Biol psixiatriyasi. 2008 Dek 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 iyul 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale sh.b..
manba
Hayvon biologiyasi kafedrasi, Pensilvaniya universiteti, Filadelfiya, 19104-6046, AQSh.
mavhum
Maqsadi:
Mukofotga sezuvchanlik giyohvand moddalarni suiiste'mol qilish bilan bir qatorda ortiqcha ovlash bilan bog'liq xatti-harakatlarning predispoziv faktori sifatida ham ifodalanadi. Biroq, sezgirlikni oshirishga yordam beruvchi asosiy mexanizmlar noma'lum. Biz dopamin signalizatsiya jarayonida regressivlikni oshirib boradigan yuqori sezuvchanlikning asosiy sababi bo'lishi mumkinligini taxmin qildik.
Uslublar:
Delta FosB-oversek sichqonchani sichqoncha bilan oziqlantiruvchi yuqori yog'li parhezga javoban mukofot yo'lini o'zgartirishni o'rganish uchun yuqori sezuvchanlik, genetik sichqoncha modelini qo'lladik. Ushbu sichqonlarda mukofotlash belgisi belgilarini ham asosan, ham 6 xafta mazali ovqatlanish marosimidan so'ng o'rganishdi. Sichqonlarga bu yallig'lanishni rag'batlantiruvchi vositalarni olib tashlash uchun ushbu modelning zaifligini baholash uchun yuqori yog'li dietani olishdan keyin xulq-atvorda tekshirildi.
Natijalar:
Bizning natijalar yadrosidagi accumbens-hipotalamus-ventral tegmental sohasidagi Delta FosB ning yadro akkumbenlari va striatal hududlarida haddan tashqari ekspresiya natijasida yuzaga keladigan mukofot yo'lini faollashishini namoyish etadi.. Fosforilleştirilmiş siklik adenozin monofosfat (cAMP) javob elementi majburiy protein darajalari (pCREB), miyadan olingan neyrotrofik omil (BDNF), yadrodagi akumbensdagi dopamin va uslubiy adenosin monofosfat bilan boshqariladigan fosfoprotein, 32 kDa (DARPP-32) molekulyar massasi bilan Delta FosB sichqonlarida kamaytirildi va dopamin signalini kamaytirishni bildiradi. Olti hafta davomida yuqori yog'li ovqatlanish ta'sirida bu farqlar butunlay yaxshilandi, bunda lazzatli ovqatlanishning kuchli salohiyatini namoyon etdi. Delta FosB sichqonlari shuningdek, yuqori yog 'olishdan so'ng, lokomotor faoliyat va sezuvchanlik bilan bog'liq javoblarni 24 soatlab sezilarli darajada oshirdi.
Natija:
Ushbu natijalar Delta FosB va dopamin signalizatsiyasi bilan bog'liq bo'lgan ta'mli dietalar bilan normallasha oladigan va obezlikning ayrim shakllarida predispozitsion fenotip bo'lishi mumkin bo'lgan regressdagi o'zgarishlarga asoslanadigan sezuvchanlikni aniqlaydi.
Kirish
Bizning tuyadi va to'yni nazorat qiluvchi neyron tizimlarining borayotgan bilimiga qaramay, Qo'shma Shtatlarda semirish stavkalari o'sib bormoqda. Mavjud dori-darmonlar cheklangan samaradorlikka ega va xatti-harakatlarning modifikatsiyasi uzoq muddatli (XXNX) minimal muvofiqlikdan aziyat chekmoqda. Kaloriya-qalin, mazali taomlarni iste'mol qilish miyada stress va mukofot yo'llarini o'zgartirish bilan bog'liq bo'lib, bunday oziq-ovqat mahsulotlarining foydali xususiyatlari energiya muvozanat belgilarini (2-4) bekor qilishi mumkinligini ko'rsatmoqda. Yog'dagi oziq-ovqatlar tabiiy foyda keltiradi, miya mukofotlari markazlarini zo'ravonlik dori-darmonlariga o'xshash tarzda faollashtiradi va bu kabi o'z-o'zini boshqarish paradigmalarida (5-8) ishlatilgan. Shunday qilib, ortiqcha ovlash va giyohvand moddalarni suiiste'mol qilishning xatti-harakati va turtki sherik umumiy mexanizmlarni o'z ichiga oladi, ehtimol, har ikki sharoitda davolanishning yangi yo'llarini ochadi.
Muvofiq oziq-ovqat va miyada mukofot va stressni tartibga soluvchi yo'llar o'rtasidagi munosabatni o'rganishda, Biz taniqli yuqori yog 'dietasidan (HF) olib tashlanganidan so'ng, oldindan kamaytirilgan va yuqori stressni oshiradigan molekulyar va biokimyoviy markerlarni aniqladik. Qo'llashda ishlatilgan giyohvandlarga o'xshash, bizning tadqiqotlarimizda rohat ovqatlanish ta'siriga o'xshash, yadro akumbensida (NAc) transkriptsion faktor DFB darajasini, (9, 10). DFOSB ko'rsatkichini oshirib yuboradigan sichqonchalar oziq-ovqat mukofoti uchun (11) oziq-ovqat mukofotini oshirishga yordam berib, ularni mukofotlash hassosiyatining rolini va mukofot tizimining uzoq muddat tartibga solinishini tekshirish uchun qimmatbaho vosita qilib, mazali ovqatlanish uchun molekulyar va biokimyoviy javoblarda namoyon qiladi.
Ushbu ishda DFOSB-overexpressing sichqonlardan foydalandik, chunki bu xushbo'y HF dietasiga javoban NAc-gipotalamus-ventral tegmental hududida (VTA) neyrokompyuterda mukofotning markerlarida uzoq muddatli o'zgarishlarni o'rganish uchun foydalandik. Ushbu mukofotga sezgir sichqonlarning oldingi ishlariga asoslanib, biz mukofotni sezuvchanlikdagi DFS bilan bog'liq bo'lgan o'zgarishlarda NATning VTA ga qayta tiklanishidan kelib chiqqan dopamin signalizatsiya jarayonida drenajlashni o'z ichiga oladi. Bundan tashqari, energiya jihatidan zich bo'lgan HF dietasining tabiiy mukofotiga ta'sir qilish, bu sichqonlarda dopaminergik tizimni normallashtirishi mumkinligini taxmin qildik, natijada ushbu HF dietasidan chiqarilishning stressiga nisbatan chayqalib javob. Muvaffaqiyatli ovqatlanish vositasi sifatida mazali ovqatni ishlatishning o'ziga xos tomoni bizga hipotalamik uskularni fenotipda mukofotlash uchun imkon beradi, bu esa kasallikka chidamli semirib ketishga moyil bo'lgan aholini taxmin qilish mumkin. Ushbu gipotezani o'rganish uchun NAF va pKREB, BDNF va DARPP-32 kabi dopamin nörotransmisyon markerlarini va HF ekspozitsiyasidan so'ng, tirozin gidroksilaz va VTA dopamin transporterini o'rgandik. Shuningdek, dopamin ishlab chiqarishga ta'sir etuvchi ma'lum miqdordagi energiya muvozanatini, shu jumladan, leptin va VEKdagi orexin retseptorlari va lateral gipotalamus ichidagi orexin ifodasini o'rganib chiqdik.
Materiallar va usullari
Hayvonlar
NAc va dorsal striatumda (Kelz va boshqalar, 1999) dynorphin-musbat neyronlarda DFosB ning indeksini oshirib yuboradigan erkak bitransgen sichqonlari Texas janubi-g'arbiy tibbiyot markazining Arktik fonida (ICR: C57Bl6 / SJL) ishlab chiqarilgan va Pensilvaniya universitetida sinovdan o'tkazildi. Barcha sichqonchani doksisiklin (ichimlik suvida 100 ig / ml) ustida saqlash Pensilvaniya universitetiga etib borgunga qadar davom etdi. Ovozsizlantirish uchun doksisiklin chiqarildi (n = 23) (12). Nazorat sichqonlari (n = 26) preparatni olishga davom etdi. Sichqoncha doksiklinani olib tashlangandan so'ng sakkiz hafta davomida diet guruhlariga tayinlandi. Bu vaqtda vaqtning ekspluatatsiyasini maksimal darajalarga (13) yetkazish ko'rsatildi. Sichqoncha 12: 12 yorug'lik zulmatli siklida (0700dagi chiroqlar) oziq-ovqat va suv bilan ta'minlangan holda saqlangan. Barcha tadqiqotlar Pensilvaniya Institutsional Hayvon Qo'llab-quvvatlash va Foydalanish Qo'mitasi tomonidan tasdiqlangan tajriba protokollari asosida amalga oshirildi va barcha tartiblar institutsional qo'llanmalarga muvofiq amalga oshirildi.
Diyetaga ta'sir qilish
Sichqoncha uy chovida (n = 16) yoki olti hafta mobaynida HF (n = 16-17) ustiga joylashtirilgan. Uy chovi (Purina Lab dieti, Sent-Luis, MO) 4.00% protein, 28% yog 'va 12% karbongidratdan tashkil topgan 60 kkal / g ni o'z ichiga oladi. HF dietasi (Research Diets, New Brunswick, NJ) 4.73% protein, 20% yog 'va 45% karbongidratdan tashkil topgan 35 kkal / g ni o'z ichiga oladi.
Biokimyo va genlarning ifodasi
Sichqoncha olti haftalik dietadan keyin tahlil qilindi. Boshsuyadan mo'ylov yoki muzlatilgan quruq muzda yoki NAc disseke (taxminan 0.5 - 1.75 mm dan bregma, 3.5 - 5.5 mm chuqurligida) va suyuq azotda muzlatilgan edi. To'qimalar tahlil qilinguniga qadar -80 ° C da saqlangan.
Biyokimyasal tahlillar
G'arb bloklari uchun usullar qo'shimcha materiallarda tasvirlangan. Qo'llaniladigan antikorlar quyidagilardir: Cdk5, CREB va BDNF (1: 500, Santa Cruz biotexnologiyasi, Santa Cruz, CA) va fosfo-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Cell signaling Technology, Danvers, MA).
Retseptorlari autoradiografiyasi
Autoradiografiya uchun batafsil usullar qo'shimcha materiallarda tasvirlangan. Amaldagi ligandlar 2 nM H3 - SCH 23390 va 5 nM H3 - spiperon (PerkinElmer, Boston, MA) sifatida ishlatilgan.
In situ hibridizatsiyasi
To'qimalarni qayta ishlash va hibridizatsiya yuqorida aytib o'tilganidek bajarildi (14). DARPP-32 probi P. Greengard (Rockefeller universiteti) va J. Elmquist (Texas janubi-g'arbiy qismidagi tibbiyot markazi) orexin probi tomonidan yaxshi ta'minlangan. 32 kun davomida DARPP-3 uchun sinov qilingan slaydlar kino uchun topshirildi va 4 kunlik film uchun orexin uchun sinov qilingan slaydlar ilova qilindi. Kino tasvirlarining kantifikatsiyasi ilgari tasvirlangan tarzda (10) o'tkazildi.
QRT-PCR
RNK VTA dan izolyatsiya qilingan va TaqMan gen ekspresifikatorlari (Applied Biosystems, Foster City, KA) yordamida baholangan alohida genlarni ifodalashgan. Batafsil uslublar va statistik tahlillarni qo'shimcha materiallarda topish mumkin.
Xulq-atvor tahlillari
Retseptivlikning ta'sirini ta'sirini o'rganish uchun, dietadan kelib chiqqan xulq-atvor o'zgarishlariga ko'ra, sichqonning pastki qismini to'rt hafta davomida ta'sirlanishdan keyingi HF dan olib tashlandi va uy choviga qaytdi (n = 9 control, n = 8FFB). Yigirma to'rt soatdan keyin sichqon sichqonchani ochiq usulda sinovdan o'tkazdi va bu avvalgi xom-ashyoni olib tashlash paradigmiga (10) asoslangan. Qisqacha aytganda, sichqon ochiq maydon apparatining markaziga joylashtirilgan va besh daqiqa davomida kuzatilgan. Umumiy chiziqli chiziqlar, fekal balli, markazda vaqt va markazga kesishgan.
statistika
G'arbiy qoralanganlardan tashqari barcha ma'lumotlar ikki tomonlama ANOVA yordamida tahlil qilindi va undan keyin Fişerning PLSD testi doksisiklin bilan davolash (DFOSB ifodasi) va parhez holati mustaqil o'zgaruvchilar sifatida. RT-PCR tahlillari uchun bog'liq genlar guruhlari ichida bir nechta taqqoslashlarni to'g'rilash uchun pasaytirilgan P qiymati ishlatilgan (qo'shimcha materiallarga qarang). G'arbiy dog'lar mustaqil o'zgaruvchi sifatida doksisiklinni davolash bilan talabaning t-testi yordamida tahlil qilindi va shu blot ichidagi optik zichlikni taqqosladi. Barcha ma'lumotlar o'rtacha ± SEM sifatida ko'rsatilgan.
natijalar
Bazal biokimyoviy farqlar
DFosB-haddan tashqari ta'sir qiluvchi sichqonlarda mukofotning sezgirligi asosida yotadigan molekulyar yo'llarni aniqlash uchun NAc-da bir nechta asosiy signalizatsiya molekulalarining darajasi tekshirildi. Doxycycline (F = 5, P = 5.1; Shakl 0.08A) da saqlanadigan littermate nazorat qiluvchi hayvonlar bilan taqqoslaganda DFosB sichqonlarining NAc-da Cdk1 darajasining o'sish tendentsiyasi mavjud edi. DFosB sichqonlari pCREB (F = 7.4, P <0.05; Shakl 1B) va CREB (F = 5.4, P = 0.05; Shakl 1C) ning umumiy darajalarini sezilarli darajada kamaytirganligini ko'rsatdi. BDNFda sezilarli pasayish DFosB sichqonlarining NAc-da ham kuzatilgan (F = 10.6, P <0.05; 1-rasm).
Shakl 1
DFosB ekspressiya qiladigan sichqonlarda NAcdagi dopamin signallarining biokimyoviy markeralari namoyish etildi
Oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilish va tana vaznining balandligi yuqori
Keyin biz tabiiy ravishda foydali HF dietasining DFB-ni haddan tashqari ta'sir qiladigan sichqonlarda signal molekulalaridagi o'zgarishlarga ta'sirini ko'rib chiqdik. DFOSB sichqonlari va uyda yoki HFda oziq-ovqat mahsulotlarini iste'mol qilishda farqlar yo'q edi. Shu bilan birga, DFOSB sichqonlariga xos bo'lgan HF ta'sirlanganda tana vazniga normalizatsiya qilingan kaloriya iste'molining umumiy pasayishi kuzatildi (F = 11.2, P <0.01; 2A-rasm). Olti hafta davomida parhezga ta'sir qilishning oxirida HF olgan sichqonlarning og'irligi chow dietasidagi (F = 17.2, P <0.001) va DFosB sichqonlari umuman olganda og'irligi og'irroq edi (F = 5.6, P <0.05; Shakl. 2B). Ushbu ta'sir chow dietasidagi guruhlar o'rtasidagi farqlarga xos edi (P <0.05).
Shakl 2
DFsB ortiqcha ekspress-simmetriya qiluvchi sichqonchalar ikkala chow yoki yuqori yog'li (HF) dietada oziq-ovqat sotib olishda farq ko'rsatmadi
Oliy yog 'dietasidagi biokimyoviy farqlar
NAF signalizatsiyaidagi bazal farqlar HF dietasi bilan qanday o'zgarishi mumkinligini aniqlash uchun oltita xafta qabul qilingan hayvonlarda dastlabki bosqichda o'rganilgan bir xil signalli oqsillar tekshirildi. Cdk5 darajasida sezilarli farqlar yo'q edi (shakl 3A). PCREB va total CREB darajalari olti hafta HF (Fig. 3B, S) dan keyin farq qilmadi. BFNF darajalari DFF ta'sirida olti hafta mobaynida (F = 6.5, P = 0.05, shakl 3D) DFOSB sichqonlarida sezilarli darajada ko'tarildi.
Shakl 3
DF farmasevtika sichqonlarini ortiqcha ekspresslatuvchi NAc ning yuqori yog'li (HF) dietasi yaxshilangan signalizatsiya farqlari
Dopamin retseptorlari autoradiografiyasi
NAcdagi dofamin signalizatsiyasida DFB tomonidan indikatsiyalangan o'zgarishlarning dopamin retseptorlari ekspressionidagi o'zgarishlar bilan bog'liqligini baholash uchun retseptorlarning avtoradiografiyasidan foydalanganmiz (4A-rasm). Yuqori yog'li diet D1 dopamin retseptorlari bilan bog'lanish zichligini biroz oshirdi (P = 0.14) va bu farq DFosB sichqonlarida katta edi (4B-rasm). Bundan tashqari, HF (P = 1) dan keyin D0.06 bog'lash maydonining o'sishi tendentsiyasi kuzatildi va post-hoc testi buni DFosB sichqonlarida muhimligini ko'rsatdi (P <0.05; 4C-rasm). D1 retseptorlaridan farqli o'laroq, D2 retseptorlari bilan bog'lanish zichligida (nazorat chow = 97.6 ± 6.9, nazorat HF = 101.1 ± 8.2, phFosB chow = 91.6 ± 1.0, phosB HF = 94.8 ± 9.5) yoki bog'lanish maydonida (nazorat chow = 47.3 ± 3.4, nazorat HF = 53.8 ± 6.0, DFosB chow = 51.9 ± 3.7, DFosB HF = 49.0 ± 3.3) NAc da kuzatildi.
Shakl 4
Yuqori yog 'dietasi (HF) D1 dopamin retseptorlari ulashida va DFOSB dan ortiqcha ekspress sichqonlarda yadroli akumbenslarda (NAc) DARPP-32 ifodasi o'zgarishiga olib keldi
NAc ichida DARPP-32 ifodasi
In situ hibridizatsiya NAcdagi DARPP-32 ekspression darajasini aniqlash uchun ishlatilgan (4-rasm). Yuqori yog 'dietasi ushbu miya mintaqasida DARPP-32 ekspressionini sezilarli darajada oshirdi (F = 5.1, P <0.05) va diet va DFosB ekspresiyasi (F = 8.9, P <0.05) o'rtasida sezilarli ta'sir o'tkazildi, bunda DFosB sichqonlari ko'proq parhez bilan bog'liq o'zgarish (4E-rasm). Nazorat va DFosB sichqonlari o'rtasidagi DARPP-32 ekspresiyasidagi bazal farq post-hoc testi (P <0.01), shuningdek DFP sichqonlarida DARPP-32 ekspresiyasining HF (P <0.01) bo'yicha sezilarli darajada oshishi bilan aniqlandi.
VTA ning gen ifodasi
QRT-PCR, mukofotni tartibga solishda ilgari ishtirok etgan bir nechta asosiy genlarga yo'naltirilgan VTAda gen ekspressionidagi o'zgarishlarni baholash uchun ishlatilgan. Barcha namunalar b-aktin normallashtirildi. D-aktin ekspressioni davolash orqali o'zgartirilmasligini ta'minlash uchun b-aktinni ikkinchi ichki nazorat GAPDH bilan taqqoslash uchun alohida tahlil o'tkazildi. B-aktin ekspresyonida sezilarli farqlar mavjud emas (DK qiymatlari, b-aktin - GAPDH: nazorat chow = 2.29 ± 0.21, nazorat HF = 2.01 ± 0.04, phFBB chow = 2.32 ± 0.49, phFBB HF = 2.37 ± 0.10).
Dyrosin hydroxylase (F = 3.6, P <0.06; Fig. 5A) ekspresiyasi uchun DFosB ekspressioni va dietani davolash o'rtasidagi o'zaro ta'sir tendentsiyasi kuzatildi. Olti hafta davomida HF ta'sirida nazorat sichqonlarida tirozin gidroksilaza ekspressioni kamayadi va DFosB sichqonlarida ekspression kuchayadi. Dopamin tashuvchisi ekspressioni uchun DFOSB ekspressioni va dietaga ta'sir qilish o'rtasida sezilarli ta'sir o'tkazish kuzatildi (F = 6.7, P <0.03; Shakl 5B). Tirozin gidroksilaza singari, HF ta'sirida nazorat sichqonlarida dopamin tashuvchisi ekspressioni pasaygan va DFosB sichqonlarida ekspression sezilarli darajada oshgan (P <0.05). Dopamin tashuvchisi nazorati va DFosB sichqonlari o'rtasidagi bazal farq ahamiyat kasb etmadi (P = 0.16), ammo HF ning 6 wksidan so'ng, DFosB sichqonlari dopamin transporterining boshqaruv darajalariga nisbatan sezilarli darajada yuqori ekanligini ko'rsatdi (P <0.05).
Shakl 5
Oliy yog 'dietasi (HF) va DFosB ifodasi VTAdagi bir qator kalit molekulalarning ifodalangan o'zgarishiga olib keldi
VTA da TrkB darajasini kamaytirish uchun DFOSB ekspressionining ko'payishini ta'sirini ko'rsatuvchi tendentsiya mavjud edi (F = 5.7, P <0.04; 5C-rasm). D-opioid retseptorlari ekspresiyasiga hech qanday asosiy ta'sir ko'rsatilmagan bo'lsa-da, DFosB sichqonlarida ekspressionning pasayishi tendentsiyasi mavjud edi (P = 0.08; 5-rasm). VTA da leptin retseptorlari ekspressioni aniqlandi. DFga ta'sir qilishning sezilarli ta'siri aniqlandi (F = 6.1, P <0.03), HF DTA FosB va nazorat sichqonlarida VTA tarkibidagi leptin retseptorlari darajasini sezilarli darajada pasaytirdi (5E-rasm). VTA da orexin retseptorlari 1 ekspressioni ham tekshirildi. Ratsionning orexin retseptorlari ekspressioniga sezilarli ta'sir ko'rsatdi (F = 9.0, P <0.02), HF ta'sirlangan sichqonlar VTAda yuqori darajalarni ifoda etdilar (5F-rasm). DFOSB sichqonlari uchun ushbu miya mintaqasida orexin retseptorlari 1 ning yuqori darajalarini ifoda etish tendentsiyasi ham mavjud edi (P <0.05).
Yanal gipotalamusda og'izning ifodasi
VTA ning orexinergik innervatsiyasi kelib chiqishi bo'lgan lateral gipotalamusdagi orexin darajasini in situ gibridlash orqali o'lchadik (6A-rasm). DFOSB ekspressioni va dietaga ta'sir qilish (O = 9.1, P <0.01) o'rtasida sezilarli ta'sir o'tkazildi, HF nazorat sichqonlarida (P <0.05) va DFOSB sichqonlarida ekspresiyani pasaytirdi (6B-rasm). Bazal holatda orexin ekspresyonida sezilarli farqlar mavjud emasligiga qaramay, 6 wk HF dan keyin, DFosB sichqonlari orexin darajasini nazoratga nisbatan sezilarli darajada pasayganligini bildirdi (P <0.05).
Shakl 6
Yuqori yog '(HF) dietasi tekshirishda (Ctrl) orexin ekspresyoni ustida differensial ta'sirga ega va DFOSB sichqonlarini ortiqcha ekspress
Behavioral tahlillari
Oziqlanish o'zgarishi sababli qo'zg'alish va hissiylikdagi o'zgarishlarni baholash uchun sichqonlar HF dietasidan chiqib ketganidan keyin 24 soatdan keyin ochiq maydonda sinovga duch kelishdi (10). Uyg'otish o'lchovi sifatida kiritilgan umumiy chiziqli xochlarga DFOSB ekspressioni (F = 6.6, P <0.05) va parhez (F = 4.6, P <0.05; Shakl 7A) sezilarli ta'sir ko'rsatdi. DFosB sichqonlari yangi muhitda kontrillarga qaraganda ancha faolroq edi va post-hok sinovlari shuni ko'rsatdiki, HF dan chiqarilgan sichqonlar chovga duchor bo'lganlarga qaraganda ancha faolroq (P <0.05). Najasli boli tashvishga o'xshash xatti-harakatlarning o'lchovi sifatida hisoblangan (10). DFOSB ekspressionining asosiy ta'siri mavjud edi (F = 10.2, P <0.01), DFOSB-haddan tashqari ta'sir qiluvchi sichqonlar yangi muhitda, ayniqsa uy chou va HFni olib tashlash guruhlarida ko'proq najasli boli hosil qiladi (7B-rasm). FFFB sichqonlari HF dietasida saqlanib qolganlarga qaraganda, najasli boli hosil qildi va sinovdan 24 soat oldin olib tashlanganlarga qaraganda. Nazorat qiluvchi sichqonlarga parhez ta'sir qilmagan. DFOSB ekspressioni yoki dietasining ochiq maydon markazida o'tkazgan vaqtiga ta'sirlari sezilarli bo'lmagan (nazorat chow = 14.5 ± 3.1 soniya, nazorat HF = 18.0 ± 3.2 sek, nazorat W / D = 15.4 ± 1.9 sek, DFosB chow = 16.9 ± 2.4 sek, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 sek, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 sek).
Shakl 7
DFF ekspressiongan sichqonchalar yuqori yog 'dietasini (HF) olib tashlash oqibatlariga nisbatan sezgir edi
muhokama
Obezlik bilan davolashda ortiqcha ovlash va kilogrammni oshirishga ta'sir etadigan omillarni aniqlash uchun juda muhim ahamiyatga ega. Meyn mukofotlash yo'llari mazali ovqatlar va xun o'zgarishlar (6, 10, 15, 16) uchun qiziqish va javob berishda muhim rol o'ynaydi. Oreksigenik va anorexigenik signallar, hipotalamus-VTA-NAc tizimi orqali mukofotlash signallarini to'g'ridan-to'g'ri ta'sir qilishi mumkinligi sababli, mukofot markazlarida energiya jihatidan boy bo'lgan mazali diyetalarga javob beradigan genlarni aniqlash semizlikni davolashda (17, 18) yangi terapevtik maqsadlarni keltirishi mumkin. Shuning uchun, biz mukofotning o'zgarishlariga (13, 19, 20) nisbatan sezgirlik namunasi sifatida DFOSB-ov-simsiz sichqonlardagi HF dietasiga javoban, gipotalamus-VTA-NAc davridagi mukofot va energiya muvozanatini ko'rsatuvchi signallarni molekulyar belgilarini tekshirdik. , dietani olib tashlashdan keyin esa, xulq-atvorlilik. Biz, DFOS sichqonlarida dopamin signalizatsiyasi bazal disregulatsiyasini energiya balansi signallari va dopamin tizimining kesishishini qamrab oluvchi HF dietasining foydali samaralari bilan normallashtirilishini taxmin qildik.
NAc dopamin signalizatsiyasi dregregatsiyasini ko'rsatuvchi markerlarni o'rganish uchun biz D1 retseptorlari darajasini va pastga yo'naltirilgan efektlarni o'rganib chiqdik. D1 retseptorlari ulashida sezilarli farq bo'lmasa-da, HF ta'sirining DFOSB sichqonlarining ulanish maydonini kuchaytirish tendentsiyasi kuzatildi. Bu DFF ning preparat bilan indüksiyasidir va tabiiy tuxum hujayralari asosan D1 retseptorlarini ifodalovchi o'rta zararli neyronlarning dinorfin-musbat pastki turida ustun turadigan ko'rinadi (9, 21). Pastki oqim dopamin signalizatsiyasi pCREB darajalari DFOSB sichqonlarida sezilarli darajada kamaydi, bu miya hududida (1, 22) past D23 retseptorlari faollashuvini qo'llab-quvvatladi. Qizig'i shundaki, biz DFF sichqonlarida CREB darajasining sezilarli kamayishini aniqladik, bu esa pCREB (24) ning uzoq muddatli pasayishidan kelib chiqadigan geribildirimga ikkinchi darajali bo'lishi mumkin bo'lgan dopamin signallarini uzatishni kamaytirish imkonini beradi. BDNF ifodasi pCREB tomonidan boshqariladi, D1 aktivatsiyasi bilan ko'tariladi va NAc (25, 26) da mukofot bilan bog'liq neyroplastikaning muhim vositachisi hisoblanadi. Shunga mos ravishda, biz DFOSB sichqonlarining NAc da BDNF oqsilining sezilarli kamayishini aniqladik.
NAc ichidagi barcha o'rta zarralar nöronlari DARPP-32 (27) ni ifodalaydi. Uning ko'plab quyi oqimlari uni mukofot yo'llarida (28) muhim rol o'ynaydi va u giyohvandlikda va dopamin sistemasini o'z ichiga olgan boshqa kasalliklarda, jumladan, affektiv kasalliklar va shizofreniya (27, 29). DFP-32 ifodasida DFF sichqonlari NAc da chuqur bazal qisqartmalar aniqlandi. DARPP-32 ifodasi BDNF tomonidan reglamentlanadi va shuning uchun kamaytirilgan ekspression DFOSB sichqonlarida (27, 29, 30) aniqlangan BDNF darajalarining kamayishi bilan bevosita bog'liq bo'lishi mumkin. DARPP-32 ning fosforlanish holatida hatto mo''tadil o'zgarishlar NAc (27) ichida hujayra ichidagi signallarda sezilarli o'zgarishlarga olib kelishi mumkin. Ilgari o'tkazilgan tadkikotlar DARPP-32 proteinida doksitsiklindan olib tashlangan 12-wk dan keyinchalik keng striatal baholash (31) o'tkazilgandan keyin DFOSB sichqonlarida o'zgarish yuz bermadi. DFP-32 da DFPning ta'siri vaqt va mintaqaga xos bo'lishi mumkinligini ko'rsatmoqda.
Biz, DFOSB sichqonchalaridagi NAc dopamin signalizatsiya indekslarining dramatik qisqarishi ehtimol VTA dopamin prognozli neyronlardagi o'zgarishlar bilan bog'liqligini nazarda tutdik, garchi DFB bu neyronlar ichida ortiqcha ifodalanmagan bo'lsa. Shuning uchun, tromosin bilan bog'liq genlarni ekspluatatsiya qilishni, jumladan, tirosin gidroksilaz va dopamin transporterini tekshirdik. Tirosin gidroksilaz va dopamin tashuvchisi darajalari dopamin chiqishi bilan ijobiy bog'liq. DFOSB sichqonlarining qisqargan tirozin gidroksilaza va dopamin tashuvchisida NAc dopamin signalizatsiyasi bilan ajralib turadigan darajada sezilarli pasayish namoyish qilish tendentsiyasi kuzatildi. DFamin sichqonlarining VTA'sidagi dopamin bilan bog'liq genlardagi ushbu bazal qisqartmalar, uzoq muddatli DFOS ekspresivligi vaqtida NAc dan o'zgaruvchan qayta bildirishni aks ettiradi, biz BDNF retseptorlari, TrkB ning VTA (32) ga NAc bilan aloqa qilishning mumkin bo'lgan mexanizmi sifatida ifodalanishini tekshirdik. Tirosin gidroksilazaga va dopamin transporteriga o'xshash bo'lgan TrkB ekspresyoni, ko'plab taqqoslashlar uchun tuzatilganida muhim ahamiyatga ega bo'lmagan DFS sichqonlarida asosan kamaytirilish tendentsiyasini ko'rsatdi. BDNF-TrkB kompleksi retrogradely ko'chirilishi mumkin va mahalliy gen ekspozitsiyasini ta'sir qilish va hujayra o'sishi va parvarishlashni yaxshilash uchun (33) VTA doirasida harakat qilish mumkin. Bundan tashqari, NAc ichidagi presinaptik TrkB ning BDNFni faollashtirishi to'g'ridan-to'g'ri dopamin nörotransmisyonunu (32) ogohlantirishi mumkin va bu sichqonchani dopamin signalizatsiya ta'sirini kamaytiradi.
K-opioid retseptorlarining dynorphin faollashuvi dopamin signalini tartibga soladi va NAc tomonidan VTA (34). VTAdagi k-opioid retseptorlari ifodasi DFF sichqonlarida kamaytirilish tendentsiyasini ko'rsatdi. DFosB ortiqcha ekspressionining NAc (20) dynorphin ifodasini kamaytirishga ko'rsatganidek, DFOSB sichqonlari aniq VTA k-opioidni faollashtirish. Dinorfin signalizatsiyasi odatda dopamin neyronlariga inhibitiv ta'sir ko'rsatishiga qaramay [35], suiiste'mol dori-darmonlarini o'z-o'zini boshqarishni kuchaytiradigan kalamushlar NAc-da dinorfinning pasaygan darajasini namoyish etadi va mukofot sezgirligini oshirishda asosan kamaytirilgan dinorfin signalizatsiyasi rolini ko'rsatmoqda [36]. , 37). Dinorfin-b-opioid tizimining regulyatsiyasi dopamin yo'llarini normalizatsiya qilishda opioid signalizatsiyasining muhim muvozanatini qo'llab-quvvatlovchi giyohvand moddalarni iste'mol qilish va davom ettirish bilan bog'liq. (38).
Energiya jihatidan zich HF dietasining mukofotlash qobiliyatiga asoslanib, biz DFS sichqonlarida dopamin va opioid mukofotlash signalizatsiyasi bu sichqonlarni bunday ratsionga nisbatan yuqori darajadagi mukofot reaktsiyalariga moslashadi, shuning uchun mukofot tizimini gipotalamusning faollashuvi orqali normallashtiradi deb taxmin qildik -VTA-NAc tizimi. Olti hafta davomida parhez ta'sirida DFOSB va nazorat sichqonlari o'rtasida oziq-ovqat iste'mol qilinishining farqlari kuzatilmadi, chunki DFOSB sichqonlaridagi bashoratli va molekulyar markulyatsiya belgilaridagi o'zgarishlar iste'mol qilinadigan kaloriyalardagi farqlarga bog'liq emas edi. HF (32, 29-39) bo'yicha DFSB sichqonlarida dopamin chiqishi tufayli, pCREBda aniqlangan bazal farqlar, total CREB, BDNF, DARPP-41 va k-opioid retseptorlari darajalari zaiflashdi, .
Vazoda tirozin gidroksilaza va dopamin transporterining tekshiruvi XF dan keyin DF va BB nazoratidagi sichqonlarning ajablantiruvchi javoblarini ko'rsatdi. Tekshirish sichqonlari tirozin gidroksilaz va dopamin tashuvchilar ekspresyonida kamayish kuzatilsa, DFOSB sichqonlari bu dopamin bilan bog'liq genlarni ikkala o'sishini oshirmoqdalar. Qizig'i shundaki, tirozin gidroksilaza ekspresiyasi surunkali kokain yoki metamfetamin (42-44) tomonidan VTA ichida o'zgartirilib, DFOSB sichqonlarining HF tabiiy farovonligini sichqonchani nazoratdan ko'ra ko'proq topishi mumkinligini ko'rsatmoqda.
VTA uchun potentsial hipotalamik kiritish energiya muvozanatini aks ettiruvchi signallarni o'tkazishi mumkin, leptin retseptorlari va orexin retseptorlari-1 ning ifodasi ham o'rganildi. Sirkulyatsiya qiluvchi leptin miqdori HF orqali oshiriladi va leptin, o'z navbatida, dopamin signalizatsiya (18, 45) ni o'zgartirish uchun VTAda harakat qilishlari mumkin. VFHda VTA leptin retseptorlari ekspresyoni, xuddi shunday kilogramm va dietani iste'mol qilish bilan birga, DFF va nazorat sichqonchalarida ham HF bilan o'xshash tarzda kamaydi. Yuqori yog 'VFOS va nazorat sichqonlarining VTA-da orexin retseptorlari-1 ning ifodasini oshirdi. Orexin VTA dopamin neyronlarini faollashtiradi, VTA plastisitivasini rivojlantiradi va NAc (46-48) dopamin darajasini oshiradi. Yuqori yog 'dietasi bizning observations (49, 50) bo'yicha sichqonlarda orexin ifodasini oshirishi ko'rsatilgan. Shunday qilib, oreksin retseptorlarining ifodalanganligi va VTA ichidagi leptin signalizatsiyasi o'zgarishi, DFF va nazorat sichqonlarida ham, DFS-ni va energiya muvozanat signallarini uzatuvchi yo'llar bilan to'g'ridan-to'g'ri mukofotga bog'langanlarni qo'llab-quvvatlashi mumkin.
Sovg'ani olib tashlashning stress ta'sirini o'rganish uchun sichqonchani XFni olib tashlangandan so'ng 24-da ochiq maydonda sinovdan o'tkazildi. DFOSB sichqonlari boshqa barcha nazorat va ovqatlanish guruhlari bilan taqqoslaganda, yangi ochiq sohada yuqori darajadagi arosish faolligi va najas baliq ishlab chiqarishini ko'rsatadigan afzal qilingan parhezni olib tashlashning o'tkir ta'siriga nisbatan sezgir edi. DFOSB sichqonlari, shuningdek, ushbu testda qiziqish va nosog'lomlik sezgirligini ko'rsatadigan qiziqarli xulq-atvorli namunasini ko'rsatdi. HF dietasi dastlab chowga nisbatan fokal baliq ishlab chiqarishni kamaytirdi va bu tashvish yana bu tashvish bilan bog'liq javobni oshirdi. Ochiq maydon faolligida kuzatilgan bu kuzatishlar ortexin ifodasining o'zgarishi bilan bog'liq emas, bu esa stress ta'siridagi xiralik bilan munosabatlarni bildiradi, bu faqatgina orexin vositasida signalizatsiya o'zgarishining ta'siri emas. Umuman olganda, ushbu ma'lumotlar bizning FFB sichqonlarining yuqori darajadagi yuqori sezuvchanlik darajasiga qarab afzal qilingan parhezni olib tashlashning o'tkir ta'siriga nisbatan sezgir bo'lishini bizning gipotezamizni qo'llab-quvvatlaydi.
NAc-da DFOSB ning uzoq muddatli haddan tashqari ekspropriatsiyasi qanday xatti-harakatlarda va mukofotlash signalizatsiya qilinishiga olib keladi?? Biz VTA ning tasodifiy aniqlash modelini taklif qildik, unda NAc va hipotalamus o'rni signallari mukofotlanish holatini belgilash uchun mukofot manbai bilan tartibga solish uchun belgilanadi va bu, mukofot yo'llari buzilishi va obeziteye moyillik o'rtasidagi bog'liqlikni qo'llab-quvvatlaydi (rasm 8). HF ta'sirida energiya muvozanatini va mukofotni aks ettiruvchi bir nechta kirishlar VTA ga yaqinlashadi. Leptin va oreksin signalizatsiyasining ortishi va NAc dan lateral gipotalamusga o'tadigan teskari ta'sirlar DFosB sichqonlarida (17, 18, 45, 47, 51-53) bu orexigenik signallarning qanday ta'sir qilishiga ta'sir qilishi mumkin. BDNFda yuqori yog 'dietasiga bog'liq bo'lgan balandliklar VTA uchun mukofotni qaytarib beradi, bu esa dopamin bilan bog'liq genlarning ifodasini o'zgartirishga yordam beradi.
Shakl 8
Yuqori yog '(HF) dietasi DFS sichqonlaridagi tartibsiz sinash signalini normallantiradi
Ushbu natijalar mukofotni sezuvchanlikning molekulyar belgilari bilan ajralib turadi va dopamin tizimining uzoq muddatli regulyatsiyasi individualni o'ziga xoslik va semirib ketishga olib kelishi mumkinligini ko'rsatadi. Bundan tashqari, ushbu ma'lumotlar semirish va boshqa mukofot tizimida markazlashtirishi mumkin bo'lgan boshqa kasalliklarni davolash va oldini olishda potentsial yangi terapevtik maqsadlarni aniqlashga qaratilgan muhim qadamdir. Kelgusida, ushbu tizimning HF dietasini yo'q qilish uchun qanday javob berishini, shuningdek, mukofotga nisbatan sezgirligi va yuqori yog 'dietasiga ta'sir etuvchi har qanday jinsiy farqlarni tekshirishni o'rganish muhimdir.
Qo'shimcha materiallar
Supp. Usullari
Ko'rish uchun bu yerni bosing. (61K, doc)
rahmat
Mualliflar, Keti Steffenga hayvonlarni yetishtirish va ko'chirishga yordam berish uchun minnatdorchilik bildiradi. Ushbu ish Pensilvaniya Diabet Markazining (DK019525) grantidan va Ruhiy salomatlik milliy instituti (R01 MH51399 va P50 MH66172) hamda Narkotik moddalarni suiiste'mol qilish milliy instituti (R01 DA07359) tomonidan taqdim etilgan grantlar bilan qo'llab-quvvatlandi.
Izohlar
Moliyaviy tushuntirishlar: Barcha mualliflar biyomedikal moliyaviy manfaatlar yoki manfaatlardagi nizolarga ega emasligini e'lon qilishadi.
Manbalar
1. Wadden TA, Berkovitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Ob'ektivlikning turmush tarzini o'zgartirish va farmakoterapiya bo'yicha randomize test. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111-20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkovits R. Lerman S. Semizlikda nikotinni kamaytirish: inson va sichqoncha bilan o'zaro taqqoslash. Psixofarmakologiya (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Mukofotni sezuvchanlikning individual farqlari sog'lom ayollarda oziq-ovqat iste'mol qilish va nisbiy tana vazniga bog'liqdir. Tuyadi. 2005; 45 (2): 198-201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berrij K. Tabiiy mukofotlar neuroscience: giyohvandlik moddalariga tegishli. J Neurosci. 2002; 22 (9): 3306-11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. O'tkir sur'atlarda ko'tarilgan dopaminli sichqonchalar oziq-ovqat mukofotini olish uchun o'rganish emas, balki ilg'or g'ayratga ega. Neyropopsikofarmakologiya. 2006; 31 (7): 1362-70. [PubMed]
6. Liang bosimining ko'tarilishi, Hajnal A, Norgren R. Sham mushaklarni yog 'bilan oziqlantirib, kalamushda dumbinga ko'tariladi. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236-9. [PubMed]
7. Mendoza J, Anjeles-Castellanos M, Escobar C. Tuxumli taomni iste'mol qilish ovqatning oldindan rejalashtiruvchi faolligini va m-ning mukofotga oid sohalarida c-Fos ifodasini keltirib chiqaradi. Neuroscience. 2005; 133 (1): 293-303. [PubMed]
8. Shryoder BE, Binzak JM, Kelley AE. Nikotin yoki shokolad bilan bog'liq kontekstli belgilar ta'siridan keyin prefrontal kortikal aktivizatsiya umumiy holat. Neuroscience. 2001; 105 (3): 535-45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: giyohvandlik uchun doimiy molekulyar kalit. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2001; 98 (20): 11042-6. [PMC bepul maqola] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale sh.b.. Xun tanlovida pasayish hissiylikning oshishi va xun parchalanishi uchun xavf tug'diradi. Biol psixiatriyasi. 2007; 61 (9): 1021-9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Teylor JR. yadroli akumbensdagi dFosB oziq-ovqat bilan mustahkamlangan instrumental xatti-harakatlar va motivatsiyalarni tartibga soladi. Nörobilim jurnali. 2006; 26 (36): 9196-9204. [PubMed]
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Miyaning bevosita, maqsadli gen ekspozitsiyasi bilan transgenik hayvonlar. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3): 495-503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon VV, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen S, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Miya ichidagi transkripsiyon faktor deltaFosB ning ifodasi kokainga sezgirlikni nazorat qiladi. Tabiat. 1999; 401 (6750): 272-6. [PubMed]
14. Balet TL, Dorsa yassi. Ventromedial hipotalamusda estrogenning oksitotsin retseptorlari xodimi ribonuklein kislotasi ifodalangan jinsiy farqlari va ta'siri. Endokrinologiya. 1995; 136 (1): 27-32. [PubMed]
15. Avena NM, Long ka, Hoebel B.G. Shakarga bog'liq bo'lgan kalamushlar shakarni to'xtatib qo'yganidan keyin shakarni yaxshilashga javob beradi: shakarni yo'qotish ta'sirining isbotidir. Fiziol Behav. 2005; 84 (3): 359-62. [PubMed]
16. MJ, Franbblau EB, Kelley AE bo'ladimi? Nucleus accumbens mu-opioids tarqalgan miya tarmog'ining faollashuvi orqali yuqori yog'li dietadan foydalanishni tartibga soladi. J Neurosci. 2003; 23 (7): 2882-8. [PubMed]
17. Zheng X, Patterson LM, Berthoud HR. Ventral tegmental sohada orkeys signalizatsiyasi yadro pardozlarini uyg'otish orqali kelib chiqadigan yuqori yog'li ishtaha uchun talab qilinadi. J Neurosci. 2007; 27 (41): 11075-82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgesku D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLone RJ. O'rta miya dopamin neyronlarida Leptin retseptorlari signalizatsiyasi ovqatni tartibga soladi. Neyron. 2006; 51 (6): 801-10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosBning striatal hujayra tipidagi maxsus ekspressionlari kokain uchun rag'batlanishni kuchaytiradi. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2488-93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton U, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB uchun morfin ta'siridagi yadrodagi akumbenslar uchun muhim rol. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205-11. [PubMed]
21. Li KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. D1 va D2 dopamin retseptorlari tarkibidagi yadroli akumbenslardagi kraxinli dendritik orqa miya hosilalari. Proc Natl Acad Sci AQSh A. 2006; 103 (9): 3399-404. [PMC bepul maqola] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Giyohvandlikning genetik tahlillari: cAMP javob elementining majburiy oqimining ahamiyati. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104-10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Giyohvandlikning molekulyar mexanizmlari. Neyrofarmakologiya. 2004; 47 1: 24-32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Nyuton SS. CREBning Brainga Bog'lanishi va Faoliyati: Elektrokonsivulseptivlik bilan mintaqaviy o'ziga xoslik va indüksiyon. Biol psixiatriyasi. 2007
25. Qumar A, Choy KH, Renthal Vt, Tsankova NM, Theobald DE, Truong Ht, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Kromatinni qayta tuzish striatumda kokain bilan indikatsiyalangan plyonkali asosiy mexanizmdir. Neyron. 2005; 48 (2): 303-14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Self DW. Kokain foydalanish bilan yadrodagi akumbensdagi dinamik BDNF faoliyati o'z-o'zini boshqarish va relapsni oshiradi. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029-37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 ko'plab giyohvand moddalarni iste'mol qilish bilan shug'ullanadi. Aaps J. 2005; 7 (2): E353-60. [PMC bepul maqola] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitskiy M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burxart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Sichqonlardagi gen ifodasi farqlari metamfetaminning sezuvchanligi uchun alohida tanlangan. Mamm Genom. 2005; 16 (5): 291-305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT va CDK5 / p35 in vitro o'rta dumba neuronlaridagi DARPP-32 ning miya-hosil bo'lgan neyrostrofik omil indulatsiyasini mediatsiya qiladi. J Biol Chem. 2007; 282 (10): 7352-9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Cdk5 ning giyohvandlik va plastika sohasida ahamiyati. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335-44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Teylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Kokainga surunkali ta'sir qilish ta'siri nöronal protein Cdk5 tomonidan belgilanadi. Tabiat. 2001; 410 (6826): 376-80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins trk va p75Lntr retseptorlari orqali rat meshteal neyronlardan dopaminning tarqalishini rag'batlantiradi. J Biol Chem. 1996; 271 (35): 21100-7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal Vt, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNFning mezolimbik dopamin yo'lida ijtimoiy mag'lubiyatdagi stressdagi asosiy roli. Ilmiy. 2006; 311 (5762): 864-8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon VV., Jr Depressiyadagi mezolimbik dopamin sovg'alari davri. Biol psixiatriyasi. 2006; 59 (12): 1151-9. [PubMed]
35. Ford Cp, Beckstead MJ, Uilyam JT. Somatodendritik dopamin inhibitor postinaptik oqimlarning Kappa opioid inhibatsiyasi. J Neurophysiol. 2007; 97 (1): 883-91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Fisher va Lyuis kalamushlarida miya dynorphin va enkephalin tizimlari: morfin tolerantlik va olib tashlash ta'siri. Brain Res. 1995; 683 (1): 25-35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia R, Forsander O, Terenius L. prodynorphin va proenkephalin tizimidagi spirtli ichimliklarni afzal ko'rgan (AA) va spirtli ichimliklarni oldini olish (ANA) o'rtasidagi farqlar. Spirtli ichimliklar klinikasi 1994; 18 (5): 1272-9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Kokain, dopamin va endogen opioid tizimi. J. Addict Dis. 1996; 15 (4): 73-96. [PubMed]
39. Carlezon VV, Jr, tutun RS, Nestler EJ. CREBning ko'plab yuzlari. Trends Neurosci. 2005; 28 (8): 436-45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Toxer M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamin D1 retseptorlari SerxNUMX-NR897 da NMDA retseptorlari fosforilatsiyasidan foydalanib, CREF fosforilatsiyasiga vositachilik qiladi. J Neurochem. 1; 2003 (87): 4-922. [PubMed]
41. Self DW. Mezolimbik dopamin tizimida neuroadaptatsiyalash orqali dori-darmonlarni qabul qilish va xatti-harakatlarni tartibga solish. Neyrofarmakologiya. 2004; 47 1: 242-55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfin va kokain dopaminerjik miya mukofotlari hududlarida tirozin gidroksilaza bo'yicha keng tarqalgan surunkali harakatlarni qo'llaydi. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344-7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Hope BT. Sichqonlarda kokainning o'z-o'zini boshqarishidan majburiy ravishda saqlanib qoladigan birinchi 90 kun mobaynida akumbens va ventral tegmental sohada molekulyar neyrooktoptsiyalar. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604-13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Issiqning mezolimbik va nigrostriatal dopamin yo'llarida tirozin gidroksilaz va dopamin transporterlari darajasida methamfetaminning o'z-o'zini boshqarishining ta'siri. Psixofarmakologiya (Berl) 2006; 185 (4): 505-13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Mesoakmumbens dopamin yo'lini leptin bilan tartibga solish. Neyron. 2006; 51 (6): 811-22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kuraxashi K, Suzuki T. Oksinning hujayra dopamin darajasining orexin tomonidan oshganligi va uni mukofotlash ta'siri ostida protein kinaz S ning ta'siri. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537-45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Xotib J, Miyatake M, Sakuray T, Yanagisava M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Mesolimbik dopamin yo'lini faollashtirishda orexinergik tizimlarning bevosita ishtiroki va morfin bilan bog'liq bo'lgan xulq-atvori. J Neurosci. 2006; 26 (2): 398-405. [PubMed]
48. Borgland SL, Taha SA, Sharti F, Fields HL, Bonci A, Otaxin A VTA tarkibida kokainga sinaptik plastisite va xulq-atvori sezgirligi uchun juda muhimdir. Neyron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Djin HK, Yoon YS. Fasting va yuqori yog'li dietli sichqonlarning gipotalamusidagi orexin-A va neuropeptid Y ekspresyonidagi o'zgarishlar. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295-302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibovitz SF. Oziq-ovqat iste'molini tartibga soluvchi peptidlar: gipertrigliseridemiya holatida orexin genining ifodasi oshadi. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454-65. [PubMed]
51. Zheng X, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Oziq-ovqat iste'molini tartibga soluvchi peptidlar: appetit-inducing akumbens manipulyatsiyasi hipotalamik orexin neyronlarni faollashtiradi va POMC neyronlarini inhibe qiladi. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436-44. [PubMed]
52. Baldo B, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Doniyor RA, Landry CF, Kelley AE. Gomeza retseptorlari vositasida yadroviy akkumbenlarning qobig'ini inhibe qilish yo'li bilan orexin / hipokretin o'z ichiga olgan hipotalamik neyronlarning subpopulyatsiyasini faollashtirish, ammo yangi muhitga ta'sir qilish orqali emas. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376-86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Xarajatlarni izlashda lateral hipotalamik yokieksin neyronlari uchun rol. Tabiat. 2005; 437 (7058): 556-9. [PubMed]
;