Dopamine e matlafatsa moputso o batlang ka ho khothalletsa thabo e hlahisoang ke mohopolo nucleus accumbens (2014)

Selelekela

Morero oa dopamine ho tloha sebakeng sa ventral tegmental (VTA) ho ea ho NAc ke karolo ea bohlokoa ea potoloho ea neural e khothaletsang boitšoaro ba ho batla moputso (Nicola, 2007). Haeba mosebetsi oa NAc dopamine o fokotseha ka mokhoa o lekang, liphoofolo ha li na monyetla oa ho ikitlaelletsa ho fumana moputso (Salamone le Correa, 2012) mme hangata ba hloleha ho arabela linthong tse boletsoeng esale pele tsa moputso (Di Ciano et al., 2001; Yun et al., 2004; Nicola, 2007, 2010; Saunders le Robinson, 2012). Lits'oaetso tsena li bakoa ke ho senyeha ha karolo e itseng ea ho batla moputso: ho latsoa tloaelo ea ho nka mekhoa, athe lebelo la ho atamela, bokhoni ba ho fumana sepheo le ho etsa boits'oaro bo hlokahalang ho fumana moputso, le bokhoni ba ho moputso oa ho jella ha o senyehe (Nicola, 2010). Dopamine e tlameha ho khothaletsa mokhoa ka ho susumetsa ts'ebetso ea li-neuron tsa NAc, empa mofuta oa tšusumetso ena o lula o sa hlakileng. Bongata bo boholo ba li-neuron tsa NAc li thabile kapa li thibetsoe ke mekhoa e boletsoeng esale pele ea moputso (Nicola et al., 2004a; Roitman et al., 2005; Ambroggi et al., 2008, 2011; McGinty et al., 2013), mme thabo e qala pele ho boitšoaro bo atamelaneng ba ho bua le ho bolela esale pele mohopoloMcGinty et al., 2013). Ka hona, ketsahalo ena e na le litšobotsi tse hlokoang ke letšoao le itšetlehileng ka dopamine le khothalletsang mokhoa oa ho cued, empa hore na o etsa joalo ha ho tsejoe.

Li-Neurons mehahong e 'meli e romellang liphatlalatso tsa glutamatergic ho NAc, BLA le dorsal medial PFC (Brog et al., 1993,, ba khahliloe ke ho tseba lintho tse lebelletsoeng pele ho moputso (Schoenbaum et al., 1998; Ambroggi et al., 2008), le inactivation kenella ea e 'ngoe ea likarolo tsena (Ambroggi et al., 2008; Ishikawa et al., 2008) kapa ea VTA (Yun et al., 2004) e fokotsa boholo ba menyako ea boithabiso e entsoeng ke cue-evoke ho NAc. Litlhokomeliso tsena li fana ka maikutlo a hore thabo ea NAc cue-evoke e tsamaisoa ke ho kenella ha glutamatergic, empa ntle le NAc dopamine, esita le liphetho tsena tse matla tsa thabo ha li na ho lekana ho nts'etsa likhahla tsa ho thunya hoa li-cue-evoke. Le ha ho le joalo, sephetho sena ke se boima. Li-neurons tse ngata tsa NAc li thibetsoe ke li-cues (Nicola et al., 2004a; Ambroggi et al., 2011) 'me ha ho tsejoe hore na menyaka kapa lithibelo li bohlokoa ho feta ts'ebetsong ea ts'ebetso ea mokhoa. Ntle le moo, ho se sebetse ha VTA ho ka fokotsa tsusumetso ea khethollo (DS) -e felise thabo ka mekhoa e 'maloa e ikemetseng ea dopamine: ho fokotsa kh'outo ea cue ho BLA le PFC, e fumanang litheko ho VTA (Swanson, 1982); fokotseha ho fokotseha ha "Gabaergic VTA neurons" projeke eo ho NAc (Van Bockstaele le Pickel, 1995); kapa ho lokolloa ha glutamate ho dopaminergic neurons (Stuber et al., 2010). Khabareng, hobane ho qaptjoa ha VTA ha ho fokotse ho thunya ha NAc DS feela, empa le boitšoaro ba mokhoa oa DS-evoke (Yun et al., 2004), Ho pepesa DS ho ka fetoha kamorao ho boemo bo hlokahalang bakeng sa motsamao o lebisitsoeng ho sepheo.

Ho leka ka kotloloho karolo ea NAc dopamine ho thunya ea cue-e kentsoeng, re qapile lefapha la tlhahlobo bakeng sa tšebeliso ea litoeba: mokokotlo oa li-elektrone tse potolohileng potolohileng cannula e bohareng, e lumellang ho rekota ka nako e le 'ngoe ea ts'ebetso ea ho thunya ea unit le infusion ea antoponists ea dopamine sebakeng se ka thoko se potolohileng li-neuron tse rekotiloeng (du Hoffmann et al., 2011). Tlhophiso ena e re lumella ho theha lihokela pakeng tsa ts'ebetso ea dopamine receptor, NAc ea ho thunya ha neuronal, le boitšoaro bo batlang moputso: haeba blockade of NAc dopamine receptors e thibela lipontšo tsa bobeli tsa cue-evoke le ts'ebetso ea ts'ebetso, sena se tla fana ka bopaki bo matla ba hore karabelo ea neuronal e itšetlehile endo native dopamine le hore lets'oao lena lea hlokahala bakeng sa boitshwaro ba ho atamela.

Lisebelisoa le mekhoa

Liphoofolo.

Ho fihlile likhoto tse leshome le metso e mehlano tsa banna ba bolelele ba X-Evan (275-300 g) ho Charles River 'me ba lula ka tlung. Bekeng e le 'ngoe ka mor'a hore ba fihle, likhoto li ne li tšoaroa ka metsotso e mengata letsatsi le leng le le leng bakeng sa 3 d ho li beha ho motho ea li lekang. Kamora ho lula, litoeba li ne li beoa lijong tse thibetsoeng tsa 13 g ea rat chow ka letsatsi. Ad libitum Lijo li ile tsa fuoa 7 d kamora ho buuoa, kamora hore liphoofolo li khutlisetsoe lijong tse thibetsoeng. Tsamaiso ea liphoofolo e ne e tsamaisana le Setsi sa Naha sa Tataiso ea Bophelo bakeng sa Tlhokomelo le Ts'ebeliso ea Liphoofolo tsa Laboraro mme se amohetsoe ke Komiti ea Tlhokomelo ea Liphoofolo le Ts'ebeliso ea Albert Einstein College of Medicine.

Likamore tse sebetsang.

Liteko tsohle tsa boitšoaro le koetliso ea boitšoaro li etsahetse likamoreng tse entsoeng ka tloaelo tsa Plexiglas (40 cm skwele, 60 cm high). Tsena li ne li fumaneha ka har'a likhabinete tsa tšepe tse neng li sebetsa e le mabokose a Faraday; likhabinete li ne li kentsoe ka foam ea molumo 'me lerata le lesoeu le ne le bapaloa khafetsa ka sebui se inehetseng ho fokotsa molumo oa lerata la kantle kahare ho phapusi. Likamore tse sebetsang li ne li kentsoe sehokelo sa moputso leboteng le le leng le nang le litšenyehelo tse ka huloang ka lehlakoreng le leng la eona. Photobeam ka pele ho setsi e ne e sebelisetsoa ho lekanya linako tsa ho kenella le ho tsoa. Tharollo ea nakoana ea sistimi ea taolo ea boitšoaro (Med Associates) e ne e le 1 ms.

Mosebetsi oa DS.

Liphoofolo li ile tsa koetlisetsoa mosebetsi oa DS ho latela lits'ebetso tse ts'oanang le tse neng li sebelisoa pele (Nicola et al., 2004a,b; Ambroggi et al., 2008, 2011; Nicola, 2010; McGinty et al., 2013). Litlhahiso tse peli li ile tsa hlahisoa ka bonngoe, ekaba DS ea ho lepa moputso kapa khothatso e sa nke lehlakore (NS). Lits'oants'o tsa kutlo li ne li na le molumo oa siren (e neng e palame baesekele khafetsa ho tloha 4 ho isa 8 kHz ho feta 400 ms) le molumo o kenang (6 kHz molumo bakeng sa 40 ms, theoha bakeng sa 50 ms); Kabelo ea molumo o itseng ho DS kapa NS e ne e entsoe ka lotho ho likhoto. Likarolo tsa intertrial (ITIs) li khethiloe ka mokhoa o sa reroang ho tsoa ho kabo e hlakileng ea li-exponential tse nang le moelelo oa li-30 le tse fetang 150 s. NS e ne e lula e hlahisoa bakeng sa li-s tse 10; Mechini ea khatiso ea lever nakong ea NS e ile ea hatisoa empa ea se ke ea ba le litlamorao tse hlophisitsoeng. Li-lever tse "sebetsang" le "tse sa sebetseng" li ne li abeloa ka mokhoa o sa reroang ho lever le ka ho le letona bakeng sa rat e ngoe le e ngoe qalong ea thupelo mme ha lia ka tsa fapana kamora moo. Karabelo ea lever ho lever e sebetsang nakong ea DS e ile ea emisa mohopolo, mme ho kena ha pele ho kenella ho ile ha baka phano ea moputso oa 10% oa sucrose selibeng se fumanehang kahare. Litlhahiso tsa DS nakong eo phoofolo e sa kang ea arabela li ile tsa emisoa kamora 10 s. Likarabo nakong ea ITI (lipakeng tsa lipuo tsa cue) le likarabo ho lever e sa sebetseng li ile tsa hatisoa empa ha li a fella ka phano ea moputso. Liphoofolo li koetliselitsoe mosebetsi oa DS ho fihlela li arabela> 80% ea li-DS le <20% NS ka linako tsa koetliso tse 2 h.

Mechini e hlophisitsoeng ea microelectrode.

Kamora boikoetliso ba pele, likhoto li ile tsa kenngoa ka li-micarrire tse khanneloang tse nang le li-electrode tse robeli tsa tungsten tse potolohileng cannula e tataisang ea microinjection. Tsena li ne li hahiloe le ho kenngoa ka li-microdrite tse entsoeng ka tloaelo joalo ka ha ho hlalositsoe pele (du Hoffmann et al., 2011). Phetoho e felletseng ea sekoti sa drive e ile ea sisinya li-elektrode le cannula joalo ka karolo ea 300 μm (ntle le ho potoloha hoa li-probes), ea re nolofalletsang ho rekota ho tsoa liphoofolong tse 'maloa tse ikhethileng tsa li-neuron ka har'a phoofolo e le' ngoe.

Ho kenya metsoako e entsoeng ka likhoto, likhoto li ile tsa lokisetsoa ts'ebetso ea bongaka 'me tsa beoa ka har'a sesebelisoa sa stereotaxic joalo ka ha ho hlalositsoe pele (du Hoffmann et al., 2011; McGinty et al., 2013). Anesthesia e ile ea qaptjoa mme ea bolokoa le isoflurane (0.5-3%). Liphoofolo li ile tsa amohela meriana e thibelang likokoana-hloko (Baytril) hang-hang pele ho buoa le ho buuoa ka mor'a 24 h. Li-array tse kenang li ne li kentsoe ka mokhoa o kopaneng mokokotlong oa dorsal NAc (1.4 mm ka ntle le 1.5 mm hamorao ho tsoa bregma, le 6.5 mm ventral ho tloha lehata). Electrodes le microdrives li ne li sirelelitsoe ka lehata ka marang-rang a masapo le acrylic ea meno, 'me lifolakha tsa terata li ne li kentsoe ka har'a cannulae ea tataiso e le hore lipheletso tsa li-approurators li ne li phunyeletsa le lipheletso tsa "cannulae" tsa tataiso. Kamora ho buoa, letlalo le ile la alafshoa le Neo-Predef ho thibela ts'oaetso mme liphoofolo tsa lumelloa beke ea 1 pele li tsoelapele ka liteko. Bakeng sa analgesia ea posturgery, liphoofolo li ile tsa fuoa 10 mg / kg ea ketoprofen ea lithethefatsi tse sa tsubeng.

Lithethefatsi.

SCH23390 le raclopride li ile tsa rekoa ho Sigma. Matsatsing a liteko, lithethefatsi li ne li sa tsoa hlatsoa ka ho li qhibiliha ka letsoai la 0.9% le letsoai. Lithethefatsi li ne li fanoa ka tekanyetso ea 1.1 μg SCH233390 ho 0.55 μl saline ka lehlakoreng le 6.4 μg raclopride ho 0.8 μl saline ka lehlakoreng le leng. SCH233390 le raclopride li ile tsa kenngoa hofihlela 12 le 17.5 min, ka ho latellana. Litekong tsa lifofane, re fumane hore infusions ea naha e 'ngoe ea li -mouslopride tse sa feleng tsa 12 e bile le litlamorao tse kholo empa tsa nakoana ho tekanyo ea karabelo ea DS. Ka hona, ho lelefatsa ts'ebetso re ile ra eketsa nako ea inflase ea raclopride hoo boemo ba nakoana ba litlamorao tsa eona ea bongaka bo ts'oanang le SCH23390. Ho entsoe ente e le 'ngoe ea lefatše kapa e le' ngoe ka nako e le 'ngoe ka letsatsi. Liphoofolo tsohle li fumane bonyane ente e le 'ngoe ea lefatše ea antagonist, le ente e le' ngoe kapa tse 'maloa. Nakong ea liteko tse ling tse sa amaneng le batho ba bang, re ile ra kenya saline e le taolo ea makoloi koloing e amohetseng mohanyetsi.

Microinjection le mokhoa oa ho rekota.

Lisebelisoa tsa microinjection e tšoanang le ho rekota li hlalositsoe pele (du Hoffmann et al., 2011). Thapo ea ho rekota e tsoang sethaleng sa hlooho e emisitsoe ka har'a motlakase o nang le liteishene tse 24 o nang le lesoba le bohareng (Moog), le fetisetsang lipontšo tsamaisong ea ho rekota ea electrophysiological. Lisirinji tse peli li ne li kentsoe pompo e le 'ngoe ea sering e ka ntle ho phaposi; mekelikeli ea mokelikeli e tsoang lisiringeng e lebisitse ho swivel e nang le mekhahlelo e 'meli (Instech Laboratories) e phahamisitsoeng ka holim'a commutator. Likhoele tsa mokelikeli li ne li theoha ho tloha ka swivel ka lesoba la commutator, li matha ka thapo ea ho rekota, ebe li emisoa ho li-microinjectors tse 33 tsa gauge.

Pele ho lenaneo la ho rekota, li-microinjectors li ile tsa tlatsoa ka tharollo ea lithethefatsi 'me tsa kenella ka har'a phoofolo e tataisang liphoofolo. Malebela a microinjector a atolositse 0.5 mm ka nqane ho tataiso ea li-cannulae e le hore ntlha ea microinjector e ne e le tlasa malebela a eleketrode le -670 μm ho tloha bohareng ba eleketrode e ngoe le e ngoe. Pele o tlatsoa ka sethethefatsi, methapo ea mokelikeli le li-microinjectors li ne li tlatsitsoe ka oli ea diminerale, 'me boemo ba sehokelo sa metsi a nang le metsi bo tšoailoe ho tsamaisa post hoc netefatso ea hore moriana o entetsoe. Qetellong, sethala sa hlooho se ne se hokahantsoe le phoofolo mme mela ea mokelikeli e ne e sirelelitsoe ka thata mohala oa ho hatisa ho boloka li-microinjectors sebakeng sa nako ea teko. Liphoofolo tse lokiselitsoeng ka tsela ena li ne li lumelloa ho etsa mosebetsi oa DS bakeng sa nako ea motheo ea bonyane 45 min, nakong eo mosebetsi oa neural o neng o tlalehiloe; ka nako eo, pompo ea syringe e ile ea buloa ka thoko ho kenya lithethefatsi bokong. Ho entoa ho ne ho sa hloke ho tšoara phoofolo kapa ho bula lemati la kamore, mme seboka sa boits'oaro se ne se tsoela pele se sa sitisoe nakong eohle ea motheo, ho kenella le nakong ea ho pepa.

Lipontšo tsa Neural voltage li ile tsa rekisoa ka li-amplifier tsa li-head-level (phaello ea bonngoe), linako tse ntlafalitsoeng tsa 10,000, le li-digitized li sebelisa lisebelisoa tsa khoebo le software (Plexon). Re rekota ho tsoa li-neurons tsa 379 ka linako tsa 38 tsa ho rekota / ente ea rato ka likhapha tsa 15. Likarolong tsa 38, 7 e ile ea lahloa ka lebaka la boitšoaro bo bobe nakong ea motheo oa mantlha kapa hobane ho se na li-neuron tse ka arohanngoang ka botsitso. Kahoo, tlhahlobo ea rona ea neural e tsepamisitse maikutlo mananeong a 31 a ho rekota / a ente ao re a rekotileng ho tsoa ho 322 li-neurons tse arohaneng hantle ho likhoto tsa 12. Kamora seboka se seng le se seng sa ho rekota / ho enta, microdrive e nkileng li-electrode arrays e ne e tsoetse-pele (150 (m (karolo e 'ngoe ea sekoti sa microdrive) ho tsamaisa li-electrodes ka ntle ho rekota ho tsoa ho sechaba se secha sa li-neuron. Haeba ho ne ho bonoa li-neuron tse 'maloa (kapa che), karolo e' ngoe le e 'ngoe e ile ea ntlafala letsatsi le leng le le leng ho fihlela li-neuron li fumanoa.

Lipatlisiso.

Lintlha li ne li arotsoe likarolo tsa preinjection, postinjection, le nako ea ho hlaphoheloa, tse neng li hlalosoa ka tatellano, joalo ka 45 min pele ho kenella ha bahanyetsi, 40 min e qala ka ho fela ha ente, le 33 min ea ho qetela (2000 s) ea Seboka se seng le se seng (se neng se tšoaretse, ka kakaretso, 2-3 h). Nako ea postinjection e tsamaisana le nako eo lithethefatsi li nang le litlamorao tse kholo tsa tsona tsa boitshwaro ha di ente ka pelo e 'ngoe (Feie. 1C).

 

Setšoantšo sa 1.

Liphello tsa bahanyetsi ba dopamine receptor mabapi le boitšoaro ba DS-cued. A, Schematic ea mosebetsi oa DS. B, Median (dot) le mekhahlelo e bohareng (mela e emeng) ea DS ('mala oa lamunu) le li-karabelo tsa karabelo tsa NS (putsoa) ka nako ea preinjection bakeng sa lithuto tsohle ...

Ho aroloa ha li-unit tse le 'ngoe ho entsoe ka marang-rang le Offline Sorter (Plexon) ho sebelisoa tlhahlobo ea mantlha ea likarolo. Ke likarolo feela tse nang le li-waveforms tse hlalositsoeng hantle (> 100 μV) tse neng li hlakile ka ho hlaka le maemo a lerata (<20-50 μV) tse kenyellelitsoeng litlhahlobong tse latelang. Kabo ea nako ea li-interspike le li-correlograms li sebelisitsoe ho netefatsa hore li-unit tse se nang molekane li arohane hantle ebile li lerata ka morao (Neural Explorer software; Nex-Tech). Litempe tsa nako ea li-spikes tse netefalitsoeng li ile tsa hlahlojoa ka litloaelo tsa tloaelo tikolohong ea software ea R. Li-histograms tsa nako ea Peristimulus tse hahiloeng haufi le DS le NS, ka li-bin tsa 50 ms, li sebelisitsoe ho lekanya le ho fumana thabo e hlahisitsoeng ke Litšoantšo 2A, , 3,3, , 4,4, , 55A, , 66A, , 77A, , 88A, 'me Le1010A-C. Ho fumana hore na na neuron e bonts'itse ts'ebetso e kholo ea ts'ebetso ea DS, ts'ebetso ea ho tsamaisoa ha Poisson e ile ea baloa bakeng sa nako ea mantlha ea 10 s pele ho polelo e 'ngoe le e' ngoe. Neuron e ne e nkuoa e le DS e thabile haeba e bonts'a lipalo tse pakeng tsa 99% ea kholiseho ea phetiso ea litheko tsa ho chesa hoa mantlha moqomong o le mong kapa tse 'maloa tsa 50 ms pakeng tsa 50 le 200 ms kamora ho qala ha cue. Bakeng sa li-neurons tse nang le thabo e kholo ea DS-evoke ka nako ea motheo oa preinjection, tekanyo e tloaelehileng ea ho thunya nakong ea li-50 ms bins time e kentsoe ho DS le NS ho qala e ile ea fumaneha bakeng sa nako e ngoe le e ngoe mohlaleng o mong le o mong, le mahareng le mahareng (Lifeiga. 2C-E, , 55A, , 66A, , 77A, , 88A, , 1010B,C) litefiso tsa ho thunya ho li-neuron li ne li bapisoa. Hobane li-neurons tse nang le tlhahlobo ea lipalo tsa NS tse hlahelletseng li ne li batla li khahlisoa haholo ke DS [e sa bontsitsoeng, empa e tlalehiloe pejana (Ambroggi et al., 2011)], re ile ra sekaseka likarabo tsa NS bakeng sa li-neurons tsohle ka karabelo ea bohlokoa ea DS. Ntle leha ho bontšitsoe ka hosele, lipapiso tsohle tsa lipalo tse sebelisitsoeng kahare ho neuron Wilcoxon kakaretso kakaretso test.

 

Setšoantšo sa 2.

Litaba tse thabisang tse hlahisitsoeng ke DS li bolela esale pele boitsoaro bo latelang ba ho batla moputso le ho ba haufi le lever. A, Karolelano ea li-histamine tsa nako ea kemiso ea preinjection e amanang le ho qala ha DS (trace ea lamunu) kapa NS (trace e putsoa) ea li-neurons tsa 145 ka thabo e kholo ...

 

Setšoantšo sa 3.

Mohlala li-neurons li bontša hore bahanyetsi ba D1 le D2 ba fokotsa ho ts'oaroa ke DS. Li-Rasters le li-histogram tse tsamaellanang li bonts'a ho thunngoa ha li-neuron tse fapaneng tse fapaneng tsa DS tse tsamaeang le ho qaleha ha DS. Lintlha li tsoa ho liteko tsa 40 tsa ho qetela pele ho qalo ...

 

Setšoantšo sa 4.

Litlamorao tsa ente e kopantsoeng ea dopamine antagonist ka cue-evoked excitation e bolela esale pele litlamorao tsa boits'oaro litekong. A, CTlhahlobo ea liteko tsa liteko tsa khokahano ea neuronal ea latency ea rat ho fihlela lever bakeng sa methapo ea kutlo e tšoanang e bontšitsoeng ...

 

Setšoantšo sa 5.

D1 receptor activation e hlokahala bakeng sa ho ts'oaroa ke DS-evoke. A, Nalane ea nako ea ketsahalo ea Peri e amanang le DS ho qala ha li-neuron tse nang le bohlokoa bo boholo ba ho ts'oaroa ke DS ka nako ea maiketsetso. Likarolo le maru li bonts'a sekhahla sa ho thunya ha SEM ...

 

Setšoantšo sa 6.

D2 receptor activation e ea hlokahala bakeng sa ho ts'oaroa ke DS. A, Nalane ea nako ea ketsahalo ea Peri e amanang le DS ho qala ha li-neurons ka mokhoa o makatsang oa ho ts'oara DS ka nako pele ho ente ea raclopride. Ho nyakalla ha DS ho mpefalitsoe ke linaha tse peli ...

 

Setšoantšo sa 7.

D activN receptor ea D1 ha e hlokehe bakeng sa ts'oarelo e ntšitsoeng ka NS. A, Nalane ea nako ea ketsahalo ea Peri e tsamaellanang le ho qala ha NS bakeng sa li-neurons tse nang le bohlokoa bo boholo ba ho ts'oaroa ha DS ka nako ea kemiso. Tsena li aparela ruri, ka hona li-neuron tse tšoanang ...

 

Setšoantšo sa 8.

Ts'ebetso ea li-receptor ea D2 e ea hlokahala bakeng sa mabaka a patiloeng a NS. A, Nalane ea nako ea ketsahalo ea Peri e tsamaellanang le ho qala ha NS bakeng sa li-neurons tse nang le bohlokoa bo boholo ba ho ts'oaroa ha DS ka nako ea kemiso. Tlatsetso ea NS e fokotsoe maemong a kopaneng le a ipsilateral ...

 

Setšoantšo sa 10.

Ts'oaetso ea saline ha e ame ho ts'oaroa ha DS- kapa NS-evoked, ebile ha ho hlokahale hore D1 kapa D2 activation recensor e lokisoe ke sekhahla sa ho thunngoa ha basement. A, Neuron e nang le thabo e le 'ngoe e tlalehiloeng nakong ea infine ea letsoai. Likopano li tšoana hantle le tseo ...

etsoe Setšoantšo sa 4, re nkile qeto ea hore na litlamorao tsa ente ea bahanyetsi ba linaha tse peli ho latency ea ho fihla ho lever li amana le litlamorao tsa bahanyetsi ka boholo ba ts'isinyeho e hlahisitsoeng ke DS maemong a liteko. Taba ea mantlha, re fumane palo e tloaelehileng ea ho thunya ho tloha 100 ho isa ho 400 ms kamora hore DS e qale tekong e ngoe le e ngoe bakeng sa li-neuron tsohle tse tlalehiloeng tse bonts'itseng nyakallo e kholo ea DS pele ho ts'oaetso ea bahanyetsi. Ka mor'a moo, bakeng sa methapo ea kutlo e 'ngoe le e' ngoe re ile ra bala palo ea coefficient ea Spearman ha e bapisoa le boholo ba teko-ka-nyeoe ea nyakallo e hlahisitsoeng ke DS le latency ea rat ho fihlela moferefere litekong tse tšoanang. Likamano tsena li ne li reriloe ka li-histograms ho Setšoantšo sa 4B,D. Liteko tsohle tsa DS li kenyellelitsoe tlhahlobisong ena; haeba phoofolo e sa hatelle lever ea latency ea 10 s (bolelele bo phahameng ba tlhahiso ea cue) e fuoe nyeoeng eo. Re kopantse li-coefficients tsa khokahano bakeng sa nako ea maiketsetso joalokaha ho hlalositsoe kaholimo; re atolositse nako ea postinjection ka 1000 s ho fumana sampuli e pharaletseng ea litekanyetso tseo liteko tsa liphoofolo li ileng tsa li araba ka mor'a ho kenella kahare. Ho lekola bohlokoa ba khokahano ka bonngoe, re sebelisitse asymptotic e 'meli t-Kholelo hobane e tobile p boleng bo ke ke ba bapaloa ha litlamo li le teng ka har'a data ea maemo. Ebe re sebelisa liteko tsa marang-rang tsa Wilcoxon ho bapisa lipakeng tsa phetisetso ea li-coefficients tsa pelehi le ka mora ts'usumetso ea antagonist.

Hobane li-neuron tsa NAc li na le litekanyetso tse tlase tsa ho thunya tse nang le meeli e tlase ea ts'ubuetso hangata ho nka zero, ho thata ho e lemoha le ho e thibela ho feta monyaka. Ka hona, ho kenyelletsa ts'ebetso e hlalositsoeng kaholimo, e neng e sebelisetsoa ho fumana ts'oaro, re sebelisitse tlhahlobo ea sebapali sa ts'ebetso (ROC), mokhoa o hlokolosi haholoanyane, ho lekola menyetla ea hore tekanyo ea ho thunya e ka latellanang ka nako ea 50 ms ka mor'a nako ea cue e ne e fapane le sekhahla sa ho thunya ho basesisi ba nepahetseng ba 10 s. Tlhatlhobo ena e ne e etsoa ka thoko bakeng sa linako tsa ho khetha le tsa postinjection. Bakeng sa mohope o mong le o mong, re ne re lekanya sebaka se tlas'a ROC curve (AUC); Melao ea AUC ea 0.5 ha e bontše phapang ea ho thunya ka nepo, athe melao e haufi le 0 kapa 1 e bonts'a monyetla o moholo oa hore neuron e thibetsoe kapa e nyakaletse, ka ho latellana. Ho bonts'a ka mokhoa o sa laoleheng, ts'ebetso ea neano ea morao-rao ho sechaba sohle sa li-neuron tse rekotiloeng, litekanyetso tsa ho thunya le litekanyetso tsa AUC li ile tsa balelloa li-bins tsa 50 ms; ho hlakola datha, likheo li ile tsa ntlafatsoa ke 10 ms bakeng sa li-compact tsa AUC tse latelang. Litholoana tsa AUC tse ntlafalitsoeng li ile tsa reroa joalo ka limmapa tsa mocheso tse nang le 10 ms resolution (ka boleng bo bong le bo bong bo emelang AUC ho 50 ms e latelang ho Litšoantšo 5B, , 66B, , 77B, , 88B, 'me Le1010D,E.

Ka mor'a moo, re ile ra lekanyetsa hore na litekanyetso tsa AUC, tse baloang ka ho se bue li-50 ms bin, li bonts'a phapang e kholo ho thuneng. Bakeng sa moqomo o mong le o mong, re qalile ka ho hlahisa boleng ba AUC bo bootstrapped ho tloha linthong tse sa reroang tsa sekhahla sa mantlha sa ho thunya le sekhahla sa ho thunya ka mokhoeng o tsamaellanang. Joale re ile ra fumana monyetla oa mehatla e 'meli ea hore boleng ba nnete ba AUC bo nkuoe ho tsoa kabo ea litekanyetso tse hatisitsoeng ka boot; haeba monyetla o ne o le <10,000, re nkile ho thunya ka moqomong ho fapane haholo le motheo oa nnete. Kamora nako, re balile palo ea li-neurone tse nang le sekhahla sa ho thunya ka moqomong o mong le o mong o neng o le moholo haholo ho feta kapa o ka tlase ho oa mantlha oa ho thunya, mme ra rera litekanyetso tsena e le likaroloana tsa baahi kaofela (Lifeiga. 5C, , 66C, , 77C, , 88C, , 99B,D, , 1010F,G).

 

Setšoantšo sa 9.

Ts'ebetso ea Neural e hokahaneng le moputso oa ho amohela mokoloko ha e anngoe ke ipsilateral kapa contralateral D1 kapa ente ea antagonist ea D2. A, C, Litekanyetso tsa ROC AUC li baloa le ho bontšoa joalo ka ha ho hlalositsoe ho Setšoantšo sa 5B, ntle le ha li-bins tsa nako li telele (200 ms) ebile li hokahane ...

Ho bapisa tekanyo ea li-neurons tse nyakalletseng kapa tse thibelitsoeng mokhoeng oa preinjection le oa postinjection re sebelisitse mokhoa oa ho fokotsa data. Pele, re balile sekhechana sa liqhomane tsa 50 ms pakeng tsa 0 le 1 s kamora qalo ea cue eo neuron e 'ngoe le e' ngoe e bonts'itseng bohlokoa ba ho pepesa kapa thibelo. Ka mor'a moo, re bapisa likaroloana tsena ka linako tsa maiketsetso le tsa postinjection le tlhahlobo ea Wilcoxon e patiloeng. Li-Neurons tse sa kang tsa bonts'a phetoho ea bohlokoa mohloling o mong le o mong ka linako tsa li-preinjection le tsa postinjection li ne li sa kenyelletsoa tlhahlobisong ena mme li sa kenyelletsoa mererong e bonts'a karoloana ea methapo ea methapo ea methapo (letheba le litelu ka lehlakoreng le letona la karolo ka 'ngoe ho Lifeiga. 5C, , 66C, , 77C, , 88C, , 1010F,G). Ts'ebetso ena e felisitse tšusumetso ea palo e kholo ea li-neuron ntle le phapang ea tšebetso pakeng tsa fensetere ea post-DS le basement ea pele ho DS; sechaba sena ha se na thahasello e nyane, leha ho le joalo se kenya letsoho palo e kholo ea litekanyetso tse se nang palo tse lekanyang palo ea likheo tsa bohlokoa ho 0 mme e pate ka bobeli e fokotseha ebile e eketseha ka sekhahla sa likheo tsa bohlokoa kamora ho kenella.

Liphuputso tse tšoanang li ile tsa etsoa bakeng sa ho thunya ho amanang le ts'ebeliso ho etsahalang kamora ho kena kahare ho moputso. Liphoofolo li ne li tloaetse ho lula ka har'a sejana bakeng sa> 5 s; ka hona, ho hapa linako tsena tse batlang li le telele, re bonts'a sephetho re sebelisa li-bin tsa 200 ms (Feie. 9). Fesetere ea nako ea ho bapisa tekanyo ea li-neuron tse neng li nyakaletse nakong ea maiketsetso le linako tsa postinjection li ne li tsoa ho 0 ho ea 1.5 s, athe e ne e le ho tloha 0 ho 5 s bakeng sa thibelo; fensetere e khutšoanyane ea tlhahlobo e sebelisitsoe bakeng sa thabo hobane e rata ho nka nako butle-butle. Litlhahlobo tsa ROC li ile tsa etsoa Univesithing ea Albert Einstein College of Medicine High Performance Computing Cluster e sebelisang sephutheloana sa pROC sa R.

Ho bapisa litekanyetso tsa ho thunya "tsa motheo" tse etsahalang kantle ho liketsahalo tsa mosebetsi, re bapisitse sekhahla se tloaelehileng sa ho thunya ka likotlo tsa 10 s pele ho DS e 'ngoe le e' ngoe ea li-postinjection tsa bahanyetsi. Ts'ebetso ena e ts'oana le sampuli e sa sebetseng ea litekanyetso tsa ho thunya hoa motheo hobane li-DS li hlahisoa ka monyetla o batlang o lekana ka nako efe kapa efe nakong ea seboka sa boits'oaro. Li-Neurons li ne li khetholloa e le li bonts'ang bohlokoa bo tebileng ba ho ts'oaroa ke DS (pele ho ts'oaetso ea lithethefatsi) kapa che, ebe litheko tsa ho thunya hoa mantlha mohopolong oa pele le oa postinjection li ne li bapisoa ka har'a lihlopha tsena ka tlhahlobo ea Wilcoxon e patiloengFeie. 10H,I). Re boetse re sebelisitse mohala o lekanang bakeng sa li-neurons tse thabisang tsa DS mme re bapisa letsoalo la mola ona le mola oa bonngoe (letsoalo la 1).

Haeba lipapiso tse ngata li entsoe ka li-subsets tsa data tse tsoang nthong e le 'ngoe (Lifeiga. 2C-E, , 55A,C, , 66A,C, , 77A,C, , 88A,C, , 99B,D, , 1010B,C,F,G), p litekanyetso li ne li lokisoa ke Bonferroni; ke hore, p boleng bo ile ba eketsoa ke palo ea lipapiso e ntseng e etsoa. E hlophisitsoe p boleng bo ne bo nkuoa bo bohlokoa haeba p <0.05. Litokiso tsohle li entsoe ka ntlha ea 3 ntle le Setšoantšo sa 2C-E, moo lebaka e neng e le 2.

Ts'ebetso ea video.

Ka seteisheneng sa liteko, boemo ba rat bo ile ba lekanngoa ho sebelisoa kh'amera e kaholimo (liforeimi / li-s) tse 30 le sistimi ea ts'ebetso ea likhomphutha (Cineplex; Plexon). Sisteme e latelletse file ea x 'me y maemo a li-LED tse peli tse mebala e fapaneng li khomaretse sethaleng sa ho rekota. Joalokaha ho hlalositsoe pele (McGinty et al., 2013), Re balile centroid e hlalosang ntlha e bohareng lipakeng tsa maemo a LED bakeng sa sethala ka seng sa video. Lintlha tse sieo tsa lintlha tse fihlang ho liforeimi tse 10 tse latellanang li ile tsa tlatsoa ka lipalo tse fapaneng; maemong a sa tloaelehang ao ho 'ona liforeimi tse 10 li neng li le sieo, lintlha li ile tsa lahloa. Bakeng sa foreimi e 'ngoe le e' ngoe ea video, re balile SD ea maeto lipakeng tsa boemo ba centroid kahara foreimi eo le ka fensetere ea nako ± 200 ms. Litekanyo tsena tsa SD ke li-index tsa locomotor (LI) bakeng sa sethala sa video. Li-LI tse fetotsoeng ka log li ile tsa ajoa ka bongata, ka tlhoro e tlase e emelang linako tsa motsamao o monyane kapa o se nang letho le tlhoro e kaholimo e emelang locomotion (Drai et al., 2000). Ka mor'a moo re tšoanela mesebetsi e 'meli ea Gaussian ho ajoa ha li-LI,' me ra beha mohato oa ho sisinyeha e le ntlha ea moo mesebetsi ena e fetang teng hanyane.

Ho sisinyeha ho hlalositsoe e le bonyane liforeimi tse robeli tse latellanang tse nang le li-LIs ka holim'a monyako oa locomotor. Ho bona nako ea ho qala ho tsamaea, re ne re lekola tlhahlobo ea liteko tsa DS moo phoofolo e neng e ntse e qala ho hlaha ebe re bala hore na latency e pakeng tsa cue ho qala le mofuta oa pele oo LI e fetang moetlong oa ho tsamaea.Lifeiga. 1D-F, , 22B,D). Haeba ho se mokhatlo o hlakileng o neng o lekantsoe tekong, latency ea nyeoe eo e ne e hlalosoa e le> 10 s (bolelele ba tlhahiso ea cue, Feie. 1D). Liphetho tse tšoanang li ile tsa fumanoa ha liteko tse joalo li ne li sa tlosoe ho tsoa tlhahlobisong (ya data e sa bontsitsoeng). Likarolo tsa DS-cued harakati latency li ile tsa kenngoa ho likhoto 'me balateli ba bapisoa le tlhahlobo ea Wilcoxon. Ho lekanya latency ho lebelo le phahameng le ho bolela lebelo la mekhatlo e lebisitsoeng ho DS, re sebelisitse liteko tsohle tse ileng tsa fela ka mochini o hatellang le haeba rat e ne e tsamaea qalong ea DS (Feie. 1E,F).

Bohlale.

Liphoofolo li ne li khahloa haholo ke Euthasol mme li entsoe ka mokhoa o hlakileng ka letsoai le 4% formalin. Direct hona joale (15 μA) e ile ea fetisoa ka har'a e 'ngoe ea li-electrode ka tatellano ea ∼30 s ho hlahisa liso. Mabili a ne a tlosoa le ho bolokwa semmuso ho fihlela a sebetsoa. Pele o sliced ​​ka cryostat, kelello e ne e llisoa ke ho qoelisoa ka 30% sucrose ka matsatsi a 'maloa. Likarolo (50 μm) li ne li entsoe ka ntho ea Nissl ho bona lithane tsa cannula le li-electrode le lesions (Feie. 11).

 

Setšoantšo sa 11.

Phetoho ea nalane ea nalane ea libaka tsa ente ea antagonist. Setšoantšo se bonts'a likarolo tse peli tsa coron ea boko ba rat tse akaretsang boholo ba karolo ea bokantle ba bokapele ba NAc (0.8 mm-2.8 mm ka ntle ho bregma). Matsoho a matšo a emela ...

Results

Re hlahisitse likhoto tse nang le maikutlo a mabeli a khothatsang a 30 s: DS e nahanang esale pele, le NS (Feie. 1A; Nicola et al., 2004a,b; Ambroggi et al., 2008, 2011; McGinty et al., 2013). Mochine oa khatiso o neng o le teng nakong ea DS o ne o emisitse thulaganyo, 'me o ne a kenngoa ke marotholi a sucrose ha a kenella moamohelong oa moputso; haeba liphoofolo li sa arabe kahare ho 10 s, cue e ne e felisoa ntle le ho tlisa meputso mme nako ea nakoana ea maiketsetso e qalile. Likarabo nakong ena le nakong ea NS ha li ba le litholoana tse boletsoeng. Li-NSs e ne e lula e le 10 s. Liphoofolo tse koetlisitsoeng, tse arabelang ho li-DS tse ngata empa li-NS tse fokolangFeie. 1B), li kentsoe ka lipampiri tse khannoang tse lebisitsoeng botebong ba NAc. Nakong ea liteko, liphoofolo li qalile ho etsa mosebetsi oa 45 min preinjection nakong eo mosebetsi oa nec o tlalehiloeng. E latelang, D1 receptor antagonist SCH23390 kapa D2 / 3 racagopist raclopride e ile ea kenngoa ka kotloloho kapa ka boomo ho NAc; liphoofolo li ile tsa lula kamoreng e nang le maemo a ts'ebetso a sebetsang ho pholletsa le infusion le bonyane metsotso ea 75 kamora moo.

E lumellana le lithuto tse fetileng (Yun et al., 2004; Nicola, 2010), infusions ea naha ka bobeli ea mohanyetsi ea mantlha ea NAc e fokolitse boholo ba li-DS tseo phoofolo e arabileng ho tsona (Feie. 1C, 'mala o moputsoa o lefifi) le ho nyolla latency ea ho qalisa ka mokhoa o lekantsoeng ka ho latedisa video ka sethaleng sa linako (Feie. 1D, liperela tse hlephileng). Ka lehlakoreng le leng, infusions ea litekanyetso tse tšoanang tsa litekanyetso tse tšoanang ha e na tšusumetso ho karabelo ea karabelo ea DS (Feie. 1C, leseli le putsoa), latency ho qala ho tsamaea ka mor'a ho qala ha DS (Feie. 1D, e thunyetse mesaletsa e bobebe ea lamunu), le latency ho fihlela lever kapa lebelo la motsamao nakong ea mekhoa e fihleloang ke lever (Feie. 1E,F). Lintlha tsena tsa boits'oaro li bonts'a hore NAc dopamine ka hemisphere e le 'ngoe e lekane ho boloka boits'oaro le hoja blockade ea D1 kapa D2 / 3 receptors ka li-hemispheres ka bobeli li ama hampe ho arabela. Ho ikarola hona ho fana ka monyetla oa liteko oa ho leka, hobane o re lumella ho lekola litlamorao tsa bahanyetsi ba dopamine mabapi le ts'ebetso ea neural ha boitšoaro bo senyehile (ente e se nang thipa) mme ka tsela eo o ahlola pherekano e ka bang teng ea hore ho na le liphetoho tse hlokometsoeng ts'ebetsong ea neural kamora ho kenella ha antagonist ke likhato tse peli tsa liphetoho mekhoeng ea boitšoaro.

Re rekota ho tsoa ho li-neurons tsa 322 NAc ka mananeo a ho rekota / a ente a 31 ho litheko tsa 12. Hoo e ka bang 45% ea li-neurons tse rekotiloeng e ne e thabisitsoe haholo ke tlhahiso ea DS. Maikutlo ana a thabo a bonts'a thepa e ts'oanang le e tlalehiloeng pele (Yun et al., 2004; Nicola et al., 2004a; Ambroggi et al., 2011; McGinty et al., 2013; Morrison le Nicola, 2014): li ne li le kholo ho feta tse nkoang ke li-NS (Feie. 2A); ba qalile ka nako e khutšoane kamora ho qaleha (∼120 ms) mme ba bile teng pele ho qaleho ea motsamao o laetsoeng ke lever (Feie. 2B); boholo ba bona bo ne bo hokahane le monyetla oa karabelo ea boitšoaro, ho qala ts'ebetso le ho ba haufi le lever (McGinty et al., 2013; Feie. 2C-E).

Ho kenella ka botebo ho motho ea ka bang mohanyetsi oa D1or D2 / D3 ho bakile phokotso e matla bokgutlong ba DS-evoke excuse. Joalokaha ho bontšoa ho li-neuron tsa mohlala tse peli (Feie. 3A,C), phello ena e ile ea boleloa haholo metsotsong ea metsotsoana kamora ho kenella, e tsamaellanang le phokotso e kholo ea boits'oaro ba mokhoa oa ho nts'oaea ka lesela o hlahisitsoeng ke liente (Feie. 3A,C, li-rasters tse putsoa le li-histogram). Ha boitšoaro bo fola, karabelo ea ho thunya e ile ea khutla (Feie. 3A,C, li-rasters tse ntšo le li-histogram). Mokhoa ona oa liphetho o ne o feto-fetoha ho phethoa ka li-neuron tse nyakalletseng (Lifeiga. 5A, , 66A, Li-histogram tsa linaha tse peli le merero ea litelu). Ho ts'ehetsa khopolo-taba ea hore menyaka ena e beha matla a motsamao oa lever, boholo ba nyakallo e hlahisitsoeng ke maikutlo nakong ea prejection e boletse esale pele hore na phoofolo e tla ba le nakoana ho fihla ho lever (Feie. 4A,C, letšehali). Kamora ho kenngoa kahare ha D1 kapa D2 injagonist, li-latency tsena li ile tsa fetoloa ka boleng bo phahameng, hangata li le holimo hoo ho neng ho se karabelo ho hang kahare ho tlhahiso ea 10 s cue (Feie. 4A,C, kabo ea latency ea ho le letšehali le ho le letona). Ho makatsang ke hore, leha ho thunya ho felletseng ka morero oa cue ho fokotsehile ke bahanyetsi, e ile ea tsoela pele ho bolela matla a karabelo ea boitšoaro nakong ea ho hlohlona le ho hlaphoheloa (Feie. 4A,C, merero ea raster e nepahetseng). Ho bona ho supa hore litla-morao tsa boitšoaro le litla-morao tsa lithethefatsi li ile tsa lumellanoa ka liteko: ke phokotso e kholo ea ho thunngoa ho bakoang ke mohanyetsi oa dopamine, le ho feta le ho feta ho fihlelang lever le ho theola monyetla oa hore phoofolo e fihlile ho lever ho hang.

Ho lekola ho lekana ha khokahano ena ea liteko-le-teko, re ile ra lekanya, bakeng sa neuron e 'ngoe le e' ngoe e thabileng, khokahano ea boemo ba Spearman lipakeng tsa boholo ba maipiletso le tumello ea ho hatella lever. Re ile ra abela latency ea 10 s litekong moo ho neng ho se karabelo; latency litekong tsena ka hona e ne e tlameletsoe maemong a phahameng ka ho fetisisa. (Liphetho tse ts'oanang li fumanoe haeba liteko ntle le karabelo ea DS-cued lever li sa tloheloa tlhahlobisong; datha e sa bonts'oa. Ha re bapisa li-coefficients tsa nako ea preinjection le tse nakong e kopaneng ea postinjection / restaure, re fumane hore hoo e ka bang kaofela ea li-coefficients li ne li le mpe ka linako tsohle. Ho feta moo, bahanyetsi e ka ba ha ba na phello e matla ho bo-mahareng ba mafumahali kapa ba fetisetsa phetisetso eo ho ea ka litekanyetso tse mpe tse mpe haholo (Feie. 4B,D). Ka hona, ha se feela hore palo ea methapo ea kutlo e thabisang batho e bolela esale pele boits'oaro ba karabelo ea boits'oaro, empa keketseho ea latency ea karabelo e bakoang ke mohanyetsi nyeoeng e fanoeng e boletsoe esale pele ka matla ke litlamorao tsa mohanyetsi moferefereng o hlahisitsoeng ke teko eo. Liphetho tsena li fana ka bopaki bo matla ba karolo ea bohlokoa bakeng sa dopamine e sa feleng ho beha matla a karabelo e batlang moputso ho cue: dopamine e eketsa nyakallo e hlahisitsoeng ke NAc neurons, e leng eona e bakang mokhoa o mokhutšoane oa nakoana.

Tlhaloso e 'ngoe ea liphetho tsena ke hore mokhoa o fokolisitsoeng oa ho tsosoa hoa leseli ke sephetho sa karabelo e fokotsang ea boitšoaro- mohlomong hobane boithabiso bo latela feela (kapa bo lebella) karabelo ea boits'oaro empa ha bo e qobelle. Haeba ho ne ho le joalo, ts'ebeliso ea bahanyetsi ka tsela eo ba sa susumetseng boitšoaro ha ea lokela ho fella ka hore ho fokotse tšusumetso e mpe ea mohopolo. Empa, joalo ka ha ho bonts'itsoe mehlala e 'meli ea li-neuron (Feie. 3B,D), ente e sa amaneng leha e le efe ea mohanyetsi oa D1or D2 / D3 e fokolitse boholo ba cue-evoke exciting leha liente tse sa kopaneng li sa fetole ts'ebetso ea boits'oaro. Liphetho tse ts'oanang li fumanoe ha ho potoloha menyaka ea thabo e senotsoeng ea cue e tlalehiloeng ho NAc e lemetseng (Lifeiga. 5A, , 66A, Ipsilateral histograms); ka holimo ho moo, data e akaretsang e bonts'a hore thabo e hlahisitsoeng ke li-neurons tse tlalehiloeng mokhatlong oa NAc oa jareteng li ne li sa angoe (Lifeiga. 5A, , 66A, Histograms ea Contralateral). Ho ahlola menyetla ea hore phokotso ea cue-evoked excation ipsilateral ho liente ka lebaka la liphapang tse nyane molemong oa karabelo ea boitšoaro, re pheta-pheta tlhahlobo eo kamora hore re se kenye liteko tsohle moo phoofolo e sa kang ea araba karabo ea khatiso; liphetho tse tšoanang li fumanoe (ya data ha e bontšoe; p <0.05 bakeng sa bahanyetsi ba D1 le D2, Wilcoxon). Liphetho tsena li supa hore phokotso e bakoang ke mohanyetsi ea nyakallo e hlahisitsoeng ke mohopolo ho ka etsahala hore e se ke ea bakoa ke ts'ebetso e mpe ea boits'oaro.

Leha maemo a nakoana a cue-eviding excitation a ne a ts'oana ho li-neuron, litšitiso kamora ho qala ha cue li ne li fapane haholo, hangata li bonts'a ho qaleha ha nako le lithuto tse sa tsitsitseng tsa nako ho fapana le thabo (Lifeiga. 5B, , 66B). Ho sekaseka litšitiso (le, ho isa tekanyong, mehopolo) tse shebileng fensetereng ea nako e le ngoe ka hona ho ka haelloa ke karolo e kholo ea lets'oao. Ntle le moo, mekhoa e tloaelehileng ea ho fumana lipalo e ke ke ea khetholla ho fokotseha ho tsoa ho litheko tse tlase haholo ho kenyeletsa le tsa manonyeletso a mangata a NAc. Ho qoba litaba tsena, re nkile tsela e kenyeletsang eo re hlalositseng, bakeng sa likotlo tsa nako ea 50 tsa poso ka nako e ngoe le e 'ngoe e rekotiloeng ea methapo, ROC AUC e emelang phapang lipakeng tsa ho thunya ka har'a moba le motheo o nepahetseng. Limmapa tse futhumatsang tsa boleng ba AUC maemong a nakong a hokahantsoeng le DS ho qala (Lifeiga. 5B, , 66B) bonts'a hore phokotso ea DS-evoke excitation kamora liente tse peli le tse ling (empa e seng tsa konteraka) li-D1 le li-antxonists tsa D2 li phatlalalitsoe hoo e batlang e le li-neuron tse ngata tse thabisang mme li bile teng nakong eohle ea thupelo. Ha ho bapisoa, litšitiso kamora ho qala ha DS ha lia ka tsa fokotsoa. Ho hlakola litlamorao tsena, re bonts'a hore na boleng ba AUC e 'ngoe le e' ngoe e bonts'a phapang ea bohlokoa ho tloha k'homphieutheng ka ho kenya theko ea pente e emisitsoeng ho latela ts'oaetso ea li-AUC tse hlahisitsoeng ka mokhoa o sa reroang oa thepa le litheko tsa ho chechisa ha poso. Mekhoa). Joalokaha ho bontšoa ke lipalo tsa karolo ea li-neurons tse bonts'a bohlokoa (p <0.05) nyakallo kapa thibelo ho e 'ngoe le e' ngoe e tsamaellanang le ho qala ha DS (Lifeiga. 5C, , 66C, leqheka le letšehali moleng ka 'ngoe), karolo ea menyaka, empa eseng thibelo, e fokotsoe ke liente tsa lefats'e le ipsilateral tsa bahanyetsi. Tlhaloso ena e netefalitsoe lipalo-palo ka ho bapisa palo ea likenke tse thabileng le tse thibelitsoeng hohle ka fensetereng ea post-DS ea 1 (Lifeiga. 5C, , 66C, lirifi tsa matheba). Kahoo, nyakallo kamora ho qala ha DS e fokotsoe ke ente ea antagonist ea D1 le D2, empa litšitiso li ne li se joalo.

Ho joalo, palo ea li-neurons tse bontšang thibelo ea bohlokoa e ile ea eketseha kamora mefuta e meng ea ente (Lifeiga. 5B,C, , 66B,C). Lithibelo tsena tse hlahang ha li na monyetla oa ho ba le phello ea litla-morao tsa boitšoaro ba bahanyetsi ba linaha tse ling hobane li ne li sa feto-fetohe (mohlala, li etsahetse kamora ho kena ka ente ea bongoaneng le konteraka, empa e se ipsilateral D1 injagonist sindano le kamora ipsilateral, empa eseng ka ente ea machabeng ea D2 ha ba hlalose litla-morao tsa bohanyetsi. Ntle le moo, lipolao tsena tsa morao-rao li ne li hlaheletse haholo ∼600 ms kamora ho qala ha DS, nako eo, maemong a taolo, ∼50% ea boits'oaro bo tataisang maikemisetso bo ne bo se bo qaliloe (Feie. 2B). Ka lebaka leo, ha ho na monyetla oa hore lithibelo tsa bofetoheli tse kenyelletsang keketseho e bakoang ke ho hlekefetsa ea ho hlekefetsa kapa ho fokotsa monyetla oa karabelo. Ka ho makatsang, bongata bo boholo ba lintho tse hlahelang tse etsahetseng ka har'a li-neurons tse thabisang tsa DS, hangata ho ea qetellong ea boipheliso (li-nergardal D1 antagonist: 14 / 17 neurons, 82%; ipsilateral D2 antagonist: 11 / 16%; Lifeiga. 5B,C, , 66B,C), tumellanong le monyetla oa hore ba ne ba sa hlakoloe ke phokotso ea bahanyetsi e bakileng karabelo e thabisang le ho ts'ehetsa maikutlo a hore ho thunya ha li-neurons tse nyakalletseng ke ho qalella ha ts'ebetso ea mokhoa oa ho atamela.

Litlhahiso tsa NS, tse sa atisang ho hlahisa likarabo tsa khatiso ea likoranta (Feie. 1B), e ileng ea tsosa likhahla tse nyane empa e le 'nete tse lumellanang ka methapong e le' ngoe e neng e khahliloe ke DS (Feie. 2A). Ho makatsang ke hore mehoo ea NS-evuswe e nyarosang ha ea ka ea fokotsoa ke mohanyetsi oa D1, ekaba ka boholo (Feie. 7A) kapa ka palo ea li-neurons tse thabileng (Feie. 7B,C). Ka lehlakoreng le leng, ente ea antagonist ea D2 e fokolitse boholo le palo ea menyaka ea NS-evoke (Feie. 8). Lithibelo tse hlahisitsoeng ke NS ha lia ka tsa fokotsoa ke mohanyetsi (Lifeiga. 7B,C, , 88B,C). Ka hona, tlasa maemo ana ts'ebetso ea li-receptor ea D1 e hlokahala bakeng sa li-neuron tsa NAc ho hlahisa maikutlo a maholo ka lebaka la ts'usumetso e kholo ea meputso, athe ts'ebetso ea li-receptor ea D2 e hlokahala bakeng sa likarabo molemong oa boikemisetso ba pele le bo sa nkeng lehlakore.

Re nahanne ka monyetla oa ho fokotsa ts'ebetso ea ho batla moputso kamora ho ikamahanya le maemo a marang-rang ka lebaka la ho sitisoa hoa ts'ebetso ea neural e amanang le matlafatso kapa ts'ebetso e kholo ea moputso. Ts'ebetso e joalo e ka kenyelletsa ho tlosoa ka tlase hoa li-neuron tsa NAc tse sa thibeloang kapa tse thabileng nakong ea tšebeliso ea sucrose (Nicola et al., 2004b; Roitman et al., 2005; Taha le Masimo, 2005). Hobane liphoofolo li ile tsa tsoela pele ho fumana moputso kamora ho kenella ka lehlakoreng le leng la bahanyetsi, re khonne ho tseba hore na ts'ebetso ea neuronal e amanang le ts'ebeliso ea moputso e ipapisitse le ts'ebetso ea dopamine receptor. Re hlahlobile ho thunya nakong ea li-5 kamora hore phoofolo e kene kahare ea moputso, nako eo tšebeliso ea moputso e atisang ho etsahala (Nicola, 2010). Re sebelisa tlhahlobo ea ROC, re bapisitse ho thunya ha li-bins tsa 200 ka har'a fensetere ena le motheo oa 10 s o nepahetseng; limmapa tsa mocheso tsa litekanyetso tsa AUC tse hlahisang li bonts'a phello e fokolang ea ente ea antagonist ebang ke ipsilateral kapa contralateral ho ente (Feie. 9A,C). Karolelano ea li-neuron tse thabileng le tse thibeloang ha lia ka tsa angoa ke bahanyetsi (Feie. 9B,D), ka ho fana ka maikutlo a matla a hore menyaka le litakatso tse amanang le ts'ebeliso ha li itšepa ho dopamine. Liphetho tse tšoanang li ile tsa fumanoa ha re ne re etsa tlhahlobo e tšoanang re sebelisa li-Xins tsa li-50 ms (data e sa bontšitsoeng).

Ho ahlola monyetla oa hore liphetho li bonoe li hlahisitsoe ke ntlha e ngoe ntle le mohanyetsi (mohlala, ts'oenyeho ea 'mele e bakiloeng ke ente kapa karolo e itseng ea koloi ea lithethefatsi) re kentse saline litekong tse ling. Joalokaha ho bontšoa ke neuron ea mohlala (Feie. 10A) le ka lebaka la maqhubu a tloaelehileng a "cue-thabo neurons" (Feie. 10B), Mehopolo e bakiloeng ke DS ha e ea fetoloa ka ente ea letsoai; Mehopolo e bakiloeng ke NS le eona ha ea ka ea ameha (Feie. 10C). Ho feta moo, ente ea saline ha e a ka ea susumetsa boholo ba li-neuron tse bonts'ang bohlokoa bo boholo le bo thibelang kamora ho qala ha DS kapa NS (Feie. 10D-G).

Kamora nako, re ile ra botsa hore na ts'ebetso ea dopamine receptor e ka lumella maemo a mekhoa e metle ka ho kenya letsoho litekanyetsong tsa ho thunya tsa mantlha tsa li-neuron tsa NAc. E sa lumellaneng le khopolo ena, ha ho na phello e kholo ea mohanyetsi oa D1 kapa D2 maemong a qobello ea litekanyetso tsa DS-thabo kapa li-neuron tse ling tsa NAc (Feie. 10H,I).

Puisano

Liphumano tsena li bonts'a mokhoa oo NAc dopamine e khothalletsang mokhoa oa ho batla meputso o khothalletsoang ke ts'usumetso ea tikoloho: ts'ebetso ea dopamine receptor e thusa ho nyakalla, le ho khothaletsa ts'ebetso ea ho etsa lintho tse amanang le moputso. Qeto ena e tšehetsoa ka matla ke ho bona hore ente ea machabeng ea dopamine antagonist ka bobeli e ekelitse morao ho qala motsamao (Feie. 1D) le ho fokotsa thabo ea menyaka ea thabo ea mantlha (Lifeiga. 33​-6). Ho fokotseha hoa moea o fokotsoang ke cue e ka se be sesosa sa boitšoaro bo senyehileng hobane liente tse sa sebetseng ha li fetole boitšoaro ba DS-cued (Feie. 1C-F), empa e fokolitse haholo ts'oaretso ea DS e tsitsitseng lithong tse kentsoeng (Lifeiga. 3B,D, , 5,5, , 6) .6). Maikutlo ana a thabisang e bile karabelo ea mantlha ea neural ho NAc (e etsahalang ho 45% ea li-neurons tse tlalehiloeng), 'me ka bobeli ba etella pele ho qala ho tsamaea (Feie. 2B) le tumellano ea ho qala motsamao ka ho thunya ho hoholo ka liteko ka bokhutšoanyane bo khutšoane (Feie. 2D) (McGinty et al., 2013; Morrison le Nicola, 2014). Ka hona, lebaka le matla la ho fumana moputso le senotsoe, ka bobeli hoa itšetleha ka dopamine mme hoa hlokahala bakeng sa ho batla moputso o matla.

Liphetho tsa rona li bonts'a li-cue-evoked excitation, hape ha ho mofuta o mong oa ts'ebetso ea nec ho NAc, mohlomong ke pontso ea bohlokoa ho potoloho ea neural e behang moralo oa metsamao e lebisitsoeng ho sepheo. Qeto ena e latela kamora hore bahanyetsi ba fokotse ho ts'oaroa hoa chue ntle le ho fokotsa litšitiso tse hlahisitsoeng ke cue, ho thunya ho amanang le moputso, kapa litekanyetso tsa ho thunya hoa motheo. Ntle le moo, liteko tseo ka tsona liente tse peli tsa bahanyetsi li neng li sebetsa hantle haholo ho fokotsa ts'abo ke tseo ba ileng ba baka boitšoaro bo bobe haholo (Feie. 4), a pheha khang e matla khahlano le monyetla oa hore phetoho e 'ngoe e sa fumanoeng ea kh'outo ea methapo ea kutlo e ikarabella bakeng sa litlamorao tsa boits'oaro. Ka hona, tlhaiso-leseling ea rona e hokahanya ka tieo ts'ebetso ea dopamine receptor ho NAc, boholo ba nyakallo e hlahisitsoeng ke cue, le latency ea phoofolo ho qala ho batla moputso.

Mosebetsi oa nakong e fetileng o bonts'itse hore ts'ebetso ea VTA e fokotsitseng thabo le liphoofotsoana tsa NAc le tsona li thibetse liphoofolo ho bonts'a boitšoaro bo atamelaneng ba mokhoa (Yun et al., 2004). Leha ho le joalo, thuto eo ha ea ka ea tlosa monyetla oa hore liphetoho tsena e ne e le phello e sa tobang ea potoloho. Mona, re bonts'a hore li-dopamine receptors tsa lehae ho li-neurons tse rekotiloeng li hlokahala bakeng sa ho ipeha ka leseli, ho tlosa monyetla oa hore litlamorao li bakoa ke ketso ea dopamine e nyoloha molemong oa NAc. Ho fapana le hoo, le ha e le hore lithibelo tse senotsoeng tsa cue-evoked li ile tsa fokotsoa ke inactivation ea VTA (Yun et al., 2004), ha baa ka ba fokotsoa ka ente ea mohanyetsi ea dopamine ea sebakeng seo, mme ka hona, litšitiso tsena ha li na monyetla oa ho ba lebaka la ketso e tobileng ea dopamine kahare ho NAc.

Litlamorao tsa bahanyetsi ba D1 le D2 ho boits'oaro bo habeli ba DS-ho tsoa tseleng le ho thunngoa ha DS-lifofane li ne li tšoana ka mokhoa o ts'oanang. Boitlhotlhollo bona bo lumellana le tlhahlobo e telele ea liteko tsa NAc microinjection moo bahanyetsi ba D1 le D2 ba hlahisitseng litlamorao tse ka bang le boitšoaro bo bobe ho litekanyetso tse ts'oanang le tsa rona (Hiroi le White, 1991; Ozer et al., 1997; Koch et al., 2000; Eiler et al., 2006; Pezze et al., 2007; Lex le Hauber, 2008; Liao, 2008; Nicola, 2010; Shin et al., 2010; Haghparast et al., 2012). Liphetho tsena, hammoho le phapano lipakeng tsa khatello ea mohanyetsi ka har'a jareteng e hlokoang ho bona litlamorao (limilimithara) le tumellano ea lithethefatsi bakeng sa lipehelo tsa tsona (nm), lia belaella hore na litlamorao tsa lithethefatsi li tobile. Leha motsoako o sebetsang ho receptor o kanna oa ba o tlase haholo ho feta karolo e kenngoeng ka ente ka lebaka la ho se sebetse hantle, metabolism, le oxidation ea lithethefatsi, ts'ebetso e kopaneng le nako ea lits'ebetso tsena ha e tsejoe. Ka hona, menyetla e le 'ngoe e hlophisitsoeng ke hore litla-morao tsa boitšoaro le tsa elektroniki tsa SCH23390 le raclopride ke litlamorao tsa litlhare ka bobeli tse tlamang li-receptor tse le' ngoe kapa tse fetang tse sa tlangoa ke dopamine ho hang. Ho na le mabaka a 'maloa a hanyetsang monyetla ona. Boitšoaro ba mokhoa oa ho tsosoa oa Cue-evoke ha bo thijoe eseng feela ke SCH23390 le raclopride, empa hape ka ho kenngoa ka ente ea "radioploptous" dopamine receptor antagonist flupenthixol ho NAc (Di Ciano et al., 2001; Saunders le Robinson, 2012), ka inactivation ea VTA (Yun et al., 2004) le ka lesion ea NAc e nang le 6-hydroxydopamine (Parkinson et al., 2002), e bolaeang likhoele tsa catecholaminergic. Ho feta moo, ente ea NAc ea dopamine reuptake blocker, D1 kapa D2 receptor agonist, kapa dopamine releaser amphetamine e eketsa menyetla ea mokhoa oa cued (Wyvell le Berridge, 2000; Nicola et al., 2005; du Hoffmann le Nicola, 2013). Kamora nako, boitšisinyo ba optogenetic ba VTA dopamine neurons (boitsoaro boo ntle ho pelaelo bo bolokiloeng ke dopamine neuron activation) bo kenngoa ka ente ea SCH23390 kapa raclopride ho NAc ho tekanyetso e tšoanang le e sebelisitsoeng mona (Steinberg et al., 2014). Ho thata ho nahana ka mochine o bonolo o ka ikarabellang ho e 'ngoe ea liphetho tsena ntle le ho beha mokhoa oa hore SCH23390 le blocklopride block e emetse mokhoa ka ho thibela litlamorao tsa dopamine ea endo native.

Monyetla o mong ke oa hore bahanyetsi ba tlamele feela li-receptor tsa bona, empa le li-receptor tsa dopamine tse se nang tsona. Boemong ba 10 μm kapa tlase, raclopride ha e tlame li-receptors tse kang D1 (Hall et al., 1986); likhakanyo tse phahameng ha li so hlahlojoe. Ka hona, raclopride e ka ba e tobileng bakeng sa li-receptor tsa D2 / D3 leha e le ho kenella ka ente ea mm, e sebelisoang ke rona le ba bang, haholoholo kamora ho kenyelletsoa, ​​metabolism le oxidation. Khakanyo ea SCH23390 e lulang e tlamaha ho li-receptors tse kang D2 tse kang 1 le 5 μm (Bourne, 2001; Mottola et al., 2002); leha boleng bona bo fana ka maikutlo a hore SCH23390 e tlama li-receptor tsa D2 / D3 litsing tse amehileng, ts'ebetso e sebetsang ea SCH23390 ho thibela ts'ebetso ea li-receptors tse kang D2 tse entsoeng ke dopamine ha e tsejoe. Phihlelo ea rona ea hore raclopride e fokotsitse ho ts'oaroa ha NS -NUMX ha SCH23390 e sa ts'ehe khopolo ea hore lithethefatsi li sebelisana le li-receptor tse fapaneng, empa ha li bonts'e bonnete ba tsona. Leha ho le joalo, le haeba lithethefatsi tse le 'ngoe kapa ka bobeli li thibetse mefuta e meng ea li-receptor ho fokotsa ho ts'oaroa ke DS, sena se ka lumellana hantle le phetho ea rona ea hore ts'ebetso ea bonyane mofuta o le mong oa "dopamine receptor" e ea hlokahala bakeng sa ho ts'oaroa ke DS. Kahoo, leha potso ea tlhaiso ea lithethefatsi e lula e sa arabeloa, potso ena e fokolisa qeto ea rona ea mantlha ea hore dopamine e nolofatsa mokhoa o hlahisitsoeng ka ho eketseha hoa mabaka a tlisoang ke cue.

Haeba ha e le hantle lithethefatsi li sebelitse ka kotloloho, liphumano tsa rona tsa hore D1 le D2 / D3 antagonists e mong le e mong o fokotsetse ho thunya hoa moea ka bongata ba li-neurons tse thabisang tsa tlhahiso-leseling e bontša hore ts'ebetso ea li-receptors tsena e lebisa synergistically ho cheba ka methapo e tšoanang ea kutlo. Le ha li-receptor tsa D1 le D2 li fumanoa libakeng tse arohaneng haholo tsa li-neuron ho NAc (Albin le al., 1989; Gerfen et al., 1990), tekanyo e kholo ea mantlha ea NAc ea mantlha le li-neuron tsa shell tse hlahisang li-receptor tsa D1 le tsona li na le mRNA bakeng sa li-receptor tsa D3 (Le Moine le Bloch, 1996), e thibetsoeng ke bahanyetsi ba D2, ho kenyelletsa le raclopride. Coexpression ea D1 le D3 receptors e fana ka mochini o ka sebelisang mokhoa oo dopamine e ka khothaletsang boipiletso ho NAc neurons ka ts'ebetso ea synergistic e ka thibeloang ke bahanyetsi ba D1 kapa D2 / 3 (Schwartz et al., 1998). Ntle le moo (kapa ka ho eketsehileng), tšebelisano lipakeng tsa D1 le D2 (le / kapa D3) li ka etsahala maemong a potoloho ea lehae (Goto le Mohau, 2005; Gerfen le Surmeier, 2011). Mohlala, dopamine e sebetsa ho li-receptor tsa D1 ho fokotsa tokollo ea GABA ho li-neuron tsa NAc (Nicola le Malenka, 1997; Hjelmstad, 2004), phello e ka khothalletsang kholiseho khonsateng le activation ea D2 / D3 receptors ho li-neuron tsa spiny (Hopf et al., 2003). Haholo, lits'ebetso tsena li fana ka maikutlo a hore dopamine ha e khahlise li-neuron ka kotloloho, empa ho e-na le hoo e eketsa thabo ea bona ka lebaka la karabelo ea glutamatergic; ka hona, ba ka hlalosa hore na ke hobaneng ha thabo e nyelisitsoeng ea cue-evoke e sa thibeloe feela ke bahanyetsi ba dopamine, empa hape le ka ho se sebetse ha amygdala ea basolateral le cortex ea pele (Ambroggi et al., 2008; Ishikawa et al., 2008), tseo ka bobeli li romellang likhakanyo tsa glutamatergic ho NAc (Brog et al., 1993).

Ho tšoana le ho fapana lipakeng tsa SCH23390 le litlamorao tsa raclopride e ka ba litholoana tsa mekhoa e 'meli e fapaneng ea neural, e kenyang phasic le tonic dopamine. Hobane bahanyetsi ba D1 le D2 / D3 ba fokotsitse ho ts'oaroa ha DS-evigation, empa tšusumetso e nyane ea NS-evigation e hlahang ka neuron e ts'oanang e fokotsoe feela ke mohanyetsi oa D2 / D3 (Lifeiga. 8, , 9), 9), ho bonahala eka dopamine e phahamisa ho kenyelletsa boleng ba khothalletso ka ts'ebetso ea li-receptor tsa D1, empa e tsamaisa likarabo tsa ho thunya ho li-cue tsohle (hore na li amana le sephetho sa bohlokoa) ka D2 / D3 receptors. Sena se ka bakoa ke linako tse kholo tsa phasic dopamine tse hlahang ho NAc ka ho rerela moputso ho feta likhakanyo tse sa nke lehlakore.Phillips le al., 2003; Roitman et al., 2004). Hobane li-receptor tsa D2 / 3 li na le tšebetso e phahameng ho feta ea li-dopamine ho feta li-receptor tsa D1, li-tropents tse nyane tsa NS-evoke dopamine li ka ba tse lekaneng ho kenya tšebetsong li-D2 / 3 receptors, athe li-DS tsa moputso li ka phahamisa mahloriso a dopamine maemong a holimo ho lekana ho kenya tšebetsong li-receptor tsa D1 (Mosa, 1991).

Ntle le moo, bophahamo ba cue-evigation excuse bo ka laoloa ke tonic, ho fapana le phasic dopamine. Maemo a dopamine ea Tonic a ka bontša litšenyehelo tsa monyetla oa ho se sebetse (Niv et al., 2007), ka tsela eo, ho hlophisoa mafolofolo a tšebetso e sebetsang. Kahoo, ha maemo a holimo a lekaneng a dopamine a fumaneha, li-receptor tse lekaneng tsa dopamine li ka etsoa ts'ebetsong ho nolofatsa mokhoa oa ho tsosa moferefere le ho fokotsa mokhoa oa ho batla moputso. Mochine o tšoanang o kanna oa tlatsa tlatsetso e tsebahalang ea NAc dopamine ts'ebetsong ea mesebetsi e sa sebetseng e hlokang boiteko bo phahameng (Salamone le Correa, 2012), moo ho hloka taolo ea dopamine ho eketsang maqhubu a atamelehang ho atamela oparetene (Nicola, 2010). Lits'oants'o tse hlakileng tsa kantle (mohlala, ho bona ha lever) kapa mekhoa ea kahare (mohlala, ho tloha nakong ea nako kapa tlala) e ka baka mokhoa oa ho ts'oaroa ke li-neuron tse thabisang ho isa tekanyong e kholo ha litšenyehelo tsa menyetla le litekanyetso tsa dopamine li le holimo.

Ka kakaretso, ho sa tsotelehe mokhoa o ikhethang oa pharmacological, liphetho tsa rona li bonts'a hore NAc dopamine e khothaletsa boits'oaro ba ho batla moputso ka ho phahamisa likhakanyo tsa li-neurc tsa NAc ho susumetsa tikoloho. Boholo ba tlhahiso ena e beha morolo oa taba ho qala karabo ea mokhoa. Ka mochine ona, dopamine e laola matla le menyetla ea ho batla moputso.

Mongolo o botlaaseng ba leqephe

References