Journal of Neuroscience, 6 shtator 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4dhe Jane R. Taylor1
1.Korrespondenca duhet t'i drejtohet Jane R. Taylor, Departamenti i Psikiatrisë, Divizioni i Psikiatrisë Molekulare, Shkolla Universale e Mjekësisë Yale, Objektet e Kërkimit Ribicoff, Qendra e Shëndetit Mendor të Connecticut, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[email mbrojtur]
Abstrakt
Ndryshimet në motivim janë implikuar në patofiziologji të disa çrregullimeve psikiatrike, duke përfshirë abuzimin e substancave dhe depresionin. Ekspozimi i përsëritur ndaj drogave të abuzimit ose stresit është i njohur për të nxitur vazhdimisht faktorin e transkriptimit ΔFosB në bërthamë accumbens (NAc) dhe striatum dorsal, efektet e hipotezuara për të kontribuar në neuroadaptations në dopamin të rregulluara sinjalizuar. Sidoqoftë, pak është e njohur për përfshirjen specifike të ΔFosB në disregulimin e sjelljeve të motivuara me imtësi. Ne tregojmë këtu se mbizotërimi i ΔFosB në NAc dhe striatum dorsal i minjve bitransgjenik, ose në mënyrë specifike në bërthamën e NAc të minjve duke përdorur transferimin e gjeneve të ndërmjetësuara nga virale, performanca e përforcuar e instrumentit të përforcuar me ushqim dhe raporti progresiv në përgjigje. Efektet e sjelljes shumë të ngjashme u gjetën pas ekspozimit të mëparshëm të përsëritur ndaj kokainës, amfetaminës, MDMA [(+) - 3,4-methylenedioxymethamphetamine], ose nikotinës në minjtë. Këto rezultate zbulojnë rregullimin e fuqishëm të proceseve motivuese nga ΔFosB dhe japin dëshmi se ndryshimet e induktuara nga droga në shprehjen e gjeneve nëpërmjet induksionit të ΔFosB brenda bërthamës së NAc mund të luajnë një rol kritik në ndikimin e ndikimeve motivuese në sjelljen instrumentale.
Prezantimi
Ekspozimi i përsëritur i drogës shkakton ndryshime të përkohshme në transkriptimin e gjeneve që prodhojnë neuroadaptime të qëndrueshme brenda bërthamës accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Ky rajon i trurit luan një rol kritik në të dy proçeset e përforcimit të drogës dhe të natyrës (Kelley dhe Berridge, 2002), edhe pse pak dihet për faktorët e transkriptimit që ndikojnë në sjelljen e motivuar nga ilaçet, përforcuesit e shijshëm si ushqimi. ΔFosB është një faktor transkriptimi i aktivizuar brenda NAc dhe striatum dorsal nga ekspozimi kronik i drogës (Konradi et al., 1994; Nye et al., 1995; Chen et al., 1997; Pich et al., 1997; Shaw-Lutchman et al., 2003) dhe rrotullimi i ngathët (Werme et al., 2002). Ajo gjithashtu nxitet në këto rajone nga disa forma të stresit kronik (Perrotti et al., 2004). Rritja e proceseve të përforcimit të drogës që shoqërohet me induksionin e ΔFosB striatum është ngritur mirë (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Pasojat e niveleve të ngritura të ΔFosB në këto rajone për sjellje instrumentale të motivuara nga përforcuesit natyrorë, nuk janë të njohura.
Performanca e përgjigjeve instrumentale është një komponent i domosdoshëm i sjelljes së drogës që mund të bëhet disreguluar ose jo fleksibël, ndërsa kalon tranzicioni në varësi (Jentsch dhe Taylor, 1999; Berke dhe Hyman, 2000; Berridge dhe Robinson, 2003; Everitt dhe Robbins, 2005). NAc është i përfshirë në aspekte të shumëfishta të sjelljes instrumentale me rëndësi për varësinë (Balleine dhe Killcross, 1994; Corbit et al., 2001; de Borchgrave dhe të tjerët, 2002; Di Ciano dhe Everitt, 2004b; Everitt dhe Robbins, 2005). Prandaj është e mundshme që neuroadaptimet e nxitura nga droga brenda NAc mund të ndikojnë në performancën e veprimeve instrumentale. Në të vërtetë, ekspozimi kronik i kokainës rrit performancën instrumentale të përforcuar me saharozë (Miles et al., 2004) dhe manipulimet që mendohet të bllokojnë neuroplasticitetin brenda bërthamës së NAc, përfshirë ndalimin e PKA (protein kinazës A) ose sintezën e proteinave, ndërhyjnë në përgjigjet instrumentale të shpërblimit ushqimor (Baldwin et al., 2002a; Hernandez et al., 2002). Bërthama e NAc gjithashtu ndërmjetëson ndikimin motivues të ndikimeve të kushtëzuara në sjelljen instrumentale (Parkinson et al., 1999; Corbit et al., 2001; Hall et al., 2001; Di Ciano dhe Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), duke siguruar një substancë neurobiologjike, ku induksioni ΔFosB mund të ndikojë fuqishëm në performancën instrumentale dhe në motivimin për përforcuesit e shijshëm siç janë ushqimi, uji ose drogat e abuzimit.
Këtu kemi studiuar efektet e ΔFosB në sjelljen instrumentale të motivuar nga ushqimi duke përdorur dy qasje komplementare gjenetike: (1) overexpression inducible e ΔFosB brenda NAc dhe striatum dorsal e minj bitransgenic (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) dhe (2) overexpression e ΔFosB në thelbin e NAc në mënyrë specifike duke përdorur transferimin e gjeneve virale në rats. Ne gjithashtu vlerësuam nëse ekspozimi i mëparshëm i përsëritur ndaj kokainës, amfetaminës, (+) - 3,4-methylenedioxymethamphetamine (MDMA) ose nikotinës, nën kushtet e raportuara për të rritur ΔFosB, do të rriste reagimin dhe / ose motivimin instrumental të përforcuar nga ushqimi duke përdorur një plan progresiv progresi, siç është treguar për vetë-administrimin e drogës (Horger et al., 1990, 1992; Piazza et al., 1990; Vezina et al., 2002; Miles et al., 2004). Rezultatet tona tregojnë efektet e vazhdueshme të ΔFosB në sjelljen instrumentale dhe sugjerojnë se ky faktor transkriptimi mund të veprojë në thelbin e NAc si një rregullator i funksionit motivues.
Materialet dhe Metodat
Kafshët dhe kujdesin e kafshëve
Eksperimentalisht naivë Sprague Dawley rats u ble nga Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Minjtë 11A me bitransgjencë janë nxjerrë nga një kryq në mes të minjve homozigozë transgenikë që shprehin një proteinë transaktive specifike neuron-enolase (NSE) -T tetraciklin transaktivator (vija A) dhe minj që shprehin TetOp (promotor i përgjegjshëm me tetraciklin) -ΔFosB (linja 11); linjat prindërore janë ruajtur në një sfond të përzier të dalë (50% ICR dhe 50% C57BL6 × SJL) (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Këto minj 11A bitransgjenike shprehin ΔFosB vetëm kur: (1) të dy transgenes janë të pranishëm në të njëjtën qelizë dhe (2) aktivizimi transkripcional nga tTA nuk është i frenuar nga prania e antibiotikëve tetraciklinikë siç është doksiciklin. Administrimi i doksiciklinit ndaj këtyre minjve mund të ushtrojë kështu një kontroll të përkohshëm mbi shprehjen e ΔFosB dhe të përdoret për të parandaluar shprehjen gjatë zhvillimit; në të vërtetë, administrimi i doksiciklinës është i lidhur me asnjë shprehje të zbuluar të rrjedhjes së ΔFosB (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Për më tepër, linja 11A e minjve bitransgjenike u përzgjodhën për eksperimentet e tanishme, sepse ato shfaqin një model ekspresioni i cili kryesisht kufizohet tek neuroni striatal që përmbajnë dynorfin (si NAc dhe striatum dorsal), shumë i ngjashëm me modelin e induksionit ΔFosB nga droga kronike ekspozimit (Kelz et al., 1999). Për më tepër, kuantifikimi i kësaj shprehjeje striatake të ΔFosB është kuantifikuar më parë (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Minjtë u gjeneruan në Universitetin e Teksasit Jugperëndimor dhe u mbajtën dhe testuan në ambientet e Yale. Gjatë gjithë shtatëzanisë dhe zhvillimit, të gjitha minjtë u mbajtën në doksikiklinë deri në moshën 8-9 në një përqendrim 100 μg / ml në ujë të pijshëm, kushte të njohura për të mbajtur transgenes të shtyrë nga TetOp në gjendjen "off" dhe përdorën fillimin e 6 javë jashtë doxiciklinës kur shprehja ΔFosB bëhet maksimale (Kelz et al., 1999). Të gjitha eksperimentet përfshinin krahasimin e minjve bitransgjenës së littermatic në kundrejt off doxycycline, e cila në vetvete nuk ka efekt mbi sjelljen e motivuar (Kelz et al., 1999; McClung dhe Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).
Të gjitha subjektet eksperimentale u vendosën në çifte (rats) ose në grupe (minj, katër deri në pesë për kafaz) nën kushtet e kontrolluara të temperaturës dhe lagështisë nën një cikël 12 h / dritë të errët (dritë në 7: 00 AM dhe jashtë në 7: 00 PM). Ato u lejuan të paktën që 7 d të përshtateshin në objektet e strehimit para çdo studimi. Kafshët kanë qasje ad libitum në ujë në çdo kohë dhe qasje të kufizuar në ushqim siç është detajuar më poshtë. Të gjitha përdorimet e kafshëve janë kryer në përputhje me Institutin Kombëtar të Shëndetësisë Udhëzues për Kujdesin dhe Përdorimin e Kafshëve Laboratore dhe është miratuar nga Komitetet e Kujdesit dhe Përdorimit të Kafshëve në Universitetin e Teksasit Jugperëndimore dhe Yale University.
Droga
Hidrokloruri i kokainës (i dhënë me mirësi nga Instituti Kombëtar për Abuzimin e Narkotikëve (NIDA)], sulfamati d-amfetamina (Sigma, St. Louis, MO), MDMA hidroklorid (dhënë mirësi nga NIDA) dhe (-) - ) janë tretur në fiziologjinë sterile sterile (0.9%) dhe injektuar intraperitonean në një vëllim 5 ml / kg (minj) ose 2 ml / kg (rats). PH e zgjidhjes nikotine u rregullua me bikarbonat natriumi para injektimit.
Vektorët viralë
Transferimi i gjeneve virale është kryer siç përshkruhet më sipër (Carlezon et al., 1998; Perrotti et al., 2004). Shkurtimisht, cDNAs që kodojnë proteinat specifike u futën në HSV-PrPUC të virusit herpes simplex (HSV) dhe u paketuan në virus duke përdorur ndihmësin 5dl1.2. Vektorët që nxisin shprehjen e ose HSV-LacZ, që kodojnë për proteinën kontrolluese β-galaktosidase ose HSV-ΔFosB, që kodojnë për ΔFosB, u futën më pas në thelbin e NAc sipas protokollit eksperimental.
procedurë eksperimentale
Përshkruajë.
Eksperimenti 1 shqyrtoi efektet e ekspozimit të mëparshëm të përsëritur të barnave në performancën instrumentale të përforcuar nga ushqimi dhe raporti progresiv në përgjigje. Rats u ndanë rastësisht në pesë grupe eksperimentale (n = 9-10 / grup). Këto grupe kanë marrë injeksione dy herë në ditë (intraperitoneally; në 9: 00 AM dhe 5: 00 PM) me kripur ose një nga barnat e mëposhtme: nikotina, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokainë, 15 mg / kg; ose amfetaminë, 2.5 mg / kg për 15 ditë të njëpasnjëshme. Doza u përzgjodh bazuar në të dhënat tona të publikuara më parë (Taylor dhe Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), dhe stimulimi lokomotor i nxitur nga droga u monitorua në ditët e trajtimit 1 dhe 15. Pas 5 d të tërheqjes, kafshët u stërvitën në përgjigje instrumentale për 10 ditë të njëpasnjëshme dhe më pas u testuan në raport progresiv duke iu përgjigjur ditën tjetër. Dy kafshë u përjashtuan nga analiza statistikore sepse nuk kishin marrë përgjigje instrumentale, duke bërë jo më shumë se një përgjigje aktive të levës në secilën prej tre seancave përfundimtare të trajnimit.
Eksperimentet 2 dhe 3 ekzaminuan efektet e tejpërhapjes stërhyrëse të ΔFosB në bërthama bitransgjenike në performancën instrumentale dhe reagojnë në një raport progresiv të përforcimit. Shpejtësia e indeksit të ΔFosB në këto minj është treguar më parë për të imituar efektet e ekspozimit të përsëritshëm të drogës në aktivitetin lokomotor dhe paradigmat e preferuara të vendit (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Këto minj mund të ofrojnë informata kritike për kontributin e ΔFosB striatale në proceset specifike të sjelljes. Minjot mashkullore të gjeninuara u mbajtën në doksiciklin ose u ndërruan për të mbushur ujë në 8 javë të moshës. Eksperimentet u iniciuan pas javëve 6 të tërheqjes doksikikline, në të cilën kohë shprehja e transgjencave është maksimale (Kelz et al., 1999). Në eksperimentin 2, kafshët (n = 16) u kufizuan me ushqimin dhe u stërvitën në procedurën instrumentale të përshkruar më poshtë (shih më poshtë, Testimi instrumental i përgjigjes dhe progresiv) për 10 ditë të njëpasnjëshme. Pas përfundimit të testimit instrumental, stimulimi i lokomotorëve të nxitur nga kokaina u vlerësua në këto minj. Në eksperimentin 3, një grup i veçantë i minjve (n = 18) u trajnuan në përgjigjen instrumentale për ditët 10 të njëpasnjëshme në kushte gjatë së cilave u dërgua një maksimum i përforcimeve 50. Në ditën 11, të gjithë minjtë u testuan në raport progresiv duke iu përgjigjur. Në ditën 12, ne përcaktuam efektet e zhvlerësimit të përforcuesit duke prefeeding në raport progresiv përgjigjur.
Eksperimentet 4 dhe 5 ekzaminuan efektet e shprehjes së tepërt të virusit të ΔFosB në mënyrë specifike brenda NAc. Eksperimenti 4 ka testuar efektet e shprehjes ΔFosB mbi shfaqjen instrumentale. Këtu, minjtë u infuzuan me HSV-ΔFosB (n = 8) ose HSV-LacZ (n = 8) në thelbin e NAc dhe u stërvitën në procedurën instrumentale që filloi më vonë 40 h. Pas sesioneve ditore të trajnimit 10, u vlerësuan nivelet e aktivitetit bazë për të gjitha kafshët në pajisjet e monitorimit të aktivitetit lokomotor siç përshkruhet më poshtë (shih më poshtë, aktiviteti i lokomotoreve). Eksperimenti 5 vlerësoi efektet e shprehjes së tepërt të NAc ΔFosB në mënyrë specifike në raportin progresiv të përgjigjes. Këtu, minjtë janë trajnuar fillimisht për ditët e njëpasnjëshme 15, të caktuar në grupe eksperimentale dhe më pas të infuzuar me HSV-ΔFosB (n = 8) ose HSV-LacZ (n = 7) në thelbin e NAc. Kafshët kanë mbetur të paprovuara dhe të patrajtuara për 4 d për të lejuar shprehjen ΔFosB në kulmin. Në ditën 5 pas infuzionit, të gjitha kafshët u testuan për levë shtypur në orarin e raportit progresiv. Pas ditës së fundit të testimit, të gjitha minjtë u vranë dhe vendosja e kanulave të infuzionit në thelbin e NAc u verifikua histokemikisht. Bazuar në vendosjen e kanulave të infuzionit, dy minjtë janë përjashtuar nga eksperimenti 4 dhe një rat nga eksperimenti 5.
Karakterizimi i shprehjes së gjeneve është bërë në një grup të veçantë kafshësh. Këtu, HSV-LacZ u fut në thelbin e NAc dhe kafshët u vranë më vonë 3. Shprehja e β-galaktosidazës u vlerësua më pas imunohistokimisht.
Aktivitet lokomotor.
Aktiviteti i lokomotoreve është matur duke përdorur matësat e aktivitetit (monitorimi i aktivitetit të kafshëve Digiscan, Omnitech Electronics, Columbus, OH). Matësit e aktivitetit ishin të pajisur me dy rreshta të fotosensorëve me infra të kuqe, secili rresht i përbërë nga sensorë 16 vendosur veçmas 2.5 cm. Matësit e aktivitetit kontrolloheshin nga të dhënat e matësve të aktivitetit të mbledhura nga një kompjuter PC duke përdorur softuerin Micropro (Omnitech Electronics).
Kafshët eksperimentale u vendosën në kuti plastike transparente (25 × 45 × 20 cm) që u vendosën në metra aktiviteti. Kafshët u lejuan fillimisht të habiteshin në pajisjen e regjistrimit të aktivitetit lokomotor për 30 min. Në disa eksperimente, kafshët u morën më pas, injektohen me kokainë, amfetaminë, nikotinë, ose automjet sipas dizajnit eksperimental dhe u vendosën përsëri në kuti. Aktiviteti lokomotor u regjistrua pastaj për 60 min, duke filluar 5 min pas injektimit të drogës për të shmangur hipermotilitetin e injektuar jo-specifik. Të gjitha eksperimentet u kryen gjatë fazës së dritës së kafshëve (ndërmjet 9: 00 AM dhe 6: 00 PM).
Testimi instrumental i përgjigjeve dhe progresive.
Përgjigjja instrumentale është vlerësuar duke përdorur dhomat standarde operative për minjtë (30 × 20 × 25 cm) ose minj (16 × 14 × 13 cm) të kontrolluara nga programi MedPC (Med Associates, St. Albans, VT). Çdo dhomë ishte e vendosur në një dhomë të jashtme të zhurmshme, të pajisur me një gjenerator të bardhë zhurmash dhe një tifoz për të zvogëluar ndikimin e zhurmës së jashtme. Një dritë shtëpie e montuar në mur të pasmë ndriçoi dhomën. Një bombol me vrimë nxjerrëse dha peleta ushqimore (20 ose 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) si përforcues në revistë. Hyrjet e kokës u zbuluan nga një fotokellë e montuar mbi priza për përforcim. Në këtë revistë ishte një dritë stimuluese. Për minjtë, një levë u vendos në çdo anë të revistës. Për minj, dy hapje të hapura ishin vendosur në murin e prapambetur të dhomave (dmth., Përballë revistës për përforcim).
Gjatë 5 d menjëherë para fillimit të stërvitjes, kafshët u kufizuan në qasjen 90 min në ushqim në ditë dhe u ekspozuan fishekëve ushqimor me bazë gruri (minj, 20 mg, rats, 45 mg) në kafazet e tyre të shtëpisë. Gjatë periudhës së testimit, fishekët e ushqimit ishin në dispozicion në mënyrë të përhershme në dhomat operante sipas protokollit të sjelljes (shih më poshtë), si dhe në sasi të pakufizuar në kafazin e shtëpisë për 90 min, duke filluar 30 min pas sesionit të testimit ditor. Kjo skemë e qasjes në ushqime lejon që çdo kafshë individuale të arrijë pikën e tyre individuale të ngopjes dhe të zvogëlojë ndryshueshmërinë e shkaktuar nga konkurrenca midis kafshëve dominuese dhe vartëse. Në duart tona, kjo skemë lejon një fitim të ngadaltë në peshë pas humbjes fillestare të peshës ~85-90% e peshave të ushqyerjes së lirë. Peshat e kafshëve u monitoruan gjatë gjithë eksperimentit.
Të gjithë subjektet fillimisht u përdorën në aparatin e testimit për 2 d; gjatë këtyre seancave, fishekët e ushqimit u dërguan në revistën për përforcim në orar të caktuar me orar 15 (FT-15). Duke filluar të nesërmen, subjektet morën sesione trajnimi ditore për 10 ditë të njëpasnjëshme. Përgjigja për ushqimin u provua në bazë të procedurave të kondicionimit instrumental të botuar më parë (Baldwin et al., 2002b). Përgjigja ndaj levës së saktë (dmth. Aktive) është forcuar, ndërsa përgjigjja në levën tjetër (joaktive) / nosepoke nuk kishte pasoja të programuara. Pozicioni i koshit ose levës aktive (majtas / djathtas) ishte i balancuar për të gjitha grupet eksperimentale. Përfundimi i kërkesës për përgjigje (shih më poshtë) rezultoi në fillimin e dritës stimuluese të revistës, e ndjekur më vonë nga 1-ja me dorëzimin e një pelete të vetme ushqimore. Dy sekonda më vonë, drita e stimulimit u fikur. Përforcuesit e parë 10 janë marrë pas përfundimit të suksesshëm të përgjigjes sipas një raporti fiks (FR1), pas së cilës pellet ishin në dispozicion pas reagimit në një raport të ndryshueshëm (VR2). Sesioni zgjati për 15 min.
Eksperimentet 3 (minj) dhe 5 (minjtë) përdorën oraret alternative të trajnimeve për të shmangur ndikimin e mundshëm të dallimeve në performancën instrumentale gjatë trajnimit në raportin e mëvonshëm progresiv që i përgjigjet (detajuar më poshtë). Në eksperimentin 3, minjtë janë trajnuar në një skemë FR1 për 2 d dhe pastaj në një skemë FR2 për 8 d. 3 e parë e testimit përdoret seanca minimale 60. Në ditët e fundit të trajnimit 7, sesioni u ndërpre kur u përforcuan 50. Në eksperimentin 5, minjtë u stërvitën në orën FR1 / VR2 në seancat min të 15 siç përshkruhet më sipër për të gjitha eksperimentet e tjera me dy përjashtime. Së pari, u dha një numër maksimal i fishekëve 150 / sesion. Së dyti, këto kafshë morën 5 ditë shtesë të trajnimit (dmth. Një total prej 15 d) për të lejuar krijimin e performancës së qëndrueshme para çdo manipulimi eksperimental.
Kafshët u testuan gjithashtu për t'u përgjigjur për ushqim në një program raporti progresiv të përforcimit. Në këtë test, kërkesa e përgjigjes për të marrë ushqimin u iniciua si një skemë FR1, por u rrit gradualisht nga 2 për të marrë një përforcues të mëvonshëm (p.sh., përgjigjet 1, 3, 5, 7 ..., X + 2). Në eksperimentin e trajtimit të drogës duke përdorur minjtë, orari u rrit në mënyrë progresive nga 5, duke dhënë një orar përfundimtar të 1, 6, 11, 16 ..., X + 5. Të gjitha parametrat e tjerë u mbajtën identike me procedurën e trajnimit të detajuar më lart. Testi u ndërpre kur nuk ishte bërë përgjigje aktive për 5 min.
Zhvlerësim përforcues.
Efekti i zhvlerësimit të përforcuesit u ekzaminua duke përdorur prefeeding specifike përforcues. Këtu, minjve iu lejuan të hanë ushqime të pakufizuara ushqimore me bazë kokrrizash në kafazin e tyre të shtëpisë gjatë 3 h para testimit në orarin e raportimit progresiv të përforcimit siç përshkruhet më sipër.
Teknika kirurgjikale.
Kafshët janë anestetizuar duke përdorur Equithesin [një përzierje që përmban pentobarbitalin (35 mg / kg) dhe hidrogjen kloral (183.6 mg / kg) në etanol (10% v / v) dhe glikol propilen (39% v / v); të administruara në 4.32 ml / kg, ip]. Cannulas (Plastics One, Roanoke, VA) janë implantuar kirurgjikale që synojnë mbi bazën e NAc, duke përdorur pajisje Kopf stereotactic. Koordinatat stereotaktike të përdorura në lidhje me bregma ishin si më poshtë: anterior / posterior, + 1.5 mm; lateral / medial, ± 1.5 mm; ventral / dorsal, -6.0 mm (Paxinos dhe Watson, 1986). Kanunat u ankoruan në kafkë duke përdorur vida dhe çimento dentare. Obturatorët u vendosën në cannulë udhëzues për të parandaluar bllokimin. Pas operacionit, kafshët iu nënshtruan kujdesit postoperativ standard dhe u lejuan të mbuloheshin për 5 d para fillimit të çdo eksperimenti.
Infusions.
Infuzionet intracerebrale të vektorëve viralë u kryen në mënyrë bilaterale 40 h para fillimit të trajnimit (shih më poshtë). Shiringat e injektimit (matësi 31), duke zgjeruar 1 mm nën majën e kanulave udhëzuese, u ulën ngadalë në të njëjtën kohë në NAc të majtë dhe të djathtë dhe 1.0 μl / anë u infuzuan për një periudhë min 4 me një shkallë të infuzionit prej 0.25 μl / min duke përdorur një pompë mikroinfuzioni (PHD-5000; Harvard Aparatet, Holliston, MA). Gjilpërat e infuzionit u lanë në vend për 1 min pas përfundimit të infuzionit, dhe kanalet e bedjes u zëvendësuan. Vendosjet e kanulave u verifikuan histologjikisht pas përfundimit të eksperimenteve të sjelljes (shih Fig. 6B), dhe vetëm kafshët me kanulë të vendosur mirë u përfshinë në analizën statistikore të të dhënave eksperimentale.
Analizat histologjike dhe immunostaining.
Pas përfundimit të eksperimenteve, kafshët që kishin marrë operacione si pjesë e eksperimentit u anestetikuan me Equithesin dhe perfunduan transcardially me 0.1 m PBS (5 min) dhe 10% formalin (10 min) sipas procedurave standarde. Trurit u vendosën në formalin dhe më pas u vendosën në një zgjidhje fosfat-buffered sukroze (30%). Të gjitha trurit janë prerë në seksione 40 μm në një mikrotomë dhe përdoren për analiza histologjike të vendosjes së kanulës dhe shprehjes së proteinave.
Vendosja e kanulave është bërë në seksione të kundërta me të kuqe neutrale dhe montuar në slides mikroskop në plasticizer distylen dhe xylene (DPX) pas dehidratim etanol. Imunohistokimi u krye siç u përshkrua më parë (Hommel et al., 2003). Shkurtimisht, shprehja e β-galaktosidazës pas infuzionit HSV-LacZ është përcaktuar me imunofluorescent me një antitrup primar anti-β-galaktosidazë dhie (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Pas inkubacionit brenda natës, seksionet u shpënuan dhe më pas u inkubuan me një antitrupi sekondar anti-dhi fluoreshent të lidhur me Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Seksionet u lahen përsëri pasuar nga dehidratimi etanol dhe montimi në DPX. Seksionet e kontrollit pranë janë trajtuar në mënyrë identike pa përfshirjen e antitrupave primarë. Imunofluorescenca u vlerësua në 520 nm duke përdorur a Zeiss (Oberkochen, Gjermani) mikroskop me filtrin FITC dhe imazhet e kapura në të njëjtën kohë ekspozimi me Zeiss Sistemi i imazhit digjital Axiovision.
të dhëna statistikore
Të dhënat nga të gjitha eksperimentet u vlerësuan duke përdorur një ANOVA një, dy, ose trekahëshe e ndjekur nga testi post hoc i Scheffe ose Dunnett, duke korrigjuar krahasime të shumta, kur ishte e përshtatshme, duke përdorur testin e refuzimit vijues të Holm. Një vlerë prej p ≤ 0.05 është konsideruar statistikisht e rëndësishme.
Rezultatet
Eksperimenti 1: efektet e ekspozimit të përsëritur të drogës në performancën instrumentale dhe raporti progresiv i përgjigjet
Për të konfirmuar se paradigma jonë e përsëritur e ekspozimit të drogës prodhonte neuroadaptime funksionale të rëndësishme, ne fillimisht e vlerësuam sensibilizimin e locomotor si një masë prototypike të sjelljes së veprimit kronik të drogës. Rats janë dhënë injeksione dy herë në ditë nikotina (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokaina (15 mg / kg), ose amfetaminë (2.5 mg / kg), dhe aktiviteti lokomotor është testuar pas injektimit të parë ditë trajtimi 1 dhe 15 (shtesë Fig. 1A-E, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Analiza statistikore zbuloi një trajtim të rëndësishëm nga ndërveprimi ditor (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Me përjashtim të MDMA (p = 0.62), të gjitha medikamentet nxitën dukshëm më shumë aktivitet lokomotor (p.sh., sensibilizimi) në ditën 15 krahasuar me ditën 1 (nikotina, p ≤ 0.001, kokainë, p ≤ 0.001, amfetaminë, p ≤ 0.01). Injeksione të përsëritura kripur nuk kishin efekt. Asnjë nga trajtimet e drogës nuk ndryshoi aktivitetin lokal të lokomotoreve të matura gjatë periudhës së zakonit në ditën 15 (plotësuese Fig. 2A, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues).
Pesë ditë pas injektimit të fundit të drogës, ne shqyrtuam efektet e ekspozimit të mëparshëm të nikotinës, MDMA, kokainës ose amfetaminës në sjelljen instrumentale të përforcuar nga ushqimi. Të dhënat paraqiten për secilën prej tyre veçmas në Figura 1A-H duke përdorur të njëjtin grup kontrolli të kripur për krahasime. Ne kemi vërejtur se ekspozimi i mëparshëm ndaj secilës prej këtyre barnave në mënyrë të konsiderueshme dhe në mënyrë selektive ka rritur reagimin instrumental të përforcuar me ushqim (trajtimi me levë gjatë ditës së trajnimit, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; analiza post hoc: nikotina, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; kokaina, p ≤ 0.01; amfetaminë, p ≤ 0.001). Lartësia e vazhdueshme në reagimin instrumental të vërejtur në ecurinë asymptotic sugjeroi një përmirësim të mundshëm në motivim, në përputhje me rritjen e raportuar më parë pas ekspozimit të përsëritur psikostimulues (shih Diskutim). Prandaj testuam nëse ekspozimi i mëparshëm i përsëritur i drogës nxiti motivimin duke përdorur një plan të progresit progresiv. Ekziston një efekt statistikor i ekspozimit të mëparshëm të drogës në reagimin në levën aktive (trajtimi me ndërveprimin e levës, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Fig 2A) si dhe pika përfundimtare e thyerjes (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Fig 2B). Analiza shtesë tregoi se të gjitha trajtimet rritën si numrin e përgjigjeve aktive (nikotina, p ≤ 0.001, MDMA, p ≤ 0.05, kokainë, p ≤ 0.001, amfetaminë, p ≤ 0.001) dhe pika e thyerjes (nikotina, p ≤ 0.001, MDMA , p ≤ 0.01, kokainë, p ≤ 0.0001, amfetaminë, p ≤ 0.0001) në përputhje me efektin e këtyre trajtimeve në motivim. Duke pasur parasysh mungesën e efekteve të drogës në aktivitetin bazë të lokomotoreve dhe mungesën e efektit në shtytësit e levës jo aktive, nuk ka gjasa që rritja e përgjigjes për ushqimin në këto kushte pasqyron rritje jo specifike në aktivitetin motorik.
Figura 1.
Efekti i injektimeve të përsëritura të nikotinës (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokainës (15 mg / kg) ose amfetaminës (2.5 mg / kg) dy herë në ditë për 15 d në sjelljen e mëvonshme instrumentale. Kafshët u testuan së bashku, por për qartësi, efektet e secilit medikament janë paraqitur veç e veç, duke përdorur të njëjtin grup kontrolli të trajtuar me kripë. A (përgjigjet aktive) dhe B (përgjigjet jo aktive) tregojnë efektet e ekspozimit të mëparshëm të nikotinës; C, D, MDMA; E, F, kokaina; G, H, amfetaminë. Të dhënat përfaqësohen si mjete ± SEM.
Figura 2.
Efekti i trajtimit të mëparshëm të përsëritur (dy herë në ditë, 15 d) me solucion të kripur, nikotinë (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokainë (15 mg / kg), ose amfetaminë (2.5 mg / kg) në përgjigjen instrumentale në një orar progresiv të përforcimit. Të dhënat paraqiten si mjete EM SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, kripur; Nik, nikotinë; Kokainë, kokainë; Amf, amfetaminë; PR, raport progresiv.
Ekspozimi i mëparshëm i drogës gjithashtu nuk kishte efekt mbi peshën trupore të regjistruar para kufizimit të ushqimit, në ditën e parë ose të fundit të trajnimit instrumental, ose menjëherë para testit të raportit progresiv (shtesë Fig. 2B, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Qasja e kufizuar ushqimore për 3 d fillimisht ulte peshën e trupit në mesatarisht 91-92% të peshave të ushqyerjes së lirë. Në fund të testimit të sjelljes, peshat ishin kthyer në 97-99% të peshës së trupit të prerestrimit, dhe nuk u vërejtën dallime në mes të kafshëve të ekspozuara dhe të trajtuara me kripë. Ndryshimet në peshën e trupit dhe dallimet në uri apo oreks nuk duhet të kontribuojnë në mënyrë të konsiderueshme në përmirësimin e vëzhguar të performancës ose motivimit instrumental.
Eksperiment 2: overexpression inducible e ΔFosB në minj bitransgenic; performancës instrumentale
Ne pastaj shqyrtojmë nëse performanca instrumentale u rrit edhe në minj bitransgenic që ovcxpressively induce ΔFosB me selektivitet të shënuar në NAc dhe striatum dorsal (Kelz et al., 1999). Në këtë eksperiment, minjtë ΔFosB-ovekspresionuese u krahasuan me kontrollet e littermate që nuk e ekspresojnë ΔFosB sepse ato mbahen në doksikiklinë (shih Materialet dhe Metodat). Ne kemi vërejtur se shprehja e tepërt e ΔFosB në mënyrë të konsiderueshme ka rritur reagimin e ushqimit të përforcuar (shprehja e gjeneve me anë të levës gjatë ditës së trajnimit, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Fig 3A). Numri i përgjigjeve të bëra në aperturën joaktive nuk ishte e ndryshme midis dy grupeve (Fig 3B). Së bashku, këto të dhëna tregojnë se ekspresioni i ΔFosB në NAc dhe striatum dorsal selektivisht ka rritur performancën instrumentale
Figura 3
Efekti i mbizotërimit të striatumit inducibil të ΔFosB në minjtë bitransgjenik në performancën instrumentale. A, përgjigjet aktive. B, Përgjigjet joaktive. Të dhënat përfaqësohen si mjete ± SEM.
Për të përjashtuar se rritja e performancës instrumentale në kafshët e ΔFosB-ovekspressing mund të shpjegohet me ndryshime në oreksin ose urinë, pesha e trupit u regjistrua përpara kufizimit të ushqimit dhe në ditët e para dhe të fundit të trajnimit. ΔFosB nuk kishte efekt mbi peshën e trupit para kufizimit të ushqimit, as nuk kishte efekt në peshën e trupit gjatë testimit të sjelljes. Këtu, qasja e kufizuar e ushqimit për 3 d ul peshën trupore në një mesatare prej 87-89% të peshave të ushqyerjes së lirë. Në fund të testimit të sjelljes, peshat e kafshëve ishin 97-99% e peshave të trupit prerestrik, me ndryshime ekuivalente të shikuara në minjtë e kontrollit ΔFosB dhe kontrollit (shtesë Fig. 3A, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Prandaj është e pamundur që efektet e mundshme të shprehjes së tepërt të ΔFosB në uri ose oreks mund të japin llogari për përmirësime në reagimin instrumental të vërejtur.
Kur testimi në performancën instrumentale ishte përfunduar, ΔFosB overexpression nuk ndryshoi aktivitetin lokomotor bazë të matur gjatë një periudhe Min 30 (shtesë Fig. 3B, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Ky vëzhgim mbështet pikëpamjen se ndryshimet jo specifike në aktivitet nuk kontribuojnë në performancën e përmirësuar instrumentale të vërejtur në këto kafshë. Sidoqoftë, minjtë bitransgjenë që ekspresojnë fortësisht ΔFosB janë raportuar të shfaqin reagime të zgjeruara lokomotore ndaj kokainës akute dhe të përsëritura (Kelz et al., 1999). Sepse ne kemi përdorur një orar pak më të ndryshëm të tërheqjes nga doxycycline për të nxitur shprehjen e gjeneve (javët e 6 me kufizimin e ushqimit), kemi përcaktuar për të konfirmuar këtë fenotip. Në të vërtetë, minjtë e ekspresionit të ΔFosB treguan një rritje të konsiderueshme të aktivitetit lokal kur injektohen me kokainë krahasuar me kontrollet e tyre të mbetjeve të mbajtura në doksiciklin (trajtimi me shprehjen e gjeneve, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (shtesë Fig. 3C, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues).
Eksperiment 3: overexpression inducible e ΔFosB në minj bitransgenic; progresive
Duke pasur parasysh se ekspozimi i mëparshëm i drogës shkakton ΔFosB striatumin (Nestler et al., 2001) dhe u gjet këtu për të rritur raportin progresiv duke iu përgjigjur, ne testuam më tutje nëse shprehja mbizotëruese striatransformuese e ΔFosB gjithashtu rrit performancën në një program raporti progresiv të përforcimit. Një grup i ri i minjve është trajnuar për reagimin instrumental në kushte (shih Materialet dhe Metodat) që nuk kanë prodhuar dallime të rëndësishme në performancën instrumentale përpara se të testoheshin në raport progresiv duke iu përgjigjur (F(1,16) <1) Sidoqoftë, në testin e raportit progresiv kemi vërejtur një shprehje të konsiderueshme të gjenit nga ndërveprimi i levës (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Fig 4A) dhe konstatoi se minjtë e ekspresionit të ΔFosB, krahasuar me minjtë kontrolluese të littermate të mbajtura në doksiciklin, bënë një numër më të madh përgjigjesh aktive (p ≤ 0.05), ndërsa numri i përgjigjeve të levës joaktive nuk ishte i ndryshëm. Minjtë e ekspresionit ΔFosB gjithashtu arritën një pikë të lartë pushimi (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Fig 4B). Këto të dhëna sugjerojnë se, sikurse ekspozimi i mëparshëm psikostimulues, tejpërhapja striatake e ΔFosB rrit motivimin. Për shkak se numri i përgjigjeve joaktive nuk u ndryshua në minjtë ekzagjerues ΔFosB, rritjet jo specifike të aktivitetit nuk kanë të ngjarë të kontribuojnë në këto efekte. Kjo pikëpamje u mbështet më tej nga vlerësimet e aktivitetit lokomotor të bazës në të cilin nuk kishte dallim në mes të minjve që shprehin peshën e tepërt të ΔFosB dhe minjve të kontrollit të mbetjeve të mbajtura në doksikiklinë. Nuk ka dallime bruto në peshën e trupit në mes të kafshëve ΔFosB-ovekspressing dhe kontrollit ishin të dukshme si matur në ditën e testimit. Kështu, edhe pse kafshët ΔFosB-overexpressing do të lëshojnë më shumë reagime instrumentale të motivuara nga ushqimi, ata nuk duket se konsumojnë më shumë ushqime kur është në dispozicion të lirë. Shpjegimi më i mundshëm për këtë vëzhgim është se, megjithëse motivimi përcakton se sa vështirë një kafshë do të punojë për të fituar një përforcues, faktorë të tjerë shtesë (oreks, ngopje, gjendje metabolike etj.) Ndikojnë në sjelljen e ushqimit dhe në konsumimin aktual të ushqimit.
Figura 4.
Efekti i mbishprehjes induktive të FosB në minjtë bitransgjenikë në reagimin instrumental në një skemë progresive të përforcimit, para dhe pas zhvlerësimit të përforcuesit të ngopjes. A, B, Baza fillestare: përgjigjet e levës (A), pika e thyerjes (B). C, D, Pas zhvlerësimit të përforcuesit: përgjigjet e levës (C), pika e thyerjes (D). Të dhënat paraqiten si mjete EM SEM. * p <0.05.
Minjtë Bitransgenic ΔFosB të përdorura këtu shprehin ΔFosB në të gjithë striatumin. Ndërsa striatumi i barkut (përfshirë NAc) është përfshirë në procese motivuese, striatum dorsal argumentohet të përfshihet në marrjen e zakoneve instrumentale (Yin et al., 2004; Faure et al., 2005). Edhe pse nuk kemi vërejtur ndryshime në performancën instrumentale gjatë fazës së trajnimit duke përdorur një plan të ulët raporti me kufijtë maksimalë të përforcimit, kushtet relativisht rezistente ndaj zhvillimit të shprehive instrumentale (Dickinson, 1985), është e mundur që krijimi i zakoneve të mund të ndikojë në reagimin sipas programit progresiv. Kjo mundësi u testua drejtpërsëdrejti duke vlerësuar efektin e zhvlerësimit të përforcuesit duke prefeeding në raportin progresiv duke iu përgjigjur. Kjo prefeeding ka zhdukur efektin e ΔFosB në raportin progresiv duke reaguar, pa asnjë dallim në përgjigjen ose në pikën e thyerjes së vërejtur në mes të minjve të kontrollit të tepërt dhe të kontrollit të FosB (F(1,16) <1) (Fig 4C, D). Së bashku, këto të dhëna sugjerojnë se shprehja e tepërt striatake e ΔFosB nuk e ndryshoi ndjeshmërinë ndaj ndryshimeve në vlerën e rezultateve të shpërblimit duke përdorur këtë orar testimi. Përkundrazi, përgjigjja instrumentale e vërejtur në testin e raportit progresiv duket të jetë i orientuar nga qëllimi dhe pika e rritur e thyerjes së vërejtur në minjtë e ΔFosB që overexpresson ka të ngjarë që i atribuohet motivimit të rritur dhe jo rritjes së reagimit të zakonshëm.
Eksperimenti 4: shprehja e madhe e ΔFosB e ndërmjetësimit viral në thelbin e NAc: performanca instrumentale
Për të vlerësuar nëse seleksionimi i tepërt i ΔFosB në NAc mund të llogarisë sjelljen e vëzhguar në minj bitransgenic, ne kemi infuzion HSV-ΔFosB ose HSV-LacZ si kontroll, selektivisht në thelbin e NAc të minjve dhe kemi studiuar efektin e këtij manipulimi në ushqim - performanca instrumentale e përforcuar (Fig 5A, B). Pas trajnimit të revistës, HSV-ΔFosB ose HSV-LacZ u futën në bërthamën e AKK-së 40 h para fillimit të testimit të sjelljes. Vendndodhja e infuzionit dhe shtrirja e shprehjes gjenetike të ndërmjetësuar nga viruset janë paraqitur në Figura 6, A dhe B. Infuzimet e NAc të HSV-ΔFosB prodhuan një rritje të qëndrueshme në numrin e përgjigjeve aktive të bëra (shprehja e gjeneve me levë, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Fig 5A), e cila vazhdoi gjatë gjithë eksperimentit. Këto efekte ishin selektive, sepse nuk kishte efekte të rëndësishme të shprehjes së tepërt të ΔFosB brenda thelbit të NAc në numrin e përgjigjeve joaktive (Fig 5B) ose në aktivitetin lokomotor të regjistruar në ditën pas përfundimit të eksperimentit (të dhënat nuk janë treguar). Shpërndarja e tepërt e ΔFosB në NAc mimikoi kështu efektet e sjelljes të ekspozimit të mëparshëm të drogës ose mbiekspression striatural të ΔFosB.
Figura 5.
Efekti i infuzioneve të HSV-ΔFosB në bërthamën e NAc para trajnimit për reagimin instrumental. A, përgjigjet aktive. B, Përgjigjet joaktive. Të dhënat përfaqësohen si mjete ± SEM.
Figura 6.
A, Vendosjet e vendeve të infuzionit për eksperimentet vektor virale. Top, Qarqet e zeza të mbushura korrespondojnë me faqen e caktuar të infuzionit. Vetëm infuzione të bëra brenda ~0.5 mm e kësaj zone (dmth., Brenda bërthamës së NAc), siç tregohet nga rrethi, u konsideruan të pranueshme. Kafshët me infuzione të bëra jashtë kësaj zone janë përjashtuar nga analizat statistikore. Në fund, vend infuzion brenda NAc në një kafshë përfaqësuese. B, Verifikimi imunohistokemik i shprehjes së proteinave pas infuzionit të HSV-LacZ. Panelet e lartë tregojnë shprehjen β-galaktosidase brenda bërthamës së NAc (2.5 dhe 10 × zmadhim). Panelet e poshtme tregojnë mungesën e imunofluorescencës në seksionet e kontrollit ngjitur duke përdorur të njëjtën procedurë imunohistokimike pa përfshirjen e antitrupit primar.
Eksperiment 5: shprehja e madhe e ΔFosB e ndërmjetësimit viral në thelbin e NAc: raporti progresiv
Eksperimenti përfundimtar përcaktoi drejtpërdrejt nëse shtypja e tepërt e ΔFosB në bërthamën e NAc duke përdorur qasjen e transferimit gjenetik të virusit ishte e mjaftueshme për të rritur motivimin në minjtë. Këtu, HSV-ΔFosB u infuzua vetëm pas përfundimit të trajnimit instrumental, duke eliminuar çdo ndikim të mundshëm të ekspresionit të madh të ΔFosB gjatë trajnimit në testin e radhës progresive pasuese. Një grup i ri i minjve u trajnuan, si më parë, dhe u ndanë në grupe eksperimentale të balancuara në bazë të performancës së tyre në ditët e fundit të trajnimit. Kafshët më pas morën infusione bilaterale të HSV-ΔFosB ose HSV-LacZ në thelbin e NAc dhe u testuan në raport progresiv duke reaguar pas 5 d të overexpression. Analiza statistikore zbuloi një shprehje të rëndësishme të gjeneve nëpërmjet ndërveprimit të levës (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Fig 7A). Rats infuzion me HSV-ΔFosB bënë më shumë reagime aktive (p ≤ 0.01) krahasuar me ato të infuzuara me HSV-LacZ, ndërkohë që reagimi në levën joaktive nuk u prek. Në përputhje me këtë rritje, minjtë e infuzuar me HSV-ΔFosB gjithashtu kishin një pikë të lartë pushimi (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Fig 7B) se kafshët e infuzuara me HSV-LacZ. Nuk kishte asnjë efekt të ΔFosB në aktivitetin e lokomotoreve bazë të testuar me 1 h para testit të raportit progresiv (shtesë Fig. 4A, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Gjithashtu nuk kishte dallime në peshën e trupit në ditën e testimit të raportit progresiv (shtesë Fig. 4B, në dispozicion në www.jneurosci.org si material plotësues). Këto gjetje mbështesin vëzhgimet tona me minjtë transgenic ΔFosB-overepresspressing, dhe tregojnë se overexpression selektive e ΔFosB në NAc është e mjaftueshme për të rritur motivimin e lidhur me ushqimin.
Figura 7.
Efekti i infuzioneve të HSV-ΔFosB 5 d para testimit në përgjigjen instrumentale në një skemë progresive të përforcimit. Përgjigjet e A, Lever. B, pika e ndërprerjes. Të dhënat paraqiten si mjete EM SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.
Diskutim
Studimi i tanishëm demonstron që tejpërçimi i ΔFosB brenda NAc rrit sjelljen instrumentale të përforcuar nga ushqimir. Ekspozimi i mëparshëm ndaj kokainës, amfetaminës, MDMA-së ose nikotinës së rritur ka prodhuar një rritje të qëndrueshme në performancën pasuese instrumentale. Këto ekspozime të barnave gjithashtu rritën sjelljen e motivuar nga ushqimi në një progres progresi orar të përforcimit. Këto efekte të ekspozimit të mëparshëm të drogës u imituan nga ekspozimi i kufizuar i ΔFosB në striatum, duke përdorur minj të induktueshëm bitransgjenik (NSE-tTA × TetOP-ΔFosB) ose duke përdorur një virus të ri viral për të shprehur ΔFosB selektivisht në NAc. Veçanërisht, shprehja e tepërt e ΔFosB në thelbin e NAc, pasi reagimi instrumental ishte tashmë i fituar, motivimi i shtuar për ushqim nën orarin progresiv të raportit. Së bashku, gjetjet tona identifikojnë ΔFosB në thelbin e NAc si një ndërmjetësues i mundshëm i neuroadaptimeve të drogës që mund të nxisin sjelljen instrumentale, duke zgjeruar rolin për këtë faktor transkriptimi për të përfshirë procese me rëndësi për ndikimet motivuese në ecurinë e sjelljes së përforcuar nga ushqimi. Ata gjithashtu rrisin mundësinë që kushtet që shkaktojnë shprehjen ΔFosB në NAc mund të ndikojnë në vetitë motivuese të të dy forcave natyrore dhe të drogës.
ΔFosB akumulon në neuronet e mesme të dyfishtë të shprehura nga dynorfin, si nga NAc dhe nga striatum dorsal pas ekspozimit kronik, por jo akut, ndaj drogave të abuzimit. Ky model rajonal i shprehjes riprodhohet në minjtë e industueshme bitransgjenike ΔFosB-ovekspression që përdoren këtu. Në këto minj, nivelet e ngritura striatale të ΔFosB rrisin ndjeshmërinë e kafshëve ndaj kokainës dhe morfinës siç matet nga preferenca e vendit të kondicionuar (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Gjithashtu shton raportin progresiv që reagon ndaj kokainës duke sugjeruar që motivimi për vetë-administrimin e kokainës rritet me shprehjen stërhadore të ΔFosB (Colby et al., 2003). Këtu kemi gjetur se shprehja ΔFosB striatale në këto minj gjithashtu rriti raportin progresiv duke reaguar për një përforcues të ushqimit dhe se këto efekte janë riprodhuar nga ekspozimi i tepërt i kufizuar i ΔFosB në thelbin e NAc në mi. Të dhënat tona sugjerojnë që ΔFosB mund të veprojë si një modulator transkriptues i motivimit për përforcues primar, qofshin ushqim, drogë, ose ndoshta ushtrim, një ide në përputhje me vëzhgimet paraprake që shprehja striatake e ΔFosB rritet pas drejtimit kronik të rrotave ose pijes së sukrozësMcClung et al., 2004). Këto të dhëna sugjerojnë se overexpression NAc e ΔFosB mund të rrisë ndikimin motivues të të dy forcave natyrore dhe të drogës.
Subregionet e NAc janë argumentuar që në mënyrë të diferencuar ndërmjetësojnë ndikimin e proceseve nxitëse pavloviane ose instrumentale në performancën instrumentale (Corbit et al., 2001; de Borchgrave dhe të tjerët, 2002), ndërkohë që ndikimet më të përgjithshme motivuese në performancën instrumentale mund të kodohen nga rajone të tjera të tilla si bërthama qendrore e amigdalës (Corbit dhe Balleine, 2005). Sidoqoftë, bërthama e NAc është propozuar gjithashtu të jetë një vend kritik për përvetësimin e mësimit instrumental të orientuar nga qëllimi (Smith-Roe dhe Kelley, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004). Ne tregojmë efekte ekuivalente të ekspozimeve të mëparshme të drogës dhe ekspresion transgenik striatural ΔFosB në rritjen e sjelljes instrumentale. Infuzionet e HSV-ΔFosB të kufizuara në thelbin e NAc gjithashtu rritën reagimin instrumental të përforcuar nga ushqimi. Megjithëse këto eksperimente nuk përjashtojnë një kontribut të striatumit dorsal në këto sjellje, ato fuqimisht sugjerojnë që ndryshimet e shkaktuara nga ΔFosB në shprehjen e gjeneve brenda NAc janë të mjaftueshme për të rritur reagimin e motivuar nga ushqimi. Për shkak se raporti progresiv i përgjigjes u rrit edhe kur ΔFosB u shpreh pasi një performancë e qëndrueshme instrumentale ishte arritur më parë, duket një rol për ndikimet motivuese në sjelljen instrumentale. Megjithatë, mundësia që manipulimet tona të ndikojnë në proceset mësimore instrumentale nuk mund të përjashtohen plotësisht. Në mbështetje të konkluzioneve tona, rritja e performancës instrumentale të vërejtur pas ekspozimit të mëparshëm të kokainës me gojë (Miles et al., 2004) është argumentuar të përfshijë ndryshime motivuese në përputhje me aftësinë e trajtimit kronik të nikotinës për të rritur raportin progresiv në përgjigje të minjve (Brunzell et al., 2006). Për më tepër, minjtë knock-out të transporterëve dopamikë, në të cilët shtohen nivelet e shtresës së jashtme dopamine, shfaqin imunotaktimin e shtuar të ΔFosB dhe motivimin e përforcuar të ushqimit, por jo të mësuarit e ndryshuar (Cagniard et al., 2006). Për më tepër, ne kemi gjetur se overexpression i ΔFosB striatal në minj nuk ka ndikuar në performancën kur ushqimi ishte "zhvlerësuar" nga prefeeding. Këto të dhëna tregojnë se kafshët ishin të ndjeshme ndaj vlerave motivuese të përforcuesit dhe se reagimi ishte qëllimi i drejtuar.
Ekspozimi i përsëritur i drogës mund të përmirësojë kontrollin e sjelljes të ushtruar nga stimujt e kushtëzuar të lidhur me përforcuesit natyrorë, të matur me qasjen pavloviane (Harmer dhe Phillips, 1998; Taylor dhe Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), përforcim i kushtëzuar (Taylor dhe Horger, 1999; Olausson et al., 2004), dhe transferimin pavlovian-to-instrumental (Wyvell dhe Berridge, 2001). Tani ka prova bindëse se thelbi i NAc, në krahasim me predhën, është i përfshirë në kontrollin e sjelljes së motivuar nga droga nga stimulimet e kushtëzuara pavloviane (Parkinson et al., 1999, 2002; Hall et al., 2001; Dalley dhe të tjerët, 2002; Ito et al., 2004). Rezultatet tona mund të sugjerojnë që induksioni i drogës-induced i ΔFosB në NAc mund të jetë një mekanizëm me të cilin kontrolli i sjelljes rritet në këto procedura. Është gjithashtu e mundur që stimujt pavlovian të kushtëzuar, që veprojnë si përforcues të kushtëzuar, të kontribuojnë në efektet aktuale të sjelljes. Kontrolli i përmirësuar mbi sjelljen nga stimujt e tillë të kushtëzuar të ndërmjetësuar nga rritjet në ΔFosB striatake mund të kontribuojnë gjithashtu në efektin e proteinës në preferencën e vendit të kushtëzuar nga droga (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006) dhe raporti progresiv që përgjigjet për kokainën (Colby et al., 2003). Ndryshimet në proceset motivuese janë hipotetizuar për të kontribuar në zhvillimin dhe ruajtjen e sjelljes problematike (Robinson dhe Berridge, 1993; Jentsch dhe Taylor, 1999; Robbins dhe Everitt, 1999; Nestler, 2004). Të dhënat aktuale janë gjithashtu në përputhje me teoritë e tjera që theksojnë proceset e shumta instrumentale dhe pavloviane në sjelljen e varësisë (Everitt dhe Robbins, 2005). Puna shtesë është e nevojshme për të përcaktuar rolin e neuroadaptimeve të drogës dhe ΔFosB në NAc dhe në nën-rajonet e tjera limbike-striatale në lidhje me faktorët specifikë shoqërues ose motivues që mund të lehtësojnë performancën instrumentale dhe të kontribuojnë në sjelljen e sëmurë.
Megjithëse mekanizmat e saktë molekularë me të cilët nuk njihen ndryshime brenda ndikimit të AKK-së të motivuara nga armët primare ose të kushtëzuara (Kelley dhe Berridge, 2002), neuronet GABAergjike të shtresës së mesme të NAc konsiderohen një substrat kritik për plasticitetin e drogës dhe të përvojës. Këtu, kontributi dopaminergjik nga zona tegmentale e barkut dhe kontributi glutamatergik nga afferentët kortikolimik konvergojnë mbi dendritet e zakonshme dhe spines dendritike (Sesack dhe Pickel, 1990; Smith dhe Bolam, 1990). Ekspozimi kronik psikostimulues rrit dendësinë e spinave të tilla në neuronet në shell dhe core të NAc (Robinson dhe Kolb, 1999; Robinson et al., 2001; Li et al., 2003, 2004). Kohët e fundit, induksioni i sensibilizimit të sjelljes u shoqërua në mënyrë specifike me një rritje në spines dendriti brenda bërthamës së NAc (Li et al., 2004). Veçanërisht, rritja e kokainës në shtrirjen e shpinës vazhdon vetëm në D1- neuronet pozitive që coexpress ΔFosB (Robinson dhe Kolb, 1999; Lee et al., 2006). ΔFosB në thelbin e NAc mund të kontribuojë kështu në plasticitetin e qëndrueshëm synapik që mund të ndikojë në sjelljen instrumentale. Në të vërtetë, një rol kritik për neurotransmetimin dopamin-glutamat (Smith-Roe dhe Kelley, 2000), aktiviteti i protein kinazës A (Baldwin et al., 2002a), dhe de novo sintezën e proteinave (Hernandez et al., 2002) brenda thelbit të NAc në performancën instrumentale janë raportuar më parë. Ne tani e identifikojmë ΔFosB si një faktor transkriptimi që mund të zgjasë vazhdimisht përmirësimin e ushqimit të përforcuar kur tejpërdoret në thelbin e NAc. Gjenet specifike ose proteinat e përfshira në këto efekte mbeten të përcaktohen saktësisht. ΔFosB rregullon shprehjen e proteinave të shumëfishta në NAc të përfshira në neuroplasticitet (McClung dhe Nestler, 2003). Një analizë e fundit e mikroarresë karakterizoi modelet e shprehjes gjenetike në NAc të minjve bitransgjenik që shprehin ΔFosB të përdorur këtu, dhe identifikuan një nëngrup të gjeneve që janë rregulluar me shprehjen relativisht afatshkurtër të ΔFosB (McClung dhe Nestler, 2003). BDNF ishte një gjen i tillë dhe BDNF në këtë qark nervor është i njohur për të rritur reagimin ndaj cues të lidhura me drogën dhe ushqimin (Horger et al., 1999; Grimm et al., 2003; Lu et al., 2004). Një gjen tjetër i interesit është ciklin-dependent kinase 5 (Bibb et al., 2001), i cili gjithashtu nxitet nga ΔFosB, dhe mund të rregullojë si plasticitetin strukturor të kokainës (Norrholm et al., 2003) dhe motivimi i matur me raportin progresiv që përgjigjet për përforcuesit natyrorë ose të drogës (JR Taylor, vëzhgimet e pabotuara). Ende kandidatët shtesë janë nën-njësia GluR2 e receptorëve të glutamateve AMPA (Kelz et al., 1999) dhe faktori i transkriptimit NFκB (faktori bërthamor κB) (Ang dhe të tjerët, 2001). Do të ishte e rëndësishme të vlerësohen këto dhe proteina të tjera të rregulluara në nën-rajonet e NAc si kandidatë për të ndërmjetësuar efektet e sjelljes së ΔFosB në performancën instrumentale dhe motivimin.
La seria e eksperimenteve të pranishme jep dëshmi se tejpërçimi i ΔFosB brenda NAc mund të përmirësojë sjelljen e motivuar nga ushqimi dhe në këtë mënyrë të rregullojë performancën instrumentale, siç është treguar më parë për shpërblimet e drogës. Këto të dhëna ofrojnë dëshmi të reja që ΔFosB mund të veprojë si një kalim i përgjithshëm molekulare i lidhur me përmirësimet në aspektin motivues të përforcuesve në sjelljen e drejtuar nga qëllimi. Gjetjet tona ngrisin mundësinë që indukimi i NAc ΔFosB nga, për shembull, drogat e varësisë, stresi, ose ushqime ndoshta shumë të dobishme, mund të jetë një mekanizëm kritik me anë të të cilit shtetet motivuese jofunksionale rezultojnë në çrregullime psikiatrike të lidhura me sjelljen e sëmurë.
Shënimet
o Marr mars 15, 2006.
o Revizioni mori qershorin 23, 2006.
o Pranohet gusht 2, 2006.
Kjo punë u mbështet nga grante nga Instituti Kombëtar për Abuzimin e Narkotikëve, Instituti Kombëtar i Shëndetit Mendor dhe Instituti Kombëtar i Abuzimit të Alokimit dhe alkoolit. Falënderojmë me mirënjohje ndihmën e vlefshme të Dilja Krueger, Drew Kiraly, Dr Ralph DiLeone, Robert Sears dhe Dr. Jonathan Hommel në Departamentin e Psikiatrisë, Yale University. Ne gjithashtu i jemi mirënjohës Dr. Jennifer Quinn dhe Dr. Paul Hitchcott për dhënien e komenteve të dobishme për këtë dorëshkrim.
Korrespondenca duhet t'i drejtohet Jane R. Taylor, Departamenti i Psikiatrisë, Divizioni i Psikiatrisë Molekulare, Shkolla Universale e Mjekësisë Yale, Objektet e Kërkimit Ribicoff, Qendra e Shëndetit Mendor të Connecticut, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[email mbrojtur]
Copyright © Shoqëria 2006 për Neurosciencë 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Referencat
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) Induksioni i NFκB në nucleus accumbens nga administrimi kronik i kokainës. J Neurochem 79: 221-224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Holahan MR,
4. Kelley AE
(2002a) Mësimdhënia apetitive instrumentale është e dëmtuar nga frenimi i kinazës proteinike të varur nga cAMP brenda bërthamës accumbens. Neurobiol Mësoni Mem 77: 44-62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) Mësimi mësimor i heshtur kërkon aktivizimin e njëkohshëm të NMDA dhe dopamin D1 receptorët brenda korteksit medial paraballor. J Neurosci 22: 1063-1071.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Efektet e lezioneve të acidit ibotenik të bërthamës accumbens në veprimin instrumental. Behav Brain Res Përshkrim i Shkurtër: 65: 181-193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Varësia, dopamina dhe mekanizmat molekularë të kujtesës. Neuron 25: 515-532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinson TE
(2003) Shpërblimi i analizës. Trendet Neurosci 26: 507-513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P
(2001) Efektet e ekspozimit kronik ndaj kokainës rregullohen nga proteina neuronale Cdk5. Natyra 410: 376-380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-Subunit që përmbajnë receptorët nikotinik të acetilkolinës janë të përfshira në rritjen e nikotinës në përforcim të kushtëzuar, por jo në raport progresiv që reagon për ushqimin në minjtë C57BL / 6. Psikofarmakologjia (Berl) 184: 328-338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Minjtë me shfaqje kronike të rritur të dopaminit kanë rritur motivimin, por jo të mësuarit, për një shpërblim ushqimor. Neuropsychopharmacology 31: 1362-1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Rregullimi i shpërblimit të kokainës nga CREB. Shkenca 282: 2272-2275.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Hope BT,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ
(1997) Antigjenet kronike të lidhura me Fos: variante të qëndrueshme të ΔFosB të shkaktuara në tru nga trajtimet kronike. J Neurosci 17: 4933-4941.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Kafshët transgjenike me shprehje indicibile të gjenit në tru në tru. Mol Pharmacol 54: 495-503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Vetë DW
(2003) Shpejtësimi eksplicit i qelizave striatake të ΔFosB rrit nxitjen për kokainë. J Neurosci 23: 2488-2493.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Shkrirja e dyfishtë e lezioneve basolaterale dhe amygdale qendrore në format e përgjithshme dhe përfundimtare të transferimit pavlovian-instrumental. J Neurosci 25: 962-970.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Roli i bërthamës accumbens në kushtëzimin instrumental: dëshmi e një dissociimi funksional midis bërthamës dhe shellit të akumulatorëve. J Neurosci 21: 3251-3260.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamine dhe qasje të diskriminuar qasje: efektet interaktive të lezioneve 6-hydroxydopamine dhe administrimit apomorphine sistemike. Psikofarmakologjia (Berl) 161: 425-433.
17. ↵
1. de Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Efektet e lezioneve citotoksike nucleus accumbens në kondicionimin instrumental në minjtë. Eksp. Brain Res 144: 50-68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Ndërveprimet e drejtpërdrejta midis amygdalës bazolaterale dhe thelbit të nucleus accumbens nënkuptojnë sjelljen e kërkuar nga kokaina nga minjtë. J Neurosci 24: 7167-7173.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Pronat e përforcuara të stimujve të shoqëruar me kokainë, heroinë ose sukrozë të vetë-administruar: implikime për këmbënguljen e sjelljes problematike. Neurofarmakologjia 47 ([Suppl 1]) 202-213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Veprimet dhe zakonet: zhvillimi i autonomisë së sjelljes. Philos Trans R Lond B Sci Biol 308: 67-78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Sistemet nervore të përforcimit për varësinë nga droga: nga veprimet tek zakonet në detyrim. Nat Neurosci 8: 1481-1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) Humbja e sistemit të dopaminës nigrostriatal ndërpret formimin e zakonit të stimulimit-reagimit. J Neurosci 25: 2771-2780.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. Hope BT,
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Rritjet e varura nga koha në nivelet proteine të faktorit neurotrofik të trurit brenda sistemit mesolimbik të dopaminës pas tërheqjes nga kokaina: implikimet për inkubimin e dëshirës së kokainës. J Neurosci 23: 742-747.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
24. ↵
1. Hall J,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Përfshirja e bërthamës qendrore të bërthamës amygdala dhe nucleus accumbens në ndërmjetësimin e ndikimeve pavloviane në sjelljen instrumentale. Eur J Neurosci 13: 1984-1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Kondicionimi i rritur i nxituar pas përsëritjes së përsëritur me d-amfetaminën. Behav Pharmacol 9: 299-308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002) Konsolidimi i hershëm i të mësuarit instrumental kërkon sintezë të proteinave në nucleus accumbens. Nat Neurosci 5: 1327-1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Zhvendosja e gjeneve lokale në tru duke përdorur ndërhyrje virale të ndërmjetësuar nga ARN. Nat Med 9: 1539-1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Ngrohja e ndjeshme sensibilizon minjtë për efektet e dobishme të kokainës. Pharmacol Biochem Behav 37: 707-711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) Ngrohja ndaj amfetaminës dhe nikotinës i predispozon minjtë të vetë-administrojnë një dozë të ulët të kokainës. Psikofarmakologjia (Berl) 107: 271-276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Rritja e aktivitetit lokomotor dhe shpërblimi i kushtëzuar për kokainën nga faktori neurotrofik i lindur nga truri. J Neurosci 19: 4110-4122.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Kontrolli diferencues mbi sjelljen e kërkuar nga kokaina nga thelbi dhe shell i nucleus accumbens. Nat Neurosci 7: 389-397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulsiviteti që rezulton nga mosfunksionimi frontostriatal në abuzimin e drogës: implikimet për kontrollin e sjelljes nga stimujt e lidhur me shpërblimin. Psikofarmakologjia (Berl) 146: 373-390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Kontrolli striatral Ventral i motivimit appetitive: Roli në sjelljen e ushqimit dhe mësimin e lidhur me shpërblimin. Neurosci Biobehav Rev 27: 765-776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Nevojshmëria e shpërblimeve natyrore: rëndësia e barnave me drogë. J Neurosci 22: 3306-3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Vetë DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Shprehja e faktorit të transkriptimit ΔFosB në tru kontrollon ndjeshmërinë ndaj kokainës. Natyra 401: 272-276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetamin rregullon shprehjen e gjeneve në striatumin e miut nëpërmjet faktorit të transkriptimit CREB. J Neurosci 14: 5623-5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Formimi i shtyllës së dendritit të shkaktuar nga kokaina në receptorët e D1 dhe D2 që përmbajnë receptorët dopaminë që përmbajnë neuronet e mesme të mprehtë në nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci USA 103: 3399-3404.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) Vendndodhja e ndryshimeve të vazhdueshme të amfetaminës së detyruar në dendësinë e spines dendritike në neuronet e mesme të mprehtë në nucleus accumbens dhe caudate-putamen. Neuropsychopharmacology 28: 1082-1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Induksioni i sensibilizimit të sjelljes është i lidhur me plasticitetin strukturor të induktuar nga kokaina në bërthamën (por jo në shell) të bërthamës accumbens. Eur J Neurosci 20: 1647-1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Një infuzion i vetëm i faktorit neurotrofik që rrjedh nga truri në zonën tegmentale të barkut shkakton potencim afatgjatë të kokainës që kërkon pas tërheqjes. J Neurosci 24: 1604-1611.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) Rregullimi i shprehjes së gjeneve dhe shpërblimit të kokainës nga CREB dhe ΔFosB. Nat Neurosci 6: 1208-1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: një kalim molekular për përshtatjen afatgjatë në tru. Truri i trurit Respekti i trurit i trurit 132: 146-154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Aktiviteti i kushtëzuar dhe përforcimi instrumental pas konzumimit oral afatgjatë të kokainës nga minjtë. Behav Neurosci 118: 1331-1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Mekanizmat molekulare të varësisë nga droga. Neurofarmakologjia 47 ([Suppl 1]) 24-32.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Vetë DW
(2001) ΔFosB: një kalim i qëndrueshëm molekular për varësinë. Proc Natl Acad Sci USA 98: 11042-11046.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Shtimi i kokainës së spinave dendritike në nucleus accumbens varet nga aktiviteti i ciklin-varur kinazës-5. Neuroscience 116: 19-22.
47. ↵
1. Nye HE,
2. Hope BT,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Studime farmakologjike për rregullimin e induksionit antigjen kronik të FOS nga kokaina në striatum dhe nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671-1680.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Ekspozimi i përsëritur i nikotinës rrit mësimin e fituar në shpërblim në rat. Neuropsychopharmacology 28: 1264-1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Ekspozimi i përsëritur i nikotinës rrit reagimin me përforcim të kushtëzuar. Psikofarmakologjia (Berl) 173: 98-104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Shkëputja në efektet e lezioneve të bërthamës dhe bërthamës së bërthamës në sjelljen e apetit pavlovian dhe potencimi i përforcimit të kushtëzuar dhe aktivitetit lokomotor nga d-amfetamina. J Neurosci 19: 2401-2411.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardinali RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Nucleus accumbens sosje dopamine pengon blerjen dhe performancën e sjelljes appetitive approach Pavlovian: implikimet për mesoaccumbens funksion dopamine. Behav Brain Res Përshkrim i Shkurtër: 137: 149-163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Truri i miut në koordinatat stereotakse (Akademik, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Induksioni i ΔFosB në strukturat e trurit të lidhura me shpërblimin pas stresit kronik. J Neurosci 24: 10594-10602.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) Sensibilizimi i sjelljes nga stresi dhe farmakologjia rrit ndjeshmërinë ndaj marrjes së vetë-administrimit të amfetaminës. Rezistenca e trurit 514: 22-26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Substrate nervore të zakonshme për vetitë e Addictive të nikotinës dhe kokainës. Shkenca 275: 83-86.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Varësia e drogës: shprehitë e këqija shtohen. Natyra 398: 567-570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) Baza nervore e dëshirës së drogës: një teori stimuluese-sensibilizuese e varësisë. Brain Res Respektimi Trurit 18: 247-291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Ndryshime në morfologjinë e dendriteve dhe spines dendritike në bërthamë accumbens dhe korteksit paraballor pas trajtimit të përsëritur me amfetaminë ose kokainë. Eur J Neurosci 11: 1598-1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) Vet-administrimi i kokainës ndryshon morfologjinë e dendriteve dhe spines dendritike në nucleus accumbens dhe neocortex. Synapse 39: 257-266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Në nucleus accumbens mediale miu, terminalet hipokampale dhe katekolaminergjike konvergojnë në neuronet e shtyllave dhe janë në apozicion me njëri-tjetrin. Rezistenca e trurit 527: 266-279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Stuhia D,
4. Nestler EJ
(2003) Rregullimi i transkriptimit të CRE-së në trurin e miut nga amfetamina. Synapse 48: 10-17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Rrjeti nervor i ganglive bazale siç zbulohet nga studimi i lidhjeve sinaptike të neuroneve të identifikuara. Trendet Neurosci 13: 259-265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) Aktivizimi i njëkohshëm i NMDA dhe dopamin D1 receptorët brenda bërthamës së bërthamës së bërthamës janë të nevojshme për të mësuarit oreksiv instrumental. J Neurosci 20: 7737-7742.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) Përmirësimi i përgjigjes për shpërblimin e kushtëzuar të prodhuar nga amfetaminat intra-accumbens është potencuar pas sensibilizimit të kokainës. Psikofarmakologjia (Berl) 142: 31-40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Administrimi i përhershëm i drogave stimuluese psikomotorës ndryshon sjelljen e sjelljes pavloviane në rats: efektet diferenciale të kokainës, d-amfetaminës dhe 3,4-methylenedioxymethamphetamine ("Ecstasy") Psikologjia e Biologjisë 50: 137-143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Sensibilizimi i reaktivitetit të neuronit të dopamines midbrain promovon ndjekjen e amfetaminës. J Neurosci 22: 4654-4662.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) ΔFosB rregullon drejtimin e rrotave. J Neurosci 22: 8133-8138.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Ndjeshmëria stimuluese nga ekspozimi i mëparshëm i amfetaminës: rritje e nxitjes së nxitjes "të dëshiruar" për shpërblimin e saharozës. J Neurosci 21: 7831-7840.
Abstrakt / FALAS Tekst i Plotë
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Lëndimet e striatumit dorsolateral ruajnë pritshmërinë e rezultateve, por prishin formimin e zakonit në mësimin instrumental. Eur J Neurosci 19: 181-189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Një rol esencial për ΔFosB në bërthamë accumbens në veprim morfinë. Nat Neurosci 9: 205-211.
;