Metamfetamin verkar på subpopuleringar av neuroner som reglerar sexuellt beteende hos hanrotter (2010)

Neuroscience. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Kyl LM.

källa

Institutionen för anatomi och cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, ON, Kanada, N6A 5C1.

Abstrakt

Metamfetamin (Meth) är en starkt beroendeframkallande stimulans. Metmissbruk är vanligtvis förknippad med övning av sexuellt riskbeteende och ökad förekomst av humana immunbristvirus- och metanvändare rapporterar ökad sexuell lust, upphetsning och sexuell njutning. Den biologiska grunden för denna nexus av narkotikakön är okänd. Den aktuella studien visar att Meth-administrering hos hanrotter aktiverar neuroner i hjärnregioner i mesolimbic-systemet som är inblandade i regleringen av sexuellt beteende. Specifikt, Meth och parning co-aktiverar celler i kärnan accumbens kärna och skal, basolateral amygdala och främre cingulära cortex. Dessa fynd illustrerar att i motsats till nuvarande övertygelse kan missbruksmissbruk aktivera samma celler som en naturlig förstärkare, det är sexuellt beteende och kan i sin tur påverka tvångssökning av denna naturliga belöning.

Nyckelord: kärnan accumbens, basolateral amygdala, prefrontal cortex, missbruk, reproduktion, missbruk

Motivation och belöning regleras av mesolimbic systemet, ett sammankopplat nätverk av hjärnområdena som ingår i ventral tegmental area (VTA) nucleus accumbens (NAc), basolateral amygdala och medial prefrontal cortex (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas och Volkow, 2005). Det finns gott om bevis för att mesolimbic-systemet är aktiverat som svar på båda ämnena av missbruk (Di Chiara och Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) och naturligt givande beteende som sexuellt beteende (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Manligt sexuellt beteende, och i synnerhet ejakulation, är mycket givande och förstärkande i djurmodeller (Pfaus et al., 2001). Manliga gnagare utvecklar en konditionerad platspreferens (CPP) för sampolymerisering (Agmo och Berenfeld, 1990, Martinez och Paredes, 2001, Tenk, 2008) och kommer att utföra operativa uppgifter för att få tillgång till en sexuellt mottaglig kvinna (Everitt et al., 1987, Everitt och Stacey, 1987). Drog av missbruk är också givande och förstärkande, och djur kommer att lära sig att själv administrera substanser av missbruk, inklusive opiater, nikotin, alkohol och psykostimulanter (Klokt, 1996, Pierce och Kumaresan, 2006, Feltenstein och See, 2008). Även om det är känt att båda droger av missbruk och sexuellt beteende aktiverar mesolimbiska hjärnområden, är det för närvarande oklart huruvida droger av missbruk påverkar samma neuroner som förmedlar sexuellt beteende.

Elektrofysiologiska studier har visat att mat och kokain både aktiverar neuroner i NAc. De två förstärkarna aktiverar emellertid inte samma celler inom NAc (Carelli et al., 2000, Carelli och Wondolowski, 2003). Dessutom orsakar självförvaltning av mat och sackaros inte långvariga förändringar av elektrofysiologiska egenskaper som induceras av kokain (Chen et al., 2008). Däremot föreslår en samling bevis att manligt sexuellt beteende och missbruksmissbruk verkligen kan fungera på samma mesolimbiska neuroner. Psykostimulanter och opioider förändrar uttrycket av sexuellt beteende hos hanrotter (Mitchell och Stewart, 1990, Fiorino och Phillips, 1999a, Fiorino och Phillips, 1999b). Nya data från vårt laboratorium visade att sexuell erfarenhet förändrar responsen på psykostimulantia, vilket framgår av en sensibiliserad lokomotorisk respons och sensibiliserad belöningsuppfattning för d-amfetamin hos sexuellt erfarna djur (Pitchers et al., 2009). Ett liknande svar har tidigare observerats vid upprepad exponering för amfetamin eller andra missbruksmedel (Lett, 1989, Shippenberg och Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren och Kalivas, 2000). Tillsammans föreslår dessa resultat att sexuellt beteende och svar på missbruksmissbruk medieras av samma neuroner i mesolimbic-systemet. Därför är det första syftet med föreliggande studie att undersöka neural aktivering av mesolimbic systemet genom sexuellt beteende och läkemedelsadministration i samma djur. I synnerhet testade vi hypotesen att psykostimulanten, metamfetamin (Meth), verkar direkt på neuroner som normalt förmedlar sexuellt beteende.

Meth är ett av de mest missbrukade illegala drogerna i världen (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) för attnd det har ofta kopplats till förändrat sexuellt beteende. Intressant rapporterar Meth-användare ökad sexuell lust och upphetsning, liksom förbättrad sexuell njutning (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Dessutom, Metmissbruk är vanligtvis förknippad med sexuellt kompulsivt beteende (Rawson et al., 2002). Användare rapporterar ofta att de har många sexpartner och är mindre benägna att använda skydd än andra drogmissbrukare (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Tyvärr är studier som indikerar Meth som prediktor för sexuellt riskbeteende begränsade eftersom de är beroende av obekräftade självrapporter (Elifson et al., 2006). Därför krävs en undersökning av den cellulära grunden för Met-inducerad förändring i sexuellt beteende i en djurmodell för förståelse av denna komplexa drogkönssnxus.

Med tanke på ovan angivna belägg som tyder på att missbruksmedel och särskilt Meth kan verka på neuroner som normalt är involverade i att förmedla sexuellt beteende var syftet med föreliggande studie att undersöka neuralt aktivering genom sexuellt beteende och administrering av psykostimulanten Meth. Denna studie genomförde en neuroanatomisk teknik som utnyttjar immunohistokemisk visualisering av de omedelbara tidiga generna Fos och fosforylerade Map Kinase (pERK) för att detektera samtidig neuralt aktivering genom sexuellt beteende respektive Meth. Fos uttrycks endast inom cellens kärna, med en maximal expressionsnivå 30-90 minuter efter aktivering av neuronen. Det finns gott om tecken på att sexuell aktivitet inducerar Fos uttryck i hjärnan (Pfaus och Heeb, 1997, Veening och Coolen, 1998), inklusive det mesokortikolimbiska systemet (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Det finns också bevis för att missbruksmedel inducerar pERK-uttryck inom det mesokortikolimbiska systemet (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). I motsats till uttrycket av Fos är fosforylering av ERK en mycket dynamisk process och uppträder endast 5-20 minuter efter neuronal aktivering. Fos och pERKs distinkta temporala profiler gör dem till en idealisk uppsättning markörer för efterföljande neuronal aktivering med två olika stimuli.

EXPERIMENTELLA PROCEDURER

Ämnen

Vuxna manliga Sprague Dawley-råttor (210-225 g) erhållna från Charles River Laboratories (Montreal, QC, Kanada) hölls två per bur i vanliga plexiglasburar (hemburar). Djurrummet upprätthölls vid en 12 / 12 h-omvänd ljuscykel (lyser vid 10.00 h). Mat och vatten var tillgängliga AD libitum. All testning utfördes under den första halvan av den mörka fasen under dim röd belysning. Stimulösa kvinnor som användes för sexuellt beteende var bilateralt ovariektomerade under djupbedövning (13 mg / kg ketamin och 87 mg / kg xylazin) och erhöll ett subkutant implantat innehållande 5% östradiolbensoat (EB) och 95% kolesterol. Sexuell mottaglighet inducerades genom subkutan (sc) administrering av 500 μg progesteron i 0.1 ml sesamolja 4 h före testning. Alla förfaranden godkändes av djurvårdskommittén vid University of Western Ontario och överensstämmer med de riktlinjer som skisseras av det kanadensiska rådet om djurvård.

Experimentella mönster

Experiment 1 och 2: Manliga råttor (n = 37) fick komma i kontakt med en mottaglig kvinna till en ejakulation (E) eller för 30 min, som någonsin kom först i rena provburar (60 × 45 × 50 cm) under fem gånger vecka-före-test parning sessioner, för att få sexuell erfarenhet. Under de senare två sessionerna registrerades alla standardparametrar för sexuell prestation, inklusive: bergslängd (ML; tid från kvinnans introduktion till första berget), intromission latens (IL; tid från kvinnans introduktion till det första fästet med vaginal penetration), ejakulationslatens (EL, tid från första intromission till utlösning), efter ejaculationsintervall (PEI, tid från ejakulation till första efterföljande intromission), antal fästen (M) och antal intromisser (IM)Agmo, 1997). Alla män fick 1 ml / kg daglig injektion av 0.9% NaCl (saltlösning, sc) 3 på varandra följande dagar före testdagen, för behandling vid hantering och injektioner. En dag före testdagen var alla män singelhusade. Hos erfarna män kan Fos induceras av konditionerade kontextuella signaler i samband med tidigare sexuell erfarenhet (Balfour et al, 2004). Därför genomfördes alla parnings- och kontrollmanipuleringar under de slutliga testerna i hemmaburen (undvik av prediktiva villkorade indikeringar) för att förhindra konditionerad inducerad aktivering i de omoderna kontrollmännen. Manspersoner delades ut i åtta experimentgrupper som inte skilde sig åt i någon mått av sexuell prestation under de två senaste parningstiderna (data ej visade). Under det slutliga testet fick manar antingen mata i sin hemmabur tills de visade en utlösning (kön) eller inte fick kvinnlig partner (ingen kön). Alla parade manar perfunderades 60 minuter efter början av parningen för att möjliggöra analys av parning-inducerad Fos-expression. Män fick en injektion av 4 mg / kg Meth eller 1 ml / kg saltlösning (sc) (n = 4 vardera), antingen 10 (experiment 1) eller 15 (experiment 2) min före perfusion för analys av läkemedelsinducerad fosforylering av MAP-kinas. Dosering och tid före perfusion baserades på tidigare rapporter (Choe et al., 2002, Choe och Wang, 2002, Chen och Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Kontrollgrupper inkluderade hanar som inte mäter men fick Meth 10 (n = 7) eller 15 (n = 5) min före offer, eller saltlösningsinjektioner 10 (n = 5) eller 15 (n = 4) min före offret . Efter offret behandlades hjärnorna för immunhistokemi.

Experiment 3: Eftersom en hög dos Meth användes i experiment 1 och 2 utfördes ett ytterligare neuroanatomiskt experiment för att undersöka om sexuellt beteende och en lägre dos Meth induserade dosberoende mönster av överlappande neuralt aktivering. Denna studie utfördes på ett identiskt sätt som experiment 1 och 2. Vid det slutliga testet fick emellertid sammankopplade och omoderna grupper (n = 6 vardera) 1 mg / kg Meth (sc) 15 min före offer.

Experiment 4: För att testa om neural aktivering orsakad av kön och Meth är specifik för Meth, undersökte detta experiment om liknande mönster av överlappande neuralt aktivering kunde ses med psykostimulerande d-amfetamin (Amph). Detta experiment utfördes på ett identiskt sätt som experiment 1 och 2. I det slutliga testet administrerades dock män antingen Amph (5 mg / kg) eller saltlösning (1 mg / kg) (sc) 15 min före offret (n = 5 vardera). Kontrollera obemannade män erhållit saltlösning eller Amph 15 minuter före offret. En översikt över experimentgrupperna som användes i experiment 1-4 finns i Tabell 1.

Tabell 1      

Översikt över experimentella grupper som ingår i experiment 1-4.

Tissue Preparation

Djur bedövades med pentobarbital (270 mg / kg, ip) och perfusionerades transkartärt med 5 ml saltlösning följt av 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffert (PB). Hjärnor avlägsnades och efterfixerades för 1 h vid rumstemperatur i samma fixativ, nedsänktes sedan i 20% sackaros och 0.01% natriumazid i 0.1 M PB och lagrades vid 4 ° C. Koronala sektioner (35 μm) skars på en frysande mikrotom (H400R, Micron, Tyskland) samlades i fyra parallella serier i kryoprotektantlösning (30% sackaros och 30% etylenglykol i 0.1 M PB) och lagrades vid 20 ° C tills vidare bearbetning.

immunohistokemi

Alla inkubationer utfördes vid rumstemperatur med försiktig omröring. Fria flytande sektioner tvättades omfattande med 0.1 M fosfatbuffrad saltlösning (PBS) mellan inkubationer. Sektioner inkuberades i 1% H2O2 för 10 min, sedan blockerad i inkubationslösning (PBS innehållande 0.1% bovint serumalbumin och 0.4% Triton X-100) för 1 h.

Perk / Fos

Vävnad inkuberades över natten med en kaninkolyklonal antikropp mot p42- och p44-kortkinaser ERK1 och ERK2 (pERK; 1: 400 experiment 1 lot 19; 1: 4.000 experiment 2 och 3 lot 21; Cell Signaling Cat # 9101;) följt av en 1h-inkubationer med biotinylerat åsna-anti-kanin-IgG (1: 500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) och avidin-pepparrotsperoxidaskomplex (ABC Elite; 1: 1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Därefter inkuberades vävnaden för 10 min med biotinylerad tyramid (BT; 1: 250 i PBS + 0.003% H2O2; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) och för 30 min med Alexa 488 konjugerad strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Därefter inkuberades vävnad över natten med en kaninpolyklonal antikropp mot c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz-bioteknik, Santa Cruz, CA) följt av en 30 mininkubation med get anti-kanin Alexa 555 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Efter färgning tvättades sektionerna noggrant i 0.1 M PB, monterades på glasskivor med 0.3% gelatin i ddH20 och täckt med ett vattenhaltigt monteringsmedium (Gelvatol) innehållande anti-blekmedel 1,4-diazabicyklo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiska kontroller innehöll utelämnandet av endera eller båda primära antikropparna, vilket resulterade i frånvaro av märkning i lämplig våglängd.

Dataanalys

Sexuellt beteende

För alla fyra experimenten registrerades standardparametrar för sexuell prestation som beskrivits ovan och analyserades med hjälp av variansanalys (ANOVA). Dataanalys av sexuellt beteende under den sista testdagen avslöjade inga signifikanta skillnader mellan grupper i någon av parametrarna för sexuell prestation.

pERK / Fos cellantal

Enkla och dubbelmärkta celler för Fos och pERK räknades i de caudala nivåerna av NAc-kärn- och skalsubregioner, basolateral amygdala (BLA), posterodorsal medial amygdala (MEApd), central amygdala (CeA), medial preoptisk kärna (MPN), posteromedial och posterolaterala bäddkärnan i stria terminalis (BNSTpm och BNSTpl), och den främre kingulerade arean (ACA), prelimbic (PL) och infralimbiska (IL) delregioner av mPFC. Bilderna fångades med hjälp av en kyld CCD-kamera (Microfire, Optronics) kopplad till ett Leica-mikroskop (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) och Neurolucida-programvaran (MicroBrightfield Inc) med fasta kamerainställningar för alla ämnen (med 10x-mål). Användning av neurolucidaprogrammet definierades områden av analys baserat på landmärken (Swanson, 1998) unikt för varje hjärnområde (se Figur 1). Standardområden för analys användes på alla områden utom NAc-kärna och skal. I de senare områdena var uttrycket PERK och Fos inte homogent och uppträdde i lappliknande mönster. Därför skisserades hela kärnan och skalet baserat på landmärken (lateral ventrikel, främre höjden och öarna Calleja). Analysområdena skilde sig inte mellan experimentgrupper och var 1.3 mm2 i NAc-kärnan och skalet. Standardområden för analys för de återstående områdena var: 1.6 mm2 i BLA, 2.5 och 2.25 mm2 i respektive MEApd respektive CeA, 1.0 mm2 i MPN, 1.25 mm2 i BNST- och mPFC-delregionerna och 3.15 mm2 i VTA. Två sektioner räknades bilateralt för varje hjärnområde per djur och antalet enkla och dubbla märkta celler för pERK och Fos liksom procentandelen pERK-celler som uttryckte Fos-markören beräknades. För experiment 1, 2 och 4 jämfördes gruppmedelvärden med tvåvägs ANOVA (faktorer: parning och drog) och Fishers LSD för post hoc jämförelser vid en signifikansnivå av 0.05. För experiment 3 jämfördes gruppmedelvärden med hjälp av oparmade t-test vid en signifikansnivå av 0.05.

Figur 1      

Schematiska ritningar och bilder som illustrerar hjärnområden av analys. Angivna analysområden var baserade på landmärken som var unika för varje hjärnområde, skilde inte mellan experimentgrupper och var 1.25 mm2 i mPFC-delregioner (a), 1.3 mm2 i .

Bilder

Digitala bilder för Figur 3 fångades med hjälp av CCD-kamera (DFC 340FX, Leica) kopplad till ett Leica-mikroskop (DM500B) och importerades till Adobe Photoshop 9.0-programvaran (Adobe Systems, San Jose, CA). Bilder ändrades inte på något sätt förutom justering av ljusstyrka.

Figur 3      

Representativa bilder av NAc-sektioner immunostained för Fos (röd, a, d, g, j) och pERK (grön, b, e, h, k) av djur i varje experimentgrupp: Nej Kön + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), Inget kön + Meth (g, h, i) och Sex + Meth (j, k, l). Höger paneler är .

RESULTAT

Neural aktivering av det limbiska systemet genom sexuell beteende och metadministration

Experiment 1: Analys av enkla och dubbelmärkta celler för parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK hos män som fick Meth 10 minuter före offer avslöjade parning-inducerad Fos i MPN, BNSTpm, NAc kärna och skal, BLA, VTA, och alla subregioner av mPFC, i överensstämmelse med tidigare studier som demonstrerar parning-inducerad Fos-uttryck i dessa områden (Baum och Everitt, 1992, Pfaus och Heeb, 1997, Veening och Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Metadministrering 10 minuter före offerinducerad pERK i NAc-kärna och skal, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl och regioner av mPFC, i överensstämmelse med aktiveringsmönster som inducerats av andra psykostimulanter (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Dessutom observerades tre mönster av samuttryck av neuralt aktivering genom sexuellt beteende och Meth: Först identifierades hjärnområden där kön och läkemedel aktiverade icke överlappande neurala populationer (Tabell 2). Specifikt i CeA, MEApd, BNSTpl och mPFC signifikanta ökningar av både läkemedelsinducerad pERK (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) och könsinducerad Fos (F (1,16, 16.53) = 158.83–0.001; p <1,16) observerades. I dessa regioner fanns det dock inga signifikanta ökningar av dubbla märkta nervceller hos parade Meth-behandlade män. Det enda undantaget var MEApd, där en effekt av parning på antalet dubbelmärkta celler hittades (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Det fanns dock ingen övergripande effekt av läkemedelsbehandling och dubbel märkning i Meth-behandlade grupper var inte signifikant högre än i saltlösningsgrupper och orsakades därför inte av läkemedlet (Tabell 2). För det andra identifierades hjärnområden där neural aktivering endast inducerades genom parning (Tabell 3). Specifikt aktiverades MPN, BNSTpm och VTA endast genom parning och innehöll signifikanta ökningar i parningsinducerad Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p <0.001) men ingen metinducerad pERK.

Tabell 2      

Översikt över parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i hjärnområden där kön och läkemedel aktiverar icke-överlappande neurala populationer.
Tabell 3      

Översikt över parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i hjärnområden där neural aktivering inducerades endast genom parning.

Slutligen hittades hjärnområden där kön och läkemedel aktiverade överlappande populationer av neuroner (Figur 2 och and3) .3). I NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA, fanns det övergripande effekter av parning (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) och läkemedelsbehandling (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), liksom en interaktion mellan dessa två faktorer (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; ingen signifikant interaktion i ACA) på antal celler som uttrycker båda parningsinducerad Fos och Meth-inducerad pERK. Post hoc-analys avslöjade att antalet dubbelmärkta nervceller var signifikant högre hos parade Meth-injicerade män jämfört med omärkta Meth-behandlade (p = 0.027- <0.001) eller parade salt-behandlade (p = 0.001- <0.001) män (Figur 2 och and3) .3). När data uttrycktes som procentandelar av läkemedelsaktiverade neuroner, 39.2 ± 5.3% i NAc-kärnan, aktiverades 39.2 ± 5.8% i NAc-skalet, 40.9 ± 6.3% i BLA och 50.0 ± 5.3% av ACA-neuroner genom att både parning och Meth.

Figur 2      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 10 min efter administrering av 4 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

En oväntad observation var att sexuellt beteende påverkade Met-inducerad pERK. Även om Meth signifikant inducerade pERK-nivåer i både parade och icke-mättade Met-injicerade grupper, i NAc, BLA och ACA var pERK-märkning signifikant lägre hos parade Met-injicerade hanar jämfört med ofamma Meth-injicerade män (Figur 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Denna upptäckt kan ytterligare stödja hypotesen att kön och droger verkar på samma neuroner, men det kan också vara en indikation på parning-inducerad förändring i läkemedelsupptagning eller metabolism som i sin tur orsakar förändrade neurala reaktioner på Meth. För att undersöka om sexuellt beteende orsakar ett annat temporalt mönster av läkemedelsinducerad aktivering, avgränsades delar av NAc, BLA och ACA för män som offrades vid en senare tidpunkt (15 min) efter administrering av läkemedel (experiment 2).

Experiment 2: Analys av enkla och dubbelmärkta celler bekräftade de ovan beskrivna resultaten att sexuellt beteende och efterföljande exponering för Meth 15 minuter före offer resulterade i signifikanta ökningar av Fos- och pERK-immunomärkning i NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA. Dessutom återfanns betydande samuttryck av parning-inducerad Fos och Meth-inducerad pERK igen i dessa områden (Figur 4; parningseffekt: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; läkemedelseffekt: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). Antalet dubbla märkta nervceller hos parade Meth-injicerade män var signifikant högre jämfört med icke parade Meth-behandlade (p <0.001) eller parade saltlösning (p <0.001) män. När data uttrycktes som procent av läkemedelsaktiverade neuroner, 47.2 ± 5.4% (NAc-kärna), 42.7 ± 7.6% (NAc-skal), 36.7 ± 3.7% (BLA) och 59.5 ± 5.1% (ACA) av aktiverade neuroner. genom parning aktiverades också av Meth. Dessutom skilde sig läkemedelsinducerad pERK inte mellan parade och omparade djur (Figur 4b, e, h, k), i alla områden utom för ACA (p <0.001). Dessa data indikerar att sexuellt beteende verkligen orsakar en förändring av det temporala mönstret av pERK-induktion med Meth.

Figur 4      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 4 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

Neural aktivering efter sexuell beteende och 1 mg / kg Meth

Resultat hittills visat att sexuellt beteende och 4 mg / kg Meth aktiverade överlappande populationer av neuroner i NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA. To undersöka påverkan av läkemedelsdosering på denna överlappning vid aktivering, mönster av neural aktivering studerades också med användning av en lägre dos Meth. NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA analyserades för aktivering inducerad av kön och Meth. Faktum är att sexuellt beteende och efterföljande exponering för Meth resulterade i signifikanta ökningar av Fos- och perk-immunomärkning i NAc-kärn- och skal-subregionerna, BLA, såväl som neuroner i ACA-regionen i mPFC (Figur 5). Intressant sett resulterade den lägre dosen av Meth i liknande antal pERK-märkta neuroner som inducerades av 4 mg / kg Meth i de fyra hjärnregionerna som analyserades. Viktigare är att NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA, visade signifikanta ökningar av antalet dubbelmärkta celler (Figur 5c, f, i, l) jämfört med icke-parade Meth-injicerade män (p = 0.003- <0.001). När data uttrycktes som procentandelen av läkemedelsaktiverade nervceller, 21.1 ± 0.9% och 20.4 ± 1.8% i NAc-kärnan respektive skalet, 41.9 ± 3.9% i BLA och 49.8 ± 0.8% av ACA-neuroner aktiverades av kön och Meth.

Figur 5      

Sexinducerad Fos och Meth-inducerad pERK-expression i NAc-, BLA- och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 1 mg / kg Meth. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

Neural aktivering efter sexuellt beteende och administrering av d-amfetamin

För att testa om ovanstående resultat var specifika för Meth, genomfördes ett ytterligare experiment för att studera parning- och Amph-inducerad neuralaktivering. Analys av enkla och dubbla märkta celler för pERK och Fos visade att sexuellt beteende och efterföljande exponering för Amph resulterade i signifikanta ökningar av Fos och pERK immunomärkning i NAc-kärnan och skalet och BLA (Figur 6; parningseffekt: F (1,15) = 7.38–69.71; p = 0.016- <0.001; läkemedelseffekt: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). Dessutom var antalet dubbla märkta neuroner signifikant högre hos parade Amph-behandlade jämfört med om parade Amph-behandlade (p = 0.009- <0.001) eller parade saltlösning (p = 0.015- <0.001) män (Figur 6c, f, i). När data uttrycktes som procentsatserna av läkemedelsaktiverade neuroner, aktiverades 25.7 ± 2.8% och 18.0 ± 3.2% i NAc-kärnan och skalet och 31.4 ± 2.0% av BLA-neuroner genom både parning och Amph. ACA-regionen i mPFC uppvisade signifikanta nivåer av parningsinducerad Fos (Figur 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Till skillnad från Meth resulterade Amph inte i signifikanta ökningar av läkemedelsinducerade pERK-nivåer i ACA (Figur 6k) eller antal dubbelmärkta neuroner i ACA (Figur 6l) jämfört med både parade och icke-mättade saltlösningsinsprutade män.

Figur 6      

Sexinducerad Fos och Amph-inducerad pERK-expression i NAc, BLA och ACA-neuroner 15 min efter administrering av 5 mg / kg Amph. Medelvärden ± som Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) och dubbla (c, f, I, 1) märkta celler i NAc-kärnan .

DISKUSSION

Den aktuella studien demonstrerar på cellulär nivå en överlappning mellan neuralt aktivering med det naturliga förstärkars sexuella beteendet och psykostimulanten Meth. Därför visar dessa data att inte bara droger verkar på samma hjärnregioner som reglerar naturlig belöning, men i själva verket aktiverar droger samma celler som är inblandade i reglering av naturlig belöning. Specifikt visades det här att sexuellt beteende och Meth samaktiverade en population av neuroner i NAc-kärnan och skalet, BLA och ACA-regionen i mPFC, som identifierar potentiella platser där Meth kan påverka sexuellt beteende.

Den nuvarande upptäckten att sexuellt beteende och administration av Meth aktiverar överlappande populationer av neuroner i NAc, BLA och ACA står i kontrast till resultaten från andra studier som visar att olika populationer av NAc-neuroner kodar läkemedel och naturliga belöningar.

Specifikt visade elektrofysiologiska studier som jämförde neural aktivering under självadministrering av naturliga belöningar (mat och vatten) och intravenöst kokain att kokain självadministration aktiverade en differential, icke överlappande population av neuroner som i allmänhet inte var mottagliga under operant svarande på vatten och matförstärkning (92%). Endast 8% av accumbal neuroner visade aktivering av både kokain och naturliga belöningar (Carelli et al., 2000).

Däremot uppvisade en majoritet (65%) av cellen i NAc aktivering med olika naturliga fördelar (mat och vatten), även om en förstärkare var mer smaklig (sackaros) (Roop et al., 2002).

Flera faktorer kan ha bidragit till avvikelsen med nuvarande resultat. För det första användes olika tekniska metoder för att undersöka neural aktivitet. Den aktuella studien utnyttjade en neuroanatomisk metod för detektering av samtidig neuralt aktivering med två olika stimuli med användning av dubbel fluorescerande immuncytokemistik för Fos och pERK, vilket möjliggör undersökning av enkelcellsaktivering över stora spänningar av hjärnområden. Däremot använde Carelli och medarbetare studierna elektrofysiologiska inspelningar som begränsades till NAc hos uppträdande djur för att ta itu med om självförvaltning av missbruksmedel aktiverar samma neurala kretsar som används av naturliga belöningar.

För det andra undersökte den aktuella studien en annan naturlig belöning, dvs sexuellt beteende jämfört med tidigare studier, som använde mat och vatten i begränsade råttor (Carelli, 2000). Mat och vatten kan ha mindre givande värde än parning. Sexuellt beteende är mycket givande och råttor bildar enkelt CPP för att samlas (Agmo och Berenfeld, 1990, Martinez och Paredes, 2001, Tenk, 2008). Även om diet begränsade råttor bildar CPP för vatten (Agmo et al., 1993, Perks och Clifton, 1997) och mat (Perks och Clifton, 1997), dIcke obegränsade råttor förbrukar företrädesvis och bildar CPP för mer välsmakande livsmedel (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

För det tredje innehöll våra studier olika missbruksmissbruk jämfört med tidigare studier, med användning av metamfetamin och amfetamin istället för kokain. De nuvarande resultaten visar att specifikt Meth och i mindre utsträckning amphetamin resulterade i aktivering av neuroner också aktiverad genom sexuellt beteende. Läkemedelserfarenhet kan också ha spelat en faktor i våra resultat. De nuvarande studierna utnyttjade djur som var sexuellt erfarna, men drog naiva. Däremot använde de elektrofysiologiska studierna av Carelli och medarbetare "välutbildade" djur som fick upprepade exponeringar mot kokain.

Det är därför möjligt att Met-inducerad aktivering av neuroner aktiverad genom sexuellt beteende förändras hos läkemedelsresterade råttor. Emellertid föreslår preliminära studier från vårt laboratorium att läkemedelserfarenhet sannolikt inte är en viktig faktor som sexuellt beteende och Meth-behandling hos män behandlas kroniskt med Meth-samaktiverade liknande procentandelar av läkemedelsaktiverade neuroner som rapporterats i den aktuella studien (20.3 ± 2.5% i NAc-kärnan och 27.8 ± 1.3% i NAc-skalet; Frohmader och Coolen, opublicerade observationer).

Slutligen undersökte den aktuella studien den "direkta" verkan av läkemedel som utnyttjade passiv administrering. Därför avslöjar den nuvarande analysen inte information om neurala kretsar som är inblandade i läkemedelssökande eller signaler associerade med läkemedelsbelöning, men avslöjar snarare neural aktivitet orsakad av läkemedlets farmakologiska verkan. I de tidigare elektrofysiologiska studierna är NAc-neural aktivitet som uppträder inom några sekunder av förstärkta svar inte resultatet av den farmakologiska verkan av kokain, men är starkt beroende av associativa faktorer inom självadministrationsparadigmet (Carelli, 2000, Carelli, 2002). Specifikt påverkas NAc-neural aktivitet av reaktionsoberoende presentationer av stimuli associerade med intravenös kokainleverans såväl som av instrumentella händelser (dvs. tryckpressning) som är inneboende i detta beteendeparadigm (Carelli, 2000, Carelli och Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli och Wightman, 2004). Sammanfattningsvis kan våra resultat av samaktivering av natur- och drogbelöning vara specifika för aktivering genom sexuellt beteende och passivt administrerat Meth och Amph.

Meth och kön aktiverade överlappande populationer av neuroner i NAc-kärnan och skalet på ett dosberoende sätt. De samaktiverade neuronerna i NAc kan medla potentiella effekter av Meth på motivationen och givande egenskaper hos sexuellt beteende, eftersom lesioner av NAc störa sexuellt beteende (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Dessutom är dessa neuroner potentiellt ett ställe för dosberoende läkemedelseffekter vid parning, eftersom den lägre Meth-dosen (1 mg / kg) minskade antalet dubbelmärkta celler med 50% jämfört med den högre dosen Meth (4 mg / kg). Fastän denna studie inte identifierar den kemiska fenotypen av samaktiverade neuroner har tidigare studier visat att läkemedelsinducerat PERK- och Fos-uttryck i NAc är beroende av både dopamin (DA) och glutamatreceptorer (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Fastän det inte är klart om parning-inducerad neural aktivering i NAc är beroende av dessa receptorer har detta visats på andra hjärnregioner, särskilt i den mediala preoptiska området (Lumley och Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). Thus kan Meth fungera på neuroner som också aktiveras under sexuellt beteende via aktivering av dopamin och glutamatreceptorer. NAc-glutamats roll i sexuellt beteende är för närvarande oklart, men det är väl etablerat att DA spelar en viktig roll i motivationen för sexuellt beteende (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Mikrodialysstudier rapporterade ökningar av NAc DA-utflöde under aptitliga och konsumtiva faser av manligt sexuellt beteende (Fiorino och Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) och mesolimbisk DA-utflöde har korrelerats med att underlätta initiering och upprätthållande av råttkönsmässigt beteende (Pfaus och Everitt, 1995). Vidare visar DA-manipulationsstudier DA-antagonister i NAc-hämmar sexuellt beteende, medan agonister underlättar initiering av sexuellt beteender (Everitt et al., 1989, Pfaus och Phillips, 1989). Således kan Meth påverka motivation för sexuellt beteende via aktivering av DA receptorer.

I motsats till NAc var antalet dubbelmärkta celler i BLA och ACA relativt oförändrat oavsett Meth-dosen. BLA är kritisk för diskret associativ inlärning och är starkt involverad i konditionerad förstärkning och belöningsutvärdering under instrumental respons (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Se, 2002). BLA-belastade råttor visade minskad spakspänning för konditionerade stimuli i kombination med mat (Everitt et al., 1989) eller sexuell förstärkning (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). I motsats härtill påverkar denna manipulation inte den konsumtiva fasen av matning och sexuellt beteende (Cardinal et al., 2002). BLA spelar också en nyckelroll till minne av konditionerade stimuli associerade med läkemedelsstimuli (Grace och Rosenkranz, 2002, Laviolette och Grace, 2006). Lesioner eller farmakologiska inaktiveringar av BLA-blocket förvärvet (Whitelaw et al., 1996) och uttryck (Grimm och See, 2000) Konditionering av kokainreparation, medan den inte påverkar läkemedelsförfarandet. Vidare, Amph infunderad direkt i BLA resulterar i en potentierad återställning av läkemedel i närvaro av de konditionerade indikatorerna (Se et al., 2003). Därför är det möjligt att psykostimulerande förbättrad DA-överföring i BLA resulterar i potentierad känslomässig salighet och sökande (Ledford et al., 2003) av sexuell belöning, vilket bidrar till den förbättrade sexuella körningen och lusten som rapporteras av Meth-missbrukare (Semple et al., 2002, Grön och Halkit, 2006).

I ACA var neuralt aktivering av sexaktiverade neuroner doseringsoberoende och specifika för Meth, eftersom det inte observerades med Amph. Även om Meth och Amph har liknande strukturella och farmakologiska egenskaper är Meth en mer potent psykostimulant än Amph med längre bestående effekter (NIDA, 2006). Studier av Goodwin et al. visade att Meth genererar en större DA-utflöde och hämmar clearance av lokalt applicerad DA mer effektivt i råttan NAc än Amph. Dessa egenskaper kan bidra till de beroendeframkallande egenskaperna hos Meth jämfört med Amph (Goodwin et al., 2009) och kanske de neurala aktiveringsskillnaderna observerade mellan de två läkemedlen. Det är emellertid inte klart huruvida de olika resultatmönstren beror på effektskillnader mellan drogerna eller styrkan i samband med de doser som används och ytterligare undersökning krävs.

Samaktivering av Meth och kön observerades inte i andra delregioner av mPFC (IL och PL). I råtta har ACA studerats omfattande med hjälp av aptitliga uppgifter, som stödjer en roll i stimulansförstärkareorganisationer (Everitt et al., 1999, Se, 2002, Cardinal et al., 2003). Det finns gott om bevis för att mPFC är inblandad i drogbehov och återfall till läkemedelssökande och drogbeteende hos både människor och råttor (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin och See, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas och Volkow, 2005). jagI linje med detta har det föreslagits att mPFC-dysfunktion orsakad av upprepad exponering för missbrukande läkemedel kan vara ansvarig för minskad impulskontroll och ökat drogstyrt beteende som observerats hos många missbrukare (Jentsch och Taylor, 1999). Nya data från vårt laboratorium visade att mPFC-lesioner resulterade i fortsatt sökande av sexuellt beteende när detta var associerat med en aversiv stimulans (Davis et al., 2003). Trots att denna studie inte undersökte ACA stöder den hypotesen att mPFC (och ACA specifikt) medierar effekterna av Meth på en förlust av hämmande kontroll över sexuellt beteende som rapporterats av Meth-missbrukare (Salo et al., 2007).

Sammanfattningsvis utgör dessa studier ett kritiskt första steg mot en bättre förståelse av hur missbruksmissbruk agerar på neurala vägar som normalt förmedlar naturliga belöningar. Dessutom illustrerar dessa fynd att i motsats till den nuvarande övertygelsen att missbruksmedel inte aktiverar samma celler i mesolimbicsystemet som naturlig belöning, aktiverar Meth, och i mindre utsträckning Amph, samma celler som sexuellt beteende. Dessa samaktiva neurala populationer kan i sin tur påverka sökandet efter naturlig belöning efter exponering av läkemedel. Slutligen kan resultaten av denna studie väsentligt bidra till vår förståelse av grunden för missbruk i allmänhet. Jämförelser av likheter och skillnader samt förändringar i neuralt aktivering av mesolimbinsystemet som framkallas av sexuellt beteende mot missbruksmissbruk kan leda till en bättre förståelse av missbruk och därmed sammanhängande förändringar i naturlig belöning.

Erkännanden

Denna forskning stöddes av bidrag från National Institute of Health R01 DA014591 och kanadensiska institut av hälsovetenskap RN 014705 till LMC.

FÖRKORTNINGAR

  • ABC
  • avidin-biotin-pepparrotperoxidaskomplex
  • ACA
  • främre cingulatområdet
  • Amph
  • d-amfetamin
  • BLA
  • basolateral amygdala
  • BNSTpl
  • posterolaterala sängkärnan i stria terminalis
  • BNSTpm
  • postomediala sängkärnan från stria terminalis
  • BT
  • biotinylerad tyramid
  • CEA
  • cental amygdala
  • CPP
  • konditionerad platspreferens
  • E
  • ejakulation
  • EL
  • ejakulations latens
  • IF
  • infralimbic område
  • IL
  • intromission latens
  • IM
  • intromission
  • M
  • montera
  • MAP Kinase
  • mitogenaktiverad proteinkinas
  • MEApd
  • posterodorsal medial amygdala
  • met
  • metamfetamin
  • ML
  • monterings latens
  • mPFC
  • medial prefrontal cortex
  • MPN
  • medial preoptisk kärna
  • NAc
  • kärnan Accumbens
  • PB
  • Fosfatbuffert
  • PBS
  • fosfatbuffrad saltlösning
  • PEI
  • posta ejaculatoriskt intervall
  • HÖJA
  • fosforylerat MAP-kinas
  • PL
  • prelimbic område
  • VTA
  • ventral tegmental area

fotnoter

Ansvarsfriskrivning för förlag: Detta är en PDF-fil av ett oediterat manuskript som har godkänts för publicering. Som en tjänst till våra kunder tillhandahåller vi denna tidiga version av manuskriptet. Manuskriptet kommer att genomgå copyediting, uppsättning och granskning av det resulterande beviset innan det publiceras i sin slutliga formulär. Observera att under tillverkningsprocessen kan det upptäckas fel som kan påverka innehållet och alla juridiska ansvarsfrister som gäller för tidskriften avser.

referenser

  1. Agmo A. Mänskliga råttor sexuellt beteende. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Förstärkning av ejakulationsegenskaper hos hanrotten: Opioids och dopaminers roll. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Belöning och förstärkning framställd av dricksvatten: Funktionen av opioider och dopaminreceptorsubtyper. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Sexuellt beteende och könsrelaterade miljöanpassningar aktiverar mesolimbic systemet hos hanrotter. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Ökat uttryck av c-fos i det mediala preoptiska området efter parning hos hanrotter: Roll av afferenta ingångar från medial amygdala och midbrain central tegmental fält. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. En roll för prefrontal cortex i stress- och kokaininducerad återinställning av kokain som söker hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Kardinal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Känslor och motivation: rollen som amygdala, ventral striatum och prefrontal cortex. Neurovetenskap & Biobehavioral Reviews. 2002; 26: 321–352. [PubMed]
  8. Kardinal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Rollen av den främre cingulära cortexen i kontrollen över beteendet av Pavlovian-konditionerade stimuli hos råttor. Beteende neurovetenskap. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Aktivering av accumbens cellbränning med stimuli associerad med kokainleverans under självadministrering. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens cell avfyrar under målstyrda beteenden för kokain mot "naturlig" förstärkning. Fysiologi och beteende. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selektiv aktivering av accumbens neuroner av kokainrelaterade stimuli under ett vatten / kokain-schema. Brain Research. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Bevis att separata neurala kretsar i kärnan accumbens kodar för kokain kontra "naturlig" (vatten och mat) belöning. J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Funktionell mikrocirkulation i accumbens underliggande narkotikamissbruk: insikter från realtidssignal under beteende. Nuvarande yttrande i neurobiologi. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selektiv kodning av kokain kontra naturliga belöningar av nukleinsymboler är inte relaterad till kronisk drogexponering. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronala svar i prefrontal cortex och kärnan accumbens under självhantering av heroin hos fritt rörliga råttor. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Kokain men inte naturlig belöning Självförvaltning eller passiv kokaininfusion producerar beständig LTP i VTA. Nervcell. 2008; 59: 288-297. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Förbättrad Cdk5-aktivitet och p35-translokation i ventralstriatum av akuta och kroniska metamfetaminbehandlade råttor. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbisk aktivering under cue-inducerad kokainbehov. Am J Psykiatri. 1999; 156: 11-18. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamin ökar fosforylering av extracellulära signalreglerade kinas- och transkriptionsfaktorer i råttastriatum via grupp I-metabotropa glutamatreceptorer. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reglerar amfetamininducerad ERK1 / 2 fosforylering i striatala neuroner. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Samhälle för beteendemässig neuroendokrinologi. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoner och beteende; 2003. Lesioner av den mediala prefrontala cortexen stör inte sexuellt beteende hos hanrotter; s. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Läkemedel som missbrukas av människor ökar synaptiska dopaminkoncentrationer i mesolimbic-systemet med fritt rörliga råttor. Proc Natl Acad Sci USA A. 1988; 85: 5274-5278. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Parning aktiverar NMDA-receptorer i det mediala preoptiska området hos hanrotter. Beteende neurovetenskap. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Förutsägare av sexuell riskupptagning bland nya droganvändare. Journal of sex research. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmakoterapi av metamfetaminberoende: En uppdatering. Drogmissbruk. 2008; 29: 31-49. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Sexuell motivation: En neural och beteendemässig analys av de mekanismer som ligger till grund för appetitiva och copulatoriska reaktioner hos hanrotter. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interaktioner mellan amygdala och ventralstriatum i stimulus-belöningsföreningar: Studier med hjälp av en andra ordning med sexuell förstärkning. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studier av instrumentalt beteende med sexuell förstärkning hos manliga råttor (Rattus norvegicus): I. Kontroll med korta visuella stimuli parat med en mottaglig kvinna. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Associativa processer i beroende och belöning Rollen av Amygdala-Ventral Striatal Subsystems. Annaler från New York Academy of Sciences. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studier av instrumentalt beteende med sexuell förstärkning hos hanrotter (Rattus norvegicus): II. Effekter av preoptiska arealskador, kastration och testosteron. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, se RE. Neurokretsen för missbruk: en översikt. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Amfetaminframkallat c-fos mRNA-uttryck i caudat-putamen: effekterna av DA- och NMDA-receptorantagonister varierar som en funktion av neuronal fenotyp och miljö sammanhang. Journal of Neurochemistry. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dynamiska förändringar i kärnan bidrar till dopaminutflöde under Coolidge-effekten hos hanrotter. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Underlättande av sexuell beteende och förbättrad dopaminutflöde i Nucleus Accumbens hos manliga råttor efter D-amfetamininducerad beteendessensibilisering. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Underlättande av sexuellt beteende hos hanrotter efter d-amfetamininducerad beteendssensibilisering. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamin och metamfetamin påverkar differensiellt dopamintransportörer i Vitro och in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Reglering av konditionerade svar från basolaterala amygdala nervceller. Fysiologi och beteende. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Aktivering av minneskretsar under cue-framkallad kokainbehov. Proc Natl Acad Sci USA A. 1996; 93: 12040-12045. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  39. Grön AI, Halkitis PN. Kristallmetamfetamin och sexuell socialitet i en urban gaykultur: En elektiv affinitet. Kultur, hälsa & sexualitet. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, se RE. Dissociation av primära och sekundära belöningsrelevanta limbiska kärnor i en djurmodell av återfall. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormon-neurotransmitter-interaktioner i kontrollen av sexuellt beteende. Behavioral Brain Research. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Manligt sexuellt beteende. I: Pfaff DW, et al., Redaktörer. Hormoner Hjärna och beteende. San Diego, CA: Elsevier Science (USA); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamine and serotonin: influenser på manligt sexuellt beteende. Fysiologi och beteende. 2004; 83: 291–307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Effekter av singel och upprepad administrering av metamfetamin eller morfin på neuroglykan C-genuttryck i råtthjärnan. Den internationella tidningen för neuropsykofarmakologi. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Conditioned place preferences (CPP) till högkaloriska "mellanmål" i råttstammen genetiskt benägen mot resistent mot diet-inducerad fetma: Resistens mot naltrexon-blockad. Farmakologi biokemi och beteende. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Effekt av opioidantagonism på konditionerade platspreferenser till mellanmålsmedel. Farmakologi biokemi och beteende. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitet som orsakas av frontostriatal dysfunktion vid drogmissbruk: konsekvenser för kontroll av beteende genom belöningsrelaterade stimuli. Psykofarmakologi (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Den neurala grunden för missbruk: en patologi av motivation och val. Am J Psykiatri. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Minne och beroende: delade neurala kretsar och molekylära mekanismer. Nervcell. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Motsatta roller av kärnan accumbens och främre laterala hypotalamiska området i kontrollen av sexuellt beteende hos hanroten. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoider potentierar känslomässig lärande plasticitet i neuroner av medial prefrontal cortex genom basolaterala Amygdala ingångar. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, Se RE. Potentierad återinförande av kokain-sökande beteende efter infusion av d-amfetamin i basolateral amygdala. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Upprepade exponeringar intensifieras snarare än att minska de givande effekterna av amfetamin, morfin och kokain. Psykofarmakologi (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Sexuellt beteende hos manrottor efter radiofrekvens eller dopaminförlustsskador i nukleär accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Lateral Hypothalamus Serotonin Hämmar Nukleus Accumbens Dopamin: Implikationer för Sexuell Satiety. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Effekter av en D1-antagonist och av sexuell erfarenhet på copulationsinducerad Fos-liknande immunreaktivitet i den mediala preoptiska kärnan. Brain Research. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Endast självkopplande parning är givande i råttor av båda könen. Horm Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, se RE. Selektiv inaktivering av dorsomedial prefrontal cortex och den basolaterala amygdalen dämpar konditionering av återställande av släckt kokainsökande beteende hos råttor. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Förenkling av sexuellt beteende hos manrotten i närvaro av stimuli som tidigare parat med systemiska injektioner av morfin. Farmakologi biokemi och beteende. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regler för metamfetaminbelöning genom extracellulär signalreglerad kinase 1 / 2 / ets-liknande gen-1 signaleringsväg via aktiveringen av dopamin NIDA Forskning Rapport Serie: Metamfetamin missbruk och tillägg. 2006 NIH Publiceringsnummer 06-4210. [PubMed]
  61. Förmåner SM, Clifton PG. Förstärkare omvärdering och villkorad plats preferens. Fysiologi och beteende. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Vägar av sexuell önskan. Journal of Sexual Medicine. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Den psykofarmakologi av sexuellt beteende. I: Bloom FE, Kupfer DJ, redaktörer. Psykofarmakologi: den fjärde generationen av framsteg. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Inverkan av omedelbar tidig geninduktion i hjärnan efter sexuell stimulering av kön och manliga gnagare. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Konditionering och sexuellt beteende: en recension. Horm Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Differentiella effekter av dopaminreceptorantagonister på sexuell beteende hos hanrotter. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Det mesolimbiska dopaminsystemet: Den sista gemensamma vägen för den förstärkande effekten av missbruksdroger? Neurovetenskap & Biobehavioral Reviews. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Sexuell erfarenhet inducerar funktionell och strukturell plasticitet i mesolimbic systemet. Biologisk psykiatri. 2009 I tryck.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Dopaminfluktuationer i kärnan accumbens under underhåll, utrotning och återinförande av intravenös D-amphetamin självadministrering. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Läkemedel och sexuella effekter: Roll av drogtyp och kön. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Sexuellt beteende ökar c-fos-uttrycket i förkroppen hos hanroten. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens aktivitet under ett flertalsschema för förstärkning av vatten och sackaros hos råtta. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Attentional Control och Brain Metabolite Nivåer i Metamfetamin Abusers. Biologisk psykiatri. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Kristallmetamfetamin och ecstasy skiljer sig i förhållande till osäkert sex bland unga homosexuella män. Kanadensisk journal för folkhälsan. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Se RE. Neurala substrat av konditionerat cued återfall till drogsökande beteende. Farmakologi biokemi och beteende. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Se RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drogmissbruk, återfall och Amygdala. Annaler från New York Academy of Sciences. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivationer i samband med metamfetaminanvändning bland HIV-män som har sex med män. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Återställningsmodellen för återfall av droger: historia, metod och viktiga resultat. Psykofarmakologi (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilisering till de konditionerade givande effekterna av kokain: farmakologiska och tidsmässiga egenskaper. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilisering till de konditionerade givande effekterna av morfin: farmakologi och tidsmässiga egenskaper. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Förutsägare av HIV-sexuella riskbeteenden i ett samhälleprov av injektionsmissbruk med användning av män och kvinnor. Aids och beteende. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, Vit D, Kelder S. Methamphetamin Användning och Sexuell Risk Behavior i amerikanska gymnasieelever: Resultat från en nationell riskbeteendeundersökning. Förebyggande vetenskap. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Effekter av dopamin och NMDA-receptorer på kokaininducerat Fos-uttryck i striatum av Fischer-råttor. Brain Research. 2008; 1243: 1-9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  84. Swanson LW, redaktör. Hjärnkartor: Struktur av råttahjärnan. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Sexuell belöning hos hanrotter: Effekter av sexuell erfarenhet på villkorad platspreferens i samband med ejakuleringar och intromissioner. Horm Behav. 2008 [PMC gratis artikel] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Sidor C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Inblandning av den extracellulära signalreglerade kinaskaskaden för kokainbelöningsegenskaper. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Sidor C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Addictive och non-addictive drugs inducerar tydliga och specifika mönster för ERK-aktivering i mushåran. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Reglering av en proteinfosfataskaskad möjliggör konvergerande dopamin och glutamatsignaler för att aktivera ERK i striatumet. Proc Natl Acad Sci USA A. 2005; 102: 491-496. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Förändringar i dopaminerg och glutamatergisk överföring vid induktion och uttryck av beteendessensibilisering: en kritisk granskning av prekliniska studier. Psykofarmakologi (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neural aktivering efter sexuellt beteende hos han- och honrottshjärnan. Behavioral Brain Research. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Excitotoxiska lesioner av den basolaterala amygdalen försämrar förvärvet av kokainsökande beteende under en andra ordningens förstärkningsschema. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologi av missbruk. Nuvarande yttrande i neurobiologi. 1996; 6: 243-251. [PubMed]