Shpërndarja e DeltaFosB në bërthamë accumbens simbolizon fenotipin e varësisë mbrojtëse, por jo fenotipin mbrojtës të depresionit të pasurimit mjedisor (2014)

Front Behav Neurosci. 2014; 8: 297.

Botuar në internet Gusht 29, 2014. doi:  10.3389 / fnbeh.2014.00297

PMCID: PMC4148937

Abstrakt

Pasurimi në mjedis prodhon varësi mbrojtëse dhe fenotipet e depresionit në minjtë. ΔFosB është një faktor transkriptimi që rregullon shpërblimin në tru dhe nxitet nga stresi psikologjik si dhe nga droga abuzimi. Megjithatë, roli i luajtur nga ΔFosB në phenotypes mbrojtëse të pasurimit të mjedisit nuk është studiuar mirë. Këtu, ne demonstrojmë se ΔFosB është rregulluar në mënyrë të diferencuar në rats të rritur në një gjendje të izoluar (IC) në krahasim me ato në një gjendje të pasuruar (EC) në përgjigje të stresit të kufizimit ose kokainës.

Stresi kronik ose trajtimi kronik i kokainës secila ngre nivelin e proteinave të ΔFosB në bërthamë accumbens (NAc) të minjve të IC, por jo të minjve të KE-së për shkak të një akumulimi basal tashmë të ngritur të ΔFosB të parë nën kushtet e KE.

Zmadhimi i madh i ΔFosB në epruvetën NAc të rats të vendosur në palë (dmth., I pavarur nga pasurimi / izolimi mjedisor) rrit operantin që përgjigjet për sukrozën kur motivohet nga uria, por zvogëlohet duke iu përgjigjur kafshëve të ngopura. Për më tepër, shfaqja e madhe e ΔFosB zvogëlon vetë-administrimin e kokainës, rrit zhdukjen e kërkimit të kokainës dhe zvogëlon rikthimin e kokainës nga vetë-administrimi intravenoz të kokainës; të gjitha gjetjet e sjelljes në përputhje me fenotipin e pasurimit.

Në të kundërt, megjithatë, shprehja e tepërt e ΔFosB nuk ndryshoi përgjigjet e minjve me dy palë në disa teste të sjelljeve të lidhura me ankthin dhe depresionin.

Kështu, ΔFosB në Shembull i NAc imiton fenotipi i varësisë mbrojtëse, por jo fenotipi mbrojtës i depresionit të pasurimit mjedisor.

Keywords: [Rritje]FosB, pasurimi mjedisor, depresioni, vetë administrimi i kokainës, virusi adeno-shoqëruar (AAV), overexpression

Prezantimi

Përvoja e jetës, veçanërisht në fazat e hershme të jetës, ka një ndikim të thellë në sjelljen e kafshëve gjatë gjithë jetës. Mjedisi luan një rol esencial në dobësinë dhe rezistencën ndaj çrregullimeve mendore të njerëzve (Elisei et al., 2013; Akdeniz dhe të tjerët, 2014; Kato dhe Iwamoto, 2014; van Winkel dhe të tjerët, 2014). Në modelet e brejtësve, që jetonin në një mjedis të pasuruar nga largimi nga mosha e rritur, u raportua se prodhonte varësi mbrojtëse dhe fenotip të depresionit (Green et al., 2002, 2003, 2010; Laviola et al., 2008; Solinas et al, 2008, 2009; El Rawas et al, 2009; Thiel et al., 2009, 2010). Në këtë paradigmë, kafshët u caktohen ose një gjendje të pasuruar (EC) në të cilën kafshët janë të strehuara në grup dhe kanë qasje të përditshme në objekte të reja, ose një gjendje të izoluar (IC) në të cilën kafshët janë të vendosura pa risi ose kontakt social. Kafshët e rritura në gjendje të pasuruar, që përfshijnë kontakt social, stërvitje dhe risi, shfaqin më pak përforcim dhe kërkimin e kokainës ose amfetaminës në paradigmën intravenoze të vetëadministrimit të drogës (Green et al., 2002, 2010). Përveç fenotipit të varësisë, ekspozimi i tillë ndaj pasurimit prodhon një efekt si antidepresivi në modelet e kafshëve të depresionit (Green et al., 2010; Jha et al., 2011). Në mënyrë të veçantë, kafshët e pasuruara shfaqin sjellje të ngjashme me anhedonin në testin e preferencës së sukrozës, më pak tërheqje sociale në një test të ndërveprimit shoqëror dhe më pak paqëndrueshmëri në testin e notimit të detyruar (FST). Pavarësisht efekteve anti-varësisë dhe antidepresionit si pasojë e pasurimit, mekanizmat që i nënshtrojnë këto phenotypes mbrojtëse të pasurimit të mjedisit mbeten të paplotësuara, megjithëse hulumtimi ynë paraprak ka implikuar një rol për aktivitetin e zvogëluar të faktorit të transkriptimit, CREB, në nucleus accumbens (NAc ) në ndërmjetësimin e disa prej efekteve të pasurimit mjedisor (Green et al., 2010; Larson et al, 2011). Kështu, qëllimi i këtyre studimeve diferenciale të rritjes është që të përdorin një qasje bazë shkencore për të identifikuar mekanizmat molekularë të elasticitetit që më vonë mund të përkthehen në klinikë. Kjo qasje është ekologjikisht ekuivalente me strategjitë gjenetike të përcaktuara mirë siç është brezi selektiv (McBride et al., 2014).

Këtu përqendrohemi tek një tjetër faktor i transkriptimit, ΔFosB, i cili nxitet dukshëm në NAc nga forma të caktuara të stresit ose nga pothuajse të gjitha barnat e abuzimit, duke përfshirë kokainën, morfinën, alkoolin, nikotinën dhe amfetaminën (Hope et al. 1992; Kelz dhe Nestler, 2000; Perrotti et al., 2004, 2008). Si një faktor i transkriptimit, ΔFosB dimerizon me proteinat familjare Jun, kryesisht JunD, për të formuar një kompleks aktiv AP-1 që lidhet me elementin e përgjigjes AP-1 për të rritur ose shtypur transkriptimin e gjeneve të saj të synuar (Nestler, 2001), megjithëse hulumtimet e reja sugjerojnë se ΔFosB mund të veprojë gjithashtu si një homodimer (Wang et al., 2012). Proteina ΔFosB është një variancë e prerë e copëtuar e FosB gjen, i cili shkakton proteina ΔFosB të mungojë dy DEGRON domains C-terminal, duke parandaluar proteina ΔFosB nga degradimi i shpejtë i parë me FosB dhe të gjithë proteinat e tjera Fos-familjare. Për shkak se ΔFosB është jashtëzakonisht e qëndrueshme në NAc, ΔFosB vepron shumë ndryshe në përgjigje të stimujve akute kundrejt kronikëve në krahasim me proteinat e tjera Fos. Me ekspozim të përsëritur ndaj drogave të abuzimit ose stresit, proteina ΔFosB gradualisht akumulon dhe vazhdon për ditë në javë, ndërsa FosB dhe proteina të tjera Fos induktohen vetëm për një kohë të shkurtër (orë) dhe zhvillojnë një induksion të zbutur pas ekspozimit të mëvonshëm (Nestler et al, 2001; Nestler, 2008).

Rëndësia e ΔFosB jo vetëm që është shumë e nxitur nga drogat e abuzimit dhe stresit, por që manipulimi i ΔFosB në tru ka treguar të ndikojë në sjelljen e kafshëve. Induksioni selektiv i ΔFosB në mesataren e dinorfinit në miunët e rritur rrit ndjeshmërinë e locomotor në përgjigje të kokainës akute dhe të përsëritura, si dhe përgjigjet e dobishme për kokainën në paradigmën e preferencës së vendit të kushtëzuar dhe përforcimin në paradigmën e vetëadministrimit (Kelz et al., 1999; Kelz dhe Nestler, 2000; Colby et al, 2003).

Edhe pse variacioni mbrojtës dhe fenotipet e depresionit janë përshkruar në detaje për minjtë e pasuruar me mjedis, një rol të mundshëm për ΔFosB në ndërmjetësimin e këtyre fenotipeve mbrojtëse nuk është vlerësuar plotësisht. Studimet e mëparshme të pasurimit mjedisor treguan se, në krahasim me mjedisin standard (SE), një mjedis i pasuruar rrit nivelet bazike të ΔFosB në të dy neuronet D1 dhe D2 mesatare të rajoneve striatale në minj (Solinas et al., 2009; Lobo et al, 2013). Përveç kësaj, ratsat e pasuruar Wistar treguan qelizat pozitive ΔFosB pozitive në NAc dhe korteksit paraballor krahasuar me minjtë SE, duke sugjeruar një rol të mundshëm të ΔFosB në fenotipin e varësisë mbrojtëse ndaj nikotinës (Venebra-Muñoz et al., 2014). Për më tepër, tejkalimi i ΔFosB në striatumin e minjve rrit drejtimin e përditshëm të timonit, i cili mund të jetë analog me rritjen e aktivitetit të minjve në një mjedis të pasuruar (Werme et al., 2002).

Në studimin e tanishëm, kemi hipotizuar se: (1) pasurimi mjedisor do të rriste akumulimin e niveleve bazë ΔFosB në NAc; dhe (2) ky akumulim i ΔFosB do të kontribuonte në efektet mbrojtëse të pasurimit mjedisor.

Materiale dhe metoda

kafshët

Për pasurimin mjedisor, rats meshkuj Sprague-Dawley (Harlan, Houston, TX, SHBA) u caktuan rastësisht në strehimin EC ose IC nga dita postnatal 21 në ditën 51. Ratsat e KE-së ishin të vendosur në grup (20 për kafaz) në një kafaz të madh metalik (70 × 70 × 70 cm) me disa objekte plastike të forta (lodra për fëmijë, enë plastike, tuba PVC etj.). Këto objekte u zëvendësuan me objekte të reja dhe u riorganizuan në një konfigurim të ri çdo ditë. Rats IC ishin vendosur në mënyrë individuale në kafaze standarde polikarbonate. Rats mbeti në këto kushte gjatë gjithë eksperimenteve dhe të gjitha testet e sjelljes dhe testet biokimike filluan pas moshës 51 (dmth., Të paktën 30 ditë pasurimi / izolimi). Për shfaqjen e tepërt të ΔFosB, meshkujt meshkuj Sprague-Dawley (Harlan, Houston, TX, USA) janë marrë në madhësinë 225-250 g dhe vendosen me çifte në kafaze standarde polikarbonate para se të injektohen stereotaktikisht me një vektor viral adeno-shoqëruar (AAV2) overexpressing ΔFosB me proteinë fluoreshente jeshile (GFP) ose vetëm GFP si një kontroll (shih më poshtë). Shporta standarde dhe uji ishin falas për të gjitha minjtë përveç gjatë testeve të sjelljes dhe rregullimit të ushqimit. Të gjitha minjtë u mbajtën në një mjedis të kontrolluar (temperatura, 22 ° C, lagështia relative, 50% dhe cikli 12 h / dritë / i errët, dritat në 600 h) në një Asociacion për Vlerësimin dhe Akreditimin e Kolonit të miratuar të AAALAC . Të gjitha eksperimentet janë konform Udhëzuesit të NIH për Kujdesin dhe Përdorimin e Kafshëve Laboratore dhe Komitetit të Kujdesit dhe Përdorimit Institucional të Kafshëve në Universitetin e Teksasit.

Pasurimi mjedisor është një manipulim kompleks i përbërë nga risi, kontakt social dhe stërvitje. Banimi i çiftit siguron kontakt social dhe kështu përfaqëson një KE (shih Udhëzuesin e NIH). Kështu, grupi i duhur i kontrollit për një gjendje me risi, kontakt social dhe stërvitje do të ishte një grup pa risi, kontakt social ose stërvitje, gjendja e IC. Rats IC tregojnë më pak shenja të stresit kronik se minjtë e KE. Në mënyrë të veçantë, minjtë e KE kanë rritur adrenalin (Mlynarik et al., 2004), përgjigjur CORT përgjigjet (Stairs et al., 2011), induktimi i vonuar i hershëm i hershëm i gjenit (Zhang et al., manuscript in preparation) dhe akumulimi ΔFosB (Solinas et al, 2009; Lobo et al, 2013), të gjitha shenjat e stresit kronik (Crofton et al., në shqyrtim).

Stresi psikologjik

Rats të pasuruara dhe të izoluara u vendosën në kufizues të butë plastike të brejtësve (DecapiCone®, Braintree Scientific Inc., MA, USA) për 60 min për ditët 1 (akute) ose 9 (përsëriten). Për testet e mRNA-së të ekspozimit të shkurtër, minjtë 30 (minjtë 5 për grup) u dekapituan minus 30 pas fillimit të periudhës së fundit të stresit të kufizimit, truri i miut u nxorrën dhe NAc u diseksua për analizën e mRNA. Për imunohistokimizëm, minjtë 12 u perfunduan me kripur dhe 4% paraformaldehyde, trurin e nxjerrë, post-fiksuar në 4% paraformaldehyde dhe ruajtur në 20% glicerinë në 1xPBS në 4 ° C. Trurin e rat ishin feta në 40 μm me një mikrotomë ngrirëse. Trurit u korr 24 h pas stresit përfundimtar për të lejuar që proteina e plotë FosB të degradohet (Perrotti et al., 2008).

Vet-administrimi intravenoz të kokainës me pasurimin e mjedisit

Implantimi i kateterit intravenoz

Rats u anestetizuan duke përdorur ketaminë (100 mg / kg IP) dhe xilazinë (10 mg / kg IP) dhe një katetër silastike u vendos dhe u sigurua në venë jugulare, duke dalë nga lëkura në shpinë të kafshës. Çdo ditë catheters u infused me 0.1 ml të një zgjidhje të kripës sterile që përmbajnë heparin (30.0 U / ml), penicilinë G kalium (250,000 U / ml) dhe streptokinase (8000 IU / ml) për të parandaluar infeksionin dhe për të ruajtur patogjen kateter gjatë gjithë kohëzgjatjes e eksperimenteve.

Vetërndarja e kokainës me pasurimin e mjedisit

Njëzet rats të pasuruar dhe 20 u vendosën në dhomat e operimit 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, Shën Albans, VT) dhe lejohej të shtypnin një levë për infuzion të kokainës (0.5 mg / kg / infuzion, Instituti i Kërkimeve të Triangle, NC, SHBA) ose kripërat nën një raport fiks 1 (FR1) për 2 h në ditë për një total prej 14 ditë. Për të ruajtur futje të ngjashme të kokainës në mes të grupeve të KE dhe IC kishte një maksimum të infuzioneve 30 në seancë. Kapaciteti i përpunimit të indit ishte i kufizuar në mostrat e 30, kështu që minjtë reagues më të ulët nga secili grup nuk ishin përpunuar, duke lënë Ns e 8 për kokainë dhe 7 për grupet e kripës. Kështu, nuk kishte dallime në EC / IC në marrjen totale të kokainës ose në kohën e infuzioneve ndërmjet EK dhe IC. Trurin e rat janë nxjerrë 3 h pas fillimit të seancës së fundit vetë-administrimit dhe NAc është dissected për mRNA dhe analiza proteinave. Një anë e NAc është përdorur për blotën perëndimore, pala tjetër përdoret për qPCR.

Administrimi jo-kontingjent i kokainës me pasurimin e mjedisit

Për krahasim të drejtpërdrejtë me literaturën e botuar më parë (Hope et al. 1994; Chen et al., 1995), KE (N = 12) dhe rats IC (N = 12) janë injektuar me kokainë ose 20 mg / kg kokainë intraperitoneally (IP) për ditët e ditës 1 (akute) ose 9 (përsëriten). Një mostër e KE u humb gjatë përpunimit. Grupi akut mori injeksione të kripës për ditët e 8 dhe një injeksion të kokainës në ditën 9 në mënyrë që të gjitha minjtë të merrnin të njëjtin numër injeksish. Trurit janë nxjerrë 30 min pas injektimit të fundit dhe NAc të analizuar për analizën e mRNA.

Kuantifikimi i mRNA duke përdorur qPCR

ARN ishte nxjerrë duke homogjenizuar në STAT-60 të ARN (Teltest, Friendswood, TX), duke ndarë ARN nga ADN dhe proteina duke përdorur kloroform dhe duke precipituar ARN totale me izopropanol. Kontaminimi i ADN-së është hequr (TURBO DNA-Free, Life Technologies, CA, USA) dhe 5 ug i ARN i pastruar është transkriptuar në mënyrë të kundërt në cDNA (Sinziza e Parë Strukturore SuperScript III: Katalogu Invitrogen # 18080051). ΔFosB mRNA u quantifikua duke përdorur sasiore PCR në kohë reale (SYBR Green: Applied Biosystems, Foster City, CA) në një Biosystems të Aplikuar 7500 thermocycler shpejtë me primers projektuar për të zbuluar vetëm ΔFosB (përpara: AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT, prapa: GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG) për të zbuluar GAPDH miell (përpara: AACGACCCCTTCATTGAC, prapa: TCCACGACATACTCAGCAC). Të gjitha primerët janë validuar dhe analizuar për specifikë dhe linearitet para eksperimenteve (Alibhai et al., 2007).

Pastertis se gjakut

Ana e djathtë e NAc nga kokaina ose vetë-administrimin e kripës EC dhe IC u homogjenizua në një tampon që përmban saharozë, Hepes tampon, fluorid natriumi, 10% SDS dhe frenuesit e proteazës dhe fosfatazës (Sigma-Aldrich: P-8340, P -2850, P-5726). Përqendrimi i proteinës është vlerësuar duke përdorur Kit Pierce BCA Protein Assay (Thermo Scientific, IL, USA). Për shkak se proteina e nxjerrë nga një rat nuk ishte e mjaftueshme për analiza, mostrat 2 nga i njëjti grup u bashkuan së bashku, duke prodhuar mostra 4 për secilin grup. Mostrat e proteinave u denatruan në 95 ° për 5 min dhe u zbatuan në një xhel gradient 10-20% polyacrylamide (Criterion TGX, Bio-Rad Laboratories, CA, SHBA), pastaj transferoheshin në një membranë fluoride poliviniliden (PVDF) (Millipore, MA, USA ). Membrana u bllokua me blloqer të bluar (qumësht i thatë i thatë), inkubuar me antitrupat primarë ΔFosB (lepuri, 1: 1000, #2251, Teknologjia e sinjalizimit të qelizave, MA, USA) dhe antitrupi primar β-aktin (miu, 1: 1000 , 780: 680, Li-Cor Biosciences, NE, Teknologjia e sinjalizimit të qelizave, MA, USA), larë me TBST dhe pastaj inkubuar me antitrupa të mesme fluoreshente (gomë anti-lepuri (1 nm) SHBA). Imazhet perëndimore u fotografuan më pas (Odisea, Li-Cor Biosciences, NE, SHBA) dhe nivelet e proteinave të quantifikuara me programin Odyssey.

Immunohistochemistry

Për Figura Figure11 (N = 3), qelizat që përmbajnë ΔFosB u vizualizuan dhe u numëruan nëpërmjet etiketimit imunohistokemik të ΔFosB në feta NAc të ngjyrosura me DAB (DAB peroksidase substrate kit, Vector Laboratories, CA, USA). Truri është nxjerrë, fiksohet, krijohet dhe sekuestrohet në feta 40 μm që përmbajnë NAc në një mikrotomë të ngrirjes (Leica Biosystems, IL, USA). Fletët mbetën të lundruara dhe u shpëlartën me 1xPBS para se peroksidaza endogjene të shuhen, para bllokimit me 3% serum të dhisë normale (Jackson ImmunoResearch, PA, SHBA) me 0.3% triton dhe avidin D (Vector Laboratories, CA, SHBA). Fetë NAc u inkubuan me antitrupin primar FosB brenda natës (1: 1000, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) me serum 3% dhie, 0.3% triton, 1xPBS dhe zgjidhje biotin (Vector Laboratories, CA, USA). Megjithëse ky antitrup njeh si FosB dhe ΔFosB, studimet e mëparshme Western blot treguan se në stimulimin post-24 h, shumica dërrmuese e sinjalit immunohistochemical është i përbërë nga ΔFosB sepse FosB degradon mirë para 24 h (Perrotti et al, 2008). Pas larjes, feta u inkubuan me një antitrupi dytësor anti-lepuri Biotinylated IgG (Vector Laboratories, CA, SHBA), serum dhie, dhe 1xPBS. Pastaj, feta u inkubuan me njollë peroksidaze komplekse avidin-biotin (ABC) për 15 min (Thermo Scientific, IL, SHBA). Së fundi, feta ishin montuar, dehidratuar duke përdorur etanol dhe CitriSolv (Fischer Scientific, MA, SHBA) dhe mbuluar me DPX (Fisher Scientific). Për numërimin e qelizave, seksionet u provuan nga Bregma + 1.80 në + 1.44 nga çdo kafshë. Numri i përgjithshëm i qelizave immunopositive ΔFosB është numëruar nga katër seksione NAc nga thelbi dhe guaska e secilit miu.

Figura 1  

stresi dhe [Rritje]FosB në EC dhe IC. (A-D) Përfaqësuesi i imunohistokemisë DAB ngjyrosje e ΔFosB në shell NAc dhe thelbi i IC (A B) dhe KE (C D) rats me (B D) dhe pa (A C) stres i përsëritur (N = (E) kuantifikim ...

Virusi adeno-shoqëruar overexpressing [Rritje]FosB

Një vektor i bazuar në AAV2 që shpreh ΔFosB dhe humanized renilla GFP (hrGFP; Winstanley et al., 2007, 2009a,b) ose vektori i kontrollit të hrGFP (N = 10 secila) u injektua në mënyrë bilaterale në NAc miu. Për shkak se nuk ka njerëz të IC, në vend të rats IC u përdorën rats të vendosur me palë për këtë studim për të rritur rëndësinë e komunitetit shkencor duke demonstruar efektet e ΔFosB i pavarur e paradigmës EC / IC. Një AAV që shprehte hrGFP, por që nuk e ekspresionon ΔFosB është përdorur si një kontroll. Shprehja e ΔFosB in vivo është validuar me imunofluorescencën e errësirës me antitrupin kryesor FosB (1: 200, Rabbit, Teknologjia e sinjalizimit të qelizave, MA, SHBA). Vektorët AAV u injektuan në shellin NAc në mënyrë bilaterale (1 μl / anë mbi 10 min) duke përdorur koordinatat (AP = 1.7, L = 2.0, D = -6.5). Testet e sjelljes filluan 3 javë pas operacionit stereotak. Vendosja e saktë u përcaktua nga imunohistokimi pas përfundimit të testimit të sjelljes.

Neophobia saharoze

Minjtë e ekspozuar ndaj ΔFosB (N = 10) dhe rats kontrollit (N = 8) janë trajtuar për javën 1 para fillimit të testeve të sjelljes. Për të testuar për sjellje ankthi, rats janë vlerësuar për neophobia në një shije të re (sukrozë). Rats u ndanë në kafaze individuale dhe uji u hoq në 1600 h. Shishet standarde të ujit të miellit u mbushën me një solucion 1% w / v saharoze në ujë të zakonshëm "trokitje e lehtë" të minjve dhe u peshuan para se të vendoseshin në çdo kafaz në 1800 h. Pas 30 min shishet u hoqën dhe peshohen përsëri, dhe diferenca e peshës së shisheve të saharozës para dhe pas testit është llogaritur. Pastaj, saharoza u zëvendësua në kafaze për një shtesë 2 ditë për t'i lejuar rats të familjarizohen me aromën e sukrozës para testit të preferencës së sukrozës.

Elevated plus labirint

Një tjetër test i sjelljes si ankthi, labirinti i ngritur plus (EPM), u provua 2 ditë pas neofobisë së saharozës. EPM-ja mat sjelljen eksploruese të modifikuar nga vektorët në një mjedis roman dhe prodhim ankthi (Green et al., 2008). Dy armë të mbyllura dhe dy armë të hapura (Med Associates Inc., VT, SHBA) që matnin 12 × 50 cm ishin 75 cm mbi dysheme dhe kishin fotobeams në hyrje të secilës krah. Koha e kaluar në armë të hapura u monitorua për minutën 5 me pushime fotobeam duke përdorur programin Med-PC.

Shpërbërja e ftohtë e stresit

Ditën pas EPM, u përdor një test i tretë ankthi: defekimi në përgjigje të një mjedisi të butë stresues (të ftohtë). Kafazet e miut me polikarbonat (33 × 17 × 13 cm) ishin para-ftohur në akull për 10 min. Rats u vendosën në kafaze në akull për 30 min dhe numri i boli fekal u regjistrua çdo 5 min.

Kontakt social

Të nesërmen, sjellja e ngjashme me depresionin u matur duke përdorur një test të ndërveprimit shoqëror. Rats ishin ndarë për 24 h para testimit. Në ditën e testimit minjtë u vendosën në një mjedis të ri (enë plastike, 45 × 40 × 45 cm) me bashkëshortin e tyre të kafazit dhe sjellja u regjistrua në video për 30 min. Shuma e kohës që çifti i minjve kalonin duke u kujdesur me njëra-tjetrën u mat nga një hetues i verbër në gjendjen e minjve.

Preferenca e saharozës

Pas kontaktit social, testi i preferencës së sukrozës është përdorur si model i anhedonia. Rats të strehuara me palë u ndanë në 1600 h me ushqim, por nuk lejoheshin qasje në ujë për 2 h. Në 1800 h u vendosën dy shishe uji të peshuar para në çdo kafaz, një që përmban ujë, një tjetër zgjidhje 1% saharoze në ujë. Shishet u vendosën në pozicionin normal, ndërsa saharoza u vendos rreth 10 cm larg. Shishet u hoqën dhe u peshuan pas 15 min.

Aktivitet lokomotor

Tre ditë pas preferimit të saharozës, aktiviteti i lokomotoreve u vlerësua në kushte normale të dritës duke vendosur rats në dhomat e pastra të plexiglasit (40 × 40 × 40 cm) me një shtresë të hollë shtresash, të rrethuar nga dy matrica 4 × 4 photobeam, një 4 cm lart toka dhe një cm 16 mbi tokë për të regjistruar ambulation horizontale dhe aktivitet vertikal (rritja). Prerjet e Photobeam u monitoruan për 2 h nga një sistem i modifikuar i aktivitetit të hapur në terren (San Diego Instruments, CA, SHBA).

Testi i notuar i notuar

Testi i fundit spontan i sjelljes ishte FST, një model i ndjeshëm ndaj ilaqet kundër depresionit. Rats u vendosën në një cilindër Plexiglas mbushur me afërsisht 14 L të ujit të dhomës (24 ± 0.5 °) për 15 min në Sesionin 1 dhe 5 min në Sesionin 2 të nesërmen. Rats ishin tharë dhe vendosur përsëri në kafaze të tyre të shtëpisë. Aktiviteti i ujit u regjistrua në video dhe latente për periudhën e parë të paqëndrueshmërisë (1 s) dhe totalit të kohës së palëvizshme u përcaktuan për Sesionin 2 nga një hetues i verbuar ndaj kushteve.

Operatori i sakaçerit duke u përgjigjur

Rats kontrollit AAV dhe minjtë ΔFosB-oversexpressing ishin rregulluar në 85% të peshës së ushqyerit të lirë gjatë ditëve 7. Të gjitha minjtë janë trajnuar për të shtypur barnat për fishekët e saharozës (Bio-Serv, NJ, USA) në një skemë FR1 të përforcimit për seancat minimale të 15 në ditët 5 të njëpasnjëshme. Rats më pas iu dhanë qasje të lirë në ushqim për ditët 3 dhe përsëri u lejuan të shtypnin bar për fishekët e saharozës në një orar FR1 për 15 min, këtë herë në peshën 100% të ushqyerjes së lirë.

Vetë-administrim i kokainës

Përvetësim

Një javë pas operacionit të kateterit (siç u përshkrua më sipër), të gjitha minjtë (rats kontrolluese 7 dhe minjtë 10 ΔFosB që ekspresonin, një rat kontrolli u humbën nga kirurgjia e kateterit) u vendosën në dhomat operante 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, Albans, VT) dhe lejohet të vetëadministrojë dozën 0.2 mg / kg / infuzion të kokainës për 2 h në seanca për ditët e 4; pastaj 0.5 mg / kg / infuzion për ditët 3 në një orar FR1. Çdo infuzion u dha në mënyrë intravenoze në një volum 0.01 ml mbi 5.8 s. Infuzion u sinjalizua nga ndriçimi i dy dritave të sugjeruara për 20 s, që sinjalizoi një periudhë kohore gjatë së cilës nuk mund të arrihej asnjë infuzion i mëtejshëm.

Zhdukje

Meqë ekspozimi kronik i kokainës do të shkaktonte akumulimin e ΔFosB në minjtë e kontrollit, gjë që do të shkaktonte që minjtë në të dyja kushtet vektoriale të kishin nivele të larta të ΔFosB në tru, minjtë ishin mbyllur në kafazet e tyre për ditët 4 pa vetë administrim për të lejuar ΔFosB nivelet e proteinave të ulen në kontrollin e vektorëve të vaksinës. Pas mbijetesës së 4 ditë, minjtë u vendosën në dhomën e operimit dhe u lejuan të vetë-administrojnë kripur në vend të kokainës nën një orar FR1 për seancat 1 h për ditët 3 të njëpasnjëshme.

Reagimi i dozës së raportit fikse

Çdo miu (kontrolli dhe ΔFosB overexpressing) u lejohet të vetë-administrojë 0.00325, 0.0075, 0.015, 0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5 mg / kg / kokainë infuzion në rendin në rritje në një orar FR1 çdo ditë për 5 ditë të njëpasnjëshme. Rats vetë-administruar çdo dozë të kokainës për 30 min.

Rivendosja e kokainës

Rats iu nënshtrua një procedure rikthimi brenda seancës. Rats marrë 0.5 mg / kg / infuzion në një orar FR1 për 60 min ndjekur nga 3 h e zhdukjes (me cues kontingjent kokainë). Më pas ata morën një injeksion IP (Green et al., 2010) të kokainës me një nga pesë doza (0, 2.5, 5, 10, ose 20 mg / kg) në mënyrë të rastësishme për secilin rat gjatë gjithë seancave 5 të rivendosjes. Faza e fundit 3 h e seancës ishte rivendosja e përgjigjes, përsëri me cocaine, por ende pa infuzion të kokainës. Pas çdo sesioni të rikthimit të shkaktuar nga kokaina, rats pranuan ditët e intervenimit të dozës së lartë (2 mg / kg / infuzion) të kokainës në një orar të FR0.5 për 1 h për të mbajtur norma të larta të përgjigjjes gjatë seancave. Gjatë procesit të vetë-administrimit të kokainës, katetat e disa rats humbën gradualisht; prandaj, të dhënat e minjve të kontrollit të 2 dhe të minjve 6 ΔFosB, që shprehin overeximin, janë përdorur në këtë analizë.

Analiza statistikore

Analizat dyanaloge të variancës (ANOVAs) dhe dyfishi i masave të përsëritura ANOVA janë bërë për të krahasuar katër grupet e trajtimit dhe krahasimet e planifikuara janë përdorur për të krahasuar dallimet mes kushteve. Rëndësia midis vetëm dy kushteve u analizua duke përdorur një studente t-Test. të gjithë ttë dhënat e testit kaluan testin Shapiro-Wilk të normalitetit. Të gjitha të dhënat janë shprehur si mesatare ± SEM. Rëndësia statistikore ishte vendosur në p <0.05. Të gjithë minjtë e pasuruar për një eksperiment të vetëm ishin vendosur në një kafaz, por u trajtuan si subjekte të veçantë, duke siguruar implikime në lidhje me çështjen e pseudoreplikimit të mundshëm.

Rezultatet

Minjtë e KE shfaqin nivele më të larta bazale të [Rritje]FosB në NAc se minjtë IC

Krahasuar me minjtë IC, minjtë e KE kanë një numër dukshëm më të lartë të qelizave pozitive ΔFosB në të dyja bërthamën e NAc (t(4) = -3.31, p <0.05) dhe guaska (t(4) = -6.84, p <0.05) (Shifrat 1A, C, E, F), duke sugjeruar që toni basal i ΔFosB është më i lartë në minjtë e KE krahasuar me minjtë IC. Përveç kësaj, rezultatet Western blot treguan një prirje të fortë për rats kripur KE që kanë nivel më të lartë basal të proteina ΔFosB në NAc krahasuar me minjtë kripur IC (t(6) = -2.03, p = 0.089; figurë Figure2A) 2A) duke përdorur një test me dy bisht. Megjithatë, duke pasur parasysh shprehjen në rritje në Shifra 1A-F dhe rritjet e shikuara në letrat e tjera (Solinas et al., 2009), ne jemi të sigurt në këtë efekt. Të gjeturat Western blot gjithashtu verifikojnë se pothuajse të gjithë immunoreactivity FosB-zbuluar nga immunohistochemistry ishte ΔFosB dhe jo FosB, e cila nuk ishte detektueshme në 24 h.

Figura 2  

Kokaina dhe [Rritje]FosB në EC dhe IC. (A-B) Mesatarja e proteinës ΔFosB (A) dhe ARNi (B) niveli (± SEM) në NAc pas 14 ditëve të vetë-administrimit të kripës ose kokainës në minjtë IC dhe EC (N = 7-8). Banda e kuqe në panelin a tregojnë ...

[Rritje]FosB është induktuar në mënyrë të diferencuar në stërvitje në EC dhe IC

Ka pasur një efekt kryesor domethënës të stresit të kufizuar të kufizimit në të dyja pjesët (F(1, 8) = 16.6, P <0.005) dhe thelbi (F(1, 8) = 7.9, P <0.05) të NAc dhe një efekt kryesor i pasurimit mjedisor në guaskë (F(1, 8) = 22.3, P <0.005; Shifrat 1A-F). Më e rëndësishmja, ndërveprimi midis stresit dhe pasurimit të mjedisit ishte gjithashtu i rëndësishëm në të dyja guaskat (F(1, 8) = 25.6, P <0.01) dhe thelbi (F(1, 8) = 6.7, P <0.05). Ndërveprimi ishte i tillë që, pas stresit të përsëritur të përmbajtjes, numri i qelizave ΔFosB pozitive u rrit ndjeshëm në minjtë IC, ndërsa ky numër nuk ndryshoi në minjtë EC pas stresit të përsëritur.

Për të hulumtuar më tej se si ΔFosB është rregulluar në mënyrë dinamike nga stresi akute kundrejt përsëritjes dhe për të mundësuar krahasimin me hulumtimet paraprake (Alibhai et al, 2007), induksioni i ΔFosB ARNi u studiua me stresin akute dhe të përsëritura të frenimit (Figura (Figure1G) .1G). Ka pasur një efekt kryesor domethënës të stresit (F(2, 24) = 31.9, P <0.001) dhe pasurimi mjedisor (F(1, 24) = 5.1, P <0.05). Në minjtë IC, ΔFosB mARN u induktua fort pas stresit akut të përmbajtjes. Sidoqoftë, me stres të përsëritur, induksioni i mRNA i ΔFosB u dobësua ndjeshëm në krahasim me induksionin akut. Kishte gjithashtu një ndërveprim të rëndësishëm (F(2, 24) = 4.6, P <0.05), duke demonstruar se induktimi akut i mRNA-së ΔFosB ishte më pak te minjtë EC krahasuar me minjtë IC. Kështu, minjtë e KE kanë nivele më të larta bazike të ΔFosB proteinë në NAc, por më pak ΔFosB ARNi induksion në përgjigje të një stresori akut.

[Rritje]FosB është shkaktuar nga kokaina në NAc të EC dhe IC

Për të përcaktuar nëse kometat e KE dhe IC reagojnë ndryshe ndaj kokainës, ne kemi studiuar rregullimin e proteinës ΔFosB dhe ARNi në miun NAc pas vetë-administrimit të kokainës (Figura 2A, B respektivisht). Një njollë perëndimore zbuloi një efekt kryesor domethënës të kokainës (F(1, 12) = 24.9, P <0.001) dhe një ndërveprim domethënës (F(1,12) = 5.5, P <0.05). Ndërveprimi ishte i tillë që ΔFosB u rrit më shumë në minjtë IC sesa minjtë EC (Figura) (Figure2A) .2A). Në fakt, pas vetë-administrimit të kokainës, nivelet e proteinave të ΔFosB ishin ngritur ndjeshëm është vetëm në rats IC. Sa i përket niveleve të ARNi, rezultatet e qPCR-së zbuluan gjithashtu një efekt kryesor domethënës të kokainës (F(1, 26) = 47.1, P <0.001) dhe efekti kryesor i pasurimit mjedisor (F(1, 26) = 13.8, P <0.005). Edhe pse nivelet e përgjithshme ishin më të ulëta në minjtë EC, të dy grupet rritën mRNA të ΔFosB (Figura) (Figure2B2B).

Megjithëse të dhënat e proteinave mbështetën hipotezën origjinale, ajo u hipotezua nga Figura Figure1G1G se minjtë e KE do të tregonin më pak ARNi induksion se rats të izoluar në eksperimentin e mësipërm të kokainës, që nuk ndodhi, ka të ngjarë që Figura Figure1G1G shfrytëzuar një minutë minimale 30 dhe eksperimenti i kokainës shfrytëzonte një timepoint 3 h. Për të marrë më tutje hipotezën e mRNA-së, një pikë 30 min kohë është përdorur për të eksploruar trajtimin akut dhe përsëritjen e kokainës si një krahasim më i mirë me Figura Figure1G.1G. Për shkak se vetë-administrimi akut i kokainës është problematik për nga natyra (dmth. Mësimi i përvetësimit), EC dhe IC rats janë dhënë ditë akute ose 9 të injeksioneve të përsëritura jo kontigjente IP të kokainës (20 mg / kg). Si hipoteza, ka pasur një efekt kryesor domethënës të pasurimit mjedisor (F(1, 17) = 14.3, P <0.005), por efekti kryesor i trajtimit të kokainës (F(2, 17) = 3.4, P = 0.057) dhe ndërveprimi (F(2, 17) = 3.4, P = 0.055) treguan vetëm tendenca të forta me një test me dy bisht. Megjithatë, duke pasur parasysh se kishim hipoteza drejtuar nga Figura Figure1G, 1G, ne jemi jashtëzakonisht të rehatshëm sipas mendimit tonë se minjtë e KE-së shfaqin më pak induksione se sa minjtë IC (Figura (Figure2C2C).

Shpërndarja e tepërt e [Rritje]FosB në shell NAc simbolizon fenotipin e varësisë mbrojtëse të shkaktuar nga pasurimi

Për të hetuar efektin e ΔFosB në sjelljen e miut të pavarur nga pasurimi / izolimi mjedisor (p.sh., për t'i bërë këto rezultate më të rëndësishme për studimet jo-EC / IC), virusi adeno-shoqëruar (AAV) është përdorur për të mbiekspressuar bilaterale ΔFosB në NAc në minjtë e pasuruar me palë. Sipas studimeve tona të mëparshme, predha e NAc është më e ndjeshme për të kontrolluar sjelljen e sjelljes dhe sjelljes së drogës në lidhje me depresionin, kështu që vektorët AAV u injektuan në shell të NAc në këtë studim (Green et al. 2006, 2008, 2010). shifrat 3A, B tregojnë imunohistofluorescencën përfaqësuese të ΔFosB me vektorin e kontrollit (paneli A, dmth., shprehja endogjene ΔFosB) dhe vektorin ΔFosB-ovekspressing (paneli B) në shell NAc.

Figura 3  

Shpërndarja e tepërt e [Rritje]FosB në shell NAc simbolizon fenotipin e varësisë mbrojtëse të pasurimit mjedisor. (A-B) Imunohistokimi i përfaqësuesit të ΔFosB për kontrollin e hrGFP (A) dhe ΔFosB-ovekspression (B) Vektorët AAV. ...

Pas validimit të titrit, in vivo shprehjes dhe vendosjes së përgjithshme të vektorit viral, ne së pari studiuam efektin e overexpression të ΔFosB në modelet e ankthit. Shpërndarja e madhe e ΔFosB në shell NAc nuk ishte e mjaftueshme për të riprodhuar efektin angjikogjenik të pasurimit të mjedisit në sofobinë e saharozës dhe në paradigmat e zbrazjes së stresit të ftohtë (të dhënat nuk tregohen). Përveç kësaj, nuk kishte asnjë efekt në EPM (të dhënat nuk janë treguar). Për shkak se pasurimi mjedisor prodhon një efekt të ngjashëm me antidepressantin në minjtë, ne kemi kryer testet e lidhura me depresionin në minjtë e ekspresionit ΔFosB. Ngjashëm me modelet e ankthit, rezultatet treguan se mbizotërimi i ΔFosB në shell NAc nuk ishte i mjaftueshëm për të ulur sjelljen e ngjashme me depresionin në testin e preferencës së sukrozës, në testin e ndërveprimit social ose në FST (të dhënat nuk tregohen).

Në paradigmën e pasurimit të mjedisit, minjtë e KE tregojnë aktivitet të ulët lokomotor basal se minjtë IC (Bowling et al., 1993; Bowling dhe Bardo, 1994; Smith et al, 1997; Green dhe të tjerët, 2003, 2010). Për të hetuar efektin e overexpressing ΔFosB në shell NAc, aktiviteti spontan lokomotor është testuar për 120 min. Duke përdorur një test me dy rreze, rezultatet zbuluan se tejpërcaktimi i ΔFosB në shell NAc rezultoi një prirje e fortë për zvogëlimin e aktivitetit lokomotor të bazës në minjtë (Figura (Figure3C; 3C; t(16) = 1.84, p = 0.084). Pavarësisht se nuk janë mjaft statistikisht të rëndësishme me një test me dy bisht, këto të dhëna janë akoma intriguese duke pasur parasysh se ato përputhen me hipotezën tonë të drejtpërdrejtë të drejtuar sipas Green et al. (2010), e cila është në përputhje me efektin e pasurimit mjedisor.

In në kontrast me modelet e depresionit dhe ankthit, shprehja e tepërt e ΔFosB në shell NAc ishte në gjendje të prodhonte një fenotip të ngjashëm me KE në paradigmat e shumta të varësisë / përforcimit. unën testin e vetë-administrimit të operacionit të sakuzës së saharozës, ekzistonte një ndërveprim i rëndësishëm në mes të ekspresionit të ΔFosB dhe motivimit të urisë të minjve (F(1, 16) = 7.4, P <0.01). Rats mbishprehur ΔFosB në shell NAc mori në mënyrë të konsiderueshme më shumë (p.sh., në 85% peshë ushqimi të lirë), por pak pelleta nën kushtet e motivuara të ulët (p.sh., peshë pa ushqim 100%; Figura Figure3D) 3D), i cili imiton fenotipin e KE-së në mënyrë të përkryer (Green et al., 2010).

Në paradigmën e pasurimit të mjedisit, minjtë e KE treguan sjellje të reduktuar të kërkimit të kokainës në zhdukje dhe rikthimin e shkaktuar nga kokaina (Green et al., 2010). Kështu, marrja dhe kërkimi i sjelljes së kokainës është matur në minjtë që shprehin ΔFosB duke përdorur paradigmën intravenoze të vetë-administrimit të kokainës. Si një model i mall, paradigma e zhdukjes së kokainës zbuloi se ekspresioni i ΔFosB në shell NAc ulte sjelljen e kërkuar të drogësr (F(1, 15) = 6.7, P <0.05; Figura Figure3E) .3E). Ka pasur gjithashtu një efekt kryesor domethënës të seancës (F(2, 30) = 74.0, P <0.001). Për përgjigjen e mirëmbajtjes sipas një skeme FR1, kishte një efekt kryesor të rëndësishëm të dozës (F(7, 105) = 222.6, P <0.001) dhe një ndërveprim domethënës (F(7, 105) = 2.3, P <0.05) në marrjen kumulative të kokainës. Natyra e ndërveprimit ishte e tillë që ndryshimet ishin të dukshme vetëm në doza më të larta të kokainës (Figura (Figure3F) .3F). Së fundi, në rikthimin e shkaktuar nga kokaina, kishte një efekt domethënës kryesor të dozës (F(4, 44) = 15.5, P <0.001) dhe një prirje për një efekt kryesor të mbishprehjes së ΔFosB duke përdorur një test me dy bishta (F(1, 11) = 4.1, P = 0.067). Megjithatë, duke pasur parasysh hipotezën drejtuar nga Green et al. (2010) dhe rezultatet statistikisht të rëndësishme dhe të qëndrueshme në Figura 3D, E, F, ka të ngjarë që ΔFosB të zvogëlohet rivendosja (Figura (Figure3G) .3G). Përgjigja në dozën 10 mg / kg ishte dukshëm më e ulët për minjtë që shprehin ΔFosB. Rezultatet si një e tërë tregojnë se tejpërcaktimi i ΔFosB në shell shell NAc zvogëlon marrjen e kokainës dhe kërkon sjellje, e cila është në përputhje me efektet e sjelljes së pasurimit të mjedisit.

Diskutim

Dobësia e individëve në varësi dhe depresion është e prekur rëndë nga faktorët e mjedisit. Pasurimi mjedisor është një paradigmë që manipulon mjedisin jetësor të kafshëve, duke prodhuar efekte mbrojtëse kundër shumë kushteve psikiatrike. ΔFosB luan një rol kyç në rregullimin e funksionit të shpërblimit në rajone të shumta të trurit, duke përfshirë NAc dhe striatum dorsal (Koob et al, 1998; Wise, 1998; Wallace et al., 2008; Grueter et al., 2013; Pitchers et al., 2013). Në këtë projekt, ne kemi studiuar rregullimin dinamik të ΔFosB nga stresi i përmbajtjes dhe kokaina në rats të pasuruar dhe të izoluar. Gjetjet kryesore të këtij projekti janë:

(1) minjtë e KE kanë rritur nivelet e ΔFosB në NAc në bazë krahasuar me minjtë IC;

(2) vetëm rats IC grumbullojnë proteina shtesë ΔFosB me stres të përsëritur;

(3), minjtë e KE-së shfaqin indukimin e zbutur të mRNA-së ΑFosB pas stresit ose kokainës; dhe

(4) që ekspresionon ΔFosB në NAc të rats të strehuar me çifte, simbolizon fenotipin e varësisë mbrojtëse, por jo fenotipin mbrojtës të depresionit.

Dikush mund të presë nga literatura e botuar, e cila tregon se minjtë eksogjencues transfuzional të ΔFosB tregojnë ndjeshmëri më të madhe ndaj shpërblimit të kokainës dhe vetë-administrimit në doza të ulëta të barnave (Kelz et al., 1999; Colby et al, 2003; Vialou et al, 2010; Robison et al., 2013), se minjtë e ekspresionit të ΔFosB në eksperimentin aktual do të shfaqnin një prirje më të madhe për vetë-administrimin dhe kërkimin e kokainës. In Eksperimentet e tanishme, megjithatë, shprehja e tepërt e ΔFosB në shell NAc ka rënë marrja e kokainës dhe kërkimi i kokainës gjatë zhdukjes dhe rivendosjes, duke treguar motivimin e reduktuar për kokainë. Mospërputhja mund të jetë për shkak të faktit se minjtë transgjenikë shprehën ΔFosB gjatë gjithë striatumit, por vetëm në qelizat dynorfin + (Colby et al., 2003). Në eksperimentin e tanishëm ΔFosB ishte mbiekspressuar përmes një vektori AAV i cili infekton neuronet dinorfin + dhe enkefalin +. Së dyti, studimi aktual përqendrohet në shell NAc se sa në të gjithë rajonin striatal.

Përveç fenotipit të varësisë, pasurimi mjedisor prodhon profilet antidepresante dhe anksiogjenike në minjtë (Green et al., 2010; Vialou et al, 2010). Në studimin e tanishëm, shprehja e tepërt e ΔFosB në NAc dështoi të prodhonte efekte në secilën prej tre depresionit ose tre testeve të ankthit. Megjithëse ka shumë faktorë të mundshëm që mund të kontribuojnë në ΔFosB që imiton varësinë e pasurimit por jo nga fenotipi i depresionit, është e mundur që predha e NAc është më dominuese për sjelljen e varësisë, ndërsa sjellja e lidhur me depresionin mund të ndërmjetësohet më me forcë nga rajone të tjera. Gjetjet e tanishme janë në kundërshtim me studimet në miu ku shprehja e tepërt e ΔFosB në NAc (ku nuk mund të dallojmë në mënyrë të besueshme shell-core) ka prodhuar efekte të forta si antidepresante në disa teste të sjelljes (Vialou et al, 2010). Një arsye e mundshme është se mund të jetë më e lehtë të shihet efekti i ΔFosB në modelet e sjelljes së stresit të rëndë si stresi i humbjes shoqërore. Studimi i tanishëm i overexpression hulumtoi sjelljen e ngjashme me depresionin në mungesë të një stresori të rëndë.

Në mënyrë të vazhdueshme gjatë gjithë këtij studimi, nivelet e larta bazike të ΔFosB (p.sh., nga pasurimi, stresi i përsëritur ose kokaina) lidhen me induksionin e dobët të ΔFosB. Kjo mund të përfaqësojë një efekt tavani, pa asnjë induksion të mëtejshëm të mundshëm në krye të niveleve bazale të ngritura të proteinës. Është gjithashtu e mundur që nivelet e grumbulluara të ΔFosB mund të kthehen prapa për të penguar induksionin e mëtutjeshëm të ARN mRNA pas stresit ose kokainës si një lak negativ feedback. Për shembull, EC rats kishin nivele të larta të ΔFosB dhe treguan një induksion attenuated të ΔFosB pas stresit ose kokainës. Kjo nënvizon korrelacionin negativ ndërmjet niveleve të proteinave ΔFosB dhe induksionit të tij të mRNA. Reagimet negative të ΔFosB të akumuluar llogariten gjithashtu për induksionin e zbutur të ΔFosB me stres të përsëritur në minjtë IC.

Për të qenë i qartë, nuk bëjmë asnjë pretendim se paradigma e pasurimit të mjedisit ka rëndësi të drejtpërdrejtë të përkthimit, pasi ka shumë pak fëmijë të rritur në privim të vërtetë (duhet të theksohet se privimi socio-ekonomik nuk barazohet me privimin mjedisor). Përdorimi i kësaj paradigme është se është një manipulim jo-ilaç, jo-kirurgjik, jo-gjenetik që prodhon fenotip të sjelljes mbrojtëse për varësinë dhe depresionin që mund të shfrytëzohet në një mjedis të kontrolluar nga laboratori si një mjet bazë shkencor për identifikimin e mekanizmave molekularë qëndrueshmëria themelore ndaj kushteve psikiatrike. Hulumtimi i mëparshëm ka përshkruar në mënyrë të hollësishme fenotipet e sjelljes (Bowling et al., 1993; Bowling dhe Bardo, 1994; Bardo et al., 1995; Green dhe të tjerët, 2002, 2003; El Rawas et al, 2009) dhe studimet më të fundit (Solinas et al., 2009; Green dhe të tjerët, 2010; Lobo et al, 2013), së bashku me studimin e tanishëm, po japin të dhëna për mekanizmat transkripsionë që i nënshtrojnë këto fenotip të sjelljes. Gjenet / proteinat e synuara transkriptiale në rrjedhën e poshtme që prodhojnë fenotipet mbrojtëse aktualisht janë duke u hetuar (Fan et al., 2013a,b; Lichti et al, 2014).

Konceptimi ynë i pasurimit mjedisor është se pasurimi është një vazhdimësi me izolim në fund të ulët dhe pasurim të plotë në fund të lartë. "Plotësimi i plotë "në këtë rast është definuar si një mjedis ku subjektet janë të ekspozuar ndaj risi, kontakti jo-kërcënues social me personat e interesuar dhe lejohen hapësirë ​​dhe objekte për stërvitje. Ttë tre faktorët përfaqësojnë gjendjen komplekse të "pasurimit" sepse ata janë secili prej tyre që shpërblyen dhe secili lëshon dopamin në NAc dhe si i tillë, aktivizon një qark të përbashkët neurobiologjik (Louilot et al., 1986; Calcagnetti dhe Schechter, 1992; Crowder dhe Hutto, 1992; Rebec et al., 1997; Bevins et al., 2002). Në këtë konceptualizim, izolimi konsiderohet si grup i kontrollit, sepse përfaqëson mungesën e manipulimit (dmth. Pasurimin; Crofton et al., Në shqyrtim). Megjithatë, konceptualizime të tjera janë të mundshme. Në një konceptualizim alternativ, vazhdimi është i njëjtë, por grupi i izolimit është grupi eksperimental dhe grupi i pasuruar është kontrolli. unën ky model, duke i privuar subjektet e pasurimit normal is manipulimi aktual. INë këtë rast, në vend që të thuhet se pasurimi është mbrojtës, dikush do të thoshte se izolimi jep ndjeshmëri. Ende një konceptualizim i tretë tregon se nuk ka asnjë vazhdimësi dhe se pasurimi dhe izolimi janë dy manipulime rrënjësisht të ndryshme. Në këtë këndvështrim, pasurimi dhe izolimi duhet të ndahen dhe të dyja, krahasuar me një kontroll të vendosur me palë. Mungesa e një konsensusi universal në lidhje me natyrën e pasurimit paraqet një kufizim të paradigmës, por siguron drejtim për studimet e ardhshme. Pa marrë parasysh, rezultatet e këtyre eksperimenteve qëndrojnë të qëndrueshme pavarësisht nga interpretimi i mëvonshëm.

Mjedisi dhe përvojat jetësore kanë një ndikim të fortë në zhvillimin dhe shprehjen e shumë kushteve psikiatrike. Kuptimi i mekanizmit të varësisë mbrojtëse dhe depresionit fenotip të pasurimit të mjedisit trajton një pyetje themelore në hulumtimin e çrregullimeve mendore-domethënë kontributin mjedisor ndaj ndjeshmërisë ose rezistencës ndaj kushteve psikiatrike. Ky studim nënvizon rëndësinë e ΔFosB në rregullimin e sjelljeve që lidhen me varësinë. Në studimet e ardhshme, veprimi i ΔFosB dhe efektet e tij aktivizuese dhe frenuese në gjenet e veçanta të synuar duhet të hulumtohen më tutje në kuadër të modelit të pasurimit të mjedisit.

Financimi dhe zbulimi

Yafang Zhang, asnjë; Elizabeth J. Crofton, asnjë; Dingge Li, asnjë; Mary Kay Lobo, asnjë; Fan Xiuzhen, asnjë; Eric J. Nestler, R37DA007359; Thomas A. Green, DA029091.

Deklarata e konfliktit të interesit

Autorët deklarojnë se hulumtimi është kryer në mungesë të ndonjë marrëdhënie tregtare ose financiare që mund të interpretohet si një konflikt i mundshëm interesi.

Mirënjohje

Këto eksperimente u financuan nga granti i Institutit Kombëtar për abuzimin e drogës, DA029091 dhe R37DA007359. Kokaina e siguruar nga Instituti Kombëtar për abuzimin e drogës.

Referencat

  1. Akdeniz C., Tost H., Meyer-Lindenberg A. (2014). Neurobiologjia e rrezikut mjedisor social për skizofreninë: një fushë kërkimore në zhvillim. Soc. Psikiatria Psychiatr. Epidemiol. 49, 507-517 10.1007 / s00127-014-0858-4 [PubMed] [Cross Ref]
  2. Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ (2007). Rregullimi i ekspresionit të fosB dhe DeltafosB mRNA: studime in vivo dhe in vitro. Brain Res. 1143, 22-33 10.1016 / j.brainres.2007.01.069 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  3. Bardo MT, Bowling SL, Rowlett JK, Manderscheid P., Buxton ST, Dwoskin LP (1995). Pasurimi mjedisor zbut sensibilizimin e locomotorit, por jo lirimin in vitro të dopaminës, të shkaktuar nga amfetamina. Pharmacol. Biochem. Behav. 51, 397-405 10.1016 / 0091-3057 (94) 00413-d [PubMed] [Cross Ref]
  4. Bevins RA, Besheer J., Palmatier MI, Jensen HC, Pickett KS, Eurek S. (2002). Kondicionimi i vendeve të reja: proceset e sjelljes dhe dopaminergic në shprehjen e shpërblimit të risi. Behav. Brain Res. 129, 41-50 10.1016 / s0166-4328 (01) 00326-6 [PubMed] [Cross Ref]
  5. Bowling SL, Bardo MT (1994). Locomotori dhe efektet shpërblyese të amfetaminës në rats të pasuruar, shoqëror dhe të izoluar. Pharmacol. Biochem. Behav. 48, 459-464 10.1016 / 0091-3057 (94) 90553-3 [PubMed] [Cross Ref]
  6. Bowling SL, Rowlett JK, Bardo MT (1993). Efekti i pasurimit të mjedisit në amfetaminën-stimuluar aktivitetin lokomotor, sinteza dopamine dhe lirimin dopamine. Neurofarmakologjia 32, 885-893 10.1016 / 0028-3908 (93) 90144-r [PubMed] [Cross Ref]
  7. Calcagnetti DJ, Schechter MD (1992). Vendi i kushtëzuar zbulon aspektin shpërblyes të ndërveprimit social në minjtë e rinj. Physiol. Behav. 51, 667-672 10.1016 / 0031-9384 (92) 90101-7 [PubMed] [Cross Ref]
  8. Chen J., NYe HE, MB Kelz, Hiroi N., Nakabeppu Y., Hope BT, et al. (1995). Rregullimi i proteinave Delta FosB dhe FosB si nga sekuestrimi elektrokonvulsiv dhe trajtimet e kokainës. Mol. Pharmacol. 48, 880-889 [PubMed]
  9. Colby CR, Whisler K., Steffen C., Nestler EJ, Vetë DW (2003). Zmadhimi i tepërt i tipit qelizor striatoz të DeltaFosB rrit nxitjen për kokainë. J. Neurosci. 23, 2488-2493 [PubMed]
  10. Crowder WF, Hutto CW (1992). Masat e kushtëzimit të vendit të punës janë ekzaminuar duke përdorur dy armatura të antitrupave. Pharmacol. Biochem. Behav. 41, 817-824 10.1016 / 0091-3057 (92) 90233-6 [PubMed] [Cross Ref]
  11. Elisei S., Sciarma T., Verdolini N., Anastasi S. (2013). Resilience dhe çrregullime depresive. Psychiatr. Danubit. 25 (Shtesa 2), S263-S267 [PubMed]
  12. El Rawas R., Thiriet N., Lardeux V., Jaber M., Solinas M. (2009). Pasurimi mjedisor zvogëlon efektet e dobishme, por jo aktivizimin e heroinës. Psikofarmakologjia (Berl) 203, 561-570 10.1007 / s00213-008-1402-6 [PubMed] [Cross Ref]
  13. Fan X., Li D., Lichti CF, Green TA (2013a). Proteomika dinamike e bërthamës accumbens në përgjigje të stresit akut psikologjik në minjtë e pasuruar me mjedis dhe të izoluar. PLoS Një 8: e73689 10.1371 / journal.pone.0073689 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  14. Fan X., Li D., Zhang Y., Green TA (2013b). Rregullimi diferencues i phosphoproteome të nucleus accumbens në minjtë e pasuruar me mjedis dhe të izoluar në përgjigje të stresit akut. PLoS Një 8: e79893 10.1371 / journal.pone.0079893 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  15. Green TA, Alibhai IN, Hommel JD, Dileone RJ, Kumar A., ​​Theobald DE, et al. (2006). Induksioni i shprehjes induksionuese të cAMP të hershëm të represionit në nucleus accumbens nga stresi ose amfetamina rrit përgjigjet e sjelljes ndaj stimujve emocionalë. J. Neurosci. 26, 8235-8242 10.1523 / jneurosci.0880-06.2006 [PubMed] [Cross Ref]
  16. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, et al. (2010). Pasurimi mjedisor prodhon një fenotip të sjelljes të ndërmjetësuar nga aktiviteti i ulët i ciklit të reagimit adenosine monophosphate (CREB) në nucleus accumbens. Biol. Psikiatria 67, 28-35 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  17. Green TA, Alibhai IN, Unterberg S., Neve RL, Ghose S., Tamminga CA, et al. (2008). Induksioni i aktivizimit të faktorëve të transkriptimit (ATF) ATF2, ATF3 dhe ATF4 në bërthamë accumbens dhe rregullimi i tyre i sjelljes emocionale. J. Neurosci. 28, 2025-2032 10.1523 / jneurosci.5273-07.2008 [PubMed] [Cross Ref]
  18. Green TA, Cain ME, Thompson M., Bardo MT (2003). Pasurimi në mjedis zvogëlon hiperaktivitetin e nxitur nga nikotina në rats. Psikofarmakologjia (Berl) 170, 235-241 10.1007 / s00213-003-1538-3 [PubMed] [Cross Ref]
  19. Green TA, Gehrke BJ, Bardo MT (2002). Pasurimi mjedisor ul vetë-administrimin intravenoz të amfetaminës në minjtë: funksionet e dozës-përgjigje për oraret fikse dhe progresive. Psikofarmakologjia (Berl) 162, 373-378 10.1007 / s00213-002-1134-y [PubMed] [Cross Ref]
  20. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC (2013). ΔFosB diferencialisht modulon funksionin e drejtpërdrejtë dhe indirekt të bërthamës accumbens. Proc. Natl. Acad. Sci. SHBA 110, 1923-1928 10.1073 / pnas.1221742110 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  21. Hope B., Kosofsky B., Hyman SE, Nestler EJ (1992). Rregullimi i shprehjes së menjëhershme të gjeneve të hershme dhe lidhjes AP-1 në bërthamën e miut të akumuluar nga kokaina kronike. Proc. Natl. Acad. Sci. SHBA 89, 5764-5768 10.1073 / pnas.89.13.5764 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Vetë DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y., et al. (1994). Induksioni i një kompleksi AP-1 afatgjatë të përbërë nga proteinat e ndryshuara të Fos-it në tru me kokainë kronike dhe trajtime të tjera kronike. Neuron 13, 1235-1244 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2 [PubMed] [Cross Ref]
  23. Jha S., Dong B., Sakata K. (2011). Trajtimi i pasuruar i mjedisit kthen sjelljen e ngjashme me depresionin dhe rikthen neurogjenezën e hipokampës dhe nivelet e proteinave të faktorëve neurotrofikë të trurit që rrjedhin nga minjtë që nuk kanë shprehjen e tyre përmes promotorit IV. Përk. Psikiatria 1: e40 10.1038 / tp.2011.33 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  24. Kato T., Iwamoto K. (2014). Metilizimi gjithëpërfshirës i ADN-së dhe analizat e hidroksimetilimit në trurin e njeriut dhe implikimet e saj në çrregullimet mendore. Neurofarmakologjia 80, 133-139 10.1016 / j.neuropharm.2013.12.019 [PubMed] [Cross Ref]
  25. Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM, et al. (1999). Shprehja e faktorit të transkriptimit deltaFosB në tru kontrollon ndjeshmërinë ndaj kokainës. Natyra 401, 272-276 10.1038 / 45790 [PubMed] [Cross Ref]
  26. Kelz MB, Nestler EJ (2000). deltaFosB: një kalim molekular që nënvizon plasticitetin afatgjatë nervor. Curr. Mendime. Neurol. 13, 715-720 10.1097 / 00019052-200012000-00017 [PubMed] [Cross Ref]
  27. Koob GF, Sanna PP, Bloom FE (1998). Neuroscience e varësisë. Neuron 21, 467-476 [PubMed]
  28. Larson EB, Graham DL, Arzaga RR, Buzin N., Webb J., Green TA, et al. (2011). Shpërndarja e tepërt e CREB në shell nucleus accumbens rrit armatimin e kokainës në minjtë vetë-administrues. J. Neurosci. 31, 16447-16457 10.1523 / JNEUROSCI.3070-11.2011 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  29. Laviola G., Hannan AJ, Macrì S., Solinas M., Jaber M. (2008). Efektet e mjedisit të pasuruar në modelet e kafshëve të sëmundjeve neurodegjenerative dhe çrregullimeve psikiatrike. Neurobiol. Dis. 31, 159-168 10.1016 / j.nbd.2008.05.001 [PubMed] [Cross Ref]
  30. Lichti CF, Fan X., anglisht RD, Zhang Y., Li D., Kong F., et al. (2014). Pasurimi mjedisor ndryshon shprehjen e proteinave, si dhe përgjigjen proteomike ndaj kokainës në nucleus accumbens të miut. Front. Behav. Neurosci. 8: 246 10.3389 / fnbeh.2014.00246 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  31. Lobo MK, Zaman S., Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, et al. (2013). Induksioni ΔFosB në subtipet neurone të mesme striatake në përgjigje të stimujve kronik farmakologjik, emocional dhe optogenetik. J. Neurosci. 33, 18381-18395 10.1523 / JNEUROSCI.1875-13.2013 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  32. Louilot A., Le Moal M., Simon H. (1986). Reaktivitet diferencues i neuroneve dopaminergjike në bërthamën accumbens në përgjigje të situatave të ndryshme të sjelljes. Një studim volvamtrik në vivo në minjtë lëvizës të lirë. Brain Res. 397, 395-400 10.1016 / 0006-8993 (86) 90646-3 [PubMed] [Cross Ref]
  33. McBride WJ, Kimpel MW, Mcclintick JN, Ding ZM, Edenberg HJ, Liang T., et al. (2014). Ndryshimet në shprehjen e gjeneve brenda amygdalës së zgjeruar pas pirjes alkoolike si pirja e alkoolit nga adoleshentët që preferojnë alkoolin (P). Pharmacol. Biochem. Behav. 117, 52-60 10.1016 / j.pbb.2013.12.009 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  34. Mlynarik M., Johansson BB, Jezova D. (2004). Mjedis i pasuruar ndikon në përgjigjen adrenokortike ndaj sfidës imune dhe shprehjes së gjenit të receptorit të glutamatit në hippocampusin e miut. Ann. NY Acad. Sci. 1018, 273-280 10.1196 / annals.1296.032 [PubMed] [Cross Ref]
  35. Nestler EJ (2001). Neurobiologjia molekulare e varësisë. Jam. J. Addict. 10, 201-217 10.1080 / 105504901750532094 [PubMed] [Cross Ref]
  36. Nestler EJ (2008). Shqyrtim. Mekanizmat transkripcionalë të varësisë: roli i DeltaFosB. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 363, 3245-3255 10.1098 / rstb.2008.0067 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  37. Nestler EJ, Barrot M., Vetë DW (2001). DeltaFosB: një kalim i qëndrueshëm molekular për varësinë. Proc. Natl. Acad. Sci. SHBA 98, 11042-11046 10.1073 / pnas.191352698 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  38. Perrotti LI, Hadeishi Y., Ulery PG, Barrot M., Monteggia L., Duman RS, et al. (2004). Induksioni i deltaFosB në strukturat e trurit të lidhura me shpërblimin pas stresit kronik. J. Neurosci. 24, 10594-10602 10.1523 / jneurosci.2542-04.2004 [PubMed] [Cross Ref]
  39. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B., Renthal W., Maze I., Yazdani S., et al. (2008). Modele të dallueshme të induksionit DeltaFosB në tru nga drogat e abuzimit. Synapse 62, 358-369 10.1002 / sin.20500 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  40. Pitchers KK, Vialou V., Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM (2013). Shpërblimet natyrore dhe të drogës veprojnë mbi mekanizmat e zakonshëm të plasticitetit nervor me ΔFosB si ndërmjetës kyç. J. Neurosci. 33, 3434-3442 10.1523 / jneurosci.4881-12.2013 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  41. Rebec GV, Christensen JR, Guerra C., Bardo MT (1997). Dallimet rajonale dhe kohore në efflux dopamine në kohë reale në bërthamë accumbens gjatë risi të zgjedhjes së lirë. Brain Res. 776, 61-67 10.1016 / s0006-8993 (97) 01004-4 [PubMed] [Cross Ref]
  42. Robison AJ, Vialou V., Mazei-Robison M., Feng J., Kourrich S., Collins M., et al. (2013). Përgjigjet e sjelljes dhe strukturore ndaj kokainës kronike kërkojnë një lak me hyrje që përfshin ΔFosB dhe kalcium / calmodulin-dependent protein kinase II në shell nucleus accumbens. J. Neurosci. 33, 4295-4307 10.1523 / jneurosci.5192-12.2013 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  43. Smith JK, Neill JC, Costall B. (1997). Kushtet e strehimit të pas ndarjes ndikojnë në efektet e sjelljes së kokainës dhe d-amfetaminës. Psikofarmakologjia (Berl) 131, 23-33 10.1007 / s002130050261 [PubMed] [Cross Ref]
  44. Solinas M., Chauvet C., Thiriet N., El Rawas R., Jaber M. (2008). Zvogëlimi i varësisë së kokainës nga pasurimi mjedisor. Proc. Natl. Acad. Sci. SHBA 105, 17145-17150 10.1073 / pnas.0806889105 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  45. Solinas M., Thiriet N., El Rava R., Lardeux V., Jaber M. (2009). Pasurimi në mjedis gjatë fazave të hershme të jetës redukton efektet e sjelljes, neurokimi dhe molekulare të kokainës. Neuropsychopharmacology 34, 1102-1111 10.1038 / npp.2008.51 [PubMed] [Cross Ref]
  46. Shkallët DJ, Prendergast MA, Bardo MT (2011). Ndryshimet e shkaktuara nga mjedisi në bllokadën e receptorit të kortikosteronit dhe receptorit glukokortikoid të vetë-administrimit të amfetaminës në minjtë. Psikofarmakologjia (Berl) 218, 293-301 10.1007 / s00213-011-2448-4 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  47. Thiel KJ, Pentkowski NS, Peartree NA, Piktor MR, Neisewander JL (2010). Kushtet e jetesës mjedisore të paraqitura gjatë mosrespektimit të detyruar ndryshojnë sjelljen që kërkon kokainë dhe shprehjen e proteinave Fos. Neuroscience 171, 1187-1196 10.1016 / j.neuroscience.2010.10.001 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  48. Thiel KJ, Sanabria F., Pentkowski NS, Neisewander JL (2009). Efektet anti-mall për pasurimin e mjedisit. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 1151-1156 10.1017 / s1461145709990472 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  49. Van Winkel M., Peeters F., Van Winkel R., Kenis G., Collip D., Geschwind N., et al. (2014). Ndikimi i variacionit në gjenin BDNF mbi ndjeshmërinë e stresit social dhe ndikimin buffering të emocioneve pozitive: replikimin dhe zgjerimin e një ndërveprimi gjen-mjedis. Eur. Neuropsychopharmacol. 24, 930-938 10.1016 / j.euroneuro.2014.02.005 [PubMed] [Cross Ref]
  50. Venebra-Muñoz A., Corona-Morales A., Santiago-García J., Melgarejo-Gutierrez M., Caba M., Garcia-García F. (2014). Mjedis i pasuruar zbut vetë-administrimin e nikotinës dhe shkakton ndryshime në shprehjen ΔFosB në korteksin prefrontal miu dhe nucleus accumbens. Neuroreport 25, 694-698 10.1097 / wnr.0000000000000157 [PubMed] [Cross Ref]
  51. Vialou V., Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, DM Dietz, Ohnishi YN, et al. (2010). DeltaFosB në qarqet e shpërblimit të trurit ndërmjetëson elasticitetin ndaj stresit dhe përgjigjeve kundër depresionit. Nat. Neurosci. 13, 745-752 10.1038 / nn.2551 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  52. Wallace DL, Vialou V., Rios L., Carle-Florence TL, Chakravarty S., Kumar A., ​​et al. (2008). Ndikimi i DeltaFosB në bërthamën accumbens në sjelljen e natyrshme të shpërblimit. J. Neurosci. 28, 10272-10277 10.1523 / jneurosci.1531-08.2008 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  53. Wang Y., Cesena TI, Ohnishi Y., Burger-Caplan R., Lam V., Kirchhoff PD, et al. (2012). Ekzaminimi i molekulave të vogla identifikon rregullatorët e faktorit të transkriptimit ΔFosB. ACS Chem. Neurosci. 3, 546-556 10.1021 / cn3000235 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  54. Werme M., Messer C., Olson L., Gilden L., Thoren P., Nestler EJ, et al. (2002). Delta FosB rregullon drejtimin e rrotave. J. Neurosci. 22, 8133-8138 [PubMed]
  55. Winstanley CA, Bachtell RK, Theobald DE, Laali S., Green TA, Kumar A., ​​et al. (2009a). Rritja e impulsivitetit gjatë tërheqjes nga vetë-administrimi i kokainës: roli i DeltaFosB në korteksin orbitofrontal. Cereb. Cortex 19, 435-444 10.1093 / kërkim / bhn094 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  56. Winstanley CA, Green TA, Theobald DE, Renthal W., LaPlant Q., DiLone RJ, et al. (2009b). Induksioni DeltaFosB në korteksin orbitofrontal fuqizon ndjeshmërinë e lokomotoreve pavarësisht zbutjes së mosfunksionimit njohës të shkaktuar nga kokaina. Pharmacol. Biochem. Behav. 93, 278-284 10.1016 / j.pbb.2008.12.007 [Artikulli i lirë i PMC] [PubMed] [Cross Ref]
  57. Winstanley CA, LaPlant Q., Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, et al. (2007). Induksioni DeltaFosB në korteksin orbitofrontal ndërmjetëson tolerancën ndaj mosfunksionimit njohës të kokainës. J. Neurosci. 27, 10497-10507 10.1523 / jneurosci.2566-07.2007 [PubMed] [Cross Ref]
  • RA urti (1998). Aktivizimi i drogës i rrugëve të shpërblimit të trurit. Alkooli i drogës varet. 51, 13-22 10.1016 / s0376-8716 (98) 00063-5 [PubMed] [Cross Ref]