Neuroscience jurnali, 6 sentyabr 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Erik J. Nestler4va Jeyn R. Teylor1
1.Xat yozishni Jane R. Teylor, Psixiatriya bo'limi, Molekulyar psixiatriya bo'limi, Yel universiteti tibbiyot maktabi, Ribicoff tadqiqot institutlari, Konnektikut ruh salomatligi markazi, 34 Park ko'chasi, New Haven, CT 06508-ga yuborish kerak.[elektron pochta bilan himoyalangan]
mavhum
Motivatsiya o'zgarishlari psixiatrik kasalliklarning bir nechta patofizyologiyasida, jumladan modda va ekspluatatsiyaga olib kelgan. Noqonuniy ekspluatatsiyaga yoki stressga duch kelgan ta'sirga duchor bo'lish, yadrodagi akumbenslarda (NAc) va dorsal striatumda DFosB ning transkriptsion faktori doimiy ravishda dopamin-regulyatsiyalangan signallarda neuroadaptatsiyaga hissa qo'shishi uchun faraz qilingan oqibatlarga olib kelishi ma'lum. Shunga qaramay, DFFning o'ziga xos ishtiyoqli xatti-harakatlarining tuzatilishida o'ziga xos ishtiroki haqida kam narsa ma'lum. Biz bu erda DFOSB ning DFOSB ning ingichka vaktsinasida bittsen sichqonlarining NAc va dorsal striatumida, yoki ayniqsa, kalamushlarning NAc yadrosida virus bilan bog'langan gen transferi orqali, oziq-ovqat bilan mustahkamlash instrumental ishlashini va progressiv nisbatlarga javob berishini ko'rsatamiz. Oldindan qaytarilgan kokain, amfetamin, MDMA [(+) - 3,4-metilendioksimetamfetamin], yoki kalamushlarda nikotin ta'siridan keyin juda ko'p shunga o'xshash ta'sirchan ta'sirlar aniqlandi. Ushbu natijalar DFOSB tomonidan motivatsion jarayonlarning kuchli tartibga solinishini ko'rsatadi va NAc yadrosi ichida DFB ning indüksiyonu orqali genin ifodalangan dori-dori ta'sirining o'zgarishi instrumental harakatlarga motivatsion ta'sirlarning ta'sirida muhim rol o'ynashi mumkinligini isbotlaydi.
Kirish
Takrorlanadigan dori ta'siriga o'tish gen transkripsiyasida vaqtinchalik dinamik o'zgarishlarni keltirib chiqaradi, bu esa nukleus akumbenslardagi (NAc)Nestler, 2004). Ushbu miya hududi ham giyohvand moddalar va tabiiy mustahkamlash jarayonlarida muhim rol o'ynaydi (Kelley va Berrij, 2002), shunga qaramasdan, oziq-ovqat kabi nefrufli, ishtahani mustahkamlovchi harakatlarga ta'sir qiluvchi transkripsiyalik omillar haqida juda oz narsa ma'lum. DFOSB surunkali dori ta'sirida NAc va dorsal striatumda faollashtirilgan transkriptsiya faktoridir (Konradi va boshq., 1994; Nye va boshq., 1995; Chen va boshq., 1997; Pich va boshq., 1997; Shaw-Lutchman va boshq., 2003) va kompulsiv g'ildirakchalar (Werme va boshq., 2002). Shuningdek, ushbu hududlarda surunkali stressning bir necha shakllariPerrotti va boshq., 2004). Stroliatal DFQning indüksiyasiga aloqador dori-darmonlarni takomillashtirishni takomillashtirish yaxshi tashkil etilgan (Kelz va boshq., 1999; Colby va boshq., 2003; Zachariou va boshq., 2006). Biroq, bu hududlarda yuqori darajadagi DFB darajalarining tabiiy nazorat qiluvchi shaxslar tomonidan ta'sirlangan instrumental xatti-harakatlar oqibatlari ma'lum emas.
Instrumental javoblarning bajarilishi giyohvand moddalar bilan bog'liq xatti-harakatlarning zarur tarkibiy qismidir.Jentsch va Taylor, 1999; Berk va Hyman, 2000; Berridge va Robinson, 2003; Everitt va Robbins, 2005). NAc giyohvandlik uchun ahamiyatga ega bo'lgan instrumental xatti-harakatlarning ko'p jihatlariga jalb qilingan (Ballein va Killkross, 1994; Corbit va boshq., 2001; de Borchgrave va boshq., 2002; Di Ciano va Everitt, 2004b; Everitt va Robbins, 2005). Shu sababli NAc ichidagi giyohvand moddalar bilan bog'liq bo'lgan neyroxoddastinglar chora-tadbirlarning bajarilishiga ta'sir qilishi mumkin. Haqiqatan ham, surunkali giyoh ta'sir qilish sukroz bilan mustahkamlangan instrumental ko'rsatkichni oshiradi (Miles va boshq., 2004) va NAc yadrosidagi nevroplastikani blokirovka qilishni nazarda tutadigan manipulyatsiya, jumladan, PKA inhibisyonu (protein kinaz A) yoki protein sintezi, oziq-ovqat mukofoti asboblaridagi javoblarga (Baldwin va boshq., 2002a; Hernandez va boshq., 2002). NAc yadrosi shuningdek, shartli ta'sirlarning instrumental xatti-harakatlarga motivatsion ta'siri (Parkinson va boshq., 1999; Corbit va boshq., 2001; Hall va boshq., 2001; Di Ciano va Everitt, 2004a; Ito va boshqalar, 2004), nevrologik substratni ta'minlaydigan, DFOSB indüksiyonu, oziq-ovqat, suv yoki zo'ravonlik kabi giyohvand tuzatuvchilari uchun instrumental ishlash va motivasyona kuchli ta'sir qilishi mumkin.
Bu erda DFF ning oziq-ovqatga asoslangan instrumental xulq-atvoriga ta'siri ikkita qo'shimcha genetik yondoshuvdan foydalanib o'rganildi: (NAX-TTA × TetOp-DFosB) va (1) overspesifikatsiya (NAX) va NAc ning dorsal striatumida (2) NAc yadrosida DFOSB ning, xususan, kalamushlarda virusli vositalar bilan almashinuvini qo'llash orqali. Biz, shuningdek, DFOSning o'sishiga erishilganligi sababli, kokain, amfetamin, (+) - 3,4-metilendioksimetamfetamin (MDMA) yoki nikotinga oldindan takroriy maruziyetning progressiv nisbat jadvali yordamida oziq-ovqat bilan mustahkamlangan instrumental javobni va / dori-darmonli o'zini o'zi boshqarish uchun ko'rsatilgandek (Horger va boshq., 1990, 1992; Piazza va boshq., 1990; Vezina va boshq., 2002; Miles va boshq., 2004). Bizning natijalarimiz DFSning instrumental xulq-atvoriga ta'sirini ko'rsatmoqda va bu transkriptsiya faktori NAc yadrosida motivatsion funktsiyani tartibga soluvchi vosita sifatida harakat qilishini taklif qiladi.
Materiallar va usullari
Hayvonlar va hayvonlarni parvarish qilish
Eksperimental darajada sodda Sprague Dawley kalamushlari Charlz River Laboratories (Wilmington, MA) dan olingan. Erkak bitransgenik 11A sichqonlari neyronga xos enolaz (NSE) -tTA tetratsiklin transaktivator oqimi (A liniyasi) va TetOp (tetratsiklin-javob beruvchi promoter) -DFosB (chiziqli 11) ifodalovchi sichqonlarni ifodalovchi homozigot transgenli sichqonlarning o'zaro faoliyatidan olingan; ota-onalar chiziqli aralashgan fonda saqlangan (50% ICR va 50% C57BL6 × SJL) (Chen va boshq., 1998; Kelz va boshq., 1999). Ushbu bitransgenik 11A sichqonlari faqat DFOSB ni ifodalaydi: (1) har ikkala transgen bir xil hujayradagi mavjud va (2) tTA bilan transkripsiya faollashuvi doksisiklin kabi tetratsiklin antibiotiklari mavjudligi bilan inhibited emas. Shu sichqonlarga doksisiklinni administratsiyasi DFF ekspresyoni bo'yicha vaqtinchalik nazoratni amalga oshirishi va rivojlanish vaqtida ifodalanishini oldini olish uchun ishlatilishi mumkin; doksisiklinni administratsiyasi DFOSBning aniqlanmagan qochqinning ifodasi bilan bog'liqChen va boshq., 1998; Kelz va boshq., 1999). Bundan tashqari, 11A bitransgen sichqonlarining liniyasi hozirgi tajribalar uchun tanlangan, chunki ular asosan dynorphin-containing striatal neyronlar (har ikkala NAc va dorsal striatum) bilan cheklangan, surunkali dori vositasida DFBning induksiyasiga juda o'xshash bir iborani ko'rsatishadi ta'sir qilish (Kelz va boshq., 1999). Bundan tashqari, DFBning bu striatal ekspresyoni miqdori oldin belgilandi (Chen va boshq., 1998; Kelz va boshq., 1999). Sichqon Texas shtatining janubi-g'arbiy qismida yaratilgan va Yale majmuasida saqlanib qolgan va sinovdan o'tgan. Homiladorlik va rivojlanish vaqtida barcha sichqonlar 8-9 haftasiga qadar ichimlik suvida 100 ig / ml kontsentratsiyasida, dorilariklinada saqlanib, TetOp-ga asoslangan transgenlarni "off" holatda saqlash uchun ma'lum bo'lgan va 6 DFosB ifodasi maksimal bo'ladi (doksitsiklinKelz va boshq., 1999). Barcha tajribalar littermate bitransgen sichqonlari bilan doksisiklinga qarshi solishtirishni o'z ichiga oladi, bu o'z-o'zidan maqsadi harakatlarga ta'sir qilmaydi (Kelz va boshq., 1999; McClung va Nestler, 2003; Zachariou va boshq., 2006).
Barcha eksperimental sub'ektlar 12 h nurlari / quyuq aylanish ostida (7: 00 AM va 7: 00: 7 da yonadi) ostida nazorat ostida harorat va namlik sharoitida juftlar (kalamushlar) yoki guruhlar (sichqonlar, PM). Har qanday o'rganishdan avval ular uchun turar joylarga moslashish uchun kamida XNUMX d ruxsat berilgan. Hayvonlar har doim suvga kirish huquqiga ega edi va quyida batafsil aytib o'tilganidek, oziq-ovqatlarga kirish cheklangan. Barcha hayvonlardan foydalanish laboratoriya hayvonlarini saqlash va ulardan foydalanish bo'yicha Milliy Sog'liqni Saqlash bo'yicha milliy institutlarga muvofiq olib borildi va Texas janubi-g'arbiy va Yel universitetining Hayvonlarni parvarish qilish va foydalanish bo'yicha qo'mitalari tomonidan tasdiqlandi.
Preparatlar
(NIDA) tomonidan taqdim etilgan kokain gidroxloridi, D-amfetamin sulfat (Sigma, Sent-Luis, MO), MDMA gidroxloridi (NIDA tomonidan taqdim etilgan) va (-) - nikotin vodorodli tartrat (Sigma ) steril fiziologik sho'r suv bilan (0.9%) eritilgan va intraperitonal ravishda 5 ml / kg (sichqonchani) yoki 2 ml / kg (kalamush) hajmida AOK qilingan. Nikotin eritmasining pH in'ektsiyasidan oldin natriy bikarbonat bilan o'rnatildi.
Virusli vektor
Virus orqali yuborilgan genlarni ilgari aytilganidek amalga oshirildi.Carlezon va boshq., 1998; Perrotti va boshq., 2004). Muxtasar aytganda, o'ziga xos oqsillarni kodlovchi cDNAlar, herpes simplex virusi (HSV) amplikon HSV-PrPUC ichiga kiritildi va yordamchi 5dl1.2 yordamida virusga paketlandi. HSV-LacZ ning ekspluatatsiyasini boshqaruvchi vektorlar, BF-galaktozidaz nazorat qiluvchi protein yoki HSF-DFB uchun kodlash, keyin DFOSB uchun kodlash tajriba protokoli bo'yicha NAc yadrosiga kiritildi.
Sinov jarayonlari
Xulosa.
1 eksperimenti ilgari takrorlangan dori ta'sirining oziq-ovqat bilan mustahkamlash instrumental ishlashi va progressiv nisbatlarga ta'sirini o'rganib chiqdi. Sichqoncha tasodifiy besh tajriba guruhiga bo'lingan (n = 9-10 / group). Ushbu guruhlar kuniga ikki marta kuniga ikki marta (intraperitoneal, 9, 00 va 5: 00-PM) in'ektsiya bilan sho'r suv yoki quyidagi preparatlardan birini oldi: nikotin, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; giyoh, 15 mg / kg; yoki 2.5 ketma-ket kunida amfetamin, 15 mg / kg. Dozalar oldin nashr etilgan ma'lumotlarga asoslangan holda tanlangan (Teylor va Jentsch, 2001; Olausson va boshq., 2003), va dori-drenaj qilingan lokomotor stimulyatsiyasi 1 va 15 davolash kunlarida kuzatildi. 5 d olib tashlanganidan so'ng, hayvonlar 10 ketma-ketligi uchun instrumental javob berishga o'rgatilgan va keyinchalik kelgusi kunda javob beradigan progressiv nisbatda sinovdan o'tgan. Ikki hayvon statistik tahlildan chiqarib tashlandi, chunki ular uchta yakuniy mashg'ulotlarning har birida bir nechta faol qo'zg'aluvchan javob bera olmadilar.
2 va 3 eksperimentlari DFOSB ning invertible striatal ortiqcha tushuntirishlari asboblarning ishlashida va mustahkamlashning progressiv nisbati bo'yicha javob berishda bittsenjenik sichqonlardagi ta'sirini o'rganishdi. Ushbu sichqonlarda DFBning indüklenebilen aşırı ekspresyonu, ilgari takrorlanadigan dori ta'sirini lokomotor faoliyatda va kondisyonlu joy afzalliklari paradigmalarındaKelz va boshq., 1999; Zachariou va boshq., 2006). Ushbu sichqonlarga Striatal DF ning xos hissiy jarayonlardagi ishtiroki haqida muhim ma'lumot berilishi mumkin. Genotipli erkak sichqonchani doksisiklinada ushlab turildi yoki 8 xaftalik yoshdagi suvga tegishi mumkin edi. Ekspertizalar 6 haftasida doksisiklin chiqishi bilan boshlangan edi, shunda transgen ekspressioni maksimal (Kelz va boshq., 1999). 2 eksperimentida hayvonlar (n = 16) oziq-ovqat taqiqlangan va 10 ketma-ket kunlar uchun quyida tavsiflangan instrumental protsedura bo'yicha o'qitildi (quyida Qarang: Instrumental javob berish va progressiv raqamli test). Instrumental sinovdan o'tganidan so'ng, bu sichqonlarda kokain bilan indikator lokomotor stimulyatsiya baholandi. 3 eksperimentida sichqonlarning alohida guruhi (n = 18) 10 ketma-ket kunida instrumental javobda eng ko'p 50 tekshiruvi o'tkazilgan sharoitlarda o'qitildi. 11 kunida barcha sichqon progressiv nisbatlarga javoban sinovdan o'tkazildi. 12 kunida biz takomillashgan nisbatlarga javob berish orqali valyuta devalvatsiyasi ta'sirini aniqladik.
4 va 5 eksperimentlari Virus bilan bog'liq bo'lgan DFFning haddan tashqari ekspresasini NAc ichida aniq o'rganishdi. 4 eksperimenti DF ekspresyonining instrumental ishlashga ta'sirini sinab ko'rdi. Bu erda, kalamushlarni NAc yadrosida HSV-DFosB (n = 8) yoki HSV-LacZ (n = 8) bilan infuz qilingan va keyinroq 40 soatdan boshlab instrumental usulda o'rgatilgan. 10 kundalik mashg'ulotlaridan so'ng, quyida ko'rsatilganidek, lokomotor faollik monitoringi uskunasidagi barcha hayvonlar uchun asosiy faoliyat darajalari baholandi (quyida qarang: Lokomotorlik faoliyati). 5 eksperimenti, NAc FFB eksperksepsiyasini, progressiv nisbatlarga javob berishga ta'sirini baholadi. Bu erda, kalamushlarni dastlab 15 ketma-ketligi uchun tajriba guruhlariga ajratilgan va keyin NAc yadrosida HSV-DFB (n = 8) yoki HSV-LacZ (n = 7) bilan infuz qilingan. Hayvonlar testdan o'tkazilmadi va 4 d uchun DFOSB ifodasini yig'ish uchun ruxsat berilmagan. 5 kunida infuziondan keyin barcha hayvonlar progressiv nisbatlar jadvali bo'yicha qo'lni bosish uchun sinovdan o'tkazildi. Sinovning oxirgi kuni o'tkazilganidan so'ng, barcha kalamushlar o'ldirildi va NAc yadrosidagi infuzion kanüllerin joylashishi histokimyasal sifatida tasdiqlandi. Infuzionli kanüllarni joylashtirishga asoslangan holda, ikkita kalamush 4 va 5 eksperimentidan bitta sichqonni tashladi.
Geni ifodalashning o'ziga xos xususiyati hayvonlarning alohida guruhida yaratilgan. Bu erda HSV-LacZ NAc yadrosi ichiga kiritildi va hayvonlar 3 d keyinchalik o'ldirildi. B-galaktosidazning ifodasi keyinchalik immünohistokimyoviy sifatida baholandi.
Lokomotorlar faoliyati.
Yer qimirlashi faolligi o'lchov metodikasi yordamida o'lchandi (Digiscan hayvonlarning faolligi monitori, Omnitech Electronics, Columbus, OH). Faoliyat o'lchagichlari infraqizil fotosensorlarning ikkita qatori bilan jihozlangan, har bir qatorda 16 sensordan iborat 2.5 sig'imi alohida joylashgan. Faoliyat o'lchagichlari Micropro dasturidan (Omnitech Electronics) foydalangan holda kompyuter kompyuteri tomonidan to'plangan faoliyat hisoblagichlari tomonidan nazorat qilingan.
Tajriba hayvonlari shaffof plastik qutilarga (25 × 45 × 20 sm) joylashtirilgan, ular faoliyat o'lchagichlariga joylashtirilgan. Hayvonlar birinchi navbatda 30 min uchun harakatlanishni ro'yxatga oluvchi asboblarni joylashtirishga ruxsat berildi. Ba'zi tajribalarda hayvonlar keyinchalik eksperimental dizaynga muvofiq kokain, amfetamin, nikotin yoki transport vositasiga chiqarildi va qutilarga joylashtirildi. Keyinchalik 60 min uchun lokomotor harakatlar qayd etildi va 5 mindan boshlab giyohvand moddalarni inyeksiya qilishdan keyin nospetsifik bo'lmagan in'ektsion hipermotiliyani oldini olish uchun boshlandi. Barcha tajribalar hayvonlarning engil fazasi (9: 00 AM va 6: 00 PM orasida) davomida amalga oshirildi.
Instrumental javob va progressiv raqamli test.
Instrumental javoblar MedPC dasturlari (Med Associates, St Albans, VT) tomonidan boshqariladigan sichqonlarga (30 × 20 × 25 sm) yoki sichqonchani (16 × 14 × 13 sm) ishlatish uchun standart operatsion kameralar yordamida baholandi. Har bir xona tashqi shovqin ta'sirini kamaytirish uchun oq shovqin generatori va foniy bilan jihozlangan ovoz chiqaradigan tashqi kameraga joylashtirildi. Orqa devorga o'rnatilgan uy yorug'lik kamerani yoritdi. Pellet dispenseri jurnali mustahkamlash uchun oziq-ovqat pelletlarini (20 yoki 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) yetkazib berdi. Bosh yozuvlari reinforcer idishining ustiga o'rnatilgan qilingan fotosel tomonidan aniqlandi. Ushbu jurnalda rag'batlantiruvchi yorug'lik bo'ldi. Sichqonlar uchun jurnalning har bir tomoniga bitta qo'l qo'yildi. Sichqoncha uchun kameralarning orqa devoriga (masalan, reinforcer jurnali qarshisida) ikkita nosepoke teshik qo'yilgan.
5 d o'qitish boshlanishidan oldin hayvonlarga kuniga oziq-ovqat uchun 90 daqiqaga ruxsat berildi va ularning uy qafaslarida donga asoslangan oziq-ovqat pelletlari (sichqonlar, 20 mg, kalamushlar, 45 mg) ta'sirlandi. Sinov muddati davomida oziq-ovqat pelletlari intervalgacha operativ xonalarda xatti-harakat protokoli bo'yicha (pastga qar.), Shuningdek, kunlik testdan so'ng 90 min dan boshlanib, 30 min uchun uy qafasida cheksiz miqdorda mavjud edi. Oziq-ovqat mahsulotlarini taqsimlash jadvali har bir jonivorning o'ziga xos to'yinganlik darajasiga erishish imkonini beradi va dominant va pastki hayvonlar o'rtasidagi raqobatning o'zgaruvchanligini kamaytiradi. Bizning qo'limizda ushbu jadval dastlabki vazn yo'qotishdan keyin sekin vazn olish imkonini beradi ~85-90% bepul ovqatlanish og'irligi. Hayvonlarning og'irliklari eksperiment davomida kuzatildi.
Barcha sub'ektlar dastlab 2 d uchun test apparati bilan jihozlangan; Ushbu seanslar davomida oziq-ovqat pelletlari reinforcer jurnali ichiga 15 (FT-15) dasturida belgilangan. Ertasi kundan boshlab, sub'ektlar kuniga 10 kunlik mashg'ulotlarni oldi. Oziq-ovqat mahsulotlariga javob berish oldindan nashr etilgan asbob-uskunalar bilan ta'minlash vositalariga asoslangan holda sinovdan o'tkazildi (Baldwin va boshq., 2002b). To'g'ri (ya'ni, faol) qo'l / nosepokega javob berishda boshqa (faol bo'lmagan) qo'lda javob berishda dasturlashtirilgan oqibatlar yo'q edi. Faol nosepoke yoki qo'lni (chap / o'ng) pozitsiyasi barcha eksperimental guruhlar uchun muvozanatlashgan. Jarayon talablarini bajarish (quyida ko'rib chiqing) jurnalni ogohlantiruvchi nurning paydo bo'lishiga sabab bo'ldi, keyin esa birgina oziq-ovqat pelletini etkazib berish bilan 1-ni keyinroq bajarildi. Ikki soniyadan keyin ogohlantiruvchi nur o'chirilgan. Birinchi 10 takomillashuvi qat'iy nisbaga (FR1) muvofiq javob berishni muvaffaqiyatli tugatgandan so'ng erishildi, undan so'ng granulalar o'zgarmaydigan nisbati (VR2) bo'yicha javob berilgandan so'ng mavjud edi. Sessiya 15 daqiqa davom etdi.
3 (sichqonchani) va 5 (rat) tajribalari keyingi mashg'ulotlarga javob berish bo'yicha (quyida batafsilroq) trening davomida instrumental ishlashda yuz beradigan farqlarning potentsial ta'siridan qochish uchun muqobil o'quv dasturlarini ishlatdi. Sinov 3da sichqon 1 d uchun FR2 dasturida va keyin 2 d uchun FR8 dasturida o'qitildi. Sinovning birinchi 3 dasi 60 minlik seansni ishlatdi. Oxirgi 7 ta ta'lim kunida sessiya 50 nazoratchilari sotib olinganidan keyin bekor qilindi. 5 eksperimentida kalamushlar FR1 / VR2 dasturida yuqorida aytib o'tilganidek, 15 min sessiyalarida, ikkita istisnosiz boshqa barcha tajribalar bo'yicha o'qitildi. Birinchidan, eng ko'p sonli 150 pelet / sessiyasi yetkazib berildi. Ikkinchidan, bu hayvonlarga har qanday eksperimental manipulyatsiyadan oldin barqaror ishlashni ta'minlash uchun 5 qo'shimcha kun (ya'ni, jami 15 d) topshirildi.
Hayvonlarni oziq-ovqat uchun javobgarlikka tortishning ilg'or koeffitsienti bo'yicha sinovdan o'tkazildi. Ushbu testda oziq-ovqat mahsulotlarini olish uchun javob chorasi FR1 dasturi sifatida ishga tushirildi, biroq keyinroq takomillashtiruvchi vositani (masalan, 2, 1, 3, 5 ..., X + 7 javoblarni) olish uchun 2 tomonidan bosqichma-bosqich oshirildi. Sichqoncha yordamida dori-darmonli tajribada, 5, 1, 6, 11 ..., X + 16 dasturlarining yakuniy jadvali paydo bo'ldi. Barcha boshqa ko'rsatkichlar yuqorida bayon qilingan o'quv amaliyoti bilan bir xil saqlangan. 5 daqiqa davomida hech qanday faol javob bo'lmaganda test sinovdan o'tkazildi.
Reinforcer devalvatsiyasi.
Fortepiano devalvatsiyasining ta'siri reinforcerning o'ziga xos prefidtsiyasidan foydalanib o'rganildi. Bu erda sichqonlarga yuqorida ta'riflanganidek, mustahkamlash jadvali jadvali bo'yicha sinovdan o'tmasdan oldin 3 soat davomida o'z uy qafasida cheksiz donli oziq-ovqat pelletlarini iste'mol qilishga ruxsat berilgan.
Jarrohlik texnikasi.
Hayvonlarga «Equithesin» preparati (xNUMX% v / v) va propilen glikol (35% v / v) da pentobarbital (183.6 mg / kg) va xloral hidrati (10 mg / kg) qo'shilgan holda xushbo'ylashtirildi; 39 ml / kg, ipda kiritilgan). Kopf stereotaktik asbob-uskunalarni qo'llagan holda, NAc yadrosi ustida ishlaydigan kanüllar (Plastika One, Roanok, VA) jarrohlik yo'l bilan joylashtirildi. Bregma nisbatan ishlatilgan stereotaktik koordinatalar quyidagilar edi: old / orqa, + 4.32 mm; Yanal / medial, ± 1.5 mm; ventral / dorsal, -1.5 mm (Paxinos va Watson, 1986). Kanüller, vintlardek va tish sementi yordamida kafataya yotqizilgan. Obturatorlar blokirovkaning oldini olish uchun yo'riqnomalarga joylashtirildi. Jarrohlikdan keyin hayvonlarga standart operatsiyadan keyingi parvarishlarga duchor bo'lgan va har qanday eksperiment boshlanishidan oldin 5 d uchun tuzalish mumkin edi.
Infüzyonlar.
Virusli vektor intraserebral infüzyonları, ta'lim boshlanishidan oldin ikki tomonlama ravishda 40 h (pastga qarang) amalga oshirildi. 31 mm yo'riqnomalarning uchi bo'ylab cho'ziladigan enjektabl shpritslari (1 o'lchagich) bir vaqtning o'zida chap va o'ng NAc ichiga sekin tushirildi va 1.0 mi / tomoni 4 daqiqada 0.25 mi / (PHD-5000, Garvard Apparatus, Holliston, MA) mikroinfuzion nasos yordamida. Infuzion ignalari infuziya tugaganidan keyin 1 min uchun joyida qoldirildi va qo'g'irchoqbozlar o'zgartirildi. Xulq-atvorli tajribalar (6B-ga qarang) so'ng kannula joylashuvi histologik tekshirilgandir va eksperimental ma'lumotlarning statistik tahliliga faqat to'g'ri joylashtirilgan kanola bo'lgan hayvonlar kiritilgan.
Histologik tahlil va immunostaning.
Eksperimentlar yakunlanganidan so'ng eksperimentning bir qismi sifatida operatsiya qilingan hayvonlarga Equithesin bilan behushlik qilindi va standart protsedura bo'yicha 0.1 m PBS (5 min) va 10% formalin (10 min) bilan transkardial perfuziyalangan edi. Brainlar formalinda eritildi va keyinchalik fosfat tamponli sukroz eritmasiga (30%) joylashtirildi. Keyin barcha miyalar mikrotom bo'yicha 40 ìm kesimlarida kesilgan va kanül joylashishi va protein ekspresyonunun histologik tahlillari uchun ishlatilgan.
Kanül joylashtirish neytral qizil rangli opponentlar bo'linmalarida ishlab chiqarilgan va etanol dehidratsiyasidan so'ng distillangan plastifikator va ksilen (DPX) mikroskop slaydlarida o'rnatilgan. Immunohistokimyo ilgari tasvirlangan (Hommel va uning hamkorlari, 2003). Qisqacha HSV-LacZ infuzionidan keyin b-galaktozidaza ekspressionini echki anti-b-galaktozidaz asosiy antikor (1: 5000, Biogenesis, Kingston, NH) yordamida immunofluorescent boyitish orqali aniqlandi. Kechiktirilgan inkubatsiyadan so'ng, bo'limlar chayqatiladi va Cy2 (1: 200, Jekson ImmunoResearch, West Grove, PA) ga biriktirilgan floresan eshakka qarshi echki sekonder antikor bilan inkübe qilinadi. Bo'limlar yana yuvinib, keyinchalik o'rganishsiz dehidratsiyani va DPX ga o'rnatildi. Qo'shni nazorat bo'limlari birlamchi antikorlarni kiritmasdan bir xil tarzda davolandi. Immunofluoresans 520 nm yordamida baholandi Zeiss (Oberkochen, Germaniya) FITC filtrli mikroskop va bir xil ta'sir qilish vaqtida olingan tasvirlar Zeiss Axiovision raqamli tasvirlash tizimi.
statistika
Barcha tajribalardan olingan ma'lumotlar bir, ikki yoki uch tomonlama ANOVA yordamida baholandi, so'ngra Sheffe yoki Dunnettning post-hoc testi o'tkazildi, Holmning ketma-ket rad etish testidan foydalangan holda bir nechta taqqoslashlar tuzatildi. P-0.05 qiymati statistik jihatdan ahamiyatli hisoblanadi.
natijalar
1ni eksperiment: takrorlangan dori ta'sirining instrumental ishlash va progressiv nisbatlarga ta'sir qilish ta'siri
Biz takroriy dori ta'sir qilish paradigmining funktsional jihatdan ahamiyatli neyroxoddeptsiyalarni ishlab chiqarganligini tasdiqlash uchun avval biz lokomotor sezuvchanlikni surunkali dori ta'sirining prototipik xatti-o'lchovi sifatida baholaymiz. Sichqonlarga kuniga ikki marta nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) yoki amfetamin (2.5 mg / kg) in'ektsiyasi berildi va lokomotorlar kirish birinchi inyeksiyadan so'ng sinov qilindi 1 va 15 davolash kunlari (qo'shimcha 1A-E, mavjud www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). Statistik tahlil kunlik munosabatlarda sezilarli davolanishni ko'rsatdi (F.(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). MDMA (p = 0.62) tashqari, barcha dorilar 15 (nikotin, p ≤ 1, kokain, p ≤ 0.001, amfetamin, p ≤ 0.001) bilan solishtirganda kunlik 0.01da lokomotor faollikni sezilarli ravishda ko'proq oshirdi (ya'ni sensitizatsiya). Ko'pchilik sho'rlangan in'ektsiyalar hech qanday ta'sir ko'rsatmadi. Dori preparatlarining hech biri 15 (HNUMX-da kunlik) davrida odatdagi lokomotor faoliyatni o'lchaganini o'zgartirdi (qo'shimcha ravishda www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida).
O'tkazilgan so'nggi giyohvand moddalarni in'ektsiyadan besh kun o'tgach, avvalgi takrorlangan nikotin, MDMA, kokain yoki amfetaminning ta'sirini oziq-ovqat bilan mustahkamlangan instrumental xulq-atvorga tekshirdik. Ma'lumot har bir dori uchun alohida-alohida taqdim etiladi Shakl 1A-H solishtirish uchun bir xil sho'rlangan nazorat guruhidan foydalaniladi. Biz ushbu dori-darmonlarning har biriga nisbatan avvalgi ta'sirini oziq-ovqat bilan mustahkamlash instrumental javobni sezilarli darajada va tanlagan holda oshirishni aniqladik (mashqlar kuni bilan qo'lni davolash, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc tahlil qilish: nikotin, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; giyoh, p ≤ 0.01; amfetamin, p ≤ 0.001). Asimptotik ishlashda kuzatilgan instrumental javoblarning doimiy ko'tarilishi, psixostimulyatorning takroriy ta'siridan keyin ilgari bildirilgan o'sishlar bilan mos keladigan, turtki berishning mumkin bo'lgan kuchayishini ilgari surdi (Qarang: Munozara). Shuning uchun oldingi takrorlangan dori ta'sirining progressiv nisbatlar jadvalidan foydalangan holda motivatsiyasi kuchaytirilishini tekshirdik. O'tkazilgan dori ta'sirining faol qo'lni saqlash bo'yicha statistik ta'sirini (qo'lbozar shovqinni davolash, F.(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Anjir. 2A) va yakuniy chiqish nuqtasi (F.(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Anjir. 2B). Qo'shimcha tahlillar shuni ko'rsatdiki, barcha muolajalar (nikotin, p ≤ 0.001, MDMA, p ≤ 0.05, kokain, p ≤ 0.001, amfetamin, p ≤ 0.001) va chiqish nuqtasi (nikotin, p ≤ 0.001, MDMA , p ≤ 0.01, kokain, p ≤ 0.0001, amfetamin, p ≤ 0.0001). Giyohvand moddalarni asosiy lokomotor faoliyatga ta'siri yo'qligi va faol bo'lmagan qo'lni bosadigan presslarga ta'sir etishmasligi hisobga olinsa, bu sharoitlarda oziq-ovqat uchun javob berishning ortishi vosita faoliyatidagi noaniq ko'payishni aks ettirmaydi.
Shakl 1.
Keyingi xom-ashyoning 0.35-d uchun kuniga ikki marta nikotin (2.5 mg / kg), MDMA (15 mg / kg), kokain (2.5 mg / kg) yoki amfetamin (15 mg / kg) ning takroriy in'ektsiyalarining ta'siri. Hayvonlar birgalikda sinovdan o'tkazildi, ammo ravshanlik uchun har bir preparatning ta'siri bir xil sho'rlangan-nazorat qilinadigan nazorat guruhi yordamida alohida ko'rsatildi. A (faol javoblar) va B (faol bo'lmagan javoblar) oldingi nikotin ta'sirining ta'sirini ko'rsatadi; C, D, MDMA; E, F, kokain; G, H, amfetamin. Ma'lumotlar ± SEM vositasi sifatida ifodalanadi.
Shakl 2.
Ilgari takroriy davolanishning (kuniga ikki marta, 15 d) fiziologik eritma, nikotin (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokain (15 mg / kg) yoki amfetamin (2.5 mg / kg) bilan ta'siri mustahkamlashning progressiv nisbati jadvali bo'yicha. Ma'lumotlar ± SEM degan ma'noni anglatadi. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Tuzli, sho'rlangan; Nik, nikotin; Kok, kokain; Amf, amfetamin; PR, progressiv nisbat.
Ilgari giyohvand moddalarga ta'sir qilish, shuningdek, asbob-uskunalar bilan mashg'ulotlarning birinchi yoki oxirgi kunida oziq-ovqat taqiqlashidan avval qayd etilgan tana vazniga, yoki progressiv nisbatlar sinovidan oldin darhol ta'sir ko'rsatmadi (qo'shimcha 2B, www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). 3 d uchun cheklangan oziq-ovqat ta'minoti dastlab tana vaznini o'rtacha 91-92% gacha erkin ovqatlanish vazniga kamaytirdi. Xulq-atvor sinovlari oxirida og'irliklari oldingi vaznning og'irligi bo'yicha 97-99% ga qaytdi va giyohvand moddalarga ta'sir qiladigan va sho'rlangan hayvonlar o'rtasida farq yo'q edi. Tana vaznidagi o'zgarishlar va ochlik yoki tuyadi o'rtasidagi farqlar, instrumental ishlash yoki motivatsiyani yaxshilashning sezilarli darajada oshishiga olib kelmasligi kerak.
2ni eksperiment: Bitstansenik sichqonlarda DFBning induksiya qilinadigan ortiqcha ekspressioni; instrumental ishlash
Keyinchalik NAc va dorsal striatumda aniq selektivlik bilan DFOSB ni indeksini oshirib yuboradigan tugatilgan sichqonlarda instrumental ko'rsatkichlar ko'paytirildi,Kelz va boshq., 1999). Ushbu tajribada DFOSB-oversekspressing sichqonlari doksisiklinda saqlanganligi sababli DFOSB ni ortiqcha bosim o'tkazmasligi bilan solishtirildi (Qarang Materiallar va usullar). DFBning haddan tashqari ifodasi oziq-ovqatlarni kuchaytirishga javob berish darajasini sezilarli darajada oshirdi (o'rgatish kunida F, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Anjir. 3A). Faol bo'lmagan diafragma qilingan nosepoke javoblari soni ikki guruh o'rtasida farq qilmadi (Anjir. 3B). Birgalikda, bu ma'lumotlar NAF va dorsal striatumda DFosB ekspresyonunun selektiv tarzda instrumental ishlash
Shakl 3
Bitstansenik sichqonlardagi DFB ning induksion striatal ortiqcha ifodasini ta'siri instrumental ishlash. A, faol javoblar. B, noto'g'ri javob. Ma'lumotlar ± SEM vositasi sifatida ifodalanadi.
DFF-dagi hayvonlarni ortiqcha ifloslantirishda instrumental ishlashning yaxshilanishini tuyadi yoki ochlikda o'zgarishlar bilan izohlash mumkinligini istisno qilish uchun tana vaznidan oziq-ovqat taqiqlashidan oldin va ta'limning dastlabki va oxirgi kunlarida qayd etilgan. DFF oziq-ovqat taqiqlashidan oldin tana vazniga ta'sir ko'rsatmadi va xatti-harakatlarda tana vazniga ta'sir ko'rsatmadi. Bu erda, 3 d uchun oziq-ovqat taqiqlanganligi tana vaznini o'rtacha 87-89% gacha bo'lgan bepul oziqlantirish vazniga kamaytirdi. Xulq-atvor sinovlari oxirida, hayvonlarning og'irliklari oldingi tananing og'irliklari 97-99% bo'lib, DF va B sichqonlarida kuzatilgan ekvivalent o'zgarishlarga ega (qo'shimcha 3A, www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). DF favqulodda ekspressionizmning ochlik yoki tuyadi haqida salbiy ta'siri kuzatilgan instrumental javoblarning takomillashtirilishiga sabab bo'lishi ehtimoldan yiroq emas.
Instrumental ishlash bo'yicha sinovlar tugallangandan so'ng, DFF ekspresyoni 30 min davrida o'lchangan asosiy lokomotor ta'sirni o'zgartirdi (qo'shimcha ravishda shakl 3B, www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). Ushbu kuzatuv, bu hayvonlarda kuzatilgan takomillashgan instrumental ko'rsatkichga hissa qo'shmasdan faoliyatda noaniq o'zgarish bo'lishiga qaramasligini qo'llab-quvvatlaydi. Shu bilan birga, DFOSB-oversekiruvchi bitransgenik sichqonlarning aktiv va takrorlangan kokainga (masalan,Kelz va boshq., 1999). Doksisiklindan genlarni ifodalashni (6 haftalaridagi oziq-ovqat taqiqlashiga) indamaslik uchun biroz farqli jadvalni ishlatganimiz uchun biz ushbu fenotipni tasdiqlash uchun yo'lga qo'ydik. Darhaqiqat, DFOSB-ovsekspressing sichqonlari doksisiklinda (geni ifoda etish orqali davolash, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (qo'shimcha 3C, mavjud www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida).
3ni eksperiment: Bitstansenik sichqonlarda DFBning induksiya qilinadigan ortiqcha ekspressioni; progressiv nisbati
Oldingi dori ta'sirida striatal DFB (Nestler va boshq., 2001) va bu erda progressiv nisbaga javob beradigan javob topildi. Keyinchalik, DFOSB ning transgenik striatal oshqozon namoyishi kuchayishning progressiv nisbat jadvalidagi ishlashni oshiradi. Sichqonlarning yangi guruhi ilg'or nisbatlarga javob berishda (F (F)) oldin sinovdan oldin instrumental ishlashda sezilarli farq qilmaydigan sharoitlarda instrumental javob berishga o'rgatildi (Materiallar va uslublar bo'limiga qarang).(1,16) <1). Biroq, progressiv nisbat testida biz qo'lning o'zaro ta'sirida sezilarli gen ekspresiyasini kuzatdik (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Anjir. 4A) va doksisiklinada saqlanadigan littermate nazorat sichqonlari bilan solishtirganda, DFOSB-oversexpressing sichqonlarning faol javoblarga (p ≤ 0.05) ko'proq ta'sir qilganini, ammo faol bo'lmagan leverlarning javoblari boshqacha emasligini aniqladi. DFF-overspektsiyalashuvchi sichqonchalar ham yuqori nuqtaga (F.(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Anjir. 4B). Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, oldingi psixostimulyator ta'sirida, DFSning striatal oshqozon namoyishi motivatsiyani oshiradi. Faol bo'lmagan javoblar soni DFF-ortiqcha susaytiruvchi sichqonchalarda o'zgartirilmaganligi sababli, faoliyatning noaniq ko'payishi ushbu ta'sirga hissa qo'sha olmaydi. Ushbu fikr, shuningdek, doksisiklinda saqlanadigan DFosB va littermate nazorat sichqonlarini ortiqcha sichqoncha bilan farqi bo'lmagan asosiy lokomotor harakatlarning baholashlari bilan ham qo'llab-quvvatlandi. DFF-overspesifikatsiya qilish va nazorat hayvonlari orasidagi tana vaznidagi har xil farqlar sinov kunida aniqlangan. Shunday qilib, DFF-ov hayvonlari ko'proq oziq-ovqat vositalariga ta'sir o'tkazadigan bo'lsa, ular erkin oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishda ko'proq taom iste'mol qilmaydilar. Bu kuzatish uchun eng maqbul tushuntirish shundan iboratki, turtki, hayvonning mustahkamlovchi vosita olish uchun qanchalik qiyin ish qiladigan bo'lsa-da, ko'pgina qo'shimcha omillar (ishtahani, to'yintirish, metabolik holat va boshqalar) ovqatlanish xatti-harakatiga va oziq-ovqatning haqiqiy iste'moliga ta'sir qiladi.
Shakl 4.
FosB ning bitransgenik sichqonlarda induktsiya qilinadigan haddan tashqari ekspressionini to'yinganlik sababli kuchaytiruvchi kuchaytiruvchi devalvatsiyadan oldin va keyin mustahkamlashning progressiv nisbati jadvaliga instrumental javob berishga ta'siri. A, B, boshlang'ich chizig'i: qo'lning javoblari (A), sinish nuqtasi (B). C, D, Kuchaytiruvchi devalvatsiyadan so'ng: qo'lning javoblari (C), sinish nuqtasi (D). Ma'lumotlar ± SEM degan ma'noni anglatadi. * p <0.05.
Bu erda ishlatiladigan DFBB bittsantjenli sichqonchalar DFOSBni striatum davomida ifodalaydi. Ventral striatum (NAc ni o'z ichiga olgan holda) motivatsion jarayonlarda ishtirok etgan bo'lsa, dorsal striatumda instrumental odatlarni sotib olishgaYin va boshq., 2004; Faure va boshq., 2005). O'qitish jarayonida instrumental ishlashda farqlar kuzatilmasa-da, maksimal nazorat chegaralari bilan past nisbatlar jadvali, instrumental odatlarning rivojlanishiga nisbatan nisbatan chidamli bo'lgan shartlarDickinson, 1985), odatning paydo bo'lishi ilg'or nisbatlar jadvali bo'yicha javob berishga ta'sir qilishi mumkin. Ushbu imkoniyat to'g'ridan-to'g'ri kuchaygan devalvatsiyani progresiv nisbatlarga javob berish orqali oldindan to'ldirish orqali baholash orqali baholandi. Bunday prefeeding DFOSB ning progressiv nisbatlarga ta'sirini bartaraf etdi va DFOSB-oversexpressing va nazorat sichqonlari o'rtasida (F(1,16) <1) (Anjir. 4C, D). Birgalikda, bu ma'lumotlar DFOSBning striatal ortiqcha tushuntirishlari ushbu sinov jadvalidan foydalanib, mukofotlangan natijalar qiymatidagi o'zgarishlarga nisbatan sezgirlikni o'zgartirmaganligini ko'rsatadi. Aksincha, progressiv nisbatlardagi testda kuzatilgan instrumental javob maqsadga yo'naltirilgan bo'lib, DFOSBda ortiqcha ekspress sichqonlarda kuzatilgan keskin nuqta, odatdagidek javob berishni kuchaytirmasdan emas, balki kuchli motivatsiya bilan bog'liq.
4 eksperimenti: NAc yadrosida DFOSBning virusli vositalaridan ortiqcha namoyishi: instrumental ishlash
NAFda DFosB ortiqcha ekspressionni qay tarzda tanlab olishi bitransgen sichqonlarda kuzatilgan xatti-harakatni hisobga olishini aniqlash uchun HSV-DFB yoki HSV-LacZ ni kaltsiylarning NAc yadrosiga selektiv ravishda tekshiruv sifatida kiritdik va bu manipulyatsiyaning oziq-ovqatga ta'siri o'rganildi - takomillashtirilgan instrumental ishlash (Anjir. 5A, B). Jurnallarni o'rganishdan so'ng, HSV-DFOSB yoki HSV-LacZ xulq-atvor sinovlarini boshlashdan oldin NAc yadrosi 40-ga kiritildi. Infuziyaning joylashuvi va virusga asoslangan vosita genining ifoda darajasi Shakl 6, A va B. HSV-DFOSB ning NAc infuziyalari faol reaktsiyalar sonining barqaror o'sishini ta'minladi (lever, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Anjir. 5A), tajriba davomida davom etdi. Ushbu ta'sirlar selektiv edi, chunki NAF yadrosida DFosB ortiqcha tushuntirishining nofaol javoblar soni bo'yicha katta ta'siri yo'q edi (Anjir. 5B) yoki tajriba yakunlangan kundan boshlab (ma'lumotlar ko'rsatilmagan) asosiy lokomotor harakatlarda qayd etilgan. NAcdagi DFBning yuqori darajada ifodalanganligi oldingi dori ta'sirining ta'sirchan ta'sirini yoki DFBning striatal ortiqcha tushuntirishini takomillashtirdi.
Shakl 5.
HSV-FFB infuziyalarining instrumental javob berish bo'yicha treningdan oldin NAc yadrosiga ta'siri. A, faol javoblar. B, noto'g'ri javob. Ma'lumotlar ± SEM vositasi sifatida ifodalanadi.
Shakl 6.
A, Virusli vektor tajribalari uchun infuzion uchastkalarni joylashtirish. Yuqori, to'ldirilgan qora doiralar mo'ljallangan infuzion maydonga mos keladi. Faqat infuzionlar ~ ichida ishlab chiqarilganUshbu maydonning 0.5 mm (ya'ni, NAc yadrosida) doirada ko'rsatilgandek qabul qilinadi. Ushbu hududdan tashqarida o'tkazilgan infuziyalar bilan hayvonlar statistik tahlillardan chiqarildi. Bottom, Ta'minotchi vaktsinada NAc ichida. B, HSV-LacZ infuzionidan keyin protein ekspresyonunun immunohistokimyoviy tekshiruvi. Yuqori panellar NAc yadrosida (2.5 va 10 × kattalashtirish) b-galaktosidaza ifodasini namoyish etadi. Pastki panellar, asosiy antikorun kiritilmasdan, bir xil immunohistokimyasal usuli yordamida ulashgan nazorat boblarida immunofloresans eksikliğini ko'rsatadi.
5 tajribasi: NAc yadrosida DFOSBning virusli vositalaridan ortiqcha namoyishi: progressiv nisbat
Yakuniy tajriba to'g'ridan-to'g'ri Virusli vosita gen protsessorini qo'llagan holda NAc yadrosida DFOSning cheklangan ortiqcha ekspressionini faralarni rag'batlantirish uchun etarli ekanligini aniqladi. Bu erda, HSV-DFBQ faqat instrumental tayyorgarlikdan so'ng, keyinchalik progressiv nisbat testida mashq davomida DFB eksperksepsiyasining potentsial ta'sirini bartaraf etishga kirishdi. Yangi kalamushlar guruhi oldingi kabi o'qitildi va mashg'ulotlarning yakuniy kunlarida ularning bajarilishlari asosida muvozanatli eksperimental guruhlarga bo'lingan edi. Keyinchalik hayvonlarda HSV-DFV yoki HSV-LacZ ning ikki tomonlama infüzyonlari NAc yadrosiga kelib tushdi va 5 d ortiqcha ekspressiondan keyin javob beruvchi progressiv nisbatda sinovdan o'tkazildi. Statistik tahlilda qo'lning ta'sirchanligi (F.(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Anjir. 7A). HSV-DFS bilan inflyatsiya qilingan kalamushlar HSV-LacZ bilan infuz qilinganlar bilan solishtirganda ko'proq faol javoblar (p ≤ 0.01) qildi, ammo faol bo'lmagan qo'lni ushlab turish ta'sir ko'rsatmadi. Bu o'sish bilan izchil ravishda HSV-DF bilan ishlangan sichqonlar ham yuqori nuqta (F.(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Anjir. 7B) HSV-LacZ bilan bog'langan hayvonlarga nisbatan. Progressive nisbati testidan oldin (HNUMXA, ilova qilingan, qo'shimcha ravishda, 1 h) asosiy dvigatel harakatining DFOSB ta'siri yo'q edi. www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). Progressiv nisbatlardagi sinov kunida tana og'irligida farqlar yo'q edi (qo'shimcha ravishda 4B www.jneurosci.org qo'shimcha material sifatida). Ushbu topilmalar transgenik DFS-oversexpressing sichqonlari bilan kuzatuvlarimizni qo'llab-quvvatlaydi va NAcdagi DFFning selektiv ortiqcha tushuntirishiga oziq-ovqat bilan bog'liq motivatsiyani kuchaytirish uchun etarli ekanligini ko'rsatib beradi.
Shakl 7.
Sinovdan oldin HSV-DFosB infuziyalarining 5 g kuchaytirishning progressiv nisbati jadvali bo'yicha instrumental reaktsiyaga ta'siri. A, Lever javoblari. B, tanaffus nuqtasi. Ma'lumotlar ± SEM degan ma'noni anglatadi. *** p <0.001; ** p <0.01.
muhokama
Ushbu ishda NAc ichidagi DFBning ortiqcha ifoda etilganligi oziq-ovqat bilan mustahkamlangan instrumental xarakteristikani kuchaytiradir. Avvalgi kokain, amfetamin, MDMA yoki nikotin bilan ta'sir qilish keyingi instrumental ishlashning davomiy o'sishini ta'minladi. Ushbu dori-darmonlar oziq-ovqatga yo'naltirilgan xatti-harakatni kuchaytiruvchi jadvali jadvali bo'yicha oshirdi. Oldingi dori ta'sirining bu ta'siri endirgen bitransgenik (NSE-tTA × Tetop-DFosB) sichqonlaridan foydalanib yoki DFOSB ni tanlab, NAc-da ifodalash uchun yangi virusli vektor yordamida DFosB ning striatumda cheklangan ortiqcha ekspresyoni bilan taqqoslangan. Masalan, NAc yadrosida DFFning ortiqcha namoyishi, instrumental javobdan keyin allaqachon sotib olingan bo'lsa, progressiv nisbatlar jadvali ostida oziq-ovqat uchun rag'batlantirildi. Bizning xulosalarimiz NAc yadrosidagi DFSB ni vosita xatti-harakatini rag'batlantiradigan, bu transkripsiya faktori rolini oziq-ovqatni mustahkamlashning xatti-harakatlariga motivatsion ta'sirlarga bog'liq bo'lgan jarayonlarni o'z ichiga oladigan dori-vositalar bilan bog'liq neyrokodatsiyalarning potentsial vositachisi sifatida belgilaydi. Bundan tashqari, NAc'teki DFosB ifodasini uyg'otadigan shartlar, tabiiy va giyohvand nazoratchilarning motivasyonel xususiyatlariga ta'sir qilishi mumkin.
DFFB surunkali, ammo o'tkir emas, giyohvand moddalarga ta'sir qilishdan keyin NAc va dorsal striatumning dynorphin-expressing o'rta teshik neyronlarida to'planadi. Bu hududiy ifodalash iborasi bu erda ishlatiladigan tugallanuvchi bitransgenik DFSB-oveysekspressing sichqonlarda takrorlanadi. Ushbu sichqonlarda, DFOSB ning striatal darajasining ko'tarilishi hayvonlarning kokain va morfinga nisbatan sezgirligini shartli joy afzalligi bilan o'lchanadi (Kelz va boshq., 1999; Zachariou va boshq., 2006). Shuningdek, giyohni o'z-o'zini boshqarish uchun turtki berish striatal DFB eksperkspresyoni bilan kuchayganligini ko'rsatuvchi progressiv nisbaga ega.Colby va boshq., 2003). Bu sichqonlardagi striatal DFB ekspresyonu, shuningdek, oziq-ovqatni mustahkamlash uchun javob beradigan progressiv nisbatlarni oshirganini va bu ta'sirlar Sichqonning NAc yadrosida DFosB ning cheklangan virusli vositalaridan ortiqcha tushuntirishlari bilan qayta ishlab chiqarilganligini aniqladik. Bizning ma'lumotlarga ko'ra, DFOSB boshlang'ich tekshiruvchilar uchun, ya'ni oziq-ovqat, giyohvand moddalar yoki ehtimol jismoniy mashqlar uchun oldindan rejalashtiruvchi modulator bo'lib xizmat qilishi mumkin. Dastlabki kuzatishlar bo'yicha, DFOSBning striatal ekspressioni surunkali g'ildirak harakatida yoki sukrozni ichishdan (McClung va uning hamkorlari, 2004). Ushbu ma'lumotlar NAc ning DFF ekspresyonunun tabiiy va giyohvand moddalarni nazorat qiluvchi organlarining motivatsion ta'sirini kuchaytirishi mumkinligini ko'rsatadi.
NAc ning pastki qatlamlari pavlov yoki instrumental rag'batlantiruvchi jarayonlarning instrumental ishlashga ta'sirini (Corbit va boshq., 2001; de Borchgrave va boshq., 2002), shunga qaramay instrumental ishlashga umumiy motivatsion ta'sirlarni boshqa mintaqalar, masalan, amigdala markaziy yadrosi (Corbit va Balleine, 2005). NAc yadrosi, shuningdek, maqsadga yo'naltirilgan instrumental ta'limni olish uchun juda muhim sayt bo'lishi taklif qilingan (Smit-Ro va Kelley, 2000; Baldwin va boshq., 2002a,b; Kelley, 2004). Biz avvalgi dori ta'sirining ekvivalent ta'sirini va transgenik striatal DFF ekspresivligini instrumental xatti-harakatni kuchaytirishga ko'rsatib beramiz. NAc yadrosi bilan chegaralangan HSV-DFb infuziyalari, shuningdek, oziq-ovqatni kuchaytirish instrumental javobini oshirdi. Ushbu tajribalar dorsal striatumning ushbu xatti-harakatlardagi hissasini istisno etmasa-da, ular NAc ichidagi gen ekspressionida DFOSB tomonidan kiritilgan o'zgarishlar oziq-ovqatni rag'batlantirishga javob berishni kuchaytirish uchun etarli ekanligini ta'kidlashadi. Progressiv nisbatlarga javob berish, shuningdek, DFOSB ni barqaror instrumental ishlashga erishilganidan keyin ifodalanishi tufayli kengaytirildi, chunki instrumental xatti-harakatlarda motivatsion ta'sirlarning ahamiyati katta. Shunga qaramasdan, manipulyatsiyamiz instrumental o'quv jarayoniga ta'sir etishi ehtimoldan xoli emas. Bizning xulosalarimizni qo'llab-quvvatlash uchun avvalgi og'zaki kokain ta'siridan keyin kuzatilgan instrumental ko'rsatkichlarning o'sishi (Miles va boshq., 2004) surunkali nikotinli davolanishni sichqonchada javob beradigan progressiv nisbatni oshirishga qobiliyatli motivasion o'zgarishlarBrunzell va boshq., 2006). Bundan tashqari, hujayra dopamin darajasining oshishi bilan birga dopamin tashuvchilarni urish sichqonlari ham rivojlangan DFSB immunoreaktivligi va oziq-ovqatni mustahkamlash motivatsiyasi bilan namoyon bo'ladi, lekin o'zgaruvchan ta'lim (Cagniard va boshq., 2006). Bundan tashqari, sichqonchamizda stroliatal FFB ning haddan tashqari ifodalanganligi, oziq-ovqat mahsulotlarini oldindan to'yintirishda "devalvatsiyalash" bo'lgan taqdirda, tashqi ta'sirga ta'sir etmasligini aniqladik. Ushbu ma'lumotlarga ko'ra, hayvonlar hayvonlarning motivatsion ahamiyatiga sezgir bo'lib, javob berish maqsadga qaratilgan.
Avvalgi takroriy dori ta'siri pavlovlar yondashuvi bilan o'lchanadigan tabiiy nazorat organlari bilan bog'liq bo'lgan shartli ogohlantirgandan kelib chiqadigan xatti-harakatlarning nazoratini kuchaytirishi mumkin (Harmer va Phillips, 1998; Teylor va Jentsch, 2001; Olausson va boshq., 2003), shartli mustahkamlash (Teylor va Xorger, 1999; Olausson va boshq., 2004) va pavlove-to-instrumental o'tkazish (Wyvell va Berridge, 2001). Hozirda NAc yadrosi qobiqdan farqli o'laroq, pavlitsiyali shartli ogohlantiruvchi vositalar bilan giyohvandlikka asoslangan harakatlarni nazorat qilishda ishtirok etmoqda (Parkinson va boshq., 1999, 2002; Hall va boshq., 2001; Dalley va boshq., 2002; Ito va boshqalar, 2004). Bizning natijalar NAc-da DFFning dori-darmonli indüksiyasini ushbu usullarda xatti-harakatlarning nazoratini kuchaytiradigan mexanizm bo'lishi mumkinligini ko'rsatishi mumkin. Shuningdek, pavlovlar bilan shartlangan qo'zg'atuvchi, shartli mustahkamlovchi sifatida faoliyat yuritadigan, hozirgi xulq-atvor ta'siriga hissa qo'shishi mumkin. Striatal DF ning o'sishida vositachilardan kelib chiqadigan bunday shart-sharoitlarga nisbatan nazoratni yaxshilash DF-dan tashqari preparatning uyg'unlashtirilgan konditsioner joylashuvga ta'siri ham bo'lishi mumkin (Kelz va boshq., 1999; Zachariou va boshq., 2006) va giyoh uchun javob beradigan progressiv nisbati (Colby va boshq., 2003). Motivatsion jarayonlarda o'zgarishlarni qo'shadi xulq-atvorini rivojlantirish va davom ettirishga yordam berish uchun faraz qilingan (Robinzon va Berrij, 1993; Jentsch va Taylor, 1999; Robbins va Everitt, 1999; Nestler, 2004). Ushbu ma'lumotlar, shuningdek, qo'shiqchi xatti-harakatlarda ko'plab instrumental va pavlitsion jarayonlarni ta'kidlaydigan boshqa nazariyalar bilan ham mos keladi (Everitt va Robbins, 2005). Endi NAc va boshqa limbic-striatal subregionsda dori-va FosB-ning sababli neyroxodizatsiyasining rolini aniqlash uchun qo'shimcha ishni bajarish kerak, bu esa instrumental ishlashga yordam beradigan va majburiy xulq-atvorga hissa qo'shadigan o'ziga xos biriktiruvchi yoki motivatsion omillarga bog'liq.
NAc ichida o'zgarib turadigan nozik molekulyar mexanizmlar asosiy yoki konditsionerlar tomonidan boshqariladigan xatti-harakatlarga ma'lum emas (Kelley va Berrij, 2002), NAc ning GABAergic o'rta zararli neyronlari preparat va tajribaga bog'liq bo'lgan plastika uchun muhim substrat hisoblanadi. Bu erda ventral tegmental sohadan olingan dopaminerjik kirish va kortikolimbik eferentlardan olingan glutamaterjik kirish umumiy dendritlar va dendritik kontsentratlarga (Sesack va Pickel, 1990; Smit va Bolam, 1990). Surunkali psixostimulyator ta'sir qilish NAc qobig'idagi va yadrodagi bu nayzalarning neyronlarga zichligini oshiradi (Robinson va Kolb, 1999; Robinson va boshq., 2001; Li va boshq., 2003, 2004). So'nggi paytlarda xulq-atvori sezgirlash indikatsiyasi, ayniqsa, NAc yadrosi ichidagi dendritik uzaylarda (masalan,Li va boshq., 2004). E'tiborli jihati shundaki, kokain bilan bog'liq omillar orasidagi zichlik faqatgina D ga to'g'ri keladi1- FosB (birlashma) ni tashkil etuvchi ijobiy neyronlarRobinson va Kolb, 1999; Lee va boshq., 2006). NAc yadrosidagi DFSB shuning uchun instrumental xarakatlarga ta'sir qiladigan uzoq muddatli sinaptik plastisitiyaga yordam beradi. Darhaqiqat, dopamin-glutamat nörotransmisyonu uchun muhim rol (Smit-Ro va Kelley, 2000), protein kinaz A faoliyati (Baldwin va boshq., 2002a) va de novo protein sintezi (Hernandez va boshq., 2002) Nosozlik vositasida instrumental bajarish bo'yicha oldindan xabar berilgan. Biz DFOSB ni NAc yadrosida ortiqcha bosim o'tkazilganda oziq-ovqat bilan mustahkamlangan javobni doimiy ravishda kuchaytira oladigan transkriptsion faktor sifatida aniqlaymiz. Ushbu ta'sirlarda ishtirok etadigan o'ziga xos genlar yoki oqsillar to'liq aniqlanishi kerak. DFOSB nervoplastikada ishtirok etadigan NAcdagi bir nechta oqsillarni ifodalashni tartibga soladi (McClung va Nestler, 2003). Yaqinda o'tkazilgan mikroarray tahlillari bu erda ishlatiladigan DFOSBni ifodalovchi bitransgen sichqonlarning NAc-dagi gen ekspression naqshini tavsiflaydi va DFosB ning nisbatan qisqa muddatli ifodasi bilan tartibga olingan genlarning quyi qismini aniqlaydiMcClung va Nestler, 2003). BDNF bunday gen edi va ushbu neyron devordagi BDNF dori-darmon va oziq-ovqat bilan bog'liq birikmalarga javob berishni kuchaytiradiHorger va boshq., 1999; Grimm va boshq., 2003; Lu va boshq., 2004). Qiziqishning yana bir genidir siklinga qaram kinaza 5 (Bibb va boshq., 2001), shuningdek, DFB tomonidan indüklenen, va kokainga bog'liq bo'lgan strukturali plastisitani (Norrholm va boshq., 2003) va tabiiy yoki giyohvand moddalarni nazorat qiluvchi organlar (JR Taylor, nashr qilingan kuzatishlar) uchun javob beradigan progressiv nisbat bilan o'lchanadigan motivatsiya. Amalga oshiriladigan qo'shimcha nomzodlar AMPA glutamat retseptorlarining GluR2 bo'limi hisoblanadi (Kelz va boshq., 1999) va NFKB (yadroviy omil kB) transkripsiyasi faktori (Ang va boshqalar, 2001). NAF pastki mintaqalarida ushbu va boshqa tartibga solinadigan oqsillarni DFFning ta'sirchan ta'sirini vositachilik ishlashi va motivatsiyasi bo'yicha vositachilik qilish uchun nomzod sifatida baholash muhimdir.
The mavjud eksperimentlar seriyasi NAc ichidagi DFSB ning ortiqcha tushuntirishining oziq-ovqatga asoslangan xulq-atvorini kuchaytirishi va shu bilan birga dori-darmonlar uchun ko'rsatilayotgan instrumental ko'rsatkichni tartibga solishi mumkinligini isbotlaydi. Ushbu ma'lumotlar DFOSB maqsadga yo'naltirilgan xatti-harakatlarda mustahkamlovchi tashkilotlarning motivatsion tomonlarini takomillashtirish bilan bog'liq bo'lgan umumiy molekulyar kalit bo'lib xizmat qilishi mumkin bo'lgan yangi dalillar keltiradi. Bizning topilmalarimiz NAF DFBning, masalan, qo'shimchali dori-darmonlar, stress yoki, ehtimol, juda foydali bo'lgan oziq-ovqat mahsulotlari bilan indüklenmesinin, işlevsiz motivasyonel vaziyatlarning majburiy xatti-bilan bog'liq psixiatrik bozukluklara olib keladigan muhim bir mexanizm bo'lishi mumkinligini oshiradi.
Izohlar
o Mart oyida qabul qilingan 15, 2006.
o Tahrir iyun 23, 2006 bo'ldi.
o Qabul qilingan avgust, 2, 2006.
Ushbu ish Milliy giyohvandlik milliy instituti, Milliy ruhiy salomatlik instituti va Milliy alkogol ichimliklarni suiiste'mol qilish va alkogolizm institutining grantlari bilan qo'llab-quvvatlandi. Dilya Krueger, Drew Kiraly, doktor Ralf DiLeone, Robert Sirs va doktor Jonathan Hommelning Yale universiteti Psixiatriya kafedrasida qimmatli yordamini minnatdorchilik bilan qabul qilamiz. Doktor Jennifer Kinn va doktor Paul Hitchcottga ushbu maqolada foydali fikrlarni bildirish uchun minnatdormiz.
Xat yozishni Jane R. Teylor, Psixiatriya bo'limi, Molekulyar psixiatriya bo'limi, Yel universiteti tibbiyot maktabi, Ribicoff tadqiqot institutlari, Konnektikut ruh salomatligi markazi, 34 Park ko'chasi, New Haven, CT 06508-ga yuborish kerak.[elektron pochta bilan himoyalangan]
Mualliflik huquqi © 2006 Nevrologiya jamiyati 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Manbalar
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras R,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) NFKB ning surunkali giyohni qo'llash orqali yadrodagi akumbenslarda indüksiyasi. J Neurochem 79: 221-224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadegyian K,
3. Holaxan MR,
4. Kelley AE
(2002a) Appetitli instrumental o'rganish yadro bolgarlari ichida cAMPga qaram protein kinaz inhibisyonu bilan buziladi. Neurobiol Mem 77 ni o'rganing: 44-62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadegyian K,
3. Kelley AE
(2002b) Tushkunlikka asoslangan instrumental o'rganish NMDA va dopamin D ning tasodifiy faollashuvini talab qiladi1 medial prefrontal korteks ichidagi retseptorlari. J Neurosci 22: 1063-1071.
4. ↵
1. Ballein B,
2. Killcross S
(1994) Nukleus akumbenslarning ibotenik kislota lezyonlarining instrumental ta'sirga ta'siri. Behav Brain Res 65: 181-193.
5. ↵
1. Barkiy JD,
2. Hyman SE
(2000) Addiction, dopamin va xotira molekulyar mexanizmlari. Neuron 25: 515-532.
6. ↵
1. Berrij KC,
2. Robinson TE
(2003) Ajratilgan mukofot. Trends Neurosci 26: 507-513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Teylor JR,
4. Svenningsson R,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P.
(2001) surunkali ta'sirini kokainga ta'siri nöronal protein Cdk5 tomonidan reglamentlanadi. Tabiat 410: 376-380.
8. ↵
1. Brunzell DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Teylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-Subunit o'z ichiga olgan nikotinik asetilkolin retseptorlari C57BL / 6 sichqonlarida oziq-ovqat uchun javob bermaydigan progressiv nisbada emas, balki shartli mustahkamlashda nikotinga bog'liq oshishlarda ishtirok etadi. Psixofarmakologiya (Berl) 184: 328-338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balsam PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) surunkali ko'tarilgan dopaminli sichqonchalar oziq-ovqat mukofotini olish uchun o'rganishni emas, balki motivatsiyani oshiradi. Nöropsikofarmakologiya 31: 1362-1370.
10. ↵
1. Carlezon Vt Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) CREB tomonidan kokain mukofotini tartibga solish. Fan 282: 2272-2275.
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Hope IT,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ
(1997) Surunkali Fos bilan bog'liq antijenler: surunkali davolanishlar orqali miyada boshlangan DFBning barqaror variantlari. J Neurosci 17: 4933-4941.
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen S,
6. Shockett pe,
7. Picciotto MR,
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Miyaning bevosita, maqsadli gen ekspozitsiyasi bilan transgenik hayvonlar. Mol Pharmacol 54: 495-503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen S,
4. Nestler EJ,
5. Self DW
(2003) DFOSBning striatal hujayra tipiga xos eksperimenti kokainga qaratilgan rag'batni kuchaytiradi. J Neurosci 23: 2488-2493.
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Ballein BW
(2005) Pavloviya-instrumental klassning umumiy va natija o'ziga xos shakllari bo'yicha bazolateral va markaziy amigdala lezyonlarining ikki tomonlama ajralishi. J Neurosci 25: 962-970.
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Ballein BW
(2001) Instrumental konditsiyadagi yadro aksumbenslarining roli: akumbenslar yadrosi va qobig'i orasidagi funktsional disosiyatsiyaning isboti. J Neurosci 21: 3251-3260.
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y,
3. Theobald, ShU,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamin va diskriminatsiyali yondashuv o'rganish: 6-gidroksidopamin lezyonlarining interaktiv ta'siri va tizimli apomorfinni qo'llash. Psixofarmakologiya (Berl) 161: 425-433.
17. ↵
1. da Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Dikkinson A,
4. Ballein BW
(2002) Sitotoksik nukleus akumbens lezyonlarının kalamushlarda instrumental kondisyona ta'siri. Exp Brain Res 144: 50-68.
18. ↵
1. Di Ciano R,
2. Everitt BJ
(2004a) Bazolateral amigdala va yadro accumbenslar o'rtasida to'g'ridan-to'g'ri o'zaro ta'sirlar kalamushlar tomonidan kokainga mo'ljallangan xatti-harakatga asoslangan. J Neurosci 24: 7167-7173.
19. ↵
1. Di Ciano R,
2. Everitt BJ
(2004b) O'z-o'zini boshqaradigan kokain, geroin yoki sukroz bilan uyg'unlashtirilgan ogohlantirgichning shartli mustahkamlovchi xususiyatlari: o'ziga qaramlik xatti-harakatining qat'iyligi. 47 ([Suppl 1]) 202-213 nevroparmakologiya.
20. ↵
1. Dikkinson A
(1985) Faoliyat va odatlar: yurish-turish muxtoriyatini rivojlantirish. Filos Trans R London B Biol Sci 308: 67-78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Narkomaniya uchun neyroli kuchlanish tizimlari: harakatlardan tortib to majburlashgacha. Nat Neurosci 8: 1481-1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Xabarland U,
3. Conde F,
4. El Massioui N
(2005) Nigrostriatal dopamin tizimiga zararlanish stimulga javoban odat shakllanishini buzadi. J Neurosci 25: 2771-2780.
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. Hope IT,
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Moksolimbik dopamin tizimidagi miya manbalaridan kelib chiqqan nörotrofik omillar darajasining vaqtga bog'liqligi kokaindan chiqarilgandan so'ng: kokainning o'ziga xosligi inkubatsiyasiga bog'liq. J Neurosci 23: 742-747.
24. ↵
1. Hall J,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dikkinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Amigdala markaziy yadrosi va yadroviy akumbens yadrosi Pavlovning instrumental xulq-atvorga ta'sirini jalb qilishda ishtiroki. Eur J Neurosci 13: 1984-1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) d-amfetamin bilan takroriy davolanishni takomillashgan holda, keksayganligi yaxshilanadi. Behav Pharmacol 9: 299-308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadegyian K,
3. Kelley AE
(2002) Instrumental ta'limning erta birlashuvi yadro gulxanlarida oqsil sintezini talab qiladi. Nat Neurosci 5: 1327-1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Virus orqali vositachilik qilgan RNK parazitidan foydalanib, miyada mahalliy genlarni noktalashtirish. Nat Med 9: 1539-1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Preekpozitsiya kalamushlarni kokainning foydali samaralariga sezgirlaydi. Pharmacol Biochem Behav 37: 707-711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Schenk S
(1992) Amfetamin va nikotinning oldindan zarrilishi, kalamushlarni kam dozli kokainni o'zlashtirishi uchun predispoze qiladi. Psixofarmakologiya (Berl) 107: 271-276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Teylor JR
(1999) Miya manbalaridan neyrotrofik omil tomonidan lokomotor faollikni kuchaytirish va kokainga shartli mukofot. J Neurosci 19: 4110-4122.
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Nukleus akumbens yadrosi va qobig'i tomonidan kokainni qidirish harakati ustidan differentsial nazorat. Nat Neurosci 7: 389-397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Teylor JR
(1999) Preparatning giyohvandlikda frontostriatal disfunktsiyadan kelib chiqadigan impulsivligi: mukofot bilan bog'liq ogohlantirishlar orqali xatti-harakatlarni nazorat qilish uchun ta'sir. Psixofarmakologiya (Berl) 146: 373-390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Tuyadi motivatsiyasining ventral striatal nazorat qilish: Yutuvchi xatti-harakatlardagi roli va mukofot bilan bog'liq o'rganish. Neurosci Biobehav Rev 27: 765-776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Tabiiy yutuqlarning asabiylashuvi: giyohvand moddalarga aloqadorlik. J Neurosci 22: 3306-3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon Vt Jr.,
4. Whisler K,
5. Gilden L,
6. Beckmann AM,
7. Steffen S,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. O'z DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR,
17. Nestler EJ
(1999) Mushak ichidagi transkriptsion faktori DFBning ifodasi giyohga sezgirlikni nazorat qiladi. Tabiat 401: 272-276.
36. ↵
1. Konradi S,
2. Cole RL,
3. Hekkers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetamin tranzus faktor CRB orqali rat striatumida gen ekspresyonini tartibga soladi. J Neurosci 14: 5623-5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P.
(2006) D1 va D2 dopaminda retseptorlari o'z ichiga olgan o'rta yadroli neyronlar ichidagi kokainga asoslangan dendritik orqa miya hosil bo'lishi. Proc Natl Acad Sci AQSh 103: 3399-3404.
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) Dendritik zichlikdagi doimiy amfetaminli o'zgarishlarning joylashishi yadrodagi akumbens va kaudat-pitamen o'rta zarrachali neyronlarga to'g'ri keladi. Nöropsikofarmakologiya 28: 1082-1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Xulqli sezuvchanlikning induktsiyasi yadro akselerasining yadroidagi (lekin qobig'i bo'lmagan) kokain bilan indikatsiyalangan strukturali plastisit bilan bog'liq. Eur J Neurosci 20: 1647-1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Ventral tegmental hududga miya manbalaridan kelib chiqqan neyrotrofik omillarning yagona infuzioni keyinchalik kokainni qidirishdan uzoq vaqt talab qilinadigan kuchlanishni keltirib chiqaradi. J Neurosci 24: 1604-1611.
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) CREB va DFOSB tomonidan gen ekspressioni va kokain mukofotini tartibga solish. Nat Neurosci 6: 1208-1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Berton O,
6. Nestler EJ
(2004) DFOSB: miyada uzoq muddatli moslashish uchun molekulyar kalit. Brain Res Mol Brain Res 132: 146-154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dikkinson A
(2004) Sichqoncha orqali kokainni uzoq muddatli og'iz iste'mol qilishidan so'ng shartli faoliyat va instrumental mustahkamlash. Behav Neurosci 118: 1331-1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Giyohvandlikning molekulyar mexanizmlari. 47 ([Suppl 1]) 24-32 nevroparmakologiya.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Self DW
(2001) DFOSB: giyohvandlik uchun doimiy molekulyar kalit. Proc Natl Acad Sci AQSh 98: 11042-11046.
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Teylor JR,
6. Greengard P.
(2003) Nukleus akumbensidagi dendritik konlarni kokain tomonidan ishlab chiqarilgan proliferatsiyasi siklinga qaram bo'lgan kinaz-5 faolligiga bog'liq. 116: 19-22 neuroscience.
47. ↵
1. Nye U,
2. Hope IT,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Striatum va nukleus akumbensida kokain tomonidan surunkali FOSga bog'liq antijenning indüksiyasini tartibga solishning farmakologik tekshiruvlari. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671-1680.
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Teylor JR
(2003) Takrorlanadigan nikotin ta'sirida issiqda mukofot bilan bog'liq o'rganish kuchayadi. Nöropsikofarmakologiya 28: 1264-1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Teylor JR
(2004) Takrorlanadigan nikotin ta'sir qilish shartli mustahkamlash bilan javob beradi. Psixofarmakologiya (Berl) 173: 98-104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Berns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Yadro akumbensi yadrosi va qobig'ining lezzetlarining tuyadi pavlitsiyali yondashuv ta'siriga ta'siri va D-amfetamin bilan konditsioner mustahkamlash va lokomotor faollikni kuchaytirish. J Neurosci 19: 2401-2411.
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardinal RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Nucleus accumbens dopaminning kamayishi, shuningdek, tuyadi, Pavlovning yondashuv xatti-harakatlarini ham buzadi: mezoaktsmens dopamin funktsiyasi uchun ta'sir. Behav Brain Res 137: 149-163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Stereotaksik koordinatlardagi rat miyasi (Academic, Sidney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) surunkali stressdan so'ng mukofotlash bilan bog'liq miya strukturalarida DFOSB indüksiyasidir. J Neurosci 24: 10594-10602.
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. ga Moal M,
4. Simon H.
(1990) Stress- va farmakologik tarzda ta'sirlangan xulq-atvorni sezgirlash amfetaminni o'z-o'zini boshqarish uchun zaiflikni oshiradi. Brain Res 514: 22-26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Nikotin va kokainning o'ziga xos xususiyatlari uchun umumiy neyron substratlar. Fan 275: 83-86.
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Giyohvandlik: yomon odatlarni qo'shish. Tabiat 398: 567-570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) Preparatning nervning asosi: giyohvandlikning rag'batlantiruvchi sensitizatsiya nazariyasi. Brain Res Brain Res Rev 18: 247-291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Amfetamin yoki kokain bilan takroriy davolanishdan so'ng yadrodagi akumbens va prefrontal korteksdagi dendritlar va dendritik qirralarning morfologiyasidagi o'zgarishlar. Eur J Neurosci 11: 1598-1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) Kokainning o'z-o'zini boshqarishi yadrodagi akumbens va neokorteksdagi dendritlar va dendritik uzuk morfologiyasini o'zgartiradi. Synapse 39: 257-266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Sichqoncha mediyal nukleus akumbenslarida, hippokamp va katekolaminerjik klemenslar zararli neyronlarga yaqinlashadi va bir-biriga biriktiriladi. Brain Res 527: 266-279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Bo'ron D,
4. Nestler EJ
(2003) Amfetamin bilan sichqonchaning miyasida CRE-mediatsiyalangan transkripsiyani tartibga solish. Synapse 48: 10-17.
62. ↵
1. Smit AD,
2. Bolam JP
(1990) Identifikatsiya qilingan neyronlarning sinaptik birikmalarini o'rganish natijasida bazal ganglionlarning nerv tarmoqlari. Trends Neurosci 13: 259-265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) NMDA va dopamin D ning tasodifiy faollashuvi1 sezgir instrumental o'rganish uchun yadroli accumbenslar yadrosi ichidagi retseptorlari talab qilinadi. J Neurosci 20: 7737-7742.
64. ↵
1. Teylor JR,
2. Horger BA
(1999) Qo'shilgan amfetamin tomonidan ishlab chiqarilgan shartli mukofotlar uchun tezkor javob berish giyoh sensitizatsiyasidan keyin kuchaytiriladi. Psixofarmakologiya (Berl) 142: 31-40.
65. ↵
1. Teylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Psikomotor ogohlantiruvchi dorilarni muntazam ravishda takroran berish, kalamushlarda pavlitsiyali yondashuv xatti-harakatlarini takomillashtirishni o'zgartiradi: kokain, d-amfetamin va 3,4-metilendioksimetamfetaminning differensial ta'siri ("Ecstasy") Biol Psychiatry 50: 137-143.
66. ↵
1. Vezina R,
2. Lorrain DS,
3. Arnold GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) midbrain dopamin neyron reaktivligining sezuvchanligi amfetaminni orttirishga yordam beradi. J Neurosci 22: 4654-4662.
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) DFF g'ildirakni boshqaradi. J Neurosci 22: 8133-8138.
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Avvalgi amfetamin ta'sirida rag'batlantirishni sezgirlash: sukroz mukofotini oshirish uchun "istak" ni oshirdi. J Neurosci 21: 7831-7840.
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Ballein BW
(2004) Dorsolateral striatumning leykozlari natijalarni kutish davomiyligini saqlaydi, lekin instrumental o'rganish odatlarining shakllanishiga putur etkazadi. Eur J Neurosci 19: 181-189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA,
3. Selley, ShU,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Berton O,
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Morfin ta'siridagi yadrodagi akumbenslarda DFOSB uchun muhim rol. Nat Neurosci 9: 205-211.
;