Lauriane Cantin,#¤a Magalie Lenoir,#¤b Eric Augier,# Nathalie Vanhille,# Sarah Dubreucq,¤c Fuschia Serre,¤d Caroline Vouillacoch Serge H. Ahmed*
Kenji Hashimoto, redaktör
Författarinformation ► Artikelnoter ► Upphovsrätt och licensinformation ►
Denna artikel har varit citerad av Andra artiklar i PMC.
Abstrakt
Bakgrund
Att bedöma det relativa värdet av kokain och hur det förändras med kronisk droganvändning representerar ett långvarigt mål inom beroendeforskning. Överraskande nog tyder nyare experiment på råttor – den överlägset mest använda djurmodellen inom detta område – att värdet av kokain är lägre än man tidigare trott.
Metod / huvudfynd
Här rapporterar vi en serie valexperiment som bättre definierar den relativa positionen för kokain på värdestegen för råttor (dvs. preferensrankning av olika belöningar). Råttor fick välja att antingen ta kokain eller dricka vatten sötat med sackarin – ett icke-drogalternativ som inte är biologiskt nödvändigt. Genom att systematiskt variera kostnaden och koncentrationen av sötvatten, fann vi att kokain ligger lågt på värdestegen för de allra flesta råttor, nära de lägsta koncentrationerna av sötvatten. Dessutom avslöjade en retrospektiv analys av alla experiment under de senaste 5 åren att oavsett hur tungt tidigare kokainanvändning var, så ger de flesta råttor lätt upp kokainmissbruket till förmån för det icke-drogande alternativet. Endast en minoritet, färre än 15 % vid den tyngsta nivån av tidigare kokainanvändning, fortsatte att ta kokain, även när de var hungriga och erbjöd ett naturligt socker som kunde lindra deras behov av kalorier.
Slutsatser / Betydelse
Detta resultatmönster (kokainabstinens hos de flesta råttor; kokainpreferens hos få råttor) kartlägger väl epidemiologin av mänskligt kokainberoende och antyder att endast en minoritet av råttorna skulle vara sårbara för kokainberoende medan den stora majoriteten skulle vara motståndskraftig trots omfattande droger använda sig av. Motståndskraft mot drogberoende har länge misstänkts hos människor men har inte kunnat fastställas på ett säkert sätt, främst på grund av att det är svårt att i efterhand kontrollera skillnader i drogs självexponering och/eller tillgänglighet hos mänskliga droganvändare. Denna slutsats har viktiga konsekvenser för preklinisk forskning om kokainberoendes neurobiologi och för framtida läkemedelsutveckling.
Beskrivning
Det omedelbara belöningsvärdet av kokain, särskilt om det snabbt levereras till hjärnan efter rökning eller intravenös injektion, anses allmänt vara högre än värdet för de flesta naturliga eller socialt värderade belöningar – en skillnad som skulle bidra till att förklara dess beroendeframkallande potential [1]-[5]. Detta antagande är till stor del baserat på retrospektiva självrapporter från nuvarande eller före detta kokainmissbrukare eller på bevis från försöksdjur som fått tillgång till kokain självadministrering utan något beteendealternativ tillgängligt. Det verkar också bekräftas, men mer indirekt, av neurobiologisk forskning som visar att kokain framkallar en ökning av dopamin i det ventrala striatum som är onormalt högt och som inte vänjer sig vid upprepad drogexponering, jämfört med den som framkallas av icke-drogbelöningar. [3], [5], [6]. Uppskattning av det relativa värdet av kokain hos nuvarande eller före detta kokainmissbrukare – som tillhör en icke-representativ minoritet – är dock benägen till en selektionsbias och kommer därför sannolikt att leda till överskattningar när de generaliseras till majoriteten av andra, oselekterade populationer. Det råder ingen tvekan om att kokain initialt kan vara mycket givande för vissa utsatta individer [7]-[10]; huruvida detta är sant i den stora majoriteten av andra oselekterade individer återstår att visa [11]-[13]. På samma sätt, även om det inte råder någon tvekan om att de flesta försöksdjur enkelt själv administrerar kokain när inga andra värdefulla val finns tillgängliga, ger dessa bevis i sig inte information om dess relativa värde jämfört med andra icke-drogbelöningar. I själva verket, sedan Pickens och Thompsons framträdande verk 1968 [14], jämförelsevis lite forskning har utförts på försöksdjur för att kvantifiera det relativa värdet av kokain (dvs. i jämförelse med icke-drogbelöning) [15], [16].
Nyare forskning på (ovalda) råttor – den i särklass mest använda djurmodellen inom experimentell beroendeforskning [17] – har avslöjat att det relativa värdet av kokain är förvånansvärt svagare än man tidigare trott [18]-[21]. Till exempel, med hjälp av en tillförlitlig beteendeekonomisk metod, uppskattades det nyligen hos hungriga råttor från olika stammar att belöningsvärdet för mat är mycket större än belöningsvärdet för intravenöst kokain [18], [19], en skillnad som kvarstod även efter långvarig kokainsjälvadministration [20]. Med tanke på att mat är avgörande för överlevnad, tillväxt och reproduktion, kanske detta resultat inte är förvånande. Kanske mer överraskande, fann vi att när de erbjuds ett ömsesidigt exklusivt val, slutar de flesta råttor som inte är berövade lätt kokain för att dricka vatten sötat med ett kalorifritt sötningsmedel (dvs. sackarin) [21] – ett annars biologiskt oväsentligt givande beteende. Denna observation överensstämmer i allmänhet med tidigare forskning som visar att tillgång till alternativ belöning eller aktivitet som inte är drog kan minska självadministrationen av kokain hos både råttor, apor och människor [22]-[27]. Preferensen för sött vatten berodde inte på törst eller alkoholbeteende i sig och observerades trots maximal kokainstimulering och bevis för robust kokainsensibilisering [21] - en väldokumenterad beteendeförändring associerad med ihållande förändringar i hjärnans glutamat och dopaminsynapser [28]. Ännu mer överraskande är att de flesta råttor snabbt avstår från kokainanvändning till förmån för det icke-drogalternativet efter en längre period av självadministrering av kokain [21]. Tidigare forskning har visat att efter utökad tillgång till självadministration av kokain är det mer sannolikt att råttor ökar sin konsumtion av kokain [29], att arbeta hårdare [30] och att ta större risker för att söka och/eller få kokain [31]. Dessutom kokainets förmåga att återställa kokainsökning efter utrotning – ett beteendefenomen som har studerats avsevärt under de senaste 10 åren som en modell för återfall eller begär [32]-[34] – ökar också efter en lång period av självadministration av kokain [35]-[38]. Helt klart, alla dessa beteendeförändringar och andra [39] förråda en konsekvent ökning av det förstärkande och/eller stimulerande värdet av kokain efter långvarig droganvändning; men oavsett hur stor denna ökning av drogvärde är, är det uppenbarligen inte tillräckligt för att åsidosätta preferensen för icke-drogalternativet och främja kokainpreferensen hos råttor.
Som helhet visar dessa observationer att kokainanvändning har ett förvånansvärt lågt relativvärde hos den stora majoriteten av råttor. Målet med den aktuella serien av experiment var att testa tillförlitligheten och allmängiltigheten av denna slutsats och att mer exakt definiera kokainets position på värdestegen för råttor (dvs. preferensrangordning av olika belöningar) [40], [41]. Vi försökte först jämföra resultaten från valproceduren med resultaten från en annan belöningsbedömningsmetod – det progressiva förhållandet (PR) schemat [42]. PR-schemat är den mest använda metoden för att mäta belöningsvärdet av både läkemedels- och icke-drogbelöningar hos försöksdjur [43], [44]. I PR-schemat fungerar den maximala mängd arbete som råttor accepterar att göra för att få tillgång till en given belöning (dvs. brytpunkten), som ett index på dess värde. Intuitivt skulle man förvänta sig att råttor kommer att arbeta mer för att få tillgång till sin föredragna belöning (dvs sötvatten). Sedan, med hjälp av valproceduren, försökte vi exakt kvantifiera storleken på skillnaden i belöningsvärde mellan kokain och sött vatten. För att uppnå detta mål mätte vi punkten för likgiltighet (eller subjektiv jämlikhet) mellan de två belöningarna genom att justera kostnaden och koncentrationen av sött vatten [45], [46]. Vi uppskattade också det betingade incitamentsvärdet för varje typ av belöning genom att testa råttor under utrotning [47]. Slutligen utförde vi en retrospektiv analys av alla valexperiment som utförts i laboratoriet under de senaste 5 åren för att bedöma hur svårigheten av tidigare kokainanvändning påverkar preferensen. Sammantaget fann vi att oavsett hur tungt det var efter självadministration av kokain, värderar de flesta råttor kokain dåligt och avstår lätt från kokainanvändning när de erbjuds möjligheten att göra ett annat val. Endast en minoritet av råttorna, färre än 15 % vid den högsta svårighetsgraden av tidigare kokainmissbruk, föredrar kokain framför den alternativa icke-drogbelöningen, även när de är hungriga och erbjuds ett naturligt socker (dvs. sackaros) som kan lindra deras behov av kalorier. Den ihållande kokainpreferensen inför höga insatser tyder starkt på ett tillstånd av missbruk.
Resultat
Tjugonio råttor från 2 oberoende kohorter tränades först på alternerande dagliga sessioner att spakpress för att själv administrera antingen vatten sötat med sackarin (0.2 %) eller intravenöst kokain (0.25 mg) enligt ett schema med fast proportion 1 (FR) (dvs. , ett svar resulterar i en belöning) (se Figur 1 och Material och metoder). Efter förvärv och stabilisering av FR-prestanda testades de alternativt enligt ett progressivt förhållande 3 (PR) schema (dvs. svarskravet ökas inom sessionen i konstant steg 3 efter varje successiv belöning) av antingen sött vatten eller kokain. administrering för att mäta brytpunkten för varje typ av belöning (se Figur 1 och Material och metoder). Slutligen, efter stabilisering av PR-prestanda, testades samma råttor i valproceduren för diskreta försök för att bedöma individuella preferenser (se Figur 1 och Material och metoder). I FR-schemat administrerade de flesta råttor själv det maximala tillgängliga antalet belöningar som var begränsat till 30 per 3-timmars session. I PR-schemat svarade råttor mer kraftfullt för kokain än för sött vatten [F(1, 28) = 7.62, P<0.01; Figur 2A]. Som ett resultat tjänade de fler kokaindoser än söta belöningar [F(1, 28) = 11.38, P<0.01; Figur 2B] och brytpunkten för kokain var två gånger högre än brytpunkten för sött vatten [F(1, 28) = 11.4, P<0.01; Figur 2C]. Vid första anblicken tyder dessa fynd på att kokain har ett högre värde jämfört med den alternativa icke-drogbelöningen. Men när de fick välja ömsesidigt exklusivt mellan de två belöningarna, föredrog samma råttor som arbetade hårdare för kokain än för sött vatten i PR-schemat klart det senare framför det förra [från dag 1 till 6: t(28)>2.69, P<0.01; Figur 3A]. Preferensen för sött vatten var uppenbart den första valdagen och ökade därefter [F(5, 140) = 2.54, P<0.05].
Diagram över utformningen av det första experimentet.
Differentiell PR-svar för kokain och sackarin.
Jämförelse mellan belöningsbedömningsförfaranden.
För att ytterligare utforska ursprunget till denna uppenbara motsägelse mellan belöningsbedömningsprocedurer, beräknade vi för varje individ skillnaden i brytpunkter mellan vatten sötat med sackarin och kokain, därefter kallat PR-poäng. Positiva PR-poäng indikerar att råttor arbetade mer för sött vatten än för kokain och negativa PR-poäng indikerar motsatsen. Vi ritade sedan individuella PR-poäng med individuella preferenspoäng, mätt under valproceduren för diskreta försök (se Dataanalys i Material och metoder), och erhöll en graf med 2 indifferenslinjer centrerade vid 0, och definierade därigenom 4 kvadranter (Figur 3B). Poäng under den horisontella likgiltighetslinjen indikerar individuella råttor som föredrar kokain framför sött vatten (dvs 5 av totalt 29; 17.2%); poängen till vänster om den vertikala linjen indikerar råttor som arbetar mer för kokain än för sött vatten (dvs. 65.5 %). Uppenbarligen var majoriteten av individerna (65.5 %; öppna cirklar) beteendemässigt inkongruenta över belöningsbedömningsprocedurer: de arbetade mer (eller ungefär lika mycket) för kokain än för sött vatten i PR-schemat men föredrog det senare framför det förra under valet. Endast en minoritet av individerna (34.5 %; slutna cirklar) var beteendemässigt kongruenta. Denna kvalitativa analys bekräftades av en linjär regressionsanalys som visade att PR-poäng var en mycket dålig, men signifikant, prediktor för preferenspoäng [R2 = 0.15, F(1, 27) = 4.82, P<0.05].
Motsättningen i utfall mellan PR-schemat och valproceduren tyder på att dessa två belöningsbedömningsprocedurer inte helt mäter samma sak. Tidigare forskning tyder på att att svara för kokain enligt PR-schemat inte bara skulle spegla värdet av kokain utan också den direkt stimulerande effekten av kokainackumulering på arbetsresultat eller ansträngningsproduktion [48]-[50]. Denna senare, värdeoberoende effekt bör leda till en systematisk överskattning av det verkliga värdet av kokain i PR-schemat. Observera att kokainackumulering förhindras i valproceduren genom att prova med 10 minuters mellanrum (se Material och metoder). Tio minuter är den tid det tar för den stimulerande effekten av den planerade dosen kokain försvinner [21]. För att testa denna hypotes tränades ytterligare 23 råttor från 2 separata kohorter identiskt som beskrivits i föregående experiment, förutom att PR-schemat modifierades enligt följande: en fast fördröjning på 10 minuter lades till efter varje successiv belöning. Under varje fördröjning efter belöningen drogs den tillgängliga spaken in för att undvika utsläckning. Genom att lägga till en fördröjning efter belöningen minskade svaret avsevärt för kokain, men inte för vatten sötat med sackarin, jämfört med det tidigare experimentet utan fördröjning [Delay X Type of Reward: F(1, 50) = 5.84, P<0.05; Figur 4A]. Som ett resultat minskade brytpunkten för kokain till en nivå som var jämförbar med brytpunkten för sött vatten som förblev konstant [Delay X Type of Reward: F(1, 50) = 8.85, P<0.01; Figur 4B]. Detta resultat tyder nu på att de två belöningarna skulle vara lika värdefulla. Men återigen, när samma råttor fick välja antingen kokain eller sött vatten, uttryckte de en omedelbar och stark preferens för sött vatten [från dag 1 till 6 var preferenspoängen signifikant över likgiltighetsgränsen; t(22) >4.42, P<0.01]. Sammantaget avslöjar de två första experimenten oväntat att valproceduren är mer känslig och tillförlitlig för att bedöma det relativa värdet av kokain än PR-schemat, det senare är selektivt partiskt till förmån för kokain.
Effekter av förseningar efter belöning på PR som svarar för kokain.
För att definitivt utesluta den förvirrande effekten av kokainackumulering på bedömningen av dess relativa värde, mättes skillnaden i respons för kokain och vatten sötat med sackarin under utrotning i en separat grupp av råttor (n = 12). Dessa råttor har tidigare under en period av 6 månader fått 59 omväxlande dagliga FR-sessioner med självadministrering av kokain och sackarin, följt av 40 omväxlande dagliga PR-sessioner med självadministrering av kokain och sackarin som slutligen följdes av 52 valsessioner. Som ett resultat hade de själv administrerat 1296.7±54.4 intravenösa doser kokain motsvarande 324.2±13.6 mg kokain (vilket ungefär motsvarar 926 mg/kg). Under utrotningstestning hade råttor samtidigt tillgång i 45 minuter till spaken förknippad med kokain och till spaken förknippad med vatten sötat med sackarin men att svara på någon av spaken hade ingen programmerad konsekvens. Sålunda, under utsläckning, motiveras svaret av det betingade incitamentsvärdet som varje spak tidigare har förvärvat från sin tillhörande belöning. I överensstämmelse med deras pre-extinktion preferenspoäng [10.4±5.2% kokainval, t(11) = -7.60, P<0.01], men inte deras PR-resultat före utsläckning [brytpunkt för kokain: 65.0±7.8; brytpunkt för sött vatten: 31.6±2.5; F(1, 11) = 22.48, P<0.01], reagerade råttor mer ivrigt på spaken förknippad med sött vatten än på kokainspaken [F(1, 11) = 6.88, P<0.05; Figur 5A), särskilt inom de första 3 minuterna där skillnaden i att svara på de två spakarna var högst [Time X Type of Reward: F(14, 154) = 6.74, P<0.01; Figur 5B]. Detta resultat visar att när den direkt stimulerande effekten av kokain utesluts, arbetar råttor mer för att försöka få sött vatten än kokain.
Samtidigt utrotning av svar för kokain och sackarin.
Tillsammans med tidigare forskning [21], ovanstående serie av experiment tyder starkt på att för de flesta råttor är belöningsvärdet för intravenöst kokain svagare än värdet av vatten sötat med sackarin. Följande serie experiment syftade till att exakt kvantifiera storleken på denna skillnad i belöningsvärde med hjälp av en kostnadseffektanalys anpassad till valproceduren (se Material och metoder). I dessa experiment tränades råttor först att själv administrera kokain eller sackarin omväxlande dagar under ett FR1-schema för förstärkning som beskrivits ovan. Sedan testades de i den diskreta provvalsproceduren under minst 6 på varandra följande dagar till stabilisering av söt preferens (ingen ökande eller minskande trend under 3 på varandra följande dagar). I det första experimentet, som involverade 11 råttor, efter stabilisering av preferensen, ökades antalet svar som krävdes för att erhålla sött vatten (eller kostnaden) gradvis från 1 till 16 gånger det för kokain (fastställd till 2 svar per belöning) tills återföring av preferens och därmed identifiering av likgiltighetspunkten. Punkten för likgiltighet (eller ibland även kallad punkten för subjektiv jämlikhet) motsvarar den relativa kostnaden för vilken råttor väljer endera belöningen lika (se Material och metoder). Likgiltighetspoäng ger ett kontinuerligt gemensamt mått för att mäta och jämföra värdena på belöningar som är lika olika till sin natur som intravenöst kokain och sött vatten. Om till exempel punkten för likgiltighet mellan kokain och sackarin är lika med X, kan man dra slutsatsen att värdet av kokain är lika med värdet av sött vatten när kostnaden för det senare är X gånger större än kokainets. Som väntat, när kostnaden för vatten sötat med sackarin ökade, ändrade råttor gradvis sin preferens till kokain [F(4, 44) = 30.53, P<0.01; Figur 6A]. Till den högsta kostnaden (dvs. 16 gånger så stor som för kokain) ändrade praktiskt taget alla råttor sin preferens till kokain (dvs. 10 av totalt 11 råttor som inte föredrog droger). Observera att antalet genomförda valförsök inte påverkades av kostnaden för sackarin [F(4, 44) = 1.6, NS; Figur 6B]; detta visar att ändringen i preferenser inte påverkades av en generaliserad minskning av prestanda. Liknande resultat erhölls när den relativa kostnaden för sötvatten ökades på ett sätt inom sessionen [F(3, 33) = 22.54, P<0.01; Figur 6A, B], vilket tyder på att råttor fattade sitt ansträngningsbaserade beslut om en snabb, försök för försök omvärdering av de tillgängliga alternativen. Viktigt, i både bestämningar mellan och inom sessionen, nåddes likgiltighetspunkten när ansträngningen som krävdes för sött vatten var 7.8 (bestämning inom sessionen, R2 = 0.98, P<0.01) till 8.5 (bestämning mellan sessioner, R2 = 0.99, P<0.01) gånger det för kokain, beräknat genom kurvanpassning av procentuella data med normal sigmoidfunktion (se Material och metoder). Denna stora relativa kostnad tyder på att värdet av kokain är mycket lägre än värdet på vatten sötat med sackarin. Slutligen, för att ytterligare kvantifiera det relativa värdet av kokain, mättes punkten för likgiltighet (eller subjektiv jämlikhet) mellan kokain och sackarin inom en session som en funktion av koncentrationen av sackarin (0.0016–0.2 %) i en ytterligare grupp (n = 10) av råttor. Som väntat flyttades kostnadseffektkurvan för sackarinpreferens åt höger med ökande koncentrationer av sackarin [Sackarinkoncentration: F(3, 27) = 14.26, P<0.01; Figur 7A]. Som ett resultat, punkten för likgiltighet (all R2 var större än 0.96, P<0.01) mellan kokain och sackarin ökade linjärt upp till 8.3 med koncentrationen av sackarin [R2 = 0.988, P<0.01; Figur 7B]. Av särskilt intresse var likgiltighetspunkten nära 1 vid den lägsta sackarinkoncentrationen (dvs. 0.0016%), vilket tyder på att värdet av intravenöst kokain i genomsnitt var lika med värdet av denna låga koncentration hos majoritetsråttorna.
Uppskattning av det relativa värdet av kokain.
Uppskattning av det relativa värdet av kokain som en funktion av sackarinkoncentrationen.
Även om den stora majoriteten av råttor föredrar sött vatten framför intravenöst kokain, upptäckte vi konsekvent över experiment existensen av en liten minoritet av kokainföredragande råttor (dvs kokainval >50% av genomförda försök). För att uppskatta frekvensen av kokainföredragna råttor, genomförde vi en retrospektiv analys av alla valexperiment som utförts i laboratoriet under de senaste 5 åren, inklusive de flesta råttorna i den aktuella serien av experiment. Denna analys avslöjar att endast 16 råttor av totalt 184 (dvs. 8.7%) föredrar intravenöst kokain framför vatten sötat med sackarin. För att bedöma effekten av tidigare kokainanvändning på frekvensen av kokainföredragande råttor, beräknades den totala mängden självadministrerat kokain före valtestning för varje individ. Denna mängd varierade från 0 till 486.8 mg (eller ungefär 1388 mg/kg) och delades upp i 5 lika intervall (dvs. 75 mg vardera, förutom det sista öppna intervallet), vilket definierade 5 ökande svårighetsgrad av tidigare kokainmissbruk (Figur 8A). Frekvensen av personer som föredrar kokain ökade något men inte signifikant med svårighetsgraden av tidigare kokainmissbruk [Kruskal-Wallis, H(4, 184) = 3.47)] och förblev under 15 % (Figur 8B). På samma sätt, även om preferensen för sött vatten minskade något med svårighetsgraden av tidigare kokainmissbruk, var det uppenbarligen ingen förändring i preferens, inte ens vid den högsta svårighetsgraden [F(4, 179) = 2.42, P<0.05; Figur 8C]. Sålunda, oavsett hur tungt det har varit tidigare självadministration av kokain, förblir kokainpreferensen hos råttor sällsynt och exceptionell.
Effekter av svårighetsgraden av tidigare kokainbruk på kokainvalet.
Viktigt är att kokainpreferensen hos kokainföredrande råttor inte berodde på enbart bristande intresse för eller motvilja mot vatten sötat med sackarin, eftersom dessa råttor under provtagningsförsöken med sackarin drack lika mycket som majoriteten av andra råttor (0.28±0.02 mot 0.31±) 0.01 ml per 20-s åtkomst). Under kokainprovtagningsförsök svarade däremot kokainföredragande råttor mycket snabbare än majoriteten av andra råttor på att själv administrera kokain [16.0±7.6 mot 54.1±6.5 s; F(4, 179) = 2.42, P<0.05], vilket tyder på en större aviditet för läkemedlet. Denna relativa aviditet för kokain hos kokainföredrande råttor berodde inte på en ökad känslighet för de psykomotoriska effekterna av intravenöst kokain [Grupp: F(1, 182) = 1.09, grupp x tid: F(9, 1638) = 1.72; Figur 9], såsom mätt efter den första kokainprovtagningen i genomsnitt över de senaste 3 stabila testsessionerna. Slutligen, för att bättre bestämma styrkan av kokainpreferensen, en undergrupp av kokainföredrande råttor (n = 3) med en historia av FR1-träning (24 omväxlande dagliga sessioner med självadministrering av kokain och sackarin) och valtestning (36 dagliga sessioner) var kroniskt matbegränsad (dvs. 85 % av deras kroppsvikt för fri mat) och tillåts att välja mellan kokain och sackarin (0.2 %) och sedan mellan kokain och sackaros (10 %) – ett naturligt kalorisocker. Målet med att ersätta sackarin med sackaros i matbegränsade råttor var att öka värdet och insatsen av sötvatten genom att öka dess fysiologiska användbarhet (dvs. lindring av kaloribehov). Överensstämmer med tidigare forskning [51], visade vi i en pilotstudie att matbegränsade råttor till stor del föredrar och arbetar hårdare för att få sackaros (5–20 %) än den högsta koncentrationen av sackarin som testats (0.2 %) (Eric Augier och Serge Ahmed, opublicerade data). Dessutom, i en parallell undergrupp av matbegränsade råttor som inte föredrar droger (n = 8, samma kohort och beteendehistoria som de 3 kokainföredragande råttorna som beskrivs ovan), sackaros skiftade både nedåt och åt höger kostnadseffektkurvan för söt preferens framför kokain [Typ av sötningsmedel: F(1, 7) = 21.62, P<0.01; Figur 10A]. Som ett resultat ökade likgiltigheten mellan de två belöningarna från cirka 5.5 till 10.6, vilket tyder på att sackaros plus behovet av kalorier nästan fördubblade värdet av sött vatten jämfört med kokain. I motsats till kokainföredrande råttor ändrade sackaros inte nämnvärt preferensen för kokain trots behovet av kalorier [Typ av sötningsmedel: F(1, 2) = 15.43; Figur 10B].
Kokain-inducerad rörelse som en funktion av individuella preferenser.
Effekter av matrestriktioner på kokainpreferens.
Diskussion
Flera viktiga egenskaper hos den aktuella serien av experiment måste uttryckligen anges i början för att undvika efterföljande förvirring och/eller feltolkningar. För det första, förutom det sista experimentet med sackaros, var råttor varken föda eller vattenberövade under experimentella tester, så preferensen för sött vatten – den alternativa icke-drogbelöningen – framför kokain som rapporteras här beror inte på hunger eller törst. För det andra, i den aktuella studien, tränades råttor först att själv administrera kokain och sött vatten flera omväxlande dagar innan de testades i valproceduren. Denna inledande utbildning visade tydligt att råttor enkelt själv administrerar intravenöst kokain när inget annat val är tillgängligt – vilket rikligt visat i tidigare forskning [29], [31], [47], [52]. För det tredje, i valet av diskreta försök fick råttor välja antingen kokain eller vatten sötat med sackarin (dvs valet var ömsesidigt exklusivt eller antingen/eller). Som ett resultat uteslöt valet av en belöning den alternativa belöningen, vilket gjorde det möjligt för enskilda råttor att uttrycka sina preferenser. Med andra ord, att välja en belöning motsvarade ett avstående från den alternativa belöningen. När det gäller alternativkostnader motsvarade kostnaden för att välja en belöning förlusten av möjligheten att få den andra belöningen. För det fjärde begränsades antalet valförsök till endast 8 per dag för att förhindra den eventuella förvirrande effekten av differentiell belöningsmättnad på bedömningen av belöningsvärdet [53]. I en pilotstudie fann vi dock att en ökning av antalet dagliga valförsök upp till 40 inte hade någon signifikant inverkan på söta preferenser (Sarah Dubreucq, Lauriane Cantin och Serge Ahmed, opublicerade resultat). För det femte var försöken fördelade med minst 10 minuter för att minska den direkta anorexigena effekten av kokainackumulering på intagsbeteende - en effekt som uppenbarligen skulle påverka valet till förmån för kokain, som föreslagits i annan forskning [54]. Men som visas här var denna försiktighetsåtgärd överflödig eftersom de flesta råttor spontant väljer att inte fortsätta ta kokain. Observera att rättegångsavstånd i sig inte är orsaken till råttors relativa brist på intresse för kokain. När inget annat val är tillgängligt, administrerar råttor själv kokain med påtvingade mellandosintervall på 10 minuter eller ännu längre [21], [55]. Slutligen är enhetsdosen kokain som testats i den serie av experiment som beskrivs ovan (dvs. 0.25 mg per infusion) en måttlig till hög dos som har använts i stor utsträckning i tidigare forskning på råttor [29], [38], [56]. Faktum är att, som visats i en tidigare studie, fortsatte de flesta råttor att föredra vatten sötat med sackarin även när enhetsdosen av kokain ökades sex gånger, från 6 upp till den subkonvulsiva dosen på 0.25 mg [21]. Viktigt är att bristen på effekter av kokaindoser på sötts preferens också sågs efter utökad droganvändning och eskalering av intaget, vilket tyder på att det maximala värdet av kokain är lägre än värdet av sött vatten [21]. Dessa fynd förklarar varför resten av denna diskussion fokuserar på det relativa värdet av kokain oberoende av dess dos.
Sammantaget och med tanke på ovanstående information visar den aktuella studien att oavsett hur tungt det var efter självadministration av kokain, så ger den stora majoriteten av råttorna lätt och nästan helt upp kokainanvändning för att delta i en annan givande aktivitet som är biologiskt oväsentlig (dvs. att dricka vatten sötat med ett kalorifritt sötningsmedel är inte nödvändigt för tillväxt, överlevnad och/eller reproduktion). Endast en liten minoritet av råttorna, färre än 15 % vid den högsta svårighetsgraden av tidigare kokainmissbruk, fortsätter att ta kokain trots möjligheten att göra ett annat val. Viktigt är att dessa få råttor fortsatte att föredra kokain, även när de var hungriga och erbjöd ett naturligt socker (dvs. sackaros) som kunde lindra deras behov av kalorier, ett beteende som påminner om drogberoende (dvs fortsatt droganvändning på bekostnad av andra viktiga aktiviteter eller yrken). Däremot tyder den snabba, självinitierade avhållsamheten från kokainanvändning hos den stora majoriteten av råttor starkt på att värdet av intravenöst kokain är svagare än man tidigare trott. Till stöd för denna tolkning avslöjade en systematisk kostnadseffektanalys hos dessa råttor att kokain är lågt på deras värdetrappa, nära den lägsta koncentrationen av sötvatten. Denna hedoniska position kan visualiseras i en enda graf som representerar fördelningen av likgiltighetspunkterna som motsvarar de olika alternativen till kokain som testats i den aktuella serien av experiment (Figur 11). Det låga värdet av kokain förklarar varför det betingade incitamentvärdet för den spak som är associerad med kokain, mätt under utrotning, förblir relativt låg, trots mer än 1000 upprepade självadministration av kokain från denna spak. Det svaga relativa värdet av intravenöst kokain kan också förklara varför i en tidigare studie, en sexfaldig ökning av kokaindosen (från 6 till maximalt 0.25 mg) uppenbarligen inte var tillräcklig för att ändra preferensen till kokain, även efter utökad tillgång till kokain självförvaltning [21]. Slutligen kan det också bidra till att förklara varför man studerar kokainpreferens, det är ofta nödvändigt att öka kostnaderna för den alternativa belöningen [57], [58]. Till exempel, i flera nya studier på apor, var kostnaden för kokain (dvs. FR10) mycket lägre än kostnaden för mat (dvs. FR100), vilket gynnar kokainpreferensen [57], [58]. Som visas här, när kostnaden för sött vatten är mycket högre än kostnaden för kokain, föredrar även råttor kokain.
Kokainets position på värdestegen för råttor.
Detta resultatmönster (dvs kokainabstinens hos de flesta råttor, kokainpreferens hos få råttor) skulle kunna tolkas som bevis för motståndskraft och sårbarhet för kokainberoende [16]. Specifikt skulle det kunna tyda på att endast en minoritet av råttor skulle vara sårbara för denna störning bland en stor majoritet av de motståndskraftiga, det vill säga individer som inte konstitutivt kan utveckla beroende även efter omfattande droganvändning. I standardexperimentella miljöer utan något val än droganvändning, skulle motståndskraftiga råttor ta kokain bara som standard av andra alternativ. Deras beteende skulle vara "bara en förväntad reaktion" på en onormal situation (dvs. brist på val eller möjlighet) och skulle inte nödvändigtvis återspegla en underliggande missbruksrelaterad dysfunktion [16]. Tolkningen i termer av motståndskraft och sårbarhet för beroende stämmer väl överens med vad vi vet om drogberoendes epidemiologi i allmänhet och kokainberoende i synnerhet. För det första, bland befolkningen i allmänhet i åldrarna 15–54 år, utvecklar cirka 12–16 % av dem som någonsin har provat kokain kokainberoende [59], [60]. För det andra, bland nyligen börjat kokainmissbrukare, blir endast en minoritet (från 4 till 16 % beroende på den valda latenta klassmodellen) beroende av kokain inom 24 månader efter att ha börjat använda kokain. [61]. Sammantaget visar dessa epidemiologiska fynd att den stora majoriteten av mänskliga kokainmissbrukare inte så småningom blir beroende av drogen, en slutsats som tydligen överensstämmer med mönstret för kokainval som observeras här hos råttor. Det är dock viktigt att notera att tolkningen av dessa fynd i termer av motståndskraft mot kokainberoende är känslig och långt ifrån tydlig för närvarande. Det är möjligt att de flesta mänskliga kokainanvändare inte utvecklar beroende, inte för att de är motståndskraftiga, som hypotesen här, utan bara för att de inte har använt kokain i tillräckligt stor utsträckning (t.ex. på grund av icke-gynnsamma miljöer). För att välja mellan dessa två möjligheter måste man helst först selektivt identifiera bland personer som någonsin provat kokain vilka som använt det i stor utsträckning och sedan uppskatta hur många av dem som är motståndskraftiga mot kokainberoende (dvs. inte utvecklade ett beroende trots omfattande kokainmissbruk). .
Kanske det närmaste man kunde komma detta epidemiologiska ideal var i en nu gammal, men fortfarande giltig, epidemiologisk undersökning av heroinanvändare av Lee Robins och medarbetare. [62], [63]. Denna undersökning rapporterade att den stora majoriteten av Vietnamveteraner (cirka 90 %) som hade använt heroin på en kronisk basis i Vietnam, till och med till den grad att de blev fysiskt beroende, lätt och varaktigt slutade använda heroin när de återvände från kriget [62]. Endast en minoritet av individerna (dvs. cirka 10 %) fortsatte att använda heroin efter kriget. För soldater under Vietnamkriget fanns det små möjligheter och heroinanvändning var ett billigt, lättillgängligt sätt att göra "livet i tjänst uthärdligt", "njutbart" och förmodligen också att klara av krigets stress. [62]. Som ett resultat använde soldater troligen heroin som standard i andra belönings- eller outletaktiviteter, och inte för att de förlorade makten att kontrollera droganvändningen. Denna tolkning förklarar varför så många veteraner (dvs. 90 %) slutade använda heroin när de återvände till hemmet trots kronisk och tung heroinanvändning och bevis på fysiskt beroende. Trots kronisk, kraftig heroinkonsumtion förblev de flesta soldater resistenta mot heroinberoende. Som diskuterats ovan finns det för närvarande inga likvärdiga bevis för motståndskraft mot kokainberoende efter kronisk, tung kokainmissbruk hos människor. Det finns dock några möjliga bevis för motståndskraft mot beroendeliknande beteende till kronisk dopaminerg medicin vid Parkinsons sjukdom [64], [65]. För att kompensera för den irreversibla förlusten av mellanhjärnans dopaminneuroner på grund av neurodegeneration, får Parkinsonpatienter kroniska dopaminersättningsterapier, inklusive dopaminprekursorn levodopa och direkta dopaminagonister. Under loppet av denna kroniska behandling utvecklar några av dessa patienter så småningom överdriven användning av dopaminerga läkemedel, trots allvarliga motoriska och icke-motoriska biverkningar [64]. Detta syndrom kallas ofta dopamin dysregulation syndrome och antas för närvarande vara besläktat med ett tillstånd av drogberoende [65]. Det uppskattas för närvarande att detta syndrom endast förekommer hos en liten minoritet av patienter som kroniskt behandlas med dopaminersättningsterapier (dvs färre än 10%), vilket tyder på att den återstående majoriteten sannolikt kommer att vara motståndskraftig mot detta syndrom trots år av dopaminerga mediciner. .
Hypotesen att hos råttor, precis som hos människor, bara en minoritet av kokainmissbrukarna skulle bli beroende av kokain, även efter omfattande droganvändning, nåddes tidigare av andra forskare med ett annat tillvägagångssätt. [66], [67]. Även om det är innovativt och intressant, bör giltigheten av detta tillvägagångssätt ändå övervägas med försiktighet. Den baserades på en cirkulär statistisk metod som på förhand och godtyckligt begränsar den maximala möjliga frekvensen av råttor med ett beroendeliknande beteende till färre än 33 %. Specifikt ansågs en individ presentera ett specifikt beroendeliknande kriterium (t.ex. en förhöjd brytpunkt för kokain i det vanliga PR-förfarandet) om dess poäng för detta kriterium var över 66th percentilen av fördelningen. Uppenbarligen förutsätter en sådan frekvensberoende identifieringsmetod från början att ett beroendeliknande beteende bara kan drabba en minoritet av råttor, med en fördefinierad maximal frekvens på 33 %. Att lägga till andra frekvensberoende kriterier kunde bara ytterligare minska denna frekvens i proportion till graden av rangkorrelation mellan de valda kriterierna. Således, när den tillämpas, kan denna metod endast identifiera ett fåtal råttor med additionsliknande beteende. Det faktum att det inte av designen tillåter ett annat resultat väcker farhågor om dess giltighet när det gäller att objektivt mäta frekvensen av råttor som är motståndskraftiga eller sårbara för beroendeliknande beteende. Däremot sätter den valbaserade selektionsmetoden som förespråkas här inte godtyckligt och i förväg någon gräns för den maximala möjliga frekvensen av kokainföredragande råttor. I princip skulle denna frekvens kunna nå 100 %. Det faktum att den observerade maximala frekvensen var mycket lägre (dvs. ~15 %) kunde objektivt visa, snarare än att förutsätta, att kokainberoende bara drabbar en minoritet av individer bland ett hav av motståndskraftiga. Ur metodisk synvinkel skulle den valprocedur som beskrivs här kunna fungera som en tillförlitlig såll för kokainberoende: den skulle sålla bort majoriteten av motståndskraftiga råttor och bara behålla de få råttor som potentiellt är beroende av kokain [16]. Till stöd för giltigheten av denna valbaserade urvalsmetod visade en nyligen genomförd laboratoriestudie på människor att när de ges ett val mellan kokain och pengar, väljer kokainanvändare med en DSM-baserad diagnos av beroende kokain oftare än icke-beroende länge. kokainmissbrukare, oavsett hur mycket pengar som finns tillgängliga [68].
De nuvarande resultaten har flera potentiella implikationer för framtida forskning i djurmodeller för drogberoende. För det första skiljde inte tidigare forskning om drogberoendes neurobiologi mellan djur med omfattande kokainmissbruk den minoritet som är sårbar för missbruk från den majoritet som är motståndskraftig. [16]. Som ett resultat är hjärnförändringar associerade med omfattande kokainmissbruk svåra att tolka och deras betydelse för kokainberoendes neurobiologi är osäker. Eftersom motståndskraftiga djur verkar representera en stor majoritet, är det troligt att många av dessa hjärnförändringar inte representerar neurobiologiska korrelat av beroende utan snarare andra, kanske normala, neuroplastiska anpassningar till den nya, framträdande och unika upplevelsen av upprepad kokainanvändning. . Ett sätt att klargöra denna viktiga fråga i framtida neurobiologisk forskning skulle vara att systematiskt jämföra och kontrastera minoriteten av utsatta råttor med den motståndskraftiga majoriteten. Sådana jämförelser kan verkligen ge oöverträffade insikter i de neurobiologiska dysfunktioner som antas ligga bakom kokainberoende. För det andra, en annan relaterad implikation av föreliggande fynd är deras relevans för prekliniska modeller för självadministration av kokain för utveckling av mediciner för att behandla kokainberoende. Trots många förhoppningar och löften har experimentell forskning om djurmodeller för drogberoende hittills endast haft en blygsam translationell effekt. Denna forskning identifierade många potentiella farmakologiska mål men ingen effektiv behandling för kokainberoende [69]. Det behövs alltså helt klart mer för att förbättra den prediktiva validiteten av prekliniska självadministrationsmodeller i läkemedelsutveckling för missbruk. I detta sammanhang kan screening av mediciner för deras förmåga att minska kokainvalet i den lilla undergrupp av råttor som föredrar kokain bättre förutsäga deras terapeutiska effekt hos kokainberoende människor.
Ett av de ursprungliga målen med denna studie var att bekräfta det svagare värdet av kokain, som uppskattats i valet av diskreta prövningar, med hjälp av det klassiska PR-schemat. Paradoxalt nog fann vi att även om de flesta råttor till stor del föredrar sött vatten framför intravenöst kokain, arbetar de ändå hårdare för att få det senare än det förra. Ytligt påminner detta resultat om det väldokumenterade "preferensomkastande"-fenomenet i forskning om ekonomiskt beslutsfattande hos människor (dvs försökspersoner föredrar det ekonomiska alternativet som de värderade mindre i oberoende utvärdering) [70]. Ytterligare undersökningar visade dock att denna uppenbara paradox beror på en selektiv fördom i PR-schemat för självadministration av kokain. I motsats till brytpunkten för sött vatten som bara beror på värdet av denna belöning, beror brytpunkten för kokain på två oberoende effekter: belöningsvärdet för den schemalagda kokaindosen och den direkt stimulerande effekten av kokainackumulering på arbetsresultat eller ansträngningsproduktion [48], [50]. När den sistnämnda, värdeoberoende effekten av kokain minimeras genom att minska kokainackumuleringen med tvångsförsök, minskar brytpunkten för kokain avsevärt, ett fynd som överensstämmer med tidigare forskning på apor [49], [71]. Viktigt, åtkomst av avstånd till sötvatten hade ingen liknande inverkan. Sålunda ger kokainets brytpunkt, mätt i standard-PR-schemat, en partisk överskattning av värdet av kokain som delvis förklarar den uppenbara avvikelsen med valproceduren. Det är möjligt att med mer spridda PR-försök (dvs. mer än 10 minuter), kunde brytpunkten för kokain ha sjunkit under den för sött vatten – en förutsägelse som motiverar ytterligare forskning. Denna selektiva fördom förklarar förmodligen också varför brytpunkten för kokain i allmänhet är mycket högre än för andra icke-stimulerande droger (t.ex. heroin; nikotin) som ändå är lika eller till och med mer beroendeframkallande än kokain hos människor [72]-[74]. Således avslöjar den aktuella serien av experiment oväntat att standard-PR-schemat är selektivt partiskt till förmån för kokain och är således mindre lämpat än valproceduren för att bedöma dess relativa värde. Icke desto mindre är det värt att nämna här att även om den aktuella studien visar vikten av kokainets stimulerande egenskaper i de mycket höga kokainbrytpunkter som vanligtvis uppnås i det vanliga PR-schemat, tenderar människor att själv administrera kokain i ett liknande hetsmönster, med relativt korta intervaller. mellan på varandra följande doser. Därför är det kanske mest giltigt, för vissa forskningsfrågor, att studera ett kort mellandosintervall av självadministrering hos råttor, även om den resulterande brytpunkten speglar både förstärkande och stimulerande effekter.
Slutligen, trots många fördelar, har den valbaserade metoden för identifiering av individer som är sårbara eller motståndskraftiga mot drogberoende också vissa potentiella begränsningar. Den kanske viktigaste begränsningen är att enbart brist på drogpreferens inte alltid är tillräckligt bevis för att utesluta kokainberoende. Till exempel, i fallet med polysubstansberoende, utesluter inte preferensen för ett ämne missbruk av det andra ämnet. Det indikerar bara att det ena beroendet är starkare än det andra. I den aktuella studien, om råttor råkade vara beroende av både sött vatten och kokain, skulle söta preferenser bara indikera att beroende av sött vatten är starkare än kokainberoende. Men även om det finns växande bevis för mat- och sockerberoende hos både djur och människor [75]-[78], medberoende av sött vatten och kokain är osannolikt att förklara mönstret för kokainval som rapporteras här. I en tidigare studie ändrade råttor med omfattande kokainbruk sin preferens till sött vatten inom bara två dagar och efter att ha druckit mindre än 5 ml sött vatten [21]. Det verkar mycket osannolikt att de flesta råttor skulle kunna bli beroende av sött vatten så snabbt och efter en så låg konsumtionsnivå. Dessutom tyder nyare uppskattningar på människor att matberoende, liksom kokainberoende, bara skulle påverka en minoritet av människor [76]. Slutligen och mer generellt måste man beakta vid tolkningen av föreliggande resultat att preferens ensam förmodligen inte heller är tillräckligt bevis för att sluta sig till ett beroendetillstånd. Det som också räknas är alternativkostnaderna eller negativa konsekvenser förknippade med en preferens. Om man till exempel visade att honråttor systematiskt föredrar sina valpar framför kokain, skulle man med rätta inte betrakta denna preferens som en återspegling av missbruk. Moderns preferens för ungar är ett normalt, förväntat beteende hos honråttor och det associerade avståendet från kokainanvändning är inte en stor kostnad. Däremot, om få honråttor föredrog kokain på bekostnad av deras valpars välbefinnande och/eller överlevnad, skulle man vara grundad på att tolka en sådan preferens som möjliga bevis för beroendeliknande beteende [79]-[81]. I det här fallet är alternativkostnaden faktiskt relativt allvarlig eftersom den leder till en minskning av den biologiska konditionen. I den aktuella studien var preferensen för kokain associerad med minskad välfärd, eftersom det kvarstod även när råttor var hungriga och erbjöd ett naturligt socker (dvs. sackaros) som kunde lindra deras behov av kalorier. Den ihållande kokainpreferensen inför höga insatser tyder starkt på ett tillstånd av missbruk.
Material och metoder
Etik uttalande
Alla experiment utfördes i enlighet med institutionella och internationella standarder för skötsel och användning av laboratoriedjur [UK Animals (Scientific Procedures) Act, 1986; och tillhörande riktlinjer; Europeiska gemenskapernas rådsdirektiv (86/609/EEG, 24 november 1986) och de franska direktiven om användning av försöksdjur (dekret 87–848, 19 oktober 1987)]. Alla försök har godkänts av Veterinärvårdskommittén Gironde, avtalsnummer B-33-063-5, 13 juni 2006.
Ämnen
Naiva, ung vuxen (2 och en halv månader gammal i början av experiment), han-, Wistar-råttor (n = 83, Charles River, Frankrike) avslutade denna studie. Råttor inhystes i grupper om två eller tre och hölls i en ljus- (12 timmars omvänd ljus-mörk-cykel) och temperaturkontrollerad vivarium (22°C). Alla beteendetester inträffade under den mörka fasen av ljus-mörk-cykeln. Mat och vatten var fritt tillgängligt i hemburarna, förutom när det anges nedan. Födan bestod av standard råttfoder A04 (SAFE, Scientific Animal Food and Engineering, Augy, Frankrike) som innehöll 60 % kolhydrater (främst majsstärkelse), 16 % proteiner, 12 % vatten, 5 % mineraler, 3 % av fett och 4 % cellulosa. Inget syntetiskt eller raffinerat socker tillsattes.
Apparater
Tolv identiska operanta kammare (30×40×36 cm) användes för all beteendeträning och testning (Imétronic, Frankrike). Alla kammare var placerade bort från kolonirummet i ett svagt upplyst rum. De var individuellt inneslutna i träskåp utrustade med en vitt brushögtalare (45±6 dB) för ljuddämpning och en frånluftsfläkt för ventilation. Varje kammare hade ett gallergolv i rostfritt stål som möjliggjorde uppsamling av avfall i en avtagbar bricka som innehöll majssågspån. Varje kammare bestod av två ogenomskinliga operanta paneler på höger och vänster sida, och två klara plexiglasväggar på baksidan och framsidan (framsidan motsvarar ingången/utgången av kammaren). Varje operantpanel innehöll en automatiskt infällbar spak, monterad på mittlinjen och 7 cm ovanför gallret. Den vänstra operantpanelen var också utrustad med en infällbar, cylinderformad drickspip, 9.5 cm till vänster om spaken och 6 cm ovanför gallret. En lickometerkrets tillät övervakning och registrering av slickning. En vit ljusdiod (1.2 cm OD) monterades 8.51 cm ovanför varje spak (från mitten av dioden). Varje kammare var också utrustad med två sprutpumpar placerade utanför, på toppen av skåpet. En sprutpump styrdes av den vänstra spaken och levererade vatten sötat med sackarinlösning till drickspipen genom en silastisk slang (Dow Corning Corporation, Michigan, USA). Den andra pumpen styrdes av den högra spaken och levererade läkemedelslösning genom en Tygon-slang (Cole Parmer) ansluten via en enkanalig vätskesvivel (Lomir biomedical inc., Quebec, Kanada) till en kanylkoppling (Plastics One, Roanoke, VA) ) på baksidan av djuret. Tygon-slangen skyddades av en fjäder av rostfritt stål (0.3 cm ID, 0.5 cm OD) (Aquitaine Ressort, Frankrike) som var upphängd i mitten av kammaren från den vridbara tjuderkopplingen. Vertikala rörelser av djuret kompenserades för med hjälp av en balanserande vikt-remskiva-anordning.
Kirurgi
Bedövade råttor [kloralhydrat (500 mg/kg, ip, JT Baker, Nederländerna) eller en blandning av xylazin (15 mg/kg, ip, Merial, Frankrike) och ketamin (110 mg/kg, ip, Bayer Pharma, Frankrike )] preparerades kirurgiskt med silastiska katetrar (Dow Corning Corporation, Michigan, USA) i den högra halsvenen som lämnade huden i mitten av ryggen cirka 2 cm under skulderbladen. Efter operationen sköljdes katetrar dagligen med 0.15 ml av en steril antibiotikalösning innehållande hepariniserad koksaltlösning (280 IU/ml) (Sanofi-Synthelabo, Frankrike) och ampicillin (Panpharma, Frankrike). När ett kateterläckage misstänktes kontrollerades kateterns öppenhet genom en intravenös administrering av etomidat (1 mg/kg, Braun Medical, Frankrike), ett kortverkande icke-barbituratbedövningsmedel. Beteendetester började 7–10 dagar efter operationen.
Schema med fast kvot
Operanta- och drognaiva råttor tränades under ett fast förhållande 1 (FR1) schema för självadministration av sackarin och kokain på alternerande dagliga sessioner, sex dagar i veckan. På sackarinsessioner förlängdes spaken förknippad med sackarin för att markera början av sessionen och för att signalera sackarintillgänglighet; den andra spaken förblev indragen. En spak som tryckte på den förlängda spaken belönades med en 20-sekunders tillgång till vatten sötat med 0.2 % natriumsackarin tillfört i den intilliggande drickskoppen och initierade en åtföljande 20-s time-out-period som signalerades av tändningen av signalljuset ovanför spaken. Under time-outperioden hade svaret inga planerade konsekvenser. De första 3 sekunderna av varje 20-s tillgång till sött vatten fylldes drickskoppen automatiskt med sött vatten; under de följande 17 sekunderna erhölls ytterligare volymer sötvatten vid behov genom frivillig slickning (cirka 0.02 ml per 10 slickar). Observera att 20 s tillgång till sötvatten är en kort tillgång. När de får fri tillgång till sött vatten kan råttor dricka nästan kontinuerligt under 20–30 minuter innan de blir mättade (Magalie Lenoir och Serge Ahmed, opublicerade observationer). På kokainsessioner utökades spaken förknippad med kokain för att markera början av sessionen och för att signalera kokaintillgänglighet; spaken förknippad med sackarin förblev indragen. En spak som tryckte på den förlängda spaken belönades med en intravenös dos på 0.25 mg kokain i en volym av 0.15 ml levererad under 4 s och initierade en åtföljande 20-s time-out-period som signalerades av tändningen av signalljuset ovanför spaken . Under time-outperioden hade svaret inga planerade konsekvenser. Kokaindosen har använts flitigt i tidigare forskning om självadministration av kokain, inklusive vår egen forskning. Sessioner avslutades efter att råttor hade tjänat maximalt 30 sackarin- eller kokainbelöningar eller 3 timmar hade förflutit.
Schema med progressivt förhållande
Efter träning i FR-schemat testades råttor under ett linjärt progressivt förhållande (PR)-schema för självadministrering av sackarin eller kokain på alternerande dagliga sessioner, sex dagar i veckan. Alla experimentella förhållanden var identiska med de som användes i FR-schemat, förutom att svarskravet eller kostnaden ökades inom sessionen med en konstant ökning på 3 efter varje sötsak eller kokainbelöning (dvs. 1, 4, 7, 10 ...). PR-sessioner avslutades efter att 30 minuter hade förflutit utan belöning eller 4 timmar hade förflutit. Efter stabilisering av prestanda upphörde PR-sessioner inom 3 timmar för de flesta råttor (dvs över 90%). Brytpunkten definierades som det senast genomförda svarskravet och motsvarade det totala antalet belöningar som tjänats in under PR-sessionen.
Val av procedur för diskreta försök
Råttorna fick välja under flera på varandra följande dagliga sessioner mellan spaken förknippad med kokain (spak C) och spaken associerad med vatten sötat med sackarin (spak S) på ett diskret provvalsförfarande. Varje daglig valsession bestod av 12 diskreta försök, fördelade på 10 minuter, och uppdelade i två på varandra följande faser, provtagning (4 försök) och val (8 försök). Under provtagningen började varje försök med presentationen av en enda spak i denna alternativa ordning: C – S – C – S. Spak C presenterades först för att förhindra en eventuell läkemedelsinducerad smakaversion eller negativa affektiva kontrasteffekter. Om råttor svarade inom 5 minuter på den tillgängliga spaken belönades de med motsvarande belöning (dvs 0.25 mg kokain tillfört intravenöst eller 20 sekunders tillgång till vatten sötat med 0.2 % sackarin, som beskrivits ovan). Belöningsleverans signalerades genom indragning av spaken och en 40-s belysning av signalljuset ovanför denna spak. Om råttor inte svarade inom 5 minuter drogs spaken tillbaka och ingen signallampa eller belöning levererades. Under provtagningen fick råttor således utvärdera varje belöning separat innan de gjorde sitt val. Under valet började varje försök med samtidig presentation av båda spakarna S och C. Råttor var tvungna att välja en av de två spakarna. Under valet signalerades belöningsleverans genom indragning av båda spakarna och en 40-s belysning av signalljuset ovanför den valda spaken. Om råttor inte svarade på någon av spakarna inom 5 minuter drogs båda spakarna tillbaka och ingen signallampa eller belöning levererades. Svarskravet för varje belöning sattes till 2 på varandra följande svar för att undvika eventuella oavsiktliga val. Ett svar på den alternativa spaken innan svarskravet är uppfyllt återställer det. Svarsåterställning inträffade dock mycket sällan.
Kvantitativ bedömning av det relativa värdet av kokain: fastställande mellan sessioner
Efter stabilisering av preferensen (dvs. inga ökande eller minskande trender under 3 på varandra följande dagar), ökades antalet svar eller kostnaden som krävdes för att få vatten sötat med sackarin – den föredragna belöningen – gradvis mellan sessionerna från 1 till 16 gånger det för kokain som förblev konstant (dvs 2 svar per belöning). Målet var att skapa en förändring i preferens för att mäta punkten för likgiltighet (eller subjektiv jämlikhet) mellan de två belöningarna. Varje kostnadsnivå testades under minst 2 på varandra följande sessioner och fram till stabilisering av valets prestanda. Punkten för likgiltighet mellan de två belöningarna uppskattades genom att anpassa (gruppgenomsnittet) kostnadseffektkurvan med en normal (dvs tre-parameter) sigmoidfunktion (minsta kvadraters icke-linjära regressioner, Sigmaplot 5, version 2). För kurvanpassning uttrycktes data i procent av kokainvalen med maxvärdet satt till 2002 %. Grafiskt motsvarar indifferenspunkten således den relativa kostnaden för alternativet där den anpassade kurvan korsar indifferenslinjen på 8.02 %.
Kvantitativ bedömning av det relativa värdet av kokain: bestämning inom sessionen
Efter stabilisering av preferensen ökades den relativa kostnaden för sött vatten – den föredragna belöningen – gradvis på ett sätt inom sessionen var fjärde valförsök. I den första kostnadseffektanalysen inom sessionen som genomfördes på samma råttor efter analysen mellan sessionerna, fanns det totalt 4 diskreta valförsök, motsvarande fyra kostnadsnivåer för sötvatten: 16, 4, 1 och 4 gånger kostnaden för kokain i denna ordning. I alla efterföljande kostnadseffektanalyser inom sessionen bestod varje daglig session av 8 provtagningsförsök, som i standardförfarandet, följt av 16 diskreta valförsök, motsvarande 4 nivåer av relativ kostnad: 20, 5, 1, 2 och 4 gånger kostnaden för kokain i denna ordning. I övrigt var experimentförhållandena identiska med dem i standardvalsförfarandet. För varje testad variabel (t.ex. sackarinkoncentration) testades råttor under minst 8 på varandra följande sessioner och fram till stabilisering av kostnadseffektkurvan inom sessionen. Punkten för likgiltighet mellan kokain och sött vatten uppskattades genom kurvanpassning enligt beskrivningen ovan.
Retrospektiv analys av frekvensen av kokain-föredrar individer
Under de senaste 5 åren testades totalt 184 råttor som tillhörde 13 oberoende kohorter i valproceduren som beskrivs ovan under minst 5 på varandra följande dagliga sessioner fram till beteendestabilisering (dvs 3 på varandra följande sessioner med mer än 50 % av genomförda valförsök [ intervall: 58 till 100 %; median: 100] och utan minskande eller ökande trender i preferenspoäng; se även Dataanalys). Data från några av dessa råttor publicerades på annat håll [21], dock inte under denna form (dvs. frekvenser) och inte som en funktion av tidigare kokainanvändning. Dessa råttor hade en lång rad olika historia av självadministrering av kokain före valtestning, allt från ingen tidigare exponering till långvarig exponering för självadministrering av kokain. Som ett resultat varierade mängden självadministrerat kokain från 0 till 486 mg (eller cirka 1388 mg/kg) och definierade 5 svårighetsgrader: 0 (n = 43), 1–75 (n = 66), 76–150 (n = 52), 151–225 (n = 10), >226 mg (n = 13). Sedan uppskattade vi frekvensen av kokainföredrande råttor genom att för varje svårighetsgrad räkna antalet individer med en preferenspoäng under 0 (dvs. kokainval >50 % av försöken under 3 stabila sessioner; se Dataanalys).
Läkemedel
Kokainhydroklorid (Coopération Pharmaceutique Française, Frankrike) löstes i 500 ml sterila påsar med 0.9 % NaCl och hölls vid rumstemperatur (21±2°C). Läkemedelsdoser uttrycktes som vikten av saltet. Natriumsackarin (Sigma-Aldrich, Frankrike) eller sackaros (Sigma-Aldrich, Frankrike) löstes i kranvatten vid rumstemperatur (21±2°C). Söta lösningar förnyades varje dag.
Dataanalys
Likgiltighetsnivån mellan vatten sötat med sackarin (eller sackaros) och kokain normaliserades lämpligen till 0 i valproceduren för diskreta försök. Poäng över 0 indikerade en preferens för icke-drogalternativet (dvs val av denna belöning >50 % av genomförda valprövningar) medan poäng under 0 indikerade en preferens för kokain (dvs. val av denna belöning >50 % av genomförda valprövningar). I PR-schemat motsvarar poängen skillnaden i brytpunkter mellan det icke-drogalternativet och kokainet. Individer med en PR-poäng mellan -3 och +3 (dvs. motsvarande en skillnad på ett stegs storlek i PR3-schemat) ansågs arbeta lika för båda typerna av belöning. Statistiska analyser kördes med Statistica, version 7.1 (Statsoft, Inc. Frankrike).
Erkännanden
Vi tackar Anne Fayoux och Stephane Lelgouach för djurvård, Pierre Gonzalez för teknisk assistans, Marie-Hélène Bruyères för administrativ hjälp, Christian Darrack för hans hjälp med datautvinning och Alain Labarriere för hushållshjälp. Vi tackar också Drs. Sallouha Aidoudi, Karyn Guillem och Kevin Freeman för deras kommentarer om ett tidigare utkast och Prs. Bernard Bioulac och Michel Le Moal för allmänt stöd. Slutligen tackar vi de två anonyma granskarna för deras omtänksamma och konstruktiva kommentarer.
fotnoter
Konkurrerande intressen: Författarna har förklarat att inga konkurrerande intressen existerar.
finansiering: Detta arbete stöddes av anslag från Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS), Université Victor-Segalen Bordeaux 2, Conseil Régional d'Aquitaine, National Research Agency (ANR), Fondation pour la Recherche Médicale (FRM) och Mission Interministérielle de Lutte contre la Drogue et la Toxicomanie (MILDT). Finansiärerna hade ingen roll i studiedesign, datainsamling och analys, beslut att publicera eller förberedelse av manuskriptet.
Referensprojekt
1. Dackis CA, Gold MS. Nya koncept inom kokainberoende: hypotesen om dopaminutarmning. Neurosci Biobehav Rev. 1985;9:469–477. [PubMed]
2. Gawin FH. Kokainberoende: psykologi och neurofysiologi. Vetenskap. 1991;251:1580-1586. [PubMed]
3. Redish AD. Addiction som en beräkningsprocess gick fel. Vetenskap. 2004; 306: 1944-1947. [PubMed]
4. Van Dyck C, Byck R. Kokain. Scientific American. 1982;246:128–141. [PubMed]
5. Volkow ND, Wise RA. Hur kan drogmissbruk hjälpa oss att förstå fetma? Nat Neurosci. 2005; 8: 555-560. [PubMed]
6. Di Chiara G. Drogmissbruk som dopaminberoende associativ inlärningsstörning. Eur J Pharmacol. 1999; 375: 13-30. [PubMed]
7. Davidson ES, Finch JF, Schenk S. Variabilitet i subjektiva svar på kokain: initiala erfarenheter av studenter. Missbrukare beteende. 1993;18:445–453. [PubMed]
8. Haertzen CA, Kocher TR, Miyasato K. Förstärkningar från den första drogupplevelsen kan förutsäga senare drogvanor och/eller missbruk: resultat med kaffe, cigaretter, alkohol, barbiturater, mindre och större lugnande medel, stimulantia, marijuana, hallucinogener, heroin, opiater och kokain. Drogalkoholberoende. 1983;11:147-165. [PubMed]
9. Lambert NM, McLeod M, Schenk S. Subjektiva svar på initiala erfarenheter av kokain: en utforskning av incitament-sensibiliseringsteorin om drogmissbruk. Missbruk. 2006;101:713–725. [PubMed]
10. Sofuoglu M, Brown S, Dudish-Poulsen S, Hatsukami DK. Individuella skillnader i det subjektiva svaret på rökt kokain hos människor. Am J Drog Alkoholmissbruk. 2000;26:591–602. [PubMed]
11. Goldstein RZ, Woicik PA, Moeller SJ, Telang F, Jayne M, et al. Att tycka om och vilja ha drog- och icke-drogbelöningar hos aktiva kokainanvändare: STRAP-R frågeformuläret. J Psychopharmacol. 2010;24:257–266. [PMC gratis artikel] [PubMed]
12. Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Logan J, Gatley SJ, et al. Förutsägelse av förstärkande svar på psykostimulanter hos människor genom hjärnans dopamin D2-receptornivåer. Am J Psykiatri. 1999;156:1440–1443. [PubMed]
13. Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Thanos PP, Logan J, et al. Brain DA D2-receptorer förutsäger förstärkande effekter av stimulantia hos människor: replikationsstudie. Synaps. 2002;46:79–82. [PubMed]
14. Pickens R, Thompson T. Kokainförstärkt beteende hos råttor: effekter av förstärkningsstorlek och storlek med fast kvot. J Pharmacol Exp Ther. 1968;161:122–129. [PubMed]
15. Ahmed SH. Obalans mellan narkotika och icke-drog belöning tillgänglighet: en viktig riskfaktor för missbruk. Eur J Pharmacol. 2005;526:9–20. [PubMed]
16. Ahmed SH. Neurosci Biobehav Rev i press; 2010. Valideringskris i djurmodeller av drogberoende: Beyond non-disorded drug use toward drug addiction. [PubMed]
17. Vecka JR. Experimentellt morfinberoende: metod för automatiska intravenösa injektioner i ohämmade råttor. Vetenskap. 1962;138:143–144. [PubMed]
18. Christensen CJ, Kohut SJ, Handler S, Silberberg A, Riley AL. Efterfrågan på mat och kokain hos Fischer och Lewis-råttor. Behav Neurosci. 2009;123:165–171. [PubMed]
19. Christensen CJ, Silberberg A, Hursh SR, Huntsberry ME, Riley AL. Väsentligt värde av kokain och mat hos råttor: tester av den exponentiella efterfrågemodellen. Psykofarmakologi (Berl) 2008;198:221–229. [PubMed]
20. Christensen CJ, Silberberg A, Hursh SR, Roma PG, Riley AL. Efterfrågan på kokain och mat över tid. Pharmacol Biochem Behav. 2008;91:209–216. [PMC gratis artikel] [PubMed]
21. Lenoir M, Serre F, Cantin L, Ahmed SH. Intens sötma överträffar kokainbelöning. PLoS One. 2007; 2: e698. [PMC gratis artikel] [PubMed]
22. Carroll ME, Lac ST. Autoshaping iv kokain självadministration hos råttor: effekter av icke-drog alternativa förstärkare på förvärv. Psykofarmakologi (Berl) 1993;110:5–12. [PubMed]
23. Carroll ME, Lac ST, Nygaard SL. En samtidigt tillgänglig icke-drogförstärkare förhindrar förvärvet eller minskar upprätthållandet av kokainförstärkt beteende. Psykofarmakologi (Berl) 1989;97:23–29. [PubMed]
24. Haney M. Självadministration av kokain, cannabis och heroin i det mänskliga laboratoriet: fördelar och fallgropar. Addict Biol. 2009;14:9–21. [PMC gratis artikel] [PubMed]
25. Nader MA, Woolverton WL. Effekter av att öka storleken på en alternativ förstärkare på val av läkemedel i ett val av diskreta prövningar. Psykofarmakologi (Berl) 1991;105:169–174. [PubMed]
26. Higgins ST, Bickel WK, Hughes JR. Inflytande av en alternativ förstärkare på självadministration av mänskligt kokain. Life Sci. 1994;55:179–187. [PubMed]
27. Spealman RD. Beteende som upprätthålls genom att ett schema för självadministrerat kokain avslutas. Vetenskap. 1979;204:1231–1233. [PubMed]
28. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Förändringar i dopaminerg och glutamaterg överföring i induktion och uttryck av beteendesensibilisering: en kritisk översyn av prekliniska studier. Psykofarmakologi (Berl) 2000;151:99–120. [PubMed]
29. Ahmed SH, Koob GF. Övergång från måttligt till alltför stort läkemedelsintag: förändring i hedonisk börvärde. Vetenskap. 1998; 282: 298-300. [PubMed]
30. Paterson NE, Markou A. Ökad motivation för självadministrerad kokain efter eskalerat kokainintag. Neuroreport. 2003;14:2229–2232. [PubMed]
31. Vanderschuren LJ, Everitt BJ. Drogsökande blir tvångsmässigt efter långvarig kokain självadministration. Vetenskap. 2004; 305: 1017-1019. [PubMed]
32. Epstein DH, Preston KL, Stewart J, Shaham Y. Mot en modell av drogåterfall: en bedömning av giltigheten av återinförandeproceduren. Psykofarmakologi (Berl) 2006;189:1–16. [PMC gratis artikel] [PubMed]
33. Kalivas PW. Glutamathomeostashypotesen om beroende. Nat Rev Neurosci. 2009;10:561–572. [PubMed]
34. Shalev U, Grimm JW, Shaham Y. Neurobiologi av återfall till heroin och kokain som söker: en recension. Pharmacol Rev. 2002; 54: 1 – 42. [PubMed]
35. Kippin TE, Fuchs RA, se RE. Bidrag av långvarig betingad och icke-kontingent exponering för kokain till förbättrad återupptagning av kokainsökning hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2006;187:60–67. [PubMed]
36. Knackstedt LA, Kalivas PW. Utökad tillgång till självadministrering av kokain förbättrar återinförandet av droger men inte beteendesensibilisering. J Pharmacol Exp Ther. 2007;322:1103–1109. [PubMed]
37. Mantsch JR, Yuferov V, Mathieu-Kia AM, Ho A, Kreek MJ. Effekter av utökad tillgång till höga kontra låga kokaindoser på självadministration, kokaininducerad återinsättning och hjärnans mRNA-nivåer hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2004;175:26–36. [PubMed]
38. Ahmed SH, Cador M. Dissociation av psykomotorisk sensibilisering från tvångsmässig kokainkonsumtion. Neuropsykofarmakologi. 2006;31:563–571. [PubMed]
39. Ahmed SH. Upptrappning av droganvändning. I: Olmstead MC, redaktör. Neurometoder: Djurmodeller för drogberoende. Humana press, Inc. Vol i press; 2009.
40. Hollard V, Davison MC. Företräde för kvalitativt olika förstärkare. J Exp Anal Behav. 1971;16:375-380. [PMC gratis artikel] [PubMed]
41. Miller HL. Matchningsbaserad hedonisk skalning i duvan. J Exp Anal Behav. 1976;26:335–347. [PMC gratis artikel] [PubMed]
42. Hodos W. Progressivt förhållande som ett mått på belöningsstyrka. Vetenskap. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
43. Richardson NR, Roberts DC. Progressiva kvotscheman i studier av självadministration av läkemedel på råttor: en metod för att utvärdera förstärkande effekt. J Neurosci Methods. 1996;66:1–11. [PubMed]
44. Stafford D, LeSage MG, Glowa JR. Progressivt förhållande scheman för läkemedelsleverans i analysen av självadministration av läkemedel: en översyn. Psychopharmacology (Berl) 1998;139:169–184. [PubMed]
45. Russ BE, Cohen YE. Rhesusapors värdering av vokaliseringar under en fritt valuppgift. PLoS One. 2009;4:e7834. [PMC gratis artikel] [PubMed]
46. Mazur JE. Val. I: Iverson IH, Lattal KA, redaktörer. Tekniker inom beteende- och neuralvetenskap: Experimentell analys av beteende, del 1. Amsterdam: Elsevier Science Publishers BV; 1991. s. 219–250.
47. Grimm JW, Hope BT, Wise RA, Shaham Y. Neuroadaptation. Inkubation av kokainbegär efter uttag. Natur. 2001;412:141–142. [PMC gratis artikel] [PubMed]
48. Brown G, Stephens DN. Effekter av kokain på att svara för etanol eller sackaros under ett progressivt förhållande schema. Behav Pharmacol. 2002;13:157–162. [PubMed]
49. Martelle JL, Czoty PW, Nader MA. Effekt av time-out-varaktighet på den förstärkande styrkan hos kokain bedömd under ett schema med progressivt förhållande hos rhesusapor. Behav Pharmacol. 2008;19:743–746. [PMC gratis artikel] [PubMed]
50. Poncelet M, Chermat R, Soubrie P, Simon P. Det progressiva förhållandet schema som en modell för att studera den psykomotoriska stimulerande aktiviteten hos droger hos råtta. Psykofarmakologi (Berl) 1983;80:184–189. [PubMed]
51. Sclafani A. Post-intag positiva kontroller av intagsbeteende. Aptit. 2001;36:79–83. [PubMed]
52. Carroll ME, Lac ST. Förvärv av iv amfetamin och kokain självadministration hos råttor som en funktion av dos. Psykofarmakologi (Berl) 1997;129:206–214. [PubMed]
53. Elsmore TF, Fletcher GV, Conrad DG, Sodetz FJ. Minskning av heroinintaget hos babianer av en ekonomisk begränsning. Pharmacol Biochem Behav. 1980;13:729-731. [PubMed]
54. Aigner TG, Balster RL. Valbeteende hos rhesusapor: kokain kontra mat. Vetenskap. 1978;201:534–535. [PubMed]
55. Fitch TE, Roberts DC. Effekterna av dos- och åtkomstbegränsningar på periodiciteten av självadministrering av kokain hos råtta. Drogalkoholberoende. 1993;33:119–128. [PubMed]
56. Ahmed SH, Kenny PJ, Koob GF, Markou A. Neurobiologiska bevis för hedonisk allostas i samband med eskalerande användning av kokain. Nat Neurosci. 2002; 5: 625-626. [PubMed]
57. Negus SS. Snabb bedömning av valet mellan kokain och mat hos rhesusapor: effekter av miljömanipulationer och behandling med d-amfetamin och flupentixol. Neuropsykofarmakologi. 2003;28:919–931. [PubMed]
58. Negus SS. Effekter av straff på valet mellan kokain och mat hos rhesusapor. Psykofarmakologi (Berl) 2005;181:244–252. [PubMed]
59. Anthony JC, Warner LA, Kessler RC. Jämförande epidemiologi av beroende av tobak, alkohol, kontrollerade substanser och inhalationsmedel: Grundläggande resultat från National Comorbidity Survey. Experimentell och klinisk psykofarmakologi. 1994;2:224–268.
60. Degenhardt L, Bohnert KM, Anthony JC. Bedömning av kokain och annat drogberoende i den allmänna befolkningen: "gated" kontra "ogated" tillvägagångssätt. Drogalkoholberoende. 2008;93:227–232. [PMC gratis artikel] [PubMed]
61. Reboussin BA, Anthony JC. Finns det epidemiologiska bevis som stödjer tanken att ett kokainberoendesyndrom uppstår strax efter att kokain har börjat? Neuropsykofarmakologi. 2006;31:2055–2064. [PMC gratis artikel] [PubMed]
62. Robins LN. Den sjätte Thomas James Okey Memorial föreläsningen. Vietnamveteraners snabba återhämtning från heroinmissbruk: en lyckoträff eller normal förväntan? Missbruk. 1993;88:1041-1054. [PubMed]
63. Robins LN, Davis DH, Goodwin DW. Narkotikaanvändning av amerikanska arméns värvade män i Vietnam: en uppföljning när de återvände hem. Am J Epidemiol. 1974;99:235–249. [PubMed]
64. Voon V, Fernagut PO, Wickens J, Baunez C, Rodriguez M, et al. Kronisk dopaminerg stimulering vid Parkinsons sjukdom: från dyskinesier till störningar i impulskontroll. Lancet Neurol. 2009;8:1140–1149. [PubMed]
65. Evans AH, Lees AJ. Dopamin dysregulation syndrome i Parkinsons sjukdom. Curr Opin Neurol. 2004;17:393–398. [PubMed]
66. Deroche-Gamonet V, Belin D, Piazza PV. Bevis för beroendeframkallande beteende hos råtta. Vetenskap. 2004; 305: 1014-1017. [PubMed]
67. Belin D, Mar AC, Dalley JW, Robbins TW, Everitt BJ. Hög impulsivitet förutsäger övergången till tvångsmässigt kokaintag. Vetenskap. 2008;320:1352–1355. [PMC gratis artikel] [PubMed]
68. Walsh SL, Donny EC, Nuzzo PA, Umbricht A, Bigelow GE. Kokainmissbruk kontra kokainberoende: självadministration av kokain och farmakodynamisk respons i det mänskliga laboratoriet. Drogalkoholberoende. 2010;106:28–37. [PMC gratis artikel] [PubMed]
69. Koob GF, Kenneth Lloyd G, Mason BJ. Utveckling av farmakoterapier för drogberoende: en Rosetta stone approach. Nat Rev Drug Discov. 2009;8:500–515. [PMC gratis artikel] [PubMed]
70. Tversky A, Kahneman D. Utformningen av beslut och valets psykologi. Vetenskap. 1981;211:453–458. [PubMed]
71. Woolverton WL, Ranaldi R, Wang Z, Ordway GA, Paul IA, et al. Förstärkande styrka hos en ny dopamintransportörligand: farmakodynamiska och farmakokinetiska mekanismer. J Pharmacol Exp Ther. 2002;303:211–217. [PubMed]
72. Anthony JC. Epidemiologi av drogberoende. I: Davis KL, Charney D, Coyle JT, Nemeroff C, redaktörer. Neuropsykofarmakologi: den femte generationens framsteg. Philadelphia: Lippincott Williams och Wilkins; 2002. s. 1557–1573.
73. Hughes JR, Helzer JE, Lindberg SA. Prevalens av DSM/ICD-definierat nikotinberoende. Drogalkoholberoende. 2006;85:91–102. [PubMed]
74. Nutt D, King LA, Saulsbury W, Blakemore C. Utveckling av en rationell skala för att bedöma skadorna av droger vid potentiellt missbruk. Lansett. 2007;369:1047–1053. [PubMed]
75. Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Bevis för sockerberoende: beteendemässiga och neurokemiska effekter av intermittent, överdrivet sockerintag. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20 – 39. [PMC gratis artikel] [PubMed]
76. Gearhardt AN, Corbin WR, Brownell KD. Preliminär validering av Yale Food Addiction Scale. Aptit. 2009; 52: 430-436. [PubMed]
77. Rogers PJ, Smit HJ. Matbegär och "matberoende": en kritisk granskning av bevisen ur ett biopsykosocialt perspektiv. Pharmacol Biochem Behav. 2000;66:3–14. [PubMed]
78. Pelchat ML. Matberoende hos människor. J Nutr. 2009;139:620–622. [PubMed]
79. Mattson BJ, Williams S, Rosenblatt JS, Morrell JI. Jämförelse av två positiva förstärkande stimuli: valpar och kokain under postpartumperioden. Behav Neurosci. 2001;115:683–694. [PubMed]
80. Mattson BJ, Williams SE, Rosenblatt JS, Morrell JI. Preferenser för kokain- eller valp-associerade kammare skiljer annars beteendemässigt identiska postpartum maternal råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2003;167:1–8. [PMC gratis artikel] [PubMed]
81. Seip KM, Pereira M, Wansaw MP, Reiss JI, Dziopa EI, et al. Incitamentframträdande framträdande av kokain under postpartumperioden för honråttan. Psykofarmakologi (Berl) 2008;199:119–130. [PMC gratis artikel] [PubMed]
;