Metamfetamin verkar på subpopuleringar av neuroner som reglerar sexuellt beteende hos hanrotter (2010)

Neurovetenskap. 2010 31 mars;166(3):771-84. doi: 10.1016/j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 4 januari.

Frohmader KS , Wiskerke J , Wise RA , Lehman MN , Coolen LM.

Källa

Institutionen för anatomi och cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

Abstrakt

Metamfetamin (Meth) är ett mycket beroendeframkallande stimulerande medel. Metamfetaminmissbruk är ofta förknippat med sexuellt riskbeteende och ökad prevalens av humant immunbristvirus (HIM) och metamfetaminanvändare rapporterar ökad sexuell lust, upphetsning och sexuell njutning. Den biologiska grunden för denna koppling mellan drog och sex är okänd. Den aktuella studien visar att metamfetaminadministrering hos hanråttor aktiverar neuroner i hjärnregioner i det mesolimbiska systemet som är involverade i regleringen av sexuellt beteende. Mer specifikt samaktiverar metamfetamin och parning celler i nucleus accumbens kärna och skal, basolateral amygdala och främre cingulära cortex. Dessa fynd illustrerar att i motsats till nuvarande uppfattning kan droger aktivera samma celler som en naturlig förstärkare, det vill säga sexuellt beteende, och i sin tur kan påverka det tvångsmässiga sökandet efter denna naturliga belöning.

Nyckelord: kärnan accumbens, basolateral amygdala, prefrontal cortex, missbruk, reproduktion, missbruk

Motivation och belöning regleras av mesolimbic systemet, ett sammankopplat nätverk av hjärnområdena som ingår i ventral tegmental area (VTA) nucleus accumbens (NAc), basolateral amygdala och medial prefrontal cortex (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas och Volkow, 2005). Det finns gott om bevis för att mesolimbic-systemet är aktiverat som svar på båda ämnena av missbruk (Di Chiara och Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) och naturligt givande beteende som sexuellt beteende (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Manligt sexuellt beteende, och i synnerhet ejakulation, är mycket givande och förstärkande i djurmodeller (Pfaus et al., 2001). Manliga gnagare utvecklar en konditionerad platspreferens (CPP) för sampolymerisering (Agmo och Berenfeld, 1990, Martinez och Paredes, 2001, Tenk, 2008) och kommer att utföra operativa uppgifter för att få tillgång till en sexuellt mottaglig kvinna (Everitt et al., 1987, Everitt och Stacey, 1987). Drog av missbruk är också givande och förstärkande, och djur kommer att lära sig att själv administrera substanser av missbruk, inklusive opiater, nikotin, alkohol och psykostimulanter (Klokt, 1996, Pierce och Kumaresan, 2006, Feltenstein och See, 2008). Även om det är känt att båda droger av missbruk och sexuellt beteende aktiverar mesolimbiska hjärnområden, är det för närvarande oklart huruvida droger av missbruk påverkar samma neuroner som förmedlar sexuellt beteende.

Elektrofysiologiska studier har visat att mat och kokain både aktiverar neuroner i NAc. De två förstärkarna aktiverar emellertid inte samma celler inom NAc (Carelli et al., 2000, Carelli och Wondolowski, 2003). Dessutom orsakar självförvaltning av mat och sackaros inte långvariga förändringar av elektrofysiologiska egenskaper som induceras av kokain (Chen et al., 2008). Däremot föreslår en samling bevis att manligt sexuellt beteende och missbruksmissbruk verkligen kan fungera på samma mesolimbiska neuroner. Psykostimulanter och opioider förändrar uttrycket av sexuellt beteende hos hanrotter (Mitchell och Stewart, 1990, Fiorino och Phillips, 1999a, Fiorino och Phillips, 1999b). Nya data från vårt laboratorium visade att sexuell erfarenhet förändrar responsen på psykostimulantia, vilket framgår av en sensibiliserad lokomotorisk respons och sensibiliserad belöningsuppfattning för d-amfetamin hos sexuellt erfarna djur (Pitchers et al., 2009). Ett liknande svar har tidigare observerats vid upprepad exponering för amfetamin eller andra missbruksmedel (Lett, 1989, Shippenberg och Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren och Kalivas, 2000). Tillsammans föreslår dessa resultat att sexuellt beteende och svar på missbruksmissbruk medieras av samma neuroner i mesolimbic-systemet. Därför är det första syftet med föreliggande studie att undersöka neural aktivering av mesolimbic systemet genom sexuellt beteende och läkemedelsadministration i samma djur. I synnerhet testade vi hypotesen att psykostimulanten, metamfetamin (Meth), verkar direkt på neuroner som normalt förmedlar sexuellt beteende.

Metamfetamin är en av de mest missbrukade illegala drogerna i världen (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008 ) och den har ofta kopplats till förändrat sexuellt beteende. Intressant nog rapporterar metamfetaminanvändare ökad sexuell lust och upphetsning, samt ökad sexuell njutning ( Semple et al., 2002 , Schilder et al., 2005 ). Dessutom är metamfetaminmissbruk ofta förknippat med sexuellt tvångsmässigt beteende ( Rawson et al., 2002 ). Användare rapporterar ofta att de har flera sexpartners och är mindre benägna att använda skydd än andra drogmissbrukare ( Somlai et al., 2003 , Springer et al., 2007 ). Tyvärr är studier som indikerar metamfetaminanvändning som en prediktor för sexuellt riskbeteende begränsade eftersom de förlitar sig på obekräftade självrapporter ( Elifson et al., 2006 ). Därför krävs en undersökning av den cellulära grunden för metamfetamininducerade förändringar i sexuellt beteende i en djurmodell för att förstå denna komplexa koppling mellan droger och sex.

Mot bakgrund av ovanstående bevis som tyder på att missbruksdroger, och särskilt metamfetamin, kan verka på neuroner som normalt är involverade i att mediera sexuellt beteende, var syftet med föreliggande studie att undersöka neural aktivering genom sexuellt beteende och administrering av det psykostimulerande medlet metamfetamin. Denna studie implementerade en neuroanatomisk teknik som använde immunhistokemisk visualisering av de omedelbara tidiga generna Fos och fosforylerat Map Kinase (pERK) för att detektera samtidig neural aktivering genom sexuellt beteende respektive metamfetamin. Fos uttrycks endast i cellkärnan, med en maximal uttrycksnivå 30–90 minuter efter neuronens aktivering. Det finns gott om bevis för att sexuell aktivitet inducerar Fos-uttryck i hjärnan ( Pfaus och Heeb, 1997 , Veening och Coolen, 1998 ), inklusive det mesokortikolimbiska systemet ( Robertson et al., 1991 , Balfour et al., 2004 ). Det finns också bevis för att missbruksdroger inducerar pERK-uttryck inom det mesokortikolimbiska systemet ( Valjent et al., 2000 , Valjent et al., 2004 , Valjent et al., 2005 ). Till skillnad från uttrycket av Fos är fosforylering av ERK en mycket dynamisk process och sker endast 5–20 minuter efter neuronal aktivering. De distinkta tidsprofilerna för Fos och pERK gör dem till en idealisk uppsättning markörer för efterföljande neuronal aktivering av två olika stimuli.

EXPERIMENTELLA PROCEDURER

Ämnen

Vuxna hanråttor av typen Sprague Dawley (210–225 g) från Charles River Laboratories (Montreal, QC, Kanada) hölls två per bur i vanliga plexiglasburar (hemburar). Djurrummet hölls med en 12/12 timmars omvänd ljuscykel (ljuset släcks kl. 10.00). Mat och vatten fanns tillgängligt ad libitum. All testning utfördes under den första halvan av den mörka fasen under svagt rött ljus. Stimulanshonor som användes för sexuellt beteende fick bilaterala äggstockar opereras under djup anestesi (13 mg/kg ketamin och 87 mg/kg xylazin) och fick ett subkutant implantat innehållande 5 % östradiolbensoat (EB) och 95 % kolesterol. Sexuell mottaglighet inducerades genom subkutan (sc) administrering av 500 μg progesteron i 0.1 ml sesamolja 4 timmar före testning. Alla procedurer godkändes av djurvårdskommittén vid University of Western Ontario och överensstämmer med riktlinjerna från Canadian Council on Animal Care.

Experimentella mönster

Experiment 1 och 2: Hanråttor (n=37) fick para sig med en mottaglig hona för en ejakulation (E) eller i 30 minuter, beroende på vilket som inträffade först, i rena testburar (60 × 45 × 50 cm) under fem parningssessioner två gånger i veckan före testet, för att få sexuell erfarenhet. Under de två senare sessionerna registrerades alla standardparametrar för sexuell prestation, inklusive: monteringslatens (ML; tid från introduktion av honan till den första monteringen), intromissionslatens (IL; tid från introduktion av honan till den första monteringen med vaginal penetration), ejakulationslatens (EL; tid från första intromission till ejakulation), post-ejakulationsintervall (PEI; tid från ejakulation till första efterföljande intromission), antal monteringar (M) och antal intromissioner (IM) ( Agmo, 1997 ). Alla hanar fick 1 ml/kg daglig injektion av 0.9 % NaCl (saltlösning; subkutant) 3 dagar i följd före testdagen, för att vänja sig vid hantering och injektioner. En dag före testdagen hölls alla hanar ensamma. Hos erfarna hanar kan Fos induceras genom betingade kontextuella signaler associerade med tidigare sexuell erfarenhet ( Balfour et al, 2004 ). Därför utfördes alla parnings- och kontrollmanipulationer under de slutliga testerna i hemmaburen (undvik prediktiva betingade signaler) för att förhindra betingad signalinducerad aktivering hos de omaparade kontrollhanarna. Hanarna delades in i åtta experimentgrupper som inte skilde sig åt i något mått på sexuell prestation under de två sista parningssessionerna (data visas ej). Under det slutliga testet fick hanarna antingen para sig i sin hemmabur tills de uppvisade en ejakulation (sex) eller fick ingen kvinnlig partner (inget sex). Alla parade hanar perfunderades 60 minuter efter parningens början för att möjliggöra analys av parningsinducerat Fos-uttryck. Hanarna fick en injektion av 4 mg/kg metamfetamin eller 1 ml/kg saltlösning (sc) (n=4 vardera), antingen 10 (experiment 1) eller 15 (experiment 2) minuter före perfusion, för analys av läkemedelsinducerad fosforylering av MAP-kinas. Dosering och tid före perfusion baserades på tidigare rapporter ( Choe et al., 2002 , Choe och Wang, 2002 , Chen och Chen, 2004 , Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006 ). Kontrollgrupperna inkluderade hanar som inte parade sig, men som fick metamfetamin 10 (n=7) eller 15 (n=5) minuter före avlivning, eller saltlösningsinjektioner 10 (n=5) eller 15 (n=4) minuter före avlivning. Efter avlivning bearbetades hjärnorna för immunhistokemi.

Experiment 3: Eftersom en hög dos Meth användes i experiment 1 och 2 utfördes ett ytterligare neuroanatomiskt experiment för att undersöka om sexuellt beteende och en lägre dos Meth induserade dosberoende mönster av överlappande neuralt aktivering. Denna studie utfördes på ett identiskt sätt som experiment 1 och 2. Vid det slutliga testet fick emellertid sammankopplade och omoderna grupper (n = 6 vardera) 1 mg / kg Meth (sc) 15 min före offer.

Experiment 4: För att testa om neural aktivering orsakad av kön och metamfetamin är specifik för metamfetamin, undersökte detta experiment om liknande mönster av överlappande neural aktivering kunde ses med det psykostimulerande medlet d-amfetamin (Amph). Detta experiment utfördes på identiskt sätt som experiment 1 och 2. I det sista testet administrerades dock hanarna antingen Amph (5 mg/kg) eller saltlösning (1 mg/kg) (subkutant) 15 minuter före avlivning (n=5 vardera). Kontrollhanar som inte parats fick saltlösning eller Amph 15 minuter före avlivning. En översikt över de experimentgrupper som användes i experiment 1–4 finns i tabell 1.

Tabell 1      

Översikt över experimentella grupper som ingår i experiment 1-4.

Tissue Preparation

Djur bedövades med pentobarbital (270 mg / kg, ip) och perfusionerades transkartärt med 5 ml saltlösning följt av 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffert (PB). Hjärnor avlägsnades och efterfixerades för 1 h vid rumstemperatur i samma fixativ, nedsänktes sedan i 20% sackaros och 0.01% natriumazid i 0.1 M PB och lagrades vid 4 ° C. Koronala sektioner (35 μm) skars på en frysande mikrotom (H400R, Micron, Tyskland) samlades i fyra parallella serier i kryoprotektantlösning (30% sackaros och 30% etylenglykol i 0.1 M PB) och lagrades vid 20 ° C tills vidare bearbetning.

immunohistokemi

Alla inkubationer utfördes vid rumstemperatur under försiktig omrörning. Fritt flytande snitt tvättades noggrant med 0.1 M fosfatbuffrad saltlösning (PBS) mellan inkubationerna. Snitten inkuberades i 1 % H₂O₂ i 10 minuter och blockerades sedan i inkubationslösning (PBS innehållande 0.1 % bovint serumalbumin och 0.4 % Triton X-100) i 1 timme.

Perk / Fos

Vävnad inkuberades över natten med en polyklonal kaninantikropp mot p42- och p44-kartkinaserna ERK1 och ERK2 (pERK; 1:400 experiment 1 lot 19; 1:4 000 experiment 2 och 3 lot 21; Cell Signaling Cat # 9101;), följt av 1 timmes inkubationer med biotinylerad åsna-anti-kanin-IgG (1:500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) och avidin-pepparrotsperoxidaskomplex (ABC Elite; 1:1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Därefter inkuberades vävnaden i 10 minuter med biotinylerad tyramid (BT; 1:250 i PBS + 0.003 % H₂O₂ ; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) och i 30 minuter med Alexa 488-konjugerad strepavidin (1:100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Därefter inkuberades vävnaden över natten med en polyklonal kaninantikropp mot c-Fos (1:500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), följt av en 30 minuters inkubation med get-anti-kanin Alexa 555 (1:200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Efter färgning tvättades snitten noggrant i 0.1 M PB, monterades på objektglas med 0.3 % gelatin i ddH₂O och täcktes med ett vattenhaltigt monteringsmedium (Gelvatol) innehållande antiblekningsmedlet 1,4-diazabicyklo(2,2)oktan (DABCO; 50 mg/ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiska kontroller inkluderade utelämnande av en eller båda primära antikropparna, vilket resulterade i avsaknad av märkning i lämplig våglängd.

Dataanalys

Sexuellt beteende

För alla fyra experimenten registrerades standardparametrar för sexuell prestation som beskrivits ovan och analyserades med hjälp av variansanalys (ANOVA). Dataanalys av sexuellt beteende under den sista testdagen avslöjade inga signifikanta skillnader mellan grupper i någon av parametrarna för sexuell prestation.

pERK / Fos cellantal

Enkel- och dubbelmärkta celler för Fos och pERK räknades i de kaudala nivåerna av NAc-kärn- och skalsubregionerna, basolateral amygdala (BLA), posterodorsal medial amygdala (MEApd), central amygdala (CeA), medial preoptisk kärna (MPN), posteromediala och posterolaterala bäddkärnor i stria terminalis (BNSTpm och BNSTpl), samt det främre cingulerade området (ACA), prelimbiska (PL) och infralimbiska (IL) subregionerna av mPFC. Bilder togs med en kyld CCD-kamera (Microfire, Optronics) ansluten till ett Leica-mikroskop (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) och Neurolucida-programvara (MicroBrightfield Inc) med fasta kamerainställningar för alla försökspersoner (med 10x objektiv). Med hjälp av neurolucida-programvara definierades analysområden baserat på landmärken ( Swanson, 1998 ) unika för varje hjärnregion (se figur 1 ). Standardanalysområden användes i alla områden utom NAc-kärna och -skal. I de senare områdena var pERK- och Fos-uttrycket inte homogent och uppträdde i fläckliknande mönster. Därför skisserades hela kärnan och skalet baserat på landmärken (lateral ventrikel, främre kommisur och Callejaöarna). Analysområdena skilde sig inte mellan experimentgrupperna och var 1.3 mm² i NAc-kärnan och -skal. Standardanalysområdena för de återstående områdena var: 1.6 mm² i BLA, 2.5 och 2.25 mm² i MEApd respektive CeA, 1.0 mm² i MPN, 1.25 mm² i BNST- och mPFC-subregionerna och 3.15 mm² i VTA. Två sektioner räknades bilateralt för varje hjärnregion per djur, och antalet enkel- och dubbelmärkta celler för pERK och Fos samt procentandelen pERK-celler som uttryckte Fos-markör beräknades. För experiment 1, 2 och 4 jämfördes gruppmedelvärden med hjälp av tvåvägs ANOVA (faktorer: parning och läkemedel) och Fishers LSD för post hoc -jämförelser vid en signifikansnivå på 0.05. För experiment 3 jämfördes gruppmedelvärden med oparade t-tester vid en signifikansnivå på 0.05.

Figur 1      

Schematiska ritningar och bilder som illustrerar hjärnområden av analys. Angivna analysområden var baserade på landmärken som var unika för varje hjärnområde, skilde inte mellan experimentgrupper och var 1.25 mm2 i mPFC-delregioner (a), 1.3 mm2 i .

Bilder

Digitala bilder för figur 3 togs med en CCD-kamera (DFC 340FX, Leica) ansluten till ett Leica-mikroskop (DM500B) och importerades till Adobe Photoshop 9.0-programvaran (Adobe Systems, San Jose, CA). Bilderna ändrades inte på något sätt förutom justering av ljusstyrkan.

Figur 3      

Representativa bilder av NAc-sektioner immunostained för Fos (röd, a, d, g, j) och pERK (grön, b, e, h, k) av djur i varje experimentgrupp: Nej Kön + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), Inget kön + Meth (g, h, i) och Sex + Meth (j, k, l). Höger paneler är .

RESULTAT

Neural aktivering av det limbiska systemet genom sexuell beteende och metadministration

Experiment 1: Analys av enkel- och dubbelmärkta celler för parningsinducerad Fos och Meth-inducerad pERK hos hanar som fick Meth 10 minuter före avlivning avslöjade parningsinducerad Fos i MPN, BNSTpm, NAc-kärna och -skal, BLA, VTA och alla subregioner av mPFC, vilket överensstämmer med tidigare studier som visar parningsinducerad Fos-expression i dessa områden ( Baum och Everitt, 1992 , Pfaus och Heeb, 1997 , Veening och Coolen, 1998 , Hull et al., 1999 ). Meth-administrering 10 minuter före avlivning inducerade pERK i NAc-kärna och -skal, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl och regioner av mPFC, vilket överensstämmer med aktiveringsmönster inducerade av andra psykostimulantia ( Valjent et al., 2000 , Valjent et al., 2004 , Valjent et al., 2005 ).

Dessutom observerades tre mönster av samuttryck av neural aktivering genom sexuellt beteende och metamfetamin: Först identifierades hjärnområden där sex och droger aktiverade icke-överlappande neurala populationer ( tabell 2 ). Specifikt observerades signifikanta ökningar av både läkemedelsinducerad pERK (F(1,16)=7.39–48.8; p=0.015-<0.001) och sexinducerad Fos (F(1,16)=16.53–158.83; p<0.001) i CeA, MEApd, BNSTpl och mPFC. I dessa regioner fanns dock inga signifikanta ökningar av dubbelmärkta neuroner hos parade metamfetaminbehandlade hanar. Det enda undantaget var MEApd, där en effekt av parning på antalet dubbelmärkta celler observerades (F(1,16)=9.991; p=0.006). Det fanns dock ingen övergripande effekt av läkemedelsbehandling och dubbelmärkning i metamfetaminbehandlade grupper var inte signifikant högre än i saltlösningsbehandlade grupper, och orsakades således inte av läkemedlet ( tabell 2 ). För det andra identifierades hjärnområden där neural aktivering endast inducerades genom parning ( tabell 3 ). Mer specifikt aktiverades MPN, BNSTpm och VTA endast genom parning och innehöll signifikanta ökningar av parningsinducerad Fos (F(1,16)=14.99–248.99; p ≤ 0.001), men ingen metamfetamininducerad pERK.

Tabell 2      

Översikt över parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i hjärnområden där kön och läkemedel aktiverar icke-överlappande neurala populationer.
Tabell 3      

Översikt över parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i hjärnområden där neural aktivering inducerades endast genom parning.

Slutligen hittades hjärnområden där sex och droger aktiverade överlappande populationer av neuroner ( Figur 2 och 3 ). I NAc-kärnan och -skalet, BLA och ACA, fanns det övergripande effekter av parning (F(1,16)=7.87–48.43; p=0.013-<0.001) och läkemedelsbehandling (F(1,16)=6.39–52.68; p=0.022-<0.001), samt en interaktion mellan dessa två faktorer (F(1,16)=5.082–47.27; p=0.04-<0.001; ingen signifikant interaktion i ACA) på antalet celler som uttrycker både parningsinducerad Fos och Meth-inducerad pERK. Post hoc-analys visade att antalet dubbelmärkta neuroner var signifikant högre hos parade metamfetamininjicerade hanar jämfört med omaparade metamfetaminbehandlade (p = 0.027-<0.001) eller parade saltlösningsbehandlade (p = 0.001-<0.001) hanar ( Figur 2 och 3 ). När data uttrycktes som procentandelar läkemedelsaktiverade neuroner aktiverades 39.2 ± 5.3 % i NAc-kärnan, 39.2 ± 5.8 % i NAc-skalet, 40.9 ± 6.3 % i BLA och 50.0 ± 5.3 % av ACA-neuronerna av både parning och metamfetamin.

Figur 2      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 10 min efter administrering av 4 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

En oväntad observation var att sexuellt beteende påverkade metamfetamininducerad pERK. Även om metamfetamin signifikant inducerade pERK-nivåer i både parade och omarmade metamfetamininjicerade grupper, var pERK-märkningen signifikant lägre hos parade metamfetamininjicerade hanar i NAc-, BLA- och ACA-grupperna jämfört med omarmade metamfetamininjicerade hanar ( Figur 2b, e, h, k ; p = 0.017-<0.001). Detta fynd kan ytterligare stödja hypotesen att sex och droger verkar på samma neuroner, men det kan också tyda på parningsinducerade förändringar i läkemedelsupptag eller metabolism som i sin tur orsakar förändrade neurala svar på metamfetamin. För att undersöka om sexuellt beteende orsakar ett annat tidsmässigt mönster av läkemedelsinducerad aktivering, färgades sektioner av NAc, BLA och ACA för hanar som avlivades vid en senare tidpunkt (15 min) efter läkemedelsadministrering (experiment 2).

Experiment 2: Analys av enkel- och dubbelmärkta celler bekräftade de ovan beskrivna resultaten att sexuellt beteende och efterföljande exponering för Met 15 minuter före avlivning resulterade i signifikanta ökningar av Fos- och pERK-immunmärkning i NAc-kärnan och -skalet, BLA och ACA. Dessutom hittades återigen signifikant samuttryck av parningsinducerat Fos och Met-inducerat pERK i dessa områden ( Figur 4 ; parningseffekt: F(1,12)=15.93–76.62; p=0.002-<0.001; läkemedelseffekt: F(1,12)=14.11–54.41; p=0.003-<0.001). Antalet dubbelmärkta neuroner hos parade Met-injicerade hanar var signifikant högre jämfört med omaprade Met-behandlade (p<0.001) eller parade saltlösningsbehandlade (p<0.001) hanar. När data uttrycktes som procentandelar läkemedelsaktiverade neuroner, aktiverades 47.2 ± 5.4 % (NAc-kärna), 42.7 ± 7.6 % (NAc-skal), 36.7 ± 3.7 % (BLA) och 59.5 ± 5.1 % (ACA) av neuronerna aktiverade genom parning också av metamfetamin. Dessutom skilde sig inte läkemedelsinducerad pERK mellan parade och omarvade djur ( figur 4b, e, h, k ) i alla områden förutom för ACA (p < 0.001). Dessa data indikerar att sexuellt beteende verkligen orsakar en förändring av det tidsmässiga mönstret för pERK-induktion av metamfetamin.

Figur 4      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 4 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

Neural aktivering efter sexuell beteende och 1 mg / kg Meth

Hittills har resultaten visat att sexuellt beteende och 4 mg/kg Meth aktiverade överlappande populationer av neuroner i NAc-kärnan och -skalet, BLA och ACA. För att undersöka läkemedelsdosens inverkan på denna överlappning i aktivering studerades även mönster av neural aktivering med en lägre dos meth. NAc-kärnan och -skalet, BLA och ACA analyserades för aktivering inducerad av kön och meth. Sexuellt beteende och efterföljande exponering för meth resulterade faktiskt i signifikanta ökningar av Fos- och pERK-immunmärkning i NAc-kärnan och -skal-subregionerna, BLA, såväl som neuroner i ACA-regionen av mPFC ( Figur 5 ). Intressant nog resulterade den lägre dosen meth i ett liknande antal pERK-märkta neuroner som inducerades av 4 mg/kg Meth i de fyra analyserade hjärnregionerna. Ännu viktigare är att NAc-kärnan och -skalet, BLA och ACA uppvisade signifikanta ökningar i antalet dubbelmärkta celler ( Figur 5c, f, i, l ) jämfört med omarvade metamfetamininjicerade hanar (p = 0.003-<0.001). När data uttrycktes som procentandelar läkemedelsaktiverade neuroner aktiverades 21.1 ± 0.9 % respektive 20.4 ± 1.8 % i NAc-kärnan och -skalet, 41.9 ± 3.9 % i BLA och 49.8 ± 0.8 % av ACA-neuronerna av kön och metamfetamin.

Figur 5      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 1 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

Neural aktivering efter sexuellt beteende och administrering av d-amfetamin

För att testa om ovanstående resultat var specifika för Meth, utfördes ett ytterligare experiment för att studera parnings- och Amph-inducerad neural aktivering. Analys av enkel- och dubbelmärkta celler för pERK och Fos visade att sexuellt beteende och efterföljande exponering för Amph resulterade i signifikanta ökningar av Fos- och pERK-immunmärkning i NAc-kärnan och -skalet samt BLA ( Figur 6 ; parningseffekt: F(1,15)=7.38–69.71; p=0.016-<0.001; läkemedelseffekt: F(1,15)=4.70–46.01; p=0.047-<0.001). Dessutom var antalet dubbelmärkta neuroner signifikant högre hos parade Amph-behandlade hanar jämfört med omarvade Amph-behandlade (p=0.009-<0.001) eller parade saltlösningsbehandlade (p=0.015-<0.001) hanar ( Figur 6c, f, i ). När data uttrycktes som procentandelar läkemedelsaktiverade neuroner aktiverades 25.7 ± 2.8 % respektive 18.0 ± 3.2 % i NAc-kärnan och -skalet, och 31.4 ± 2.0 % av BLA-neuronerna av både parning och Amph. ACA-regionen i mPFC uppvisade signifikanta nivåer av parningsinducerad Fos ( Figur 6j ; F(1,15)=168.51; p<0.001). Till skillnad från Meth resulterade Amph dock inte i signifikanta ökningar av läkemedelsinducerade pERK-nivåer i ACA ( Figur 6k ) eller antalet dubbelmärkta neuroner i ACA ( Figur 6l ) jämfört med både parade och omarvade saltlösningsinjicerade hanar.

Figur 6      

Sexinducerad Fos och Amph-inducerad pERK-expression i NAc, BLA och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 5 mg / kg Amph. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

DISKUSSION

Den aktuella studien demonstrerar på cellulär nivå en överlappning mellan neuralt aktivering med det naturliga förstärkars sexuella beteendet och psykostimulanten Meth. Därför visar dessa data att inte bara droger verkar på samma hjärnregioner som reglerar naturlig belöning, men i själva verket aktiverar droger samma celler som är inblandade i reglering av naturlig belöning. Specifikt visades det här att sexuellt beteende och Meth samaktiverade en population av neuroner i NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA-regionen i mPFC, som identifierar potentiella platser där Meth kan påverka sexuellt beteende.

Den nuvarande upptäckten att sexuellt beteende och administration av Meth aktiverar överlappande populationer av neuroner i NAc, BLA och ACA står i kontrast till resultaten från andra studier som visar att olika populationer av NAc-neuroner kodar läkemedel och naturliga belöningar.

Mer specifikt har elektrofysiologiska studier som jämfört neural aktivering under självadministrering av naturliga belöningar (mat och vatten) och intravenöst kokain indikerat att självadministrering av kokain aktiverade en differentiell, icke-överlappande population av neuroner som generellt inte svarade under operant respons på vatten- och matförstärkning (92 %). Endast 8 % av ackumbala neuroner visade aktivering av både kokain och naturlig belöning ( Carelli et al., 2000 ).

Däremot visade en majoritet (65 %) av cellerna i NAc aktivering av olika naturliga belöningar (mat och vatten), även om en förstärkare var mer välsmakande (sackaros) ( Roop et al., 2002 ).

Flera faktorer kan ha bidragit till avvikelsen med nuvarande resultat. För det första användes olika tekniska metoder för att undersöka neural aktivitet. Den aktuella studien utnyttjade en neuroanatomisk metod för detektering av samtidig neuralt aktivering med två olika stimuli med användning av dubbel fluorescerande immuncytokemistik för Fos och pERK, vilket möjliggör undersökning av enkelcellsaktivering över stora spänningar av hjärnområden. Däremot använde Carelli och medarbetare studierna elektrofysiologiska inspelningar som begränsades till NAc hos uppträdande djur för att ta itu med om självförvaltning av missbruksmedel aktiverar samma neurala kretsar som används av naturliga belöningar.

För det andra undersökte den aktuella studien en annan naturlig belöning, dvs. sexuellt beteende, jämfört med tidigare studier som använde mat och vatten hos restriktiva råttor ( Carelli, 2000 ). Mat och vatten kan ha mindre givande värde än parning. Sexuellt beteende är mycket givande och råttor bildar lätt CPP för kopulation ( Agmo och Berenfeld, 1990 , Martinez och Paredes, 2001 , Tenk, 2008 ). Även om dietrestrikerade råttor bildar CPP för vatten ( Agmo et al., 1993 , Perks och Clifton, 1997 ) och mat ( Perks och Clifton, 1997 ), konsumerar och bildar dietiga, orestriktiva råttor företrädesvis CPP för mer välsmakande föda ( Jarosz et al., 2006 , Jarosz et al., 2007 ).

För det tredje inkluderade våra studier olika missbruksdroger jämfört med tidigare studier, där de använde metamfetamin och amfetamin istället för kokain . De aktuella resultaten visar att specifikt metamfetamin, och i mindre utsträckning amfetamin, resulterade i aktivering av neuroner som också aktiverades av sexuellt beteende. Drogerfarenhet kan också ha spelat en roll i våra resultat. De aktuella studierna använde djur som var sexuellt erfarna men drognaiva. Däremot använde Carelli och medarbetares elektrofysiologiska studier "vältränade" djur som utsattes för upprepad exponering för kokain.

Det är därför möjligt att den metamfetamininducerade aktiveringen av neuroner aktiverade av sexuellt beteende förändras hos drogerfarna råttor. Preliminära studier från vårt laboratorium tyder dock på att drogerfarenhet sannolikt inte är en viktig faktor eftersom sexuellt beteende och metamfetaminbehandling hos hanar som kroniskt behandlats med metamfetamin samtidigt aktiverade liknande procentandelar läkemedelsaktiverade neuroner som rapporterats i den aktuella studien (20.3 ± 2.5 % i NAc-kärna och 27.8 ± 1.3 % i NAc-skal; Frohmader och Coolen, opublicerade observationer).

Slutligen undersökte den aktuella studien den "direkta" verkan av läkemedel som använder passiv administrering. Därför avslöjar den aktuella analysen inte information om neurala kretsar involverade i läkemedelssökande eller signaler associerade med läkemedelsbelöning, utan snarare neural aktivitet orsakad av läkemedlets farmakologiska verkan . I tidigare elektrofysiologiska studier är NAc-neural aktivitet som inträffar inom sekunder efter förstärkta svar inte resultatet av kokainets farmakologiska verkan, utan är i hög grad beroende av associativa faktorer inom självadministreringsparadigmet ( Carelli, 2000 , Carelli, 2002 ). Specifikt påverkas NAc-neural aktivitet av responsoberoende presentationer av stimuli associerade med intravenös kokainleverans såväl som av instrumentella händelser (dvs. spaktryckningar) som är inneboende i detta beteendeparadigm ( Carelli, 2000 , Carelli och Ijames, 2001 , Carelli, 2002 , Carelli och Wightman, 2004 ). Sammanfattningsvis kan våra resultat av samaktivering genom naturlig och läkemedelsbelöning vara specifika för aktivering genom sexuellt beteende och passivt administrerad metamfetamin och amfetamin.

Meth och kön aktiverade överlappande populationer av neuroner i NAc-kärnan och skalet på ett dosberoende sätt. De samaktiverade neuronerna i NAc kan medla potentiella effekter av Meth på motivationen och givande egenskaper hos sexuellt beteende, eftersom lesioner av NAc störa sexuellt beteende (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Dessutom är dessa neuroner potentiellt ett ställe för dosberoende läkemedelseffekter vid parning, eftersom den lägre Meth-dosen (1 mg / kg) minskade antalet dubbelmärkta celler med 50% jämfört med den högre dosen Meth (4 mg / kg). Fastän denna studie inte identifierar den kemiska fenotypen av samaktiverade neuroner har tidigare studier visat att läkemedelsinducerat PERK- och Fos-uttryck i NAc är beroende av både dopamin (DA) och glutamatreceptorer (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Fastän det inte är klart om parning-inducerad neural aktivering i NAc är beroende av dessa receptorer har detta visats på andra hjärnregioner, särskilt i den mediala preoptiska området (Lumley och Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). Thus kan Meth fungera på neuroner som också aktiveras under sexuellt beteende via aktivering av dopamin och glutamatreceptorer. NAc-glutamats roll i sexuellt beteende är för närvarande oklart, men det är väl etablerat att DA spelar en viktig roll i motivationen för sexuellt beteende (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Mikrodialysstudier rapporterade ökningar av NAc DA-utflöde under aptitliga och konsumtiva faser av manligt sexuellt beteende (Fiorino och Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) och mesolimbisk DA-utflöde har korrelerats med att underlätta initiering och upprätthållande av råttkönsmässigt beteende (Pfaus och Everitt, 1995). Vidare visar DA-manipulationsstudier DA-antagonister i NAc-hämmar sexuellt beteende, medan agonister underlättar initiering av sexuellt beteender (Everitt et al., 1989, Pfaus och Phillips, 1989). Således kan Meth påverka motivation för sexuellt beteende via aktivering av DA receptorer.

I motsats till NAc var antalet dubbelmärkta celler i BLA och ACA relativt oförändrat oavsett Meth-dosen. BLA är kritisk för diskret associativ inlärning och är starkt involverad i konditionerad förstärkning och belöningsutvärdering under instrumental respons (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Se, 2002). BLA-belastade råttor visade minskad spakspänning för konditionerade stimuli i kombination med mat (Everitt et al., 1989) eller sexuell förstärkning (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). I motsats härtill påverkar denna manipulation inte den konsumtiva fasen av matning och sexuellt beteende (Cardinal et al., 2002). BLA spelar också en nyckelroll till minne av konditionerade stimuli associerade med läkemedelsstimuli (Grace och Rosenkranz, 2002, Laviolette och Grace, 2006). Lesioner eller farmakologiska inaktiveringar av BLA-blocket förvärvet (Whitelaw et al., 1996) och uttryck (Grimm och See, 2000) Konditionering av kokainreparation, medan den inte påverkar läkemedelsförfarandet. Vidare, Amph infunderad direkt i BLA resulterar i en potentierad återställning av läkemedel i närvaro av de konditionerade indikatorerna (Se et al., 2003). Därför är det möjligt att psykostimulerande förbättrad DA-överföring i BLA resulterar i potentierad känslomässig salighet och sökande (Ledford et al., 2003) av sexuell belöning, vilket bidrar till den förbättrade sexuella körningen och lusten som rapporteras av Meth-missbrukare (Semple et al., 2002, Grön och Halkit, 2006).

I ACA var neural aktivering av könsaktiverade neuroner dosoberoende och specifik för Meth, eftersom den inte observerades med Amph. Även om Meth och Amph har liknande strukturella och farmakologiska egenskaper, är Meth ett mer potent psykostimulerande medel än Amph med mer långvariga effekter (NIDA, 2006). Studier av Goodwin et al. visade att Meth genererar ett större DA-efflux och hämmar clearance av lokalt applicerad DA mer effektivt i rått-NAc än Amph. Dessa egenskaper kan bidra till Meths beroendeframkallande egenskaper jämfört med Amph ( Goodwin et al., 2009 ) och kanske de skillnader i neural aktivering som observerats mellan de två läkemedlen. Det är dock inte klart om de olika resultatmönstren beror på effektskillnader mellan läkemedlen eller potensproblem relaterade till de använda doserna och ytterligare undersökning krävs.

Samaktivering av Meth och kön observerades inte i andra delregioner av mPFC (IL och PL). I råtta har ACA studerats omfattande med hjälp av aptitliga uppgifter, som stödjer en roll i stimulansförstärkareorganisationer (Everitt et al., 1999, Se, 2002, Cardinal et al., 2003). Det finns gott om bevis för att mPFC är inblandad i drogbehov och återfall till läkemedelssökande och drogbeteende hos både människor och råttor (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin och See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas och Volkow, 2005). jagI linje med detta har det föreslagits att mPFC-dysfunktion orsakad av upprepad exponering för missbrukande läkemedel kan vara ansvarig för minskad impulskontroll och ökat drogstyrt beteende som observerats hos många missbrukare (Jentsch och Taylor, 1999). Nya data från vårt laboratorium visade att mPFC-lesioner resulterade i fortsatt sökande av sexuellt beteende när detta var associerat med en aversiv stimulans (Davis et al., 2003). Trots att denna studie inte undersökte ACA stöder den hypotesen att mPFC (och ACA specifikt) medierar effekterna av Meth på en förlust av hämmande kontroll över sexuellt beteende som rapporterats av Meth-missbrukare (Salo et al., 2007).

Sammanfattningsvis utgör dessa studier ett kritiskt första steg mot en bättre förståelse av hur missbruksmissbruk agerar på neurala vägar som normalt förmedlar naturliga belöningar. Dessutom illustrerar dessa fynd att i motsats till den nuvarande övertygelsen att missbruksmedel inte aktiverar samma celler i mesolimbicsystemet som naturlig belöning, aktiverar Meth, och i mindre utsträckning Amph, samma celler som sexuellt beteende. Dessa samaktiva neurala populationer kan i sin tur påverka sökandet efter naturlig belöning efter exponering av läkemedel. Slutligen kan resultaten av denna studie väsentligt bidra till vår förståelse av grunden för missbruk i allmänhet. Jämförelser av likheter och skillnader samt förändringar i neuralt aktivering av mesolimbinsystemet som framkallas av sexuellt beteende mot missbruksmissbruk kan leda till en bättre förståelse av missbruk och därmed sammanhängande förändringar i naturlig belöning.

Erkännanden

Denna forskning stöddes av bidrag från National Institute of Health R01 DA014591 och kanadensiska institut av hälsovetenskap RN 014705 till LMC.

FÖRKORTNINGAR

  • ABC
  • avidin-biotin-pepparrotperoxidaskomplex
  • ACA
  • främre cingulatområdet
  • Amph
  • d-amfetamin
  • BLA
  • basolateral amygdala
  • BNSTpl
  • posterolaterala sängkärnan i stria terminalis
  • BNSTpm
  • postomediala sängkärnan från stria terminalis
  • BT
  • biotinylerad tyramid
  • CEA
  • cental amygdala
  • CPP
  • konditionerad platspreferens
  • E
  • ejakulation
  • EL
  • ejakulations latens
  • IF
  • infralimbic område
  • IL
  • intromission latens
  • IM
  • intromission
  • M
  • montera
  • MAP Kinase
  • mitogenaktiverad proteinkinas
  • MEApd
  • posterodorsal medial amygdala
  • met
  • metamfetamin
  • ML
  • monterings latens
  • mPFC
  • medial prefrontal cortex
  • MPN
  • medial preoptisk kärna
  • NAc
  • kärnan Accumbens
  • PB
  • Fosfatbuffert
  • PBS
  • fosfatbuffrad saltlösning
  • PEI
  • posta ejaculatoriskt intervall
  • HÖJA
  • fosforylerat MAP-kinas
  • PL
  • prelimbic område
  • VTA
  • ventral tegmental area

fotnoter

Utgivarens ansvarsfriskrivning: Detta är en PDF-fil av ett oredigerat manuskript som har godkänts för publicering. Som en service till våra kunder tillhandahåller vi denna tidiga version av manuskriptet. Manuskriptet kommer att genomgå korrekturläsning, typsättning och granskning av det resulterande korrekturet innan det publiceras i sin slutliga citerbara form. Observera att fel kan upptäckas under produktionsprocessen som kan påverka innehållet, och alla juridiska ansvarsfriskrivningar som gäller för tidskriften gäller.

Referensprojekt

  1. Agmo A. Mänskliga råttor sexuellt beteende. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Förstärkning av ejakulationsegenskaper hos hanrotten: Opioids och dopaminers roll. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Belöning och förstärkning framställd av dricksvatten: Funktionen av opioider och dopaminreceptorsubtyper. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Sexuellt beteende och könsrelaterade miljöanpassningar aktiverar mesolimbic systemet hos hanrotter. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Ökat uttryck av c-fos i det mediala preoptiska området efter parning hos hanrotter: Roll av afferenta ingångar från medial amygdala och midbrain central tegmental fält. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. En roll för prefrontal cortex i stress- och kokaininducerad återinställning av kokain som söker hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Kardinal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Känslor och motivation: rollen som amygdala, ventral striatum och prefrontal cortex. Neurovetenskap & Biobehavioral Reviews. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Rollen av den främre cingulära cortexen i kontrollen över beteendet av Pavlovian-konditionerade stimuli hos råttor. Beteende neurovetenskap. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktivering av accumbens cellbränning med stimuli associerad med kokainleverans under självadministrering. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens cell avfyrar under målstyrda beteenden för kokain mot "naturlig" förstärkning. Fysiologi och beteende. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektiv aktivering av accumbens neuroner av kokainrelaterade stimuli under ett vatten / kokain-schema. Brain Research. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Bevis att separata neurala kretsar i kärnan accumbens kodar för kokain kontra "naturlig" (vatten och mat) belöning. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funktionell mikrocirkulation i accumbens underliggande narkotikamissbruk: insikter från realtidssignal under beteende. Nuvarande yttrande i neurobiologi. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektiv kodning av kokain kontra naturliga belöningar av nukleinsymboler är inte relaterad till kronisk drogexponering. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronala svar i prefrontal cortex och kärnan accumbens under självhantering av heroin hos fritt rörliga råttor. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain men inte naturlig belöning Självförvaltning eller passiv kokaininfusion producerar beständig LTP i VTA. Nervcell. 2008; 59: 288-297. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Förbättrad Cdk5-aktivitet och p35-translokation i ventralstriatum av akuta och kroniska metamfetaminbehandlade råttor. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbisk aktivering under cue-inducerad kokainbehov. Am J Psykiatri. 1999; 156: 11-18. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamin ökar fosforylering av extracellulära signalreglerade kinas- och transkriptionsfaktorer i råttastriatum via grupp I-metabotropa glutamatreceptorer. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reglerar amfetamininducerad ERK1 / 2 fosforylering i striatala neuroner. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Samhälle för beteendemässig neuroendokrinologi. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoner och beteende; 2003. Lesioner av den mediala prefrontala cortexen stör inte sexuellt beteende hos hanrotter; s. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Läkemedel som missbrukas av människor ökar synaptiska dopaminkoncentrationer i mesolimbic-systemet med fritt rörliga råttor. Proc Natl Acad Sci USA A. 1988; 85: 5274-5278. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Parning aktiverar NMDA-receptorer i det mediala preoptiska området hos hanrotter. Beteende neurovetenskap. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Förutsägare av sexuell riskupptagning bland nya droganvändare. Journal of sex research. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapi av metamfetaminberoende: En uppdatering. Drogmissbruk. 2008; 29: 31-49. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Sexuell motivation: En neural och beteendemässig analys av de mekanismer som ligger till grund för appetitiva och copulatoriska reaktioner hos hanrotter. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaktioner mellan amygdala och ventralstriatum i stimulus-belöningsföreningar: Studier med hjälp av en andra ordning med sexuell förstärkning. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studier av instrumentalt beteende med sexuell förstärkning hos manliga råttor (Rattus norvegicus): I. Kontroll med korta visuella stimuli parat med en mottaglig kvinna. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Associativa processer i beroende och belöning Rollen av Amygdala-Ventral Striatal Subsystems. Annaler från New York Academy of Sciences. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studier av instrumentalt beteende med sexuell förstärkning hos hanrotter (Rattus norvegicus): II. Effekter av preoptiska arealskador, kastration och testosteron. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, se RE. Neurokretsen för missbruk: en översikt. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Amfetaminframkallat c-fos mRNA-uttryck i caudat-putamen: effekterna av DA- och NMDA-receptorantagonister varierar som en funktion av neuronal fenotyp och miljö sammanhang. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dynamiska förändringar i kärnan bidrar till dopaminutflöde under Coolidge-effekten hos hanrotter. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Underlättande av sexuell beteende och förbättrad dopaminutflöde i Nucleus Accumbens hos manliga råttor efter D-amfetamininducerad beteendessensibilisering. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Underlättande av sexuellt beteende hos hanrotter efter d-amfetamininducerad beteendssensibilisering. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin och metamfetamin påverkar differensiellt dopamintransportörer i Vitro och in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Reglering av konditionerade svar från basolaterala amygdala nervceller. Fysiologi och beteende. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktivering av minneskretsar under cue-framkallad kokainbehov. Proc Natl Acad Sci USA A. 1996; 93: 12040-12045. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  39. Grön AI, Halkitis PN. Kristallmetamfetamin och sexuell socialitet i en urban gaykultur: En elektiv affinitet. Kultur, hälsa & sexualitet. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, se RE. Dissociation av primära och sekundära belöningsrelevanta limbiska kärnor i en djurmodell av återfall. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormon-neurotransmitter-interaktioner i kontrollen av sexuellt beteende. Behavioral Brain Research. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Manligt sexuellt beteende. I: Pfaff DW, et al., Redaktörer. Hormoner Hjärna och beteende. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamine and serotonin: influenser på manligt sexuellt beteende. Fysiologi och beteende. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Effekter av singel och upprepad administrering av metamfetamin eller morfin på neuroglykan C-genuttryck i råtthjärnan. Den internationella tidningen för neuropsykofarmakologi. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Conditioned place preferences (CPP) till högkaloriska "mellanmål" i råttstammen genetiskt benägen mot resistent mot diet-inducerad fetma: Resistens mot naltrexon-blockad. Farmakologi biokemi och beteende. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Effekt av opioidantagonism på konditionerade platspreferenser till mellanmålsmedel. Farmakologi biokemi och beteende. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitet som orsakas av frontostriatal dysfunktion vid drogmissbruk: konsekvenser för kontroll av beteende genom belöningsrelaterade stimuli. Psykofarmakologi (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Den neurala grunden för missbruk: en patologi av motivation och val. Am J Psykiatri. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Minne och beroende: delade neurala kretsar och molekylära mekanismer. Nervcell. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Motsatta roller av kärnan accumbens och främre laterala hypotalamiska området i kontrollen av sexuellt beteende hos hanroten. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoider potentierar känslomässig lärande plasticitet i neuroner av medial prefrontal cortex genom basolaterala Amygdala ingångar. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, Se RE. Potentierad återinförande av kokain-sökande beteende efter infusion av d-amfetamin i basolateral amygdala. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Upprepade exponeringar intensifieras snarare än att minska de givande effekterna av amfetamin, morfin och kokain. Psykofarmakologi (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Sexuellt beteende hos manrottor efter radiofrekvens eller dopaminförlustsskador i nukleär accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Lateral Hypothalamus Serotonin Hämmar Nukleus Accumbens Dopamin: Implikationer för Sexuell Satiety. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Effekter av en D1-antagonist och av sexuell erfarenhet på copulationsinducerad Fos-liknande immunreaktivitet i den mediala preoptiska kärnan. Brain Research. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Endast självkopplande parning är givande i råttor av båda könen. Horm Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, se RE. Selektiv inaktivering av dorsomedial prefrontal cortex och den basolaterala amygdalen dämpar konditionering av återställande av släckt kokainsökande beteende hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Förenkling av sexuellt beteende hos manrotten i närvaro av stimuli som tidigare parat med systemiska injektioner av morfin. Farmakologi biokemi och beteende. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regler för metamfetaminbelöning genom extracellulär signalreglerad kinase 1 / 2 / ets-liknande gen-1 signaleringsväg via aktiveringen av dopamin NIDA Forskning Rapport Serie: Metamfetamin missbruk och tillägg. 2006 NIH Publiceringsnummer 06-4210. [PubMed]
  61. Förmåner SM, Clifton PG. Förstärkare omvärdering och villkorad plats preferens. Fysiologi och beteende. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Vägar av sexuell önskan. Journal of Sexual Medicine. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Den psykofarmakologi av sexuellt beteende. I: Bloom FE, Kupfer DJ, redaktörer. Psykofarmakologi: den fjärde generationen av framsteg. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Inverkan av omedelbar tidig geninduktion i hjärnan efter sexuell stimulering av kön och manliga gnagare. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditionering och sexuellt beteende: en recension. Horm Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Differentiella effekter av dopaminreceptorantagonister på sexuell beteende hos hanrotter. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Det mesolimbiska dopaminsystemet: Den sista gemensamma vägen för den förstärkande effekten av missbruksdroger? Neurovetenskap & Biobehavioral Reviews. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Sexuell erfarenhet inducerar funktionell och strukturell plasticitet i mesolimbic systemet. Biologisk psykiatri. 2009 I tryck.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Dopaminfluktuationer i kärnan accumbens under underhåll, utrotning och återinförande av intravenös D-amphetamin självadministrering. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Läkemedel och sexuella effekter: Roll av drogtyp och kön. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Sexuellt beteende ökar c-fos-uttrycket i förkroppen hos hanroten. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens aktivitet under ett flertalsschema för förstärkning av vatten och sackaros hos råtta. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Attentional Control och Brain Metabolite Nivåer i Metamfetamin Abusers. Biologisk psykiatri. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Kristallmetamfetamin och ecstasy skiljer sig i förhållande till osäkert sex bland unga homosexuella män. Kanadensisk journal för folkhälsan. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Se RE. Neurala substrat av konditionerat cued återfall till drogsökande beteende. Farmakologi biokemi och beteende. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Se RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drogmissbruk, återfall och Amygdala. Annaler från New York Academy of Sciences. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivationer i samband med metamfetaminanvändning bland HIV-män som har sex med män. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Återställningsmodellen för återfall av droger: historia, metod och viktiga resultat. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilisering till de konditionerade givande effekterna av kokain: farmakologiska och tidsmässiga egenskaper. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilisering till de konditionerade givande effekterna av morfin: farmakologi och tidsmässiga egenskaper. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Förutsägare av HIV-sexuella riskbeteenden i ett samhälleprov av injektionsmissbruk med användning av män och kvinnor. Aids och beteende. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, Vit D, Kelder S. Methamphetamin Användning och Sexuell Risk Behavior i amerikanska gymnasieelever: Resultat från en nationell riskbeteendeundersökning. Förebyggande vetenskap. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Effekter av dopamin och NMDA-receptorer på kokaininducerat Fos-uttryck i striatum av Fischer-råttor. Brain Research. 2008; 1243: 1-9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  84. Swanson LW, redaktör. Hjärnkartor: Struktur av råttahjärnan. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Sexuell belöning hos hanrotter: Effekter av sexuell erfarenhet på villkorad platspreferens i samband med ejakuleringar och intromissioner. Horm Behav. 2008 [PMC gratis artikel] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Sidor C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Inblandning av den extracellulära signalreglerade kinaskaskaden för kokainbelöningsegenskaper. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Sidor C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Addictive och non-addictive drugs inducerar tydliga och specifika mönster för ERK-aktivering i mushåran. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Reglering av en proteinfosfataskaskad möjliggör konvergerande dopamin och glutamatsignaler för att aktivera ERK i striatumet. Proc Natl Acad Sci USA A. 2005; 102: 491-496. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Förändringar i dopaminerg och glutamatergisk överföring vid induktion och uttryck av beteendessensibilisering: en kritisk granskning av prekliniska studier. Psykofarmakologi (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neural aktivering efter sexuellt beteende hos han- och honrottshjärnan. Behavioral Brain Research. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Excitotoxiska lesioner av den basolaterala amygdalen försämrar förvärvet av kokainsökande beteende under en andra ordningens förstärkningsschema. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologi av missbruk. Nuvarande yttrande i neurobiologi. 1996; 6: 243-251. [PubMed]