วารสารประสาทวิทยา 15 มีนาคม 2001, 21(6): 2123 2130-;
+ ผู้ร่วมวิจัย
นามธรรม
การส่งโดปามีนในนิวเคลียส accumbens สามารถใช้งานได้โดยยาเสพติดความเครียดหรือพฤติกรรมที่กระตุ้นและการได้รับสิ่งเร้าเหล่านี้ซ้ำ ๆ สามารถกระตุ้นการตอบสนองของโดพามีนนี้ได้ การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบว่าพฤติกรรมทางเพศของผู้หญิงเปิดใช้งานเซลล์ประสาทนิวเคลียสหรือไม่และประสบการณ์การมีเพศสัมพันธ์ที่ผ่านมามีความไวต่อการตอบสนองของเซลล์ประสาทในนิวเคลียสแอมเฟตามีนหรือไม่ การใช้การติดฉลาก immunocytochemical การแสดงออกของ c-Fos ในอนุภูมิภาคต่าง ๆ (เปลือก vs core ที่ระดับ rostral, กลางและ caudal) ของนิวเคลียส accumbens ถูกตรวจสอบในแฮมสเตอร์หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศในปริมาณที่แตกต่างกัน แฮมสเตอร์หญิงซึ่งได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์หรือการไร้เดียงสาทางเพศที่เหลืออยู่ได้รับการทดสอบพฤติกรรมทางเพศโดยการสัมผัสกับแฮมสเตอร์ชายผู้ใหญ่ ประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้เพิ่มการติดฉลาก c-Fos ในระดับ rostral และ caudal แต่ไม่ได้อยู่ในระดับกลางของนิวเคลียส accumbens การทดสอบพฤติกรรมทางเพศเพิ่มการติดฉลากในแกนกลาง แต่ไม่ใช่เปลือกของนิวเคลียส accumbens เพื่อตรวจสอบว่าพฤติกรรมทางเพศของผู้หญิงสามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในเส้นทางโดปามีน mesolimbic, การตอบสนองของหัวรถจักรของเพศหญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาทางเพศกับการฉีดแอมเฟตามีน ยาบ้าเพิ่มกิจกรรมการเคลื่อนไหวทั่วไปในผู้หญิงทุกคน อย่างไรก็ตามสัตว์ที่มีประสบการณ์ทางเพศตอบสนองต่อแอมเฟตามีนเร็วกว่าสัตว์ที่ไร้เดียงสาทางเพศ ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าพฤติกรรมทางเพศของเพศหญิงสามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในนิวเคลียส accumbens และประสบการณ์ทางเพศนั้นสามารถตอบสนองต่อการตอบสนองของเซลล์ประสาทที่ไวต่อยายาบ้า นอกจากนี้ผลลัพธ์เหล่านี้ยังมีหลักฐานเพิ่มเติมสำหรับความแตกต่างในการทำงานระหว่างเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens และทั่วทั้งแกน anteroposterior
เซลล์โดพามีนที่มีต้นกำเนิดในบริเวณหน้าท้องส่วนกลางสมองส่วนกลางและฉายไปยังนิวเคลียส forebrain ต่างๆรวมถึงนิวเคลียส accumbens เป็นส่วนหนึ่งของระบบโดปามีน mesolimbic มันได้รับการแนะนำว่าระบบโดปามีนนี้มีความสำคัญต่อการควบคุมพฤติกรรมการทานอาหาร (Mitchell และ Gratton, 1994; ซาลาโมน 1994, 1996; Ikemoto และ Panksepp, 1999) รวมถึงการดูแลตนเองเกี่ยวกับยาเสพติด (Pierre และ Vezina, 1998;Koob, 1999; Lorrain et al., 1999; McKinzie และคณะ, 1999; ประชาชนและคณะ 1999; Bradberry และคณะ, 2000) การบริหารระบบยาเสพติดที่หลากหลาย (เช่นโคเคนแอมเฟตามีนและเฮโรอีน) เปิดใช้งานเส้นทางโดปามีน (Pontieri et al., 1995; Nisell และคณะ, 1997; เพียร์ซและคาลิวาส 1997a; Tanda et al., 1997; Tanda และ Di Chiara, 1998; Barrot และคณะ, 1999; Cadoni และ Di Chiara, 1999) และการได้รับสารทางเภสัชวิทยาเหล่านี้ซ้ำ ๆ สามารถทำให้เซลล์ประสาทที่ต้องตอบสนองต่อโดปามีนมีความไว (Robinson และคณะ, 1988; Kalivas et al., 1992; Kalivas และ Duffy, 1993; เพียร์ซและคาลิวาส 1995; Kuczenski et al., 1997; Nisell และคณะ, 1997; Birrell และ Balfour, 1998; Heidbreder และ Feldon, 1998; Cadoni และ Di Chiara, 1999; Cadoni และคณะ, 2000) การวิจัยได้ให้หลักฐานว่านิวเคลียส accumbens ยังตอบสนองต่อคุณสมบัติบางอย่างที่เกี่ยวข้องกับการผสมพันธุ์ ระดับโดปามีนในเซลล์ extracellular ในนิวเคลียส accumbens เพิ่มขึ้นระหว่างการมีเพศสัมพันธ์ในหนูเพศเมีย (Mermelstein และ Becker, 1995; Pfaus et al., 1995) และแฮมสเตอร์ (Meisel et al., 1993; Kohlert และคณะ, 1997; Kohlert และ Meisel, 1999) เช่นเดียวกับการบริหารยาซ้ำการทดสอบพฤติกรรมทางเพศหลายครั้งยังเพิ่มการเพิ่มขึ้นของระดับนิวเคลียส accumbens โดปามีนบอกว่าประสบการณ์ทางเพศสามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในเซลล์โดปามีน (dopamine pathway)Kohlert และ Meisel, 1999).
นิวเคลียส accumbens ประกอบด้วย subregions ชัดเจนทางร่างกายจำนวนมากที่คุ้นเคยมากที่สุดคือเปลือกและแกนกลาง การเชื่อมต่อทางกายวิภาคของเชลล์และแกนดิเวอร์เรจเป็นการบอกว่า subregions ทั้งสองนี้จะควบคุมฟังก์ชั่นต่าง ๆ (Crawley และคณะ 1985a,b; Heimer et al., 1991; Zahm และ Brog, 1992; Brog et al., 1993;Kalivas และ Duffy, 1995; Maldonado-Irizarry และคณะ, 1995; เพียร์ซและคาลิวาส 1995; Pontieri et al., 1995; การเลี้ยงและอื่น ๆ , 1997; Heimer et al., 1997; ตวัดและอัล 1997; สแตรตฟอร์ดและตวัด 1997; Heidbreder และ Feldon, 1998; Lanca et al., 1998; Bassareo และ Di Chiara, 1999; ใน Chiara และคณะ, 1999b; Groenewegen และคณะ, 1999; ตวัด, 1999; McKinzie และคณะ, 1999; Zahm, 1999; สีน้ำตาลและ Molliver 2000) เพราะนิวเคลียส accumbens เป็นนิวเคลียสที่แตกต่างกันมันไม่ชัดเจนว่าการตอบสนองต่อพฤติกรรมทางเพศหญิงจะถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นเพื่อ subregions เฉพาะของนิวเคลียส accumbens หรือกระจายไปทั่วทั้งนิวเคลียส ก่อนหน้านี้เทคนิคที่ใช้ในการตอบคำถามนี้ (เช่น microdialysis) ไม่ไวพอที่จะสำรวจความสามารถในการทำงานของเซลล์สืบพันธุ์ที่แตกต่างกัน ในทางกลับกันการประมวลผลทางอิมมูโนโตเคมีคอลสำหรับโปรตีน c-Fos ให้วิธีการตรวจสอบการกระตุ้นเซลล์แบบแยกส่วนระหว่างกลุ่มย่อยของนิวเคลียส accumbens ดังนั้นจุดประสงค์แรกของการทดลองนี้คือการตรวจสอบว่าการกระตุ้นเซลล์หลังจากพฤติกรรมทางเพศของหญิงนั้นมีการแปลไปยังอนุภูมิภาคเฉพาะของนิวเคลียส accumbens หรือไม่
คุณสมบัติที่น่าสนใจของเส้นทางโดพามีนเหล่านี้คือการข้ามความไว กล่าวอีกนัยหนึ่งเซลล์โดปามีนที่ไวต่อยาก่อนหน้านี้จะแสดงอาการตอบสนองไวต่อยาอื่นที่ให้เป็นครั้งแรก (คันนิงแฮมและตวัด 1992; เพียร์ซและคาลิวาส 1997a; Birrell และ Balfour, 1998; เทย์เลอร์และฮอร์เกอร์ 1999) นอกเหนือจากการผสมข้ามสิ่งกระตุ้นระหว่างยาหลายการศึกษาได้รายงานว่ามีอาการแพ้ข้ามระหว่างการสัมผัสซ้ำ ๆ กับตัวแทนทางเภสัชวิทยาและพฤติกรรมกระตุ้นธรรมชาติ (มิทเชลและสจ๊วต 1990a,b; Tidey และ Miczek, 1997; Fiorino และ Phillips, 1999) ดังนั้นเราจึงตรวจสอบว่าสัตว์ที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาทางเพศจะตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นที่แปลกใหม่ที่รู้จักกันในการกระตุ้นวิถีโดปามีน (เช่น cross-sensitization) เช่นแอมเฟตามีน หากพฤติกรรมทางเพศของผู้หญิงเกิดความรู้สึกไวต่อเส้นทางโดปามีนผู้หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศควรแสดงการตอบสนองเชิงพฤติกรรมที่เพิ่มขึ้นของการฉีดยาบ้าเพียงครั้งเดียว
วัสดุและวิธีการ
วิธีการทั่วไป
สัตว์ แฮมสเตอร์ซีเรียเพศชายและเพศหญิงถูกส่งมาจาก Charles River Laboratories (Kingston, NY) ที่อายุ ∼60 d ตัวเมียถูกเก็บแยกกันและสัตว์กระตุ้นอวัยวะเพศชายถูกเก็บไว้ในกรงสามหรือสี่ตัวในกรงพลาสติก (50.8 × 40.6 × 20.3 cm) ห้องอาณานิคมของสัตว์ได้รับการดูแลรักษาที่อุณหภูมิคงที่ (22 ° C) โดยมีไฟดับระหว่าง 1: 30 และ 11: 30 PM (14 / 10 ชมแสง / รอบมืด) อาหารและน้ำก็ใช้ได้ โฆษณาฟรี.
ขั้นตอนที่ใช้ในการทดลองนี้เป็นไปตามสถาบันสุขภาพแห่งชาติ แนวทางการดูแลและใช้สัตว์ทดลอง และได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์เพอร์ดู
ประสบการณ์ทางเพศ ประมาณ 1 สัปดาห์หลังจากที่ผู้หญิงมาถึงห้องปฏิบัติการพวกเขาถูกตัดรังไข่ทั้งสองข้างภายใต้โซเดียมเพนตาบาบาร์ทัล (Nembutal) การดมยาสลบ (8.5 mg ต่อน้ำหนักร่างกาย 100 กรัม, ip) หลังจากการผ่าตัดรังไข่ผู้หญิงจะถูกแบ่งออกเป็นสองกลุ่ม ผู้หญิงกลุ่มหนึ่งได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์กับผู้ชายตัวกระตุ้น; กลุ่มที่สองยังคงไร้เดียงสาทางเพศ ผู้หญิงทุกคนได้รับฮอร์โมนก่อนสัปดาห์ละครั้งในช่วงสัปดาห์ที่ 6 ที่ 48 และ 24 ชม. ก่อนมีเพศสัมพันธ์ผู้หญิงจะถูกฉีดเข้าใต้ผิวหนังด้วย 10 μgของ estradiol benzoate ในน้ำมันฝ้ายเมล็ด 0.1 μg ในวันทดสอบประสบการณ์ผู้หญิงได้รับโปรเจสเตอโรน 500 μgในน้ำมันฝ้ายเมล็ด 0.1 มล. (ฉีดใต้ผิวหนัง) ผู้หญิงที่ไม่ได้รับประสบการณ์ทางเพศถูกฉีดด้วยระบบฮอร์โมนและยังคงอยู่ในกรงที่บ้านของพวกเขาในห้องอาณานิคม ที่ 4 – 5 ชม. หลังจากการให้ฮอร์โมนโปรเจสเตอโรนหนูแฮมสเตอร์เพศผู้ที่ได้รับประสบการณ์ทางเพศผ่านการใช้งานในการศึกษาพฤติกรรมทางเพศอื่น ๆ ถูกวางไว้ในกรงที่บ้านของหญิงทดลอง คำสั่งของกรงที่บรรจุตัวผู้ถูกหมุนในแต่ละสัปดาห์เพื่อลดความเป็นไปได้ที่คู่ชายและหญิงจะถูกจับคู่มากกว่าหนึ่งครั้งในช่วงสัปดาห์ที่ 6 ของประสบการณ์ทางเพศ
immunocytochemistry แฮมสเตอร์หญิงที่ถูกฆ่าตายด้วยยาเกินขนาดของโซเดียม pentobarbital นั้นถูกทำให้สมบูรณ์ทางหลอดเลือดดำด้วย 25 mm สารละลาย PBS, pH 7.5, สำหรับ 2 min (อัตราการไหล, 25 ml / นาที), ตามด้วย 4% paraformaldehyde ใน PBS สำหรับ 20 min สมองถูกโพสต์คงที่สำหรับ 2 ชม. ในพาราฟอร์มัลดีไฮด์และเก็บไว้ใน 10% ซูโครสพีบีเอสในชั่วข้ามคืนที่ 4 ° C
อนุกรมแช่แข็ง 40 μmส่วนถูกถ่ายผ่านนิวเคลียสทั้งหมด หลังจากการล้าง 10 ขั้นต่ำสามครั้งใน PBS ส่วนต่างๆจะถูกบ่มในแอนติบอดีหลักไปยัง c-Fos (1: 6000 ใน PBS ด้วย 0.3% Triton X-100; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) หรือในแอนติบอดีหลักไปยัง calbindin-D (28 kDa) (1: 6000 ใน PBS ที่มี 0.3% Triton X-100; Chemicon ระหว่างประเทศ, เตเมคูลา, แคลิฟอร์เนีย) ที่ 4 ° C เป็นเวลา 48 ชม. จากนั้นทั้งส่วน c-Fos และ calbindin-D จะถูกบ่มเป็นเวลา 45 นาทีที่อุณหภูมิห้องในแอนติบอดีรองแอนติบอดีต่อกระต่ายที่เป็น biotinylated (1: 200 ใน PBS; ชุด Elite Vectastain ABC; Vector Laboratories, Burlingame, CA) บ่มด้วย avidin-biotin พืชชนิดหนึ่ง peroxidase คอมเพล็กซ์ (1: 50 ใน PBS; ชุด ABC Vectastain Elite) สำหรับ 45 นาทีที่อุณหภูมิห้องโดยมี 10 min สามครั้งในแต่ละ PBS หลังจากการล้างสองครั้งใน PBS และ 10 ขั้นต่ำล้างใน 0.1 m Tris buffer, pH 7.6, ส่วน c-Fos และ calbindin-D ถูกบ่มสำหรับ 5 และ 10 นาทีตามลำดับใน 0.08% diaminobenzidine (DAB) (Aldrich, Milwaukee, WI) ใน Tris buffer ที่ประกอบด้วย 0.003% ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และ 0.015 นาที นิกเกิลคลอไรด์ ทุกส่วนถูกล้างอีกครั้งในบัฟเฟอร์ทริสและน้ำปราศจากไอออนแล้วติดตั้งลงบนสไลด์ที่เคลือบด้วยโครเมียม - สารส้ม สไลด์ถูกทำให้แห้งอบแห้งล้างและปิดฝาโดยใช้ Permount (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA)
การวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ เนื้อเยื่อประสาทย้อมสีสำหรับ calbindin-D ซึ่งแบ่งเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens (Jongen-Relo และคณะ, 1994a; จอห์นสันและวูด 1999) ใช้เพื่อระบุส่วนหนึ่งในแต่ละระดับ rostral, กลางและ caudal ของนิวเคลียสหลัง ส่วนจากนิวเคลียส accumbens ที่ระดับ rostral กลางและหางสีสำหรับ Calbindin แสดงในรูปที่ 1 A-C. มีรายงานว่ามีความแตกต่างที่ชัดเจนน้อยกว่าระหว่างแกนกลางและเปลือกในสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันคาลวินบิน - ดีในหนูแฮมสเตอร์ซีเรียเมื่อเทียบกับหนู แต่การย้อมสีสำหรับเปปไทด์นี้ยังคงสามารถแยกแยะ subregions ของนิวเคลียส accumbensจอห์นสันและวูด 1999) กล่องที่ครอบคลุมขอบเขตการสุ่มตัวอย่างของ 0.1 mm2 (0.2 × 0.5 mm) วางอยู่เหนือเปลือกหลังและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens สำหรับแต่ละส่วน ภาพของแต่ละส่วนถูกพิมพ์ลงบนฟิล์มโปร่งใสและภาพจะถูกวางทับบนส่วน c-Fos ที่สอดคล้องกันสำหรับสัตว์แต่ละตัวเพื่อให้แน่ใจว่ากล่องถูกวางในตำแหน่งเดียวกันสำหรับสัตว์ทั้งหมด รูป 1, D และ Eแสดงให้เห็นว่าส่วนหางหนึ่งจากสัตว์ที่ได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์และได้รับการทดสอบสำหรับพฤติกรรมทางเพศ กล่องถูกวางไว้ในแกนกลางของนิวเคลียสหางในรูปที่ 1 Dและในเปลือกของหางเสียงในรูป1 E. กล่องที่มีขนาดเท่ากันวางอยู่ในส่วนของเนื้อเยื่อเดียวกันในเยื่อหุ้มสมอง cingulate ที่อยู่ตรงกลางและเหนือนิวเคลียสหางด้านหลังที่อยู่ตรงกลางและด้านข้างในแต่ละระดับที่สุ่มตัวอย่างสำหรับนิวเคลียสแอคคัมเบน เนื่องจากเราตั้งสมมติฐานว่าผลของการผสมพันธุ์บน c-Fos อาจมีความผันแปรของ rostral-caudal จึงมีการวิเคราะห์เพียงส่วนเดียวต่อระดับเพื่อเพิ่มความแม่นยำทางกายวิภาคของการสุ่มตัวอย่าง จำนวนเซลล์ภูมิคุ้มกัน c-Fos-immunoreactive ในแต่ละพื้นที่ที่เลือกถูกนับด้วยความช่วยเหลือของกล้องวิดีโอที่เชื่อมต่อกับระบบวิเคราะห์ภาพด้วยคอมพิวเตอร์ (BioQuant MegM; R & M Biometrics, Nashville, TN)
นิวเคลียส accumbens ส่วนเนื้อเยื่อย้อมสีสำหรับ calbindin-D และ c-Fos A-C เป็นส่วนจาก rostral (A) ตรงกลาง (B) และหาง (Cนิวเคลียส accumbens สี (midline is) ซ้าย) สำหรับ Calbindin แสดงการแบ่งระหว่างเชลล์และภูมิภาคย่อยหลัก (ดอกจัน) มี 320 μmระหว่างส่วน rostral และกลางและ 240 μmระหว่างส่วนตรงกลางและส่วนหาง ภาพด้านล่าง (D, E) เป็นตัวอย่างของการย้อมสี c-Fos จากแกนหาง (D) และเชลล์ (E) ของนิวเคลียส accumbens (midline is) ขวา) ของผู้หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศถูกฆ่าตายหลังจากการทดสอบพฤติกรรมทางเพศ รูปสี่เหลี่ยมผืนผ้า แสดงพื้นที่การสุ่มตัวอย่าง (0.2 × 0.5 mm)
ทดลอง 1
การทดลองครั้งแรกตรวจสอบผลกระทบของประสบการณ์ทางเพศและการทดสอบการเหนี่ยวนำ c-Fos ในนิวเคลียส accumbens, หลังหาง caudate นิวเคลียสและเยื่อหุ้มสมอง cingulate เป้าหมายของการทดสอบคือสองเท่า เป้าหมายแรกคือการตรวจสอบว่ามีความแตกต่างในการเปิดใช้งานโทรศัพท์มือถือในพื้นที่สมองใด ๆ เพราะประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้และ / หรือการทดสอบพฤติกรรม หากมีการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของ c-Fos มันจะถูกกำหนดแล้วว่าการเปลี่ยนแปลงนั้นจะถูกแปลไปยัง subregions เฉพาะภายในพื้นที่สมองทั้งสามที่วิเคราะห์
แฮมสเตอร์ซีเรียหญิงได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์หรือยังคงไร้เดียงสาทางเพศ ในช่วงสัปดาห์ประสบการณ์ 6 จำนวนระยะเวลาสะสมที่ผู้หญิงคิดว่า lordosis (ไม่สามารถเคลื่อนย้ายได้พร้อมกับ dorsoflexion ด้านหลัง) ถูกวัดสำหรับการทดสอบ 10 ขั้นต่ำแต่ละครั้ง ไม่มีการบันทึกพฤติกรรมทางเพศของผู้ชาย ในช่วงสัปดาห์ที่ 7 จะมีการฉีด estradiol benzoate และ progesterone แบบเดียวกัน ในครั้งนี้ครึ่งหนึ่งของผู้หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาถูกทดสอบพฤติกรรมทางเพศโดยวางชายผู้ใหญ่ไว้ในกรงที่บ้าน ผู้หญิงที่เหลือถูกขังอยู่ในกรงบ้าน ที่ 60 – 90 ขั้นต่ำหลังจากได้รับสัมผัสกับตัวผู้ตัวเมียจะถูกทำให้สมบูรณ์ในสมองและสมองของพวกมันถูกประมวลผลเพื่อแสดงออกทาง c-Fos หญิงที่ไม่ผ่านการทดสอบพฤติกรรมทางเพศนั้นถูกทำให้สมบูรณ์แบบ 4 ชม. หลังจากการบริหารฮอร์โมน
การวิเคราะห์ข้อมูล. เนื่องจากจำนวนเซลล์ไม่แตกต่างกันระหว่างเพศหญิงที่ไม่ได้ทดสอบพฤติกรรมทางเพศในช่วงสัปดาห์ที่ 7 โดยไม่คำนึงถึงประสบการณ์ทางเพศที่ผ่านมา (ดูตารางที่1 ตัวอย่าง) สตรีที่ทำการทดลองถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่มสุดท้ายเพื่อทำการวิเคราะห์ กลุ่มแรกบรรจุหญิงที่ได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์และผ่านการทดสอบพฤติกรรมทางเพศ (ประสบการณ์ / การทดสอบ n = 6) กลุ่มที่สองประกอบด้วยผู้หญิงที่ไม่เคยได้รับประสบการณ์มาก่อน แต่มีการทดสอบพฤติกรรมทางเพศ (ไม่มีประสบการณ์ / ทดสอบn = 8) กลุ่มสุดท้ายมีแฮมสเตอร์หญิงทั้งหมดที่ไม่ได้ทดสอบพฤติกรรมทางเพศโดยไม่คำนึงถึงประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้ (ไม่มีการทดสอบ n = 13) ทั้งสองกลุ่มที่ไม่ได้รับการทดสอบพฤติกรรมทางเพศรวมกันเพื่อเพิ่มพลังทางสถิติในการวิเคราะห์ จำนวนของเซลล์ย้อมสี c-Fos จากนิวเคลียสหลังหลัง, นิวเคลียสหาง caudate, และเยื่อหุ้มสมอง cingulate เปรียบเทียบระหว่างสามกลุ่ม
การเปรียบเทียบค่าเฉลี่ย±จำนวน SEM ของเซลล์ c-Fos-immunoreactive ในนิวเคลียส accumbens shell และ core ระหว่างกลุ่มที่ไม่มีการทดสอบ
วิเคราะห์จำนวนเซลล์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนร่วม ANOVAs ผลกระทบหลักที่เรียบง่ายและ โพสต์เฉพาะกิจ ทำการทดสอบนิวแมน - เคอลตามความเหมาะสม ข้อมูลพฤติกรรม (ระยะเวลา lordosis) ถูกวิเคราะห์โดยใช้แบบสองด้าน t ทดสอบ
ทดลอง 2
การทดลองที่สองเปรียบเทียบความสามารถในการกระตุ้นแอมเฟตามีนนวนิยายเพื่อสร้างความรู้สึกไวต่อพฤติกรรมในผู้ที่มีประสบการณ์ทางเพศและแฮมสเตอร์หญิงที่ไร้เดียงสาทางเพศ การแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียส accumbens, dorsal caudate nucleus และ cingulate cortex ถูกวิเคราะห์อีกครั้งเพื่อตรวจสอบว่ารูปแบบของกิจกรรมของเซลล์นั้นคล้ายกับผลลัพธ์ที่ได้จาก Experiment 1 หรือไม่
แฮมสเตอร์ซีเรียหญิงได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์หรือยังคงไร้เดียงสาทางเพศ ในสัปดาห์ที่ 7 ผู้หญิงทุกคนถูกพาไปที่สภาพแวดล้อมแปลกใหม่ (เช่นพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแก้ว 10 แกลลอนในห้องที่ไม่คุ้นเคย) 4 ชม. หลังจากการบริหารฮอร์โมน หญิงถูกวางไว้ในพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแก้ว 10 แกลลอนสำหรับ 10 ขั้นต่ำหลังจากนั้นครึ่งหนึ่งของหญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาทางเพศd- แอมเฟตามีนซัลเฟต (1 มก. ต่อ 1 กิโลกรัมน้ำหนักตัว 1.0 มล. ของ 0.9% NaCl ของขวัญจากดร. เดวิดนิโคลส์, มหาวิทยาลัยเพอร์ดู) หญิงที่เหลือถูกฉีดด้วย 0.9% NaCl (1 มก. ต่อ 1 กิโลกรัมน้ำหนักตัว) จากนั้นตัวเมียจะถูกนำกลับไปใส่ในตู้ปลา 10 แกลลอนอีกหนึ่งนาที 60 เพิ่มเติม ช่วงเวลา 70 ขั้นต่ำถูกบันทึกวีดิโอสำหรับการวิเคราะห์กิจกรรมทั่วไปของตัวเมีย ภายใน 30 ขั้นต่ำหลังจากการทดสอบกิจกรรมทั่วไปตัวเมียจะถูกฉีดเข้าที่ภายในเซลล์และสมองของพวกมันจะถูกประมวลผลสำหรับการแสดงออกของ c-Fos
การวิเคราะห์วิดีโอเทป ในช่วงสัปดาห์ 7 กิจกรรม 70 ขั้นต่ำของการทดสอบหัวรถจักรถูกทำวีดิโอ พิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำแก้ว 10 แกลลอนถูกแบ่งออกเป็นสามส่วนเท่า ๆ กันบนหน้าจอวิดีโอและกิจกรรมของหัวรถจักรของผู้หญิงถูกบันทึกในแง่ของจำนวนพื้นที่ข้าม
การวิเคราะห์ข้อมูล. ประวัติทางเพศที่ผ่านมาไม่ได้มีผลต่อกิจกรรมการเคลื่อนไหวของแฮมสเตอร์หญิงฉีดด้วยน้ำเกลือ; ดังนั้นสตรีที่ทำการทดลองถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่มเพื่อทำการวิเคราะห์ กลุ่มแรกประกอบด้วยผู้หญิงที่ได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์และถูกฉีดด้วยยาบ้า (ประสบการณ์ / แอมเฟตามีน n = 8) กลุ่มที่สองประกอบด้วยผู้หญิงที่ได้รับยาบ้า แต่ไม่ได้รับประสบการณ์ทางเพศใด ๆ (ไม่มีประสบการณ์ / ยาบ้าn = 8) กลุ่มสุดท้ายมีแฮมสเตอร์หญิงทั้งหมดที่ฉีดน้ำเกลือโดยไม่คำนึงถึงประสบการณ์ทางเพศใด ๆ ที่ผ่านมา (น้ำเกลือ n = 15) ค่าเฉลี่ยกิจกรรมของหัวรถจักรของเพศหญิงถูกเปรียบเทียบระหว่างกลุ่มการรักษาทั้งสามกลุ่มในช่วงทดสอบ 70 นาที (ในช่วงระยะเวลา 10 นาที) โดยใช้ ANOVAs สองปัจจัย ANOVAs ผลกระทบหลักที่เรียบง่ายและ โพสต์เฉพาะกิจ ทำการทดสอบนิวแมน - เคอลตามความเหมาะสม
จำนวนเซลล์ที่ย้อมสีสำหรับ c-Fos ไม่แตกต่างกันระหว่างเพศเมียที่ฉีดด้วยน้ำเกลือโดยไม่คำนึงถึงประสบการณ์ทางเพศในอดีต ดังนั้นจึงมีการเปรียบเทียบจำนวนเซลล์ที่ถูกย้อมสีด้วย c-Fos จากนิวเคลียสด้านหลัง, นิวเคลียสหางด้านหลัง, และเยื่อหุ้มสมอง cingulate เปรียบเทียบระหว่างกลุ่มการรักษาสามกลุ่มเช่นเดียวกับในการทดลองครั้งแรก วิเคราะห์จำนวนเซลล์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนร่วม ANOVAs ผลกระทบหลักที่เรียบง่ายและ โพสต์เฉพาะกิจ ทำการทดสอบนิวแมน - เคอลตามความเหมาะสม
ผล
ทดลอง 1
มาตรการพฤติกรรมทางเพศ
ระยะเวลา lordosis ระหว่างการทดสอบพฤติกรรมทางเพศในสัปดาห์ 7 ถูกเปรียบเทียบระหว่างประสบการณ์ / การทดสอบกับกลุ่มที่ไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบ ระยะเวลา lordosis เฉลี่ยระหว่างการทดสอบ 10 ขั้นต่ำคือ 341 ± 53 วินาทีสำหรับกลุ่มประสบการณ์ / การทดสอบและ 478 ± 20 วินาทีสำหรับกลุ่มที่ไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบ ผู้หญิงในกลุ่มที่ไม่มีประสบการณ์ / ทดสอบได้สันนิษฐานว่า lordosis เป็นเวลานานกว่าผู้หญิงในกลุ่มประสบการณ์ / การทดสอบอย่างมีนัยสำคัญ (t 6 = 5.131; p = 0.05) นอกจากนี้ประสบการณ์ทางเพศไม่มีผลต่อระยะเวลา lordosis การวิเคราะห์พบว่าไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างระยะเวลาเฉลี่ยสำหรับสัปดาห์ 1 (399 ± 44 วินาที) และสัปดาห์ 7 (341 ± 53 วินาที) สำหรับผู้หญิงในกลุ่มประสบการณ์ / การทดสอบ
การแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียส accumbens
การวิเคราะห์ความแปรปรวนสามทางของเวลาในการรักษาระดับ rostral – caudal ครั้งที่ shell-core ไม่พบว่ามีผลกระทบหลักอย่างมีนัยสำคัญของการรักษาและไม่มีการโต้ตอบสามทางระหว่างการรักษาระดับ accumbens และ shell – core 2); อย่างไรก็ตามการโต้ตอบแบบสองทางที่สำคัญสองครั้ง (เวลาในการรักษาเชลล์ - คอร์และเวลาในการรักษาระดับ rostral – caudal) ถูกตรวจพบ
การแสดงออกของ c-Fos ในเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens ที่ระดับ rostral กลางและหางสำหรับแต่ละกลุ่มการรักษา การวิเคราะห์ความแปรปรวนสามทาง (เวลาการรักษาระดับ rostral – caudal ครั้งเชลล์ - คอร์) ถูกใช้เพื่อตรวจสอบผลกระทบของประสบการณ์ทางเพศและพฤติกรรมที่มีต่อค่าเฉลี่ย± SEM จำนวนเซลล์ c-Fos ไม่พบผลกระทบที่สำคัญอย่างมีนัยสำคัญของการรักษาและไม่มีการโต้ตอบสามทางระหว่างการรักษาระดับ accumbens และ shell-core
การตรวจสอบเวลาในการรักษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างเชลล์ - คอร์เผยให้เห็นผลกระทบที่สำคัญของกลุ่มการรักษาเฉพาะในแกนกลางของนิวเคลียส 3) การเปรียบเทียบแบบหลายคู่พบว่าหญิงที่ทดสอบพฤติกรรมทางเพศในช่วงสัปดาห์ที่ 7 (ประสบการณ์ / การทดสอบและไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบ) มีเซลล์ย้อมสี c-Fos ในแกนกลางของ accumbens นิวเคลียสมากกว่าเพศหญิงที่ไม่ได้ทดสอบ (ไม่มี ทดสอบ) (Newman – Keuls, p <0.01) ไม่พบผลกระทบของการทดสอบในเปลือกของนิวเคลียส accumbens นอกจากนี้ไม่มีผลกระทบที่ชัดเจนของประสบการณ์ทางเพศต่อจำนวนเซลล์ที่แสดงออกถึง c-Fos ทั้งในเปลือกหรือแกนกลางของแอคคัมเบน
การแสดงออกของ c-Fos ในเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens ทรุดตัวลงทั่วระดับ rostral - caudal ANOVA สามทางเปิดเผยการมีปฏิสัมพันธ์สองทางระหว่างการรักษาและค่าเฉลี่ย± SEM จำนวนเซลล์ c-Fos ในเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens (เวลาการรักษาเปลือก - แกน;F (2,24) = 4.243; p<0.026) ANOVA ทางเดียวที่ตรวจสอบปฏิสัมพันธ์นี้พบผลกระทบหลักที่สำคัญของกลุ่มบำบัดเฉพาะในแกนกลางนิวเคลียสเท่านั้น (F (2,24) = 7.341; p<0.003) และไม่อยู่ในเปลือกของ accumbens (F (2,24) = 1.271; p> 0.1) ตัวอักษรที่แตกต่างกัน บ่งชี้ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างกลุ่ม
การพิสูจน์เวลาในการรักษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างระดับ rostral-caudal พบว่ามีผลกระทบอย่างสำคัญต่อกลุ่มการรักษาทั้งในระดับ rostral และ caudal แต่ไม่ได้อยู่ในระดับกลางของนิวเคลียส accumbens (รูปที่ 4) นิวแมน Keuls โพสต์เฉพาะกิจ การทดสอบแสดงให้เห็นว่าเพศหญิงที่ได้รับประสบการณ์ทางเพศ 6 สัปดาห์และได้รับการทดสอบพฤติกรรมทางเพศ (ประสบการณ์ / การทดสอบ) มีเซลล์ c-Fos-positive ในนิวเคลียส rostral accumbens มากกว่าหญิงที่ถูกทดสอบ แต่ไม่เคยได้รับประสบการณ์ทางเพศมาก่อน (ไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบ; p <0.05) และหญิงที่ไม่ได้รับการทดสอบพฤติกรรมทางเพศ (ไม่มีการทดสอบ;p <0.01) โพสต์เฉพาะกิจ การทดสอบพบผลลัพธ์ที่คล้ายกันสำหรับนิวเคลียสหาง ตัวเมียในกลุ่มประสบการณ์ / การทดสอบมีจำนวนเซลล์ที่แสดงออก c-Fos ในนิวเคลียสหางมากขึ้นกว่าเพศหญิงในกลุ่มที่ไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบ (p <0.05) และไม่มีกลุ่มทดสอบ (p <0.01) ดังนั้นการทดสอบพฤติกรรมทางเพศในช่วงสัปดาห์ที่ 7 ได้เพิ่มจำนวนของเซลล์ที่ย้อมสี c-Fos ในนิวเคลียส rostral และ caudal ซึ่งเฉพาะกับผู้หญิงที่ได้รับประสบการณ์ 6 สัปดาห์เท่านั้น
การแสดงออกของ c-Fos ผ่านมิติ rostral – caudal ของนิวเคลียส accumbens ทรุดตัวลงทั่วแกนกลางและเปลือก แม้ว่าการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสามทางชี้ให้เห็นว่าการปฏิสัมพันธ์แบบสองทางระหว่างกลุ่มการรักษาและค่าเฉลี่ย± SEM จำนวนเซลล์ c-Fos ผ่านระดับ rostral – caudal ของนิวเคลียส accumbens เข้าหาอย่างมีนัยสำคัญเท่านั้น (F (4,48) = 2.365; p <0.066) เราตรวจสอบนิวเคลียสแต่ละระดับแยกกันเพื่อผลของการรักษาต่อการย้อมสี c-Fos ANOVA ทางเดียวเปิดเผยผลกระทบหลักที่สำคัญของกลุ่มการรักษาทั้งในระดับ rostral (F (2,48) = 5.230; p<0.009) และระดับหาง (F (2,48) = 7.455; p <0.002) แต่ไม่อยู่ในระดับกลาง (F (2,48) = 1.744; p> 0.1) ของนิวเคลียส accumbens ตัวอักษรที่แตกต่างกันบ่งชี้ความแตกต่างที่สำคัญระหว่างกลุ่ม
การแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียส caudate และ cingulate cortex
จำนวนเซลล์จากนิวเคลียสหางด้านหลังถูกวิเคราะห์ด้วยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสามทาง การวิเคราะห์เผยให้เห็นเพียงปฏิสัมพันธ์ระหว่างการรักษาและการแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียสตรงกลางและด้านข้าง caudate (F (2,24) = 3.514;p <0.046) อย่างไรก็ตามการวิเคราะห์แยกนิวเคลียสหางตรงกลางและด้านข้างโดย ANOVA ทางเดียวไม่พบความแตกต่างของจำนวนเซลล์ที่ย้อมสี c-Fos ระหว่างประสบการณ์ / การทดสอบไม่มีประสบการณ์ / การทดสอบและไม่มีกลุ่มทดสอบ (ตาราง2) นอกจากนี้ยังไม่พบผลกระทบหลักของประสบการณ์ทางเพศหรือพฤติกรรมต่อจำนวนเซลล์ที่แสดง c-Fos หรือปฏิกิริยาใด ๆ ที่พบในเยื่อหุ้มสมอง cingulate (ไม่ได้แสดงข้อมูล)
ค่าเฉลี่ย±จำนวน SEM ของเซลล์ c-Fos-immunoreactive ในนิวเคลียสตรงกลางและด้านข้างด้านหลัง
ทดลอง 2
กิจกรรมของหัวรถจักร
ANOVA แบบสองทาง (ระยะเวลาการทดสอบการรักษา) เปรียบเทียบกิจกรรมเฉลี่ยของหญิงในประสบการณ์ / แอมเฟตามีนไม่มีประสบการณ์ / แอมเฟตามีนและกลุ่มการรักษาน้ำเกลือตลอดการทดสอบ 70 ขั้นต่ำเปิดเผยปฏิสัมพันธ์ระหว่างกลุ่มการรักษาและระยะเวลาการทดสอบ เพื่อตรวจสอบการมีปฏิสัมพันธ์นี้กลุ่มการรักษาของแต่ละบุคคลจะถูกตรวจสอบแยกกันด้วยการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว การวิเคราะห์แสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในกิจกรรมทั่วไปหมายถึงในช่วงการทดสอบ 70 ขั้นต่ำสำหรับหญิงสองกลุ่มที่ถูกฉีดด้วยยาบ้า (ประสบการณ์ / ยาบ้าและไม่มีประสบการณ์ / ยาบ้า) อย่างไรก็ตามกิจกรรมทั่วไปของผู้หญิงที่ได้รับน้ำเกลือไม่เปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญใน 70 นาที (รูปที่5) นิวแมน Keuls โพสต์เฉพาะกิจการทดสอบถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดระยะเวลาการทดสอบ 10 ขั้นต่ำที่แตกต่างกัน การเปรียบเทียบแบบหลายคู่พบว่ากิจกรรมทั่วไปของผู้หญิงที่มีเพศสัมพันธ์เนื่องจากยาบ้าเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ 10 นาทีหลังจากฉีดยา (p <0.05) นอกจากนี้เมื่อเทียบกับ 10 นาทีก่อนการฉีดผู้หญิงในกลุ่มบำบัดประสบการณ์ / แอมเฟตามีนยังคงมีความกระตือรือร้นมากกว่า 20 นาที (p <0.05) และ 30 นาที (p<0.05) หลังฉีด ในทางตรงกันข้ามผลของแอมเฟตามีนในสตรีที่ไร้เดียงสาทางเพศไม่ปรากฏให้เห็นจนกว่าจะถึง 20 นาทีหลังการฉีดยา ในขณะนี้ผู้หญิงเหล่านี้มีความกระตือรือร้นมากกว่าเมื่อเทียบกับ 10 นาทีก่อนการฉีด (p <0.05) นอกจากนี้กิจกรรมของหญิงไร้เดียงสาที่ได้รับแอมเฟตามีนยังคงเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเป็นเวลา 30 นาที (p <0.05) และ 40 นาที (p<0.01) หลังฉีด
ผลของยาบ้าต่อกิจกรรมทั่วไปของแฮมสเตอร์หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาทางเพศ การวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง (ระยะเวลาการทดสอบการรักษา) เปิดเผยการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างกลุ่มการรักษาและระยะเวลาการทดสอบ (F (12,150) = 2.288;p <0.011) สำหรับค่าเฉลี่ย±กิจกรรม SEM นับ การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวของกลุ่มบำบัดแต่ละกลุ่มแสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในกิจกรรมทั่วไปสำหรับสตรีในประสบการณ์ / แอมเฟตามีน (F (6,150) = 3.0468; p <0.008) และไม่มีประสบการณ์ / ยาบ้า (F (6,150) = 3.893;p <0.001) กลุ่มบำบัด กิจกรรมของตัวเมียที่ฉีดน้ำเกลือไม่เปลี่ยนแปลง (F (6,150) = 1.619;p <0.1) โพสต์นี้ ผลการทดสอบบ่งชี้ว่าหญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศตอบสนองต่อแอมเฟตามีนได้เร็วขึ้นแสดงถึงการเพิ่มขึ้นของกิจกรรมภายใน 10 นาทีแรกหลังการฉีด เพศหญิงที่ไร้เดียงสาไม่ตอบสนองต่อแอมเฟตามีนจนกระทั่ง 20 ขั้นต่ำหลังจากการฉีด * * * *p <0.05 เทียบกับช่วงเวลาก่อนการทดสอบ
การแสดงออก c-Fos
การวิเคราะห์ความแปรปรวนสามทาง (เวลาการรักษาระดับ rostral - caudal ครั้งเชลล์ - คอร์) ถูกนำมาใช้เพื่อตรวจสอบผลกระทบของประสบการณ์ทางเพศและยาบ้าในการแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียส accumbens ไม่พบผลกระทบที่สำคัญอย่างมีนัยสำคัญของการรักษาและไม่มีการโต้ตอบสามทางระหว่างการรักษาระดับ accumbens และ shell-core นอกจากนี้การวิเคราะห์ไม่ได้เปิดเผยการมีปฏิสัมพันธ์ระหว่างกลุ่มการรักษาและการแสดงออกของ c-Fos ในเปลือกและแกนกลางของ accumbens หรือระหว่างกลุ่มการรักษาและการติดฉลาก c-Fos ในระดับ rostral, กลางและหางของนิวเคลียส accumbens ( ไม่แสดงข้อมูล)
จำนวนเซลล์จากนิวเคลียสหางด้านหลังถูกวิเคราะห์ด้วยการวิเคราะห์ความแปรปรวนสามทาง การวิเคราะห์เบื้องต้นพบว่าไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญของประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้หรือแอมเฟตามีนต่อจำนวนเซลล์บวก c-Fos นอกจากนี้ยังไม่มีผลกระทบจากประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้หรือแอมเฟตามีนต่อจำนวนเซลล์ที่แสดง c-Fos ที่พบในเยื่อหุ้มสมอง cingulate โดยใช้ ANOVA แบบสองทาง (ไม่ได้แสดงข้อมูล)
อภิปราย
วัตถุประสงค์ของการตรวจสอบนี้มีสองเท่า ครั้งแรกที่เราตรวจสอบผลกระทบของประสบการณ์ทางเพศต่อกิจกรรมของเซลล์ใน subregions ที่แตกต่างกันของนิวเคลียส accumbens ประเด็นที่สองไม่ว่าจะเป็นประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้จะทำให้ไวต่อสารโดปามีน mesolimbic ได้รับการตรวจสอบโดยการเปรียบเทียบการตอบสนองพฤติกรรมของสัตว์ที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสากับการฉีดแอมเฟตามีน การค้นพบของเราไม่เพียง แต่บ่งบอกว่าพฤติกรรมทางเพศของผู้หญิงสามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในนิวเคลียส accumbens แต่ยังรวมถึงประสบการณ์ทางเพศที่สามารถตอบสนองต่อการตอบสนองของแอมเฟตามีนประสาทไวต่อความรู้สึก
พฤติกรรมทางเพศมีผลต่อการแสดงออกของ c-Fos ในเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens
การทดสอบพฤติกรรมทางเพศเพิ่มการแสดงออกของ c-Fos ในแกนกลาง แต่ไม่ใช่เปลือกของนิวเคลียส accumbens สนับสนุนการวิจัยก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าการเผชิญหน้าทางเพศครั้งเดียวสามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในนิวเคลียส accumbens ในหนูหญิง (Meisel et al., 1993; Joppa et al., 1995; Mermelstein และ Becker, 1995; Pfaus et al., 1995; Kohlert และคณะ, 1997; Kohlert และ Meisel, 1999) วรรณคดีที่กล่าวถึงการแบ่งขั้วหน้าที่ของนิวเคลียส accumbens ประกอบด้วยรายงานจำนวนมากของการเปลี่ยนแปลงที่แตกต่างกันในการส่งโดปามีนภายในเปลือกและแกนกลางของนิวเคลียส accumbens ในการตอบสนองต่อการกระตุ้นทางเภสัชวิทยาและสรีรวิทยา การบริหารยาเสพติดหลายรายการของการละเมิดผลในการเพิ่มการเลือกในระดับโดปามีนนอกเซลล์ในเปลือกของนิวเคลียส accumbens (Pontieri et al., 1995; Nisell และคณะ, 1997; เพียร์ซและคาลิวาส 1997a; Tanda et al., 1997; Tanda และ Di Chiara, 1998; Barrot และคณะ, 1999; Cadoni และ Di Chiara, 1999) ในลักษณะที่คล้ายกันอาหารอร่อยมากTanda และ Di Chiara, 1998; Di Chiara และคณะ, 1999a; ตวัด, 1999) ความเครียดเล็กน้อย (เช่นเท้าสั่นสะเทือน) (Kalivas และ Duffy, 1995; Tidey และ Miczek, 1997; Bruijnzeel et al., 1999; Wu et al., 1999) และความแปลกใหม่ด้านสิ่งแวดล้อม (Rebec et al., 1997;รีเบค 1998) ยังเลือกเพิ่มการส่งโดปามีนในเปลือกของนิวเคลียส accumbens
การค้นพบของเรานั้นสอดคล้องกับสมมติฐานที่ว่าเปลือกและแกนกลางมีความแตกต่างกันในเชิงหน้าที่แม้ว่าเราจะพบแกนกลางและไม่ใช่เปลือกเพื่อตอบสนองต่อพฤติกรรมทางเพศ อย่างไรก็ตามเป็นไปได้ว่ามีการเปลี่ยนแปลงของ c-Fos immunoreactivity ในเปลือกของนิวเคลียส accumbens แต่ไม่พบการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ เชลล์ถูกจัดระเบียบอย่างซับซ้อนในภูมิภาคย่อยที่แตกต่างกันคืออยู่ตรงกลางหน้าท้องและด้านข้างของเปลือกที่มีหน้าท้องและด้านหลังของเปลือกตรงกลางอาจเป็นสอง subregions ที่แตกต่างกันมากขึ้น (Groenewegen และคณะ, 1999) ภูมิภาคย่อยของเปลือกเช่นเดียวกับส่วนที่อยู่ตรงกลางและด้านข้างของแกนกลางได้รับการรวมกันที่แตกต่างกันของปัจจัยการผลิตจากพื้นที่เยื่อหุ้มสมองและ subcortical (Groenewegen และคณะ, 1999) ยิ่งไปกว่านั้นที่ตั้งอยู่ภายในอนุภูมิภาคเหล่านี้เป็นวงประสาทของเซลล์ประสาทที่มีหน้าที่แตกต่างกันออกไปGroenewegen และคณะ, 1999) เนื่องจากผลกระทบของพฤติกรรมทางเพศต่อการแสดงออกของ c-Fos ในการศึกษานี้ถูกตรวจสอบเฉพาะเปลือก dorsomedial จึงเป็นไปได้ว่าจำนวนของเซลล์ c-Fos-positive เปลี่ยนไปจริง ๆ ในภูมิภาคย่อยที่แตกต่างกัน
แม้จะมีการสังเกตว่าการทำงานของนิวเคลียส accumbens มีการแปลไปยังภูมิภาคของเปลือกมันก็มีเหตุผลที่จะตั้งสมมติฐานว่าวงจรประสาทที่แตกต่างกันภายในนิวเคลียส accumbens เป็นสื่อกลางคุณสมบัติเสริมแรงของพฤติกรรมที่แตกต่างกัน Carelli และคณะ (2000)เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รายงานว่านิวเคลียส accumbens เซลล์ประสาทในหนูแสดงกิจกรรมของเซลล์ประสาทที่คล้ายกันในระหว่างการผ่าตัดตอบสนองต่อการเสริมธรรมชาติสอง (เช่นอาหารและน้ำ) แต่รูปแบบการยิงที่แตกต่างกันในระหว่างการตอบสนองสำหรับ reinforcer ธรรมชาติกับโคเคน พวกเขาได้ข้อสรุปว่าวงจรประสาทที่แยกจากกันในนิวเคลียส accumbens ประมวลผลข้อมูลเกี่ยวกับอาหารและการเสริมแรงน้ำกับรางวัลโคเคน (Carelli และคณะ, 2000).
ประสบการณ์ทางเพศมีผลต่อการแสดงออกของ c-Fos ผ่านแกน rostral – caudal ของนิวเคลียส accumbens
วรรณกรรมที่ตรวจสอบองค์กร subnuclear ผ่านนิวเคลียส rostral-caudal accumbens นั้นมีขนาดเล็ก อย่างไรก็ตามมีการสังเกตการทำงานและกายวิภาคที่แตกต่างกันอย่างชัดเจน การค้นพบของเรานั้นสอดคล้องกับการศึกษาที่ได้รายงานการควบคุมความแตกต่างของการตอบสนองทางประสาทและมอเตอร์ในแกน rostral-caudal ของ accumbens Cholecystokinin (CCK) ปรับเปลี่ยนผลกระทบที่เกิดจากโดปามีนในโดโรมีนและนิวเคลียสในระดับที่แตกต่างกันCrawley และคณะ 1985a,b), hyperlocomotion ที่เกิดจากโดปามีนโพเทนชิโอเรชั่นเมื่อถูกแทรกซึมเข้าไปในบริเวณที่มีหาง, บริเวณที่ถูกกระตุ้นโดยเซลล์ประสาท CCK ที่ให้โคปาโลพาซินด้วยโดพามีน (Crawley และคณะ 1985a,b; Lanca et al., 1998) อย่างไรก็ตาม CCK นั้นไม่ทำงานตามพฤติกรรมเมื่อฉีดเข้าไปในนิวเคลียส rostral accumbens ซึ่งเป็นบริเวณที่ได้รับ CCK และโดปามีนที่แยกออกมา (Crawley และคณะ 1985a,b; Lanca et al., 1998) มีรายงานว่าการฉีดยาโดยตรงของแอมเฟตามีนในเปลือก rostral, caudal shell หรือแกนกลางมีผลต่อพฤติกรรมของพฤติกรรมและระดับโดปามีนและเซโรโทนินในระดับที่แตกต่างกัน (Heidbreder และ Feldon, 1998) ระเบียบ opioid เปปไทด์, สาร P, ตัวรับ dopamine D1 (Voorn และ Docter, 1992; Jongen-Relo และคณะ, 1994b; Voorn et al., 1994) และปล่อย acetylcholine (Jongen-Relo และคณะ, 1995) โดยตัวรับโดปามีนและโดพามีนก็มีความแตกต่างกันระหว่างส่วน rostral และส่วนหางของ accumbens โดยที่ accumbens rostral มีความไวต่อการโดปามีนและการบริหาร แม้ว่าจะมีรายงานความแตกต่างในการทำงานระหว่างนิวเคลียส rostral และ caudal accudens แต่ทำไมความแตกต่างของหน้าที่เหล่านี้ยังคงไม่เข้าใจ
ประสบการณ์ทางเพศมีผลต่อการเคลื่อนไหวของแอมเฟตามีนที่เกิดจากหัวรถจักร
ผลการรายงานในที่นี้และจากการศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่าประสบการณ์ทางเพศก่อนหน้านี้มีความไวต่อการตอบสนองของเซลล์ประสาทต่อการทดสอบพฤติกรรมทางเพศKohlert และ Meisel, 1999) และกิจกรรมของเซลล์ในนิวเคลียส accumbens (การศึกษานี้) อย่างไรก็ตามข้อกังวลอย่างหนึ่งคือผู้หญิงที่มีประสบการณ์ในการศึกษาก่อนหน้านี้อาจตอบสนองต่อการทดสอบพฤติกรรมทางเพศและการชี้นำสิ่งแวดล้อมเพราะประสบการณ์ทางเพศและการทดสอบได้ดำเนินการในห้องเดียวกัน ตัวชี้นำสิ่งแวดล้อมเกี่ยวข้องกับพฤติกรรมที่ถูกกระตุ้นสามารถรับคุณสมบัติกระตุ้นและเพิ่มระดับโดปามีนในนิวเคลียส accumbens (Reid et al., 1996, 1998; Watson and Little, 1999) ข้อกังวลประการที่สองคือเนื่องจากมาตรการของพฤติกรรมทางเพศของผู้ชายไม่ได้ถูกบันทึกไว้จึงไม่เป็นที่ทราบกันว่าเพศหญิงสองกลุ่มที่ทำการทดสอบสำหรับพฤติกรรมทางเพศที่ได้รับการกระตุ้นทางช่องคลอดในช่องคลอดเทียบเท่าหรือไม่ มีรายงานว่าการกระตุ้น vaginocervical นั้นจำเป็นต่อการหลั่งโดปามีนในนิวเคลียส accumbens ในระหว่างการผสมพันธุ์ (Kohlert และคณะ, 1997) บางทีสตรีที่มีเพศสัมพันธ์ก็ได้รับการกระตุ้นด้วย vaginocervical มากกว่า (ไม่ได้วัดในการศึกษานี้) ซึ่งเป็นการเพิ่มการชักนำ c-Fos ดังนั้นเพื่อตรวจสอบว่าพฤติกรรมทางเพศของผู้หญิงมีความไวต่อเส้นทางโดปามีน mesolimbic เราจึงตรวจสอบว่าผู้หญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศและไร้เดียงสาตอบสนองต่อการฉีดแอมเฟตามีนที่แตกต่างกันหรือไม่ นอกจากนี้เพื่อให้แน่ใจว่าการตอบสนองที่ไวต่อการสังเกตนั้นเป็นเพราะพฤติกรรมทางเพศซ้ำ ๆ และไม่ใช่เพราะความสัมพันธ์ของสภาพแวดล้อมที่มีต่อพฤติกรรมทางเพศการตอบสนองเชิงพฤติกรรมของแฮมสเตอร์ถึงยาบ้าถูกทดสอบในสภาพแวดล้อมใหม่
ยาบ้าเพิ่มกิจกรรมทั่วไปในแฮมสเตอร์หญิงทั้งหมด อย่างไรก็ตามหญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศตอบแอมเฟตามีนเร็วกว่าเพศหญิงที่ไร้เดียงสา ผลลัพธ์เหล่านี้ตรวจสอบสมมติฐานที่ว่าพฤติกรรมทางเพศซ้ำ ๆ สามารถกระตุ้นเซลล์ประสาทในเส้นทางโดปามีน mesolimbic และแนะนำว่าการเปลี่ยนแปลงในเส้นทางทำให้เกิดการตอบสนองพฤติกรรมไวต่อทั้งพฤติกรรมกระตุ้นธรรมชาติและกระตุ้นจิต (cross-sensitization)
การค้นพบนี้สอดคล้องกับสมมติฐานที่ว่ามีกลไกประสาทแบบมาบรรจบกันเป็นสื่อกลางในการตอบสนองต่อยาและพฤติกรรมทางเพศ (Robinson และ Berridge, 1993; เพียร์ซและคาลิวาส 1997b) การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้หลายแห่งพบว่ามีอาการแพ้ข้ามระหว่างการได้รับยาซ้ำกับพฤติกรรมที่กระตุ้นโดยธรรมชาติ ความเครียดจากการพ่ายแพ้ทางสังคมช่วยลดเวลาในการได้รับโคเคนในหนูด้วยตนเอง (Tidey และ Miczek, 1997) สภาพแวดล้อมที่จับคู่กับการฉีดมอร์ฟีนซ้ำ ๆ สามารถทำให้พฤติกรรมทางเพศในหนูตัวผู้ (มิทเชลและสจ๊วต 1990a,b) การปรับสภาพยาบ้ายังช่วยให้พฤติกรรมทางเพศในหนูตัวผู้ไร้เดียงสาทางเพศสัมพันธ์และมีความสัมพันธ์กับการเติมสารโดปามีนในนิวเคลียส accumbens (Fiorino และ Phillips, 1999).
การแสดงออกของ c-Fos ถูกวิเคราะห์ในนิวเคลียส accumbens หลังการรักษาแอมเฟตามีน มันถูกตั้งสมมติฐานว่ายาบ้าจะเพิ่มการแสดงออกของ c-Fos ในนิวเคลียส accumbens และในระดับที่มากขึ้นในเพศหญิงที่มีประสบการณ์ทางเพศ อย่างไรก็ตามไม่มีผลของแอมเฟตามีนต่อจำนวนเซลล์ที่แสดง c-Fos ในส่วนย่อยของนิวเคลียส accumbens มันเห็นได้ชัดจากตาราง3 สัตว์ควบคุมในการทดลอง 2 (ตัวเมียน้ำเกลือ) มีจำนวนเซลล์ c-Fos-positive สูงกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับสัตว์ควบคุมในการทดลอง 1 (ไม่มีตัวเมียทดสอบ) Badiani et al. (1998) รายงานว่าความแปลกใหม่เพิ่มขึ้น C-เหลวไหล เนื้อหา mRNA ในนิวเคลียส accumbens และผลกระทบของความแปลกใหม่นี้C-เหลวไหล เนื้อหามีความแข็งแกร่งในหลายพื้นที่ของสมองซึ่งการบริหารแอมเฟตามีนในสภาพแวดล้อมใหม่ไม่ได้สร้างการตอบสนองที่เพิ่มขึ้น ดังนั้นจึงเป็นไปได้ว่าในการศึกษาของเราความเครียดของการถูกส่งไปยังสภาพแวดล้อมที่แปลกใหม่ของห้องทดสอบเปิดใช้งานการสังเคราะห์โปรตีน c-Fos จึงกำบังการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของ c-Fos ที่เกิดจากยาบ้าและประสบการณ์ทางเพศ
ค่าเฉลี่ย± SEM จำนวนฐานของเซลล์ c-Fos-immunoreactive ในนิวเคลียส accumbens เชลล์และแกนกลางสำหรับควบคุมสัตว์ในการทดลอง 1 และ 2
ศักยภาพที่สำคัญ
การทดลองเหล่านี้เข้าร่วมรายการการศึกษาที่เพิ่มขึ้น (มิทเชลและสจ๊วต 1990b; Fiorino และ Phillips, 1999; Miczek และคณะ, 1999) แสดงให้เห็นว่าประสบการณ์ของสัตว์สามารถทำให้ไวต่อการตอบสนองของเส้นทางโดปามีน mesolimbic ทั้งต่อพฤติกรรมที่เป็นส่วนหนึ่งของเพลงตามธรรมชาติของสัตว์และยาบางชนิดที่มนุษย์รู้จักว่าเป็นการละเมิด (ปรีชาญาณและ Bozarth, 1987) ประเด็นสำคัญในการวิจัยเกี่ยวกับการใช้ยาเสพติดคือความอ่อนแอของแต่ละบุคคลต่อผลกระทบของยาเสพติด (Newcomb, 1992; Robinson และ Berridge, 1993) และโดยรวมการวิจัยนี้อาจให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการพัฒนาของการติดยาเสพติดในคน
เชิงอรรถ
- ที่ได้รับ มิถุนายน 8, 2000
- ได้รับการแก้ไข ธันวาคม 12, 2000
- ได้รับการยอมรับ ธันวาคม 20, 2000
งานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนโดยมูลนิธิวิทยาศาสตร์แห่งชาติแกรนท์ IBN-9723876 เราขอขอบคุณ Melissa Zila, Shannon McCanna, Marchelle Baker, Michael Huntington และ Deborah Shelley สำหรับความช่วยเหลือจากผู้เชี่ยวชาญในการทดสอบพฤติกรรมและการประมวลผล c-Fos
จดหมายควรได้รับการติดต่อกับดร. Robert L. Meisel, ภาควิชาจิตวิทยา, มหาวิทยาลัย Purdue, West Lafayette, IN 47907-1364 E-mail: [ป้องกันอีเมล].
- ลิขสิทธิ์© 2001 Society for Neuroscience
;