Biol Psikiatria. 2008 Dhjetor 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Korrik 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
Burim
Departamenti i Biologjisë Kafshëve, Universiteti i Pensilvanisë, Philadelphia, PA 19104-6046, SHBA.
Abstrakt
HISTORIKU:
Ndjeshmëria ndaj shpërblimit është implikuar si një faktor predispozues për sjelljet që lidhen me abuzimin e drogës, si dhe duke ngrënë. Megjithatë, mekanizmat themelorë që kontribuojnë në ndjeshmërinë e shpërblimit janë të panjohura. Ne hypothesized se një dysregulation në doping sinjalizuar mund të jetë një shkak themelor i rritjes ndjeshmëri shpërblim, ku stimuj të dobishme mund të veprojë për të normalizuar sistemin.
METODAT:
Ne kemi përdorur një model gjenetik të miut për rritjen e ndjeshmërisë së shpërblimit, Delta FosB-overexpressing mouse, për të shqyrtuar ndryshimet në rrugën e shpërblimit në përgjigje të një diete të shijshme me yndyrë të lartë. Shenjat e sinjalizimit shpërblim në këto minj janë ekzaminuar si në bazë dhe pas javëve 6 të ekspozimit të shijshëm të dietë. Mice u ekzaminuan në një test të sjelljes pas tërheqjes së dietëve me yndyrë të lartë për të vlerësuar vulnerabilitetin e këtij modeli në heqjen e stimujve të dobishme.
Rezultatet:
Rezultatet tona demonstrojnë ndryshim të aktivitetit të shpërblimit të shpërblimit përgjatë qarkut të zonës tegmentale të bërthamës accumbens-hypothalamic-ventral që rezultojnë nga shprehja e tepërt e Delta FosB në bërthamën accumbens dhe rajonet striatale. Nivelet e proteinave të detyrueshme të reagimit ciklon të fosforiluar monofosfat (cAMP) (PCREB) faktor neurotrofik i trurit (BDNF), dhe fosfoproteina dopaminike dhe ciklike adenosine monofosfat të rregulluar me një masë molekulare të 32 kDa (DARPP-32) në bërthamë accumbens u zvogëluan në minjtë Delta FosB, që sugjeronin sinjalizimin e reduktuar të dopamines. Gjashtë javë me ekspozim të lartë të yndyrës në dietë plotësisht zbutën këto dallime, duke zbuluar kapacitetin e fuqishëm të një diete të shijshme. Minjtë Delta FosB gjithashtu treguan një rritje të konsiderueshme në aktivitetin e lokomotor dhe përgjigjet lidhur me ankthin 24 orë pas tërheqjes së yndyrës së lartë.
PËRFUNDIME:
Këto rezultate krijojnë një ndjeshmëri themelore ndaj ndryshimeve në shpërblim në lidhje me disregulimin e Delta FosB dhe sinjalizimit dopamin që mund të normalizohet me dieta të shijshme dhe mund të jetë një fenotip predispozitë në disa forma të trashje.
Prezantimi
Pavarësisht nga njohuritë tona në rritje të sistemeve nervore që kontrollojnë oreksin dhe ngopje, normat e obezitetit vazhdojnë të rriten në Shtetet e Bashkuara. Trajtimet e tanishme të drogës kanë efikasitet të kufizuar dhe modifikimet e sjelljes vuajnë nga pajtueshmëria minimale afatgjatë (1). Konsumi i ushqimeve të dendura kalorike është i lidhur me ndryshimet në rrugët e stresit dhe shpërblimit në tru, duke sugjeruar që pronat e dobishme të ushqimeve të tilla mund të anashkalojnë sinjalet e bilancit të energjisë (2-4). Ushqimet e larta me yndyrë veprojnë si shpërblime natyrore, duke aktivizuar qendrat e shpërblimit të trurit në një mënyrë të ngjashme me drogën e abuzimit dhe si të tillë janë përdorur në paradigmat e vetëadministrimit (5-8). Kështu, ka të ngjarë që sjelljet dhe motivimi për ngrënie dhe abuzimi me drogat të ndajnë mekanizma të përbashkët themelor, potencialisht duke hapur rrugë të reja trajtimi për të dyja kushtet.
Në studimin e marrëdhënies midis ushqimeve të shijshme dhe rrugëve që rregullojnë shpërblimin dhe stresin në tru, ne kemi identifikuar më parë markerë molekulare dhe biokimike të shpërblimit të reduktuar dhe stres të rritur pas tërheqjes nga një dietë e shijshme e lartë e yndyrës (HF). Ngjashëm me medikamentet e abuzimit, ekspozimi ndaj një diete të shijshme në studimet tona rezultoi në nivele të rritura të faktorit të transkriptimit ΔFosB në nucleus accumbens (NAc), një strukturë shpërblimi qendror të trurit (9, 10). Minjtë që overpressure induktivë ΔFosB tregojnë rritje instrumentale duke iu përgjigjur një shpërblimi të ushqimit (11), duke i bërë ata një mjet të vlefshëm për të shqyrtuar rolin e ndjeshmërisë shpërblim dhe disregulimin afatgjatë të sistemit shpërblim në përgjigjet molekulare dhe biokimike në një dietë të shijshme.
Në studimin e tanishëm, ne shfrytëzuam minjtë ekzagjerues ΔFosB për të analizuar ndryshimet afatgjata në shënuesit e shpërblimit në neurocircuitry në zonën tegmentale të VTK-hypothalamus-ventralë në përgjigje të një diete të shijshme HF. Bazuar në studimet e mëparshme në këto minj të ndjeshëm ndaj shpërblimeve, ne supozuam që ndryshimet e shkaktuara nga ΔFosB në ndjeshmërinë e shpërblimeve përfshijnë një disregulim në sinjalizimin e dopaminës që rezulton nga reagimet NAc ndaj VTA. Më tej, ne supozuam që ekspozimi ndaj një shpërblimi natyror të një diete energjike të dendur HF do të normalizonte sistemin dopaminergjik në këto minj, duke rezultuar në një reagim të ekzagjeruar ndaj stresit të tërheqjes nga kjo dietë HF. Aspekti unik i përdorimit të një diete të shijshme si një substancë shpërblyese na lejon të përfshijmë inputet hipotalamike në shpërblim të qarkut në një fenotip që mund të jetë parashikues i një popullsie të predispozuar ndaj obezitetit rezistent ndaj trajtimit. Për të shqyrtuar këtë hipotezë, ne kemi studiuar shënuesit e neurotransmetimit të dopaminës, duke përfshirë pCREB, BDNF dhe DARPP-32 në NAc dhe tirozin hidroksilazë dhe transporterin dopamin në VTA, pas ekspozimit HF. Ne gjithashtu shqyrtuam shënues të veçantë të bilancit të energjisë të njohur për të ndikuar në prodhimin dopamin, duke përfshirë receptorët e leptin dhe oreksin në shprehjen VTA dhe oreksin brenda hypothalamus lateral.
Materialet dhe Metodat
kafshët
Minjtë bitransgjenikë që mbizotëronin me induksion ΔFosB në neuronet dinamorfin pozitive në NAc dhe striatum dorsal (Kelz et al., 1999) u krijuan në një sfond të përzier (ICR: C57Bl6 / SJL) në Qendrën Mjekësore Jugperëndimore të Universitetit të Teksasit dhe mbajtën dhe testuar në Universitetin e Pensilvanisë. Të gjitha minjtë u mbajtën në doxycycline (100 μg / ml në ujë të pijshëm) deri në mbërritjen në Universitetin e Pensilvanisë. Për të nxitur overexpression, doxycycline është hequr (n = 23) (12). Minj e kontrollit (n = 26) vazhdoi të marrë ilaçin. Mice u caktuan në grupet e dietës tetë javë pas heqjes së doxycyline në të cilën shprehja kohë ka treguar të arrijë nivelet maksimale (13). Mice u mbajtën në një cikël 12: 12 dritë-errët (dritat në 0700) me ushqim dhe ujë në dispozicion ad libitum. Të gjitha studimet u kryen në bazë të protokolleve eksperimentale të miratuara nga Komiteti i Kujdesit dhe Përdorimit të Institucioneve Shoqërore të Pensilvanisë, dhe të gjitha procedurat u zhvilluan në përputhje me udhëzimet institucionale.
Ekspozimi i dietës
Mice u mbajtën në shtëpi chow (n = 16) ose vendosur në HF (n = 16-17) për gjashtë javë. Chow shtëpi (Purina Lab Diet, St Louis, MO) përmban 4.00 kcal / g, i përbërë nga 28% proteina, 12% yndyrë, dhe 60% karbohidrate. Dieta HF (Research Diets, New Brunswick, NJ) përmbante 4.73 kcal / g, që përbëhej nga 20% protein, 45% yndyrë dhe 35% karbohidrate.
Biokimi dhe shprehja e gjeneve
Minjtë u analizuan pas gjashtë javë të ekspozimit në dietë. Trurit u hoqën nga kafka dhe ose të ngrirë të gjithë në akull të thatë ose NAc dissected (rreth 0.5 - 1.75 mm nga bregma, në një thellësi prej 3.5 - 5.5 mm) dhe të ngrira në azot të lëngshme. Tungja është ruajtur në -80 ° C derisa të analizohet.
Analizat biokimike
Metodat për blotet perëndimore janë përshkruar në materiale plotësuese. Antitrupat e përdorur ishin: Cdk5, CREB dhe BDNF (1: 500, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) dhe phospho-CREB (pCREB) (Ser 133).
Autoradiografia e receptorit
Metodat e hollësishme për autoradiografi përshkruhen në materiale plotësuese. Ligands të përdorura ishin 2 nM H3 - SCH 23390 dhe 5 nM H3 - spiperone (PerkinElmer, Boston, MA).
Hibridizimi në situ
Përpunimi i indit dhe hibridizimi janë kryer siç përshkruhet më parë (14). Prova DARPP-32 u sigurua me mirësjellje nga P. Greengard (Universiteti Rockefeller), dhe hetimi oreksin nga J. Elmquist (Universiteti i Qendrës Mjekësore Jugperëndimore të Teksasit). Slides testuar për DARPP-32 ishin caktuar për të filmuar për 3 ditë, dhe slides testuar për orexin ishin caktuar për të filmuar për 4 ditë. Kuantifikimi i imazheve të filmit u zhvillua siç u përshkrua më sipër (10).
QRT-PCR
ARN u izolua nga VTA dhe shprehja e gjeneve individuale të vlerësuara duke përdorur testet e shprehjes së TaqMan (Applied Biosystems, Foster City, CA). Metoda të hollësishme dhe analiza statistikore mund të gjenden në materiale plotësuese.
Analiza të sjelljes
Me qëllim të shqyrtimit të efekteve të ndjeshmërisë së shpërblimit në ndryshimet e sjelljes të nxitur nga dieta, një nëngrup i minjve u tërhoq nga HF pas katër javëve të ekspozimit dhe u kthye në shtëpi chow (n = kontroll 9, n = 8 ΔFosB). Njëzet e katër orë pas tërheqjes, minj u ekspozuan në testin e hapur në terren në përputhje me paradigmën e tërheqjes dietike të publikuar më parë (10). Shkurtimisht, miu u vendos në qendër të aparatit të fushës së hapur dhe u monitorua për pesë minuta. Kalimet e linjave totale, boli fekal, koha në qendër, dhe kalimet në qendër janë matur.
të dhëna statistikore
Të gjitha të dhënat, përveç njollave Western u analizuan duke përdorur një ANOVA dykahëshe e ndjekur nga testi PLSD i Fisherit me trajtimin e doksiciklinës (shprehja ΔFosB) dhe gjendjen e dietës si variablat e pavarur. Për analizat e RT-PCR, u përdor një vlerë e zvogëluar P për të korrigjuar krahasimet e shumta brenda grupeve të gjeneve të lidhura (shih materialet shtesë). Blots Western u analizuan duke përdorur testin t të studentit me trajtimin e doksiciklinës si variabël të pavarur, duke krahasuar dendësitë optike brenda të njëjtës njollë. Të gjitha të dhënat paraqiten si mesatare EM SEM.
Rezultatet
Dallimet bazike biokimike
Për të sqaruar rrugët molekulare që qëndrojnë në themel të ndjeshmërisë së shpërblimit të shtuar në minj të mbishprehur të ΔFosB, nivelet e disa molekulave kryesore të sinjalizimit u ekzaminuan në NAc. Kishte një tendencë për rritjen e niveleve të Cdk5 në NAc të minjve ΔFosB krahasuar me kafshët e kontrollit të shokut të mbeturinave të mbajtura në doksiciklinë (F = 5.1, P = 0.08; Fig. 1A). Minjtë ΔFosB shprehën nivele të reduktuara ndjeshëm të pCREB (F = 7.4, P <0.05; Fig. 1B) si dhe nivelet totale të CREB (F = 5.4, P = 0.05; Fig. 1C). Një zvogëlim i dukshëm në BDNF u vu re edhe në NAc të minjve ΔFosB (F = 10.6, P <0.05; Fig. 1D).
Figura 1
Zmadhimi i tepërt i minjve ΔFosB shfaqi shënuesit biokimik të sinjalizimit të reduktuar të dopaminës në NAc
Marrja e ushqimit dhe pesha e trupit në dietë të lartë yndyrë
Ne më tej shqyrtuam efektet e një diete HF natyrshëm të dobishme në ndryshimet në molekulat sinjalizuese në minjtë që shprehin ΔFosB. Nuk kishte dallime midis minjve ΔFosB dhe kontrolleve në marrjen e ushqimit në shtëpi ose në HF. Sidoqoftë, kishte një rënie të përgjithshme në marrjen e kalorive të normalizuar në peshën e trupit kur ekspozohej ndaj HF që ishte specifike për minjtë ΔFosB (F = 11.2, P <0.01; Fig. 2A). Në fund të gjashtë javëve të ekspozimit në dietë, minjtë që merrnin HF peshonin dukshëm më shumë sesa ata që ishin në dietë chow (F = 17.2, P <0.001), dhe minjtë ΔFosB peshonin më pak në përgjithësi sesa kontrollet (F = 5.6, P <0.05; Fig. 2B) Ky efekt ishte specifik për ndryshimet midis grupeve në dietën chow (P <0.05).
Figura 2
Minjtë e ekspresionit të ΔFosB nuk treguan asnjë dallim në marrjen e ushqimit në ushqimin e ngrënshëm ose të lartë (HF)
Ndryshimet biokimike në dietën e yndyrës së lartë
Për të përcaktuar se si diferencat bazë në sinjalizimin e NAc mund të ndryshohen nga dieta HF, të njëjtat proteina sinjalizuese të studiuara në bazë u shqyrtuan në kafshë që kishin marrë gjashtë javë HF. Nuk kishte dallime të konsiderueshme në nivelet Cdk5 (Fig. 3A). Nivelet e pCREB dhe CREB total nuk ishin më të ndryshme pas gjashtë javë të HF (Fig. 3B, C). Nivelet e BDNF u rritën ndjeshëm në minjtë ΔFosB pas gjashtë javëve të ekspozimit HF (F = 6.5, P = 0.05, Fig. 3D).
Figura 3
Dieta me yndyrë të lartë (HF) përmirëson dallimet sinjalizuese të vërejtura në NAc të minjve të ekspresionit të ΔFosB
Autoradiografia e receptorit dopamina
Ne përdorëm autoradiografinë e receptorëve për të vlerësuar nëse ndryshimet e shkaktuara nga ΔFosB në sinjalizimin e dopaminës në NAc janë të lidhura me ndryshimet në shprehjen e receptorëve të dopaminës (Fig. 4A). Dieta me yndyrna të larta duket se rrit pak dendësinë e lidhjes së receptorëve dopamine D1 (P = 0.14), dhe kjo ndryshim ishte më e madhe te minjtë ΔFosB (Fig. 4B). Kishte gjithashtu një tendencë drejt një rritje në zonën e lidhjes D1 pas HF (P = 0.06), dhe testimi post hoc tregoi që kjo të ishte domethënëse në minjtë ΔFosB (P <0.05; Fig. 4C). Në ndryshim nga receptorët D1, nuk ka ndryshime në dendësinë e lidhjes së receptorëve D2 (kontrolli chow = 97.6 ± 6.9, kontrolli HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) ose zona e lidhjes (chow kontroll = 47.3 ± 3.4, kontrolli HF = 53.8 6.0, ΔFosB chow = 51.9 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) në NAc janë vërejtur.
Figura 4
Dieta me yndyrë të lartë (HF) çoi në ndryshime në receptorin D1 receptor dopamin dhe shprehjen DARPP-32 në nucleus accumbens (NAc) të minjve overexpressing ΔFosB
Shprehja DARPP-32 në NAc
Hibridizimi in situ u përdor për të përcaktuar nivelet e shprehjes së DARPP-32 në NAc (Fig. 4D). Dieta me yndyrna të larta rriti ndjeshëm shprehjen e DARPP-32 në këtë rajon të trurit (F = 5.1, P <0.05) dhe kishte një ndërveprim të rëndësishëm midis dietës dhe shprehjes ΔFosB (F = 8.9, P <0.05), me minjtë ΔFosB ndryshimi i nxitur nga dieta (Fig. 4E). Një ndryshim themelor në shprehjen DARPP-32 midis minjve të kontrollit dhe ΔFosB u zbulua nga testimi post hoc (P <0.01), si dhe një rritje e konsiderueshme në shprehjen e DARPP-32 në minjtë ΔFosB në HF (P <0.01).
Shprehja e Genes në VTA
QRT-PCR u përdor për të vlerësuar ndryshimet në shprehjen e gjeneve në VTA, duke synuar disa gjene kryesore të implikuara më parë në rregullimin e shpërblimit. Të gjithë mostrat u normalizuan në β-aktin. Për të siguruar që shprehja e β-aktinës nuk u ndryshua nga trajtimi, u zhvillua një provë e veçantë për të krahasuar β-aktin me një kontroll të dytë të brendshëm, GAPDH. Nuk kishte dallime të konsiderueshme në shprehjen e β-aktinës (vlerat ΔCT, β-aktin - GAPDH: kontrolli chow = 2.29 ± 0.21, kontrolli HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Expressionshtë vërejtur një prirje për një ndërveprim midis shprehjes ΔFosB dhe trajtimit dietë për shprehjen e hidroksilazës së tirosinës (F = 3.6, P <0.06; Fig. 5A). Gjashtë javë të ekspozimit ndaj HF duket se ulin shprehjen e hidroksilazës së tirozinës në minjtë e kontrollit dhe rrisin shprehjen në minjtë ΔFosB. Një ndërveprim i rëndësishëm midis shprehjes ΔFosB dhe ekspozimit në dietë u vu re për shprehjen e transportuesit të dopaminës (F = 6.7, P <0.03; Fig. 5B). Ngjashëm me hidroksilazën e tirosinës, ekspozimi ndaj HF zvogëloi shprehjen e transportuesit të dopaminës në minjtë e kontrollit dhe rrit ndjeshëm shprehjen në minjtë ΔFosB (P <0.05). Dallimi bazë në shprehjen e transportuesit të dopaminës midis minjve të kontrollit dhe ΔFosB nuk arriti rëndësi (P = 0.16), por pas 6 javësh HF, minjtë ΔFosB shprehën nivele të ngritura dukshëm të transportuesit të dopaminës në krahasim me kontrollet (P <0.05).
Figura 5
Ekspozimi i lartë i dietës së yndyrë (HF) dhe shprehja ΔFosB çuan në ndryshime në shprehjen e një numri të molekulave kyçe në VTA
Kishte një prirje që tregon një efekt të rritjes së shprehjes ΔFosB për të ulur nivelet e TrkB në VTA (F = 5.7, P <0.04; Fig. 5C). Megjithëse nuk kishte efekte kryesore në shprehjen e receptorëve κ-opioid, ekzistonte një prirje drejt shprehjes së zvogëluar në minjtë ΔFosB (P = 0.08; Fig. 5D). Shprehja e receptorit të leptinës u përcaktua edhe në VTA. U gjet një efekt i rëndësishëm i ekspozimit në dietë (F = 6.1, P <0.03), me HF që zvogëlon ndjeshëm nivelet e receptorit të leptinës në VTA në të dy ΔFosB dhe minjtë e kontrollit (Fig. 5E). Shprehja e receptorit të oreksinës 1 në VTA u ekzaminua gjithashtu. Ka pasur një efekt të rëndësishëm të dietës në shprehjen e receptorit të oreksinës (F = 9.0, P <0.02), me minjtë e ekspozuar ndaj HF që shprehin nivele më të larta në VTA (Fig. 5F). Ekzistonte gjithashtu një prirje që minjtë ΔFosB të shprehnin nivele të përgjithshme më të larta të receptorit 1 të oreksinës në këtë rajon të trurit (P <0.05).
Shprehja e Orexin në hypothalamus lateral
Ne matëm nivelet e oreksinës në hipotalamusin anësor, origjina e inervimit oreksinergjik të VTA, nga hibridizimi in situ (Fig. 6A). Kishte një ndërveprim të rëndësishëm midis shprehjes së ΔFosB dhe ekspozimit të dietës në shprehjen e oreksinës (F = 9.1, P <0.01), me HF që rrit ndjeshëm nivelet e oreksinës në minjtë e kontrollit (P <0.05) dhe zvogëlon shprehjen te minjtë ΔFosB (Fig. 6B). Megjithëse nuk kishte ndryshime të rëndësishme në shprehjen e oreksinës në gjendjen bazale, pas 6 javësh HF, minjtë ΔFosB shprehën nivele të reduktuara ndjeshëm të oreksinës në krahasim me kontrollet (P <0.05).
Figura 6
Dieta me yndyrë të lartë (HF) kishte efekte diferenciale në shprehjen orexin në kontroll (Ctrl) dhe minjtë e ekspresionit ΔFosB
Beanaliza të sjelljes
Për të vlerësuar ndryshimet në eksitim dhe emocionalitet për shkak të ndryshimit të dietës, minjtë u ekspozuan ndaj testit të fushës së hapur 24 orë pas tërheqjes së dietës HF (10). Kryqëzimet totale të vijave, të cilat u shënuan si një masë e zgjimit, u ndikuan ndjeshëm nga shprehja ΔFosB (F = 6.6, P <0.05) dhe dieta (F = 4.6, P <0.05; Fig. 7A). Minjtë ΔFosB ishin më aktivë në mjedisin e ri sesa kontrilët, dhe testimi post hoc tregoi se minjtë e tërhequr nga HF ishin dukshëm më aktivë sesa ata të ekspozuarit ndaj chow (P <0.05). Boli i fekaleve u numërua si një masë e sjelljes së ngjashme me ankthin (10). Ekzistonte një efekt kryesor i shprehjes ΔFosB (F = 10.2, P <0.01), me minj mbivlerësues të ΔFosB duke prodhuar më shumë boli fekal në mjedisin e ri, veçanërisht në grupin e tërheqjes së shtëpisë dhe në tërheqjen e HF (Fig. 7B). Minjtë ΔFosB të mbajtur në dietë HF prodhuan më pak boli fekal sesa ata të mbajtur në chow dhe ata që tërhiqeshin 24 orë para testit. Minjtë e kontrollit nuk duket se janë prekur nga dieta. Nuk kishte efekte domethënëse të shprehjes ΔFosB ose dietës në kohën e kaluar në qendër të fushës së hapur (kontrolli i zakonshëm = 14.5 3.1 sek, kontrolli HF = 18.0 ± 3.2 sek, kontrolli W / D = 15.4 ± 1.9 sek, kontrolli ΔFosB = 16.9 ± 2.4 sek, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 sek, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 sek)
Figura 7
Mouse over-expressing ΔFosB ishin më të ndjeshëm ndaj efekteve të tërheqjes me dietë të lartë yndyrë (HF)
Diskutim
Në trajtimin e trashje, ekziston një nevojë kritike për identifikimin e faktorëve që ndikojnë në ndjeshmërinë ndaj ngrënies dhe shtimit të peshës. Rrugët e shpërblimit të trurit luajnë një rol të rëndësishëm në motivimin dhe përgjigjen ndaj ushqimeve të shijshme dhe ndryshimeve dietike (6, 10, 15, 16). Si sinjale oreksigenike dhe anorexigenike mund të ndikojnë drejtpërsëdrejti në shpërblimin e shpërblimit nëpërmjet një qarku hipotalamusi-VTA-NAc, sqarimi i gjeneve të përgjegjshëm ndaj dietave të shijshme të pasura me energji brenda qendrave të shpërblimit mund të ofrojnë objektiva të reja terapeutike në trajtimin e trashjes (17, 18). Prandaj, ne kemi analizuar shënuesit biokimike dhe molekulare të shpërblimit dhe sinjalizimit të bilancit të energjisë përgjatë qarkut të hypothalamus-VTA-NAc në përgjigje të një diete HF në minjtë e ΔFosB-ovekspressing si një model i ndjeshmërisë së shtuar ndaj ndryshimeve në shpërblim (13, 19, 20) , dhe ndjeshmërinë e sjelljes pas tërheqjes së dietës. Ne hypothesized se dysregulation basal e sinjalizimit dopamine në minj ΔFosB do të normalizohet nga efektet e dobishme e një dietë HF, që përfshin kryqëzimin e sinjaleve të bilancit të energjisë dhe të sistemit dopamin.
Për të shqyrtuar shënuesit që tregojnë një disregulim në sinjalizimin e dopaminës në NAc, ne shqyrtuam nivelet e receptorit të D1 dhe efektorët e poshtëm. Megjithëse nuk kishte dallime të rëndësishme në receptorin e receptorit D1, ka pasur një trend për ekspozimin e HF për të rritur zonën e detyrueshme në minjtë ΔFosB. Kjo është interesante si induksioni i ΔFosB nga droga dhe shpërblimet natyrore duket të mbizotërojnë në subtype dynorphin-pozitive të neuroneve të mesme me gjemba që kryesisht shprehin receptorët D1 (9, 21). Nivelet e targetit pCREB të sinjalizimit të dopaminës në drejtim të rrymës ishin reduktuar ndjeshëm në minjtë ΔFosB, duke mbështetur aktivizimin e receptorit të reduktuar D1 në këtë rajon të trurit (22, 23). Interesante, ne gjithashtu kemi zbuluar një rënie të ndjeshme në nivelet totale të CREB në minj ΔFosB, duke sugjeruar një kapacitet të reduktuar më tej për transmetimin e sinjalit të dopaminës që mund të jetë sekondar ndaj reagimeve që rezultojnë nga një rënie e zgjatur në pCREB (24). Shprehja BDNF rregullohet nga pCREB, është ngritur me aktivizimin e D1 dhe është një ndërmjetës i rëndësishëm i neuroplasticitetit të shpërblimit në NAc (25, 26). Prandaj, ne kemi zbuluar një rënie të ndjeshme të proteinës BDNF në NAc të minjve ΔFosB.
Të gjithë neuronet e mesme të shtyllës në NAc shprehin DARPP-32 (27). Efekte të shumta të saj në rrjedhën e sipërme e bëjnë atë një lojtar vital në rrugët e shpërblimit (28), dhe është përfshirë në varësinë e drogës dhe në çrregullime të tjera që përfshijnë sistemin dopamin, përfshirë çrregullimet emocionale dhe skizofreninë (27, 29). Ne zbuluam reduktime thelbësore bazë në shprehjen DARPP-32 në NAc të minjve ΔFosB. Shprehja DARPP-32 është e rregulluar nga BDNF dhe për këtë arsye shprehja e zvogëluar mund të lidhet drejtpërdrejt me reduktimet në nivelet e BDNF të zbuluara në minjtë ΔFosB (27, 29, 30). Edhe ndryshimet e moderuara në gjendjen e fosforilimit të DARPP-32 mund të çojnë në ndryshime substanciale në sinjalizimin intracelular brenda NAc (27). Studimet e mëparshme nuk kanë raportuar ndryshime në proteina DARPP-32 në minj ΔFosB pas një largimi 12-wk nga doksiciklin kur u krye një vlerësim më i gjerë striatum (31) duke sugjeruar se efektet e ΔFosB në DARPP-32 mund të jenë specifike për kohën dhe rajonin.
Ne supozuam se ulja dramatike e indekseve të sinjalizimit të dopaminës në NAc të minjve ΔFosB ka të ngjarë të përfshinte ndryshime në neuronet e projeksionit të dopaminës VTA, edhe pse ΔFosB nuk është tepër e shtypur brenda këtyre neuroneve. Prandaj, kemi ekzaminuar shprehjen e gjeneve të lidhura me dopamin në VTA, duke përfshirë tirozin hidroksilazën dhe transporterin e dopaminës. Nivelet e tirozin hidroksilazës dhe transportuesit dopamin janë të lidhur pozitivisht me prodhimin e dopamines. Ekziston një trend për minjtë ΔFosB që shfaqin reduktim të hidroksilazës së tirozinës dhe një reduktim të ndjeshëm në transportuesin dopamin, në përputhje me rregullimin e dopingut në NAc. Meqë këto reduktime basale në gjenet e lidhura me dopamin në VTA të minjve ΔFosB pasqyrojnë pasqyron ndryshimet e kthyera nga NAc gjatë ekspresionit afatgjatë ΔFosB, kemi ekzaminuar shprehjen e receptorit BDNF, TrkB, si një mekanizëm i mundshëm i komenteve NAc tek VTA (32). Ngjashëm me tirozin hidroksilazë dhe transporter dopamin, shprehja TrkB gjithashtu tregoi një trend që do të reduktohet në mënyrë të ulët në minjtë ΔFosB që nuk kanë arritur domethënie kur korrigjohen për krahasime të shumëfishta. Kompleksi BDNF-TrkB mund të transportohet retrogradisht dhe të veprojë brenda VTA për të ndikuar në shprehjen lokale të gjeneve dhe për të nxitur rritjen dhe mirëmbajtjen e qelizave (33). Më tej, aktivizimi i BDNF i TrkB presynaptic brenda NAc mund të stimulojë direkt neurotransmetimin dopamin (32), duke mbështetur një zvogëlim themelor të sinjalizimit dopamin në këto minj.
Aktivizimi i Dynorphin i receptorëve κ-opioid rregullon sinjalizimin dopamin dhe është një mekanizëm tjetër ku NAc jep reagime ndaj VTA (34). Ne kemi gjetur se shprehja e receptorit κ-opioid në VTA tregoi një tendencë për t'u reduktuar në minjtë ΔFosB. Meqë ΔFosB overexpression ka treguar të ulë shprehjen e dynorphin në NAc (20), ΔFosB minj ka gjasa të ketë reduktime të thella në rrjetin VTA κ-aktivizimi opioid. Megjithëse sinjalizimi i dynorfinës ushtron normalisht një efekt frenues në neuronet dopamine (35), minjtë që tregojnë vetë-administrim të shtuar të ilaçeve të abuzimit shfaqin nivele të reduktuara të dynorfinës në NAc, duke treguar një rol për sinjalizimin e dynorfinës së zvogëluar në rritjen e ndjeshmërisë së shpërblimit (36 , 37). Rregullimi i sistemit dynorfinë - κ-opioid ka qenë i lidhur me përvetësimin dhe qëndrueshmërinë e abuzimit të drogës, duke mbështetur një ekuilibër kritik të sinjalizimit opioid në normalizimin e rrugëve të dopaminës (38).
Duke u bazuar në kapacitetin shpërblyes të një diete energjike të dendur HF, ne supozuam se një disregulim në dopamin dhe shpërblim shpërblimi opioid në minj ΔFosB do t'i predispozonte këta minj për të rritur përgjigjet e shpërblimit në një dietë të tillë, duke normalizuar kështu sistemin e shpërblimit nëpërmjet aktivizimit të hypothalamus -VTA-NAc qark. Gjatë ekspozimit gjashtë javë të dietëve, nuk u vërejtën dallime në marrjen e ushqimit ndërmjet ΔFosB dhe minjve të kontrollit, duke sugjeruar që ndryshimet e gjetura në shënuesit biokimik dhe molekulare të sinjalizimit shpërblues në minjtë ΔFosB nuk ishin për shkak të dallimeve në kaloritë e konsumuara. Siç është parashikuar, diferencat bazale të zbuluara në pCREB, nivelet e receptorit total CREB, BDNF, DARPP-32 dhe κ-opioid ndërmjet ΔFosB dhe minjve të kontrollit u zbehën, të mundshme për shkak të rritjes së prodhimit dopamin në minjtë ΔFosB në HF (29, 39-41) .
Ekzaminimi i dy tirozin hidroksilazës dhe transporterit dopamin në VTA zbuloi përgjigjet kundërshtuese të habitshme të ΔFosB dhe minjve të kontrollit pas HF. Minj e kontrollit tregoi një rënie në shprehjen e tirozin hidroksilazës dhe transporterit dopamin, ndërsa minjtë ΔFosB shfaqën një rritje të shprehjes së të dy këtyre gjeneve të lidhura me dopamin. Është interesante që shprehja e tirozin hidroksilazë ndryshohet në VTA nga administrimi kronik i kokainës ose metamfetaminës (42-44), duke sugjeruar që minjtë AFAs mund të gjejnë shpërblimin natyror të HF më të spikatur sesa minjtë e kontrollit.
Në mënyrë që të shqyrtojmë se si mund të futen potencialë hipotalamika tek VTA mund të transmetojnë sinjale që reflektojnë balancën e energjisë, ekzaminimi i shprehjes së receptorit të leptinit dhe receptorit oreksin-1. Nivelet e qarkullimit të leptinit rriten me HF dhe leptina mund të veprojë në VTA për të ndryshuar sinjalizimin e dopamines (18, 45). Shprehja e receptorit të leptinës VTA u zvogëlua në mënyrë të ngjashme nga HF në të dyja ΔFosB dhe miunët e kontrollit, në përputhje me fitimin e peshës të ngjashme dhe marrjen e dietës ndërsa në HF. Lartë yndyra gjithashtu rrit shprehjen e receptorit oreksin-1 në VTA të të dy ΔFosB dhe minjve të kontrollit. Oreksina aktivizon neuronet e dopaminës në VTA, promovon plasticitetin VTA dhe rrit nivelin e dopaminës në NAc (46-48). Dieta me yndyrë të lartë është treguar të rrisë shprehjen orexin në minj, në përputhje me vëzhgimet tona (49, 50). Kështu, rritja e shprehjes së receptorit të oreksinës si dhe ndryshimet në sinjalizimin e leptin në VTA mund të nxisin shpërblimin e dietë në të dyja ΔFosB dhe minj të kontrollit, duke mbështetur një shkëputje midis rrugëve që transmetojnë sinjale të bilancit energjetik dhe ato të lidhura direkt me shpërblimin.
Për të shqyrtuar efektet e nxitjes së stresit të tërheqjes së shpërblimeve, minj u ekzaminuan në një test në fushë të hapur 24 orë pas heqjes së HF. Minjtë ΔFosB ishin më të ndjeshëm ndaj efekteve akute të tërheqjes së preferuar të dietit, duke treguar rritje të aktivitetit arousal dhe prodhimin e fekaleve në arenën e re të hapur krahasuar me të gjitha grupet e tjera të kontrollit dhe dietës. Minjtë ΔFosB treguan gjithashtu një model interesant të sjelljes në këtë test që sugjeron shpërblimin dhe ndjeshmërinë e stresit, me dietën e HF që fillimisht redukton prodhimin boli të fekaleve në krahasim me ushqim, dhe tërheqja përsëri e shton këtë përgjigje lidhur me ankthin. Kjo rritje e vëzhguar në aktivitetin në fushë të hapur nuk korreloi me ndryshimet në shprehjen orexin, duke sugjeruar një marrëdhënie me zgjimin e stresit që nuk është thjesht një efekt i ndryshimeve në sinjalizimin e ndërmjetësuar nga orexin. Në përgjithësi, këto të dhëna mbështesin hipotezën tonë se minjtë ΔFosB do të ishin më të ndjeshëm ndaj efekteve akute të tërheqjes së preferuar të dietës për shkak të ndjeshmërisë së tyre të shpërblimit të rritur.
Si e bën shprehja afatgjatë e ΔFosB në NAc të çojë në ndryshime të tilla në sjelljen dhe shpërblimin e sinjalizimit? Ne kemi propozuar një model të zbulimit të rastësishëm VTA ku reagimet e ndryshuara nga NAc dhe hypothalamus transmetojnë sinjale në lidhje me gjendjen e shpërblimit për të përcaktuar rregullimin e sistemit dopamin që mund të mbështesë një lidhje midis disregulimit të rrugës së shpërblimit dhe një predispozicioni për obezitetin (Figura 8). Gjatë ekspozimit të HF, hyrjet e shumta që pasqyrojnë të dyja bilancin e energjisë dhe gjendjen e shpërblimit konvertohen në VTA. Rritja e sinjalizimit të leptin dhe oreksin si dhe reagimet e ndryshuara nga NAc në hypothalamus lateral mund të ndikojnë se si këto sinjale oreksigjenike reagojnë ndaj HF në minj ΔFosB (17, 18, 45, 47, 51-53). Nivelet e larta të nxitura nga dieta në yndyrë në BDNF mund të ofrojnë reagime shpërblimi për VTA, duke promovuar më tej ndryshimet në shprehjen e gjeneve të lidhura me dopamin.
Figura 8
Dieta me yndyrë të lartë (HF) normalizon sinjalizimin shpërblim të parregulluar në minjtë ΔFosB
Këto rezultate përshkruajnë markerë molekulare të ndjeshmërisë së shpërblimit dhe tregojnë se disregulimi afatgjatë i sistemit dopamin mund t'i predispozojë një individi të varësisë dhe obezitetit. Më tej, këto të dhëna ofrojnë një hap të rëndësishëm drejt përcaktimit të objektivave të reja terapeutike të mundshme në trajtimin dhe parandalimin e obezitetit dhe çrregullimeve të tjera që mund të përqendrohen në sistemin e shpërblimit. Në të ardhmen, do të jetë e rëndësishme të hetohet se si ky sistem reagon ndaj heqjes së dietës HF, si dhe të hetojë çdo ndryshim gjinor në ndjeshmërinë ndaj shpërblimit dhe ekspozimit të lartë të dietëve yndyrore.
Materiale plotësuese
Supp. metodat
Kliko këtu për të parë. (61K, doc)
Mirënjohje
Autorët dëshirojnë të falenderojnë Cathy Steffen për ndihmë me mbarështimin dhe transferimin e kafshëve. Kjo punë u mbështet nga një grant nga Qendra e Diabetit të Universitetit të Pensilvanisë (DK019525) dhe nga grante nga Instituti Kombëtar i Shëndetit Mendor (R01 MH51399 dhe P50 MH66172) dhe Instituti Kombëtar për Abuzimin e Drogës (R01 DA07359).
Shënimet
Dhënia e informacioneve shpjeguese financiare: Të gjithë autorët deklarojnë se nuk kanë interesa financiare biomjekësore apo konflikte të mundshme të interesit.
Referencat
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarver DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Prova e rastësishme e modifikimit të jetesës dhe farmakoterapisë për obezitetin. N Engl J Med. 2005; 353 (20) 2111-20 [PubMed].
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Shpërblimi i reduktuar i nikotinës në trashje: krahasimi i tërthortë në njeriun dhe miun. Psikofarmakologjia (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Ndryshimet individuale në ndjeshmërinë e shpërblimit lidhen me dëshirën e ushqimit dhe peshën relative të trupit në gratë e shëndetshme. Oreks. 2005; 45 (2) 198-201 [PubMed].
4. Kelley AE, Berridge KC. Neuroscience e shpërblimeve natyrore: rëndësia e drogave Addictive. J Neurosci. 2002; 22 (9) 3306-11 [PubMed].
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Minjtë me shfaqje kronike të dopaminit kanë rritur motivimin, por jo të mësuarit, për një shpërblim ushqimor. Neuropsychopharmacology. 2006; 31 (7) 1362-70 [PubMed].
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham ushqyer vaj misri rrit accumbens dopamine në miu. Am J Physiol Regul Integr Kompleksi Physiol. 2006; 291 (5) R1236-9 [PubMed].
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. Nxjerrja nga një vakt i shijshëm nxit aktivitetin paraprak ushqimor dhe shprehjen c-Fos në fushat që lidhen me shpërblimin e trurit. Neuroscience. 2005; 133 (1) 293-303 [PubMed].
8. Shrëder BE, Binzak JM, Kelley AE. Një profil i përbashkët i aktivizimit kortikal parafrontal pas ekspozimit ndaj cues kontekstuale të lidhura me nikotinë ose me çokollatë. Neuroscience. 2001; 105 (3) 535-45 [PubMed].
9. Nestler EJ, Barrot M, Vetë DW. DeltaFosB: një kalim i qëndrueshëm molekular për varësinë. Proc Natl Acad Sci USA A. 2001; 98 (20): 11042-6. [PMC artikull falas] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Zvogëlimi i preferencës ushqimore prodhon emocionalitet dhe rrezik për rikthim dietetik. Biol Psikiatria. 2007; 61 (9) 1021-9 [PubMed].
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB në Nucleus Accumbens Rregullon Sjelljen dhe Motivimin Instrumental të Përforcuar nga Ushqimi. Gazeta e Neurosciences. 2006; 26 (36) 9196-9204 [PubMed].
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Kafshët transgjenike me shprehje indicibile të gjenit në tru në tru. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3) 495-503 [PubMed].
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Vetë DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Shprehja e faktorit të transkriptimit deltaFosB në tru kontrollon ndjeshmërinë ndaj kokainës. Nature. 1999; 401 (6750) 272-6 [PubMed].
14. Bale TL, Dorsa DM. Diferencat gjinore në dhe efektet e estrogjenit në shprehjen e acidit ribonukleik të receptorit të receptorit të oksitocit në hypothalamus ventromedial. Endokrinologji. 1995; 136 (1) 27-32 [PubMed].
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Rats të varur nga sheqeri tregojnë se reagimi i rritur për sheqer pas abstinencës është dëshmi e një efekti të deprivimit të sheqerit. Physiol Behav. 2005; 84 (3) 359-62 [PubMed].
16. Do MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-opioids rregullojnë marrjen e një diete me yndyrë të lartë nëpërmjet aktivizimit të një rrjeti të shpërndarë të trurit. J Neurosci. 2003; 23 (7) 2882-8 [PubMed].
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Sinjalizimi i Orexin në zonën tegmentale të barkut kërkohet për oreksin e yndyrës të shkaktuar nga stimulimi opioid i bërthamës accumbens. J Neurosci. 2007; 27 (41) 11075-82 [PubMed].
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLone RJ. Nënshkrimi i receptorit të Leptin në neuronet e dopamenit të midbrain rregullon ushqimin. Neuron. 2006; 51 (6) 801-10 [PubMed].
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Vetë DW. Zmadhimi i tepërt i tipit qelizor striatoz të DeltaFosB rrit nxitjen për kokainë. J Neurosci. 2003; 23 (6) 2488-93 [PubMed].
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Një rol esencial për DeltaFosB në bërthamë accumbens në veprim morfinë. Nat Neurosci. 2006; 9 (2) 205-11 [PubMed].
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Prodhimi i shtyllës së dendritit të shkaktuar nga kokaina në receptorët e D1 dhe D2 që përmbajnë receptorët dopaminë që përmbajnë neuronet e mesme të mprehtë në nucleus accumbens. Proc Natl Acad Sci USA A. 2006; 103 (9): 3399-404. [PMC artikull falas] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Analiza gjenetike e varësisë nga droga: roli i proteinës lidhëse të reagimit të cAMP. J Mol Med. 1998; 76 (2) 104-10 [PubMed].
23. Nestler EJ. Mekanizmat molekularë të varësisë nga droga. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 24-32 [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Njutoni SS. Lidhja dhe aktiviteti i CREB në trurin: Specificiteti rajonal dhe induksioni nga sekuestrimi elektrokonvulsiv. Biol Psikiatria. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Vetë DW, Nestler EJ. Remodeling kromatin është një mekanizëm kyç që bazon plasticitetin e shkaktuar nga kokaina në striatum. Neuron. 2005; 48 (2) 303-14 [PubMed].
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Vetë DW. Aktiviteti dinamik i BDNF në bërthamë accumbens me përdorimin e kokainës rrit vetë-administrimin dhe rikthimin. Nat Neurosci. 2007; 10 (8) 1029-37 [PubMed].
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 ndërmjetëson veprimet e drogave të shumta të abuzimit. Hapat J. 2005; 7 (2): E353-60. [PMC artikull falas] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Diferencat e shprehjes së gjeneve në minj përzgjidhet divergjenisht për ndjeshmërinë e metamfetaminës. Mamm Genome. 2005; 16 (5) 291-305 [PubMed].
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Shluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT dhe CDK5 / p35 ndërmjetësojnë induktimin e faktorit neurotrofik të trurit nga DARPP-32 në neuronet e mesme të mprehtë në vitro. J Biol Chem. 2007; 282 (10) 7352-9 [PubMed].
30. Benavides DR, Bibb JA. Roli i Cdk5 në abuzimin me drogat dhe plasticitetin. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025:. 335-44 [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Efektet e ekspozimit kronik ndaj kokainës rregullohen nga proteina neurone Cdk5. Nature. 2001; 410 (6826) 376-80 [PubMed].
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins stimulojnë lirimin e dopamines nga neuronet meseskene të miut nëpërmjet receptorëve të Trk dhe p75Lntr. J Biol Chem. 1996; 271 (35) 21100-7 [PubMed].
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Vetë DW, Nestler EJ. Roli thelbësor i BDNF në shtegun mesolimbik të dopaminës në stresin e humbjes sociale. Shkenca. 2006; 311 (5762) 864-8 [PubMed].
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr Mesolimbic dopamine shpërblim qark në depresion. Biol Psikiatria. 2006; 59 (12) 1151-9 [PubMed].
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Frenimi opioid Kappa i rrymave postinaptike frenuese të dopaminës somatodendritike. J Neurophysiol. 2007; 97 (1) 883-91 [PubMed].
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Dinorfin i trurit dhe sistemet enkefaline në Fischer dhe Lewis rats: efektet e tolerancës morfine dhe tërheqjes. Brain Res. 1995; 683 (1) 25-35 [PubMed].
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Dallimet ndërmjet preferencave të alkoolit (AA) dhe shmangies së alkoolit (ANA) në prodynorphin dhe sistemet proenkefalina. Alkooli Clin Exp Res. 1994; 18 (5) 1272-9 [PubMed].
38. Kreek MJ. Kokaina, dopamina dhe sistemi endogjen opioid. J Addict Dis. 1996; 15 (4) 73-96 [PubMed].
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. Fytyrat e shumta të CREB. Trendet Neurosci. 2005; 28 (8) 436-45 [PubMed].
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamine receptorët D1 ndërmjetësojnë fosforilimin CREB nëpërmjet fosforilimit të receptorit NMDA në Ser897-NR1. J Neurochem. 2003; 87 (4) 922-34 [PubMed].
41. Vetë DW. Rregullimi i sjelljes së drogës dhe ndjekjes së sjelljeve nga neuroadaptimet në sistemin mesolimbik të dopamines. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 242-55 [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfina dhe kokaina ushtrojnë veprime të zakonshme kronike në hidroksilazën e tirosinës në rajonet shpërblim dopaminergjike të trurit. J Neurochem. 1991; 57 (1) 344-7 [PubMed].
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Hope BT. Neuroadaptimet molekulare në zonën tegmentale të akumulatorëve dhe barkut gjatë ditëve të para të 90 të abstinencës së detyruar nga vetë-administrimi i kokainës në minjtë. J Neurochem. 2003; 85 (6) 1604-13 [PubMed].
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Efekti i vetë-administrimit të metamfetaminës në nivelet e tirozin hidroksilazës dhe të transportuesit dopamin në rrugët mesolimbike dhe nigrostriatale të dopaminës së miut. Psikofarmacologjia (Berl) 2006; 185 (4): 505-13 [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Rregullimi i leptinit të rrugës dopamane mesoaccumbens. Neuron. 2006; 51 (6) 811-22 [PubMed].
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Implikimi i proteinës kinazës C në nivelet e nivelit të shtatzënisë dopamine të stimuluar nga oreksina dhe efekti i saj i shpërblyer. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5) 1537-45 [PubMed].
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Përfshirja e drejtpërdrejtë e sistemeve oreksinergjike në aktivizimin e rrugës mesolimbike të dopaminës dhe sjelljet e lidhura me morfinë. J Neurosci. 2006; 26 (2) 398-405 [PubMed].
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fushat HL, Bonci A. Orexin A në VTA është kritike për induksionin e plasticitetit synaptik dhe sensibilizimit të sjelljes ndaj kokainës. Neuron. 2006; 49 (4) 589-601 [PubMed].
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Ndryshimet në shprehjen orexin-A dhe neuropeptide Y në hypothalamus të ushqimit të agjëruar dhe me yndyrë të lartë të ushqyerit me rats. J Vet Sci. 2004; 5 (4) 295-302 [PubMed].
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Peptidet që rregullojnë marrjen e ushqimit: ekspresja e oreksin gjen rritet gjatë gjendjeve të hipertrigliceridemisë. Am J Physiol Regul Integr Kompleksi Physiol. 2003; 284 (6) R1454-65 [PubMed].
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Peptidet që rregullojnë marrjen e ushqimit: manipulimi i akupunkteve që nxisin oreksin aktivizon neuronet e hypothalamic orexin dhe pengon neuronet POMC. Am J Physiol Regul Integr Kompleksi Physiol. 2003; 284 (6) R1436-44 [PubMed].
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Aktivizimi i një nënpopullimi të neuroneve hipotalamike që përmbajnë oreksin / hypocretin nga inhibimi i GABAA-mediatorit të shell shell nucleus accumbens, por jo nga ekspozimi ndaj një mjedisi të ri. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2) 376-86 [PubMed].
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Një rol për neuronet oreksin hypothalamic lateral në kërkimin e shpërblimit. Nature. 2005; 437 (7058) 556-9 [PubMed].
;