Пролонгед Хигх Фат Диет Смањење допаминског поновног преузимања без промене ДАТ експресије гена (КСНУМКС)

  • Јацксон Ј. Цоне,
  • Елена Х. Цхартофф,
  • Давид Н. Поттер,
  • Степхание Р. Ебнер,
  • Митцхелл Ф. Роитман

Апстрактан

Развој гојазности изазване исхраном (ДИО) може значајно да промени вишеструке аспекте допаминског сигнализирања, укључујући експресију допамин транспортера (ДАТ) и допаминску допуну. Међутим, временски ток промене ДАТ изражавања и функције изазване исхраном и да ли такве промене зависе од развоја ДИО остаје нерешено. Овде смо хранили пацове високом (ХФД) или ниском (ЛФД) масном исхраном за КСНУМКС или КСНУМКС недеље. После излагања исхрани, пацови су анестезирани уретаном, а стриатална ДАТ функција је процењена електричним стимулисањем тела допаминских ћелија у вентралном тегменталном подручју (ВТА) и снимањем резултујућих промена концентрације допамина у вентралној стриатуму помоћу цикличне волтаметрије брзог претраживања. Такође смо квантификовали ефекат ХФД на мембрану повезану ДАТ у фракцијама стриаталних ћелија из одвојене групе пацова након излагања истом протоколу исхране. Значајно је да се ниједна од наших третираних група није разликовала по тјелесној тежини. Пронашли смо дефицит у стопи поновног преузимања допамина код ХФД пацова у односу на ЛФД пацове после КСНУМКС, али не и КСНУМКС недеља излагања исхрани. Поред тога, повећање евоцираног допамина након фармаколошког изазивања кокаина било је значајно ослабљено у ХФД у односу на ЛФД пацове. Вестерн блот анализа је открила да нема ефекта исхране на укупни ДАТ протеин. Међутим, КСНУМКС недеља излагања ХФД значајно је редуковала КСНУМКС кДа ДАТ изоформу у синаптосомалној мембранској фракцији, али не у фракцији која је повезана са рециклирањем ендосома. Наши подаци пружају додатне доказе о промјенама поновног преузимања допамина узрокованим дијетом, неовисно о промјенама у производњи ДАТ и показују да се такве промјене могу манифестирати без развоја ДИО. 

цитат: Конус ЈЈ, Цхартофф ЕХ, Поттер ДН, Ебнер СР, Роитман МФ (КСНУМКС) Продужена исхрана високе масноће смањује допаминску реуптаке без промене експресије ДАТ гена. ПЛоС ОНЕ КСНУМКС (КСНУМКС): еКСНУМКС. дои: КСНУМКС / јоурнал.поне.КСНУМКС

Уредник: Сиднеи Артхур Симон, Медицински центар Универзитета Дуке, Сједињене Америчке Државе

Примљен: Октобар КСНУМКС, КСНУМКС; Прихваћено: Фебруар КСНУМКС, КСНУМКС; Публисхед: Март КСНУМКС, КСНУМКС

Ауторска права: © КСНУМКС Цоне ет ал. Ово је чланак отвореног приступа који се дистрибуира под условима лиценце Цреативе Цоммонс Аттрибутион, која дозвољава неограничено коришћење, дистрибуцију и репродукцију на било ком медију, под условом да се изворни аутор и извор признају.

Финансирање: Описани пројекат је подржан од стране Националног института за здравље (НИХ), донација ДАКСНУМКС (МФР) и ТКСНУМКС-МХКСНУМКС из Биомедицинског неурознанственог програма обуке (ЈЈЦ). Додатну подршку пружили су Национални центар за истраживачке ресурсе и Национални центар за унапређење транснационалних наука, НИХ, кроз додјелу УЛКСНУМКСРРКСНУМКС (ЈЈЦ) и Чикаго биомедицинског конзорцијума уз подршку Сеарле фондова у Тхе Цхицаго Цоммунити Труст (ЈЈЦ). Садржај је искључиво одговорност аутора и не представља нужно званичне ставове НИХ-а или Цхицаго Биомедицал Цонсортиум. Фондери нису имали никакву улогу у дизајну студија, прикупљању података и анализи, одлуци о објављивању или припреми рукописа.

Такмичарски интереси: Аутори су изјавили да не постоје конкурентни интереси.

увод

Прекомерна тежина и гојазност представљају све већи проценат популације Сједињених Држава и света [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Иако постоје многи путеви до гојазности, можда је једна од највећих претњи здравој телесној тежини преваленција и конзумација веома укусних, густо калоричних намирница [КСНУМКС]. Заиста, густина енергије (кцал / г) хране снажно доприноси прекомерној тежини и гојазности код одраслих [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Укусна храна изазива ослобађање допамина у стриатуму људи и не-људских животиња [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС] и субјективне оцјене дебљине у храни позитивно корелирају са јачином неуралних одговора у трбушном стриатуму [КСНУМКС]. Према томе, чини се да допамин и стриатум доприносе преференцијама за енергијски густу храну. Недавно је показано да разлике у исхрани могу узроковати истовремене промјене у стријаталним круговима и понашању усмјерено на храну [КСНУМКС]. Међутим, можда је мање цењен растући доказ да разлике у унесеној храни, посебно у погледу масти, могу дати повратну информацију о допаминској сигнализацији стриатара.

Стриатална допаминска сигнализација је регулисана са неколико фактора, укључујући производњу допамина од стране ензима тирозин хидроксилазе, пре- и постсинаптичких допаминских рецептора, и пресинаптичких транспортера допамина (ДАТ), који су сви укључени у гојазност [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Промене у броју или функцији ДАТ могу изменити сферу утицаја ослобођеног допамина и последично стриатне функције [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Показано је да инсулин, који се ослобађа као одговор на унесену храну, утиче на функцију ДАТ [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Дакле, ДАТ је један од могућих кандидата за ефекте исхране.

Недавно су истражене корелације између доступности гојазности и ДАТ, као и промене функције ДАТ-а изазване исхраном. Индекс телесне масе (БМИ) негативно корелира са доступности ДАТ у људском стриатуму [КСНУМКС]. ДАТ везивање, а тиме и доступност, је смањено код мишева који су храњени високом масноћом (ХФД) [КСНУМКС]. ХФД-индукована гојазност (ДИО) је повезана са смањеном стопом поновног преузимања допамина од стране ДАТ код пацова [КСНУМКС]. Узете заједно, ове студије указују на то да гојазност установљена потрошњом ХФД може утицати на критичне пресинаптичке регулаторе допаминског сигнализирања - посебно ДАТ. Међутим, временски ток измене допаминског сигнала изазваног дијетом и да ли је развој ДИО неопходан за манифестне промене остаје непознат. Анализирали смо ДАТ функцију евоцирајући ослобађање допамина у вентралном стриатуму и квантификујући његову брзину поновног преузимања код пацова помоћу цикличне волтаметрије брзог скенирања. Да би се утврдило да ли је смањење поновног преузимања допамина проузроковано смањеном експресијом ДАТ гена, мерили смо ДАТ мРНК у вентралној тегменталној области и супстанце нигри користећи реалном времену кРТ-ПЦР. Поред тога, користили смо биохемијску процедуру фракционисања и Вестерн блот анализу како бисмо тестирали стриаталне ДАТ нивое у сировим синаптосомалним и ендосомалним мембранама. Пацови су имали или КСНУМКС или КСНУМКС недеље исхране са високим или ниским садржајем масти, али су сва мерења вршена у одсуству ДИО. Наши резултати указују да продужена конзумација ХФД, независно од ДИО, смањује стопу поновног преузимања допамина у вентралном стриатуму без смањења експресије ДАТ.

Материјал и метод

Изјава о етици

Ова студија је спроведена у строгој сагласности са препорукама из Водича за негу и употребу лабораторијских животиња Националног института за здравље. Протокол је одобрен од стране Комитета за бригу о животињама на Универзитету Илиноис, Чикаго. Све операције су обављене под уретанском анестезијом и учињени су сви напори како би се смањила патња.

Теме

Коришћени су стандардни мушки пацови Спрагуе – Давлеи (н = КСНУМКС), стари око КСНУМКС месеци и вагање КСНУМКС-КСНУМКС г по доласку. Животиње су појединачно смештене у пластичне кавезе (КСНУМКС × КСНУМКС × КСНУМКС цм) у температури (КСНУМКС ° Ц) и влажности (КСНУМКС%) контролисане средине на КСНУМКС∶КСНУМКС х светлосном: мрачном циклусу (светла на КСНУМКС∶КСНУМКС) х). Пацови су се привикнули на објекат једну недељу по вољи приступ стандардној лабораторијској храни и води.

Мерење уноса хране и телесне тежине

После аклиматизације, пацови су мерени и насумично распоређени у КСНУМКС КСНУМКС група које су биле уравнотежене за почетну телесну тежину. Двије групе су одржаване на дијети с ниским удјелом масти (ЛФД; Ресеарцх Диетс, Нев Брунсвицк, Њ; ДКСНУМКСБ; КСНУМКС% килокалорија од масти (КСНУМКС кцал / г)). Остале КСНУМКС групе су одржаване на ХФД (Ресеарцх Диетс; ДКСНУМКС; КСНУМКС% килокалорија од масти (КСНУМКС кцал / г)). За сваку исхрану, пацови су одржавани или за КСНУМКС или КСНУМКС недеље (вкс). Тако су групе КСНУМКС биле: ЛФД-КСНУМКС вк (н = КСНУМКС), ХФД-КСНУМКС вк (н = КСНУМКС), ЛФД-КСНУМКС вк (н = КСНУМКС) и ХФД-КСНУМКС вк (н = КСНУМКС). Све групе су имале по вољи приступ води. Уношење хране и мерење телесне тежине извршени су три пута / нед, а подаци су приказани одвојено за пацове који су подвргнути волтаметријским снимцима или ДАТ анализи протеина / порука.

Хируршке процедуре и допаминска мерења

Након излагања исхрани, подскуп пацова који се нису разликовали у телесној тежини припремљени су за волтаметријска снимања (ЛФД-2 недеље (н = 8), ХФД-2 недеље (н = 6), ЛФД-6 недеље (н = 6) , и ХФД-6 недеља (н = 7)) под уретанском анестезијом (1.5 г / кг) [као у 9,21]. Водећа канила (Биоаналитицал Системс, Вест Лафаиетте, ИЛ) постављена је изнад вентралног стриатума (1.3 мм предње, 1.5 мм бочно од брегме), у контралатералну кору је уграђена референтна електрода хлорисане жице (Аг / АгЦл) причвршћен за лобању вијцима од нерђајућег челика и зубним цементом. Микроманипулатор који садржи електроду од угљеничних влакана (ЦФЕ) убачен је у канилу за вођење и електрода је спуштена у вентрални стриатум. ЦФЕ и референтна електрода су повезани на главу, а потенцијал ЦФЕ је скениран од -0.4 до +1.3 В (у односу на Аг / АгЦл) и назад (400 В / с; 10 Хз). Биполарна стимулативна електрода (Пластицс Оне, Роаноке, ВА) је затим постепено спуштана у вентрално тегментално подручје / субстантиа нигра парс цомпацта (ВТА / СНпц; 5.2 мм позади, 1.0 мм бочно и у почетку 7.0 мм трбушно од брегме) у корацима од 0.2 мм . На сваком кораку испоручен је ток тренутних импулса (60 импулса, 4 мс по импулсу, 60 Хз, 400 µА). Када се стимулативна електрода постави у ВТА / СНпц, а ЦФЕ у стриатуму, стимулација поуздано изазива ослобађање допамина - издвојено из волтаметријских података помоћу анализе главних компонената [КСНУМКС], [КСНУМКС]; и конвертује се у концентрацију након што се свако ЦФЕ калибрише у систему за убризгавање протока после сваког експеримента [КСНУМКС]. Положај стимулативне електроде је оптимизован за максимално ослобађање. ЦФЕ је затим остављен да се уравнотежи за КСНУМКС мин пре почетка експеримента. Ослобађање допамина је изазвано електричном стимулацијом ВТА / СНпц (исти параметри као горе), а резултирајуће промјене концентрације допамина израчунате су од -КСНУМКС с до КСНУМКС с у односу на стимулацију. Одмах након стимулације, пацовима је убризган кокаин хидрохлорид растворен у КСНУМКС% физиолошком раствору (КСНУМКС мг / кг ип) и, КСНУМКС мин касније, стимулација је поновљена. Примењени напони, прикупљање података и анализа извршени су коришћењем софтвера написаног у ЛабВИЕВ (Натионал Инструментс, Аустин, ТКС, УСА) [КСНУМКС].

Допамин

Повраћај допамина је моделиран коришћењем Демон Волтамметри Аналисис Софтваре (КСНУМКС; Ваке Форест Университи, Винстон-Салем НЦ). Овде наводимо константу распадања тау као меру брзине поновног преузимања допамина. Тау је изведен из експоненцијалне кривуље која обухвата већину криве допаминског клиренса и високо корелира (р = .КСНУМКС) са Кm, привидни афинитет допамина за ДАТ [КСНУМКС]. Да би се одредио ефекат кокаина на максималну концентрацију допамина упоредили смо вредности добијене пре и после примене (% промене).

Хистологија

После сваког снимања, електрода од нерђајућег челика (АМ Системс # КСНУМКС, Секуим, ВА) је спуштена на исту дубину као ЦФЕ и направљена је лезија (КСНУМКС µА, КСНУМКС с) да означи локацију снимања. Мозгови су уклоњени и ускладиштени у КСНУМКС% формалину. За идентификацију положаја лезије на короналним секцијама (КСНУМКС µм) кроз стриатум је коришћена светлосна микроскопија. Сва снимања која су овде пријављена су направљена у вентралном стриатуму [КСНУМКС].

Субцелуларна фракционација Стриаталног ткива

Пацови (ЛФД-КСНУМКС вк, ХФД-КСНУМКС вк, ЛФД-КСНУМКС вк и ХФД-КСНУМКС вк; н = КСНУМКС / група; нема разлике у телесној тежини) су убијени децапитатион. Биохемијска фракционација је изведена користећи протокол описан у [КСНУМКС], уз мање измене. Мозгови су брзо уклоњени, замрзнути у изопентану и резани на криостату (ХМКСНУМКСЕ, Мицром, Валлдорф, Немачка, -КСНУМКС ° Ц) до постизања стриатума. Билатерални КСНУМКС-мм3 ударци кроз вентралну стриатум (средња тежина ткива: КСНУМКС мг) су хомогенизовани за КСНУМКС с у КСНУМКС мл ледено хладном ТЕВП (КСНУМКС мМ Трис база, КСНУМКС мМ НаФ, КСНУМКС мМ На3VO4КСНУМКС мМ ЕДТА, КСНУМКС мМ ЕГТА, пХ КСНУМКС) + КСНУМКС мМ сахарозни пуфер. Аликвот КСНУМКС µл укупног хомогената (Х) је сачуван. Остатак Х је центрифугиран на КСНУМКС к г за КСНУМКС мин на КСНУМКС ° Ц. Пелет (ПКСНУМКС, језгра и велики дебрис) је ресуспендован у КСНУМКС мл ТЕВП пуферу и сачуван. Супернатант (СКСНУМКС) је уклоњен и стављен у чисту цев на леду. СКСНУМКС је центрифугиран на КСНУМКС × г за КСНУМКС мин на КСНУМКС ° Ц да би се добила пелета (ПКСНУМКС, сирове синаптосомалне мембране) и супернатант (СКСНУМКС). ПКСНУМКС је испран једном у ТЕВП + КСНУМКС мМ сахарозном пуферу и затим ресуспендован у КСНУМКС мл ТЕВП + КСНУМКС мМ сахарозног пуфера, нежно вортексован за КСНУМКСс и хипо-осмотски лизиран држањем узорка на леду за КСНУМКС мин. Супернатант (СКСНУМКС) је сакупљен и центрифугиран на КСНУМКС к г за КСНУМКС х да би се добила пелета (ПКСНУМКС, лаке мембране, рециклирање ендосома) која је ресуспендована у ТЕВП (КСНУМКС мл) и сачувана. Сви узорци су држани на -КСНУМКС ° Ц до полиакриламидне електрофорезе.

Гел електрофореза и западна блоттинг

Садржај протеина је одређен помоћу Био-Рад ДЦ комплета за испитивање протеина (Херцулес, ЦА), а концентрација сваког узорка је подешена на 0.3 мг / мл протеина. НуПАГЕ ЛДС (литијум додецил сулфат) пуфер за узорке (Инвитроген, Царлсбад, ЦА) и 50 мМ дитиотреитол додани су у сваки узорак пре загревања на 70 ° Ц током 10 минута. Да би се напуниле еквивалентне количине протеина за сваку фракцију, 3 µг сваког узорка је напуњено у НуПАГЕ Новек 4–12% Бис-Трис гелове (Инвитроген) за одвајање гел електрофорезом. Протеини су накнадно пребачени у поливинилиден флуоридну мембрану (ПВДФ) (ПеркинЕлмер Лифе Сциенцес, Бостон, МА). Неспецифична места везивања су блокирана 2 сата на собној температури у пуферу за блокирање (5% немасног сувог млека у ПБС и 0.02% Твеен 20 [ПБС-Т]). Блотс су затим инкубирани у примарном антителу (1∶3000 мишјег моноклонског анти-НР2Б [# 05–920, Миллипоре], 1∶5000 зечјег анти-ДАТ [# АБ2231, Миллипоре] и 1∶1000 мишјег моноклонског рецептора за анти-трансферин ( ТфР) [# 13–6800, Инвитроген]. Блотови су исечени на 3 дела: велике (> 97 кДа), средње (46–97 кДа) и мале (<46 кДа) тежине и сваки део је сондиран антителом које је препознало протеин унутар тог распона тежине. Привидне молекулске тежине коришћених антитела су: НР2Б, 180 кДа; ДАТ, 75, 64 и 50 кДа; ТрфР, 95 кДа. Након испитивања блотова средње тежине за ДАТ, антитела су уклоњена инкубацијом са пуфером за уклањање (62.5 мМ Трис, 2% СДС, 100 мМ β-меркаптоетанола, пХ 6.8) током 15 минута на 50 ° Ц. Блотс су затим поново блокирани и сондирани анти-ТфР. СееБлуе Плус 2 (Инвитроген) пре- за процену молекуларне тежине коришћени су обојени стандарди.

Протеински имуноблотови су анализирани коришћењем Царестреам Молецулар Имагинг Софтваре КСНУМКС. Нето интензитет (сума пиксела унутар траке од интереса минус сума позадинских пиксела) је одређен за сваки опсег. Да би се омогућило поређење блота, подаци су нормализовани на ЛФД контроле на КСНУМКС и КСНУМКС вкс. Подаци су изражени као средња индукција у поређењу са ЛФД ± СЕМ.

Квантитативна реверзна транскриптаза полимераза ланчана реакција у реалном времену (кРТ-ПЦР)

После сакупљања стриаталних удараца за Вестерн блот анализу, замрзнути мозгови су коронално раздвојени на микротом све до достизања ВТА / СН. Билатерални КСНУМКС-мм3 направљени су ударци ВТА и СН ткива (просечна тежина ткива = КСНУМКС мг) и РНА је екстрахована помоћу ПуреЛинк РНА Мини Кит (Инвитроген). Квалитет и количина РНК су процењени коришћењем РНА КСНУМКС Нано Цхип (Агилент, Санта Цлара, ЦА) на Агилент Биоанализер КСНУМКС. Број РНК интегритета (РИН) премашио је КСНУМКС за све узорке, што указује на висок квалитет. Један микрограм укупне РНК је коришћен за синтезу цДНА коришћењем иСцрипт цДНА Синтхесис Кит (БиоРад) у ТхермоХибаид иЦицлер (Тхермо Сциентифиц). Прајмери ​​специфични за ДАТ (СлцКСНУМКСаКСНУМКС; Форвард прајмер: ГГААГЦТГГТЦАГЦЦЦЦТГЦТТ, Реверсе пример: ГААТТГГЦГЦАЦЦТЦЦЦЦТЦТГ), β-актин (Нба; Форвард прајмер: АГГГАААТЦГТГЦГТГАЦАТ; Реверсе пример: ААГГААГГЦТГГААГАГЦ), и ТАТА везујући протеин (Тбп; Форвард пример: АЦЦТАААГАЦЦАТТГЦАЦТТЦГТГЦЦ; : ГЦТЦЦТГТГЦАЦАЦЦАТТТТЦЦЦ) (Генбанк приступни бројеви НМ_КСНУМКС, НМ_КСНУМКС и НМ_КСНУМКС) су дизајнирани помоћу НЦБИ Пример-БЛАСТ (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/) и набављен од Интегратед ДНА Тецхнологиес (Цоралвилле, Иова). Анализа кривуља таљења и електрофореза полиакриламидног гела потврдили су специфичност прајмера. ДАТ, β-актин, и Тбп ампликони су КСНУМКС, КСНУМКС и КСНУМКС базни парови у дужини, редом.

Коришћен је К-ПЦР кит (иК СибрГреен Супермик, БиоРад). Реакција је изведена на МииК Једнобојном Реал-Тиме ПЦР детекционом систему (БиоРад) у запремини КСНУМКС ул, са КСНУМКС уЛ КСНУМКС уМ унапред и обрнутим прајмерима и КСНУМКС µЛ цДНА узорком разблаженим КСНУМКСКСКСНУМКС. ПЦР циклусни услови су били КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС мин; КСНУМКС циклуса на КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС с, КСНУМКС ° за КСНУМКС с, КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС с. Подаци су сакупљени на температури очитавања КСНУМКС ° Ц за КСНУМКС с на основу температуре талине ампликона. Стандардне криве разређења су генерисане за сваки сет прајмера серијским разблаживањем (КСНУМКС, КСНУМКС, КСНУМКС и КСНУМКС-фолд) мастер цДНА сток који садржи једнаку мешавину цДНА из свих третираних група. Дневник10 од вредности разблажења је уцртано у односу на вредности прага циклуса за стандардне криве. За анализу података коришћен је софтвер МииК Оптицал Систем Софтваре (БиоРад). Узорци који не садрже шаблон цДНК и узорке од цДНА реакција које не садрже реверзну транскриптазу су вођене као контроле за контаминацију и амплификацију геномске ДНК, респективно. Извештене вредности су нормализоване на просечне вредности интерних стандарда ß-актина и Тбп за сваки узорак. Подаци су изражени као средњи релативни нивои мРНА ± СЕМ интерног стандарда ДАТ /.

Статистичке анализе

ДАТ израз се динамички мења током животног циклуса код оба човека [КСНУМКС] и пацови [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Додатно, допамин и понашање у понашању на кокаин се такође мењају са сазревањем младих пацова [КСНУМКС]. Према томе, мерења ДАТ могу ко-варирати са годинама и забранити значајна поређења између КСНУМКС вк и КСНУМКС вк група. Према томе, групна средства за унос хране, телесна тежина, вршна концентрација допамина, тау,% промена, и релативна експресија гена су поређена одвојено за КСНУМКС и КСНУМКС вк групе коришћењем Студентовог неспареног т-теста. За Вестерн блот анализе, групне разлике у нормализованом интензитету ДАТ опсега су упоређиване одвојено за КСНУМКС и КСНУМКС вк групе користећи двосмерну АНОВА за поновљене мере (дијетна фракција). Све статистичке анализе су изведене у Грапх Пад КСНУМКС (Присм Инц.).

Резултати

ХФД промовише повећану потрошњу масти

Пре почетка излагања исхрани није било разлика у почетној телесној тежини у КСНУМКС вк (ЛФД: КСНУМКС +/− КСНУМКС г; ХФД: КСНУМКС +/− КСНУМКС г; p = 0.37), или 6 недеља (ЛФД: 287.31 +/− 4.9 г; ХФД: 289.44 +/− 5.1 г; 6 недеља p = 0.97) групе. Упркос конзумирању дијете драстично различитог састава, нисмо пронашли разлике у тјелесној тежини између дијеталних група након 2 или 6 тједана (Слика КСНУМКСа – б; оба нс). Такође није било разлике у укупним кцал конзумираним између група након КСНУМКС и КСНУМКС тједана излагања дијети (Слика КСНУМКСц – д; нс). Међутим, ХФД пацови конзумирали су знатно више кцал од масти (Слика КСНУМКСе – ф; КСНУМКС вкс: т (КСНУМКС) = КСНУМКС; КСНУМКС вкс: т (КСНУМКС) = КСНУМКС; p<0.0001 за обе трајања дијете).

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Унос хране и мерење телесне тежине.

Није било разлика између ХФД и ЛФД у коначној телесној тежини (а – б) или укупних потрошених килокалорија (ц – д) након КСНУМКС или КСНУМКС недеља излагања дијети. (е – ф) ХФД пацови конзумирали су знатно више килокалорија од масти него ЛФД пацови у условима КСНУМКС недеље и КСНУМКС недеље (***p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g001

Продужени ХФД смањује брзину поновног преузимања ДА

Волтамметријски снимци су направљени у вентралном стриатуму (Слика КСНУМКС). Слика КСНУМКС приказује репрезентативне електрично изазване промене концентрације допамина добијене од пацова након КСНУМКС вкс дијета. На почетку, величина евоцираног допамина није се разликовала између група исхране и током трајања исхране (Слика КСНУМКСа – б, оба нс). Међутим, преглед појединачних примера указао је на то да је стопа распадања након врхунца концентрације допамина била различита између група у исхрани након КСНУМКС тједана излагања дијети (Слика КСНУМКС а – б за примере). Стопа пропадања је првенствено посљедица допаминског одобрења од стране ДАТ-а [КСНУМКС], које смо моделирали као експоненцијалну фазу да одредимо тау. Није било разлика између група за исхрану након КСНУМКС тједана излагања дијети (Сл. КСНУМКСц). Међутим, након КСНУМКС тједана изложености исхрани, тау је био значајно већи код ХФД-КСНУМКС вк пацова у односу на ЛФД-КСНУМКС вк (Слика КСНУМКСд; т (КСНУМКС) = КСНУМКС; p<0.05). Дакле, 6 недеља ХФД смањује брзину клиренса допамина у вентралном стриатуму у поређењу са животињама које су конзумирале ЛФД.

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Хистолошка верификација места снимања за анализу поновног преузимања.

Мјеста снимања за штакоре храњене ЛФД кодирана су сивим троугловима и за ХФД пацове црним круговима. Бројеви означавају растојање у мм испред Брегме. Слика је прилагођена од стране Пакинос и Ватсон КСНУМКС.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g002

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Електрична стимулација ВТА / СНц изазива фазни скок концентрације допамина.

Репрезентативни примери података добијених после КСНУМКС недеља изложености исхрани. a) Позадина-одузета боја приказује тренутне промене на различитим потенцијалима електроде пре (-КСНУМКС до КСНУМКС с у односу на почетак) и после (КСНУМКС до КСНУМКС с у односу на почетак) електричне стимулације (СТИМ) ВТА / СНц. Време је апсциса, потенцијал електроде је ордината, а тренутне промене су кодиране у лажној боји. Допамин [идентификован његовом оксидацијом (+ КСНУМКС В; зелено) и карактеристикама редукције (-КСНУМКС В; плаве)] пролазно се повећао као одговор на стимулацију у овом ЛФД-КСНУМКС вк штакору. b) Исто као у а), изузев ХФД-КСНУМКС вк пацова. c) Концентрација допамина у функцији времена је издвојена из дијаграма боја у а), а тау је идентификован преко уклапања криве. Две црвене тачке означавају врх и концентрацију допамина у тренутку када се достигне тау. Тау је означен десно. d) Исто као у ц), али подаци су извађени из б).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g003

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Шест недеља исхране велике масноће смањује стопу поновног преузимања допамина и ублажава допамински одговор на кокаин.

Просечна концентрација допамина изазвана стимулацијом ВТА / СНпц након КСНУМКС (a) или КСНУМКС седмица (b) изложености исхрани пре ињекције кокаина. ц – д) Просек Тау који следи КСНУМКС (c) вкс или КСНУМКС вкс (d) изложености исхрани. Тау је био значајно већи за ХФД-КСНУМКС вк пацове у односу на ЛФД-КСНУМКС вк пацове (*p е – ф) Проценат промене у вршној концентрацији допамина након ињекције кокаина за КСНУМКС (e) и КСНУМКС (f) недеље изложености исхрани. Проценат промене је био значајно мањи у ХФД-КСНУМКС вк у односу на ЛФД-КСНУМКС вк пацове (**p

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g004

Продужени ХФД смањује одговор ДА на кокаин

Да бисмо даље испитивали промене изазване исхраном у ДАТ, убризгали смо пацове кокаином ДАТ блокатором. Максимална концентрација допамина након електричне стимулације узрокована је ослобађањем допамина, али је такође ограничена истовременим уклањањем допамина од стране ДАТ-а. [КСНУМКС]. Утврдили смо ефекат кокаина на пренос допамина израчунавањем промене величине евоцираног допамина у односу на вредности пре дроге (% промене). Два тједна ХФД нису утицала на промену у односу на ЛФД (Фиг. КСНУМКСе; нс). Међутим, након КСНУМКС хода изложености исхрани,% промене је значајно смањено у ХФД у односу на ЛФД (Сл. КСНУМКСф; т (КСНУМКС) = КСНУМКС; p<0.01). Наши резултати сугеришу да 6, али не и 2 недеље, изложености ХФД-у смањује допамински одговор на кокаин.

Продужена изложеност ХФД смањује експресију протеина ДАТ у синаптосомским мембранама

Да би се утврдило да ли су ефекти продуженог ХФД услед промена у ДАТ броју, нивои ДАТ протеина су квантификовани у укупним ткивним хомогенатима (Х фракција), синаптосомалним мембранама (ПКСНУМКС фракција) и интрацелуларним рециклирањем ендосома (ПКСНУМКС фракција). ДАТ је Nгликопротеина са привидном молекулском масом између КСНУМКС и КСНУМКС кДа услед повећања нивоа гликозилације док сазрева протеин [КСНУМКС]. Фракционација је потврђена обогаћеном експресијом подјединице НРКСНУМКСБ НМДА рецептора у синаптосомалној мембранској фракцији и рецептору трансферина у ендосомалној фракцији (на пример мрља Слика КСНУМКСб). Нисмо пронашли разлике у укупном ДАТ протеину након КСНУМКС и КСНУМКС тједана излагања дијети (подаци нису приказани). Да бисмо тестирали разлике специфичне за фракције ДАТ протеина, користили смо двосмерну АНОВА за поновљене мере (дијетна фракција). У складу са експериментима волтаметрије, КСНУМКС вкс исхране није био довољан да промени нивое било које ДАТ изоформе у ПКСНУМКС или ПКСНУМКС фракцијама (Сл. КСНУМКС. ц, е, г; све нс). Међутим, након КСНУМКС тједана излагања исхрани, дошло је до значајне интеракције дијететске фракције (F(1,18) = 8.361, p<0.01); Слика КСНУМКСд) за КСНУМКС кД изоформ ДАТ. Тако, продужени ХФД значајно је редуковао КСНУМКС кД изоформу ДАТ у ПКСНУМКС фракцији и изазвао тренд повећања ПКСНУМКС фракције. Нисмо нашли никакав ефекат исхране или фракција ни на КСНУМКС кД (Сл. КСНУМКСф; нс) или КСНУМКС кД (Слика КСНУМКСх; нс) ДАТ изоформи.

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Конзумирање исхране са високим садржајем масти смањује ДАТ протеин везан за мембрану у трбушном стриатуму.

a) Репрезентативна слика која приказује (КСНУМКС) КСНУМКС × КСНУМКС мм шупљине ткива узете из вентралног стриатума које су комбиноване за анализу ДАТ протеина. ВСтр = Вентрал Стриатум; ДСтр = Дорсал Стриатум; цц = цорпус цаллосум; ац = предња комисура. b) Репрезентативне западне мрље података приказане у ц-х. Л = ЛФД; Х = ХФД; ТфР = рецептор за трансферин; НРКСНУМКСБ = НРКСНУМКСБ подјединица НМДА рецептора. c) Није било разлика у протеину КСНУМКС кД ДАТ за фракције ПКСНУМКС или ПКСНУМКС након КСНУМКС недеља излагања исхрани. d) ДАТ протеин од 50 кД је значајно смањен у П2 (* = p<.05), али не и П3 фракција вентралног стриаталног ткива у ХФД-6 седмици у односу на ЛФД-6 седмице пацова. Није било разлике у 64 кД ДАТ протеина ни после 2 (e) или КСНУМКС седмица (f) изложености исхрани. Није било разлике у КСНУМКС кД ДАТ протеину након било КСНУМКС (g) или КСНУМКС седмица (h) изложености исхрани.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g005

Да би се одредило да ли су смањени нивои ДАТ протеина у ПКСНУМКС фракцији, делимично, последица смањења ДАТ транскрипције, ВТА / СНц ДАТ мРНА нивои су мерени у истим пацовима као горе (Сл. КСНУМКСа на пример). Нисмо приметили никакве разлике између група за исхрану у средњем мозгу ДАТ мРНА након КСНУМКС или КСНУМКС вкс исхранеСлика КСНУМКСб – ц; оба нс). Према томе, разлике у нивоима протеина ДАТ унутар вентралног стриатума није вероватно да ће бити последица дефицита у производњи ДАТ.

тхумбнаил

Довнлоад:

ПоверПоинт слиде

већа слика

оригинал имаге

Фигуре КСНУМКС. Потрошња исхране са високим садржајем масти не мења нивое ДАТ мРНА. а)

Репрезентативна слика која показује КСНУМКС × КСНУМКС мм ударце ткива узетих из ВТА / СН и комбинована за ДАТ мРНА анализу. цп = церебрални пендук; пц = задња комисија; ММ = средња језгра мамилара. Није било разлика у релативним ДАТ мРНА нивоима након КСНУМКС недеља (b) или КСНУМКС недеља изложености исхрани (c).

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0058251.g006

Дискусија

Продужена потрошња ХФД може довести до ДИО и пластичности унутар централног нервног система. Чини се да су допамински неурони и стриатни допамински рецептори један скуп ЦНС циљева на које утиче ХФД и код гојазних појединаца [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Овде наводимо да је ХФД смањио стопу поновног преузимања допамина у вентралном стриатуму и овај ефекат је зависио од трајања излагања. Важно је да се ефекат ХФД на ДАТ функцију десио у одсуству ДИО. Иако у овој студији нисмо директно мерили маркере телесне адипозности, животиње су традиционално класификоване као ДИО или резистентне на исхрану засноване искључиво на прирасту телесне тежине након излагања ХФД [КСНУМКС]. Продужени ХФД значајно смањује способност кокаина, који омета ДАТ, да потенцира величину ослобађања допамина. Квантификовали смо нивое ДАТ протеина у вентралној стриатуму користећи Вестерн блот анализу - разликовање између ДАТ локализованих унутар субцелуларних фракција обогаћених за плазма мембрану или за рециклирање ендосома. Пронашли смо значајно смањење незреле изоформе ДАТ повезане са плазма мембраном. Тако, чини се да продужени ХФД смањује брзину поновног преузимања допамина преко ДАТ вероватно тако што интерферира са ДАТ трговином или можда сазревањем, али не смањењем експресије ДАТ гена или ДАТ мРНА стабилности. Штавише, период између два и шест недеља излагања ХФД-у изгледа да је најранија тачка преокрета за пластичност изазвану исхраном у односу на ДАТ.

Гојазност је у корелацији са вишеструким аспектима стриатне допаминске сигнализације, укључујући доступност ДАТ код оба човека [КСНУМКС] и мишеви [КСНУМКС]. Међутим, тек недавно је показано да развој ДИО мења брзину поновног преузимања допамина код пацова [КСНУМКС]. Иако је ова студија показала оштећење допамина након ексогено примењеног допамина након само КСНУМКС недеља ХФД, животиње које су одржаване на ХФД су изабране на основу почетног повећања тежине и тако могу представљати јединствену популацију. У складу са овим гледиштем, ХФД животиње су наставиле да једу више калорија и добијају већу тежину у поређењу са ЛФД контролама. Друга недавна студија објавила је ослабљен повратак допамина после КСНУМКС недеља ХФД код одраслих пацова [КСНУМКС]. Међутим, постојале су значајне разлике у телесној тежини између животиња које су храњене ХФД-ом у односу на стандардну лабораторијску храну када су вршена мерења поновног преузимања. Према томе, остало је нејасно да ли се оштећење допамина поново појављује као директан резултат развоја ДИО. Насупрот овим недавним извештајима, нисмо нашли разлике у телесној тежини или укупној кцал потрошњи између наших дијетних група када су вршена мерења повратног уноса. Да смо открили разлике у поновном преузимању допамина после КСНУМКС-а, али не и КСНУМКС, недеље ХФД сугеришу да су промене у допаминском поврату изазване храном одговор на хроничне, али не и акутне промене у саставу исхране. Поред тога, наши резултати сугеришу да уместо да буду последица гојазности, промене у ДАТ-у изазване исхраном могу допринети развоју болести. Будуће студије ће морати да адресирају да ли или не животињске популације које су диференцијално подложне ДИО [КСНУМКС] имају већ постојеће разлике у ДАТ експресији / функцији или су различито осетљиве на промене у ДАТ изазваној дијетом.

Према нашим сазнањима, ово је прва студија која показује да ХФД смањује допамински одговор на кокаин. Имајући у виду улогу допамина у наградама за лекове, наши резултати су у складу са претходним радом који показује да су пацови који су храњени ХФД око КСНУМКС недеље спорији да би стекли само-администрацију кокаина него животиње које су храњене контролном дијетом [КСНУМКС]. Важно је напоменути да је овај ефекат независан и од развоја ДИО. Поред тога, пацови селективно узгојени за осетљивост на ДИО показују смањену преференцију места кокаина, што сугерише да су награђиване особине кокаина затупљене у овим животињама [КСНУМКС]. Смањени одговор на кокаин који смо приметили код ХФД-КСНУМКС вк пацова може бити последица смањене доступности стриатних ДАТ. Међутим, кокаин такође повећава допаминску сигнализацију преко механизама који нису зависни од ДАТ. Конкретно, ХФД би могао имати нарушену кокаином изазвану мобилизацију резервних допаминских везикула [КСНУМКС]. Кокаин такође смањује пренос ГАБА на неуроне допамина унутар ВТА [КСНУМКС] и индуцира осцилације у брзини отпуштања тијела допаминских ћелија [КСНУМКС]. Било који или сви ови процеси могли су такође бити погођени ХФД-ом. Будућа истраживања ће се морати бавити механизмима на којима се темељи како ХФД модифицира аспекте награђивања кокаина и / или потенцијал за неуронске адаптације изазване лијековима [КСНУМКС]. Потрошња ХФД умањује оба понашања [КСНУМКС] и одговор на допамин [КСНУМКС], [КСНУМКС] амфетамина, који такође омета ДАТ. Важно је да пацови чији је унос ХФД калорично одговара оном код пацова који су храњени контролном исхраном не развијају ДИО, али ипак не успевају да развију амфетамин условљену преференцију места. [КСНУМКС]. Заједно са приказаним подацима, чини се да конзумација ХФД отупљује одговор на психостимулансе. Сви лекови који утичу на злоупотребу утичу на систем допамина и сматра се да је допаминско појачавање допаминског сигнала од кључног значаја за развој зависности. [КСНУМКС]. Према томе, смањени одговор на кокаин код ХФД пацова је конзистентан са извештајима да гојазни људи имају значајно нижи животни ризик од развоја поремећаја злоупотребе супстанци. [КСНУМКС]. Будући рад ће морати да реши да ли се субјективна оцена награде за кокаин разликује код гојазних појединаца у поређењу са нормалном контролом тежине.

Наша Вестерн блот анализа сугерише да дуготрајна конзумација ХФД не утиче на укупни стриатални ДАТ протеин, већ умањује интеграцију не-гликозилиране КСНУМКС кДа ДАТ изоформе у синаптосомалне мембране. Док ДАТ гликозилација побољшава брзину транспорта допамина и повећава стабилност површине мембране [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС], гликозилирани ДАТ од људи [КСНУМКС], [КСНУМКС] као и пацове [КСНУМКС] лако транспортује допамин. Поред тога, експерименти имунолошког обележавања откривају да су нивои не-гликозилираног ДАТ-а виши у вентралном односу на дорзални стриатум код мајмуна и код људи [КСНУМКС]. Узете заједно, ове студије указују да би смањени нивои мембрана КСНУМКС кДа ДАТ могли да допринесу дефициту реапсорпције који смо приметили код КСНУМКС вк ХФД пацова. Наши подаци су конзистентни са претходном студијом која показује да потрошња ХФД смањује доступност ДАТ у вентралном стриатуму мишева [КСНУМКС]. Међутим, ова студија није мјерила локализацију ДАТ у различитим интрацелуларним одјељцима. Поред тога, наши налази су конзистентни са студијом која показује смањење ДАТ ћелијске површине у стриатуму ДИО пацова [КСНУМКС]. Ова студија је такође објавила да укупни ниво протеина ДАТ није био под утицајем исхране у ДИО моделу. Ово откриће проширујемо како бисмо показали да укупни ДАТ протеин такође није под утицајем ХФД код одраслих пацова. Према томе, продужена конзумација ХФД не мења експресију ДАТ, али може да омета ДАТ трговину или сазревање.

Недостатак разлика у нивоима ВТА / СНпц ДАТ мРНА након КСНУМКС или КСНУМКС тједана ХФД изложености додатно подупире мишљење да су укупне разине ДАТ-а биле непромијењене нашим манипулацијама дијетом. Овај резултат је у супротности са претходним извештајем који показује редуковану ДАТ мРНА у мишјем ВТА после КСНУМКС недеља ХФД потрошње [КСНУМКС]. Међутим, у овој студији нивои ДАТ мРНА су мерени након што су се групе за исхрану разликовале у телесној тежини током КСНУМКС недеља. Према томе, њихови резултати вероватно представљају касне адаптације ДИО. Укратко, наши подаци пружају чврсте доказе да излагање ХФД доводи до функционалних промена поновног преузимања допамина стријатом смањењем ДАТ-а повезаних са мембраном без промене укупне ДАТ експресије. Важно је напоменути да се поремећаји узроковани дијетом у ДАТ-у могу појавити прије почетка ДИО, што сугерира да би ове промјене могле допринијети развоју гојазности.

Наши подаци доприносе растућој литератури која имплицира исхрану у регулацији функције допамина, и пружају додатне доказе да промене у ДАТ експресији узрокују функционално релевантне промене у допаминској сигнализацији. Измене у динамици стриатне допаминске сигнализације преко ДАТ-а изазване исхраном вероватно ће имати последице за понашање храњења. Подражаји повезани са храном изазивају фазно повећање допамина у стријату [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС]који вероватно појачавају и јачају акције усмјерене на храну [КСНУМКС]. Овде показујемо да КСНУМКС недеља ХФД потрошње продужава трајање фазног ослобађања допамина смањењем ДАТ-а повезаних са мембраном у региону стриатума где је допаминска функција од суштинског значаја за унос хране. [КСНУМКС]. Промене зависне од исхране у ДАТ могле би промовисати механизам напретка према којем продужени допамински сигнали изазвани стимулансима хране повећавају активацију рецептора допамина ДКСНУМКС ниског афинитета, који су критични за понашање понашања [КСНУМКС], [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Током времена, продужено повишење стриамина допамина могло би да промовише адаптације, као што је смањење допаминских ДКСНУМКС рецептора (ДКСНУМКСР), што је показано иу хуманим и глодарским моделима гојазности. [КСНУМКС], [КСНУМКС]. Наша студија сугерише да развој гојазности није неопходан за промену поновног преузимања допамина. Према томе, смањења ДАТ у мембрани повезана са исхраном могу претходити и допринети настанку ДКСНУМКСР довнрегулатиона, гојазности и компулзивног понашања у исхрани које се развија током потрошње ХФД. [КСНУМКС].

priznanja

Желимо да се захвалимо др. Јамие Д. Роитман и Јамес Е. МцЦутцхеон за корисне коментаре о ранијим верзијама рукописа. Садржај овог рада је искључиво одговорност аутора и не мора нужно представљати званичне ставове НИХ-а или Чикашког биомедицинског конзорцијума.

Аутор прилога

Конципиран и дизајниран експерименти: ЈЈЦ ЕХЦ МФР. Извршили експерименте: ЈЈЦ ДНП СРЕ. Анализирани податоци: ЈЈЦ ЕХЦ СРЕ МФР. Написао је рад: ЈЈЦ ЕХЦ МФР.

Референце

  1. КСНУМКС. Флегал КМ, Царролл МД, Кит БК, Огден ЦЛ (КСНУМКС) Преваленција гојазности и трендови у расподјели индекса тјелесне масе међу одраслим особама у САД, КСНУМКС – КСНУМКС. ЈАМА КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  2. КСНУМКС. Огден ЦЛ, Царролл МД, Цуртин ЛР, МцДовелл МА, Табак ЦЈ, ет ал. (КСНУМКС) Преваленца прекомерне тежине и гојазности у Сједињеним Државама, КСНУМКС – КСНУМКС. ЈАМА КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  3. Погледајте чланак
  4. ПубМед / НЦБИ
  5. Гоогле Сцхолар
  6. КСНУМКС. Древновски А, Алмирон-Роиг Е (КСНУМКС) Људска перцепција и преференције за богату храну. У: Монтмаиеур ЈП, ле Цоутре Ј, уредници. Детекција масти: укус, текстура и пост-ингестивни ефекти, Поглавље КСНУМКС. Боца Ратон, ФЛ: ЦРЦ Пресс.
  7. Погледајте чланак
  8. ПубМед / НЦБИ
  9. Гоогле Сцхолар
  10. Погледајте чланак
  11. ПубМед / НЦБИ
  12. Гоогле Сцхолар
  13. Погледајте чланак
  14. ПубМед / НЦБИ
  15. Гоогле Сцхолар
  16. Погледајте чланак
  17. ПубМед / НЦБИ
  18. Гоогле Сцхолар
  19. Погледајте чланак
  20. ПубМед / НЦБИ
  21. Гоогле Сцхолар
  22. Погледајте чланак
  23. ПубМед / НЦБИ
  24. Гоогле Сцхолар
  25. Погледајте чланак
  26. ПубМед / НЦБИ
  27. Гоогле Сцхолар
  28. Погледајте чланак
  29. ПубМед / НЦБИ
  30. Гоогле Сцхолар
  31. Погледајте чланак
  32. ПубМед / НЦБИ
  33. Гоогле Сцхолар
  34. Погледајте чланак
  35. ПубМед / НЦБИ
  36. Гоогле Сцхолар
  37. Погледајте чланак
  38. ПубМед / НЦБИ
  39. Гоогле Сцхолар
  40. Погледајте чланак
  41. ПубМед / НЦБИ
  42. Гоогле Сцхолар
  43. Погледајте чланак
  44. ПубМед / НЦБИ
  45. Гоогле Сцхолар
  46. Погледајте чланак
  47. ПубМед / НЦБИ
  48. Гоогле Сцхолар
  49. Погледајте чланак
  50. ПубМед / НЦБИ
  51. Гоогле Сцхолар
  52. Погледајте чланак
  53. ПубМед / НЦБИ
  54. Гоогле Сцхолар
  55. Погледајте чланак
  56. ПубМед / НЦБИ
  57. Гоогле Сцхолар
  58. Погледајте чланак
  59. ПубМед / НЦБИ
  60. Гоогле Сцхолар
  61. Погледајте чланак
  62. ПубМед / НЦБИ
  63. Гоогле Сцхолар
  64. Погледајте чланак
  65. ПубМед / НЦБИ
  66. Гоогле Сцхолар
  67. Погледајте чланак
  68. ПубМед / НЦБИ
  69. Гоогле Сцхолар
  70. 4. Роллс БЈ (2009) Однос између густине енергије у исхрани и уноса енергије. Физиологија и понашање 97: 609–15.
  71. КСНУМКС. Ледикве ЈХ, Бланцк ХМ, Кеттел Кхан Л, Сердула МК, Сеимоур ЈД, ет ал. Густина енергије у исхрани је повезана са уносом енергије и статусом тежине код одраслих у САД. Амерички часопис за клиничку исхрану КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  72. Погледајте чланак
  73. ПубМед / НЦБИ
  74. Гоогле Сцхолар
  75. Погледајте чланак
  76. ПубМед / НЦБИ
  77. Гоогле Сцхолар
  78. Погледајте чланак
  79. ПубМед / НЦБИ
  80. Гоогле Сцхолар
  81. Погледајте чланак
  82. ПубМед / НЦБИ
  83. Гоогле Сцхолар
  84. Погледајте чланак
  85. ПубМед / НЦБИ
  86. Гоогле Сцхолар
  87. Погледајте чланак
  88. ПубМед / НЦБИ
  89. Гоогле Сцхолар
  90. Погледајте чланак
  91. ПубМед / НЦБИ
  92. Гоогле Сцхолар
  93. Погледајте чланак
  94. ПубМед / НЦБИ
  95. Гоогле Сцхолар
  96. Погледајте чланак
  97. ПубМед / НЦБИ
  98. Гоогле Сцхолар
  99. Погледајте чланак
  100. ПубМед / НЦБИ
  101. Гоогле Сцхолар
  102. Погледајте чланак
  103. ПубМед / НЦБИ
  104. Гоогле Сцхолар
  105. Погледајте чланак
  106. ПубМед / НЦБИ
  107. Гоогле Сцхолар
  108. Погледајте чланак
  109. ПубМед / НЦБИ
  110. Гоогле Сцхолар
  111. Погледајте чланак
  112. ПубМед / НЦБИ
  113. Гоогле Сцхолар
  114. Погледајте чланак
  115. ПубМед / НЦБИ
  116. Гоогле Сцхолар
  117. Погледајте чланак
  118. ПубМед / НЦБИ
  119. Гоогле Сцхолар
  120. Погледајте чланак
  121. ПубМед / НЦБИ
  122. Гоогле Сцхолар
  123. Погледајте чланак
  124. ПубМед / НЦБИ
  125. Гоогле Сцхолар
  126. Погледајте чланак
  127. ПубМед / НЦБИ
  128. Гоогле Сцхолар
  129. Погледајте чланак
  130. ПубМед / НЦБИ
  131. Гоогле Сцхолар
  132. Погледајте чланак
  133. ПубМед / НЦБИ
  134. Гоогле Сцхолар
  135. Погледајте чланак
  136. ПубМед / НЦБИ
  137. Гоогле Сцхолар
  138. Погледајте чланак
  139. ПубМед / НЦБИ
  140. Гоогле Сцхолар
  141. Погледајте чланак
  142. ПубМед / НЦБИ
  143. Гоогле Сцхолар
  144. Погледајте чланак
  145. ПубМед / НЦБИ
  146. Гоогле Сцхолар
  147. Погледајте чланак
  148. ПубМед / НЦБИ
  149. Гоогле Сцхолар
  150. Погледајте чланак
  151. ПубМед / НЦБИ
  152. Гоогле Сцхолар
  153. Погледајте чланак
  154. ПубМед / НЦБИ
  155. Гоогле Сцхолар
  156. КСНУМКС. Мали ДМ, Јонес-Готман М, Дагхер А (КСНУМКС) Испуштање допамина изазвано храњењем у дорзалном стриатуму је у корелацији са оцјенама угодности оброка код здравих добровољаца. НеуроИмаге КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  157. КСНУМКС. Бассеро В, Ди Цхиара Г (КСНУМКС) Диференцијална реакција трансмисије допамина на подражаје хране у љускама / језграма. Неурознаност КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  158. КСНУМКС. Роитман МФ, Вхеелер РА, Вигхтман РМ, Царелли РМ (КСНУМКС) Кемијски одговори у реалном времену у нуцлеус аццумбенс разликују награђивање и одбојне подражаје. Натуре Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  159. КСНУМКС. Бровн ХД, МцЦутцхеон ЈЕ, Цоне ЈЈ, Рагоззино МЕ, Роитман МФ (КСНУМКС) Примарни стимуланси за награђивање хране и предиктивно награђивање изазивају различите обрасце фазног сигнализирања допамина кроз стриатум. Еуропеан Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  160. КСНУМКС. Грабенхорст Ф, Роллс ЕТ, Паррис БА, д 'Соуза АА (КСНУМКС) Како мозак представља наградну вредност масти у устима. Церебрални кортекс КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  161. КСНУМКС. Јохнсон ПМ, Кенни ПЈ (КСНУМКС) Допамин ДКСНУМКС рецептори у дисфункцији награђивања зависности и компулзивном једењу код гојазних пацова. Натуре Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  162. КСНУМКС. Вуцетиц З, Царлин ЈЛ, Тотоки К, Реиес ТМ (КСНУМКС) Епигенетска дисрегулација допаминског система у гојазности изазваној дијетом. Часопис за неурохемију КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  163. КСНУМКС. Стице Е, Споор С, Бохон Ц, Мали ДМ (КСНУМКС) Однос између гојазности и отпуштеног стриатног одговора на храну је модериран ТакИА АКСНУМКС алелом. Наука КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  164. КСНУМКС. Црагг СЈ, Рице МЕ (КСНУМКС) Плеса поред ДАТ-а у ДА синапси. Трендс ин Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  165. КСНУМКС. Дреиер ЈК, Херрик КФ, Берг РВ, Хоунсгаард ЈД (КСНУМКС) Утицај фазног и тоничког ослобађања допамина на активацију рецептора. Тхе Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  166. КСНУМКС. Фиглевицз ДП, Сзот П, Цхавез М, Воодс СЦ, Веитх РЦ (КСНУМКС) Интравентрикуларни инсулин повећава мРНК транспортера допамина у пацовском ВТА / субстантиа нигра. Истраживање мозга КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  167. КСНУМКС. Мебел ДМ, Вонг ЈЦ, Донг ИЈ, Боргланд СЛ (КСНУМКС) Инсулин у вентралном тегменталном подручју смањује хедонску исхрану и сузбија концентрацију допамина повећаним поновним преузимањем. Еуропеан Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  168. КСНУМКС. Цхен ПС, Ианг ИК, Иех ТЛ, Лее ИХ, Иао ВЈ, ет ал. (КСНУМКС) Корелација између индекса телесне масе и доступности допаминског транспортера стријаталне у здравих добровољаца - СПЕЦТ студија. НеуроИмаге КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  169. КСНУМКС. Јужно Т, Хуанг КСФ (КСНУМКС) Изложеност високој масноћи повећава допамин ДКСНУМКС рецептор и смањује густину везивања рецептора допамин транспортера у нуцлеус аццумбенс и каудатном путамену мишева. Неурохемијска истраживања КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  170. КСНУМКС. Спеед Н, Саундерс Ц, Давис АР, Овенс ВА, Маттхиес ХЈГ, ет ал. (КСНУМКС) Смањено стриатно Акт сигнализирање ремети допаминску хомеостазу и повећава храњење. ПлоС оне КСНУМКС: еКСНУМКС.
  171. КСНУМКС. Роитман МФ, Весцотт С, Цоне ЈЈ, МцЛане МП, Волфе ХР (КСНУМКС) МСИ-КСНУМКС смањује акутни унос хране без утицаја на активност транспортера допамина. Фармакологија Биохемија и понашање КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  172. КСНУМКС. Хеиен МЛАВ, Јохнсон МА, Вигхтман РМ (КСНУМКС) Рјешавање неуротрансмитера детектованих брзом цикличном волтаметријом. Аналитичка хемија КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  173. КСНУМКС. Синкала Е, МцЦутцхеон ЈЕ, Сцхуцк МЈ, Сцхмидт Е, Роитман МФ, ет ал. (КСНУМКС) Калибрација електроде са микрофлуидном ћелијом за проток за цикличку волтаметрију брзог скенирања. Лаб на чипу КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  174. КСНУМКС. Иоргасон ЈТ, Еспана РА, Јонес СР (КСНУМКС) Демонска волтаметрија и софтвер за анализу: анализа кокаином изазваних промјена у допаминској сигнализацији уз помоћ вишеструких кинетичких мјера. Часопис неуронаучних метода КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  175. КСНУМКС. Пакинос Г, и Франклин КБЈ (КСНУМКС) Мозак пацова у стереотаксичним координатама. Сан Дијего, Калифорнија: Ацадемиц Пресс.
  176. КСНУМКС. Халлетт ПЈ, Цоллинс ТЛ, Стандаерт ДГ, Дунах АВ (КСНУМКС) Биокемијско фракционисање можданог ткива за проучавање расподеле и трговине рецепторима. Актуелни протоколи у неурознаности / редакцији, Јацкуелине Н. Цравлеи… [ет ал.] Поглавље КСНУМКС: Јединица КСНУМКС.
  177. КСНУМКС. Менг СЗ, Озава И, Итох М, Такасхима С (КСНУМКС) Развојне и старосне промене у допаминском транспортеру, и допамин ДКСНУМКС и ДКСНУМКС рецептори у хуманим базалним ганглијима. Истраживање мозга КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  178. КСНУМКС. Молл ГХ, Мехнерт Ц, Вицкер М, Боцк Н, Ротхенбергер А, ет ал. (КСНУМКС) Промене у густоћи пресинаптичких транспортера моноамина у различитим регионима мозга пацова повезаним са старењем од раног малолетничког живота до касног одраслог доба. Развојно истраживање мозга КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  179. КСНУМКС. Цруз-Мурос И, Афонсо-Орамас Д, Абреу П, Перез-Делгадо ММ, Родригуез М, ет ал. (КСНУМКС) Утицај старења на експресију допаминског транспортера и компензационе механизме. Неуробиологија старења КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  180. КСНУМКС. Баданицх КА, Адлер КЈ, Кирстеин ЦЛ (КСНУМКС) Адолесценти се разликују од одраслих код кокаина увјетованог мјеста и кокаином индуцираног допамина у нуцлеус аццумбенс септи. Еуропеан Јоурнал оф Пхармацологи КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  181. КСНУМКС. Јонес СР, Гаррис ПА, Килтс ЦД, Вигхтман РМ (КСНУМКС) Упоређивање преузимања допамина у базолатералном амигдалоидном језгру, каудат-путамену и нуцлеус аццумбенс пацова. Часопис за неурохемију КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  182. КСНУМКС. Рао А, Симмонс Д, Соркин А (КСНУМКС) Диференцијална подстанична дистрибуција ендосомалних компартмента и допамин транспортера у допаминергичким неуронима. Молекуларна и ћелијска неуронаука КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  183. КСНУМКС. Ванг ГЈ, Волков НД, Тханос ПК, Фовлер ЈС (КСНУМКС) Приказивање путева допамина у мозгу: импликације за разумевање гојазности. Часопис медицине зависности КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  184. КСНУМКС. Левин БЕ, Дунн-Меинелл АА, Балкан Б, Кеесеи РЕ (КСНУМКС) Селективни узгој за дијету изазвану гојазност и отпорност код Спрагуе-Давлеи пацова. Америцан Јоурнал оф Пхисиологи КСНУМКС: РКСНУМКС – КСНУМКС.
  185. КСНУМКС. Моррис ЈК, Бомхофф ГЛ, Горрес БК, Давис ВА, Ким Ј, ет ал. (КСНУМКС) Инзулинска резистенција умањује функцију допаминског нигростриатара. Експериментална неурологија КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  186. КСНУМКС. Веллман ПЈ, Натион ЈР, Давис КВ (КСНУМКС) Оштећење стицања кокаинске самоуправе код пацова одржаваних на дијети са високим садржајем масти. Фармакологија, биохемија и понашање КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  187. 37. Тханос ПК, Ким Р, Цхо Ј, Мицхаелидес М, Андерсон БЈ, ет ал. (2010) С5Б пацови отпорни на гојазност показали су већу предност кокаину условљеном месту него ОМ пацови склони гојазности. Физиологија и понашање 101: 713–8.
  188. КСНУМКС. Вентон БЈ, Сеипел АТ, Пхиллипс ПЕМ, Ветсел ВЦ, Гитлер Д, ет ал. (КСНУМКС) Кокаин повећава ослобађање допамина мобилизацијом резервног базена који зависи од синапсина. Тхе Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  189. КСНУМКС. Стеффенсон СЦ, Таилор СР, Хортон МЛ, Барбер ЕН, Лите ЛТ (КСНУМКС) Кокаин дисинхибира допаминске неуроне у вентралној тегменалној области путем блокаде ГАБА неурона овисних напонских канала. Еуропеан Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  190. КСНУМКС. Схи ВКС, Пун ЦЛ, Зхоу И (КСНУМКС) Психостимуланси изазивају ниске фреквенције осцилација у активностима паљења допаминских неурона. Неуропсихофармакологија КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  191. КСНУМКС. Давис ЈФ, Траци АЛ, Сцхурдак ЈД, Тсцхоп МХ, Липтон ЈВ, ет ал. (КСНУМКС) Излагање повишеним нивоима дијеталне масти умањује психостимулантну награду и мезолимбички промет допамина код пацова. Бихевиорална неуронаука КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  192. КСНУМКС. Геигер БМ, Хабурцак М, Авена НМ, Моиер МЦ, Хоебел БГ, ет ал. (КСНУМКС) Дефицити мезолимбичке неуротрансмисије допамина у прехрамбеној гојазности пацова. Неурознаност КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  193. КСНУМКС. Химан СЕ, Маленка РЦ, Нестлер ЕЈ (КСНУМКС) Неурални механизми зависности: Улога учења и памћења повезаног са наградом. Овисност КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  194. КСНУМКС. Симон ГЕ, Вон Корфф М, Саундерс К, Миглиоретти ДЛ, Цране ПК, ет ал. (КСНУМКС) Повезаност између гојазности и психијатријских поремећаја у одраслој популацији САД. Архива опште психијатрије КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  195. КСНУМКС. Торрес ГЕ, Царнеиро А, Сеаманс К, Фиорентини Ц, Свеенеи А, ет ал. (КСНУМКС) Олигомеризација и трговина људским допаминским транспортером. Јоурнал оф Биологицал Цхемистри КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  196. КСНУМКС. Ли ЛБ, Цхен Н, Рамамоортхи С, Цхи Л, Цуи КСН, ет ал. (КСНУМКС) Улога Н-гликозилације у функцији и површинском промету људског транспортера допамина. Јоурнал оф Биологицал Цхемистри КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  197. КСНУМКС. Афонсо-Орамас Д, Цруз-Мурос И, де ла Роса ДА, Абреу П, Гиралдез Т, ет ал. (КСНУМКС) Гликозилација транспортера допамина је у корелацији са рањивошћу допаминергичних ћелија средњег мозга код Паркинсонове болести. Неуробиологија болести КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  198. КСНУМКС. Роитман МФ, Стубер ГД, Пхиллипс ПЕМ, Вигхтман РМ, Царелли РМ (КСНУМКС) Допамин дјелује као секундарни модулатор тражења хране. Тхе Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  199. КСНУМКС. МцЦутцхеон ЈЕ, Беелер ЈА, Роитман МФ (КСНУМКС) Сукроза-предиктивни знакови изазивају веће фазно ослобађање допамина од слагања сахарина. Синапсе КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  200. КСНУМКС. Флагел СБ, Цларк ЈЈ, Робинсон ТЕ, Маио Л, Цзуј А, ет ал. (КСНУМКС) Селективна улога допамина у подстицању учења. Природа КСНУМКС: пКСНУМКС – КСНУМКСд.
  201. КСНУМКС. Сзцзипка МС, Мандел РЈ, Донахуе БА, Снидер РО, Лефф СЕ, ет ал. (КСНУМКС) Довођење виралног гена селективно обнавља храњење и спречава смртност мишева са недостатком допамина. Неурон КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  202. КСНУМКС. Ди Циано П, Кардинал РН, Цовелл РА, Литтле СЈ, Еверитт БЈ (КСНУМКС) Диференцијално укључивање НМДА, АМПА / каинат и допамин рецептора у језгру нуцлеус аццумбенс у аквизицији и изведби павловског приступа понашању. Јоурнал оф Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  203. КСНУМКС. Кравитз АВ, Фреезе БС, Паркер ПРЛ, Каи К, Тхвин МТ, ет ал. (КСНУМКС) Регулација паркинсонског моторичког понашања оптогенетичком контролом кругова базалних ганглија. Природа КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.
  204. КСНУМКС. Кравитз АВ, Тие ЛД, Креитзер АЦ (КСНУМКС) Различите улоге за директне и индиректне путеве стриатних неурона у појачању. Натуре Неуросциенце КСНУМКС: КСНУМКС – КСНУМКС.