DeltaFosB medierar epigenetisk desensibilisering av c-fos-genen efter kronisk exponering av amfetamin (2008)

Abstrakt

De molekylära mekanismer som ligger bakom övergången från rekreationsdroganvändning till kronisk missbruk är fortfarande dåligt förstådda. En molekyl som är inblandad i denna process är ΔFosB, en transkriptionsfaktor som ackumuleras i striatum efter upprepad läkemedelsexponering och medierar sensibiliserat beteendemässigt svar på psykostimulanter och andra missbruksmissbruk. De nedströms transkriptionsmekanismerna genom vilka ΔFosB reglerar läkemedelsinducerad beteende förstås ofullständigt. Vi har tidigare rapporterat om kromatinomvandlingsmekanismerna genom vilka AFosB aktiverar uttrycket av vissa gener, men mekanismerna som ligger bakom AFosB-medierad genrepression förblir okända. Här identifierar vi c-fos, en omedelbar tidig gen inducerades snabbt i striatum efter psykostimulantsexponering, som ett nytt nedströms mål som är undertryckt av ΔFosB. Vi visar att ackumulering av ΔFosB i striatum efter kronisk amfetaminbehandling desensibiliserar c-fos mRNA-induktion till en efterföljande drogdos. ΔFosB desensibiliserar c-fos uttryck genom att rekrytera histon-deacetylas 1 (HDAC1) till c-fos genpromotorn, som i sin tur deacetylerar omgivande histoner och dämpar genaktivitet. Följaktligen avskaffar lokal knockout av HDAC1 i striatum amfetamininducerad desensibilisering av c-fos gen. Sammanfattningsvis ökar kroniskt amfetamin histon H3-metylering på c-fos promotor, en kromatinmodifikation som också är känd för att undertrycka genaktivitet, såväl som expressionsnivåer av H3-histonmetyltransferas, KMT1A / SUV39H1. Denna studie avslöjar en ny epigenetisk vägen genom vilken ΔFosB medierar distinkta transkriptionsprogram och slutligen beteendetsplasticitet för kronisk amfetaminexponering.

Nyckelord: beroende, amfetamin, striatum, kromatin, histon-modifiering, genreglering

Beskrivning

Upprepad användning av psykostimulerande medel som amfetamin och kokain resulterar ofta i en övergång från rekreationsdroganvändning till ett kroniskt beroende tillstånd (). En mekanism som är inblandad i denna process involverar transkriptionsfaktorn AFosB, en höggradigt stabil splitsprodukt av den omedelbara tidiga genen FosB, som dimeriserar med Jun-familjeproteiner för att bilda funktionella AP-1 transkriptionskomplex (). ΔFosB ackumuleras flera gånger i striatum efter upprepad exponering för missbruk, och denna ackumulering har kopplats till ökad kokainbelöning, lokomotorisk sensibilisering och självadministrering (; ; ), vilka tillsammans föreslår en roll i de neurala mekanismerna som är inblandade i övergången mellan rekreations- och beroendemissbruk. Enligt denna hypotes fungerar ΔFosB i en positiv återkopplingsslinga genom att öka läkemedelssökande beteenden, vilket i sin tur leder till att ΔFosB. En viktig utestående fråga är hur ΔFosB medierar effekterna på narkotikarelaterade beteenden. Genomgående mikroarraystudier hos möss som överuttryckte ΔFosB i striatum gav den första insikten om potentiella nedströmsmål (). Denna studie föreslog att ΔFosB kan fungera som en transkriptionsaktivator eller repressor, beroende på målgenen. Studien undersökte transkript som reglerades i en överuttrycksinställning, så det är inte klart vilka av dessa gener är direkta fysiologiska ΔFosB mål.

Vi identifierade nyligen det cyklinberoende kinaset 5 (cdk5) genen som ett direkt mål för endogent ΔFosB, vilket främjar Cdk5 transkription i striatum (). Emellertid har mekanismerna, som är involverade i ΔFosBs repression av målgener, förblivit oförmåga. En attraktiv kandidat är c-fos, en gen som induceras dramatiskt av akuta psykostimulanter men endast svagt efter upprepad exponering (; ; ), när nivåerna av APFX och XFOSB-innehållande AP-1-komplex är höga (, ). Sedan c-fos genen innehåller en AP-1-liknande plats i sin proximala promotor (), det är en trovärdig kandidat för ΔFosB-medierad repression. Induktion av c-fos betraktas traditionellt som en tidig markör för neuralt aktivering, eftersom det snabbt och transient induceras som svar på en mängd stimuli (). Den c-fos gen är också viktig för beteendemässiga reaktioner mot kokain, eftersom mus saknar c-fos I dopamin D1-receptorinnehållande neuroner induceras den neuronala celltypen där ΔFosB av psykostimulanter (), har minskad beteendssensibilisering mot kokain (). Dessa resultat ledde oss att undersöka om ΔFosB kontrollerar c-fos genaktivitet efter kronisk exponering för amfetamin. Vi beskriver här en ny epigenetisk mekanism genom vilken ΔFosB ackumulering som svar på kronisk amfetamin matar tillbaka till desensibilisera c-fos induktion till efterföljande drogdoser. Detta nya samspel mellan ΔFosB och chromatin remodeling händelser på c-fos promotorn kan vara en viktig homeostatisk mekanism för att reglera ett djurs känslighet för upprepad läkemedelsexponering.

Material och metoder

RNA-isolering och kvantifiering

Fryst hjärnvävnad tinas i TriZol (Invitrogen, Carlsbad, CA) och behandlas enligt tillverkarens protokoll. RNA renades med RNAesy Micro-kolonner (Qiagen, Valencia, CA). Total RNA omvänt transkriberades med användning av Superscript III (Invitrogen). Realtids-PCR kördes sedan med användning av SYBR Green (ABI, Foster City, CA) och kvantifierades med användning av AΔCt-metoden. Se Kompletterande tabell för en komplett lista över primers.

Kromatinimmunutfällning (ChIP)

Kromatin sonikerades och immunoprecipiterade sedan (se Kompletterande metoder) med användning av acetylerade histonantikroppar (Millipore, Billerica, MA), anti-HDAC1 eller anti-H3K9me2 från Abcam (Cambridge, UK), anti-FosB (C-terminus)), anti-FosB (N-terminus) (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, State) eller en kanin-IgG-kontroll (Millipore). IP-värdet uppsamlades med användning av Protein A-pärlor från Millipore. Efter tvättning eluerades kromatin från pärlorna och omvänt tvärbunden i närvaro av proteinas K. DNA renades sedan och kvantifierades med realtids-PCR.

immunoprecipitation

PC12-celler transfekterades med V5-märkt HDAC1 (), FosB eller AFosB som beskrivits tidigare (). Celllysater delades och inkuberades med antingen icke-immuna IgG (Sigma) eller anti-FosB antikroppar (sc-48, Santa Cruz) över natten vid 4 ° C. Immunfällning utfördes med Protein G-pärlor (Sigma). De immunprecipiterade proteinerna kördes med SDS-PAGE och analyserades genom Western blotting med användning av en anpassad polyklonal anti-FosB (N-terminus) antikropp () och anti-V5-antikropp (Abcam). För att bestämma om HDAC1 och ΔFosB är bindande partners in vivo-, vi använde upprepade elektrokonvulsiva anfall för att framkalla höga nivåer av ΔFosB-protein (). Kortikalvävnad dissekerades från kroniska (7 dagliga) anfall eller skambehandlade råttor, lyserades och immunprecipiterades såsom beskrivits ovan med anti-HDAC1-antikroppar (Abcam).

Laserinspelning mikrodissektion

Genom användning av stereotaktisk kirurgi infekterades den ventrala striaten hos möss med ett adenoassocierat virus (AAV) som uttrycker den angivna genen eller GFP på motsatta sidor av hjärnan. Efter amfetaminbehandling bearbetades frusna hjärnor till 8 μm tjocka koronalsektioner och monterades på membranglas (Lieca, Wetzlar, Tyskland). AAV-infekterade regioner laserdissekterades (Leica) för att utesluta icke-infekterade celler och bearbetades med PicoPure RNA-extraktionssats (MDS, Sunnyvale, CA). RNA amplifierades med RiboAmp HS-kit (MDS) och omvänt transkriberades såsom beskrivits ovan. Se Kompletterande metoder för fullständig information.

Resultat

ΔFosB desensibiliserar c-fos mRNA-induktion i striatum efter kronisk exponering av amfetamin

Att undersöka om desensibilisering av c-fos mRNA-uttryck är en cellulär anpassning kontrollerad av ΔFosB, vi behandlade råttor med saltlösning eller akut eller kroniskt amfetamin och låt dem dra sig tillbaka i deras hemmabur för 1 till 10 dagar. Råttorna analyserades sedan 1 h efter en utlösningsdos av saltlösning eller amfetamin. Som visat tidigare (se Beskrivning), c-fos mRNA inducerades 4-vik i striatum genom akut amfetaminadministration. Hos råttor som tidigare utsatts för kroniskt amfetamin är emellertid uttrycket av c-fos som svar på läkemedelsutmaningen försämrades avsevärt för upp till 5-dagar med drogavdrag (Figur 1A), en punkt vid vilken ΔFosB förblir förhöjd i denna hjärnregion (). Vidare fann vi att hos råttor som drogs från kronisk amfetamin för 5-dagar, fann vi att det var basalt c-fos mRNA-uttrycket reducerades under nivåer som fanns i saltlösningsbehandlade kontroller (Figur 1A). Viktigt är storleken på c-fos induktion till en amfetaminutmaning dämpades avsevärt vid dag 1 av uttag jämfört med saltlösningsbehandlade djur. Tillsammans visar dessa fynd en effekt av kroniskt amfetamin på både basal och inducerad c-fos mRNA-nivåer, även om de två effekterna uppträder med en komplex tidskurs.

Figur 1  

ΔFosB desensibiliserar c-fos mRNA-induktion i striatum efter kronisk exponering av amfetamin

För att bestämma om ΔFosB ackumulering efter kronisk amfetamin direkt bidrar till desensibilisering av c-fos uttryck, vi utförde först ChIP för ΔFosB på c-fos genpromotorn i striatum. Som visas i Figur 1B, den c-fos promotorn har signifikant mer ΔFosB bunden efter kronisk exponering för amfetamin, en effekt som ses i minst 5-dagar med drogavdrag. Dessa data korrelerar ΔFosB beläggning på c-fos promotor med reducerad kinetik c-fos genaktivitet. Därefter, för att direkt testa om ΔFosB orsakar minskat c-fos induktion som svar på amfetaminutmaning, använde vi en AAV-vektor för att överuttrycka antingen ΔFosB eller GFP som en kontroll i striatum. Vi isolerade sedan den infekterade striatumen genom lasermikrodissektion (Figur 1C) och utförde qRT-PCR för c-fos mRNA. Vi observerade betydligt mindre c-fos mRNA inducerad efter en akut dos av amfetamin i striatalvävnaden infekterad med AAV-ΔFosB jämfört med den kontralaterala sidan infekterad med AAV-GFP, medan nivåer av β-tubulin mRNA förblir oförändrad (Figur 1D). Dessa data tyder på att c-fos desensibilisering medieras genom ackumulering av ΔFosB på dess promotor efter kronisk exponering för amfetamin.

ΔFosB rekryterar HDAC1 till c-fos promotorn att förmedla c-fos genrepression

Att utforska mekanismerna med vilka ΔFosB medierar c-fos desensibilisering, fokuserade vi på tidpunkten vid vilken c-fos var mest signifikant undertryckt: 5-dagar av uttag från kronisk amfetamin. En nyckelmekanism involverad i c-fos aktivering som svar på en mängd olika stimuli, inklusive kokain () är histonacetylering. Vi var därför intresserade av att bestämma om histonacetylering på c-fos genpromotorn inducerades också av akut amfetamin och huruvida upprepad läkemedelsexponering dämpade detta svar. Faktiskt ökade akut amfetamin histon H4 acetylering på c-fos promotorn och efter kronisk amfetaminbehandling observerades denna induktion inte längre (Figur 2A). Acetylering av H4 var specifik, eftersom ingen effekt observerades för H3 (ej visad). Dessa data antyder att minskad histonacetylering, associerad med en mer kompakt och inaktiv kromatinstruktur (), bidrar till desensibilisering av c-fos gen efter kronisk exponering för amfetamin. För att direkt testa den här hypotesen behandlade vi råttor med kroniskt amfetamin och efter 5-dagars tillbakadragande administrerade HDAC-hämmaren, natriumbutyrat eller dess vehikel. Vi fann att natriumbutyrat omvänt den amfetamininducerade repressionen av c-fos uttryck (Figur 2B), som direkt stöder tanken att hypoacetylering på c-fos promotorn är en nyckelmekanism som ligger till grund för desensibilisering av genen.

Figur 2  

Rekrytering av HDAC1 medierar ΔFosB-verkan på c-fos

För att förstå hur ΔFosB hämmar histonacetylering på c-fos promotor undersökte vi om ΔFosB interagerar med enzymer som reducerar histonacetylering, nämligen HDAC. Vi undersökte först HDAC1 och HDAC2 eftersom dessa enzymer bildar komplex med en mängd olika transkriptionsfaktorer för att undertrycka genuttryck (). Sedan preliminära ChIP-studier identifierade betydande HDAC1-bindning på c-fos promotorn (se nedan), men ingen detekterbar HDAC2 (ej visad), utförde vi samimmunutfällningsexperiment för att bestämma huruvida AFFosB fysiskt interagerar med HDAC1. Faktum är att vi fann att immunutfällning av ΔFosB också drog ner HDAC1 i PC12-celler (Figur 2D). Viktigt är att denna interaktion är specifik för ΔFosB, som FosB i full längd, som inte ackumuleras efter kronisk psykostimulant administrering (), interagerade inte med HDAC1. Vi utförde det omvända experimentet in vivo- genom att inducera stora mängder avFosB med elektrokonvulsiva anfall. I överensstämmelse med våra cellodlingsdata drog immunutfällning med en antikropp mot HDAC1 ned ΔFosB från hjärnvävnad (Figur 2E).

Baserat på dessa fynd att ΔFosB och HDAC1 interagerar fysiskt vitro och in vivo-, vi antog att efter kronisk amphetamin rekryterar ΔFosB HDAC1 till c-fos genpromotor. Faktiskt fann ChIP av striatallysater signifikant högre nivåer av HDAC1 på c-fos promotor efter kronisk amphetaminexponering (Figur 2C), medan amfetamin inte förändrade HDAC1-bindning till β-aktin genpromotor. För att direkt bestämma huruvida HDAC1 var tillräcklig för att dämpas c-fos induktion, transfekterade vi HEK293T-celler med HDAC1 eller GFP och stimulerade dem med 5% serum (se Kompletterande metoder). Vi fann att seruminducerad c-fos uttryck var signifikant avstupat i celler som överuttryckte HDAC1 (Figur 2F). Dessa studier förlängdes in vivo- genom att använda floxade HDAC1-möss infekterade med AAV-GFP på ena sidan av deras striatum och AAV-CreGFP för att inducera lokal knockout av hdac1 gen i den kontralaterala striatumen. AAV-CreGFP reducerades Hdac1 mRNA-uttryck i den infekterade vävnaden (isolerad med laser-mikrodissektion) med> 75% jämfört med AAV-GFP-injicerade kontroller medan Hdac2 uttryck var oförändrat (Figur 2G). Möss behandlades sedan med kronisk amfetamin följt av läkemedelsuttag för 5-dagar. Mössen analyserades 30 minuter efter amfetaminutmaning och de infekterade striatala regionerna mikrotissades. Vi fann att amfetamin inducerade betydligt mer c-fos mRNA i striatal vävnad infekterad med AAV-CreGFP jämfört med AAV-GFP (Figur 2G), vilket visar att HDAC1 är nödvändigt för kronisk amfetamininducerad repression av c-fos uttryck. Dessa data tyder på att ΔFosB-ackumulation hos råttor efter kronisk amfetaminbehandling resulterar i mer ΔFosB-bindning till c-fos promotor, rekrytering av HDAC1, mindre histonacetylering och slutligen mindre aktivitet hos genen.

Histonmetylering är förhöjd på c-fos promotor efter kronisk exponering för amfetamin

Repression av genaktivitet involverar ofta flera epigenetiska modifieringar som uppträder parallellt (; ). En av de bäst karakteriserade histonmodifieringarna associerade med reducerad genaktivitet är metylering av histon H3 vid lysin 9 (H3K9). Denna histon-modifiering, när den finns på promotorområden, är associerad med transkriptionell repression genom rekrytering av co-repressorer såsom HP1 (heterochromatinprotein 1) (). Vi analyserade därför om hypoacetylering av c-fos genen, sedd efter kronisk amphetaminadministration, är också associerad med förändringar i H3K9-metylering. I överensstämmelse med denna hypotes utfördes ChIP på striatal vävnad från råttor behandlade med kroniskt amfetamin, vilket avslöjade att den metylerade H3K9 (H3K9me2) ökade signifikant på c-fos promotor (Figur 3A), en effekt som inte observerats på β-aktin genpromotor. En av de viktigaste enzymerna som medierar H3K9-metylering är KMT1A / SUV39H1, vilket väckte frågan om huruvida uttrycket av detta enzym reglerades genom kronisk exponering av amfetamin. Vi utförde qRT-PCR på striatum av råttor behandlade med kroniskt amfetamin och observerade en signifikant uppreglering av Kmt1a / Suv39h1 mRNA, medan det distinkta kromatinmodifierande enzymet, Hdac5, förblev opåverkad (Figur 3B). Till skillnad från HDAC1 avslöjade inte samimmunutfällningsexperiment någon detekterbar interaktion mellan ΔFosB och KMT1A / SUV39H1, och vi kunde inte identifiera signifikant anrikning av metyltransferaset på c-fos promotor av ChIP (ej visad). Oavsett, dessa resultat tyder på att uppreglering av KMT1A / SUV39H1 kan hypermetylat H3 vid c-fos och bidra till att mekanismerna minskar c-fos genaktivitet efter kronisk exponering för amfetamin.

Figur 3  

Histon-metylering efter kronisk exponering av amfetamin

Diskussion

Denna studie identifierades c-fos som en ny nedströms målgen för FFosB i striatum efter kronisk amfetaminadministration. Vi ger direkta bevis för att endogen ΔFosB binds till c-fos promotor in vivo-, där ΔFosB rekryterar HDAC1 för att deacetylera omgivande histoner och reducera transkriptionsaktiviteten hos c-fos gen. Både farmakologisk inhibition av HDAC och den inducerbara knockouten av HDAC1 var tillräckliga för att lindra c-fos desensibilisering och höjning c-fos uttryck i striatum hos kroniska amfetaminbehandlade djur. Vi fann också samtidiga ökningar av repressiv histonmetylering vid H3K9 på c-fos promotor, en anpassning associerad med amfetamininducerad uppreglering av histonmetyltransferaset, KMT1A / SUV39H1. Tillsammans ger dessa resultat fundamentalt nytt inblick i de mekanismer genom vilka ΔFosB undertrycker aktiviteten hos vissa gener och illustrerar ett nytt samspel mellan två nyckelvägar som styr beteendemässiga svar på psykostimulanter: ΔFosB induktion () och kromatinomvandling (). Våra resultat visar hur dessa två vägar sammanfaller på c-fos promotor efter kronisk amphetaminexponering för förändrad aktivitet hos genen.

Vi observerade först desensibilisering av c-fos mRNA-uttryck efter kronisk kokainbehandling över 15 år sedan (), men ingen mekanistisk inblick har varit tillgänglig för hur sådana djupt olika transkriptionella reaktioner kan uppstå mellan akut kontra kronisk drogexponering. I vår strävan att förstå nedströms handlingar av ΔFosB återvände vi kontrollen över c-fos uttryck på grund av denna differentialreglering mellan exponering för akut och kronisk psykostimulering. Eftersom ΔFosB höjs flera gånger efter kronisk drogexponering, är denna differentialinduktion av c-fos mRNA, liksom en AP-1-liknande webbplats i c-fos proximal promotor, föreslog en potentiell regulatorisk roll för ΔFosB. Detta gjorde också c-fos genen en attraktiv kandidat för att studera de repressiva effekterna av ΔFosB på genuttryck ().

Kroniskt amfetamin dämpat c-fos mRNA-induktion eller dess baslinjenivåer i striatum i ungefär 5-dagar med drogavdrag, en tidskurs som överensstämmer med stabiliteten avFosB () och dess beläggning på c-fos promotor. Även om ΔFosB kan detekteras efter ännu längre perioder av uttag, minskar det gradvis över tiden (; ) och kan vara otillräckligt för att upprätthålla undertryckningen av c-fos gen långt bortom 5-dagpunkten. Ändå tidskursen av c-fos desensibilisering är komplex, med undertryckande av dess vik-induktion med en amfetaminutmaning maximal vid 1-dagen för uttag, men undertryckande av dess basala nivåer maximalt vid 5-dagars uttag. Våra ChIP-data visar att ΔFosB är bunden till c-fos promotor vid båda tidpunkterna, vilket tyder på att differentieringsaktiviteten hos c-fos gen observerad mellan 1- och 5-dagars uttag kan bero på ytterligare transkriptionsregulatorer som rekryteras till genen med en mycket komplicerad tidskurs. Ytterligare studier behövs för att förstå de detaljerade mekanismer som är inblandade.

Den beteendemässiga betydelsen av ΔFosB-medierad c-fos desensibilisering kan vara homeostatisk, som möss som saknar c-fos gen i dopamin D1-receptorinnehållande neuroner visar reducerade beteendehanteringar mot kokain (). Vidare blockerar HDAC-hämmare, som blockerar ΔFosB-medierad desensibilisering av c-fos, öka ett djurs känslighet mot kokainens beteendeeffekter (; ). Dessa fynd tyder på att medan ΔFosBs nettoeffekt är att främja sensibiliserad beteendemässig respons på psykostimulanter (; ), det initierar också ett nytt transkriptionsprogram genom c-fos desensibilisering för att begränsa storleken på dessa samma beteenden. ΔFosB skulle i själva verket titrera beteendemässiga svar på psykostimulanter genom en komplex serie av nedströms transkriptionshändelser, vilket involverar induktion eller repression av många målgener (), som förutom genen som kodar för c-Fos, såsom visas här, även innefattar AMPA glutamatreceptor-subenheten GluR2 (), serin-treoninkinaset Cdk5 () och opioidpeptid-dynorfinen (), bland andra (). Några av dessa gener aktiveras av ΔFosB (där ΔFosB rekryterar transkriptionella samaktivatorer) (), medan andra är undertryckta av ΔFosB (där ΔFosB rekryterar transkriptionella co-repressorer, såsom visas här). En stor insats för framtida forskning är att identifiera faktorer som avgör om ΔFosB aktiverar eller represserar en målgen när den binder till genpromotorn.

Sammantaget identifierar våra fynd en ny epigenetisk mekanism genom vilken ΔFosB medierar del av dess transkriptionseffekter i striatum efter kronisk amfetaminexponering. Denna studie ger också en viktig ny inblick i de grundläggande transkriptionella och epigenetiska mekanismerna in vivo- involverad i desensibilisering (dvs tolerans) av en avgörande gen för psykostimulantinducerade beteendesvar.

 

Extramaterial

Tack

Detta arbete stöddes av bidrag från NIDA

referenser

  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effekter av kronisk exponering för kokain regleras av neuronproteinet Cdk5. Natur. 2001; 410: 376-380. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomberoende och oberoende mekanismer för FosB-destabilisering: identifiering av FosB degron-domäner och konsekvenser för DeltaFosB-stabilitet. Eur J Neurosci. 2007; 25: 3009-3019. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celltypsspecifik överuttryck av DeltaFosB ökar incitamentet för kokain. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  • Grozinger CM, Schreiber SL. Deacetylas enzymer: biologiska funktioner och användning av små molekylhämmare. Chem Biol. 2002; 9: 3-16. [PubMed]
  • Hopp B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Reglering av omedelbart tidigt genuttryck och AP-1-bindning i råttkärnan accumbens av kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci USA A. 1992; 89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hoppas BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induktion av ett långvarigt AP-1-komplex bestående av förändrade Fos-liknande proteiner i hjärnan av kronisk kokain och andra kroniska behandlingar. Nervcell. 1994; 13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. Neurala mekanismer för missbruk: rollen som belöningsrelaterad inlärning och minne. Annu Rev Neurosci. 2006; 29: 565-598. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Själv DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Uttryck av transkriptionsfaktorn deltaFosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Natur. 1999; 401: 272-276. [PubMed]
  • Kouzarides T. Chromatin modifieringar och deras funktion. Cell. 2007; 128: 693-705. [PubMed]
  • Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatin remodeling är en nyckelmekanism som ligger bakom kokaininducerad plasticitet i striatum. Nervcell. 2005; 48: 303-314. [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Reglering av genuttryck och kokainbelöning av CREB och DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylär växel för långsiktig anpassning i hjärnan. Brain Res Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154. [PubMed]
  • Montgomery RL, Davis CA, Potthoff MJ, Haberland M, Fielitz J, Qi X, Hill JA, Richardson JA, Olson EN. Histon-deacetylaser 1 och 2 reglerar redundant hjärtmorfogenes, tillväxt och kontraktilitet. Gener Dev. 2007; 21: 1790-1802. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkriptionskoppling i neuroner: roll av cellulära omedelbara tidiga gener. Trender Neurosci. 1989; 12: 459-462. [PubMed]
  • Nye HE, Hopp BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiska studier av reglering av kronisk FOS-relaterad antigeninduktion av kokain i striatum och kärnan accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275: 1671-1680. [PubMed]
  • Persico AM, Schindler CW, O'Hara BF, Brannock MT, Uhl GR. Hjärntranskriptionsfaktoruttryck: effekter av akut och kronisk amfetamin och injektionsstress. Brain Res Mol Brain Res. 1993; 20: 91–100. [PubMed]
  • Renthal W, Maze I, Krishnan V, Covington HE, 3rd, Xiao G, Kumar A, Russo SJ, Graham A, Tsankova N, Kippin TE, Kerstetter KA, Neve RL, Haggarty SJ, McKinsey TA, Bassel-Duby R, Olson EN, Nestler EJ. Histondeacetylas 5 kontrollerar epigenetiskt beteendemässiga anpassningar till kroniska känslomässiga stimuli. Nervcell. 2007; 56: 517-529. [PubMed]
  • Steiner H, Gerfen CR. Kokaininducerat c-fos messenger-RNA är omvänt relaterat till dynorfinuttryck i striatum. J Neurosci. 1993; 13: 5066-5081. [PubMed]
  • Tsankova N, Renthal W, Kumar A, Nestler EJ. Epigenetisk reglering vid psykiatriska störningar. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 355-367. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En viktig roll för DeltaFosB i kärnan accumbens i morfin åtgärder. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos underlättar förvärv och utrotning av kokaininducerad ihållande förändringar. J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296. [PubMed]