KOMMENTARER: Även om både stress, missbruksmissbruk och vissa naturliga belöningar leder till en ackumulering av DeltaFosB, aktiverar stress olika nedströms celler och senare olika receptorer och gener. Med andra ord är beroende och motståndskraft mot stress beroende av fundamentalt olika mekanismer
J Neurosci. 2010 Oct 27; 30 (43): 14585-92.
Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Nestler EJ.
Källa
Fishberg avdelningen för neurovetenskap, Mount Sinai School of Medicine, New York, New York, 10029, USA.
Abstrakt
De molekylära mekanismerna bakom stress- och läkemedelsinducerade neuronala anpassningar är ofullständigt förstådda. En molekyl som är inblandad i sådana anpassningar är ΔFosB, en transkriptionsfaktor som ackumuleras i gnagarens nucleus accumbens (NAc), en viktig hjärnbelöningsregion, som svar på antingen kronisk stress eller upprepad exponering för missbruksdroger. De uppströms transkriptionsmekanismer som kontrollerar ΔFosB-induktion genom dessa miljöstimuli förblir svårfångade. Här identifierar vi den aktivitetsberoende transkriptionsfaktorn, serumresponsfaktor (SRF), som en ny uppströms mediator av stress-, men inte kokain- , inducerad ΔFosB. SRF är nedreglerad i NAc hos både deprimerade mänskliga patienter och hos möss som kroniskt exponeras för social nederlagsstress. Denna nedreglering av SRF saknas hos resilienta djur. Genom användning av inducerbar mutagenes visar vi att stressmedierad induktion av ΔFosB, som huvudsakligen sker hos resilienta möss, är beroende av SRF-uttryck i denna hjärnregion . Dessutom främjar NAc-specifik genetisk deletion av SRF en mängd olika prodepressiva och ångestframkallande fenotyper och gör djur mer känsliga för de skadliga effekterna av kronisk stress. Däremot visar vi att SRF inte spelar någon roll i ΔFosB-ackumulering i NAc som svar på kronisk kokainexponering. Dessutom har NAc-specifik knockout av SRF ingen effekt på kokaininducerade beteenden, vilket indikerar att kronisk social nederlagsstress och upprepad kokainexponering reglerar ΔFosB-ackumulering och beteendekänslighet genom oberoende mekanismer.
Beskrivning
Nucleus accumbens (NAc), en viktig belöningsregion i hjärnan, är viktig för att integrera sensoriska och kognitiva input som driver motivationsrelevanta beteenden som svar på miljöstimuli (Nestler och Carlezon, 2006; Sesack och Grace, 2010). NAc har också implicerats i beteendeavvikelser i samband med drogberoende och depression. Följaktligen har det visat sig att djup hjärnstimulering av NAc lindrar depressions- och beroendeliknande beteenden hos både människor och gnagare (Schlaepfer et al., 2008; Vassoler et al., 2008; Heinze et al., 2009; Kuhn et al., 2009).
Upprepad exponering för droger eller stress inducerar förändrade mönster av genuttryck i NAc, vilket potentiellt ligger till grund för kronisk missbruk och depression (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). Intressant nog ackumuleras transkriptionsfaktorn ΔFosB, en splitsningsprodukt av fosB-genen, i NAc som svar på upprepad drog- eller stressexponering (Nestler, 2008; Perrotti et al., 2008; Vialou et al., 2010). ΔFosB har föreslagits som en potentiell molekylär omkopplare som styr övergången från rekreationsdroganvändning till kroniskt beroende (Nestler et al., 1999; McClung et al., 2004; Renthal et al., 2009), eftersom dess ackumulering i NAc förstärker givande reaktioner på flera missbruksdroger. På senare tid har rollen av ΔFosB-induktion i NAc efter kronisk social nederlagsstress (Nikulina et al., 2008; Vialou et al., 2010) klargjorts: ΔFosB främjar aktiva copingreaktioner mot stressiga stimuli och ökar motståndskraften . Även om ΔFosB-induktion sker på ett stimulusberoende sätt, är mekanismerna som är ansvariga för läkemedels- och stressinducerad ΔFosB-ackumulering i NAc fortfarande okända.
Serumsvarsfaktor (SRF) är en transkriptionsfaktor som krävs för aktivitetsberoende transkriptionsaktivering av flera omedelbara tidiga gener, inklusive c-fos, fosb, Egr1 och Arc (Knöll och Nordheim, 2009). Nya studier har visat SRF: s effekter på de morfologiska och cytoarkitektoniska egenskaperna hos neuroner, inklusive reglering av synaptisk aktivitet och kretsbildning i vuxenhjärnan (Knöll och Nordheim, 2009). Dessa resultat fick oss att undersöka om SRF är funktionellt reglerad av kronisk exponering för missbruk eller stress, samt den potentiella effekten av sådan reglering på ΔFosB-induktion under dessa förhållanden.
Här beskriver vi en ny mekanism genom vilken nedreglering av SRF i NAc främjar prodepressiva och ångestframkallande fenotyper, vilket i slutändan ökar ett djurs sårbarhet för de skadliga effekterna av kronisk stress . Dessa effekter medieras delvis av förlusten av ΔFosB-induktion i NAc hos stressade djur. Observerade minskningar av SRF- och ΔFosB-uttryck i postmortem NAc-vävnad erhållen från deprimerade patienter stöder relevansen av våra resultat för mänsklig depression. Intressant nog verkar denna mekanism som kontrollerar ΔFosB-ackumulering vara stressspecifik: kronisk kokainexponering har ingen effekt på SRF-uttryck, SRF-deletion från NAc har ingen inverkan på ΔFosB-ackumulering efter kronisk kokainexponering, och sådan SRF-deletion har ingen effekt på kokaininducerade beteenden. Detta nya samspel mellan SRF och ΔFosB, i samband med stress, kan representera en viktig homeostatisk mekanism som reglerar en individs känslighet för kronisk stress.
Material och metoder
djur
Åtta veckor gamla C57BL / 6J manliga möss (Jackson Laboratory) användes i alla beteende- och biokemiska experiment. Alla djur habituerade till djuranläggningen under minst 1 vecka före experimentella manipuleringar och bibehölls vid 23-25 ° C i en 12 h ljus / mörk cykel (lyser från 7: 00 AM till 7: 00 PM) med ad libitum tillgång till mat och vatten. Experiment utfördes i enlighet med riktlinjerna för Society for Neuroscience och den institutionella djurvårds- och användarkommittén vid Mount Sinai School of Medicine.
För kokainexperiment [Western blotting och kvantitativ kromatinimmunprecipitation (ChIP)] användes 8- till 10-veckiga manliga C57BL / 6J-möss. Djur fick sju dagliga intraperitoneala injektioner av antingen saltlösning eller kokain (20 mg / kg kokain-HCl; Sigma). Möss användes 24 h efter den slutliga behandlingen. För beteendexperiment möttes möss enstaka postkirurgi och behandlades med 10 mg / kg (lokomotorisk sensibilisering) eller 7.5 mg / kg (konditionerad platspreferens) kokain-HCl intraperitonealt, såsom beskrivs nedan.
Srffl / fl möss alstras som tidigare beskrivits (Ramanan et al., 2005). NAc-specifik utlösning av Srf uppnåddes genom stereotaxisk injektion och efterföljande viral överuttryckning av Cre recombinas (Cre) fuserad till grönt fluorescerande protein (GFP) med användning av adenoassocierade virus (AAV) -vektorer. En ej-borttagande Cre användes. AAV-GFP injicerades i stället för AAV-Cre-GFP i Srffl / Fl möss som en kontroll. Kortfattat bedövades mössen med en blandning av ketamin (10 mg / kg) och xylazin (10 mg / kg) med följande stereotaxiska koordinater som användes för viral leverans: + 1.6 (främre / bakre), + 1.5 (lateral) 4.4 (dorsal / ventral) i en vinkel av 10 ° från mittlinjen (i förhållande till bregma). Totalt 0.5 μl renat virus levererades bilateralt över en 5 min-period (0.1 μl / min) följt av 5 min vilo. Möss testades 2 veckor efter operationen, när virusuttryck var maximal och virusinjektionsställen bekräftades för alla djur med användning av standardhistologiska metoder. Effektiviteten av virusmedierad Cre-expression validerades genom immunhistokemi och genom revers-transkriptas-PCR för Srf utförd på mikrodissekterade NAc-slag från djur som gav AAV-Cre-GFP och AAV-GFP i NAc. AAV-GFP- och AAV-Cre-GFP-virus genererades som tidigare beskrivits (Maze et al., 2010).
Beteendeförfaranden
Socialt nederlag stress.
C57BL / 6J-möss utsattes för kronisk social nederlagsspänning i 10-konsekutiva dagar såsom beskrivits tidigare (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Kort sagt var varje mus utsatt för en obekant och aggressiv manlig CD1-pensionerad uppfödarmus för 5 min per dag. Efter direkt interaktion med CD1-aggressorn placerades djuren i ett intilliggande fack i samma bur för nästa 24 h med sensorisk men inte fysisk kontakt. Kontrolldjur hölls i ekvivalenta burar men med medlemmar av samma stam. Sociala interaktionstest utfördes 24 h efter den sista dagen i nederlaget.
Social undvikande från en okänd CD1-hanmus bedömdes enligt publicerade protokoll (Berton et al., 2006; Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Den experimentella musen introducerades först i ett öppet fält innehållande en tom trådnätbur under 2.5 minuter. Under en andra session introducerades en okänd CD1-hanmus i den trådbundna buret. Tiden i interaktionszonen (en 8 cm bred korridor som omger buren) mättes. Segregering av besegrade möss i mottagliga och elastiska delpopulationer utfördes som beskrivits tidigare (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010). Eftersom majoriteten av kontrollmössen spenderade mer tid på att interagera med ett socialt mål än med ett tomt målhölje, sattes ett interaktionsförhållande på 100 (lika tid i interaktionszonen i närvaro kontra frånvaro av ett socialt mål) som ett avbrott. Möss med poäng <100 märktes som mottagliga och de med poäng ≥100 märktes som elastiska. Omfattande beteendemässiga, biokemiska och elektrofysiologiska analyser stöder giltigheten av dessa distinkta mottagliga och motståndskraftiga delpopulationer (Krishnan et al., 2007; Wilkinson et al., 2009; Vialou et al., 2010).
För att undersöka Srffl / Fl-musens sårbarhet för social nederlagsspänning utsattes mössen, injicerade bilateralt med AAV-GFP eller AAV-Cre-GFP, för tre följder nederlag samma dag och testades därefter för social interaktion 24 h senare. Denna submaximala nederlagsprocedur har tidigare validerats för att avslöja fenusprocesser som är acceptabla efter genetiska manipuleringar (Krishnan et al., 2007; Vialou et al., 2010).
Lär sig hjälplöshet.
Srffl / fl-möss som överuttryckte antingen AAV-GFP eller AAV-Cre-GFP utsattes för det lärda hjälplöshetsförfarandet som beskrivits tidigare (Berton et al., 2007). I korthet exponerades möss för intermittenta, oundvikliga fotstötar för 1 h under 2-konsekendagar (0.45 mA, 5 s varaktighet). På provningsdagen återfördes möss i lådan för 15 på varandra följande flyktester. Under varje försök levererades en kontinuerlig chock och möss fick möjlighet att fly genom att ange det intilliggande, icke-elektrifierade facket. Efter en lyckad flykt stängdes dörren automatiskt och flykt latens spelades in. När möss inte släpptes inom 25 s avslutades försöket och registrerades som ett misslyckande. Tidigare studier har visat att virusuttryck i NAc och andra regioner inte har någon effekt på grundlinjeflödesbeteende i frånvaro av stress (Newton et al., 2002, Berton et al., 2007).
Lokomotorisk sensibilisering.
Två veckor efter intra-NAc-injektioner av antingen AAV-GFP eller AAV-Cre-GFP utsattes Srffl / fl-möss för sensibilisering av rörelse. Möss vanades till rörelsearenan i 30 minuter per dag i 4 d. Efter tillvänjning injicerades djuren intraperitonealt med 10 mg / kg kokain-HCl och placerades i rörlådorna. Djurens rörelseaktiviteter registrerades med ett fotostrålsystem (San Diego Instruments) som ambulerande strålbrott i 30 minuter per dag. Lokomotorisk sensibilisering registrerades under en period av 6 d.
Villkorad platspreferens.
Platskonditioneringsförfarandet genomfördes som tidigare beskrivits (Maze et al., 2010), med följande modifieringar. Kortfattat, 18 d efter intra-NAc-infusioner av AAV-GFP eller AAV-Cre-GFP i Srffl / fl-möss, placerades djuren i konditioneringskamrarna, som bestod av tre sammanhangsspecifika miljöer. Möss som visade betydande preferenser för någon av de två konditioneringskamrarna uteslöts från studien (<10% av alla djur). Konditioneringsgrupperna balanserades ytterligare för att justera för eventuell kammarförspänning. På efterföljande dagar injicerades djur med saltlösning och begränsades till en kammare på eftermiddagen i 30 minuter och injicerades sedan med kokain (7.5 mg / kg, ip) och begränsades under 30 minuter till den andra kammaren dagen därpå, vilket motsvarade totalt två omgångar av associationsträning per behandling (två saltlösning och två kokainparningar). På dagen för testet placerades möss tillbaka i apparaten utan behandling i 20 minuter och testades för att utvärdera sidopreferenser. Lokomotoriska svar på kokain bedömdes via strålbrott i de kokainparade kamrarna för att säkerställa effektiviteten av läkemedelsbehandling. För alla grupper bedömdes rörelse vid baslinjen som svar på saltlösning för att säkerställa att rörelse inte påverkades av viral behandling.
Andra beteendestest.
Srffl / fl möss testades i öppna fält, ljus / mörka och tvingade-svimprov baserat på publicerade protokoll (Vialou et al., 2010). Aktiviteten hos möss i öppna fält registrerades för 5 min med ett videospårningssystem (Ethovision) under röda ljusförhållanden. För ljus / mörkt test fick möss fritt utforska en tvådammad låda bestående av en stor upplyst arena kopplad till en mindre sluten arena. Möss testades under en period av 5 min för att utvärdera den tid som spenderades i endera höljet. I de öppna fälten och ljus / mörka testen utvärderades tiden i respektive centrum och ljusarenan som ett inverst index av ångestrelaterade svar. Ett 1 d-tvångsundersökning utfördes under en period av 5 min. Ökad immobilitetstid under tvångsundersökningen tolkades som ett prodepressantliknande beteende. 1 d-tvångsundersökningen har använts i stor utsträckning hos möss och har validerats som ett mått på prediktiv validitet, eftersom antidepressiva terapier reducerar immobilitetstider.
immunohistokemi
Srffl / fl möss bedövades och perfusionerades intrakardiellt med 4% paraformaldehyd / PBS. Hjärnor avlägsnades och kryoprotekterades i 30% sackaros / PBS. Koronala sektioner (30 μm) skars på en frysande mikrotom och behandlades för immunohistokemiska analyser. Validering av Srffl / fl-knock-out utfördes med användning av en polyklonal antikropp riktad mot SRF (1 / 2000; Santa Cruz Biotechnology). Cre-uttrycket bekräftades via GFP (kycklingpolyklonalt, 1 / 8000, Aves Labs) -uttryck i dissekerade hjärnor, eftersom Cre är smält till GFP. För kvantifiering av ΔFosB-induktion efter social nederlagsspänning i Srffl / fl-knock-out-möss detekterades ΔFosB med användning av en kaninpolyklonal antikropp som höjdes mot proteinets N-terminala region (1 / 1000; Santa Cruz Biotechnology). Bilder togs med ett konfokalmikroskop (20 × förstoring, Zeiss). Antalet GFP-immunopositiva celler räknat som negativa och positiva för ΔFosB-immunreaktivitet kvantifierades i multipla bilder för varje djur, med medelvärden som därefter beräknades för varje djur. Varje djur betraktades som en individuell observation för statistisk analys.
Human postmortem NAc vävnad
Mänsklig hjärnvävnad efter döden erhölls från Dallas Brain Collection, där vävnad samlas från Dallas Medical Examiner's Office och University of Texas (UT) Southwestern's Tissue Transplant Program efter samtycke från de närmaste anhöriga. Vävnaden analyserades från både män och kvinnor som matchades för ålder, postmortem-intervall, RNA-integritetsnummer (RIN) och pH. Specifika agonala faktorer, inklusive koma, hypoxi, pyrexi, kramper, uttorkning, hypoglykemi, multipelt organsvikt och intag av neurotoxiska substanser vid dödsfallet påverkar RNA-integritet i hjärnvävnaderna efter döden (Tomita et al., 2004). Vi använde en agonal faktorskala (AFS) för att karakterisera vävnadsprover på vart och ett av dessa åtta tillstånd. Frånvaron av en agonal faktor tilldelades poängen 0 och dess närvaro värderades som 1 för att ge en total AFS-poäng mellan 0 och 8. Vävnad med agonalpoäng 0 eller 1 återspeglar prover av god kvalitet; falldemografin ges i tabell 1. Enastående vävnadskvalitet bekräftades med höga RIN-värden. Fallen utsattes för en standarddissektion före snäppfrysning i -40 ° C isopentan och lagring vid -80 ° C; ytterligare dissektion av NAc utfördes på frusen vävnad. UT Southwestern institutionella granskningskort granskade och godkände insamlingen av denna vävnad för forskningsanvändning. En direkt informantintervju genomfördes för varje depression vid ett senare tillfälle, där information om fallets sjukdom dokumenterades. en konsensusdiagnos av major depressiv sjukdom gjordes med hjälp av DSM-IV-kriterier av två forskningspsykiatriker. Inget av fallen som inkluderades i denna studie hade blodtoxikologiska skärmar som är positiva för missbruk, alkohol eller receptbelagda läkemedel andra än antidepressiva medel. Trots antidepressiv behandling var alla patienter kliniskt deprimerade vid tidpunkten för döden. Vävnadsprover fördelades på ett förblindat sätt för analys.
Tabell 1.
Demografiska data för human postmortemstudie
Western blotting
Humana och mus-NAc-prover behandlades som beskrivits tidigare (Maze et al., 2010). Fryst vävnad sonikerades i en 5 mM HEPES lysisbuffert innehållande 1% SDS med proteas (Roche) och fosfatasinhibitorer (Sigma). Proteinkoncentrationer bestämdes genom Dc-proteinanalysen (Bio-Rad). Lika mängder proteinprover utsattes för SDS-PAGE och Western blotting. Western-blottar undersöktes med användning av en antikropp mot SRF (1 / 2000; Santa Cruz-bioteknik) eller GAPDH (1 / 1500; Abcam) och skannades därefter och kvantifierades med användning av Odyssey imaging system (Licor).
RNA-isolering och kvantitativ PCR
RNA-isolering, kvantitativ PCR (qPCR) och dataanalys utfördes såsom tidigare beskrivits (Maze et al., 2010; Vialou et al., 2010). I korthet isolerades RNA med TriZol-reagens (Invitrogen) och renades ytterligare med RNAeasy-mikrosatser från Qiagen. Alla RNA-prover bestämdes att ha 260 / 280- och 260 / 230-värden ≥1.8. Omvänd transkription utfördes med användning av iScript (Bio-Rad). qPCR med användning av SYBR green (Quanta) utfördes med ett Applied Biosystems 7900HT RT PCR-system med följande cykelparametrar: 2 min vid 95 ° C; 40-cykler av 95 ° C för 15 s, 59 ° C för 30 s, 72 ° C för 33 s; och graderad uppvärmning till 95 ° C för att generera dissociationskurvor för bekräftelse av enskilda PCR-produkter. Data analyserades genom att jämföra C (t) -värdena i behandlingsförhållandet (kontroll mot mottagliga eller fjädrande möss eller humana kontroller mot deprimerade patienter) med AAC (t) -metoden (Tsankova et al., 2006). ΔFosB qPCR-primers: foward, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT och omvänd, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG.
Chip
ChIP utfördes som tidigare beskrivits (Maze et al., 2010) på poolade bilaterala NAc-slag från kontrollmottagliga och fjädrande möss (fyra 14-gauge-stans / mus) 1 h efter den senaste nederlagsupplevelsen och från salt- och kokain- behandlade djur 24 h efter den slutliga behandlingen. Vävnad tvärbunden i 1% formaldehyd. Fixeringen avbröts därefter via glycinanvändning och vävnad tvättades och hölls vid -80 ° C tills användning. Skjuvad kromatin inkuberades över natten med en anti-SRF-antikropp (Santa Cruz Biotechnology) som tidigare var bunden till magnetiska pärlor (Dynabeads M-280; Invitrogen). Efter omvänd tvärbindning och DNA-rening bestämdes bindningen av SRF till fosbpromotorn genom qPCR med användning av primrar som spänner över en region av fosbpromotorn innehållande två serumreaktionsbindningsställen. SRF-pulldowns berikades signifikant jämfört med kontroller utan antikroppar. Mus fosb gen promotor primers: framåt, CCCTCTGACGTAATTGCTAGG och omvänd, ACCTCCCAAACTCTCCCTTC.
Statistiska analyser
Envägs ANOVA användes för att jämföra medel mellan kontroll, mottagliga och elastiska möss i biokemiska och beteendeanalyser. Tvåvägs ANOVA användes för att jämföra ΔFosB-induktion genom socialt nederlag i Srf-lokala knock-out-möss, liksom för att jämföra effekten av Srf-knock-out i de inlärda hjälplöshet och lokomotoriska sensibiliseringsprotokollen. Studentens t-tester användes för att jämföra medel i effekten av Srf-knock-out på ΔFosB-induktion, och mellan grupper i humant postmortem vävnad och mus ChIP-analys. Skillnader mellan experimentella förhållanden ansågs statistiskt signifikanta när p ≤ 0.05.
Resultat
SRF och ΔFosB-uttryck i humant depression och socialt besegrade möss
För att utforska en potentiell roll för SRF i utvecklingen av depressivt liknande beteenden, utvärderade vi först SRF-proteinuttryck i NAc hos mänskliga patienter med postmortem. Deprimerade försökspersoner uppvisade signifikant reducerade SRF-nivåer i NAc jämfört med deras åldersmatchade kontroller (t (19) = 1.9; p <0.05) (Fig. 1A). Med tanke på SRF: s roll vid reglering av aktivitetsberoende omedelbar tidig genuttryck (Ramanan et al., 2005) antog vi att SRF kan vara inblandad i att kontrollera ΔFosB-uttryck i denna hjärnregion. Till stöd för denna hypotes observerade vi att Δfosb mRNA-nivåer också minskade signifikant i NAc hos deprimerade människor (t (16) = 1.8; p <0.05) (Fig. 1B). Detta överensstämmer med de senaste resultaten av minskade nivåer av ΔFosB-protein under dessa förhållanden (Vialou et al., 2010).
Figur 1.
Kronisk stressinducerad förtryck av SRF korrelerar med minskad ΔFosB-transkription i NAc. A, B, postmortem humana deprimerade patienter uppvisar reducerade nivåer av SRF-protein (n = 10 / grupp; A) och Δfosb mRNA-uttryck i NAc (n = 8 / grupp; B). C, möss utsatta för kronisk (10 d) social nederlagsspänning grupperades i mottagliga och motståndskraftiga delpopulationer. D, Kronisk social nederlagsspänning minskar SRF-proteinnivåerna i NAc hos mottagliga möss, men inte fjädrande möss, jämfört med kontroller 24 timmar efter det sociala interaktionstestet som visas i C.E, ΔfosB mRNA-nivåer i NAc är oförändrade hos mottagliga möss, men signifikant uppreglerad i fjädrande djur (n = 7–15 / grupp). F, SRF-protein uppvisar ökad bindning till fosb-genpromotorn efter kronisk social nederlagsspänning endast hos elastiska och inte mottagliga möss (n = 5 / grupp). Data som visas uttrycks som medelvärde ± SEM (representeras som felstaplar). Con., Control; Dep., Deprimerad; Sus., Mottaglig; Res., Elastisk. * p <0.05 kontra kontroll; *** p <0.001 kontra kontroll; #p <0.05 kontra mottagliga; ## p <0.01 kontra mottagliga; ### p <0.001 kontra mottagliga.
För att förlänga dessa resultat använde vi det kroniska sociala nederlagets stressprotokoll hos möss. Två urskiljbara grupper av besegrade möss, mottagliga och elastiska, var uppenbara (Krishnan et al., 2007) baserat på ett mått på social undvikande, där mottagliga djur visade signifikant minskad social interaktion jämfört med både kontroll- och fjädrande djur (F (2,23, 157.2) = 0.001; p <0.001; t-test med en Bonferroni-korrigering, mottaglig kontra kontroll, p <0.05; fjädrande kontra kontroll, p <0.01; fjädrande mot mottaglig, p <1) (Fig. 2,32C). Två dagar efter den sista nederlagsepisoden analyserades mottagliga, fjädrande och icke-besegrade kontrollmöss för SRF-expression i NAc. I likhet med fynd vid human depression minskade SRF-proteinnivåerna signifikant i NAc hos mottagliga möss jämfört med kontroller, medan SRF-nivåer var opåverkade i NAc hos fjädrande möss (F (4.7) = 0.05; p <0.05; t-test med en Bonferroni-korrigering, känslig mot kontroll, p <0.05; motståndskraftig mot mottaglig, p <1) (Fig. XNUMXD).
Därefter undersökte vi Δfosb mRNA-uttryck i NAc av dessa tre djurgrupper och observerade en signifikant ökning av Δfosb-uttryck hos endast fjädrande djur, med en trend men ingen signifikant ökning observerad hos mottagliga möss (t (14) = 2.1; p <0.05 (Bild 1E). För att ytterligare undersöka möjliga interaktioner mellan SRF-nivåer och Δfosb-transkription, använde vi ChIP för att undersöka om SRF-bindning till fosb-genpromotorn förändrades efter kronisk social nederlagsspänning i separata kohorter av mottagliga och elastiska möss. Fjädrande djur visade signifikant förbättrad SRF-bindning till fosb-promotorn i NAc jämfört med kontroller (t (8) = 2.1; p <0.05) samt jämfört med mottagliga möss (t (8) = 2.0; p <0.05). Ingen skillnad observerades mellan kontroller och mottagliga möss, vilket speglar troligen bristen på SRF-induktion hos mottagliga möss (Fig. 1F).
För att bekräfta SRF: s roll i regleringen av ΔFosB efter kronisk social nederlagsspänning användes Srffl / fl-möss för att undersöka effekten av en selektiv radering av SRF från NAc på stressinduktion av ΔFosB. Srffl / fl-möss injicerades stereotaxiskt intra-NAc med AAV-vektorer som uttryckte GFP eller Cre-GFP. En NAc-specifik knock-out av SRF inducerad av AAV-Cre-GFP bekräftades immunhistokemiskt (Fig. 2A). Faktum är att det inte fanns någon överlappning mellan SRF-färgning och Cre-uttryck, vilket visade effektiviteten i knock-out. I mikrodissekerade NAc-stämplar upptäckte vi en signifikant 50% minskning av SRF-proteinnivåer (t (11) = 4.3; p <0.001). Storleken speglar sannolikt det faktum att en bråkdel av vävnad i sådana mikrodissektioner inte är virusinfekterad.
Figur 2.
SRF förmedlar ΔFosB-induktion genom kronisk social nederlagsstress. A, injektion av AAV-Cre-GFP i NAc av Srffl / fl möss resulterar i knock-out av SRF-protein i Cre-uttryckande neuroner. Injektion av AAV-GFP var utan urskiljbar effekt. B, sådan selektiv utslagning av SRF från NAc blockerar fullständigt induktionen av ΔFosB i NAc efter kronisk social nederlagsspänning (n = 4 / grupp). Data som visas uttrycks som medelvärde ± SEM (representeras som felstaplar). * p <0.05 kontra AAV-GFP-kontroll; ** p <0.01 kontra AAV-GFP-nederlag.
Vi utförde sedan kvantitativ immunhistokemi för ΔFosB i NAc av besegrade Srffl / fl-möss injicerade intra-NAc med antingen AAV-Cre-GFP eller AAV-GFP. Efter kronisk social nederlagsspänning inducerades ΔFosB-uttryck signifikant i NAc av AAV-GFP-injicerade djur (virus × behandlingsinteraktion, F (1,12) = 6.4; t-test med en Bonferroni-korrigering, kontroll vs nederlag, p <0.05; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <0.01). Denna induktion observerades dock inte hos Srffl / fl-möss som fick AAV-Cre-GFP (Fig. 2B), vilket visar att ΔFosB-induktion i NAc av kronisk stress kräver SRF.
SRF-knock-out i NAc främjar prodepression- och proanxietyliknande fenotyper
Eftersom ΔFosB-induktion av kronisk social nederlagsspänning tidigare har visat sig förmedla motståndskraft (Vialou et al., 2010) antog vi att nedreglering av SRF och den resulterande förlusten av ΔFosB-induktion hos mottagliga djur kan representera en negativ anpassning som i slutändan gör djur som är mer utsatta för de skadliga effekterna av stress. För att testa denna hypotes inducerade vi en lokal NAc-specifik radering av Srf-genen hos vuxna Srffl / fl-möss som beskrivits ovan, och de resulterande mössen och deras kontroller testades i ett batteri av beteendeparadigmer för att bedöma baslinje depression- och ångest- som beteende. Lokal NAc-radering av SRF främjade en prodepressionliknande effekt mätt via testet med tvångs simning (t (30) = 2.5; p <0.05), liksom en ångestdämpad effekt mätt i det öppna fältet (t (38) = 1.9; p <0.05) och ljus / mörktest (t (8) = 1.9; p <0.05). Således uppvisade Srffl / fl-möss som fick AAV-Cre-GFP i NAc minskad latens till rörlighet i tvångssimmetestet, mindre tid i mitten av ett öppet fält och mindre tid i ljusfacket i en ljus / mörk låda jämfört med AAV-GFP-injicerade djur (Fig. 3A – C). Emellertid förändrade intra-NAc-borttagning av SRF inte baslinjenivåerna för rörelse, vilket tyder på att de observerade beteendeeffekterna hos SRF-knock-out-djur inte berodde på abnormiteter i allmän rörelseaktivitet (Fig. 3D). Dessa data är intressanta mot bakgrund av tidigare rapporter som tyder på att, även om ΔFosB i NAc reglerar depressivt beteende, verkar det inte vara involverat i ångestrelaterade svar (Vialou et al., 2010). Våra nuvarande resultat att förlust av SRF inducerar ångestsvärda svar tyder på att det görs genom andra mål än ΔFosB.
Figur 3.
SRF knock-out från NAc främjar prodepression- och ångestliknande fenotyper. A – C, selektiv utslagning av SRF från NAc, uppnådd via AAV-Cre-GFP-injektion i NAc av Srffl / fl-möss, minskar latens till rörlighet i testet med tvångs simning (n = 14–18 / grupp; A) och minskar tiden som spenderas i mitten och tiden i ljusfacket i testfältet (B) respektive ljus / mörk (C) (n = 5–15 / grupp). D, ingen skillnad i basal rörlig aktivitet observerades i det öppna fältet hos möss som fick intra-NAc-injektioner av AAV-GFP eller AAV-Cre-GFP. E, F, ökad mottaglighet för inlärd hjälplöshet (n = 7–8 / grupp; E) och socialt nederlagsspänning (n = 5–6 / grupp; F), uppmätt, med latens att fly och social interaktionstid . Data som visas uttrycks som medelvärde ± SEM (representeras som felstaplar). * p <0.05 mot GFP eller mot frånvarande mål; ** p <0.01 kontra GFP; *** p <0.001 kontra GFP.
Vi undersökte därefter huruvida SRF-radering i NAc också ökar djurets sårbarhet för de skadliga effekterna av upprepad stress. Srffl / fl-möss, injicerade med antingen AAV-Cre-GFP eller AAV-GFP i NAc, undersöktes i två depressionmodeller, lärde sig hjälplöshet och kronisk social nederlagsspänning. I inlärd hjälplöshet uppvisade Srffl / fl-djur som fick AAV-Cre-GFP ökad latens för att undkomma en fotchock efter tidigare exponering för oundviklig fotchockstress (behandling × interaktionsförsök, F (14,180 10.2) = 0.001; t-test med en Bonferroni-korrigering, p <0.01; AAV-Cre vs AAV-GFP, p <3), vilket indikerar ökad känslighet för stressinducerade beteendemässiga underskott (Fig. 10E). På samma sätt ökade lokal SRF-radering från NAc också social aversion (t (1.8) = 0.05; p <3) jämfört med AAV-GFP-injicerade kontrolldjur efter kronisk social nederlagsspänning (Fig. XNUMXF), en prodepressionliknande effekt.
Brist på involvering av SRF i ΔFosB induktion och beteendehantering mot kokain
Med tanke på att ΔFosB också induceras i NAc som svar på missbrukande droger som kokain, var det av intresse att undersöka en potentiell roll för SRF i kokainhandling. Till skillnad från kronisk social nederlagsspänning förändrade inte upprepad kokainexponering SRF-proteinuttryck i NAc (t (14) = 0.8; p> 0.05) (Fig. 4A) och hade ingen effekt på SRF-bindning till fosB-genpromotorn i denna hjärnregion. (t (4) = 0.7; p> 0.05) (fig. 4B). Detta antyder att, i motsats till stress, induktion av ΔFosB efter kronisk kokain inte medieras genom SRF. Vi testade detta direkt genom att undersöka om ΔFosB-ackumulering efter kronisk kokain förändrades hos Srffl / fl-djur som fick AAV-Cre-GFP kontra AAV-GFP i NAc. Vi fann att SRF-radering inte hade någon effekt på kokaininducerad ΔFosB-ackumulering i denna hjärnregion (fig. 4C).
Figur 4.
Förlust av SRF hade ingen effekt på kokaininduktion av ΔFosB eller kokainreglerade beteenden. A, B, Repeterad kokainexponering (7 d, 20 mg / kg kokain-HCl) hade ingen effekt på SRF-proteinuttryck i NAc (A) eller på SRF-bindning till fosB-genpromotorn i denna hjärnområde (B) 24 h efter läkemedelsexponering (n = 5 / grupp). C, ΔFosB ackumulering, uppmätt immunocytokemiskt, efter kronisk kokainexponering påverkas inte av NAc-specifik utrotning av SRF. D, E, Lokal deletion av SRF från NAc hade ingen effekt på lokomotorisk aktivitet efter en saltinjektion (d 1) på kokaininducerad lokomotorisk aktivitet och sensibilisering (n = 8 / grupp) (d 1-7; D) eller på kokainkonditionerad platspreferens (n = 8 / grupp; E). Data som visas är uttryckt som medelvärde ± SEM (representerad som felstänger).
För att följa upp detta överraskande resultat undersökte vi om en selektiv SRF-knock-out från NAc förändrar beteendemässiga svar på kokain. I överensstämmelse med SRFs bristande reglering av ΔFosB-induktion med kokain, hade NAc-specifik knock-out av SRF ingen effekt på rörelseaktivitet inducerad av akut kokain eller rörelsessensibilisering sett efter upprepad kokainexponering (behandling × tidsinteraktion, F (4,80) = 0.3; p> 0.05) (Fig. 4D). På samma sätt hade NAc-specifik utslagning av SRF ingen effekt på kokain-konditionerad platspreferens (t (14) = 0.1; p> 0.05) (Fig. 4E), vilket ger ett indirekt mått på kokainbelöning.
Diskussion
Denna studie identifierade SRF som en ny uppströms mediator av ΔFosB i NAc efter kronisk social nederlagsstress, och implicerar SRF i utvecklingen av depressiva och ångestliknande beteenden. Vi tillhandahåller direkta bevis för att kronisk social nederlagsstress minskar SRF-nivåerna i NAc hos mottagliga, men inte resilienta, djur, och att denna nedreglering förhindrar induktionen av ΔFosB i denna hjärnregion, vilket vi har visat är nödvändigt för effektiv hantering av kronisk stress, dvs. resiliens (Vialou et al., 2010). En liknande minskning av SRF-uttryck hittades i NAc hos deprimerade människor, där ΔFosB mRNA och proteinuttryck också minskade. Däremot minskade inte ΔFosB-nivåerna i NAc hos mottagliga möss, trots en nedreglering av SRF, vilket implicerar andra transkriptionsmekanismer, ännu okända, för att kontrollera ΔFosB-uttryck. En kausal roll för SRF i att mediera ΔFosB-induktion i NAc efter kronisk stress fastställdes genom användning av inducerbar genetisk deletion av SRF från denna hjärnregion. Beteendeanalys av möss med denna NAc-specifika SRF-knockout implicerar ytterligare att SRF spelar en nyckelroll i utvecklingen av både baslinje- och stressinducerade depressions- och ångestliknande beteenden. I slående kontrast hade SRF-deletion ingen effekt på ΔFosB-induktion som svar på kronisk kokainadministrering eller på kokainets beteendemässiga effekter. Dessa fynd stöder en ny stimulusspecifik roll för SRF i regleringen av ΔFosB-induktion och av beteendemässiga svar på distinkta miljöstörningar.
SRF-medierad transkription har tidigare visat sig reagera på synaptisk aktivitet, som i stor utsträckning utlöses av ökad kalciuminströmning, såväl som förbättrad neurotrofisk aktivitet, särskilt när det gäller hjärnavledande neurotrofisk faktor (BDNF) (Bading et al., 1993; Xia et al., 1996, Johnson et al., 1997; Chang et al., 2004; Kalita et al., 2006; Knöll och Nordheim, 2009). Detta väcker den intressanta frågan om varför SRF är nedreglerade i NAc av mottagliga, men inte fjädrande, möss efter kronisk social nederlagsspänning. Denna differentialreglering är sannolikt inte medierad av dopamin eller BDNF-signalering, eftersom mottagliga mössdisplay ökade BDNF-proteinnivåer och ökad nedströms BDNF-signalering i NAc samt förbättrad bristning av ventra-tegmentala (VTA) dopaminneuroner, som innervate NAc, medan fjädrande djur uppvisar normala nivåer av BDNF-signalerings- och VTA-bränningshastigheter (Krishnan et al., 2007). En alternativ möjlighet är att SRF-uttryck undertryckas i NAc som svar på förändrad glutamatergisk innervation av denna hjärnområde, vilken vi har visat är differentiellt reglerad i mottagliga mot fjädrande möss (Vialou et al., 2010). Ytterligare arbete behövs för att direkt studera dessa och andra möjliga mekanismer.
Tidigare studier som använder genom-breda och andra metoder antyder att ~5-10% av SRF-målgener i neuroner är omedelbara tidiga gener (Philippar et al., 2004; Ramanan et al., 2005; Etkin et al., 2006; Nordheim, 2009). Detta överensstämmer med våra data som visar en kritisk roll för SRF vid induktion av ΔFosB, en trunkerad produkt av den omedelbara tidiga genen av fosb, genom kronisk stress. Intressant representerar många SRF-målgener som identifieras i dessa olika studier också kända mål för ΔFosB i NAc (Kumar et al., 2005, Renthal et al., 2008, 2009, Maze et al., 2010). Bland dessa generellt reglerade gener är flera som är kända för att reglera den neuronala cytoskeleten (till exempel Cdk5, Arc och Actb). Detta är i sin tur förenligt med rapporter som SRF påverkar aktindynamik och neuronell motilitet i flera neuronala celltyper (Alberti et al., 2005; Ramanan et al., 2005; Knöll et al., 2006), medan ΔFosB är känt för påverka dendritisk ryggradsutväxt av NAc-neuroner (Maze et al., 2010). Sådana gemensamma funktionella ändpunkter kan återspegla de samordnade effekterna av SRF, kombinerat med dess inducering avAFFB, som verkar på en serie gemensamma målgener för att påverka neuronmorfologi och i slutändan komplext beteende.
SRF har också visat sig spela en avgörande roll i regleringen av synaptisk plasticitet och neuronal aktivitetsberoende genuttryck och beteende. Till exempel har förlust av SRF-beroende induktion av omedelbara tidiga gener som svar på antingen frivillig utforskning av en ny miljö eller neuronal aktivering genom elektrokonvulsiva anfall associerats med försämrad långsiktig synaptisk potentiering i hippocampus hos Srf-mutanter (Ramanan et al., 2005; Etkin et al., 2006). Dessutom har SRF-utarmning i hippocampus visat sig orsaka brister i långsiktig synaptisk depression, omedelbar tidig genuttryck inducerad av en ny kontext och försämrad tillvänjning under utforskning av en ny miljö (Etkin et al., 2006). Dessa data fastställer vikten av SRF för ett djurs förmåga att anpassa sig på lämpligt sätt till miljöstörningar, som i det ovannämnda fallet att lära sig att vänja sig vid en ny miljö, eller, i fallet med att anpassa sig till negativa stressiga stimuli, för att förhindra spridning av stressinducerade beteendestörningar, som i vår aktuella studie . Vi observerar således att djur som uppvisar brister i SRF-uttryck, antingen som svar på social nederlagsstress hos mottagliga individer eller genom direkt nedreglering av SRF, uppvisar ökat depressivt och ångestliknande beteende. Med tanke på att deprimerade människor också uppvisar minskade SRF-nivåer i NAc, är det tänkbart att SRF spelar en grundläggande roll i att reglera en individs förmåga att positivt anpassa sig till negativa miljöstimuli, delvis genom reglering av ΔFosB-uttryck i NAc.
DIFFERANDE MEKANISMER: ADDICTION VS STRESS RESISTANCE
Ett överraskande fynd i den aktuella studien är att även om SRF krävs för ΔFosB-ackumulering i NAc som svar på kronisk stress, krävs det inte för ΔFosB-induktion inom samma hjärnregion som svar på kronisk kokain. Likaså krävs inte SRF för normala beteendemässiga reaktioner på drogen. Dessa data visar att trots att ΔFosB induceras i NAc som svar på många typer av stimuli (Nestler et al., 1999; Nestler, 2008), verkar det finnas distinkta molekylära vägar som leder till ΔFosB-induktion. En möjlig förklaring till dessa fynd är de delvis olika celltyperna som visar ΔFosB-ackumulering som svar på stress jämfört med kokain. Kronisk stress inducerar ΔFosB ungefär lika mycket inom de två huvudsakliga subpopulationerna av NAc-medium taggiga neuroner, de som uttrycker övervägande D1- kontra D2-dopaminreceptorer, medan kronisk kokain inducerar ΔFosB övervägande inom D1+ neuroner (Kelz et al., 1999; Perrotti et al., 2004). Det är således möjligt att SRF-beroende signalvägar kan vara viktiga för ΔFosB-induktion i D2+ neuroner . Detta skulle dock inte förklara den fullständiga förlusten av ΔFosB-induktion hos SRF-knockout-möss efter kronisk stress, eftersom induktionen sker i båda neuronala subtyperna. En alternativ förklaring är att kronisk stress och kroniskt kokain påverkar distinkta intracellulära signalkaskader, på grund av deras distinkta verkningsmekanismer på NAc-neuroner, där kronisk stress kanske verkar genom förändrad glutamaterg transmission, som tidigare nämnts, och kroniskt kokain verkar primärt genom D1-receptorsignalering (Nestler, 2008). Ytterligare en möjlighet är att ΔFosB-induktion genom kronisk stress kontra kroniskt kokain är beroende av distinkta transkriptionsmekanismer som styrs differentiellt av distinkta neurala insignaler som innerverar NAc från olika glutamaterga projektionsregioner, till exempel flera regioner av prefrontal cortex, hippocampus och amygdala. Mycket ytterligare arbete behövs för att utforska dessa och alternativa möjligheter.
Tillsammans identifierar våra resultat en ny transkriptionsmekanism genom vilken ΔFosB induceras i NAc för att mediera proresiliensresponser på stressiga stimuli. Denna studie ger också viktiga nya insikter i den roll som SRF spelar på NAc-nivå i regleringen av depressions- och ångestliknande beteenden. Att få en bättre förståelse av SRF:s transkriptionella roll i regleringen av sådana beteenden kommer att bidra till identifieringen av nya genmål involverade i resiliens mot stressrelaterade störningar, och kan underlätta framtida utveckling av mer effektiva antidepressiva behandlingar.
Detta arbete stöddes av bidrag från National Institute of Mental Health och National Institute on Drug Abuse och av en forskningsallians med AstraZeneca. Vi tackar David D. Ginty för att ge Srffl / fl-mössen.
Korrespondens bör adresseras till Eric J. Nestler, Fishberg Department of Neuroscience, Mount Sinai School of Medicine, One Gustave L. Levy Place, Box 1065, New York, NY 10029-6574. [email protected]
Copyright © 2010 författarna 0270-6474 / 10 / 3014585-08 $ 15.00 / 0
Referensprojekt
1. ↵
1. Alberti S,
2. Krause SM,
3. Kretz O,
4. Philippar U,
5. Lemberger T,
6. Casanova E,
7. Wiebel FF,
8. Schwarz H,
9. Frotscher M,
10. Schütz G,
11. Nordheim A
(2005) Neuronal migration i den murina rostral-migrationsströmmen kräver serumresponsfaktor. Proc Natl Acad Sci USA 102: 6148-6153.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
2. ↵
1. Bading H,
2. Ginty DD,
3. Greenberg ME
(1993) Reglering av genuttryck i hippocampala neuroner med distinkta kalciumsignalvägar. Vetenskap 260: 181-186.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
3. ↵
1. Berton O,
2. McClung CA,
3. Dileone RJ,
4. Krishnan V,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Graham D,
8. Tsankova NM,
9. Bolanos CA,
10. Rios M,
11. Monteggia LM,
12. Själv DW,
13. Nestler EJ
(2006b) BDNFs viktiga roll i den mesolimbiska dopaminvägen i social nederlagsspänning. Vetenskap 311: 864-868.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
4. ↵
1. Berton O,
2. Covington HE 3rd.,
3. Ebner K,
4. Tsankova NM,
5. Carle TL,
6. Ulery P,
7. Bhonsle A,
8. Barrot M,
9. Krishnan V,
10. Singewald GM,
11. Singewald N,
12. Birnbaum S,
13. Neve RL,
14. Nestler EJ
(2007) Induktion av ΔFosB i periaqueductal grå genom stress främjar aktiva coping-svar. Neuron 55: 289-300.
CrossRefMedline
5. ↵
1. Chang SH,
2. Poser S,
3. Xia Z
(2004) En ny roll för serumresponsfaktorn vid neuronal överlevnad. J Neurosci 24: 2277-2285.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
6. ↵
1. Etkin A,
2. Alarcón JM,
3. Weisberg SP,
4. Touzani K,
5. Huang YY,
6. Nordheim A,
7. Kandel ER
(2006) En roll i att lära sig för SRF: borttagning i den vuxna förebilden stör ARB och bildandet av ett omedelbart minne om ett nytt sammanhang. Neuron 50: 127-143.
CrossRefMedline
7. ↵
1. Heinze HJ,
2. Heldmann M,
3. Voges J,
4. Hinrichs H,
5. Marco-Pallares J,
6. Hopf JM,
7. Müller UJ,
8. Galazky jag,
9. Sturm V,
10. Bogerts B,
11. Münte TF
(2009) motverkar incitament sensibilisering i svår alkoholberoende med hjälp av djup hjärnstimulering av kärnans accumbens: kliniska och grundläggande vetenskapliga aspekter. Front Hum Neurosci 3: 22.
Medline
8. ↵
1. Johnson CM,
2. Hill CS,
3. Chawla S,
4. Treisman R,
5. Bading H
(1997) Calcium kontrollerar genuttryck via tre distinkta vägar som kan fungera oberoende av signalkaskaden Ras / mitogen-aktiverad proteinkinaser (ERKs). J Neurosci 17: 6189-6202.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
9. ↵
1. Kalita K,
2. Kharebava G,
3. Zheng JJ,
4. Hetman M
(2006) Roll av megakaryoblastisk akut leukemi-1 vid ERK1 / 2-beroende stimulering av serumresponsfaktorstyrd transkription av BDNF eller ökad synaptisk aktivitet. J Neurosci 26: 10020-10032.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
10. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Själv DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Uttryck av transkriptionsfaktorn FosB i hjärnan styr känsligheten för kokain. Natur 401: 272-276.
CrossRefMedline
11. ↵
1. Knöll B,
2. Nordheim A
(2009) Funktionell mångsidighet av transkriptionsfaktorer i nervsystemet: SRF-paradigmet. Trender Neurosci 32: 432-442.
CrossRefMedline
12. ↵
1. Knöll B,
2. Kretz O,
3. Fiedler C,
4. Alberti S,
5. Schütz G,
6. Frotscher M,
7. Nordheim A
(2006) Serum-responsfaktor kontrollerar neuronal kretsmontering i hippocampus. Nat Neurosci 9: 195-204.
CrossRefMedline
13. ↵
1. Krishnan V,
2. Han MH,
3. Graham DL,
4. Berton O,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Laplant Q,
8. Graham A,
9. Lutter M,
10. Lagace DC,
11. Ghose S,
12. Reister R,
13. Tannös P,
14. Grön TA,
15. Neve RL,
16. Chakravarty S,
17. Kumar A,
18. Eisch AJ,
19. Själv DW,
20. Lee FS,
21. et al.
(2007) Molekylära anpassningar som ligger bakom känslighet och motstånd mot socialt nederlag i hjärnbelöningsregioner. Cell 131: 391-404.
CrossRefMedline
14. ↵
1. Kuhn J,
2. Bauer R,
3. Pohl S,
4. Lenartz D,
5. Huff W,
6. Kim EH,
7. Klosterkoetter J,
8. Sturm V
(2009) Observationer om ouppkopplad rökuppehåll efter djup hjärnstimulering av kärnans accumbens. Eur Addict Res 15: 196-201.
CrossRefMedline
15. ↵
1. Kumar A,
2. Choi KH,
3. Renthal W,
4. Tsankova NM,
5. Theobald DE,
6. Truong HT,
7. Russo SJ,
8. Laplant Q,
9. Sasaki TS,
10. Whistler KN,
11. Neve RL,
12. Själv DW,
13. Nestler EJ
(2005) Kromatinomvandling är en nyckelmekanism som ligger bakom kokaininducerad plasticitet i striatum. Neuron 48: 303-314.
CrossRefMedline
16. ↵
1. Maze I,
2. Covington HE 3rd.,
3. Dietz DM,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Russo SJ,
7. Mekanik M,
8. Mouzon E,
9. Neve RL,
10. Haggarty SJ,
11. Ren Y,
12. Sampath SC,
13. Hurd YL,
14. Greengard P,
15. Tarakhovsky A,
16. Schaefer A,
17. Nestler EJ
(2010) Väsentlig roll för histon-metyltransferas G9a i kokaininducerad plasticitet. Vetenskap 327: 213-216.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
17. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) DeltaFosB: en molekylär växel för långsiktig anpassning i hjärnan. Brain Res Mol Brain Res 132: 146-154.
Medline
18. ↵
1. Nestler EJ
(2008) Transkriptionsmekanismer för missbruk: deltaFosB: s roll. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci 363: 3245-3255.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
19. ↵
1. Nestler EJ,
2. Carlezon WA Jr.
(2006) Den mesolimbiska dopaminbelöningskretsen i depression. Biologisk psykiatri 59: 1151-1159.
CrossRefMedline
20. ↵
1. Nestler EJ,
2. Kelz MB,
3. Chen J
(1999) ΔFosB: en molekylär mediator av långvarig neural och beteendets plasticitet. Brain Res 835: 10-17.
CrossRefMedline
21. ↵
1. Newton SS,
2. Thome J,
3. Wallace TL,
4. Shirayama Y,
5. Schlesinger L,
6. Sakai N,
7. Chen J,
8. Neve R,
9. Nestler EJ,
10. Duman RS
(2002) Inhibering av cAMP-responselementbindande protein eller dynorfin i kärnans accumbens producerar en antidepressiv-liknande effekt. J Neurosci 22: 10883-10890.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
22. ↵
1. Nikulina EM,
2. Arrillaga-Romany Jag,
3. Miczek KA,
4. Hammer RP Jr.
(2008) Långvarig förändring i mesokortikolimbiska strukturer efter upprepad social nederlagsspänning hos råttor: tidsförlopp av mu-opioidreceptor mRNA och FosB / DeltaFosB immunreaktivitet. Eur J Neurosci 27: 2272-2284.
CrossRefMedline
23. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) Induktion av ΔFosB i belöningsrelaterade hjärnstrukturer efter kronisk stress. J Neurosci 24: 10594-10602.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
24. ↵
1. Perrotti LI,
2. Weaver RR,
3. Robison B,
4. Renthal W,
5. Maze I,
6. Yazdani S,
7. Elmore RG,
8. Knapp DJ,
9. Selley DE,
10. Martin BR,
11. Sim-Selley L,
12. Bachtell RK,
13. Själv DW,
14. Nestler EJ
(2008) Distinkta mönster av DeltaFosB induktion i hjärnan genom missbruk. Synapse 62: 358-369.
CrossRefMedline
25. ↵
1. Philippar U,
2. Schratt G,
3. Dieterich C,
4. Müller JM,
5. Galgóczy P,
6. Engel FB,
7. Keating MT,
8. Gertler F,
9. Schüle R,
10. Vingron M,
11. Nordheim A
(2004) SRF-målgenen Fhl2 antagoniserar RhoA / MAL-beroende aktivering av SRF. Molcell 16: 867-880.
CrossRefMedline
26. ↵
1. Ramanan N,
2. Shen Y,
3. Sarsfield S,
4. Lemberger T,
5. Schütz G,
6. Linden DJ,
7. Ginty DD
(2005) SRF medierar aktivitetsinducerad genuttryck och synaptisk plasticitet men inte neuronal livskraft. Nat Neurosci 8: 759-767.
CrossRefMedline
27. ↵
1. Renthal W,
2. Carle TL,
3. Maze I,
4. Covington HE 3rd.,
5. Truong HT,
6. Alibhai jag,
7. Kumar A,
8. Montgomery RL,
9. Olson EN,
10. Nestler EJ
(2008) Delta FosB medierar epigenetisk desensibilisering av c-fos-genen efter kronisk amfetaminexponering. J Neurosci 28: 7344-7349.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
28. ↵
1. Renthal W,
2. Kumar A,
3. Xiao G,
4. Wilkinson M,
5. Covington HE 3rd.,
6. Maze I,
7. Sikder D,
8. Robison AJ,
9. LaPlant Q,
10. Dietz DM,
11. Russo SJ,
12. Vialou V,
13. Chakravarty S,
14. Kodadek TJ,
15. Stack A,
16. Kabbaj M,
17. Nestler EJ
(2009) Genomgående analys av kromatinreglering av kokain avslöjar en roll för sirtuins. Neuron 62: 335-348.
CrossRefMedline
29. ↵
1. Schlaepfer TE,
2. Cohen MX,
3. Frick C,
4. Kosel M,
5. Brodesser D,
6. Axmacher N,
7. Joe AY,
8. Kreft M,
9. Lenartz D,
10. Sturm V
(2008) Djup hjärnstimulering för att belöna kretsar lindrar anhedonia i eldfast huvuddepression. Neuropsykofarmakologi 33: 368-377.
CrossRefMedline
30. ↵
1. Sesack SR,
2. Grace AA
(2010) Cortico-basal ganglia belöningsnätverk: microcircuitry. Neuropsykofarmakologi 35: 27-47.
CrossRefMedline
31. ↵
1. Tomita H,
2. Vawter MP,
3. Walsh DM,
4. Evans SJ,
5. Choudary PV,
6. Li J,
7. Overman KM,
8. Atz ME,
9. Myers RM,
10. Jones EG,
11. Watson SJ,
12. Akil H,
13. Bunney WE Jr.
(2004) Effekt av agonala och postmortemfaktorer på genuttrycksprofil: kvalitetskontroll i mikroarrayanalyser eller postmortem mänsklig hjärna. Biolpsykiatri 55: 346-352.
CrossRefMedline
32. ↵
1. Tsankova NM,
2. Berton O,
3. Renthal W,
4. Kumar A,
5. Neve RL,
6. Nestler EJ
(2006) Hippocampal kromatinreglering i en musmodell av depression och antidepressiv verkan. Nat Neurosci 9: 519-525.
CrossRefMedline
33. ↵
1. Vassoler FM,
2. Schmidt HD,
3. Gerard ME,
4. Berömda KR,
5. Ciraulo DA,
6. Kornetsky C,
7. Knapp CM,
8. Pierce RC
(2008) Djup hjärnstimulering av kärnans accumbens skal dämpar kokain priming-inducerad återinställning av läkemedelssökning hos råttor. J Neurosci 28: 8735-8739.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
34. ↵
1. Vialou V,
2. Robison AJ,
3. Laplant QC,
4. Covington HE 3rd.,
5. Dietz DM,
6. Ohnishi YN,
7. Mouzon E,
8. Rush AJ 3rd.,
9. Watts EL,
10. Wallace DL,
11. Iñiguez SD,
12. Ohnishi YH,
13. Steiner MA,
14. Warren BL,
15. Krishnan V,
16. Bolaños CA,
17. Neve RL,
18. Ghose S,
19. Berton O,
20. Tamminga CA,
21. Nestler EJ
(2010) ΔFosB i hjärnbelöningskretsar förmedlar motståndskraft mot stress och antidepressiva reaktioner. Nat Neurosci 13: 745-752.
CrossRefMedline
35. ↵
1. Wilkinson MB,
2. Xiao G,
3. Kumar A,
4. LaPlant Q,
5. Renthal W,
6. Sikder D,
7. Kodadek TJ,
8. Nestler EJ
(2009) Imipramin-behandling och elasticitet uppvisar liknande kromatinreglering i en nyckelhjälnebelöningsregion. J Neurosci 29: 7820-7832.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text
36. ↵
1. Xia Z,
2. Dudek H,
3. Miranti CK,
4. Greenberg ME
(1996) Calciuminflöde via NMDA-receptorn inducerar omedelbar tidig gentransskription med en MAP-kinas / ERK-beroende mekanism. J Neurosci 16: 5425-5436.
Sammanfattning / GRATIS Fullständig text