Утицај прекомерне експресије ΔФосБ на сигнализацију посредовану опиоидним и канабиноидним рецепторима у нуцлеус аццумбенс (КСНУМКС)

Неуропхармацологи. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

Сим-Селлеи Љ, Цассиди МП, Спарта А, Зацхариоу В, Нестлер ЕЈ, Селлеи ДЕ.

извор

Одсек за фармакологију и токсикологију и Институт за студије лекова и алкохола, Медицински факултет Универзитета Вирџиније, Рицхмонд, ВА КСНУМКС, САД.

Апстрактан

Стабилни транскрипциони фактор ΔФосБ је индукован у нуцлеус аццумбенс (НАц) хроничном изложеношћу неколико лекова злоупотребе, а трансгена експресија ΔФосБ у стриатуму повећава награђивана својства морфијума и кокаинае. Ме | утим, механи ~ ка основа за ова опаʻања није потпуно схва} ена. Користили смо модел битрансгенског миша са индуцибилном експресијом ΔФосБ у допамин Д (КСНУМКС) рецептори / динорпхин који садрже стриаталне неуроне да би се одредио ефекат експресије ΔФосБ на сигнализацију опиоидног и канабиноидног рецептора у НАц. Резултати су показали да је активност Г-протеина посредована опиоидима и инхибиција аденилил циклазе појачани у НАц мишева који су изразили ΔФосБ. Слично томе, каппа опиоидна инхибиција аденилил циклазе је побољшана у мишевима који експримирају ΔФосБ. Насупрот томе, сигнализирање посредовано канабиноидним рецепторима није се разликовало између мишева који су прекомерно експримирали ΔФосБ и контролних мишева. TРезултати истраживања указују да су сигнализација опиоидног и канабиноидног рецептора диференцијално модулирана експресијом ΔФосБ, и указују на то да експресија ΔФосБ може произвести неке од својих ефеката путем појачаног му и капа опиоидног рецептора у НАц.

Кључне речи: Г-протеин, аденилил циклаза, стриатум
Иди на:

КСНУМКС. увод

Опиоидни рецептори и канабиноидни ЦБ1 рецептори (ЦБ1Р) су неуробиолошки циљеви за две широко коришћене класе лекова које укључују морфијум, хероин и опиоиде на рецепт, и марихуану (Δ).9-тетрахидроканабинол (ТХЦ)). Акутни ефекти опиоида и канабиноида посредовани су Г-протеин-везаним рецепторима који активирају примарно Ги / о протеини и производе низводне ефекторске одговоре као што је инхибиција аденилил циклазе (Цхилдерс, КСНУМКС, Цхилдерс, ет ал., КСНУМКС, Ховлетт, ет ал., КСНУМКС). Мотори, поремећаји памћења и психоактивни ефекти Δ9-ТХЦ производе ЦБ1Р (Хуестис, ет ал., КСНУМКС, Зиммер ет ал., КСНУМКС), који су широко распрострањени у мозгу, са високим нивоом у базалним ганглијима, хипокампусу и церебелуму (Херкенхам, ет ал., КСНУМКС). Аналгетски и ревардинг ефекти већине клинички релевантних и злоупотребљених опиоидних лекова углавном су посредовани му опиоидним рецепторима (МОР) (Маттхес ет ал., КСНУМКС), који су обогаћени лимбичким системом и можданим стаблом (Мансоур, ет ал., КСНУМКС). Мезолимбички систем, састављен од допаминергичких пројекција из вентралног тегменталног подручја (ВТА) до нуцлеус аццумбенс (НАц), игра важну улогу у ефектима награђивања опиоида и канабиноида (Бозартх и Висе, КСНУМКС, Ваццарино, ет ал., КСНУМКС, Занген ет ал., КСНУМКС), као и друге дроге злоупотребе (Кооб и Волков, КСНУМКС). Штавише, ендогени опиоидни и канабиноидни системи су укључени у ефекте награђивања више класа психоактивних лекова (Малдонадо, ет ал., КСНУМКС, Триго, ет ал., КСНУМКС). Стога је важно разјаснити механизме по којима опиоиди и ЦБ1Р сигнализација је регулисана у НАц.

Централно питање на пољу злоупотребе дрога је било идентификовање протеина који посредују у преласку из акутних у дугорочне ефекте психоактивних дрога. Фактор транскрипције АП-КСНУМКС ΔФосБ је посебно интересантан јер је стабилан производ са скраћеним спојем. фосб ген који се акумулира при поновљеном излагању лековима злоупотребе или природним наградама (МцЦлунг, ет ал., КСНУМКС, Нестлер, КСНУМКС, Нестлер, ет ал., КСНУМКС). Установили смо да се ΔФосБ индукује у мозгу након поновљене изложености морфину, Δ9-ТХЦ, кокаин или етанол, при чему сваки лек производи јединствени регионални образац ΔФосБ експресије (Перротти, ет ал., КСНУМКС). Константан налаз код лекова био је да је ΔФосБ био високо индукован у стриатуму, где су сва четири лека изазвала ΔФосБ у НАц језгру и све осим9-ТХЦ значајно индукује експресију у шкољци НАц и каудат-путамену.

Фармаколошка испитивања су показала да истовремена примена допамина Д1 рецептор (Д1Р) антагонист СЦХ КСНУМКС блокирао је индукцију ΔФосБ у НАц и каудат-путамен након интермитентне администрације кокаина или морфина, што указује на потенцијалну важност Д1Неурони који експримирају Р (Муллер и Унтервалд, КСНУМКС, Ние, ет ал., КСНУМКС). Ефекат индукције ΔФосБ на понашања посредована леком испитиван је коришћењем битрансгенских мишева који експримирају ΔФосБ у специфичним неуронским популацијама НАц и дорзалног стриатума (Цхен, ет ал., КСНУМКС). Мишеви који експримирају ΔФосБ у динорпхин / Д1Р позитивни неурони у НАц и дорзалном стриатуму (линија КСНУМКСА) показују измењене одговоре на дроге злоупотребе, нарочито повећану осјетљивост на ефекте кокаина или морфијума (Цолби, ет ал., КСНУМКС, Келз, ет ал., КСНУМКС, Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС). Ове промене су се десиле у одсуству промена нивоа МОР или различитих подјединица Г-протеина. Међутим, нивои мИНР динорфина су смањени у НАц мишева који експримирају ΔФосБ (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС), што сугерише да је један циљ ΔФосБ ген који кодира ендогени опиоидни пептид. ΔФосБ индукција такође може произвести промјене у понашању регулацијом сигнализације рецептора у НАц, али ова могућност није истражена. Стога, ове студије су користиле модел битрансгенског миша да би одредиле да ли је прекомерна експресија ΔФосБ у динорфину / Д1Р који садржи стриаталне неуроне мења активност Г-протеина посредовану МОР-ом и инхибицију аденил-циклазе посредоване МОР- и КОР-ом у НАц. Ефекат ΔФосБ на ЦБ1Р-посредована активност Г-протеина је такође процењена због Δ9-ТХЦ примењује ΔФосБ у НАц (Перротти, ет ал., КСНУМКСи познато је да ендоканабиноидни систем регулише коло награђивања мозга (Гарднер, КСНУМКС, Малдонадо, ет ал., КСНУМКС), али ефекат ΔФосБ на ендоканабиноидни систем није испитан.

Иди на:

КСНУМКС. Материјали и методе

КСНУМКС. Реагенси

[35С] ГТПиС (КСНУМКС Ци / ммол), [α-32П] АТП (КСНУМКС Ци / ммол) и [3Х] цАМП (КСНУМКС Ци / ммол) је набављен од ПеркинЕлмер (Схелтон, ЦТ). АТП, ГТП, ГДП, цАМП, албумин говеђег серума, креатин фосфокиназа, папаверин, имидазол и ВИН-КСНУМКС-КСНУМКС, набављени су од Сигма Алдрицх (Ст. Лоуис, МО). ГТПиС је купљен од Роцхе Диагностиц Цорпоратион (Цхицаго, ИЛ). ДАМГО је обезбеђен од стране Програма снабдевања лековима Националног института за злоупотребу дрога (Роцквилле, МД). Ецоно-КСНУМКС сцинтилациона течност је добијена од Фисхер Сциентифиц (Норцросс, ГА). Еколитна сцинтилациона течност је добијена од ИЦН (Цоста Меса, ЦА). Све друге хемикалије су добијене од Сигма Алдрицх или Фисхер Сциентифиц.

КСНУМКС. Мишеви

Мушки битрансгенични мишеви изведени из НСЕ-ТТА (линија А) × ТетОп-ΔФосБ (линија КСНУМКС) су генерисани као што је описано у Келз ет ал. (Келз, ет ал., КСНУМКС). Битрансгенични мишеви су конципирани и узгојени на доксициклину (КСНУМКСгг у води за пиће) да би се сузбила експресија трансгена. У старости КСНУМКС недеље, доксициклин је изостављен из воде за половину мишева да би се омогућила експресија трансгена, док су преостали мишеви одржавани на доксициклину да би супримирали трансген. Мозгови су сакупљени КСНУМКС недеље касније, време у коме су транскрипциони ефекти ΔФосБ максимални (МцЦлунг и Нестлер, КСНУМКС). Коришћена је друга трансгена линија миша у којој је Δц-Јун, доминантни негативни антагонист ц-Јун, изражен у Д1Р / динорфин и Д2Р / енкефалинске ћелије стриатума, хипокампуса и паријеталне коре (Пеакман, ет ал., КСНУМКС). Ц-Јун и сродни протеини Јун породице димеризују са протеинима Фос фамилије и везују се за АП-КСНУМКС место циљних гена да би регулисали транскрипцију. Међутим, скраћивање Н-терминуса ц-Јун (Δц-Јун) чини комплекс транскрипцијски неактивним и способан да омета везивање ДНК активних АП-КСНУМКС комплекса. Мушки битрансгенични мишеви изведени из НСЕ-ТТА (линија А) × ТетОп-ФЛАГ-Ац-Јун (линија Е) су генерисани као што је описано у Пеакман ет ал. (Пеакман, ет ал., КСНУМКС). Битрансгенични мишеви су конципирани и узгојени на доксициклину (КСНУМКСгг у води за пиће) да би се сузбила експресија трансгена. Женке су биле одбијене у КСНУМКС недељама, генотипизоване и подељене у групе, са пола одржаваних на води која садржи доксициклин и пола на редовној води за пиће да индукује ФЛАГ-Δц-Јун експресију. Мозгови су сакупљени КСНУМКС недеље касније, време у коме су мерени максимални нивои ФЛАГ-Δц-Јун (Пеакман, ет ал., КСНУМКС). Све процедуре на животињама су спроведене у складу са Националним водичем за негу и употребу лабораторијских животиња.

КСНУМКС. Мембране Препаратион

Мозгови су чувани на -КСНУМКС ° Ц до дана теста. Пре испитивања, сваки мозак је одмрзнут, а НАц је дисециран на леду. Сваки узорак је хомогенизован у КСНУМКС мМ Трис-ХЦл, КСНУМКС мМ МгЦл2, КСНУМКС мМ ЕГТА, пХ КСНУМКС (мембрански пуфер) са КСНУМКС потезима из стакленог хомогенизатора на КСНУМКС ° Ц. Хомогенат је центрифугиран на КСНУМКСк g на КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС мин, ресуспендован у мембранском пуферу, поново центрифугиран на КСНУМКС × g на КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС мин и ресуспендован у КСНУМКС мМ Трис-ХЦл, КСНУМКС мМ МгЦл2, КСНУМКС мМ ЕГТА, КСНУМКС мМ НаЦл, пХ КСНУМКС (тестни пуфер). Нивои протеина су одређени методом Брадфорда (Брадфорд, КСНУМКСкоришћењем говеђег серумског албумина (БСА) као стандарда.

КСНУМКС. Стимулисани агонист [35С] ГТПγС Биндинг

Мембране су претходно инкубиране током КСНУМКС минута на КСНУМКС ° Ц са аденозин деаминазом (КСНУМКС мУ / мл) у пуферу за испитивање. Мембране (протеин КСНУМКС – КСНУМКС µг) су затим инкубиране током КСНУМКС сати на КСНУМКС ° Ц у пуферу за испитивање које садржи КСНУМКС% (в / в) БСА, КСНУМКС нМ [35С] ГТПиС, КСНУМКС уМ ГДП и аденозин деаминаза (КСНУМКС мУ / мл) са и без одговарајућих концентрација ДАМГО или ВИНКСНУМКС-КСНУМКС. Неспецифично везивање је измерено са КСНУМКС уМ ГТПиС. Инкубација је завршена филтрацијом кроз ГФ / Б филтере од стаклених влакана, праћено са КСНУМКС испирањем са КСНУМКС мл ледено хладним КСНУМКС мМ Трис-ХЦл, пХ КСНУМКС. Везана радиоактивност одређена је текућом сцинтилационом спектрофотометријом након екстракције преко ноћи филтерима у Ецоно-КСНУМКС сцинтилационој течности.

КСНУМКС. Аденилил циклаза тест

Мембране (протеин КСНУМКС-КСНУМКС µг) су претходно инкубиране са аденозин деаминазом као што је горе описано, а затим инкубиране за КСНУМКС мин на КСНУМКС ° Ц у присуству или одсуству форсолина КСНУМКСµМ, са или без ДАМГО, УКСНУМКСХ или ВИНКСНУМКС-КСНУМКС, у тестном пуферу који садржи КСНУМКС µМ АТП, [α-32П] АТП (КСНУМКС µЦи), КСНУМКС мМ ДТТ, КСНУМКС% (в / в) БСА, КСНУМКС µМ циклични АМП, КСНУМКС µМ ГТП, КСНУМКС мМ папаверин, КСНУМКС мМ фосфокреатин, КСНУМКС јединице / мл креатин фосфокиназе и аденозин деаминаза (КСНУМКС мУ / мл) у коначној запремини КСНУМКС µл. Под овим условима, укупно [α-32П] регенерисан цАМП је био генерално мањи од КСНУМКС% од укупне количине доданог [α-32П] АТП у сваком узорку. Реакција је прекинута кључањем за КСНУМКС мин и [32П] Циклични АМП изолован је двоструком колоном (Довек и алуминијум) методом Саломона (Саломон, КСНУМКС). [3Х] цАМП (КСНУМКС дпм) је додат у сваку епрувету пре хроматографије на колони као интерни стандард. Радиоактивност је одређена течном сцинтилационом спектрофотометријом (ефикасност КСНУМКС% за 3Х) након што је КСНУМКС мл елуата растворено у КСНУМКС мл Ецолите сцинтилационе течности.

КСНУМКС. Анализа података

Уколико није другачије назначено, подаци се приказују као средње вредности ± СЕ одвојених експеримената КСНУМКС-КСНУМКС, од којих је сваки изведен у трипликату. Нет-стимулисано [35С] ГТПиС везивање је израчунато као агонист-стимулисано везивање минус базално везивање. Активност аденилил циклазе стимулисане форсколином дефинише се као форсколин-стимулисана активност - базална активност (пмол / мг / мин). Проценат инхибиције активности форсколином стимулисане аденилил циклазе дефинише се као (нето форсколин-стимулисана активност у одсуству агониста - нето форсколин-стимулисана активност у присуству агониста / нето форсколин-стимулисане активности у одсуству агониста) × КСНУМКС. Све кривуље и статистичке анализе извршене су коришћењем Присм КСНУМКСц (ГрапхПад Софтваре, Инц., Сан Диего, ЦА). Криве концентрације-ефекта анализиране су итеративном нелинеарном регресијом да би се добила ЕЦ50 и ЕМак вредности. Статистичка значајност података о концентрацији-ефекту одређена је двосмјерном анализом варијанце (АНОВА), користећи као основни фактори агонистичку дозу и индукцију гена (укључено или искључено). Статистичка значајност вредности уклапања криве (ЕМак или ЕЦ50) је одређен неспареним двостраним Студентовим т-тестом, користећи Велцхову корекцију или трансформацију квадратног корена података, где је потребно да се исправе неједнаке варијансе (откривене Ф-тестом) у ЕЦ50 вредности.

Иди на:

КСНУМКС. Резултати

КСНУМКС. Утицај експресије ΔФосБ на активацију Г-протеина посредованом опиоидним и канабиноидним рецепторима

Да бисте утврдили да ли МОР- или ЦБ1Активација Г-посредованог Г-протеина је промењена индуцибилном трансгенском експресијом ΔФосБ у НАц, агонист-стимулисана [35С] ГТПиС везивање је испитивано на изолованим мембранама припремљеним из овог региона битрансгенских мишева условно експримирајући (ΔФосБ на) или не експримирајући (ΔФосБ офф) ΔФосБ трансген. За активирање МОР је коришћен МОР-селективни аналог енкефалина ДАМГО, а канабиноид аминоалкилиндол ВИНКСНУМКС-КСНУМКС је коришћен за активирање ЦБ1Р. Ови лиганди су претходно показани као пуни агонисти у МОР и ЦБ1Р, респективно (Бреивогел, ет ал., КСНУМКС, Селлеи, ет ал., КСНУМКС). Није било могуће испитати активност Г-протеина посредовану КОР-ом јер је сигнал пренизак у мозгу глодара (Цхилдерс, ет ал., КСНУМКС). Резултати су показали стимулацију активности Г-протеина овисно о концентрацији и од ДАМГО и ВИНКСНУМКС-КСНУМКС у НАц из ΔФосБ офф и ΔФосБ на мишевима (Слика КСНУМКС). За ДАМГО-стимулисану активност (Слика КСНУМКСА), двосмерна АНОВА података о ефекту концентрације открила је значајне главне ефекте статуса ΔФосБ (п <0.0001, Ф = 22.12, дф = 1) и концентрације ДАМГО (п <0.0001, Ф = 29.65, дф = 5) без значајна интеракција (п = 0.857, Ф = 0.387, дф = 5). Нелинеарна регресијска анализа кривих концентрација-ефекат открила је значајно већи ДАМГО ЕМак вредност у ΔФосБ на мишевима (ЕМак = КСНУМКС ± КСНУМКС% стимулација) у односу на ΔФосБ код мишева (ЕМак = 56 ± 4.1% стимулација; п <0.05 различито од ΔФосБ на мишевима студентским т-тестом). ДАМГО ЕЦ50 вредности нису биле различите између ΔФосБ и ΔФосБ код мишева (КСНУМКС ± КСНУМКС нМ наспрам КСНУМКС ± КСНУМКС нМ, редом, п = КСНУМКС).

Слика КСНУМКС 

Утицај експресије ΔФосБ на агонист-стимулисане35С] ГТПиС везивање у НАц. Мембране од ΔФосБ-експресујућих (ΔФосБ он) или контролних (ΔФосБ офф) мишева су тестиране као што је описано у Методама уз коришћење различитих концентрација ...

За разлику од резултата добијених са МОР агонистом ДАМГО, нису забележене разлике у активацији Г-протеина зависне од статуса ΔФосБ са канабиноидним агонистом ВИНКСНУМКС-КСНУМКС (Слика КСНУМКСБ). Двосмерна АНОВА података о ефекту концентрације ВИН55,212-2 открила је значајан главни ефекат концентрације ВИН55,212-2 (п <0.0001, Ф = 112.4, дф = 7), али не и статуса ΔФосБ (п = 0.172 , Ф = 1.90, дф = 1) и није било интеракције (п = 0.930, Ф = 0.346, дф = 7). Слично томе, није било утицаја статуса ΔФосБ на ВИН55,212-2 ЕМак вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС% наспрам КСНУМКС ± КСНУМКС% стимулације у ΔФосБ мишевима, односно, п = КСНУМКС помоћу Студентовог т-теста) или ЕЦ50 вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС нМ наспрам КСНУМКС ± КСНУМКС нМ у ΔФосБ на и ван мишева, редом, п = КСНУМКС).

На основу облика кривуља и чињенице да су наше претходне студије показале бифазне криве концентрације-ефекта ВИНКСНУМКС-КСНУМКС у мозгу (Бреивогел, ет ал., КСНУМКС, Бреивогел, ет ал., КСНУМКС), криве ВИНКСНУМКС-КСНУМКС су такође анализиране коришћењем модела са два места. Анализа просечних података показала је благо побољшање у доброј форми употребом модела са два места (Р2 = КСНУМКС и КСНУМКС, сума квадрата = КСНУМКС и КСНУМКС у ΔФосБ мишевима, респективно) у поређењу са моделом једног места (Р)2 = КСНУМКС и КСНУМКС, сума квадрата = КСНУМКС и КСНУМКС у ΔФосБ мишевима, односно). Међутим, нису нађене значајне разлике између ΔФосБ на и ван мишева у оба ЕМак или ЕЦ50 вредности локација високих или ниских потенцијала (Супплементари Табле КСНУМКС), иако је постојао тренд ка нижој ЕЦ50 вредност на месту високе потенције код мишева са ΔФосБ на (ЕЦ50висок = КСНУМКС ± КСНУМКС нМ) у поређењу са онима са ΔФосБ (ЕЦ50висок = КСНУМКС ± КСНУМКС нМ; п = КСНУМКС). Штавише, није било утицаја ΔФосБ статуса на базалну35С] ГТПиС везивање у НАц мембранама (КСНУМКС ± КСНУМКС у односу на КСНУМКС ± КСНУМКС фмол / мг у ΔФосБ мишевима, односно, п = КСНУМКС). Ови подаци указују да индукована трансгенска експресија ΔФосБ у НАц мишева повећава активацију Г-протеина посредованог МОР без значајног утицаја на ЦБ1Р-посредована или базална активност Г-протеина.

КСНУМКС. Утицај ΔФосБ на инхибицију аденил циклазе посредованом опиоидним и канабиноидним рецепторима

Проценити ефекат индуковане трансгенске експресије ΔФосБ на модулацију ефекторске активности низводно од МОР и ЦБ1Р, инхибиција активности КСНУМКС уМ форсколин-стимулисане аденилил циклазе испитивана је у НАц мембранама. Поред МОР- и ЦБ1Р-посредована инхибиција активности аденилил циклазе, ефекти КОР активности су такође испитивани коришћењем КОР-селективног пуног агониста УКСНУМКС (Зху, ет ал., КСНУМКС), јер су претходни резултати показали да је динорпхин мРНА мета ΔФосБ у битрансгенском моделу (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС). Резултати су показали да су ДАМГО, УКСНУМКС и ВИНКСНУМКС-КСНУМКС произвели инхибицију аденил циклазе у зависности од концентрације у оба ΔФосБ и ΔФосБ на мишевима (Слика КСНУМКС). Двосмјерна АНОВА података о ДАМГО концентрацији-ефекту (Слика КСНУМКСА) открили су значајне главне ефекте ΔФосБ статуса (п = 0.0012, Ф = 11.34, дф = 1) и концентрације ДАМГО (п <0.0001, Ф = 29.61, дф = 6), али без значајне интеракције (п = 0.441, Ф = 0.986 , дф = 6). Нелинеарна регресијска анализа ДАМГО кривуља концентрација-ефекат открила је значајно нижи ДАМГО ЕЦ50 вредност у ΔФосБ на мишевима (101 ± 11 нМ) у поређењу са ΔФосБ на мишевима (510 ± 182 нМ, п <0.05 студентским т-тестом). Међутим, није било значајне разлике у ДАМГО Е.Мак вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС% наспрам КСНУМКС ± КСНУМКС% инхибиције у ΔФосБ на и ван мишева, редом, п = КСНУМКС).

Слика КСНУМКС 

Утицај експресије ΔФосБ на инхибицију активности аденилил циклазе у НАц. Мембране од ΔФосБ-експресујућих (ΔФосБ он) или контролних (ΔФосБ офф) мишева су тестиране као што је описано у Методама у присуству КСНУМКС уМ \ т ...

КОР-посредована инхибиција аденилил циклазе такође се разликује као функција индуцибилне трансгенске експресије ΔФосБ (Слика КСНУМКСБ). Двосмерни АНОВА података о ефекту концентрације У50,488 показао је значајне главне ефекте статуса ΔФосБ (п = 0.0006, Ф = 14.53, дф = 1) и концентрације У50,488 (п <0.0001, Ф = 26.48, дф = 3) , без значајне интеракције (п = 0.833, Ф = 0.289, дф = 3). Нелинеарна регресиона анализа кривих концентрација-ефекат открила је већи У50,488 ЕМак вредност у ΔФосБ на мишевима (инхибиција 18.3 ± 1.14%) у поређењу са ΔФосБ код мишева (12.5 ± 2.03% инхибиција; п <0.05 различито од ΔФосБ на Студентовом т-тесту), без значајне разлике у У50,488 ЕЦ50 вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС нМ наспрам КСНУМКС ± КСНУМКС нМ у ΔФосБ на и ван мишева, редом, п = КСНУМКС).

За разлику од ефеката који су примећени са МОР и КОР, није било значајног ефекта индуковане трансгенске експресије ΔФосБ на инхибицију аденилил циклазе канабиноидним агонистом ВИНКСНУМКС-КСНУМКС (Слика КСНУМКСЦ). Двосмерни АНОВА података о ефекту концентрације ВИН55,212-2 показао је значајан ефекат концентрације лека (п <0.0001, Ф = 23.6, дф = 2), али не и статуса ΔФосБ (п = 0.735, Ф = 0.118, дф = 1) нити је дошло до значајне интеракције (п = 0.714, Ф = 0.343, дф = 2). Даље, није било ефекта ΔФосБ статуса на базалну или форсколин-стимулисану активност аденилил циклазе у одсуству било ког агониста. Базална активност аденилил циклазе била је 491 ± 35 пмол / мг / мин код ΔФосБ на мишевима у поређењу са 546 ± 44 код ΔФосБ код мишева (п = 0.346 према Студентовом т-тесту). Слично томе, активност аденилил циклазе у присуству 1 уМ форсколина била је 2244 ± 163 пмол / мг / мин у ΔФосБ на мишевима наспрам 2372 ± 138 пмол / мг / мин код ΔФосБ код мишева (п = 0.555).

КСНУМКС. Утицај ΔцЈун на опиоидну и канабиноидну рецептору посредовану инхибицију аденилил циклазе

Због индуковане трансгенске експресије ΔФосБ појачане инхибиторне трансдукције сигнала из МОР и КОР у аденилил циклазу у НАц, било је од интереса утврдити да ли би доминантни негативни инхибитор ΔФосБ-посредоване транскрипције модулирао сигнализацију опиоидног рецептора на супротан начин. Да би се одговорило на ово питање, инхибиција активности форсколином стимулисане аденилил циклазе од стране ДАМГО и УКСНУМКС испитана је на мембранама припремљеним од НАц битрансгенских мишева који условно експримирају ΔцЈун. Резултати нису показали значајан ефекат експресије ΔцЈун на инхибицију активности аденилил циклазе помоћу МОР или КОР (Слика КСНУМКС). Двосмерна АНОВА кривих ефекта концентрације ДАМГО показала је значајан главни ефекат концентрације ДАМГО (п <0.0001, Ф = 20.26, дф = 6), али не и статуса ΔцЈун (п = 0.840, Ф = 0.041, дф = 1) и није било значајне интеракције (п = 0.982, Ф = 0.176, дф = 6). Слично томе, није било значајне разлике у Е.Мак или ЕЦ50 вредности између мишева са ΔцЈун он (ЕМак = КСНУМКС ± КСНУМКС%; ЕЦ50 = КСНУМКС ± КСНУМКС нМ) или ΔцЈун офф (ЕМак = КСНУМКС ± КСНУМКС%, п = КСНУМКС; ЕЦ50 = 611 ± 176 нМ, п = 0.129). Слични резултати су виђени и са У50,488, тако да је двосмерна АНОВА кривих концентрација-ефекат показала значајан ефекат концентрације (п <0.0001, Ф = 11.94, дф = 6), али не и ΔцЈун статуса (п = 0.127 , Ф = 2.391, дф = 1) и није било значајне интеракције (п = 0.978, Ф = 0.190, дф = 6). Исто тако, није било значајних разлика у Е.Мак или ЕЦ50 вредности између мишева са ΔцЈун он (ЕМак = КСНУМКС ± КСНУМКС%; ЕЦ50 = КСНУМКС ± КСНУМКС нМ) или искључено (ЕМак = КСНУМКС ± КСНУМКС%, п = КСНУМКС; ЕЦ50 = КСНУМКС ± КСНУМКС нМ, п = КСНУМКС).

Слика КСНУМКС 

Утицај експресије ΔцЈун на инхибицију активности аденилил циклазе у НАц. Мембране од ΔцЈун-експресујућих (ΔцЈун на) или контролних (ΔцЈун офф) мишева су инкубиране у присуству ДАМГО (А), УКСНУМКСХ (Б) или ВИНКСНУМКС-КСНУМКС ...

Експресија ΔцЈун такође није значајно утицала на инхибицију аденилил циклазе у НАц од стране канабиноидног агониста. Двосмерна АНОВА кривих концентрације ВИН55,212-2 показала је значајан главни ефекат концентрације ВИН55,212-2 (п <0.0001, Ф = 15.53, дф = 6), али не и генотипа (п = 0.066, Ф = 3.472, дф = 1) и није било значајне интеракције (п = 0.973, Ф = 0.208, дф = 6). Исто тако, није било значајних разлика у ВИН55,212-2 ЕМак вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС% и КСНУМКС ± КСНУМКС% инхибиције у ΔцЈун наспрам офф мишева, редом, п = КСНУМКС) и или ЕЦ50 вредности (КСНУМКС ± КСНУМКС нМ и КСНУМКС ± КСНУМКС нМ у ΔцЈун насупрот офф мишевима, редом, п = КСНУМКС). Према томе, иако је дошло до благог тренда смањења јачине ВИНКСНУМКС-КСНУМКС код мишева који експримирају ΔцЈун, трансген није значајно изменио инхибицију канабиноида аденилил циклазе. Штавише, није било ефекта ΔцЈун статуса на базалну или форсколин-стимулирану активност аденилил циклазе. Базална активност аденилил циклазе је била КСНУМКС ± КСНУМКС пмол / мг / мин и КСНУМКС ± КСНУМКС пмол / мг / мин (п = КСНУМКС) код мишева са ΔцЈун укључено или искључено. Активност аденилил циклазе стимулисана са КСНУМКС уМ форсколином је КСНУМКС ± КСНУМКС пмол / мг / мин у односу на КСНУМКС ± КСНУМКС пмол / мг / мин (п = КСНУМКС) код мишева са ΔцЈун укључено или искључено, респективно.

КСНУМКС. Дискусија

Резултати ове студије открили су појачану МОР-посредовану Г-протеину активацију и инхибицију аденилил циклазе у НАц мишева са индуцибилном трансгенском експресијом ΔФосБ у динорфину / Д1Р који садржи неуроне. КОР-посредована инхибиција активности аденилил циклазе је такође побољшана у НАц мишева који експримирају ΔФосБ, што сугерише да ΔФосБ регулише ендогени опиоидни систем у НАц. ДАМГО ЕМак вредност је била већа за МОР-стимулисане35С] ГТПиС везивање, и његова ЕЦ50 вредност је била нижа за инхибицију аденилил циклазе, у ΔФосБ над-експресујућим мишевима у поређењу са контролним мишевима. Ови налази указују на могућност резерве рецептора за ефекторску модулацију, али не и за активацију Г-протеина у испитиваним условима анализе. Налаз да је максимална инхибиција аденилил циклазе од КОР агониста погођена експресијом ΔФосБ указује на ниску резерве рецептора за КОР-посредовани одговор, у складу са ниским нивоима места везивања КОР у мишјем мозгу (Унтервалд, ет ал., КСНУМКС). Насупрот томе, ЦБ1Активност Р-посредованог Г-протеина и инхибиција аденилил циклазе нису под утицајем експресије ΔФосБ, сугеришући да се опијатни и канабиноидни системи разликују у свом одговору на ΔФосБ у овим НАц неуронима.

Ефекат ΔФосБ на сигнализацију посредован опиоидним рецепторима је у складу са нашим претходним извештајем да је експресија ΔФосБ у стриатуму изменила акутне и хроничне ефекте морфијума (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС). Један налаз те студије био је да мишеви са трансгенском експресијом ΔФосБ у динорфину / Д1Р стриатални неурони су били осјетљивији на морфијум на мјесту кондиционирања него контроле. Поред тога, овај ефекат је опонашан вирусно посредованом експресијом ΔФосБ од стране специфичне ињекције у НАц. Ова опажања су конзистентна са тренутним резултатима који показују побољшану МОР сигнализацију у НАц.

Претходно смо идентификовали кодирање гена динорпхин као мета ΔФосБ, и предложио да би редуковани динорпхин био конзистентан са побољшаним својствима морфина у ΔФосБ битрансгенским мишевима (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС). Садашњи резултати показују да је инхибиција КОР-а адилил циклазе у НАц-у појачана код ΔФосБ експресионих мишева, што може одражавати компензаторно повећање КОР осетљивости после редукованог динорфина. Претходне студије су показале да је КОР регулисан у одређеним регионима мозга продинорпхин кноцкоут мишева, укључујући НАц (Цларке, ет ал., КСНУМКС).

За разлику од ΔФосБ, индукована трансгенска експресија ΔцЈун, доминантног негативног скраћеног мутанта ΔФосБ везујућег партнера цЈун, није изменила инхибицију аденилил циклазе са МОР или КОР агонистима. Ови резултати указују да базални нивои експресије ΔФосБ, који су релативно ниски, не играју значајну улогу у одржавању сигнализације опиоидних рецептора на овом нивоу трансдукције сигнала у НАц. Чињеница да је условљени ефекат награђивања морфијума смањен изражавањем ΔцЈун у нашој претходној студији (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС) сугерише да је индукција морфина ΔФосБ током кондиционог поступка важна за регулисање реакција понашања на лек или да транскрипциони ефекти ΔФосБ, осим оних који утичу на проксимално сигнализирање од стране опиоидних рецептора, могу утицати на опиоидну награду. У сваком случају, резултати ове студије јасно показују да, када је експресија ΔФосБ повишена изнад базалних нивоа у стриаталном динорпхин / Д1Неурони који експримирају Р, постоји снажно повећање спајања МОР и КОР у инхибицију аденилил циклазе у НАц.

Механизми помоћу којих се сигнали са МОР- и КОР-ом појачавају превеликом експресијом ΔФосБ су нејасни, али смо претходно показали да су нивои МОР-а, процењени [3Х] везивање налоксона, не разликују се у НАц од ΔФосБ у односу на офф мишеве (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС). Иста студија је показала да је ГαiНивои протеина КСНУМКС и КСНУМКС нису били погођени експресијом ΔФосБ у овом региону. Међутим, претходна анализа експресије гена показала је да Гαo мРНА је повећана у НАц ΔФосБ на мишевима (МцЦлунг и Нестлер, КСНУМКС). Биће од интереса у будућим истраживањима да се свеобухватно испита ефекат трансгене експресије ΔФосБ на експресију подјединице Г-протеина на нивоу протеина као и на експресију многих Г-протеин модулаторних протеина.

Интересантно је да експресија ΔФосБ није побољшала ЦБ1Р-посредована сигнализација у НАц. Могуће је да измене у ЦБ1Р сигнализација се јавља у дискретној популацији неурона која је замагљена у читавом НАц препарату. На пример, давање Δ9- ТХЦ је значајно индуковао ΔФосБ у језгру, али не и у омотачу НАц (Перротти, ет ал., КСНУМКС). ИПоказало се да је изазов са Δ9-ТХЦ после поновљеног давања А9-ТХЦ повећава ослобађање допамина у НАц језгру, али смањује ослобађање у љусци (Цадони, ет ал., КСНУМКС). Важно је такође приметити да линија КСНУМКСА мишева који имају битрансгенски експресију експримирају ΔФосБ само у динорфину / Д1Р позитивни средњи спини неурони стриатума, али ЦБ1Р су експримирани у оба динорпхин / Д1Р и енкефалин / Д2Р позитивни стриатални неурони (Хохманн и Херкенхам, КСНУМКС), као и на терминалима кортикалних аферента (Роббе, ет ал., КСНУМКС). Експресија доминантног негативног регулатора ΔФосБ-посредоване транскрипције, ΔцЈун, такође није имала значајан ефекат на сигнализирање канабиноидних рецептора, иако је ΔцЈун индуцибно изражен у оба Д1 и Д2који садрже популације средњих кичмених неурона у овим мишевима (Пеакман, ет ал., КСНУМКС). Могуће је, међутим, да је базална ΔФосБ експресија довољно ниска да ΔцЈун не утиче на сигнализацију рецептора, као што су показали резултати са МОР и КОР. Такође је могуће да ЦБ1Р сигнализирање је умјерено појачано базалном експресијом ΔФосБ, тако да је даљње повећање експресије ΔФосБ или блокирање њених акција са ΔцЈун имало само незнатне ефекте који нису достигли ниво статистичке значајности. Индиректна подршка за ово тумачење може се видети упоређивањем ВИНКСНУМКС-КСНУМКС ЕЦ50 вредности између мишева који експримирају ΔцЈун наспрам ΔФосБ. Однос ВИНКСНУМКС-КСНУМКС ЕЦ50 вредност за инхибицију аденилил циклазе код мишева са индукованом експресијом ΔцЈун у њену ЕЦ50 Вредност за активацију Г-протеина код мишева са индукованом експресијом ΔФосБ била је КСНУМКС, док је исти однос код мишева без индукције оба трансгена био КСНУМКС.

Алтернативно, канабиноиди могу индуковати експресију ΔФосБ без директног ефекта на ЦБ1Р сигналинг. У овом сценарију, канабиноиди могу модулирати реакцију на психоактивне ефекте других лијекова путем ΔФосБ-посредоване регулације транскрипције. ИЗаправо, администрација Δ9-ТХЦ производи унакрсну сензибилизацију на опиоиде и амфетамин (Цадони, ет ал., КСНУМКС, Ламаркуе, ет ал., КСНУМКС), у складу са овом хипотезом. Штавише, поновљено је давање канабиноидног агониста ЦПКСНУМКС за повећање МОР-посредоване Г-протеинске активације у НАц, слично као код мишева који индукују експресију ΔФосБ у овој студији (Вигано, ет ал., КСНУМКС). Утицај експресије ΔФосБ на Δ9Понашање посредовано са ТХЦ-ом није процењено, али садашњи резултати не искључују интеракцију. Резултати ове и наше претходне студије (Зацхариоу, ет ал., КСНУМКС) показују ΔФосБ-индуковане промјене у МОР и КОР / динорфину у стриатуму. Награђени ефекти Δ9-ТХЦ, мерено преференцијом места, укида се у МОР нултим мишевима, док делеција КОР-а ослабљује Δ9-ТХЦ аверзија места и откривено Δ9-ТХЦ преференција места (Гхозланд, ет ал., КСНУМКС). Слично, условљена аверзија према Δ9-ТХЦ је одсутан у нокауту про-динорфина у односу на мишеве дивљег типа (Зиммер ет ал., КСНУМКС). Ови подаци сугеришу да је Δ9-ТХЦ може бити кориснији након индукције ΔФосБ и посљедичне индукције МОР сигнализације са редукцијом експресије динорфина.

Ин суммари, резултати ове студије су показали да је експресија ΔФосБ у Д1Р / динорпхин позитивни стриатални неурони појачали су МОР- и КОР-посредовану сигнализацију на нивоу Г-протеина посредоване инхибиције активности аденилил циклазе у НАц. Овај налаз је у складу са студијама које су показале улогу ендогеног опиоидног система у наградама (Триго, ет ал., КСНУМКС), и обезбедити потенцијални механизам за ефекте посредоване ΔФосБ на награду. Насупрот томе, ЦБ1Р-посредована сигнализација у НАц није била значајно погођена стриаталном експресијом ΔФосБ у испитиваним условима, мада су додатна истраживања оправдана за одређивање ефекта индукције ΔФосБ на ендоканабиноидни систем.

Ресеарцх Хигхлигхтс

  • МОР сигнализација је појачана у нуцлеус аццумбенс мишева који експримирају ΔФосБ
  • КОР инхибиција аденилил циклазе је такође појачана код мишева који експримирају ΔФосБ
  • Израз ΔФосБ не мијења ЦБ1Р сигнализација у нуцлеус аццумбенс
Иди на:

Додатни материјал

Иди на:

Признања

Аутори захваљују Хенгјун Хе, Јордан Цок и Аарон Томарцхио за техничку помоћ са [35С] ГТПиС испитивања везивања. Ова студија је подржана од стране УСПХС Грантс ДАКСНУМКС (ЉС), ДАКСНУМКС (ДЕС) и ПКСНУМКС ДАКСНУМКС (ЕЈН).

Иди на:

Фусноте

Изјава издавача: Ово је ПДФ фајл нерегистрованог рукописа који је прихваћен за објављивање. Као услугу нашим клијентима пружамо ову рану верзију рукописа. Рукопис ће бити подвргнут копирању, слагању и прегледу резултирајућег доказа прије него што буде објављен у коначном облику. Имајте на уму да се током производног процеса могу открити грешке које би могле утицати на садржај, а све правне изјаве које се односе на часопис припадају.

Иди на:

Референце

  • Бозартх МА, Висе РА. Анатомски различита поља рецептора опијата посредују награду и физичку зависност. Наука. КСНУМКС;224: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Брадфорд ММ. Брза и осетљива метода за квантификацију микрограмских количина протеина коришћењем принципа везивања протеина-боје. Анал. Биоцхем. КСНУМКС;72: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Бреивогел ЦС, Цхилдерс СР, Деадвилер СА, Хампсон РЕ, Вогт Љ, Сим-Селлеи Љ. Цхрониц делта9Третирање тетрахидроканабинолом ствара губитак канабиноидних рецептора активираних Г-протеина у мозгу. Ј. Неуроцхем. КСНУМКС;73: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Бреивогел ЦС, Селлеи ДЕ, Цхилдерс СР. Ефикасност агониста канабиноидних рецептора за стимулацију [35С] ГТПиС везивање за церебеларне мембране пацова корелира са смањењем афинитета према БДП-у изазваном агонистом. Ј. Биол. Цхем. КСНУМКС;273: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цадони Ц, Писану А, Солинас М, Ацкуас Е, Ди Цхиара Г. Сензибилизација понашања након вишеструке изложености Делта КСНУМКС-тетрахидроканабинолу и унакрсна сензибилизација морфијумом. Психофармакологија (Берл) КСНУМКС;158: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цадони Ц, Валентини В, Ди Цхиара Г. Сензибилизација понашања на делта КСНУМКС-тетрахидроканабинол и унакрсну сензибилизацију морфијумом: диференцијалне промјене у пријеносу допамина акумула и језгре допамина. Ј. Неуроцхем. КСНУМКС;106: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цхен Ј, Келз МБ, Зенг Г, Сакаи Н, Стеффен Ц, Схоцкетт ПЕ, Пицциотто МР, Думан РС, Нестлер ЕЈ. Трансгене животиње са индуцибилном циљаном експресијом гена у мозгу. Мол. Пхармацол. КСНУМКС;54: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цхилдерс СР. Други гласници повезани са опиоидним рецепторима. Лифе Сци. КСНУМКС;48: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цхилдерс СР, Флеминг Л, Конкои Ц, Марцкел Д, Пацхецо М, Сектон Т, Вард С. Опиоидна и канабиноидна рецепторска инхибиција аденилил циклазе у мозгу. Анн. НИ Ацад. Сци. КСНУМКС;654: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цхилдерс СР, Ксиао Р, Вогт Љ, Сим-Селлеи Љ. Стимулација капа опиоидних рецептора35С] ГТПγС везивање у мозгу заморца: Недостатак доказа за капа2-селективна активација Г-протеина. Биоцхем. Пхармацол. КСНУМКС;56: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цларке С, Зиммер А, Зиммер АМ, Хилл РГ, Китцхен И. Регија селективне уп-регулације микро-, делта- и каппа-опиоидних рецептора али не и рецептора сличних опиоидним рецепторима у мозгу енкефалина и динорпхин кноцкоут мишева. Неуросциенце. КСНУМКС;122: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Цолби ЦР, Вхислер К, Стеффен Ц, Нестлер ЕЈ, Селф ДВ. Стриатална тип-специфична прекомерна експресија ДелтаФосБ-а појачава стимулацију за кокаин. Ј. Неуросци. КСНУМКС;23: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Гарднер ЕЛ. Ендоканабиноидни сигнални систем и награда за мозак: нагласак на допамину. Пхармацол. Биоцхем. Бехав. КСНУМКС;81: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Гхозланд С, Маттхес ХВ, Симонин Ф, Филлиол Д, Киеффер БЛ, Малдонадо Р. Мотивациони ефекти канабиноида посредовани су му-опиоидним и капа-опиоидним рецепторима. Ј. Неуросци. КСНУМКС;22: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Херкенхам М, Линн АБ, Јохнсон МР, Мелвин ЛС, де Цоста БР, Рице КЦ. Карактеризација и локализација канабиноидних рецептора у мозгу пацова: квантитативна ауторадиографска студија ин витро. Ј. Неуросци. КСНУМКС;11: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Хохманн АГ, Херкенхам М. Локализација мНК канабиноидног ЦБ (КСНУМКС) рецептора у неуронским субпопулацијама стриатума пацова: двоструко означена ин ситу хибридизацијска студија. Синапсе. КСНУМКС;37: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Ховлетт АЦ, Бартх Ф, Боннер ТИ, Цабрал Г, Цаселлас П, Деване ВА, Фелдер ЦЦ, Херкенхам М, Мацкие К, Мартин БР, Мецхоулам Р, Пертвее РГ. Интернатионал Унион оф Пхармацологи. КСКСВИИ. Класификација канабиноидних рецептора. Пхармацологицал Ревиев. КСНУМКС;54: КСНУМКС-КСНУМКС.
  • Хуестис МА, Горелицк ДА, Хеисхман СЈ, Престон КЛ, Нелсон РА, Моолцхан ЕТ, Франк РА. Блокада ефеката димљене марихуане помоћу ЦБКСНУМКС-селективног антагониста канабиноидних рецептора СРКСНУМКС. Арцх. Ген. Псицхиатри. КСНУМКС;58: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Келз МБ, Цхен Ј, Царлезон ВА, Јр., Вхислер К, Гилден Л, Бецкманн АМ, Стеффен Ц, Зханг ИЈ, Маротти Л, Селф ДВ, Ткатцх Т, Баранаускас Г, Сурмеиер ДЈ, Неве РЛ, Думан РС, Пицциотто МР, Нестлер ЕЈ. Експресија транскрипционог фактора делтаФосБ у мозгу контролише осетљивост на кокаин. Природа. КСНУМКС;401: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Кооб ГФ, Волков НД. Неуроцирцуитри оф аддицтион. Неуропсицхопхармацологи. КСНУМКС;35: КСНУМКС-КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
  • Ламаркуе С, Тагхзоути К, Симон Х. Хронични третман са Делта (КСНУМКС) -тетрахидроканабинолом појачава локомоторни одговор на амфетамин и хероин. Импликације на рањивост на овисност о дрогама. Неуропхармацологи. КСНУМКС;41: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Малдонадо Р, Валверде О, Беррендеро Ф. Укљученост ендоканабиноидног система у овисности о дрогама. Трендс Неуросци. КСНУМКС;29: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Мансоур А, Фок ЦА, Тхомпсон РЦ, Акил Х, Ватсон СЈ. експресија мРНА мио-опиоидног рецептора у ЦНС пацова: поређење са везивањем за му-рецептор. Браин Рес. КСНУМКС;643: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Маттхес ХВД, Малдонадо Р, Симонин Ф, Валверде О, Слове С, Кухиња И, Бефорт К, Диерицх А, ЛеМеур М, Долле П, Тзавара Е, Ханоуне Ј, Рокуес БП, Киеффер БЛ. Губитак аналгезије изазване морфијумом, ефекат награђивања и симптоми повлачења код мишева којима недостаје ген г-опиоидног рецептора. Природа. КСНУМКС;383: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • МцЦлунг ЦА, Нестлер ЕЈ. Регулација експресије гена и награде за кокаин од стране ЦРЕБ и ДелтаФосБ. Нат. Неуросци. КСНУМКС;6: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • МцЦлунг ЦА, Улери ПГ, Перротти ЛИ, Зацхариоу В, Бертон О, Нестлер ЕЈ. ДелтаФосБ: молекуларни прекидач за дугорочну адаптацију у мозгу. Браин Рес. Мол. Браин Рес. КСНУМКС;132: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Муллер ДЛ, Унтервалд ЕМ. ДКСНУМКС рецептори допамина модулирају делтаФосБ индукцију у стриатуму штакора након интермитентне примене морфина. Ј. Пхармацол. Екп. Тхер. КСНУМКС;314: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Нестлер ЕЈ. Ревиев. Транскрипцијски механизми зависности: улога ДелтаФосБ-а. Пхилос. Транс. Р. Соц. Лонд. Б. Биол. Сци. КСНУМКС;363: КСНУМКС-КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
  • Нестлер ЕЈ, Келз МБ, Цхен Ј. ДелтаФосБ: молекуларни посредник дуготрајне неуралне и бихевиоралне пластичности. Браин Рес. КСНУМКС;835: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Ние ХЕ, Хопе БТ, Келз МБ, Иадарола М, Нестлер ЕЈ. Фармаколошке студије регулације кроничне индукције антигена повезане са ФОС кокаином у стриатуму и нуцлеус аццумбенс. Ј. Пхармацол. Екп. Тхер. КСНУМКС;275: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Пеакман МЦ, Цолби Ц, Перротти ЛИ, Текумалла П, Царле Т, Улери П, Цхао Ј, Думан Ц, Стеффен Ц, Монтеггиа Л, Аллен МР, Стоцк ЈЛ, Думан РС, МцНеисх ЈД, Баррот М, Селф ДВ, Нестлер ЕЈ , Сцхаеффер Е. Индуцибилна, специфична експресија доминантног негативног мутанта ц-Јун-а у трансгеним мишевима мозга смањује осетљивост на кокаин. Браин Рес. КСНУМКС;970: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Перротти ЛИ, Веавер РР, Робисон Б, Рентхал В, Мазе И, Иаздани С, Елморе РГ, Кнапп ДЈ, Селлеи ДЕ, Мартин БР, Сим-Селлеи Л, Бацхтелл РК, Селф ДВ, Нестлер ЕЈ. Разликују се обрасци индукције ДелтаФосБ у мозгу путем дрога злоупотребе. Синапсе. КСНУМКС;62: КСНУМКС-КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]
  • Роббе Д, Алонсо Г, Дуцхамп Ф, Боцкаерт Ј, Манзони ОЈ. Локализација и механизми деловања канабиноидних рецептора на глутаматергичне синапсе мишјег језгра акумбенса. Ј. Неуросци. КСНУМКС;21: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Саломон И. Анализа аденилат циклазе. Адв. Цицлиц Нуцлеотиде Рес. КСНУМКС;10: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Селлеи ДЕ, Сим Љ, Ксиао Р, Лиу К, Цхилдерс СР. Му опиоидни рецептор-стимулисан35С] ГТПиС везивање у таламусу пацова и култивисаних ћелијских линија: Механизми трансдукције сигнала који леже у основи ефикасности агониста. Мол. Пхармацол. КСНУМКС;51: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Триго ЈМ, Мартин-Гарциа Е, Беррендеро Ф, Робледо П, Малдонадо Р. Ендогени опиоидни систем: заједнички супстрат у овисности о дрогама. Алкохол зависи од дроге. КСНУМКС;108: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Унтервалд ЕМ, Кнапп Ц, Зукин РС. Неуроанатомска локализација κКСНУМКС и κКСНУМКС опиоидних рецептора у мозгу пацова и заморца. Браин Рес. КСНУМКС;562: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Ваццарино ФЈ, Блоом ФЕ, Кооб ГФ. Блокада рецептора нуклеуса акумбенса умањује интравенозну награду хероина код пацова. Психофармакологија (Берл) КСНУМКС;86: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Вигано Д, Рубино Т, Ваццани А, Бианцхесси С, Марморато П, Цастиглиони Ц, Пароларо Д. Молекуларни механизми укључени у асиметричну интеракцију канабиноидних и опиоидних система. Психофармакологија (Берл) КСНУМКС;182: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Зацхариоу В, Боланос ЦА, Селлеи ДЕ, Тхеобалд Д, Цассиди МП, Келз МБ, Схав-Лутцхман Т, Бертон О, Сим-Селлеи Љ, Дилеоне РЈ, Кумар А, Нестлер ЕЈ. Битна улога за ДелтаФосБ у нуцлеус аццумбенс у морфину. Нат. Неуросци. КСНУМКС;9: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Занген А, Солинас М, Икемото С, Голдберг СР, Висе РА. Два места мозга за канабиноидну награду. Ј. Неуросци. КСНУМКС;26: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Зху Ј, Луо ЛИ, Ли ЈГ, Цхен Ц, Лиу-Цхен ЛИ. Активација клонираног хуманог каппа опиоидног рецептора помоћу агониста повећава [КСНУМКСС] ГТПиС везивање за мембране: одређивање потенцијала и ефикасности лиганда. Ј. Пхармацол. Екп. Тхер. КСНУМКС;282: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Зиммер А, Ваљент Е, Кониг М, Зиммер АМ, Робледо П, Хахн Х, Валверде О, Малдонадо Р. Одсуство делфос-КСНУМКС-тетрахидроканабинол дисфоричних ефеката код динорпхин-дефицијентних мишева. Ј. Неуросци. КСНУМКС;21: КСНУМКС-КСНУМКС. [ЦроссРеф]
  • Зиммер А, Зиммер АМ, Хохманн АГ, Херкенхам М, Боннер ТИ. Повећана смртност, хипоактивност и хипоалгезија код канабиноидних ЦБКСНУМКС рецептора нокаутних мишева. Проц. Натл. Ацад. Сци. сад КСНУМКС;96: КСНУМКС-КСНУМКС. [ПМЦ бесплатан чланак] [ЦроссРеф]