PLoS se tasi. 2013 Nov 25; 8 (11): e81245. doi: 10.1371 / journal.pone.0081245.
Nishijima T, Kawakami M, Kita I.
puna
Laboratory of Physical Physiology, Faʻasalaga Aʻoga a le Soifua Maloloina o Tagata, Tokyo Metropolitan University, Tokyo, Iapani.
lē faʻatino
O faamalositino faaletino e faaleleia ai vaega e tele o le galuega o le hippocampal. E tusa ai ma le manatu e faʻapea o le gaioiga faʻapitoa o le ki i le faʻalauteleina o galuega a le neuronal, o faʻamatalaga muamua ua faʻaalia i taimi uma o le tele o faamalositino e faʻaleleia ai le faʻaleleia o le neuronal i le hippocampus. O faʻasolosolo osofaʻi fua e mafua ai le faʻapipiʻiina o le numera o le transcript ΔFosB, lea e faʻafefeteina ai le pisipisia uumi umi.
I lenei suʻesuʻega, na matou tofotofoina le manatu o le uila e le o toe faʻaaogaina e faʻaosoosoina ai le ΔFosB expression i le hippocampus, ma suʻesuʻeina soʻo se aafiaga patino i le itulagi i totonu ole pito i lalo o le hippocampal i luga o le pito i luga ole ala. Male C57BL / 6 mice sa nonofo i le aunoa pe aunoa foi ma se uila tietie mo 4 vaiaso. O le uumi o le uila o loʻo faʻaauau le faateleina o le immunoreactivity FosB / ΔFosB i itulagi uma o le hippocampal (ie, i le DG, CA1, ma CA3 subfields o le pito i tua ma le hippocampus). Iʻuga na faʻamaonia ai o le uili o loʻo faʻaosoosoina le faʻaalia o le faʻaogaina o le FosB / ΔFosB i le cortex, ma fai mai o le faʻateleina o le FosB / ΔFosB i totonu o le hippocampus e le o se taunuuga patino o le tamoe. O faʻamatalaga mai le Western Western data na faʻamaonia ai o le faateleina o le puipuia o le Sosipotamp FosB / ΔFosB na mafua ona o le faateleina o le ΔFosB. O nei taunuʻuga e taʻu mai ai o le faagaioiga faaletino o le tino o se mea e ono mafua ai le atinaʻe o le ΔFosB i le hippocampus atoa, lea o le a faʻamatalaina ai pe aisea e mafai ai e le faʻamalositino ona faʻaleleia uma galuega o le hippocampus ma le faʻalauteleina o galuega. O le mea e mataʻina ai, na matou iloa ai o le FosB / ΔFosB expression i le DG na faʻamaonia lelei ma le numera o numera lua-immunoreactive (ie, immature) neurons.
E ui lava e le o mautinoa le faʻaogaina o auala e faʻaaogaina ai le ΔFosB-neurogenesis, o nei faʻamatalaga e faʻamaonia ai o le neurogenesis e faʻamalosia ai, o le mea sili lea ona faalagolago i le galuega. Faʻatasi, o tatou taunuuga o loʻo i ai nei o loʻo fautua mai o le ΔFosB o se fua faʻatatau o le molécula fou e aofia ai le faʻatonutonuina o le plastics hippocampal.
faʻatomuaga
O le faamalositino e faʻamalosia ai le tele o faʻamanuiaga i luga o le molécula, fausaga, ma vaega o galuega a le hippocampus i le tootoo [1,2], o nisi o ia mea na lagolagoina e suesuega a tagata [3,4]. Ae ui i lea, o auala o loʻo i lalo o suiga o le faʻataʻitaʻiga i le hiipocampal plasticity e le lava le malamalama. O lomiga muamua na faʻaalia i taimi uma o le faʻamalosia o le faʻafouina o le hippocampal i le aʻafia. O suʻesuʻega faʻapitoa e faʻaaoga ai le C-Fos, o se faailoga o le toe faʻafouina o le neuronal activation, ua faʻamaonia ai o le faʻamalosia ma le ofo e faʻalauteleina le i-fos expression i le dentate gyrus (DG), CA1, ma CA3 subfields o le hippocampus rodent [5-7]. E le gata i lea, o se suʻesuʻega talu ai e faʻaaoga ai le laser-Doppler flowmetry (LDF) ua faʻaalia ai o le suauu vaivai e faʻaleleia atili ai le toto o le cerebral blood flow (rCBF), o se isi faailoga o le faʻafouina o le neuronal, i le CA1 subfield i le rat [8]. O suʻesuʻega faʻamalosi e mafai ona faʻamaonia ai auʻiliʻiliga auʻiliʻiliga faʻapitonuʻu pe'ā maeʻa le faʻamalositino, aʻo LDF e mafai ona mataʻituina le taimi o le rCBF i se nofoaga faʻapitoa i le taimi o le faamalositino. E ui lava i tulaga lelei ma tapulaa o suʻesuʻega taʻitasi, o nei suʻesuʻega na faʻaalia ai foi le aafiaga o le tele o faamalositino i le gaioiga o le himpocampal. O nei taunuʻuga e taʻu mai ai se masini e faʻamalositino ai le tumau i taimi masani e faʻamalosia ai le faʻataʻitaʻiina o le hippocampal e ala i le faʻateleina o le faʻaosoina o le neuronal activation [9].
O le faʻailoga o le transcript ΔFosB, o le faʻasologa o le faʻaaogaina o le FosB atoa, o loʻo faʻaosoina e ituaiga eseese o faʻaopoopoga faifaipea i totonu o le mafaufau faiʻai faapitoa, lea e faasolosolo malie ona faʻaleleia ona o lona tulaga mautu (afa afa o vaiaso) [10-12]. O se tino tuputupu aʻe o molimau e faʻaalia ai o le maualuga o le ΔFosB e faʻatalanoa ai le uumi tumau ma le amio faʻasisitino e fesootaʻi atu i fualaau faʻapitoa [11,13]. Mo se faʻataʻitaʻiga, o le faʻaaogaina masani o fualaau oona e pei o cocaine ma morphine e faʻateleina ai le faʻaalia o le ΔFosB i le nucleus accumbens, e fai ma sui o se tasi o masini molioʻo e mafua ai le faʻalauteleina o lagona i nei fualaau [11,14,15]. Se masani lava i isi faʻamaʻi fua, e aofia ai meaʻai maualuluga ma mea tau feusuaʻiga [16,17], lo loʻo faʻaauau pea le tilivaina o le uila e faʻaaoga ai le FosB / ΔFosB i le rat nucleus accumbens, e fautua mai ai o le ofo mai o se taui masani lea mo roi [18,19]. Ae ui i lea, i le mea sili tatou te iloa, e leai ni tusitusiga na suʻesuʻeina pe o le faʻaalia pea o le faʻaalia i faamalositino e faʻaosoina ai le ΔFosB expression i le hippocampus. Talu ai ona o le faamalositino e mafua ai le toe faʻafouina mai i le hippocampus, matou te faʻamautinoaina o le a faʻaaogaina e le uila le tumau le faʻamatalaga ΔFosB i le hippocampus. E ui lava e le o mautinoa le faʻaogaina o auala e faʻaaogaina ai e le ΔFOSB le eletise o le hippocampal, o suʻesuʻega ua faʻaalia ai e le maua e le mice fosB gene faaalia le leaga o le neurogenesis o le hippocampal ma le faateleina o le atuatuvale-faapei o amio [20,21]. O aʻutogafitiga, faʻamalositino e iloa e faʻaleleia ai le neurogenesis ma maua ai ni meatotino faʻasao [22-25]. O aʻuf o tatou talitonuga e saʻo, ΔFosB o le a avea ma se faʻataʻitaʻiga faʻapipiʻi fou e mafai ona faʻatautaia ai le faʻataʻitaʻiga o le hiipocampal plasticity.
O le hippocampus ei ai le gradient o le natura ma le galue i luga o lona itu umi (dorso-ventral)26]. O le hippocampus o loʻo taʻalo ai se vaega autu i le suʻesuʻeina o fanua ma le mafaufau [27,28], ae o le himpocampus o le vaalele e sili ona aafia i le faatonutonuina o amioga faalelagona [29,30]. E le gata i lea, o suʻesuʻega ua faʻaalia e faapea, o fualaau oona e faʻaaogaina ai ni mamanu eseese o le C-Fos i totonu o vaega maualuluga o le hippocampus [31-33]. Ona o le faʻamalositino e faʻaleleia ai uma le lua [34-37] ma le galuega hippocampus-faalagolago i galuega [24,25,38], e taua le suʻeina pe o le a le umi se taimi e faia ai le ofo e mafua ai le faʻaalia o le ΔFosB ile itulagi i le hippocampus.
O le manatu autu o lenei suʻesuʻega, o le uumi o le taimi e faʻaaogaina ai e le aunoa, o le a faʻaaogaina ai le ΔFosB i totonu o le hiipocampus o le kiore. Ole suʻesuʻega lenei na suʻesuʻeina e le FosB / ΔFosB immunohistochemistry i subfields i tua ma le vaʻalele, DG, CA1, ma CA3, faʻatasi ai ma le faamamafa atili i le faʻamalamalamaina o le faʻavaeina patino o le vaega. O faʻamaumauga na faʻamaonia e ala i sisifo o le sisifo, lea sa faʻaaogaina e iloagofie ai le tulaga o le fosB gaosia o gaʻo i totonu o le hippocampus. Na matou suʻesuʻeina foi le paʻu o le FosB / ΔFosB faʻamalosi e fai ai le taʻaloga e faʻataʻitaʻi ai le mafai e le faamalositino o le FosB / ΔFosB i le mafaufau. Ma le mea mulimuli, o le mafutaga fefaʻasoaʻiga i le va o le FosB / ΔFosB expression ma le neurogenesis o loʻo suʻesuʻeina o le laasaga muamua i le sailia o le aoga o le faʻaaogaina o le ΔFosB i le faʻatonutonuina o le palasititi o le hippocampal.
Mea ma Metotia
1: Meaola ma faʻamatalaga tau amio
Twenty male C57BL / 6 mice (8 vaiaso o tausaga) na faʻatau mai se faʻatoʻaga faʻatau (SLC, Shizuoka, Iapani). E sefulu ni kusi na faʻaaogaina mo le Faʻailoa 1, ma le isi sefulu mo le Experiment 2. Sa i ai ni masini i lalo o le puleaina o le vevela (22-24 ° C) ma le malamalama (12 / 12-h malamalama / pouliuli, malamalama i le 0500), ma sa tuuina atu meaai ma vai ad libitum. O faʻataʻitaʻiga uma na faʻamaonia e le Komiti o Amio Taualoa a le Atunuʻu o Tokyo Metropolitan.
I suʻega taʻitasi, a oʻo i le taimi na taunuu mai ai, na tuʻuina atu i fafo le maso i se vaega faʻataʻitaʻiga (Pule, n = 5) poʻo se kulupu faʻataʻitaʻi (Runner, n = 5). A o faagasolo le vaiaso muamua, sa i ai uma ni musele i totonu o pusa palasitika paina i vaega (5 mice / cage) mo le uluai faʻataʻatitia. O le taimi lea, na faʻafeiloaʻi ai mice feʻaveaʻi i totonu o se fale faʻapipiʻi ua saunia i se uila lele (ENV-046, Med Associate Inc., Georgia, VT, USA). Talu ai ona o le vavalalata faʻasalalauga e masani ona taofia le faʻaaogaina o le neurogenesis i le hippocampus [39], O fale o le taamilosaga na faia o se vaega (5 mice / cage) mo se 4 faaopoopo vaiaso. O le numera o suiga o uili na tusia i taeao taitasi ma le mamafa o le tino (g) na fuaina i vaiaso taitasi.
2: Faʻailoa 1. Suʻega faʻapitoa mo suʻesuʻega o le FosB / ΔFosB expression ma le neurogenesis o le hippocampal
2.1: Faʻasalaga ma le gaosiga o le tino
O le taeao (0900-1100) i le maeʻa ai o le aso mulimuli o le vaitau o le taʻavale, o le isumu na matua faʻamaʻiina ma le sodium pentobarbital ma faʻafefeteina i le saline malulu. O le faiʻai na vave ona faʻaaogaina ma faʻapipiʻi i le 4% paraformaldehyde i le 0.1 M phosphate masini paʻu (PBS, pH 7.4) i le pō. O le faiʻai na tagi i le 30% sucrose i le PBS ma na malulu seia oʻo ina toe gaosia. O vaega o le mafaufau o le coronal (40 μm) o se hemisphere na maua e ala i le faʻaaogaina o le microtome malulu ma aoina i le PBS ma le 0.01% sodium azide.
2.2: Immunohistochemistry
O le tasi-i-le ono vaega o vaega na filifilia i se tasi taimi mo le FosB / ΔFosB faʻamaʻiina. Sa faʻaaogaina se laina lata ane mo le faʻailogaina o le doublecortin (DCX), o se faailoga o le faʻaogaina o neu ua faʻamaonia mo le suʻesuʻeina o le neurogenesis [40,41]. I le maeʻa ai o le faʻamalosi o le peroxyidase faʻatasi ma le 1% H2O2 i le PBS, o vaega e leai se totogi e faʻapipiʻiina i le fofoina o faʻasili e aofia ai le 10% suauu masani masani i PBS mo 2 h. I le maea ai o solo i totonu o le PBS, o vaega na faʻaaogaina i le rabbit polyclonal pan-FosB antibody (1: 1000, sc-48, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) faʻavae i PBS ma le 0.5% Triton X-100 ma le 0.5% BSA (PBST -BSA) mo 24 h i 4 ° C. O isi vaega o vaega na faʻafefiloi i le polyclonal Anti-DCX antibody (1: 500, sc-8066, Santa Cruz) i le PBST-BSA mo le 48 i 4 ° C. O vaega na faʻaopopoina i se vailaau faʻasaina ole biotinylated talafeagai (IgG anti-rabbit, 1: 1000, AP182B, IgG anti-'oti, 1: 1000, AP180B, faʻamaʻi faʻamaʻi mai EMD Millipore, Billerica, MA, USA) ile PBST-BSA mo 2 h i le vevela vevela. O vaega na togafitia i le avidin-biotin-peroxidase complex (Vectastain ABC peroxidase kit, Vector Laboratories Inc, Burlingame, CA, USA) mo 90 min mulimuli i faatonuga a le kamupanī. Na iu lava ina vaai faalemafaufau i le antigens i le 0.02% 3,3-diaminobenzidine (DAB) i le 0.1 M Tris-HCl (pH 7.6) e aofia ai le 0.01% H2O2. Mo le FosB / ΔFosB faʻamaʻiina, o le tali na faʻateteleina i le nickel ammonium sulfate. Mo le taofiga o DCX, na puipuia ai le nuclei o le cell ma le nissl. O vaega na faʻapipiʻiina i luga o gelatin-faʻapipiʻi faʻasolosolo ma faʻamau ai.
2.3: Faʻasoaina o le FosB / ΔFosB immunoreactivity e faʻaaoga ai le faʻasologa o ata
O le anticorphose pan-FosB na faʻaaogaina i lenei suʻesuʻega na faʻatūina e faasaga i le lotoifale o loʻo faʻasoa e le FosB ma le ΔFosB N-terminal, ina ia lē mafai ona faʻasesega i le va o le lua. O le mea lea, o fausaga faʻamausali na faʻamatalaina o le FosB / ΔFosB immunoreactive (FosB / ΔFosB-ir) nuclei. Mo se faʻatusatusaga tauaso tauaso, na faʻatalanoaina ata vitio aʻo leʻi suʻeina. O le talo i luga ole faiʻai [42] sa faʻaaogaina e faʻamalamalama ai le nofoaga o loʻo i lalo o mea e fiafia i ai (ROIs): paluga o le granule (GCL) o le DG (3 vaega), o le pyramidal cell layer o vaega CA1 (3) ma CA3 (2-3) i le hippocampus (tapuni i -2.2 mm mai le bregma); Vaega o le DG (2), CA1 (2 sections), ma CA3 (2 vaega) i le himpocampus i totonu o le fale (tapunia -3.4 mm mai le bregma) (Ata 4, taumatau). O vaega o paluga o loʻo i ai vaega uma o le hippocampus, ma o le vaega faʻavae na faʻatulagaina. I le DG, supotheramidal (DGsp) ma le infrapramidal (DGip) o fuataga na suʻesuʻeina eseese. (2-3 vaega, tapunia i -0.6 mm mai le bregma), cortex vis (2 sections, tapunia i -3 mm mai le vaega o le 0.6-3, kesi i -2.9 mm mai le bregma), Bregma), le cortex auditory (vaega 3, tapuni i -2.9 mm mai le bregma), ma le pusa olfactory (3 vaega, tapunia i + 4.3 mm mai le bregma) sa iloiloina foi (Ata 6, taumatau).
O ata tifaga (2070 × 1548 pixels) o ROI na aveina i le faaaogaina o se microscope tioata (BX-51, Olympus, Tokyo, Iapani) faʻapipiʻiina i se kamera DCD (DP-73, Olympus) ma le polokalama faʻataʻitaʻi (cellSens, Olympus). le faʻatautaiga o tioata faʻamoemoeina o le 10 × mo ROI Sipocampal ma 4 × mo ROOT Cortical. Ina ia mafai ai ona iloa le malosi o le FosB / ΔFosB immunoreactivity (Ata 1D-G), e faʻaaoga ai le tele o vaega muamua, o faʻatautaia uma o ata (faʻamalamalamaina, tele o le taofi o le fanua, taimi faʻaalia, ma paleni paʻepaʻe) ma laasaga o vaega taʻitasi o le RGB vaega na faʻamamaina mo siata o le hippocampal ma le Cortical ROIs. O le auʻiliʻiliga lenei na faia i lalo ole tulaga faʻatonutonu (1). O ROI na filifilia e se polygon ua faʻavasegaina (Ata 1A, B) (2). Na maua le ata, lea na liua ai le FosB / ΔFosB-ir nuclei i se lanu mumu (Ata 1C-G) (3). O le% ROI na faʻapipiʻoti faʻapitoa e pei o:% ROI = (vaega liliu (i le lanu mumu) / vaega ROI uma) × 100.
Ina ia faʻamaonia le suʻesuʻeina o lenei faʻataʻitaʻiga, o filifili o 20 na filifilia mai le va o isi vaega o faiʻai ma faʻalapotopotoga eseese eseese. I le faaopoopo atu i le faʻatusatusaga o le faʻasologa o foliga, o le numera o FosB / ΔFosB-ir nuclei i totonu o itumalo filifilia na faitauina ma le lima ma le tele o FosB / ΔFosB-ir nuclei na maua e ala i le vaevaeina o le numera o le FosB / ΔFosB-ir nuclei e fuaina vaega (mm2).
2.4: Faʻatusatusaga o le DCX-ir o le tino i le dentate gyrus
O fua DCX-ir i le DG o Runner mice e tele ma e leʻo, e faigata ai ona faitau saʻo le numera o DCX-ir amata e faʻaaoga ai se microscope opio. Ae ui i lea, i se suʻesuʻega talu ai, o suʻesuʻega a Sholl mo le suʻesuʻeina o morphology na faʻaalia ai o DCX-ir neuron, i le averesi, se tasi o le dendrite pe a fuaina i totonu o le 40 μm o le soma [43]. O le mea lea, o atinaʻe muamua na atiaeina ina ia faʻamautu ai le faʻamautuina o le DCX-ir neurons.
- (1) O se ata o le GCL na faʻatulagaina i luga o se komepiuta e faʻaaogaina ai masini faʻatautaia ma se 40 × tioata faamoemoe (2). I luga o le ata ola, o le laina laina (150 ± 0.1 μm) na tusia i le ogatotonu o le GCL (Ata 2) (3). Suʻeina o le loloto, o le numera o taimi na faʻataʻatia ai le DCX-ir dendrites (4). O ROI (DGsp dorsal, dDGsp; DGip dorsal, dDGip, DGsp lautele, vDGsp; DGip, vDGip), na fetaui ma itulagi na suʻesuʻeina ai le 5 FosB / ΔFosB immunoreactivity. I ROI uma, o laina laina 2-3 na tosina i vaega taitasi ma o le fuainumera o laasaga na ave i luga o vaega 2-3 i le kiore. Ona o le mafiafia o le GCL e tusa ma le 60-80 μm, o le fuainumera o laasaga e tatau ona atagia ai le numera o DCX-ir neurons i totonu o le vaega faasaina ua iloiloina.
3. Faʻamatalaga 2. Faʻamatalaga o le FosB / ΔFosB faʻasologa o loʻo faʻaosoina e ala ile uila
3.1: Faʻasalaga ma le gaosiga o le tino
O le faʻaopoopoga o kulupu na faʻatinoina i luga i le Faʻataʻitaʻiga 1. I le maeʻa o 4 vaiaso o faʻataʻitaʻiga, o le isumu na faʻafefeteina i le saline malulu i lalo o le loloto o le gasegase. O le hippocampus sa vave ona sasaa ese ma faamaa i le aisa malosi, ma teuina i -80 ° C. O le hippocampi o kiore taitasi na faʻatusatusa i le pa puipui RIPA (150 mM NaCl, 25 mM Tris-HCl pH 7.6, 1% NP-40, 1% sodium deoxycholate, 0.1% SDS, #8990, Thermo Scientific, IL, USA) inhibitors (cOmplete Mini, Roche, Manheim, Siamani). O le lysates na centrifuga mo le 15 min i le 5000 rpm i le 4 ° C ma na aoina ai supernatants. Na faʻatusatusa faʻamaumauga o le Protein i le kita BCA Protein Assay kit (#23227, Thermo Scientific, IL, ISA).
3.2: Faʻasolo i sisifo
O le tutusa o polotini (30 μg / lane) na filifilia i luga o le 10% polyacrylamide gel, ona siitia atu lea i le membrane PVDF (Immun-Blot, 0.2 μm, Bio-Rad, MD, USA). O faʻamaumauga le saʻo na puipuia e ala i le muaʻi faʻapipiʻiina o le membrane mo le 1 h i le TBST (0.5 M NaCl, 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.1% Tween-20) faʻatasi ma le 3% BSA. O le membrane na afaina i le pan-FosB antibody (1: 1000) lea na faʻaaogaina i luga mo immunohistochemistry, faʻamavae i le TBST o loʻo aofia ai le 3% BSA. I le fufulu solo o le TBST, o le membrane na faʻaaogaina i le HRP-anti-rabbit IgG antibody (1: 5000 i TBST, NA934, GE Healthcare, Buckinghamshire, UK) mo 1 h i le vevela o le potu. Ina ua maeʻa ona fufulu faatasi ma le TBST, na faʻaalia foliga o le protein i le faʻapipiʻiina o le Chemiluminescence Faʻalauteleina (Western Lightning Plus-ECL, PerkinElmer, MA, Amerika) ma puʻeina faʻaaogaina le Image Quant LAS 4000 mini (GE Healthcare, Buckinghamshire, UK). Na faʻasalaina le membrane i le anti-glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) antibody (#2275, 1: 5000 i le TBS-T, Trevigen, MD, USA) o se faʻatonuina o le faʻaaoga. O le maualuga o le fua o le polotini na faʻamalosia e faʻaaoga ai le Ata-I ma faʻapitoa i le maualuga o le GAPDH.
4: Suʻesuʻega Faʻamaumauga
Suʻega o le mamafa o le tino o le tino na suʻeina e ala i auala e lua faʻaaogā ANOVA (vaega × taimi). O se suʻega e leʻi totogiina na faʻaaogaina e fuafua ai feeseeseaiga fuainumera i le va o vaega (Pule ma le Runner). Na faʻaaogaina le faʻamalamalamaina o le fesuiaiga a Pearson e faʻamaonia ai le iloiloga o le immunoreactivity FosB / ΔFosB (faʻataʻitaʻiga ma le faʻataʻitaʻiina o foliga), ma suʻesuʻe le fesoʻotaʻiga i le va o le maualuga o le FosB / ΔFosB ma le numera DCX crossings i le DG. O faʻamatalaga na tuʻuina mai e pei o le ± SEM. O le laasaga mo le taua o le fuainumera na faatulagaina i P <0.05.
i'uga
1: O le mamafa o le tino ma le taamilosaga i le Faʻailoga 1 ma le 2
O suiga i le mamafa o le tino o le Control ma Runner mice i le Faʻataʻitaʻiga 1 ma le 2 o loʻo faʻaputu ma faʻaalia i Ata 3. Auala e lua-auala na faʻaalia e ANOVA se fegalegaleaiga taua (vaega × taimi, F(4, 72) = 13.6, P <0.001) ma aʻafiaga autu o kulupu F(1, 18) = 6.07, P <0.05), o loʻo faʻailoa mai ai le mamafa maualalo o le mamafa o le tino i tamoe Isumu. O le mamao tamoe i le pa o loʻo faʻaalia i Laulau 1. E ui lava o le mamao o le taamilosaga o kulimi taitasi e le mautonu ona o le i ai faatasi o maso, o faʻamatalaga masani na faʻamaonia ai o mice uma e masani ona faia le uila e tamoe. Ole umi o le Runner i le Faʻataʻitaʻiga 2 na umi atu le umi nai lo i latou i le Faʻataʻitaʻiga 1, ae o le mamao o le mamao (m / day / cage) e tumau i taimi uma o suʻega.
2: Aloaia o le FosB / ΔFosB faʻasologa o le immunoreactivity e faʻaaoga ai le faʻatautaiga o foliga
Sa i ai se faʻamaoniaga taua i le va o FosB / ΔFosB-ir vaega na maua e ala i foliga ma le maualuga o le FosB / ΔFosB-ir nuclei e maua mai i le faitauina o le tusi (r = 0.941, P <00001, Ata 4).
3: FosB / ΔFosB immunoreactivity i le hippocampus
O ata o sui o le FosB / ΔFosB faʻamalolo i le pito i tua ma le pito i lalo o le hippocampal subfields na faʻaalia i Ata 5. I iloiloga uma a le ROI, FosB / ΔFosB le faʻamalosia o le tino i le 'Ata 5, taumatau) na sili atu le maualuga nai lo le mea i totonu o Mice Pule (Ata 5, ogatotonu). I mice Runner, faʻataʻitaʻiga faʻatusatusa na faʻaalia ai le faateleina o le faateleina o le FosB / ΔFosB-ir i le pito i tua (DGsp: P <0.01; DGip: P <0.01; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05) ma le pito i lalo hippocampal lalo (DGsp: P <0.01; DGip: P <0.05; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05; Ata 6).
4: FosB / ΔFosB immunoreactivity i le cortex
O faʻataʻitaʻiga o le FOSB / ΔFosB faʻamaonia i totonu o ROI faʻamasino o loʻo faʻaalia i Ata 7. Ole auiliiliga ole auiliiliga na faʻaalia ai suiga faʻalagolago i le faʻalagolago i le fosB / ΔFosB immunoreactivity with long-term running (Ata 8). I mice Runner, o le FosB / ΔFosB-ir e sili atu le maualuga i le uila afi (P <0.05) ma le faʻailoga paelo somatosensory (P <0.05), ae le o totonu o le vaʻaiga vaaia (P = 0.662) poʻo le faʻavao faʻamamaluina (P = 0.523). I le cortex auditory, o le FosB / ΔFosB-ir e taulaʻi atu i se faʻaopoopoga o mice Runner (P = 0.105).
5: Neurogenesis
O ata o le sui o le DCX o loʻo faʻamaoniaina Ata 9. I totonu o le hippocampus, o le DCX immunoreactivity i sourner mice (Ata 9, taumatau) sa maualuga le maualuga pe a faʻatusatusa atu i laʻau masi (Ata 9, taumatau). Pe a faatusatusa i le hippocampus i tua, o le DCF i le himpocampus e sili atu ona vaivai ile Pule ma Runner souris. I mice Runner, o le fuainumera o laasaga na maualuga tele i le dDGsp (P <0.01) ma dDGip (P <0.01; Ata 10). I le himpocampus i le matafaga, o le aofaʻi o le sopoia o mice Running sa masani ona faateleina, ae leai ni eseesega eseese i le va o vaega (vDGsp, P = 0.101; vDGip, P = 0.257; Ata 10).
6: Faʻaleleia i le va o le FosB / ΔFosB ma le neurogenesis
Na faia se faʻasalalauga faʻamaonia i le va o le FosB / ΔFosB-ir ma le numera o crossx crossings (Ata 11). Talu ai o faʻamaumauga taʻitasi (faʻataʻitaʻiga, DGsp o loʻo i totonu o le Control souris) e naʻo 5 paʻu e aofia ai, o le suʻesuʻega muamua sa faia i vaega uma o le 40. I le maofa, sa i ai se tuufaatasiga taua i le va o le FosB / ΔFosB-ir ma le numera o crossX crossings (r = 0.885, P <0.0001). I se faʻaopopoga, o se faʻamaoniga taua na faʻailoa mai foʻi pe a o le Dorsal DG (r = 0.762, P <0.05) ma le veni o le DG (r = 0.816, P <0.01) na auʻiliʻili taʻitasi.
7: Faʻamatalaga o le FosB / ΔFosB faʻavasegaina faʻaosoina e ala i le faʻaauau le umi
Ma le mea mulimuli, ia iloa le uiga o le fosB gaosia o gaʻo i totonu o le hippocampus i le tali atu i le umi o le taimi, o le hippocampi mai se isi vaega o miole na gasegase i sisifo e ala i le faʻaaogaina o le anticorps pan-FosB tutusa. Vaega tele o le 35-37 kDa, e fai ma sui o suiga o le ΔFosB [44], na matua faateleina i le Runner versus Control souris (Ata 12, P <0.01). I leisi itu, o le 48 kDa FosB isoform na le mafai ona mauaina i soʻo se vaega. O le isi fusipaʻu e tau le iloa atu i luga atu o le 25 kDa e foliga mai o le of2ΔFosB isoform (27 kDa). E i ai isi fusi e lua, i luga atu o le 50 kDa ma le 37 kDa, lea na foliga mai ona o le le faʻamaonia faʻapitoa. A faʻatulagaina, e leai ni eseesega na maua i nei non-ΔFosB fusi i le va o kulupu (faʻamatalaga le faʻaalia).
Talanoaga
I le aotelega, o le suʻesuʻega nei na muamua faia ai se suʻesuʻega faʻamausalisi i le suʻesuʻeina o le 1) pe o le uumi taimi ole taimi ole taimi ole taimi ole taimi ole taimi e faʻaaogaina ai le FosB / ΔFosB expression i le hippocampus; ma le 2) tusa lava pe iai se tali faʻapitonuʻu i lona itu o le dorso-ventral.
E fa vaiaso o le leoleoina o le uili o le a osofaʻia ai se faʻaopoopoga taua i le FosB / ΔFosB immunoreactivity i itulagi uma o le hippocampal (e pei o le DG, CA1, ma CA3 subfields o vaega uma ma vaega o le hippocampus). Na matou faʻamaonia o le 35-37kDa ΔFosB isoform o le autu fosB oloa gaosia e maua i le tali atu i le taimi umi. O nei taunuuga ua manino le lagolagoina o le manatu e faapea, o faamalositino faifai pea o se mea e ono tupu mo le atinaʻe o le ΔFosB i le hippocampus atoa, ma o lona faaulufaleina atonu o se masini mole mole mole masini lea e aafia ai ituaiga galuega eseese o le hippocampus ma / poo le mafaufau.
1: Faʻamanuiaga ma tapulaʻa o le faʻasoaina o le FosB / ΔFosB immunoreactivity faʻaaogaina le faʻatautaiga o ata
O se metotia o le tapunia o ata, lea na masani ona faaaogaina i suʻesuʻega o le immunohisto Chemicals mo le faitauina o numera o cellular targets ma le iloiloga o le toto, na faaaogaina i lenei suʻesuʻega mo le faatulagaina o le FosB / ΔFosB immunoreactivity [15,45,46]. O se tuufaatasiga iloga i le va o le maualuga o le FosB / ΔFosB immunoreactivity na fuafuaina e ala ile ata ma le faitauina o tusi faitauga na faaalia (Ata 4). Ae ui i lea, talu ai o le lapopoʻa ma le fesiliaʻi na taofia ai le faitauina o le numera o le FosB / ΔFosB-ir nuclei i vaega maualuluga tele, o le faʻamaonia faʻatasi na o lona uiga o le sao atoatoa o le faʻataʻitaʻiina o auala auala pe a fai o le FosB / ΔFosB-ir o vaega e fai ma <~ 40% o le aofaʻi o ROI eria O le mea lea, e manaʻomia le faʻauiga totoʻa mo vaega FosB / ΔFosB-ir> 40% o le aofaʻi o ROI eria.
Aemaise lava, i le DG o Runner mice (Ata 4), O le FosB / ΔFosB faʻaaliga sa matua faatosinaina e le uila o tamomoʻe ma o le tele o le FosB / ΔFosB-ir nuclei na lofia. I nei eria, o le faateleina o le faʻaaogaina o le FosB / ΔFosB faʻaleaogaina ai le le amanaʻiaina o le maualuga o faʻaaliga, e tusa lava po o le a le metotia metotia na faʻaaogaina (faʻasologa o ata poʻo le faitau tusi). E ui i lea, e ui lava i tulaga lamatia o le le manatu faatauvaa, e taua le maitauina o le suʻesuʻega i le taimi nei na faʻaalia ai le faateleina o le faateleina o le FosB / ΔFosB-ir i le DG o Runice souris. O lenei mea e taʻu mai ai o faʻagata faʻagata e le faʻamaonia ai a tatou sailiga. Nai lo lena, o le le manatu faatauvaa e mafai ona faateleina ai le mautinoa o le sailiiliga o le umi o le taimi na faʻaleleia ai le FosB / ΔFosB immunoreactivity i le hippocampus.
2: Faʻavaeina o le Ava o le ΔFosB i totonu o le hippocampus e ala i le umi o le taʻavale
O le hippocampus ei ai fuamoa faʻasolosolo ma galulue i luga o lona itu umi umi [26], o le mea lea mo le suʻesuʻeina nei o suʻesuʻega FosB / ΔFosB faʻatasi i vaega i tua ma vaega o le hippocampus na vaʻaia ese. O faʻamatalaga na faʻamaonia ai o le umi o le taʻavale masani na faʻateleina ai le FosB / ΔFosB expression i totonu o ROI hippocampal uma ua fuaina. O lenei togiga o le FosB / ΔFosB immunoreactivity atonu o le a le mafua ona mafua mai i suiga masani o metabolic e fesootaʻi atu i le umi o le taʻavale. E ui i lea, e taua le maitauina o loʻo iai le faʻalauteleina o le fosB / ΔFosB i le faʻapipiʻiina ole tino. O lenei taunuʻuga e lagolagoina e suʻesuʻega talu ai nei o loʻo faʻaalia ai o se gasegase o le taʻavale o loʻo faʻateleina ai le faʻalauteleina o le toto i le hippocampus, ae le o le pusa faʻapipiʻi [8]. Ma le isi, Rhodes et al. (2003) na faʻaalia ai o 7 aso o le wheel faʻalealoaina o loʻo faʻaaogaina i le C-Fos expression i le DG ma le CA2 / 3 o le hippocampus (CA1 e le fuaina) ma i le cortex sensory, ae le o le cortex vaaia [47]. I le tuufaatasia, o nei suʻesuʻega o loʻo fautua mai ai o le tuʻufaʻatasia o le FosB / ΔFosB expression i le hippocampus e le o se taunuuga le maoti o le taimi umi. E malie, Hawley et al. talu ai nei na lipotia mai e le atuatuvale le mautonu le faateleina o le FosB / ΔFosB i le pito i tua, ae le o le falemaʻi, DG o le ratopopampus [48]. I le suʻesuʻega atili, o mamanu faʻavae o le FosB / ΔFosB faʻatoʻaga e pei o faʻataʻitaʻiga e ala ile faamalositino poʻo le mafatia o le a maua ai faʻamatalaga faifaipea i aʻafiaga faʻalagolago i le hippocampus.
O le faʻamuamua o le pan-FosB o loʻo faʻaogaina i lenei suʻesuʻega ua iloa e iloa lelei uma lava foliga o FosB proteins. I luga o le iloiloga i le itu i sisifo, na matou iloa ai na o le siama na faateleina i le hippocampus ina ua maeʻa le taimi umi, o fesuiaiga ua suia o le ΔFosB (35-37 kDa), na o le pau o le iso i totonu o Fos protein proteins [11]. O lenei sailiiliga e tusa ai ma le galuega talu ai e faʻaaoga ai le alo o le pan-Fos e faʻaalia ai o 35-37 kDa ΔFosB o le fatu sili o le Fos Family protein i le muaʻi cortex e ala i taimi faigata [44]. O le mea lea, o le faʻaopoopoga o le FOLF / ΔFosB immuno-activation o loʻo faʻaosoina iinei e ala i le umi o le taamilosaga e foliga mai e atagia ai le maualuga o le ΔFosB.
E itiiti se mea e iloa e uiga i aʻafiaga-faʻapitoa o faʻamalositino i vaega o meaola ma faʻavae o le hippocampus. Ae ui i lea, o le tele o suʻesuʻega faʻataʻitaʻiga ua faʻaalia ai se gafatia sili mo le faʻatinoina o le faʻaleleia o galuega i totonu o galuega a le hipampampal. Ua faʻaalia le faamalositino e faʻaleleia ai aʻoaʻoga faʻapitoa ma mafaufauga [34-38] ma togafitiga faʻapitoa ma faʻalautelega e faʻalagolago lava i le hippocampus i fafo [27,28]. I le eseesega, o le faamalositino ua lauiloa foi e faʻaaogaina ai le popole ma le faʻamalosia o meatotino [24,25,38] ma o nei tali faʻalagona e sili ona faʻatulafonoina e le himpocampus o le vaʻaia [29,30]. O le tuʻufaʻatasia o le ΔFosB e ala i le umi o le lumanaʻi o loʻo vaaia i lenei suʻesuʻega o loʻo taʻu mai ai o nisi ituaiga o suiga e le mafai ona faʻaaogaina na tutupu i le hippocampus atoa. O le a faʻamatalaina pe aisea e mafai ai e le faamalositino ona aafia uma le galuega o le hippocampus i tua ma faʻalauiloa.
3: Suʻesuʻeina faʻapitoa o le neurogenesis faʻamalosi tino
O le vavaeeseina o le neurogenesis i le va o le hipatimampus i tua ma le vavalalata ua maua foi le faateleina o le [49]. I lenei suʻesuʻega, faʻaaogaina ai uiga o le DCX-ir o le tino pepe [43], matou te faitauina le numera o fesoʻotaʻiga i le va o DCX-ir dendrites ma se laina laina na tusia i le ogatotonu o le GCL. Ole fua ole fua ole DCX-ir neurons i le DG, ae na mafai ai e le faʻalapotopotoga faʻapitoa le faʻatulagaga talafeagai mo le faʻatinoina o se faʻasologa faʻasalalauga i faʻamatalaga faʻamatalaga FosB / ΔFosB (silasila i lalo). I le maeʻa ai o le taimi umi, o le numera o DCX-ir neurons na faʻalauteleina i le pito i tua, ae le o le falemaʻi, DG. O lenei mea e taʻu mai ai o le faamalositino e mafai ona faaosofia ai le neurogenesis sili atu le mataʻutia i totonu o le fale e faʻatusatusa atu i le vaega o le DG. Ae ui i lea, o suʻesuʻega talu ai na lipotia ai feteenaiga taunuuga lea o le uila e faʻateleina ai le neurogenesis i totonu o le DG i fafo ma le lautele [50,51]. I le suʻesuʻega i le taimi nei, o le numera o DCX-ir crossings i le DG faʻalauiloa na faʻatupulaia i le faʻatinoga, e ui lava o le laʻititi laʻititi (5 mice per group) atonu na faʻatapulaʻaina le mafai ona iloa se eseesega taua tele i le va o vaega. O le mea lea, e foliga mai e le i vave ona taofiofia le ono mafai e le tilivavale o le vaʻavaʻavale ona faʻaleleia le neurogenesis o le hippocampal. O nisi faʻamatalaga auʻiliʻili e manaʻomia e malamalama ai i le faʻapitoa o le vailaau o le neurogenesis faʻataʻitaʻi e faʻatatau i le faagasologa o le telefoni (faʻateleina o le cell, vavalalata, femalagaiga, ma le ola).
4: Faʻamaumauga faʻatino o le faʻamalosiina o le ΔFosB mo le faʻatonutonuina o le palasitika o le hippocampal
I le mea mulimuli, o le laasaga muamua i le iloaina o le aoga o aafiaga o le faatinoga o le ΔFosB induction i le hippocampus, na matou suesueina ai le sootaga o le FosB / ΔFosB immunoreactivity i DCX-ir crossings i le DG i fafo ma le lautele ma maua ai se fesootaiga taua ma lelei i le va lua fesuiaiga. E ui lava o mea tonu e faʻaaogaina ai e le ΔFOSB le neurogenesis faʻamalosi tino e le mautinoa, o se suʻesuʻega talu ai nei na faʻaalia ai fosB-null mice, lea e leai FosB, ΔFosB, ma Δ2ΔFosB (uma fosB oloa), na faʻaalia ai le paʻu i le neurogenesis hipopampal Basal, e aofia ai le faʻaitiitia o le faʻaopoopoga o siama o le augasegase o le neuronal, faʻateleina le femalagaiga ectopic o pepe fou faatoa fananau mai, ma fausaga le lelei o le DG [20]. Ae ui i lea, o nei suiga e lei matauina i totonu fosB(d / d) muse, e leai se FosB, ae le o le ΔFosB / Δ2ΔFosB. Fiafia, i totonu fosB-null mice, faʻamatalaga o ni aʻafiaga e aʻafia ai le neurogenesis, e aofia ai Vgf (VGF o le tuputupu aʻe o le nerve growth factor) ma Gal (Galanin prepropeptide) na lalo ifo [20]. Talu ai o le VGF ma le GAL o ni molimiti failautusi, o se tasi o fautuaga lea o loʻo i ai le folafolaga e manatu e mafai e le neurons ona faʻaalia le ΔFOSB e mafai ona faʻatonutonu le neurogenesis e ala i le autocrine / paracrine activity [20].
E le gata i lea, e tatau ona maitauina o le itulagi lea e osofaʻia ai le ΔFOSB e ala i le lele faʻatasi ma le itulagi o loʻo maualuga ai le neurogenic. O lenei sailiga e taʻu mai ai o le neurogenesis e mafua ai le faagaioia o le itiiti ifo lea o le galuega-faalagolago. O le faʻafouina mai o le Neuronal o le ki lea i le tausia ma le faʻaleleia o le faʻatonuina o le tino o mea faigaluega [9], e ala i auala e aofia ai le faʻaalia ma le tuʻuina atu o le faiʻai-mafuaʻaga aʻafiaga o le neurotrophy (BDNF) [52,53], o le aʻafia o le siama o le insulin-pei o le tuputupu aʻe-1 (IGF-1) e ala i le puipui o le toto-faiʻai [54,55], taofiga o apoptosis [56], ma le faʻatonutonuina o le mitochondrial motility [57]. O le mea lea, o le suʻesuʻega o loʻo i ai nei o loʻo taʻu mai ai o faʻamalositino tumau na faʻaalia ai le toe faʻafouina mai o le neuronal, faʻamaonia i le faʻateleina o le faaupuga o le ΔFosB, lea e fesoasoani i le faʻaleleia o le eletise o le hippocampal, atonu e ala mai i nei auala e tele o loʻo faʻamatalaina i luga.
O le suʻesuʻega nei ua naʻo le suʻesuʻeina o le neurogenesis faʻamalosi-tino ma le fesoʻotaʻiga ma le FosB / ΔFosB i le DG. Ae ui i lea, o le FosB / ΔFosB immunoreactivity na aʻafia foi i le CA1 ma CA3 subfields. E ui o nisi suʻesuʻega e manaʻomia ina ia maua atili ai le malamalamaaga i le faatinoga o le faatinoga o le faatinoga o le ΔFosB i totonu o nei subfields, o lomiga talu ai ua ofoina atu ai se avanoa mautinoa. Guan et al. (2011) na faʻaalia ai o le faʻamavaega patino o le 5 (Cdk5) kinati-toto i le cyclin-toto i le CA1 poʻo le CA3 pyramidal neurons na faʻaleagaina ai le faʻamalosia poʻo le toe maua,58]. O le mea e malie ai, o le Cdk5 o le laʻasaga pito i lalo o le ΔFosB [59] ma e aʻafia ai i le faʻatonutonuina o le faʻatautaia o le palota [60]. O le mea lea, o le faʻataʻitaʻiga o le ΔFosB e mafai ona aʻafia i le faʻatonutonuina o le faʻatautaia faʻasilika e ala i le Cdk5 faʻamalosia i le CA1 ma CA3 subfields.
iʻuga
E ui lava o le tele o faamalositino na iloa e faatosina ai le vave vave ona maua mai i le hippocampus, o le suʻesuʻega i le taimi nei e maua ai le faʻamaoniga muamua o faʻamalositino tumau-tumau e aʻafia ai le ΔFosB expression i le hippocampus atoa. To le tuʻufaʻatasia o le ΔFosB e lagolagoina ai le malamalamaaga o loʻo i ai nei o se faʻamalositino e le mafai ona faʻaogaina faʻamalosi e mafai ona faʻaleleia le tele o galuega a le hippocampal. Faatasi ai ma le taua tele i le va o le FosB / ΔFosB expression ma le neurogenesis, o nei faamatalaga e faaosofia ai ma taʻu mai ai se manaoga mo nisi suʻesuʻega o le faasoaina o le matafaioi a le ΔFosB i le faasalalauina o aafiaga o faamalositino i galuega o le hippocampal, e aofia ai le neurogenesis.
Faiga Faʻavae
mau faasino