แหล่ง
ศูนย์ Wagoner สำหรับโรคพิษสุราเรื้อรังและ ติดยาเสพติด วิจัยสถาบันประสาทวิทยาศาสตร์, มหาวิทยาลัยเท็กซัสที่ออสติน, ออสติน, เท็กซัส, 78712, สหรัฐอเมริกา [ป้องกันอีเมล].
นามธรรม
นามธรรม:
พื้นหลัง:
การไร้ความสามารถในการลดหรือควบคุมปริมาณแอลกอฮอล์เป็นอาการของเครื่องหมายสำหรับความผิดปกติของการใช้แอลกอฮอล์ งานวิจัยเกี่ยวกับรูปแบบพฤติกรรมและพันธุกรรมที่แปลกใหม่ของการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากประสบการณ์ในการดื่มจะช่วยเพิ่มความรู้เกี่ยวกับความผิดปกติในการใช้แอลกอฮอล์ของเรา ก่อนหน้านี้มีการสังเกตพฤติกรรมการดูแลตนเองของแอลกอฮอล์ที่แตกต่างเมื่อเปรียบเทียบกับลูกผสม F1 สองสายพันธุ์: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) แสดงการลดลงของการดื่มแอลกอฮอล์หลังจากประสบการณ์กับแอลกอฮอล์ที่มีความเข้มข้นสูงและระยะเวลาที่เลิกดื่ม ในขณะที่ C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) แสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืน ฟีโนไทป์เหล่านี้น่าสนใจเพราะลูกผสมเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงการเกิดขึ้นของการเพิ่มทางพันธุกรรม (BxN) และ overdominance (BxF) ในการบริโภคเอทานอลในลักษณะที่ขึ้นกับประสบการณ์
โดยเฉพาะอย่างยิ่ง BxF มีความต้องการแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่องและ BxN ลดการดื่มแอลกอฮอล์ลงหลังจากประสบการณ์ที่มีความเข้มข้นของเอทานอลสูง อย่างไรก็ตามประสบการณ์ที่มีความเข้มข้นของเอทานอลต่ำทำให้เกิดความพึงพอใจของแอลกอฮอล์ต่อลูกผสมทั้งสอง.
ในการศึกษาปัจจุบันเราทดสอบสมมติฐานว่าฟีโนไทป์เหล่านี้แสดงโดยการผลิตที่แตกต่างกันของปัจจัยการถอดความที่ไม่สามารถอธิบายได้คือΔFosBในด้านของรางวัลความเกลียดชังและความเครียดที่เกี่ยวข้องกับสมอง
ผล:
การเปลี่ยนแปลงของเส้นประสาทพลาสติก (วัดจากระดับΔFosB) ขึ้นอยู่กับประสบการณ์เช่นเดียวกับพื้นที่สมองและจีโนมที่เฉพาะเจาะจงสนับสนุนเพิ่มเติมว่าวงจรประสาทภายใต้แรงบันดาลใจด้านการบริโภคเอทานอล.
หนู BxN ที่มีความต้องการแอลกอฮอล์ลดลงมีระดับΔFosBในนิวเคลียส Edinger-Westphal ต่ำกว่าหนูที่แสดงการดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและเพิ่มระดับΔFosBใน amygdala อยู่ตรงกลางเมื่อเปรียบเทียบกับหนูควบคุม
หนู BxN ที่แสดงความพึงพอใจแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่องแสดงระดับΔFosBที่สูงขึ้นในพื้นที่หน้าท้องหน้าท้อง นิวเคลียส Edinger-Westphal และ amygdala (ดิวิชั่นกลางและด้านข้าง)
ยิ่งกว่านั้นใน หนู BxN ระดับ BFosB ในนิวเคลียสของ Edinger-Westphal และบริเวณท้องหน้าท้องมีความสัมพันธ์เชิงบวกกับการตั้งค่าเอทานอลและการบริโภคอย่างมีนัยสำคัญ. นอกจากนี้การวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นพบว่าหนูเอทานอลไร้เดียงสาที่มีระดับΔFosBต่ำโดยรวมอยู่ในกลุ่มในขณะที่หนูจำนวนมากแสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนด้วยระดับΔFosBสูงโดยรวมอยู่ในกลุ่มด้วยกัน
สรุป
จากการเปรียบเทียบและเปรียบเทียบฟีโนไทป์ของแอลกอฮอล์สองชนิดการศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าวงจรที่เกี่ยวข้องกับการให้รางวัลและความเครียด (รวมถึงนิวเคลียสของ Edinger-Westphal, พื้นที่หน้าท้องส่วนล่าง, อะมิกดาลา) มีลักษณะเป็นพลาสติกที่สำคัญ
พื้นหลัง
มีปัจจัยด้านความอ่อนไหวต่อสิ่งแวดล้อมและพันธุกรรมที่เกี่ยวข้องกับการดื่มสุราและการติดสุรา ความสามารถในการดื่มแอลกอฮอล์ปริมาณมากที่มีผลเพียงเล็กน้อยต่อบุคคลนั้นเป็นอาการเริ่มแรกในผู้ติดสุราจำนวนมากแสดงว่าการตอบสนองแอลกอฮอล์ในระดับต่ำเป็นปัจจัยเสี่ยงสำคัญในการพัฒนาโรคพิษสุราเรื้อรัง1,2] การกำหนดปัจจัยทางระบบประสาทที่เอื้อต่อการควบคุมแอลกอฮอล์จะช่วยให้เราเข้าใจถึงการใช้แอลกอฮอล์และการใช้ในทางที่ผิดและเป็นกลยุทธ์ที่มีประสิทธิภาพสำหรับการพัฒนาวิธีการรักษาที่พัฒนาขึ้นสำหรับผู้ที่ได้รับการวินิจฉัยว่าผิดปกติจากการดื่มแอลกอฮอล์ การใช้แบบจำลองหนูเพื่อเลียนแบบโรคของมนุษย์เป็นเครื่องมือที่ทรงพลังในการพัฒนาความเข้าใจโรคนี้และปรับปรุงการรักษา มีโมเดลหนูหลายตัวเพื่อศึกษาแง่มุมของการใช้แอลกอฮอล์ในทางที่ผิดและโรคพิษสุราเรื้อรัง. ขอบเขตที่หนูจะจัดการแก้ไขปัญหาเอทานอลด้วยตนเองภายใต้สภาพแวดล้อมที่คล้ายคลึงกันนั้นขึ้นอยู่กับภูมิหลังทางพันธุกรรม [3].
เมื่อเร็ว ๆ นี้เราพบว่า C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) และ FVB / NJxC57BL / 6J / FNBXB6 (FVBxB1) หนูไฮบริด F20 ของเราสามารถควบคุมแอลกอฮอล์ในระดับสูงผิดปกติได้ในระหว่างการทดสอบการตั้งค่าแบบสองขวด และเพศชาย 35 – 7 g / kg / วันขึ้นอยู่กับความเข้มข้นและกระบวนทัศน์)4] โมเดลทางพันธุกรรมใหม่นี้มีข้อได้เปรียบที่สำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับสายพันธุ์ที่มีอยู่ในปัจจุบันรวมถึงหลักฐานของฟีโนไทป์ที่เหนือกว่าและการดื่มในระดับแอลกอฮอล์ในเลือดสูง [4] นอกจากนี้การบริโภคเอทานอลสูงที่แสดงโดยหนู BxF จะเห็นได้ในกระบวนทัศน์การดื่มเอทานอลเพิ่มเติมอีกสองรายการ (การดื่มในที่มืดและการยอมรับเอทานอลระหว่างการเข้าถึงของเหลวตามกำหนดเวลา) [4] จากนั้นเราสังเกตพฤติกรรมการดูแลตนเองของแอลกอฮอล์ที่แตกต่างกันเมื่อเปรียบเทียบสองสายพันธุ์ F1 ไฮบริดของหนู: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) แสดงการลดลงของการดื่มแอลกอฮอล์หลังจากประสบการณ์กับแอลกอฮอล์ที่มีความเข้มข้นสูงและระยะเวลาที่เลิกดื่ม5]. จากการใช้การทดสอบพฤติกรรมเราได้แสดงให้เห็นว่า BxN นั้นไวกว่าหนู BxF ที่มีต่อ aversive และยากล่อมประสาท แต่ไม่ได้ผลที่คุ้มค่าจากเอทานอล [6].
การวิจัยพื้นฐานเกี่ยวกับรูปแบบพฤติกรรมและพันธุกรรมแบบใหม่ของการดื่มแอลกอฮอล์สูงและการเปลี่ยนแปลงที่เกิดจากประสบการณ์การดื่มจะช่วยเพิ่มความรู้เกี่ยวกับการใช้แอลกอฮอล์ในทางที่ผิด ฟีโนไทป์ของแอลกอฮอล์ที่ลดลงนั้นน่าสนใจเพราะในตอนแรกหนู BxN แสดงความต้องการสูงสำหรับสารละลายเอทานอล แม้ว่าแรงจูงใจด้านการลดปริมาณแอลกอฮอล์หลังจากประสบการณ์ที่มีความเข้มข้นของเอทานอลสูงและการเลิกบุหรี่ก็ไม่เป็นที่รู้จัก แต่หนู BxN อาจเปรียบเสมือนนักดื่มแอลกอฮอล์ระดับปานกลางซึ่งพวกเขายังคงใช้สารละลายเอทานอลอยู่ แต่ในระดับที่ลดลง
รูปแบบการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนนั้นน่าสนใจเช่นกันเนื่องจากหนู BxF นั้นบริโภคเอทานอลในระดับที่สูงมากโดยไม่คำนึงถึงประสบการณ์ที่ผ่านมา การดื่มแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่องและลดลงสามารถเกี่ยวข้องกับผลการกีดกันแอลกอฮอล์ปรากฏการณ์ที่สัตว์แสดงการบริโภคแอลกอฮอล์ที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจากช่วงเวลาที่ถูกบังคับให้เลิกดื่มe [7] ผลการกีดกันแอลกอฮอล์เป็นปรากฏการณ์ที่มีประโยชน์สำหรับการศึกษาพฤติกรรมการดื่มแอลกอฮอล์ที่เพิ่มขึ้น แม้ว่าตารางการทดลองที่ทราบกันดีว่าการชักนำให้เกิดการกีดกันแอลกอฮอล์นั้นค่อนข้างแตกต่างจากตารางที่ใช้ในที่นี้ แต่การเปรียบเทียบความพึงพอใจของแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลงกับผลการกีดกันแอลกอฮอล์นั้นสัมพันธ์กับฟีโนไทป์พฤติกรรมที่แตกต่างกัน การลดลงของแอลกอฮอล์จะเป็นสิ่งที่ตรงกันข้ามกับผลของการกีดกันแอลกอฮอล์และการดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนสามารถอธิบายได้ว่าไม่มีผลกระทบจากการกีดกันแอลกอฮอล์ การใช้แบบจำลองสัตว์ที่มีความหลากหลายทางพันธุกรรมเช่น BxF และ BxN มีส่วนช่วยอย่างมากต่อความก้าวหน้าของภาคสนามเนื่องจากความผิดปกติของการใช้แอลกอฮอล์เป็นความคิดที่เกิดขึ้นจากปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างพันธุศาสตร์และสิ่งแวดล้อม การจำแนกการแสดงออกของยีนต้นที่แตกต่างกันในทันทีสำหรับลูกผสมเหล่านี้จะนำเสนอข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับวงจรสมองที่สำคัญสำหรับคุณสมบัติที่ให้ผลตอบแทนและ aversive ของเอทานอล
เอทานอลและ neurocircuits ที่เกี่ยวข้องกับยาอื่น ๆ ได้รับการศึกษาในแบบจำลองหนูเฉพาะโดยใช้เครื่องหมายโมเลกุลของพลาสติกประสาทและ / หรือกิจกรรม [8-15] เอทานอลที่บริหารด้วยตนเองและผู้ทดลองไม่ได้ส่งผลในแผนที่การเผาผลาญของสมองที่เทียบเท่าการแนะนำวงจรเฉพาะที่รองรับผลกระทบของเอทานอล8,9].
องค์ประกอบสำคัญอย่างหนึ่งที่ยังไม่ได้รับการสำรวจอย่างกว้างขวางในการวิจัยแอลกอฮอล์คือการตรวจสอบพฤติกรรมการดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลงและการระบุวงจรของเซลล์ประสาทที่เกี่ยวข้องในระหว่างพฤติกรรมเหล่านี้ เป้าหมายของการทดลองนี้คือการระบุบริเวณสมองที่มีส่วนร่วมโดยการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลง เนื่องจากการบริหารแอลกอฮอล์เรื้อรัง (รวมถึงยาเสพติดอื่น ๆ ) ได้แสดงให้เห็นถึงความแตกต่างของระดับสมองในระดับΔFosBเราจึงทดสอบสมมติฐานว่าฟีโนไทป์พฤติกรรมเหล่านี้แสดงโดยการผลิตที่แตกต่างกันของปัจจัยการถอดความ มีส่วนร่วมในรางวัลความเกลียดชังและความเครียด [10].
สิ่งกระตุ้นที่ทำให้เกิดความแตกต่างในระดับภูมิภาคในระดับ BFosB ได้แก่ ยาเสพติด (แอลกอฮอล์, โคเคน, แอมเฟตามีน, นิโคติน, มอร์ฟีน, และยารักษาโรคจิต), ความเครียดเรื้อรัง (ความเครียดจากการยึดเหนี่ยว, การสั่นสะเทือนแบบเท้าไม่แน่นอน11] ในฐานะผู้ไกล่เกลี่ยที่มีศักยภาพของการปรับตัวในระยะยาวในสมองการระบุตัวแปรที่สำคัญของ FosB (FosB หรือΔFosB) ในการตอบสนองต่อการรักษาเอทานอลเรื้อรังเป็นความแตกต่างที่สำคัญ
มีการศึกษาหลายอย่างที่วัด FosB และΔFosBหลังจากสิ่งกระตุ้นเรื้อรังซึ่งยังไม่ได้รับการยืนยันว่าΔFosBเป็น isoform ที่โดดเด่น (เช่นที่อธิบายไว้ด้านล่าง) อย่างไรก็ตามมีหลักฐานที่ชัดเจนว่าΔFosBไม่ใช่ FosB เป็น isoform ที่โดดเด่นหลังจากสิ่งเร้าเรื้อรัง10-12] การศึกษาโดย Ryabinin และ Wang (1998) พบว่าในแอลกอฮอล์ต่ำที่ต้องการ DBA / 2J หนูสี่วันของการฉีดเอธานอลซ้ำ ๆ ทำให้เกิดการแสดงออกของ FosB ในบริเวณสมองต่อไปนี้: เยื่อบุช่องท้อง amygdaloid ส่วนกลางด้านข้าง amygdala ด้านข้าง, hypothalamus ด้านข้าง, นิวเคลียส accumbens เปลือก, นิวเคลียสเตียงของ stria terminalis, และนิวเคลียส paraventricular ของฐานดอก13] ผลลัพธ์ของพวกเขาบ่งชี้ neurocircuit เอทานอลตอบสนอง การแสดงออกของ FosB นั้นได้รับการวัดด้วยแอลกอฮอล์ระดับสูงซึ่งต้องการเมาส์ C57BL / 6J ในระหว่างการซื้อและการบำรุงรักษาการควบคุมตนเองของเอทานอลภายใต้เงื่อนไขการเข้าถึงที่ จำกัด ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในระดับ FosB ระหว่างการซื้อการบริหารตนเอง14]. อย่างไรก็ตามหลังจากสองสัปดาห์ของการควบคุมการเข้าถึงเอทานอลด้วยตนเองอย่าง จำกัด ระดับ FosB ได้เพิ่มขึ้นในนิวเคลียสตรงกลางของ amygdala และ Edinger-Westphal นิวเคลียส [15]. โดยรวมแล้วรายงานระบุภูมิภาคใหม่ ๆ ที่มีส่วนร่วมในการบริหารจัดการด้วยตนเองของเอทานอลรวมถึงเกี่ยวข้องกับบทบาทของเส้นทาง mesocorticolimbic และ amygdala ที่ขยายออกไป [16] อย่างไรก็ตามสิ่งสำคัญคือต้องทราบว่าการเปลี่ยนแปลงในระดับΔFosBขึ้นอยู่กับเส้นทางของการบริหารเอทานอลปริมาณและระยะเวลาที่สัมผัสกับการรักษาหรือกำหนดเวลา [13-15].
หนูสายพันธุ์ที่ใช้ในการศึกษานี้ให้แบบจำลองที่น่าสนใจสำหรับการเปรียบเทียบความพึงพอใจของแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลงและกลไกพื้นฐานที่รับผิดชอบในการตอบสนองแอลกอฮอล์ที่แตกต่างกันเหล่านี้ การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าหนูที่แสดงความพึงพอใจแอลกอฮอล์ลดลงก็แสดงให้เห็นถึงความสำคัญของพลาสติกในวงจรที่เกี่ยวกับการให้รางวัลและความเครียด (รวมถึงนิวเคลียสของ Edinger - Westphal, พื้นที่หน้าท้องส่วนล่าง, amygdala, นิวเคลียส accumbens และเยื่อหุ้มสมอง cingulate)
ผลสอบ
ผลของความเข้มข้นของแอลกอฮอล์และช่วงเวลาเลิกบุหรี่ต่อการดูแลตนเองในหนู BxF และ BxN
เพื่อแสดงให้เห็นว่าความเข้มข้นของเอทานอลที่แตกต่างกันและ / หรือระยะเวลาการงดเว้นเปลี่ยนการบริโภคเอทานอลที่ตามมาเราได้ออกแบบสี่ตาราง (กลุ่ม) เพื่อวัดปริมาณการใช้เอทานอล (Figure1a b)1A, B) มีกลุ่มการทดลองสี่กลุ่มสำหรับลูกผสมแต่ละตัว: ความเข้มข้นสูง, ความเข้มข้นสูงที่มีช่วงการเลิกบุหรี่, ความเข้มข้นต่ำและความเข้มข้นต่ำที่มีระยะเวลาเลิกบุหรี่ ข้อมูลที่สมบูรณ์สำหรับการตั้งค่าเอทานอล (รูปที่ (Figure2)2) และการบริโภค (รูปที่ (Figure3)3) ข้อมูล (สำหรับทุกกลุ่มและจีโนไทป์ทั้งสอง) จะถูกนำเสนอเพื่อการอ้างอิง เพื่อสร้างและแสดงให้เห็นฟีโนไทป์พฤติกรรมของการตั้งค่าเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลงข้อมูลการตั้งค่าเอทานอล 9% และการบริโภคจะถูกนำเสนอในรูป Figures44 และ and55. ฟีโนไทป์พฤติกรรมเหล่านี้ขึ้นอยู่กับการเปรียบเทียบการตั้งค่าเอทานอล 9% และการบริโภคจากการนำเสนอครั้งแรกที่สองที่สามและสี่ในกลุ่มความเข้มข้นสูงและวันทดลองที่สอดคล้องกันสำหรับกลุ่มความเข้มข้นต่ำ ได้ทำการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทาง (Genotype x Time) ของ 9% Ethanol และการบริโภค สำหรับกลุ่มความเข้มข้นสูงการตั้งค่าเอทานอล (รูปที่ (Figure4a)4ก) และการบริโภค (รูปที่ (Figure5a)5a) มีค่า BxF มากกว่า BxN และ BxF แสดงการตั้งค่าและการบริโภคแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืนในขณะที่ BxN แสดงความชอบและการบริโภคแอลกอฮอล์ที่ลดลง (ETHANOL PREFERENCE - ปฏิสัมพันธ์ F (3,54) = 4.83, P <0, จีโนไทป์ F (01, 1,54) = 24.10, P <0.001, เวลา F (3,54) = 9.92, P <0.0001; ETHANOL CONSUMPTION - ปฏิสัมพันธ์ N / S, จีโนไทป์ F (1,54) = 50.73, P <0.0001, เวลา F (3,54, 11.68) = 0.0001, P <XNUMX) สำหรับกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงที่งดเว้นควรใช้เอทานอล (รูปที่ (Figure4b)4b) และการบริโภค (รูปที่ (Figure5b)5b) มีค่า BxF มากกว่า BxN และ BxF แสดงการตั้งค่าและการบริโภคแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืนในขณะที่ BxN แสดงการตั้งค่าและการบริโภคแอลกอฮอล์ที่ลดลง (ETHANOL PREFERENCE - ปฏิสัมพันธ์ F (3,132) = 15.89, P <0.0001, จีโนไทป์ F (1,132) = 250.43, P <0.0001, เวลา F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ETHANOL CONSUMPTION - ปฏิสัมพันธ์ F (3,132) = 11.35, P <0.0001, จีโนไทป์ F (1,132) = 510.88, P <0.0001, เวลา F (3,132) = 22.42, P <0.0001) สำหรับกลุ่มความเข้มข้นต่ำการตั้งค่าเอทานอล (รูปที่ (Figure4c)4c) และการบริโภค (รูปที่ (Figure5c)5c) มีค่า BxF มากกว่า BxN และลูกผสมทั้งสองมีการตั้งค่าและการบริโภคแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืน (ETHANOL PREFERENCE - ปฏิสัมพันธ์ N / S, จีโนไทป์ F (1,54) = 12.2, P <0.01, เวลา N / S; ETHANOL CONSUMPTION - ปฏิสัมพันธ์ N / S, จีโนไทป์ F (1,54) = 74.83, P <0.0001, เวลา N / S) สำหรับกลุ่มความเข้มข้นต่ำที่งดเว้นควรใช้เอทานอล (รูปที่ (Figure4d)4d) และการบริโภค (รูปที่ (Figure5d)5d) มีค่า BxF มากกว่า BxN และลูกผสมทั้งสองมีการลดการตั้งค่าและการบริโภคแอลกอฮอล์ในระดับปานกลาง (ETHANOL PREFERENCE - ปฏิสัมพันธ์ N / S, จีโนไทป์ F (1,132) = 166.58, P <0.0001, เวลา N / S; การบริโภคของ ETHANOL - ปฏิสัมพันธ์ F (3,132) = 3.61, P <0.05, จีโนไทป์ F (1,132) = 480.64, P <0.0001, เวลา F (3,132) = 7.87, P <0.0001) โดยสรุปในกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูง (โดยไม่ต้องงดเว้น) BxF แสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่องในขณะที่ BxN แสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ลดลงและในกลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำ (โดยไม่ต้องงดเว้น) ทั้ง BxF และ B6xN มีการตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่อง เนื่องจากฟีโนไทป์ที่สนใจถูกจับได้ดีที่สุดในกลุ่มโดยไม่มีการละเว้นจึงเป็นจุดสำคัญของส่วนที่เหลือของการศึกษา
Δระดับ FosB
quant ปริมาณ FosB และการวิเคราะห์ถูกนำมาใช้เพื่อระบุ neurocircuitry เปิดใช้งานเรื้อรังในระหว่างการตั้งค่าที่ยั่งยืนและลดแอลกอฮอล์ มีกลุ่มทดลองสามกลุ่มสำหรับลูกผสมแต่ละตัว: ความเข้มข้นสูง, ความเข้มข้นต่ำและน้ำ (การควบคุม) ข้อมูลΔFosBแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์Δเซลล์ประสาทบวก FosB [(# ของΔFosBเซลล์ประสาทเชิงบวก) / (# ของ # เซลล์ประสาทเชิงบวก FosB + # ของเซลล์ประสาทเชิงบวก Nissl) # ตาราง (Table1)1) งานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าประสบการณ์เอทานอลสามารถกระตุ้นระบบประสาทได้ [17] ดังนั้นเราจึงตรวจสอบตัวเลขของเส้นประสาทในการศึกษานี้และรายงานว่าไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญตามจีโนไทป์หรือกลุ่มสำหรับพื้นที่สมองที่วัดในการศึกษาครั้งนี้ ทำการวิเคราะห์ข้อมูลΔFosBสามตัวต่อไปนี้: 1) การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสามทาง (ยีน x กลุ่มสมองส่วนที่ x), 2) การวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทางของวิธีการ ANOVA (สมองภาค x กลุ่ม) สำหรับแต่ละสายพันธุ์และ 3) เครือข่าย
การวัดความแปรปรวนสามทางซ้ำ ๆ (genotype x group x brain region) แสดงให้เห็นปฏิสัมพันธ์ของจีโนไทป์ x บริเวณสมอง [F (15,375) = 2.01, P <.05], ปฏิสัมพันธ์ระหว่างกลุ่ม x สมอง [F (15.375) = 1.99, P <0.01] และผลกระทบหลักของบริเวณสมอง [F (15,375) = 43.36, P <.000] การวัดความแปรปรวนสองทางซ้ำ ๆ (บริเวณสมอง x กลุ่ม) สำหรับแต่ละจีโนไทป์พบว่ามีผลหลักของกลุ่มและบริเวณสมองทั้ง BxF และ BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001 ผลกระทบหลักของ กลุ่ม; F (15,374) = 25.64, P <.0001 ผลกระทบหลักของบริเวณสมอง BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001 ผลกระทบหลักของกลุ่ม F (15,360) = 23.73, P <.0001 ผลกระทบหลักของจีโนไทป์] การวิเคราะห์หลังการทดลองพบความแตกต่างของกลุ่มที่สำคัญหกประการสำหรับ BxN (รูปที่ (Figure6a-C)6AC) เปอร์เซ็นต์ΔFosBระดับสูงในกลุ่มความเข้มข้นต่ำกว่าในกลุ่มน้ำใน La, CeC / CeL, EW และ VTA เปอร์เซ็นต์ΔFosBสูงกว่าในกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงกว่าในกลุ่มน้ำใน CeMPV เปอร์เซ็นต์ΔFosBสูงขึ้นในกลุ่มความเข้มข้นต่ำกว่าในกลุ่มความเข้มข้นสูงใน EW data ข้อมูล FosB สำหรับพื้นที่สมองอื่น ๆ ทั้งหมดที่แสดงปริมาณนั้นแสดงในตาราง Table11. การวิเคราะห์สหสัมพันธ์ r ของ Pearson ใช้เพื่อตรวจสอบว่า% ของเซลล์ประสาทเชิงบวก positiveFosB ในบริเวณสมองที่กำหนดมีความสัมพันธ์กับการบริโภคเอทานอลหรือความชอบหรือไม่ การบริโภคเอทานอลและความชอบแสดงความสัมพันธ์เชิงบวกอย่างมีนัยสำคัญกับ% ΔFosBใน EW และ VTA ของหนู BxN (ETHANOL CONSUMPTION - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETHANOL PREFERENCE - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 สำหรับทุกอย่าง).
การสำรวจความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนระหว่างการแสดงออกของΔFosBจีโนไทป์พื้นที่สมองและการบริโภคเอทานอลโดยใช้การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักและการจัดกลุ่มแบบลำดับชั้น การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักพบว่าส่วนใหญ่ของความแปรปรวน (~ 80%) ในข้อมูลถูกแสดงโดยองค์ประกอบ 5 การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นที่ไม่ได้รับอนุญาต (ทำโดยกลุ่มบุคคลและพื้นที่สมอง) จากนั้นดำเนินการและสั่งซื้อโดยใช้องค์ประกอบหลักตัวแรก (รูปที่ (Figure7)7) การจัดกลุ่มแต่ละกลุ่มเผยให้เห็นรูปแบบการจัดกลุ่มที่แข็งแกร่ง แต่ไม่สมบูรณ์แบบตามการบริโภคเอทานอลโดยไม่คำนึงถึงจีโนไทป์ หนูเอทานอล - ไร้เดียงสาหลายกลุ่มรวมตัวกันและแสดงΔFosBโดยรวมน้อยกว่าค่าเฉลี่ยและหนูจำนวนมากที่แสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนรวมเข้าด้วยกันและแสดงΔFosBโดยรวมมากกว่าค่าเฉลี่ย สองกลุ่มนี้มีความแตกต่างมากที่สุด กลุ่มทั้งสามในระหว่างนั้นเป็นตัวแทนที่มากกว่าน้อยกว่าและหมายถึงการผสมผสานของค่าΔFosBและฟีโนไทป์การดื่มเอทานอล
การสนทนา
พฤติกรรมการดูแลตนเองของแอลกอฮอล์ที่แตกต่างถูกสังเกตเมื่อเปรียบเทียบหนูพันธุ์ลูกผสม F1 สองสาย: BxN แสดงการลดลงของการดื่มแอลกอฮอล์หลังจากประสบการณ์กับแอลกอฮอล์ที่มีความเข้มข้นสูงและระยะเวลางดดื่มในขณะที่ BxF แสดงการดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืน. แบบจำลอง BxF เสถียรการบริโภคสูง (การตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืน) และแบบจำลอง BxN การดื่มปานกลาง (การตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ลดลง) Neuronal plasticity (หรือกิจกรรมที่วัดโดยระดับΔFosB) นั้นแตกต่างกันไปตามประสบการณ์ของเอทานอลซึ่งจะช่วยสนับสนุนบทบาทพื้นฐานของวงจรประสาทของเซลล์ประสาทที่เฉพาะเจาะจงในการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลง
สำหรับความเครียดจากการบริโภคแอลกอฮอล์สูง C57BL / 6 การเลือกเอทานอลและการบริโภคจะขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของเอทานอลเริ่มต้นความยาวของการเลิกบุหรี่และความเครียดย่อย (C57BL / 6Cr หรือ C57BL / 6J) [7,18] เราพบว่าการตั้งค่าเอทานอลและการบริโภคที่เห็นในหนู BxF นั้นสูงกว่าอย่างสม่ำเสมอ (และมีเสถียรภาพมากกว่าใน BxN) ในตารางทดสอบทั้งสี่ที่แตกต่างกัน ความต้องการเอทานอลและการบริโภคเอทานอลที่ค่อนข้างสูงใน BxN นั้นได้รับการรักษาด้วยการดื่มเรื้อรังเพียงหนึ่งครั้ง (ความเข้มข้นต่ำโดยไม่ต้องงดเว้น) ในขณะที่การลดลงของการตั้งค่าและการบริโภค BxN ลดการตั้งค่าแอลกอฮอล์ให้สัตว์รุ่นใหม่ที่มีประสบการณ์ (นำเสนอซ้ำของเอทานอลหลังจากประสบการณ์กับความเข้มข้นของเอทานอลสูงหลายครั้งและ / หรือช่วงเวลาสั้น ๆ ของการเลิกบุหรี่) ลดการตอบสนองต่อความเข้มข้นของเอทานอลก่อนหน้านี้
เอทานอลที่บริหารด้วยตนเองและทดลองดำเนินการสร้างแผนที่การเผาผลาญของสมองที่แตกต่างกันแนะนำวงจรเฉพาะภายใต้ผลกระทบเสริมของเอทานอล [8,9] เราทดสอบสมมติฐานที่ว่าฟีโนไทป์แบบปรับพฤติกรรมแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืนและลดลงนั้นแสดงด้วยการผลิตที่แตกต่างกันของปัจจัยการถอดความที่เรียกว่า ,FosB ในบริเวณสมองซึ่งเป็นที่ทราบกันว่ามีส่วนเกี่ยวข้องกับรางวัลความเกลียดชังและความเครียด ΔFosBเป็นปัจจัยการถอดความที่มีความมั่นคงในระยะยาวที่ไม่เหมือนใครและไม่ต้องการสิ่งกระตุ้นตามที่ c-Fos ทำ แต่จะสะสมในระหว่างการรักษาเรื้อรัง การเพิ่มขึ้นของΔFosBเกิดจากการเพิ่มขึ้นของกิจกรรมของเซลล์ประสาทและมีความคิดที่จะสะท้อนให้เห็นถึงความยืดหยุ่นของเส้นประสาทพลาสติกในระยะยาว เราพบว่าเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ประสาทบวกΔFosBในพื้นที่สมองขึ้นอยู่กับจีโนไทป์ (BxF และ BxN) และกลุ่ม (การควบคุมน้ำความเข้มข้นต่ำและความเข้มข้นสูง)
Fหรือ BxN การวิเคราะห์แบบโพสต์เฉพาะกิจเปิดเผยว่าการบริโภคเอทานอลโดยสมัครใจส่งผลให้ΔFosBเพิ่มขึ้นในนิวเคลียส EW, VTA และ amygdala: บ่งชี้ความยืดหยุ่นของเซลล์ประสาทในบริเวณสมองที่รู้จักกันว่ามีส่วนร่วมในเอทานอลรางวัลและความเครียด หนู BxN ในกลุ่ม High Concentrations (ลดการดื่มแอลกอฮอล์) ลดความเป็นพลาสติกของเซลล์ประสาทใน EW โดยแนะนำว่าเซลล์เหล่านี้ตอบสนองต่อการบริโภคแอลกอฮอล์ด้วยพลาสติกที่ขึ้นกับประสบการณ์ ในกลุ่มความเข้มข้นต่ำ (แสดงการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืน), ความยืดหยุ่นของเส้นประสาทใน EW มากกว่าในกลุ่มความเข้มข้นสูงและกลุ่มควบคุมน้ำ แม้ว่าดำเนินการโดยใช้กระบวนทัศน์การดื่มเอทานอลที่แตกต่างกันและแบบจำลองทางพันธุกรรมของเมาส์ แต่การค้นพบของเราใน EW ของหนู BxN เห็นด้วยกับการศึกษาการบริโภคเอทานอลก่อนหน้านี้ [14,15] EW ที่ไม่ใช่ preganglionic เพิ่งมีลักษณะว่าประกอบด้วย perioculomotor urocortin (Ucn) - ควบคุมเซลล์ประสาท [19] Ucn1 เป็น corticotropin releasing factor (CRF) - เปปไทด์ที่จับกับ CRF1 และ CRF2 receptors การศึกษาก่อนหน้านี้โดยใช้วิธีทางพันธุศาสตร์เภสัชวิทยาและแผลแสดงให้เห็นว่า Ucn1 มีส่วนร่วมในการควบคุมการบริโภคแอลกอฮอล์ [19-22] Tนี่คือความบกพร่องทางพันธุกรรมที่เป็นที่รู้จักสำหรับการดื่มแอลกอฮอล์สูงในหนูที่มีความสัมพันธ์กับระดับพื้นฐานที่สูงขึ้นของ Ucn1 ใน EW และ LSi [23] ดังนั้นการขาดความสำคัญหลังเลิกเรียนที่เราสังเกตเห็นใน EW สำหรับการเลือกเครื่องดื่มที่มีแอลกอฮอล์สูงและการบริโภคหนู BxF นั้นไม่คาดคิด บางทีนี่อาจเป็นเพราะเปอร์เซ็นต์ΔFosBที่เพิ่มขึ้นเล็กน้อยในกลุ่มน้ำ BxF เมื่อเทียบกับกลุ่มน้ำ BxN แน่นอนเปอร์เซ็นต์เปอร์เซ็นต์ΔFosBสำหรับหนูทุกตัวที่แสดงความพึงพอใจแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่อง (กลุ่มความเข้มข้นสูง BxF, กลุ่มความเข้มข้นต่ำ BxF และกลุ่มความเข้มข้นต่ำ BxN) ค่อนข้างคล้ายกัน
สำหรับ BxN การบริโภคเอทานอลในกลุ่มความเข้มข้นต่ำจะเพิ่มความยืดหยุ่นของเซลล์ประสาทใน VTA (มากกว่าในกลุ่มความเข้มข้นสูงและกลุ่มควบคุมน้ำ) การตั้งค่าและการบริโภคเอทานอลก็ยิ่งมากขึ้นสำหรับกลุ่มความเข้มข้นต่ำ. การขาดความสำคัญหลังเลิกเรียนที่เราสังเกตเห็นใน VTA สำหรับการเลือกเครื่องดื่มที่มีแอลกอฮอล์สูงและการบริโภคหนู BxF นั้นไม่คาดคิดและอาจเกิดจากระดับพื้นฐานที่สูงขึ้นเล็กน้อยของ basFosB ในกลุ่มควบคุมน้ำ เปอร์เซ็นต์ระดับΔFosBสูงขึ้นเล็กน้อยในกลุ่มน้ำ BxF เมื่อเทียบกับกลุ่มน้ำ BxN ในขณะที่เปอร์เซ็นต์ΔFosBระดับค่อนข้างใกล้เคียงกันสำหรับหนูทุกกลุ่มที่มีความต้องการแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืน (กลุ่มความเข้มข้นสูง BxF, กลุ่มความเข้มข้นต่ำ BxF) . ระบบโดปามีน VTA มีบทบาทสำคัญในการเป็นสื่อกลางในการเสริมผลกระทบของเอทานอลและมีส่วนร่วมในการเชื่อมต่อซึ่งกันและกันหลายอย่างที่สำคัญสำหรับเอทานอลและพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องกับการให้รางวัล24-26] นอกจากนี้โครงการ VTA ไปยังนิวเคลียส amygdala และ EW มีการแสดงให้เห็นว่าหนูได้จัดการเอทานอลด้วยตนเองโดยตรงใน VTA27]. นอกจากนี้การได้รับเอทานอลจะเพิ่มอัตราการยิงของเซลล์ประสาทโดปามีนใน VTA [28,29] อัตราการยิงที่เพิ่มขึ้นอาจเชื่อมโยงกับการเหนี่ยวนำΔFosBใน VTA ที่เราสังเกตเห็นหลังจากการบริหารเอทานอลแบบสมัครใจเรื้อรังใน BxN
การพึ่งพาแอลกอฮอล์ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงทางประสาทในระยะยาวส่งผลให้เกิดสภาวะอารมณ์เชิงลบ กลไกสำคัญในการเสริมแรงเชิงลบคือ corticotropin-releasing factor (CRF) การส่งสัญญาณภายใน amygdala [30] การปรับเปลี่ยนทางเภสัชวิทยาของเซลล์ประสาทใน CeA ได้กำหนดเป้าหมายไปที่ GABA, CRF, opioid, serotonin, dynorphin และ norepinephrine receptors [25,31-34] GABA คู่อริรวมถึง CRF คู่อริลดการใช้เอทานอล [32,33,35]. แผลของ CeA ลดการเข้าถึงเอทานอลโดยสมัครใจ [36]. การค้นพบของเรายังสนับสนุนบทบาทของ CeA ในการควบคุมพฤติกรรมการดื่มแอลกอฮอล์ เซลล์ประสาท GABAergic ใน amygdala ตอนกลางก่อตัวเป็นประชากรต่างกันที่การเชื่อมต่อปรากฏสัมพันธ์กับเนื้อหาของเปปไทด์ เซลล์ประสาท GABAergic เหล่านี้รวมเอาท์พุทกิจกรรมของ CeA ตรวจสอบในวีและคูบ (2010)]), sการศึกษาที่ไม่สิ้นสุดได้ระบุบทบาทของตัวรับ dynorphin และ kappa opioid ในการบำรุงรักษาและการเพิ่มขึ้นของปริมาณเอทานอลe [37] อีกไม่นานวอล์คเกอร์และคณะได้แสดงให้เห็นว่า op-opioid receptor antagonist, หรือ -binaltorphimine, ภายใน amygdala ที่ขยายออกไปเลือกลดการจัดการเอทานอลด้วยตนเองในสัตว์ที่พึ่งพา [38] การส่งสัญญาณตัวรับ Kappa opioid ยังคงเป็นความสนใจหลักของการวิจัยที่จุดตัดของความเครียดรางวัลและความเกลียดชัง นอกจากนี้ยังได้รับการพิสูจน์แล้วว่าการควบคุมตนเองด้วยเอทานอลที่เกิดจากความเครียดนั้นกระทำโดยการส่งสัญญาณคัปปา opioid [39] CeA กลางสามารถแบ่งออกเป็น latero-capsular (CeL / CeC) และ ventral posterior ventral เซลล์ประสาทของ GABAergic ของ CeL / CeC ได้รับการกระตุ้นโดปามีนจาก VTA; ดังที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้เซลล์ประสาทเหล่านี้จะถูกเปิดใช้งานหลังจากการบริหารเอทานอลเฉียบพลันและแสดงหนูΔFosBเพิ่มขึ้นแสดงการตั้งค่าเครื่องดื่มแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืน ดูเพิ่มเติม Mc [เจ้าสาว (2002)]) สำหรับรีวิวที่ยอดเยี่ยมเกี่ยวกับ CeA และผลกระทบของแอลกอฮอล์ [40] ในการศึกษาของเราหนู BxN ที่มีความต้องการแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่อง (กลุ่มความเข้มข้นต่ำ) แสดงให้เห็นถึงความยืดหยุ่นของเซลล์ประสาทในหนูที่ได้รับ CeC / CeL และ La และ BxN ที่มีความต้องการแอลกอฮอล์ลดลง (กลุ่มที่มีความเข้มข้นสูง) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าประสบการณ์เอทานอลที่เฉพาะเจาะจงนั้นเกี่ยวข้องกับความเป็นพลาสติกในเซลล์ประสาท GABAergic ใน amygdala จากข้อมูลนี้รวมถึงการเปลี่ยนแปลงที่สอดคล้องกันของเส้นประสาทพลาสติกใน VTA และ EW เราจึงเสนอวงจรนี้ผ่านพลาสติกที่สำคัญภายใต้เงื่อนไขการตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืน
การวิจัยก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่าหนู C57BL / 6J สามารถบรรลุระดับแอลกอฮอล์ในเลือดสูงได้โดยการเลือกดื่มสองขวดอย่างไรก็ตามระดับแอลกอฮอล์ในเลือดเหล่านี้ไม่ยั่งยืนและบ่อยครั้งที่การดื่มไม่เป็นไปตามเกณฑ์แรงจูงใจทางเภสัชวิทยาที่กำหนดโดย Dole and Gentry (1984)41,42] หนู BxN ที่มีความต้องการแอลกอฮอล์ลดลงบริโภคน้อยกว่าที่คาดไว้จากเมาส์ C57BL / 6J ทั่วไป [1] ดังนั้นแม้ว่าเราจะไม่ได้ดื่มแอลกอฮอล์ในเลือด แต่ก็ไม่น่าจะเป็นไปได้ที่หนู BxN จะลดระดับแอลกอฮอล์ในเลือดที่มีความเกี่ยวข้องกับการใช้ยาในทางเภสัชวิทยาการแนะนำว่าแอลกอฮอล์ในเลือดมีความเข้มข้นสูง มันเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องทราบว่ามีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญของกลุ่มยังอยู่ใน BxF แม้ว่าผลโพสต์ hoc (แก้ไขสำหรับการเปรียบเทียบหลาย ๆ ) สำหรับภูมิภาคสมอง BxF ไม่ได้ระบุการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในเปอร์เซ็นต์ΔFosBเซลล์ประสาทเชิงบวกสำหรับภูมิภาคใด ๆ ด้วยตารางเวลาที่แตกต่างกันเหล่านี้
เพื่อให้เห็นภาพความสัมพันธ์ที่อาจเกิดขึ้นระหว่างการจัดกลุ่มตัวแปรแบบลำดับชั้น แผนผังความร้อนของการวิเคราะห์ผลลัพธ์แสดงแนวโน้มทั่วไประหว่างระดับΔFosBและการใช้เอทานอลโดยไม่คำนึงถึงพันธุกรรม ระดับΔFosBที่สูงขึ้นเกี่ยวข้องกับการดื่มสูงและระดับ lowerFosB ที่ต่ำกว่านั้นเกี่ยวข้องกับสัตว์ควบคุม อย่างไรก็ตามความแข็งแกร่งของความสัมพันธ์ไม่เพียงพอที่จะทำนายฟีโนไทป์ได้อย่างถูกต้องตามระดับ basedFosB เท่านั้น
สรุป
พฤติกรรมการดูแลตนเองของแอลกอฮอล์ที่แตกต่างพบกับหนูพันธุ์ F1 สองสายพันธุ์: BxN แสดงการลดลงของการดื่มแอลกอฮอล์หลังจากประสบการณ์กับแอลกอฮอล์ที่มีความเข้มข้นสูงในขณะที่ BxF แสดงการดื่มแอลกอฮอล์ที่ยั่งยืน แบบจำลอง BxF เสถียรการบริโภคสูง (การตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างยั่งยืน) และแบบจำลอง BxN การดื่มปานกลาง (การตั้งค่าแอลกอฮอล์ที่ลดลง) การเปลี่ยนแปลงของเส้นประสาทพลาสติก (วัดจากระดับΔFosB) ขึ้นอยู่กับประสบการณ์เช่นเดียวกับพื้นที่สมอง - และจีโนไทป์เฉพาะเจาะจงเพิ่มเติมกำหนดวงจรประสาทภายใต้แรงจูงใจด้านการบริโภคเอทานอล ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการเปลี่ยนแปลงของผู้ปกครองหนึ่งสายในหนูลูกผสมส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงในรูปแบบของการดื่มแอลกอฮอล์และการเปลี่ยนแปลงที่ทำเครื่องหมายในรูปแบบของการแสดงออกของΔFosBแสดงให้เห็นว่าเครือข่ายสมองที่แตกต่างกัน
วิธีการ
จริยธรรม
การศึกษานี้ดำเนินการอย่างเคร่งครัดตามคำแนะนำในคู่มือการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองของสถาบันสุขภาพแห่งชาติ โปรโตคอลได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและใช้สัตว์ประจำสถาบันของมหาวิทยาลัยเท็กซัสที่ออสติน (AUP 2010 – 00028) การผ่าตัดทั้งหมดดำเนินการภายใต้การดมยาสลบของโซเดียม pentobarbital และความพยายามทั้งหมดได้ทำเพื่อลดความทุกข์ทรมาน
สัตว์
การศึกษาดำเนินการโดยใช้ลูกผสม F1 ลูกผสมหญิงที่ได้จาก C57BL / 6J และ FVB / NJ หรือ NZB / B1NJ หนู (BxF F1 และ BxN F1, ความเครียดจากสายพันธุ์ของพ่อ x) C57BL / 6J, FVB / NJ และ NZB / B1NJ ผสมพันธุ์ถูกซื้อมาจาก The Jackson Laboratory (Bar Harbour, ME) และผสมพันธุ์ในสัปดาห์ที่ 7 – 8 ลูกหลานถูกหย่านมเป็นกลุ่มรักร่วมเพศของจีโนไทป์แต่ละอัน (BxF F1, BxN F1) เราทดสอบเฉพาะหนูตัวเมียเพื่ออำนวยความสะดวกในการเปรียบเทียบกับข้อมูลที่รวบรวมไว้ก่อนหน้านี้1,5,6] หนูถูกขังอยู่ในกรงมาตรฐานพร้อมอาหารและน้ำ โฆษณาฟรี. ห้องอาณานิคมและห้องทดสอบอยู่ในแสง 12 h: 12 h รอบมืด (เปิดไฟที่ 07: 00)
การทดสอบการเลือกเอทานอลสองขวด
ใช้วิธีการเลือกขวดสองแบบเพื่อกำหนดรูปแบบการดูแลตนเองของเอทานอลด้วยความสมัครใจในหนูเพศเมีย BxF และ BxN [1,6] หนูตัวเมียลูกผสม F1 (อายุ 63 วัน) ติดอยู่ในกรงมาตรฐานแต่ละตัวในขณะที่อยู่ในขวดนมด้วยหลอด sipper ที่บรรจุน้ำไว้หนึ่งสัปดาห์ก่อนนำสารละลายเอทานอลมาใช้ หลังการทำให้คุ้นเคยหนูจะสามารถเข้าถึงขวดที่เหมือนกันสองขวด: อันหนึ่งบรรจุน้ำและอีกอันบรรจุสารละลายเอทานอล ตำแหน่งหลอดถูกเปลี่ยนทุกวันเพื่อควบคุมการตั้งค่าตำแหน่ง เพื่ออธิบายถึงการรั่วไหลและการระเหยที่อาจเกิดขึ้นน้ำหนักเฉลี่ยที่ลดลงจากหลอดในกรงควบคุมที่ไม่มีหนูถูกลบออกจากค่าการดื่มของแต่ละคนในแต่ละวัน หนูถูกชั่งทุกวัน 4 ตลอดการทดลอง วัดปริมาณการใช้ของเหลวทุกวันตลอดการทดลอง ปริมาณของเอทานอลที่บริโภคและการตั้งค่าเอทานอลถูกคำนวณสำหรับเมาส์แต่ละตัวและค่าเหล่านี้ถูกเฉลี่ยสำหรับความเข้มข้นของเอทานอลทุกตัว ผลของความเข้มข้นของแอลกอฮอล์และระยะเวลาการงดเว้นต่อการบริหารตนเองในหนู BxF และ BxN นั้นแสดงให้เห็นโดยการกำหนดกลุ่มทดลองที่มีการเข้าถึงความเข้มข้นสูง (เพิ่มการเข้าถึงโซลูชั่น 3-35% เอทานอล 3 ตามด้วย 9 ซ้ำรอบของ 18, 27 และ 9% เอทานอลซึ่งลงท้ายด้วยการนำเสนอสุดท้ายของ 3% เอทานอลและกลุ่มอื่นที่มีความเข้มข้นต่ำ (เพิ่มการเข้าถึง 9-9% เอทานอลด้วยส่วนที่เหลือจากการทดลองที่เข้าถึง XNUMX% เอทานอล) แต่ละกลุ่มเหล่านี้มีกลุ่มย่อยที่ไม่ได้หรือไม่ได้พบกับการงดเว้นสามสัปดาห์หนึ่ง หนูควบคุมพบสภาวะคล้ายกันในเวลาเดียวกันกับหนูทดลอง แต่ได้รับน้ำเพียงขวดเดียวเท่านั้น
โดยรวมมีห้ากลุ่มสำหรับลูกผสมแต่ละตัว: น้ำ (n = 14-16), ความเข้มข้นสูง (n = 10), ความเข้มข้นสูงที่มีระยะเวลาเลิกบุหรี่ (n = 20), ความเข้มข้นต่ำ (n = 10) และความเข้มข้นต่ำ ด้วยระยะเวลาเลิกบุหรี่ (n = 20) อ้างถึงรูปที่ Figure11 สำหรับตารางกลุ่มตัวเลือกสองขวดแบบละเอียด
ΔFosB Immunohistochemistry และการหาปริมาณ
ΔFosB immunohistochemistry (IHC) ถูกวัดในบริเวณสมอง 16 แห่งจากหนูที่มีประสบการณ์ 72 วันในการเข้าถึงน้ำอย่างต่อเนื่อง (Control) หรือน้ำ & แอลกอฮอล์ [ความเข้มข้นสูงและความเข้มข้นต่ำ] ผลของความเข้มข้นสูงต่อความชอบและการบริโภคเอทานอลมีมากกว่าผลของการเลิกบุหรี่ ดังนั้นกลุ่มที่มีประสบการณ์ในการเลิกบุหรี่จึงไม่รวมอยู่ในการวัดΔFosB IHC นอกจากนี้การทดลองยังดำเนินการนอกเหนือจากการปรากฏตัวครั้งแรกของการตั้งค่าแอลกอฮอล์อย่างต่อเนื่องหรือลดลงเพื่อแสดงให้เห็นว่าฟีโนไทป์พฤติกรรมมีความคงตัวโดยมีการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของเอทานอลซ้ำ ๆ เพื่อตรวจสอบผลกระทบของการบริโภคเอทานอลแบบเรื้อรัง สี่ถึงแปดชั่วโมงหลังจากกำจัดแอลกอฮอล์ในวันที่ 73 ของการทดลองหนูถูกดมยาสลบ (โซเดียมเพนโตบาร์บิทัล 175 มก. / กก.) และฉีดเข้าเส้นเลือดด้วยน้ำเกลือ 20 M ฟอสเฟต (PBS) 0.01 มล. ตามด้วย 100 มล. ของ 4% paraformaldehyde ใน PBS สมองถูกถอดออกโพสต์คงที่ในพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4% ที่ 4 ° C ฝังในอะกาโรส 3% แบ่งส่วน (50 um โคโรนา) บนไวเบรโตมวางไว้ในสารป้องกันการแข็งตัว (ซูโครส 30% เอทิลีนไกลคอล 30% และโพลีไวนิล 0.1% pyrrolidone ใน PBS) ค้างคืนที่ 4 ° C และเก็บไว้ที่ −20 ° C จนกว่าจะประมวลผลสำหรับ IHC ส่วนที่ละลายแล้วถูกล้างด้วย PBS โดยใช้ 0.3% H2O2 และบ่มเป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงในซีรั่มแพะ 3% ปกติเพื่อลดการติดฉลากที่ไม่เฉพาะเจาะจง จากนั้นนำส่วนของเนื้อเยื่อไปบ่มค้างคืนที่อุณหภูมิ 4 ° C ในซีรั่มแพะปกติ 3% และ anti-FosB (SC-48, 1: 5000 dilution, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ส่วนต่างๆถูกล้างบ่มใน biotinylated goat anti-rabbit Ig (1: 200 dilution, Vector Laboratories, Burlingame, CA) เป็นเวลาหนึ่งชั่วโมงล้างและบ่มใน avidin-biotin complex (เจือจาง 1: 200, Elite kit-Vector Laboratories) . กิจกรรมของ Peroxidase ถูกมองเห็นได้จากปฏิกิริยากับ 0.05% diaminobenzidine (ประกอบด้วย 0.015% H2O2) ส่วนเนื้อเยื่อถูกระงับ Nissl (โดยใช้ methylene blue / azure II) สไลด์ถูกกำหนดรหัสเพื่อนับจำนวนคนตาบอด ΔFosB-IR เซลล์ประสาทถูกนับที่กำลังขยาย 50X (น้ำมัน) โดยใช้วิธีการตัวแยกแสงและซอฟต์แวร์คอมพิวเตอร์ StereoInvestigator ข้อมูลพารามิเตอร์การสุ่มตัวอย่าง: กรอบการนับ (50um x 50um x 10um) เป็นค่าเดียวกันสำหรับทุกพื้นที่ที่ระบุ แม้กระนั้นขนาดกริดถูกกำหนดสำหรับแต่ละพื้นที่สมองเพื่อให้แน่ใจว่าจำนวนทวิภาคีเซลล์ทั้งหมดจะเท่ากับ 100 – 300 เพื่อให้สัมประสิทธิ์การเปลี่ยนแปลงน้อยกว่า 0.1 ข้อมูลถูกคำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ของ positiveFosB positive nuclei (จำนวนΔFosB positive nuclei / จำนวน neurons) สำหรับแต่ละภูมิภาค
แอนติบอดี FosB ที่ใช้ในการศึกษานี้ (SC-48, เทคโนโลยีชีวภาพของ Santa Cruz, Santa Cruz, CA) ถูกยกระดับขึ้นเมื่อเทียบกับภูมิภาคภายในของ FosB และตระหนักถึงทั้ง FosB และΔFosB แม้ว่าแอนติบอดีนี้รับรู้ทั้ง FosB และΔFosBเซลล์ประสาทภูมิคุ้มกันที่วัดในการศึกษานี้จะถูกเรียกว่า positiveFosB เซลล์ประสาทเชิงบวกเนื่องจากมันแสดงให้เห็นว่ายาเสพติดรวมถึงแอลกอฮอล์โดยเฉพาะทำให้เกิด BFosB ไม่ใช่เซลล์ประสาท Perrotti และคณะ ([2008]) การวัดการเหนี่ยวนำΔFosB (เพื่อตอบสนองต่อการบริหารยาเสพติดรวมถึงแอลกอฮอล์) โดยใช้สองแอนติบอดี: หนึ่งที่รู้จัก FosB และΔFosB (SC-48) และเลือกหนึ่งสำหรับ selectFosB (ไม่มีขายในเชิงพาณิชย์) และพบว่าสำหรับยาทั้งหมด การศึกษา immunoreactivity สังเกตโดยใช้ FosB แอนติบอดี (SC-48) เกิดจากΔFosBเนื่องจากพวกเขาไม่ได้ตรวจพบเซลล์ประสาทภูมิคุ้มกันใด ๆ ที่ใช้แอนติบอดีเลือก FosB เต็มความยาว [10] นอกจากนี้ΔFosBเป็นที่รู้กันว่าถูกเหนี่ยวนำให้เกิดขึ้นในลักษณะเฉพาะของสมอง - และเซลล์ชนิดเฉพาะโดยการรักษาเรื้อรังต่างๆและความคิดเห็นที่ยอดเยี่ยมในหัวข้อนี้มีอยู่ [11,43,44].
ตัวย่อและที่ตั้งของโครงสร้างระบบประสาท
Il - เยื่อหุ้มสมอง infralimbic (+1.70 มม.); Cg1 - cingulate cortex 1 (+1.1 มม.); Cg2 - cingulate cortex 1 (+1.10 มม.); แกน NAcc - แกนกลางของนิวเคลียส (+1.10 มม.); เปลือก NAcc - เปลือกนิวเคลียส accumbens (+1.10 มม.); LSi - กะบังด้านข้างกลาง (+1.10 มม.); La - amygdala ด้านข้าง (−1.22 มม.); Bla - อะมิกดาลา basolateral (−1.22 มม.); CeC / CeL - อะมิกดาลากลางและกลางด้านข้าง (−1.22 มม.) CeMPV - ส่วนหลังที่อยู่ตรงกลางของนิวเคลียสกลางของอะมิกดาลา (−1.22 มม.) PAG - สีเทา periaquaductal (−3.64 มม.); EW - นิวเคลียส Edinger-Westphal (−3.64 มม.); VTA - พื้นที่หน้าท้อง (−3.64 มม.); DR - แร็พหลัง (- 4.60 มม.); PBN - นิวเคลียสพาราบราเชียล (−5.2 มม.); NTS - นิวเคลียส tractus solitarius (−6.96 มม.) สมองของหนูในพิกัด stereotaxic[45] ใช้เพื่อจับคู่ความคิดแบบหนึ่งถึงสามส่วนเพื่อหาปริมาณของแต่ละส่วนของสมอง
วิธีการทางสถิติ
ข้อมูลถูกรายงานว่าเป็นค่าเฉลี่ย± SEM ยกเว้นที่ระบุไว้เป็นอย่างอื่น ข้อมูลถูกกระจายตามปกติ สถิติดำเนินการโดยใช้ Statistica รุ่น 6 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) และ GraphPad Prism รุ่น 4.00 (ซอฟต์แวร์ GraphPad, San Diego, CA, USA) มีการใช้มาตรการ ANOVA แบบสองทางซ้ำเพื่อการบริโภคเอทานอลและข้อมูลความพึงพอใจเพื่อประเมินความแตกต่างระหว่างกลุ่ม ทำการวิเคราะห์ความแปรปรวนสองทางและสามทางสำหรับข้อมูลΔFosBเพื่อประเมินปฏิกิริยาและผลกระทบหลักสำหรับกลุ่ม (ความเข้มข้นสูงความเข้มข้นต่ำและน้ำ) พื้นที่สมองและจีโนไทป์ การแก้ไขของ Bonferroni สำหรับการเปรียบเทียบหลายรายการและการโพสต์เฉพาะกิจของ Bonferroni ถูกดำเนินการตามความเหมาะสม โดยเฉพาะเราตั้งสมมติฐานว่าวงจรความเครียดและรางวัลจะเพิ่มขึ้น FosB ในหนูแสดงการตั้งค่าเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ลดลง สำหรับลูกผสมข้ามนั้น Pearson's r ถูกใช้เพื่อระบุการมีความสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่างระดับΔFosBและความชอบของเอทานอลและการบริโภคในหนูที่มีประสบการณ์ของเอทานอล
การจัดกลุ่มตามลำดับชั้นได้ดำเนินการเพื่อให้เห็นภาพว่าข้อมูลมีความแตกต่างกันอย่างไรและประเมินว่ากลุ่มข้อมูลเข้าด้วยกันอย่างไร ค่ามัธยฐานที่กำหนดแทนที่ข้อมูลเปอร์เซ็นต์ΔFosBที่หายไปซึ่งไม่เกิน 15% ของข้อมูล แม้ว่าจะมีระดับความไม่แน่นอนสูงกว่าค่าที่ตรวจพบจริง แต่การวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นต้องการสมาชิกที่สมบูรณ์หรือการลบแบบสมบูรณ์เพื่อการเปรียบเทียบแบบตัวพิมพ์เล็ก การจัดกลุ่มตามลำดับชั้นดำเนินการโดยใช้วิธีของ Ward และกลุ่มผลลัพธ์ที่ได้รับคำสั่งจากส่วนประกอบหลักแรกของการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (JMP®, เวอร์ชัน 8, SAS Institute Inc. , Cary, NC) สำหรับกลุ่มที่มีประสบการณ์เกี่ยวกับน้ำและเอธานอลข้อมูลΔFosBสำหรับแต่ละส่วนของสมองจะถูกแปลงเป็นคะแนนซีและทำการวิเคราะห์องค์ประกอบหลักเพื่อกำหนดจำนวนของกลุ่ม ข้อมูลจะถูกจัดกลุ่มตามพื้นที่สมองและแต่ละบุคคลโดยใช้การวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้น
ผลงานของผู้เขียน
ARO, YAB, RAH, TAJ สนับสนุนการออกแบบการศึกษา ARO ได้รับข้อมูล ARO, IP, RDM วิเคราะห์ข้อมูล ARO, RDM, IP, TAJ, YAB และ RAH มีส่วนร่วมในการร่างและแก้ไขต้นฉบับ ผู้เขียนทั้งหมดอ่านและได้รับการอนุมัติต้นฉบับสุดท้าย.
กิตติกรรมประกาศ
เราขอขอบคุณดร. Jody Mayfield และ Colleen McClung สำหรับการสนทนาที่เป็นประโยชน์และ Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour และ Darshan Pandya สำหรับความช่วยเหลือด้านเทคนิค งานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนโดยความคิดริเริ่มเชิงบูรณาการของระบบประสาทเกี่ยวกับโรคพิษสุราเรื้อรัง Consortium Grant AA13520 และสถาบันแห่งชาติเกี่ยวกับการละเมิดแอลกอฮอล์และโรคพิษสุราเรื้อรังมอบ AA06399-S และ AA16424
อ้างอิง
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL ตำนานการผจญเพลิงและการตอบสนองต่อแอลกอฮอล์ในภารกิจอินเดียน จิตเวชศาสตร์ Am J 1997;154: 983 988- [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. การค้นพบในกลุ่มย่อยเกี่ยวกับระดับการตอบสนองต่อแอลกอฮอล์เป็นปัจจัยเสี่ยงต่อความผิดปกติในการใช้แอลกอฮอล์: กลุ่มประชากรของผู้หญิงและลาติน แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 2004;10: 1499 1508- [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER การใช้เอทานอลโดยสมัครใจใน 15 สายพันธุ์เมาส์ที่มีเชื้อ เภสัช 1993;112: 503 510- doi: 10.1007 / BF02244901 [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC ลูกผสม C57BL / 6J x FVB / NJ ดื่มแอลกอฮอล์มากกว่าหนู C57BL / 6J แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK et al. หนูไฮบริดเป็นแบบจำลองทางพันธุกรรมของการบริโภคแอลกอฮอล์สูง Behav Genet 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA ความแตกต่างของพฤติกรรมระหว่าง C57BL / 6JxFVB / NJ และ C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 เมาส์ไฮบริด: สัมพันธ์กับการควบคุมการบริโภคเอทานอล Behav Genet 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW การพัฒนาเครื่องดื่มที่มีแอลกอฮอล์และการเพิ่มผลใน C57BL / 6J แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Porrino LJ, Whitlow CT, แซมซั่น HH ผลของการบริหารตนเองของเอทานอลและเอทานอล / ซูโครสต่ออัตราการใช้กลูโคสในสมองในหนูขาว สมอง Res 1998;791(1-2): 18 26- [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ ปริมาณเอทานอลในระดับต่ำถึงปานกลางจะสร้างรูปแบบที่แตกต่างกันของการเปลี่ยนแปลงการเผาผลาญในสมองในหนู แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Perrotti LI, ผู้ประกอบ RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, DW ตนเอง, Nestler EJ รูปแบบที่แตกต่างของการเหนี่ยวนำ DeltaFosB ในสมองโดยยาเสพติด ไซแนปส์ 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ DeltaFosB: สวิตช์ระดับโมเลกุลสำหรับการปรับตัวในระยะยาวในสมอง สมอง Res Res Mol สมอง 2004;132: 146 154- [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, DW ตนเอง, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB สะสมอยู่ในประชากรเซลล์ GABAergic ในหางหลังของการรักษาทางจิต Eur J Neurosci 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ryabinin AE, Wang YM การบริหารแอลกอฮอล์ซ้ำ ๆ จะส่งผลต่อการสร้างภูมิคุ้มกันของโปรตีน c-Fos และ FosB ในหนู DBA / 2J แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO การแสดงออกของ ITF ในสมองของเมาส์ระหว่างการได้รับการดูแลตนเองด้วยแอลกอฮอล์ สมอง Res 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE การดื่มแอลกอฮอล์ก่อให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของสมองในการเลือกปัจจัยการถอดความ สมอง Res 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Kalivas PW. เราจะทราบได้อย่างไรว่าการเปลี่ยนแปลงทางประสาทที่เกิดจากยามีความสำคัญอย่างไร? Nat Neurosci 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Crews FT, Nixon K. กลไกการทำงานของระบบประสาทและการฟื้นฟูในโรคพิษสุราเรื้อรัง เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 2009;44: 115 127- ดอย: 10.1093 / alcalc / agn079 [ข้ามอ้างอิง]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF การศึกษาคุณสมบัติของเอธานอลที่กีดกันในพื้นผิวของหนู C57BL / 6 เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 2006;40: 119 126- doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE การกระจาย Urocortin 1 ในสมองของเมาส์นั้นขึ้นอยู่กับความเครียด ประสาท 2005;132: 729 740- doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047 [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ryabinin AE รอยโรคของนิวเคลียส Edinger-Westphal ในหนู C57BL / 6J ขัดขวางการเกิดภาวะอุณหภูมิที่เกิดจากเอทานอลและการบริโภคเอทานอล Eur J Neurosci 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA Urocortin 1 microinjection เข้าไปในผนังด้านข้างกะบังควบคุมการได้มาและการแสดงออกของการบริโภคแอลกอฮอล์ ประสาท 2008;151: 780 790- doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE การแสดงออกของ Urocortin 1 ในสายหนูห้าคู่คัดเลือกโดยคัดเลือกเพื่อความแตกต่างในการดื่มแอลกอฮอล์ เภสัช 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ The urocortin 1 neurocircuit: ความไวของเอทานอลและการมีส่วนร่วมที่อาจเกิดขึ้นในการบริโภคแอลกอฮอล์ รายละเอียดของสมอง Res 2006;52: 368 380- doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007 [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- แซมซั่น HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW การบริหารตนเองแอลกอฮอล์: บทบาทของโดปามีน mesolimbic แอนวิทย์นิวยอร์ก Acad 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- แมกไบรด์ WJ, Li TK โมเดลสัตว์พิษสุราเรื้อรัง: ชีววิทยาของพฤติกรรมการดื่มแอลกอฮอล์สูงในสัตว์ฟันแทะ Crit Rev Neurobiol 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurocircuitry เป้าหมายในรางวัลเอทานอลและการพึ่งพาอาศัยกัน แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, จางวาย, เมอร์ฟี่ JM, แมกไบรด์ WJ การดูแลตนเองในสมองของเอธานอลภายในบริเวณพื้นที่หน้าท้องของหนู Wistar ชาย: หลักฐานการมีส่วนร่วมของเซลล์ประสาทโดปามีน J Neurosci 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. ปริมาณเอทานอลในปริมาณต่ำกระตุ้นเซลล์ประสาทโดปามีนในพื้นที่หน้าท้อง สมอง Res 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV เอทานอลเพิ่มอัตราการยิงของโดปามีนเซลล์ประสาทของพื้นที่หน้าท้องหนูในพื้นที่หลอดแก้ว สมอง Res 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Heilig M, Koob GF บทบาทสำคัญของการใช้สาร corticotropin ในการติดเหล้า Trends Neurosci 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Dyr W, Kostowski W. หลักฐานที่แสดงว่า amygdala มีส่วนในการยับยั้งฤทธิ์ของ 5-HT3 ตัวรับที่มีต่อการดื่มแอลกอฮอล์ในหนู เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF ผลของ CRF1-receptor และ opioid-receptor คู่อริต่อการเพิ่มขึ้นของการพึ่งพาเครื่องดื่มแอลกอฮอล์โดยหนูที่ชอบแอลกอฮอล์ (P) แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Hyytiä P, Koob GF การเป็นปรปักษ์กับตัวรับ GABAA ใน amygdala ที่ขยายออกไปจะลดการจัดการด้วยตนเองของเอทานอลในหนู Eur J Pharmacol 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR เอทานอลช่วยเพิ่มการส่ง GABAergic ที่ไซต์ก่อนและหลังซินแนปติคในเซลล์ประสาทส่วนกลาง amygdala หนู Proc Natl Acad Sci 2003;100: 2053 2058- doi: 10.1073 / pnas.0437926100 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF Intra-amygdala muscimol ลดการทำงานของเอทานอลด้วยตนเองในหนูที่อาศัยอยู่ แอลกอฮอล์ Clin ค่าใช้จ่าย Res 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. ลดความวิตกกังวลในการทดลองและการบริโภคเอทานอลโดยสมัครใจในหนูตามหลังรอยโรค amygdala ที่เป็นเบส แต่ไม่ถึงฐาน สมอง Res 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Wee S, Koob GF บทบาทของระบบ dynorphin-kappa opioid ในการเสริมฤทธิ์ของยาเสพติด Psychopharmacology (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- วอล์คเกอร์ BM, วาลเดซจี, McLaughlin JP, Bakalkin G. การกำหนดเป้าหมายระบบตัวรับแรงหมุน / แคปป้า opioid เพื่อรักษาอาการติดสุราและการพึ่งพา เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ 2012;46: 359 370- doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP การไกล่เกลี่ย Kappa-opioid จากภายนอกของศักยภาพที่เกิดจากความเครียดของการตั้งค่าสถานที่เอทานอลปรับอากาศและการบริหารตนเอง Psychopharmacology (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- แมกไบรด์ WJ นิวเคลียสส่วนกลางของ amygdala และผลกระทบของพฤติกรรมการดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์และแอลกอฮอล์ในหนู Pharmacol Biochem Behav 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Dole VP, Gentry RT ไปสู่อะนาล็อกของโรคพิษสุราเรื้อรังในหนู: ปัจจัยขนาดในรูปแบบ Proc Natl Acad Sci 1984;81: 3543 3546- doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Dole VP, Gentry RT ไปสู่อะนาล็อกของโรคพิษสุราเรื้อรังในหนู: เกณฑ์การรับรู้ของการดื่มแรงจูงใจทางเภสัชวิทยา Proc Natl Acad Sci 1985;82: 3469 3471- doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Nestler EJ ชีววิทยาโมเลกุลของการเสพติด ฉันคือ J Addict 2001;10: 201 217- doi: 10.1080 / 105504901750532094 [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: ผู้ไกล่เกลี่ยระดับโมเลกุลของพลาสติกและระบบประสาทในระยะยาว สมอง Res 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [ข้ามอ้างอิง]
- Franklin KJ, Paxinos G. สมองของเมาส์ในพิกัด stereotaxic 2 ซานดิเอโก: นักวิชาการ; 2001
;