Ventral tegmental hududida dopaminerjik neyronlarning endogen opioid bilan bog'liq nöroplastikligi tabiiy va opiat mukofotiga (2014)

IZOHLAR: The DeltaFosB tadqiqotlari biz ko'pincha barcha e'tibor qaratamiz yadroli akumbenslar (mukofot markazi) va jinsiy aloqa met va kokain kabi miya mexanizmlarini deyarli aylanib chiqishini aniqladi. Xuddi shu tadqiqotchining muhim tadqiqotidan (Tabiiy va giyohvand moddalarni mukofotlash vositasi DFOSB bilan umumiy vositachilardan umumiy nerv plastisizm mexanizmlari (2013)):

Shunday qilib, tabiiy va dorivor mukofotlar nafaqat bir xil asab yo'lida birlashadi, balki ular bir xil molekulyar vositachilarga yaqinlashadi va ehtimol yadro akumbensidagi xuddi shu neyronlarda rag'batlantiruvchi ta'sirchanlikka va har ikkala turdagi mukofotlarning "xohishiga" ta'sir qiladi.

Olingan narsalar: meth, giyoh va jinsiy aloqada bo'lganlar, mukofot markazidagi (nukleus akumbens) bir xil nerv hujayralari bilan bir xil asosiy narsalarni qiladilar. Bu odatdagi so'zlashuv nuqtasini sog'aytirdi, chunki tabiiy mukofot va giyohvand moddalar mexanizmlar va ta'sirlardan farq qiladi.

Ushbu yangi ishda VTAga jinsiy aloqada bo'lganlar o'rganildi. VTA - bu erda dopamin ishlab chiqaradigan asab hujayralari boshlanadi va ular akumbens yadrosi, frontal korteks va amigdalaga tarqaladi. VTA asosan bizning dopaminimizning ko'p qismining manbai (qudug'i). Mukofot sxemasining ushbu 2 rasmini ko'ring: Pic1, Pic2

Tadqiqotchilarning ta'kidlashicha, jinsiy aloqa (VIMA) VTAdagi hujayralar vaqtincha (erkaklarda) qisqarishiga olib keladi. Hujayra jismlari va ularning dendritlari miyaning kulrang moddasini tashkil etadi. Bu VTAga (heroinni bir martadan ishlatmaslik, balki surunkali geroinni ishlatmaslik) kerak bo'lgan narsalardir. Shuni esda tutingki, VTA hujayralarining jasadlari bir xil inson giyohvand moddalariga qaram bo'lgan odamlarda uchraydi.

Jinsiy manbalarga asoslangan hujayra siqilish kamida 7 kun davom etadi. 30 kun ichida jinsiy aloqada sodir bo'lgan o'zgarishlar an'anaviy bo'lib qaytdi, ammo tadqiqotchilar 1, 7 va 30 kunlarini baholadilar.

Geroin giyohvandligida hujayra tanasining qisqarishi akumbens yadrosidagi past dofaminga olib keladi - yoki biz nima deymiz desensitizm. Tadqiqotchilar morfinni kalamushlarga ta'sirini (jinsiy aloqadan keyin) baholash uchun yuborishdi, ammo hech narsa bo'lmadi. Odatda kalamushlar morfinni juda yaxshi ko'radilar, ammo bu erda ular vaqtincha susaytirildi. Qisqasi, ejakulyatsiyadan keyingi kalamushlarning mukofotlash sxemasi geroinning past darajasiga javob bermadi. Tadqiqotchilar "normal" kalamush reaktsiyasini boshlash uchun yuqori dozalar kerak bo'ladi, deb taxmin qilishdi.

Xulosa qilib aytganda - Jinsiy aloqa (vaqtincha) VTA da geroinga qaramlik bilan bir xil narsani amalga oshiradi: dopaminning asab hujayralari tanasini kamayishi. Bu mukofot markazida dopaminning pasayishiga va giyohvand moddalarga nisbatan kamroq ta'sirlanishiga olib keladi - va kalamush miyalarining tiklanishi uchun kamida 7 kun kerak bo'ladi.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pichoqlar KK1, Coppens CM2, Beloate LN3, Fuller J.2, Van S2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, Coolen LM5.

mavhum

Tabiiy mukofot va giyohvand moddalarni iste'mol qilish mezolimbik yo'lga yaqinlashadi va nerv plastinkasining neytral plastinka mexanizmini faollashtiradi. Opiatlarning surunkali ta'siri, morfin mukofoti bag'rikengligini tartibga soluvchi ventral tegmental hududining (VTA) dopaminergik neyronlarida plastisitni keltirib chiqaradi.

Bu erda VTA ichidagi endogen opioidlarning juftlashuvini keltirib chiqarmoqchi erkak opalardagi VTA dopamin hujayralarining morfologik o'zgarishlarini keltirib chiqaradigan farazlarni sinab ko'rdik, bu esa o'z navbatida jinsiy xatti-harakatni kuchaytirishning uzoq muddatli ifodasini belgilaydi.

Birinchidan, jinsiy tajriba VTA dopamin soma o'lchamini 1 va 7 kunga qisqartirdi, ammo oxirgi marta suhbatdan so'ng 30 kun emas. Ushbu ta'sir nalokson bilan bloklandi har bir juftlashma sessiyasidan oldin; shuning uchun VTA dopaminli hujayra plastinkasi endogen opioidlarning ta'siriga bog'liq edi.

O'z navbatida, VTA plastisitrasi o'zgartirilgan opiat mukofotiga bog'liq edi, chunki jinsiy jihatdan tajribali erkaklar 0.5 mg / kg morfin uchun konditsioner o'rinlarni tashkil qilmaganlar.

Keyinchalik, endogen opioid ta'sirining juftlikdagi jinsiy tajriba va xotirada nalokson bilan davolashda vositachilik tajribasi, yoki tizimli yoki intra-VTA bilan bog'liqligi aniqlandi. Nalokson jinsiy xatti-harakatlarning dastlabki tajribasini takrorlamasdan juftakning suhbatlarida, yoki juftlanish uchun shartli joyni tanlashga to'sqinlik qilmadi. Biroq, nalokson bilan davolash jinsiy aloqa bilan bog'liq bo'lgan tajribali jinsiy xulq-atvorni va mezolibbiy hududlarda neyron faollashuvini uzoq muddatli ifodalashni kuchaytirdi..

Birgalikda bu ma'lumotlar juftlarni urish davrida endogen opioidlarning VTA dopamin neyronlarida nöral plastisiteyi inhibe qilganligini ko'rsatib turibdi va morfin mukofotiga va uzoq muddatli xotiraga ega bo'lish uchun tabiiy mukofotlar xatti-harakati uchun juda muhimdir.

 

Kirish

Tabiiy mukofot harakatlariga mezocorticolimbic tizimi (Meisel va Mullins, 2006; Hoebel va boshq., 2009; Frohmader va boshq., 2010a; Pitchers va boshq., 2010a; Young va boshq., 2011; Blum va boshq., 2012). Noqonuniy giyohvandlik ushbu tizimda neytral o'zgarishga olib keladi, bu esa o'z navbatida moddalarni suiiste'mol qilishgaHyman va boshq., 2006; Nestler, 2012). Ilgari biz, tabiiy mukofot xulq-atvori bilan tajriba, ya'ni erkaklar kalamushlarida jinsiy tajriba, shuningdek, yadro gilamlarda (NAc) neytral plastinkaga olib keladi, shu bilan birga, dendritik bellarniPitchers va boshq., 2010a) va deltaFosB (Pitchers va boshq., 2013). O'z navbatida, bu jinsiy aloqada bo'lgan plastinka jinsiy tajribani keyingi jinsiy aloqaga ta'siri uchun juda muhim, bu jinsiy xatti-harakatlarning boshlanishi va bajarilishiga ko'maklashish sifatida namoyon bo'ladi (Pitchers va boshq., 2010b, 2012, 2013). Bundan tashqari, jinsiy tajriba psixostimulyatorlarga javob berishni o'zgartiradi, shu jumladan, lokomotorlar ta'sirini sezgirlash va yuqori darajadagi mukofot (Frohmader va boshq., 2010a; Pitchers va boshq., 2010a, 2013).

NAc ventral tegmental sohada (VTA) dopaminerjik neyronlarning bir pastki maqsadidir. VTA dopamin neyronlari jinsiy aloqa paytida va jinsiy mukofotni oldindan belgilab beruvchi shartli belgilarga ta'sir qilish vaqtida faollashadi (Balfour va boshq., 2004; Frohmader va boshq., 2010a), endogen opioid peptid (EOP) orqali m-opioid retseptorlari (MORs; Matthews va nemis, 1984; Jonson va Shimoliy, 1992; Klitenick va boshq., 1992; Ikemoto va boshq., 1997; Balfour va boshq., 2004). Shunday qilib, jinsiy xatti-harakatni oldindan belgilash shartli belgilarga ta'sir qilish EOP va VTA dopamin hujayralarining faollashuviga sabab bo'ladi, bu jinsiy turtkiMitchell va Styuart, 1990; van Furth va boshqalar, 1995; Van Furth va van Re, 1996) va NAc (dopamin salınımı)Fiorino va boshq., 1997).

Ekzogen opiatlarning takroran ta'siri VTA ning morfologik o'zgarishiga olib keladi (Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011; Mazei-Robison va Nestler, 2012), VTA dopamin neyronlarining soma o'lchamining kamayishi (Sklair-Tavron va uning hamkorlari, 1996; Spiga va boshq., 2003; Chu va boshqalar, 2007; Russo va boshq., 2007; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011), nörofilament oqsillari miqdorini pasayishi (Beitner-Johnson va boshq., 1992), dopamin hujayralarining kuchayib ketishi va axoplazmik transport va dopamin chiqindilarini NAcBeitner-Johnson va boshq., 1992; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Ushbu VTA dopamin neyron o'zgarishlar, morfin mukofotiga bag'rikenglik keltirib chiqaradi va bir oy davomida giyohvand moddalarni iste'mol qilmaslik (masalan,Russo va boshq., 2007). Bugungi kunda VTA dopamin neyronlari ichidagi plastisitiya opiatlarning harakatlariga xosmi yoki ular tabiiy tavakkalchilik harakati davomida EOPni chiqarish bilan hosil qilinganmi, yo'qmi, hozircha noma'lum.

Bu erda tabiiy mukofot tajribasi opiyatlarning sababi bilan o'xshash neuroplastikaga sabab bo'ladigan gipotezasini testdan o'tkazamiz va shuning uchun opiatlar tabiiy mukofotlash va mukofotni mukofotlash uchun juda muhim bo'lgan plastisitivlik mexanizmiga yaqinlashadi. Erkak ratlarda jinsiy tajriba VTA dopamin neyronlarining Soma o'lchamini VTAdagi EOP operatsiyasiga bog'liq jarayon orqali kamaytiradimi-yo'qligini tekshiramiz. Bundan tashqari, biz VTA dopamin neyronlarida EOP tomonidan kiritilgan o'zgarishlar tabiatni qutqarish xatti-harakatini mustahkamlash va tabiiy mukofot bilan bog'liq bo'lgan rag'batlantirish qobiliyatini belgilash bilan bog'liqligini tekshiramiz, bu esa morfin mukofotiga nisbatan chidamlilikka olib keladi.

Materiallar va usullari

Hayvonlar

Katta yoshli erkak Sprague-Dawley kalamushlari (200-225 g) Charlz daryosidan olingan va barcha tajribalardagi (12: 10 AMda yorug'lik chiroqlari morfin tolerantlik tajribasi bundan mustasno) sun'iy ravishda yoritilgan xonalarda juft bo'lib joylashtirilgan. , 00 da yonadi: 5). Oziq-ovqat va suv mavjud edi ad libitum xulq-atvorda testdan tashqari. Stimulus urg'ochilar ovariectomized va 5% 17-b-estradiol benzoat SILASTIC kapsulalar (1.98 mm ichki diametri, 0.5 sm uzunligi, Dow-Corning) bilan teri ostiga implante qilindi. Progesteronni (teri osti, 500 ml susam yog'idagi 0.1 ig / kg) infektsiyalari 3-6 soatiga jinsiy qabul qilishni boshlash uchun testdan o'tkazildi. Barcha usullar G'arbiy Ontario Universiteti va Michigan Universiteti Hayvonni Qo'riqlash Qo'mitalari tomonidan ma'qullangan va umurtqali hayvonlar hayvonlarini tadqiq qilishda Kanada Hayvonlarni Qabul Qilish va Milliy Sog'liqni Saqlash Institutlari tavsiyalariga moslashgan.

VTA dopamin soma hajmining o'zgarishi

Kunlik suhbatlar.

VTAda dopamin neyron soma hajmining o'zgarish vaqtini o'rganish uchun 1, 7 yoki 31 d (jinsiy va tajribali hayvonlar)n = Guruhda 5-8) bilan bog'lanish (tajribali) yoki ishlash (sodda) kunining oxirigacha. Jinsiy jihatdan tajribaga ega bo'lgan guruhlar oxirgi uchrashuvda jinsiy xatti-harakatlar uchun moslashgan, shuningdek beshta mashg'ulotda (har bir guruh uchun o'rtacha 5) yig'ilganlar soni va jinsiy xatti-harakatlarning har qanday parametrida farq qilmadi.

Bitta seanslar.

Jinsiy nikohli erkaklar ikkita eksperimental sharoitdan biriga tayinlangan: jinsiy aloqa bilan bog'liq yoki jinsiy hayotga tajribali. Jinsiy hayotga jalb qilingan hayvonlarga beshikli kunlarda besh marta urg'ochi jinsiy a'zolar bilan (60 × 45 × 50 sm) echinish ko'rsatilgunga qadar yoki 1-ga (qaysi biri birinchi keldi) qarashli ayollarga ruxsat berildi. Qafaslar 70% etanol eritmasi bilan yaxshilab tozalanib, juftakni o'tirishlar orasida yangi to'shamalar qo'shildi. Jinsiy xatti-harakatlar qorong'u bosqichda (qorong'ulikdan keyin 2-6 soat) amalga oshirildi. Faqat beshta jinsiy aloqa seansining kamida to'rttai davomida ejakulyatsiya qilingan hayvonlar faqat jinsiy tajribaga ega va tajribaga kiritilgan. Barcha juftlashuv seanslari kuzatilgan va jinsiy xatti-harakatlar qayd etilgan. (M) intromitsiyalar soni (IM), kechikish (ML, ayoldan birinchi tog'ora kiritilgandan vaqt), intromissiya kechikishi (IL, ayolning birinchi intromilatsiyasini kiritish vaqtidan) va bo'shashish kechikishi (EL; birinchi intromisyondan zaryadga qadar bo'lgan vaqt) qayd etildi (Agmo, 1997). Xayvonotli hayvonlar, 1-soati uchun bir xil xonada juftlashuvchi jinsiy tajribali erkaklar bilan bir vaqtning o'zida XNUMX-soatlarga joylashtirilgan, ular uzoq ayol xonlar bilan ta'sirlanib, tajribali erkaklar kabi bezovtalanish va ekologik yangilanish darajalariga ega.

Immunofluoresans markalash.

Hayvonlar natriy pentobarbital (270 mg / kg, ip) yordamida chuqur tashvishga tushib, 50 ml 0.9% eritma bilan xromosomadan ichak-chavaqlangan, keyin 500 ml natriy fosfat tamponida (PB) 4 ml 0.1% paraformaldehid. Brainlar 1 h uchun xona haroratida (RT) bir xil fiksatifte chiqarildi va 20 ° C da saqlash uchun 0.01% sukroz va 0.1% natriy azidda 4 m. PBda joylashtirildi. 35 mikronda 400 mikronda (H30R, Microm) 30 mikroskopda kesilgan va kryoprotektsiya eritmasida (0.1% sukroz, 20% etilen glikol, 0.1 m PBda) to'rtta parallel seriyali to'plangan va keyinchalik 7.35 ° C da saqlanadi. Barcha inkübasyonlar, RT'de nozik ajitasyon va ko'p sonli xNUMX m PBS, pH 1 bilan inkübasyonlar orasida durulandı. Bo'limlar XNUMX% ga ta'sirlangan2O2 endogen peroksidazlarni yo'q qilish uchun 10 min uchun, so'ng inkubatsiya eritmasida (PBS +: 1% Triton X-0.4; Sigma-Aldrichni o'z ichiga olgan PBS) va 100% bosh sigir sarum albomini (Jekson Immuno Research Laboratories) 0.1 h uchun bloklandi. Keyinchalik, bo'limlar sichqonchani tirozin gidroksilaz (TH) -antibodasida (1: 20 000; Millipore). Birlamchi antikor inkubatsiyasidan so'ng, bo'limlar 555 min uchun AlexaFluor 1-konjuge echki anti-sichqonchani antikor (100: 30; Invitrogen, Eugene, OR) inkubatsiya qilindi. Nihoyat, bo'limlar 0.1 m PB bilan yuvilgan, Superfrost Plus shisha slaydlarida o'rnatilgan va quritilgan va 1,4-diazabisiklo (2,2) oktan (DABCO, 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Ma'lumotlar tahlili: neyron soma o'lchami.

VTAdagi TH-immunoreaktiv (IQ) neyronlarning suratlari uch rostral kaudal darajasiga (40 × kattalashtirishda)Balfour va boshq., 2004). Turli darajadagi hujayralar o'rtasida farqlar mavjud emas edi. TH-IR neyronlarning soma o'lchami ImageJ (Milliy Sog'liqni saqlash institutlari) yordamida tahlil qilindi. O'rtacha maydon, perimetri va aylanasi tomonidan ta'riflanganidek o'lchandi Sklair-Tavron va boshq. (1996). Hayvon boshiga o'rtacha 25 hujayra (barcha 3 VTA darajasini birlashtirgan) tahlil qilindi va faqat aniq ko'rinadigan yadroli hujayralar kiritildi. Har bir hayvon uchun o'rtacha maydon, perimetr va aylana aniqlandi. Statistik tahlil uchun ikki tomonlama ANOVA [omillar: jinsiy tajriba yoki jinsiy aloqa tajribasi] va vaqt (1, 7 yoki 31 d) qo'llanilgan. post hoc 0.05ning muhimligi bilan Holm-Sidak usuli yordamida taqqoslash.

VTA bo'lmagan dopaminli o'zgarishlar

Ikkalasi juftlashuv seanslari.

TH-IR neyron soma o'lchamidagi pasayish uchun kundalik juftlashish seanslari davomida jinsiy tajribani talab qilish uchun tekshirish uchun 5 hafta davomida ikki marta juftlashish sessiyalarida juftlashgan VTA dopamin neyronlari tahlil qilindi. Bitta seanslar yuqorida aytib o'tilganidek edi, lekin 2.5 hafta davomida. Oxirgi matingdan yoki ishlovdan so'ng braziliyaliklar 7 d to'plandi.

İmmünoperoksidaz etiketleme.

Bundan tashqari, immunoperoksidaz va xromogenni aniqlash bilan aniq bo'yalish usullarini qo'llash, TH-IR soma kattaligi o'zgarishini ko'rishga imkon beradimi, sinovdan o'tkazildi. Perfüzyon va to'qimalarni qayta ishlash, yuqorida aytib o'tilganidek, amalga oshirildi. 1% H bilan davolashdan keyin2O2 va PBS + dan iborat bo'lib, sichqonlar poliklonal tirozin gidroksilaz (TH) -antibody (1: 20 000; Millipore). Birlamchi antikor inkubatsiyasidan so'ng, sektsiya biotin konjugatsiyalangan echki quyonlarga qarshi IgG (1, 1: 500, PBS +, Vektor Laboratoriyalari), avidin-biotin-horseradish peroksidaza (1 h, ABC elit; 1: 1 000 ning PBS Va 3,3'-diaminobenzidin tetrahidroklorid (10 min, 0.02%, DAB; Sigma-Aldrich) nikel sulfat bilan (0.02% PB 0.1) vodorod periks (0.015%) bilan kuchaytirilgan. Reaktsiyani tugatish uchun 0.1 m PBda bo'limlar yaxshilab yuvib tashlandi va ddH ichida xNUMX% jelatinli kodli Superfrost plus shisha slaydlarida (Fisher) o'rnatilgan2O. dehidratsiyadan so'ng, barcha slaydlar DPX montajchi (dibutil fitalat ksilen, Sigma-Aldrich) bilan qoplangan.

Ma'lumotlar tahlili: neyron soma o'lchami.

TH-IR hujayralari yuqorida ta'riflanganidek, maydon, perimetri va doiraviyligi uchun tahlil qilindi. Bundan tashqari, VTA TH-IR hujayralarini tahlil qilish uchun ishlatiladigan xuddi shu bo'limlarda substantia nigra (SN) tarkibidagi TH-IR hujayralari tahlil qilindi. Va nihoyat, VTA va SN TH-IR hujayralarining tahlili natijasida, kresil binafsharang yordamida bo'limlar qarshi turdi va TH-IR bo'lmagan hujayralar yuqorida tavsiflangan usullar yordamida tahlil qilindi. Tajribali va tajribali guruhlar o'rtasidagi farqlar ikki qanotli Studentlar yordamida taqqoslandi t 0.05ning ahamiyatli darajalariga ega testlar.

Naloksonning dopamin soma miqdorini kamaytirishga ta'siri

Dopamin neyron soma o'lchamidagi jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan o'zgarishlarda XRTlarning rol o'ynashini aniqlash uchun, JR jinsiy xatti-harakatlar paytida bloklangan. Hayvonlarning yarmi jinsiy tajribaga ega bo'ldi, qolgan qismi esa ko'rib chiqilgan, ammo jinsiy aloqa muammosiga aylandi. Jinsiy hayotga ega bo'lgan hayvonlarga ketma-ket kunlarda 5-da juftlik qilish ruxsat berilgan. Jinsiy tajribali va naif guruhlarda hayvonlarga tajribali ayolni (tajribali) kiritishdan oldin yoki oldin qo'llashdan oldin 10 daqiqada sho'r bo'lmagan nalokson (0.9 mg / kg, SC, Sigma-Aldrich, 30% (sodda); shu bilan jinsiy darajada sodda nalokson (Naive NLX), jinsiy tajribaga ega sho'r (Exp Sal) va jinsiy yo'l bilan tajribali nalokson (Exp NLX; n = Guruhda 5-8). Naloksonni davolashda jinsiy xatti-harakatlarning har qanday parametrlari bo'yicha statistika jihatidan jiddiy ta'siri yo'q edi, har qanday 5 d va nalokson va sho'r-davolangan guruhlar jinsiy tajribada bir xil edi. Barcha hayvonlarning oxirgi marta juftlashtirilganidan keyin intrakardial perfuziya 7 d bilan o'ldirildi. Dopamin soma o'lchamlari uchun ajratish, immunohistokimyo va ma'lumotlar tahlili (ikki tomonlama ANOVA, omillar: jinsiy tajriba va dori davolash) yuqorida aytib o'tilganidek amalga oshirildi.

Morfin shartli joyni afzal ko'radi

Eksperimental dizayn.

ilgari, Russo va boshq. (2007) surunkali morfin morfin mukofotiga bag'rikenglik ko'rsatdi. VTAda jinsiy tajriba va surunkali morfinlar soma o'lchamidagi dopamin neyronlaridagi shunga o'xshash pasayishlarga olib kelganligi sababli jinsga bog'liq morfologik o'zgarishlarning funktsional ahamiyati morfin mukofoti uchun sinovdan o'tkazildi. Jinsiy va tajribali hayvonlar hayvonlarni olti xil tajriba guruhigan (9, 13 yoki 0.5 mg / kg, ip) jinsiy axloqsizlik va jinsiy moyilliklarga asoslangan (guruhda 5.0-10.0) va morfin bilan indikatsiyalangan konditsioner joy tanlovi (CPP) uchun sinov qilingan.

Morfin-CPP.

Oxirgi xayrlashuv sessiyasidan so'ng 1 d bilan shartnoma tuzildi va guruhlar so'nggi juftlashuv seansida jinsiy ishlash uchun moslashtirildi. Ishlatiladigan CPP paradigmasi pretest, konditsioner kunlar va post-testdan iborat bo'lib, qurilma Tenk va boshq. (2009). Qisqacha aytganda, CPP apparati (MED Associates) uchta alohida xonadan iborat edi. Har bir mashg'ulot oralig'ida, hidlash belgilarini minimallashtirish uchun apparat 70% etanol eritmasi bilan yaxshilab tozalangan. Shaxsiy imtiyozlarni aniqlash uchun dastlabki sinov o'tkazildi, unda hayvonlar butun apparatga 15 daqiqa davomida bepul kirish huquqi berildi. Bir guruh bo'lib, hayvonlar ma'lum bir xonaga nisbatan muhim afzalliklarni ko'rsatmadilar, ammo har bir alohida hayvon ozgina dastlabki afzalliklarga ega edi. Prestest paytida kameralardan biriga katta ustunlik ko'rsatgan (har bir xonada o'tkazilgan vaqt o'rtasidagi> 200 s farq; hayvonlarning <5%) kalamushlar tadqiqotdan chiqarildi. Konditsionerlash paytida, dori xolis paradigma yordamida dastlab tanlangan yoki tanlanmagan xonaga qo'shildi (Tzschentke, 2007) va hayvonlar 30 daqiqa mobaynida xonalarga joylashtirilgan edi. Hayvonlar ertalab sho'r (ip) bilan quyiladi (9: 00 AM: 12: 00 PM) va sho'r qo'shiladi kameraga (nazorat) cheklangan. Kunduzi (1: 00-4: 00 PM) hayvonlarga morfin (ip, 0.5 mg / kg, 5.0 mg / kg yoki 10.0 mg / kg, 0.9% eritmada erigan morfin sulfat, Johnson Matthey) morfin bilan bog'langan xonaga. Hayvonlar ikkita shamshir kuniga tobe etildi. Ertasi kuni (sinovdan o'tgan oxirgi kundan keyin 3 d) testdan oldingi sinovga o'xshash protsessual bo'lib o'tdi. Statistik tahlil uchun postfolding vaqtida morfin bilan bog'langan xonada o'tkaziladigan vaqt shizo-juftlashgan xonada o'tkaziladigan vaqt bilan har bir dozadagi jinsiy o'gay yoki tajribali erkaklar uchun testdan o'tgan vaqt davomida juftlik yordamida t sinov. p <0.05 statistik jihatdan ahamiyatli hisoblanadi. Jinsiy jihatdan sodda va tajribali hayvonlarning qo'shimcha nazorat guruhlari salbiy boshqaruv sifatida xizmat qilish uchun ikkala juft va juft bo'lmagan xonalarda sho'r suv oldi. Ikkala guruh uchun ham xonalar o'rtasida o'tkazilgan vaqt farqlari aniqlanmadi.

Tizimli naloksonning jinsiy xulq-tafakkurni kuchaytirishga ta'siri

Eksperimental dizayn.

Jinsiy tajriba kamida 1 oy davom etgan jinsiy xatti-harakatni engillashtirishga olib keladi (Pitchers va boshq., 2012). MORni jinsiy aloqada bo'lishga yordam berishga ta'sirini tahlil qilish uchun jinsiy tajribali hayvonlarni ketma-ket besh marta suhbatlaridan oldin (yoki nalokson yoki sho'r)n = 12 har biri). Oxirgi juftlashma suhbatlaridan bir hafta o'tgach, barcha hayvonlarning bir naychalash yoki 1-ga qadar juft bo'lishiga ruxsat berilgan so'nggi juftlash testi o'tkazildi. Oxirgi sinov kunida juftlashdan oldin nalokson yoki sho'rsiz davo berilmagan. Juftlikning parametrlari naloksonning jinsiy tajribani (1-kunduz kuniga 5-kunga qarshi) yoki ushbu ko'makni (kun 5 va boshqalar sinovi) ikki tomonlama ANOVA [faktorlar: davolash (salin va nalokson ) va kun (kun 1, kun 5 yoki test)] va Holm-Sidak usuli post hoc taqqoslashlar. Barcha statistik testlar uchun, p <0.05 statistik jihatdan ahamiyatli hisoblanadi.

Qo'shimcha boshqarish tajribalari

Sinov kunida tizimli nalokson.

Naloksonning yo'qligi sababli so'nggi jinsiy aloqa sinovida o'zgargan jinsiy xatti-harakatni ko'rsatmaslik uchun nalokson bilan juftlikdagi juftlarni sotib olgan hayvonlarga jinsiy tajribani orttirgan holda nalokson yoki sho'r suvni tatbiq qildik. Ayniqsa, barcha hayvonlar 10 ketma-ket kunida bir naychalash uchun naloksonni (30 mg / kg, SC) 5 daqiqadan oldin qabul qilishdi. Sinov kuni 7 d keyinchalik hayvonlarning deyarli yarmi naloksonni (10 mg / kg, n = 7) yoki sho'r (n = 6) 30 daqiqa oldin qabul qiluvchi ayolni kiritish. Jinsiy xatti-harakatlar kuzatildi va qayd etildi. Juftlikning parametrlari naloksonning jinsiy tajribani (1-kunduz kuniga 5-kunga qarshi) yoki ushbu ko'makni (kun 5 va boshqalar sinovi) ikki tomonlama ANOVA [faktorlar: davolash (salin va nalokson ) va kun (kun 1, kun 5 yoki test)] va Holm-Sidak usuli post hoc taqqoslashlar. Barcha statistik testlar uchun, p <5% statistik ahamiyatga ega deb hisoblanadi.

Naloksonning jinsiy xulq-atvorining qisqa muddatli ifodalariga ta'siri.

Nalokson (10 mg / kg, SC) bilan davolanish jarayonida jinsiy xulq-atvor tekshirilgandi. Bu oxirgi marta juftlash sinovidan o'tgan kunida (faqat shirin, n = 5; nalokson, n = 4).

Tizimli naloksonni oldingi davolash.

Naloksonni davolashni qayta takrorlamasligini aniqlash so'nggi davolashdan so'ng 7 d jinsiy xulq-atvorining yomonlashuviga olib kelishi mumkinligini aniqlash uchun, jinsiy ozg'in hayvonlarga oxirgi naloksondan so'ng juftlik testidan oldin 10 d dan keyin ketma-ket besh kunlik naloksonni (7 mg / kg, sc) yoki sho'r kiritishni buyurdi yoki sho'r tushirish. Ushbu oxirgi sinov kuni hayvonlar hech qanday inyeksiya olishmagan. Jinsiy xatti-harakatlar yuqorida ta'riflanganidek kuzatilgan va qayd etilgan. Yig'ish parametrlari takomillashmagan holda guruhlar o'rtasida taqqoslangan t sinovlari. Barcha statistik testlar uchun, p <5% statistik ahamiyatga ega deb hisoblanadi.

Tizimli nalokson va jinsiy mukofot.

Naloksonning yengillashtirilgan jinsiy xatti-harakatlarini namoyish qilishda susaytiruvchi ta'sirining bir imkoniyati shundaki, nalokson jinsiy xatti-harakatlarning mukofotlovchi ta'sirini bloklaydi. Ushbu imkoniyatni sinab ko'rish uchun CPP paradigmasi, jinsiy aloqada, oldin jinsiy tajribaga ega bo'lmagan erkaklarga nalokson yoki sho'rlangan in'ektsiyadan so'ng o'tkazildi. CPP protsedurasi, yuqorida tavsiflangan morfin-CPP uchun o'xshash edi, shu jumladan prestest, konditsioner kunlar va testdan keyin.

Jinsiy xatti-harakatlar avval boshlanmagan xonaga joylashtirilgan edi. O'zaro muvozanatli tarzda har bir hayvon naloksonni (n = 12) yoki sho'r (n = 11) 30 daqiqa oldin qabul qiluvchi ayolga kirish huquqi. Bitta juftlashuvning o'rtacha davomiyligi ~13 min edi. Bezakdan keyingi daqiqada hayvon 30 daqiqa uchun juftlashgan xonaga joylashtirildi. Boshqa shoshilinch holatlarda hayvonlarga nalokson yoki sho'r (yoki juftlashdan oldin olingan) ning in'ektsiyasi kiritildi va 30 min uchun to'ldirilmagan xonaga joylashtirildi. Keyinchalik, testdan oldingi test bilan bir xil testdan o'tkazildi. Xona tanlovini aniqlash uchun oldingi va keyingi sinov davomida juftlashgan xonada o'tkaziladigan vaqtni taqqosladik. Statistik tahlil uchun juftlik t imtihon va testdan keyingi davrda juftlik xonasida vaqtni tanlash va farqlarni solishtirish uchun testlar ishlatilgan, natijada jinsiy xatti-harakatlar uchun muhim CPP shakllanishi aniqlangan. p <0.05 muhim deb hisoblandi.

Intra-VTA naloxonning jinsiy xulq-tinni tajribaga asoslangan holda osonlashtirishga ta'siri

Eksperimental dizayn.

VTAga xos bo'lgan EOP operatsiyasining jinsiy tajribaga ta'siri oqibatida jinsiy xulq-atvorga ta'sir ko'rsatishi uchun mas'ul bo'lganligini aniqlash uchun hayvonlar besh kunlik juftlanish seanslaridan oldin VALga nalokson yoki sho'r suvni mahalliy infuzion qilishgan. Behavioral paradigma tizimli nalokson tajribasiga o'xshardi. Jinsiy hayotga ega bo'lgan hayvonlarga 5 ketma-ketligi kunida bir naychalash yoki 1 soatgacha juftlik qilish ruxsat berilgan edi. Qabul qiluvchi ayolni kiritmasdan 15 minut oldin erkaklar kalamush yoki naloksonning ikki tomonlama infüzyonlarini oldi (10 mili hajmida 0.5 mik / ml), yoki sho'r (0.9 mili yarmida). Ikki tomonlama mikroenjeksiyonlar, 0.5 min oralig'ida 0.5 mkm / min oqim tezligida, keyinchalik qo'shimcha 1 min bilan in'ektsiya kanülünün difüzyon uchun joyida qoldirildi. Keyin in'ektsiya kanülasi qo'g'irchoq kanül va chang qopqoq bilan almashtirildi. Chorvachilikning oxirgi kuni (sinov kuni) dan bir hafta o'tgach, barcha hayvonlar bir marta nalokson yoki sho'rsiz infüzyon holda zaryadga chalinganlar. Shakl 3A eksperimental dizaynni belgilaydi. Ma'lumotlar tahlili tizimli nalokson tajribasida ta'riflanganidek amalga oshirildi.

Kannülasyon cerrahisi.

Erkak sichqonchani intraperitoneal in'ektsiya (0.1 ml / kg) ketamin (0.87 mg / ml) va xylazine (0.13 mg / ml) bilan behushlikda tashxis qilindi va stereotaksik apparatga (Kopf Instruments) joylashtirildi. Ikki tomonlama 21-gauge yo'l-yo'riqli kanüller (Plastiğin One) Boshsuyagi kichik burg'ulash teshiklari orqali miya ichiga VXA-4.8 mm AP, bregma ± 0.75 mm ML va -7.8 mm DV boshiga qarab Paxinos va Watson (2013). Kanüller kafataya o'rnatilgan uchta vintga yopishtirilgan akril akril bilan ta'minlangan. Hayvonlarga 2 haftalik tiklanish davri berildi va xulq-atvorda tekshirish paytida ishlatiladigan operatsiya va in'ektsion jarayonlarga odatiylik uchun har kuni ishlov berildi.

Kanül joylashtirishni tekshirish.

Kanola joylashtirilishi VTA-ni to'g'ri aniqlashtirish uchun TH-immun tizimini qo'llash orqali tekshirildi. Faqatgina to'g'ri joylashuvga ega hayvonlar tahlilga kiritildi (yakuniy guruhlar hajmi: tajribali sho'rsizlar n = 8; tajribali nalokson n = 6). VTA tashqarisiga yo'naltirilgan VTA naloxon in'ektsiyasini olgan uchta hayvon «o'tkazib yuborilgan» in'ektsiya guruhida birgalikda to'plandi. O'tkazib yuborilgan guruh anatomik boshqaruv va Mann-Whitney sifatida xizmat qilish uchun alohida tahlil qilindi U Nalokson va sho'rlangan davolangan tajribali erkaklar bilan yakuniy sinov kunidagi xatti-harakatlarini solishtirish uchun test ishlatilgan.

Mating bilan bog'liq kontekstli replikatsiya bilan bog'liq PERK ifodasi

Eksperimental dizayn.

Erkaklarning juftlik tajribasini o'rgangan katakka ta'sir qilish VTA va NTA (VTA va NAc)Balfour va boshq., 2004). Shu sababli, juftlik muhiti jinsiy mukofotni oldindan belgilab beruvchi shartli bir ibora sifatida xizmat qiladi. Mavjud ishda jinsiy tajriba davomida qorin bo'shlig'ining faollashuvi keyingi shartli replikatsiya bilan bog'liq neyron faollashuvi uchun zarurligini testdan o'tkazdi. Nalokson yoki fiziologik juftlik (juft) 30 min oralig'ida joylashishdan oldin (ip) 8 min va jinsiy (tajribali) uchun qabul qiluvchi ayolning kiritilishi yoki ayolning (neytral muhit, sodda). Shunday qilib, to'rtta tajriba guruhi yaratildi: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal ​​va Exp NLX. Yakuniy juftlashtirilgan suhbatdan bir hafta o'tgach, har bir guruhdagi hayvonlarning yarmi jinsiy aloqa qafasiga (Exp erkaklar: jinsiy aloqa bilan bog'liq shartlar) yoki qafasni (naif erkaklar: noaniq / neytral belgilar) ta'sir qilganda, qolgan yarmi esa har qanday maslahat va uning o'rniga uy qafasida saqlanadi (asosiy PERK ifodasini aniqlash uchun). Ushbu eksperimental paradigma XNUMX guruhlari: Naive Sal-No Cue, Naive Sal + Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n Naive NLX-No Cue tashqari, har bir 4 = n = 3). Hayvonlarni replikatsiya ta'siridan so'ng 10-15 daqiqadan so'ng perfüze qildi. Tekshirish hayvonlari o'z uylarining hujayralaridan olib tashlandi va bir vaqtning o'zida perfüze qilindi.

Immunohistokimyo.

Kesish va immunohistokimyo yuqorida aytib o'tilganidek, o'tkazildi. Bu erda biz p42 va p44 Map Kinats ERK1 va ERK2 (perk; 1: 4 000; Uyali signalizatsiya texnologiyasi) ga qarshi quyon poliklonal antikoridan foydalanganmiz. Asosiy antikor keng tarqalgan bo'lib adabiyotdaRoux va Blenis, 2004; Murphy va Blenis, 2006; Frohmader va boshq., 2010b). Bundan tashqari, boshlang'ich antikorning etishmovchiligi barcha immunoreaktivlikning oldini oldi va rat miya to'qimalarining Western analizini muvofiq molekulyar og'irliklarda ikkita chok aniqladi.

Ma'lumotlarni tahlil qilish.

PERK-immunoreaktiv (-IR) hujayralari bir qator miya hududlarida sanaladi Leika DMRD mikroskopi: NAc [yadro (C) va qobiq (S); 400 × 600 mm; medial prefrontal korteks; mPFC; oldingi singulat maydoni (ACA); prelimbik korteks (PL); infralimbik korteks (IL); 600 × 800 mkm har biri], kaudat-putamen (CP; 800 × 800 mm) va bazolateral amigdala (BLA; 900 × 1200 μm; Balfour va boshq., 2004; Frohmader va boshq., 2010b; Pitchers va boshq., 2010b). Miya hududida ikkita bo'lim aniqlandi va standart sohalarda hujayralar soni keyinchalik mm bo'yicha hujayra soni sifatida hisoblandi2. Guruh vositalarini hisoblash uchun ikki hayvon hisobiga o'rtacha hisoblangan. Jinsiy yo'l bilan tajribali yoki naif guruhlardagi guruhlarning o'rtacha qiymatlari ikki tomonlama ANOVA [omillar: giyohvand moddalarni davolash (NLX yoki Sal) va marka (nishon yoki no belgisi)] yordamida taqqoslandi. post hoc Holm-Sidak yoki Mann-Whitney sum sinovlaridan foydalanib, tegishli joylarda muhim ahamiyatga ega p <0.05. Jinsiy tajribaga ega bo'lgan hayvonlarning NAc qobig'ida omillarning ahamiyatiga nisbatan kuchli tendentsiya kuzatildi va shu sababli faqat sho'r (Sal-No Cue) va fiziologik tuz (Sal + Cue) guruhlarini taqqoslash uchun juft taqqoslashlar o'tkazildi.

Rasmlar.

Raqamli tasvirlar bir CCD kamera (Macrofire, Optronics) yordamida olingan Leika mikroskop (DM5000B) bilan ta'minlangan. Rasmlar Adobe Photoshop 9.0 dasturiga kiritilgan. Yorqinlik va kontrastni sozlashdan tashqari, tasvirlar hech qanday tarzda o'zgartirilmagan.

natijalar

VTA dopamin hujayralarida jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan o'zgarishlar

Jinsiy tajriba VTA dopamin soma hajmining pasayishiga olib keldi (Anjir. 1A-C). Jinsiy tajriba VTA TH-IH hujayralarining soma qismini va hududini sezilarli darajada kamaytirdi (maydon: F(1,31) = 23.068, p <0.001; perimetri, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Vaqtning asosiy muhim ta'siri ham mavjud edi (maydon: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; atrof-muhit, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) va tajriba va vaqt o'rtasidagi muhim ta'sir o'tkazish (maydon: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; atrof-muhit, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Ikki tomonlama taqqoslashlar shuni ko'rsatdiki, TH-IR hujayralarining hududi va perimetri jinsiy a'zolar jinsida jinsiy a'zolar bilan jinsiy aloqada bo'lgan hayvonlarda jinsiy axloqsizlikning so'nggi kunidan so'ng 1 va 7 d darajada kamaydi [Anjir. 1B, maydon: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, perimetri: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Jinsiy xulq-atvorning ta'siri, mukofotni bekor qilish davri o'tgach tarqaldi, chunki TH-IR neyronlarining somasi hajmi oxirgi juftlik sessiyasidan keyin 31 d ga qaytdi (Anjir. 1B, maydon: p = 0.798; C, perimetri: p = 0.785). Jinsiy tajriba-o'zgaruvchan o'zgarishlar vaqtning har qanday nuqtasida aylanada aniqlanmagan (Anjir. 1D). VTA dopamin soma o'lchamini qisqartirish kundalik juftlashuv seanslariga bog'liq emas edi, chunki besh hafta davomida ikki marta juftlashish seanslari davomida juftlashish tajribasi kamroq VTA dopamin soma hajmini (Anjir. 2A,B, E-H, maydon: p = 0.004; atrofi: p <0.001). Aksincha, jinsiy tajriba substantia nigrada TH-IR soma hajmiga ta'sir qilmadi (Anjir. 2C, I-J, maydon: p = 0.13; atrofi: p = 0.16) yoki VTA bo'lmagan TH-IR neyronlaridagiAnjir. 2D, E-H, maydon: p = 0.46; atrofi: p = 0.45).

Shakl 1. 

VTA dopamin neyronlarining endogen opioid bilan bog'liq soma o'lchamidagi o'zgarishi. A, VTA dopamin neyronlarining vaktsinalari jinsiy o'ta sodiq va tajribali hayvonlardan olingan. O'lcham paneli, 7 μm. Jinsiy tajriba (Exp, qora novda) mintaqada sezilarli kamayishga olib kelganB; mkm da2) va perimetri (C; vm dopamin hujayralari, xNUMX d (Naive, Exp; n = 6) va 7 d (Naif, n = 5; Exp, n = 6), lekin 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) jinsiy ozchilikni nazorat qilish bilan solishtirganda (Naif, oq bar). 84 yoki 1 d dagi naif boshqaruv bilan solishtirganda tajriba erkaklarida 7% ga kamaydi. 91.6 va 90-dagi tekshiruvlarga nisbatan atrof-muhit tajribali guruhlarda 1 va 7% ga kamaydi. Dairesellikka ta'sir ko'rsatmadi (D). Mintaqadagi bu dopaminli hujayra plastinkasi (E) va perimetri (F) Nalokson (NLX, n = 8), lekin sho'r bo'lmagan (Sal, n = 7) davolanish vaqtida, 7 d oxirgi jinsiy aloqa sessiyasidan so'ng, jinsiy ozg'in nazorati bilan solishtirganda (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Ma'lumotlarni o'rtacha ± SEM ifodalaydi; * o'sha kunning jinsiy aloqa sirlari bilan solishtirganda ancha farq qiladi (B, C) yoxud salmon bilan muomala qilingan jinsiy moyak boshqaruvlari va nalokson bilan davolash qilingan jinsiy tajribali erkaklar (E, F).

Shakl 2. 

Jinsiy tajriba asosan nigra dopamin neyronlari yoki VTA nondopamin neuronlaridagi soma hajmini pasaytirmadi. VTA TH-IR neyron soma maydoni (A; mkm da2) va perimetri (B; (oq) va tajribali (qora) hayvonlarda ketma-ket kunlarda emas, balki haftasiga ikki marta juftlashib, tajriba orttirgan. Substantia nigra TH-IR soma maydoni (C) va VTA bo'lmagan TH-IR soma maydoni (D) jinsiy ozg'in (oq) va tajribali (qora) hayvonlar. Ma'lumotlarni o'rtacha ± SEM ifodalaydi; * jinsiy axloqsizlik nazorati bilan solishtirganda ancha farq qiladi. VTAdagi TH-IR (jigarrang) neuronlarini jinsiy aloqa bilan ifodalovchi tasvirlarE) va tajribali (F) erkaklar. G, H, Strelka bilan ko'rsatiladigan neyronning yuqori magnit tasviri E va F navbati bilan. Nissl-leybl neyronlari bu tasvirlarda ko'k rangda ko'rsatilgan. SNda TH-IR neyronlarini jinsiy o'jar (I) va tajribali (J) erkaklar. O'lchamlari: E-J, 20 μm.

VTA dopamin neyronlarining jinsiy tajribasi natijasida paydo bo'lgan soma o'lchamining pasayishi opioid retseptorlari aktivatsiyasiga bog'liq.

Jinsiy tajribadan kelib chiqqan VTA dopaminning neyron soma o'lchamining pasayishi har bir juftlashish sessiyasidan oldin qo'llaniladigan noaniq MOR antagonisti nalokson tomonidan bloklandi. Nalokson bilan davolanish seanslari oldidan davolash hududga katta ta'sir ko'rsatdi (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) va perimetrga sezilarli ta'sir ko'rsatadigan trendF(1,22) = 2.892, p = 0.052). Mintaqada tajriba va nalokson bilan davolash o'rtasida sezilarli ta'sir o'tkazish aniqlandiF(1,22) = 5.578, p = 0.027) va perimetri (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Ikki tomonlama taqqoslashlar sho'rlangan davolangan hayvonlarda jinsiy tajriba sho'rlik bilan davolash qilingan jinsiy o'ynaydigan erkaklar bilan solishtirganda oxirgi marta juftlashishdan keyin VTA dopamin neyronlari 7 d ning hududini va perimetrini sezilarli darajada kamaytirdiAnjir. 1E, maydon: p = 0.018; F, perimetri: p = 0.007). Aksincha, nalokson bilan davolash qilingan hayvonlar nalokson bilan muomala qilingan sodda erkaklardan farq qilmadi (Anjir. 1E, maydon: p = 0.483; F, perimetri: p = 0.330). Bundan tashqari, tajribali naloksonli hayvonlarga nisbatan tajribali sho'rlangan hayvonlarning soma o'lchami sezilarli darajada kamaydi (Anjir. 1E, maydon: p = 0.002; F, perimetri: p = 0.002). Naloksonning bu ta'siri jinsiy tajribaga xos edi, chunki nalokson bilan davolash nafaqat jinsiy nalokson bilan davolash qilingan erkaklarda TH-IR hujayra soma hajmiga ta'sir qilmadi, balki sho'rlangan davolanish bilan solishtirganda (Anjir. 1E,F). Bundan tashqari, naloksonning tajriba bilan bog'liq soma o'lchamlarini qisqartirish ta'siri naloksonning jinsiy xatti-harakatlariga bog'liq emasligi sababli, nalokson va sho'rlangan erkaklar orasida juftlashuv harakati sezilarli darajada farq qilmagani uchun, bo'shashishdan keyin juftlashishni boshlash uchun uzoq vaqtdan tashqari nalokson bilan davolangan erkaklarda birinchi va beshinchi juftlashuv paytidap = 0.03 va p = 0.004). Har ikkala shilimshiq va nalokson bilan muomala qilingan erkaklar besh marta juftlashish seanslari davomida zaryadga uchragan.

Jinsiy tajriba - morfin mukofotiga bag'rikenglik keltirdi

VTA dopamin soma kattaligidagi VTA ta'sirida EOP ta'sirida jinsiy tajribaning ta'siri ekzogen opiatlargaSklair-Tavron va uning hamkorlari, 1996; Russo va boshq., 2007). Shuning uchun tabiiy mukofotni keltirib chiqaradigan VTA dopaminli hujayrali plastisitiya opiat morfin uchun mukofotni ta'siri tekshirildi. Haqiqatan ham, jinsiy tajriba surunkali opiat ta'siriga o'xshash morfin mukofoti bag'rikengligiga sabab bo'ldi (Russo va boshq., 2007). Jinsiy hayotga ega bo'lgan erkaklarda 0.5 mg / kg morfin dozasi uchun CPP ishlab chiqilmadi; jinsiy noma'qul erkaklar ushbu dozada CPP hosil qildilar, chunki morfin bilan bog'langan xonada sinovdan o'tgan vaqt davomida sho'rlangan juftlik xonasiga nisbatan ko'proq vaqt sarflashAnjir. 3; p = 0.039). Har ikkala jinsiy aloqa bilan shug'ullanadigan va tajribali guruhlar morfinlar bilan birgalikda kamerada ancha yuqori miqdorda vaqt o'tkazdilar: 5.0 mg / kg (Anjir. 3; Sodda: p = 0.029; Exp: p = 0.012) va 10.0 mg / kg (Anjir. 3; Sodda: p <0.001; Muddati: p = 0.002).

Shakl 3. 

Jinsiy tajribaning morfin mukofotiga ta'siri. Vaqtni jinsiy o'limdan keyingi sinovda (sal) yoki morfinli (Mor, 0.5, 5 yoki 10 mg / kg tana vaznli) kameralarda o'tkazgan vaqtlar (Naive, n = 10-13) yoki tajribali (Exp, n = 9-13) erkaklar. O'rtacha ± SEM sifatida taqdim etilgan ma'lumotlar; * bir xil hayvonlarda Sal-bog'langan xonaga nisbatan sezilarli farqni ko'rsatadi. NS, muhim emas.

Juftlik xulq-atvorining jinsiy tajribasi, sababi opioid retseptorlari aktivatsiyasiga bog'liq

Bulgular hozirgi kunga qadar 5 kundalik qisqa nutq mashg'ulotlari paytida VTAda ishlovchi EOPning surunkali morfin yoki geroinni o'z-o'zini boshqarish samaradorligiga o'xshash VTA dopamin neyronlarining plastinkasiga olib keladi (Russo va boshq., 2007; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Biz VTA dopamin soma o'lchamlarini kamaytirish mukofotni o'rganish va ayniqsa jinsiy tajribani keltirib chiqarishi uchun muhim ahamiyatga egaligini taxmin qildik. Ushbu gipoteza juftlik paytida naloksondan foydalanib, besh kunlik juftlashuv seanslarida jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan jinsiy xatti-harakatlarni osonlashtirishga ta'sirini o'rganish orqali sinovdan o'tgan. Ma'lumotlar Shakl 4 faqat birinchi va beshinchi juftlashish seanslari uchun, chunki bu ma'lumotlar juftlikning xulq-atvorini engillashtirishning eng yaxshi tajribasini ko'rsatuvchi ma'lumotlardir. Bundan tashqari, naloksonni davolanish seanslari davomida davolashning uzoq muddatli ta'siri 1 haftadan keyin yakuniy juftlashish tajribasi davomida juftlashtirilgan xatti-harakatlarning tajribaga asoslangan yordamini ta'minlash bo'yicha sinovdan o'tkaziladi. Shakl 4A eksperimental dizaynni ko'rsatadi. Jinsiy xatti-harakatlarning barcha parametrlari bo'yicha juftlashuvchi sessiyaning asosiy ta'siri bo'ldi (kechikish vaqti: F(2,55) = 11.286, p <0.001; kirish kechikishi: F(2,55) = 8.767, p <0.001; bo'shashish kechikishi: F(2,55) = 10.368, p O'rnatish uchun kechikishlarda naloksonni davolash (<0.001) vaF(1,55) = 6.585, p = 0.013) va intromission (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Noloksonli davolanishni birinchi juftlash paytida seziladigan jinsiy xulqli ta'sir ko'rsatdi, chunki naloxone hayvonlari birinchi marta (p = 0.002) va intromission (p = 0.002) juftlashning dastlabki kunida sho'r yuvish bilan solishtirganda. Boshlang'ich jinsiy xulq-atvoridagi ushbu nalokson ta'siri jinsiy tajriba orqali qisqartirildi va keyinchalik juftlashish seanslaridan birida kuzatilmadi (1 stol). Bundan tashqari, naloksonni administratsiya qilish beshta jinsiy mashg'ulotdan oldin jinsiy tajribani dastlabki ko'maklashishiga yo'l qo'ymasdi. Jinsiy tajribani kuchaytiruvchi ta'siriga muvofiq, sho'rlangan erkaklar chuqurlashtirilgan latanslarniAnjir. 4B; p = 0.032) intromission (Anjir. 4C; p = 0.033) va ejekulyatsiya (Anjir. 4D; p <0.001) beshinchi juftlik seansi paytida birinchi juftlik seansiga nisbatan, bu jinsiy xatti-harakatlarning osonlashishini ko'rsatdi. Xuddi shunday, nalokson bilan davolash qilingan erkaklar o'rnatish uchun ancha qisqa kechikishlarni ko'rsatdilar (Anjir. 4B; p <0.001), kirish (Anjir. 4C; p <0.001) va bo'shashish (Anjir. 4D; p = 0.017) birinchi kunga nisbatan beshinchi. Bundan tashqari, nalokson bilan muomala qilingan erkaklar beshinchi juftlik majlisida kechiktirilayotgan har qanday vaqtda sho'rlangan idishlardan farq qilmadi.

Shakl 4. 

Endogen opioidlar jinsiy xatti-harakatni boshdan kechirishga yordam berishda muhim rol o'ynaydi. A, Eksperimental dizayn. B-D, Sholga bilan davolash qilingan erkaklar uchun jinsiy xatti-parametrlari (Sal, oq bar, n = 11) yoki nalokson (NLX; qora bar, n = 12) tizimli administratsiyalashgan. Ko'rsatilgan ma'lumotlar kutish uchun kechikish (B; soniya), intromission (C; soniya) va zaryadga (D; soniyalar) 1 va 5 kunlari kundan-kunga bir-biriga qo'shilish uchun besh kun. Bundan tashqari, beshinchi juftlashuv seansidan so'ng, so'nggi nikoh testida 7 d uchun ma'lumotlar ko'rsatiladi. Ma'lumot o'rtacha ± SEM sifatida taqdim etiladi; + 1 va 5 kunlaridagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi; * Test kuni va 5 kunidagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi; # kun davomida nalokson va fiziologik guruhlar o'rtasida sezilarli farqni ko'rsatadi.

Ushbu jadvalni ko'ring: 

Jadval 1. 

Naloksonni administratsiya qilishdan avval, faqat juftlashning birinchi kunida montaj qilish va intromilatsiyani oshirish uchun lattalar ko'payadi

Aksincha, jinsiy tajriba mashg'ulotlari paytida naloksonni davolash yakuniy juftlash test kunida jinsiy xatti-harakatni boshdan kechirishga yordam berdi. Sinov kuni naloxon inyeksiya bo'lmay turib, oxirgi nikoh sessiyasidan so'ng 7 d o'tkazildi. Tuzli davolangan qo'zg'atuvchilar erkaklar jinsiy xulq-atvorning kutilgan tajribasini ko'rsatdilar. Ayniqsa, joylashtirish, ichish va ajralish uchun kechikishlar beshinchi juftlashuv sessiyasi va oxirgi sinov kuni o'rtasida farq yo'q edi (Anjir. 4B-D). Nalokson bilan muomala qilingan erkaklar lattsiyalarda (masalan,Anjir. 4B; p = 0.033), intromission (Anjir. 4C; p = 0.036) va ejekulyatsiya (Anjir. 4D; p = 0.049) test kunida beshinchi juftlashuv seansiga nisbatan. Bundan tashqari, test kuni naloksonli hayvonlarni sho'rlangan erkaklarnikiga qaraganda ancha sekinroq ekanligi aniqlandi, chunki ular uzoq vaqt davomidaAnjir. 4B; p = 0.017) va intromission (Anjir. 4C; p = 0.043). Shunday qilib, naloksonni davolash parvarishni to'xtatdi, lekin boshlang'ich emas, jinsiy xatti-harakatlarning tajribasini keltirib chiqardi. Ushbu topilmalar EOP bilan bog'liq bo'lgan VTA dopamin neyron plastisiyasida tabiiy mukofotni mustahkamlashni uzoq muddatli ifodalashda muhim rol o'ynaydi.

Opioid retseptorlari blokadasining jinsiy xatti-harakatni uzoq muddatli takomillashtirishning yo'qolishiga ta'sirini aniqlash uchun bir nechta qo'shimcha tekshirish tajribalari o'tkazildi, natijada oxirgi nikohdan o'tgan test kuni naloksonni qo'llashdan mahrum bo'ldi (Anjir. 5A,B), uzoq muddatli, ammo qisqa muddatli parvarishlashni osonlashtirmaslik uchun o'ziga xos edi (Anjir. 5E,F), kundalik nafaqat nalokson ta'siridan kelib chiqmagan (Anjir. 5C,D) va nalokson bilan davolash qilingan erkaklarda jinsiy mukofotni yo'qotishidan kelib chiqmagan (Anjir. 5G,H). Birinchidan, nalokson yo'qligi sababli yakuniy juftlik testida o'zgaruvchan jinsiy xatti-harakatlarning mavjud emasligini ko'rsatish uchun nalokson yoki sho'r suvni nalokson bilan bog'langan hayvonlarga jinsiy tajriba orttirgan (oxirgi marta juftlash sinovida)Anjir. 5A). Uyg'oqlik kunining kechiktirilishiga katta ta'sir ko'rsatdi.Anjir. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) va intromission (2 stol; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Uyqusizlik kunini kechiktirmaslik uchun asosiy sabab yo'q edi (2 stol; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Yuqorida ta'rif etilganidek, juftlash vaqtida naloksonli davo dastlabki beshta jinsiy tajriba mashg'ulotlarida jinsiy xatti-harakatlarning osonlashishiga ta'sir ko'rsatmadi. Har ikki guruhda (neytral va nalokson bilan muomala qilingan guruhlar juftlik paytida naloksonni qabul qildilar), 5 kuniga nisbatan 1 kunida kunduzgi jinsiy xulq-atvorni namoyon etdi va birinchi martaAnjir. 5B; sho'rlangan: p = 0.033; nalokson: p = 0.014) va intromission (2 stol; sho'rlangan: p = 0.034; nalokson: p = 0.026). Nalokson yoki sho'rlangan moyli hayvonlarga oxirgi juftlash testida kunduzgi uzunligiAnjir. 5B; sho'rlangan: p = 0.018; nalokson: p = 0.029) va intromission (2 stol; sho'rlangan: p = 0.019; nalokson: p = 0.020) tajriba juftligi beshinchi kuni bilan solishtirganda. Shu sababli, nalokson yoki sho'rlanishni sinovdan o'tkazish kunida darhol jinsiy tajriba mashg'ulotlari paytida naloksonni davolash samarasiga ta'sir qilmadi va jinsiy xulq-atvorning uzoq muddatli yordamini kamaytirish hayvonlarda ko'rsatilmagan, bu hech qanday inyeksiya qilinmagan oxirgi test sinov kuni (Anjir. 4).

Shakl 5. 

Endogen opioidlar uzoq muddat jinsiy xulq-atvorning tajribasini keltirib chiqaradigan ifodalashda muhim ahamiyatga ega. A, Sinov kunida NLX davolash samaradorligiga tajriba o'tkazish uchun eksperimental dizayn. B, Quyoshli (kulrang) yoki nalokson (qora) inyeksionatsiyadan keyin 5 kun ketma-ket besh kunlik 1 va 5 kechikishlarini o'rnatish. Ma'lumot o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi. * 1 kun va 5 kunidagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi. # Test kuni va kun 5 o'rtasidagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi. C, Naloksonni oldingi davolanishni juftlik xulq-atvorida jinsiy tajribasiz o'rganish uchun eksperimental dizayn. D, Xammoni yo'qligida 7 kundan keyin sho'r yoki naloksonli in'ektsiyadan keyingi 5 kundan so'ng, so'nggi nikoh sinov kuni uchun lattaga o'rnatish. Ma'lumot o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi. E, Nalokson bilan davolashni jinsiy hayotga jalb qilingan hayvonlarda qisqa muddatli jinsiy xulq-atvor ta'siriga ta'sir qilishini tekshirish uchun eksperimental dizayn. FKun (1) kunida 5 va 1 kunida kunduzgi kuni va 5 kunida 1 kuniga (sho'r yoki nalokson (qora) inyeksiya mavjud bo'lganda, 5 kuniga). Ma'lumot o'rtacha ± SEM ni ifodalaydi. * XNUMX kun va XNUMX kunidagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi. G, Naloksonni davolash jinsiy xulq-atvorning samaradorligini bartaraf qiladimi yoki yo'qligini tekshirish uchun eksperimental dizayn. H, Nalokson yoki sho'rlangan hayvonlarni juftlashdan oldin oldingi (oq) va keyin sinovdan o'tkazgan (qora) vaqt davomida bog'langan xonani (sekundlarda) bog'lash uchun vaqt. Ma'lumotlarni o'rtacha ± SEM ifodalaydi; * Pretestga qaraganda sezilarli farqni ko'rsatadi.

Ushbu jadvalni ko'ring: 

Jadval 2. 

Ko'rsatilgan ma'lumotlar MOR blokadasining jinsiy xatti-harakatni uzoq muddatli kuchayishiga halokat oqibatida yakuniy juftlash test kunida naloksonni etishmasligidan qat'iy nazar sodir bo'lishini aniqlash uchun o'tkaziladigan tekshiruvlardan olingan intromilatsiya va ajralishga (sekund)

Jinsiy tajriba bilan bog'langan va naloksonga qayta tiklanmaydigan naloksonli davolanishni aniqlash uchun oxirgi davolashdan so'ng 7 d jinsiy xulq-atvorga sabab bo'lgan, jinsiy beixtiyor hayvonlarga oxirgi nikohon yoki sho'r quyish inyeksionlaridan 5 kunlik nalokson yoki sho'r quyilish in'ektsiyasini olish uchun 7 d keyinroq (Anjir. 5C). Salin va nalokson bilan oldindan tuzilgan guruxlar o'rtasida biron bir juftlash parametri uchun sezilarli farqlar aniqlanmadi (Anjir. 5D; kechiktirishni o'rnatish; intromission kechikish: sho'r 139.7 ± 40.3 va boshqalar naloxone 121.83 ± 42.55; bo'shatish kechikishi: sho'rlangan 887.9 ± 70.0 va boshqalar naloxone 1050.8 ± 327.31). Natijada, naloksonning nafaqat nalokson ta'sirining VTA dopamin neyron plastinkasiga ta'siri kabi, keyingi jinsiy xulq-atvorni o'zgartirish uchun etarli emasligini ko'rsatadi.

Biz jinsiy tajribani qo'lga kiritish paytida naloksonni davolash jinsiy tajribani keltirib chiqaradigan uzoq muddatli jinsiy xulq-atvorni buzishini taxmin qilamiz. Buni sinab ko'rish uchun nalokson bilan davolanish jarayonida juftlash vaqtidagi natijalar keyingi jinsiy xulq-atvorda sinovdan o'tkazildi va oxirgi nikohdan keyin faqat 1 d (tajriba dizayni; Anjir. 5E). Mating kunida tog'da (Anjir. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) va kirish kechikishi (2 stol; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Ejakulyatsiya kechikishida kunning asosiy ta'siri yo'q edi (2 stol; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Yuqorida ta'rif etilganidek, barcha erkaklar (salin yoki naloksonli davolanishlarga qaramasdan) besh jinsiy mashg'ulotlar davomida jinsiy xatti-harakatlarning osonlashtirilishini ko'rsatdiAnjir. 5F; sho'rlangan: p = 0.002; nalokson: p = 0.018) va intromission (2 stol; sho'rlangan: p = 0.006; nalokson: p = 0.009) kuni 5 kuniga nisbatan 1. Xuddi shunday, jinsiy xulq-atvorda test kuni 1 kuniga nisbatan ancha pastroq kechikishlar bilan ko'rsatilganAnjir. 5F; sho'rlangan: p = 0.001; nalokson: p = 0.020) va intromission (2 stol; sho'rlangan: p = 0.004; nalokson: p = 0.009). Eng muhimi, juftlash paytida naloksonli davolanish jinsiy tajribani, jinsiy tajribadan so'ng, 1 d sinovidan o'tkazilganda, jinsiy xulq-atvorini kuchaytirishga sezilarli ta'sir ko'rsatmadi.

Va nihoyat, naloksonning yengillashtirilgan jinsiy xatti-harakatlarining uzoq muddatli ifloslanishiga ta'sir etuvchi ta'siri, naloksonning jinsiy xatti-harakatlarning mukofotlanadigan xususiyatlariga to'sqinlik qiladigan ta'siri bilan bog'liqligini sinab ko'rdik. Biroq, juftlashtirishdan oldin darhol qo'llaniladigan nalokson juftlash uchun CPP shakllanishini o'zgartirmadi (Anjir. 5G), naloksonli davolanish jinsiy mukofotni o'zgartirmaganligini ko'rsatdi. Sho'r va nalokson bilan muomala qilingan guruhlar jinsiy axloqsizlikka nisbatan sezilarli darajada CPP ni tashkil etdi, chunki jinsiy bog'langan xonadaAnjir. 5H; sho'rlangan: p = 0.038; nalokson: p = 0.002) testdan oldingi test vaqtida. Shuning uchun nalokson jinsiy xatti-harakat bilan bog'liq bo'lgan mukofotni to'sib qo'yish orqali osonlashtirilgan jinsiy xulq-atvorni saqlashga salbiy ta'sir ko'rsatmaydi.

Jinsiy xatti-harakatlarning osonlashtirilishi VTAdagi EOP operatsiyasiga bog'liq

VTAga jinsiy xatti-harakatlarning uzoq muddatli yordamini kuchaytirish uchun maxsus EOP aktini tasdiqlash uchun, Shakl 3A tizimli in'ektsiya o'rniga ichki VTA nalokson infuziyalari bilan takrorlangan. Natijalar yuqorida tavsiflangan tizimli tatbiqot bilan bir xil edi. Jinsiy xatti-harakatlarning barcha parametrlari bo'yicha juftlashuv kunining muhim ta'siriAnjir. 6A, kechikish vaqti: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, intromission kechikish: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, ajralish kechikishi: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) va lattalardagi ichki VTA naloksonni davolashF(1,33) = 7.345, p = 0.011) va intromission (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Intra-VTA naloxone 5 d bilan jinsiy aloqa jarayonida jinsiy xulq-atvorning dastlabki tajribasini engillashtirdi, chunki nalokson bilan muomala qilingan erkaklar,Anjir. 6A; p = 0.001), intromission (Anjir. 6B; p <0.001) va bo'shashish (Anjir. 6C; p = 0.001) kuni 5 kuniga nisbatan 1. Nalokson bilan muomala qilingan erkaklar sholg'in bilan davolash qilingan erkaklardan kechiktirilishning beshinchi kunida farq qilmadi. Intra-VTA naloksonli davolash, masalan tizimli tatbiq etish kabi, sezilarli darajada ko'payishiga olib keldi (Anjir. 6A; p <0.001) va kirish kechikishi (Anjir. 6B; p <0.001) birinchi juftlik kunida sho'rlangan erkaklar bilan taqqoslaganda, keyingi juftlashuv seanslarida kuzatilmadi (bu davrda nalokson va sho'r suv bilan ishlangan erkaklar farq qilmadi). Kutilmagan kuzatuvlardan biri shundaki, ushbu tajribada sho'rlangan erkaklar montaj yoki kirish kechikishlarini statistik jihatdan sezilarli darajada osonlashtirmaganligini ko'rsatdilar (yuqorida tavsiflangan barcha tajribalarda ko'rsatilgandek) va faqat bo'shashish kechikishi birinchi kun bilan taqqoslaganda beshinchi kuni qisqartirildi. (sho'r: p = 0.001).

Shakl 6. 

VTA ichidagi endogen opioidlar jinsiy xulq-atvorni tezlashtirishi va uning uzoq muddatli xizmat ko'rsatishiga yordam beradi. Sholin bilan davolash qilingan erkaklar uchun jinsiy xatti-parametrlari (Sal, oq bar, n = 8) yoki NLX (qora bar, n = 6) ichki VTA administratsiyasi bilan. Ko'rsatilgan ma'lumotlar kutish uchun kechikish (A), intromission (B) va zaryadga (C) 1 va 5 kunlari kundan-kunga besh marta juftlashtiriladi. Bundan tashqari, shin yoki nalokson inyeksiya bo'lmaganida 7 kunidan keyingi xamma sinov kuni, 5 d uchun ma'lumotlar ko'rsatiladi. Ma'lumotlarni o'rtacha ± SEM ifodalaydi; + 1 va 5 kunlaridagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi; * Test kuni va 5 kunidagi davolanish jarayonida sezilarli farqni ko'rsatadi; # kun ichida nalokson va Sal guruhlari o'rtasida sezilarli farqni ko'rsatadi. 4.60 eksperimentida (sho'r, oq, nalokson, qora, o'tkazib yuborilgan, kulrang) barcha hayvonlar uchun ichki VTA'larni ko'rsatuvchi koronali VTA qismlarining sxematik chizmalari (H, 5.00; I, 5.25; J, -5; Swanson Brain Xaritalaridan shablonni chizmalardan foydalanish (Swanson, 2004). Kanüller ikki tomonlama edi, ammo inyeksiya joylari bir tomonlama ravishda taqdimot kolaylığı uchun taqdim etildi. fr, Fasikulus retroflexus; ML, Medial lemniscus; SN, muhim nigra.

Intra-VTA naxolonni davolash, tizimli nalokson ta'siriga o'xshash jinsiy tajribali erkaklarda kuzatilgan engil jinsiy xulq-atvorning saqlanishini blokladi. Xususan, oxirgi test kuni nalokson bilan davolash qilingan erkaklar uzoq vaqt davomidaAnjir. 6A; p = 0.011), intromission (Anjir. 6B; p = 0.010) va ejekulyatsiya (Anjir. 6C; p = 0.015) va ularning beshinchi juftlashuv seansi bilan taqqoslaganda va oxirgi sinov kunida sho'rlangan erkaklar bilan taqqoslaganda (Anjir. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Buning aksincha, sho'rlangan davolangan hayvonlarning oxirgi test kunlari va kuniga 5 juftlashuvi o'rtasida joylashish va intromilatsiya uchun latentlarda farq bo'lmadi. Ushbu ta'sirlar naloksonni VTA ga etkazib berishga xos bo'lgan, chunki yaqin atrofdagi kanola joylari bo'lgan erkaklarda VTAAnjir. 6D; n = 3) jinsiy xulq-atvorda uzoq muddatli yordam ko'rsatishni ko'rsatdi (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5 va yakuniy juftlash sinov kunida ichki VTA naloxone hayvonlariga nisbatan sezilarli darajada farq qiladi) (ML, IL: p = 0.029; QO'LDAN p = 0.0395).

Jinsiy aloqa bilan bog'liq shartli nekrozning faollashishi uchun EOP harakati talab qilinadi

Xozirgi kunga kelib biz topilgan natijalarga asoslanib, biz VTA'da juftlashuv tajribasi va keyingi VTA dopamin soma o'lchamlarini qisqartirish davomida EOP faollashuvi rag'batlantiruvchi qobiliyatni mukofot bilan bog'liq ogohlantirishlarni uyg'unlashtirishga va shuning uchun ham jinsiy xulq-atvorni ushlab turish uchun muhim ahamiyatga ega deb hisobladik. Ushbu gipotezani sinab ko'rish uchun jinsiy aloqani (jinsga bog'liq kontekstli belgilar) predikativ shartli kontekstli belgilarga ta'sir qilish natijasida kelib chiqadigan neytral harakatlar tajribasi davomida opioid retseptorlarini blokirovka qilish oqibatlari o'rganildi. Jinsiy noma'lum hayvonlar ham atrof-muhitga oid narsalarga duch kelgan, biroq ular avvalgi juftlik tajribasi bilan bog'liq emas edi, shuning uchun neytral belgilar edi. Nihoyat, boshlang'ich PERK darajalari uyda yashaydigan va hech qanday iz qoldirmasdan (-No Cue) ta'sir qilmaydigan jinsiy tajribali va naif nazorat guruhlarida aniqlandi. Avvalgi topilmalarni tasdiqlash va kengaytirish (Balfour va boshq., 2004), oldingi jinsiy mukofot bilan bog'liq kontekstual ahamiyatga ega bo'lgan ta'sirlarga ta'sir qilish NAc (jinsida tajribali erkaklarda) PERK ifodasini sezilarli darajada oshirdiAnjir. 7) va mPFC (Anjir. 8A-C), ammo BLA'da neyronal aktivizatsiya qilmagan (Anjir. 8D) yoki CPU (ma'lumotlar ko'rsatilmagan). NAc yadrosida marka ta'sirining asosiy ta'siri kuzatildi (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), ACA (F(1,12) = 5.541, p = 0.038) va PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041) va NAc yadrosidagi naloksonni davolash (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), ACA (F(1,12) = 15.242, p = 0.002) va PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). NAc yadrosida sezilarli o'zaro ta'sirlar mavjud (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), ACA (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014) va IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Birinchidan, juftlik bilan bog'liq Cue maruzalari salfetka bilan davolash qilingan jinsiy tajribali hayvonlarda (Exp Sal ​​+ Cue) sezilarli darajada oshdi va hech qanday ko'rsatgichlarga duch kelmagan va NAc yadrosida uy bekasi (Exp Sal-No Cue) dan olinganAnjir. 7A; p <0.001) va ACP ning mPFC subregionlari (Anjir. 8A; p = 0.001), PL (Anjir. 8B; p = 0.003) va IL (Anjir. 8C; p = 0.029). Aksincha, sho'rlangan jinsiy ozuqali hayvonlarda, jinsiy mukofot bilan bog'lanmagan kontekstli so'rovlarga ta'sir qilish, miyadagi biron bir sohada (Naive Sal + Cue ni na Sal-No Cue bilan taqqoslaganda, Shakl. 7, 8), PERK indüksiyonunun, jinsiy tajriba bilan bog'liq ipuçlarının ta'sir qilishiga xos ekanligini ko'rsatib turibdi. Bundan tashqari, jinsiy tajriba nafaqat miya mintaqalaridagi dastlabki PERK ifodasini o'zgartirmagan, chunki uy qafaslaridan olingan jinslar o'rtasida naif yoki tajribaga ega bo'lgan guruhlar o'rtasida sho'r yoki nalokson bilan muomala qilingan.

Shakl 7. 

Jinsiy aloqa bilan bog'liq shartlar asosida indükatsiya qilingan NAc ning neyro faollashuvi uchun endogen opioid ta'sir talab etiladi. Perk-IR kameralar soni mm bo'yicha2 yadroidagi akumbens yadrosidaA) va qobiq (B) jinsiy o'ynaydigan (oq) va tajribali (Exp) qora hayvonlarda tizimli NLX yoki salin (Sal) bilan juftlashuv seanslari (Exp erkaklar) yoki mashg'ulot seanslari (Naif erkaklar) bilan oldindan davolangan. Guruhlar yoki Exp-erkaklardagi juft-juftliklar va Naive hayvonlarida neytral belgilar bo'lgan yoki uy-kafeslardan (No Cue, Cue-labelning etishmasligi bilan ko'rsatilgan) olingan kontekstli belgilarga (Cue) ta'sir ko'rsatdi. Ma'lumot o'rtacha ± SEM sifatida taqdim etiladi; * Salin-pretreed tuzilmalar bilan solishtirganda sezilarli farqni ko'rsatadi (Naive Sal-No Cue va Exp Sal-No Cue); # Sal-muomala qilingan Cue-exp exp Exp guruhiga (Exp Sal ​​+ Cue) nisbatan sezilarli farqni ko'rsatadi. Perk-IQ hujayralarining vakolatli tasvirlari mm2 Sal jinsi bo'lgan jinsiy tajribali erkaklarning NAc yadrosidaC, D) yoki NLX (E, F) yoki uy qafasidan olingan (No Cue, C, E) yoki juftlik bilan bog'liq kontekstli belgilarga ta'sir qolgan (Cue; D, F). N Naif NLX (No Cue) dan tashqari har bir guruh uchun = 4, n = 3. Oldin oldingi komissura. O'lcham paneli, 100 μm.

Shakl 8. 

Naloksonning boshqa VTA maqsadli hududlarida replikatsiya bilan bog'liq bo'lgan PERK ifodasini juftlashtirishga ta'siri. Perk-IR kameralar soni mm bo'yicha2 juftlashuv seanslari davomida tizimli NLX yoki salin (Sal) bilan oldindan davolangan va ACAda (Cue) yoki uydagi qafasga (no ends) ta'sir qolgan jinsiy (naushnik) va tajribali (Exp) qora hayvonlardaA), PL (B), IL (C) va BLA (D). Ma'lumot o'rtacha ± SEM; * Salin-pretreed tuzilmalar bilan solishtirganda sezilarli farqni ko'rsatadi (Naive Sal-No Cue va Exp Sal-No Cue); # Sal-muomalaga uchragan jinsiy axloqsizlik nazorati (Naive Sal + Cue) ga nisbatan sezilarli farqni ko'rsatadi.

Gipotezamizni qo'llab-quvvatlash uchun jinsiy tajriba davomida naloksonni davolash jinsiy aloqa bilan bog'liq shartlar asosida PERK indüksiyasini sezilarli darajada kamaytirdi. Ushbu nalokson bilan muomala qilingan tajribali erkaklarda (Exp NLX + Cue) boshlang'ich PERK ifodasidan uy qafasmasidan olingan (Naive Sal-No Cue yoki Naive NLX- No Cue). Bundan tashqari, nalokson bilan muomala qilingan tajribali erkaklarda (Exp NLX + Cue) PERK ekspressi NAc yadrosida sho'rlangan davolangan tajribali hayvonlarga (Exp Sal ​​+ Cue) nisbatan ancha past ediAnjir. 7A; p = 0.002) va mPFC subregions (Anjir. 8A, ACA: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

NAc qobig'ida ikki tomonlama ANOVA tahlillari ta'sir ko'rsatadigan omillar va naloksonni davolashning statistik jihatdan ahamiyatli ta'sirini ko'rsatmadi. Shu bilan birga, juftlik bilan taqqoslash shuni ko'rsatdiki, replikatsiya pozitsiyasi sho'rsiz davolangan jinsiy tajribali guruhda (Exp SAL + Cue) PERK ni keltirib chiqardi, bu esa salbiy ta'sirga ega emasAnjir. 7B; Naive SAL-No Cue: p = 0.0163).

muhokama

Hozirgi o'rganish shuni ko'rsatadiki, VTA jinsiy xulq-atvorda harakat qiluvchi EOP, tabiiy mukofot xulq-atvori VTA dopamin hujayralarining soma kattaligida mustahkam, ammo vaqtinchalik kamayishga olib keldi. Voma dopamin bo'lmagan neyronlarda, shuningdek, yaqin miqdordagi nigra dopamin neyronlarida soma kattaligidagi kamayish kuzatilmadi va bu o'zgarish VTA dopamin hujayralariga xos edi. Ushbu VTA dopamin plastisiyasi surunkali opiat ta'siriga duchor bo'lganlarga o'xshaydi (Sklair-Tavron va uning hamkorlari, 1996; Russo va boshq., 2007; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011) va ekzogen opiat (morfin) mukofotiga o'xshash bardoshlik keltirdi. VTA dopamin plastisiyasini VTA maqsadli hududlarda uzoq muddatli (parvarish qilish), lekin qisqa muddatli (rivojlanish), jinsiy xatti-harakatlarni kuchaytirish va mukofot bilan bog'liq nukleer faoliyat (PERK) uchun juda muhim ekanligini namoyish qildik: NAc va mPFC. Ushbu topilmalar VTA dopamin plastisiyasining uzoq muddat davomida tabiiy mukofotni prognozlashi yoki mukofot xotirasida rag'batlantiruvchi ahamiyatga ega bo'lgan rolini ko'rsatadi.

Jinsiy tajriba keyingi jinsiy xulq-atvorga yordam berish, natijada juftlashishni boshlash va tezkor ishlashni tezroq boshlash (masalan,Balfour va boshq., 2004; Pitchers va boshq., 2010a,b, 2012). Jinsiy xatti-harakatlarning osonlashtirilishi yoki kuchaytirilishi kamida 28 d bilan juftlashdan keyin saqlanadi (Pitchers va boshq., 2012). Bundan tashqari, jinsiy munosabatlarning predmeti bo'lgan jinsiy xulq-atvor va VTA-da MOR ichkiizatsiyasini keltirib chiqardi va mezolimbik tizimda, shu jumladan VTA (NAA), NAA, PFK va BLA (noprofinan va nondopamin neuronlar)Balfour va boshq., 2004, 2006). VTA dopamin neyronlari yaxshi tashkil etilgan taqdirda, reward-associated stimulning rag'batlantiruvchi ahamiyatini o'rganish va unga tegishli rol o'ynashda muhim rol o'ynaydi (Berridge va Robinson, 1998; Berridge va boshq., 2009; Flagel va boshq., 2011) va mukofot predmeti uchun juda muhimdir (Shultz, 2010). Hozirgi topilmalar bizning joriy bilimimiz orqali ushbu mukofot uchun VTA neuroplastisitining ushbu funktsiyalar uchun juda muhim ekanligini ko'rsatib, VTA tomonidan EOP orqali MOR aktivatsiyasiga bog'liqdir. Ayni vaqtda EOP erkak jinsiy xulq-atvorda VTAda faoliyat yuritadigan BOR ligandidir. Garchi ikkala endorfin va enkefalin ham oziq-ovqatlarni mustahkamlash uchun rag'batlantirish motivigaHayward va boshq., 2002), bu erkak jinsiy xulq-atvori uchun o'rnatilishi kerak. Biz ilgari B-endorfinli neyronlarning juftlash vaqtida faollashmaganligini va POMC mRNA-da ortib borayotganligini ko'rsatdik; shuning uchun b endorfinning juftlashuv vaqtida VTA da muhim EOP bo'lishi mumkin emasligini ko'rsatib beradi (Davis va boshq., 2007). Ushbu VTA dopamin plastinkasi mPFC, NAc va VTA da neytral faollik uchun jinsiy mukofotni ta'siri ostiga olish uchun zarur edi - ekologik talablarni bashorat qilish. Bundan tashqari, VTA dopamin plastisiyasi uzoq davom etuvchi jinsiy xulq-atvorning boshlanishi va bajarilishining uzoq muddatli ifodasi uchun juda muhim edi. Aksincha, juft jinsiy aloqaga ega bo'lgan VTA neuroplastikasi jinsiy tajribani (CPP bilan belgilanadi) va jinsiy motivatsiya va ishlashning qisqa muddatli yordamini (jinsiy tajriba davomida yoki 1 d keyinroq) jinsiy javobgarlikka tortish uchun talab qilinmadi.Mehrara va Baum, 1990). Buning o'rniga, ma'lumotlar VTA dopamin neuroplastikasining uzoq muddatga (7 d so'nggi jinsiy tajribadan so'ng; Pitchers va boshq., 2012) jinsiy aloqa mukofotining "istaklari" ni ifodalash va juftliklar haqida gaplashishni kuchaytirishga qaratilganMiller va Baum, 1987; Berridge va Robinson, 1998).

Jinsiy hayotga ega bo'lgan hayvonlarda morfin mukofotiga nisbatan chidamlilik, sichqonlardagi g'ildirakning ta'siriga o'xshashlik, boshqa tabiatni qutqaradigan xatti-harakatlar, naloksonni davolash bilan bloklangan ta'sirLett va boshq., 2001, 2002) va VTA dopamin hujayra plastisitesine (mavjud bulgulara) bog'liq ekanligi belgilangan. Tabiiy yutuqlarga o'xshab, opiat morfin yoki geroinga uchraydigan takroriy ta'sir VTA dopamin soma hajmini vaqtincha kamaytirishga olib keladi (Sklair-Tavron va uning hamkorlari, 1996; Spiga va boshq., 2003; Russo va boshq., 2007; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Bundan tashqari, qisqartirish muddati bilan opiat ta'sir qilish mukofotni bag'rikenglikka sabab bo'ladi, chunki yuqori miqdorda dori-darmon vositalarini mukofotlash assotsiatsiyalarigaShippenberg va boshq., 1987; Russo va boshq., 2007) va o'z-o'zini boshqarish uchun dori vositasini kuchaytirishga yordam beradi (Ahmad va boshq., 2000; Walker va boshq., 2003). Shuning uchun, EOP va opiatlar erta olish vaqtida mukofot bardoshligiga sabab bo'lish uchun umumiy neyral substratlar ustida ishlaydi, bu takroriy ta'sir qilish orqali stimulyatsiyaga qarshi turish uchun kompensatsiya qiluvchi homeostatik mexanizmni aks ettirishi mumkin (Koob va Le Moal, 2005). Buning aksincha, uzoq muddatli opiat giyohvand moddalarining saqlanib qolishi vaqtida bardoshlik preparatga foydali xususiyatlarga sezuvchanlik bilan qaytadi (Xarris va Aston-Jones, 2003; Aston-Jones va Xarris, 2004; Xarris va Gyuirtz, 2004). Qizig'i shundaki, 7-28 d jinsiy aloqada qolish muddati kuzatilgan jinsiy tajriba psixostimulyator mukofot uchun o'zaro sezgirlikni keltirib chiqaradi (Pitchers va boshq., 2010a), birlashtiruvchi indikatorli deltaFosB ekspresyonuna va NAc (dopamin retseptorlari 1 aktivatsiyasiga bog'liq bo'lgan)Pitchers va boshq., 2013). Shunday qilib, jinsiy tajriba tajribasi, bir vaqtning o'zida opiate mukofot bag'rikenglik va psixostimulant mukofotni sezgirlashni keltirib chiqaradi, garchi morfin mukofotiga bag'rikenglikda uzoq davom etadigan jinsiy aloqada bo'lish sinovlari sinovdan o'tkazilsa ham. Preparatning mukofotlanishiga qarshi bo'lgan bu ta'sirlar mezolimbik tizimning turli sohalarida neyral plastisitiklikning turli shakllari orqali vositachilik qilishi mumkin: VTA EOP va dopamin plastisiyasi opiyat mukofotiga bardoshlik (hozirgi o'rganish) ga yordam beradi, NAc deltaFosB ifodasi psixostimulant sensitizatsiyani nazorat qiladi (Pitchers va boshq., 2013). Ushbu ikki voqea, giyohvand qabul qilishAhmad va Koob, 1998, 1999; Ahmad va boshq., 2000, 2002, 2003; Walker va boshq., 2003).

Tabiiy mukofotlanish jarayonida EOP ning VTA dopamin neyronlariga ta'sir ko'rsatadigan molekulyar mexanizmlari noma'lum. IRS2-Akt-mTORC2 usuli VTA-da takrorlangan morfinning sababli soma hajmining pasayishiJaworski va boshq., 2005; Russo va boshq., 2007; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). VTAdagi dopamin neyronlar miqdoridagi takrorlanadigan morfinning kiritilishi o'zgarishlarni miya orqali olingan nörotrofik omil ichi VTA infuziyalari (BDNF; Sklair-Tavron va Nestler, 1995). BDNF, bu yo'lni TrkB signalizatsiyasi orqali faollashtiradi (Russo va boshq., 2007), BDNF uchun yuqori yaqinligi va IRS2-Akt yo'lining bir qismi (Seroogy va Gall, 1993; Numan va Seroogy, 1999) va VTA dopamin va GABA neyronlari bilan ifodalangan. Virusli vektorli gen protokoli yordamida IRS2-Akt yo'lining turli qismlarini pastga tushirish surunkali opiat ta'sirlanishini taqqoslaydi. Bundan tashqari, opiat ta'sirining ta'siri bu signalizatsiyani qayta tiklash orqali qutqarilishi mumkin (Russo va boshq., 2007) va mTORC2 komponentining haddan tashqari ekspluatatsiyasi morfin bilan indikatsiyalangan VTA dopamin soma miqdorini kamaytiradi (Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Shuning uchun, surunkali opiatlarning VTA dopamin soma o'lchamiga ta'sirini o'rganuvchi oldingi ish, IRS2-Akt-mTOR yo'lining morfin bilan indikatsiyalangan pastki regulatsiyasi ham ushbu ta'sir uchun etarli va zarurMazei-Robison va Nestler, 2012). Shunday qilib, jinsiy tajribaning VTA dopamin nevroplastikasiga ta'siri BDNF va IRS2-Akt-mTORC2 yo'llari orqali ham vositachilik qilishini spekulyatsiya qiladi.

Xulosa qilib aytganda, VTA neuroplastikasi, tabiiy ravishda mukofotlash xatti-harakatlari, xususan, takroriy erkak jinsiy xatti-harakatlari bilan bog'liq. Ayniqsa, EOP VTA'ta dopamin soma hajmini kamaytiradi, bu hipodopaminerjik tizimga olib keladigan nervlarning ta'sirlanishiga va kam dopamin ishlab chiqarilishiga bog'liq deb faraz qilinadi va jinsiy mukofotni oldindan belgilab qo'yadigan maslahatlarga javoban mezolimbik tizimini o'zgartiradi. Bundan tashqari, VTA neuroplasticity rag'batlantirish motivatsiyasi va mukofot xotira uchun muhim, ammo jinsiy xatti-harakatlarning hedonik ta'siri uchun emas. Va nihoyat, VLA neuroplastisitivligi, tabiiy mukofotlanish xatti-harakatlaridan kelib chiqqan holda, qisqa muddat davomida mukofotni bekor qilish opiat mukofotiga ta'sir qiladi va shuning uchun giyohvandlik rivojlanishining zaifligiga ta'sir qilishi mumkin.

Izohlar

  • Yanvar oyi 12, 2014 bo'ldi.
  • Tahrir May 17, 2014 bo'ldi.
  • Qabul qilingan may 20, 2014.

  • Ushbu tadqiqotlar Kanada Sog'liqni saqlash tadqiqotlari institutining LMC va tabiiy fanlar va muhandislik tadqiqotlari kengashiga KKP

  • Mualliflar hech qanday raqobat qiladigan moliyaviy manfaatlarni e'lon qilmaydi.

  • Xat yozishni doktor Lique M. Coolen, Missisipi tibbiyot markazi, Fiziologiya va biofizika kafedrasi, 2500 Shimoliy shtati ko'chasi, Jekson, milodiy 39216-4505ga yuborish kerak. [elektron pochta bilan himoyalangan]

Manbalar

  1. ↵
    1. Agmo A

    (1997) Erkaklar jinsiy aloqasi. Brain qobig'i Brain qoldiqlari protokoli 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ahmad SH,
    2. Koob GF

    (1998) O'rtacha dan ortiqcha preparatni qabul qilish: hedonik nuqtada o'zgarish. fan 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ahmad SH,
    2. Koob GF

    (1999) Sıçanlarda eskalasyondan keyin kokainning o'z-o'zini boshqarish uchun belgilangan nuqtada uzoq davom etadigan o'sish. Psixofarmakologiya 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ahmad SH,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Preparatni eskalatsiyalash tarixi bilan kalamushlarda geroinni qabul qilishda turtki ko'payib bormoqda. Nöropsikofarmakologiya 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ahmad SH,
    2. Kenny PJ,
    3. Koob GF,
    4. Marko A

    (2002) Giyohvand allostazlari uchun neyrobiologik dalillar kokain iste'molini kuchaytiradi. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ahmad SH,
    2. Lin D,
    3. Koob GF,
    4. Parsons LH

    (2003) Kokainning o'z-o'zini boshqarishini kuchaytirishi o'zgargan kokainga asoslangan nukleus akumbens dopamin darajasiga bog'liq emas. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Jones G,
    2. Xarris GC

    (2004) Uzoq muddat davomida dori izlashni kuchaytirish uchun miya substratlari. Neyrofarmakologiya 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. Coolen LM

    (2004) Jinsiy xulq-atvor va jinsga bog'liq ekologlar erkakning kalamushlarida mezolimbik tizimini faollashtiradi. Nöropsikofarmakologiya 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Jigarrang JL,
    3. Yu L,
    4. Coolen LM

    (2006) Erkak ratida jinsiy xulq-atvorni keyin medial prefrontal korteksdan neyron faollashuviga ta'sir qilish. Neuroscience 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Neurofilament oqsillari va mezolimbik dopamin tizimi: surunkali morfin va surunkali kokain tomonidan rat ventral tegmental sohada umumiy tartibga solish. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berrij KC,
    2. Robinson TE

    (1998) Dopaminning mukofotda qanday rol o'ynashi mumkin: hedonik ta'sir, mukofot olish yoki rag'batlantirish talablari? Brain Res Brain Qol Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berrij KC,
    2. Robinson TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Mukofotlarni qismlarga ajratish: "sevish", "istak" va o'rganish. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Blum K,
    2. Verner T,
    3. Carnes S,
    4. Carnes R,
    5. Bowirrat A,
    6. Giordano J,
    7. Oskar-Berman M,
    8. Gold M

    (2012) Jins, giyohvand moddalar va rok-n-roll: umumiy genetik polimorfizmlarning vazifasi sifatida umumiy mesolimbik faollashuvini faraz qiladi. P Psixoaktiv preparatlar 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Chu NN,
    2. Zuo YF,
    3. Meng L,
    4. Lee DY,
    5. Han JS,
    6. Cui CL

    (2007) Periferik elektr stimulyatsiyasi surunkali morfin bilan ishlangan kalamushlarda ventral tegmental sohada hujayra o'lchamini pasaytirish va BDNF darajasini oshirdi. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Davis B,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Jigarrang JL,
    4. Amstaldan KA,
    5. Coolen LM

    (2007) Erkak kalamushlarida jinsiy xulq-atvorda emas, balki umumiy xushyoqish davrida POMC neyronlarning faollashishi. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Phillips AG

    (1997) Erkak kalamushlarida Coolidge ta'siri davomida yadrodagi accumbens dopamin effluxidagi dinamik o'zgarishlar. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel SB,
    2. Clark JJ,
    3. Robinson TE,
    4. Mayo L,
    5. Czuj A,
    6. Willuhn I,
    7. Akers CA,
    8. Klinton SM,
    9. Phillips pe,
    10. Akil H

    (2011) Rag'batlantiruvchi-mukofotni o'rganishda dopamin uchun tanlangan rol. tabiat 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Pichoqlar KK,
    3. Balfour ME,
    4. Coolen LM

    (2010a) Aralashtirilgan lazzatlar: giyohvand moddalarning inson va hayvon modellarida jinsiy xatti-harakatlariga ta'sirini o'rganish. Horm Behav 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Aqlli RA,
    4. Lehman MN,
    5. Coolen LM

    (2010b) Metamfetamin erkak sichqonlarda jinsiy xatti-harakatni tartibga soluvchi neyronlarning subpopulyatsiyalariga ta'sir qiladi. Neuroscience 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Harris AC,
    2. Gewirtz JC

    (2004) O'tkir morfindan chiqarib tashlash paytida ko'tarilgan bosh og'rig'i: opiatning tortilishi va xavotirlik modeli. Psixofarmakologiya 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Xarris GC,
    2. Aston-Jones G

    (2003) Opiatni yo'qotishdan keyingi turtki va ta'lim almashinuvi: mukofotni qayta ishlash muddatini uzaytirishning dalili. Nöropsikofarmakologiya 28: 865-871.

  22. ↵
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. Past MJ

    (2002) Beta-endorfin va enkefalin yo'q sichqonlarda tanlangan mukofot defitsiti. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel B.G.,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Rada P.

    (2009) Tabiiy giyohvandlik: kalamushlarda shakar giyohvandligiga asoslangan yurish-turish va elektron model. J. Addict med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Narkologik taqiqlash mexanizmlari: mukofot bilan bog'liq o'rganish va xotiraning ahamiyati. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) GABA (A) retseptorlari blokirovkasi oldingi ventral tegmental sohada, kalamushlar yadroidagi akumbenslarda dopaminning hujayra tashqari darajasini oshiradi. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. Seeburg DP,
    4. Hoogenraad CC,
    5. Sheng M

    (2005) Rapamisin yo'lining fosfoinositid-3'-kinaz-Akt-darrandalar maqsadi orqali dendritik tortishni nazorat qilish. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Jonson SW,
    2. Shimoliy ra

    (1992) Opioidlar mahalliy internöronlarning hiperpolarizatsiyasi bilan dopamin neyronlarini qo'zg'atadi. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Klitenick MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Opioidlar va GABA tomonidan ventral tegmental sohada somatodendritik dopaminning tarqalishini tartibga solish: in vivo mikrodializ tekshiruvi. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Koob GF,
    2. Le Moal M

    (2005) Mukofotni neyroxirurgiya va narkomaniyaning "qorong'i tomoni" ning plastisitivligi. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette DA

    (1978) Immunofluoresans mikroskopi uchun ishlab chiqilgan o'rnatish vositasi. Am J Clin Patol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT

    (2001) Nalokson kalamushlarda ishlaydigan g'ildirak bilan indikatorlangan konditsionerning afzalligini oshiradi. Physiol Behav 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh uz Top reyting,
    4. Flynn G

    (2002) g'ildirak bilan ishlashning oldingi tajribasi morfinning foydali ta'siriga nisbatan chidamliligini oshiradi. Farmakol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Matthews RT,
    2. Germaniya shahar

    (1984) Sichqoncha ventral tegmental hududini dopamin neuronlarini morfin bilan uyg'otish uchun elektrofizyologik dalillar. Neuroscience 11: 617-625.

  34. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Koo JW,
    3. Fredman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Vinish M,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Galli A,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Horvath MC,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Hurd YL,
    18. Cheer JF,
    19. Xon MH,
    20. Russo SJ,
    21. va boshq.

    (2011) mTOR signalizatsiyasi va ventral tegmental hududida dopamin neyronlaridagi morfin ta'siridagi adaptatsiyalardagi neyronal faollik. Neyron 72: 977-990.

  35. ↵
    1. Mazei-Robison MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Ventral tegmental soha va lokus koeruleus katekolamin neuronlarining opiat bilan bog'liq molekulyar va hujayrali plastinkasi. Sovuq Bahor Harb Perspekt Med 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Naloxone ifloslanmagan ayol uchun shartli joyga moslashuvchan javobning erkak sichqonlari tomonidan emas, balki ifodani buzadi. Psixofarmakologiya 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Ayol kemiruvchilarida jinsiy tajriba: hujayra mexanizmlari va funktsional oqibatlari. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Miller RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Nalokson kastratsiya qilinganidan keyin erkaklar kalamushlarida estratsion ayolning juftlashuvi va shartli joyini afzal ko'radi. Farmakol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. Mitchell JB,
    2. Stewart J

    (1990) Vita ichi opiatlarni in'ektsiya qilish bilan bog'liq erkak ratlarda jinsiy xulq-atvorga yordam berish. Farmakol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J.

    (2006) MAPK signalining o'ziga xosligi: to'g'ri joyda to'g'ri vaqtda. Trends Biochem Sci 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Nestler EJ

    (2012) Giyohvandlikning transkripsiya mexanizmlari. Klinik Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Watson C

    (2013) Stereotaksik koordinatlardagi rat miyasi (Academic, Boston), Ed 7.

  • ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Rikhtand NM,
    5. Yu L,
    6. Coolen LM

    (2010a) Mezolimbik tizimda neyroplastiklik tabiiy mukofot bilan va keyinchalik mukofotni bekor qilish bilan bog'liq. Biol psixiatriyasi 67: 872-879.

  • ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2010b) DeltaFosB yadrodagi akumbenslarda jinsiy mukofotning ta'sirini kuchaytirish uchun juda muhimdir. Genlar Brain Behav 9: 831-840.

  • ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Schmid S,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Vang X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. Coolen LM

    (2012) Tabiiy mukofotlar tajribasi AMPA va NMDA retseptorlari taqsimotini va yadro gabaritlarida ishlaydigan funksiyani o'zgartiradi. PLoS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Pichoqlar KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. Coolen LM

    (2013) Tabiiy va dori-darmonlar DeltaFosB bilan umumiy neytral plastisitik mexanizmlar ustida ish olib boradi. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. Roux PP,
    2. Blenis J.

    (2004) ERK va p38 MAPK faollashtirilgan oqsil kinazlari: turli xil biologik funktsiyalari bilan protein kinazlarining oilasi. Mikrobiol mol Biol Rev 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. Bolanos CA,
    3. Theobald, ShU,
    4. DeCarolis NA,
    5. Renthal Vt,
    6. Kumar A,
    7. Winstanley CA,
    8. Renthal NIMA,
    9. Wiley MD,
    10. O'z DW,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) IRS2-Akt yo'llari midbrain dopamin neyronlarida xulq-atvorni va opiatlarga nisbatan uyali javoblarni tartibga soladi. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010) Dopamin neyronlarining bir nechta funktsiyalari. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB,
    2. Gall CM

    (1993) Nörotrofinlerin midbrain dopaminerjik nöronlarla ifodasi. Exp Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A

    (1987) Opioidlarning motivatsion xususiyatlari: Delta-retseptorlarning faollashuvini mustahkamlash jarayonlarini qo'llab-quvvatlovchi dalillar. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) Morphin va neyrotropinlar, NT-3, NT-4 va BDNF ning in vitro lokus koeruleus neyronlariga ta'siri. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Shi WX,
    3. Lane SB,
    4. Xarris HW,
    5. Bunney BS,
    6. Nestler EJ

    (1996) Kronik morfin mezolimbik dopamin neuronlarining morfologik o'zgarishlarini keltirib chiqarmoqda. Proc Natl Acad Sci AQSh 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. Serra GP,
    3. Puddu MC,
    4. Foddai M,
    5. Diana M

    (2003) VTAdagi morfinni olib tashlash natijasida paydo bo'lgan anomaliyalar: konfokal lazer skanerlash mikroskopi. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Miya xaritalari: Sichqon miya tuzilishi (Academic, San-Diego), Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Pichoqlar KK,
    5. Coolen LM

    (2009) Erkak kalamushlarida jinsiy mukofot: jinsiy tajribaning oqib chiqishi va bo'shashish bilan bog'liq bo'lgan shartli joyga bog'liq afzalliklari. Horm Behav 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Konditsioner joy afzalligi (CPP) paradigm bilan mukofotni o'lchash: so'nggi o'n yillik yangilanish. Addict Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. Van Furth WR,
    2. Van Ree JM

    (1996) Jinsiy motivatsiya: ventral tegmental sohada endogen opioidlarning ishtiroki. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. Van Furth WR,
    2. Wolterink G,
    3. Van Ree JM

    (1995) Erkaklar uchun jinsiy axloqni tartibga solish: miya opioidlarini va dopaminni jalb qilish. Brain Res Brain Qol Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. Inturrisi Idoralar,
    5. Koob GF

    (2003) Surunkali opioid ta'sir qilish kalamushlarda erinni o'z-o'zini boshqarishning ko'payishiga olib keladi. Farmakol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. Yosh KA,
    2. Gobrogge KL,
    3. Liu Y,
    4. Wang Z

    (2011) Jinsiy aloqaning neyrobiologiyasi: ijtimoiy-monogam kemiruvchidan tushunchalar. Oldin neyroendokrinol 32: 53-69.

    •