Tabiiy va giyohvand moddalarni mukofotlash vositasi DFOSB bilan umumiy vositachilardan umumiy nerv plastisizm mexanizmlari (2013)

Ushbu tadqiqot DeltaFosBga jinsiy mukofotning ta'sirini va DeltaFosBning jinsiy xulq-atvor va mukofotga ta'sirini o'rganib chiqdi. Giyohvandlik bilan ma'lum bo'lgan standart molekulyar o'zgarishlar jinsiy aloqada bo'lgani kabi aniqlandi. Boshqacha qilib aytganda, DeltaFosB jinsiy ogohlantirishlar uchun rivojlangan, ammo giyohvand moddalar aynan shu mexanizmni o'g'irlamoqda. Bu bilan giyohvandlikning o'ziga xos xulq-atvordan farq qilishi va xulq-atvori shunchaki majburlash (bu nimani anglatadi) degan munozaralar tugaydi. Xuddi shu sxemalar, bir xil mexanizmlar, bir xil uyali o'zgarishlar, bir xil xatti-harakatlar - kichik farqlar bilan.

J Neurosci. 2013 Feb 20;33(8):3434-3442.

To'liq o'rganish

Pichoqlar KK, Vialou V, Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM.

manba

Anatomiya va hujayra biologiyasi, Shulich tibbiyot va stomatologiya fakulteti, G'arbiy Ontario universiteti, London, Ontario N6A 3K7, Kanada, Molekulyar va integral fiziologiya bo'limi, Michigan universiteti, Ann Arbor, Michigan 48109, Fishberg nevrologiya va Fridman bo'limi. Brain Instituti, Nyu-York, Nyu-York, Nyu-York, Tibbiyot Sinay Tibbiyot maktabi va Missisipi Tibbiyot Markazi, Jekson, Missisipi 10029, Neyrobiologiya va anatomik fanlar va fiziologiya va biofizika bo'limlari.

mavhum

Noqonuniy giyohvand moddalar nervoplazitsiyani tabiiy mukofot yo'lida, ayniqsa yadro akkumtsiyalarida (NAc) paydo bo'lishiga olib keladi, bu esa o'z navbatida o'ziga xoslik va xulq-atvorni rivojlanishiga olib keladi. So'nggi ma'lumotlarga ko'ra, tabiiy nafaqa NAc da shunga o'xshash o'zgarishlarga olib kelishi mumkin, chunki giyohvand moddalar tabiiy foyda keltiradigan plastisiyani mexanizmlarini faollashtirishi va tabiat va giyohvand moddalar bilan ajralib turishi.

Ushbu tadqiqotda erkak jinsida jinsiy tajribani jinsiy a'zolar uchun qisqa yoki uzoq muddatli jinsiy aloqada yo'qotish davrida kam dozada (0.5 mg / kg) amfetamin uchun sensitised konditsionerlik bilan afzal qilingan amfetamin mukofotini oshiradi. Bundan tashqari, rivojlangan amfetamin mukofotining boshlanishi, ammo uzoq muddatli ifodasi NAcdagi dendritik uzaylarda vaqtinchalik o'sish bilan bog'liq edi. Keyinchalik, jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan amfetaminning o'sishida DFOSB transkripsiyasi faktori uchun muhim rol va NAc neyronlari bo'yicha dendritik uzaylarda birikadigan ortish-salbiy ulash sherigi DJunD virusi vektorini o'tkazish orqali aniqlandi. Bundan tashqari, jinsiy tajriba - giyohvandlik mukofotini oshirish, DFOSB va spinogenez NAc ning juftlashtirilgan dopamin D1 retseptorlari faollashuviga bog'liq ekanligi ko'rsatib o'tilgan. D1 reseptorining D2 retseptorlari dori-darmonli blokadasi, ammo DXNUMX retseptorlari emas, jinsiy xatti-harakatlar vaqtida NAc ichida DFBQ indüksiyasini kuchaytirdi va spinogenezi va sezgirli amfetaminni oshirdi.

Tushbu topilmalar giyohvandlik va tabiatdan ajralib chiqadigan giyohvandlikning giyohvandlikning zaifligini nazorat qiluvchi keng tarqalgan molekulyar va hujayrali plastisitik mexanizmlarga ta'sir qilishini ko'rsatmoqda va bu kuchayib borayotgan zaiflik DF va uning quyi oqim transkripsiyasi maqsadlari orqali amalga oshiriladi.

Kirish

Tabiiy mukofot xulq-atvori va dori-darmonlar umumiy neyron yo'lda, mezolimbik dopamin (DA) tizimiga to'g'ri keladi, unda yadro gulxanlari (NAc) markaziy rol o'ynaydi (Kelley, 2004). Giyohvand moddalarni iste'mol qilish giyohvand moddalardan giyohvand moddalarga qaramlikdan giyohvandlikka (giyohvandlikka) o'tishda muhim rol o'ynaydigan mezolimbik tizimda nevroplastikani keltirib chiqaradiHyman va boshq., 2006; Kauer va Malenka, 2007; Kalivas, 2009; Chen va boshq., 2010; Koob va Volkow, 2010; Wolf, 2010a; Mameli va Luscher, 2011). Giyohvand moddalar va tabiiy nafaqalar mezolimbik tizimda bir xil neyronlarni faollashtirmaydi deb faraz qilindi va shuning uchun bu dorilar bu devoni noyob ravishda faollashtiradi va o'zgartiradi (Kameron va Karelli, 2012). Shu bilan birga, tabiiy va dori-darmonlar mezolimbik tizimga ta'sir ko'rsatadigan tabiiy sovg'a, ayniqsa, jinsiy mukofot, va giyohvand moddalarni suiiste'mol qilish oqibatlari (Frohmader va boshq., 2010a; Pitchers va boshq., 2010a; Olsen, 2011).

Jinsiy xatti-harakatlar juda qimmatlidir (Tenk va boshqalar, 2009),

Ushbu topilmalar, tabiiy va dori mukofot tajribalari, nöral plastisitenin umumiy mexanizmlarini paylaşıyor va bu, o'z navbatida, modda foydalanishga zaiflik ta'sir qiladi.

Ushbu tadqiqotning maqsadi jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan plastisitivaga bog'liq hujayralardagi mexanizmlarni aniqlashdan iborat bo'lib, bu o'z navbatida giyohvand moddalarning ko'payishiga olib keladi. Xususan, DFOSB transkripsiyasi faktori o'rni o'rganildi, chunki u tabiiy va dori-darmonlarning ta'siri bilan shug'ullanadi (Nestler va boshq., 2001; Werme va boshq., 2002; Olausson va boshq., 2006; Wallace va boshq., 2008; Hedges va boshq., 2009; Pitchers va boshq., 2010b). Bundan tashqari, jinsiy tajriba bilan bog'liq nöral plastisite uchun dopamin D1 retseptorlari (D1R) ning roli tekshirildi, chunki NAc DFOSB induksiyasi va psixostimulyatorli idoradan so'ng orttirilgan orqa zichligi D1R o'z ichiga olgan neyronlarda ifodalangan. (Lee va boshq., 2006; Kim va uning hamkorlari, 2009) va D1R aktivatsiyasiga bog'liq (Zhang va boshq., 2002).

Bu erda biz DFOS, diOlivistik etiketlash uchun, dominant-salbiy majburiy sherikning virusli vektorli vositachilik ekspressionini va Amph mukofotining oshirilishi bo'yicha mukofotni bekor qiladigan jinsiy tajribaning o'zaro ta'sirlashuvchi ta'sirini tekshirish uchun farmakologik manipulyatsiyani qo'lladik. D1Rga bog'liq NAFda DFNB indüksiyasi va undan keyin NAc o'mt zichligi oshishi. Birgalikda, topilmalar tabiiy va giyohvand mukofotlar neytral plastisitaning umumiy mexanizmlari, DFBning muhim vositachisi bo'lganligini tasdiqlaydi.

Materiallar va usullari

Hayvonlar.

Erkaklar erkak (225-250 g kelishi) va ayol (210-220 g) Sprague Dawley kalamushlari (Charlz River laboratoriyalari) tajriba davomida har xil jinsiy juftlarga Plexiglas hujayralarida, harorat va namlikning regulyatsiyasi va 12 / 12 h Oziq-ovqat va suv bilan erkin va ochiq-oydin bo'lgan yorug'lik / quyuq aylanish. Xotin-qizlar juft-juftlik mashg'ulotlari uchun ovariectomizatsiya qilindi va sinovdan oldin 5% estradiol benzoat (Sigma-Aldrich) va progesteron (500 ml susam yog ', Sigma-Aldrich) xujayralari uchun 0.1 mg'a kiritilgan teri osti implantlari qabul qilindi. Barcha protseduralar G'arbiy Ontario Universiteti va Michigan Universitetining Hayvonlarni parvarish qilish va foydalanish bo'yicha qo'mitalari tomonidan tasdiqlangan va Hayvonlarni davolash bo'yicha Kanada Kengashiga va O'zbekistondagi umurtqali hayvonlarni tadqiq qilishda milliy salomatlik institutlari ko'rsatmalariga moslashgan.

Jinsiy xatti.

Mating seanslari qorong'u davrda (2 va 6 soat oralig'ida) erta zulmatli davrda, qizil rangli yorug'lik ostida, toza sinov hujayralarida (60 × 45 × 50 sm) sodir bo'lgan. Erkak sichqonchani 4 yoki 5 kundalik juftlashuv seanslari paytida zaryadga uchragan. Besh seans tanlandi, chunki ilgari biz ushbu paradigma jinsiy axloqni uzoq muddatli yordamgaPitchers va boshq., 2010b), Amf lokomotor faolligiga o'zaro ta'sirchanlik (Pitchers va boshq., 2010a) va mukofot (Pitchers va boshq., 2010a). Ejakulyatsiya har bir juftlashish seansining yakuniy nuqtasi sifatida tanlangan, chunki biz bundan oldin Amf lokomotiv sensitizatsiyasida jinsiy tajribani ta'siri uchun muhim ekanligini ko'rsatgan edik (Pitchers va boshq., 2010a), bu hayvonlarga zaryadlanish ko'rsatmasdan urg'ochi bilan turmushga chiqishga ruxsat berilganda yuzaga kelmagan. Jinsiy xatti-harakatlarning parametrlari (ya'ni, birinchi o'rnatish uchun kechikish, intromilatsiya va ajralish, qo'shtirnoq va intromitsiyalar soni) ilgari ta'riflanganidek qayd etilgan (Pitchers va boshq., 2010b). Barcha tajribalar uchun jinsiy jihatdan tajribali guruhlar jinsiy xatti-harakatlariga (har bir juftlashuv seansi vaqtida zaryadga uchragan va ajralishning umumiy soni) mos tushadi. Beshinchi juftlik majlisidan so'ng erkaklar bir xil jinsiy hamkorlar bilan birga turdilar va 1, 7 yoki 28 d jinsiy aloqada bo'lish vaqtida turmush o'rtog'iga ruxsat berilmadi. Jinsiy aloqada qolgan hayvonlar jinsiy jihatdan tajribali erkaklar bilan bir xonada joylashtirilgan va joylashtirilgan. Bundan tashqari, sodda tekshiruvlar 5 ketma-ketligi davomida, qabul qiluvchi ayolga ruxsatisiz, bir soat davomida toza sinov kafeslarida joylashtirildi.

DFOSB ifodasi.

Hayvonlar 390 ml 50% eruvchanligi bilan chuqur tashvishga solingan (natriy pentobarbital, 0.9 mg / kg ip) va 500 ml paraformaldehid (Sigma-Aldrich) ning 4 m fosfat tamponida (PB) nuqta va DR antagonist tajribalari. Miyalari olib tashlandi va 0.1 h uchun xona haroratida bir xil fiksatifte eritildi, so'ngra 1 ° C da 4% sukroz va 20% nNNMX m azidda saqlandi. DR antagonisti tajribalari uchun sintez o'qi bo'ylab miya olib tashlandi va yarmiga tashlandi. Ulardan bir qismi PBda saqlanib, DiOlistik uchun ishlatilgan, ikkinchisi esa DF uchun ishlab chiqarilgan. Kronofrotektant eritmasida (0.01% sukroz va 0.1% etilen glikol PB) 35 ° C da saqlangan to'rt parallel seriyali yig'ilgan muzlatish mikrotomlari (Microm H400R) bilan kesilgan koronali qismlar (30 mikron). Erkin cho'zinchoq bo'limlar 30 m PBS, pH 0.1 bilan inkubatsiyalar o'rtasida keng tarqalgan bo'lib yuvindi va barcha qadamlar xona haroratida edi. Bo'limlar 20% ga ta'sirlangan2O2 (10 min) va kuluçka solüsyonu (1 h, 0.1% BSA, Fisher va 0.4% Triton X-100, Sigma-Aldrich o'z ichiga olgan PBS). Keyin bo'limlar ilgari sinovdan o'tkazilgan (PNFX quyon poliklonal antikorida (1: 5K; sc-48 Santa Cruz biotexnologiyasi)Perrotti va boshq., 2004, 2008; Pitchers va boshq., 2010b). Pan-FosB antikorlari FosB va DFosB tomonidan taqsimlangan ichki mintaqaga qarshi ko'tarilgan va ilgari DFOSB hujayralarini ushbu tadqiqotda ishlatiladigan vaqt nuqtalarida aniq tasavvur qilish uchun xarakterlangan (stimuldan keyin> 1 d) (Perrotti va boshq., 2004, 2008; Pitchers va boshq., 2010b). Keyinchalik, biotin konjugatsiyalangan echki quyonlarga qarshi IgG (1, 1: 500 in PBS +, Vector Laboratories), avidin-biotin-horseradish peroxidase (1 h; ABC elit; 1: 1000 in PBS; Vector Laboratories) , 0.02% 3,3% 10'-diaminobenzidin tetrahidroklorid (0.02 min; Sigma-Aldrich) va 0.1% nikel sulfat bilan vodorod periks (0.015%) bilan PB. Bo'limlar Superfrost plus shisha slaydlarida (Fisher) o'rnatildi va dibutil ftalat ksilen bilan qoplangan.

DFOSB-IQ hujayralari soni NAc qobig'ida va asosiy yadroda standart (400 × 600 mm) sohalarida (yuqorida aytib o'tilganidek) hisoblandiPitchers va boshq., 2010b). Har bir NAc pastki mintaqasida har bir hayvonga o'rtacha hisoblangan ikki qism hisoblangan. Vaqt nuqtasi eksperimentida, DFOSB-IQ hujayralarining soni tegishli vaqt nuqtasida naif nazorat guruhining bir marta o'zgarishi sifatida ifodalangan va har bir kichik hudud uchun tajribali va naif guruhlar o'rtasida taqqoslanmagan, t muhim ahamiyatga ega bo'lgan testlar p <0.05. ΔJunD-AAV va DR antagonist tajribalarida, mos ravishda ikki tomonlama yoki bir tomonlama ANOVA va Holm-Sidak usuli ishlatilgan. Bundan tashqari, DR antagonisti tajribasida barcha hayvonlarda DFosB-IR hujayralari darhol NAc ga dorsal va lateral qorinchaga ulashgan dorsal striatumda (tahlil maydoni: 200 × 600 mkm) hisoblangan. Bir tomonlama ANOVA va t guruhlar orasidagi solishtirish uchun testlardan foydalanilgan.

DiOlistik.

Vaqt nuqtasi va DjunD virusli vektor tajribasi uchun, kalamushlar 50 ml sho'r suv bilan (0.9%) intrasardial tarzda perfuze qilindi, keyin 500 ml 2 ml 0.1% paraformaldehid 100 m PB. 0.1 santimetrda 0.01% natriy azid bilan 4 m PBda saqlangan vibratom (Microm) va bo'limlari yordamida miya (1.3 mikron koronali) bo'linadi. Volfram zarralarini (1,1 mm diametri, Bio-Rad) lipofil karbosiyaninli diI (3,3,3'-dioctadecyl-3'XNUMX'-tetrametilindokarbosiyanin perklorat; Invitrogen) bilan qoplash ilgari ta'rif etilganidek (Forlano va Woolley, 2010). Di-qoplangan volfram zarralari 160-180 psi da 3.0 moy por hajmli (BD Biosciences) filtri bilan Helios Gene Gun tizimi (Bio-Rad) yordamida to'qimaga keltirildi va 0.1 mb uchun nNNXX mb 24 s. 4 s ° da yorug'likdan himoyalangan. Keyinchalik, tilim 4% paraformaldehidda PBNNXX h uchun PB xona haroratida, PBda yuvilgan va xNUMX-diazabicyclo (3) oktan (-1,4) anti-fading agenti bo'lgan jelvatol bilan polimer yopiq kameralarda (Bio-Rad) 2,2 mg / ml, Sigma-Aldrich) (Lennette, 1978).

DiI-etiketli neyronlar yordamida tasvirlangan Zeiss LSM 510 m konfokal mikroskop (Carl Zeiss) va geliy / neon 543 nm lazer. Har bir hayvon uchun, DN-AAV va DR antagonist tajribalarida, har bir NAc pastki mintaqasida yoki qobiqda (joy belgilari, jumladan, lateral qorincha va oldingi komissura bilan bog'liq holda) 2-5 nöronlar orqa miya miqdori uchun ikkinchi darajali dendritga qiziqish. Har bir neyron uchun 2-4 dendritlari 40-100 mm umumiy dendritik uzunligini aniqlash uchun tahlil qilindi. Dendritik qismlar 40 × suvga cho'mish maqsadidan foydalanib, 0.25 mm oralig'ida qo'lga kiritildi. z-axis va 3D tasviri qayta tuzildi (Zeiss) va dastur tomonidan taklif qilingan adaptiv (ko'r) va nazariy PSF sozlamalari yordamida dekonvolyutsiyaga (Autoquant X, Media Cybernetics) o'tdi. Orqa miya zichligi Imaris dasturiy paketining Filament moduli yordamida aniqlandi (versiya 7.0, Bitplane). Dendritik urug'lar soni har bir neyron uchun o'rtacha va keyin har bir hayvon uchun o'rtacha hisoblangan 10 ìm jinsidan bildirilgan. Statistik farqlar har bir nuqtada (omillar: jinsiy tajriba va NAc pastki hududi) va DJunD eksperimentida (omillar: jinsiy tajriba va virusli vektor) jinsiy noma'qul va tajribali hayvonlarning ketma-ketlikdagi tajribalarida ikki tomonlama ANOVA yordamida belgilandi. DR antagonist eksperimentida ANOVA dan foydalaning. Guruhlarning taqqoslashlari Holm-Sidak usuli bilan muhim ahamiyatga ega p <0.05.

Konditsioner joy tanlovi.

CPP eksperimental dizayni ilgari tasvirlanganPitchers va boshq., 2010a(amf; Sigma-Aldrich, erkin bazaning asosida hisoblangan 0.5 mg / ml / kg skor) juft juftlashtiruvchi ishtiyoq bilan, neytral uch o'lchovli apparati (Med Associates) juftlashgan xonada va sho'rlangan eritma xonasida muqobil kunlarda va yorug'lik fazasining birinchi yarmida amalga oshiriladi. Nazorat hayvonlari ikkala xonada sho'rlangan.

Har bir hayvon uchun CPP ballari testdan o'tgan vaqt davomida juftlik xonasida vaqtni (sekundlarda), pretestdan minus sifatida hisoblab chiqilgan. Vaqt nuqtasi tajribalarida guruhlarni solishtirish uchun bir tomonlama ANOVA va Holm-Sidak usuli qo'llanildi. Yomonlashtirilmagan t sinov vaqtida ahamiyatga ega bo'lgan test p Vaqt nuqtasi tajribasida har bir vaqt oralig'ida va DJunD tajribasida har bir virusli vektor bilan davolashda Naive-Sal va Naive Amfni solishtirish uchun <0.05 ishlatilgan. Vaqt eksperimentida bir tomonlama ANOVA va Holm-Sidak usuli jinsiy tajribali guruhlarni taqqoslash uchun ishlatilgan (Exp-Sal, 7 d Exp Amph va 28 d Exp Amph) va juft bo'lmagan. t 2 naif guruhlarini solishtirish uchun test ishlatilgan. DR antagonist eksperimentidagi barcha guruhlarni solishtirish uchun ikki tomonlama ANOVA va Holm-Sidak usuli qo'llanildi. Ikkita to'lanmagan t Naive-Sal va Naif Amf guruhlarini har bir Virusli Vektorli davolash holati (GFP yoki DJunD) bilan solishtirish uchun foydalanildi, chunki ma'lumotlar ANOVA tahlilini o'tkazish uchun DJunD guruhlarida juda o'zgaruvchilardir. Barcha ahamiyatga ega darajalar belgilandi p <0.05.

Virusli vektor tajribalari.

Erkak kalamushlari sterotaksik apparatga (Kopf Instruments) joylashtirilgan ketamin (87 mg / ml / kg ip) va xylazine (13 mg / ml / kg ip) bilan behushlikda va rekombinan adeno bilan bog'liq virusli vektorlarni Faqat GFP (yashil floresan oqsil) yoki DJunD (DFOSB ning dominant-salbiy ulash sherigi) va GFP, NAc (Koordinatalari: AP + 1.5, bregma'dan ML ± 1.2, Boshsarardan DV-7.6), 1.5 Bir Hamilton shpritsi (Garvard Apparatus) dan foydalanib, 7 min. DJunD DFOSB bilan raqobat bilan gegerodimerizatsiya qilish orqali DFosB orqali vositachilik transkripsiyasini kamaytiradi va shuning uchun maqsadli genlarning promotor hududlari ichida DFOSB ning AP-1 hududiga ulanishining oldini oladi (Winstanley va boshq., 2007; Pitchers va boshq., 2010b). DJunD DFOSBga yuqori yaqinlik bilan bog'langan bo'lsa ham, DjunD ning ba'zi kuzatilgan ta'sirlari boshqa AP-1 proteynlarini antagonizatsiya qilish vositasi bo'lishi mumkin. Shu bilan birga, DFOSB test qilingan sharoitlarda ifodalangan AP-1 dominantli oqsilidir (Pitchers va boshq., 2010b). 3 va 4 hafta o'tgach, hayvonlar 4 ketma-ket juftlashuv seanslari davomida jinsiy tajribani oldilar yoki 4 guruhlarini yaratish uchun soddalikda qolishdi: jinsiy o'spirin GFP, jinsiy jihatdan tajribali GFP, jinsiy o'spirin DJunD va jinsiy jihatdan tajribali DJunD. Jinsiy tajriba 4 kunlik juftlashuv sessiyasidan iborat edi. Jonivorlar CPP va diOlistics uchun sinovdan o'tkazildi. Qarshi maydonlarni tekshirish ilgari ta'riflanganidek amalga oshirildi (Pitchers va boshq., 2010b). NAc bo'limlari (koronal; 100 μm) GFP (1: 20,000; quyon anti-GFP antikoru; Invitrogen) uchun immunga ega bo'lgan. Virusning tarqalishi asosan NAc ning qobiq qismi bilan chegaralangan va yadroga qo'shimcha ravishda tarqaldi.

D1R / D2R antagonistlari.

Erkak sichqonchani intraperitoneal in'ektsiya (0.1 ml / kg) ketamin (87 mg / ml) va xylazine (13 mg / ml) bilan behushlikda tashxis qilindi va stereotaksik apparatga (Kopf Instruments) joylashtirildi. Ikki tomonlama 21-gauge yo'riqnomasi kanülleri (Plastiğin One) AP + 1.7 da NAc tomon yo'naltirildi, bregma dan ML ± 1.2; -6.4 DV kafatasidan olingan va akril akril bilan ta'minlangan, bosh suyagiga o'rnatilgan uchta vintga yopishtirilgan. 2 haftalik tiklanish davrida hayvonlarni xushbo'ylash jarayonlari uchun infüzyon usullariga aylantirildi. 4 kundalik juftlashuv seanslari boshlanishidan o'n besh daqiqa oldin qabul qiluvchi ayolni kiritib, erkaklar kalamushlari D1R antagonisti R (+) SCH-23390 gidroxloridi (Sigma-Aldrich), D2 retseptorlari (D2R) antagonisti S- ( -) etikloprid gidroxlorid (Sigma-Aldrich) 0.9 ning oqim tezligida steril sho'r (10%, har bir yarim sharda 1 mkm da, 0.9% sho'r suv bilan eritilgan) yoki sho'r (1.0 mili) ichida eritildi 1.0 min oralig'ida, keyinchalik 1 min bilan in'ektsiya kanülüyle, dori difüzyonu uchun o'rniga, bir ml / daqiqa. Ushbu in'ektsiya hajmi yadro va qobiqni tiriltiradi, chunki 1 ml infuziyalari qobiq yoki yadro bo'linmalari bilan chegaralanadi (Laviolette va boshq., 2008). Dozalar avvalgi tadkikotlarga asoslanib, ushbu yoki undan kam dozalarda dori yoki tabiiy mukofotning ta'siriga (Laviolette va boshq., 2008; Roberts va boshq., 2012). Erkaklar nazorati jinsiy jihatdan sodda bo'lib qoldi, ammo 4 kundalik ishlov berish seanslarida bo'sh test katakchasiga joylashtirilgunga qadar natriy ichi sho'rlanmagan. Yakuniy juftlash yoki mashg'ulot mashg'ulotidan bir hafta o'tgach, erkaklar Amph CPP uchun va orqa miya va DFB tahlillari uchun sinovdan o'tkazildi. Boshqa tajribalardagi kabi besh seansdan tashqari to'rt seansdan foydalanish takrorlangan infuziyalar natijasida kelib chiqqan NAcga ortiqcha zararni bartaraf etish uchun tanlandi va shuning uchun orqa miya va DFB tahlilini o'tkazish imkonini berdi. Darhaqiqat, shikastlanish aniq emas edi va sho'rlangan infektsiyali hayvonlarda o'murtqa va DFF ning tahlillari oldingi eksperimentlarda nojo'ya guruhlar kabi ma'lumotlarni ko'rsatdi. Ikki tomonlama ANOVA va Holm-Sidak usuli aniqlangan p <0.05 jinsiy xatti-harakatlarning jinsiy tajribasini keltirib chiqaradigan yengillashtirishni aniqlash uchun ishlatilgan.

natijalar

Tajribali indikator DFOSB regulyatsiyasi uzoq muddatli

Birinchidan, jinsiy tajriba bilan bog'liq bo'lgan qisqa va uzoq muddatli (7 yoki 28 d) jinsiy a'zosining ajralib chiqishi bilan bog'liq bo'lgan vaqtinchalik korrelyatsiyalar DFF eksperementida, NAcdagi dendritik kontsentratlar va Amf-CPPda aniqlangan. Ilgari, 5 kundalik juftlashuv seanslarining jinsiy tajribasi, mezolimbik tizimda, ayniqsa, NAcWallace va boshq., 2008; Pitchers va boshq., 2010b). Ushbu o'tmishda o'tkazilgan tadqiqotlarda DFOSB darajalari jinsiy xatti-harakatlardan so'ng 1 d ichida o'lchanadi va DFOSB to'planish muddati uzaytirilgan muddatlarda saqlanib qolinganidan keyin ham davom etadimi-yo'qmi ma'lum emas edi. Jinsiy hayotga ega bo'lgan erkaklar 1, 7 yoki 28 d dan so'ng 5 kundalik juftlashuv mashg'ulotlarini yakunladilar. Jinsiy tartibsizliklar 5 kundalik mashg'ulotlarning yakuniy bosqichidan keyin bir vaqtning o'zida parflantirildi. NAc qobig'i va yadrosidagi DFOSB-IQ hujayralarining soni barcha vaqtlarda jinsiy o'limga qarshi tekshiruvlardan sezilarli darajada yuqoridir (Anjir. 1A, qobiq; 1 d, p = 0.022; 7 d, p = 0.015; Anjir. 1B: yadro; 1 d, p = 0.024; 7 d, p <0.001; 28 d, p <0.001), 28 kunlik abstentsiyadan keyin NAc qobig'idan tashqari (p = 0.280). Shunday qilib, DFOSB regulyatsiyasi kamida 28 d davrida jinsiy tajribadan so'ng abstinentsiya vaqtida davom etadi.

Shakl 1.     

Shakl 1.     

Jinsiy tajriba DFOSB-I hujayralari sonining tez va doimiy o'sishiga sabab bo'ldi. NAc qobig'idagi DFOSB-IQ hujayralari sonining kattalashishi (A) va yadro (B) jinsiy aloqa vositasida (oq) nazoratchilar bilan solishtirganda jinsiy tajribada (qora) hayvonlardan = 4 har bir guruh). Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. *p <0.05, sodda boshqaruv bilan solishtirganda sezilarli farq. Naif 1 d tasvirlari vakili (C), Exp 1 d (D), Exp 7 d (E) va Exp 28 d (F). Oldin oldingi komissura. O'lcham paneli, 100 μm.

Dendritik spinalarda tajribaga asoslangan jinsiy aloqalar vaqtinchalik

Pitchers va boshq. (2010a) ilgari 7 d bilan emas, balki 1 d tomonidan amalga oshirilgan jinsiy tajriba orqali Golgi emprenyatsiya texnikasidan foydalanganligi haqida xabar berib, mukofotni bekor qilmaslik dendritik dallanma va NAc qobig'i va yadro neyronlarida dendritik bellarning soni (Pitchers va boshq., 2010a). Bu erda jinsiy o'spirin va tajribali erkaklar spinogenezi oxirgi nikoh sessiyasidan so'ng 7 d yoki 28 d bilan baholandi. DiOlistik etiketleme usuli yordamida mavjud bo'lgan topilmalar 7 d jinsiy aloqada qolish muddati kuzatilgan jinsiy tajribani dendritik o'moqlar soniniF(1,8) = 9.616, p = 0.015; Anjir. 2A-C). Ayniqsa, NAc qobig'i va yadroida dendritik o'murtmalar soni sezilarli darajada oshdiAnjir. 2A: qobiq, p = 0.011; yadro, p = 0.044). Biroq, bu o'pka zichligi ortishi vaqtinchalik edi va NAc pastki mintaqasida 28 d uzoq davom etgan jinsiy aloqani to'xtatish davridan keyin aniqlanmadiAnjir. 2B).

Shakl 2.     

Shakl 2.    

Jinsiy tajriba NAcdagi dendritik pog'onalar sonining ko'payishiga va sezgir Amph mukofotiga olib keldi. A, B, NAc qobig'idagi dendritik tayanchlarning soni va 7 d (A) yoki 28 d (jinsiy o'ynaydigan oq va tajribali qora) hayvonlar; n = 4 yoki 5). Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. #p <0.05, sodda boshqaruv bilan solishtirganda sezilarli farq. C, Naive 7 d va Exp 7 d guruhlaridan vakillikning dendritik segmentlari o'murtqa zichligini o'lchash uchun ishlatilgan. O'lcham paneli, 3 μm. D, Juftlashgan xonada (Amph yoki salin) vaqt sinovidan o'tgan vaqtdan so'ng, jinsiy o'ynaydigan (oq) yoki tajribali (qora) hayvonlardan oldingi testdan so'ng (XPN) yoki 7 d yoki 28 d sonidan keyin juftlash yoki mashg'ulot seansi: Naif-Sal (7 d keyin foydalanish; n = 8), Naif Amph (7 d bilan ishlashdan keyin; n = 9), Exp-Sal (hayvonlarning estrodiol guruhlari xamdan keyin 7 d yoki 28 d bilan sinovlangan; n = 7), 7 d Exp Amph (7 d bilan bog'langanidan so'ng; n = 9) va 28 d Exp Amph (28 d bilan bog'langanidan so'ng; n = 11). Tuzli guruhlar ikkala palatasi bilan ham bog'langan Sal oldi. *p <0.05, jinsiy tajribali sho'rlanish nazorati bilan solishtirganda sezilarli farq.

Tajribali bo'lgan jinsiy aloka Amph mukofoti uzoq muddatli

Biz bundan oldin 7-10 d tomonidan olib borilgan jinsiy tajribani amph reward (Pitchers va boshq., 2010a). Ayniqsa, jinsiy jihatdan tajribaga ega hayvonlarda amf (0.5 yoki 1.0 mg / kg) past dozalari uchun jiddiy shartli joy tanlovi (CPP) shakllandi. Joriy tadqiqot natijalari 7 d va 28 d jinsiy aloqada qolish davridan keyin ham jinsiy hayotga ega bo'lgan hayvonlarga Amph mukofotini namoyish qilish orqali ushbu oldingi natijalarni tasdiqladi va kengaytirdi (Anjir. 2D; F(2,24) = 4.971, p = 0.016). Ayniqsa, 7 yoki 28 abstinensiyasi bilan jinsiy jihatdan tajribaga ega hayvonlar, testdan o'tgan vaqt davomida Amf-paired xonasida ancha vaqt o'tkazdi, bu esa har ikkala kamerada ham salbiy ta'sir ko'rsatadigan salbiy ta'sirlardanAnjir. 2D: Exp-Sal va boshqalar 7 d Exp AMPH, p = 0.032; va boshqalar 28 d Exp AMPH, p = 0.021). Avvalgi topilgan natijalarni tasdiqlash natijasida, jinsiy ozg'in hayvonlarning keyingi test vaqtida Amf-paired xonasida ko'proq vaqt sarflamaganligi va jinsiy darajada sodali sho'rlanishni nazorat qilish guruhidan farq qilishmagan (Anjir. 2D) (Pitchers va boshq., 2010a).

DFOSB faoliyati jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan sezgir Amph mukofotiga taalluqlidir

Natijalar shuni ko'rsatadiki, jinsiy tajriba NAc neyronlarda DF-ning uzoq muddatli birikmasiga Amph mukofotini kuchaytirdi. Ko'tarilgan DFOSB faoliyati Amph mukofotini oshirish uchun muhimmi yoki yo'qligini aniqlash uchun DFosBning dominant-salbiy majburiy sherigi bo'lgan DJunD, DFS bilan bog'liq transkripsiyani (Winstanley va boshq., 2007), NAc (Virusli vektor vositachali gen klubi orqali)Anjir. 3A,B). Amf CPP testlarining natijalari NAFdagi DJunDni ifodalash orqali DFosB faoliyatining susayib borishi jinsiy tajribani va 7 d jinsi mukofotini takomillashtiruvchi Amph mukofotiga ta'sirini oldini oldi. Jinsiy hayotga ega bo'lgan DJunD hayvonlari Amf uchun sezilarli darajada CPP hosil qilmagan va jinsiy ozg'inlikdagi DJunD hayvonlardan farq qilmagan (Anjir. 3B). Aksincha, jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan GFP nazorat hayvonlari amf uchun CPP ni tashkil qilib, jinsiy o'spirin GFP nazorati bilan solishtirganda sezilarli darajada yuqori CPP skori bilan ko'rsatilgan (Anjir. 3B, p = 0.018).

Shakl 3.    

NAc ichidagi DFosB faolligini tashvishga solib, sensitize qilingan AMPHni mukofotlash va jinsiy jihatdan tajribali hayvonlarda NAc spinalarining sonini ko'paytirish. AKichik (chap), oraliq (o'rta) va katta (o'ng) qarshi joylarni ko'rsatadigan, yadro akumbenslariga yo'naltirilgan rekombinan adeno bilan bog'liq Virusli-DJunD in'ektsiyasini olgan uch hayvondagi GFP ekspressionining vakillik tasvirlari. AC, oldingi komissura; LV, lateral qorincha. O'lcham paneli, 250 μm. B, Virus tarqalishining eng mashhur joylari va naqshlarining sxematik illyustratsiyasi. Barcha hayvonlarda GFP qobiqda aniqlandi, lekin yadroga tarqaldi. CAmf-paired xonasida testdan o'tgan vaqt davomida GFP nazorati vektorini (Naif, Naif, GFP) yuborish uchun sarflaydigan jinsiy ozuqaviy (oq) va tajribali (qora) hayvonlardan oldingi testdan (CPP balidan) n = 9; Exp, n = 10) yoki DJunD vektori (Naif, n = 9; Exp, n = 9). DJinsiy tajribali GFP va DJunD dan olingan dendritik segmentlarning vakillik suratlari o'murtqa zichligini o'lchash uchun ishlatilgan. O'lcham paneli, 3 μm. E, GFP nazorat vektori yoki DJunD vektori in'ektsiyasini olgan yoki jinsiy o'ta sodda (oq) va tajribali (qora) hayvonlarning NAc jinsida dendritik pog'onalarning soni. Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. *p <0.05, sodda boshqaruv bilan solishtirganda sezilarli farq. #p <0.05, GFP tajribali boshqaruvidan sezilarli farq.

DjunD haddan tashqari ekspressionning susaytiruvchi ta'siri jinsiy tajribani olishda jinsiy xatti-harakatlarning buzilmasligining natijasi emas edi. NAc'deki DJunD ifodasi ilgari jinsiy tajribadan so'ng jinsiy axloqni yaxshilashning oldini olish uchun ko'rsatildi (Pitchers va boshq., 2010b). Haqiqatan ham, bu mavjud eksperimentda tasdiqlangan. GFP nazorat hayvonlari, montaj qilish, intromilatsiya va ajralish uchun qisqa muddatli lattalar ko'rsatdi va juftlashning birinchi kuni bilan solishtirganda to'rtinchi kun ketma-ket jinsiy aloqa sinovlari davomida kamroq ulash va intromilatsiya1 stol). Aksincha, DjunD-AOK qilingan hayvonlarning birinchi kuni bilan taqqoslaganda to'rtinchi kunida montaj qilish yoki intromilatsiya qilish uchun kamroq latanslar mavjud emas. Shunday qilib, NAJ ichiga DJunf infuziyalari jinsiy tajribani ta'sirini kuchaytirdi. Ammo, GFP nazorati va DJunD bilan infüze qilingan guruhlar orasida juftlik testlarining har qanday natijalari bo'yicha jiddiy farqlar mavjud emas edi, bu DJunD infuziyalarining Amf CPP ning jinsiy tajribasiga asoslangan sensitizatsiya ta'siriga ta'sirini ko'rsatmaydi. juftlik tajribasi1 stol).

Ushbu jadvalni ko'ring:     

Jadval 1.    

GFP- yoki DJunD-ifodalangan virusli vektorlarning NAc infüzyonlarini olgan guruhlarda jinsiy tajribani olish paytida jinsiy xatti-harakatlarning parametrlaria

DF fosbasi NAc dendritik spinalarida jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan o'sish uchun juda muhimdir

NAF neyronlarning jinsiy tajribasidan keyin orttirilgan orqa miya zichligi va 7 d jinsiy aloqa mukofotini bekor qilish uchun DFosB faoliyati ham talab qilingan (Anjir. 3C,D). CPP uchun yuqorida tavsiflangan hayvonlarning NAc kasalliklarida omurgani tahlil qilish uchun ikki tomonlama ANOVA ham jinsiy tajribani (F(1,34) = 31.768, p <0.001) va virusli vektor bilan davolash (F(1,34) = 14.969, p = 0.001), shuningdek, o'zaro ta'sir (F(1,34) = 10.651, p = 0.005). Ayniqsa, jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan GFP nazorat hayvonlari jinsiy o'spirin GFP nazorati bilan solishtirganda ko'proq NAc pog'onasiga ega edi (Anjir. 3D: p <0.001), bizning avvalgi topilmamizni tasdiqlaydi (Pitchers va boshq., 2010a). Bunga javoban, jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan DJunD hayvonlari JIND guruhlariga nisbatan jiddiy farq qilmaganlar va jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan GFP nazorat hayvonlari bilan solishtirganda ancha past edi (Anjir. 3D: p <0.001). Shunday qilib, NAcdagi DJunD ifodasi jinsiy tajribaning ta'sirini to'sdi va NAc spinogeneziga voz kechishni mukofotladi.

D1R antagonisti jinsiy tajribani keltirib chiqaradi, DFOSB regulyatsiyasi

Jinsiy tajriba natijasida DFOSB regulyatsiyasi va sezgir bo'lgan Amph CPP uchun D1R yoki D2R faollashuvi zarur bo'lsa, hayvonlarga 1 ning har birida NAX 2 min oldin D15R yoki D4R antagonisti (yoki sho'r) kundalik ketma-ket juftlanish seanslari. Muhimki, na D1R, na D2R antagonist infüzyonları NAc'ta, jinsiy aloqa suhbatida hech qanday jinsiy xatti-harakatni boshlash yoki ta'sir ko'rsatishi (Anjir. 4D-F). Xuddi shunday, D1R yoki D2R antagonizmi jinsiy tajribani juftlashishga ta'sir qilishiga to'sqinlik qilmadi, chunki barcha guruhlar jinsiy xatti-harakatlarning osonlashtirilishini namoyish qildilar, 4 kuniga nisbatan 1 kuniga nisbatan qisqaradigan bo'shliqni kechiktirishi bilan tasdiqlanganAnjir. 4F) (F(1,40) = 37.113, p <0.001; Sal, p = 0.004; D1R ant, p = 0.007; D2R ant, p <0.001).

Shakl 4.    

NAc ga kiritilgan dopamin retseptorlari antagonistlari jinsiy axloqqa ta'sir qilmadi. Coronal NAc bo'limlari (A, + 2.2; B, + 1.7; C, Bregma + 1.2), barcha hayvonlar uchun NAC ning in'ektsiya joylarini ko'rsatmoqda. Kanallar ikki tomonlama bo'lib, bir tomonlama ravishda barcha hayvonlarni (Naive-Sal, oq, n = 7; Exp-Saline; quyuq kulrang, n = 9; Exp D1R ant, ochiq kulrang, n = 9; Exp D2R Ant, qora, n = 8). AC, oldingi komissura; LV, lateral qorincha; CPu, kaudat-pitamen. Kechikishga o'rnatish (D), intromission kechikish (E) va bo'shashish kechikishi (F) barcha jinsiy aloqa guruhlari uchun (Salin, oq, D1R Ant, kulrang, D2R Ant, qora). Ma'lumot o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi. *p <0.05, davolanish davridagi 1-kun va 4-kun o'rtasidagi farq.

NAc 7 dda so'nggi NAc infuzioni va juftlash yoki ishlov berish seansidan so'ng DFosB-IQ hujayralarining sonini tahlil qilish ham NAc qobig'i (F(3,29) = 18.070, p <0.001) va yadro (F(3,29) = 10.017, p <0.001). Birinchidan, sho'r suv bilan yuborilgan nazoratlardagi jinsiy tajriba DFOSB ning jinsiy jihatdan sodda boshqaruvga nisbatan sezilarli darajada regulyatsiyasini keltirib chiqardi (Anjir. 5A, qobiq p <0.001; Anjir. 5B: yadro, p Yuqoridagi natijalarni tasdiqlovchi <0.001). D1R antagonizmi, ammo D2R emas, DFOSB ning ushbu regulyatsiyasini oldini oldi yoki susaytirdi. NAc qobig'ida, jinsiy tajribali erkaklarga davolangan D1R antagonisti DFOSB-IR hujayralarida jinsiy jihatdan sodda boshqaruvga nisbatan o'sish kuzatilmadi (Anjir. 5A: p = 0.110), va DFosB ekspressioni jinsiy tajribaga ega sho'rlangan erkaklar bilan solishtirganda ancha past edi (Anjir. 5A: p = 0.002). NAc yadrosida D1R antagonizmi qisman ta'sir ko'rsatdi: D1R antagonist bilan davolash qilingan erkaklarda DFSB sezilarli sho'rlangandan so'ng (Anjir. 5B: p = 0.031), ammo bu upregulatsiya jinsiy tajribaga ega sho'rlangan erkaklar bilan solishtirganda ancha past edi (Anjir. 5B: p = 0.012). D2R antagonistli davolash DFNQX antagonistini olgan jinsiy tajribali erkaklar NAFosB indüksiyoniga ta'sir qilmadi, chunki sodda sho'rlangay nazorati bilan solishtirganda,Anjir. 5A: qobiq, p <0.001; Anjir. 5B: yadro, p <0.001) va D1R antagonisti bilan davolangan erkaklar (Anjir. 5A: qobiq, p <0.001; Anjir. 5B: yadro, p = 0.013) va jinsiy tajribaga ega sho'rlangan erkaklardan farq qilmadi.

Shakl 5.     

Shakl 5.     

NAcdagi D1Rni blokirovkalash jinsiy hayotga jalb qilingan hayvonlarning NAcdagi DFSB-IQ hujayralarining sonini oshiradi. NAc qobig'idagi DFOSB-IQ hujayralari sonining kattalashishi (A) va yadro (B) jinsiy hayotga ta'sir qiluvchi (qora) hayvonlardagi jinsiy ozuqaviy (oq) nazoratlarga nisbatan (Naive-Sal, n = 6; Exp-Saline, n = 7; Exp D1R ant, n = 9; Exp D2R ant, n = 8). Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. *p <0.05, sodda boshqaruv bilan solishtirganda sezilarli farq. #p <0.05, sho'r va D2R Ant tajribali hayvonlar bilan solishtirganda sezilarli farq. Naivel Sal tasvirlari vakili (C), Exp Sal ​​(D), Exp D1R ant (E) va Exp D2R ant (F). Oldin oldingi komissura. O'lcham paneli, 100 μm.

D1R yoki D2R antagonistlarining dorsal striatumga tarqalishini nazorat qilish uchun DFosB ifodasi NAc ga yaqin va lateral qorincha uchun ulashgan sohada tahlil qilindi, chunki dorsal striatumda DFSB ning psixostimulyator va opiyatlar tomonidan indikatsiyasi D1R faoliyat (Zhang va boshq., 2002; Muller va Unterwald, 2005). Jinsiy tajriba sho'rlangan erkaklardagi dorsal striatumda (Naive-Sal: 35.6 ± 4.8 vs Exp-Sal: 82.9 ± 5.1; p Oldingi hisobotimizni tasdiqlovchi <0.001) (Pitchers va boshq., 2010b). Bundan tashqari, na D1R yoki D2R antagonist infuziyalari nac ta'sir jinsiy tajribasi-Dorsal striatum (Exp-D1R: 82.75 ± 2.64 ir hujayralar, Exp-D2R: 83.9 ± 4.4 ir hujayralar; p <0.001 Naive-Sal nazorati bilan taqqoslaganda). Ushbu topilmalar antagonist infuziyalarining tarqalishi birinchi navbatda NAc bilan chegaralanganligini ko'rsatmoqda.

NAc-da D1R antagonisti sezgir Amph mukofotini bloklaydi

NAX ning D1R blokadasi juftlik paytida ham blokirovka qilingan jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan Amph mukofotini oshirdi, oxirgi NAc infuzionidan keyin testlangan 7 d va mating testi (F(3,29) = 2.956, p = 0.049). Yig'ilish seanslari davomida NAc ichida sho'rlangan jinsiy tajribali hayvonlarning jinsiy o'ynaydigan erkaklar bilan taqqoslaganda, Amf-xonada ko'proq vaqt o'tkazdi (Anjir. 6A, p = 0.025), yuqoridagi natijalarni tasdiqlaydi. Aksincha, juftlashuv vaqtida intra-NAc D1R antagonistini olgan jinsiy hayotga duchor bo'lgan hayvonlar Amph uchun CPP hosil qilmadi. Ular jinsiy axloqsizlik nazorati bilan ajralib turmaganlar va Amf-paired kamerada sho'r suv bilan solishtirganda ancha oz vaqt sarflashgan (Anjir. 6A: p = 0.049) yoki D2R antagonisti (Anjir. 6A: p = 0.038) jinsiy aloqa bilan shug'ullanadigan erkaklar. D2R antagonist infuziyalari NAC D2R antagonist infuziyalari bilan jinsiy hayotga ega bo'lgan hayvonlardan farqli o'laroq Amph mukofotiga salbiy ta'sir ko'rsatmadi.Anjir. 6A: p = 0.040) va D1R antagonistlari tajribali hayvonlar (Anjir. 6A: p = 0.038) va jinsiy tajribaga ega sho'rlangan erkaklardan farq qilmadi.

Shakl 6.     

Shakl 6.     

NAc ichidagi D1 retseptorlarini blokirovkalash jinsiy tajribaga ega bo'lgan hayvonlarda sezgir Amph mukofotini va dendritik bellarni ortdi. A, Amf-paired xonasida sarf-xarajat miqdori, sinovdan o'tgan vaqtdan boshlab, jinsiy o'spirin (oq, n = 6) va sho'rlangan (qora) hayvonlarn = 7), D1R antagonisti (n = 9) yoki D2R antagonisti (n = 8). Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. *p <0.05, sodda sho'rlangan moddalar bilan solishtirganda sezilarli farq. #p <0.05, D1R Ant tajribali hayvonlardan sezilarli farq. B, Jinsiy darajada naif (dona oq rangli, oq, n = 7) va sho'rlangan (qora) hayvonlarn = 8), D1R antagonisti (n = 8) yoki D2R antagonisti (n = 8). Ma'lumotlar o'rtacha ± SEM guruhlari. *p <0.05, sodda sho'rlangan moddalar bilan solishtirganda sezilarli farq. #p <0.05, tajribali sho'rlangan eritmalardan sezilarli farq.

D1R antagonistli davolashni NAc spinogenezini jinsiy tajribasi bloklaydi

Xuddi shu hayvonlarning NAc'larida o'murtqa zichligini tahlil qilish shuni ko'rsatdiki, jinsiy tajribani orttirgan NAc o'murtqa zichligi va 1 d jinsiy aloqa mukofotidan voz kechish uchun juftlashish paytida D7R faollashuvi talab etiladi (Anjir. 6B; F(3,26) = 41.558, p <0.001). Xususan, jinsiy tajribali sho'rlanish nazorati va D2R antagonist hayvonlari jinsiy jihatdan sodda sho'rlanish nazorati bilan solishtirganda juda ko'p sonli umurtqalarga ega edi (Anjir. 6B: p Avvalgi topilmalarimizni tasdiqlovchi <0.001) (Pitchers va boshq., 2010a) va yuqorida tavsiflangan GFP nazorat virusli vektorli topilmalar. Aksincha, jinsiy hayotga ega bo'lgan D1R antagonisti bilan to'ldirilgan hayvonlarni jinsiy o'gitlarni sho'r moddalar bilan to'ldirilgan elementlardan farqlashmadi (Anjir. 6B). D2R antagonist infuzionining qisman ta'siri D2R infüzyonlu hayvonlarni jinsiy yo'l bilan tajribayu salin nazorat qilishdan ko'ra kamroq orqa miya zichligi ko'rsatdi (Anjir. 6B: p = 0.02), lekin jinsiy o'spirin sho'rlanishi va D1R bilan muomala qilingan tajribali erkaklarga nisbatan ancha yuqorip <0.001; Anjir. 6B). Shunday qilib, juftlik paytida NAc'teki D1R blokeli jinsiy tajriba ta'sirini to'sqinlik qildi va NAc spinogenesis'de mukofotni bekor qilmadi.

muhokama

Hozirgi tadqiqotda tabiat va giyohvandlik mukofotlari orasidagi o'zaro sezgirlikni namoyon qildik. Tabiiy mukofotni ta'qib qilish davri davom etadi. Ayniqsa, 7 yoki 28 d qoldirilgan jinsiy xatti-harakatlar bilan tajribani Amph mukofotini oshirdi.. Ushbu topilmalar giyohvand iste'molini inkubatsiya qilishda suiiste'mollikdan olingan giyohvandlikdan saqlanishning muhim roli bilanLu va boshq., 2005; Tomas va boshq., 2008; Kurt, 2010b, 2012; Xue va boshq., 2012). Bundan tashZari, NAc da tabiiy foyda keltiradigan DFF breddi, chunki tabiiy mukofotni bekor ḱilishni psixostimulyator mukofotga ta'sir etishi mumkin, potentsial ravishda NAc da spinogenez orqali mukofotni bekor kilish davrida. Biz jinsiy tajribadan so'ng NAcdagi DFSB birikmasini uzoq vaqt davom etadigan va juftlash vaqtida NAc D1R faoliyatiga bog'liqligini ko'rsatdik. O'z navbatida, bu D1R-vositachiligi DFOSB-ning NAcdagi yangilanishi, Amf uchun oshirilgan mukofot uchun va NAcdagi o'murtqa zichligi ortishi uchun juda muhimdir, garchi jinsiy tajribalarning bu natijalari jinsiy aloqada bo'lishdan uzoqlashishga bog'liq bo'lsa-da (Pitchers va boshq., 2010a). Nihoyat, NAc spinogenezi sezgirlangan Amph mukofotining qisqa muddatli ifodasini dastlabki rivojlanishida o'z hissasini qo'shishi mumkinligini ko'rsatdi, ammo NAc ning orttirilgan orqa miya zichligi vaqtinchalik bo'lgan va 7 d dan so'ng kuzatilganligi sababli, dori rentabelligini davom ettirish uchun muhim emas. 28 d emas, bekor qilish davri.

Uzog'i bilan jinsiy xulq-atvorda, shu jumladan, tabiiy mukofotlanish jarayonida NApda dopaminning chiqarilishi ma'lum bo'lgan. Qabul qiluvchi ayolni kiritishda NAc ichidagi hujayra dopamini ko'payadi va juftlash vaqtida yuqori bo'lib qoladi (Fiorino va boshq., 1997). Hozirgi o'rganish shuni ko'rsatdiki, juftlik paytida dopamin retseptorlari antagonistlarini NScga infüze qilish jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishi yoki bajarilishiga ta'sir qilmaydi, bu esa dopaminning o'ziga xos mukofot harakatlarini ifodalashda ishtirok etmasligi haqidagi tushunchaga mos keladi jinsiy aloqaga oid maslahatlar berishni rag'batlantirish uchun (Berridge va Robinson, 1998). Darhaqiqat, jinsiy mukofotni oldindan belgilash mezolimbik dopamin mukofot tizimidagi neyronlarning faollashuviga olib keladi, shu jumladan ventral tegmental sohadagi dopaminarjik hujayralar va ularning maqsadlari, NAc (Balfour va boshq., 2004). Repetitorlik jinsiy xatti-harakati NAcda DFOSBni keltirib chiqaradi, bu esa jinsiy axloqni yaxshilash tajribasini keltirib chiqaradi (Pitchers va boshq., 2010b). Amaldagi natijalar shuni ko'rsatadiki, juftlashtirilgan DFOSB regulyatsiyasi juftlash vaqtida NAc ichida D1R aktivatsiyasiga bog'liq. Ushbu topilma D1R ni ifodalovchi NAc o'rta bo'g'imli neuronlardagi DFOSBni takrorlab, psevdo- (Lee va boshq., 2006; Kim va uning hamkorlari, 2009) va bunday DFOSB regulyatsiyasi D1R aktivizatsiyasiga (Zhang va boshq., 2002). Bundan tashqari, dori tajribali hayvonlarda odatda kuzatilgan sezgir bo'lgan dorilar javob D1R ning DFH ning eksprespresiyasi orqali oldindan dori ta'siriga ega bo'lmasa, DIXNUMXR striatumdagi neyronlarni ifoda etishi mumkin (Kelz va boshq., 1999). Tham, ham tabiiy, ham giyohvand moddalar uchun mukofotlari D1R ga qaram mexanizm orqali NAc da DFFni oshiradi.

Bundan tashqari, hozirgi topilmalar DFOSB tabiiy mukofoti tajribasi va psixostimulyator mukofot o'rtasidagi o'zaro bog'liqlikni sezgirlash vositasining muhim vositasi ekanligini ko'rsatadi. Yuqorida ta'kidlab o'tilganidek, NAc ichidagi DFosB faoliyati bundan oldin sezgir bo'lgan dori javoblarida ta'sir ko'rindi, chunki NAcdagi DFF ekspresyoni oldindan o'tkir yoki takroriy tatbiq etilganidan keyin kokainga lokomotivni faollashtiradiKelz va boshq., 1999), giyoh va morfin CPP ga sezuvchanligini oshiradi (Kelz va boshq., 1999; Zachariou va boshq., 2006) va kam dozada kokainning o'z-o'zini boshqarishiga olib keladi (Colby va boshq., 2003). Hozirgi o'rganish shuni ko'rsatadiki, juftlarni jinsiy aloqa bilan shug'ullanish davomida jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan Amph mukofotini sezgirlash davomida NAcdagi D1R yoki DFosB faoliyatining blokadasi.

Hozirgi tadqiqot Amph mukofotining va NAc spinogenesisning sezuvchanligi uchun jinsiy mukofotdan voz kechish zarurligini ko'rsatdi. Ushbu bekor qilish davrida DFB bu spinogenezni boshlash va sinaptik kuchini o'zgartirish uchun quyi oqim genining ifodasini o'zgartirib, nöronal funktsiyani ta'sirini faraz qilamiz. Darhaqiqat, juftlash vaqtida NAFda DFB ning indüksiyonunu blokirovka qilish, mukofotni bekor qilmasdan aniqlangan NAc'de ortib borayotgan orqa zichligini oldini oladi. Bundan tashqari, D1R antagonistining NAc ga har bir juftlashuv seansi oldidan infuzionlanishi DFOSBning jinsiy tajribasining sababli ortishi va keyinchalik ortib borgan orqa zichligini oldini oldi.

DFOS - bu transkripsiyaal faollashtiruvchi yoki repressor vazifasini bajaradigan transkriptsion faktor bo'lib, ko'plab maqsadli genlarni ifodalashga ta'sir qiladi, bu esa o'z navbatida NAcdagi orqa miya zichligi va sinaptik kuchga ta'sir qilishi mumkin. (Nestler, 2008). Ayniqsa, DFOSB sikliqa bog'liq kinaz-5ni faollashtiradi (Bibb va boshq., 2001; Kumar va boshq., 2005), yadro omili k B (NF-kB) (Russo va boshq., 2009b), va glutamat AMPA retseptorining GluA2 bo'limi (Vialou va boshq., 2010) va rzudlik bilan erta gen c-fos transkripsiyasini kuchaytiradi (Pitchers va boshq., 2010b) va histon metiltransferaz G9 (Maze va boshq., 2010). Cyclik-qaram kinaz-5 sitoskeletal oqsillarni va nevritning tashqi o'sishini tartibga soladi (Teylor va boshq., 2007). Bundan tashqari, NF-KB ning faollashtirilishi NAc ichidagi dendritik o'moqlar sonini ko'paytiradi, NF-kB ning inhibisyonu esa bazal dendritik pog'onalarni qisqartiradi va kokainning indikatorli o'sishini bloklaydi (Russo va boshq., 2009b). Shunday qilib, jinsiy sovg'a NAc-da DFOSB ni oshiradi, bu esa NAc omurgasi zichligini bir nechta maqsadlar (masalan, uslubga bog'liq kinaz-5, NF-kB) orqali o'zgartirishi va umumiy natijalar tomonidan faraz qilinganidek, Russo va boshq. (2009a) takroriy kokain harakati uchun.

Ushbu ishda kutilmagan kuzatuv NAcdagi ortikcha zichligi vaqtinchalik bo'lganligi va jinsiy tajribadan keyin 28 dda aniqlanmaganligi kuzatildi. Shunday qilib, orqa miya zichligi ortdi Amph mukofotining boshlanishi bilan bog'liq va sezgirli Amf javoblarining dastlabki rivojlanishi yoki qisqa muddatli ifoda etishiga yordam berishi mumkin. Shu bilan birga, uzaygan abstinentlik davridan keyin sezgir Amph mukofotining qat'iyligi uchun ortikcha orqa miya zichligi talab qilinmadi. Biz oldin jinsiy tajriba NAc da NMDA retseptorlari subunit NR-7 kichik (28, lekin 1, oxirgi marta juft keyin bir kun) sabab bo'ladi ko'rsatdi, bu uzoq muddat mukofotlar saqlanib qolishi keyin boshlang'ich darajalariga qaytdi (Pitchers va boshq., 2012). Ushbu oshgan NMDA retseptorlari ifodasi jinsiy tajribali indentatsiya qilingan sukunat sinapslarining namoyon bo'lishi uchun faraz qilingan (Huang va boshq., 2009; Brown va boshq., 2011; Pitchers va boshq., 2012), jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan o'murtqa o'sishi NMDA retseptorlari faolligini oshirishga bog'liqligini bildiradi (Hamilton va uning hamkorlari, 2012).

Xulosa qilib aytganda, ushbu ishda giyohvand mukofotining o'zaro bog'liqligini tabiiy mukofot (jinsiy aloqa) va uning qaramlikdan mahrum qilish davriga bog'liqligi ta'kidlanadi. Bundan tashqari, bu xatti-plastinka NAFda D1R faollashishi orqali DFosB tomonidan vositachilik qilingan. Shuning uchun, ma'lumotlarga ko'ra, mukofotlash tajribasidan so'ng tabiiy mukofotni yo'qotish shaxslarni giyohvandlikning rivojlanishiga qarshi himoya qila oladi va bu kuchayib borayotgan zaiflikning bir vositachisi DFB va uning quyi oqim transkripsiyasi maqsadlari hisoblanadi.

Izohlar

  • Iyul oyi 16, 2012 bo'ldi.
  • Tahrir dekabr 12, 2012 bo'ldi.
  • Dekabr qabul qilingan 23, 2012.

  • Ushbu ish Kanada Sog'liqni saqlash tadqiqotlari Instituti (LMC), Milliy ruh salomatligi instituti (EJN) va Kanada tabiiy fanlar va muhandislik tadqiqotlari kengashi (KKP va LMC) tomonidan qo'llab-quvvatlandi. Doktor Ketrin Vulli (Northwestern University) diOliistic etiketleme texnikasi bilan yordam berish uchun minnatdorchilik bildiramiz.

  • Mualliflar hech qanday raqobat qiladigan moliyaviy manfaatlarni e'lon qilmaydi.

  • Xat yozishni doktor Lique M. Coolen, Missisipi Tibbiyot Markazining Fizika va Biofizika bo'limi, 2500 Shimoliy Shtat ko'chasi, Jekson, MS 39216 ga yuborish kerak. [elektron pochta bilan himoyalangan]

Manbalar

  1. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Coolen LM

    (2004) Jinsiy xulq-atvor va jinsga bog'liq ekologlar erkakning kalamushlarida mezolimbik tizimini faollashtiradi. Nöropsikofarmakologiya 29: 718-730.

  2. ↵
    1. Berrij KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dopaminning mukofotda qanday rol o'ynashi mumkin: hedonik ta'sir, mukofot olish yoki rag'batlantirish talablari? Brain Res Brain Qol Rev 28: 309-369.

  3. ↵
    1. Bibb JA,
    2. Chen J,
    3. Teylor JR,
    4. Svenningsson R,
    5. Nishi A,
    6. Snyder GL,
    7. Yan Z,
    8. Sagawa ZK,
    9. Ouimet CC,
    10. Nairn AC,
    11. Nestler EJ,
    12. Greengard P.

    (2001) surunkali ta'sirini kokainga ta'siri nöronal protein Cdk5 tomonidan reglamentlanadi. tabiat 410: 376-380.

  4. ↵
    1. Bradley KC,
    2. Meisel RL

    (2001) Jinsiy harakatlarda v-Fosning jinsiy xatti-harakatlari va amfetamin-stimulyatsiya qilingan lokomotorlik faolligi ayolning ayol hamsterlarida oldingi jinsiy tajribalar bilan sezgirlanadi. J Neurosci 21: 2123-2130.

  5. ↵
    1. Jigarrang TE,
    2. Lee BR,
    3. Mu R,
    4. Ferguson D,
    5. Dietz D,
    6. Ohnishi YN,
    7. Lin Y,
    8. Suska A,
    9. Ishikawa M,
    10. Huang YH,
    11. Shen X,
    12. Kalivas PW,
    13. So'rov B,
    14. Zukin RS,
    15. Nestler EJ,
    16. Dong Y,
    17. Schlüter OM

    (2011) Kokainga taalluqli lokomotor sezuvchanlik uchun jim-sinaps asosidagi mexanizm. J Neurosci 31: 8163-8174.

  6. ↵
    1. Kameron CM,
    2. Carelli RM

    (2012) Kokainni saqlab qolish nukleusni kokain va sukroz uchun maqsadga qaratilgan harakatlar davomida dinamikani yoqib yuboradi. Eur J Neurosci 35: 940-951.

  7. ↵
    1. Chen BT,
    2. Hopf FW,
    3. Bonci A

    (2010) Mesolimbik tizimidagi sinaptik plastisitiviya: modda ishlatish uchun terapevtik ta'sir. Ann NY Acad Sci 1187: 129-139.

  8. ↵
    1. Colby CR,
    2. Whisler K,
    3. Steffen S,
    4. Nestler EJ,
    5. Self DW

    (2003) DFOSBning striatal hujayra tipiga xos eksperimenti kokainga qaratilgan rag'batni kuchaytiradi. J Neurosci 23: 2488-2493.

  9. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Erkak kalamushlarida Coolidge ta'siri davomida yadrodagi accumbens dopamin effluxidagi dinamik o'zgarishlar. J Neurosci 17: 4849-4855.

  10. ↵
    1. Forlano PM,
    2. Woolley CS

    (2010) Nucleus accumbens-da pre-va postsinaptik jinslardagi farqlar miqdori. J Comp neurol 518: 1330-1348.

  11. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Pichoqlar KK,
    3. Balfour ME,
    4. Coolen LM

    (2010a) Aralashtirilgan lazzatlar: giyohvand moddalarning inson va hayvon modellarida jinsiy xatti-harakatlariga ta'sirini o'rganish. Horm Behav 58: 149-162.

  12. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Aqlli RA,
    4. Lehman MN,
    5. Coolen LM

    (2010b) Metamfetamin erkak sichqonlarda jinsiy xatti-harakatni tartibga soluvchi neyronlarning subpopulyatsiyalariga ta'sir qiladi. Neuroscience 166: 771-784.

  13. ↵
    1. Hamilton AM,
    2. Oh WC,
    3. Vega-Ramirez H,
    4. Stein IS,
    5. Jahannam JW,
    6. Patrik GN,
    7. Zito K

    (2012) Yangi dendritik uzaylarning faolligiga bog'liqlik proteazom tomonidan boshqariladi. Neyron 74: 1023-1030.

  14. ↵
    1. Hedges VL,
    2. Chakravarty S,
    3. Nestler EJ,
    4. Meisel RL

    (2009) D FosBning oshqozon-ichakchasidagi oshqozon-jinsiy ekspozitsiyasi ayol suruvidagi ayollar hamkasblaridagi jinsiy mukofotni kuchaytiradi. Genlar Brain Behav 8: 442-449.

  15. ↵
    1. Huang YH,
    2. Lin Y,
    3. Mu R,
    4. Lee BR,
    5. Jigarrang TE,
    6. Wayman G,
    7. Marie H,
    8. Liu Vt,
    9. Yan Z,
    10. So'rov B,
    11. Schlüter OM,
    12. Zukin RS,
    13. Dong Y

    (2009) In vivo kokain tajribasi jim sinaps hosil qiladi. Neyron 63: 40-47.

  16. ↵
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Narkologik taqiqlash mexanizmlari: mukofot bilan bog'liq o'rganish va xotiraning ahamiyati. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  17. ↵
    1. Kalivas PW

    (2009) Narkomaniyaning glyutamat gomeostazi gipotezasi. Nat Rev Neurosci 10: 561-572.

  18. ↵
    1. Kauer JA,
    2. Malenka RC

    (2007) Synaptic plastisite va giyohvandlik. Nat Rev Neurosci 8: 844-858.

  19. ↵
    1. Kelley AE

    (2004) Xotira va giyohvandlik: birgalikda neyron devorlar va molekulyar mexanizmlar. Neyron 44: 161-179.

  20. ↵
    1. Kelz MB,
    2. Chen J,
    3. Carlezon Vt Jr.,
    4. Whisler K,
    5. Gilden L,
    6. Beckmann AM,
    7. Steffen S,
    8. Zhang YJ,
    9. Marotti L,
    10. O'z DW,
    11. Tkatch T,
    12. Baranauskas G,
    13. Surmeier DJ,
    14. Neve RL,
    15. Duman RS,
    16. Picciotto MR,
    17. Nestler EJ

    (1999) Mushak ichidagi transkriptsion faktori DFBning ifodasi giyohga sezgirlikni nazorat qiladi. tabiat 401: 272-276.

  21. ↵
    1. Kim Y,
    2. Teylan Ma,
    3. Baron M,
    4. Qumlar A,
    5. Nairn AC,
    6. Greengard P.

    (2009) Yadro akumbenslarida metilfenidat bilan bog'langan dendritik orqa miya va DFosB ekspressionlari. Proc Natl Acad Sci AQSh 106: 2915-2920.

  22. ↵
    1. Koob GF,
    2. Volkow ND

    (2010) Narkomaniyaning asabiylashish. Nöropsikofarmakologiya 35: 217-238.

  23. ↵
    1. Kumar A,
    2. Choi KH,
    3. Renthal Vt,
    4. Tsankova NM,
    5. Theobald, ShU,
    6. Truong HT,
    7. Russo SJ,
    8. Laplant Q,
    9. Sasaki vagon,
    10. Whistler KN,
    11. Neve RL,
    12. O'z DW,
    13. Nestler EJ

    (2005) Xromatinni qayta tuzish striatumda kokain bilan indikatsiyalangan plyonkali asosiy mexanizmdir. Neyron 48: 303-314.

  24. ↵
    1. Laviolette SR,
    2. Lauzon NM,
    3. Bishop SF,
    4. Quyosh N,
    5. Tan H

    (2008) D1ga o'xshash D2-ga o'xshash DXPNN kabi nerv hujayrasidagi akumbens yadroidagi DXNUMX-o'xshash retseptorlari orqali dopamin signalizatsiyasi nikotin mukofotining sezuvchanligini turli xil tarzda o'zgartiradi. J Neurosci 28: 8025-8033.

  25. ↵
    1. Lee KW,
    2. Kim Y,
    3. Kim AM,
    4. Helmin K,
    5. Nairn AC,
    6. Greengard P.

    (2006) D1 va D2 dopaminda retseptorlari o'z ichiga olgan o'rta yadroli neyronlar ichidagi kokainga asoslangan dendritik orqa miya hosil bo'lishi. Proc Natl Acad Sci AQSh 103: 3399-3404.

  26. ↵
    1. Lennette DA

    (1978) Immunofluoresans mikroskopi uchun ishlab chiqilgan o'rnatish vositasi. Am J Clin Patol 69: 647-648.

  27. ↵
    1. Lu L,
    2. Hope IT,
    3. Dempsey J,
    4. Liu SY,
    5. Bossert JM,
    6. Shaham Y

    (2005) Markaziy amygdala ERK signalizatsiyasi yo'llari giyohning o'ziga xosligini inkubatsiyalash uchun juda muhimdir. Nat Neurosci 8: 212-219.

  28. ↵
    1. Mameli M,
    2. Lüscher C

    (2011) Synaptic plastisite va giyohvandlik: o'rganish mexanizmlari puchga chiqdi. Neyrofarmakologiya 61: 1052-1059.

  29. ↵
    1. Maze I,
    2. Covington HE 3rd.,
    3. Dietz DM,
    4. LaPlant Q,
    5. Renthal Vt,
    6. Russo SJ,
    7. Mexanik M,
    8. Mouzon E,
    9. Neve RL,
    10. Haggarty SJ,
    11. Ren Y,
    12. Sampath SC,
    13. Hurd YL,
    14. Greengard R,
    15. Taraxovskiy A,
    16. Schaefer A,
    17. Nestler EJ

    (2010) G9aning histon metiltransferazining asosiy vazifasi kokainga bog'liq plastika. fan 327: 213-216.

    1. McCutcheon JE,
    2. Vang X,
    3. Tseng KY,
    4. Wolf ME,
    5. Marinelli M

    (2011) Kalsiyning o'tkazuvchan AMPA retseptorlari kokainning o'z-o'zini boshqarishidan uzoq vaqtdan keyin chiqarilgandan so'ng, eksperimental qo'llanadigan kokainga emas, balki nukleus akumbens sinapsida mavjud. J Neurosci 31: 5737-5743.

  31. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Ayol kemiruvchilarida jinsiy tajriba: hujayra mexanizmlari va funktsional oqibatlari. Brain Res 1126: 56-65.

  32. ↵
    1. Myuller,
    2. Unterwald EM

    (2005) D1 dopamin retseptorlari intervalgacha morfinni yuborishdan keyin rat striatumida DFOSB indüksiyasini modulyatsiya qiladi. J Pharmacol Exp Ther 314: 148-154.

  33. ↵
    1. Nestler EJ

    (2008) Narkomaniyaning transkripsiya mexanizmlari: DFBning ahamiyati. Filos Trans R Soc London B Biol Sci 363: 3245-3255.

  34. ↵
    1. Nestler EJ,
    2. Barrot M,
    3. Self DW

    (2001) DFOSB: giyohvandlik uchun doimiy molekulyar kalit. Proc Natl Acad Sci AQSh 98: 11042-11046.

  35. ↵
    1. Olausson P,
    2. Jentsch JD,
    3. Tronson N,
    4. Neve RL,
    5. Nestler EJ,
    6. Teylor JR

    (2006) DF Fosb yadrodagi akumbenslarda oziq-ovqatni kuchaytirish instrumental xatti-harakatini va motivatsiyasini boshqaradi. J Neurosci 26: 9196-9204.

  36. ↵
    1. Olsen CM

    (2011) Tabiiy yutuqlar, neyroplastiklik va giyohvandlikdan tashqari giyohvandlik. Neyrofarmakologiya 61: 1109-1122.

  37. ↵
    1. Perrotti LI,
    2. Hadeishi Y,
    3. Ulery PG,
    4. Barrot M,
    5. Monteggia L,
    6. Duman RS,
    7. Nestler EJ

    (2004) surunkali stressdan so'ng mukofotlash bilan bog'liq miya strukturalarida DFOSB indüksiyasidir. J Neurosci 24: 10594-10602.

  38. ↵
    1. Perrotti LI,
    2. Weaver RR,
    3. Robison B,
    4. Renthal Vt,
    5. Maze I,
    6. Yazdani S,
    7. Elmore RG,
    8. Knapp DJ,
    9. Selley, ShU,
    10. Martin BR,
    11. Sim-Selley L,
    12. Bachtell RK,
    13. O'z DW,
    14. Nestler EJ

    (2008) DFOSB ning turli xil nayranglari - miyadagi suiiste'mollik bilan miya. Sinaps 62: 358-369.

  39. ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Rikhtand NM,
    5. Yu L,
    6. Coolen LM

    (2010a) Mezolimbik tizimda neyroplastiklik tabiiy mukofot bilan va keyinchalik mukofotni bekor qilish bilan bog'liq. Biol psixiatriyasi 67: 872-879.

  40. ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2010b) yadroidagi akushtenslarda DFSB jinsiy mukofotning ta'sirini kuchaytirish uchun juda muhimdir. Genlar Brain Behav 9: 831-840.

  41. ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Vang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2012) Tabiiy mukofotlar tajribasi AMPA va NMDA retseptorlari taqsimotini va yadro gabaritlarida ishlaydigan funksiyani o'zgartiradi. PLoS One 7: e34700.

  42. ↵
    1. Roberts MD,
    2. Gilpin L,
    3. Parker KE,
    4. Childs TE,
    5. MJ,
    6. Booth FW

    (2012) Dopamin D1 retseptorlari modulatsiyasi yadroli akumbenslarda yuqori masofalarni ishlatish uchun tayyorlanadigan kalamushlarda ixtiyoriy g'ildirakni harakatga keltiradi. Physiol Behav 105: 661-668.

  43. ↵
    1. Russo SJ,
    2. Mazei-Robison MS,
    3. Ables JL,
    4. Nestler EJ

    (2009a) Neyrotrofik omillar va giyohvandlik sharoitida strukturali plastisitivlik. Neyrofarmakologiya 56 (Suppl 1): 73-82.

  44. ↵
    1. Russo SJ,
    2. Wilkinson MB,
    3. Mazei-Robison MS,
    4. Dietz DM,
    5. Maze I,
    6. Krishnan V,
    7. Renthal Vt,
    8. Graham A,
    9. Birnbaum SG,
    10. Yashil to,
    11. Robison B,
    12. Lesselyong A,
    13. Perrotti LI,
    14. Bolaños CA,
    15. Kumar A,
    16. Clark, milodiy,
    17. Neumaier JF,
    18. Neve RL,
    19. Bhakar AL,
    20. Barker PA,
    21. va boshq.

    (2009b) Yadro faktor kb signalizatsiyasi neyronal morfologiya va kokain mukofotini tartibga soladi. J Neurosci 29: 3529-3537.

  45. ↵
    1. Teylor JR,
    2. Lynch WJ,
    3. Sanches H,
    4. Olausson P,
    5. Nestler EJ,
    6. Bibb JA

    (2007) Cdk5 ning yadro akumbenslaridagi inhibatsiyasi kokainning lokomotor faollashtiruvchi va rag'batlantiruvchi-motivatsion ta'sirini kuchaytiradi. Proc Natl Acad Sci AQSh 104: 4147-4152.

  46. ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pichoqlar KK,
    5. Coolen LM

    (2009) Erkak kalamushlarida jinsiy mukofot: jinsiy tajribaning oqib chiqishi va bo'shashish bilan bog'liq bo'lgan shartli joyga bog'liq afzalliklari. Horm Behav 55: 93-97.

  47. ↵
    1. Tomas MJ,
    2. Kalivas PW,
    3. Shaham Y

    (2008) Mesolimbik dopamin tizimidagi neyroplastiklik va kokainga bog'liqlik. Br J Pharmacol 154: 327-342.

  48. ↵
    1. Vialou V,
    2. Robison AJ,
    3. Laplant QC,
    4. Covington HE 3rd.,
    5. Dietz DM,
    6. Ohnishi YN,
    7. Mouzon E,
    8. Rush AJ 3rd.,
    9. Watts EL,
    10. Wallace DL,
    11. Iñiguez SD,
    12. Ohnishi YH,
    13. Steiner, Ma,
    14. Warren BL,
    15. Krishnan V,
    16. Bolaños CA,
    17. Neve RL,
    18. Ghose S,
    19. Berton O,
    20. Tamminga shahri,
    21. va boshq.

    (2010) MF mukofotlari davrida stress va antidepressant javoblarga qarshilik ko'rsatadi. Nat Neurosci 13: 745-752.

  49. ↵
    1. Wallace DL,
    2. Vialou V,
    3. Rios L,
    4. Carle-Florence sh.b.,
    5. Chakravarty S,
    6. Kumar A,
    7. Graham DL,
    8. Yashil to,
    9. Kirk A,
    10. Iñiguez SD,
    11. Perrotti LI,
    12. Barrot M,
    13. DiLeone RJ,
    14. Nestler EJ,
    15. Bolaños-Guzman CA

    (2008) DFF ning yadrodagi ta'siri tabiatni mukofotlash bilan bog'liq xatti-harakatlariga bog'liq. J Neurosci 28: 10272-10277.

  50. ↵
    1. Werme M,
    2. Messer C,
    3. Olson L,
    4. Gilden L,
    5. Thoren P,
    6. Nestler EJ,
    7. Brena S

    (2002) D FosB g'ildirakni boshqaradi. J Neurosci 22: 8133-8138.

  51. ↵
    1. Winstanley CA,
    2. LaPlant Q,
    3. Theobald, ShU,
    4. Yashil to,
    5. Bachtell RK,
    6. Perrotti LI,
    7. DiLeone RJ,
    8. Russo SJ,
    9. Garth WJ,
    10. O'z DW,
    11. Nestler EJ

    (2007) Orbitofrontal korteksda DFOSB induktsiya kokainga sabab bo'lgan kognitif disfunktsiyaga bardoshlik keltirib chiqaradi. J Neurosci 27: 10497-10507.

  52. ↵
    1. Wolf ME

    (2010a) Bermud uchburchagi - giyoh moddalar bilan bog'liq bo'lgan neyroxodizatsiyalar. Trends Neurosci 33: 391-398.

  53. ↵
    1. Wolf ME

    (2010b) dopamin va kokain orqali AMPA retseptorlari savdosini nukleus akumbensida tartibga solish. Neurotox Res 18: 393-409.

  54. ↵
    1. Wolf ME

    (2012) Neuroscience: giyohning ta'sir xatti-harakati teskari. tabiat 481: 36-37.

  55. ↵
    1. Xue YX,
    2. Luo YX,
    3. Wu P,
    4. Shi HS,
    5. Xue LF,
    6. Chen S,
    7. Zhu WL,
    8. Ding ZB,
    9. Bao YP,
    10. Shi J,
    11. Epstein DH,
    12. Shaham Y,
    13. Lu L.

    (2012) Narkomaniya va relapsni oldini olish uchun xotira olib tashlashni bekor qilish tartibi. fan 336: 241-245.

  56. ↵
    1. Zachariou V,
    2. Bolanos CA,
    3. Selley, ShU,
    4. Theobald D,
    5. Cassidy MP,
    6. Kelz MB,
    7. Shaw-Lutchman T,
    8. Berton O,
    9. Sim-Selley LJ,
    10. Dileone RJ,
    11. Kumar A,
    12. Nestler EJ

    (2006) Morfin ta'siridagi yadrodagi akumbenslarda DFOSB uchun muhim rol. Nat Neurosci 9: 205-211.

  57. ↵
    1. Zhang D,
    2. Zhang L,
    3. Lou DW,
    4. Nakabeppu Y,
    5. Zhang J,
    6. Xu M

    (2002) Dopamin D1 retseptorlari kokain bilan hosil qilingan genin ifodasi uchun muhim vositachi hisoblanadi. J Neurochem 82: 1453-1464.

Ushbu maqolaga asoslanib maqola

  • Aplysia'dagi sinaptik plastisitenin yangi shaklini, sut emizuvchilarning memelilerdeki mükafatlarını, xotiralarini va ularning funktsiyalarini bajarish uchun mumkin bo'lgan hissasi. Learning & Memory, 18 yil 2013-sentyabr, 20 (10): 580-591

To'liq o'rganish - munozara bo'limi:

Hozirgi tadqiqotda tabiat va giyohvandlik mukofotlari orasidagi o'zaro sezgirlikni namoyon qildik. Tabiiy mukofotni ta'qib qilish davri davom etadi. Ayniqsa, biz 7 yoki 28 d qoldirilgan jinsiy xatti-harakatlar bilan tajribani Amph mukofotini oshirganimizni ko'rsatdik.

Ushbu topilmalar giyohvand iste'molini inkubatsiya qilishda suiiste'mollikdan olingan giyohvandlikdan saqlanishning muhim roli bilan o'xshashliklarga ega. (Lu va uning hamkorlari, 2005; Thomas va boshq., 2008; Wolf, 2010b, 2012; Xue va boshqalar, 2012). Bundan tashqari, tabiiy mukofot - NAcdagi FosB tabiiy mukofotni bekor qilishni psixostimulyator mukofotga ta'sir o'tkazadigan, potentsial ravishda NAc tizimida spinogenez orqali, mukofotni bekor qilish vaqtida o'zaro ta'sirlashuvchi ta'sir uchun juda muhimdir.

Biz jinsiy tajribadan so'ng NAcdagi FosB birikmasini uzoq vaqt davom etadigan va juftlik paytida NAc D1R faoliyatiga bog'liqligini ko'rsatdik.. O'z navbatida, bu D1R vositasida NAcdagi FosB regulyatsiyasi Amf uchun oshirilgan mukofot uchun va NAcdagi ortikcha zichligi ortishi uchun juda muhimdir, garchi jinsiy tajribaning bu natijalari jinsiy sovg'adan voz kechish davriga bog'liq bo'lsa (Pitchers va boshq., 2010a). Nihoyat, NAc spinogenezi sezgirlangan Amph mukofotining qisqa muddatli ifodasini dastlabki rivojlanishida o'z hissasini qo'shishi mumkinligini ko'rsatdi, ammo NAc ning orttirilgan orqa miya zichligi vaqtinchalik bo'lgan va 7 d dan so'ng kuzatilganligi sababli, dori rentabelligini davom ettirish uchun muhim emas. 28 d emas, bekor qilish davri.

Uzog'i bilan jinsiy xulq-atvorda, shu jumladan, tabiiy mukofotlanish jarayonida NApda dopaminning chiqarilishi ma'lum bo'lgan. Qabul qiluvchi ayolni kiritishda NAc ichidagi hujayra tashqari dopamin kuchayadi va juftlashuv vaqtida ko'tariladi (Fiorino va boshq., 1997). Hozirgi o'rganish shuni ko'rsatdiki, juftlik paytida dopamin retseptorlari antagonistlarini NScga infüze qilish jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishi yoki bajarilishiga ta'sir qilmaydi, bu esa dopaminning o'ziga xos mukofot harakatlarini ifodalashda ishtirok etmasligi haqidagi tushunchaga mos keladi jinsiy aloqaga oid maslahatlar berishni rag'batlantirish uchun (Berrij va Robinzon, 1998). Darhaqiqat, jinsiy mukofotni oldindan belgilash mezolimbik dopamin mukofot tizimidagi neyronlarning faollashuviga olib keladi, shu jumladan, ventral tegmental hududdagi dopaminergik hujayralar va ularning maqsadi NAc (Balfour va boshq., 2004).

Repressiv jinsiy xatti-harakatlar NAc-da FosB bo'lib, bu o'z navbatida jinsiy axloqsizlikning ta'sirini kuchaytirishga yordam beradi (Pitchers va boshq., 2010b). Amaldagi natijalar juftlashishni keltirib chiqaradigan FosB regulyatsiyasi juftlash paytida NAc ichida D1R aktivatsiyasiga bog'liq ekanligini ko'rsatadi. Ushbu topilma, psevdo-reabilitatsiya dasturini takroriy ravishda oshirganligini ko'rsatadigan avvalgi tadqiqotlar bilan mos tushadi? D1R ni ifodalovchi NAc o'rta aylanma nöronlardagi FosB (Lee va uning hamkorlari, 2006, Kim va boshq., 2009) va shunga o'xshash FosB regulyatsiyasi D1R aktivatsiyasiga bog'liq (Zhang va boshq., 2002). Bundan tashqari, D1R ning striatumdagi neyronlarni ifodalovchi FosB ning ("Kelz va boshqalar, 1999") ekspresyoni bilan oldindan dori ta'siriga ega bo'lmasa, odatda dori tajribali hayvonlarda kuzatiladigan sezuvchan dori javoblarni ishlab chiqishi mumkin. Shunday qilib, tabiiy va dori-darmonlar ko'payadi, NAXda FosB D1R-ga bog'liq mexanizm orqali mukofotlashni sezgirlaydi.

Bundan tashqari, hozirgi topilmalar ko'rsatadiki, FosB tabiiy mukofot mukofoti va psixostimulyator mukofot bilan o'zaro bog'liqlikni sezgirlash vositasi hisoblanadi. Yuqorida ta'kidlanganidek, NAc'dagi FosB faoliyati oldindan sezgir bo'lgan dori javoblarida ilgari surildi, chunki NAcdagi FosB ekspressionasi ilgari o'tkir yoki takroriy qo'llanilgandan so'ng lokomotor faollashuvini kokainga sezgirlaydi (Kelz va boshqalar, 1999), kokainga sezuvchanligini oshiradi va morfin CPP (Kelz va boshqalar, 1999; Zachariou va boshqalar, 2006) va past dozada kokainning o'z-o'zini boshqarishiga sabab bo'ladi (Colby va boshq., 2003). Hozirgi o'rganish shuni ko'rsatmoqdaki D1R yoki FosB faoliyatining blokadasi NAc-da jinsiy aloqada bo'lgan jinsiy aloqa bilan jinsiy aloqada bo'lgan tajribalar Amph mukofotini sezgirlashda. Ter, tabiiy va dori-darmonlar nafaqat bir xil neyral yo'lga yaqinlashibgina qolmasdan, ular bir xil molekulyar vositachilar bilan birlashadilar (Nestler va boshq., 2001; Wallace va boshqalar, 2008; Hedges va boshqalar, 2009; Pitchers va boshqalar, 2010b), va ehtimol, NAcdagi bir xil neyronlarda bo'lishi mumkin (Frohmader va boshq., 2010b), har ikki turdagi mukofotning rag'batlantirilishiga va "istak" etishiga ta'sir qilish (Berrij va Robinzon, 1998).

Hozirgi tadqiqot Amph mukofotining va NAc spinogenesisning sezuvchanligi uchun jinsiy mukofotdan voz kechish zarurligini ko'rsatdi. Biz ushbu farazda FosB spinogenezni boshlash va sinaptik kuchini o'zgartirish uchun past oqimli gen ifodasini o'zgartirib, nöronal funktsiyani ta'sir qiladi. Haqiqatdan ham, NAcdagi FosB ning induktsiyasini blokirovkalash, mukofotni bekor qilmasdan aniqlangan NAcdagi ortikcha orqa miya zichligini oldini oladi. Bundan tashqari, iD1R antagonistining NAc ga har bir juftlashuvidan oldin jinsiy tajribani keltirib chiqarmagani uchun FOSB va ortib borgan orqa miya zichligi. FosB narksning zichligi va sinaptik kuchini NAc (Nestler, 2008) ta'siriga olib kelishi mumkin bo'lgan ko'plab maqsadli genlarning ifodasini ta'sir qilish uchun transkripsiyaal faollashtiruvchi yoki repressor vazifasini bajaradigan transkripsiyadan faktor hisoblanadi. Keyinchalik aniqrog'i, FosB sikliqa bog'liq kinaz-5ni faollashtiradi (Bibb va boshq., 2001; Kumar va boshq., 2005), yadro omili? B (NF-? B) (Russo va boshq., 2009b) va glutamat AMPA retseptorlari (Vialou va boshqalar, 2) ning GluA2010 bo'limi va zudlik bilan erta gen c-fos transkripsiyasini (Pitchers va boshqalar, 2010b) va histon metiltransferaz G9 (Maze va boshq., 2010). Diqqatli mustaqil kinaz-5 tsitoskeletal oqsillarni va nevritning tashqi o'sishini tartibga soladi (Taylor va boshq., 2007). Bundan tashqari, NF-B ni faollashtirish NAc-da dendritik o'murtmalar sonini oshiradi, NF-B ning inhibisyonu esa bazal dendritik o'murtalarni qisqartiradi va spinalarda kokainning indikatsion o'sishini bloklaydi (Russo va boshq., 2009b). Shunday qilib, NAcdagi FOSB ko'payadi, bu esa NAc omurgasi zichligini bir nechta maqsadlar orqali o'zgartirishi mumkin (ya'ni, siklikqa bog'liq kinaz - 5, NF -? B) aumumiy natijalar giyohvandlikka qarshi sezgirlanganligini anglatadi, Russo va boshq. (2009a) takrorlangan kokain harakati uchun

Ushbu ishda kutilmagan kuzatuv NAcdagi ortikcha zichligi vaqtinchalik bo'lganligi va jinsiy tajribadan keyin 28 dda aniqlanmaganligi kuzatildi. Shunday qilib, orqa miya zichligi ortdi Amph mukofotining boshlanishi bilan bog'liq va sezgirli Amf javoblarining dastlabki rivojlanishi yoki qisqa muddatli ifoda etishiga yordam berishi mumkin. Biroq, iuzaygan uzilish muddatidan so'ng sezgirlangan amf mukofotining qat'iyligi uchun umurtqa pog'onali zichligi kerak emas edi. Biz oldin jinsiy tajriba NAc da NMDA retseptorlari subunit NR-7 kichik (28, lekin 1, oxirgi marta juft keyin bir kun) sabab bo'ladi ko'rsatdi, bu uzoq muddat mukofotlar saqlanib qolishi keyin boshlang'ich darajalariga qaytdi (Pitchers va boshq., 2012). NMDA retseptorlari sonining ko'payishi, jinsiy tajribali jinsiy sinapslarning (Huang va boshq., 2009; Brown et al., 2011; Pitchers va boshq., 2012) ko'rsatganligi va jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan orqa miya o'sishi NMDA retseptorlari faolligini oshirishga bog'liq (Hamilton va boshq., 2012).

Xulosa qilib aytganda, ushbu ishda giyohvand moddalarning mukofotlanishining o'zaro bog'liqligini tabiiy mukofot (jinsiy aloqa) va uning mukofotni bekor qilish davriga bog'liqligi aks ettirilgan. Bundan tashqari, bu xatti-plastinka NAc ichida D1R aktivasyonu orqali FosB tomonidan vositachilik qilgan. Shuning uchun, ma'lumotlarga ko'ra, mukofotlash tajribasidan so'ng tabiiy mukofotni yo'qotish shaxslarni giyohvandlikning rivojlanishiga zaiflashtirishi mumkin va bu kuchayib borayotgan zaiflikning bitta vositachisi FosB va uning quyi oqim transkripsiyasi maqsadlari hisoblanadi.