Monoaminstabilisatorn (-) - OSU6162 motverkar nedreglerade dopaminutgångar i kärnans accumbens av långvariga Wistar-råttor (2015)

Kristin Feltmann1, †, Ida Fredriksson1, †, Malin Wirf1, Björn Schilström2,3 och Pia Steensland1, *

Artikel publicerad online: 14 OCT 2015

DOI: 10.1111 / adb.12304

Abstrakt

Vi har nyligen fastställt att monoaminstabilisatorn (-) - OSU6162 (OSU6162) minskade frivilligt alkoholmedierat beteende, inklusive alkoholintag och cue / priming-inducerad återinsättning, hos långvariga drickande råttor, samtidigt som alkohol-inducerad dopaminproduktion i kärnan avstympades accumbens (NAc) av alkoholnaiva råttor. Därför antog vi att OSU6162 försvagar alkoholmedierat beteende genom att stumpa alkoholens givande effekter. Här utvärderade vi effekterna av långvarig drickning och OSU6162-behandling (30 mg / kg, sc) på basal och alkoholinducerad (2.5 g / kg, ip) NAc-dopaminutgångar i Wistar-råttor efter 10 månaders intermittent tillgång till 20 % alkohol. Resultaten visade att basala och alkoholinducerade NAc-dopaminutgångar var signifikant lägre hos långtidsdrinkråttor, jämfört med alkoholnaiva råttor. Hos de långvariga dricksråttorna ökade OSU6162 långsamt och upprätthöll dopaminproduktionen signifikant förhöjd jämfört med baslinjen i minst 4 timmar. Dessutom stumade OSU6162-förbehandlingen inte den alkoholinducerade produktionen hos de långvariga drickråttorna, ett resultat som stod i kontrast till våra tidigare resultat i alkoholnaiva råttor. Slutligen inducerade OSU6162 inte konditionerad platspreferens (CPP) hos varken långvariga drickande eller alkoholnaiva råttor, vilket indikerar att OSU6162 inte har några förstärkande egenskaper. För att verifiera att CPP-resultaten inte berodde på minnesförvärv, visade vi att OSU6162 inte påverkade nytt objektigenkänning. Sammanfattningsvis indikerar dessa resultat att OSU6162 försvagar alkoholmedierat beteende genom att motverka NAc-dopaminunderskott hos långvariga drickråttor och att OSU6162 inte är givande på egen hand. Tillsammans med OSU6162s fördelaktiga bieffektprofil förtjänar föreliggande studie utvärdering av OSU6162s kliniska effekt för att dämpa alkoholanvändning hos alkoholberoende patienter.

Beskrivning

Alkoholmissbruk (AUD) är en kronisk återkommande sjukdom som väsentligt bidrar till den globala sjukdomsbördan (Rehm et al,. 2009). Den begränsade kliniska effekten av de få tillgängliga medicinerna (Anton et al,. 2006) betonar ett viktigt behov av bättre behandlingar.

Det mesolimbiska dopaminsystemet är ett möjligt behandlingsmål. Alkohol ökar dopaminfrigörelsen i nukleär accumbens (NAc) av alkohol-naiva råttor (Di Chiara och Imperato 1988) och friska individer (Boileau et al,. 2003) och därmed framkallar förstärkande effekter (Tupala och Tiihonen 2004). I striatum av individer med AUD, emellertid, både dopamin D2-receptordensitet (Hietala et al,. 1994; Volkow et al,. 1996) och central stimulant-inducerad dopaminfrisättning reduceras (Martinez et al,. 2005; Volkow et al,. 2007). Dessa anpassningar har föreslagits för att driva alkoholbehov, kompulsiv dricks och öka risken för återfall (Diana 2011). Faktum är att krävande svårighetsgrad har föreslagits vara korrelerad med en snabb dopaminomsättning (Kumakura et al,. 2013) och en reducerad D2-receptordensitet i striatum av avgiftade alkoholberoende patienter (Heinz et al,. 2004). Hos outbredda gnagare är effekterna på det mesolimbiska dopaminsystemet efter kronisk alkoholbehandling emellertid inkonsekventa (Tupala och Tiihonen 2004). En möjlig förklaring till dessa skillnader kan vara att de mest prekliniska studierna hittills har använt tvångsalkoholadministration, vilket introducerar ett element av stress och artifice i experimentet, vilket tvivlar på tillämpligheten på vår förståelse för mänsklig AUD. Nyligen återinförde vi den prekliniska intermittent-åtkomst 20% etanol tvåflaskans valprocedur (IA20E) (Klok 1973; Simms et al,. 2008), vilket visar tydligt ansikte validitet och flera kännetecken för en AUD-profil (Carnicella et al,. 2014) inklusive följande: (1) eskalering av frivilligt drickande; (2) cykler av överdriven dricks och abstinens; (3) farmakologiskt relevanta blodalkoholkoncentrationer (Simms et al,. 2008); och (4) tvångsdrickning (Hopf et al,., 2010). Dessutom har IA20E-modellen visat prediktiv validitet, åtminstone för aktuella AUD-mediciner (Simms et al,. 2008) och vareniclin (Steensland et al,. 2007; Litten et al,. 2013). Thans IA20E-modell inducerar också neuroadaptations som är relevanta för förståelsen av AUD, including en dysregulerad glutamatergisk neurotransmission i den mediala prefrontala cortexen (Fredriksson et al,. 2015). Vidare minskar 7-veckorna i IA20E NAc-dopaminutgången (Barak et al,. 2011), supporting hypotesen att kronisk alkoholkonsumtion inducerar ett hypo-fungerande dopamin tillstånd i AUD (Diana 2011; Becker och Mulholland 2014). Dopaminreceptorns genuttrycksnivåer har dock tidigare visat sig vara lägre jämfört med ålders-matchade alkohol-naiva råttor, efter 2 och 4 månader, men inte 10 månader, av frivillig alkoholförbrukning (Jonsson et al,. 2014). Således undersöker föreliggande mikrodialysstudie effekterna av tio månader av IA20E på basala och alkoholinducerade NAc-dopaminutgångar för att ytterligare förstå påverkan av långvarig frivillig alkoholkonsumtion på dopamin-systemet.

Trots betydelsen av dopaminsystemet vid utveckling och underhåll av AUD (Tupala och Tiihonen, 2004), studier med traditionella dopamin D2-antagonister och agonister hos AUD-patienter har varit avskräckande (Snabb 2010). Nyliga studier med modafinil (en dopamintransportmodulator) och aripiprazol (en partiell D2-agonist) visar dock lovande resultat hos alkoholberoende patienter (Brunetti et al,. 2012; Joos et al,. 2013). Således kan optimal behandling inte förlita sig på blockad eller aktivering utan snarare en modulering eller stabilisering av det dopaminerga systemet.

(-) - OSU6162 (OSU6162) tillhör en klass av föreningar som vid utveckling namngavs "dopaminstabilisatorer" baserat på dess förmåga att hämma eller stimulera dopaminrelaterade beteenden beroende på den rådande dopaminerga tonen (Sonesson et al,. 1994; Ringt et al,. 2008). OSU6162 är kliniskt säker och har utvärderats vid flera neuropsykiatriska störningar som Huntingtons sjukdom och mental trötthet efter stroke och hjärntrauma (Johansson et al,. 2012; Kloberg et al,. 2014). In vitro studier indikerar att OSU6162, som aripiprazol, verkar som en partiell agonist med låg egenaktivitet vid D2-receptorer (Seeman och Guan 2007; Kara et al,. 2010); beteendestudier har emellertid misslyckats med att visa någon egen verksamhet hos OSU6162 (Sonesson et al,. 1994; Natesan et al,. 2006), vilket indikerar en annan mekanism än den hos en klassisk partiell agonist. jagnstead har det antagits att OSU6162 huvudsakligen verkar som en antagonist vid presynaptiska D2-receptorer (Carlsson et al,. 2004). Nya observationer visar emellertid att OSU6162 också fungerar som en partiell agonist på serotonerga, särskilt 5-hydroxytryptamin 2A-receptorer, vilket kan bidra till dess stabiliserande egenskaper (Carlsson et al,. 2011) och indikerar att "monoaminstabilisatorer" kan vara ett lämpligare namn för denna klass av föreningar. Trots det är en human brain imaging studie (Tolboom et al,. 2015) visade att OSU6162 ockuperade D2 / D3-receptorer koncentrationsberoende i striatum, inklusive ventralt striatum (NAc), vilket framhöll OSU6162: s potential att rikta dopaminsystemet och hjärnregionerna kopplade till AUD. Faktum är att vi nyligen identifierade OSU6162 som ett potentiellt AUD-läkemedel genom att visa att det minskade frivilligt alkoholintag, alkoholsökning, cue / priming-inducerad återinförande och abstinensliknande symtom hos långvariga dricksråttor (Steensland et al,. 2012). Vi fann vidare att OSU6162 avstoppade dopaminproduktionen inducerad av en systemisk alkoholutmaning hos alkohol-naiva råttor (Steensland et al,. 2012), vilket framhäver OSU6162: s förmåga att motverka en akut dopaminflod. Dessutom ökade OSU6162 i sig NAc-dopaminproduktionen under basförhållanden hos de alkoholnaiva råttorna (Steensland et al,. 2012), vilket kan indikera en risk för missbruk. Den aktuella studien utvärderar vidare mekanismen bakom OSU6162: s potential som AUD-läkemedel. Först undersöktes effekterna av OSU6162, ensam och i kombination med en alkoholutmaning, på NAc-dopaminproduktionen med användning av mikrodialys i vakna råttor efter 10 månaders IA20E. För det andra utvärderades OSU6162s givande egenskaper med användning av konditionerad platspreferens (CPP). Slutligen, eftersom minnesförvärv bidrar till att upprätta CPP, utvärderades effekterna av OSU6162 på nytt objektigenkänning (NOR).

Material och metoder

Detaljerad beskrivning av djur [manliga Rcc Wistar Han Rats (Harlan, Nederländerna)], bostadsförhållanden, IA20E-drickande paradigmet (Wise 1973; Simms et al,. 2008) och droger och kemikalier finns i supportinformationen (SI). Alla experiment utfördes i enlighet med rekommendationerna i svensk djurskyddslagen och godkändes av den svenska etiska kommittén för djurforskning i Stockholm (Dnr: N475 / 12 och N64 / 12).

In vivo mikrodialys

Mikrodialys utfördes i NAc hos råttor efter 10 månader av frivillig alkoholkonsumtion (IA20E; n = 44) och hos åldersmatchade alkoholnaiva råttor (n  = 8) för att mäta basala och alkoholinducerade (2.5 g / kg, ip) utgångar av dopamin och dess metaboliter 3,4-dihydroxifenylättiksyra (DOPAC) och homovanillinsyra (HVA). Gruppen av långvariga dricksråttor delades vidare in i fyra behandlingsgrupper för att utvärdera effekterna av OSU6162 (30 mg / kg, sc), ensam och i kombination med alkohol (2.5 g etanol / kg, ip), på NAc-dopamin, DOPAC och HVA utgångsnivåer. OSU6162-dosen baserades på tidigare resultat som visade effektivitet för att dämpa alkoholmedierat beteende (Steensland et al,. 2012) och 60-minutintervallet mellan injektioner valdes för att tillåta att OSU6162-inducerad dopaminutgång når maximalt före den andra injektionen (Steensland et al,. 2012). Alkoholdosen baserades på tidigare studier som tillämpade mikrodialys i NAc hos vakna råttor (Lido et al,. 2009; Steens et al,. 2012).

Kirurgi utfördes såsom beskrivits tidigare (Schilström et al,. 1998; Steens et al,. 2012); emellertid användes isoflurananestesi. Koncentriska dialysprober konstruerades som beskrivits tidigare (Malmlöf et al,. 2015) med ett 2.25-mm aktivt membran (Filtral 10 AN69, Hospal, Meyzieu, Frankrike) och implanteras i rätt NAc vid AP + 1.6, ML -1.1 och DV-8.2 mm i förhållande till bregma och dura mater (Atlas of Paxinos and Watson 2007). Två timmar efter att råttorna hade vaknat från anestesi fick de tillgång till en cykel av IA20E (dvs 24 timmar med frivilligt alkoholintag, följt av fri tillgång till vatten).

Dialys initierades ungefär 21 timmar efter slutet av den sista alkoholdrinkningssessionen (dvs ungefär 48 timmar efter operation), genom perfusion (2.5 μl / min) med fysiologisk perfusionslösning (mm: 147 NaCl, 3.0 KCl, 1.3 CaCl2, 1 MgCl, 1.0 NaHPO4; pH = 7.4). Efter ungefär 2-timmar samlades dialysatprover i 15-minuters intervall i rör innehållande 5-xl 0.5-m perklorsyra / 1.76-pm etylendiamintetraättiksyra (EDTA). Baslinjeprover uppsamlades under 45 minuter innan OSU6162 (30 mg / kg, sc) eller vehikel (saltlösning) administrerades. Sixtio minuter senare gavs råttor en injektion av alkohol (2.5 g / kg, ip) eller vehikel (saltlösning) och prov uppsamlades under ytterligare 180 minuter. Dialysprover svalkades omedelbart till 4 ° C, överfördes varje timme till -20 ° C-frysen och lagrades vid -80 ° C tills de analyserades med användning av högprestandad vätskekromatografi (HPLC) såsom beskrivits tidigare men med manuell provinjektion (Steensland et al,. 2012).

Under HPLC användes den mobila fasen (55 mm acetat, 10-12% metanol, 0.1 mm oktansulfonsyra, 0.01 mm Na2EDTA; pH = 4.1) pumpades (0.8 ml / min) genom en C-18-kolonn med täta kärnpartiklar (Kinetex 150 × 4.6 mm, 2.6 ^ m, Phenomenex, Torrance, CA, USA). Efter separering på kolonnen detekterades dopamin, DOPAC och HVA elektrokemiskt med användning av en ESA analytisk cell (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) vid en oxidationspotential av 400 mV och en reducerande potential av -200 mV och koncentrationer kvantifierades genom jämföra toppområden med externa standarder (TotalChrom-programvara, PerkinElmer, Waltham, MA, USA).

Probeplacering verifierades med användning av ljusmikroskopi av 50-μm sektioner, färgad med neutral röd. Totalt utesluts 16 av 44 långsiktiga drickrottor på grund av sondförskjutning (n = 5) eller tekniska svårigheter under operationen (n = 2), dialys (n = 6) och HPLC-analys (n  = 3). En råtta uteslöts från jämförelsen av basal produktion (fmol), eftersom absolut dopaminkoncentration inte kunde bedömas. Relativa förändringar kunde emellertid bestämmas och därför inkluderades denna råtta när data presenterades som procent av förändringar vid baslinjen. I den alkohol-naiva gruppen (n = 8) uteslöts en råtta på grund av sondförskjutning. Två råttor inkluderades endast i jämförelsen av basal produktion eftersom tekniska svårigheter med mikrodialysproceduren inträffade efter provtagning vid baslinjen.

Villkorad platspreferens

Konditionerad platspreferens utfördes med användning av en förspänd design (dvs. testföreningarna parades med det minst föredragna facket och vehikeln med det föredragna facket) som beskrivits tidigare (Jerlhag et al,. 2009) i fyra identiska CPP-lådor (TSE Systems, Bad Homburg, Tyskland), vardera bestående av två fack (45 × 22 × 40 cm) separerade av en guillotindörr och distinkt med vägg- och golvmönster samt golvstruktur. Tid i varje fack registrerades automatiskt av 32 infraröda sensorer som ligger 2 cm över facket (ActiMot, TSE Systems).

CPP-experimentet bestod av tre faser: förkonditionering (dag 1; 15 minuter), konditionering (dag 2-5; 60 minuter / session) och efterkonditioneringsprov (dag 6; 15 minuter). Den initiala preferensen (dvs. den sida där råttan spenderade mer än 50% av tiden) bestämdes under förkonditioneringsfasen. För att följa den förspända utformningen utesluts råttor som spenderade mindre än 51 och mer än 75% av sin tid på den föredragna sidan. Under konditioneringsfasen (stängd gillotindörr) mottog varje råtta två injektioner med 6 timmar från varandra per dag och slumpmässigt tilldelades konditionering med antingen testförening på morgonen och fordonet på eftermiddagen eller vice versa. Fyra konditioneringssessioner valdes eftersom tre till fyra sessioner vanligtvis används för att erhålla robust CPP till givande ämnen hos gnagare (Cunningham et al,. 2006; Tzschentke 2007). Kontrollrotor var parade med fordon på båda sidor. Under efterkonditioneringsprovet fick råttorna återigen fri tillgång till båda facken, och tid i varje fack registrerades. CPP-uttryck utvärderades genom att jämföra tiden som spenderades i det läkemedelsparade facket under efterkonditionering, med tiden som spenderades i samma fack under förkonditionering. Robust CPP-uttryck har upprepade gånger visats efter morfinbehandling (Karami och Zarrindast 2008); Förmågan hos miljöförhållandet i våra CPP-lådor att inducera CPP bekräftades därför med användning av morfin (10 mg / kg, sc, n = 10) eller saltlösning (n = 10) konditionering som beskrivits tidigare med undantag för att konditioneringsfasen varade i 30 minuter.

OSU6162: s effekt på CPP-expression utvärderades såsom beskrivits ovan hos båda alkoholnaiva råttor (n = 20) och råttor fick IA20E i cirka 3 månader före experimentet (n  = 20). Under konditioneringsfasen gavs OSU6162 (30 mg / kg, sc) eller vehikelinjektioner 30 minuter innan råttorna begränsades till ett fack. Längden på konditioneringssessionen (60 minuter) och förbehandlingstiden (30 minuter) baserades på våra tidigare studier som visade att dopaminproduktionen i NAc nådde ett maximum 45 minuter efter en systemisk OSU6162 (30 mg / kg) injektion och hölls därefter i mer än 60 minuter i alkoholnaiva råttor (Steensland et al,. 2012).

Nya objektigenkänning

Detaljer om NOR-kammaren och föremål finns i SI. Under den första NOR-sessionen var varje råtta fri att utforska kammaren utan föremål som var närvarande under 8-protokollet (habituation session). Efter 12 minuter i hemburet placerades råttan igen i kammaren och fick undersöka två identiska föremål fästa vid kammarens motstående väggar under 2-minuter (träningspass). Efter ett intersessionintervall av 2 respektive 24 timmar placerades råttan igen i kammaren och fick undersöka en kopia av ett känt objekt från träningspasset tillsammans med ett nytt objekt under fem minuter (testperiod). Objektpositioner och kombinationer var motbalanserade mellan varje råtta. Både träning och test sessioner var videoinspelade och tiden råttor som använts för att utforska varje objekt blev poäng manuellt av en blindad forskare (XNote Stopwatch). Under testperioden beräknades diskrimineringsförhållandet (dvs den totala tiden som undersökte det nya objektet dividerat med den totala tiden som undersökte båda objekten) och på grund av den naturliga preferensen hos råttor att utforska nya föremål betraktades dominerande utforskning av det nya objektet som minnet av det välbekanta objektet. Exploration av ett objekt definierades som sniffing, biting eller slickar objektet. Att sitta, klättra eller luta sig på objektet utan några tecken på aktiv utforskning blev inte uppskattad som utforskning.

Först bekräftade vi att ett intervallintervall för 2-timme skulle möjliggöra för råttorna att komma ihåg det välbekanta objektet som infördes under träningspasset under testperioden genom att jämföra diskrimineringsförhållandet efter ett 2-timmeintervall (n = 16) med det efter ett 24-timmarsintervall (n = 16), när naturlig glömska inträffar (Nilsson och Carlsson 2013). Därefter användes intervallintervallet 2-timme för att testa effekterna av OSU6162 vid minnesförvärv. OSU6162 (30 mg / kg, sc, n = 8) eller fordon (n  = 8) gavs 60 minuter före träningspasset och diskrimineringsgraden under testperioden jämfördes mellan de två behandlingsgrupperna.

Statistisk analys

I mikrodialys-experimentet jämfördes basal dopamin, DOPAC och HVA-utdata (fmol) mellan långvarig dricka (n = 27) och alkohol-naiv (n = 7) råttor som använder Mann – Whitney U-test på grund av antaganden för t-test [lika standardavvikelser (SD)] uppfylldes inte.

Att analysera effekten av en systemisk alkoholutmaning på dopaminproduktionen vid alkoholdryck (n = 7) kontra alkoholnaiva råttor (n  = 5), en tvåvägs upprepad mätning av ANOVA med tillstånd som mellan-subjektfaktor och tid som inom-subjektfaktor användes. De absoluta värdena (fmol) av dopaminproduktionen användes i analysen på grund av signifikant olika basala dopaminnivåer under de två förhållandena (alkohol dricker eller alkohol naiv). Efter ett signifikant tillstånd och interaktionseffekt beräknades och analyserades arean under kurvan (AUC) (tidpunkt 0–45 minuter) i förhållande till värdet vid tidpunkt 0 (ΔAUC) med oparad student t-test för att jämföra den alkoholinducerade toppen mellan långvariga dricks- och alkohol-naiva råttor. De basala DOPAC- och HVA-utgångarna var å andra sidan oberoende av tillstånd och normaliserades sålunda till procent av respektive baslinjevärden (medelvärdet för tidpunkterna -90 till -60 minuter) och analyserades därefter med användning av tvåvägiga upprepade åtgärder ANOVA såsom beskrivits för dopamin tidigare.

Hos alkoholdrottande råttor fanns inga signifikanta skillnader i basal dopamin, DOPAC och HVA (fmol) utgångar (medelvärdet av tidpunkter -90 till -60 minuter) mellan de olika behandlingsgrupperna: fordonskøretch, OSU6162-fordon, fordon -Alkohol och OSU6162-alkohol (envägs ANOVA; n  = 6–8 per grupp). Således normaliserades data om produktionen av dopamin och metaboliter till procent av baslinjen och analyserades separat för varje behandlingsgrupp med användning av upprepade mått enkelriktad ANOVA med tiden som faktor inom ämnet följt av Fishers minst signifikanta skillnad. post hoc test för att jämföra signifikanta förändringar mot baslinjen.

För att utvärdera effekterna av OSU6162 jämfört med förbehandling av fordon på den alkoholinducerade dopaminutgången beräknades procentuell förändring av dopaminproduktionen efter alkoholinjektionen med hjälp av provet omedelbart före alkoholinjektionen som referens (timepoint 0 minuter). Data analyserades med upprepad mätning av tvåvägs ANOVA med behandling som mellanfaktorns faktor och tid som den individsfaktor.

Statistisk analys av CPP-data utfördes med hjälp av parade Student's t-test inom varje behandlingsgrupp på förhand bestämt. Analys av NOR-data utfördes med hjälp av oparad student t-test inom varje session.

Genomsnittligt alkoholintag (g / kg per 24-timmar) presenterades som median och interkvartilintervall (IQR). Alla andra värden presenterades som medelvärde och standardfel av medelvärdet (SEM). Signifikansnivån sattes till α = 0.05. Statistisk analys utfördes med hjälp av mjukvaran spss version 22 (SPSS Inc., Chicago, IL, USA) och GraphPad Prism version 5.0 (La Jolla, CA, USA).

Resultat

Tio månader av frivillig alkoholdryck inducerade ett hypo-dopaminerat tillstånd i kärnan accumbens

Med hjälp av mikrodialys jämfördes basala och alkoholinducerade (2.5 g / kg, ip) NAc-utgångar av dopamin och dess metaboliter mellan råttor som frivilligt hade druckit alkohol i 10 månader [4.2 (2.4-4.7) g / kg per 24 timmar; median och IQR av deras livstidiga alkoholintag] och åldersrelaterade alkohol-naiva råttor. Den basala dopaminutgången (uttryckt som median och IQR i fmol / min) minskade signifikant (U = 41.5; P <0.05) vid långvarigt drickande [1.8 (1.2-2.7); n = 27] jämfört med alkoholnaiva råttor [2.5 (2.3-3.3); n  = 7]. Däremot fanns det ingen signifikant skillnad mellan grupperna i basal DOPAC [alkohol: 638 (504-734), alkohol-naiv: 691 (582-734); U = 85.5; icke-signifikant (ns)] eller HVA [alkohol: 243 (199-294), alkohol-naiv: 251 (192-263); U = 90.5; ns] utdata.

Analys av dopaminutgång efter en systemisk alkoholutmaning (Fig. 1a) uppvisade en övergripande huvudverkan av tiden (F12, 120 = 51.1; P <0.001), tillstånd [alkohol-drickande (n = 7) eller alkoholnaiva råttor (n = 5)] (F1, 10 = 7.3; P <0.05) och en tid * tillståndsinteraktion (F12, 120 = 2.7; P <0.01). Post hoc analys visade att den alkoholinducerad dopamintoppen (AAUC, timepoint 0-45 minuter) var signifikant lägre vid alkoholdryck jämfört med alkohol-naiva råttor (Fikon. 1b, t10 = 2.8; P  <0.05). Analys av DOPAC- och HVA-utgångar efter alkoholutmaningen avslöjade inga signifikanta skillnader mellan alkohol-drickande och alkohol-naiva råttor (Stödinformation Fig. S1; se statistiska detaljer i SI).

Figur 1.

Figur 1. Dopaminproduktionen i nucleus accumbens efter en systemisk alkoholutmaning blev trubbig hos långvariga drickande råttor. För att utvärdera effekterna av en akut alkoholutmaning (2.5 g / kg, ip) på dopaminproduktionen i nucleus accumbens efter långvarig frivillig alkoholkonsumtion applicerades mikrodialys i vakna Wistar-råttor efter 10 månaders intermittent tillgång till 20% etanol i ett paradigm med två flaskor (n = 7) och i åldersmatchade alkoholnaiva råttor (n = 5). (a) Alkoholutmaningen påverkade dopaminproduktionen (medelvärde ± SEM, fmol / min) annorlunda i långvariga drickande och alkoholnaiva råttor, vilket visas av ett signifikant övergripande tillstånd och en tillstånd * tidsinteraktionseffekt (tvåvägs upprepade åtgärder ANOVA med villkor som faktor mellan ämnen och tid som faktor inom motivet). (b) Den alkoholinducerade dopamintoppen stympades signifikant i alkoholdrycken jämfört med alkoholnaiva råttor som avslöjades genom jämförelse av arean under kurvan (ΔAUC) mellan tidpunkter 0 och 45 minuter i förhållande till tidpunkt 0 inom varje grupp (Studentens t-test, * P <0.05 jämfört med alkoholnaiva råttor)

(-) - OSU6162 motverkade det hypo-dopaminerga tillståndet i kärnan accumbens inducerat av långsiktigt frivilligt alkoholdryck

Koncernen av långvariga råttor av råttor (med minskad basal dopaminproduktion jämfört med alkohol-naiva råttor, se resultat tidigare) delades in i fyra behandlingsgrupper: vehikel-vehikel (n = 6), fordon – alkohol (n = 7), OSU6162 – fordon (n = 8) och OSU6162 – alkohol (n  = 7) för att utvärdera effekterna av OSU6162, ensam eller i kombination med alkohol, på dopamin-, DOPAC- och HVA-utgångar i NAc. Det fanns ingen signifikant skillnad mellan behandlingsgrupperna i basal dopamin (1.97 ± 0.22 fmol / min; F3, 23 = 0.2), DOPAC (649 ± 46 fmol / min; F3, 23 = 0.3) eller HVA (242 ± 22 fmol / min; F3, 23  = 1.2) utgång. Således normaliserades data och presenterades som procent av individuell baslinje. I fordon-fordonsgruppen (fig. S2) fanns ingen övergripande huvudeffekt på dopamin (F16, 80 = 0.9; ns) eller HVA (F16, 80 = 1.1; ns) utgångar. Det var dock en övergripande huvudeffekt på DOPAC-produktionen (F16, 80 = 3.2; P <0.001) och post hoc analys avslöjade en signifikant minskning mot baslinjen vid tidpunkter 150 och 180 minuter.

I alkoholfordonsgruppen (Fig. 2a), det fanns en signifikant effekt på dopamin (F16, 96 = 18.0; P <0.001), DOPAC (F16, 96 = 8.6; P <0.001) och HVA (F16, 96 = 9.3; P <0.001) utgångar. Post hoc analys avslöjade att dopaminutmatningen ökades signifikant vid 15- och 30-minuttidpunkten jämfört med baslinjen, medan den var signifikant minskad jämfört med baslinjen från 90-till 165-minuts tidpunkter. Vidare ökade DOPAC-utsignalen signifikant jämfört med baslinjen vid 30-minutens tidpunkt, medan HVA-utsignalen var signifikant förhöjd från 30-till 135-minuttidpunkten jämfört med baslinjen.

Figur 2.

 

Figur 2. (-) - OSU6162 (OSU6162) motverkar det hypo-dopaminerga tillståndet i kärnan accumbens inducerad av långvarig frivillig alkoholdryck. Mikrodialys användes för att mäta kärnans accumbensproduktion av dopamin och dopaminmetaboliterna 3,4-dihydroxifenylättiksyra (DOPAC) och homovanillinsyra (HVA) efter behandling med vehikelalkohol (2.5 g / kg, ip) (a), OSU6162 (30 mg / kg, sc) -vehicle (b) och OSU6162-alkohol c) (n = 7-8 per behandling) i vakna Wistar-råttor, som hade lägre basal dopaminutgång efter 10-månader av att dricka i intermittent tillgång till 20% etanol tvåflaskvalparamigram (under 24-timmars uttag) än alkohol -Anna ålders-matchade kontroller. (a) Than ökade akut alkoholutmaning signifikant och minskade dopaminproduktionen jämfört med baslinjen mellan 15 och 30 minuter och mellan 90 och 165 minuter efter injektion. DOPAC- och HVA-utdata ökade signifikant jämfört med baslinjen vid 30 respektive 30-135 minuter efter alkoholutmaningen. (b) OSU6162-administrering ökade och upprätthöll signifikant dopamin (från tidpunkt -45 minuter), DOPAC och HVA (från tidpunkt -30 minuter) utdata förhöjda jämfört med baslinjen under hela experimentet (dvs. minst 4 timmar efter OSU6162-injektionen). (c) När OSU6162 administrerades 60 minuter före alkoholutmaningen höjdes dopamin signifikant jämfört med baslinjen från -45 till 60 minuter, och DOPAC- och HVA-output ökade signifikant jämfört med baslinjen vid alla uppmätta tidpunkter. Värden presenteras som procent av respektive individuella baslinje (medelvärde ± SEM), eftersom basvärden (fmol / min) inte skilde sig mellan behandlingsgrupperna (enkelriktad ANOVA). Data analyserades med användning av upprepade mått envägs ANOVA inom varje separat behandlingsgrupp med tiden som faktor inom ämnet följt av Fishers minst signifikanta skillnad efter hoc-test. Pilar indikerar tid för injektioner. Asterisker indikerar tidpunkter när dopaminproduktionen skiljer sig signifikant från baslinjen (* P <0.05, ** P <0.01, *** P <0.001). För att undvika röran utelämnades asterisker för DOPAC och HVA. OSU, OSU6162; Alc, alkohol; Fordon, fordon

I OSU6162-vehikelgruppen (fig. 2b) fanns en signifikant övergripande huvudeffekt på dopamin (F16, 112 = 4.0; P <0.001), DOPAC (F16, 112 = 19.6; P <0.001) och HVA (F16, 112 = 53.6; P <0.001) utgångar. Post hoc analys visade att dopaminproduktionen var signifikant förhöjd jämfört med baslinjen direkt efter injektionen (timepoint -45 minuter), uppnådde maximalt 75 minuter efter injektion (timepoint 15 minuter) och förblev signifikant förhöjd under dialys-sessionen (timepoint 180 minuter). DOPAC och HVA ökade signifikant jämfört med baslinjen från -30- till 180-minuts tidpunkter.

I OSU6162-alkoholgruppen (Fig. 2c) det fanns en övergripande huvudverkan på dopamin (F16, 96 = 7.3; P <0.001), DOPAC (F16, 96 = 17.5; P <0.001) och HVA (F16, 96 = 29.9; P <0.001) utgångar. Post hoc analys avslöjade att dopaminproduktionen var signifikant förhöjd jämfört med baslinjen från -30- till 60-minuts tidpunkter. Utgångar av DOPAC och HVA var signifikant förhöjda jämfört med baslinjen vid alla tidpunkter efter OSU6162-injektionen.

För att ytterligare utvärdera effekten av OSU6162 på alkoholinducerad dopaminproduktion i NAc, jämfördes procentuell skillnad i dopaminutgången från tidpunkten direkt före alkoholinsprutningen (timepoint 0-minut) mellan alkoholgrupperna och OSU6162-alkoholbehandlingsgrupperna. Det var en signifikant generell huvudverkan av tiden (F3.1, 36.7 = 20.1; P <0.001) men inte för behandling (F1, 12 = 0.46; ns), och ingen tid * behandlingsinteraktion (F3.1, 36.7 = 2.6; P = 0.067) på alkoholinducerad dopaminproduktion (fig. 3). Således nej post hoc analys utfördes.

Figur 3.

Figur 3. Förbehandling med (-) - OSU6162 (OSU6162) hade ingen signifikant effekt på alkoholinducerad dopaminutgång i kärnbatterierna hos långvariga råttor. För att utvärdera effekterna av OSU6162 specifikt på den alkoholinducerade dopaminutgången i kärnbäraren i de långsiktiga råttorna, var procentuell förändring av dopaminproduktionen i förhållande till utgången vid tidpunkten omedelbart innan alkoholinjektionen (timepoint 0 minuter ) jämfördes mellan råttorna behandlade med vehikelalkohol (2.5 g / kg, ip) eller OSU6162 (30 mg / kg, sc) -alkohol. Det fanns ingen signifikant skillnad i OSU6162-förbehandlad jämfört med fordonsbehandlade grupper (upprepad mätning av tvåvägs ANOVA med behandling som mellanfaktorfaktor och tid som inomfaktsfaktor). Värden presenteras som medelvärde ± SEM (n = 7 per behandling)

(-) - OSU6162 framkallade inte konditionerad platspreferens vid långvariga dricks- eller alkohol-naiva råttor

Möjligheten att underlätta en CPP i våra CPP-lådor bekräftades genom att visa att morfinkonditionerade råttor (n  = 8) tillbringade betydligt mer tid på den morfinparade sidan under efterkonditioneringssessionen, jämfört med samma sida under förkonditioneringen (Fig. 4a, höger panel), medan ingen sådan effekt sågs i de fordonskondenserade råttorna (n = 9; Fikon. 4en vänster panel).

Figur 4.

Figur 4. (-) - OSU6162 (OSU6162) inducerade inte konditionerad platspreferens (CPP) hos varken långvariga drickande eller alkoholnaiva råttor. För att utvärdera de förstärkande effekterna av OSU6162 utsattes alkoholnaiva råttor och råttor som hade druckit alkohol (intermittent tillgång till 20% etanol) i 3 månader före experimentet för CPP-paradigmet. (a) Först validerades CPP-lådorna genom att visa att morfin-konditionering (10 mg / kg, sc) inducerade CPP, vilket visas genom en signifikant ökad tid på den morfinparade sidan under efterkonditionering jämfört med förkonditionering. Däremot fanns inget uttryck av CPP i de vehikelbehandlade råttorna. OSU6162 (30 mg / kg, sc) och vehikelbehandling inducerade inte CPP hos varken (b) alkoholnaiva eller (c) alkoholdrickande råttor. Alla värden presenteras som medelvärde ± SEM (n = 8-9 per behandling). Data analyserades med hjälp av ihopkopplat Student-t-test inom varje behandlingsgrupp (jämförande tid på den läkemedelsparade sidan under efterbehandling med samma sida under förkonditionering); *** P <0.001 jämfört med motsvarande förkonditionering

För att utvärdera möjliga förstärkande egenskaper hos OSU6162 genomfördes ett CPP-experiment på råttor som hade druckit alkohol [IA20E; 2.6 (2.1–3.2) g / kg / dag] i 3 månader såväl som i alkoholnaiva råttor. Resultaten visade att varken alkoholnaiva eller alkoholdrinkande råttor (Fig. 4b respektive c), konditionerade med antingen OSU6162 eller vehikel (n = 8-9 per behandlingsgrupp), visade signifikant skillnad i hur mycket tid som spenderades på OSU6162-parade respektive fordonsparade sida under efterkonditionering jämfört med samma sida under förkonditionering.

(-) - OSU6162 påverkar inte minnesförvärv i det nya objektigenkänningstestet

I NOR-testet hade råttor ett signifikant högre diskrimineringsförhållande efter ett intervall mellan 2-timmen, jämfört med ett intervall mellan 24-timmen (Fig. 5a), bekräftar att råttorna, under testsessionen, kom ihåg det objekt som infördes under träningspasset som genomfördes två timmar tidigare. Följaktligen användes ett 2-timmars korsningsintervall för att testa OSU2: s förmåga att påverka minnesförvärv hos långvariga drickråttor. Resultaten visade ingen signifikant skillnad i total tid för att utforska de två objekten under träningspasset mellan de OSU6162-behandlade eller fordonsbehandlade råttorna (Fig. 5b). Både OSU6162-behandlade och vehikelbehandlade råttor hade ett diskrimineringsförhållande över 0.5 under testperioden (utan signifikanta skillnader mellan behandlingarna; 5c), vilket indikerar en funktionell minnesförvärv.

 

Figur 5.

Figur 5. (-) - OSU6162 (OSU6162) försämrade inte objektminnet 2 timmar efter objektpresentation. Råttor fick utforska två identiska objekt under 2 minuter under ett träningspass, och efter ett 2- eller 24-timmarsintervallintervall presenterades råttor med ett välbekant objekt från träningspasset och ett nytt objekt under 5 minuters testperiod . Ett diskrimineringsförhållande (medelvärde ± SEM, utforskning av nytt objekt dividerat med utforskning av båda föremålen) över 0.50 under testfasen indikerar minnet av det välbekanta objektet. (a) Råttor kom ihåg det välbekanta föremålet efter en 2-timmars, men inte efter ett 24-timmars, korsningsintervall (n = 16 per tillstånd). (b) Den totala tiden som spenderades för att utforska båda föremålen under träningspasset skilde sig inte signifikant mellan OSU6162-behandlade (30 mg / kg, sc; n = 8, 60 minuter före S1) och fordonsbehandlade råttor (n = 8). (c) Med användning av ett intermittensintervall på 2 timmar fanns det ingen signifikant skillnad på diskrimineringsförhållandet mellan OSU6162-behandlade och vehikelbehandlade råttor under testperioden. Alla värden uttrycks som medelvärde ± SEM. Data analyserades med hjälp av oparad Student's t-test inom varje session; *** P <0.001 jämfört med 24-timmars interessionsintervallet

Diskussion

I den föreliggande studien, Vi visade för första gången att monoaminstabilisatorn OSU6162 motverkar dopaminunderskott i NAc under uttag i långsiktiga, drickande Wistar-råttor. Vidare visade vi att OSU6162 inte belönade på egen hand, mätt av CPP, och har därför sannolikt ingen missbruksansvar. Sammantaget stöder dessa resultat vår tidigare studie som visar att OSU6162 (i samma dos som utvärderats i föreliggande studie) dämpar flera alkoholmedierade beteenden hos långvariga råttor (Steens et al,. 2012) och har därmed potential som en ny AUD-medicinering.

Den föreliggande studien indikerar att 10 månader av frivilligt alkoholintag (IA20E) inducerar ett hypodopaminerat tillstånd i NAc jämfört med ålders-matchade alkohol-naiva råttor. Först reducerades den basala dopaminutgången (fmol-värden) signifikant efter 24-timmar med uttag, vilket stödde en annan mikrodialysstudie visar liknande resultat i Wistar-råttor efter 7-veckor av IA20E (Barak et al,. 2011). Dessa resultat visar vidare att effekterna av alkoholdryck på dopaminsystemet är långvariga, vilket står i kontrast till en tidigare studie som visar ett minskat dopaminreceptor-genuttryck efter 4 månader, men inte 10 månader, av alkoholdryck (Jonsson et al,. 2014). Det bör dock noteras att ett ganska lågt alkoholintag och kontinuerligt tillträdesschema kan bero på bristen på långvariga långvariga effekter i den senare studien. För det andra fanns det ett trubbigt dopamin-svar efter en systemisk alkoholutmaning vid långvarigt drickning jämfört med alkohol-naiva råttor, som stödde hjärnbildningsstudier som visade reducerat centralt stimulant-inducerat dopaminfrisättning i avgiftade alkoholberoende patienter (Martinez et al,. 2005; Volkow et al,. 2007). Slutligen minskade dopaminproduktionen under baslinjevärdena efter att den alkoholinducerade dopamin-toppen upphörde. Sammantaget resulterar de nuvarande mikrodialyserna, som visar ett hypo-fungerande dopamin-system efter 10-månader av frivilligt intermittent intag av höga alkoholer, stöd för hypotesen att kronisk alkoholkonsumtion bidrar till ett nedreglerat dopamin-system hos alkoholberoende patienter, en stat som har föreslagits vara förknippade med dysfori, vilket i sin tur kan utlösa alkoholbehov som leder till återfall i AUD-patienter (Weiss et al,. 1996; Nåd 2000; Diana 2011; Becker och Mulholland 2014).

Vi har tidigare fastställt att monoaminstabilisatorn OSU6162 dämpar frivillig alkoholdryck, alkoholsökning, cue / priming-inducerad återinställning och abstinensliknande symtom hos långvariga råttor (Steensland et al,. 2012). Dessutom visade vår tidigare studie att OSU6162 avstoppade en alkoholinducerad dopamin topp i NAc av alkohol-naiva råttor (Steensland et al,. 2012). Den nuvarande mikrodialysstudien som genomfördes på långvariga råttor visade emellertid att OSU6162, jämfört med förbehandling av vehikel, inte hade någon signifikant effekt på den alkoholinducerade dopamin-toppen. De kontrasterande mikrodialysresultaten i alkohol-drickande kontra alkohol-naiva råttor ledde oss till att förkasta vår tidigare hypotes att OSU6162 försvagar alkoholmedierat beteende genom att stumpa alkoholens givande egenskaper (Steens et al,. 2012). jagnstead visar de nuvarande resultaten att OSU6162 har förmågan att motverka det hypodopaminerga tillståndet som induceras genom långvarig dricks. Denna hypotes stöds av de nuvarande resultaten att OSU6162 ensamt inducerade en långvarig ökning av NAc-dopaminutgången och att OSU6162-förbehandling hindrade dopaminutgången från att sjunka under baslinjevärdena efter att den alkoholinducerade NAc-dopamin-toppen upphörde under den långa -term dricka råttor. Detta förslag stöds ytterligare av en tidigare studie som visar att råttor som utsätts för alkoholavdrag själv administrerar tillräckligt med alkohol för att returnera dopaminutgången tillbaka till baslinjen (Weiss et al,. 1996) och hypotesen att ett hypodopaminerat tillstånd under AUD driver alkoholbehov, tvångsdrickning och ökad risk för återfall (Diana 2011). Således är det möjligt att OSU6162, genom sin förmåga att motverka ett alkoholinducerat hypodopaminerat tillstånd, dämpar frivilligt alkoholmedierat beteende genom att minska drömen att dricka alkohol.

Den exakta mekanismen bakom OSU6162: s förmåga att motverka det NAc hypo-dopaminergiska tillståndet i de långvariga drickråttorna är fortfarande okänt. Ändå har OSU6162 föreslagits för att förbättra dopaminaktiviteten genom att verka som följer: (1) en antagonist vid D2-autoreceptorer och därigenom desinficerar den negativa återkopplingen av dopaminfrisättning (Carlsson et al,. 2004) eller (2) en allosterisk modulator vid postsynaptiska D2-receptorerna, varigenom effekterna av dopamin (Kara et al,. 2010). En ökning av dopaminnivåerna som registrerats genom mikrodialys, efter OSU6162-behandling i föreliggande studie, indikerar antingen en ökad dopaminfrigöring eller ett minskat återupptag av dopamin. De nuvarande resultaten visade att OSU6162 långsamt ökade och bibehöll både dopamin- och DOPAC-utsignalen förhöjd ovanför baslinjen i en liknande utsträckning (en indikation på en ökning av dopaminfrisättning istället för ett minskat dopaminreopptag) och sålunda indikerar att antagonism vid den presynaptiska autoreceptorn är den mest troliga mekanismen. Dessutom var den OSU6162-inducerade dopaminhöjningen mer långvarig i alkoholdrottande råttor i den föreliggande studien jämfört med den som tidigare har observerats hos alkohol-naiva råttor (Steens et al,. 2012), sidsynligt på grund av ökad D2 autoreceptor känslighet, som tidigare har visats hos aber efter 18 månader av frivillig alkoholkonsumtion (Budygin et al,. 2003) och hos möss som använder det kroniska intermittenta etanol-exponeringsparadigmet (Karkhanis et al,. 2015). Det bör dock noteras att den alkohol-naiva råttan i vår tidigare studie (Steensland et al,. 2012) var några månader yngre än de långsiktiga råttorna i den nuvarande studien. Således föreligger möjligheten att de observerade differentialeffekterna av OSU6162 hos alkohol-naiva mot alkoholdrottande råttor kan bero på åldersrelaterade skillnader i dopaminsystemet. Slutligen visade en ny studie med optogenetik att tonisk (låg men långvarig) men inte fasisk (stor men kortlivad) dopaminfrisättning i NAc minskade frivilligt alkoholintag hos råttor som hade genomgått IA20E-proceduren för 7 veckor (Bas et al,. 2013). Dessa resultat stöder vår övergripande tolkning att OSU6162: s förmåga att inducera stabila, förhöjda dopaminnivåer kan vara nyckelfunktionen i föreningens förmåga att dämpa alkoholmedierat beteende hos råttor.

När det gäller OSU6162s potentiella terapeutiska tillämpbarhet i en patientpopulation med AUD bör det noteras att de nuvarande och tidigare fynd som visar att OSU6162 ökar NAc-dopaminproduktionen vid långvarig drickning, såväl som alkoholnaiva råttor, kan möjligen indikera missbruk ansvar. Till skillnad från den snabba toppen som vanligtvis förknippas med de förstärkande effekterna av alkohol och andra missbrukande droger (Di Chiara och Imperato 1988; Volkow och Swanson 2003), den OSU6162-inducerade dopaminökningen var långsam och långvarig i både alkoholdryck och alkohol-naiva råttor. Dessutom inducerade OSU6162 inte en CPP i antingen långsiktiga dricks- eller alkohol-naiva råttor. Möjligheten att en försämrad förmåga att lära sig sambandet mellan de potentiella förstärkande effekterna och den parade kammaren var orsaken till bristen på en OSU6162-inducerad CPP uteslutes genom att finna att OSU6162-behandlade råttor lätt diskriminerade mellan ett nytt och välbekant objekt i NOR-paradigmet. Vidare visade en nyligen genomförd studie att OSU6162-behandling faktiskt förbättrade objektplatsminne (involverande association med rumsliga signaler) (Nilsson och Carlsson 2013), vilket indikerar att OSU6162-behandling ökar kognitiva egenskaper i ett naturligt förglömt paradigm. Sammantaget indikerar dessa resultat att OSU6162 sannolikt inte har några förstärkande egenskaper i sig och argumenterar mot ett potentiellt missbrukansvar.

Sammanfattningsvis stärker den nuvarande studien som visar en minskad basal dopaminproduktion i NAc av långvariga Wistar-råttor, hypotesen att kronisk alkoholkonsumtion inducerar ett hypodopaminerat tillstånd hos AUD-patienter. Vidare visar vi för första gången att monoaminstabilisatorn OSU6162 har förmågan att motverka dessa allostatiska förändringar inom mesolimbisk dopamin-system inducerad av cykler av långvarig frivillig alkoholkonsumtion och perioder av abstinens. Slutligen indikerar nuvarande resultat att OSU6162 inte har någon överföringsansvar. TDessa resultat tillsammans med vår senaste "proof-of-concept" humana laboratoriestudie som visar att OSU6162 dämpar priming-inducerad begär och gillande av den konsumerade alkoholen hos alkoholberoende patienter (opublicerade resultat från vår forskargrupp) och föreningens gynnsamma bieffekt profil (Johansson et al,. 2012; Kloberg et al,. 2014) förtjänar ytterligare utvärdering av OSU6162s kliniska effekt för att dämpa alkoholanvändningen hos AUD-patienter.

Tack

Vi tackar Dr. Arvid Carlsson, Sahlgrenska akademin, Göteborgs universitet, för den generösa donationen av OSU6162 (levererad till Dr. Arvid Carlsson av Pfizer Pharmaceuticals, Inc.), värdefulla kommentarer om manuskriptet och inspirerande diskussioner om resultaten presenterade i nuet manuskript. Vi tackar teknikerna Monica Aronsson, Linnea Tankred och studenterna Weinni Mussie, Carolina Bengtsson-Gonzales och Mohammed Elhassan för utmärkt hjälp med experimenten. Studien finansierades av Vetenskapsrådet (2009-2612), Karolinska Institutets forskningsfonder, Forskningsrådet för Swedish Alcohol Retailing Monopol (FO2012-0053), Torsten Söderberg Foundation (M203 / 12), Swedish Brain Foundation ( FO2011-0106, FO2012-0083 och FO2013-0042) och Vetenskapsrådet för hälsa, arbetsliv och välfärd (2013–1781) till PS

Upplysningar / intressekonflikter

Ingen av författarna förklarar några biomedicinska ekonomiska intressen eller intressekonflikter.

Författarnas bidrag

Författare KF, BS och PS konstruerade, analyserade och tolkade data från mikrodualys-experimentet. KF och PS konstruerade, analyserade och tolkade data från NOR-experimentet. KF utförde mikrodialysen och NOR-experimenten. IF och PS designade analyserade och tolkade data CPP-experimenten. IF och MW utförde CPP-experimenten. KF, IF och PS skrev det första utkastet till manuskriptet. Alla författare bidrog till och godkände den slutliga versionen av manuskriptet.

referenser

  • Anton RF, O'Malley SS, Ciraulo DA, Cisler RA, Couper D, Donovan DM, Vänner DR, Hosking JD, Johnson BA, LoCastro JS, Longabaugh R, Mason BJ, Mattson ME, Miller WR, Pettinati HM, Randall CL, Swift R, Weiss RD, Williams LD, Zweben A, Grupp CSR (2006) Kombinerade farmakoterapier och beteendeinterventioner för alkoholberoende: COMBINE-studien: En randomiserad kontrollerad studie. JAMA 295:2003-2017.
  • Barak S, Carnicella S, Yowell QV, Ron D (2011) Gliacellcellsavledad neurotrofisk faktor reverserar alkoholinducerad allostas av det mesolimbiska dopaminerge systemet: konsekvenser för alkoholbelöning och sökande. Journal of Neuroscience: Den officiella tidningen för Society for Neuroscience 31:9885-9894.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 23
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 8
  • CrossRef,
  • PubMed
  • Bas CE, Grinevich VP, Gioia D, Dag-Brun JD, Bonin KD, Stuber GD, Weiner JL, Budygin EA (2013) Optogenetisk stimulering av VTA dopaminneuroner avslöjar att toniska men inte fasiska mönster av dopaminöverföring minskar etanol självförvaltning. Gränser i beteende neurovetenskap 7:173.
  • Becker HC, Mulholland PJ (2014) Neurokemiska mekanismer för återtag av alkohol. Handb Clin Neurol 125:133-156.
  • Boileau I, Assaad JM, Pihl RO, Benkelfat C, Leyton M, Diksic M, Tremblay RE, Dagher A (2003) Alkohol främjar dopaminfrisättning i humankärnans accumbens. Synapsen 49:226-231.

Direktlänk:

  • Brunetti M, Di Tizio L, Dezi S, Pozzi G, Grandinetti P, Martinotti G (2012) Aripiprazol, alkohol och drogmissbruk: en recension. Eur Rev Med Pharmacol Sci 16:1346-1354.
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 9
  • Budygin EA, John CE, Mateo Y, Daunais JB, Friedman DP, Grant KA, Jones SR (2003) Kronisk etanolexponering förändrar presynaptisk dopaminfunktion i striatum av apor: en preliminär studie. Synapsen 50:266-268.

Direktlänk:

  • Carlsson ML, Carlsson A, Nilsson M (2004) Schizofreni: från dopamin till glutamat och tillbaka. Curr Med Chem 11:267-277.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 94
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 9
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 8
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 124
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • ADS
  • CrossRef
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 1
  • Carlsson ML, Burstein ES, Kloberg A, Hansson S, Schedwin A, Nilsson M, Rung JP, Carlsson A (2011) I. In vivo-bevis för partiella agonistverkningar av (-) - OSU6162 och (+) - OSU6162 på 5-HT2A serotoninreceptorer. J Neural Transm 118:1511-1522.
  • Carnicella S, Ron D, Barak S (2014) Intermittent etanolåtkomstschema hos råttor som en preklinisk modell för alkoholmissbruk. Alkohol 48:243-252.
  • Cunningham CL, Gremel CM, Groblewski PA (2006) Droginducerad konditionerad platspreferens och aversion hos möss. Nat Protoc 1:1662-1670.
  • Di Chiara G, Imperato A (1988) Läkemedel som missbrukas av människor ökar företrädesvis synaptiska dopaminkoncentrationer i mesolimbic-systemet med fritt rörliga råttor. Proc Natl Acad Sci USA 85:5274-5278.
  • Diana M (2011) Dopaminhypotesen om narkotikamissbruk och dess potentiella terapeutiska värde. Främre psykiatr 2:64.
  • Fredriksson I, Jayaram-Lindstrom N, Wirf M, Nylander E, Nystrom E, Jardemark K, Steensland P (2015) Utvärdering av guanfacin som en potentiell medicin för alkoholanvändning hos långvariga råttor: beteende- och elektrofysiologiska fynd. Neuropsychopharmacology 40:1130-1140.
  • Grace AA (2000) Tonik / fasform av dopaminsystemreglering och dess konsekvenser för att förstå alkohol och psykostimulerande begär. Addiction 95:S119-128.

Direktlänk:

  • Heinz A, Siessmeier T, Wrase J, Hermann D, Klein S, Grusser SM, Flor H, Braus DF, Buchholz HG, Grunder G, Schreckenberger M, Smolka MN, Rosch F, Mann K, Bartenstein P (2004) Korrelation mellan dopamin D (2) receptorer i ventralstriatum och central behandling av alkoholvaror och begär. Am J Psykiatri 161:1783-1789.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 257
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 148
  • Hietala J, Väst c, Syvalahti E, Nagren K, Lehikoinen P, Sonninen P, Ruotsalainen U (1994) Striatal D2 dopaminreceptorbindande egenskaper in vivo- hos patienter med alkoholberoende. Psykofarmakologi (Berl) 116:285-290.
  • Hopf FW, Chang SJ, Sparta DR, Bowers MS, Bonci A (2010) Motivation för alkohol blir resistent mot kininförfalskning efter 3 till 4 månader av intermittent alkohol självadministrering. Alkoholklin Exp Exp 34:1565-1573.

Direktlänk:

  • Jerlhag E, Egecioglu E, Landgren S, Salome N, Heilig M, Moechars D, Datta R, Perrissoud D, Dickson SL, Engel JA (2009) Krav på central ghrelinsignalering för alkoholbelöning. Proc Natl Acad Sci USA 106:11318-11323.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 141,
  • ADS
  • Johansson B, Carlsson A, Carlsson ML, Karlsson M, Nilsson MKL, Nordquist-Brandt E, Rönnbäck L (2012) Placebokontrollerad korsningsstudie av den monoaminerge stabilisatorn (-) - OSU6162 i mental utmattning efter stroke eller traumatisk hjärnskada. Acta Neuropsychiatrica 24:266-274.

Direktlänk:

  • Jonsson S, Ericson M, Soderpalm B (2014) Modest långtidseetanolförbrukning påverkar uttryck av neurotransmittorreceptorgener i råttkärnans accumbens. Alkoholklin Exp Exp 38:722-729.

Direktlänk:

  • Joos L, Goudriaan AE, Schmaal L, Fransen E, van den Brink W, Sabbe BG, Dom G (2013) Effekt av modafinil på impulsivitet och återfall hos alkoholberoende patienter: En randomiserad, placebokontrollerad studie. European Neuropsychopharmacology: Journal of European College of Neuropsychopharmacology 23:948-955.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 10
  • Kara E, Lin H, Svensson K, Johansson AM, Konstigt PG (2010) Analys av åtgärderna hos de nya dopaminreceptor-riktade föreningarna (S) -OSU6162 och ACR16 vid D2 dopaminreceptorn. Br J Pharmacol 161:1343-1350.

Direktlänk:

  • Karami M, Zarrindast MR (2008) Morfin, sexberoende inducerad konditionering hos vuxna Wistar-råttor. Eur J Pharmacol 582:78-87.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 13
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 1
  • Web of Science® Times citerade: 1
  • CrossRef,
  • Web of Science® Times citerade: 2,
  • ADS
  • Karkhanis AN, Rose JH, Huggins KN, Konstantopoulos JK, Jones SR (2015) Kronisk intermittent etanolexponering minskar presynaptisk dopamin-neurotransmission i muskelkärnans accumbens. Drogalkohol Beroende 150:24-30.
  • Kloberg A, Constantinescu R, Nilsson MK, Carlsson ML, Carlsson A, Wahlstrom J, Haghighi S (2014) Tolerabilitet och effekt av den monoaminerga stabilisatorn (-) - OSU6162 (PNU-96391A) vid Huntingtons sjukdom: en dubbelblind cross-over-studie. Acta Neuropsychiatrica. Officieel Wetenschappelijk Orgaan van Het IGBP (Interdisciplinary Genootschap voor Biologische Psychiatrie) 26:298-306.
  • Kumakura Y, Gjedde A, Caprioli D, Kienast T, Beck A, Plotkin M, Schlagenhauf F, Vernaleken I, Grunder G, Bartenstein P, Heinz A, Cumming P (2013) Ökad omsättning av dopamin i caudatkärnan av avgiftade alkoholhaltiga patienter. PLoS One 8e73903 :.
  • Lido HH, Stomberg R, Fagerberg A, Ericson M, Soderpalm B (2009) Glycinreceptionshämmaren org 25935 interagerar med basal och etanolinducerad dopaminfrigöring i råttkärnan accumbens. Alkoholklin Exp Exp 33:1151-1157.

Direktlänk:

  • Litten RZ, Ryan ML, Fertig JB, Falk DE, Johnson B, Dunn KE, Grön AI, Pettinati HM, Ciraulo DA, Sarid-Segal O, Kampman K, Brunett MF, Stam EC, Tiouririne NA, Ransom J, Scott C, Stout R, Grupp NS (2013) En dubbelblind, placebokontrollerad studie som utvärderar effekten av vareniclin tartrat för alkoholberoende. J Addiction Med 7:277-286.
  • CrossRef,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 32
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science®
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 187
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 40
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 1
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 784
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 21
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 140
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 17
  • Malmlöf T, Feltmann K, Konradsson-Geuken A, Schneider F, Alken RG, Svensson TH, Schilström B (2015) Deuterium-substituerade l-DOPA visar ökad beteendestyrka och dopaminproduktion i en djurmodell av Parkinsons sjukdom: jämförelse med effekterna av l-DOPA och en MAO-B-hämmare. J Neural Transm 122:259-272.
  • Martinez D, Gil R, Slifstein M, Hwang DR, Huang Y, Perez A, Kegeles L, Talbot P, Evans S, Krystal J, Laruelle M, Abi-Dargham A (2005) Alkoholberoende är förknippat med trubbig dopaminöverföring i ventralstriatumet. Biolpsykiatri 58:779-786.
  • Natesan S, Svensson KA, Hänsynslös GE, Nobrega JN, Barlow KB, Johansson AM, Kapur S (2006) Dopaminstabilisatorerna (S) - (-) - (3-metansulfonylfenyl) -1-propyl-piperidin [(-) - OSU6162] och 4- (3-metansulfonylfenyl) -1-propyl-piperidin (ACR16) in vivo- D2-receptorbeläggning, antipsykotisk liknande effekt och låg potential för motoriska biverkningar hos råtta. J Pharmacol Exp Ther 318:810-818.
  • Nilsson MK, Carlsson ML (2013) Den monoaminerge stabilisatorn (-) - OSU6162 reverserar fördröjningsberoende naturlig förglömning och förbättrar minnesförlust som induceras av scopolamin hos möss. Neuro 75:399-406.
  • Rehm J, Mathers C, Popova S, Thavorncharoensap M, Teerawattananon Y, Patra J (2009) Global sjukdomsskada och skada och ekonomisk kostnad som kan hänföras till alkoholanvändning och alkoholanvändning. Lansetten 373:2223-2233.
  • Rung JP, Rung E, Helgeson L, Johansson AM, Svensson K, Carlsson A, Carlsson ML (2008) Effekter av (-) - OSU6162 och ACR16 på motorisk aktivitet hos råttor, vilket indikerar en unik mekanism för dopaminerg stabilisering. J Neural Transm 115:899-908.
  • Schilström B, Nomikos GG, Nisell M, Hertel P, Svensson TH (1998) N-metyl-d-aspartatreceptorantagonism i det ventrala tegmentala området minskar den systemiska nikotininducerade dopaminfrisättningen i kärnan accumbens. Neuroscience 82:781-789.
  • Seeman P, Guan HC (2007) Dopamin partiell agonistverkan av (-) OSU6162 överensstämmer med dopamin hyperaktivitet i psykos. Eur J Pharmacol 557:151-153.
  • Simms JA, Steensland P, Medina B, Abernathy KE, Chandler LJ, Wise R, Bartlett SE (2008) Intermittent tillgång till 20% etanol inducerar hög etanolförbrukning hos Long Evans och Wistar råttor. Alkoholklin Exp Exp 32:1816-1823.

Direktlänk:

  • Sonesson C, Lin CH, Hansson L, Vatten N, Svensson K, Carlsson A, Smith MW, Wikstrom H (1994) Substituerade (S) -fenylpiperidiner och styva congenerer som preferentiella dopamin-autoreceptorantagonister: syntes- och struktur-aktivitetsrelationer. J Med Chem 37:2735-2753.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 76
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 175,
  • ADS
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 17
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 13
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 1
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 126
  • Steensland P, Simms JA, Holgate J, Richards JK, Bartlett SE (2007) Vareniclin, en alfa4beta2 nikotin acetylkolinreceptor partiell agonist, selektivt minskar etanolförbrukningen och söker. Proc Natl Acad Sci USA 104:12518-12523.
  • Steensland P, Fredriksson I, Holst S, Feltmann K, Franck J, Schilström B, Carlsson A (2012) Monoaminstabilisatorn (-) - OSU6162 dämpar frivilligt etanolintag och etanolinducerad dopaminutgång i kärnan accumbens. Biolpsykiatri 72:823-831.
  • Swift R (2010) Medicin som verkar på det dopaminerga systemet vid behandling av alkoholiska patienter. Curr Pharm Des 16:2136-2140.
  • Tolboom N, Berendse HW, Leysen JE, Yaqub M, van Berckel BN, Schuit RC, Ponsen MM, Bakker E, Hoetjes NJ, Windhorst AD, Carlsson ML, Lammertsma AA, Carlsson A (2015) Dopaminstabilisatorn (-) - OSU6162 upptar en subpopulation av striataldopamin D2 / D3 receptorer: en [C] racloprid PET-studie hos friska humana personer. Neuropsychopharmacology 40:472-479.
  • Tupala E, Tiihonen J (2004) Dopamin och alkoholism: neurobiologisk grund för etanol missbruk. Prog Neuropsychopharmacol Biolpsykiatri 28:1221-1247.
  • Tzschentke TM (2007) Mäta belöning med CPP-paradigmet (CPP): uppdatering av det senaste decenniet. Addict Biol 12:227-462.

Direktlänk:

  • Volkow ND, Swanson JM (2003) Variabler som påverkar klinisk användning och missbruk av metylfenidat vid behandling av ADHD. Am J Psykiatri 160:1909-1918.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 218
  • Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Logan J, Hitzemann R, Ding YS, Pappas N, Shea C, Piscani K (1996) Minskar dopaminreceptorer men inte i dopamintransportörer hos alkoholister. Alkoholklin Exp Exp 20:1594-1598.

Direktlänk:

  • Volkow ND, Wang GJ, Telang F, Fowler JS, Logan J, Jayne M, Maj, Pradhan K, Wong C (2007) Dämpande minskningar av dopaminfrisättning i striatum i avgiftade alkoholister: möjlig orbitofrontal involvering. Journal of Neuroscience: Den officiella tidningen för Society for Neuroscience 27:12700-12706.
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 151
  • PubMed,
  • Web of Science® Times citerade: 262
  • CrossRef,
  • PubMed,
  • CAS,
  • Web of Science® Times citerade: 146
  • Weiss F, Parsons LH, Schulteis G, Hyytia P, Lorang MT, Bloom FE, Koob GF (1996) Ethanol-självadministration ger återhämtningsrelaterade brister vid ackumbal dopamin och 5-hydroxytryptaminfrisättning i beroende råttor. Journal of neuroscience: den officiella tidningen för Society for Neuroscience 16:3474-3485.
  • Wise RA (1973) Frivilligt etanolintag hos råttor efter exponering för etanol på olika scheman. Psychopharmacologia 29:203-210.