DeltaFosB i The Nucleus Accumbens är kritisk för att förstärka effekterna av sexuell belöning. (2010)

KOMMENTARER: Delta FosB är en markör för alla beroende, både beteendemässiga och kemiska. När denna molekyl ökar i belöningskretsen så gör beroendeframkallande beteenden. Det är en av molekylerna som är involverade i neuroplastiska förändringar. Detta experiment visar att det ökar med sexuell upplevelse, på samma sätt som det gör med narkotikamissbruk. I experimentet använde de genteknik för att öka dess nivåer bortom "normalt". Detta resulterade i förbättrad underlättande av sexuell aktivitet. Vi tror att detta händer med porrberoende.

FULLSTUDIE

Platser KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genes Brain Behav. 2010 okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Institutionen för anatomi och cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario, Kanada.

SAMMANDRAG

Sexuellt beteende hos hanrotter är givande och förstärkande. Det är emellertid lite känt om specifika cellulära och molekylära mekanismer som medierar sexuell belöning eller de förstärkande effekterna av belöning på efterföljande uttryck av sexuellt beteende. Denna studie tester hypotesen att ΔFosB, den stabilt uttryckta stympade formen av FosB, spelar en viktig roll vid förstärkning av sexuellt beteende och erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell motivation och prestanda.

Sexuell erfarenhet visade sig orsaka ΔFosB-ackumulation i flera limbiska hjärnregioner, inklusive nukleinsymboler (NAc), medial prefrontal cortex, ventral tegmental area och caudate putamen men inte den mediala preoptiska kärnan.

Därefter uppmättes induktionen av c-Fos, ett nedströms (undertryckt) mål för ΔFosB, hos sexuellt erfarna och naiva djur. Antalet parning inducerade c-Fos-immunoreaktiva celler sjönk signifikant hos sexuellt erfarna djur jämfört med sexuellt naiva kontroller.

Slutligen manipulerades ΔFosB-nivåer och dess aktivitet i NAc med användning av viralt medierad genöverföring för att studera sin potentiella roll för att förmedla sexuell erfarenhet och erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell prestanda. Djur med ΔFosB överuttryck visade förbättrad underlättande av sexuell prestanda med sexuell erfarenhet i förhållande till kontroller. I motsats härtill uttryckte uttrycket av AJunD, en dominerande negativ bindande partner av ΔFosB, dämpad sexuell erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell prestanda och stunted långsiktigt underhåll av förenkling jämfört med grön fluorescensprotein och ΔFosB-överuttryckande grupper.

Tillsammans stöder dessa resultat en kritisk roll för ΔFosB-uttryck i NAc för de förstärkande effekterna av sexuellt beteende och sexuell erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell prestation.

INLEDNING

Sexuellt beteende är mycket givande och förstärkande för manliga gnagare (Coolen et al. 2004; Pfaus et al,. 2001). Dessutom förändrar sexuell erfarenhet efterföljande sexuellt beteende och belöning (Tenk et al,. 2009). Med upprepad parningsupplevelse underlättas eller förstärks könsbeteende, vilket framgår av minskad latens för att initiera parning och underlättande av sexuell prestation (Balfour et al,. 2004; Pfaus et al,. 2001). Emellertid är de underliggande cellulära mekanismerna för sexuell belöning och förstärkning dåligt förstådda. Sexuellt beteende och konditionerade indikeringar som förutspår parning har visat sig övergående ge upphov till uttryck av omedelbar tidig gen c-fos i mesolimbic-systemet hos hanrotter (Balfour et al,. 2004; Pfaus et al,. 2001). Vidare har det nyligen visats att sexuell erfarenhet inducerar långvarig neuroplasticitet i mesolimbinsystemet för manliga råttor (Frohmader et al,. 2009; pitchers et al,. 2010). Vidare har hos sexuella råttor visat sig sexuell erfarenhet att framkalla ΔFosB, a Fos familjemedlem i kärnan accumbens (NAc) (Wallace et al,. 2008). ΔFosB, en trunkerad splitsningsvariant av FosB, är en unik medlem av Fos-familjen på grund av dess större stabilitet (Carle et al,. 2007; Ulery-Reynolds et al,. 2008; Ulery et al,. 2006) och spelar en roll i ökad motivation och belöning för missbruksmissbruk och den långsiktiga neurala plasticitetsmediärande missbruk (Nestler et al,. 2001). ΔFosB bildar ett heteromert transkriptionsfaktorkomplex (aktivatorprotein-1 (AP-1)) med Jun-proteiner, företrädesvis JunD (Chen et al,. 1995; Hiroi et al,. 1998). Genom inducerbart överuttryck av ΔFosB, som huvudsakligen är begränsat till striatumet med användning av bi-transgena möss, produceras en drogmissbrukad beteendemässig fenotyp trots att det saknats tidigare läkemedelsexponering (McClung et al,. 2004). Denna beteendemässiga fenotyp innefattar ett sensibiliserat lokomotoriskt svar på kokain (Kelz et al,. 1999), ökad preferens för kokain (Kelz et al,. 1999) och morfin (Zachariou et al,. 2006) och ökad självhantering av kokain (Colby et al,. 2003).

På liknande sätt som läkemedelsbelöning upplöses ΔFosB av naturligt givande beteenden och medierar uttrycket av dessa beteenden. Överuttryck av ΔFosB i NAc med hjälp av gnagare modeller ökar frivilligt hjullöpning (Werme et al,. 2002), instrumental svara på mat (Olausson et al,. 2006), sackarosintag (Wallace et al,. 2008), och underlättar han (Wallace et al,. 2008) och kvinnlig (Bradley et al,. 2005) sexuellt beteende. Således kan ΔFosB vara involverad i att mediera effekterna av naturliga givande upplevelser. Thans nuvarande studie expanderar på tidigare studier genom att specifikt undersöka rollen av ΔFosB i NAc i de långsiktiga resultaten av sexuell erfarenhet av efterföljande parningsbeteende och neuralt aktivering i mesolimbic systemet.

  • Först fastställdes vilka hjärnregioner som medverkas i belöningskretsarna och sexuellt beteende uttrycka sex-erfarenhetsinducerad ΔFosB.
  • Därefter påverkades effekten av sex-erfarenhetsinducerad ΔFosB på parning-inducerad expression av c-Fos, ett nedströms mål som undertrycktes av ΔFosB (Renthal et al,. 2008), undersöktes.
  • Slutligen bestämdes effekten av att manipulera ΔFosB-aktivitet i NAc (genöveruttryckning och uttryck av en dominant negativbindande partner) på sexuellt beteende och erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell motivation och prestanda bestämdes med användning av virusvektortillverkningsteknik.
Gå till:

METODER

djur

Vuxna manliga Sprague Dawley-råttor (200-225 gram) erhölls från Charles River Laboratories (Senneville, QC, Kanada). Djur hölls i plexiglasburar med ett tunnelrör i samma könspar under experiment. Koloninrummet var temperaturreglerade och upprätthölls på en 12 / 12 hr ljus mörk cykel med mat och vatten tillgängligt AD libitum utom vid beteendestestning. Stimulösa kvinnor (210-220 gram) för parningstider fick ett subkutant implantat innehållande 5% östradiolbensoat och 95% kolesterol efter bilateral ovariektomi vid djupbedövning (0.35g ketamin / 0.052g Xylazin). Sexuell mottaglighet inducerades genom administrering av 500μg progesteron i 0.1 mL sesamolja ungefär 4 timmar före testning. Samtliga förfaranden godkändes av djurhälso- och användarkommittéerna vid University of Western Ontario och överensstämde med CCAC-riktlinjer som involverar ryggradsdjur i forskning.

Sexuellt beteende

Parningstider inträffade under den tidiga mörka fasen (mellan 2-6 timmar efter den mörka perioden) under dim röd belysning. Före försöksuppkomsten delades djuren slumpmässigt in i grupper. Under parningstillfällen fick manrottor att copulera till ejakulation eller 1-timme, och parametrar för sexuellt beteende registrerades inklusive: bergslängd (ML; tid från kvinnans introduktion till första berget), intromission latens (IL; tid från introduktion av kvinnan till första berget med vaginal penetration), ejakulationslatens (EL, tid från första intromission till utlösning), efter utlösningsintervall (PEI, tid från ejakulation till första efterföljande intromission), antal fästen (M; bäcken som slår utan vaginal penetration), antal intromissioner (IM, montering inklusive vaginal penetration) och samverkningsverkningsgrad (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Antal mounts och intromisser ingick inte i analysen för djur som inte visade ejakulation. Mount och intromission latencies är parametrar som indikerar sexuell motivation, medan ejaculationslatens, antal fästen och samlingseffektivitet speglar sexuell prestanda (Hull 2002).

Experiment 1: Uttryck av ΔFosB

Sexuellt naiva manråttor fick komma i kontakt med rena provburar (60 × 45 × 50 cm) för 5 på varandra följande, dagliga parningstider eller förblev sexuellt naivt. Kompletterande tabell 1 skisserar beteendeparadigmet för experimentella grupper: naivt nej sex (NNS; n = 5), naivt sex (NS; n = 5), upplevt inget kön (ENS; n = 5) och erfaren kön (ES; n = 4). NS och ES djur avlivades 1 timme efter utlösning på den sista dagen av parning för att undersöka parning-inducerad c-Fos-expression. NNS-djur offrades samtidigt med ENS-djur 24 timmar efter slutlig samlingssession för att undersöka sex-erfarenhetsinducerad ΔFosB. Sexuellt erfarna grupper matchades för sexuellt beteende före efterföljande testning. Inga signifikanta skillnader upptäcktes mellan grupper för några beteendeåtgärder inom lämplig parningssession och sexupplevelsesinducerad underlättande av sexuellt beteende visades av både erfarna grupper (Kompletterande tabell 2). Kontroller inkluderade sexuellt naiva män som hanterades samtidigt med parningsprodukter som säkerställer exponering för kvinnliga lukt och vokaliseringar utan direkt kvinnlig kontakt.

För uppoffring bedövades djuren djupt med användning av natriumpentobarbital (270mg / kg; ip) och perfusionerades intrakardiellt med 50 ml 0.9% saltlösning följt av 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffert (PB). Hjärnor avlägsnades och efterfästes för 1 h vid rumstemperatur i samma fixativ, nedsänktes sedan i 20% sackaros och 0.01% natriumazid i 0.1 M PB och lagrades vid 4 ° C. Koronala sektioner (35 μm) skars med en frysande mikrotom (H400R, Micron, Tyskland) samlades i fyra parallella serier i kryoprotektantlösning (30% sackaros och 30% etylenglykol i 0.1 M PB) och förvarades vid -20 ° C. Fria flytande sektioner tvättades omfattande med 0.1 M fosfatbuffrad saltlösning (PBS; pH 7.3-7.4) mellan inkubationer. Sektioner utsattes för 1% H2O2 för 10 min vid rumstemperatur för att förstöra endogena peroxidaser och blockeras sedan i PBS + inkubationslösning, vilket är PBS innehållande 0.1% bovint serumalbumin (katalogpost 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) och 0.4% Triton X -100 (katalogpost BP151-500; Sigma-Aldrich) för 1 h. Sektioner inkuberades därefter över natten vid 4 ° C i en polyclonal antikropp med pan-FosB-kanin (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB-antikroppen höjdes mot en intern region som delades av FosB och AFosB. ΔFosB-IR-cellerna var specifikt FosB-positiva, eftersom efter det stimulerande tiden (24-timmar) nedbrytes all detekterbar stimulusinducerad FosB (Perrotti et al,. 2004; Perrotti et al,. 2008). Dessutom avlivades djur i parning på sista dagen (NS, ES) i detta försök 1 h efter parning, alltså före FosB-uttryck. Western blot-analys bekräftade detektering av AFosB vid approximativt 37 kD. Efter inkubation av primär antikropp inkuberades sektioner för 1h i biotinkonjugerad get-anti-kanin IgG (1: 500 i PBS +, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) och sedan 1 h i avidin-biotin-hoseradishperoxidas (ABC-elit ; 1: 1K i PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Efterföljande inkubationssektioner bearbetades på ett av följande sätt:

1. Enkel peroxidasmärkning

Sektioner av NNS- och ENS-djur användes för en hjärnanalys av sexuell erfarenhetsinducerad ΔFosB-ackumulation. Efter ABC-inkubation visualiserades peroxidaskomplexet efter behandling under 10-minuter till en kromogenlösning innehållande 0.02% 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydroklorid (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) förstärkt med 0.02% nickelsulfat i 0.1 M PB med väteperoxid (0.015%). Sektioner tvättades noggrant i 0.1 M PB för att avsluta reaktionen och monterades på kodade Superfrost plus-glasskivor (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) med 0.3% gelatin i ddH20. Efter uttorkning var alla skivor täckta med DPX (dibutylftalat xylen).

2. Dubbel immunofluorescens

Sektioner från alla fyra experimentella grupper innehållande NAc och mPFC användes för analys av ΔFosB och c-Fos. Efter ABC-inkubation inkuberades sektioner för 10 min med biotinylerad tyramid (BT; 1: 250 i PBS + 0.003% H2O2 Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) och för 30 min med Alexa 488-konjugerad strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Sektioner inkuberades därefter över natten med en kaninkolyklonal antikropp som specifikt kände igen c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) följt av en 30 min inkubering med get-anti-kanin Cy3-konjugerad sekundär antikropp (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Efter färgning tvättades sektionerna noggrant i 0.1 M PB, monterad på kodade glasskivor med 0.3% gelatin i ddH20 och täckt med ett vattenhaltigt monteringsmedium (Gelvatol) innehållande anti-blekmedlet 1,4-diazabicyklo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiska kontroller innehöll utelämnandet av endera eller båda primära antikropparna, vilket resulterade i frånvaro av märkning i lämplig våglängd.

Dataanalys

Brainanalys av ΔFosB

Två experimenter som blivit blind för behandling utförde hjärnans breda skanning på kodade diabilder. ΔFosB-immunoreaktiva (-IR) -celler i hela hjärnan analyserades semikvantitativt med användning av en skala för att representera antalet avFosB-positiva celler som beskrivs i Tabell 1. Vidare räknades antalet ΔFosB-IR-celler med hjälp av standardområden för analys i hjärnområden som var inblandade i belöning och sexuellt beteende med hjälp av ett kamera lucida ritningsrör fäst vid ett Leica DMRD-mikroskop (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Tyskland): NAc (kärna (C) och skal (S); 400 × 600μm) analyserad vid tre rostral-caudala nivåer (Balfour et al,. 2004); ventral tegmental area (VTA; 1000 × 800μm) analyserad vid tre rostral-caudala nivåer (Balfour et al,. 2004) och VTA-svansen (Perrotti et al,. 2005); prefrontal cortex (anterior cinglulate area (ACA); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800μm vardera); caudat putamen (CP; 800 × 800μm); och medial preoptisk kärna (MPN; 400 × 600 μm) (Kompletterande figurer 1-3). Två sektioner räknades per delregion, och i genomsnitt per djur för beräkning av gruppens medelvärde. Sexuellt naiva och erfarna gruppmedelvärden av ΔFosB-IR-celler jämfördes för varje subregion med användning av ej parade t-test.

Tabell 1    

Sammanfattning av ΔFosB-uttryck hos sexuellt naiva och erfarna djur
Analys av ΔFosB och c-Fos

Bilderna fångades med en kyld CCD-kamera (Microfire, Optronics) kopplad till ett Leica-mikroskop (DM5000B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) och Neurolucida-programvaran (MicroBrightfield Inc) med fast kamerainställningar för alla ämnen (med 10x-mål). Antal celler som uttrycker c-Fos-IR eller FosB-IR i standardområdena för analys i NAc-kärna och skal (400 × 600μm vardera; Kompletterande figur 1) och ACA av mPFC (600 × 800μm; Kompletterande figur 3) räknades manuellt av en observatör blindad till experimentgrupperna i 2 sektioner per djur med användning av Neurolucidas mjukvara (MBF Bioscience, Williston, VT) och medelvärde per djur. Gruppmedelvärden för c-Fos eller ΔFosB-celler jämfördes med användning av tvåvägs ANOVA (Faktorer: Sexuell erfarenhet och sexaktivitet) och Fisher LSD för posthoc-jämförelser vid en signifikansnivå av 0.05.

Experiment 2: ΔFosB-expressionsmanipulation

Viral vektormedierad genöverföring

Sexuella naiva manliga Sprague Dawley-råttor delades slumpmässigt in i grupper före stereotaxisk operation. Alla djur mottog bilaterala mikroinjektioner av rekombinanta adenoassocierade virala (rAAV) vektorer som kodar för GFP (kontroll; n = 12), vildtyp ΔFosB (n = 11) eller en dominant-negativ bindande partner av ΔFosB betecknad ΔJunD (n = 9) in i NAc. ΔJunD minskar ΔFosB-medierad transkription genom kompetitivt heterodimerisering med ΔFosB innan bindning av AP-1-regionen inom genpromotorer (Winstanley et al,. 2007). Virustiter bestämdes genom qPCR och utvärderades in vivo- före studiestart. Titer var 1-2 × 1011 smittsamma partiklar per ml. rAAV-vektorer injicerades i en volym av 1.5 μL / sida över 7-minuter (koordinater: AP + 1.5, ML +/- 1.2 från Bregma; DV-7.6 från skalleytan enligt Paxinos och Watson, 1998) med hjälp av en Hamilton-spruta (5μL ; Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektorerna ger ingen toxicitet som är större än kontrollinfusioner ensamma (Winstanley et al, 2007; för detaljer om AAV-beredning, se Hommel et al., 2003). Beteendexperiment startade 3 veckor efter vektorinjektioner som möjliggjorde optimal och stabil virusinfektion (Wallace et al,. 2008). Transgenuttryck i murina arter toppar vid 10 dagar och förblir förhöjda under minst 6 månader (Winstanley et al,. 2007). Vid slutet av försöket perfekterades djuren transcardiellt och NAc-sektioner immunbehandlades för GFP (1: 20K; kanin anti-GFP antikropp; Molecular Probes) med användning av en ABC-peroxidas-DAB-reaktion (såsom beskrivits ovan) till histologiskt verifiera injektionsställen med hjälp av GFP som markör (Kompletterande figur 4). ΔFosB och ΔJunD-vektorer innehåller också ett segment som uttrycker GFP separerat med en intern ribosomal inträdesplats, vilket möjliggör kontroll av injektionsstället genom GFP-visualisering hos alla djur. Endast djur med injektionsställen och spridning av virus begränsat till NAc inkluderades i statistiska analyser. Spridning av virus begränsades i allmänhet till en del av NAc och spredde inte rostral-caudalt genom kärnan. Vidare verkade spridning av virus mestadels begränsat till antingen skal eller kärna. Variationen av injektionsställen och spridningen inom NAc påverkar emellertid inte effekter på beteende. Slutligen påverkade GFP-injektioner inte sexuellt beteende eller erfarenhetsinducerad underlättande av sexuellt beteende jämfört med icke-kirurgiska djur från tidigare studier (Balfour et al,. 2004).

Sexuellt beteende

Tre veckor efter viral vektoravgivning sammankopplade djuren med en utlösning (eller för 1-timmen) för 4-efterföljande dagliga parningssessioner för att erhålla sexuell erfarenhet (erfarenhetssessioner) och testades därefter för långsiktigt uttryck av erfarenhetsinducerad underlättande av sexuellt beteende 1 och 2 veckor (test sessioner 1 och 2) efter den sista erfarenhetssessionen. Sexuella beteendeparametrar registrerades under alla parningstider som beskrivits ovan. Statistiska skillnader för alla parametrar under varje parningssession jämfördes inom och mellan grupper med användning av tvåvägsrepeterade åtgärder ANOVAs (Faktorer: behandling och parningssession) eller envägs ANOVAs (ejakulations latens, antal mounts och intromissioner; Faktor: behandling eller parning session) följt av Fisher LSD eller Newman-Keuls tester för posthoc jämförelser vid en signifikansnivå av 0.05. Specifikt jämfördes de facilitativa effekterna av sexuell erfarenhet på parningsparametrar mellan erfarenhetssessionen 1 (naiv) och erfarenhetssessionerna 2, 3 eller 4 var och en mellan experimentgrupperna inom varje erfarenhetssession. Vidare, för att analysera effekter av behandling (vektor) vid långvarig förenkling av sexuellt beteende jämfördes parningsparametrar mellan erfarenhetssessionen 4 och testsessionen 1 och 2 inom varje behandlingsgrupp och jämfördes mellan experimentella grupper inom varje testperiod.

Gå till:

RESULTAT

Sexuell erfarenhet orsakar ΔFosB ackumulering

Inledningsvis genomfördes en halvkvantitativ undersökning av ΔFosB-ackumulation genom hjärnan hos sexuellt erfarna män jämfört med sexuellt naiva kontroller. En sammanfattning av de övergripande resultaten finns i Tabell 1. ΔFosB-IR-analysen framkallades genom att bestämma antalet avFosB-IR-celler i flera limbi-associerade hjärnområden med användning av standardområden av analys. Figur 1 demonstrerar representativa bilder av DAB-Ni som färgar NAc hos sexuellt naiva och erfarna djur. Betydande ΔFosB uppreglering hittades i mPFC-delregioner (Figur 2A), NAc kärna och skal (2B), caudate putamen (2B) och VTA (2C). I NAc fanns betydande skillnader vid alla rostral-caudala nivåer i NAc-kärnan och skalet och data som visas i Figur 2 är genomsnittet över alla rostro-caudala nivåer. Däremot var ingen signifikant ökning av ΔFosB-IR i den hypotalamala medial preoptiska kärnan (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26; ENS: Avg 6.0 +/- 1.86).

Figur 1    

 

Representativa bilder som visar ΔFosB-IR-celler (svart) i NAc av naivt nej sex (A) och upplever inga sex (B) grupper. aco: anterior commissure Scale bar anger 100 μm.
Figur 2     

Antal ΔFosB-IR-celler i: A. infralimbiska (IL), prelimbiska (PL) och främre cingulära cortex (ACA) delregioner av den mediala prefrontala cortexen; B. Nucleus accumbens kärna och skal, och caudate putamen (CP); C. Rostral, mitten, kaudalen och svansen .

Sexuell erfarenhet dämpar parning-inducerad c-Fos

Effekten av sexuell erfarenhet av ΔFosB-nivåer i NAc bekräftades med användning av fluorescensfärgningstekniker. Dessutom analyserades effekter av sexuell erfarenhet av uttryck av c-Fos. Figur 3 demonstrerar representativa bilder av ΔFosB- (grön) och c-Fos (röd) -IR-celler i alla försöksgrupper (A, NNS; B, NS; C; ENS; D, ES). Sexuell erfarenhet ökade signifikant ΔFosB-uttryck i NAc-kärnan (Figur 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) och skal (Figur 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Däremot hade parning 1-timme före perfusion ingen effekt på ΔFosB-uttryck (Figur 4A, C) och ingen interaktion mellan sexuell erfarenhet och parning omedelbart före perfusion upptäcktes. Det var en övergripande effekt av parning före perfusion på c-Fos-uttryck i både NAc-kärnan (Figur 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) och skal (Figur 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Dessutom upptäcktes en övergripande effekt av sexuell upplevelse i NAc-kärnan (Figur 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) och skal (Figur 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) och en interaktion mellan sexuell erfarenhet och parning före perfusion detekterades i NAc-kärnan (F1,15 = 6.5; p = 0.022), med en trend i skalet (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post-hoc-analyser visade parning-inducerad c-Fos uttryck i kärna och skal av sexuellt naiva män (Figur 4B, D). Men hos sexuellt erfarna män ökade c-Fos inte signifikant i NAc-kärnan (Figur 4B) och avsevärt försämrats i skalet (Figur 4D). Sålunda orsakade sexuell upplevelse en minskning av parning-inducerad c-Fos-uttryck. P-värden för specifika parvisa jämförelser finns i figurerna.

Figur 3     

Representativa bilder som visar ΔFosB (grön) och c-Fos (röd) i NAc för varje experimentgrupp. Skalafältet indikerar 100 μm.
Figur 4     

Sex erfarenhetsinducerad ΔFosB och parning inducerad c-Fos. Antal immunkoreaktiva celler för ΔFosB (Core, A, Shell, C, ACA, E) eller c-Fos (Core, B, Shell, D, ACA, F): NNS (n = 5) 5), ENS (n = 5) eller ES (n = 4). Data uttrycks .

Effekten av sexuell erfarenhet på parningsinducerade c-Fos-nivåer var inte begränsad till NAc. En liknande dämpning av c-Fos-uttryck observerades i ACA hos sexuellt erfarna djur jämfört med sexuellt naiva kontroller. Sexuell erfarenhet hade en signifikant effekt på ΔFosB-uttryck i ACA (Figur 4E: F1,15 = 154.2; p <0.001). Parning före perfusion hade ingen effekt på ΔFosB-uttryck (Figur 4C) men signifikant ökat c-Fos (Figur 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) i ACA. Dessutom minskade parningsinducerat c-Fos-uttryck i ACA signifikant av sexuell upplevelse (Figur 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). En tvåvägs interaktion mellan sexuell erfarenhet och parning före perfusion detekterades för c-Fos-uttryck (Figur 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). P-värden för specifika parvisa jämförelser finns i figurförklaringarna. Slutligen var det ingen signifikant minskning av parningsinducerat c-Fos-uttryck i den mediala preoptiska kärnan (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), ett område där parningserfarenhet inte orsakade någon signifikant ökning av ΔFosB-uttryck, vilket indikerar att parningsinducerat c-Fos-uttryck inte påverkades i alla hjärnområden.

ΔFosB i NAc medierar förstärkning av sexuellt beteende

För att undersöka en potentiell molekylär mekanism för förstärkning av sexuellt beteende som demonstrerats av erfarenhetsinducerad underlättande av sexuellt beteende bestämdes effekterna av lokal manipulation av ΔFosB-nivåer och dess transkriptionsaktivitet. Sexuell erfarenhet under de fyra på varandra följande erfarenhetssessionerna hade en signifikant effekt på beredskapslängden (Figur 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), intromission latens (Figur 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) och ejakulationslatens (Figur 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP-kontrolldjur visade den förväntade erfarenhetsinducerade möjliggörandet av sexuellt beteende och visade signifikant lägre latenser till första montering, första intromission och ejakulation under erfarenhetssessionen 4 jämfört med erfarenhetssessionen 1 (Figur 5A-C; se figurlegenden för p-värden). Denna erfarenhetsinducerad lätthet av sexuellt beteende observerades också i ΔFosB-gruppen för montering och intromission latenser, men det uppstod ingen signifikant skillnad i ejaculationslatensiteten (Figur 5A-C). Däremot visade ΔJunD-djur en stunted facilitering; trots att latenser för fästningar, intromissioner och ejakuleringar minskade med upprepade parningssessioner, uppnådde ingen av dessa parametrar statistisk signifikans jämfört mellan erfarenhetssessionerna 1 och 4 (Figur 5A-C). Mellan gruppsammanställningar för varje erfarenhetssession visar att ΔJunD hade signifikant längre latenser för montering, intromit och ejakulering under erfarenhetssessioner jämfört med ΔFosB och GFP (Figur 5A-C). Dessutom hade både sexuell erfarenhet och behandling signifikanta effekter på samverkningseffektiviteten (Figur 5F: Sexuell erfarenhet, F1,12 = 22.5; p <0.001; behandling, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB-män hade ökad samlingseffektivitet under erfarenhetssessionen 4 jämfört med erfarenhetssessionen 1 (Figur 5F). Dessutom hade ΔFosB djur signifikant färre fästen som föregick ejakulation under erfarenhetssessionsdagen 4, jämfört med erfarenhetssessionen 1 (Figur 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), och att ΔJunD-män hade betydligt fler fästen som föregick ejakulationen, alltså signifikant minskad samverkningseffektivitet än någon av de andra två grupperna (Figur 5D och F). Således uppvisade GFP- och FFB-djur erfarenhetsinducerad underlättande av initiering av sexuellt beteende och sexuell prestation, medan ΔJunD-djur inte gjorde det.

Figur 5     

Sexuell beteende hos GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) och ΔJunD (n = 9) djur: monteringslatens (A), intromissat latens (B), ejaculationslatens (C), antal fästen (D) antal intromissioner (E) och samlingseffektivitet (F). Data uttrycks .

För att testa hypotesen att ΔFosB-uttryck är kritiskt för långsiktigt uttryck av erfarenhetsinducerad underlättning av sexuellt beteende, testades djuren 1 vecka (test session 1) och 2 veckor (test session 2) efter den sista erfarenhetssessionen. Faktum är att underlättat sexuellt beteende upprätthölls i både GFP- och ΔFosB-grupper eftersom ingen av beteendeparametrarna skilde sig mellan test sessionerna 1 eller 2 och den slutliga erfarenhetssessionen 4, inom GFP- och ΔFosB-grupper (Figur 5A-C; förutom ejaculationslatens och samverkningseffektivitet i testsessionen 1 för ΔFosB djur). Betydande skillnader mellan ΔJunD-djur och GFP- eller FFB-grupper detekterades i båda test sessionerna för alla sexuella beteendeparametrar (Figur 5A-F). Inga skillnader upptäcktes mellan eller inom grupper när man jämförde antalet intromisser, PEI eller procentandelar av djur som ejaculerade (100% av män i alla grupper ejaculerade under de senaste fyra parningstiderna).

Gå till:

DISKUSSION

Den aktuella studien visade att sexuell erfarenhet orsakar ackumulering av ΔFosB i flera limbi-associerade hjärnområden, inklusive NAc-kärnan och skalet, mPFC, VTA och caudate putamen. Dessutom dämpade sexuell erfarenhet parning-inducerad expression av c-Fos i NAc och ACA. Slutligen visades ΔFosB i NAc vara kritisk för att förmedla underlättande av parning under förvärv av sexuell erfarenhet och det långsiktiga uttrycket av erfarenhetsinducerad underlättande av sexuellt beteende. Specifikt reducerar ΔFosB-medierad transkriptionsdämpad erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell motivation och prestanda, medan överuttryck av FosB i NAc orsakade en förbättrad underlättande av sexuellt beteende, vad gäller ökad sexuell prestanda med mindre erfarenhet. Tillsammans stöder de aktuella resultaten hypotesen att ΔFosB är en kritisk molekylär mediator för den långsiktiga neurala och beteendemässiga plasticiteten som induceras av sexuell erfarenhet.

De aktuella resultaten omfattar tidigare studier som visar sex-erfarenhetsinducerad ΔFosB i NAc hos hanrotter (Wallace et al,. 2008) och kvinnliga hamstrar (Hedges et al,. 2009). Wallace et al. (2008) visade att rAAV-ΔFosB överuttryck i NAc förbättrat sexuellt beteende hos sexuellt naiva djur under den första parningssessionen, vilket framgår av färre intromissioner till utlösning och kortare post-ejaculatoriska intervaller men hade ingen effekt hos sexuellt erfarna män (Wallace et al,. 2008).

Däremot uppvisade den aktuella studien inga effekter av ΔFosB-överuttryck hos sexuellt naiva män under det första testet, utan snarare under och efter förvärvet av sexuell erfarenhet. ΔFosB-överuttryckare visade ökad sexuell prestanda (ökad samverkningseffektivitet) jämfört med GFP-djur.

Dessutom testade den aktuella studien rollen av AFosB genom att blockera AFosB-medierad transkription med användning av en AJunD-uttryckande viral vektor. Förebyggande av erfarenhetsinducerad ökning av ΔFosB-expressionsinhiberad erfarenhetsinducerad underlättande av sexuell motivation (ökad montering och intromission latenser) samt sexuell prestation (ökad ejaculations latens och antal fästen) och efterföljande långsiktigt uttryck av underlättat sexuellt beteende.

Följaktligen är dessa uppgifter de första som indikerar en obligatorisk roll för ΔFosB i förvärvet av erfarenhetsinducerad underlättande av sexuellt beteende. Dessutom visar dessa data att ΔFosB också är kritiskt inblandad i det långsiktiga uttrycket av erfarenhetsinducerat underlättat beteende. Vi föreslår att detta långsiktiga uttryck för underlättat beteende representerar en form av minne för naturlig belöning, varför ΔFosB i NAc är en medlare av belöningsminne. Sexuell erfarenhet ökar också ΔFosB-nivåerna i VTA och mPFC, områden som är inblandade i belöning och minne (Balfour et al,. 2004; Phillips et al,. 2008). Framtida studier är nödvändiga för att belysa en potentiell betydelse av ΔFosB uppreglering på dessa områden för belöningsminne.

ΔFosB-uttrycket är mycket stabilt och har sålunda stor potential som en molekylär mediator av ihållande anpassningar av hjärnan efter kroniska störningar (Nestler et al,. 2001). ΔFosB har visat sig gradvis öka i NAc över flera kokaininjektioner och kvarstår i upp till flera veckor (Hoppas et al,. 1992; Hoppas et al,. 1994). Dessa förändringar i NAc ΔFosB-uttryck är förknippade med läkemedelsbelöningssensibilisering och beroende (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al,. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al,. 2001; Zachariou et al,. 2006). I motsats härtill har ΔFosBs roll i medling av naturliga belöningar blivit understudied. Nya bevis har uppstått, vilket tyder på att ΔFosB-induktion i NAc är inblandad i naturlig belöning. ΔFosB-nivåerna ökar på samma sätt i NAc efter sackarosintag och hjullöpning. Överuttrycket av ΔFosB i striatumet med användning av bitransgena möss eller virusvektorer hos råttor orsakar en ökning av sackarosintag, ökad motivation för mat och ökat spontant hjulkörning (Olausson et al,. 2006; Wallace et al,. 2008; Werme et al,. 2002). Nuvarande data lägger väsentligt till dessa rapporter och stöder vidare uppfattningen att ΔFosB är en kritisk mediator för belöningsförstärkning och naturligt belöningss minne.

ΔFosB kan medföra erfarenhetsinducerad förstärkning av sexuellt beteende via induktion av plasticitet i mesolimbicsystemet. Seksuell erfarenhet orsakar faktiskt ett antal långvariga förändringar i mesolimbic-systemet (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al,. 2009; pitchers et al,. 2010). ent beteendetsnivå, ett sensibiliserat lokomotoriskt svar på amfetamin och en förbättrad amfetaminbelöning har visats hos sexuellt erfarna hanrotter (pitchers et al,. 2010); Ett förändrat lokomotoriskt svar på amfetamin har också observerats med kvinnliga hamstrar (Bradley & Meisel 2001). Vidare har ökningar av antalet dendritiska ryggrader och komplexitet hos dendritiska arbors hittats efter en avhållningsperiod från sexuell erfarenhet hos hanrotter (pitchers et al,. 2010). Den nuvarande studien föreslår ΔFosB kan vara en specifik molekylär mediator av de långsiktiga resultaten av sexuell erfarenhet. Av överenskommelse har ΔFosB nyligen visat sig vara viktigt för att inducera dendritisk ryggradsförändringar som svar på kronisk kokainadministration (Dietz et al,. 2009; Labyrint et al,. 2010).

Det är oklart vilken uppströms neurotransmittor (er) som är ansvarig för att inducera AFosB i NAc, men DA har föreslagits som en kandidat (Nye et al,. 1995). Praktiskt taget alla missbruksmedel, inklusive kokain, amfetamin, opiater, cannabinoider och etanol, samt naturliga belöningar, ökar ΔFosB i NAc (Perrotti et al,. 2005; Wallace et al,. 2008; Werme et al,. 2002). Både missbruk och naturliga belöningar ökar synaptisk DA-koncentration i NAc (Damsma et al,. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB induktion med missbrukande läkemedel har visats i DA-receptorinnehållande celler och kokaininducerad ΔFosB blockeras av en D1 DA-receptorantagonistt (Nye et al,. 1995). Därför är DA-frisättning hypoteserad för att stimulera ΔFosB-uttryck och därigenom medla belöningsrelaterad neuroplasticitet. Vidare stödja idén om att ΔFosB-nivåer är DA-beroende är det konstaterandet att hjärnområden där sexuell erfarenhet förändrade ΔFosB-nivåer får stark dopaminerginsignal från VTA, inklusive medial prefrontal cortex och basolateral amygdala.

I motsats till detta ökar ΔFosB inte i den mediala preoptiska delen, trots att detta område får dopaminerg ingång, om än från hypotalamiska källor (Miller & Lonstein 2009). Framtida studier behövs för att testa om parning-inducerat ΔFosB-uttryck och effekterna av sexuell erfarenhet av sexuell motivation och prestanda är beroende av DA-åtgärder. Rollen för DA i sexuell belöning hos hanrotter är för närvarande inte helt klar (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Det finns gott om bevis för att DA släpps i NAc under exponering för en kvinna eller parning (Damsma et al,. 1992) och DA neuroner aktiveras under sexuellt beteende (Balfour et al,. 2004). Systemiska injektioner av DA-receptorantagonist hindrar emellertid inte sexuell belöningsinducerad konditionerad platspreferens (Agmo & Berenfeld 1990) och hypotesen att DA är kritisk för erfarenhetsinducerad förstärkning av parning är otestad.

Det är också oklart vad som är nedströms mediatorer av ΔFosB-effekter på sexuellt beteende. ΔFosB har visats fungera som både en transkriptionsaktivator och repressor genom en AP-1-beroende mekanism (McClung & Nestler 2003; Peakman et al,. 2003). Många målgener har identifierats, inklusive den omedelbara tidiga genen c-fos (Hoppas et al,. 1992; Hoppas et al,. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al,. 2008; Zhang et al,. 2006), cdk5 (Bibb et al,. 2001), dynorfin (Zachariou et al,. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al,. 2009), NFκB-underenheter (Ang et al,. 2001) Avnd AMPA glutamatreceptorn GluR2-subenheten (Kelz et al,. 1999). De nuvarande resultaten visar att parningsinducerad c-Fos-nivåer minskades genom sexuell erfarenhet i hjärnområden med ökad ΔFosB (NAc och ACA). Undertryckandet av c-Fos förefaller vara beroende av perioden sedan de senaste parningen och upprepade parningstiderna, liksom i tidigare studier, sågs inte en sådan minskning av c-Fos hos råttor som testades 1 veckan efter den sista parningssessionen (Balfour et al,. 2004) eller efter sexuell erfarenhet bestående av endast en enda parningssession (Lopez & Ettenberg 2002). Vidare är det aktuella resultatet överensstämmande med beviset att ΔFosB undertrycker c-fos-genen efter kronisk amphetaminexponering (Renthal et al,. 2008). I linje med dessa fynd reducerades induktionen av flera omedelbara tidiga gen-mRNA (c-fos, fosB, c-jun, junB och zif268) efter upprepade kokaininjektioner i jämförelse med akuta läkemedelsinjektioner (Hoppas et al,. 1992; Hoppas et al,. 1994) och amfetamininducerad c-fos undertrycktes efter uttag från kronisk amfetaminadministration (Jaber et al,. 1995; Renthal et al,. 2008). Den funktionella relevansen av nedreglering av c-Fos uttryck efter kronisk drogbehandling eller sexuell erfarenhet är fortfarande oklart och har föreslagits vara en viktig homeostatisk mekanism för att reglera ett djurs känslighet för gentagen belöningsexponering (Renthal et al,. 2008).

Sammanfattningsvis visar den aktuella studien att ΔFosB i NAc spelar en integrerad roll i minnet för sexuellt belöning, vilket stöder möjligheten att ΔFosB är viktigt för generell belöning förstärkning och minne. Resultaten från den aktuella studien belyser vidare vår förståelse av cellulära och molekylära mekanismer som medlar sexuell belöning och motivation och lägger till en litteraturkropp som visar att ΔFosB är en viktig aktör i utvecklingen av missbruk genom att visa en roll för ΔFosB i naturlig belöning förstärkning.

Gå till:

Extramaterial

Supp Fig S1-S4 & Tabell S1-S2

Gå till:

Tack

Denna forskning stöddes av bidrag från de kanadensiska instituten för hälsoforskning till LMC, National Institute of Mental Health till EJN, och Canadian Science and Engineering Research Council till KKP och LMC.

Gå till:

REFERENSER

  • Agmo A. Mänskliga råttor sexuellt beteende. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Berenfeld R. Förstärkning av ejakulationsegenskaper hos hanrotten: Opioids och dopaminers roll. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induktion av kärnfaktor-kappaB i kärnan accumbens genom kronisk kokainadministration. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Sexuellt beteende och könsrelaterade miljöanpassningar aktiverar mesolimbic systemet hos hanrotter. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effekter av kronisk exponering för kokain regleras av neuronproteinet Cdk5. Nature. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopaminsår i kvinnliga hamstrar (Mesocricetus auratus) avskaffar de sensibiliserade effekterna av sexuell erfarenhet på copulatoriska interaktioner med män. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Sexuellt beteende induktion av c-Fos i kärnans accumbens och amfetaminstimulerad lokomotorisk aktivitet är sensibiliserad av tidigare sexuell erfarenhet hos kvinnliga syriska hamstrar. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomberoende och oberoende mekanismer för FosB-destabilisering: identifiering av FosB degron-domäner och konsekvenser för DeltaFosB-stabilitet. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chao J, Nestler EJ. Molekylär neurobiologi av narkotikamissbruk. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hopp BT, Nestler EJ. Reglering av delta FosB och FosB-liknande proteiner genom elektrokonvulsiv anfall och kokainbehandlingar. Molekylär farmakologi. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celltypsspecifik överuttryck av DeltaFosB ökar incitamentet för kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Central reglering av ejakulation. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Sexuellt beteende ökar dopaminöverföringen i kärnans accumbens och striatum hos hanrotter: jämförelse med nyhet och rörelse. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Maze I, Mekanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Väsentlig roll för ΔFosB i kokainreglering av dendritiska spines av nukleinsymboler neuroner. Samhälle för neurovetenskap Abstrakt. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Blanda nöjen: Granskning av läkemedlets effekter på könsbeteende hos människor och djurmodeller. Horm Behav. 2009 I pressen.
  • Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB-överuttryck i kärnan accumbens ökar sexuell belöning i kvinnliga syriska hamstrar. Genes Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Matning och hypotalamisk stimulering ökar dopaminomsättningen i accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Livsmedelsbelöning och kokain ökar extracellulär dopamin i kärnan accumbens som uppmätt genom mikrodialys. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Viktig roll för fosB-genen i molekylära, cellulära och beteendemässiga verkningar av kroniska elektrokonvulsiva anfall. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokal genknockdown i hjärnan med användning av viralt medierad RNA-störning. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Hopp B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Reglering av omedelbart tidigt genuttryck och AP-1-bindning i råttkärnan accumbens av kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hoppas BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av ett långvarigt AP-1-komplex bestående av förändrade Fos-liknande proteiner i hjärnan av kronisk kokain och andra kroniska behandlingar. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Manlig sexuell beteende. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akut och kronisk amfetaminbehandling reglerar olika neuropeptid messenger-RNA-nivåer och Fos-immunreaktivitet i råtta-striatala neuroner. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Dynamisk ökning av dopamin under stimulering av paced i honrotan. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Själv DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Uttryck av transkriptionsfaktorn deltaFosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Nature. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Exponering för kvinnliga råttor producerar skillnader i c-fos induktion mellan sexuellt naiva och erfarna hanrotter. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mekaniker M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Viktig roll för histon-metyltransferas G9a i kokaininducerad plasticitet. Science. 2010;327: 213-216. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Reglering av genuttryck och kokainbelöning av CREB och DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylär växel för långsiktig anpassning i hjärnan. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Dopaminerga projicer till det mediala preoptiska området av råttor efter råttor. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkriptionskoppling i neuroner: roll av cellulära omedelbara tidiga gener. Trender Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Molecular mechanisms of drug addiction. Neuro. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
  • Nestler EJ. Neurobiologin av kokainberoende. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nestler EJ. Recension. Transkriptionsmekanismer för missbruk: DeltaFosBs roll. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: en hållbar molekylärbrytare för missbruk. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nye HE, Hopp BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiska studier av reglering av kronisk FOS-relaterad antigeninduktion av kokain i striatum och kärnan accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB i kärnan accumbens reglerar matförstärkt instrumentalt beteende och motivation. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, lager JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducibelt, hjärnregionsspecifik expression av en dominant negativ mutant av c-Jun i transgena möss minskar känsligheten för kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB ackumuleras i en GABAergic cellpopulation i den bakre svansen av det ventrala tegmentala området efter psykostimulerande behandling. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av deltaFosB i belöningsrelaterade hjärnstrukturer efter kronisk stress. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkta mönster av DeltaFosB induktion i hjärnan av missbruk. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Pfaus JG. Vägar av sexuell lust. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditionering och sexuellt beteende: en recension. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Ett top-down-perspektiv på dopamin, motivation och minne. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitet i mesolimbic systemet inducerat av naturlig belöning och efterföljande belöningsavstående. Biolpsykiatri. 2010;67: 872-879. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB medierar epigenetisk desensibilisering av c-fos-genen efter kronisk amphetaminexponering. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Genomgående analys av kromatinreglering av kokain avslöjar en roll för sirtuiner. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Sexuell belöning hos hanrotter: effekter av sexuell erfarenhet på konditionerade platspreferenser i samband med utlösning och intromissioner. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering av DeltaFosB medierar dess stabilitet in vivo. Neuroscience. 2008
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Reglering av DeltaFosB-stabilitet genom fosforylering. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosBs inflytande i kärnan accumbens på naturligt belöningsrelaterat beteende. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reglerar hjullöpning. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-induktion i orbitofrontal cortex medger tolerans mot kokaininducerad kognitiv dysfunktion. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En viktig roll för DeltaFosB i kärnan accumbens i morfin åtgärder. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos underlättar förvärv och utrotning av kokaininducerad ihållande förändringar. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]