 – 2676. [PubMed]
23. Faure A, Richard JM, Berridge KC. Želja in strah pred jedrskimi jedri: Kortični glutamat in subkortikalna GABA različno ustvarita motivacijo in hedonski vpliv pri podganah. PLOS One. 2010; 5: e11223. [PMC brez članka] [PubMed]
24. Baldo BA, Kelley AE. Diskretno nevrokemično kodiranje prepoznavnih motivacijskih procesov: Vpogledi iz jedra nadzirajo hranjenje. Psihoparmakologija (Berl) 2007; 191: 439 – 459. [PubMed]
25. Kelley AE, Baldo BA, Pratt WE, Will MJ. Kortikostriatalno-hipotalamično vezje in motivacija hrane: Vključevanje energije, delovanja in nagrajevanja. Physiol Behav. 2005; 86: 773 – 795. [PubMed]
26. Berthoud HR. Um v primerjavi s presnovo v nadzoru nad vnosom hrane in energijskim ravnovesjem. Physiol Behav. 2004; 81: 781 – 793. [PubMed]
27. Baldo BA, Kelley AE. Infuzija amilina v podgano jedro podgan močno zmanjšuje motorično aktivnost in zaužitje. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2001; 281: R1232 – R1242. [PubMed]
28. Bakshi VP, Alsene KM, Roseboom PH, Connors EE. Trajne motnje senzorične motnje po izpostavljenosti plenilcu ali faktorju sproščanja kortikotropina pri podganah: model za pomanjkanje obdelave informacij, podobnega PTSP-ju? Nevrofarmakologija. 2012; 62: 737 – 748. [PMC brez članka] [PubMed]
29. Roseboom PH, Nanda SA, Bakshi VP, Trentani A, Newman SM, Kalin NH. Grožnja plenilcem povzroči vedenjsko inhibicijo, aktivacijo hipofize in nadledvične žleze in spremembe v ekspresiji proteinov, ki jih veže amigdala CRF. Psihoneuroendokrinologija. 2007; 32: 44 – 55. [PMC brez članka] [PubMed]
30. Wyvell CL, Berridge KC. Amfetamin znotraj oseb povečuje pogojeno spodbujevalno pomembnost nagrajevanja saharoze: povečanje nagrade "hočeš" brez večje "všečnosti" ali okrepitve odziva. J Nevrosci. 2000; 20: 8122 – 8130. [PubMed]
31. Prodaja LH, Clarke PB. Ločevanje nagrad amfetamina in lokomotorna stimulacija med jedrom obkroži medialno lupino in jedro. J Nevrosci. 2003; 23: 6295 – 6303. [PubMed]
32. Ito R, Hayen A. Nasprotne vloge jedra obdajajo jedro in lupino dopamina pri modulaciji limbične obdelave informacij. J Nevrosci. 2011; 31: 6001 – 6007. [PMC brez članka] [PubMed]
33. McBride WJ, Murphy JM, Ikemoto S. Lokalizacija mehanizmov za krepitev možganov: Študije intrakranialne samoplačnike in intrakranialne kondicioniranja placeba. Behav možgani Res. 1999; 101: 129 – 152. [PubMed]
34. Bakši VP, Kelley AE. Preobčutljivost in kondicioniranje hranjenja po večkratnih mikroinjekcijah morfa v jedro jedra. Možgani Res. 1994; 648: 342 – 346. [PubMed]
35. Kelley AE, Bakshi VP, Fleming S, Holahan MR. Farmakološka analiza substratov, na katerih temelji pogojno hranjenje, povzročena s ponavljajočimi opioidnimi stimulacijami jedrnih jezgrov. Nevropsihoparmakologija. 2000; 23: 455 – 467. [PubMed]
36. Berridge KC, Venier IL, Robinson TE. Okusna reaktivnostna analiza afagije, ki jo povzroča 6-hidroksidopamin: Posledice hipotez o vzburjenju in anhedoniji glede funkcije dopamina. Behav Neurosci. 1989; 103: 36 – 45. [PubMed]
37. Pecina S, Berridge KC. Hedonska vroča točka v lupini jedrnih jezgrov: Kje mu-opioidi povzročajo povečan hedonski vpliv sladkosti? J Nevrosci. 2005; 25: 11777 – 11786. [PubMed]
38. Maldonado-Irizarry CS, Swanson CJ, Kelley AE. Glutamatski receptorji v jedru nadgradijo lupinsko vedenje prek stranskega hipotalamusa. J Nevrosci. 1995; 15: 6779 – 6788. [PubMed]
39. Stratford TR, Swanson CJ, Kelley A. Specifične spremembe vnosa hrane, ki nastanejo z blokado ali aktivacijo glutamatnih receptorjev v lupini jedra. Behav možgani Res. 1998; 93: 43 – 50. [PubMed]
40. Lopez F, Miller LG, Thompson ML, Schatzki A, Chesley S, Greenblatt DJ in sod. Kronično dajanje morfija poveča vezanje benzo-diazepina in delovanje receptorjev GABAA. Psihoparmakologija (Berl) 1990; 101: 545 – 549. [PubMed]
41. Hemby SE. Morfijine spremembe v ekspresiji genov imunopozitivnih nevronov kalbindina v jedru in nastanku jedra. Nevroznanost. 2004; 126: 689 – 703. [PubMed]
42. Glass MJ, Lane DA, Colago EE, Chan J, Schlussman SD, Zhou Y in sod. Kronično dajanje morfija je povezano s zmanjšanjem površinske podenote AMPA GluR1 receptorja v dopaminskem D1 receptorju, ki izražajo nevrone v lupini, in ne-D1 receptor, ki izražajo nevrone v jedru podgane jedra podgane. Exp Neurol. 2008; 210: 750 – 761. [PMC brez članka] [PubMed]
43. Barson JR, Carr AJ, Soun JE, Sobhani NC, Leibowitz SF, Hoebel BG. Opioidi v jedru jedra spodbujajo vnos etanola. Physiol Behav. 2009; 98: 453 – 459. [PMC brez članka] [PubMed]
44. Zhang M, Kelley AE. Vnos raztopin saharina, soli in etanola se poveča z infuzijo mu opioidnega agonista v jedro jedra. Psihoparmakologija (Berl) 2002; 159: 415 – 423. [PubMed]
45. Koob GF. Vloga mehanizmov GABA pri motivacijskih učinkih alkohola. Biochem Pharmacol. 2004; 68: 1515 – 1525. [PubMed]
46. Gendall KA, Sullivan PF, Joyce PR, Fear JL, Bulik CM. Psihopatologija in osebnost mladih žensk, ki doživljajo hrepenenje po hrani. Zasvojenec Behav. 1997; 22: 545 – 555. [PubMed]
47. Krahn DD, Kurth CL, Gomberg E, Drewnowski A. Patološka dieta in uživanje alkohola pri ženskah v šolah - stalnica vedenja. Jejte Behav. 2005; 6: 43 – 52. [PubMed]
48. Hyytia P, Koob GF. Antagonizem receptorjev GABAA v razširjeni amigdali zmanjšuje samo dajanje etanola pri podganah. Eur J Pharmacol. 1995; 283: 151 – 159. [PubMed]
49. Eiler WJ, 2nd, junij HL. Blokada receptorjev GABA (A) znotraj razširjene amigdale zmanjšuje D (2) regulacijo vedenja z alkoholom v ventralnem tegmentacijskem območju podgan, ki so naklonjene alkoholu (P). Nevrofarmakologija. 2007; 52: 1570 – 1579. [PMC brez članka] [PubMed]
50. Stratford TR, Wirtshafter D. Nasprotni učinki na zaužitje raztopin etanola in saharoze po injekcijah muscimola v lupino jedra. Behav možgani Res. 2011; 216: 514 – 518. [PMC brez članka] [PubMed]
51. Engleman EA, Ding ZM, Oster SM, Toalston JE, Bell RL, Murphy JM in sod. Etanol se sam daje v lupino jedra, vendar ne v jedro: dokazi o genetski občutljivosti. Klinika za alkohol 2009; 33: 2162 – 2171. [PMC brez članka] [PubMed]
52. Mitchell JM, O'Neil JP, Janabi M, Marks SM, Jagust WJ, Fields HL. Uživanje alkohola povzroči endogeno sproščanje opioidov v človeški orbitofrontalni skorji in jedru. Sci Transl Med. 2012; 4: 116ra6. [PubMed]
53. Nie H, Rewal M, Gill TM, Ron D, Janak PH. Ekstrasynaptični delta vsebujejo GABAA receptorje v jedru, ki se nahaja v dorsomedialni lupini, prispevajo k vnosu alkohola. Proc Natl Acad Sci ZDA. 2011; 108: 4459 – 4464. [PMC brez članka] [PubMed]
54. Paxinos G, Watson C. Mož podgane v stereotaksičnih koordinatah. 4. San Diego, Kalifornija: Academic Press; 1998.