DeltaFosB i Nucleus Accumbens reglerar matförstärkt instrumentalt beteende och motivation (2006)

FULLSTUDIE

Journal of Neuroscience, 6 September 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006

Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4och Jane R. Taylor1

1.Korrespondens bör adresseras till Jane R. Taylor, Psykiatrisk avdelning, Division of Molecular Psychiatry, Yale University School of Medicine, Ribicoff Research Facilities, Connecticut Mental Health Center, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-postskyddad]

Abstrakt

Ändringar i motivation har blivit implicerade i patofysiologin hos flera psykiatriska störningar, inklusive drogmissbruk och depression. Upprepad exponering för droger av missbruk eller stress är känt för att ihållande inducera transkriptionsfaktorn ΔFosB i nukleär accumbens (NAc) och dorsalstriatum, hypoteserade effekter för att bidra till neuroadaptationer i dopaminreglerad signalering. Lite är emellertid känt om den specifika involveringen av ΔFosB i dysregulering av aptitmotiverade beteenden. Vi visar här den inducerbara överuttrycket av ΔFosB i NAc och dorsalstriatum hos bitransgena möss, eller specifikt i NAc-kärnan hos råttor genom användning av virusmedierad genöverföring, förbättrad livsmedelsförstärkt instrumentell prestanda och progressivt förhållande svarande. Mycket liknande beteendeeffekter hittades efter tidigare upprepad exponering för kokain, amfetamin, MDMA [(+) - 3,4-metylendioximetamfetamin] eller nikotin hos råtta. Dessa resultat avslöjar den kraftfulla reglering av motivationsprocesser av ΔFosB och ger bevis för att läkemedelsinducerade förändringar i genuttryck via induktion av ΔFosB inom NAc-kärnan kan spela en kritisk roll i påverkan av motivationspåverkan på instrumentalt beteende.

Beskrivning

Upprepad läkemedelsexponering orsakar temporärt dynamiska förändringar i gentranskription som producerar varaktig neuroadaptationer inom nukleär accumbens (NAc) (Nestler, 2004). Denna hjärnregion spelar en viktig roll i både läkemedels- och naturförstärkningsprocesser (Kelley och Berridge, 2002), även om lite är känt om transkriptionsfaktorerna som påverkar beteendet motiverat av nondrug, aptitretande förstärkare som mat. ΔFosB är en transkriptionsfaktor aktiverad inom NAc och dorsalstriatum genom kronisk drogexponering (Konradi et al., 1994; Nye et al., 1995; Chen et al., 1997; Pich et al., 1997; Shaw-Lutchman et al., 2003) och kompulsiv hjulkörning (Werme et al., 2002). Det induceras också i dessa regioner genom flera former av kronisk stress (Perrotti et al., 2004). Förhöjningen av läkemedelsförstärkningsprocesser associerade med induktion av striatalafFosB är väl etablerad (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Konsekvenserna av förhöjda ΔFosB-nivåer i dessa regioner på instrumentalt beteende motiverat av naturliga förstärkare är emellertid inte kända.

Utförandet av instrumentala svar är en nödvändig komponent i läkemedelsbeteende som kan bli dysreglerade eller oflexibla när övergången till missbruk utvecklas (Jentsch och Taylor, 1999; Berke och Hyman, 2000; Berridge och Robinson, 2003; Everitt och Robbins, 2005). Den NAc är inblandad i flera aspekter av instrumentalt beteende med relevans för missbruk (Balleine och Killcross, 1994; Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002; Di Ciano och Everitt, 2004b; Everitt och Robbins, 2005). Det är därför troligt att läkemedelsinducerad neuroadaptationer inom NAc kan påverka resultatet av instrumentala åtgärder. Den kroniska kokainexponeringen förstärker faktiskt sackarosförstärkt instrumentell prestanda (Miles et al., 2004) och manipuleringar trodde blockera neuroplasticitet inom NAc-kärnan, inklusive inhibering av PKA (proteinkinas A) eller proteinsyntes, störa matbelönade instrumentella svar (Baldwin et al., 2002a; Hernandez et al., 2002). NAc-kärnan förmedlar också motivationseffekten av konditionerade influenser på instrumentalt beteende (Parkinson et al., 1999; Corbit et al., 2001; Hall et al., 2001; Di Ciano och Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), vilket åstadkommer ett neurobiologiskt substrat, varigenom AFFosB-induktion kan kraftigt påverka instrumental prestanda och motivation för aptitförstärkare, såsom mat, vatten eller missbruksmissbruk.

Här undersökte vi effekterna av ΔFosB på livsmedelsmotiverat instrumentalt beteende med användning av två komplementära genetiska metoder: (1) inducerbar överuttryckning av ΔFosB inom NAc och dorsalstriatum av bitransgena möss (NSE-tTA × TetOp-FosB) och (2) överuttryck av ΔFosB i NAc-kärnan specifikt genom användning av viral-medierad genöverföring hos råttor. Vi utvärderade också om tidigare upprepad exponering för kokain, amfetamin, (+) - 3,4-metylendioximetamfetamin (MDMA) eller nikotin, under förhållanden som rapporterats öka ΔFosB, skulle förbättra matförstärkt instrumentell respons och / eller motivation med hjälp av ett progressivt förhållande schema, som har visats för läkemedelsförstärkt självadministration (Horger et al., 1990, 1992; Piazza et al., 1990; Vezina et al., 2002; Miles et al., 2004). Våra resultat visar vidhäftande effekter av ΔFosB på instrumentalt beteende och föreslår att denna transkriptionsfaktor kan fungera i NAc-kärnan som en regulator av motivationsfunktionen.

Material och metoder

Djur och djurvård

Experimentellt naiva Sprague Dawley-råttor förvärvades från Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Manliga bitransgena 11A-möss härleddes från ett kors mellan homozygota transgena möss som uttryckte ett neuronspecifik enolas (NSE) -TTA-tetracyklintransaktivatorprotein (linje A) och möss som uttrycker TetOp (tetracyklin-responsiv promotor) -AFosB (linje 11); Föräldra linjerna upprätthölls på en utbredd blandad bakgrund (50% ICR och 50% C57BL6 × SJL) (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Dessa bitransgena 11A-möss uttrycker ΔFosB endast när: (1) båda transgenerna är närvarande i samma cell och (2) inhiberas inte transkriptionell aktivering av tTA genom närvaron av tetracyklinantibiotika såsom doxycyklin. Administreringen av doxycyklin mot dessa möss kan sålunda utöva en temporal kontroll över uttrycket avFosB och användas för att förhindra uttrycket under utveckling; I själva verket är doxycyklinadministration associerad med inget detekterbart läckagexpression av ΔFosB (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Vidare valdes 11A-linjen för bitransgena möss för föreliggande experiment, eftersom de visar ett expressionsmönster som primärt är begränsat till dynorfininnehållande striataleuroner (både NAc och dorsalstriatum), som mycket liknar mönstret avFosB-induktion med kroniskt läkemedel exponering (Kelz et al., 1999). Vidare har kvantifieringen av detta striatala uttryck av ΔFosB kvantifierats tidigare (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Mössen genererades vid University of Texas Southwestern och underhålls och testades i Yale-anläggningarna. Under gestation och utveckling behölls alla möss i doxycyklin tills 8-9-veckor i en koncentration av 100 μg / ml i dricksvattnet, tillstånd som är kända för att upprätthålla TetOp-drivna transgener i "off" -tillståndet och använde start av 6 veckor av doxycyklin när ΔFosB-uttryck blir maximal (Kelz et al., 1999). Alla experiment involverade jämförelsen av littermate bitransgena möss mot versus doxycyklin, som i sig inte har någon effekt på motiverat beteende (Kelz et al., 1999; McClung och Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).

Alla försökspersoner hölls i par (råttor) eller i grupper (möss, fyra till fem per bur) under kontrollerade temperatur- och fuktighetsförhållanden under en 12 h ljus / mörk cykel (tänds vid 7: 00 AM och avstängd vid 7: 00 E.M). De fick minst 7 d att anpassa sig till bostadsanläggningarna före en studie. Djur hade åtminstone ad libitum tillgång till vatten och begränsad tillgång till mat som beskrivs nedan. All djuranvändning utfördes i enlighet med National Institutes of Health Guide för vård och användning av laboratoriedjur och godkändes av Animal Care and Use Committees vid University of Texas Southwestern och Yale University.

Läkemedel

Kokainhydroklorid (NIDA), d-amfetaminsulfat (Sigma, St. Louis, MO), MDMA-hydroklorid (vänligen tillhandahållen av NIDA) och (-) - nikotinvätetartrat (Sigma ) löstes i steril fysiologisk saltlösning (0.9%) och injicerades intraperitonalt i en volym av 5 ml / kg (möss) eller 2 ml / kg (råttor). Nikotinlösningens pH justerades med natriumbikarbonat före injektion.

Virala vektorer

Viral-medierad genöverföring utfördes som tidigare beskrivits (Carlezon et al., 1998; Perrotti et al., 2004). Kortfattat infördes cDNA som kodar för de specifika proteinerna i HSV-amplicon HSV-PrPUC och paketerades in i viruset med hjälp av hjälpen 5dl1.2. De vektorer som driver expression av antingen HSV-LacZ, som kodar för kontrollproteinet p-galaktosidas eller HSV-FFB, kodande för AFosB, infuerades därefter i NAc-kärnan enligt experimentprotokollet.

experimentell procedur

Översikt.

Experiment 1 undersökte effekterna av tidigare upprepad läkemedelsexponering på matförstärkt instrumentell prestanda och progressivt förhållande svarande. Råttor delades slumpmässigt i fem experimentella grupper (n = 9-10 / grupp). Dessa grupper fick två gånger dagligen injektioner (intraperitonealt, vid 9: 00 AM och 5: 00 PM) med saltlösning eller ett av följande läkemedel: nikotin, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokain, 15 mg / kg; eller amfetamin, 2.5 mg / kg för 15 på varandra följande dagar. Doserna valdes utifrån våra tidigare publicerade data (Taylor och Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), och läkemedelsinducerad lokomotorisk stimulering övervakades på behandlingsdagarna 1 och 15. Efter 5 d för återkallelse utbildades djur på instrumental respons under 10 på varandra följande dagar och testades därefter på progressivt förhållande som svarade på nästa dag. Två djur uteslutes från den statistiska analysen eftersom de inte förvärvade det instrumentala svaret, vilket inte gjorde mer än ett aktivt spakrespons på var och en av de tre sista träningstiderna.

Experimenten 2 och 3 undersökte effekterna av inducerande striatal överuttryck av FosB i bitransgena möss på instrumentell prestanda och svarade på ett progressivt förhållande av förstärkning. Den inducerbara överuttrycket av FFosB i dessa möss har tidigare visat sig efterlikna effekterna av upprepad läkemedelsexponering i den lokomotoriska aktiviteten och konditionerade platspreferensparadigma (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Dessa möss kan ge kritisk information om bidraget från striatalafFb till specifika beteendeprocesser. Genotypa hanmöss behölls på doxycyklin eller byttes till kranvatten vid 8-veckors ålder. Experiment initierades efter 6 veckor av doxycyklinuttag, vid vilket tillfälle transgenuttryck är maximal (Kelz et al., 1999). I experiment 2 var djur (n = 16) livsmedelsbegränsade och utbildade på det instrumentella förfarandet som beskrivs nedan (se nedan, testning av instrumentet svarande och progressivt förhållande) under 10 på varandra följande dagar. Efter avslutad instrumental testning utvärderades kokaininducerad lokomotorisk stimulering i dessa möss. I experiment 3 utbildades en separat grupp möss (n = 18) på det instrumentala svaret för 10 på varandra följande dagar under betingelser under vilka maximalt 50 förstärkare levererades. På dag 11 testades alla möss på progressivt förhållande som svarade. På dag 12 bestämde vi effekterna av förstärkningsdevalveringen genom att föregöra progressivt förhållande.

Experiment 4 och 5 undersökte effekterna av virusmedierad överuttryckning av ΔFosB specifikt inom NAc. Experiment 4 testade effekterna av ΔFosB-överuttryck på instrumental prestanda. Här infuerades råttor med HSV-ΔFosB (n = 8) eller HSV-LacZ (n = 8) i NAc-kärnan och utbildades på instrumentalproceduren som började 40 h senare. Efter 10 dagliga träningstider bedömdes basnivåaktivitetsnivåerna för alla djur i övervakningsutrustningen för lokomotivaktivitet enligt nedan (se nedan, Lokomotorisk aktivitet). Experiment 5 utvärderade effekterna av NAc ΔFosB-överuttryck specifikt på progressivt förhållande svarande. Här utbildades råttorna initialt i 15-konsekutiva dagar, tilldelade experimentella grupper och infunderades sedan med HSV -AFosB (n = 8) eller HSV-LacZ (n = 7) i NAc-kärnan. Djur lämnades otestad och obehandlad för 4 d för att tillåta ΔFosB-uttryck att toppa. På dag 5 efter infusion testades alla djur för att trycka på hävstång på progressivförhållande schemat. Efter den sista testdagen avlivades alla råttor och placeringen av infusionskanyler i NAc-kärnan verifierades histokemiskt. Baserat på placering av infusionskanyler utesluts två råttor från experiment 4 och en råtta från experiment 5.

Karakterisering av genuttryck gjordes i en separat grupp av djur. Här infuerades HSV-LacZ i NAc-kärnan och djur dödades 3 d senare. Expressionen av p-galaktosidas bedömdes därefter immunohistokemiskt.

Lokomotorisk aktivitet.

Lokomotorisk aktivitet mättes med användning av aktivitetsmätare (Digiscan Animal Activity Monitor, Omnitech Electronics, Columbus, OH). Aktivitetsmätarna var utrustade med två rader av infraröda fotosensorer, varav varje rad bestod av 16-sensorer placerade 2.5 cm från varandra. Aktivitetsmätarna kontrollerades av och data från aktivitetsmätarna samlade av en PC-dator med Micropro-mjukvaran (Omnitech Electronics).

Försöksdjuren placerades i genomskinliga plastlådor (25 × 45 × 20 cm) som sattes i aktivitetsmätarna. Djur fick initialt att habituera till den lokomotoriska aktivitetsregistreringsutrustningen för 30 min. I några försök togs djur ut, injicerades med kokain, amfetamin, nikotin eller vehikel enligt den experimentella konstruktionen och placerades tillbaka i lådorna. Lokomotorisk aktivitet registrerades sedan för 60 min, startande 5 min efter läkemedelsinjektion för att undvika ospecifik injektionsinducerad hypermotilitet. Alla experiment utfördes under djurs ljusfas (mellan 9: 00 AM och 6: 00 PM).

Instrumentreaktion och progressiv förhållandestestning.

Instrumentreaktion utvärderades med användning av standardoperativa kamrar för råttor (30 × 20 × 25 cm) eller möss (16 × 14 × 13 cm) kontrollerad av MedPC-mjukvaran (Med Associates, St. Albans, VT). Varje kammare hölls i en ljuddämpande ytterkammare utrustad med en vit brusgenerator och en fläkt för att minska påverkan av yttre ljud. Ett husljus monterat på bakväggen upplyste kammaren. En pelletsdispenser levererade matpellets (20 eller 45 mg, Bio-Serv, Frenchtown, NJ) som förstärkare i tidningen. Huvudposter detekterades av en fotocell monterad ovanför förstärkningsbehållaren. I denna tidskrift var ett stimulansljus. För råttor placerades en spak på var sida om tidningen. För möss placerades två nosepokeöppningar på kamrarnas bakvägg (dvs motsatt till förstärkarmagasinet).

Under 5 d omedelbart före träningstiden begränsades djuren till 90 min tillgång till mat per dag och utsattes för kornbaserade matpellets (möss, 20 mg, råttor, 45 mg) i sina hemburar. Under testperioden var matpellets intermittent tillgängliga i operantkamrarna enligt beteendeprotokollet (se nedan) såväl som i obegränsade mängder i hemburet för 90 min, som startade 30 min efter den dagliga testperioden. Detta mat åtkomstschema gör det möjligt för varje enskilt djur att nå sin individuella mättnadspunkt och minskar den variation som orsakas av konkurrensen mellan dominerande och underordnade djur. I våra händer tillåter detta schema en långsam viktökning efter den första viktminskningen till ~85-90% av fodervikter. Djurvikter övervakades genom experimentet.

Alla ämnen initierades initialt till testapparaten för 2 d; Under dessa sessioner levererades matpellets till förstärkarmagasinet på ett schemalagd tidsplan 15 s (FT-15). Från och med nästa dag mottog ämnena dagliga träningssessioner för 10 på varandra följande dagar. Reagemang för mat testades baserat på tidigare publicerade instrumentella konditioneringsförfaranden (Baldwin et al., 2002b). Svar på den korrekta (dvs. aktiva) spaken / nosepoke förstärktes, medan svara på den andra (inaktiva) spaken / nosepoke hade inga programmerade konsekvenser. Positionen för den aktiva nosepoke eller spaken (vänster / höger) var balanserad för alla experimentgrupper. Slutförandet av svarskravet (se nedan) resulterade i början av magasinet stimulusljus, följt 1 s senare genom leverans av en enda matpellets. Två sekunder senare blev stimulusljuset avstängt. De första 10-förstärkarna erhölls efter framgångsrik fullföljande av att svara enligt ett schema med fast förhållande (FR1), varefter pellets var tillgängliga efter att ha svarat på ett variabelt förhållande (VR2) schema. Sessionen varade för 15 min.

Experiment 3 (möss) och 5 (råttor) använde alternativa träningsplaner för att undvika den potentiella effekten av skillnader i instrumentell prestanda under träning vid efterföljande progressiva förhållande svarande (detaljerat nedan). I experiment 3 utbildades möss på ett FR1 schema för 2 d och sedan på ett FR2 schema för 8 d. Den första 3 d av testningen använde 60 min sessioner. På de sista 7-träningsdagarna avslutades sessionen när 50-förstärkare hade förvärvats. I experiment 5 utbildades råttor på FR1 / VR2-schemat i 15 min-sessioner som beskrivits ovan för alla andra experiment med två undantag. Först levererades ett maximalt antal 150 pellets / session. För det andra fick djuren 5 ytterligare träningsdagar (dvs totalt 15 d) för att möjliggöra upprättandet av stabil prestanda före någon experimentell manipulation.

Djur testades också på att reagera på mat på ett progressivt förhållande schema för förstärkning. I detta test initierades svarskravet för att erhålla mat som ett FR1 schema, men stegvis ökat med 2 för att erhålla en efterföljande förstärkare (dvs 1, 3, 5, 7 ..., X + 2 svar). I läkemedelsbehandlingsexperimentet med användning av råttor ökades schemat gradvis med 5, vilket gav ett slutschema för 1, 6, 11, 16 ..., X + 5. Alla andra parametrar hölls identiska med träningsförfarandet som beskrivits ovan. Testet avslutades när inget aktivt svar hade gjorts för 5 min.

Reinforcer devalvering.

Effekten av förstärkningsdevalveringen undersöktes med hjälp av förstärkarspecifik prefeeding. Här fick möss äta obegränsade spannmålsbaserade matpellets i deras hemmabur under 3 h innan de testades på det progressiva förhållandeplanet för förstärkning som beskrivits ovan.

Kirurgiska tekniker.

Djur bedövades med användning av Equithesin [en blandning innehållande pentobarbital (35 mg / kg) och klorhydrat (183.6 mg / kg) i etanol (10% volym / volym) och propylenglykol (39% vol / vol); administrerad vid 4.32 ml / kg, ip]. Cannulas (Plast One, Roanoke, VA) implanterades kirurgiskt över NAc-kärnan, med användning av Kopf stereotaktisk utrustning. De stereotaktiska koordinaterna som användes i förhållande till bregma var följande: anterior / posterior, + 1.5 mm; lateral / medial, ± 1.5 mm; ventral / dorsal, -6.0 mm (Paxinos och Watson, 1986). Kanylerna förankrades i skallen med skruvar och dentalcement. Obturatorer placerades i styrkanylerna för att förhindra blockering. Efter operationen utsattes djuren för standard postoperativ vård och fick återhämta sig för 5 d före början av något experiment.

Infusioner.

Intracerebrala infusioner av virusvektorer utfördes bilateralt 40 h före träningens början (se nedan). Injektionssprutor (31-mätare), som sträckte sig 1 mm under ledningskanylens spetsar, sänktes sakta samtidigt till vänster och den högra NAc och 1.0 μl / sidan infunderades under en 4 min-period vid en infusionshastighet av 0.25 μl / min med en mikroinfusionspump (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Infusionsnålarna lämnades på plats för 1 min efter att infusionen var klar och dummykanylerna ersattes. Kanelplaceringar verifierades histologiskt efter genomförandet av beteendexperimenten (se Fig. 6B), och endast djur med korrekt placerade kanyler ingick i den statistiska analysen av experimentdata.

Histologiska analyser och immunförstärkning.

Efter fullbordandet av försöken bedövades djur som hade fått operationer som en del av experimentet bedövades med Equithesin och perfusionerades transkartiellt med 0.1 m PBS (5 min) och 10% formalin (10 min) enligt standardprocedurer. Hjärnor postfixerades i formalin och placerades därefter i en fosfatbuffrad sackaroslösning (30%). Alla hjärnor skars sedan i 40 μm sektioner på en mikrotom och användes för histologiska analyser av kanylplacering och proteinuttryck.

Kanelplacering gjordes i sektioner motsträckta med neutralt rött och monterat på mikroskopskivor i distriktens mjukgörare och xylen (DPX) efter etanol-uttorkning. Immunohistokemi utfördes som tidigare beskrivits (Hommel et al., 2003). Kortfattat bestämdes uttryck av p-galaktosidas efter HSV-LacZ-infusionen genom immunofluorescerande färgning med användning av en primär antikropp mot β-galaktosidas från get-antikropp (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Efter inkubation över natten sköljdes sektionerna och inkuberades därefter med en fluorescerande ås-anti-get sekundär antikropp konjugerad till Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Sektioner tvättades igen följt av etanol-dehydratisering och montering i DPX. Intilliggande kontrollsektioner behandlades identiskt utan införlivande av primära antikroppar. Immunofluorescens bedömdes vid 520 nm med användning av a Zeiss (Oberkochen, Tyskland) mikroskop med FITC filter och bilder fångade vid identiska exponeringstider med Zeiss Axiovision digitalt bildhanteringssystem.

Statistik

Data från alla experiment utvärderades med användning av en en-, två- eller trevägs ANOVA följt av Scheffes eller Dunnetts post-hoc-test, vilket korrigerade för flera jämförelser där så var lämpligt med hjälp av Holms sekventiella avstötningstest. Ett värde på p ≤ 0.05 ansågs statistiskt signifikant.

Resultat

Experiment 1: Effekter av upprepad läkemedelsexponering på instrumentell prestanda och progressivt förhållande svarar

För att bekräfta att vårt upprepade läkemedelsexponeringsparadigm producerat funktionellt signifikanta neuroadaptationer, bedömde vi först lokomotorisk sensibilisering som ett prototypiskt beteendemått för kronisk drogverkan. Råttor gavs två gånger dagligen injektioner av nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) eller amfetamin (2.5 mg / kg) och den lokomotoriska aktiviteten testades efter den första injektionen behandlingsdagar 1 och 15 (kompletterande Fig. 1A-E, tillgänglig på www.jneurosci.org som kompletterande material). Statistisk analys avslöjade en signifikant behandling vid daginteraktion (F(4,42) = 9.335; p <0.0001). Med undantag av MDMA (p = 0.62) inducerade alla läkemedel signifikant större lokomotorisk aktivitet (dvs. sensibilisering) på dag 15 jämfört med dag 1 (nikotin, p <0.001, kokain, p <0.001; amfetamin, p <0.01). Upprepade saltlösningsinjektioner hade ingen effekt. Ingen av läkemedelsbehandlingarna förändrade baslinjens lokomotoriska aktivitet uppmätt under uppehållsperioden på dag 15 (tilläggs Fig. 2A, tillgänglig vid www.jneurosci.org som kompletterande material).

Fem dagar efter den sista läkemedelsinjektionen undersökte vi effekterna av tidigare upprepad nikotin, MDMA, kokain eller amfetamin exponering på matförstärkt instrumentalt beteende. Uppgifterna presenteras för varje läkemedel separat i Figur 1A-H med samma saltlösningskontrollgrupp för jämförelser. Vi fann att tidigare exponering för vart och ett av dessa läkemedel ökade signifikant och selektivt matförstärkt instrumentalt svar (behandling med hävstång genom träningsdag, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post-hoc-analys: nikotin, p <0.01; MDMA, p <0.05; kokain, p <0.01; amfetamin, p <0.001). Den vidhäftande höjden av instrumental respons som observerades vid asymptotisk prestation föreslog en möjlig förbättring i motivation, i överensstämmelse med tidigare rapporterade ökningar efter upprepad psykostimulant exponering (se Diskussion). Vi testade därför om tidigare upprepad läkemedelsexponering ökad motivation med ett progressivt förhållande schema. Det var en statistisk effekt av tidigare läkemedelsexponering vid respons på den aktiva hävarmen (behandling genom häftinteraktion, F(4,42) = 3.340; p <0.05) (Fig 2A) liksom den slutliga brytpunkten (F(4,42) = 5.560; p <0.001) (Fig 2B). Ytterligare analys visade att alla behandlingar ökade både antalet aktiva reaktioner (nikotin, p <0.001, MDMA, p <0.05, kokain, p <0.001, amfetamin, p <0.001) och brytpunkten (nikotin, p <0.001; MDMA , p <0.01, kokain, p <0.0001; amfetamin, p <0.0001) som överensstämmer med en effekt av dessa behandlingar på motivation. Med tanke på bristen på effekten av drogerna på baslinjens lokomotoriska aktivitet och bristen på effekt på inaktiva tryckpressar är det osannolikt att den ökade responsen på mat under dessa förhållanden återspeglar icke-specifika ökningar i motoraktivitet.

Figur 1.

Effekt av tidigare upprepade injektioner av nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) eller amfetamin (2.5 mg / kg) två gånger dagligen för 15 d vid efterföljande instrumentalt beteende. Djuren testades tillsammans, men för tydlighet presenteras effekterna av varje läkemedel separat med användning av samma saltlösningsbehandlade kontrollgrupp. A (aktiva svar) och B (inaktiva svar) visar effekterna av tidigare nikotinexponering; C, D, MDMA; E, F, kokain; G, H, amfetamin. Data representeras som medel ± SEM.

Figur 2.

Effekt av tidigare upprepad behandling (två gånger dagligen, 15 d) med saltlösning, nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) eller amfetamin (2.5 mg / kg) på instrumentell respons på ett progressivt förhållandesplan för förstärkning. Data representeras som medel ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, Saltlösning; Nic, nikotin; Coc, kokain; Amph, amfetamin; PR, progressivt förhållande.

Tidigare läkemedelsexponering hade ingen effekt på kroppsvikt registrerad före livsmedelsbegränsning, på den första eller sista dagen av instrumental träning eller omedelbart före provprovsteget (tilläggs Fig. 2B, tillgänglig vid www.jneurosci.org som kompletterande material). Den begränsade tillgången till mat för 3 d minskade initialt kroppsvikt till i genomsnitt 91-92% av fodervikter. Vid slutet av beteendestestning hade vikter återvänt till 97-99% av prerestriktionskroppsvikt och inga skillnader observerades mellan läkemedelsexponerade och saltlösningsbehandlade djur. Förändringar i kroppsvikt och skillnader i hunger eller aptit bör således inte bidra avsevärt till den observerade förbättringen av instrumentell prestanda eller motivation.

Experiment 2: inducerbar överuttryckning av ΔFosB i bitransgena möss; instrumental prestanda

Vi undersökte därefter om instrumental prestanda också ökades i bitransgena möss som inducerat överuttryckligt ΔFosB med markerad selektivitet i NAc och dorsalstriatum (Kelz et al., 1999). I detta experiment jämfördes ΔFosB-överuttryckta möss med kummelkontroller som inte överuttrycker ΔFosB eftersom de bibehålls på doxycyklin (se Material och metoder). Vi fann att överuttryck av ΔFosB väsentligt ökade matförstärkt respons (genuttryck av hävarm vid träningsdag, F(9,126) = 3.156; p <0.01) (Fig 3EN). Antalet nosepoke-svar som gjordes i den inaktiva bländaren var inte olika mellan de två grupperna (Fig 3B). Tillsammans indikerar dessa data att ΔFosB-överuttryck i NAc och dorsalstriatum ökar instrumental prestanda selektivt

Figur 3

Effekt av inducerbar striatal överuttryck av AFosB i bitransgena möss på instrumental prestanda. A, Aktiva svar. B, Inaktiva svar. Data representeras som medel ± SEM.

För att utesluta att förbättringen av instrumental prestanda i ΔFosB-överuttryckande djur kan förklaras av förändringar i aptit eller hunger, registrerades kroppsvikt före livsmedelsbegränsning och på utbildningens första och sista dag. ΔFosB hade ingen effekt på kroppsvikt före livsmedelsbegränsning, och det fanns heller ingen effekt på kroppsvikt under beteendestestning. Här begränsade tillgången till livsmedel för 3 d reducerad kroppsvikt till ett genomsnitt av 87-89% av fodervikter. Vid slutet av beteendestestning var djurvikten 97-99% av prerestriktionskroppsvikt, med ekvivalenta förändringar sedda i ΔFosB och kontrollmöss (tilläggs Fig. 3A, tillgänglig vid www.jneurosci.org som kompletterande material). Det är sålunda osannolikt att potentiella effekter av ΔFosB-överuttryck på hunger eller aptit kunde utgöra förbättringar i instrumentell svarande observerad.

När testning på instrumentresultat hade slutförts, förändrade ΔFosB-överuttryck inte baslinjens lokomotoriska aktivitet mätt under en 30-minperiod (tilläggs Fig. 3B, tillgänglig vid www.jneurosci.org som kompletterande material). Denna observation stöder uppfattningen att ospecifik förändring av aktivitet inte bidrar till den förbättrade instrumentella prestationen som observerats hos dessa djur. Emellertid har ΔFosB-överuttryckt bitransgena möss rapporterats utgöra förbättrade lokomotoriska reaktioner på akut och upprepad kokain (Kelz et al., 1999). Eftersom vi använde ett något annorlunda schema för återtagande från doxycyklin för att inducera genuttryck (6 veckor med livsmedelsbegränsning) bestämde vi oss för att bekräfta denna fenotyp. Faktum är att ΔFosB-överuttryckta möss visade en signifikant större ökning av den lokomotoriska aktiviteten när de injicerades med kokain jämfört med deras kullmaskontroller som behölls på doxycyklin (behandling med genuttryck, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (kompletterande Fig. 3C, tillgänglig på www.jneurosci.org som kompletterande material).

Experiment 3: inducerbar överuttryckning av ΔFosB i bitransgena möss; progressivt förhållande

Med tanke på att tidigare läkemedelsexponering inducerar striatalafFosB (Nestler et al., 2001) och hittades här för att öka det progressiva förhållandet som svarade, testade vi nästa gång huruvida transgen striatal överuttryck av ΔFosB ökar prestandan på ett progressivt förhållande schema för förstärkning. En ny grupp möss utbildades på instrumental respons under förhållanden (se Material och metoder) som inte producerade signifikanta skillnader i instrumental prestanda före provning på progressivt förhållande svarande (F(1,16) <1). I det progressiva förhållandestestet observerade vi emellertid ett signifikant genuttryck genom spakinteraktion (F(1,16) = 5.30; p <0.05) (Fig 4A) och fann att ΔFosB-överuttryckta möss, jämfört med skräp-kontrollmöss som behölls på doxycyklin, gjorde ett större antal aktiva reaktioner (p <0.05), medan antalet inaktiva svängresponser inte var annorlunda. ΔFosB-overuttryckande möss uppnådde också en högre brytpunkt (F(1,16) = 5.73; p <0.05) (Fig 4B). Dessa data tyder på att, som tidigare psykostimulerande exponering, ökar motivation av striatal överuttryck av ΔFosB. Eftersom antalet inaktiva svar inte förändrades i ΔFosB-överuttryckta möss, kommer icke-specifika aktivitetsökningar sannolikt inte att bidra till dessa effekter. Denna uppfattning stöddes vidare av bedömningar av baslinjens lokomotoriska aktivitet, där det inte fanns någon skillnad mellan möss som överuttryckte ΔFosB och littermate-kontrollmöss som behölls på doxycyklin. Inga brutna skillnader i kroppsvikt mellan ΔFosB-överuttryckande och kontrolldjur visade sig som mätt på testdagen. Således, även om ΔFosB-överuttryckande djur kommer att avge mer matmotiverade instrumentella svar, så verkar de inte konsumera mer mat när den är fritt tillgänglig. Den mest troliga förklaringen till denna observation är att även om motivation bestämmer hur svårt ett djur kommer att arbeta för att förvärva en förstärkare, påverkar många ytterligare faktorer (aptit, mättnad, metabolisk tillstånd etc.) utfodringsbeteende och den faktiska konsumtionen av mat.

Figur 4.

Effekt av inducerbar överuttryckning av FosB i bitransgena möss på instrumental respons på ett progressivt förhållandesschema för förstärkning före och efter mättnadsinducerad förstärkningsdevaluering. A, B, baslinje: spaksvar (A), brytpunkt (B). C, D, efter förstärkning av förstärkare: spaksvar (C), brytpunkt (D). Data representeras som medel ± SEM. * p <0.05.

De ΔFosB-bitransgena mössen som används här uttrycker ΔFosB genom striatumet. Medan ventralstriatumet (inklusive NAc) har blivit involverad i motivationsprocesser, dorsalstriatum argumenteras för att vara involverad i förvärv av instrumentala vanor (Yin et al., 2004; Faure et al., 2005). Även om vi inte observerade skillnader i instrumentprestanda under träningsfasen med hjälp av ett lågt schema med maximala armeringsgränser, förhållanden som är relativt resistenta mot utvecklingen av instrumentala vanor (Dickinson, 1985), är det möjligt att upprättandet av vanor kan påverka svara enligt det progressiva förhållandet schemat. Denna möjlighet testades direkt genom att utvärdera effekten av förstärkt devalvering genom förmatning på progressivt förhållande svarande. Sådan prefeeding eliminerade effekten av ΔFosB på progressivt förhållande som svarade, utan skillnader i svarande eller brytpunkter observerade mellan ΔFosB-överuttryckande och kontrollmöss (F(1,16) <1) (Fig 4CD). Tillsammans föreslår dessa data att striatal överuttryck av ΔFosB inte förändrade känsligheten för förändringar i värdet av belönade utfall med hjälp av detta testschema. I stället verkar det instrumentella svaret i det progressiva förhållandetestet vara målinriktade och den ökade brytpunkten som observeras i ΔFosB-överuttryckta möss är sannolikt hänförlig till ökad motivation och inte förhöjt vana-liknande svarande.

Experiment 4: viralt medierad överuttryckning av ΔFosB i NAc-kärnan: instrumental prestanda

För att bedöma huruvida ΔFosB-överuttryck selektivt i NAc skulle kunna redovisa beteendet som observerades i de bitransgena mössen infuserade vi HSV-FosB eller HSV-LacZ som en kontroll, selektivt in i NAc-kärnan hos råttor och studerade effekten av denna manipulation på mat -förstärkt instrumentell prestanda (Fig 5A, B). Efter tidskursutbildning infusionerades HSV-ΔFosB eller HSV-LacZ i NAc-kärnan 40 h före initiering av beteendestestning. Placeringen av infusionen och omfattningen av virusmedierat genuttryck visas i Figur 6, A och B. NAc-infusioner av HSV -AFosB gav en förhöjd ökning av antalet aktiva reaktioner som gjordes (genuttryck av hävar, F(1,12) = 8.534; p <0.05) (Fig 5A), som kvarstod under experimentet. Dessa effekter var selektiva eftersom det inte fanns några signifikanta effekter av ΔFosB-överuttryck inom NAc-kärnan på antalet inaktiva svar (Fig 5B) eller på baslinjens lokomotoriska aktivitet inspelad dagen efter det att experimentet slutfördes (data ej visad). Överuttryck av ΔFosB i NAc efterliknade sålunda beteendeeffekterna av tidigare läkemedelsexponering eller striatal överuttryck av ΔFosB.

Figur 5.

Effekt av infusioner av HSV-FosB i NAc-kärnan innan träning på instrumental respons. A, Aktiva svar. B, Inaktiva svar. Data representeras som medel ± SEM.

Figur 6.

A, Placeringar av infusionsställen för virusvexperimenten. Top, De fyllda svarta cirklarna motsvarar den avsedda infusionsstället. Endast infusioner gjorda inom ~0.5 mm av detta område (dvs inom NAc-kärnan), såsom anges av cirkeln, ansågs acceptabel. Djur med infusioner gjorda utanför detta område utesluts från statistiska analyser. Botten, Infusionsplats inom NAc i ett representativt djur. B, immunhistokemisk verifiering av proteinuttryck efter infusion av HSV-LacZ. De övre panelerna visar p-galaktosidasuttryck inom NAc-kärnan (2.5 och 10 × förstoring). Bottenpanelerna visar bristen på immunofluorescens i intilliggande kontrollsektioner med användning av samma immunohistokemiska procedur utan inklusion av den primära antikroppen.

Experiment 5: viral-medierad överuttryckning av ΔFosB i NAc-kärnan: progressivt förhållande

Det slutliga experimentet bestämde sig direkt om begränsad överuttryckning av ΔFosB i NAc-kärnan med användning av den virala medierade genöverföringsmetoden var tillräcklig för att förbättra motivationen hos råttor. Här infuerades HSV-ΔFosB först efter det att instrumental träning hade genomförts, vilket eliminerar eventuellt inflytande av ΔFosB-överuttryck under träning på det följande progressiva förhållandetestet. En ny grupp råttor utbildades, som tidigare, och uppdelades i balanserade experimentgrupper baserat på deras prestanda på de sista dagarna av träningen. Djur mottog därefter bilaterala infusioner av HSV-AFosB eller HSV-LacZ i NAc-kärnan och testades på progressivt förhållande som svarade efter 5 d för överuttryck. Statistisk analys avslöjade ett signifikant genuttryck genom häftinteraktion (F(1,12) = 14.91; p <0.01) (Fig 7EN). Råttor infunderade med HSV-ΔFosB gjorde mer aktiva reaktioner (p <0.01) jämfört med de infuserade med HSV-LacZ, medan respons på den inaktiva armen inte påverkades. I överensstämmelse med denna ökning hade råttor infuserade med HSV-ΔFosB också en högre brytpunkt (F(1,12) = 18.849; p <0.001) (Fig 7B) än djur infunderade med HSV-LacZ. Det fanns ingen effekt av ΔFosB på baslinjens lokomotoriska aktivitet som testades 1 h före provningsförhållandetestet (kompletterande Fig. 4A, tillgänglig vid www.jneurosci.org som kompletterande material). Det fanns inga skillnader i kroppsvikt på dagen för progressiv förhållande testning (tilläggs Fig. 4B, tillgänglig på www.jneurosci.org som kompletterande material). Dessa fynd stöder våra observationer med transgena ΔFosB-överuttryckta möss och indikerar att selektiv överuttryckning av ΔFosB i NAc är tillräcklig för att förbättra matrelaterad motivation.

Figur 7.

Effekt av infusioner av HSV-ΔFosB 5 d innan testning på instrumental respons på ett progressivt förhållande schema för förstärkning. A, svarshandtag. B, brytpunkt. Data representeras som medel ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.

 Diskussion

Den föreliggande studien visar att överuttryck av ΔFosB inom NAc förbättrar matförstärkt instrumentalt beteender. Tidigare exponering för kokain, amfetamin, MDMA eller nikotin ökade resulterade i en varaktig ökning av efterföljande instrumentprestanda. Dessa läkemedelsexponeringar ökade också livsmedelsmotiverat beteende under ett progressivt förhållande schema för förstärkning. Dessa effekter av tidigare läkemedelsexponering efterliknades genom begränsad överuttryckning av ΔFosB i striatumet med användning av inducerbara bitransgena (NSE-tTA × TetOP-FosB) möss eller med användning av en ny viral vektor för att uttrycka ΔFosB selektivt i NAc. I synnerhet hade överexpression av ΔFosB i NAc-kärnan, efter det att instrumental respons hade förvärvats, ökad motivation för mat under det progressiva förhållandeplanet. Tillsammans identifierar våra fynd ΔFosB i NAc-kärnan som en potentiell medlare av läkemedelsinducerad neuroadaptations som kan främja instrumental beteende, och utvidga rollen för denna transkriptionsfaktor till att inkludera processer med relevans för motivationspåverkan på prestanda av matförstärkt beteende. De ökar också möjligheten att förhållanden som inducerar ΔFosB-uttryck i NAc kan påverka motivationsegenskaperna hos både naturliga och läkemedelsförstärkare.

ΔFosB ackumuleras i dynorfin-uttryckande medium spiny neurons av både NAc och dorsal striatum efter kronisk, men inte akut exponering för missbruksmissbruk. Detta regionala expressionsmönster reproduceras i de inducerbara bitransgena ΔFosB-överuttryckta mössen som används här. I dessa möss, förhöjda striatala nivåer av ΔFosB ökar djurens känslighet för kokain och morfin mätt med konditionerad platspreferens (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Det ökar också progressivt förhållande som svarar mot kokain, vilket tyder på att motivation för självadministrering av kokain ökar genom striatal ΔFosB-överuttryckning (Colby et al., 2003). Här fann vi att striatal ΔFosB-överuttryck i dessa möss ökade också progressivt förhållande som svarade på en matförstärkare och att dessa effekter reproducerades genom begränsad viral-medierad överuttryck av FosB i NAc-kärnan i råtta. Våra data tyder på att ΔFosB kan fungera som en transkriptionsmodulator av motivation för primära förstärkare, vare sig de är mat, droger eller kanske övning, en idé som överensstämmer med preliminära observationer att striataluttryck av ΔFosB ökar efter kronisk hjulkörning eller sackarosdryckning (McClung et al., 2004). Dessa data tyder på att NAc-överuttryck av ΔFosB kan öka motivationseffekten hos både naturliga och läkemedelsförstärkare.

Subregions of the NAc har argumenterats för att differentiellt mediera pavlovians inflytande eller instrumentella incitamentprocesser på instrumentell prestanda (Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002), medan mer generella motivativa influenser på instrumentell prestanda kan kodas av andra regioner, såsom amygdala centrala kärnan (Corbit och Balleine, 2005). NAc-kärnan har dock också föreslagits vara en kritisk plats för förvärv av målinriktat instrumentlärande (Smith-Roe och Kelley, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004). Vi visar likvärdiga effekter av tidigare läkemedelsexponeringar och transgena striatala ΔFosB-överuttryck på förbättrad instrumentalt beteende. Infusioner av HSV-FosB begränsad till NAc-kärnan ökade också livsmedelsförstärkt instrumental respons. Även om dessa experiment inte utesluter ett bidrag från dorsalstriatumet i dessa beteenden, föreslår de starkt att ΔFosB-inducerade förändringar i genuttryck inom NAc är tillräckliga för att öka matmotiverad respons. Eftersom progressivt förhållande svarade också förbättras när ΔFosB uttrycktes efter att stabil instrumentell prestanda tidigare hade uppnåtts verkar en roll för motivationspåverkan på instrumentalt beteende troligt. Möjligheten att våra manipuleringar också påverkar instrumentella inlärningsprocesser kan emellertid inte helt uteslutas. Till stöd för våra slutsatser, den ökning av instrumentella prestanda som observerats efter tidigare oral kokainexponering (Miles et al., 2004) har argumenterats för att involvera motivationsändringar som överensstämmer med förmågan hos kronisk nikotinbehandling att öka progressivt förhållande som svarar hos möss (Brunzell et al., 2006). Vidare uppvisar dopamintransportörens knock-out-möss, i vilka extracellulära dopaminnivåer ökas, både förbättrad ΔFosB-immunreaktivitet och livsmedelsförstärkt motivation men inte förändrad inlärning (Cagniard et al., 2006). Dessutom, fann vi att överuttryck av striatal ΔFosB hos möss inte påverkade prestanda när maten "devalverades" genom att föda. Dessa data tyder på att djuren var känsliga för förstärkarens motivationsvärde och att svaret var målinriktade.

Tidigare upprepad läkemedelsexponering kan också förbättra beteendekontroll som utövas av konditionerade stimuli associerade med naturliga förstärkare, mätt genom pavlovian-tillvägagångssätt (Harmer och Phillips, 1998; Taylor och Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), konditionerad förstärkning (Taylor och Horger, 1999; Olausson et al., 2004) och pavlovian till instrumentöverföring (Wyvell och Berridge, 2001). Det finns nu övertygande bevis på att NAc-kärnan, i motsats till skalet, är inblandad i kontrollen av läkemedelsmotiverat beteende genom pavlovian-konditionerade stimuli (Parkinson et al., 1999, 2002; Hall et al., 2001; Dalley et al., 2002; Ito et al., 2004). Våra resultat kan föreslå att läkemedelsinducerad induktion av ΔFosB i NAc kan vara en mekanism genom vilken beteendekontroll kontrolleras vid dessa förfaranden. Det är också möjligt att pavlovian-konditionerade stimuli, som fungerar som konditionerade förstärkare, bidrar till de nuvarande beteendeeffekterna. Förhöjd kontroll över beteende genom sådana konditionerade stimuli medierade av ökning av striatalafFosB kan också bidra till effekten av proteinet på läkemedelsinducerad konditionerad platspreferens (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006) och progressivt förhållande som svarar mot kokain (Colby et al., 2003). Förändringar i motivationsprocesser har antagits för att bidra till utveckling och upprätthållande av beroendeframkallande beteenden (Robinson och Berridge, 1993; Jentsch och Taylor, 1999; Robbins och Everitt, 1999; Nestler, 2004). Nuvarande data överensstämmer också med andra teorier som betonar flera instrumentella och pavloviska processer i beroendeframkallande beteende (Everitt och Robbins, 2005). Ytterligare arbete behövs för att definiera rollen av läkemedels- och FFB-inducerad neuroadaptationer i NAc och andra limbic-striatala subregioner med avseende på de specifika associativa eller motivationsfaktorerna som kan underlätta instrumentell prestanda och bidra till kompulsiv beteende.

Även om de exakta molekylära mekanismerna genom vilka förändringar inom NAc påverkar beteendet motiverat av primära eller konditionerade förstärkare är inte kända (Kelley och Berridge, 2002), betraktas det GABAergiska mediet spiny neurons av NAc som ett kritiskt substrat för läkemedels- och erfarenhetsberoende plasticitet. Här konvergerar dopaminerge ingrepp från det ventrala tegmentala området och glutamatergiska ingrepp från kortikolimbiska afferenter på vanliga dendrit och dendritiska ryggrader (Sesack och Pickel, 1990; Smith och Bolam, 1990). Kronisk psykostimulant exponering ökar densiteten hos sådana spines på neuroner i NAc-skalet och kärnan (Robinson och Kolb, 1999; Robinson et al., 2001; Li et al., 2003, 2004). Nyligen förknippades induktionen av beteendessensibilisering specifikt med en ökning av dendritiska spines inom NAc-kärnan (Li et al., 2004). Kocaininducerad ökning av ryggradens densitet kvarstår endast i D1-positiva neuroner som coexpressar ΔFosB (Robinson och Kolb, 1999; Lee et al., 2006). ΔFosB i NAc-kärnan kan således bidra till varaktig synaptisk plasticitet som kan påverka instrumental beteende. En kritisk roll för dopamin-glutamat-neurotransmission (Smith-Roe och Kelley, 2000), proteinkinas A-aktivitet (Baldwin et al., 2002a) och de novo proteinsyntesen (Hernandez et al., 2002) inom NAc-kärnan om instrumentell prestanda har tidigare rapporterats. Vi identifierar nu ΔFosB som en transkriptionsfaktor som kan ständigt förbättra livsmedelsförstärkt svar när överuttryckt i NAc-kärnan. De specifika gener eller proteiner som är involverade i dessa effekter förblir noggrant definierade. ΔFosB reglerar uttrycket av multipla proteiner i NAc som är involverade i neuroplasticitet (McClung och Nestler, 2003). En nyligen genomförd mikroarrayanalys kännetecknade genuttrycksmönster i NAc hos de bitransgena möss som uttrycker ΔFosB som användes här och identifierade en delmängd av gener som reglerades genom relativt korttidsuttryck av ΔFosB (McClung och Nestler, 2003). BDNF var en sådan gen, och BDNF i denna neurala krets är känd för att förbättra svara på läkemedels- och matrelaterade signaler (Horger et al., 1999; Grimm et al., 2003; Lu et al., 2004). En ytterligare gen av intresse är cyklinberoende kinas 5 (Bibb et al., 2001), vilket också induceras av ΔFosB, och kan reglera både den kokaininducerade strukturella plasticiteten (Norrholm et al., 2003) och motivation mätt med progressivt förhållande som svarar på naturliga eller drogförstärkare (JR Taylor, opublicerade observationer). Ytterligare ytterligare kandidater är GluR2-subenheten för AMPA-glutamatreceptorer (Kelz et al., 1999) och transkriptionsfaktorn NFκB (kärnfaktor KB) (Ang et al., 2001). Det skulle vara viktigt att utvärdera dessa och andra reglerade proteiner i NAc-subregioner som kandidater för att mediera beteendeffekterna av ΔFosB på instrumentell prestanda och motivation.

Du har nu möjlighet föreliggande serie experiment ger bevis för att överuttryck av ΔFosB inom NAc kan förbättra matmotiverat beteende och därigenom reglera instrumental prestanda, som tidigare har visats för drogbelöningar. Dessa data ger nya bevis för att ΔFosB kan fungera som en generell molekylomkopplare associerad med förbättringar i motivationsaspekterna av förstärkare på målriktat beteende. Våra funderingar ger upphov till möjligheten att induktion av NAc ΔFosB med exempelvis beroendeframkallande läkemedel, stress eller kanske mycket givande livsmedel kan vara en kritisk mekanism genom vilken dysfunktionella motivationstillstånd leder till psykiatriska störningar i samband med tvångsbeteende.

fotnoter

o   Mottagen mars 15, 2006.

o   Revisionen fick juni 23, 2006.

o   Godkänd augusti 2, 2006.

*     Detta arbete stöddes av bidrag från National Institute on Drug Abuse, National Institute of Mental Health och National Institute of Alcohol Abuse and Alcoholism. Vi bekräftar tacksamt det värdefulla biståndet från Dilja Krueger, Drew Kiraly, Dr Ralph DiLeone, Robert Sears och Dr Jonathan Hommel vid Psykiatriska institutionen, Yale University. Vi är också tacksamma för Dr. Jennifer Quinn och Dr. Paul Hitchcott för att ge användbara kommentarer om detta manuskript.

*     Korrespondens bör adresseras till Jane R. Taylor, Psykiatrisk avdelning, Division of Molecular Psychiatry, Yale University School of Medicine, Ribicoff Research Facilities, Connecticut Mental Health Center, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-postskyddad]

*     Copyright © 2006 Society for Neuroscience 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0

referenser

1.   

1.    Ang E,

2.    Chen JS,

3.    Zagouras P,

4.    Magna H,

5.    Holland J,

6.    Schaeffer E,

7.    Nestler EJ

(2001) Induktion av NFκB i kärnbärande medel vid kronisk kokainadministration. J Neurochem 79: 221-224.

CrossRefMedline

2.   

1.    Baldwin AE,

2.    Sadeghian K,

3.    Holahan MR,

4.    Kelley AE

(2002a) Appetitivt instrumentlärande försämras genom inhibering av cAMP-beroende proteinkinas inom kärnans accumbens. Neurobiol Learn Mem 77: 44-62.

CrossRefMedline

3.   

1.    Baldwin AE,

2.    Sadeghian K,

3.    Kelley AE

(2002b) Appetitivt instrumentlärande kräver sammanträffande aktivering av NMDA och dopamin D1 receptorer inom medial prefrontal cortex. J Neurosci 22: 1063-1071.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

4.   

1.    Balleine B,

2.    Killcross S

(1994) Effekter av ibotinsyra lesioner av kärnan accumbens på instrumental action. Behav Brain Res 65: 181-193.

CrossRefMedline

5.   

1.    Berke JD,

2.    Hyman SE

(2000) Addiction, dopamin och de molekylära mekanismerna i minnet. Neuron 25: 515-532.

CrossRefMedline

6.   

1.    Berridge KC,

2.    Robinson TE

(2003) Parsing-belöning. Trender Neurosci 26: 507-513.

CrossRefMedline

7.   

1.    Bibb JA,

2.    Chen J,

3.    Taylor JR,

4.    Svenningsson P,

5.    Nishi A,

6.    Snyder GL,

7.    Yan Z,

8.    Sagawa ZK,

9.    Ouimet CC,

10. Nairn AC,

11. Nestler EJ,

12. Greengard P

(2001) Effekter av kronisk exponering för kokain regleras av neuronproteinet Cdk5. Natur 410: 376-380.

CrossRefMedline

8.   

1.    Brunzell DH,

2.    Chang JR,

3.    Schneider B,

4.    Olausson P,

5.    Taylor JR,

6.    Picciotto MR

(2006) beta2-subunitinnehållande nikotinacetylkolinreceptorer är involverade i nikotininducerad ökning i konditionerad förstärkning men inte progressivt förhållande som svarar på mat i C57BL / 6-möss. Psykofarmakologi (Berl) 184: 328-338.

CrossRefMedline

9.   

1.    Cagniard B,

2.    Balsam PD,

3.    Brunner D,

4.    Zhuang X

(2006) Möss med kroniskt förhöjd dopamin uppvisar ökad motivation, men inte lärande, för en matbelöning. Neuropsykofarmakologi 31: 1362-1370.

CrossRefMedline

10.

1.    Carlezon WA Jr.,

2.    Thome J,

3.    Olson VG,

4.    Lane-Ladd SB,

5.    Brodkin ES,

6.    Hiroi N,

7.    Duman RS,

8.    Neve RL,

9.    Nestler EJ

(1998) Reglering av cocaine belöning av CREB. Vetenskap 282: 2272-2275.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

11.

1.    Chen J,

2.    Kelz MB,

3.    Hoppas BT,

4.    Nakabeppu Y,

5.    Nestler EJ

(1997) Kroniska Fos-relaterade antigener: stabila varianter av FosB inducerad i hjärnan genom kroniska behandlingar. J Neurosci 17: 4933-4941.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

12.

1.    Chen J,

2.    Kelz MB,

3.    Zeng G,

4.    Sakai N,

5.    Steffen C,

6.    Shockett PE,

7.    Picciotto MR,

8.    Duman RS,

9.    Nestler EJ

Transgena djur med inducerande, riktade genuttryck i hjärnan. Mol Pharmacol 54: 495-503.

13.

1.    Colby CR,

2.    Whisler K,

3.    Steffen C,

4.    Nestler EJ,

5.    Själv DW

(2003) Striatal cellspecifik överuttryck av FosB ökar incitamentet för kokain. J Neurosci 23: 2488-2493.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

14.

1.    Corbit LH,

2.    Balleine BW

(2005) Dubbel dissociation av basolaterala och centrala amygdala lesioner på de allmänna och utfallsspecifika formerna för pavlovian-instrumentöverföring. J Neurosci 25: 962-970.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

15.

1.    Corbit LH,

2.    Muir JL,

3.    Balleine BW

(2001) Kärnans roll i instrumentell konditionering: Bevis på en funktionell dissociation mellan accumbens kärna och skal. J Neurosci 21: 3251-3260.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

16.

1.    Dalley JW,

2.    Chudasama Y,

3.    Theobald DE,

4.    Pettifer CL,

5.    Fletcher CM,

6.    Robbins TW

(2002) Nucleus accumbens dopamin och diskriminerad metodinlärning: interaktiva effekter av 6-hydroxydopaminsår och systemisk apomorfinadministration. Psykofarmakologi (Berl) 161: 425-433.

CrossRefMedline

17.

1.    de Borchgrave R,

2.    Rawlins JN,

3.    Dickinson A,

4.    Balleine BW

(2002) Effekter av cytotoxisk kärna accumbens lesioner om instrumental konditionering hos råttor. Exp Brain Res 144: 50-68.

CrossRefMedline

18.

1.    Di Ciano P,

2.    Everitt BJ

(2004a) Direkta interaktioner mellan basolateral amygdala och nucleus accumbens-kärnan ligger till grund för kokainsökande beteende hos råttor. J Neurosci 24: 7167-7173.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

19.

1.    Di Ciano P,

2.    Everitt BJ

(2004b) Konditionerade förstärkningsegenskaper hos stimuli i kombination med självadministrerad kokain, heroin eller sackaros: konsekvenser för persistens av beroendeframkallande beteende. Neurofarmakologi 47 ([Suppl 1]) 202-213.

20.

1.    Dickinson A

(1985) Åtgärder och vanor: utvecklingen av beteendeautonomi. Philos Trans R Lond B Biol Sci 308: 67-78.

CrossRef

21.

1.    Everitt BJ,

2.    Robbins TW

(2005) Neurala system för förstärkning för narkotikamissbruk: från handlingar till vanor till tvång. Nat Neurosci 8: 1481-1489.

CrossRefMedline

22.

1.    Faure A,

2.    Haberland U,

3.    Conde F,

4.    El Massioui N

(2005) Lesion till nigrostriatal dopaminsystemet stör primärbildning av stimulus-respons. J Neurosci 25: 2771-2780.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

23.

1.    Grimm JW,

2.    Lu L,

3.    Hayashi T,

4.    Hoppas BT,

5.    Su TP,

6.    Shaham Y

(2003) Tidsberoende ökning av hjärnavledda neurotrofiska proteinkoncentrationer inom mesolimbisk dopamin-systemet efter uttag från kokain: konsekvenser för inkubation av kokainbehov. J Neurosci 23: 742-747.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

24.

1.    Hall J,

2.    Parkinson JA,

3.    Connor TM,

4.    Dickinson A,

5.    Everitt BJ

(2001) Inblandning av den centrala kärnan i amygdala och kärnan accumbens kärna för att förmedla Pavlovian influenser på instrumentalt beteende. Eur J Neurosci 13: 1984-1992.

CrossRefMedline

25.

1.    Harmer CJ,

2.    Phillips GD

(1998) Förbättrad appetitiv konditionering efter upprepad förbehandling med d-amfetamin. Behav Pharmacol 9: 299-308.

Medline

26.

1.    Hernandez PJ,

2.    Sadeghian K,

3.    Kelley AE

(2002) Tidig konsolidering av instrumental learning kräver proteinsyntes i kärnan accumbens. Nat Neurosci 5: 1327-1331.

CrossRefMedline

27.

1.    Hommel JD,

2.    Sears RM,

3.    Georgescu D,

4.    Simmons DL,

5.    DiLeone RJ

(2003) Lokal genknockdown i hjärnan med användning av viralt medierad RNA-störning. Nat Med 9: 1539-1544.

CrossRefMedline

28.

1.    Horger BA,

2.    Shelton K,

3.    Schenk S

(1990) Preexposure sensibiliserar råttor till de givande effekterna av kokain. Pharmacol Biochem Behav 37: 707-711.

CrossRefMedline

29.

1.    Horger BA,

2.    Giles MK,

3.    Schenk S

(1992) Pexxponering för amfetamin och nikotin predisponerar råttor för att själv administrera en låg dos kokain. Psykofarmakologi (Berl) 107: 271-276.

CrossRefMedline

30.

1.    Horger BA,

2.    Iyasere CA,

3.    Berhow MT,

4.    Messer CJ,

5.    Nestler EJ,

6.    Taylor JR

(1999) Förbättring av lokomotorisk aktivitet och konditionerad belöning för kokain genom hjärnavledande neurotrofisk faktor. J Neurosci 19: 4110-4122.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

31.

1.    Ito R,

2.    Robbins TW,

3.    Everitt BJ

(2004) Differentiell kontroll över kokain-sökande beteende av kärnan accumbens kärna och skal. Nat Neurosci 7: 389-397.

CrossRefMedline

32.

1.    Jentsch JD,

2.    Taylor JR

(1999) Impulsivitet som orsakas av frontostriatal dysfunktion vid drogmissbruk: konsekvenser för kontroll av beteende genom belöningsrelaterade stimuli. Psykofarmakologi (Berl) 146: 373-390.

CrossRefMedline

33.

1.    Kelley AE

(2004) Ventral striatal kontroll av appetitiv motivation: roll i inaktivt beteende och belöningsrelaterat lärande. Neurosci Biobehav Rev 27: 765-776.

CrossRefMedline

34.

1.    Kelley AE,

2.    Berridge KC

(2002) Neurovetenskap av naturliga belöningar: relevans för beroendeframkallande läkemedel. J Neurosci 22: 3306-3311.

GRATIS fullständig text

35.

1.    Kelz MB,

2.    Chen J,

3.    Carlezon WA Jr.,

4.    Whisler K,

5.    Gilden L,

6.    Beckmann AM,

7.    Steffen C,

8.    Zhang YJ,

9.    Marotti L,

10. Själv DW,

11. Tkatch T,

12. Baranauskas G,

13. Surmeier DJ,

14. Neve RL,

15. Duman RS,

16. Picciotto MR,

17. Nestler EJ

(1999) Uttryck av transkriptionsfaktorn FosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Natur 401: 272-276.

CrossRefMedline

36.

1.    Konradi C,

2.    Cole RL,

3.    Heckers S,

4.    Hyman SE

(1994) Amphetamin reglerar genuttryck i råttstriatum via transkriptionsfaktor CREB. J Neurosci 14: 5623-5634.

Abstrakt

37.

1.    Lee KW,

2.    Kim Y,

3.    Kim A,

4.    Helmin K,

5.    Nairn AC,

6.    Greengard P

(2006) Kokaininducerad dendritisk ryggradssbildning i D1- och D2-dopaminreceptorinnehållande mellanspinniga neuroner i nukleinsymboler. Proc Natl Acad Sci USA 103: 3399-3404.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

38.

1.    Li Y,

2.    Kolb B,

3.    Robinson TE

(2003) Placeringen av persistenta amfetamininducerade förändringar i densiteten hos dendritiska ryggrad på medelstora snygga neuroner i nukleär accumbens och caudate-putamen. Neuropsykofarmakologi 28: 1082-1085.

Medline

39.

1.    Li Y,

2.    Acerbo MJ,

3.    Robinson TE

(2004) Induktionen av beteendssensibilisering är associerad med kokaininducerad strukturell plasticitet i kärnan (men inte skalet) av kärnans accumbens. Eur J Neurosci 20: 1647-1654.

CrossRefMedline

40.

1.    Lu L,

2.    Dempsey J,

3.    Liu SY,

4.    Bossert JM,

5.    Shaham Y

(2004) En enda infusion av hjärnavledad neurotrofisk faktor i det ventrala tegmentala området inducerar långvarig potentiering av kokain som söker efter återkallande. J Neurosci 24: 1604-1611.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

41.

1.    McClung CA,

2.    Nestler EJ

(2003) Reglering av genuttryck och kokainbelöning av CREB och ΔFosB. Nat Neurosci 6: 1208-1215.

CrossRefMedline

42.

1.    McClung CA,

2.    Ulery PG,

3.    Perrotti LI,

4.    Zachariou V,

5.    Berton O,

6.    Nestler EJ

(2004) ΔFosB: en molekylärbrytare för långsiktig anpassning i hjärnan. Brain Res Mol Brain Res 132: 146-154.

Medline

43.

1.    Miles FJ,

2.    Everitt BJ,

3.    Dalley JW,

4.    Dickinson A

(2004) Konditionerad aktivitet och instrumental förstärkning efter långvarig oral konsumtion av kokain av råttor. Behav Neurosci 118: 1331-1339.

CrossRefMedline

44.

1.    Nestler EJ

(2004) Molecular mechanisms of drug addiction. Neurofarmakologi 47 ([Suppl 1]) 24-32.

45.

1.    Nestler EJ,

2.    Barrot M,

3.    Själv DW

(2001) ΔFosB: en hållbar molekylomkopplare för beroende. Proc Natl Acad Sci USA 98: 11042-11046.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

46.

1.    Norrholm SD,

2.    Bibb JA,

3.    Nestler EJ,

4.    Ouimet CC,

5.    Taylor JR,

6.    Greengard P

(2003) Kokaininducerad proliferation av dendritiska ryggraden i nukleinsymboler är beroende av aktiviteten av cyklinberoende kinas-5. Neurovetenskap 116: 19-22.

CrossRefMedline

47.

1.    Nye HE,

2.    Hoppas BT,

3.    Kelz MB,

4.    Iadarola M,

5.    Nestler EJ

(1995) Farmakologiska studier av reglering av kronisk FOS-relaterad antigeninduktion av kokain i striatum och kärnan accumbens. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671-1680.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

48.

1.    Olausson P,

2.    Jentsch JD,

3.    Taylor JR

(2003) Repeterad nikotinexponering ökar belöningsrelaterad inlärning i råtta. Neuropsykofarmakologi 28: 1264-1271.

CrossRefMedline

49.

1.    Olausson P,

2.    Jentsch JD,

3.    Taylor JR

(2004) Repeterad nikotinexponering ökar responsen med konditionerad förstärkning. Psykofarmakologi (Berl) 173: 98-104.

CrossRefMedline

50.

1.    Parkinson JA,

2.    Olmstead MC,

3.    Burns LH,

4.    Robbins TW,

5.    Everitt BJ

(1999) Dissociation i effekter av lesioner av kärnan accumbens kärna och skal på aptitligt pavlovian approach beteende och förstärkning av konditionerad förstärkning och lokomotorisk aktivitet med d-amfetamin. J Neurosci 19: 2401-2411.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

51.

1.    Parkinson JA,

2.    Dalley JW,

3.    Kardinal RN,

4.    Bamford A,

5.    Fehnert B,

6.    Lachenal G,

7.    Rudarakanchana N,

8.    Halkerston KM,

9.    Robbins TW,

10. Everitt BJ

(2002) Nukleosaccumbens dopaminutarmning försämrar både förvärv och prestanda av appetitivt Pavlovian-beteendebeteende: konsekvenser för mesoaccumbens dopaminfunktion. Behav Brain Res 137: 149-163.

CrossRefMedline

52.

1.    Paxinos G,

2.    Watson C

(1986) Råtthjärnan i stereotaxiska koordinater (Academic, Sydney).

53.

1.    Perrotti LI,

2.    Hadeishi Y,

3.    Ulery PG,

4.    Barrot M,

5.    Monteggia L,

6.    Duman RS,

7.    Nestler EJ

(2004) Induktion av ΔFosB i belöningsrelaterade hjärnstrukturer efter kronisk stress. J Neurosci 24: 10594-10602.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

54.

1.    Piazza PV,

2.    Deminiere JM,

3.    le Moal M,

4.    Simon H

(1990) Stress- och farmakologiskt inducerad beteendssensibilisering ökar sårbarheten för förvärv av amfetamin självadministration. Brain Res 514: 22-26.

CrossRefMedline

55.

1.    Pich EM,

2.    Pagliusi SR,

3.    Tessari M,

4.    Talabot-Ayer D,

5.    Hooft van Huijsduijnen R,

6.    Chiamulera C

(1997) Vanliga neurala substrat för de beroendeframkallande egenskaperna hos nikotin och kokain. Vetenskap 275: 83-86.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

56.

1.    Robbins TW,

2.    Everitt BJ

(1999) Narkotikamissbruk: dåliga vanor lägger till. Natur 398: 567-570.

CrossRefMedline

57.

1.    Robinson TE,

2.    Berridge KC

(1993) Den neurala grunden för läkemedelsbehov: En incitament-sensibiliseringsteori av beroende. Brain Res Brain Res Rev 18: 247-291.

CrossRefMedline

58.

1.    Robinson TE,

2.    Kolb B

(1999) Förändringar i morfologin för dendrit och dendritiska ryggrad i nukleär accumbens och prefrontal cortex efter upprepad behandling med amfetamin eller kokain. Eur J Neurosci 11: 1598-1604.

CrossRefMedline

59.

1.    Robinson TE,

2.    Gorny G,

3.    Mitton E,

4.    Kolb B

(2001) Kokain självadministration förändrar morfologin hos dendrit och dendritiska ryggrad i nukleär accumbens och neocortex. Synapse 39: 257-266.

CrossRefMedline

60.

1.    Sesack SR,

2.    Pickel VM

(1990) I ryggmedialkärnans accumbens, konvergerar hippocampala och katekolaminerga terminaler på spiny neuroner och står i överensstämmelse med varandra. Brain Res 527: 266-279.

CrossRefMedline

61.

1.    Shaw-Lutchman TZ,

2.    Impey S,

3.    Storm D,

4.    Nestler EJ

(2003) Reglering av CRE-medierad transkription i mushjärna av amfetamin. Synapse 48: 10-17.

CrossRefMedline

62.

1.    Smith AD,

2.    Bolam JP

(1990) Den neurala nätverket av de basala ganglierna som avslöjades genom studien av synaptiska anslutningar av identifierade neuroner. Trender Neurosci 13: 259-265.

CrossRefMedline

63.

1.    Smith-Roe SL,

2.    Kelley AE

(2000) Sammanträffande aktivering av NMDA och dopamin D1 receptorer inom kärnan accumbens kärna krävs för appetitivt instrumentlärande. J Neurosci 20: 7737-7742.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

64.

1.    Taylor JR,

2.    Horger BA

(1999) Förbättrad respons för konditionerad belöning producerad av intra-accumbens amfetamin förstärks efter kokain sensibilisering. Psykofarmakologi (Berl) 142: 31-40.

CrossRefMedline

65.

1.    Taylor JR,

2.    Jentsch JD

(2001) Upprepad intermittent administrering av psykomotoriska stimulerande läkemedel förändrar förvärv av pavlovian-beteendebeteende hos råttor: Differentiella effekter av kokain, d-amfetamin och 3,4-metylendioximetamfetamin ("Ecstasy") Biolpsykiatri 50: 137-143.

CrossRefMedline

66.

1.    Vezina P,

2.    Lorrain DS,

3.    Arnold GM,

4.    Austin JD,

5.    Suto N

(2002) Sensibilisering av dopamin-neuronreaktivitet i midbråden främjar strävan efter amfetamin. J Neurosci 22: 4654-4662.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

67.

1.    Werme M,

2.    Messer C,

3.    Olson L,

4.    Gilden L,

5.    Thoren P,

6.    Nestler EJ,

7.    Brene S

(2002) ΔFosB reglerar hjullöpning. J Neurosci 22: 8133-8138.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

68.

1.    Wyvell CL,

2.    Berridge KC

(2001) Incentiv sensibilisering vid tidigare amfetamin exponering: ökad cue-triggered "vill" för sackaros belöning. J Neurosci 21: 7831-7840.

Sammanfattning / GRATIS Fullständig text

69.

1.    Yin HH,

2.    Knowlton BJ,

3.    Balleine BW

(2004) Lesioner av dorsolateral striatum bevarar utfallet förväntan men stör vanaformation i instrumentlärande. Eur J Neurosci 19: 181-189.

CrossRefMedline

70.

1.    Zachariou V,

2.    Bolanos CA,

3.    Selley DE,

4.    Theobald D,

5.    Cassidy MP,

6.    Kelz MB,

7.    Shaw-Lutchman T,

8.    Berton O,

9.    Sim-Selley LJ,

10. Dileone RJ,

11. Kumar A,

12. Nestler EJ

(2006) En väsentlig roll för ΔFosB i kärnans accumbens i morfinåtgärd. Nat Neurosci 9: 205-211.

CrossRefMedline