Int J Biol Sci. 2015; 11 (10): 1150-1159.
Botuar në internet 2015 gusht 1. doi: 10.7150 / ijbs.12044
PMCID: PMC4551751
Jin Young Kim,1 Jong-Ho Lee,1,✉ Doyun Kim,1,2 Soung-Min Kim,1 JaeHyung Koo,2 Jeong Won Jahng1,✉
Abstrakt
Ky studim shqyrtoi efektet e ushqimit shumë të shijshëm gjatë adoleshencës në shqetësimet psiko-emocionale dhe nervore të shkaktuara nga përvoja e stresit të hershëm të jetës në minjtë femra. Pups femra Sprague-Dawley u ndanë nga diga për 3 h gjatë dy javëve të para të lindjes (MS) ose u larguan pa u ndezur (NH). Gjysma e femrave MS kanë marrë qasje të lirë në cookies me çokollatë përveç ad libitum chow nga dita postnatal 28. Pups ishin nënshtruar testeve të sjelljes gjatë moshës së re të rritur. Analiza e përgjigjeve të plazmës së kortikosteronit ndaj stresit akut, ΔFosB dhe nivelit të faktorit neurotrofik të trurit (BDNF) në rajonet e trurit. Marrja totale e kalorive dhe shtimi i peshës trupore gjatë gjithë periudhës eksperimentale nuk ndryshojnë midis grupeve eksperimentale. Qasja në cookie gjatë adoleshencës dhe të rinjve përmirësoi sjelljet e ngjashme me ankthin / depresionin nga përvoja e MS. Shprehja ΔFosB u zvogëlua, por BDNF u rrit në nucleus accumbens të femrave MS, dhe shprehja ΔFosB u normalizua dhe BDNF u rrit më tej pas hyrjes së cookie. Përgjigja e kortikosteronit ndaj stresit akut ishte e shfrenuar nga eksperienca e MS dhe qasja në cookie nuk e përmirësoi atë. Rezultatet sugjerojnë se qasja e cookie gjatë adoleshencës përmirëson çrregullimet psiko-emocionale të femrave MS, dhe shprehja ΔFosB dhe / ose BDNF në nucleus accumbens mund të luajë një rol në mekanizmat e saj nervor bazë.
Prezantimi
Ekziston një numër gjithnjë në rritje i provave që manipulimet identike me diete mund të kenë përgjigje divergjente midis gjinive. Në nivelin molekular, është demonstruar se ka përgjigje seksualisht dimorfike të transkriptomit hippokampal midis minjve dhe meshkujve të ekspozuar ndaj të njëjtit dietë 1. Në nivelin metabolik / neuroendokrin, rats femra shfaqin përgjigje të ndryshme neuropeptide hipotalamike në një dietë të zgjatur të yndyrës 2 dhe kapacitet më të lartë sesa meshkujt për të kompensuar një fluks të lartë të lipideve 3. Femrat e rritura afatshkurtra të rritura me yndyrë ushqyese kanë zvogëluar nivelet e mRNA-së të receptorit glukokortikoid në hipokampus dhe boshti i tyre hypothalamic-hipofizë-veshkave (HPA) reagon ndryshe nga meshkujt në një stres të mëvonshëm 4, 5. Në nivelin e sjelljes, ekspozimi afatshkurtër i rats të rriturve në dietën e yndyrë zvogëlon ankthin dhe rrit eksplorimin në meshkuj, ndërkohë që ka efekt të kundërt në femra 6. Puberteti është një periudhë e rëndësishme zhvillimore e karakterizuar nga rritja e plasticitetit endokrin dhe ndryshimet në reagimin ndaj stresit 7. Studimet kanë sugjeruar që dieta e lartë e yndyrës post-divorc mund të modifikojë aktivitetin bas të HPA-së dhe përgjigjet endokrinore ndaj një stres akut duke ndikuar si stresin dhe ndërmjetësuesit metabolikë në një mënyrë seksualisht dimorfike 8, 9. Ne kemi zbuluar më parë se konsumi i zgjatur i ushqimit shumë i shijshëm gjatë adoleshencës rrit sjelljet e ankthit dhe depresionit në rats meshkuj, por jo në meshkujs 10. Konsumi i zgjatur i dietës së kafeterisë me yndyrë të lartë (përmbajtja e përmbajtjes së yndyrës së 32) ka përmirësuar vështirësitë e sjelljes si në meshkuj dhe femra, të cilat i nënshtrohen një protokolli të ndarjes së nënës (MS) të përdorur në këtë studim, me efekte më të dobishme në meshkuj 11. Vështirësitë e sjelljes dhe neuroendokrine të vëzhguara në minjtë MS të femrave 12 duket të ndryshojnë nga ato në minjtë MS 13, 14.
Në studimin tonë të mëparshëm, qasja e zgjatur në ushqim shumë të shijshëm, një dietë e moderuar yndyrë (~ 21% yndyrë) 6, 15, gjatë adoleshencës dhe rinisë përmirësuan disa simptoma të lidhura me ankthin dhe mosfunksionimin e HPA-s në minjtë MS 14. Studimet kanë sugjeruar se modulimi i funksionit të aksit të stresit është implikuar në sjelljet pozitive emocionale nga dieta shumë e shijshme. Kjo eshte; ekspozimi ndaj një diete shumë të preferuar me yndyrë u sugjerua për të zvogëluar ndjeshmërinë e stresit 16; individët e ofruar me ushqim shumë të këndshëm kishin emocione më të këndshme, si kënaqësia, kënaqësia dhe dëshira 17 dhe konsumimi i ushqimit të këndshëm uli reagimet simpatike pas streseve psikologjike dhe imunologjike 18, nivelet e hormoneve të stresit pas përmbajtjes 19 dhe sjellje të ngjashme me ankth gjatë testit të ngritur plus labirint në rats 20. Sidoqoftë, në këtë studim, dieta mesatare e yndyrës (~ 21% yndyra) gjatë adoleshencës dhe rinisë nuk përmirësoi mosfunksionimin e boshtit HPA të femrave MS, edhe pse përmirësoi jo vetëm ankthin, por edhe sjelljet e ngjashme me depresionin.
Në mënyrë që të hetojmë mekanizmat nervore që bazojnë efektin psiko-emocional të qasjes shumë të shijshme të dietë në femrat tona MS, ne kemi ekzaminuar faktorët neurotrofikë të lindur nga truri (BDNF) dhe nivelet ΔFosB në nucleus accumbens (NAc). NAc, një strukturë e paraburgimit bazë që përbën një shteg mesolimbik dopaminergjik, ka një rol në shpërblimin, motivimin dhe përforcimin 21. Zhvillimi i anhedonia, një simptomë thelbësore e çrregullimeve të mëdha depresive, është përshkruar në mosfunksionimin e rrugës së shpërblimit, në të cilën NAc luan një rol kryesor 22, 23. Neuronet e NAc aktivizohen duke iu përgjigjur paradigmës së stresit të sjelljes 24, 25, dhe kanë qenë të implikuar në çrregullime ankthi 26, 27. Aktiviteti mesolimbik dopaminergjik dhe aktivizimi i stresit i induktuar i neuroneve NAc u shfarosën në minjtë MS të meshkujve të cilët treguan ankth dhe sjellje të ngjashme me depresionin 13, 28. BDNF ishte sugjeruar që të përfshihej në ushqimin hedonik nëpërmjet modulimit të sistemit mesolimbik të dopaminës 29, 30, dhe ekspozimi ndaj një diete të shijshme u rrit BDNF dhe ΔFosB nivelet dhe dopamine receptor D1 detyrueshme në NAc 16, 31, 32.
Materialet dhe Metodat
kafshët
Rastet Sprague-Dawley u blenë (Samtako Bio, Osan, Kore) dhe u kujdesën në një zonë pengese pa patogjen me kontroll të vazhdueshëm të temperaturës (22 ± 1 ℃), lagështia (55%) dhe një orë 12 / 12 ciklit dritë / të errët (dritat-në në 07: 00 AM). Ushqimi standard laboratorik (Purina Brejtësi Chow, Purina Co., Seul, Kore) dhe uji i filtruar me membranë ishin në dispozicion ad libitum. Kafshët u kujdesën sipas Udhëzuesit për Eksperimentet e Kafshëve, 2000, redaktuar nga Akademia Koreane e Shkencave të Mjekësisë, e cila është në përputhje me Udhëzimet e NIH për Kujdesin dhe Përdorimin e Kafshëve të Laboratorit, 1996 e rishikuar. Të gjitha eksperimentet e kafshëve u miratuan nga Komiteti për Kujdesin dhe Përdorimin e Kafshëve Laboratore në Universitetin Kombëtar të Seulit.
Protokolli eksperimental
Femrat e braktisura dhe meshkujt e seleksionuar janë përdorur për mbarështim në laboratorin e objektit të kafshëve dhe pups u rritën në mënyrë të kontrolluar për të minimizuar dhe standardizuar stimulimin e padëshiruar mjedisor nga në utero jeta. Dymbëdhjetë orë pas konfirmimit të lindjes [dita postnatal (PND) 1], pups u manipuluan siç përshkruam më parë 13, 14, 33 - 35. Çdo pjellë u caktua ose për grupin e ndarjes së nënës (MS) ose për grupin e pa trajtuar (NH). Këlyshët e MS u hoqën nga kafazi i tyre i kafazit dhe u vendosën së bashku në një kafaz të ri të mbushur me copa druri (Aspen rruajtje, Animal JS Bedding, Cheongyang, Korea) gjatë orës 9:00 - 12:00 h, dhe më pas u kthyen në shtëpinë e tyre kafaz dhe digë. Asnjë trajtim shtesë për të mbajtur këlyshët e ngrohtë gjatë periudhës së ndarjes nuk u ofrua. MS kryhej çdo ditë nga PND 1 deri në 14, dhe më pas këlyshët u lanë me digën e tyre të patrazuar deri në shkëputjen nga PND 22. Grupi NH mbeti i patrazuar deri në shkëputje, përveç pastrimit rutinë të kafazit të kryer dy herë në javë. Në ditën e zvjerdhjes, 2 këlyshë femra NH dhe 4 MS u zgjodhën rastësisht nga secila pjellë NH ose MS, respektivisht, dhe vendosën 2 NH ose 2 këlyshë MS së bashku në secilin kafaz. Dy femra MS të strehuara së bashku morën hyrje falas në ushqim shumë të shijshëm (HPF) (cookie Oreo, Kraft Foods Global, Inc., East Hanover, NJ, SHBA), përveç ad libitum (grupi MS + HPF) dhe pjesa tjetër 28 femra MS pups në çdo mbeturina (grupi MS) dhe pups NH (grupi NH) morën vetëm chow standarde. Formulat e përbërjes së lëndës ushqyese të bishtajës standarde dhe biskotës Oreo janë paraqitur në Tabelën Table1.1. Marrja e përditshme e ushqimit dhe shtimi i peshës janë regjistruar nga PND 29. Për vlerësimin e marrjes së ushqimit të 24 h u sigurua një sasi e parave të gatshme dhe cookies, dhe të nesërmen u mblodh sasia e mbetur e chow dhe cookies dhe u zbrit nga vlera e dhënë në ditën e mëparshme. Kujdes i veçantë u mor për të përfshirë derdhjen. Futja kalori u llogarit sipas formulave të përbërjes së lëndës ushqyese të chow dhe cookies. Shumat totale të ushqimit të konsumuar nga pups në çdo kafaz janë ndarë nga numri i pups në çdo kafaz dhe çdo vlerë e llogaritur është konsideruar si n = 1. Uji ishte i lirë për të gjitha grupet eksperimentale dhe kushtet e ushqimit vazhduan gjatë gjithë periudhës eksperimentale. Diagrami skematik i protokollit eksperimental është dhënë në Figura Figure11.
Aktiviteti ambulator
Njerëzit NH, MS dhe MS + HPF (n = 8 nga diferencat e ndryshme të 4 në secilin grup, pups 24 total nga litra të ndryshëm 8) u nënshtruan testit ambulator në PND 54. Në çdo provë, miu u vendos në qendër të dhomës së aktivitetit (43.2 cm në gjatësi, 42.2 cm në gjerësi dhe 30.5 cm në lartësi, MED Associates, VT, SHBA), një dhomë akrilike transparente e pajisur me dy aeroplanë horizontale 16 dyfishtë fotokllë-detektorë palë vendosur në x, y dimension, spaced 2.5 cm larg, dhe aktiviteti i saj ambulator u monitorua nga sistemi kompjuterik për 30 min. Gjendja e lehtë e dhomës së provës është ruajtur në të njëjtën intensitet me dhomat e kafshëve nën kushtet e ditës së dritës. Aktiviteti ambulator është matur si numërimi total i ndërprerjeve të rrezeve në sensorin horizontal gjatë çdo sesioni min 5 min. Aktiviteti i defektimit, pesha e boli fekal, gjatë testit ambulation të çdo miu u shënua si. Aktiviteti i grooming u analizua më tej; p.sh., parakalimi dhe drejtimi i kokës u konsiderua si grooming rostral, dhe trupi, këmbët, dhe bisht / gjymtimi grooming si kafkë grooming 36. Dhoma e veprimtarisë u pastrua me etanol 70% pas çdo përdorimi për të eliminuar çdo shenjë nuhatëse të miut të testuar më parë.
Elegante Maze Plus
Dy ditë pas testit të aktivitetit ambulator (PND 56), minjtë u nënshtruan në vlerësimin e sjelljes në një labirint të ngritur plus, një labirint akrilik plus me dy krahë të hapur të hapur (50 cm në gjatësi dhe 10 cm në gjerësi) dhe dy të kundërta të mbyllura krahët (50 cm në gjatësi, 10 cm në gjerësi dhe 31 cm në lartësi), që shtrihen nga një platformë qendrore (10 cm x 10 cm). I gjithë aparati u ngrit 50 cm mbi dysheme. Procedura e testimit u ndoq siç u përshkrua më parë 37. Çdo miu u vendos në qendër të labirintit që ballafaqohet me një nga krahët e hapur dhe pastaj lejohet të eksplorojë krahët e hapura ose të mbyllura të labirintit për 5 min. Koha e kaluar në armë të ndryshme u regjistrua. Katër këmbët duhej të ishin brenda vijës së hyrjes në secilën krah, gjë që sinjalizonte fillimin e kohës së kaluar në krahun e caktuar dhe pastaj koha përfundimtare u regjistrua kur të katër këmbët ishin përsëri jashtë linjës. Labireti u pastrua me etanol 70% pas çdo prove për të parandaluar ndikimet e miut të testuar më parë.
Test i Notuar i Notit
Tre ditë pas testit të ngritur plus labirint (PND 59), minjtë ishin nënshtruar testit të notimit të detyruar, sipas metodës së përshkruar më parë 38. Çdo miu u lejua të notonte në një cilindër qelqi (54 cm në lartësi dhe 24 cm në diametër) të mbushur me ujë në 40 cm thellësi (23-25) për 5 min, dhe seancat e provës u regjistruan nga një kamera video nga ana e cilindrit. Kohëzgjatja e palëvizshmërisë së miut në ujë u vlerësua nga kaseta video duke përdorur një kronometër. Palëvizshmëria u përcaktua si gjendja në të cilën minjtë u gjykuan të bënin vetëm lëvizjet e nevojshme për të mbajtur kokën mbi sipërfaqen e ujit.
Rats u vendosën në dhomën e provës të paktën 2 h para çdo testi për të minimizuar efektet e padëshiruara të stresit dhe të gjitha vlerësimet e sjelljes u kryen ndërmjet 9: 00 AM dhe 12: 00 PM të ditës për të shmangur ndikimet e variancave cirkadiane. Shënimi i sjelljes u bë me vëzhguesin e verbër të trajtimit të minjve.
Përcaktimi i cortikosteronit të plazmës
Një javë pas përfundimit të seancave të sjelljes, minjtë u vendosën në një kuti përmbajtjeje për 2 orë, në të cilën minjtë ishin në gjendje të lëviznin katër gjymtyrët e tyre, por jo të ndryshonin orientimin e tyre të trupit. Gjaku i bishtit u mblodh në 0, 30, 60 dhe 120 minuta kohë gjatë periudhës së përmbajtjes dhe u centrifugua në 2,000 rpm për 20 min. Mostrat e plazmës u ngrinë në azot të lëngët dhe u ruajtën në - 80 ° C derisa u përdorën për analizën. Nivelet plazmatike të kortikosteronit u përcaktuan me anë të radioimunoizës duke përdorur 125I-etiketuar Coat-A-Count kit (Siemens, CA, SHBA). Ndjeshmëria e analizës ishte 5.7ng / ml. Koeficienti i variacionit të vlerësimit të brendshëm ishte 4-12.2%.
Analiza Western blot
Minjtë që janë naivë nga testet e sjelljes (n = 6 nga 3 pjellë të ndryshme në secilin grup; gjithsej 18 këlyshë nga 6 pjellë të ndryshme) u flijuan në PND 62 për analizën e njollave perëndimore të niveleve ΔFosB dhe BDNF në rajonet e trurit. Mbështetësit e yndyrës retroperitoneale u mblodhën në kohën e flijimit dhe trurin u hoqën menjëherë pas prerjes së kokës. Mostrat e indeve të bërthamës accumbens (NAc) dhe hipokampusit u copëtuan shpejt në akull, u ngrinë në azot të lëngët dhe u ruajtën në - 80 ° C derisa të përdoren. Diseksioni i indeve NAc u krye duke përdorur një teh të hollë sipas metodës së përdorur në studimet tona të mëparshme 28, 39; megjithatë, nuk mund të shmanget një përfshirje e mundshme e striatumit ventro-medial aty pranë. Indet u homogjenizuan në një tampon të vetëm të lizës detergjente (50 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl, 1% Triton X-100, kokrrizë protease dhe fosfataze 0.5%) dhe pastaj centrifugohen në 13,000 g për 20 min në 4oC. Supernatantët e transferuar në tuba të rinj u matën për përmbajtjen e proteinave duke përdorur një çantë të analizës së proteinave (Biorad DC, Biorad, Inc., Hercules, CA), alikuar në një përqendrim 80 μg / 20 μl në tampon lize dhe u ruajt në - 80 ° C, përndryshe përdoret në të njëjtën ditë. Mostrat u përzien me tampon ngarkese (100 mM Tris, pH 6.8; 200 mM dithiotreitol; 4% SDS; 20% glicerinë; 0.2% bromofenol blu) në hollimin 1: 1, të zier për 5 min, të ftohur shpejt në akull dhe më pas elektrofizohet në gels 12% SDS-poliakrilamid Tris-glicinë. Proteinat e transferuara në membranat e nitrocelulozës (Hybond-C, Amersham, Bucks, UK) u trajtuan me 5% qumësht të thatë pa yndyrë në kripë-Tween me lagështirë 1X Tris (10 mM C4H11NO3; 0.145 M NaCl; 0.2% SDS; 0.1% Tween 20) gjatë natës në 40C. Membranat reaguan me lepuri poliklonal anti-∆FosB (hollimi 1: 1000; Bioteknologjia Santa Cruz, Dallas, TX, USA) ose anti-BDNF (hollimi 1: 500; Millipore, Temecula, CA, USA), dhe antitrupat e lidhur u zbuluan me kimilumineshencë sipas udhëzimeve të prodhuesit (substrati blotting perëndimor Lumi-dritë; Roche, Indianapolis, IN, USA) dhe u vlerësua duke përdorur një sistem dixhital të analizës së imazhit (LAS-1000, film Fuji, Tokio, Japoni). Vlerat e digjitalizuara të secilës mostër u normalizuan në kontrollin e ngarkesës β-aktin, dhe pastaj të gjitha vlerat u kthyen në vlera relative në vlerën mesatare të grupit NH.
Analiza statistikore
Të dhënat janë analizuar me një ose dy mënyra [të dhënat e kortikosteronit; trajtimi (trajtimi ose gjendja e ushqimit, nivelet 2 secili) X kohë (nivelet e 4)] analiza e variancës (ANOVA), dhe krahasimet parapërgatitur mes grupeve u kryen nga Post hoc Testi PLSD i Fisherit kur është e nevojshme, duke përdorur softuerin StatView (Abacus, Berkeley, CA, USA). Pesha e trupit dhe të dhënat e marrjes së ushqimit u analizuan më tej me masa të përsëritura ANOVA, pasuar nga korrigjimi Bonferroni për P rregullim vlerash. Niveli i rëndësisë ishte vendosur në P <0.05, dhe të gjitha vlerat u paraqitën si mjete EM SEM
Rezultatet
Marrja e ushqimit dhe shtimi i peshës trupore
Femrat MS duket të jenë më të lehta se femrat NH të moshës që përputhen deri në PND 39 dhe dallimi në peshë nuk u vërejt më pas (Figura (Figure2A) .2A). Dallimet statistikisht të rëndësishme (P<0.05) midis grave NH dhe MS u vunë re gjatë PND 32 - 39, me përjashtim të PND 36 dhe 37. Hyrja e shijshme e ushqimit zvogëloi diferencën e peshës nga përvoja e MS, dhe rëndësia statistikore midis NH dhe MS + HPF u zhduk pas PND 36. Përsëritur masat ANOVA zbuluan se shtimi i peshës trupore me kalimin e kohës është i ndryshëm midis MS dhe MS + HPF [F(1,780) = 2.146; P= 0.0008], por jo midis NH dhe MS. Futjet e përditshme të femrave të MS nuk ndryshojnë nga femrat NH të moshës që përputhen (Figura (Figure2B) .2B) Hyrja në cookie e shtypi marrjen ditore të chow të femrave MS, por marrja ditore e kalorive prirej të rritet nga aksesi i cookie pa ndonjë rëndësi statistikore. Analiza e marrjes së kalorive me masa të përsëritura ANOVA nuk zbuloi efekte të ndarjes së nënës dhe gjendjes së ushqimit. Marrja totale e kalorive gjatë gjithë periudhës eksperimentale (PND 28 - 62) nuk ndryshonte midis grupeve eksperimentale (Figura (Figure2C) .2C). Rreth 40% e kalorive totale të konsumuar nga femrat MS + HPF kanë origjinën nga cookies (3259.921 ± 211.657 kcal nga chow, 2184.641 ± 186.077 kcal nga cookies). Pad jastëk retroperitoneal të femrave MS në PND 62 nuk ndryshonte nga femrat NH të moshës që përputhen dhe kanë tendencë të rriten me qasje në cookie pa domethënie statistikore (P= 0.0833, MS vs MS + HPF) (Figura (Figure22D).
Vlerësimet e sjelljes
Aktivitetet ambulatore të femrave NH, MS dhe MS + HPF u matën në një dhomë aktiviteti të kompjuterizuar në PND 54. Numërimet ambulatore të femrave MS gjatë së parës (0 - 15 min) dhe seancës së mëvonshme (15 - 30 min) u ulën ndjeshëm krahasuar me femra NH; megjithatë, një rënie e konsiderueshme (P<0.05) në krahasim me NH u vu re vetëm gjatë seancës së mëvonshme në grupin MS + HPF (Figura (Figure3A) .3A). Distanca totale e udhëtuar gjatë seancës së parë 15 min u zvogëlua ndjeshëm në MS (P<0.05), por jo në MS + HPF, krahasuar me NH (Figura (Figure3B) .3B). Sjellja e grooming dhe veprimtaria e defekimit u shënuan gjatë testit të aktivitetit ambulator (Figura (Figure3C3C & D). Përvoja e MS u rrit ndjeshëm pastrimin rostral (P<0.05, NH vs MS) ndërsa aksesi i cookie e zvogëloi atë (P<0.05, MS vs MS + HPF) (Figura (Figure3C) .3C). Aktiviteti i defektimit të femrave MS është prirur të rritet në krahasim me NH pa domethënie statistikore, dhe aksesi i cookit redukton ndjeshëm atë (P<0.05, MS vs MS + HPF) (Figura (Figure33D).
Me qëllim të vlerësimit të mëtejshëm të sjelljeve të ngjashme me ankthin, minjtë ishin nënshtruar një testi të rritur plus të labirintit 2 ditë pas testit të aktivitetit ambulator (PND 56). Koha e shpenzuar në krahë të hapur u ul ndjeshëm në femrat MS (P <0.05), por jo në MS + HPF, krahasuar me NH (Figura (Figure4A) .4A). Përqindja e hapjes së krahut të hapur nuk ndryshonte midis grupeve eksperimentale (Figura (Figure4B) .4B). Për të vlerësuar sjelljet e ngjashme me depresionin, minjtë ishin nënshtruar testit të detyruar të notit 3 ditë pas testit të ngritur plus labirint (PND 59). Kohëzgjatja e imobilitetit gjatë sesionit të testimit të notit të detyruar të 5 min u rrit ndjeshëm në femrat MS (P <0.05) krahasuar me NH, dhe rezultati i palëvizshmërisë së femrave MS + HPF nuk ndryshonte nga NH (Figura (Figure44C).
Nivelet e plazmës cortikosterone
Një javë pas testit të notave, minjtë morën stresin e kufizimit dhe gjakët e bishtit u mblodhën në minutat minimale të 0, 30, 60 dhe 120 gjatë 2 h të seancës së përmbajtjes dhe u përdorën për testin e plazmës së kortikosteronit (Figura (Figure5) .5). Nivelet basal të kortikosteronit (pika kohore 0) nuk ndryshonin midis grupeve; megjithatë, rritja e stortit të nivelit të kortikosteronit ishte më e ulët në femrat MS se në NH në 30 dhe 60 min kohë pas fillimit të stresit (P<0.05, NH vs MS në çdo moment). Nivelet plazmatike të kortikosteronit të MS + HPF nuk ndryshonin nga NH në 30 min pas fillimit të stresit, por ishte më e ulët se NH në kohën 60 min (P <0.05; 394.29 ± 38.35 ng / ml në NH kundrejt 247.48 24.57 ng / ml në MS + HPF). Analiza e niveleve të kortikosteronit të shkaktuar nga stresi me ANOVA me dy drejtime zbuloi efektet kryesore të ndarjes së nënës [F(1,56) = 8.814, P= 0.0045] dhe koha [F(3,56) = 9.335, P<0.0001], dhe nuk ka efekt të gjendjes ushqimore. Nuk u gjetën ndërveprime të rëndësishme midis ndarjes së nënës dhe kohës ose midis gjendjes së ushqimit dhe kohës.
ΔFosB dhe BDNF blots perëndimore
Nivelet e ΔFosB dhe BDNF në NAc u ekzaminuan me analizë western blot (Figura (Figure6) .6). ΔFosB ishte ulur ndjeshëm, por BDNF u rrit në NAc të femrave MS (P <0.05) krahasuar me NH (Figura (Figure6A6A & B). Niveli ΔFosB në NAc të femrave MS u normalizua nga hyrja në cookie; dmth asnjë ndryshim midis NH dhe MS + HPF, dhe niveli i BDNF u rrit më tej (P <0.05, MS vs MS + HPF). Nivelet e BDNF në hipokampus të femrave MS u ulën ndjeshëm në krahasim me NH (P <0.05) dhe nuk u rikuperua nga hyrja në cookie (Figura (Figure66C).
Diskutim
Qasja e shijshme e ushqimit përmirësuar sjelljet psiko-emocionale të femrave MS
Në këtë studim, rezultatet e sjelljes që përfaqësojnë ankth dhe depresion, të tilla si aktiviteti ambulator, stërvitja rostral dhe aktiviteti i defekacionit gjatë testit të aktivitetit; qëndrimi i hapur i armëve gjatë testit të ngritur plus labirint; paqëndrueshmëria gjatë testit të notimit të detyruar, u përmirësuan në femrat MS me qasje të lirë në biskota Oreo gjatë adoleshencës dhe të rinjve. Përgjigja e kortikosteronit ndaj stresit akut ishte e shfrenuar në femrat MS, siç raportohet tek meshkujt MS 14. Përgjigja e hapur e kortikosteronit duket të jetë pasojë e përvojës MS; dmth. përvoja e stresit të përsëritur, pasi që aksi i HPA-s përgjigjet ndaj sfidës akute të stresit duket të jetë i shfrenuar pas përvojave të stresit të përsëritur kronik 40, 41. Studimet sugjerojnë se ekspozimi ndaj dietës shumë të preferuar me yndyrë mund të modifikojë aktivitetin basal të HPA dhe përgjigjet endokrine në një stres akut 9, të përmirësojë përgjigjet e stresit 17, 19 dhe ulin sjelljet e ngjashme me ankthin 18, 20. Gjithashtu, qasja e lirë në cookies Oreo (~ 21% përmbajtje yndyre, një dietë e moderuar yndyrë) gjatë adoleshencës dhe rinisë normalizoi funksionin e boshtit të HPA-së dhe përmirësoi sjelljet e ngjashme të ankthit në minjtë MS 14. Kjo është, ka të ngjarë që qasja adoleshente e cookie-t mund të përmirësojë funksionin e boshtit të HPA-së nga përvoja e MS, stresi i përsëritur në jetën e hershme dhe përmirësimi i vështirësive të sjelljes. Sidoqoftë, në këtë studim, qasja e cookie gjatë adoleshencës dhe të rinjve nuk përmirësoi aktivitetin e aksit HPA duke iu përgjigjur stresit akut në minjtë MS. Është sugjeruar që efektet anxiolytic dhe / ose antidepressant të qasjes cookie adoleshencë në rats MS femër nuk mund të lidhen me funksionin aks aks HPA, edhe pse ajo ishte në rats MS mashkull. Meshat dhe femrat dallojnë në parametra të shumta neuroendokrine dhe të sjelljes, dhe ndjeshmëria ndaj stresit varet nga gjinia 42, 43. Studimi i mëparshëm raportoi se një protokoll i moderuar i dietës me yndyrë të 7-it çon në një seleksionim të ekzagjeruar mashkullor të kortikosteronit pas një stresi akut 6.
Qasje e shijshme e ushqimit dhe funksioni neuronal në NAc të minjve femra
Ky studim tregoi se shprehja ΔFosB është zvogëluar dhe BDNF është rritur në NAc të minjve femra nga përvoja e MS. Është raportuar se ose stresi psikologjik ose metabolik rrit ΔFosB shprehjen në NAc 44-46. Studimet kanë sugjeruar se faktori i transkriptimit ΔFosB është i lidhur me shprehjen BDNF në neuronet e NAc 32, 47-49. Të marra së bashku, sugjerohet që zvogëlimi i ΔFosB dhe rritjes së shprehjes BDNF në NAc mund të jetë një pasojë afatgjatë e stresit MS në jetën e hershme, ndoshta duke moduluar funksionin neuronal NAc. Funksioni neuronal NAc sugjerohet të jetë i moduluar nga paradigma e stresit të sjelljes 24, 25 dhe mosfunksionimi i saj është implikuar në depresion dhe çrregullime ankthi 22, 23, 26, 27. Në të vërtetë, rritja e sinjalizimit të BDNF në NAc është raportuar në modelet e depresionit të nxitura nga stresi 50-52, dhe efektet depresive të nxitura nga stresi u shfarosën në minjtë mbi-shprehur ΔFosB në striatum 53. Kështu, ka të ngjarë që sjelljet e depresionit dhe / ose ankthit të femrave të femrave MS mund të lidhen me uljen e ΔFosB dhe rritjen e shprehjes BDNF në NAc.
Në këtë studim, qasja cookie gjatë periudhës adoleshente rritur shprehjet ΔFosB dhe BDNF në rats MS femër. Ky rezultat përputhet me raportet e mëparshme që tregojnë se ekspozimi ndaj një diete të shijshme rezulton në rritjen e niveleve të ΔFosB në NAc 31, dhe se dieta me yndyrë të lartë rriti nivelet e BDNF në NAc të minjve mbi-ekspresive të ΔFosB 32. Duke marrë parasysh raportin e mëparshëm që zbulon se rritja e shprehjes ΔFosB në striatum shfaq rezistencë ndaj efekteve depresive të nxitura nga stresi 53, konstatohet se rritja ΔFosB në NAc e femrave tona MS me qasje në cookie; dmth normalizuar në nivelin e saj bazal, mund të ketë kontribuar në efektshmërinë antidepresante dhe / ose anksiolitike të aksesit të cookies në adoleshencë. Megjithatë, nuk është e qartë nëse rritet niveli i BDNF në NAc të femrave MS me qasje në cookie është implikuar në efektet e saj antidepressant dhe anxiolytic, pasi rritjen e sinjalizimit BDNF në NAc është raportuar kryesisht në modelet depresive 50-52, por rrallë në modelet antidepresive. Studime të mëtejshme janë të garantuara.
Efektet e MS dhe HPF në nivelet Hippocampal BDNF
Niveli i zvogëluar i BDNF-së në hipokampus është raportuar si në meshkuj dhe femra, të cilat i janë nënshtruar një protokolli MS të ngjashëm të përdorur në këtë studim 54, 55. Në të njëjtën kohë, niveli i BDNF u zvogëlua në hipokampusin e minjve MS të femrave tona në krahasim me kontrollet e NH në këtë studim. Neurogjeneza hipokampale është implikuar në simptomat e ankthit dhe depresionit 56, 57, dhe hippocampus është i njohur për t'u përfshirë në rregullimin e reagimit të aktivitetit të aksit HPA. Duke kujtuar që aktiviteti HPA ishte i shfrenuar në femrat tona MS, ka të ngjarë që nivelet e ulëta të BDNF në hipokampus mund të implikohen në çrregullime ankthi dhe / ose depresioni nga përvoja MS, ndoshta në lidhje me aktivitetin e boshtit HPA. Raporti në mes të nivelit BDNF hipokampale dhe aktivitetit të aksit HPA në femrat tona MS u mbështet më tej nga fakti se qasja cookie nuk përmirësoi të dyja këto në këtë studim. Studimi i mëparshëm tregoi se konsumi i zgjatur i dietës së lartë të yndyrës (32% yndyra) rrit shprehjen BDNF në hippocampus e rats MS mashkull nënshtruar një protokolli MS të ngjashëm që është përdorur në këtë studim 58. Efekti i qasjes së cookit gjatë adoleshencës (~ 21% yndyrë) në nivelet Hippocampal BDNF të minjve meshkuj MS aktualisht është nën hetim.
Efektet e sjelljes së përmbajtjes së yndyrës / sheqerit në cookie Oreo
Në këtë studim, qasja e lirë në cookies Oreo përmirësuar vështirësitë psiko-emocionale në rats femra me përvojë të hershme stresuese. Cookie Oreo është një cookie me çokollatë, jo vetëm me yndyrë të lartë, por edhe me sheqer të lartë, siç tregohet në tabelën Table1.1. Në studimin njerëzor, hahet çokollata reduktonte gjendjen negative në krahasim me ujin e pijshëm, ndërsa nuk u gjetën efekte në disponime neutrale dhe pozitive 59. Dhe efekti i çokollatës për përmirësimin e humorit ishte i varur nga shijshmëria e çokollatës (çokollata e qumështit me çokollatë të thjeshtë), duke sugjeruar që të hahet ushqimi i ëmbël i këndshëm, përmirëson gjendjen negative të sjelljes eksperimentale. Është raportuar se dëshira e sukrozës është rritur në kafshët në depresion me stres të butë kronik dhe dëshira e çokollatës së shijshme të qumështit rritet në mënyrë specifike në subjektet me humor në depresion 60. Zgjedhja e lirë e sukrozës dhe / ose zambakëve përveç ushqimjes së të gjitha moduluar reagimet e aksit të stresit ndaj stresit akut 61. Gjithashtu, ekspozimi afatshkurtër në një dietë të moderuar yndyrë (20% vaj misri, përmbajtje të ngjashme yndyrë me biskota Oreo) nxiti neuroendokrin dhe ndryshimet e sjelljes në një mënyrë seksualisht dimorfike 4-6. Të marra së bashku, konstatohet se përmbajtja e sheqerit dhe yndyrës së biskotave Oreo mund të ketë kontribuar në përmirësimin e vështirësive nervore dhe të sjelljes në femrat MS. Studime të mëtejshme janë të garantuara për të shqyrtuar nëse e njëjta sasi e furnizimit me yndyrë ose sheqer si aksesi i Oreo cookie do të prodhonte përmirësime të ngjashme në femrat MS të vërejtura në këtë studim.
Së fundmi, deponi retroperitoneal yndyrë prirur të jetë rritur në femrat MS nga qasje cookie në këtë studim. Përveç efektit të saj të modulimit në funksionin e aksit të stresit, qasja e shijshme e ushqimit dukshëm ka rritur qarkullimin e nivelit të leptinës dhe insulinës me depon e yndyrës në rritje 15, 61. Si leptina ashtu edhe insulina janë sugjeruar të ushtrojnë një funksion rregullator në sistemin e shpërblimit meso-limfatik, dhe sidomos rritja e shprehjes së transportuesve të dopaminës në zonën tegmentale të barkut 62, 63. Siç është përshkruar më lart, sistemi meso-limfik shpërblim është shumë i implikuar në çrregullimet psiko-emocionale në lidhje me funksionin e aksit të stresit 22-27. Prandaj, një modulim paraprak, nëse ka, në sistemin e shpërblimit meso-limfatik nga rritja e leptinës dhe / ose insulinë me deponi të rritur yndyror, sugjerohet të luajë një rol në ngritjen e humorit me anë të qasjes ushqimore të pëlqyeshme. Në të vërtetë, konsumi i zgjatur i një diete me yndyrë të lartë (përmbajtja e përmbajtjes së yndyrës 32) redukton sjelljet e ngjashme me ankthin dhe rritjen e nivelit të plazmës leptin dhe insulinës me deponi të theksuar të yndyrës në rats femra që i nënshtrohen një protokolli MS të ngjashëm të përdorur në këtë studim 11. Sidoqoftë, nuk është ende e qartë nëse përmirësimet e sjelljes të vërejtura në femrat tona MS me qasje në cookie (një dietë e moderuar yndyrë me përmbajtje ~ 21% yndyrë) është e lidhur me depon e yndyrës në rritje, sepse rritja në deponi retroperitoneal yndyrë nga qasja e cookie nuk arritën një domethënie statistikore dhe më tej, as studimi i tanishëm nuk matte as qarkullimin e leptinës as insulinë.
Në përfundim, disfunksionet në aksin HPA, neuronet e NAc dhe hippocampus duket të implikohen në vështirësitë psiko-emocionale të rats të rinj të femrave MS nga përvoja e ndarjes së nënave gjatë dy javëve të para të lindjes. Qasja e lirë në ushqim shumë të shijshëm, një dietë të moderuar yndyrë, gjatë adoleshencës dhe rinisë përmirësoi sjelljet e ngjashme me ankthin dhe depresionin në femrat MS pa ndikuar në shtimin e peshës trupore dhe modulimi funksional në neuronet NAc mund të luajë një rol në mekanizmat e saj nervor bazë.
Mirënjohje
Autorët falenderojnë Dr. SB Yoo për ndihmë me analiza statistikore dhe Dr. JY Lee me teknika eksperimentale. Ky studim u mbështet nga grantet e Fondacionit të Kërkimeve Kombëtare (2013R1A1A3A04-006580) dhe përmes Qendrës Kërkimore të Mosfunksionimit Oromaxillofacial për të Moshuarit në Universitetin Kombëtar të Seulit (2014050477) financuar nga Qeveria e Koresë (Ministria e Shkencës, TIK dhe Planifikimi i Ardhshëm).
Referencat






