Surunkali farmokologik, hissiy va optogenetik ogohlantiruvchiga javoban Striatal-o'rta shoshilinch neyron subtipalarida DeltaFosB indüksiyasi (2013)

J Neurosci. 2013 Nov 20; 33 (47):18381-95. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013.

Lobo MK, Zaman S, Damez-Verno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, Nugent A, Finkel E, Chaudhury D, Chandra R, Riberio E, Rabkin J, Mouzon E, Cachope R, Cheer JF, Han MH, Dietz DM, Self DW, Hurd YL, Vialou V, Nestler EJ.

manba

Maryland shtatidagi Merilend tibbiyot maktabi, Baltimor shtatidagi Merilend shtatidagi 21201, Fishberg nevrologiya kafedrasi va Fridman miya instituti, Sinay tog'idagi Ixahn tibbiyot maktabi, Nyu-York, Nyu-York, 10029, Psixiatriya va farmakologiya va tizimlari kafedralari Nyu-Yorkdagi Nyu-York shtatidagi Tibbiyotning Ixnn tibbiyot maktabi, Nyu-York shtatidagi 10029, Psixiatriya bo'limi, Texas janubi-g'arbiy tibbiyot markazi universiteti, Dallas, Texas, 75390, Farmakologiya va toksikologiya kafedrasi va Nyu-York shtatidagi State University of Addictions Buffalo, Nyu-York, Nyu-Yorkdagi 14214 va Institut National de la Sante et de la Recherche Médicale, U952, Markazning Milliy Recherche Scientifique, Unite Mixte de Recherche 7224, UPMC, Parij, 75005, Fransiya.

mavhum

Transkripsiya faktori, DFOSB, striatumda suiiste'mol qilish, antipsikotik dori-darmonlar, tabiiy foyda va stress kabi bir nechta surunkali ogohlantiruvchi vositalar yordamida qat'iy va qat'iy tarzda indüklenir. Biroq, juda kam sonli tadqiqotlar ikki striatal mediadan uchuvchi neyron (MSN) pastki tipidagi DFB indüksiyon darajasini ko'rib chiqdilar. Biz lyuminestsent muxbir BAC transgen sichqon foydalanish boyitilgan va dopamin retseptorlari 1 (D1) qorin striatumdaki MSNs boyitilgan dopamin retseptorlari 2 (D2) bilan ΔFosB indüksiyon baholash uchun qilish, markaz (MAK) qobiq va yadro va orqadagi striatumdaki accumbens (dStr kokain, etanol, D (9) -tetrahidrokannabinol va opiyatlar kabi ko'plab giyohvand moddalarni surunkali ta'siridan keyin; antipsikotik preparat, haloperidol; balog'atga etmagan bolalarni tarbiyalash; sukrozni ichish; kaloriya cheklovi; serotoninni selektiv qaytarish inhibitori antidepressanti, fluoksetin; va ijtimoiy mag'lubiyat stress. Bizning topilmalarimiz shuni ko'rsatadiki, ko'plab ogohlantiruvchilarning surunkali ta'siri, uchta striatal mintaqada MSN-pastki turi selektoriyada DFOSB ni keltirib chiqaradi. DFF ning striatumda elektron vositachiligini indüksiyasini o'rganish uchun sinogtik kiritishlarni NAc ga yuboradigan limbik miya hududlarida faollikni oshirish uchun optogenetikadan foydalanamiz; bu hududlar ventral tegmental maydoni va bir nechta glutamaterjik operativ hududlarni o'z ichiga oladi: medial prefrontal korteks, amigdala va ventral hippokampus. Ushbu optogenetik sharoitlar NAc yadrosida va qobiqdagi MSN subtipalarida DFOSB indüksiyasining juda aniq naqshlariga olib keladi. Shu bilan birga, bu topilmalar surunkali ogohlantirishlarga javoban Striatal MSN subtipalarida DFOSB indüksiyasini tanlash modellarini o'rnatadi va striatumda DFB ning indüksiyon mexanizmi mexanizmlari haqidagi yangi tushunchalarni beradi.

Kirish

Surunkali qo'zg'atuvchilar, jumladan, suiiste'mol qilish, antipsikotik dorilar, stresslar va tabiiy natijalar DFOSBning barqaror to'planishiga olib keladi. FosB gen, striatumda (masalan, Hope va boshq., 1994; Xiroi va Graybiel, 1996; Xiroy va boshqalar, 1997; Moratalla va boshq., 1996; Perrotti va boshq., 2004, 2008; Muller va Unterwald, 2005; McDaid va uning hamkorlari, 2006; Teegarden va Bale, 2007; Wallace va boshq., 2008; Solinas va boshq., 2009; Vialou va boshq., 2010, 2011; Kaplan va boshq., 2011). Ushbu birikma bu miya hududida DFB tomonidan ko'plab genlarni ikki tomonlama tartibga solishga olib keladi (McClung va Nestler, 2003; Renthal va boshq., 2008, 2009; Vialou va boshq., 2010; Robison va Nestler, 2011). dopamin retseptorlari 95 (D1) yoki dopamin retseptorlari 1 (D2), shu jumladan, ko'p genlar o'z boyitish asosida ikkita pastki ajratilgan qilingan GABAergic loyiha o'rta og'ir neyronlarning (MSNs) ning striatum iborat asosan (~2%) (Gerfen, 1992; Graybiel, 2000; Lobo va boshq., 2006; Heiman va boshq., 2008) va ularning differentsial chiqimlari bilan alohida subkortikal tuzilmalarga (Albin va boshq., 1989; Gerfen, 1992; Kalivas va boshq., 1993; Graybiel, 2000; Nikola, 2007; Smit va boshq., 2013). Yaqinda ushbu ventilyator striatumda (nucleus accumbens [NAc]) va dorsal striatumda (dStr) ushbu motivatsiya va vosita harakatlariga vositachilik qilishda ushbu MSN subtipalarining alohida molekulyar va funktsional rollarini ko'rsatadigan ko'plab xabarlar mavjud (Lobo va Nestler, 2011; Gittis va Kreitzer, 2012).

Avvalgi tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, DFNBX asosan D1-MSNda kokain yoki surunkali g'ildirak bilan ishlaydigan surunkali davolanish,Moratalla va boshq., 1996; Werme va boshq., 2002; Lee va boshq., 2006), shunga qaramay surunkali cheklash stressi MSN subtipalarida (DFOSB)Perrotti va boshq., 2004). Bundan tashqari, hujayra turiga xos transgenli chiziqlardan yoki virus orqali yuborilgan genlarni o'tkazishdan dalolat beruvchi dalillar, D1-MSNda DFNB indüksiyasini kokainga qiziqish va tizimli plastika, morfin, g'ildirak yugurishi, oziq-ovqat mukofotini va surunkali ijtimoiy mag'lubiyatga chidamliligini oshiradi D2-MSNda DFOSB induktsiyasi g'ildirakning ishlaydigan harakatlariga salbiy munosabatni tartibga soladi (Kelz va boshq., 1999; Werme va boshq., 2002; Colby va boshq., 2003; Olausson va boshq., 2006; Zachariou va boshq., 2006; Vialou va boshq., 2010; Grueter va boshq., 2013; Robison va uning hamkorlari, 2013).

D1-MSN va D2-MSNlar bilan farqli ta'siri bilan, bu surunkali motivatsion stimullarni tartibga solish uchun DFOSB uchun hal qiluvchi rolni nazarda tutgan holda, biz bu erda MSN subtipalarida DFOSB induktsiyasining naqshlari haqida bir necha surunkali ogohlantirishlar, jumladan surunkali dori vositalari antipersikotik dori bilan surunkali davolash, atrof-muhit va appetitning o'zgargan ta'siriga surunkali ta'sir qilish, surunkali ijtimoiy mag'lublik stressi va antidepressant bilan surunkali davolash. DFSB ning bir necha eferent limbik miya hududlari orqali DFOSB indüksiyonunu nazorat qiluvchi elektron mexanizmlarini tushunish uchun, biz dopaminerjik yoki glutamaterjik afferent miya hududlarida hujayra jismlarini bir necha marta faollashtiradigan va MSN subtipalarida paydo bo'lgan DFOSB induksiyasini o'rganish uchun optogenetik texnologiyalardan foydalanamiz. Bizning natijalarimiz D1-MSN va D2-MSN-larda DFOSBning surunkali ogohlantirishlar orqali yangi paydo bo'lishini ta'minlaydi va birinchi marta DFOSB ning elektronik vositachiligini striatum va selektiv MSN subtipalarida ko'rsatishadi.

Materiallar va usullari

Hayvonlar.

D1-GFP or D2-GFP hemizigot sichqonlari (Gong va boshq., 2003) C57BL / 6 fonida 12-X nurli qorong'i aylanish jarayonida ad libitum oziq-ovqat va suv. Barcha tadqiqotlar Merilend Tibbiyot maktabi Universitetida Institutsional Hayvon Qo'llab-quvvatlash va Foydalanish Qo'mitalari va Sinay tog'idagi Ihnn Tibbiyot maktabi tomonidan ishlab chiqilgan qo'llanmalarga muvofiq o'tkazildi. Barcha tajribalar uchun erkak sichqonchani (yoshi 8 hafta) ishlatilgan. Barcha sichqonlarga perfüze qilindi va nur tsikli tushunchasi davomida miyalar yig'ildi. Hemizigot D1-GFP va D2-GFP C57BL / 6 yoki FVB / N fonida sichqonlarning D1-MSN va D2-MSNning xatti-harakati, fiziologiyasi va yovvoyi turdagi sichqonlarga teng bo'lishi ko'rsatilgan.Lobo va boshq., 2006; Chan va boshq., 2012; Nelson va boshq., 2012). Bundan tashqari, ushbu tadqiqotda ko'rilgan DFBQ indüksiyonunun umumiy naqshlari, hujayra bo'lmagan turdagi selektiv vositalar bilan yovvoyi turdagi hayvonlarda uchraydigan (masalan, Perrotti va boshq., 2004, 2008).

Kokainni davolash.

D1-GFP (n = Davolash uchun 4) va D2-GFP (n Har bir davolash uchun 4) sichqon 7 kuniga intraperitoneal kokainni (20 mg / kg) yoki 0.9% eritrotsitni qabul qildi. 1 yoki 3 d kokain (20 mg / kg) in'ektsiyasi uchun sichqon 6 yoki 4 d 0.9% salin in'ektsiyasini olgan, keyin navbati bilan 1 yoki 3 d giyoh in'ektsiyalarini oldi. Barcha sichqonchani so'nggi in'ektsiyadan so'ng 24 soat oraliqda perfüze qilindi. Ushbu dozadagi kokain avvalgi tadqiqotlar asosida tanlangan (masalan, Maze va boshq., 2010).

Haloperidolni davolash.

D1-GFP (n = 3 yoki 4 har bir davolash uchun) va D2-GFP (n Har bir davolash uchun 4) sichqon ichimlik suvida haloperidol (2 mg / kg), pH 6.0 (Narayan va boshq., 2007), yoki muntazam ichimlik suvi, pH 6.0, 3 hafta (21 d) uchun. Sichqoncha kun 22da perfüze qilindi.

Morfinni davolash.

D2-GFP sichqonchani (n = 4 yoki 5) izofluran bilan qisqacha anesteziya qilingan va 25 kunidagi 1 va 3 kunida teri osti morfin (XNUMX mg) yoki sham peletlarini oldiMazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Sichqoncha kun 5da perfüze qilindi.

Etanolni davolash.

D2-GFP sichqonchani (n = 4 yoki 5) 10% etanol (EtOH) ta'siriga uchragan, C57BL / 6 ning ichish ko'rsatgan dozasiYoneyama va boshq., 2008). Sichqonlarga 10% EtOH (shisha A) va suv (shisha B) uchun ikkita shisha tanlovi testi berildi, D2-GFP 10 d uchun har ikkala idishdagi (shisha A va B) olingan suvni nazorat qiladi. EtOH idishga ega bo'lgan barcha sichqonchalar EtOH uchun afzallik (100 × shisha A hacmi / [shisha A hajmi + shisha B hajmi]) tomonidan hisoblangan. 10% EtOH shlyuzini olgan sichqon suv bilan solishtirganda sezilarli darajada ko'proq EtOH iste'mol qilgan, ikkala idishdagi suvni olgan sichqonlarda esa suyuqlik iste'molida hech qanday farq yo'q edi. 10 kunining kechqurunida barcha sichqonlarga an'anaviy ichimlik suvi berildi va 11 kuniga perfuz qilindi.

D (9) -tetrahidrokannabinol (D (9) -THC) davolash.

D2-GFP (n Har bir davolash uchun 3) 9 d uchun sutkada ikki marta kuniga ikki marta D (10) -THC (0.9 mg / kg) yoki transport vositasi (0.3% eritma bilan 7% Tween) intraperitoneal in'ektsiyalarni oldiPerrotti va boshq., 2008). Sichqoncha so'nggi in'ektsiyadan so'ng 24 soat davomida perfüze qilindi.

Kokain o'zini o'zi boshqarish.

D2-GFP sichqonchani (n = 4 yoki 5) dastlab 20 sakkaroz peletlari uchun 1 (FR1) takomillashuv jadvali bo'yicha 30 sakkaroz pelletlarini qabul qilish mezonlari standart protsedura bo'yicha (masalan,Larson va boshq., 2010). Qopqoq matbuotga o'rgatilgan sichqonlarga keyinchalik kokainning intravenöz qo'llanilishiga ruxsat berish uchun jarrohlik yo'li bilan tomir ichi kateter bilan joylashtirildi. Jarrohlikdan bir hafta o'tgach, sichqonchani FRNNXX dasturining takomillashuvida 2-kunlik sessiyalar davomida o'zini o'zi boshqarish paradigmasi bilan tanishtirildi. O'z-o'zini boshqarish apparati (Med Associates) dasturning faol bandiga javob (1 s) orqali kokain (2.5 mg / kg / to'g'ri kolbaga bosish uchun infuziya), natijada esa faol bo'lmagan qo'lni dasturlashtirilgan natijaga ega emas edi. 0.5 xaftada haftasiga 1 d, 2 haftada FR5 dasturida sichqonlar o'z-o'zidan boshqariladigan kokain. D2-GFP nazorati uchun 0.9% salin in'ektsiyasini teng vaqt oralig'ida qabul qilgan sichqonlardan foydalanildi. Sichqonlarga oxirgi marta giyoh yoki sho'rlanishdan keyin 24 soat keyin perfuz qilindi.

Qahramon o'zini o'zi boshqarish.

Eroinning o'zini o'zi boshqarishidan oldin, D2-GFP sichqonchani (n = 4) har kuni 7 xNUMX sutkalik sessiyalarda shokoladli pechlar uchun (BioServ, Tozsiz aniqlik pelletlari) qo'lda matbuot uchun tayyorlangan. Qo'lbola matbuotni o'rganish sichqonlari keyinchalik geroinni tomir ichiga yuborish uchun intravenöz kateter kateter bilan jarrohlik yo'li bilan joylashtirildi. Jarrohlikdan bir hafta o'tgach, sichqonlar 1 sutkalik sessiyalarda o'zini o'zi boshqarish paradigmiga standart protsedura bo'yicha FR3 dasturini takomillashtirish dasturiga kiritildi (Navarro va boshq., 2001). O'z-o'zini boshqarish apparati (Med Associates) dasturiy vositaga ega bo'lib, faol qo'lda berilgan javob (5 s) orqali geroinni (30 ig / kg / qarshi, NIDA Dori-darmon ta'minot dasturi) etkazib berishga olib keldi, qo'lda dasturlashtirilgan natijalar yo'q edi. Hayvonlarga 14 d uchun geroinning o'z-o'zini boshqaradigan protsedurasidan foydalanish huquqi berildi. D2-GFP nazorati uchun 0.9% salin in'ektsiyasini teng vaqt oralig'ida qabul qilgan sichqonlardan foydalanildi. Sichqonlarga oxirgi eroin yoki sho'rlangan idishdan so'ng 24 soatda parflar kiritildi.

Balog'atga etmagan bolalarni tabiatni boyitish.

D2-GFP (n = Guruhda 4) sichqonchani kalamushlardan uyarilgan paradigma yordamida postnatal kunida 21 (P21) da boyitilgan muhitga yoki normal yashash sharoitlariga singib tashlanganYashil va boshqalar, 2010). Boyitilgan muhit sichqonchani tünellari, gumbazlari va g'ildiraklari, to'playdi, kulbalar (Bio Serv) va boshqa o'yinchoqlarni o'z ichiga olgan boyitish moslamalari bilan to'ldirilgan, boyituvchi-o-kob to'shamasi (Andersons Laboratoriya yotoqlari) bilan yanada katta xamir qafasidan iborat edi. Sichqoncha uy sharoitida 4 hafta davomida P50gacha qolgandi va undan keyin perfuz qilindi.

Sakrozni davolash.

D2-GFP sichqonchani (n = 4 yoki 5), 10% sukroz uchun avvalgi o'rganishga o'xshash ikkita shisha tanlovi testi berilgan (Wallace va boshq., 2008). Sichqonlarga 10% sukroz (shisha A) va suv (shisha B) berilgan D2-GFP 10 d uchun har ikkala shishada olingan suvni nazorat qiladi. Sakroz idishlarini olgan barcha sichqonchalar sukrozni afzal ko'rgan (100 × shisha A hajmli / shisha A hajmli + shisha B hajmi). 10% sukroz shishasi olingan sichqonchalar suv bilan taqqoslaganda sezilarli darajada sukroz iste'mol qilar ekan, har ikkala idishdagi suvni olgan sichqonlarda ham suyuqlik iste'moli farq qilmadi. 10 kunining kechqurunida barcha sichqonlarga an'anaviy ichimlik suvi berildi va 11 kuniga perfuz qilindi.

Kalori taqiqlash.

D2-GFP sichqonchani (n = 4 boshiga genotip) kaloriyani cheklash protokoli orqali o'tdi, unda 60% ad libitum kaloriyalar kunlik (Vialou va boshq., 2011) 10 uchun d. D2-GFP nazorat sichqonlari chowga to'liq kirishni oldi. 10 kunining kechqurunida barcha sichqonchalar chowga to'liq kirish oldilar va 11 kunida perfüze qilindi.

Ijtimoiy mag'lubiyat stress.

D2-GFP sichqonchani (n = Guruhda 4 yoki 5) 10 d ijtimoiy mag'lubiyatning stressini oldindan aytib o'tilganidek amalga oshirdi (Berton va boshq., 2006; Krishnan va boshq., 2007). Sichqoncha katta xamir qafasida 1 min uchun tajovuzkor CD5 nafaqaga chiqqan naslchilarga ta'sir ko'rsatdi. Keyinchalik sezilarli kontaktni saqlab qolish uchun teshikli bir bo'linmaning boshqa tomonidagi bir xil kafeda 24 s uchun sichqonchalar joylashtirildi. Ertasi kuni sichqonchalar bir xil sharoitlarda va uy sharoitida yangi CD1 sichqonchasiga tushishdi. Bu har kuni yangi CD10 bilan 1 d uchun takrorlandi. Nazorat sichqonlari xuddi shunday sharoitda mag'lubiyatsiz stress bilan joylashtirilgan. Sichqoncha 11 kuni ijtimoiy ta'sir o'tkazish uchun sinovdan o'tkazildi. Sichqoncha birinchi marta yangi sichqonchani boshqa maqsadsiz (maqsadsiz) ochiq maydon qutisidagi yangi kameraga ta'sir o'tkazgan vaqt uchun sinovdan o'tkazildi va so'ngra xonaning orqasida joylashgan yangi CD1 sichqonchasi (maqsad) bilan o'zaro ta'sir o'tkazadigan vaqt uchun sinov qilindiBerton va boshq., 2006; Krishnan va boshq., 2007). Sichqoncha ilgari tasvirlangan parametrlarga asoslangan sezgir yoki moslashuvchan guruhlarga ajratildi (Krishnan va boshq., 2007). Bunga yangi sichqonchani va shovqin nisbati bilan o'tkaziladigan umumiy vaqtni kiritish mumkin edi: (maqsadga sarf qilinadigan vaqt / maqsad bilan sarflanadigan vaqt) × 100. Ushbu chora ishonchli tarzda sezgir va moslashuvchan guruhlarni aniqlaydi va boshqa qiziqishlarga qarab farqlanadi (Krishnan va boshq., 2007). Barcha sichqonlarning ijtimoiy shovqin testidan so'ng (24 soatlik so'nggi ijtimoiy shikastlanish davridan keyin) 48 soatda ko'tarildi.

Fluoxetinni davolash.

D2-GFP sichqonchani (n = Guruhda 3 yoki 4) 14 kunlik intraperitoneal fluoksetin (20 mg / kg) yoki vosita (0.9% siklodekstrin bilan 10% salin)Berton va boshq., 2006). Sichqoncha so'nggi in'ektsiyadan so'ng 24 soat davomida perfüze qilindi.

Stereotaksik jarrohlik.

D2-GFP sichqonchani kichik hayvon stereotaksik vositasiga joylashtirilgan ketamin (100 mg / kg) / ksilazin (10 mg / kg) bilan behushlik bilan og'rigan va ularning bosh suyagi yuzaga kelgan. O'ttiz uch o'lchamli shpritsli igna bir soniyada 0.5-1 mili, bir daqiqada 0.1 mL, infektsiyalangan ventral tegmental hududga (VTA), medial prefrontal korteks (mPFC), amigdala yoki ventral hippokampus vHippo). AAV [adeno bilan bog'liq virus] -ssin-ChR2 [kanalli xodopsin 2] -EYFP yoki AAV-hSyn-EYFP D2-GFP sichqonchani (n (Har bir guruh uchun 5) stereotaksik koordinatlarda (oldingi orqa, -3.3 mm, lateral-medial, 0.5 mm, dorsal-ventral, -4.4 mm, 0 ° burchagi). Buning ortidan 26 mm uzunlikdagi VTA (oldingi orqa, -3.9 mm, lateral-medial, 3.3 mm, dorsal-ventral, -0.5 mm) orqali implantatsiya qilingan ikkilamchi kanola (3.7-gauge) kuzatildi (XNUMX-gauge)Koo va boshq., 2012; Chaudhury va boshq., 2013). AAV-CaMKII-CHR2-mCherry yoki AAV-CaMKII-mCherry mPFCga (n = Guruhda 4 yoki 5), amigdala (n = Guruhda 3 yoki 4) yoki vHippo (n = Guruhi uchun 3 yoki 4) D2-GFP 105 mR surunkali implantatsiyalangan optik tolalar (Sparta va boshq., 2011) implantatsiyadan so'ng amalga oshirildi. Koordinatalari quyidagicha edi: mPFC (infralimbic maqsadli, ammo oldingi posterior, 1.7 mm, lateral-medial, 0.75 mm, dorsal-ventral, -2.5 mm, 15 ° burchagi) va optik tolalar (dorsal-ventral, -2.1 mm); amigdala (bazolateral amigdala maqsadli edi, ammo biz amygdala markaziy yadrosiga, oldingi orqa, xNUMX mm, lateral-medial, 1.6 mm, dorsal-ventral, xNUMX mm, 3.1 ° burchagi) va optik tolasi (dorsal-ventral, -4.9 mm); vHippo (ventral subikulum maqsadli edi, ammo biz ventral hipokampusning boshqa mintaqalariga virusning tarqalishini kuzatdik, oldingi-orqa, -0 mm, lateral-medial, 4.9 mm, dorsal-ventral, -3.9 mm, 3.0 ° burchak) va optik tolalar (dorsal-ventral, -5.0 mm).

Optogenetik sharoit.

uchun ning Vivo jonli VNa neyronlarning otishni o'rganishning optik tekshiruvi, 200 mm yadroli optik tolali patch kabeli, kanülka biriktirilishi uchun o'zgartirilgan. Elyaf kanülle sabitlendiğinde tolalar uchi, kanülün tashqari ~ 0.5 mm (Lobo va boshq., 2010; Chaudhury va boshq., 2013). Uchun ning Vivo jonli mPFC, amigdala va vHippo neuronal otishni optik nazorat qilish, joylashtiriladigan bosh tolasi elyafiga (Sparta va boshq., 62.5) 2011 mkm ajratilgan tolali patch kabeli qo'yilgan. Optik tolalar FC / PC adapteri orqali 473 nm ko'k lazerli diyotga (Crystal Lasers, BCL-473-050-M) ulangan va stimulyator orqali (Agilent, 33220A) nur pulslari hosil qilingan. VTA uchun, ko'k chiroq (473 nm) fazaviy pulslar, 20 milodiy uchun 40 Hz (Chaudhury va boshq., 2013), 10 d dan kuniga kamida 5 daqiqaga yetkazildi. MPFC, amygdala va vHippo uchun 473 d uchun xNUMX min uchun 20 s uchun xNUMX seysmik nur (30 nm) pulslar yuborildi. Nurni etkazib berish uy qafasida bo'lib o'tdi va barcha sichqon so'nggi nashrdan so'ng 10 soat davomida perfüz qilindi.

In vitro patch-qisqich elektrofizyologiyasi.

Barcha hujayrali yozuvlar VTA dopamin neurons yoki mPF glutamatergic neuronsdan yuqorida qayd etilgan viruslar bilan yuborilgan sichqonlardan aktiv miya bo'laklarida olingan. Sichqoncha ustida sichqoncha yozuvlari yo'q ning Vivo jonli stimulyatsiya, lekin 1 d tilim stimulyatsiyasi (1 d) yoki 4 d bilan ning Vivo jonli stimulyatsiya va 1 d tilini stimulyatsiya qilish (5 d). Stressni kamaytirish va sog'lom bo'laklarni olish uchun sichqon elektrofizyologiyaga olib kirilgandan so'ng darhol behushlik ko'rsatdi va 40-60 s uchun muzlatilgan aCSF bilan reaksiyaga kirdi, bu 128 mm NaCl, 3 mm KCl, 1.25 mm NaH2PO4, 10 mm d-glyukoza, 24 mm NaHCO3, 2 mm CaCl2, va 2 mm MgCl2 (95% O bilan oksijenlanadi2 va 5% CO2, pH 7.4, 295-305 mOsm). MPFC yoki VTA o'z ichiga olgan o'tkir miya bo'laklari, NaClni 254 sakkizoz bilan to'liq almashtirib va ​​95% O bilan to'ldirilgan holda, sovuq sukrozda-aCSFda mikroslik (Ted Pella) yordamida kesilgan2 va 5% CO2. 1 ˚ C uchun xSUMX bilan tutashgan xonada bo'linmalar 37-da saqlanib turdi. To'liq hujayra oqimi uchun patchli pipetalar (3-5 MΩ) ichki to'ldirma bilan to'ldirilgan: 115 mm kaliy glyukonat, 20 mm KCl, 1.5 mm MgCl2, 10 mm fosfokreatin, 10 mm HEPES, 2 mm magniy ATP va 0.5 mm GTP (pH 7.2, 285 mOsm). Barcha hujayrali yozuvlar 34 ° C da aSF yordamida bajarildi (oqim tezligi = 2.5 ml / min). Moviy nurli poezdlar (mPFC uchun 20 Hz yoki faz 20Hz, VTA uchun 40 milodiy) 473 nm ko'k lazerli diodga (OEM) FC / PC adapteri orqali bog'langan va mPFC va VTA chiziqlariga 200 optik tolali optik tolalar Amaliy qisqich eksperimentlar Multiklampli 700B kuchaytirgichi yordamida amalga oshirildi va ma'lumotlar yig'ish pClamp 10 (Molecular Devices) da amalga oshirildi. Eksperimentlar davomida qarshilik qarshiligi kuzatildi va membran oqimlari va keskinliklar 3 kHz (Bessel filtrasi) da suzilgan.

Immunohistokimyo.

Sichqonlarga xloral hidrat bilan behushlik qilingan va 0.1 m PBS bilan perfuz qilingan va PBS ichida 4% paraformaldehid. Brainlar 4% paraformaldehidda bir kecha-kunduzda eritildi va keyin 30% sukrozda cyropreerved qilindi. Braunlar 35% natriy azid bilan PBS ichiga kryostat (Leika) 0.1 mmda bo'lindi. Immunohistokimyo uchun 3% 0.01% Triton-X bilan PBS ichida 1 soat oralig'ida 1% normal eshak sarumida immunohistokimyo uchun xona haroratida shakerda blokirovka qilindi. Keyin bo'limlar xona ichidagi haroratda shakar moddasida birlamchi antikorlarda inkübe qilingan. Qo'llaniladigan antikorlar quyidagilardir: quyon anti-FosB (2000: 48, katalog # sc-1, Santa Cruz biotexnologiyasi), sichqonchani anti-NeuN (1000: 377, katalog #MAB1, Millipore), tovuqga qarshi GFP (5000: 10 , katalog # 20-1, Aves) va quyon anti-CREB (cAMP javob elementini bog'laydigan protein; 1000: 06, catalog # 863-1, Millipore). Ertasi kuni seksiyalar PBSda durulandı, keyin ikkinchi darajali antikorlarda 3 h kuluçkalaması qilingan: eshak piyodalarga qarshi quyon Cy5, eshak piyodalarga qarshi sichqonchani Cy488 va eshak piyozi DyLight-488 yoki Alexa-XNUMX (Jackson ImmunoResearch Laboratories). MCherry va tirosin hidroksilaz immunohistokimyası uchun, tajribalar ilgari tasvirlangan (Lobo va boshq., 2010; Mazei-Robison va uning hamkorlari, 2011). Bo'limlar PBSda yuvilib, slaydlarga o'rnatildi va lang ochildi.

Ro'yxatdan va hujayra hisoblash.

Immunofluoresans Zeiss Axioscope yoki Olympus Bx61 konfokal mikroskopida ko'rsatildi. Hujayra hisoblash ImageJ dasturi bilan amalga oshirildi. NAc (yadro va qobiq) va dorsal striatumning bregma 1.42-1.1 namunalarini namuna olish 2 yoki 3 miya qismidan / hayvondan olingan Anjir. 1A). 400 mm × 500 o'lchamli tasvir yordamida sichqoncha uchun bosh miya miqdori uchun jami 250-250 hujayra hisoblandi. Hujayralar, avvalgi ishiga o'xshash ImageJ dasturidan foydalanilgan (Lobo va boshq., 2010). Taxminan 400-500 umumiy NeuN xujayralari sichqoncha boshiga bosh miya miqdori hisoblanib, GFP soni+, GFP+: DFB+, GFP-, va GFP-: DFB+ Har bir mintaqada hujayralar hisoblangan. Ma'lumotlar quyidagi tarzda aniqlandi: (GFP+: DFB+ neyronlar × 100%) / (umumiy GFP+ nöronlar) va (GFP-: DFB+ neyronlar × 100%) / (umumiy GFP- neyronlar). Statistik tahlillar GraphPad Prism dasturi yordamida amalga oshirildi. Barcha hujayralar sonini tahlil qilish uchun ikki tomonlama ANOVA va Bonferroni post testlari qo'llanildi.

Shakl 1.  

Surunkali giyoh D1-MSNda striatal hududlarda DFosB ni tanlab beradi. A, Hujayra hisoblash uchun bregma + 1.42 dan + 1.10gacha bo'lgan striatal bo'limlar ishlatilgan. A D2-GFP Striatal bo'lim uchta striatal mintaqani o'rganadi: NAc yadrosi, ...

natijalar

DOSNM-MSN va D1-MSNda DFOSB turli sabablarga ko'ra kokain va haloperidol

Biz birinchi bo'lib MSN subtipalarida DFOSB indüksiyasini tekshirdik D1-GFP va D2-GFP Oldindan D1-MSN'larda DFOSB oqsini indamaslikka ko'rsatadigan surunkali giyoh shartlarini qo'llagan sichqonMoratalla va boshq., 1996). D1-GFP va D2-GFP D1 yoki D2 retseptorlari geni ostida yashil lyuminestsent oqsilni ifodalovchi BAC transgenik sichqonlari (Anjir. 1A), 20 d uchun intraperitoneal kokain (7 mg / kg) yoki sho'rlangan in'ektsiyani oldi va miyani oxirgi in'ektsiyadan (24 soatdan keyin) to'plandiAnjir. 1B). Keyinchalik NeuN, GFP yoki FosB'ye qarshi antikorlar foydalanib, miya qismlarida immünohistokimya uygulandık va NAc yadro, NAc qobig'i va dStr (Anjir. 1A,C). Anti-FosB antikorining to'liq uzunlikdagi FosB va DFB ni taniganiga qaramay, Western blotting yoki immunohistokimyadan foydalangan holda ko'plab tadqiqotlar DFOSB 24-dan ajratib olish vaqtida mavjud bo'lgan yagona aniqlanadigan turning ekanligini tasdiqladi (masalan, Perrotti va boshq., 2008). Shuning uchun biz bu ishda faqatgina DFB ni aniqlash uchun 24 yoki undan ko'p vaqtni beyinni to'plash uchun foydalanganmiz. Striatal MSNlar striatumdagi barcha neyronlarning% 95 foizini tashkil qilganligi uchun GFP ni aniqlash uchun NeuN immunolabeling ishlatilgan- (masalan, D2-MSN-larda mavjud bo'lgan) D1-GFP Sichqoncha va D1-MSNlar D2-GFP sichqon). Biz buni topdik D1-GFP giyoh bilan davolash qilingan sichqonlarda GFPda DFB ning muhim indüksiyonu ko'rsatilgan+/ NeuN+ NAc yadrosi, NAc qobig'i va dStrda neyronlar (D1-MSN), GFP-/ NeuN+ hujayralar (D2-MSN) barcha striatal hududlarda DFB ning muhim indikatsiyasini ko'rsatmadi (Anjir. 1D): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: dori xujayrali turi F(1,12) = 16.41, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi F(1,12) = 12.41, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.001; dStr: dori xujayrasi turi F(1,12) = 12.07, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01. Ushbu topilmalarga muvofiq, biz kuzatdik D2-GFP sichqonlarda GFPda DFB ning muhim indüksiyonu yo'q+/ NeuN+ neyronlar (D2-MSNlar), ammo GFP da DFSB ning muhim indikatsiyasi-/ NeuN+ (D1-MSN) kokainni davolashdan keyin barcha striatal mintaqalardaAnjir. 1D): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: dori xujayrali turi F(1,12) = 15.76, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.0001; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,12) = 20.33, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; dStr: dori xujayrasi turi: F(1,12) = 35.96, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.001. Biz 1, 3 yoki 7 d kokain (20 mg / kg, ip) in'ektsiyasidan so'ng MSNlarda DFOSB induksiyasining kinetikasini tekshirdik. Biz D1-MSNlarda DFOSB ning muhim indüksiyasini 3 yoki 7 d kokain bilan davolash bilan kuzatdik, barcha striatal hududlarda sho'rlangan davolanish bilan solishtirganda (Anjir. 1F): dStr dan vakillik grafigi; ikki tomonlama ANOVA, hujayra turi × kun F(2,13) = 17.87, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01, p <0.001. Bu ilgari G'arbiy blotting tomonidan ko'rilgan striatumda DFOSB to'planish vaqtiga mos keladi (Hope va boshq., 1994) va DFX ning faqat D1-MSN-larda tanlangan indikatsiyasini kokainga ta'sir qilish davomida tasdiqlaydi.

Keyinchalik haloperidolga surunkali maruziyetten keyin MSN subtiplerinde immunohistokimya orqali DFOSB indüksiyasini tekshirdik (Anjir. 2). Dastlabki ishda bilvosita surunkali haloperidolning DFSB ni D2-MSNlarda (masalan,Xiroi va Graybiel, 1996; Atkins va boshq., 1999), lekin bu to'g'ridan-to'g'ri tekshirilmagan. D1-GFP va D2-GFP sichqonchani ichimlik suvi tarkibida haloperidol (2 mg / kg), pH 6.0 D1-GFP va D2-GFP 6.0 d (21 hafta) uchun pH 3, muntazam ichimlik suvi olingan sichqonchani nazorat qilish va 22 (Anjir. 2A). Kokainda bo'lgani kabi biz ushbu vaqt nuqtasida striatumdagi barcha Fosb-o'xshash immunoreaktivlikning to'liq FosB emas, balki DFB ni anglatishini bilamizAtkins va boshq., 1999). Biz buni topdik D1-GFP haloperidolni qabul qilgan sichqonlarda GFPda DFB ning sezilarli indüksiyonu ko'rsatilmagan+/ NeuN+ NAc yadrosi, NAc shell yoki dStr da neyronlar (D1-MSN); Ammo, GFPda DFBda sezilarli o'sish kuzatildi-/ NeuN+ barcha striatal hududlarda neyronlar (D2-MSN)Anjir. 2B,C): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: preparat × hujayra turi: F(1,10) = 23.29, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: dori: dori × xujayraning turi: F(1,10) = 30.14, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; dStr: dori xujayrasi turi: F(1,10) = 37.63, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.0001. Bu ekspertiza bilan tasdiqlangan D2-GFP sichqon: GFPda DFB ning muhim indüksiyonunu kuzatdik+/ NeuN+ uchta striatal mintaqada neyronlar (D2-MSN), ammo GFP da DFOSBda sezilarli o'zgarishlar yo'q-/ NeuN+ (D1-MSN) haloperidoldan keyinAnjir. 2B,C): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: preparat × hujayra turi: F(1,12) = 24.30, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.05; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,12) = 26.07, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.001; dStr: dori xujayrasi turi: F(1,12) = 21.36, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01. D1-MSN-larda DFOSB induksiyasining o'xshash sxemasini ikkalasida ham takroriy kokain ta'sirida kuzatganligimizni hisobga olsak D1-GFP (GFP+/ NeuN+) va D2-GFP (GFP-/ NeuN+) sichqonchani va D2-MSN'lardagi takroriy haloperidol tomonidan D1-GFP (GFP-/ NeuN+) va D2-GFP (GFP+/ NeuN+) sichqonchani ishlatgan, qolgan tajribalarimizdan foydalanilgan D2-GFP D1-MSNlarda DFOSB indüksiyasini tekshirish uchun sichqoncha (GFP-/ NeuN+) va D2-MSN (GFP+/ NeuN+) boshqa surunkali ogohlantirgandan keyin.

Shakl 2.  

Surunkali haloperidol, D2-MSN-da striatal hududlarda DFOSB ni tanlaydi. A, 21 d haloperidolni (2 mg / kg, ichimlik suvi) yoki suvni davolashning vaqt tartibi. BNAc qobig'ining immunohistokimyosi D1-GFP va D2-GFP haloperidoldan keyin sichqonlar ...

Tekshiruv sifatida, biz kashfiyotlar boshqa transkriptsiya omillariga umumlashtirilishi mumkinligini aniqlash uchun kokain va haloperidol sharoitlarida CREB ifodasi darajasini ko'rib chiqdik (Anjir. 3). Kontrol va dori bilan davolash qilingan sichqon o'rtasida CREB ekspresyonida sezilarli farq yo'q edi. Bundan tashqari, D2-MSN va D1-MSNlar orasida CREB darajasida hech qanday farq yo'q (Anjir. 3B,C).

Shakl 3.  

Surunkali giyoh yoki haloperidol MSN subtipalarida CREB ni keltirib chiqarmaydi. A, CREB va GFP uchun immun tizimini yaratish D2-GFP surunkali giyoh yoki surunkali haloperidoldan keyin sichqonchaniAnjir. 1 va Va22 dori preparatlari uchun afsonalar). O'lcham paneli, 50 μm. ...

MSN subtitrlaridagi DFOSB indüksiyasini noqonuniy ravishda ishlatish

O'tgan tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, boshqa suiiste'mol dori-darmonlari striatal subkordiyalarda DFB ni kuchaytirishi mumkin (Perrotti va boshq., 2008), surunkali OPiatlar, EtOH yoki D (9) -THC ta'siridan so'ng MSN subtipalarida DFOSBni tekshirdik. Biz surunkali morfin ta'siridan oldin Striatal hududlardagi ma'lum MSN subtipalarida DFOSB paydo bo'lishini tekshirdik. D2-GFP sichqon 25 va 1 kunlari kunduzgi yoki morfin (3 mg) pelletasining ikkita teri osti implantini oldi va miya kunida 5 (Anjir. 4A) DFF, lekin FosB emas, balkiZachariou va boshq., 2006). Kokainga qarama-qarshi kontekstda MSN subtiplari NAc yadrosida DFosB, NAc qobig'ida va morfin guruhidagi DStrda sham nazorati bilan solishtirganda (va taxminan taqqoslanadigan) o'sishini ko'rsatdi va hech qanday farqlovchi hujayraning subfedusiyasi DFOSBning barcha striatal viloyatlar (Anjir. 4A): ikki tomonlama ANOVA; NAc yadrosi: preparat F(1,14) = 75.01, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); NAc qobig'i: dori F(1,14) = 62.87, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); dStr: dori F(1,14) = 60.11, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Shakl 4.  

Jinsiy aloqa bilan bog'liq dori-darmonlar DFOSBni striatal mintaqalarda MSN subtipalarida paydo qiladi. A, Xronik morfin davolash (25 va 1 kunlarida 3 mg granulalar) D2-GFP NAc yadrosi, NAc qobig'i va dStr da MSN subtipalarida DFOSB ning muhim indüksiyasiga olib keladi ...

Keyinchalik EtOHga surunkali ta'sir qilishdan so'ng MSN subtipalarida DFOSBning indüksiyasini o'rganib oldik. D2-GFP sichqonlarga 10% EtOH (shisha A) va suv (shisha B) uchun ikkita shisha tanlovi testi berildi, D2-GFP har ikkala shisha idishda (A va B shishalari) olingan suvni nazorat qilish, 10 d va miyalar uchun 11 (kun)Anjir. 4B). 10% EtOH shishasini olgan sichqonlar suv bilan taqqoslaganda sezilarli darajada ko'proq EtOH iste'mol qilgan bo'lsa, ikkala idishdagi suvni olgan sichqonlarda ham suyuqlik iste'molidaAnjir. 4B): A shisha suv uchun afzallik: 50.00 ± 4.551%, EtOH guruhi: 84.44 ± 8.511%; Talaba t sinov, p <0.05. Surunkali EtOH administratsiyasi D1-MSNlarda o'zgarishsiz NAc yadrosi, NAc qobig'i va dStr tarkibidagi D2-MSNlarda DFOSB ning sezilarli induksiyasini keltirib chiqardi (Anjir. 4B): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: preparat × hujayra turi: F(1,14) = 24.58, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.05; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,14) = 36.51, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01; dStr: dori xujayrasi turi: F(1,14) = 29.03, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01.

D2-GFP sichqonchani 9 d uchun kuniga ikki marta D (10) -THC (7 mg / kg, ip) bilan davolangan va miya so'nggi in'ektsiyadan so'ng 24 soat to'plangan. Kokainga va EtOH shartlariga o'xshab, D1-MSNlarda surunkali D (9) -THC (sichqonchani) olgan sichqonlarning barcha striatal hududlarida DFOSBning sezilarli o'sishini kuzatdikAnjir. 3E): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: dori xujayrali turi F(1,8) = 26.37, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,8) = 44.49, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.001; dStr: dori xujayrasi turi F(1,8) = 29.30, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01.

Keyin biz MSN subtipalarida DFOSB induksiyasini kokain yoki opiatlarning terapiya boshqaruvchisi tomonidan kuzatilganmi yoki yo'qmi, sichqon sichqonchani iloji boricha o'z-o'zini boshqarishini nazarda tutgan kontsentratsion paradigmalarda bo'ladimi? Birinchidan, D2-GFP sichqon 0.5 xaftada 1 gacha kun uchun FR2 dasturida kokainni (3 mg / kg / infuzion) o'z-o'zini boshqarish uchun o'rgatilgan va miyada oxirgi infuziondan keyin 24 soat to'plangan (Anjir. 4D), FosB bo'lganda, lekin FosB emas,Larson va boshq., 2010). Sichqoncha faol va qarshi faol bo'lmagan qo'lni (Anjir. 4D; Talaba t sinov, p <0.01). Kokainning o'rtacha kunlik dozasi vena ichiga 19.1 mg / kg ni tashkil etdi (Anjir. 4D), yuqorida ishlatiladigan 20 mg / kg intraperitoneal dozaga o'xshash (Anjir. 1). Kontrendikatsiz kokainga ta'sir qilish kabi (Anjir. 1), shuni aniqladikki, kokainning o'z-o'zidan tatbiq qilish DFNB-ning nafaqat D1-MSN-larda, barcha striatal hududlarda salin ta'sirga nisbatanAnjir. 4D): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: dori xujayrali turi F(1,14) = 21.75, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,14) = 26.52, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.01; dStr: dori xujayrasi turi F(1,14) = 33.68, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.001. Xuddi shu tarzda, noodatiy opiat (morfin) ta'siriga o'xshash (Anjir. 4A), biz buni topdik D2-GFP 30 xaftasi uchun FR1 dasturida 3 gacha bo'lgan kunlik 2 sutkalik dozani tekshirganidan so'ng, o'z-o'zini boshqaradigan geroin (infuziya uchun 24 ig / kg) bo'lgan sichqonchani, DNNUMX-MSN va D2-MSNda muhim DFNBX indüksiyasini namoyish etdi. viloyatlar (Anjir. 4E): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: preparat F(1,12) = 68.88, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN); NAc qobig'i: dori F(1,12) = 80.08, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: dori F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni post testi: p < 0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN). Geroin uchun o'rtacha sutkalik doza 0.459 mg / kg ni tashkil etdi va sichqonlar faol va faol bo'lmagan qo'lni bosishda ancha vaqt sarfladilar (Student's t sinov, p <0.05) (Anjir. 4E).

Atrof-muhitni boyitish va neytrallashtirilgan stimulyator DFNB-D1-MSN va D2-MSN-larda

Ilgari olib borilgan tadkikotlar, tabiiy foyda Striatal mintaqalarda DFB ni keltirib chiqarganligini ko'rsatdi (Werme va boshq., 2002; Teegarden va Bale, 2007; Wallace va boshq., 2008; Solinas va boshq., 2009; Vialou va boshq., 2011), D1-MSNs uchun tanlangan g'ildirak bilan indüksiyon bilanWerme va boshq., 2002), hujayra o'ziga xosligini ko'rsatgan boshqa tabiiy sovg'alar orqali indüksiyon yoki yo'qligini o'rganib chiqdik. Avval biz balog'atga etmagan bolalar uchun boyitish paradigmasini qo'lladik D2-GFP sichqon 3 haftasiga (4 hafta) sutdan ajratilgan muhitda joylashtirildiAnjir. 5A). Ushbu yondashuv oldindan DFOSB sichqonchasida NAc va dStr (Solinas va boshq., 2009; Lemmann va Herkenham, 2011). Oddiy sharoitlar bilan taqqoslaganda, boyitilgan muhit barcha striatal hududlarda DFSB ni sezilarli darajada oshirdi, ammo buning uchun D1-MSN va D2-MSNlarda (birinchidan,Anjir. 5A): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: muhit F(1,12) = 89.13, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.0001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc qobig'i: atrof-muhit F(1,12) = 80.50, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN); dStr: atrof-muhit F(1,12) = 56.42, p <0.01, Bonferroni post testi: p <0.05 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Shakl 5.  

Atrof-muhitni boyitish va nevrologik ta'sirlanish hissi MSN subtipalarida DFOSning paydo bo'lishiga olib keladi. A, D2-GFP 21 haftalardagi P4dan boshlangan boyitilgan muhitda joylashtirilgan sichqonlar, barcha striatallar orasida MSN subtipalarida DFOSB indikatsiyasini namoyish etadilar ...

Keyin surunkali tuyadi ogohlantirgandan so'ng MSN subtipalarida DFosB ifodasini o'rgandik. Avval surunkali sukrozni ichishning ta'sirini sinovdan o'tkazdik, bu avvalgi rat NAc (FOSB)Wallace va boshq., 2008). D2-GFP sichqonlarga 10% sukroz (shisha A) va suv (shisha B) uchun ikkita shisha tanlovi testi berilgan, D2-GFP 10 d va miya uchun har ikkala idishga (A va B shishalari) olingan suvlarni nazorat qilish kuni 11 (Anjir. 5B). 10% sukroz olgan sichqonchalar sezilarli darajada sukrozni iste'mol qilar ekan, ikkala idishdagi suvni olgan sichqonlarda suyuqlik iste'molidaAnjir. 5B): A shisha uchun afzallik, suv: 50.00 ± 4.749%, saxaroza: 89.66 ± 4.473%; Talaba t sinov, p <0.001. Surunkali saxaroza iste'moli DFosB ni NAc yadrosi, NAc qobig'i va dStr da keltirib chiqarganligini va bu ikkala MSN subtipida sodir bo'lganligini aniqladik (Anjir. 5B): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: davolash F(1,12) = 76.15 p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc qobig'i: davolash F(1,12) = 63.35, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: davolash F(1,12) = 63.36, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.05 (D1-MSN).

Natijada kaloriya cheklashdan keyin MSN subtipalarida DFosB ifodasini ko'rib chiqdik, chunki bu holat lokomotor faoliyatni va motivasion holatni oshiradigan bu holat oldindan Sichqonchaning NAF (FOSB) darajasini oshirish uchun ko'rsatilganVialou va boshq., 2011). D2-GFP sichqon kaloriya bilan cheklangan protokol orqali o'tdi va unda 60% olingan ad libitum 10 d va onalar uchun kunlik kaloriyalar 11 (kun)Anjir. 5C). Kaltsiyani taqiqlash, ilgari ko'rsatilgandek, NAc yadrosida va NAc qobig'ida DFSB darajasini oshirdi (Vialou va boshq., 2011) va dStr da DFB darajasini oshirdi. Biroq, biz D1-MSN va D2-MSNs bilan farqlash indüksiyasini kuzatmaganmiz (Anjir. 5C): ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: davolash F(1,12) = 67.94 p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.01 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); NAc qobig'i: davolash F(1,12) = 67.84, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.001 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN); dStr: davolash F(1,12) = 82.70, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.001 (D2-MSN), p <0.001 (D1-MSN).

Surunkali ijtimoiy mag'lubiyat stressi va antidepressant davolanish MSN subtipalarida DFBning differentsial indüksiyasiga sabab bo'ladi

Biz surunkali ijtimoiy mag'lublik stressidan keyin sichqonlar sichqonchasida NA ning fosbini ko'paytirganligini ilgari oldik (Vialou va boshq., 2010). Ushbu indüksiyon, ham sezgir sichqonchani (stressin zararli misoli ko'rsatadigan), hamda sog'lom bo'lgan (bu zararli ta'siridan ko'pchiligidan qochgan) farelerde kuzatilgan bo'lsa-da, DFosB indüksiyonu moslashuvchan kichik guruhda katta va to'g'ridan-to'g'ri ko'rsatildi moyillik holatiga vositachilik qilish. Ushbu ikki fenotipik guruhda, DFOSB indüksiyonu uchun, ajoyib uyali o'ziga xosligi topdik. D2-GFP sichqonchalar 10 d ijtimoiy mag'lubiyat stressiga bo'ysundirildi va ijtimoiy ta'sir o'tkazish o'lchovlari asosida sezgir va moslashuvchan guruhlarga ajratildi (Anjir. 6A), boshqa xulq-atvorli belgilar bilanKrishnan va boshq., 2007). Ijtimoiy mag'lubiyatdan keyin sezgir xulq-atvorni rivojlantirgan sichqonlar D2-MSNda NAF yadrosida, NAc qobig'ida va DStr-da DFNB-ning DFNBX-MSN-larda indüksiya sezilarli bo'lmagan nazorat va moslashuvchan sichqonlarga nisbatan DFOSB ning muhim indüksiyasini ko'rsatdi. Ziddiyatli kontrastda D1-MSNlarda sezgir va nazorat sichqonlari bilan solishtirganda D1-MSNlarda sezgir DFOSB induktsiyasi namoyon bo'ldi va D2-MSN-larda indüksiya sezilarli bo'lmagan (Anjir. 6A; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: guruh x hujayra turi F(1,20) = 20.11, p <0.05, Bonferroni post test: D2-MSN / sezgir p <0.05, D1-MSN / bardoshli p <0.05; NAc qobig'i: guruh xujayrasi turi F(1,20) = 27.79, p <0.01, Bonferroni post test: D2-MSN / sezgir p <0.001, D1-MSN / bardoshli p <0.01; dStr: guruh × katak turi F(1,20) = 19.76, p <0.01, Bonferroni post test: D2-MSN / sezgir p <0.05, D1-MSN / bardoshli p <0.01).

Shakl 6.  

Surunkali ijtimoiy magmatik stress va surunkali fluoksetin DFOSB indikatsiyasini striatumdagi turli MSN subtipalarida olib keladi. A, D2-GFP 10-D ijtimoiy mag'lubiyatga chidamli stressni namoyish qiladigan D2-MSN-larda DFOSB indüksiyasini barcha striatal ...

SSRI antidepressantli, fluoksetin bilan surunkali davolash surunkali ijtimoiy mag'lubiyat stressidan keyin sezgir sichqonlarning namoyon bo'lgan depressiyaga o'xshash xatti-harakatlarini o'zgartiradi (Berton va boshq., 2006). Bundan tashqari, bunday davolash DFOSB ni sezgir va boshqariladigan sichqonlarning NAc-da qo'zg'atadi va biz ushbu indüksiyani fluoksetinning foydali xulq-atvori ta'siri uchun zarurligini ko'rsatdik (Vialou va boshq., 2010). Surunkali fluoksetinni qo'llashdan so'ng DFOSB indüksiyasining hujayra o'ziga xosligini tekshirdik. D2-GFP sichqon 20 d uchun fluoxetin (14 mg / kg, ip) qabul qilindi va miyalar 15 (kun)Anjir. 6B). Biz D1-MSNda DFNBX-MSNda sezilarli indüksiyani kuzatdik, lekin D2-MSNda emas, balki fluoksetin bilan davolash qilingan sichqonlarda vosita nazorati bilan solishtirgandaAnjir. 6B; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: preparat × hujayra turi F(1,10) = 14.59, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: dori xujayrasi turi: F(1,10) = 26.14, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; dStr: dori xujayrasi turi F(1,10) = 8.19, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.001).

NAc afferent miya hududlarining in vivo optogenetik manipulyatsiyasi striatal hududlarda va MSN subtipalarida DFOSB indüksiyasining turli shakllarini keltirib chiqaradi

NAc uchun dopaminerjik va glutamaterjik afferent kirishlar nafaqaga o'xshash xatti-harakatlarni qidirish va o'zgartirishga yordam berishi mumkinTsai va boshq., 2009; Covington va uning hamkorlari, 2010; Adamantidis va boshq., 2011; Witten va boshq., 2011; Britt va boshq., 2012; Lammel va boshq., 2012; Stuber va boshq., 2012; Chaudhury va boshq., 2013; Kumar va boshq., 2013; Tye va boshqalar, 2013), biz bir necha muhim mo'rt mo''jizaviy mintaqalarning faoliyatini manipulyatsiya qilganidan so'ng, Striatal MSN subtipalarida DFOSB indüksiyasini o'rgandik. Biz viruslarni ChR2ni bir nechta hududlarda ifodalaymiz va ilgari aytilganidek, ularni ko'k nur bilan (473 nm) faollashtirdik (Gradinaru va boshq., 2010; Yizhar va boshq., 2011). Yaqinda o'tkazilgan bir ishda, ko'k chiroq bilan fasik stimullash VTA ichida ChR2ning hujayra-selektiv ifodasidan keyin VTA dopamin neyronlarining selektiv ChR2 fasik stimulyatsiyasi bilan bir xil xatti-harakatlar fenotipiga sabab bo'lganligini ko'rsatdiChaudhury va boshq., 2013), VRA ning AAV-hsyn-ChR2-EYFP yordamida ChR2 ifodasini topdik. D2-GFP sichqon; nazorat sichqonchalari AAV-hsyn-EYFP bilan AOK qilingan. VTA qismlari tirozin gidroksilaz va GFP bilan birgalikda ChR2-EYFP ifodasini tasavvur qilish uchun (Anjir. 7C). D2-GFP VTAda faqat ChR2-EFYP yoki EYFP ekspressini ifodalovchi sichqon 5 d ni VTA ning 10 mingacha ko'k nurli fosik stimulyatsiyasini ilgari aytib o'tilganidek oldi (Koo va boshq., 2012; Chaudhury va boshq., 2013) (Anjir. 7A) va miyaning so'nggi stimulyatsiyasidan so'ng 24 soatda to'plangan. ChR2 ning 5 d stimulyatsiyasidan keyin VTA dopamin neyronlarini faollashtirish qobiliyatining noanzizlanishi yo'q edi (Anjir. 7B). Biz ChR2-EYFPni ifodalovchi VTA neuronlarini takroriy fasikaning stimullanishini NAc yadrosida ham MSN subtipalarida DFosB oshirib, faqat NAc kabuksida D1-MSNda (Anjir. 7C; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: optogenetik stimullar F(1,16) = 51.97, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.001; (ikkala MSN pastki turi) NAc qobig'i: optogenetik stimullar × hujayra turi: F(1,16) = 13.82, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01). Biz ko'k nurli fazik stimulyatsiyadan so'ng dStr da DFOSB ning EYFP boshqaruvlari bilan taqqoslaganda VTA ifodalovchi ChR2-EYFP ga induksiyasini kuzatmadik. Ushbu natijalar ehtiyotkorlik bilan talqin qilinishi kerak, chunki biz VTA dopamin neyronlarini optik stimulyatsiya uchun tanlamaganmiz va yaqinda o'tkazilgan tadqiqotlar VTA da nondopaminerjik proektsion neyronlarni hamda VTA ning juda xilma-xilligini ko'rsatdi, bu esa otishga qarab xatti-harakatlarning turlicha bo'lishiga olib kelishi mumkin. ta'sirlangan neyronlarning parametrlari va subpopulyatsiyalari (Tsai va boshq., 2009; Lammel va boshq., 2011, 2012; Witten va boshq., 2011; Kim va uning hamkorlari, 2012, 2013; Tan va boshq., 2012; Van Zessen va boshq., 2012; Stamatakis va Stuber, 2012; Chaudhury va boshq., 2013; Tye va boshqalar, 2013).

Shakl 7.  

NAc ni innervatsiya qiluvchi miya mintaqalarining optogenetik faollashuvi MSN subtipalarida va striatal hududlarda DFOSB indüksiyasining turli ko'rinishlariga sabab bo'ladi. A, Barcha sharoitlar uchun optogenetik stimulyatsiya paradigmasi. 24 d optogenetikdan so'ng braziliyaliklar 5 soat hosil qildilar ...

Keyinchalik, ChR2-mCherry yoki mCherry-ni faqat nazorat sifatida ifodalash uchun AAV-CaMKII-ChR2-mCherry va AAV-CaMKII-mCherry vektorlaridan foydalanib, mPFC, amigdala yoki vHippo D2-GFP sichqonchani (Anjir. 7D-F). CaMKII-ChR2 virusi vositachiligining ChR2 va mCherry ifodasi ilgari CaMKII ifodasi bilan kolokalizatsiya qilish uchun ko'rsatildi, bu asosan glutamaterjik neyronlarni (Gradinaru va boshq., 2009; Warden va boshq., 2012). Biz 2 d uchun 20-daqiqada 10-dagi ko'k chiroq bilan bu hududlarda ChR5-ni ifodalovchi hujayralarni faollashtirdik va miyaning so'nggi stimulyatsiyadan so'ng 24-soati yig'ildi (Anjir. 7A). Ushbu ogohlantiruvchi naqsh, asosan, ikki barobar oshganligi sababli ~ 27-33 Hz otishni o'rganib chiqdi. 2 d stimulyatsiyasi bilan ChR5ning sezilarli desensitizatsiyasi kuzatilmadi; ammo 1 dan 5 d (32-33 As) stimulyatsiyasidan tortib olishda engil o'sish kuzatildi. MPFC neyronlarining optogenetik faollashuvi NAX yadrosidagi D1-MSNda DFOSB indüksiyasiga olib keldi, shuning uchun DFosB induktsiya NAc qobig'i (ham MSN subtipalarida)Anjir. 7D; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: optogenetik ogohlantirish xujayrasi turi F(1,14) = 10.31, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: optogenetik stimullar F(1,14) = 57.17, p <0.001, Bonferroni post testi: p <0.05 (D2-MSN), p <0.01 (D1-MSN)). MPFC faollashtirilgandan so'ng dStr da DFOSB darajasida hech qanday o'zgarish kuzatilmadi. Aksincha, amigdala neyronlarining optogenetik faollashuvi NAc yadrosidagi ikkala MSN subtiplarida va selektiv ravishda NAc qobig'idagi D1-MSNlarda induksiyalangan dStr (Anjir. 7E; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: optogenetik stimullar F(1,10) = 78.92, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.001 (D2-MSN), p <0.0001 (D1-MSN); NAc qobig'i: optogenetik stimullar × hujayra turi: F(1,10) = 30.31, p <0.0001, Bonferroni post testi: p <0.0001). Va nihoyat, vHippo neyronlarining optogenetik faollashuvi nafaqat NAc yadrosi va NAc qobig'idagi D1-MSNlarda muhim DFosB induksiyasini keltirib chiqardi, dStr da hech qanday o'zgarish kuzatilmadi (Anjir. 7F; ikki tomonlama ANOVA, NAc yadrosi: optogenetik ogohlantirish xujayrasi turi F(1,10) = 18.30, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01; NAc qobig'i: optogenetik stimullar × hujayra turi: F(1,10) = 22.69, p <0.05, Bonferroni post testi: p <0.01).

muhokama

Ushbu ishda D1-MSN va D2-MSNlarda DFOSB induktsiyasi bir necha surunkali ogohlantirishlardan so'ng striatal hududlarda tekshiriladi (1 stol). Avval foydalanish maqsadga muvofiqligini o'rnatamiz D1-GFP va D2-GFP surunkali kokainga va D1-MSNda Surunkali haloperidoldan keyin D2-MSNda selektiv DFNQ indüksiyasini ko'rsatish uchun muxbirlar chiziqlari. Qo'qon topilmalari avvalgi tadqiqotlar bilan mos keladi (Moratalla va boshq., 1996; Lee va boshq., 2006) va D1-MSNda DFOSB uchun kokain mukofotini ilgari surishda belgilangan rol (Kelz va boshq., 1999; Colby va boshq., 2003; Grueter va boshq., 2013). Biz ilgari tadqiqotchi va o'z-o'zini boshqaradigan kokain DFOSB ni NAc (shunga o'xshash darajada)Winstanley va boshq., 2007; Perrotti va boshq., 2008) va eng muhimi, biz bu erda uchta striatal mintaqada D1-MSNda tanlangan DFOSB ni kokain iste'mol qilish usullarini ikkala usulda ham namoyon etamiz. Bizning topilmalarimiz oldingi tadkikotlar bilan taqqoslanganki, aktiv kokain boshqa bir qator zudlik bilan erta genlarni va bir necha hujayra ichidagi signalizatsiya oqsillarini fosforillanishini faqat D1-MSNs (Bateup va boshq., 2008; Bertran-Gonsales va uning hamkorlari, 2008). Shuningdek, surunkali haloperidoldan keyin DFOSB induksiyasining qarama-qarshi tomoni D2-kabi retseptorlari agonistlari tomonidan ushbu indikatsiyani bloklagan holda (Atkins va boshq., 1999) va o'tkir haloperidolning selektiv induksiyasi bilan darhol erta genlar va D2-MSN larda bir nechta signal beruvchi oqsillarni fosforillashi (Bateup va boshq., 2008; Bertran-Gonsales va uning hamkorlari, 2008).

Jadval 1.  

Surunkali farmakologik, hissiy va optogenetik ogohlantirgandan keyin Striatal MSN subfeyslarida DFOSB indüksiyasia

Kokain kabi, biz boshqa ikkita boshqa suiiste'mollarga duch kelgan surunkali ta'sirga ega bo'lgan EtOH va D (9) -THC barcha DNNUMX-MSN-larda barcha striatal hududlar bo'ylab DFOSB ni tanlab oladi. Biz shuni ilgari ko'rsatdik, EtOH NAc yadrosida, NAc qobig'ida va dStrda DFosB ni indinga keltirdi, ammo D (1) -THC boshqa viloyatlarda kuzatilgan tendentsiya bilan NAc yadrosida DFosB ni sezilarli darajada ko'taradiPerrotti va boshq., 2008). Biz shunga o'xshash tarzda D9-MSNs da NAc yadrosida DFosB ning eng katta D (1) -THC indikatsiyasini kuzatdik; boshqa striatal hududlarda indüksiyon ko'rsatish qobiliyatini, hujayra-o'ziga xos tahlil qilish natijasida yuzaga kelishi mumkin. Qizig'i shundaki, surunkali morfin va geroinning o'z-o'zini boshqaruvi, boshqa giyohvandlik vositalaridan farqli o'laroq, MSN subtipalarida DFOSBni barcha striatal hududlar bo'ylab o'xshash darajaga keltirdi. Yaqin o'tmishda o'tkazilgan bir tekshiruvda D1-MSN-larda o'tkir morfin s-Fosning rivojlanishini ko'rsatdi, shuning uchun surunkali morfindan keyin nalokson-cho'kindi hosil bo'lishini D2-MSN-larda c-FosEnoksson va uning hamkorlari, 2012). Bizning tadqiqotimizda opiatni olib tashlash belgilari kuzatilmagan bo'lsa-da, o'rganilgan vaqt nuqtasida morfin yoki yo'l to'sarlikdan foydalanish bilan yanada nozik olib tashlash bu erda ko'rilgan D2-MSNda DFOSB induksiyasidan mas'ul. Biz oldinroq D1-MSNda DFN, ammo D2-MSNs emas, balki morfinga (Zachariou va boshq., 2006). Endi D2-MSNda DFOSB induktsiyasi opiyning chiqarib yuborilishining salbiy oqibatlariga hissa qo'shishi mumkinligini tekshirish qiziqarli bo'ladi. Xuddi shunday, barcha dori-darmonlar bilan birga ko'ringan DF-ning indüksiyonunun mumkin bo'lgan hissasi va giyohvand moddalarni olib tashlash mumkinligi tekshirilishi kerak.

O'tkazilgan tadqiqotlar shuni ko'rsatadiki, rivojlanish jarayonida ekologik boyitish NAc va dStr (DFOSB)Solinas va boshq., 2009; Lemmann va Herkenham, 2011). Ma'lumotlarimiz shuni ko'rsatdiki, bu birikma barcha striatal hududlar bo'ylab D1-MSN va D2-MSN-larda bir xil bo'ladi. Boyitilgan paradigma ilgari kokainga (masalan,Solinas va boshq., 2009); ammo D1-MSNda DFOSB induktsiyasi faqatgina kokainga nisbatan xatti-harakatlarni kuchaytiradi, ammo D2-MSN-larda bunday induktsiya hech qanday sezilarli ta'sirga ega emas,Kelz va boshq., 1999; Colby va boshq., 2003; Grueter va boshq., 2013). Surunkali sukroz iste'moli ilgari NAc-da DFSB ni oshishi va DF-NV ning ekspressioni yoki D1-MSN-larda yoki ikkala kichik tipdagi NAc-da sukroz iste'molini oshiradiOlausson va boshq., 2006; Wallace va boshq., 2008). Bu erda sukrozni ichishdan keyin NAc va dStr da MSN subtipalarida o'xshash DFOSB indüksiyasini kuzatdik. Nihoyat, ilgari ko'rsatdikki, NAFdagi DFSB indüksiyonu, yuqori yog'li oziq-ovqat va energiya sarfini kamaytirish uchun yuqori motivatsiya bilan kaloriya chekloviga ma'lum adaptiv javoblar vositachiligini (Vialou va boshq., 2011). Umuman olganda, bu natijalar NAc va dStrdagi DFSB to'plamining D1-MSN va D2-MSN-larda bir nechta tabiiy mukofotlarga javoban sodir bo'lishini namoyish etadi. D1-MSN-larda DF-NMX-MSN-da D1-MSNda DFNB-MSF-ning ortiqcha ekspressioni, D2-MSNda DFNB-ekspresyoni DXNUMX-Werme va boshq., 2002). Shu bilan birga, g'ildirak ishlaydigan turli xil vosita yo'llarini faollashtirishi mumkin. Har qanday holatda, boshqa tabiiy sovrinlar bilan natijalar kokain, EtOH va D (9) -THC kabi kuchli dori-darmonlarga nisbatan DFOSBni striatumda boshqacha tarzda nazorat qilishlarini ko'rsatadi. Ushbu tabiiy mukofot shartlari ostida ikkala MSN subtipalarida ham DFOSB indüksiyonu, oziq-ovqat mukofoti uchun harakat boshlanishini ham MSN subtipalarini (Cui va boshq., 2013).

Surunkali ijtimoiy mag'lubiyat stress stressli va moslashuvchan sichqonlar NAc qobig'ida DFOSB ni keltiradi, ammo NAc yadrosida faqat moslashuvchan sichqonlarda (Vialou va boshq., 2010). Bundan tashqari, D1-MSNda DFOSB ekspresyoni surunkali ijtimoiy mag'lubiyat stressidan keyin mustahkamlikni ta'minlaydi. Flyoksetin bilan surunkali davolash shuningdek stressli naushnik sichqonlarida VA susayib qoladigan sichqonlarda surunkali ijtimoiy mag'lublik stressidan so'ng DFOSB to'planishiga olib keladi va DFF eksperksepsiyasini oxirgi sharoitlarda antidepressantga o'xshash xatti-harakatlarga vositachilik qiladi (Vialou va boshq., 2010). Nihoyat, oldingi ishda surunkali nazorat ostiga olishdan so'ng, ham MSN subtipalarida DFOSB induktsiya ko'rsatildi (Perrotti va boshq., 2004). D1-MSN-da DFHQ-MSNda mo''tadil va fluoksetin bilan davolash qilingan sichqonlarda DFNQX-indekslarini tanlashda ko'rsatadigan ushbu tadqiqot natijalari, ammo sezgir sichqonlardagi D2-MSN-larda tanlangan bo'lib, bu oldingi topilmalar haqida muhim ma'lumotni beradi va D1- MSNlar D2-MSNda DFOSBni sezuvchanlikka olib kelishi mumkin bo'lsa, MSNlar moyillik va antidepressant ta'sirga ega. Endi bu gipotezasini sinab ko'rish uchun keyingi ishni bajarish kerak.

Optogenetik vositalardan foydalangan holda so'nggi ishda dopaminerjik va glutamateriqik afferentslarning NAc ga mukofot va stress reaktsiyalarini modullashda kuchli rolini namoyish etadi (Natijalarga qarang). Ushbu optogenetik vositalardan D1-MSN va D2-MSNda DFosB induksiyasini NAc afferent mintaqalarini qayta takrorlangandan keyin o'rganamiz. VTA neuronlarining fazoviy stimulyatsiyasi yoki amigdaladagi asosan glutamaterjik neyronlarning faollashuvi NAc qobig'idagi D1-MSNda DFOSB va NAc yadrosida ikkala MSN subtipalarida paydo bo'lishini aniqladik. Aksincha, mPFC neyronlarining faollashishi DFNQX-indeksdagi D1-MSNda yuqori darajadagi DFOSB induksiyasini aks ettirishga olib keladi, ammo NAc qobig'idagi ikkala MSN subtipalarida ham indüksiyalanadi. Nihoyat, vHippo neyronlarning optogenetik faollashuvi DFOSB to'plamini NAX yadrosida va qobig'ida faqat D1-MSNda hosil qiladi. VHippo topilmalari D2-MSNs (D1-MSNs) bilan taqqoslaganda hipokampal kirishlar juda zaif ekanligini ko'rsatadigan so'nggi tadqiqotlar bilan mos keladiMacAskill va boshq., 2012) va bu ma'lumotlarning kokainga bog'liq lokomozasini (Britt va boshq., 2012). Bundan tashqari, D1-MSN-larda DFNQX-MSNda DF-NMX-ning barcha kirishlari bilan asosan DFNQ indüksiyasini namoyish qilish D1-MSNda DFNB-ning DOSNUMX-MSN-larda dori-darmonlarni suiiste'mol qilish uchun javob beradigan javoblarni takomillashtirishini hamda VTA dopamin neuronlarining yoki mPFCning optogenetik stimullanishini, amigdala yoki vhippo terminallari NAc mukofotini rag'batlantiradi (Kelz va boshq., 1999; Zachariou va boshq., 2006; Tsai va boshq., 2009; Witten va boshq., 2011; Britt va boshq., 2012; Grueter va boshq., 2013).

Nihoyat, ushbu ikki MSN subtipasida tanlangan neyronal guruhlar mavjud, ular turli xil faol yoki ijobiy ogohlantirishlar bilan faollashadi. Bu D2-MSNda DFNB-indeksatsiyasini ma'lum mukofotlash sharoitlarida (opiat va tabiiy yutuqlar), shuningdek, noqulay (ijtimoiy mag'lubiyat) sharoitlarini kuzatishimiz mumkin. Striatum, MSN subtipalaridan tashqarida juda heterojen, shu jumladan, dorsal va ventral striatumdagi patch va matritsa bo'linmalari (Gerfen, 1992; Watabe-Uchida va boshq., 2012). Bundan oldingi ishlar, psikostimulantlar tomonidan striatal nöronal ansamblların juda kichik bir foizini aktivasyonunu dalolat beradi. FosB Bu faol neyronlarning genGuze-Barber va boshq., 2011; Liu va boshq., 2013), bu faollashtirilgan neyronlar D1-MSN yoki D2-MSNs-larmi-yo'qmi noma'lum. Shu bilan birga, DFOSB ning funktsiyasi, qobig'dagi yadroga nisbatan, mukofotlash va noxush harakatlarga vositachilik qilishda ham ma'lum emas. D1-MSNda DFNB-dan ortiq ekspression DFX ning ikkala yadrosi va qobig'ida jim sinapslarni kuchaytirdi, ammo D2-MSNda ifoda faqat suyuqlikdagi sinapslarni kamaytirdiGrueter va boshq., 2013). Bundan tashqari, qobiqdagi yadroga nisbatan DFOSB induksiyasi, ehtimol, turli xil mexanizmlar orqali vositachilik qilishi mumkin, chunki biz kokainda mediatsiya qilingan CaFKBQ ning qobig'idagi DFOSB stabillashishini topdik, lekin yadroda yadro emas,Robison va uning hamkorlari, 2013). Keyinchalik qobiqdagi, neyronal ansambllarni faollashtiradigan yoki patch va matritsa bo'linmalarida MSN subtipalarini tanlagan maqsadga yo'naltirilgan kelajakdagi tadqiqotlar ushbu heterojen hududlarda DFBning qiziqish rolini aniqlashga yordam beradi.

Umuman olganda, NAFdagi DFSB ning bu elektron vositachilardan olingan hujayralarning turdagi tanlangan indüksiyon shakli, ushbu stimullarning o'ziga xos xususiyatlarini kodlash uchun turli xil NAc afferentlarni turli xil tarzda ajratib turadigan va stressli stimullarga ega ekanligini ko'rsatadi. Bizning natijalarimiz nafaqat surunkali ogohlantirishlar orqali Striatal MSN subtipalarida DFOSBning induktsiyasini keng qamrovda tushunish bilan bir qatorda NAF funksiyasini ta'sir qilishda maxsus neyron davrlarning ta'sirini tushunish uchun molekulyar marker sifatida DFOSBdan foydalanishda foyda ko'rsatmoqda.

Izohlar

Mualliflar hech qanday raqobat qiladigan moliyaviy manfaatlarni e'lon qilmaydi.

Manbalar

  1. Adamantidis AR, Tsai HC, Boutrel B, Zhang F, Stuber GD, Budygin EA, Touriño C, Bonci A, Deisseroth K, de Lecea L. Optimallashtirilgan terapiya bo'yicha harakatni ko'p bosqichli dopaminerjik modulyatsiyadan optogenetik tekshirish. J Neurosci. 2011; 31: 10829-10835. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2246-11.2011. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  2. Albin RL, Young AB, Penney J.B. Bazal ganglion kasalliklarining funktsional anatomiyasi. Trends Neurosci. 1989; 12: 366-375. doi: 10.1016 / 0166-2236 (89) 90074-X. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  3. Atkins JB, Chlan-Fourney J, Nye HE, Xiroi N, Carlezon WA, Jr, Nestler EJ. Tipik va atipik antipsikotik dorilarni takroriy kiritish orqali DFOSB ning mintaqaga xos induksiyasi. Sinaps. 1999; 33: 118–128. doi: 10.1002 / (SICI) 1098-2396 (199908) 33: 2 <118 :: AID-SYN2> 3.0.CO% 3B2-L. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  4. Bateup HS, Svenningsson R, Kuroiwa M, Gong S, Nishi A, Heintz N, Greengard P. DARPP-32 fosforillanishining hujayra turiga maxsus antibiotiklar va antipsikotiklar bilan regulyatsiyasi. Nat Neurosci. 2008; 11: 932-939. doi: 10.1038 / nn.2153. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  5. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal Vt, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNFning mezolimbik dopamin yo'lida ijtimoiy mag'lubiyatdagi stressdagi asosiy roli. Ilmiy. 2006; 311: 864-868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  6. Bertran-Gonzalez J, Bosch C, Maroteaux M, Matamales M, Xerre D, Valjent E, Girault JA. DPamin D1 va D2 retseptorlarini ifodalovchi striatal neyronlarning kokain va haloperidolga javoban signalizatsiya faollashuvining xilma-xilligi. J Neurosci. 2008; 28: 5671-5685. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1039-08.2008. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  7. Britt JP, Benaliouad F, McDevitt RA, Stuber GD, Wise RA, Bonci A. Yadro akumbenslariga bir nechta glutamatergik kirishlarning sinaptik va xulq-atvor profilidir. Neyron. 2012; 76: 790-803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  8. Chan CS, Peterson JD, Gertler TS, Glajch KE, Quintana RE, Cui Q, Sebel LE, Plotkin JK, Heiman M, Heintz N, Greengard R, Surmeier DJ. Drd2-eGFP BAC transjenik sichqonlarida striatal fenotipning zichlikka moslashuvi. J Neurosci. 2012; 32: 9124-9132. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0229-12.2012. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  9. Chaudhury D, Walsh JJ, Fredman AK, Juarez B, Ku SM, Koo JW, Ferguson D, Tsai HC, Pomeranz L, Christoffel DJ, Nectow AR, Ekstrand M, Domingos A, Mazei-Robison MS, Mouzon E, Lobo MK, Neve RL, Fridman JM, Russo SJ, Deisseroth K va boshq. O'rtacha miya dopamin neyronlarini nazorat qilish orqali depressiya bilan bog'liq xatti-harakatlarni tezkor tarzda tartibga solish. Tabiat. 2013; 493: 532-536. doi: 10.1038 / tabiat11713. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  10. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DFOSB giyoh uchun rag'batni kuchaytiradi. J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493. [PubMed]
  11. Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Medial prefrontal korteksning optogenetik stimulyatsiyasining antidepressant ta'siri. J Neurosci. 2010; 30: 16082-16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  12. Cui G, Jun SB, Jin X, Pham MD, Vogel SS, Lovinger DM, Kostaning RM. Harakatni boshlash paytida striatal bevosita va bilvosita yo'llarning bir vaqtda faollashuvi. Tabiat. 2013; 494: 238-242. doi: 10.1038 / tabiat11846. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  13. Enoksson T, Bertran-Gonsales J, Christie MJ. Markaziy dumba neyronlarini ifodalovchi D2 va D1-retseptorlari morfin chiqarish va o'tkir morfin bilan navbati bilan selektiv ravishda faollashtiriladi. Neyrofarmakologiya. 2012; 62: 2463-2471. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2012.02.020. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  14. Gerfen CR. Neostriatal mozaik: bazal gangliondagi ko'p qismli organizmni tashkil qiladi. Annu Rev Neurosci. 1992; 15: 285-320. doi: 10.1146 / annurev.ne.15.030192.001441. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  15. Gittis AH, Kreitzer AC. Striatal mikroko'prak va harakat bozuklukları. Trends Neurosci. 2012; 35: 557-564. doi: 10.1016 / j.tins.2012.06.008. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  16. Gong S, Zheng S, Doughty ML, Losos K, Didkovskiy N, Shambra UB, Novak NJ, Joyner A, Leblanc G, Hatten Me, Heintz N. Markaziy nerv sistemasining bakterial sun'iy xromosomalarga asoslangan gen ekspresyon atlasidir. Tabiat. 2003; 425: 917-925. doi: 10.1038 / tabiat02033. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  17. Gradinaru V, Mogri M, Tompson KR, Xenderson JM, Deisseroth K. Parkinson neyron devorlarining optik parchalanishi. Ilmiy. 2009; 324: 354-359. doi: 10.1126 / science.1167093. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  18. Gradinaru V, Chjan F, Ramakrishnan C, Mattis J, Prakash R, Diester I, Goshen I, Tompson KR, Deisseroth K. Optogenetikani diversifikatsiya qilish va kengaytirish uchun molekulyar va hujayra usullari. Hujayra. 2010; 141: 154-165. doi: 10.1016 / j.cell.2010.02.037. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  19. Graybiel AM. Bazal ganglion. Curr Biol. 2000; 10: R509-R511. doi: 10.1016 / S0960-9822 (00) 00593-5. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  20. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald, ShU, Birnbaum SG, Graham AR, Unterberg S, Graham DL, Vialou V, Bass Idoralar, Terwilliger EF, Bardo MT, Nestler EJ. Atrof-muhitni boyitish nukleus akumbenslarda past tsikli adenosin monofosfat javob elementini ulash (CREB) faoliyati vositasida harakat qiluvchi fenotip ishlab chiqaradi. Biol psixiatriyasi. 2010; 67: 28-35. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  21. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. DFOSB nukleus akumbenslarini bevosita va bilvosita yo'l harakati bilan modulyatsiya qiladi. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2013; 110: 1923-1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  22. Guez-Barber D, Fanous S, Golden SA, Shrama R, Koya E, Stern OL, Bossert JM, Harvey BK, Picciotto MR, Hope BT. FACS tanlangan faollashtirilgan kattalardagi striatal neyronlarda noyob kokain bilan bog'liq gen regulyatsiyasini aniqlaydi. J Neurosci. 2011; 31: 4251-4259. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.6195-10.2011. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  23. Xeyman A, Gong S, Peterson JD, Day M, Ramsey KE, Suares-Farinas M, Schwarz C, Stefan DA, Surmeier DJ, Greengard P, Heintz N. CNS hujayra turlarini molekulyar xarakterlash uchun translatsionatsion profilaktika yondashuvi . Hujayra. 2008; 135: 738-748. doi: 10.1016 / j.cell.2008.10.028. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  24. Hiroi N, Graybiel AM. Atipik va tipik neyroleptik muolajalar striatumda transkripsiya omillarini ifodalashning alohida dasturlarini keltirib chiqaradi. J Comp Neurol. 1996; 374: 70-83. doi: 10.1002 / (SICI) 1096-9861 (19961007) 374: 1 <70 :: AID-CNE5> 3.0.CO% 3B2-K. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  25. Xiroi N, Braun JR, Xayl CN, Ye H, Grinberg ME, Nestler EJ. FosB mutant sichqonlari: Fos bilan bog'liq oqsillarning surunkali kokain induktsiyasini yo'qotish va kokainning psixomotor va foydali ta'siriga nisbatan sezgirlikni oshirish. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 1997; 94: 10397-10402. doi: 10.1073 / pnas.94.19.10397. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  26. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, O'z DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Surunkali kokain va boshqa surunkali muolajalar tomonidan miyada o'zgargan fos-o'xshash oqsillardan tashkil topgan uzoq muddatli AP-1 kompleksini ishlab chiqarish. Neyron. 1994; 13: 1235-1244. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  27. Kalivas PW, Churchill L, Klitenick Ma. GABA va enkefalin prokimi, ventral pallidumdan ventral tegmental hududga yuboriladi. Neuroscience. 1993; 57: 1047-1060. doi: 10.1016 / 0306-4522 (93) 90048-K. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  28. Kaplan GB, Leite-Morris KA, Fan V, Young AJ, Guy MD. Opiate sezuvchanligi prefrontal kortikal, striatal va amigdala miya hududlarida FosB / DFosB ifodasini keltirib chiqaradi. PLoS One. 2011; 6: e23574. doi: 10.1371 / journal.pone.0023574. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  29. Kelz MB, Chen J, Carlezon VV, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen S, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Transkripsiya faktori DFF ning miyada namoyon bo'lishi kokainga sezgirlikni nazorat qiladi. Tabiat. 1999; 401: 272-276. doi: 10.1038 / 45790. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  30. Kim KM, Baratta MV, Yang A, Lee D, Boyden ES, Fiorillo CD. Tabiiy mukofot bilan dopamin neyronlarning vaqtinchalik faollashuvining optogenetik mimikri operativ mustahkamlash uchun etarli. PLoS One. 2012; 7: e33612. doi: 10.1371 / journal.pone.0033612. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  31. Kim TI, McCall JG, Jung YH, Huang X, Siuda ER, Li Y, Song J, Song YM, Pao HA, Kim RH, Lu C, Lee SD, Song IS, Shin G, Hasani R, Kim S, Tan MP, Huang Y, Omenetto FG, Rogers JA va boshq. Enjektabl, uyali optoelektronika, simsiz optogenetika uchun dasturlar. Ilmiy. 2013; 340: 211-216. doi: 10.1126 / science.1232437. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  32. Koo JW, Mazei-Robison MS, Chaudhury D, Juarez B, LaPlant Q, Ferguson D, Feng J, Sun H, Scobie KN, Damez-Verno D, Crumiller M, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Mouzon E, Dietz DM, Lobo MK, Neve RL, Russo SJ, Xan MH, Nestler EJ. BDNF morfin ta'sirining salbiy modulatoridir. Ilmiy. 2012; 338: 124-128. doi: 10.1126 / science.1222265. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  33. Krishnan V, Xan MH, Graham DL, Berton O, Renthal Vt, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous R, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A , Eisch AJ, Self DW, Lee FS va boshq. Molekulyar moslashuvlar miya retsessiya hududlarida ijtimoiy sezuvchanlik va qarshilikka asoslangan. Hujayra. 2007; 131: 391-404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  34. Qumar S, Qora SJ, Hultman R, Szabo ST, DeMaio KD, Du J, Katz BM, Feng G, Covington X, 3rd, Jirasa K. Affektiv tarmoqlarni kortikal nazorat qilish. J Neurosci. 2013; 33: 1116-1129. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0092-12.2013. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  35. Lammel S, Ion DI, Roeper J, Malenka RC. Dopamin neyron sinapslarining proksion-o'ziga xos modulyatsiyasini g'azablantiradigan va baxsh etgan stimuli bilan. Neyron. 2011; 70: 855-862. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.03.025. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  36. Lammel S, Lim BK, Ran S, Huang KW, Betley MJ, Tye KM, Deisseroth K, Malenka RC. Ventral tegmental sohada mukofotga va nafratga ega bo'lishga maxsus nazorat. Tabiat. 2012; 491: 212-217. doi: 10.1038 / tabiat11527. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  37. Larson EB, Akkentli F, Edvards S, Graham DL, Simmons DL, Alibhai IN, Nestler EJ, Self DW. Kokaindan o'z-o'zini boshqarish va chiqarish jarayonida DF, FosB va cFos-ning striatal regulyatsiyasi. J Neurochem. 2010; 115: 112-122. doi: 10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  38. Li KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. D1 va D2 dopamin retseptorlari tarkibidagi yadroli akumbenslardagi kraxinli dendritik orqa miya hosilalari. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2006; 103: 3399-3404. doi: 10.1073 / pnas.0511244103. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  39. Lehmann ML, Herkenham M. Atrof-muhitni boyitish infratomik korteksga bog'liq neyroanatomik yo'l orqali ijtimoiy mag'lubiyatga stressni kuchaytiradi. J Neurosci. 2011; 31: 6159-6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  40. Liu QR, Rubio FJ, Bossert JM, Marchant NJ, Fanous S, Hou X, Shaham Y, Hope BT. Florezentsiya bilan faollashtirilgan hujayra tartibini (FACS) J Neurochem yordamida metamfetamin bilan faollashtirilgan Fos-expressing neyronlarning molekulyar o'zgarishlarini bitta rat dorsal striatumdan aniqlash. 2013 ta doira: 10.1111 / jnc.12381. doi: 10.1111 / jnc.12381. Avval onlayn nashr. Iyul oyida topildi: 29, 2013. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  41. Lobo MK, Covington HE, 3rd, Chaudhury D, Fridman AK, Sun H, Damez-Verno D, Dietz DM, Zaman S, Koo JW, Kennedy PJ, Mouzon E, Mogri M, Neve RL, Deisseroth K, Han MH, Nestler EJ. BDNF signallarining hujayra turiga xos yo'qolishi kokaindan olingan mukofotning optogenetik nazoratini taqqoslaydi. Ilmiy. 2010; 330: 385-390. doi: 10.1126 / science.1188472. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  42. Lobo MK, Nestler EJ. Giyohvandlikda striatal muvozanatlash harakatlari: bevosita va bilvosita yo'llarning o'rta zo'riqibor neyronlarning alohida vazifalari. Old Neyroanat. 2011; 5: 41. doi: 10.3389 / fnana.2011.00041. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  43. Lobo MK, Karsten SL, Grey M, Geschwind DH, Yang XW. Yosh va kattalar sichqonchani miyalarida striatal proektsion neyron subtipalarini FACS-array profilini yaratish. Nat Neurosci. 2006; 9: 443-452. doi: 10.1038 / nn1654. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  44. MacAskill AF, Little JP, Cassel JM, Carter AG. Subcellular aloqasi yadro aksumbensida yo'lga xos signalizatsiya asosini tashkil etadi. Nat Neurosci. 2012; 15: 1624-1626. doi: 10.1038 / nn.3254. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  45. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal Vt, Russo SJ, Mexanik M, Mouzon E, Neve RL, Xaggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Taraxovskiy A, Schaefer A, Nestler EJ. Giyoxin bilan bog'liq bo'lgan plastisitivada histon metiltransferaza G9a ning asosiy roli. Ilmiy. 2010; 327: 213-216. doi: 10.1126 / science.1179438. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  46. N-RL, Uorley PF, Snyder SH, K. J. J., J.M., Fridman AK, Lansink CS, Robison AJ, Vinish M, Krishnan V, Kim S, Siuta MA, Galli A, Niswender KD, Appasani R, Horvath MC, Hurd YL, Cheer JF, Xan MH, Russo SJ va boshq. Ventral tegmental hududida dopamin neyronlaridagi morfin bilan bog'liq adaptatsiyalarda mTOR signalizatsiyasi va neyronal faollik uchun ahamiyati. Neyron. 2011; 72: 977-990. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.012. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  47. McClung CA, Nestler EJ. CREB va DFOSB tomonidan gen ekspressioni va kokain mukofotini tartibga solish. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208-1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  48. McDaid J, Graham MP, Napier TC. Metamfetamin bilan indikatsiyalangan sensitizatsiya sichqoncha miyasining barcha limbik o'chog'i bo'ylab pCREB va DFBni o'zgartiradi. Mol Pharmacol. 2006; 70: 2064-2074. doi: 10.1124 / mol.106.023051. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  49. Moratalla R, Vallejo M, Elibol B, Graybiel AM. D1-sinf dopaminli retseptorlari striatumda fos bilan bog'liq bo'lgan oqsillarni kokainning paydo bo'lishiga olib keladigan doimiy izotoplarga ta'sir ko'rsatadi. Neuroreport. 1996; 8: 1-5. doi: 10.1097 / 00001756-199612200-00001. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  50. Muller DL, Unterwald Em. D1 dopamin retseptorlari intervalgacha morfin kiritilgach, rat striatumida FosB indüksiyasini modulyatsiya qiladi. J Pharmacol Exp Ther. 2005; 314: 148-154. doi: 10.1124 / jpet.105.083410. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  51. Narayan S, Kass KE, Tomas EA. Surunkali haloperidolli davolash sichqonchaning miyasida miyalin / oligodendrosit bilan bog'liq genlarni ifodalaydi. J Neurosci Res. 2007; 85: 757-765. doi: 10.1002 / jnr.21161. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  52. Navarro M, Carrera MR, Fratta V, Valverde O, Cossu G, Fattore L, Chowen JA, Gomez R, del Arco I, Villanua Ma, Maldonado R, Koob GF, Rodriguez de Fonseca F. Opioid va kannabinoid retseptorlari dori-darmonlarni o'zlashtirish. J Neurosci. 2001; 21: 5344-5350. [PubMed]
  53. Nelson AB, Hang GB, Grueter BA, Paskal V, Luscher C, Malenka RC, Kreitzer AC. Yovvoyi tipdagi va gemitsigotdagi Drd1a va Drd2 BAC transgenik sichqonlarida striatal-qaram yurish-turishlarni taqqoslash. J Neurosci. 2012; 32: 9119-9123. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0224-12.2012. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  54. Nikola SM. Nucleus akkumtsiyalar bazal ganglionlar ta'sirini tanlash tizimining bir qismi sifatida. Psixofarmakologiya. 2007; 191: 521-550. doi: 10.1007 / s00213-006-0510-4. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  55. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Teylor JR. Nukleus akumbensidagi FosB oziq-ovqat bilan mustahkamlangan instrumental xulq-atvor va motivatsiyani tartibga soladi. J Neurosci. 2006; 26: 9196-9204. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  56. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Surunkali stressdan keyin mukofotga bog'liq miya strukturalarida dfFBning indulatsiyasi. J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  57. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal V, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosBning turli xil nayranglari miyadagi suiiste'mollik bilan bog'liq. Sinaps. 2008; 62: 358-369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  58. Renthal Vt, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. DFOSB surunkali amfetamin ta'siridan so'ng c-fos genining epigenetik desensitizatsiyasiga yordam beradi. J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  59. X, X, NX, X, X, N, X, N, X, X, X, N, Nestler EJ. Kokaindan kromatinni boshqarishni genomli keng tahlil qilish sirtuinlar uchun yangi rolni namoyon etadi. Neyron. 3; 2009: 62-335. doi: 348 / j.neuron.10.1016. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  60. Robison AJ, Nestler EJ. Narkomaniyaning transkripsiya va epigenetik mexanizmlari. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 623-637. doi: 10.1038 / nrn3111. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  61. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Kollinz M, Wee S, Koob G, Turecki G, Neve R, Tomas M, Nestler EJ. Surunkali kokainga nisbatan qiziqish va tizimli javoblar yadroviy shilimshiq qobig'ida DFOS va kaltsiy / kalmodulinga bog'liq protein kinaz II ni o'z ichiga oladi. J Neurosci. 2013; 33: 4295-4307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  62. Smit RJ, Lobo MK, Spenser S, Kalivas PW. D1 va D2 akumbens proektsion neyronlarida kokainga bog'liq adaptatsiyalar (dichotomiya mutlaqo bevosita va bilvosita yo'llar bilan emas, balki) Curr Opin Neurobiol. 2013; 23: 546-552. doi: 10.1016 / j.conb.2013.01.026. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  63. Solinas M, Thiriet N, El Rawas R, Lardeux V, Jaber M. hayotning erta bosqichlarida ekologik boyitish kokainning xulq-atvor, neyrokimyoviy va molekulyar ta'sirini pasaytiradi. Neyropopsikofarmakologiya. 2009; 34: 1102-1111. doi: 10.1038 / npp.2008.51. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  64. Sparta DR, Stamatakis AM, Phillips JL, Hovelsø N, Van Zessen R, Stuber GD. Neyrokronalarning uzoq muddatli optogenetik manipulyatsiyasi uchun implantatsiyalanuvchi optik tolalarni yaratish. Nat protokol. 2012; 7: 12-23. doi: 10.1038 / nprot.2011.413. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  65. Stamatakis AM, Stuber GD. Ventral midbrenga yonbosh ichakning kirishlarini faollashtirish xatti-harakatlardan qochishga yordam beradi. Nat Neurosci. 2012; 24: 1105-1107. doi: 10.1038 / nn.3145. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  66. Stuber GD, Britt JP, Bonji A. Noyob kontaktlarning zanglashiga olib keladigan neyron davrlarining optogenetik modulyatsiyasi. Biol psixiatriyasi. 2012; 71: 1061-1067. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.11.010. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  67. Tan KR, Yvon S, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouie G, Deisseroth K, Tye KM, LUSCHER C. GABA neyronlari VTA diskini shartli joylashib olgan. Neyron. 2012; 73: 1173-1183. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.015. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  68. Teegarden SL, Bale sh.b.. Xun tanlovida pasayish hissiylikning oshishi va xun parchalanishi uchun xavf tug'diradi. Biol psixiatriyasi. 2007; 61: 1021-1029. doi: 10.1016 / j.biopsych.2006.09.032. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  69. Dopaminerjik neyronlarda Tsay HC, Zhang F, Adamantidis A, Stuber GD, Bonci A, de Lecea L, Deisseroth K. Fasichning tutashuvi davolovchi sharoit uchun etarli bo'ladi. Ilmiy. 2009; 324: 1080-1084. doi: 10.1126 / science.1168878. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  70. Tye KM, Mirzabekov JJ, Warden MR, Ferenczi EA, Tsai HC, Finkelstein J, Kim SY, Adxikari A, Tompson KR, Andalman AS, Gunaydin LA, Witten IB, Deisseroth K. Dopamin neuronlari neyron kodlash va depressiyadan harakatlar. Tabiat. 2013; 493: 537-541. doi: 10.1038 / tabiat11740. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  71. Van Zessen R, Phillips JL, Budygin EA, Stuber GD. VTA GABA neuronlarini faollashtirish mukofotni sarflashni pasaytiradi. Neyron. 2012; 73: 1184-1194. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.02.016. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  72. Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños CA, Neve RL, Ghose S, Berton U, Tamminga CA, va boshq. MF mukofotlari davrida DFOSB stress va antidepressantlarga nisbatan chidamlilikka yordam beradi. Nat Neurosci. 2010; 13: 745-752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  73. Vialou V, Cui H, Perello M, Mahgob M, Yu HG, Rush AJ, Pranav H, Jung S, Yangisawa M, Zigman JM, Elmquist JK, Nestler EJ, Lutter M. Kaloriya chekloviga sabab bo'lgan metabolik o'zgarishlarda DF . Biol psixiatriyasi. 2011; 70: 204-207. doi: 10.1016 / j.biopsych.2010.11.027. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  74. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Karle-Florens TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iñiguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolaños-Guzman CA. DeltaFosB ning yadroga ta'sirini tabiiy mukofot bilan bog'liq xatti-harakatlariga ta'siri. J Neurosci. 2008; 28: 10272-10277. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1531-08.2008. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  75. Mirzabekov JJ, Lo M, Tompson KR, Kim SY, Adxikari A, Tye KM, Frank LM, Deisseroth K. Xulq-atvorga qarshi javobni nazorat qiluvchi prefrontal korteks-miya sintezi neyronal proektsiyasi. Tabiat. 2012; 492: 428-432. doi: 10.1038 / tabiat11617. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  76. Vatabe-Uchida M, Zhu L, Ogawa SK, Vamanrao A, Uchida N. Midbrain dopamin neuronlariga bevosita kirib boradigan barcha miyadagi xaritalash. Neyron. 2012; 74: 858-873. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.03.017. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  77. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thorén P, Nestler EJ, Brené S.VFosB g'ildirakni boshqaradi. J Neurosci. 2002; 22: 8133-8138. [PubMed]
  78. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Orbitofrontal korteksda DFOSB induktsiya kokainga sabab bo'lgan kognitif disfunktsiyaga chidamli bo'ladi. J Neurosci. 2007; 27: 10497-10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  79. Witten IB, Steinberg EE, Lee SY, Davidson TJ, Zalocusky KA, Brodsky M, Yizhar O, Cho SL, Gong S, Ramakrishnan C, Stuber GD, Tye KM, Janak PH, Deisseroth K. texnikasi va dopamin vositachiligini kuchaytirish uchun optogenetik dastur. Neyron. 2011; 72: 721-733. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.10.028. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  80. Yizhar O, Fenno LE, Davidson TJ, Mogri M, Deisseroth K. Neyral tizimlarda optogenetika. Neyron. 2011; 71: 9-34. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.004. [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  81. Yoneyama N, Crabbe JK, Ford MM, Murillo A, Finn DA. 22-dagi inbred sichqonchaning shtamini ixtiyoriy o'rganish iste'moli. Spirtli ichimliklar. 2008; 42: 149-160. doi: 10.1016 / j.alcohol.2007.12.006. [PMC bepul maqola] [PubMed] [O'zaro faoliyat]
  82. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton U, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB uchun morfin ta'siridagi yadrodagi akumbenslar uchun muhim rol. Nat Neurosci. 2006; 9: 205-211. doi: 10.1038 / nn1636. [PubMed] [O'zaro faoliyat]