DeltaFosB Overexression i Nucleus Accumbens Förbättrar Sexuell Belöning I Female Syrian Hamsters (2009)

KOMMENTARER: ΔFosB är en kemikalie som är nödvändig för att missbruk ska uppstå. Både läkemedels- och beteendemässiga beroende beror på en ackumulering av Delta FosB. Block Delta FosB och missbruket upphör. Här visas att sexuell erfarenhet ökar Delta FosB, och leder till en sensibilisering av belöningscentret. Sensibilisering orsakar en högre frisättning av dopamin som gör aktiviteten eller läkemedlet mer tilltalande. Kön är i huvudsak en missbruksprocess. Denna studie ökade också genetiskt Delta FosB, vilket ökade de givande aspekterna av kön utöver normala nivåer. Kunde använda Internetporno orsaka en ökning av Delta FosB utöver normala nivåer? Skulle detta leda till missbruk och omkoppling av neurala vägar? Verkar rimligt.


FULLSTUDIE: ΔFosB Overexpression i Nucleus Accumbens ökar Sexuell Belöning i kvinnliga syriska hamstrar

Genes Brain Behav. 2009 juni; 8 (4): 442-449. doi: 10.1111 / j.1601-183X.2009.00491.x.

VL Häckar, 1 S. Chakravarty, 2 EJ Nestler, 2 och RL Meisel1

Abstrakt

Upprepad aktivering av mesolimbic dopaminsystemet resulterar i beständiga beteendemässiga förändringar åtföljda av ett mönster av neural plasticitet i nukleär accumbens (NAc). Eftersom ackumuleringen av transkriptionsfaktorn ΔFosB kan vara en viktig komponent i denna plasticitet är frågan i vår forskning om ΔFosB regleras av sexuell erfarenhet hos kvinnor. Vi har visat att kvinnliga syriska hamstrar som fått sexuell erfarenhet uppvisar flera beteendemässiga förändringar, inklusive ökad sexuell effektivitet med naiva manliga hamstrar, sexuell belöning och ökad respons för psykomotoriska stimulanser (t.ex. amfetamin).

Vi visade nyligen att sexuell erfarenhet ökade ΔFosB-nivåerna i NAc av kvinnliga syriska hamstrar. Fokusen på denna studie var att utforska de funktionella konsekvenserna av denna induktion genom att bestämma om den konstitutiva överuttrycket av ΔFosB av adeno-associerade virala (AAV) vektorer i NAc kunde efterlikna beteendeeffekterna av sexuell erfarenhet.

Djur med AAV-medierad överuttryck av FosB i NAc visade bevis på sexuell belöning i en konditionerad platspreferens paradigm under betingelser där kontrolldjur som erhåller en injektion av AAV-grönt fluorescerande protein (GFP) i NAc inte. Sexuella beteendestester visade vidare att manar som var parade med AAV-ΔFosB-kvinnorna hade ökad copulatorisk effektivitet, mätt av andelen mounts som inkluderade intromission jämfört med män som parades med AAV-GFP-kvinnorna. Dessa resultat stöder en roll för ΔFosB för att förmedla naturligt motiverade beteenden, i detta fall kvinnligt sexuellt beteende, och ge ny inblick i eventuella endogena verkningar av ΔFosB.

Beskrivning

Erfarenhet av missbruk, motiverat beteende, hjulkörningsbeteende eller instrumentell inlärning resulterar i aktiveringen av mesolimbisk dopaminsystemet och vidhäftande förändringar i nukleäraccumulens (NAc) (Becker et al., 2001, Di Chiara et al., 1998, Harris et al., 2007, Kumar et al., 2005, Meisel & Mullins, 2006, Nestler, 2008, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Pierce & Kumaresan, 2006, Varg et al., 2004). Strukturella förändringar, särskilt bildandet av dendritiska spines, är en viktig komponent i denna erfarenhetsbaserade plasticitet (Allen et al., 2006, Lee et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson & Kolb, 2004), som förblir långt efter det att beteendeupplevelsen eller läkemedelsadministrationen har upphört (McClung & Nestler, 2008, Meisel & Mullins, 2006, Varg et al., 2004).

Transkriptionsfaktorn ΔFosB har molekylära egenskaper som gör den till en bra kandidat för att medla de varaktiga strukturella och beteendemässiga modifikationerna som följer av beteende- eller läkemedelsupplevelser (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Colby et al., 2003, Doucet et al., 1996, Hoppas et al., 1994, Kelz et al., 1999, McClung & Nestler, 2003, McClung et al., 2004, McDaid et al., 2006, Nakabeppu & Nathans, 1991, Nestler, 2008, Nye et al., 1995, Olausson et al., 2006, Perrotti et al., 2008, Wallace et al., 2008, Werme et al., 2002, Zachariou et al., 2006). ΔFosB är en alternativ splitsprodukt av den omedelbara tidiga genen fosB (Mumberg et al., 1991, Nakabeppu & Nathans, 1991) och, till skillnad från FosB-proteinet i full längd, har den trunkerade ΔFosB ovanlig stabilitet vilket resulterar i ackumulering av proteinet efter upprepad stimulering (Chen et al., 1997, Chen et al., 1995, Hoppas et al., 1994, Kelz et al., 1999, Perrotti et al., 2008, Zachariou et al., 2006). Även om mekanismen genom vilken fosB-genen är alternativt splitsad förblir okänd, skyddar trunkationen av proteinet tillsammans med fosforylering proteinet från snabb proteasomal nedbrytning, vilket ger en högre grad av transkriptionsaktivitet jämfört med fler övergående levande FosB-familjemedlemmar (Carle et al., 2007, Ulery & Nestler, 2007, Ulery et al., 2006). Postulatet är att ackumulering av ΔFosB-protein producerar mönster av genuttryck som kan ligga till grund för effekterna av erfarenhet av långvarig beteendemässig och cellulär plasticitet (McClung & Nestler, 2008).

Vi har använt kvinnligt sexuellt beteende i syriska hamstrar som en modell av erfarenhetsbaserad plasticitet i hjärnan (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Køhlert et al., 1997, Meisel et al., 1993, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). En fördel att arbeta med sexuellt beteende är förmågan att kontrollera nivån på ett djurs erfarenheter genom att ha antingen helt sexuellt naiva djur eller genom att på olika sätt utsätta djur för olika nivåer av sexuell upplevelse. Vi har tidigare visat att upprepad sexuell erfarenhet resulterar i sensibilisering av mesolimbic dopamin-systemet, analogt med det för missbrukande läkemedel (Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Hoppas et al., 1992, Kelz et al., 1999, Kohlert & Meisel, 1999, Pierce & Kalivas, 1995, Pierce & Kalivas, 1997a, Pierce & Kalivas, 1997b, Robinson & Kolb, 1999a). Till exempel, som effekterna av droger ökar upprepad sexuell upplevelse dendritiska ryggrad i medelstora snygga neuroner i NAc (Lee et al., 2006, Li et al., 2003, Meisel & Mullins, 2006, Norrholm et al., 2003, Robinson et al., 2001, Robinson & Kolb, 1997, Robinson & Kolb, 1999a, Robinson & Kolb, 1999b, Robinson & Kolb, 2004). Vidare har vi funnit att ΔFosB / FosB-färgning ökar persistent i NAc efter upprepad sexuell erfarenhet (Meisel & Mullins, 2006).

Med tanke på att sexuell erfarenhet kan ge ett långvarigt uttryck för FosB-familjemedlemmar, var syftet med denna studie att manipulera ΔFosB-uttryck för att efterlikna de beteendemässiga följderna av upprepad sexuell upplevelse. Efter viral-medierad överuttryck av FosB i NAc testades kvinnliga syriska hamstrar för förbättrad konditionerad platspreferens och även ökad copulatorisk effektivitet med naiva manliga hamstrar, två ändpunkter som tidigare visat sig vara drabbade av upprepad sexuell erfarenhet (Bradley et al., 2005b, Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996, Meisel & Mullins, 2006). We rapporterar här att genom att uthålligt överuttrycka ΔFosB i NAc av kvinnliga hamstrar som får minimal sexuell erfarenhet, kan vi producera beteendeförändringar som liknar kvinnorna med mer omfattande sexuella erfarenheter.

Material och metoder

Experimentella ämnen

Manliga och kvinnliga syriska hamstrar levererades vid ungefär 60 dagar från Charles River Breeding Laboratories, Inc. (Wilmington, MA). Kvinnor hölls individuellt i plastburar (50.8 cm lång × 40.6 cm bred × 20.3 cm hög), medan manliga stimulusdjur gruppades i identiska burar i antal på tre eller fyra. Djurrummet upprätthölls vid en kontrollerad temperatur av 22 ° C med ett 14: 10 hr ljusmattigt schema (tänds mellan 1: 30 och 11: 30 pm). Mat och vatten var tillgängliga för djuren AD libitum.

Alla förfaranden som användes i detta experiment var i överensstämmelse med National Institute of Health Riktlinjer för vård och användning av laboratoriedjur och godkändes av Purdue Animal Care and Use Committee.

Kirurgi

Kvinnliga hamstrar var bilateralt ovariektomerade under natriumpentobarbitalanestesi (Nembutal; 8.5 mg per 100 gm kroppsvikt, ip), ges tilläggsbedövning och genomgick därefter bilateral stereotaxisk kirurgi för leverans av virusvektorer. Under stereotaxisk kirurgi rakades huvudet och huden och muskeln drog sig tillbaka. Ett litet hål borras i skallen och en 5 μL Hamilton-spruta sänktes till nivåns nivå från en 2 ° lateral vinkel för att säkerställa röjning av de laterala cerebrala ventriklerna. Sprutan hölls på plats för 5 min före injektioner och sedan levererades antingen adenoassocierat virus (AAV) -GFP eller AAV-ΔFosB (0.7 μL) i NAc över 7 min, varefter sprutan hölls på plats för en ytterligare 5 min. Denna procedur upprepades för den kontralaterala sidan av hjärnan.

Virala vektorer

AAV kännetecknas av dess förmåga att effektivt transfektera neuroner såväl som att bibehålla specifikt transgenuttryck under långa perioder (Chamberlin et al., 1998). AAV-vektorer finns i olika serotyper baserat på karaktäriseringen av deras kapsidproteinbeläggning. Detta experiment utnyttjade en AAV2 (serotyp 2) från Stratagene med en titer över 108/ μl som uttrycker grönt fluorescerande protein (AAV-GFP) såväl som en AAV-vektor som hade konstruktioner för både ΔFosB och GFP (AAV-AFosB-GFP). Virusvektorerna injicerades i NAc minst 3 veckor före beteendestestning för att tillåta att ΔFosB-överuttryck utvecklades. Dessa AAV-vektorer medierar transgenuttryck hos råttor och möss som blir maximala inom 10-dagars injektion och kvarstår sedan vid denna nivå under minst 6 månader (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Viktigt är att vektorerna endast infekterar neuroner och producerar ingen toxicitet som är större än vehikelinfusioner ensamma. Detaljer om produktion och användning av dessa vektorer finns i tidigare publikationer (Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006).

Sexuell upplevelse

Alla ovariektomerade kvinnliga hamstrar primerades för sexuell upplevelse en gång i veckan genom att ge två dagliga subkutana injektioner av östradiolbensoat (10 μg i 0.1 ml bomullsfröolja) ungefär 48 hr och 24 timmar före sexuellt beteende test följt av en subkutan injektion av progesteron (500 μg i 0.1 ml bomullsfröolja) 4-6 timmar före sexuellt beteendeprov. Kvinnor som fick sexuell erfarenhet presenterades med en sexuellt erfaren manlig hamster för en 10 min-session 4-6 hr efter progesteroninjektionen. Varje man och kvinna var bara parade en gång under sexuella erfarenhetsprov.

Villkorad platspreferens

Ett förspänt klimatpreferensparadigm användes i detta experiment (Tzschentke, 1998). Vårt konditionerade ställföretagsapparat (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996) består av ett vitt och ett grått fack (60 × 45 × 38 cm) anslutet med ett centralt fack (37 × 22 × 38). Huvudfacken differentierades vidare med aspenbädd (Harlan Laboratories, IN) i det grå facket och corncob bedding (Harlan Laboratories, IN) i det vita facket. De ovariektomiserade kvinnliga hamstrarna var hormonella primerade före pre-test, sexuella konditionstider och eftertestet. Under föreställningen placerades djuret i den klara centrala kammaren och var fritt att röra de olika facken för 10 min för att fastställa en initial preferens för varje fack. När alla djur visade en initial preferens för den vita kammaren utfördes konditionering i den grå kammaren. Hormonpriming upprepades under 2 (Grupperna 2-5) eller 5 veckor (Group 1) för konditionering. Under konditionering fick kvinnorna sexuell erfarenhet av en man i det grå facket för 10 min, med mätning av kvinnliga copulatoriska parametrar (lordos latens och total lordos varaktighet). En timme efter det sexuella upplevelsestestet placerades honan ensam i den vita kammaren för 10 min. En kontrollgrupp av honor som inte fick sexuell erfarenhet, var hormonellt primerad men placerades ensam i varje kammare för 10 min. Efter 2- eller 5-veckans konditionering gavs djur ett eftertest, där de igen var fria att röra sig om kamrarna för 10 min. Oavsett grupp utfördes alla efterprovningar sju veckor efter stereotaxisk operation, och därför avlivades alla djur med samma nivå av virusuttryck. Det fanns 5-grupper av djur i detta experiment: En positiv kontrollgrupp av djur mottog bilateral AAV-GFP och gav 5 veckovis sexuellt beteendeparingar med en man (Grupp 1, n = 8). Två negativa kontrollgrupper fick ingen sexuell konditionering för 2-veckor och fick antingen AAV-ΔFosB (grupp 2, n = 5) eller AAV-GFP (grupp 3, n = 4). Slutligen fanns djur som fick 2 veckor av sexuellt beteendeparationer med en manlig med en bilateral injektion av antingen AAV-ΔFosB (Group 4, n = 7) eller AAV-GFP (Group 5, n = 7).

Naiv Male Experiment

Tidigare forskning har visat att sexuellt erfarna kvinnliga hamstrar kan förbättra den samverkande effekten av interaktioner med sina sexuellt naiva manliga partners (Bradley et al., 2005b). Detta test gavs ungefär en vecka efter det konditionerade platspreferensen efter testet till de två grupperna av djur som fick 2 veckor av sexuell konditionering (Grupper 4 och 5). Kvinnor var hormonellt grundade för sexuell erfarenhet som beskrivits. Under 10-mintestet introducerades en sexuellt naiv manlig hamster till kvinnans hemmalaga och testperioden var videobild för senare analys. Antalet fästen och intromissioner (inklusive ejakuleringar) av hanen samt andelen av totala fästen som inkluderade intromission (hitfrekvens) bestämdes av videoband.

immunohistokemi

Immunostaining utfördes på alla djur för att verifiera både virusinjektionsplats och anatomisk utsträckning av proteinuttryck. Kvinnor fick en överdos av Sleepaway (0.2 ml ip, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) och intracardialt perfusionerades med 25 mM fosfatbuffrad saltlösning (PBS) för 2 min (ungefär 50 ml) följt av 4% paraformaldehyd i 25 mM PBS för 20 min (ungefär 500 ml). Hjärnorna avlägsnades och efter fixering för 2h i 4% paraformaldehyd placerades sedan i en 10% sackaroslösning i PBS över natten vid 4 ° C. Djur som mottog endast bilateral AAV-GFP hade seriella koronala sektioner (40 μm) skuren från frusen vävnad till 25 mM PBS plus 0.1% bovint serumalbumin (BSA) (tvättbuffert) och sedan monterat direkt på glidbanor och täckglasade medan de fortfarande var våta med 5% n-propylgalat i glycerin. Djur som fick bilateral AAV-ΔFosB hade seriella koronala sektioner (40 μm) skuren från frusen vävnad och sköljdes sedan 3 gånger för 10 min i tvättbuffert. AAV-AFosB-djur analyserades endast för AFosB-uttryck och inkuberades därför i ΔFosB / FosB-primär antikropp (1: 10000, sc-48 Santa Cruz Biotechnology Inc., Santa Cruz, CA) i tvättbuffert plus 0.3% Triton-X 100 vid rumstemperatur för 24 hr och flyttades sedan till 4 ° C för 24 hr. Denna koncentration av primär antikropp valdes eftersom den endast producerar minimal endogen fosfB / FosB-färgning. Efter inkubation i primär antikropp sköljdes sektionerna 3 gånger för 10 min i tvättbuffert och inkuberades sedan i biotinylerad sekundär antikropp för 45 min vid rumstemperatur (1: 200, Vector, Burlingame, CA). Sektionerna tvättades sedan 3 gånger för 10 min i tvättbuffert innan de inkuberades i streptavidin Alexa Fluor 594-konjugat (1: 500, Molecular Probes, Eugene, OR). Efter denna inkubation tvättades sektionerna 3 gånger för 10 min i tvättbuffert och monterades sedan på glidbanor och täcktes medan de fortfarande var våta med 5% n-propylgalat i glycerin.

Mikroskopisk analys

Diabilder analyserades med ett Leica DM4000B ljusmikroskop med fluorescerande förmåga kopplad till en Leica DFC500 digitalkamera. Digitala bilder av både höger och vänster injektionsplats för varje sektion analyserades seriellt genom fluorescensmikroskopi för att lokalisera injektionsplaceringen i NAc. Sektionerna från varje djur analyserades för att hitta rostral till caudal spridning av viralt uttryck och även den anatomiska placeringen av uttrycks största diameter. Vidare räknades i dessa sektioner antalet FosB-färgade celler i ImageJ från sparade digitala bilder. Eftersom vårt mål var att helt enkelt få approximativa celltal, användes inte stereologiska metoder.

Resultat

Tidskurs för viralt medierad överuttryck av ΔFosB i NAc av kvinnliga syriska hamstrar

En separat grupp av djur användes initialt för att hitta en tidskurs av viral-medierad FFosB-överuttryck i honhammaren. Analys av ΔFosB-uttryck vid 3 (n = 5), 6 (n = 6) och 9 (n = 2) veckopunktpunkter avslöjade att 3-veckor efter stereotaxisk kirurgi gav en nivå av ΔFosB-överuttryck som upprätthölls genom 6 och 9 veckor efter stereotaxisk operation. Viralt uttryck var mestadels kärnvapen, men hittades också i cytoplasman och till och med dendriter av vissa överuttryckta celler. Av de tretton djuren som omfattade tidskursexperimentet hade fyra djur rostral NAc-kärnvirusinjektioner, varav den ena spred sig i strängterminalens (BNST) sädkärnan. De återstående nio djuren hade caudala injektionsplaceringar, sju i den kaudala kärnan och två i det caudala skalet av NAc. Endast en av de caudala skalinjektionerna korsade sig i BNST, medan sex av injektionerna i den kaudala kärnan korsade sig i BNST. De genomsnittliga största diametrarna för virusuttryck för varje tidpunkt visade sig vara 0.9 mm, 1.2 mm och 1.0 mm för 3, 6 respektive 9 veckor. Dessa genomsnittliga diametrar utsattes för en analys av varians och befanns inte vara signifikant olika. I följande beteendeexperiment började beteendestest kring 3-veckor efter stereotaxisk operation och djur offrades kring 9-veckor efter stereotaxisk operation för att säkerställa att virusuttrycket upprätthölls på en jämn nivå.

Immunohistologisk analys av virala injektioner av AAV-AFosB och AAV-GFP

Hjärnsektioner från varje djur som användes i beteendexperimenten analyserades seriellt i ett koronalplan för den anatomiska lokaliseringen av viral injektion. Totalt 12-djur analyserades för sitt bilaterala ΔFosB-uttryck genom cellantal och injektionsplacering, som bestämdes genom att spåra de kvarvarande nålspåren. Även om injektionsplaceringen analyserades i en koronaldel (Figur 1), proteinuttryck utsträckt i en rostral-caudal ellips från injektionsstället och spreds också i en dorsal-ventral ellipsa från injektionsstället. Av de fem djuren analyserade från grupp 2 var 70.5% av överexpersionscellerna i NAc (median = 16,864-celler, lägre kvartil = 7,551-celler, övre kvartil = 20,002-celler, interkvartilintervall = 12,451). De sju djuren analyserade från grupp 4 visade 65.6% viral överuttryck i NAc (median = 9,972-celler, lägre kvartil = 5,683-celler, övre kvartil = 11,213-celler, interkvartilintervall = 5530.). Dessa cellantal representerar viral överexpression snarare än endogen färgning på grund av den målmedicinska utspädningen av den primära antikroppen.

Figur 1    

Proteinuttrycksnivåer medierade av AAV-GFP eller AAV-AFosB 12 efter injektion. Topp. GFP-överuttryck var mestadels kärnan men befanns också spridas till cytoplasma och dendriter av celler. Botten. ΔFosB-proteinuttryck efterliknade .

Av de 24 bilaterala injektionsställena fanns tolv i den rostrala kärnan i NAc, varav sex hade viralt uttryck som spred sig caudalt i BNST. De återstående tolv injektionsställena var i den caudala NAc. En av de tolv injektionerna var i det kaudala skalet och spreds caudalt i BNST. De sista elva injektionsställena fanns alla i den caudala kärnan i NAc, varav åtta spridit caudalt i BNST. Alla injektioner centrerades kring den främre kommissionen, med undantag för den ena injektionen i det caudala skalet av NAc som var något mer medial än den främre kommissionen (Figur 2). Alla djur uppvisade lämplig överuttryckning av antingen GFP eller AFosB och användes därför i efterföljande beteendeanalys. Inga djur uteslutes från studien på grund av dålig anatomisk injektionsplacering. Eftersom alla injektioner riktades mot ackumbalkärnan och endast en injektion inkluderade skalet, gjordes ingen statistisk analys på injektionsställena.

Figur 2    

Anatomisk lokalisering av virala injektionsställen hos försöksdjur. Cirklar representerar placering av AAV-GFP och kvadrater representerar AAV-ΔFosB-placering. a. AAV-GFP-injektionsställen för djur med 5 wks sexuell konditionering (Group 1). .

AAV-vektoröveruttryck av ΔFosB i NAc av kvinnliga syriska hamstrar resulterar i förbättrat sexuellt belöning

För att bedöma om överuttrycket av ΔFosB i NAc hade en effekt på sexuell belöning använde vi det konditionerade platspreferensparadigmet. I detta test, genomgick djur antingen 0, 2 eller 5 veckor av sexuell konditionering. Under sexuell behandling registrerades lordos latens och varaktighet för varje kvinnlig hamster. Varken lordos latens (grupp 1: 553 sek ± 7 sek, Grupp 4: 552 sek ± 7 sek, Grupp 5: 561 sek ± 7 sek) eller lordos varaktighet (Grupp 1: 485 sek ± 15 sek, Grupp 4: 522 sek ± 10 sek, Grupp 5: 522 sek ± 12 sek) under sexuell behandling skiljer sig signifikant mellan grupper under testning oavsett viral injektion. Därför hade varken överuttrycket av GFP eller ΔFosB någon effekt på kvinnornas mottagliga beteende.

Varje grupp från den konditionerade platspreferensproceduren analyserades individuellt med en upprepad mätningstest mellan tiden som spenderades i konditioneringsfacket (grått utrymme) under förprovet och efterprovet. Den statistiska analysen utvidgades inte mellan grupper. Tidigare forskning har visat att fem sexuella konditioneringsupplevelser är tillräckliga för att upptäcka betydande förändringar i ställetMeisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Den positiva kontrollgruppen bestående av kvinnliga djur som överuttryckte GFP i den NAc som fick fem konditioneringsexperimentella erfarenheter tillbringade faktiskt betydligt mer tid under efterprövningen i gråkammaren parat med den sexuella upplevelsen jämfört med förkonditioneringsprestandan, t (8 ) = -3.13, P<0.05. Som förväntat förändrade inte djur som inte fick några konditionerande sexuella upplevelser signifikant tiden i någon av kammarna oavsett viral injektion. Kvinnor som överuttrycker GFP som fick två konditionerande sexuella upplevelser visade inte platskonditionering, medan kvinnor som fick två konditionerande sexuella upplevelser med överuttryck av ΔFosB tillbringade betydligt mer tid i kammaren ihopkopplad med sexuell erfarenhet under detta posttest, t (2) = −7, P <2.48 (Figur 3).

Figur 3    

Konditionerad platspreferens efter viral injektion. Denna graf visar medelvärdet (± SEM) antal sekunder under pre-konditioneringstestet (Pre) och efterkonditioneringsprovet (Post) som varje hamstegrupp använde i det grå facket. .

AAV-vektoröveruttryck av ΔFosB i NAc av kvinnliga syriska hamstrar förbättrar deras copulatoriska effektivitet med naiva män

En vecka efter det konditionerade platspreferensen efter testet utsattes kvinnor med 2 veckor av sexuella konditionstest (Grupper 4 och 5) för ett naivt manligt sexuellt beteende test. I detta test förbättrade AAV-ΔFosB-honor med 2 tidigare sexuella upplevelsestester signifikant deras sampolymeriserande effektivitet än att AAV-GFP-honor med 2 tidigare sexuella erfarenheter (Figur 4). Hitfrekvensen (andelen totala fästen som inkluderade intromission) av sexuellt naiva män som parades med AAV-ΔFosB-kvinnorna var signifikant högre än träfffrekvensen för naiva män parade med AAV-GFP-kvinnor, t (14) = 4.089 p <0.005.

Figur 4    

Copulatorisk effektivitet hos naiva manliga hamsterpartners. Denna graf visar medelvärdet (± SEM) träffhastighet (andelen av totala fästen som inkluderade intromission) hos de naiva manliga hamstrarna som parades antingen med AAV-GFP-honor .

Diskussion

Tidigare experiment som utnyttjade AAV-vektorer för överuttryck av ΔFosB utfördes i antingen rått- eller musmodelsystem (Wallace et al., 2008, Winstanley et al., 2007, Zachariou et al., 2006). Vi validerade de virala expressionsmönstren i hamsterhjärnan genom immunohistokemisk färgning. Denna analys visade effektivt uttryck av ΔFosB som uppträdde så snart som 3 veckor efter intrakranial injektion och förblev förhöjda under 9 veckor i vår tidskursanalys och upp till 12 veckor i beteendexperimenten.

I vår modell av sexuell erfarenhet leder upprepade samverkande interaktioner av mannen till en sensibilisering av dopaminfrisättning i NAc (Kohlert & Meisel, 1999, Køhlert et al., 1997) som har förstärkande konsekvenser i ett konditionerat platspreferensparadigm (Meisel & Joppa, 1994, Meisel et al., 1996). Denna dopamin-sensibilisering samt kvinnliga hamstrarnas förmåga att reglera framgångsrik intromission av den monterande hanen som ett resultat av upprepade sexuella möten demonstrerar ett associativt svar (Bradley et al., 2005b). Vi har visat att detta förstärkta sexuella beteende kan förbättras genom överuttryck av ΔFosB i NAc i samband med sexuell sexuell erfarenhet av subtreshold, analog med förbättringen av instrumentella svar på kokain, morfin eller livsmedelskonsumtion efter liknande överuttryck av ΔFosB (Colby et al., 2003, Olausson et al., 2006, Zachariou et al., 2006). Denna förbättring av sexuell interaktion med mannen efter sexuell erfarenhet speglades av förvärvet av en konditionerad platspreferens. jagt är rimligt att betrakta ΔFosB som att fungera som en transkriptionell nexus som medierar både långsiktiga modifikationer i beteende och den underliggande neuronala plasticiteten som följer av aktiveringen av nedströms mål av ΔFosB.

Med tanke på att höjningen av ΔFosB ger dessa effekter bör de underliggande mekanismerna beaktas. Det finns väldigt få identifierade molekylära konsekvenser som härrör från ackumuleringen av ΔFosB. Mmikroskopstudier av möss som överuttryckte ΔFosB-indikerade ökningar av serin / treonincyklinberoende kinas-5 (Cdk5), kärnfaktor kappa B (NF-KB), GluR2-subenhet av glutamatreceptorn och dynorfin (Ang et al., 2001, Bibb, 2003). Det är oklart hur dessa molekylära händelser kan påverka plasticitet och dendritisk ryggradsbildning, även om Cdk5 har känt roll i ökad dendritisk ryggradensitet (Bibb, 2003, Cheung et al., 2006, Kumar et al., 2005, Norrholm et al., 2003) och GluR2-subenheter eller NF-KB har blivit implicerade i synaptiska (Ang et al., 2001, Nestler, 2001, Peakman et al., 2003). I framtida studier planerar vi att koncentrera sig på dessa och andra potentiella nedströms transkriptionella mål för ΔFosB för att bestämma hur deras aktivitet fluktuerar med ackumuleringen av ΔFosB efter upprepat sexuellt beteende.

Det finns en stor litteratur som postulerar tydliga roller som skalet och kärnan i NAc spelar i motiverat beteende (Brenhouse & Stellar, 2006, Cadoni & Di Chiara, 1999, Perrotti et al., 2008, Pierce & Kalivas, 1995). Tidigare forskning i vårt laboratorium har konsekvent identifierat cellulära effekter av sexuell erfarenhet på kärnan av accumbens (Bradley et al., 2005a, Bradley et al., 2005b, Bradley & Meisel, 2001, Bradley et al., 2004, Kohlert & Meisel, 1999, Køhlert et al., 1997, Meisel et al., 1993), som ligger till grund för vår inriktning på NAc-kärnan i denna studie. Vår analys av den anatomiska omfattningen av ΔFosB-överuttryck indikerar att även om injektionerna verkligen riktades mot den caudala kärnan i NAc, sprider ΔFosB-expression ofta caudalt i rostral BNST. Även om den caudala NAc och rostral BNST är absolut anatomiskt distinkta kärnor, är de inte nödvändigtvis funktionellt distinkta, eftersom båda regionerna modulerar många av de mekanistiska elementen nyckeln till motivationsprocesser (t.ex. Koob et al., 2004). I våra mikrodialysstudier av kvinnliga hamstrar (Køhlert et al., 1997) noterade vi en oförmåga att skilja rostral BNST sond placeringar från de i caudal NAc när det gäller basala dopamin nivåer, dopamin svar på sexuell interaktion med män eller mönster av dopaminerg avferent innervation. I stället för att se infektionsspridningen i BNST som metodiskt problematiskt, stöder dessa resultat idén om ett funktionellt kontinuum mellan NAc och BNST.

Även om vi har visat att överuttryck av ΔFosB hos kvinnliga hamstrar är tillräcklig för att producera en konditionerad platspreferens mot sexuell respons och för att förbättra copulatoriska interaktioner med män, är det fortfarande okänt om ΔFosB-uttryck är också nödvändigt för för dessa beteendekonsekvenser av sexuell erfarenhet. Nyligen genomförda studier har använt ett AAV-AJunD-virus, vilket minskar AFosB-medierad transkription genom kompetitivt heterodimerisering med AFosB innan bindning av AP-1-regionen på gener (Winstanley et al., 2007). Genom att använda AAV-ΔJunD till knockdown ΔFosB-medierad transkription hoppas vi kunna avgöra om ΔFosB krävs för beteendets plasticitet som vi har observerat efter sexuell beteendeupplevelse, vilket kommer att komplettera resultaten av den studie som presenteras här. Om ackumuleringen av ΔFosB och dess efterföljande aktivering av nedströms mål leder till både beteendets och cellulär plasticitet, bör nedbrytningen av ΔFosB avskaffa dessa effekter.

Erkännanden

Vi vill tacka Amanda Mullins, Melissa McCurley och Chelsea Baker för deras hjälp med beteendestestning, konditionering och vävnadsbehandling. Detta arbete stöddes av NIH-bidrag DA13680 (RLM) och MH51399 (EJN).

Referensprojekt

  • Allen PB, Zachariou V, Svenningsson P, Lepore AC, Centonze D, Costa C, Rossi S, Bender G, Chen G, Feng J, Snyder GL, Bernardi G, Nestler EJ, Yan Z, Calabresi P, Greengard P. Distinct Rolls för spinofilin och neurabin i dopaminförmedlad plasticitet. Neuroscience. 2006;140: 897-911. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induktion av kärnfaktor-kappaB i kärnan accumbens genom kronisk kokainadministration. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Becker JB, Rudick CN, Jenkins WJ. Dopaminens roll i kärnan accumbens och striatum under sexuellt beteende hos honrotan. J Neurosci. 2001;21: 3236-3241. [PubMed]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. Induktion av deltaFosB i periaqueductalgrået genom stress främjar aktiva coping-svar. Neuron. 2007;55: 289-300. [PubMed]
  • Bibb JA. Rollen av Cdk5 i neuronal signalering, plasticitet och drogmissbruk. Neurosignals. 2003;12: 191-199. [PubMed]
  • Bradley KC, Boulware MB, Jiang H, Doerge RW, Meisel RL, Mermelstein PG. Förändringar i genuttryck inom kärnan accumbens och striatum efter sexuell erfarenhet. Genes Brain Behav. 2005a;4: 31-44. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopaminsår i kvinnliga hamstrar (Mesocricetus auratus) avskaffar de sensibiliserade effekterna av sexuell erfarenhet på copulatoriska interaktioner med män. Behav Neurosci. 2005b;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Sexuellt beteende induktion av c-Fos i kärnans accumbens och amfetaminstimulerad lokomotorisk aktivitet är sensibiliserad av tidigare sexuell erfarenhet hos kvinnliga syriska hamstrar. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Bradley KC, Mullins AJ, Meisel RL, Watts VJ. Sexuell erfarenhet förändrar D1-receptormedierad cyklisk AMP-produktion i kärnan accumbens av kvinnliga syriska hamstrar. Synapse. 2004;53: 20-27. [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR. c-Fos- och deltaFosB-uttryck förändras differensiellt i distinkta delregioner av nukleär accumbens-skalet i kokain-sensibiliserade råttor. Neuroscience. 2006;137: 773-780. [PubMed]
  • Cadoni C, Di Chiara G. Ömsesidiga förändringar i dopaminrespons i kärnans accumbens skal och kärna och i dorsala caudat-putamen hos råttor sensibiliserade för morfin. Neuroscience. 1999;90: 447-455. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomberoende och oberoende mekanismer för FosB-destabilisering: identifiering av FosB degron-domäner och konsekvenser för DeltaFosB-stabilitet. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chamberlin NL, Du B, de Lacalle S, Saper CB. Rekombinant adenoassocierad virusvektor: Användning för transgenuttryck och anterogradisk spårning i CNS. Brain Res. 1998;793: 169-175. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Hopp BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Kroniska Fos-relaterade antigener: stabila varianter av deltaFosB inducerad i hjärnan genom kroniska behandlingar. J Neurosci. 1997;17: 4933-4941. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hopp BT, Nestler EJ. Reglering av delta FosB och FosB-liknande proteiner genom elektrokonvulsiv anfall och kokainbehandlingar. Mol Pharmacol. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Cheung ZH, Fu AK, Ip NY. Synaptiska roller av Cdk5: konsekvenser i högre kognitiva funktioner och neurodegenerativa sjukdomar. Neuron. 2006;50: 13-18. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celltypsspecifik överuttryck av DeltaFosB ökar incitamentet för kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Di Chiara G, Tanda G, Cadoni C, Acquas E, Bassareo V, Carboni E. Homologier och skillnader i effekten av missbruksmedel och en konventionell förstärkare (mat) på dopaminöverföring: en tolkningsram för läkemedelsberoende. Adv Pharmacol. 1998;42: 983-987. [PubMed]
  • Doucet JP, Nakabeppu Y, Bedard PJ, Hopp BT, Nestler EJ, Jasmin BJ, Chen JS, Iadarola MJ, St-Jean M, Wigle N, Blanchet P, Grondin R, Robertson GS. Kroniska förändringar i dopaminerg neurotransmission producerar en beständig höjning av deltaFosB-liknande proteiner i både gnagare och primatstriatum. Eur J Neurosci. 1996;8: 365-381. [PubMed]
  • Harris GC, Hummel M, Wimmer M, Mague SD, Aston-Jones G. Förhöjningar av FosB i kärnan accumbens under tvingad kokainavhängighet korrelerar med divergerande förändringar i belöningsfunktionen. Neuroscience. 2007;147: 583-591. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hopp B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Reglering av omedelbart tidigt genuttryck och AP-1-bindning i råttkärnan accumbens av kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hoppas BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av ett långvarigt AP-1-komplex bestående av förändrade Fos-liknande proteiner i hjärnan av kronisk kokain och andra kroniska behandlingar. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Själv DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Uttryck av transkriptionsfaktorn deltaFosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Nature. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Kohlert JG, Meisel RL. Sexuell erfarenhet sensibiliserar parning-relaterad kärna accumbens dopamin svar av kvinnliga syriska hamstrar. Behav Brain Res. 1999;99: 45-52. [PubMed]
  • Kohlert JG, Rowe RK, Meisel RL. Intromissiv stimulering från hanen ökar extracellulär dopaminfrisättning från fluor-guldidentifierade neuroner inom midjebarnet hos kvinnliga hamstrar. Horm Behav. 1997;32: 143-154. [PubMed]
  • Koob GF, Ahmed SH, Boutrel B, Chen SA, Kenny PJ, Markou A, O'Dell LE, Parsons LH, Sanna PP. Neurobiologiska mekanismer i övergången från droganvändning till narkotikamissbruk. Neurovetenskap och Biobehavioral Recensioner. 2004;27: 739-749. [PubMed]
  • Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatin remodeling är en nyckelmekanism som ligger bakom kokaininducerad plasticitet i striatum. Neuron. 2005;48: 303-314. [PubMed]
  • Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaininducerad dendritisk ryggradssbildning i D1- och D2-dopaminreceptorinnehållande mellanspinniga neuroner i nukleinsymboler. Proc Natl Acad Sci US A. 2006;103: 3399-3404. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Li Y, Kolb B, Robinson TE. Placeringen av persistenta amfetamininducerade förändringar i densiteten hos dendritiska ryggrad på medelstora snygga neuroner i kärnan accumbens och caudate-putamen. Neuropsychopharmacology. 2003;28: 1082-1085. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Reglering av genuttryck och kokainbelöning av CREB och DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Neuroplasticitet medierad av förändrat genuttryck. Neuropsychopharmacology. 2008;33: 3-17. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylär växel för långsiktig anpassning i hjärnan. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • McDaid J, Graham MP, Napier TC. Metamfetamininducerad sensibilisering förändrar differentiellt pCREB och DeltaFosB på olika sätt genom däggdjurshjärnans limbiska krets. Mol Pharmacol. 2006;70: 2064-2074. [PubMed]
  • Meisel RL, Camp DM, Robinson TE. En mikrodialysstudie av ventral striataldopamin under sexuellt beteende hos kvinnliga syriska hamstrar. Behav Brain Res. 1993;55: 151-157. [PubMed]
  • Meisel RL, Joppa MA. Konditionerad platspreferens hos kvinnliga hamstrar efter aggressiva eller sexuella möten. Physiol Behav. 1994;56: 1115-1118. [PubMed]
  • Meisel RL, Joppa MA, Rowe RK. Dopaminreceptorantagonister dämpar konditionerad platspreferens efter sexuellt beteende hos kvinnliga syriska hamstrar. Eur J Pharmacol. 1996;309: 21-24. [PubMed]
  • Meisel RL, Mullins AJ. Sexuell erfarenhet hos kvinnliga gnagare: cellulära mekanismer och funktionella konsekvenser. Brain Res. 2006;1126: 56-65. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Mermelstein PG, Becker JB. Ökad extracellulär dopamin i kärnans accumbens och striatum hos honkratten under stimulerat samverkande beteende. Behav Neurosci. 1995;109: 354-365. [PubMed]
  • Mumberg D, Lucibello FC, Schuermann M, Muller R. Alternativ splitsning av fosB-transkript resulterar i differentiellt uttryckta mRNA som kodar för funktionellt antagonistiska proteiner. Gener Dev. 1991;5: 1212-1223. [PubMed]
  • Nakabeppu Y, Nathans D. En naturligt förekommande trunkerad form av FosB som hämmar Fos / Jun transkriptionsaktivitet. Cell. 1991;64: 751-759. [PubMed]
  • Nestler EJ. Molekylär grund för långvarig plasticitet underliggande beroende. Nat Rev Neurosci. 2001;2: 119-128. [PubMed]
  • Nestler EJ. Transkriptionsmekanismer för missbruk: deltaFosB: s roll. Philos Trans R Soc London B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Norrholm SD, Bibb JA, Nestler EJ, Ouimet CC, Taylor JR, Greengard P. Kokaininducerad proliferation av dendritiska ryggraden i nukleinsymboler är beroende av aktiviteten av cyklinberoende kinas-5. Neuroscience. 2003;116: 19-22. [PubMed]
  • Nye HE, Hopp BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiska studier av reglering av kronisk FOS-relaterad antigeninduktion av kokain i striatum och kärnan accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Oades RD, Halliday GM. Ventral tegmental (A10) system: neurobiologi. 1. Anatomi och anslutning. Brain Res. 1987;434(2): 117-165. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB i kärnan accumbens reglerar matförstärkt instrumentalt beteende och motivation. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, lager JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducibelt, hjärnregionsspecifik expression av en dominant negativ mutant av c-Jun i transgena möss minskar känsligheten för kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkta mönster av DeltaFosB induktion i hjärnan av missbruk. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Pfaus JG, Damsma G, Wenkstern D, Fibiger HC. Sexuell aktivitet ökar dopaminöverföringen i kärnan accumbens och striatum av kvinnliga råttor. Brain Res. 1995;693: 21-30. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Amfetamin producerar sensibiliserad ökning av lokomotion och extracellulär dopamin företrädesvis i nukleär accumbens skal av råttor som administreras upprepad kokain. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1019-1029. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. En kretsmodell av uttrycket av beteendessensibilisering till amfetaminliknande psykostimulanter. Brain Res Brain Res Rev. 1997a;25: 192-216. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Upprepad kokain modifierar mekanismen genom vilken amfetamin släpper ut dopamin. J Neurosci. 1997b;17: 3254-3261. [PubMed]
  • Pierce RC, Kumaresan V. Det mesolimbiska dopaminsystemet: den slutliga gemensamma vägen för den förstärkande effekten av missbruksmedel? Neurosci Biobehav Rev. 2006;30: 215-238. [PubMed]
  • Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Kokain självadministration förändrar morfologin hos dendrit och dendritiska ryggrad i nukleär accumbens och neocortex. Synapse. 2001;39: 257-266. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Ständiga strukturella modifieringar i nukleär accumbens och prefrontal cortex-neuroner producerad av tidigare erfarenhet av amfetamin. J Neurosci. 1997;17: 8491-8497. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Förändringar i morfologin för dendrit och dendritiska ryggrad i kärnan accumbens och prefrontal cortex efter upprepad behandling med amfetamin eller kokain. Eur J Neurosci. 1999a;11: 1598-1604. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Morphine ändrar strukturen hos neuroner i kärnans accumbens och neocortex hos råttor. Synapse. 1999b;33: 160-162. [PubMed]
  • Robinson TE, Kolb B. Strukturell plasticitet i samband med exponering för missbruk. Neuro. 2004;47(Suppl 1): 33-46. [PubMed]
  • Tzschentke TM. Mäta belöning med det konditionerade platspreferensparadigmet: en omfattande översyn av läkemedelseffekter, senaste framsteg och nya problem. Prog Neurobiol. 1998;56: 613-672. [PubMed]
  • Ulery PG, Nestler EJ. Reglering av DeltaFosB transkriptionsaktivitet genom Ser27 fosforylering. Eur J Neurosci. 2007;25: 224-230. [PubMed]
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Reglering av DeltaFosB-stabilitet genom fosforylering. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosBs inflytande i kärnan accumbens på naturligt belöningsrelaterat beteende. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reglerar hjullöpning. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-induktion i orbitofrontal cortex medger tolerans mot kokaininducerad kognitiv dysfunktion. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Wolf ME, Sun X, Mangiavacchi S, Chao SZ. Psykomotoriska stimulanser och neuronal plasticitet. Neuro. 2004;47(Suppl 1): 61-79. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En viktig roll för DeltaFosB i kärnan accumbens i morfin åtgärder. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]