Amfetamin förändrar beteende och mesokortikolimbisk dopaminreceptoruttryck i den monogamiska kvinnliga prairie vole (2011)

Brain Res. Författarens manuskript; tillgänglig i PMC Jul 25, 2011.

Publicerad i slutredigerad form som:

PMCID: PMC3143067

NIHMSID: NIHMS312646

Förlagets slutredigerade version av denna artikel finns tillgänglig på Brain Res

Se andra artiklar i PMC som citerar den publicerade artikeln.

Gå till:

Abstrakt

Vi har nyligen etablerat den socialt monogamiska prairie vole (Microtus ochrogaster) som en djurmodell för att undersöka inblandning av mesokortikolimbisk dopamin (DA) i amfetamin (AMPH) -inducerad försämring av socialt beteende. Eftersom majoriteten av vårt arbete hittills har fokuserat på män, och könsmässiga skillnader rapporteras vanligtvis i beteendemässiga och neurobiologiska svar på AMPH, var den aktuella studien avsedd att undersöka beteende- och neurobiologiska effekter av AMPH-behandling i kvinnliga prärievolymer. Vi använde en CPP-paradigm för att bestämma en dosresponsskurva för AMPH: s beteendeeffekter hos kvinnliga prairievolymer och fann att konditionering med låg till mellanprodukt (0.2 och 1.0 mg / kg) men inte mycket lågt ( 0.1 mg / kg), doser av AMPH inducerade en CPP. Vi fann också att exponering för en beteendemässigt relevant dos av AMPH (1.0 mg / kg) inducerade en ökning av DA-koncentrationen i Nucleus Accumbens (NAcc) och caudate putamen men inte medial prefrontal cortex eller ventral Tegmental Area (VTA). Slutligen ökade upprepad AMPH-exponering (1.0 mg / kg en gång per dag i 3 på varandra följande dagar; ett injektionsparadigm som nyligen har visat sig förändra DA-receptoruttryck och försämrar social bindning i manliga prärievolymer) ökade D1, men inte D2, receptor-mRNA i NAcc och minskad D2-receptor-mRNA och D2-liknande receptorbindning i VTA. Tillsammans indikerar dessa data att AMPH förändrar mesokortikolimbisk DA-neurotransmission på region- och receptorspecifik sätt, vilket i sin tur kan få djupa konsekvenser för socialt beteende hos kvinnliga prärievolymer.

Nyckelord: Psychostimulant, Nucleus accumbens, Ventral tegmental area, Autoreceptor, Par bonding, Conditioned place preference

1. Inledning

Misbruk av droger anses utöva sin kraftfulla kontroll över beteendet, delvis, genom deras effekter på det mesokortikolimbiska dopamin-systemet (DA) (Kelley och Berridge, 2002; Nesse och Berridge, 1997; Nestler, 2004, 2005; Panksepp et al., 2002), en neuralkrets som består av DA-producerande celler som härrör från det ventrala tegmentala området (VTA) och projekterar till olika förebildsregioner, inklusive medial prefrontal cortex (PFC) och nucleus accumbens (NAcc). Denna starkt konserverade neurala krets, som spelar en viktig roll i genereringen av adaptiva målriktade beteenden (Zahm, 2000) - inklusive beteenden allmänt förekommande för alla djur (t.ex. utfodring (Narayanan et al., 2010; Palmiter, 2007)) och de som är artspecifika (t.ex. parbindning i monogamiska arter (Aragona och Wang, 2009; Curtis et al., 2006; Young et al., 2010)) - förändras väsentligt genom exponering för missbruk. Exempelvis resulterar akut och / eller upprepad exponering för psykostimulanta läkemedel av missbruk, såsom kokain eller amfetamin (AMPH), förändrad DA-frisättning, DA-receptoruttryck och känslighet och neuronal morfologi inom mesokortikolimbiska hjärnregioner (Henry et al., 1989; Henry och White, 1995; Hu et al., 2002; Nestler, 2005; Pierce och Kalivas, 1997; Robinson et al., 2001, 1988; Robinson och Kolb, 1997; Vit och Kalivas, 1998). Det anses att dessa neuroadaptationer kan ligga till grund för läkemedelsinducerade förändringar i djurbeteende (Robinson och Becker, 1986), inklusive sociala beteenden (för granskning, se (Young et al., 2011)).

Det senaste arbetet från vårt laboratorium har etablerat prairie vole som en djurmodell för att undersöka engagemang av mesokortikolimbic DA i effekterna av missbruksmissbruk på socialt beteende (Liu et al., 2010). Prairievoles är socialt monogamiska gnagare som utgör preferenser för en välbekant partner (dvs. partnerpreferenser) efter utökad samlevnad och / eller parning (Insel et al., 1995; Williams et al., 1992; Winslow et al., 1993) och mesokortikolimbisk DA - särskilt DA-neurotransmission i NAcc - är väsentlig för denna process (Aragona et al., 2003, 2006; Aragona och Wang, 2009; Curtis et al., 2006; Gingrich et al., 2000; Liu och Wang, 2003; Wang et al., 1999; Young et al., 2010). Intressant är att exponering för AMPH väsentligt förändrar mesokortikolimbisk DA-aktivitet och neurotransmission hos manliga prärievolymer. Exempelvis ökade en enda AMPH-injektion signifikant extracellulära DA-nivåer i NAcc (Curtis och Wang, 2007). Vidare förändrade tre dagar med AMPH-exponering, som inducerade bildandet av en konditionerad platspreferens (CPP) när den parades med ett miljökontext, förändrat DA-receptoruttryck i NAcc på ett receptorspecifikt sätt (Liu et al., 2010). Det är viktigt att samma läkemedelsbehandling inhiberade bildandet av parningsinducerade partnerpreferenser, vilket indikerar att AMPH-inducerade förändringar i mesokortikolimbisk DA-neurotransmission kan ligga till grund för AMPH-inducerad försämring av parbindning i denna art (Liu et al., 2010).

Även om de studier som beskrivits ovan har fastställt prairie vole som en utmärkt modell för att undersöka AMPH-inducerad försämring av social bindning och dess underliggande neurala mekanismer, utfördes de uteslutande hos män. Därför vet vi väldigt lite om AMPHs beteendemässiga och neurobiologiska effekter i kvinnliga prärievolymer. Det finns bevis för att kvinnliga prärievolymer är känsligare för AMPH än manliga prärievolymer (Aragona et al., 2007) och studier i andra arter rapporterar vanligtvis könsskillnader i både beteendemässiga och neurobiologiska effekter av AMPH och andra psykostimulanta droger av missbruk (Becker och Hu, 2008; Fattore et al., 2008; Lynch, 2006). Till exempel visar honråttor större rörelseaktivitet och en snabbare induktion av beteendssensibilisering som svar på AMPH (Camp och Robinson, 1988), förvärva kokain och metamfetamin självadministration snabbare (Hu et al., 2004; Lynch, 2006; Lynch och Carroll, 1999; Roth och Carroll, 2004), och visa en högre grad av motivation för att erhålla psykostimulanter (Roberts et al., 1989; Roth och Carroll, 2004) än män. Dessutom har könskillnader noterats i det neurobiologiska svaret på psykostimulanter, inklusive skillnader i AMPH-inducerad DA-frisättning (Becker, 1990; Becker och Ramirez, 1981), DA-metabolism (Camp och Robinson, 1988) och omedelbart tidigt genuttryck (Castner och Becker, 1996). Att undersöka de neurobiologiska effekterna av AMPH hos kvinnliga prärievolymer är därför avgörande för att fullt ut fastställa prairiemodellmodellen för studier som undersöker sambandet mellan missbruk, socialt beteende och mesokortikolimbisk DA.

Den aktuella studien var utformad för att undersöka de beteendemässiga och neurobiologiska effekterna av AMPH-exponering i den kvinnliga prairie vole. Vi använde ett CPP-paradigm som tidigare fastställdes i manliga prärievolymer (Liu et al., 2010) för att undersöka beteendets relevans hos olika doser AMPH hos kvinnor. Som kvinnor tenderar att visa en större beteendemässig känslighet för AMPH än män (Aragona et al., 2007; Becker et al., 2001; Camp och Robinson, 1988), antog vi att kvinnliga prärievolymer skulle bilda en CPP vid lägre doser AMPH än de som rapporterats för män. Vi undersökte också effekterna av AMPH-exponering på DA-koncentration och DA-receptorgenuttryck och bindning i olika mesokortikolimbiska hjärnregioner. Vi antog att AMPH-exponering skulle förändra DA-koncentration och DA-receptoruttryck på ett receptor- och regionspecifikt sätt. Resultat från den aktuella studien kommer att ge användbar insikt för framtida arbete som undersöker effekterna av AMPH på socialt beteende hos kvinnor av denna art.

2. Resultat

2.1. Experiment 1: AMPH-konditioneringsinducerad CPP

Experiment 1 upprättade en dosresponsskurva för AMPH-inducerad CPP hos kvinnliga prairievolymer. För att i slutändan jämföra dosresponsskurvan hos honor till män, använde vi ett konditioneringsparadigm som var identiskt med det som nyligen utvecklats i manliga prärievolymer (Liu et al., 2010). Ämnen fördelades slumpmässigt i en av fyra experimentella grupper som differentierades av koncentrationen av AMPH [0.0 (n= 20), 0.1 (n= 8), 0.2 (n= 12) eller 1.0 mg / kg (n= 13)] de fick under AMPH-konditioneringssessioner (se Experimentella procedurer för detaljer). Alla ämnen testades för närvaron av en CPP i ett drogfritt tillstånd dagen efter den slutliga konditioneringssessionen. En CPP definierades av en signifikant ökning av tiden som användes i den läkemedelsparade buret under efterprovet jämfört med förprovet.

Ämnen behandlade med saltlösning ensam [0.0 mg / kg; t(19)= 1.65; p<0.12] eller saltlösning innehållande den lägsta [0.1 mg / kg; t(7)= 1.89; p<0.90] koncentration av AMPH tillbringade statistiskt lika mycket tid i den läkemedelsparade kammaren före och efter konditionering och bildade därför inte CPP (Fig. 1A). Istället behandlades ämnen behandlade med 0.2 [t(11)= 2.77; p<0.02] eller 1.0 mg / kg [t(12)= 2.53; p<0.03] AMPH visade en robust CPP, eftersom de tillbringade betydligt mer tid i den drogparade kammaren under posttestet än för-testet (Fig. 1A). Inga skillnader i lokomotorisk aktivitet noterades inom eller mellan grupper antingen före eller efter läkemedelsbehandling (Fig. 1B).

Fig 1 

Amfetamin (AMPH) -inducerad konditionerad platspreferens (CPP) och lokomotorisk aktivitet hos kvinnliga prairievolymer. Kvinnor som fick 0.0 (endast saltlösning) eller 0.1 mg / kg AMPH under 3-dagar med konditionering bildade inte en CPP, eftersom de tillbringade lika stora mängder tid .

2.2. Experiment 2: AMPH-behandling förändrade mesokortikolimbisk DA-koncentration

Experiment 2 undersökte effekten av en enda AMPH-behandling på DA-koncentration i valda hjärnområden inklusive PFC, NAcc, caudate putamen (CP) och VTA (Fig. 2A). Ämnen fördelades slumpmässigt i en av två experimentella grupper som mottog antingen en enda ip-injektion av 0.9-% saltlösning (n= 6) eller 1.0 mg / kg AMPH upplöst i saltlösning (n= 6). Denna dos valdes eftersom den var tillräcklig för att inducera en CPP hos honkön (Experiment 1) och manliga prärievolymer (Aragona et al., 2007; Liu et al., 2010), vilket indikerar dess beteendemässiga relevans för båda könen. Alla ämnen avlivades 30 min efter injektion och koncentrationen av DA i deras hjärnvävnad mättes med användning av högprestandad vätskekromatografi med elektrokemisk detektion (HPLC-ECD).

Fig 2 

Effekterna av en enda AMPH-injektion (1 mg / kg) på DA-koncentrationen i mesokortikolimbiska hjärnregioner. Schematisk illustration av vävnadsstansplatser för medial prefrontal cortex (PFC), nucleus accumbens (NAcc), caudate putamen (CP) och ventral .

En enda AMPH-behandling förändrade DA-koncentrationen på ett regionspecifikt sätt inom det mesokortikolimbiska DA-systemet (Fig. 2B). Ämnen behandlade med AMPH hade en signifikant högre koncentration av DA i NAcc [t(10) = 2.06; p<0.03] och CP [t(10)= 2.07, p<0.03] än kontroller med saltlösning. Emellertid hittades inga gruppskillnader i PFC [t(10)= 0.03; p<0.49] eller VTA [t(10)= 1.41; p<0.09].

2.3. Experiment 3 och 4: upprepad AMPH-exponering förändrar DA-receptor mRNA-uttryck och bindning

Experiment 3 och 4 undersökte effekterna av upprepad AMPH-behandling på respektive D1-receptor och D2-receptor mRNA-expression respektive D1-liknande respektive D2-liknande receptorbindning. Tidigare försök i manliga prärievolymer har visat att upprepad AMPH-exponering (1.0 mg / kg en gång per dag för 3 på varandra följande dagar) väsentligt förändrar DA-receptoruttryck i NAcc 24 h efter den slutliga injektionen och att denna förändring kan ligga till grund för det AMPH-inducerade nedsatt socialt bindandeLiu et al., 2010). Därför använde vi detta läkemedelsinjektionsparadigm för att undersöka de neurobiologiska effekterna av upprepad AMPH-exponering hos kvinnor. Ämnen fördelades slumpmässigt i en av två grupper som fick ip-injektioner av saltlösning (kontroll, n= 6) eller saltlösning innehållande 1.0 mg / kg AMPH (n= 8), en gång per dag i tre på varandra följande dagar. Alla ämnen avlivades 24 h efter den slutliga injektionen. Tätheterna för D1-receptormRNA och D1-liknande receptorbindning mättes i NAcc och CP medan D2-receptormRNA och D2-liknande receptorbindning mättes i NAcc, CP och VTA. D1R mRNA och D1-liknande receptorbindning uppmättes inte i VTA på grund av bristen på deras närvaro i denna hjärnområde (Weiner et al., 1991).

Repeterad AMPH-exponering förändrade DA-receptorns mRNA-expression på ett receptor- och regionspecifikt sätt. Ämnen som fick upprepad AMPH-behandling visade en signifikant högre nivå av D1-receptor-mRNA-märkning i NAcc [t(12)= 2.85; p <0.01], men inte CP [t(12)= 1.96; p <0.07] än saltlösning-injicerade kontroller (Fig. 3A och B). Inga gruppskillnader hittades i D2-receptor mRNA-märkning i antingen NAcc [t(12)= 1.56; p <0.14] eller CP [t(12)= 1.79; p <0.10] (Fig. 3C och D). Upprepad AMPH-behandling minskade emellertid signifikant nivån av D2-receptor-mRNA i VTA [t(12)= 3.11; p <0.01] (Fig. 3E och F).

Fig 3 

Effekterna av upprepad AMPH-administrering (1 mg / kg / dag för 3-konsekutiva dagar) på dopaminreceptor-mRNA-märkning i kvinnornas prairie vole. Upprepad AMPH-behandling ökade D1-receptorn (D1R) mRNA-märkning i nukleär accumbens (NAcc), men inte .

Upprepad AMPH-exponering hade ingen effekt på D1-liknande receptor (Fig. 4A och B) eller D2-liknande receptor (Fig. 4C och D) bindningsnivåer i NAcc [D1-liknande: t(12)= 0.40; p <0.35, D2-liknande: t(12)= 0.77; p<0.23] eller CP [D1-liknande: t(12)= 0.63; p<0.27, D2-liknande: t(12)= 0.91; p<0.19]. Emellertid hade AMPH-behandlade patienter en signifikant lägre nivå av D2-liknande receptorbindning i VTA än med saltlösning-injicerade kontroller [t(12)= 1.91; p<0.04] (Fig. 4E och F).

Fig 4 

Effekterna av upprepad AMPH-administrering (1 mg / kg / dag för 3-konsekutiva dagar) på dopaminreceptorbindningsnivåer i kvinnprorie-vole. Repeterad AMPH-behandling förändrade inte D1-liknande (A och B) eller D2-liknande receptorbindningsnivåer (C och D) i .

3. Diskussion

Den aktuella studien undersökte de beteende- och neurobiologiska effekterna av AMPH-exponering hos kvinnliga prärievolymer. Sammantaget visar våra data att AMPH har dosberoende effekter på beteende, ökar DA-koncentrationen i NAcc och CP, och ändrar DA-receptorgenuttryck och bindning på ett receptor- och regionspecifik sätt. Dessa data kan i slutändan ge användbar insikt för framtida studier som undersöker effekterna av AMPH på socialt beteende hos kvinnor av denna art.

En CPP återspeglar en preferens för ett miljökontext som har kopplats ihop med en primär förstärkare (Bardo och Bevins, 2000) - i detta fall AMPH - och används ofta som en beteendemässig relevant, om än indirekt, mått på läkemedelsbelöning. Våra resultat visar att kvinnliga prärievolymer bildar en CPP efter behandling med låg till mellanliggande doser AMPH. Jämfört med våra senaste resultat i manliga prärievolymer som uppnåddes med samma CPP-paradigm (Liu et al., 2010) visar dessa data tillsammans en vänsterskift i dosresponsskurvan för CPP i kvinnliga prairievolymer. Specifikt inducerade 0.2 mg / kg eller högre doser av AMPH en CPP hos kvinnor, medan 1.0 mg / kg eller högre doser AMPH krävdes för induktion av en CPP hos män (Liu et al., 2010). Denna vänsterväxling i dosresponsskurvan hos honor är förenlig med en tidigare studie i prärievolymer som använde ett annat konditioneringsparadigm (Aragona et al., 2007) och föreslår att kvinnor är mer känsliga för beteendeeffekterna, och kanske mer sårbara för AMPH: s givande effekter än män - ett resultat som konsekvent har visats hos andra arter (Camp och Robinson, 1988; Hu et al., 2004; Lynch, 2006; Lynch och Carroll, 1999; Roberts et al., 1989; Roth och Carroll, 2004) och det kan ha viktiga konsekvenser för AMPH: s effekter på socialt beteende hos kvinnliga prärievolymer.

I den föreliggande studien fann vi också att AMPH-administrering - vid en beteendemässigt relevant dos (1.0 mg / kg) för kvinnliga prärievolymer - ökade DA-koncentrationen i NAcc och CP men inte PFC eller VTA. Dessa resultat indikerar en regionspecifik AMPH-inducerad förstärkning av DA-koncentration. Som tidigare studier i ett antal arter har påvisat induktionen av extracellulär DA-frisättning i NAcc och CP kort efter AMPH-injektion (Cho et al., 1999; Clausing och Bowyer, 1999; Curtis och Wang, 2007; Di Chiara et al., 1993; Drevets et al., 2001) kan den ökade DA-koncentrationen i dessa regioner i föreliggande studie bero på en AMPH-inducerad förstärkning av DA-frisättning. Eftersom DA-koncentrationen också påverkas av DA-syntes och metabolism måste denna spekulation dock testas i ytterligare experiment. Dessutom var det en anmärkningsvärd trend mot en minskning av DA-koncentrationen i VTA efter AMPH-exponering hos kvinnliga prärievolymer. Även om denna effekt inte var signifikant (p <0.09) krävs ytterligare experiment för att utesluta eller utesluta en effekt av AMPH på DA-koncentration i denna hjärnregion.

För att ytterligare förstå de neurobiologiska följderna av AMPH-exponering hos kvinnliga prärievolymer undersökte vi effekterna av upprepad AMPH-behandling på DA-receptormRNA-uttryck och bindning i olika hjärnregioner. Vi använde en AMPH-dos och ett injektionsparadigm som nyligen har visat sig förändra DA-receptoruttryck och att försämra socialt beteende hos manliga prärievolymer (Liu et al., 2010). Våra data indikerar att upprepad AMPH-exponering väsentligt ökade D1-receptormRNA-nivån i NAcc. En liknande men inte signifikant (p <0.07), noterades effekt i CP, vilket indikerar att AMPH kan ha effekter på D1R-mRNA-uttryck också i denna region. Trots dessa förändringar i genuttryck förändrade AMPH-exponeringen inte nivån av D1-liknande receptorbindning i NAcc eller CP. Det finns två typer av D1-liknande receptorer - D1-receptorer och D5-receptorer - som båda hade potential att märkas av den D1-liknande liganden som användes i vårt receptbindande experiment. Eftersom D5-receptorer i princip inte finns i NAcc och CP (Missale et al., 1998; Tiberi et al., 1991), tyder våra data på brist på förändring, speciellt i D1-receptorproteinivåer. På liknande sätt har tidigare rapporter i andra gnagarearter visat att upprepad exponering för AMPH eller andra psykostimulanter inte påförlitligt förändrar D1-receptorens affinitet eller densitet i dessa hjärnregioner (för granskning se (Pierce och Kalivas, 1997; Vit och Kalivas, 1998)), trots att responsen hos NAcc-neuroner ökade till D1-receptoragonister i upp till en månad efter läkemedelsbehandling (Henry et al., 1989; Henry och White, 1991, 1995). Vi rapporterar också inga förändringar i D2-receptorns mRNA- eller D2-liknande receptorbindningsnivåer i NAcc eller CP i kvinnliga prärievolymer efter AMPH-behandling, ett resultat som överensstämmer med dem hos råttor och möss (Richtand et al., 1997; Sora et al., 1992) och förslaget att NAcc D1-receptorer spelar en större roll i svaret på upprepad AMPH-exponering (Berke och Hyman, 2000).

Ett intressant konstaterande i föreliggande studie är att upprepad AMPH-behandling minskade signifikant nivåerna av D2-receptorgenuttryck och D2-liknande receptorbindning i VTA hos kvinnliga prärievolymer. D2 receptorer i VTA ligger på somatodendritiska regioner av A10 DA neuroner (DA-projiceringsneuroner som härrör från VTA och projekt till mesokortikolimbiska områden) (Aghajanian och Bunney, 1977; Mercuri et al., 1997; Oades och Halliday, 1987; Vit och Wang, 1984b). Dessa receptorer fungerar som autoreceptorer och deras aktivering leder till hyperpolarisering av cellmembranet och inhiberingen av cellbränning (Mercuri et al., 1997) (för granskning se (Mercuri et al., 1992)), vilket minskar mängden DA som släpps ut i målregioner såsom NAcc (Usiello et al., 2000). Följaktligen resulterar D2-receptorblockering eller gendeletion i brist på A10-cellinhibering och ett efterföljande överflöde av DA i NAcc som svar på en mängd stimuli (Mercuri et al., 1997; Rouge-Pont et al., 2002). Därför kan minskningen av D2-receptorer i VTA noterad i den föreliggande studien indikera en AMPH-inducerad nedreglering av somatodendritiska autoreceptorer i kvinnornas prairie vole. Eftersom auto-receptordensiteten är omvänt relaterad till aktivitetshastigheten för A10 DA-neuroner (Vit och Wang, 1984a), kan denna effekt leda till ökad DA-frisättning och neurotransmission i NAcc. På liknande sätt har tidigare forskning visat en underkänslighet hos somatodendritiska autoreceptorer på A10 DA neuroner efter upprepad psykostimulant exponering, vilket resulterar i ökad spontan aktivitet och basal skjuthastighet av A10 DA celler (Henry et al., 1989) som kan kvarstå i dagar efter avslutad behandling av läkemedel (Ackerman och White, 1990). Det är emellertid viktigt att notera att både D2- och D3-receptorer uttrycks i VTA och lokaliseras presynaptiskt på dopaminerga neuroner (Diaz et al., 1995; Mercuri et al., 1997), vilket indikerar att den nuvarande minskningen av D2-liknande receptorbindning kan hänföras till förändringar i antingen eller båda receptorsubtyperna. Kunskap om den specifika receptorsubtyp som påverkas av AMPH-exponering är viktig för vår datatolkning, eftersom D2, men inte D3, receptorer, är nödvändiga för autoreceptorinhiberingen av DA-neuroner (Mercuri et al., 1997; Rouge-Pont et al., 2002). Eftersom D3-receptoruttryck är extremt låg i VTA i förhållande till D2-receptorer (Bouthenet et al., 1991) och spiperon visar en högre affinitet för D2 än D3-receptorn (Missale et al., 1998) är det troligt att de nuvarande effekterna på D2-liknande receptorbindning representerar en specifik minskning av D2-nivåerna snarare än D3-receptorer.

Medan de neurobiologiska effekterna av upprepad AMPH-exponering hos kvinnor visar vissa likheter med de som hittades hos manliga prärievolymer (Liu et al., 2010), två viktiga skillnader är uppenbara. För det första, även om AMPH upplever ökat D1-receptor-mRNA i NAcc i båda könen, behölls de funktionella följderna av denna ökningstranscription endast hos män (dvs. kvinnor visade inga förändringar i D1-liknande receptorbindningsnivåer, medan AMPH ökade NAcc D1-receptorproteinhalter i hanar). Dessa skillnader kan bero på användningen av olika kvantitativa tekniker för att upptäcka dessa funktionella konsekvenser (dvs receptorbindning användes hos kvinnor medan Western blotting användes hos män) eller kan indikera sexspecifika effekter av upprepad AMPH-behandling på D1-receptorer inom NAcc av prärievolymer. För det andra hade AMPH-behandling inga effekter på D2-receptor-mRNA-uttryck i VTA i manliga prärievolymer (Liu et al., 2010), men minskat signifikant, såväl som D2-receptorbindningsnivåer, hos kvinnor, vilket ytterligare tyder på att de neurobiologiska effekterna av AMPH är sexspecifika. Denna idé stöds av fynd i andra arter som anger könsskillnader i genuttryck efter AMPH-behandling (Castner och Becker, 1996).

AMPH-inducerade förändringar i det mesocorticolimbiska DA-systemet kan få viktiga konsekvenser för socialt beteende i prärievolymer. Som nämnts bildar vuxna manliga och kvinnliga prärievolymer varaktiga parbindningar efter parning (Carter et al., 1995; Williams et al., 1992; Winslow et al., 1993) och NAcc DA reglerar detta beteende i båda könen på ett receptorspecifikt sätt: D2-liknande receptoraktivering underlättar och D1-liknande receptoraktivering inhiberar partnerpreferensbildning (Aragona et al., 2003, 2006; Aragona och Wang, 2009; Gingrich et al., 2000; Liu och Wang, 2003; Wang et al., 1999). Som sådan kan AMPH-inducerade förändringar i mesokortikolimbiska hjärnregioner, inklusive de som rapporteras här, ha djupa konsekvenser för parbindningsbeteende i prairie vole. Hos män är t ex AMPH-inducerad ökning av D1-liknande receptorer i NAcc trodde att ligga till grund för AMPH-inducerad försämring av partnerpreferensbildning (Liu et al., 2010), eftersom NAcc D1-receptoraktivering inhiberar parningsinducerade partnerpreferenser (Aragona et al., 2006). Dessutom eliminerade den farmakologiska blockaden av D1-receptorer under AMPH-behandling dosberoende AMPH-inducerad försämring av partnerpreferensbildningen, vilket vidare indikerar att AMPH kan påverka parbindning genom en D1-receptormedierad mekanism (Liu et al., 2010). Hos kvinnor i stället, på grund av bristen på autoreceptorhämning implicerad av de aktuella resultaten (dvs. minskat D2-receptoruttryck i VTA) skulle parning-inducerad DA-frisättning i NAcc sannolikt förbättras i AMPH-behandlade volymer. Så starka höjningar i DA-koncentration aktiverar D1-receptorer med låg affinitet (Richfield et al., 1989), kan denna neuroadaptation ha viktiga beteendekonsekvenser på social bindning hos kvinnor.

Sammanfattningsvis visar den aktuella studien att en beteendemässigt relevant dos av AMPH förändrar DA-koncentration och receptoruttryck inom det mesocorticolimbiska DA-systemet av kvinnliga prärievolymer, en nyckelkrets involverad i den monogamiska sociala beteendet hos denna art. Dessa resultat ger en grund för framtida studier i kvinnliga prärievolymer för att undersöka effekterna av AMPH på parbindning och de involverade neurokemiska mekanismerna.

4. Experimentella procedurer

4.1. djur

Captive-bredda kvinnliga prärievolymer (Microtus ochrogaster) avkom från populationer i södra Illinois avvänjdes vid 21-ålder och sedan inrymda i samma kön syskonpar i plastburar (29 × 18 × 13 cm) innehållande cedarchipbädd. De upprätthölls på en 14: 10 ljus: mörk cykel (lyser på 0700 h) med AD libitum tillgång till mat och vatten. Temperaturen upprätthölls vid 21 ± 1 ° C. Alla djur som användes i denna studie var mellan 90 och 120 dagar i åldern. Experiment utfördes i enlighet med riktlinjerna från Institutionen för djurvård och användning vid Florida State University.

4.2. Conditioned place preference paradigm

CPP-apparaten var identisk med den tidigare beskrivna och bestod av två plastburar som var visuellt distinkta (vita vs. svarta) och förbundna med varandra med ett ihåligt rör (Aragona et al., 2007; Liu et al., 2010). Vi använde ett konditioneringsparadigm som nyligen utvecklats i manliga prärievolymer (Liu et al., 2010). Kortfattat gavs alla ämnen ett 30 min-förprov på dag 1 och mängden tid i varje bur kvantifierades. Den bur i vilken en individ spenderade mindre tid under förprovet betecknades som läkemedelsparad bur och den andra betecknades som saltlösningsparren. Konditionering inträffade under två 40-minutssessioner varje dag under de kommande tre dagarna (dagar 2-4). Under morgondagen (0900 h) fick patienterna intraperitoneala (ip) injektioner av 0.0, 0.1, 0.2 eller 1.0 mg / kg d-AMPH-sulfat (Sigma, St. Louis, MO, USA) upplöst i saltlösning omedelbart innan de placerades in i det läkemedelsparade buret. Under eftermiddagssammanträdena (1500 h) mottog individer en ip-injektion av saltlösning omedelbart innan de placerades i koksaltlösningen. Denna två försök per dag träningsplan har varit anställd hos råttor (Campbell och Spear, 1999; Zhou et al., 2010) och användes i vår tidigare studie i manliga prärievoles (Liu et al., 2010). Vidare valdes detta paradigm eftersom våra pilotdata indikerade inga skillnader i beteende mellan ämnen behandlade med motviktiga och fixerade injektions / konditioneringsparadigmer (opublicerade data) och eftersom standardiserade injektions- och vävnadsuppsamlingsscheman var viktiga för mätningen av DA-markörsexpression i efterföljande försök såväl som för direkta jämförelser med data från manliga prärievolymer (Liu et al., 2010). På dag 5 testades alla ämnen för närvaron av en CPP i ett 30 min eftertest. Antalet gånger som djur korsade mellan burar registrerades under för- och efterprov och användes som ett index för lokomotorisk aktivitet.

4.3. Vävnadstillverkning

Ämnen avkapades snabbt 30 min efter injektion i Experiment 2 och 24 h efter slutlig injektion i experiment 3 och 4. Deras hjärnor avlägsnades snabbt och omedelbart frystes på torris, innan de lagrades vid -80 ° C. Hjärnor från Experiment 2 snedades koronalt vid 300 μm och sektioner töts på Superfrost / plus-glidbanor. Paxinos och Watson rått hjärnatlaset (Paxinos och Watson, 1998) användes för att identifiera olika hjärnregioner, inklusive PFC (Plates 8-10), NAcc (Plates 9-11), CP (Plates 10-12) och VTA (Plates 40-43), från vilka bilaterala vävnadsstanser av 1 mm-diameteren togs (Fig. 2A) och lagras vid -80 ° C tills bearbetad. Även om det inte var en mesokortikolimbisk hjärnregion, inkluderades CP i vår analys eftersom den, som NAcc och PFC, mottar DAergic-insats från VTA (Oades och Halliday, 1987) men verkar inte vara involverad i DAergic-reglering av prairie vole partner preference formation (Aragona et al., 2003, 2006; Liu och Wang, 2003). För experiment 3 och 4 klippades hjärnorna koronalt i 10-uppsättningar av 14 μm-sektioner som töts på Superfrost / plus-glidbanor.

4.4. DA-extraktion och HPLC-ECD-analys

DA-extraktion utfördes såsom beskrivits tidigare (Aragona et al., 2002), förutom att vävnadsprover sonikerades i 50 μL 0.1 M perklorsyra med 0.02% EDTA. DA-koncentrationen utvärderades med användning av högprestanda vätskekromatografi med elektrokemisk detektion (HPLC-ECD) såsom beskrivits tidigare (Curtis et al., 2003) med följande undantag. Den mobila fasen bestod av 75 mM natriumdivätefosfatmonohydrat, 1.7 mM 1-oktansulfonsyranatriumsalt, 0.01% trietylamin, 25 UM EDTA och 7% acetonitril och pH justerades till 3.0 med 85% fosforsyra. Flödeshastigheten var 0.5 ml / min. Standardkurvan och toppområdet beräknades som beskrivits tidigare (Aragona et al., 2003). Detekteringsgränsen var ~ 10 pg per prov.

4.5. In situ hybridisering för D1- och D2-receptor-mRNA

Alternativa uppsättningar av hjärnsektioner från Experiment 3 behandlades för in situ hybridiseringsmärkning av DA-receptor-mRNA. Antisens- och senseriboprober (generöst tillhandahållet av Dr. O. Civelli vid University of California, Irvine, CA) användes för D1- och D2-receptor-mRNA-märkning och framställdes som tidigare beskrivits (Liu et al., 2010). Prober märktes individuellt vid 37 ° C för 1h i en transkriptionsoptimerad buffert bestående av 0.5 | ig / μl av respektive DNA-mall, [35S] -CTP, 4 mM ATP, UTP och GTP, 0.2 M ditiotreitol (DTT), RNasin (40 U / pl) och RNA-polymeras (20 U / pl). DNA-mallen digererades sedan med 1 U / pl DNaseI. Prober renades med användning av kromatografikolonner (Bio-Rad, Hercules, CA) och späddes sedan i hybridiseringsbuffert bestående av 50% avjoniserad formamid, 10% dextransulfat, 3 x SSC, 10 mM natriumfosfatbuffert (PB, pH 7.4), 1 × Denhardts lösning, 0.2 mg / ml jäst-tRNA och 10 mM DTT för att ge 5 × 106 cpm / ml.

Hjärnsektioner fixerades i 4% paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffrad saltlösning (PBS) vid 4 ° C för 20 min, sköljdes i PBS för 10 min och behandlades med 0.25% ättiksyraanhydrid i trietanolamin (pH 8.0) för 15 min för att minska icke-specifik bindning. Skivor tvättades sedan i 2 x saltlösning natriumcitrat (SSC), dehydratiserades genom ökande koncentrationer etanol (ETOH) (70, 95 och 100%) och lufttorkades.

Varje bildruta mottog 100 μl hybridiseringslösning innehållande lämplig 35S-märkt sond, täcktes och glöms sedan vid 55 ° C i en fuktad kammare över natten. Efter inkubering avlägsnades täckplåtar i 2 × SSC, skivor tvättades två gånger i 2 × SSC för 5 min och tvättades sedan vid 37 ° C för 1 h i RNas-buffert (8 mM Tris-HCl, 0.8 mM EDTA och 0.4 M NaCl, pH 8.0) innehållande 25 mg / ml RNaseA. Därefter tvättades diabilder i minskande koncentrationer av SSC (2 × SSC, 1 × SSC och 0.5 × SSC) för 5 min var och inkuberades i 0.1 × SSC vid 65 ° C för 60 min. Slutligen leddes glidbanorna till rumstemperatur, dehydratiserades genom ökande koncentrationer av ETOH och lufttorkades. Sektioner användes till BioMax MR-film (Kodak, Rochester, NY) under olika tidsperioder, beroende på sonden och regionen av intresse, för att generera optimala autoradiogram. För NAcc- och CP-, D1R- och D2R-mRNA-märkta sektioner ansågs filmen för 14 respektive 60 h, medan sektioner märkta för D1-liknande och D2-liknande receptorbindning tilldelades för 15 respektive 6.5 h. För VTA användes sektioner märkta för D2R mRNA för 60 h och de märkta för D2-liknande bindning tilldelades för 40 h. En sense RNA-kontroll testades också för varje prob och gav ingen märkning, som förväntat.

4.6. DA-receptorautadiadiografi

För Experiment 4 behandlades alternativa uppsättningar av hjärnsektioner för D1-liknande och D2-liknande receptorautadiografi. Den D1-liknande liganden [125I] SCH23982 och D2-liknande liganden [125I] 2'-jodspiperon erhölls från PerkinElmer (Waltham, MA). DA-receptorautadiadiografi utfördes som beskrivits tidigare (Aragona et al., 2006).

4.7. Dataanalys

För Experiment 1 definierades en CPP av en signifikant ökning av tiden som spenderades i den läkemedelsparade buret under efterprovet jämfört med förutprovet, mätt med en parning t-testa. Lokomotorisk aktivitet analyserades med hjälp av tvåvägsrepeterade åtgärder ANOVA, som jämförde före- och efter-test-rörelse (inom-ämnesvariabel) och lokomotion genom behandling (mellan-ämnesvariabel). För Experiment 2 normaliserades DA-koncentrationen av varje prov med användning av den totala proteinkoncentrationen för det provet för att kontrollera för den uppsamlade mängden vävnad. Det normaliserade värdet av DA-koncentration (pg / μg vävnad) omvandlades sedan till procent av den genomsnittliga DA-koncentrationen av saltlösningskontrollen. För varje hjärnområde jämfördes den procentuella DA-koncentrationen mellan grupper med a t-testa. I experiment 3 och 4 analyserades autoradiogrammer för de optiska densiteterna för mRNA-märkning eller receptorbindning i NAcc, CP och VTA med användning av ett datoriserat bildprogram (NIH IMAGE 1.60) (PFC inkluderades ej i analysen eftersom denna region visade inget svar till AMPH-behandling i Experiment 2). Den rostra / caudala omfattningen av bildanalys för NAcc, CP och VTA var densamma som beskrivits för Experiment 2. Neuroanatomisk skillnad mellan NAcc och CP gjordes med användning av Paxinos och Watson rått hjärnatlaset (Paxinos och Watson, 1998) som en guide, hänvisar både märkets form och placeringen av den främre kommissionen. Sektioner för varje hjärnområde var anatomiskt anpassade mellan ämnen och individuella medel för varje individ erhölls genom mätning av optisk densitet bilateralt i tre sektioner från varje hjärnområde per djur. Bakgrundstätheten subtraherades från mätningen av varje sektion. De slutliga optiska densiteterna omvandlades till procent av saltlösningskontrollmedlet. Gruppskillnader i mRNA eller bindningsnivåer inom hjärnområdet analyserades för varje DA-receptor med användning av a t-testa. Signifikansnivån sattes till p

Erkännanden

Vi tackar Kevin Young och Adam Smith för deras kritiska läsning av manuskriptet. Detta arbete stöddes av National Institutes of Health ger DAF31-25570 till KAY, MHF31-79600 till KLG och DAR01-19627, DAK02-23048 och MHR01-58616 till ZXW.

fotnoter

förkortningar: AMPH, amfetamin; ANOVA, variansanalys CP, caudate putamen; CPP, konditionerad platspreferens; DTT, ditiotreitol; DA, dopamin; ETOH, etanol; HPLC, högprestanda vätskekromatografi; ip, intraperitoneal; PCF, medial prefrontal cortex; NAcc, nucleus accumbens; PBS, fosfatbuffrad saltlösning; SSC, saltlösning natriumcitrat; PB, natriumfosfatbuffert; VTA, ventral tegmental area

REFERENSER

  1. Ackerman JM, White FJ. A10 somatodendritisk dopamin autoreceptor känslighet efter avhämtning från upprepad kokainbehandling. Neurosci. Lett. 1990; 117: 181-187. [PubMed]
  2. Aghajanian GK, Bunney BS. Dopamin "autoreceptorer": farmakologisk karaktärisering genom mikrojontoforetiska enkelcellinspelningsstudier. Naunyn Schmiedebergs Arch. Pharmacol. 1977; 297: 1-7. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Wang Z. Dopaminreglering av socialt val i en monogamisk gnagare. Främre. Behav. Neurosci. 2009; 3: 1-11.
  4. Aragona BJ, Curtis JT, Davidson AJ, Wang Z, Stephan FK. Beteendemässig och neurokemisk utredning av cirkadian tidstidsinlärning i råttan. J. Biol. Rytmer. 2002; 17: 330-344. [PubMed]
  5. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. En kritisk roll för kärnan accumbens dopamin i partnerpreferensbildning i manliga prärievolymer. J. Neurosci. 2003; 23: 3483-3490. [PubMed]
  6. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nukleär accumbensdopamin medierar differentiellt bildandet och underhållet av monogamiska parbindningar. Nat. Neurosci. 2006; 9: 133-139. [PubMed]
  7. Aragona BJ, Detwiler JM, Wang Z. Amfetaminbelöning i den monogamiska prairie vole. Neurosci. Lett. 2007; 418: 190-194. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  8. Bardo MT, Bevins RA. Villkorad platspreferens: vad lägger den till vår prekliniska förståelse av läkemedelsbelöning? Psykofarmakologi (Berl.) 2000; 153: 31-43. [PubMed]
  9. Becker JB. Direkt effekt av 17 beta-östradiol på striatum: könskillnader i dopaminfrisättning. Synapse. 1990; 5: 157-164. [PubMed]
  10. Becker JB, Hu M. Sexskillnader i drogmissbruk. Främre. Neuroendocrinol. 2008; 29: 36-47. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  11. Becker JB, Ramirez VD. Sexskillnader i amfetaminstimulerad frisättning av katekolaminer från råtta striatal vävnad in vitro. Brain Res. 1981; 204: 361-372. [PubMed]
  12. Becker JB, Molenda H, Hummer DL. Könsmässiga skillnader i beteendehantering mot kokain och amfetamin. Inverkan på mekanismer som medierar könsskillnader i drogmissbruk. Ann. NY Acad. Sci. 2001; 937: 172-187. [PubMed]
  13. Berke JD, Hyman SE. Addiction, dopamin och de molekylära mekanismerna i minnet. Nervcell. 2000; 25: 515-532. [PubMed]
  14. Bouthenet ML, Souil E, Martres MP, Sokoloff P, Giros B, Schwartz JC. Lokalisering av dopamin D3-receptor-mRNA i råtthjärnan med användning av in situ hybridiseringshistokemi: jämförelse med dopamin D2-receptor-mRNA. Brain Res. 1991; 564: 203-219. [PubMed]
  15. Camp DM, Robinson TE. Känslighet för sensibilisering. I. Sexskillnader i de långvariga effekterna av kronisk D-amfetaminbehandling på lokomotion, stereotypt beteende och hjärnmonoaminer. Behav. Brain Res. 1988; 30: 55-68. [PubMed]
  16. Campbell J, Spear LP. Effekter av tidig hantering av amfetamininducerad lokomotorisk aktivering och konditionerad platspreferens hos vuxna råtta. Psykofarmakologi (Berl.) 1999; 143: 183-189. [PubMed]
  17. Carter CS, DeVries AC, Getz LL. Fysiologiska substrat av däggdjursmonogami: prairie vole-modellen. Neurosci. Biobehav. Rev. 1995; 19: 303-314. [PubMed]
  18. Castner SA, Becker JB. Sexskillnader i effekten av amfetamin på omedelbart tidigt genuttryck i råtta dorsalstriatum. Brain Res. 1996; 712: 245-257. [PubMed]
  19. Cho AK, Melega WP, Kuczenski R, Segal DS, Schmitz DA. Caudate-putamen dopamin och stereotypa responsprofiler efter intravenös och subkutan amfetamin. Synapse. 1999; 31: 125-133. [PubMed]
  20. Clausing P, Bowyer JF. Tidsförlopp av hjärntemperatur och caudat / putamenmikdialysatnivåer av amfetamin och dopamin hos råttor efter flera doser av D-amfetamin. Ann. NY Acad. Sci. 1999; 890: 495-504. [PubMed]
  21. Curtis JT, Wang Z. Amfetamin effekter i mikrotina gnagare: en jämförande studie med monogamiska och promiskuösa vilda arter. Neuroscience. 2007; 148: 857-866. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  22. Curtis JT, Stowe JR, Wang Z. Differentiella effekter av intraspecifika interaktioner på striataldopamin-systemet i sociala och icke-sociala volymer. Neuroscience. 2003; 118: 1165-1173. [PubMed]
  23. Curtis JT, Liu Y, Aragona BJ, Wang Z. Dopamin och monogami. Brain Res. 2006; 1126: 76-90. [PubMed]
  24. Di Chiara G, Tanda G, Frau R, Carboni E. På förmånslösningen av dopamin i kärnan accumbens med amfetamin: ytterligare bevis erhållet genom vertikalt implanterade koncentriska dialysprober. Psykofarmakologi (Berl.) 1993; 112: 398-402. [PubMed]
  25. Diaz J, Levesque D, Lammers CH, Griffon N, Martres MP, Schwartz JC, Sokoloff P. Fenotypisk karakterisering av neuroner som uttrycker dopamin D3-receptorn i råtthjärnan. Neuroscience. 1995; 65: 731-745. [PubMed]
  26. Drevets WC, Gautier C, Pris JC, Kupfer DJ, Kinahan PE, Grace AA, Pris JL, Mathis CA. Amfetamininducerad dopaminfrisättning i humant ventralstriatum korrelerar med eufori. Biol. Psykiatri. 2001; 49: 81-96. [PubMed]
  27. Fattore L, Altea S, Fratta W. Sexskillnader i drogmissbruk: en genomgång av djur- och mänskliga studier. Kvinnors hälsa (Lond. Engl.) 2008; 4: 51-65. [PubMed]
  28. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamin D2-receptorer i kärnan accumbens är viktiga för social bindning i kvinnliga prärievolymer (Microtus ochrogaster) Behav. Neurosci. 2000; 114: 173-183. [PubMed]
  29. Henry DJ, White FJ. Upprepad kokainadministration orsakar en fortsatt förbättring av D1-dopaminreceptorkänsligheten inom råttkärnans accumbens. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1991; 258: 882-890. [PubMed]
  30. Henry DJ, White FJ. Persistensen av beteendessensibilisering mot kokainparalleller förbättrad inhibering av nukleinsekvenser neuroner. J. Neurosci. 1995; 15: 6287-6299. [PubMed]
  31. Henry DJ, Greene MA, White FJ. Elektrofysiologiska effekter av kokain i mesoaccumbens dopamin-systemet: upprepad administrering. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1989; 251: 833-839. [PubMed]
  32. Hu XT, Koeltzow TE, Cooper DC, Robertson GS, Vit FJ, Vezina P. Upprepad ventral tegmental area amfetaminadministration förändrar dopamin D1-receptorsignalering i nukleinsymbolerna. Synapse. 2002; 45: 159-170. [PubMed]
  33. Hu M, Crombag HS, Robinson TE, Becker JB. Biologisk grund för könsskillnader i benägenheten att själv administrera kokain. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 81-85. [PubMed]
  34. Insel TR, Preston S, Winslow JT. Parning i den monogamala mannen: beteendekonsekvenser. Physiol. Behav. 1995; 57: 615-627. [PubMed]
  35. Kelley AE, Berridge KC. Neurovetenskap av naturliga belöningar: relevans för beroendeframkallande droger. J. Neurosci. 2002; 22: 3306-3311. [PubMed]
  36. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oxytocin och dopamin interagerar för att reglera parbindningsbildning i kvinnliga prairievolymer. Neuroscience. 2003; 121: 537-544. [PubMed]
  37. Liu Y, Aragona BJ, Young KA, Dietz DM, Kabbaj M, Mazei-Robison M, Nestler EJ, Wang Z. Nucleus accumbens dopamin medierar amfetamininducerad försämring av social bindning i en monogamisk gnagare. Proc. Acad.Sci.USA 2010; 107: 1217-1222. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  38. Lynch WJ. Könsskillnader i sårbarhet för självhantering av droger. Exp. Clin. Psychopharmacol. 2006; 14: 34-41. [PubMed]
  39. Lynch WJ, Carroll ME. Könsskillnader i förvärv av intravenöst självförvaltat kokain och heroin hos råttor. Psykofarmakologi (Berl.) 1999; 144: 77-82. [PubMed]
  40. Mercuri NB, Calabresi P, Bernardi G. De elektrofysiologiska verkningarna av dopamin och dopaminerga läkemedel på neuroner av substantia nigra pars compacta och ventral tegmental area. Life Sci. 1992; 51: 711-718. [PubMed]
  41. Mercuri NB, Saiardi A, Bonci A, Picetti R, Calabresi P, Bernardi G, Borrelli E. Förlust av autoreceptorfunktion i dopaminerga neuroner från dopamin D2-receptorbristande möss. Neuroscience. 1997; 79: 323-327. [PubMed]
  42. Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Dopaminreceptorer: från struktur till funktion. Physiol. Rev. 1998; 78: 189-225. [PubMed]
  43. Narayanan NS, Guarnieri DJ, DiLeone RJ. Metaboliska hormoner, dopaminkretsar och matning. Främre. Neuroendocrinol. 2010; 31: 104-112. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  44. Nesse RM, Berridge KC. Psykoaktiv droganvändning i ett evolutionärt perspektiv. Vetenskap. 1997; 278: 63-66. [PubMed]
  45. Nestler EJ. Molecular mechanisms of drug addiction. Neuro. 2004; 47 (Suppl 1): 24-32. [PubMed]
  46. Nestler EJ. Finns det en vanlig molekylväg för missbruk? Nat. Neurosci. 2005; 8: 1445-1449. [PubMed]
  47. Oades RD, Halliday GM. Ventral tegmental (A10) system: neurobiologi. 1. Anatomi och anslutning. Brain Res. 1987; 434: 117-165. [PubMed]
  48. Palmiter RD. Är dopamin en fysiologiskt relevant medlare av matningsbeteende? Trender Neurosci. 2007; 30: 375-381. [PubMed]
  49. Panksepp J, Knutson B, Burgdorf J. Rollen hos hjärns emotionella system i missbruk: ett neuro-evolutionärt perspektiv och en ny 'självrapport' djurmodell. Missbruk. 2002; 97: 459–469. [PubMed]
  50. Paxinos G, Watson C. Råttahjärnan i stereotaxiska koordinater. Academic Press; San Diego, Kalifornien: 1998.
  51. Pierce RC, Kalivas PW. En kretsmodell av uttrycket av beteendessensibilisering till amfetaminliknande psykostimulanter. Brain Res. Brain Res. Rev. 1997; 25: 192-216. [PubMed]
  52. Richfield EK, Penney JB, Young AB. Anatomiska och affinitetsstat jämförelser mellan dopamin D1 och D2 receptorer i råtta centrala nervsystemet. Neuroscience. 1989; 30: 767-777. [PubMed]
  53. Richtand NM, Kelsoe JR, Kuczenski R, Segal DS. Kvantifiering av dopamin D1- och D2-receptorns mRNA-nivåer associerade med utvecklingen av beteendssensibilisering hos amfetaminbehandlade råttor. Neurochem. Int. 1997; 31: 131-137. [PubMed]
  54. Roberts DC, Bennett SA, Vickers GJ. Östrocykeln påverkar kokain självadministration i ett progressivt förhållningsscheman hos råttor. Psykofarmakologi (Berl.) 1989; 98: 408-411. [PubMed]
  55. Robinson TE, Becker JB. Varaktiga förändringar i hjärnan och beteendet som produceras genom kronisk amfetaminadministration: en genomgång och utvärdering av djurmodeller av amfetaminpsykos. Brain Res. 1986; 396: 157-198. [PubMed]
  56. Robinson TE, Kolb B. Ständiga strukturella modifieringar i nukleär accumbens och prefrontal cortex-neuroner producerad av tidigare erfarenhet av amfetamin. J. Neurosci. 1997; 17: 8491-8497. [PubMed]
  57. Robinson TE, Jurson PA, Bennett JA, Bentgen KM. Persistent sensibilisering av dopamin-neurotransmission i ventralstriatum (kärnans accumbens) som producerats av tidigare erfarenhet av (+) - amfetamin: en mikrodialysstudie i fritt rörliga råttor. Brain Res. 1988; 462: 211-222. [PubMed]
  58. Robinson TE, Gorny G, Mitton E, Kolb B. Kokain självadministration förändrar morfologin hos dendrit och dendritiska ryggrad i nukleär accumbens och neocortex. Synapse. 2001; 39: 257-266. [PubMed]
  59. Roth ME, Carroll ME. Könsskillnader i förvärvet av IV-metamfetamin självadministration och efterföljande underhåll under ett progressivt förhållande schema hos råttor. Psykofarmakologi (Berl.) 2004; 172: 443-449. [PubMed]
  60. Rouge-Pont F, Usiello A, Benoit-Marand M, Gonon F, Piazza PV, Borrelli E. Förändringar i extracellulär dopamin inducerad av morfin och kokain: avgörande kontroll av D2 receptorer. J. Neurosci. 2002; 22: 3293-3301. [PubMed]
  61. Sora I, Fujiwara Y, Tomita H, Ishizu H, Akiyama K, Otsuki S, Yamamura HI. Brist på effekt av haloperidol eller metamfetaminbehandling på mRNA-nivåerna av två dopamin D2-receptorisoformer i råtthjärna. Jpn. J. Psychiatry Neurol. 1992; 46: 967-973. [PubMed]
  62. Tiberi M, Jarvie KR, Silvia C, Falardeau P, Gingrich JA, Godinot N, Bertrand L, Yang-Feng TL, Fremeau RT, Jr., Caron MG. Kloning, molekylär karakterisering och kromosomal tilldelning av en gen som kodar för en andra D1 dopaminreceptorsubtyp: differentialuttrycksmönster i råtthjärna jämfört med D1A-receptorn. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1991; 88: 7491-7495. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  63. Usiello A, Baik JH, Rouge-Pont F, Picetti R, Dierich A, LeMeur M, Piazza PV, Borrelli E. Distinkta funktioner av de två isoformerna av dopamin D2-receptorer. Natur. 2000; 408: 199-203. [PubMed]
  64. Wang Z, Yu G, Cascio C, Liu Y, Gingrich B, Insel TR. Dopamin D2-receptormedierad reglering av partnerpreferenser hos kvinnliga prärievolymer (Microtus ochrogaster): En mekanism för parbindning? Behav. Neurosci. 1999; 113: 602-611. [PubMed]
  65. Weiner DM, Levey AI, Sunahara RK, Niznik HB, O'Dowd BF, Seeman P, Brann MR. D1 och D2 dopaminreceptor mRNA i råtthjärna. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1991; 88: 1859–1863. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  66. Vit FJ, Kalivas PW. Neuroadaptations involverade i amfetamin och kokainberoende. Drogalkohol Beroende. 1998; 51: 141-153. [PubMed]
  67. Vit FJ, Wang RY. A10 dopaminneuroner: autoreceptors roll vid bestämning av avfyrningshastighet och känslighet för dopaminagonister. Life Sci. 1984a; 34: 1161-1170. [PubMed]
  68. Vit FJ, Wang RY. Farmakologisk karakterisering av dopamin-autoreceptorer i råtta ventral tegmentalområdet: mikrojontoforetiska studier. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1984b; 231: 275-280. [PubMed]
  69. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Utveckling av partnerpreferenser hos kvinnliga prärievolymer (Microtus ochrogaster): Social och sexuell erfarenhet. Horm. Behav. 1992; 26: 339-349. [PubMed]
  70. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. roll för central vasopressin i parbindning i monogamiska prärievolymer. Natur. 1993; 365: 545-548. [PubMed]
  71. Young KA, Gobrogge KL, Liu Y, Wang Z. Den neurobiologi av parbindning: insikter från en socialt monogamisk gnagare. Främre. Neuroendocrinol. 2010 doi: 10.1016 / j.yfrne.2010.07.006. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  72. Young KA, Gobrogge KL, Wang ZX. Rollen av mesokortikolimbisk dopamin vid reglering av interaktioner mellan missbruk och socialt beteende. Neurosci. Biobehav. Rev. 2011; 35: 498-515. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  73. Zahm DS. Ett integrerat neuroanatomiskt perspektiv på några subkortiska substrat av adaptiv respons med betoning på kärnan accumbens. Neurosci. Biobehav. Rev. 2000; 24: 85-105. [PubMed]
  74. Zhou JY, Mo ZX, Zhou SW. Effekt av rhynchofyllin på centrala neurotransmitternivåer i amfetamininducerad konditionerad platspreferens råtthjärna. Fitoterapia. 2010; 81 (7): 844-848. [PubMed]